PL246173B1 - Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych - Google Patents
Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych Download PDFInfo
- Publication number
- PL246173B1 PL246173B1 PL441895A PL44189522A PL246173B1 PL 246173 B1 PL246173 B1 PL 246173B1 PL 441895 A PL441895 A PL 441895A PL 44189522 A PL44189522 A PL 44189522A PL 246173 B1 PL246173 B1 PL 246173B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- yeast
- potatoes
- pulcherrima
- clade
- whey
- Prior art date
Links
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 title claims abstract description 62
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 49
- 241001123676 Metschnikowia pulcherrima Species 0.000 claims abstract description 47
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 claims abstract description 43
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims abstract description 31
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 31
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 17
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 13
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 239000007221 ypg medium Substances 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 9
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 8
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 8
- 241000221779 Fusarium sambucinum Species 0.000 description 7
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 7
- 241000223602 Alternaria alternata Species 0.000 description 6
- 241000213004 Alternaria solani Species 0.000 description 6
- 241000266349 Alternaria tenuissima Species 0.000 description 6
- 241001274890 Boeremia exigua Species 0.000 description 6
- 241001123534 Colletotrichum coccodes Species 0.000 description 6
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 6
- 241000813090 Rhizoctonia solani Species 0.000 description 6
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 6
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 6
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241000220223 Fragaria Species 0.000 description 3
- 235000016623 Fragaria vesca Nutrition 0.000 description 3
- 235000011363 Fragaria x ananassa Nutrition 0.000 description 3
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 3
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- XERJKGMBORTKEO-VZUCSPMQSA-N (1e)-2-(ethylcarbamoylamino)-n-methoxy-2-oxoethanimidoyl cyanide Chemical compound CCNC(=O)NC(=O)C(\C#N)=N\OC XERJKGMBORTKEO-VZUCSPMQSA-N 0.000 description 1
- KWLVWJPJKJMCSH-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorophenyl)-N-{2-[3-methoxy-4-(prop-2-yn-1-yloxy)phenyl]ethyl}-2-(prop-2-yn-1-yloxy)acetamide Chemical compound C1=C(OCC#C)C(OC)=CC(CCNC(=O)C(OCC#C)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 KWLVWJPJKJMCSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223600 Alternaria Species 0.000 description 1
- 239000005726 Ametoctradin Substances 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 239000005747 Chlorothalonil Substances 0.000 description 1
- JJLJMEJHUUYSSY-UHFFFAOYSA-L Copper hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Cu+2] JJLJMEJHUUYSSY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005750 Copper hydroxide Substances 0.000 description 1
- 239000005754 Cyazofamid Substances 0.000 description 1
- 239000005756 Cymoxanil Substances 0.000 description 1
- 239000005760 Difenoconazole Substances 0.000 description 1
- 239000005780 Fluazinam Substances 0.000 description 1
- 239000005782 Fluopicolide Substances 0.000 description 1
- 239000005789 Folpet Substances 0.000 description 1
- 239000005802 Mancozeb Substances 0.000 description 1
- 239000005804 Mandipropamid Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- MKIMSXGUTQTKJU-UHFFFAOYSA-N Propamocarb hydrochloride Chemical compound [Cl-].CCCOC(=O)NCCC[NH+](C)C MKIMSXGUTQTKJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005823 Propineb Substances 0.000 description 1
