PL243349B1 - Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych - Google Patents
Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych Download PDFInfo
- Publication number
- PL243349B1 PL243349B1 PL433194A PL43319420A PL243349B1 PL 243349 B1 PL243349 B1 PL 243349B1 PL 433194 A PL433194 A PL 433194A PL 43319420 A PL43319420 A PL 43319420A PL 243349 B1 PL243349 B1 PL 243349B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- chitosan
- salt
- solution
- aqueous solution
- disodium salt
- Prior art date
Links
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims abstract description 53
- 239000000499 gel Substances 0.000 title claims abstract description 31
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 title claims abstract description 7
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 title abstract 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 title 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 6
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims abstract description 6
- -1 nucleotide disodium salt Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- ASARMUCNOOHMLO-WLORSUFZSA-L cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2s)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O ASARMUCNOOHMLO-WLORSUFZSA-L 0.000 claims abstract description 4
- 229910021389 graphene Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims abstract description 4
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 claims abstract description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 8
- INTPYBRGLGSMRA-WFIJOQBCSA-L disodium cytidine 5'-monophosphate Chemical compound [Na+].[Na+].O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP([O-])([O-])=O)O1 INTPYBRGLGSMRA-WFIJOQBCSA-L 0.000 claims description 8
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 claims description 7
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical class O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 5
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 4
- KURVIXMFFSNONZ-WFIJOQBCSA-L disodium;[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP([O-])([O-])=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 KURVIXMFFSNONZ-WFIJOQBCSA-L 0.000 claims description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- IERHLVCPSMICTF-ZAKLUEHWSA-N cytidine-5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-ZAKLUEHWSA-N 0.000 abstract 2
- DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N uridine-5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N 0.000 abstract 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L sodium glycerol 2-phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OCC(CO)OP([O-])([O-])=O AVPCPPOOQICIRJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 3
- DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N Glycerol 2-phosphate Chemical compound OCC(CO)OP(O)(O)=O DHCLVCXQIBBOPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N alpha-D-glucose 1-phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 229950010772 glucose-1-phosphate Drugs 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 2
- AFINAILKDBCXMX-PBHICJAKSA-N (2s,3r)-2-amino-3-hydroxy-n-(4-octylphenyl)butanamide Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C=C1 AFINAILKDBCXMX-PBHICJAKSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- CUPCBVUMRUSXIU-UHFFFAOYSA-N [Fe].OOO Chemical compound [Fe].OOO CUPCBVUMRUSXIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose 6-phosphate Chemical class OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O VFRROHXSMXFLSN-KCDKBNATSA-N 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical class OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- UHHRFSOMMCWGSO-UHFFFAOYSA-L calcium glycerophosphate Chemical compound [Ca+2].OCC(CO)OP([O-])([O-])=O UHHRFSOMMCWGSO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate Inorganic materials [Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229910003153 β-FeOOH Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polega na wprowadzeniu do schłodzonego roztworu wodnego soli chitozanu sporządzonej z chitozanu o stopniu deacetylacji 75-90% i o masie cząsteczkowej 500000-700000, najpierw środka wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina, kwas liponowy lub tlenek grafenu, a następnie kroplami schłodzonego roztworu wodnego soli disodowej nukleotydu, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu otrzymanej w postaci zolu mieszaniny roztworu soli chitozanu z roztworem nukleotydu, wykazującej zdolność przejścia w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego, przy czym jako roztwór wodny soli disodowej nukleotydu stosuje się roztwór wodny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny lub roztwór wodny mieszaniny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny z solą disodową 5'-monofosforanu urydyny.
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych.
Żele chitozanowe formujące się pod wpływem temperatury są atrakcyjnym materiałem, który może być wykorzystany jako rusztowanie do hodowli komórek nerwowych. Zainteresowanie tego typu rusztowaniami wynika z faktu, że przejście fazowe z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, co umożliwia wprowadzenie rusztowania w trudnodostępne miejsca drogą iniekcji.
Znane jest wytwarzanie hydro żeli chitozanowych, których przejście z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, z niskolepkich roztworów soli chitozanu, przy użyciu betaglicerofosforanu sodu (Na-β-GP), alkoholu poliwinylowego oraz kwaśnego węglanu sodu (czasopisma: Chenite2004, Carbohyd Polymers doi:10.1016/j.carbpol.015), International Journal of Pharmaceutics 414:6-15.