- 239000005869 Pyraclostrobin Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- GGKQIOFASHYUJZ-UHFFFAOYSA-N ametoctradin Chemical compound NC1=C(CCCCCCCC)C(CC)=NC2=NC=NN21 GGKQIOFASHYUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- CRQQGFGUEAVUIL-UHFFFAOYSA-N chlorothalonil Chemical compound ClC1=C(Cl)C(C#N)=C(Cl)C(C#N)=C1Cl CRQQGFGUEAVUIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910001956 copper hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- YXKMMRDKEKCERS-UHFFFAOYSA-N cyazofamid Chemical compound CN(C)S(=O)(=O)N1C(C#N)=NC(Cl)=C1C1=CC=C(C)C=C1 YXKMMRDKEKCERS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQYJATMQXGBDHF-UHFFFAOYSA-N difenoconazole Chemical compound O1C(C)COC1(C=1C(=CC(OC=2C=CC(Cl)=CC=2)=CC=1)Cl)CN1N=CN=C1 BQYJATMQXGBDHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZCGKGPEKUCDTF-UHFFFAOYSA-N fluazinam Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC(C(F)(F)F)=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1NC1=NC=C(C(F)(F)F)C=C1Cl UZCGKGPEKUCDTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GBOYJIHYACSLGN-UHFFFAOYSA-N fluopicolide Chemical compound ClC1=CC(C(F)(F)F)=CN=C1CNC(=O)C1=C(Cl)C=CC=C1Cl GBOYJIHYACSLGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HKIOYBQGHSTUDB-UHFFFAOYSA-N folpet Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(SC(Cl)(Cl)Cl)C(=O)C2=C1 HKIOYBQGHSTUDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000009329 organic farming Methods 0.000 description 1
- 230000008659 phytopathology Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- KKMLIVYBGSAJPM-UHFFFAOYSA-L propineb Chemical compound [Zn+2].[S-]C(=S)NC(C)CNC([S-])=S KKMLIVYBGSAJPM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HZRSNVGNWUDEFX-UHFFFAOYSA-N pyraclostrobin Chemical compound COC(=O)N(OC)C1=CC=CC=C1COC1=NN(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=C1 HZRSNVGNWUDEFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
- A01P3/00—Fungicides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01C—PLANTING; SOWING; FERTILISING
- A01C1/00—Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
- A01C1/08—Immunising seed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G7/00—Botany in general
- A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/32—Yeast
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Forests & Forestry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Ecology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Fruits And Vegetables (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych, który charakteryzuje się tym, że ziemniaki traktuje się zawiesiną komórek drożdży z kladu Metschnikowia pulcherrima o gęstości 10<sup>6</sup> - 10<sup>7</sup> jtk/ml w postaci kąpieli przez zanurzenie ziemniaków w czasie 5 - 10 minut, a proces namnażania komórek drożdży prowadzi się w temp. 20 - 30°C w czasie 12 - 48 godz. po zaszczepieniu serwatki czystą kulturą drożdży z kladu Metschnikowia pulcherrima w ilości inokulum 5 - 10% v/v, które inkubowano w temperaturze 20 - 30°C w czasie 12 - 48 godz., przy czym stosuje się kwaśną serwatkę pochodzącą z produkcji przemysłowej suplementowaną 1,25 - 5 g/l ekstraktem drożdżowym, 2,5 - 10 g/l peptonem i 5 - 10 g/l glukozą.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych. Sposób według wynalazku jest przeznaczony dla ekologicznego rolnictwa, jako biologiczna metoda zaprawiania bulw ziemniaka sadzeniaka przed okresem przechowywania w okresie jesienno-zimowym w celu ochrony przed fitopatogenami.
Infekcje fitopatogenami grzybowymi mogą spowodować obniżenie plonu bulw ziemniaków, szczególnie odmian wrażliwych (np. Impresja) nawet o 70%. Ochrona ziemniaka przed chorobami powodowanymi przez patogenne grzyby wymaga zabiegów ochrony roślin m.in. zaprawiania preparatami.
Obecnie na rynku krajowym dostępne są preparaty zawierające fungicydy, które w swoim składzie zawierają czynne substancje chemiczne o działaniu przeciwgrzybowym. Ich formulacje oparte są na antygrzybowych substancjach czynnych (np. fluazynam, cymoksanil, propineb, difenokonazol, mandipropamid, mankozeb, wodorotlenek miedzi, siarczan miedzi, chlorotalonil, cyjazofamid, ametoktradyna, fluopikolid, chlorowodorek propamokarbu, piraklostrobina, folpet i in.). Udowodniono jednak, że długoterminowe stosowanie fungicydów powoduje degradację środowiska naturalnego, zachwianie naturalnych biocenoz oraz wzrost oporności fitopatogenów na stosowane związki chemiczne. Środki chemiczne stosowane do ochrony roślin charakteryzują się niską biodegradowalnością w środowisku naturalnym, kumulacją w komórkach organizmów żywych, np. w ziemniakach i mogą przechodzić od końcowego ogniwa w łańcuchu żywienia do organizmów zwierząt i człowieka. Fungicydy stosowane w ochronie sadzeniaków wpływają również na zaburzenie równowagi biologicznej w naturalnych biocenozach.
Alternatywą dla fungicydów są substancje naturalnego pochodzenia które wykazują aktywność przeciwdrobnoustrojową wobec fitopatogenów. Ponadto środki chemiczne oparte na fungicydach przeznaczone są przede wszystkim dostosowania na polu w czasie uprawy ziemniaka, nie ma zaś metod stosowanych podczas magazynowania ziemniaków sadzeniaków. Natomiast podstawą produkcji zdrowych ziemniaków sadzeniaków jest profilaktyka w postaci eliminowania źródeł zakażenia, uprawa odmian o podwyższonej odporności, ale przede wszystkim prawidłowe przechowywanie zdrowych ziemniaków.
Trudności utrzymania zdrowego ziemniaka w czasie jego przechowywania wynikają z faktu zmieniającego się klimatu, w szczególności podwyższonych temperatur w sezonie jesienno-zimowym, co szczególnie dotyka małych i średnich producentów, którzy przechowują sadzeniaki tradycyjnymi metodami. W warunkach podwyższonej temperatury i wilgotności zarażone bulwy ziemniaków ulegają zniszczeniu w ciągu kilkunastu dni, a choroba dotyka do 20% magazynowanych ziemniaków. Gospodarstwa zajmujące się uprawą ekologiczną, w tym przypadku nie posiadają żadnych rozwiązań ochrony ziemniaka przed fitopatogenami.
Znane są drożdże z kladu Metschnikowia pulcherrima.
Niniejszy wynalazek rozwiązuje problem ekologicznego sposobu ochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów, bez konieczności stosowania środków chemicznych, mogących powodować degradację środowiska naturalnego, zachwianie naturalnych biocenoz oraz wzrost oporności fitopatogenów na zastosowane związki chemiczne.
Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych charakteryzuje się tym, że ziemniaki traktuje się zawiesiną komórek drożdży z k ladu Metschnikowia pulcherrima o gęstości 106-107 jtk/ml w postaci kąpieli przez zanurzenie ziemniaków w czasie 5-10 minut, a proces namnażania komórek drożdży prowadzi się w temp. 20-30°C w czasie 12-48 godz. po zaszczepieniu serwatki czystą kulturą drożdży z kladu Metschnikowia pulcherrima w ilości inokulum 5-10% v/v, które inkubowano w temperaturze 20-30°C w czasie 12-48 godz., przy czym stosuje się kwaśną serwatkę pochodzącą z produkcji przemysłowej, suplementowaną 1,25-5 g/l ekstraktem drożdżowym, 2,5-10 g/l peptonem i 5-10 g/l glukozą.
Korzystnie drożdże przechowuje się na agarze YPG (1% ekstraktu drożdżowego, 2% peptonu, 2% glukozy) w temp. 4°C po ich namnożeniu w temp. 20-30°C przez czas 24-72 godziny.
Sposób według wynalazku jest rozwiązaniem ekologicznym, przyczynia się do przywrócenia równowagi biologicznej i ochrony środowiska naturalnego. Sposób stosowany do zaprawiania sadzeniaków wpływa pozytywnie na rozwój systemu korzeniowego, a w konsekwencji rozwój roślin i zwiększone plony podczas uprawy ziemniaka.
PL 246173 Β1
Sposób według wynalazku ilustrują poniższe przykłady z powołaniem się na rysunek, na którym Fig. 1 przedstawia wykres ilustrujący aktywność przeciwdrobnoustrojową przykładowych drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima wyizolowanych z polskich upraw ekologicznych bez stosowania fungicydów w teście in vitro; Fig. 2 - wykres ilustrujący plon biomasy hodowli drożdży M. pulcherrima, w podłożach serwatkowych o różnym poziomie suplementacji. Fig. 3 -wykres ilustrujący dynamikę wzrostu drożdży M. pulcherrima w bioreaktorze w pożywce serwatkowej; Fig. 3: A1 i B1 przedstawiają próby kontrolne inhibicji infekcji ziemniaka przez Alternaria solan\ (A) i Fusarium sambucinum (B), a Fig. 3: A2 i B2 - próby z naniesioną hodowlą drożdży z kładu M. pulcherrima na podłożu serwatkowym.