Żele tworzono również w oparciu o związki glukozo-1-fosforanu (G1-P) i glukozo-6-fosforanu (G6-P), a także z wolną od poliolu solą fosforanową, Na2HPO4 (czasopismo Langmuir 2013 29(32):10229-37. doi: 10.1021/la401993q). ‘
Znane jest również wytwarzanie hydro żeli chitozanowych, których przejście z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, metodą enzymatyczną w wyniku obecności w roztworze soli chitozanowych mocznika i ureazy (czasopismo Carbohydrate Polymers doi: 10.1016/j.carbpol. 2005.12.010).
W opisie patentowym PL 219576 ujawniono sposób wytwarzania termowrażliwego hydrożelu chitozanowego zawierającego wapń i fosfor, przeznaczonego na materiał na rusztowania, także wszczepialny, polegający na tym, że roztwór wodny chlorku, octanu, mleczanu, glutaminianu lub mrówczanu chitozanu, otrzymany z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70%, o temperaturze poniżej 10°C łączy się w trakcie o mieszania z roztworem wodnym chlorku, azotanu lub fosforanu wapnia także o temperaturze poniżej 10°C i następnie z roztworem wodnym α, β lub α, β-glicerofosforanu, po czym odpowietrza i wytworzony żel odmywa się w wodzie lub w buforze o pH powyżej 6, o temperaturze powyżej 30°C bądź też schłodzony roztwór wodny soli chitozanu łączy się ze schłodzonym roztworem wodnym glicerofosforanu, odpowietrza i otrzymany żel po odmyciu w wodzie lub buforze umieszcza się w roztworze wodnym soli wapnia, po czym odmywa buforem o pH powyżej 6.
W opisie zgłoszenia patentowego P. 423822 ujawniono sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli osteoblastów, przechodzące z zolu w żel na skutek wzrostu temperatury (optymalnie w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego), natomiast wraz ze spadkiem temperatury ponownie przechodzące w zol. Sposób otrzymywania tych żeli polega na tym, że do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego octanu chitozanu, o stężeniu 1-2%, otrzymanego z chitozanu o masie cząsteczkowej 500 000 - 700 000, wprowadza się kroplami schłodzony do temperatury 4°C roztwór wodny β-glicerofosforanu wapnia o stężeniu 15-30%, po czym całość miesza się i odpowietrza w temperaturze poniżej 10°C w czasie 24 godzin. Roztwór octanu chitozanu sporządza się z chitozanu o stopniu deacetylacji 80-90%.
Z czasopisma Procedia Engineering, 59, 2013, 226-232 znane są także żele do regeneracji rdzenia kręgowego, formujące się w temperaturze ciała ludzkiego, wytwarzane z mleczanu chitozanu z udziałem β-glicerofosforanu sodu.
W publikacji w czasopiśmie internetowym Scientific Reports, 2019; 9: 6402. doi: 10.1038/s41598-019-42848 do regeneracji rdzenia kręgowego wykorzystano żele chitozanowe wytwarzane z chlorku chitozanu z udziałem β-glicerofosforanu sodu z immobilizowanymi komórkami macierzystymi.
W procesie regeneracji nerwów często wykorzystuje się związki urydyny i cytydyny. Nukleotydy bądź ich kombinacje są związkami stosowanymi do regeneracji nerwów poprzez dozowanie doustne (czasopisma: Current Topics in Medicinal Chemistry, 2011 oraz Neuroscience and Behavioral Physiology 45(7):S20-S2S, 2015 DOI: 10.1007/s11055-015-0149-xJ Pain Res. 2017 Feb 15;10:397-404. doi:10.2147/JPR.S 123045;). Z czasopisma Brain Research Reviews, 2006, 52(2):389-97) wiadomo, iż przyczyniają się one do syntezy fosfatydylocholiny i fosfatydyloetanoloaminy.
Z czasopisma Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2016;35(3): 114-29. doi:
10.1080/15257770.2015.1114132 znane jest wytwarzanie żeli chitozanowych z pochodnymi urydyny (oUrd) i monofosforanu urydyny (oUMP), połączonymi z aldehydem glutarowym (AG), ale są to żele nie wykazujące zdolności przejścia z zolu w żel pod wpływem temperatury i wymagają zastosowania dodatkowego środka sieciującego AG. Nukleotyd w postaci monofosforanu cytydyny został wykorzystany do tworzenia żeli z hydroksytlenkiem żelaza β-FeOOH (czasopismo New Journal of Chemistry, 2019 DOI: 10.1039/c9nj02949d).
Natomiast z czasopisma Macromolecular Research, 2006, 14, 4 wiadomo, iż badany był proces adsorpcji monofosforanu cytydyny na pochodnej β-cyclodekstryny (karboksymetylo-e-cyklodekstrynie) syntetyzowanej z chitozanem.