Przykład 1
Drożdże M. pulcherrima wyizolowano z owoców z polskich upraw ekologicznych. Drożdże przechowywano na podłożu agarokladuym YPG (1% ekstraktu drożdżowego, 2% peptonu, 2% glukozy) w temperaturze 4°C po uprzedniej inkubacji drożdży w temp. 20°C przez 24 godz.
Ocenę działania przeciwdrobnoustrojowego drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima w warunkach in vitro na fitopatogeny ziemniaka przeprowadzono metodą dyfuzyjno-agarową. Szczepy z kładu M. pulcherrima hodowano na pożywce YPG przez 12 godzin w temperaturze 20°C na wytrząsarce (Unimax, Heidolph, Niemcy) przy 160 rpm. Uprzednio przygotowane zawiesiny fitopatogenów (106 jtk/mL) w ilości 100 μΙ przenoszono na agar PDA. Następnie, za pomocą sterylnego korkobora, w płytkach agarowych wycięto studzienki o średnicy 10 mm, do których wprowadzono 250 μΙ hodowli drożdży - izolatów z kładu M. pulcherrima. Płytki inkubowano w temp. 25°C przez 2-5 dni, w zależności od rodzaju fitopatogenu. Średnice stref zahamowania wzrostu patogenów mierzono w mm. Na Fig. 1 przedstawiono strefy zahamowania wzrostu patogenów przez szczepy drożdży M. pulcherrima.
Hodowlę szczepu drożdży M. pulcherrima prowadzono w reaktorze szklanym LPP Equipment o objętości całkowitej 5L. W reaktorze, sterylizowano 3L pożywki, którą zaszczepiono 150 ml inokulum (5%). Inokulum stanowiła hodowla drożdży w serwatce kwaśnej, suplementowanej 1,25 g/l ekstraktu drożdżowego, 2,5 g/l peptonu i 5 g/l glukozy, inkubowana w temp. 20°C przez czas 12 godz. Hodowlę w reaktorze prowadzono w kwaśnej serwatce, suplementowanej 1,25 g/l ekstraktu drożdżowego, 2,5 g/l peptonu i 5 g/l glukozy, w reaktorze w temperaturze 20°C w czasie 12 godzin przy prędkościach mieszadła: 200 rpm.
Na Fig. 2 przedstawiono dynamikę wzrostu izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima na suplementowanej serwatce w reaktorze w całym 96-godzinnym cyklu hodowli.
Testy przeciwdrobnoustrojowe in situ na sadzeniakach przeprowadzono po ich kąpieli w zawiesinie komórek po 12-godz. hodowli drożdży z kładu M. pulcherrima o gęstości 106 jtk/ml w kwaśnej serwatce, suplementowanej 1,25 g/l ekstraktu drożdżowego, 2,5 g/l peptonu i 5 g/l glukozy, w której zanurzono ziemniaki na 5 minut i następnie pozostawiono do wyschnięcia. Następnie ziemniaki traktowano fitopatogenami poprzez nacięcia skalpelem, do których wprowadzono 20 μΙ każdej zawiesiny fitopatogenów grzybowych. Próbę kontrolną stanowiły ziemniaki traktowane tylko patogenami. Ziemniaki inkubowano w temp. 25 ± 5°C przez 14 dni. Dla porównania sprawdzono aktywność hamowania wzrostu fitopatogenów przez hodowlę drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce referencyjnej YPG. Procent porażenia fitopatogenem mierzono w porównaniu do kontroli zgodnie z równaniem:
Inhibicja (%) = (C - T) / C x 100 gdzie:
C - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach kontrolnych,
T - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach traktowanych drożdżami
M. pulcherrima wyizolowanych z kwiatów truskawki na podłożu serwatkowym/na podłożu YPG.
Procent porażonej powierzchni mierzono po przecięciu sadzeniaków na pół. Test przeprowadzono w trzech powtórzeniach. Wyniki przedstawiono w tabeli 1.
PL 246173 Β1
Tabela 1. Inhibicja porażenia sadzeniaków fitopatogenami [%] przez hodowlę izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce serwatkowej w porównaniu do podłoża YPG.
| Fitopatogen | Pożywka hodowlana | |
| YPG | ||
| Fusarium oxysporum | 30±10 | 30±5 |
| Fusarium sambucinum | 100+0 | 80+10 |
| Alternaria alternata | 100±0 | 80±5 |
| Alternaria solani | 100+0 | 90+5 |
| Alternaria tenuissima | 100±0 | 95±5 |
| Colletotrichum coccodes | 100+0 | 100+0 |
| Rhizoctonia solani | 50+5 | 60+5 |
| Phoma exigua | 100+0 | 80+5 |
Komórki drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima namnożone na podłożu serwatkowym hamowały wzrost fitopatogenów grzybowych na ziemniaku podczas jego przechowywania: Fusarium oxysporum, Fusarium sambucinum, Alternaria alternata, Alternaria solani, Alternaria tenuissima, Colletotrichum coccodes, Rhizoctonia solani, Phoma exigua.
Przykład 2
Drożdże M. pulcherrima wyizolowano z owoców z polskich upraw ekologicznych. Drożdże przechowywano na podłożu agarowym YPG (1% ekstraktu drożdżowego, 2% peptonu, 2% glukozy) w temperaturze 4°C po uprzedniej inkubacji drożdży w temp. 25°C przez 48 godz.
Ocenę działania przeciwdrobnoustrojowego drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima w warunkach in vitro na fitopatogeny ziemniaka przeprowadzono metodą dyfuzyjno-agarową. Szczepy z kładu M. pulcherrima hodowano na pożywce YPG przez 24 godziny w temperaturze 25°C na wytrząsarce (Unimax, Heidolph, Niemcy) przy 160 rpm. Uprzednio przygotowane zawiesiny fitopatogenów (106 jtk/mL) w ilości 100 μΙ przenoszono na agar PDA. Następnie, za pomocą sterylnego korkobora, w płytkach agarowych wycięto studzienki o średnicy 10 mm, do których wprowadzono 250 μΙ hodowli drożdży - izolatów z kładu M. pulcherrima. Płytki inkubowano w temp. 25°C przez 2-5 dni, w zależności od rodzaju fitopatogenu. Średnice stref zahamowania wzrostu patogenów mierzono w mm. Na Fig. 1 przedstawiono strefy zahamowania wzrostu patogenów przez szczepy drożdży M. pulcherrima.
Hodowlę szczepu drożdży M. pulcherrima prowadzono w reaktorze szklanym LPP Equipment o objętości całkowitej 5L. W reaktorze, sterylizowano 3L pożywki, którą zaszczepiono 225 ml inokulum (7,5%). Inokulum stanowiła hodowla drożdży w serwatce kwaśnej, suplementowanej 2,5 g/l ekstraktu drożdżowego, 5 g/l peptonu i 7,5 g/l glukozy, inkubowana w temp. 25°C przez czas 24 godz. Hodowlę w reaktorze prowadzono w kwaśnej serwatce, suplementowanej 2,5 g/l ekstraktu drożdżowego, 5 g/l peptonu i 7,5 g/l glukozy, w reaktorze w temperaturze 25°C w czasie 24 godzin przy prędkościach mieszadła: 200 rpm. Na Fig. 2 przedstawiono dynamikę wzrostu izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima na suplementowanej serwatce w reaktorze w całym 96-godzinnym cyklu hodowli.
Testy przeciwdrobnoustrojowe in situ na sadzeniakach przeprowadzono po ich kąpieli w zawiesinie komórek po 24-godz. hodowli drożdży z kładu M. pulcherrima o gęstości 106 jtk/ml w kwaśnej serwatce, suplementowanej 2,5 g/l ekstraktu drożdżowego, 5 g/l peptonu i 7,5 g/l glukozy, w której zanurzono ziemniaki na 7 minut i następnie pozostawiono do wyschnięcia. Następnie ziemniaki traktowano fitopatogenami poprzez nacięcia skalpelem, do których wprowadzono 20 μΙ każdej zawiesiny fitopatogenów grzybowych. Próbę kontrolną stanowiły ziemniaki traktowane tylko patogenami. Ziemniaki inkubowano w temp. 25 ± 5°C przez 14 dni. Dla porównania sprawdzono aktywność hamowania wzrostu fitopatogenów przez hodowlę drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce referencyjnej YPG. Procent porażenia fitopatogenem mierzono w porównaniu do kontroli zgodnie z równaniem:
Inhibicja (%) = (C - T) / C x 100
PL 246173 Β1 gdzie:
C - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach kontrolnych,
T - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach traktowanych drożdżami
M. pulcherrima wyizolowanych z kwiatów truskawki na podłożu serwatkowym/ na podłożu YPG.
Procent porażonej powierzchni mierzono po przecięciu sadzeniaków na pół. Test przeprowadzono w trzech powtórzeniach. Wyniki przedstawiono w tabeli 1.