Z opisu zgłoszenia patentowego P. 424971 jest znany sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polegający na wprowadzeniu do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego octanu, chlorku, mleczanu chitozanu, o stężeniu 2-5% wagowych, sporządzonego z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70% i o masie cząsteczkowej 500 000 - 700 000 u, kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego pochodnej kwasu fosforowego w postaci roztworu wodnego soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny o stężeniu 80-100% wagowych, użytego w ilości 1-2 ml na 16 ml roztworu soli chitozanu, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin powstałego zolu przechodzącego w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego. Do roztworu soli chitozanu, przed wprowadzeniem roztworu soli 5'-monofosforanu urydyny, wprowadza się także środki wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina, kwas liponowy, tlenek grafenu.
Sposób według wynalazku rozwiązuje problem wprowadzenia do struktury żelu chitozanowego zamiast bądź oprócz monofosforanu urydyny zawierającego jako zasadę pirymidynową uracyl czyli związek zawierający grupy aminowe NH, związku zawierającego zasadę pirymidynową zawierającą grupę aminową NH2 oraz o jeden więcej atom azotu niż uracyl. Obecność tych grup wpływa korzystnie na wzrost aksonów, co wynika z badań nad funkcjonalizowaniem rusztowań białkami. Aplikacja do organizmu pacjenta rusztowania modyfikowanego aminokwasami powoduje stopniowe uwalnianie aminokwasów, które są dla komórek substancjami odżywczymi oraz wpływają na zwiększoną adhezję komórek do materiału, (m.in. publikacja Trendy i rozwiązania technologiczne: odpowiedź na potrzeby współczesnego społeczeństwa t. 1, 2017, Wydawnictwo Naukowe TYGIEL, ISBN 978-83-65598-58-5, 232 s. Polidepsipeptydy w inżynierii tkankowej).
Sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polegający na wprowadzeniu do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego soli chitozanu, jak octan, chlorek lub mleczan chitozanu o stężeniu 2-5% wagowych, sporządzonej z chitozanu o stopniu deacetylacji 75-90% i o masie cząsteczkowej 500 000 - 700 000, najpierw środka wspomagającego regenerację nerwów, jak kobalamina w ilości 30-70 μg/ml roztworu soli chitozanu, kwas liponowy w ilości 0,005-0,015 g/ml roztworu soli chitozanu lub tlenek grafenu w ilości 0,002-0,003 mg/ml roztworu soli chitozanu, a następnie kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego soli disodowej nukleotydu o stężeniu 80-100% wagowych w ilości 1-2 ml na 16 ml roztworu soli chitozanu, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 otrzymanej w postaci zolu mieszaniny roztworu soli chitozanu z roztworem nukleotydu, wykazującej zdolność przejścia w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego, według wynalazku charakteryzuje się tym, że jako roztwór wodny soli disodowej nukleotydu stosuje się roztwór wodny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny lub roztwór wodny mieszaniny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny z solą disodową 5'-monofosforanu urydyny zawierającej 0,09-1 g soli cytydyny / 1 g mieszaniny soli cytydyny i soli urydyny.
Sposób według wynalazku ilustrują poniższe przykłady.
Przykład 1
200 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=78% i masie cząsteczkowej MW=680000 rozpuszczono w 20 ml 0,1M roztworu wodnego kwasu octowego i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu całkowitego rozpuszczenia polisacharydu, po czym dodano roztwór 500 μg kobaltoaminy w 1 ml wody destylowanej. Uzyskany roztwór schładzano w ciągu 2-óch godzin do temperatury 4°C. Następnie przygotowano roztwór 0,4 g soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny i 0,3 g soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny w 1 ml wody destylowanej i uzyskaną zawiesinę schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C, po czym wprowadzano kropla po kropli do schłodzonego roztworu octanu chitozanu. Po dokładnym wymieszaniu całości przygotowaną próbkę pozostawiono w warunkach chłodniczych w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu całkowitego pozbycia się pęcherzy powietrznych. Otrzymana mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny i roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny miała postać zolu, który w temperaturze 37°C przybrał postać żelu. Powstały żel posiadał strukturę amorficzną, porowatość powyżej 94%, pory o rozmiarach rzędu 20 μm.