Tabela 1. Inhibicja porażenia sadzeniaków fitopatogenami [%] przez hodowlę izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce serwatkowej w porównaniu do podłoża YPG.
| Fitopatogcn | Pożywka łiodowlaua | |
| YPG | ||
| Fusarium oxysporum | 30±10 | 30±5 |
| Fusarium sambucinum | 100±0 | 80±10 |
| Alternaria alternata | 100±0 | 80±5 |
| Alternaria solani | 100+0 | 90+5 |
| Alternaria tenuissima | 100+0 | 95+5 |
| Colletotrichum coccodes | 100+0 | 100+0 |
| Rhizoctonia solani | 50+5 | 60+5 |
| Phoma exigua | 100±0 | 80±5 |
Komórki drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima namnożone na podłożu serwatkowym hamowały wzrost fitopatogenów grzybowych na ziemniaku podczas jego przechowywania: Fusarium oxysporum, Fusarium sambucinum, Alternaria alternata, Alternaria solani, Alternaria tenuissima, Colletotrichum coccodes, Rhizoctonia solani, Phoma exigua.
Przykład 3
Drożdże M. pulcherrima wyizolowano z owoców z polskich upraw ekologicznych. Drożdże przechowywano na podłożu agarowym YPG (1% ekstraktu drożdżowego, 2% peptonu, 2% glukozy) w temperaturze 4°C po uprzedniej inkubacji drożdży w temp. 30°C przez 72 godz.
Ocenę działania przeciwdrobnoustrojowego drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima w warunkach in vitro na fitopatogeny ziemniaka przeprowadzono metodą dyfuzyjno-agarową. Szczepy z kładu M. pulcherrima hodowano na pożywce YPG przez 48 godzin w temperaturze 30°C na wytrząsarce (Unimax, Heidolph, Niemcy) przy 160 rpm. Uprzednio przygotowane zawiesiny fitopatogenów (106 jtk/mL) w ilości 100 μΙ przenoszono na agar PDA. Następnie, za pomocą sterylnego korkobora, w płytkach agarowych wycięto studzienki o średnicy 10 mm, do których wprowadzono 250 μΙ hodowli drożdży - izolatów z kładu M. pulcherrima. Płytki inkubowano w temp. 25°C przez 2-5 dni, w zależności od rodzaju fitopatogenu. Średnice stref zahamowania wzrostu patogenów mierzono w mm. Na Fig. 1 przedstawiono strefy zahamowania wzrostu fitopatogenów przez szczepy drożdży M. pulcherrima.
Hodowlę szczepu drożdży M. pulcherrima prowadzono w reaktorze szklanym LPP Equipment o objętości całkowitej 5L. W reaktorze, sterylizowano 3L pożywki, którą zaszczepiono 300 ml inokulum (10%). Inokulum stanowiła hodowla drożdży w serwatce kwaśnej, suplementowanej 5 g/l ekstraktu drożdżowego, 10 g/l peptonu i 10 g/l glukozy, inkubowana w temp. 30°C przez czas 48 godz. Hodowlę w reaktorze prowadzono w kwaśnej serwatce, suplementowanej 5 g/l ekstraktu drożdżowego, 10 g/l peptonu i 10 g/l glukozy, w reaktorze w temperaturze 30°C w czasie 48 godzin przy prędkościach mieszadła: 200 rpm. Na Fig. 2 przedstawiono dynamikę wzrostu izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima na suplementowanej serwatce w reaktorze w całym 96-godzinnym cyklu hodowli.
Testy przeciwdrobnoustrojowe in situ na sadzeniakach przeprowadzono po ich kąpieli w zawiesinie komórek po 48-godz. hodowli drożdży z kładu M. pulcherrima o gęstości 107 jtk/ml w kwaśnej serwatce, suplementowanej 5 g/l ekstraktu drożdżowego, 10 g/l peptonu i 10 g/l glukozy, w której zanurzono ziemniaki na 10 minut i następnie pozostawiono do wyschnięcia. Następnie ziemniaki traktowano
PL 246173 Β1 fitopatogenami poprzez nacięcia skalpelem, do których wprowadzono 20 μΙ każdej zawiesiny fitopatogenów grzybowych. Próbę kontrolną stanowiły ziemniaki traktowane tylko patogenami. Ziemniaki inkubowano w temp. 25 ± 5°C przez 14 dni. Dla porównania sprawdzono aktywność hamowania wzrostu fitopatogenów przez hodowlę drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce referencyjnej YPG. Procent porażenia fitopatogenem mierzono w porównaniu do kontroli zgodnie z równaniem:
Inhibicja (%) = (C - T) / C x 100 gdzie:
C - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach kontrolnych,
T - % inwazji fitopatogenu na ziemniakach traktowanych drożdżami
M. pulcherrima wyizolowanych z kwiatów truskawki na podłożu serwatkowym/ na podłożu YPG.
Procent porażonej powierzchni mierzono po przecięciu sadzeniaków na pół. Test przeprowadzono w trzech powtórzeniach. Wyniki przedstawiono w tabeli 1.
Tabela 1. Inhibicja porażenia sadzeniaków fitopatogenami [%] przez hodowlę izolatu drożdży z kładu M. pulcherrima w pożywce serwatkowej w porównaniu do podłoża YPG.
| Filopatogen | Pożywka hodowlana | |
| serwatkowa | YPG | ... + |
| Fusarium oxysporum | 30±10 | 30±5 |
| Fusarium sambucinum | 100+0 | 80+10 |
| Alternaria alternata | 100+0 | 80+5 |
| Alternaria solani | 100±0 | 90±5 |
| Alternaria tenuissima | 100+0 | 95+5 |
| Colletotrichum coccodes | 100+0 | 100+0 |
| Rhizoctonia solani | 50+5 | 60+5 |
| Phoma exigua | 100±0 | 80±5 |
Komórki drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima namnożone na podłożu serwatkowym hamowały wzrost fitopatogenów grzybowych na ziemniaku podczas jego przechowywania: Fusarium oxysporum, Fusarium sambucinum, Alternaria alternata, Alternaria solani, Alternaria tenuissima, Colletotrichum coccodes, Rhizoctonia solani, Phoma exigua.
Claims (2)
1. Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych, znamienny tym, że ziemniaki traktuje się zawiesiną komórek drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima o gęstości 106-107 jtk/ml w postaci kąpieli przez zanurzenie ziemniaków w czasie 5-10 minut, a proces namnażania komórek drożdży prowadzi się w temp. 20-30°C w czasie 12-48 godz. po zaszczepieniu serwatki czystą kulturą drożdży z kładu Metschnikowia pulcherrima w ilości inokulum 5-10% v/v, które inkubowano w temperaturze 20-30°C w czasie 12-48 godz., przy czym stosuje się kwaśną serwatkę pochodzącą z produkcji przemysłowej, suplementowaną 1,25-5 g/l ekstraktem drożdżowym, 2,5-10 g/l peptonem i 5-10 g/l glukozą.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że drożdże przechowuje się na agarze YPG zawierającym: 1% ekstraktu drożdżowego, 2% peptonu, 2% glukozy, wtemp. 4°C po ich namnożeniu w temp. 20-30°C przez czas 24-72 godziny.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL441895A PL246173B1 (pl) | 2022-08-01 | 2022-08-01 | Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL441895A PL246173B1 (pl) | 2022-08-01 | 2022-08-01 | Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL441895A1 PL441895A1 (pl) | 2024-02-05 |
| PL246173B1 true PL246173B1 (pl) | 2024-12-09 |
Family
ID=89808279
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL441895A PL246173B1 (pl) | 2022-08-01 | 2022-08-01 | Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL246173B1 (pl) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005060287A (ja) * | 2003-08-11 | 2005-03-10 | Takasaki Kasei Kk | ジャガイモ等のそうか病防除資材および防除方法 |