Przykład 2
200 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=90% i masie cząsteczkowej MW=420000 rozpuszczono w 20 ml 0,1M roztworu wodnego kwasu mlekowego i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu całkowitego rozpuszczenia polisacharydu. Uzyskany roztwór schładzano w ciągu 2-óch godzin do temperatury 4°C. Następnie przygotowano roztwór 1,1 g soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny w 1 ml wody destylowanej i uzyskaną zawiesinę schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C, po czym wprowadzano kropla po kropli do schłodzonego roztworu octanu chitozanu. Po dokładnym wymieszaniu całości przygotowaną próbkę pozostawiono w warunkach chłodniczych w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu całkowitego pozbycia się pęcherzy powietrznych. Otrzymana mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny miała postać zolu, który w temperaturze 37°C przybrał postać żelu. Powstały żel posiadał strukturę amorficzną, porowatość powyżej 95%, pory o rozmiarach rzędu 20-50 μm.
Claims (1)
1 . Sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polegający na wprowadzeniu do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego soli chitozanu, jak octan, chlorek lub mleczan chitozanu o stężeniu 2-5% wagowych, sporządzonej z chitozanu o stopniu deacetylacji 75-90% i o masie cząsteczkowej 500000-700000, najpierw środka wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina w ilości 30-70 μg/ml roztworu soli chitozanu, kwas liponowy w ilości 0,005-0,015 g/ml roztworu soli chitozanu lub tlenek grafenu w ilości 0,002-0,003 mg/ml roztworu soli chitozanu, a następnie kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego soli disodowej nukleotydu o stężeniu 80-100% wagowych w ilości 1-2 ml na 16 ml roztworu soli chitozanu, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 otrzymanej w postaci zolu mieszaniny roztworu soli chitozanu z roztworem nukleotydu, wykazującej zdolność przejścia w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego, znamienny tym, że jako roztwór wodny soli disodowej nukleotydu stosuje się roztwór wodny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny lub roztwór wodny mieszaniny soli disodowej 5'-monofosforanu cytydyny z solą disodową 5'-monofosforanu urydyny zawierającej 0,09-1 g soli cytydyny / 1 g mieszaniny soli cytydyny i soli urydyny.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL433194A PL243349B1 (pl) | 2020-03-11 | 2020-03-11 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL433194A PL243349B1 (pl) | 2020-03-11 | 2020-03-11 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL433194A1 PL433194A1 (pl) | 2021-09-13 |
| PL243349B1 true PL243349B1 (pl) | 2023-08-07 |
Family
ID=77662660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL433194A PL243349B1 (pl) | 2020-03-11 | 2020-03-11 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL243349B1 (pl) |
-
2020
- 2020-03-11 PL PL433194A patent/PL243349B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL433194A1 (pl) | 2021-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2295515C (en) | Method for large-scale production of di(uridine 5'-tetraphosphate) and salts thereof | |
| US5936080A (en) | Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives | |
| EP2529226B1 (en) | Silylated biomolecules | |
| Wójcik et al. | Nucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 1 is responsible for degradation of antisense phosphorothioate oligonucleotides | |
| PL243349B1 (pl) | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych | |
| CN107737339B (zh) | 磷酸钙-生物分子复合材料及其制备方法 | |
| KR101455208B1 (ko) | 안정적인 ｓ-아데노실메티오닌의 염 및 이를 제조하기 위한 방법 | |
| JP5706579B2 (ja) | リン酸化多糖の製造方法 | |
| CN1086736C (zh) | 卡拉胶－魔芋多糖复配胶固定化微生物载体及其应用 | |
| JPS6334161B2 (pl) | ||
| JPS6214274B2 (pl) | ||
| JP2005501930A (ja) | 哺乳動物の外科的若しくは治療的な処置方法、又は診断方法に使用、特に血漿増量剤に使用をする高度分枝アミロペクチン | |
| CA2442868A1 (en) | Chitosan and hydroxy carboxylic acid based porous and non-porous matrices | |
| PL235369B1 (pl) | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych | |
| CN111298199B (zh) | 一种骨科临时植入体及其制备方法 | |
| EP0056111A1 (en) | Immobilized enzymatic active substance and method for preparing the same | |
| EP1323727A2 (en) | Composition and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives | |
| JPS59113895A (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製法 | |
| Wang et al. | Determination of gelation kinetic parameters for a chitosan/β-glycerophosphate injectable hydrogel by means of rheological measurement | |
| CN119462803B (zh) | 核苷单体类似物、寡核苷酸的合成方法和应用 | |
| Rieg et al. | Recent advancements in the application of chitosan-based nanocomposites in tissue engineering and regenerative medicine | |
| US7132410B2 (en) | Di(uridine 5′-)tetraphosphate and salts thereof | |
| JP2537355B2 (ja) | 糖アルコ−ルの製造法 | |
| KR20110056346A (ko) | 고순도의 의료용 히아루론산의 제조 방법 | |
| JPH0468912B2 (pl) |