-
2022
- 2022-08-01 PL PL441895A patent/PL246173B1/pl unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005060287A (ja) * | 2003-08-11 | 2005-03-10 | Takasaki Kasei Kk | ジャガイモ等のそうか病防除資材および防除方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| A. STEGLIŃSKA, N. JARANOWSKA, Ł. TOKARSKI: "XI Sesja Magistrantów i Doktorantów Łódzkiego Środowiska Chemików, 23.06.2020, skrypt/streszczenie, str. 10", „WŁAŚCIWOŚCI ANTAGONISTYCZNE BAKTERII FERMENTACJI MLEKOWEJ ORAZ DROŻDŻY METSCHNIKOWIA SP. WOBEC WYBRANYCH FITOPATOGENÓW ZIEMNIAKA SADZENIAKA" * |
| D. SARAVANAKUMAR, D. SPADARO, A. GARIBALDI, M. L. GULLINO: "European Journal of Plant Pathology, vol. 123, 2009, 183-193", „DETECTION OF ENZYMATIC ACTIVITY AND PARTIAL SEQUENCE OF A CHITINASE GENE IN METSCHNIKOWIA PULCHERRIMA STRAIN MACH1 USED AS POST-HARVEST BIOCONTROL AGENT" * |
| M. KORDOWSKA-WIATER: "Postępy Mikrobiologii, 2011, 50(2), 107–119", „DROŻDŻE JAKO CZYNNIKI OCHRONY BIOLOGICZNEJ ROŚLIN" * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL441895A1 (pl) | 2024-02-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Barta | In planta bioassay on the effects of endophytic Beauveria strains against larvae of horse-chestnut leaf miner (Cameraria ohridella) | |
| EP4311856B1 (en) | Strains of the genus pantoea spp. and the use of strains of the genus pantoea spp. in plant protection | |
| CN104195069A (zh) | 一株防治稻瘟病的枯草芽孢杆菌2012syx04 | |
| JP2022545631A (ja) | 植物における真菌病原体の成長の防止または低減のための微生物組成物 | |
| López-Mora et al. | Evaluation of antifungal activity of chitosan in alternaria alternata and in the quality of'tommy atkins' mango during storage | |
| EP1774854A1 (en) | Microbial pesticide inhibiting the outbreak of plant disease damage | |
| CN107674850A (zh) | 一种杀根结线虫的莓实假单孢菌Sned811、代谢产物及应用 | |
| CN117603831B (zh) | 一株防治根结线虫的生防细菌考氏科萨克氏菌及应用 | |
| CN110527639B (zh) | 一种美极梅奇酵母及其应用 | |
| Gabrekiristos et al. | An optimized inoculation method of Fusarium wilt (Fusarium oxysporum f. sp. cubense) causal agent of banana wilt disease in Ethiopia | |
| CN105543116B (zh) | 一株酵母菌及其在鲜果采后病害防治中的应用 | |
| PL246173B1 (pl) | Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów grzybowych | |
| Arini et al. | Control activity and antibiotic gene detection of endophytic bacteria in suppressing cocoa black pod disease (Phytophthora palmivora butl.) | |
| Amin et al. | Biosciences and Plant Biology | |
| Long et al. | Kloeckera apiculata strain (34-9) to control Botrytis cinerea during the pre-and postharvest handling of strawberries | |
| Safitri et al. | Potential of endophytic yeasts as biocontrol of Phytophthora capsici, causative agent of foot rot disease on black pepper. | |
| Ajaj et al. | Isolation and identification of ssome lactobacillus spp. bacteria and evaluation their efficacy in the management of damping off disease on peas | |
| Ajith et al. | Zygosporium masonii: a new fungal antagonist against Colletotrichum capsici incitant of anthracnose on bellpeppers | |
| CN116836823A (zh) | 一种拟粉红锁掷孢酵母菌及其应用 | |
| PL247378B1 (pl) | Sposób bioochrony bulw ziemniaka sadzeniaka przed rozwojem fitopatogenów bakteryjnych i grzybowych w trakcie jego przechowywania | |
| Dewi et al. | The use of endophyte fungal isolates in controlling Fusarium oxysporum, the causal agent of wilt disease on chilli (Capsicum annuum) | |
| Sunkad et al. | Exploration of the potential of Bacillus spp. as an antagonist and PGPR against stem and pod rot of groundnut. | |
| Mohapatra et al. | Biocontrol potentials of three essential oils against some postharvest pathogens. | |
| Al-Ameen et al. | Antagonistic potential of soil fungi against post-harvest pathogenic fungi of Musa sapientum L | |
| CN118460391B (zh) | 一株内生酵母菌及其在抗苹果灰霉病中的应用 |