PL235022B1 - Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu - Google Patents
Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu Download PDFInfo
- Publication number
- PL235022B1 PL235022B1 PL420946A PL42094617A PL235022B1 PL 235022 B1 PL235022 B1 PL 235022B1 PL 420946 A PL420946 A PL 420946A PL 42094617 A PL42094617 A PL 42094617A PL 235022 B1 PL235022 B1 PL 235022B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hydroxyandrost
- sequence
- dione
- strain
- kch
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- WVAMBAWFDOYFOD-DQXCSHPPSA-N 6beta-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3C[C@@H](O)C2=C1 WVAMBAWFDOYFOD-DQXCSHPPSA-N 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 241000894120 Trichoderma atroviride Species 0.000 claims description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N Aldosterone Chemical compound C([C@@]1([C@@H](C(=O)CO)CC[C@H]1[C@@H]1CC2)C=O)[C@H](O)[C@@H]1[C@]1(C)C2=CC(=O)CC1 PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N 0.000 description 2
- PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N Aldosterone Natural products C1CC2C3CCC(C(=O)CO)C3(C=O)CC(O)C2C2(C)C1=CC(=O)CC2 PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000223194 Fusarium culmorum Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 229960002478 aldosterone Drugs 0.000 description 2
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N (3s)-3-amino-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3s)-1-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(1s)-1-carboxyethyl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-3-(1h-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-ox Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CUKWUWBLQQDQAC-VEQWQPCFSA-N 0.000 description 1
- BTTWKVFKBPAFDK-UHFFFAOYSA-N (9beta,10alpha)-Androst-4-ene-3,17-dione Natural products OC1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 BTTWKVFKBPAFDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 11-deoxycorticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 0.000 description 1
- XGUHPTGEXRHMQQ-BGJMDTOESA-N 19-hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(CO)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XGUHPTGEXRHMQQ-BGJMDTOESA-N 0.000 description 1
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101150034980 BRDT gene Proteins 0.000 description 1
- 241000088530 Chaetomium sp. Species 0.000 description 1
- OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N Corticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N androst-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N androstenedione Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N corticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N 0.000 description 1
- ZESRJSPZRDMNHY-UHFFFAOYSA-N de-oxy corticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 ZESRJSPZRDMNHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N formestane Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1O OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N 0.000 description 1
- 230000003002 hypertensinogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu.
Metoda, według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym do wytwarzania leku podwyższającego ciśnienie krwi.
63-Hydroxyandrostenedion znany jest jako czynnik podwyższający ciśnienie krwi i zwiększający wydalanie potasu powodowane aldosteronem u szczurów. Zmniejsza także stężenie reniny oraz aldosteronu, kortykosteronu oraz 11-deoksykortykosteronu. (H. Sekihara (1983) 63-Hydroxyandrostenedione: evidence for a new hypertensinogenic agent, Clin Exp Hypertens A 5, 1 -9). Wydzielanie 63-hydroxyandrostenedionu w organizmie człowieka zależy od stężenia angiotensyny II (H. Sekihara (1984) 19-Hydroxyandrostenedione and 63-hydroxyandrostenedione: new steroids regulated by the renin-angiotensin system in man, J Steroid Biochem. 20; 383-385).
Znana jest mikrobiologiczna metoda uzyskiwania 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu z androst-4-en-3,17-dionu w wyniku zastosowania szczepu: Fusarium culmorum z konwersją 31% (T Kołek, A. Świzdor 1998 Biotransformation XLV. Transformations of 4-ene-3-oxo steroids In Fusarium culmorum culture. J. Steroid Biochem. Molec. Biol. 67, 63-69); Chaetomium sp. KCH 6651 z konwersją 21% (T. Janeczko, J. Dmochowska-Gładysz, E. Kostrzewa-Susłow, A. Białońska, Z. Ciunik (2009) Biotransformations of steroid compounds by Chaetomium sp. KCH 6651 Steroids 74, 657-661).
W dostępnej literaturze nie znaleziono metody uzyskiwania 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dion z 33-hydroksyandrost-5-en-17-on (DHEA).
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Trichoderma atroviride KCh SB6. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 33-hydroksyandrost-5-en-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej trzy dni. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez sześć dni.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Trichoderma atroviride KCh SB6, następuje regio- i stereoselektywne wprowadzenie grupy hydroksylowej przy szóstym atomie węgla (C-6) poprzedzone utlenieniem grupy hydroksylowej przy trzecim atomie węgla i izomeryzacją wiązania podwójnego z 5-en do 4-en. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu z wydajnością izolowaną na poziomie 32% (według GC > 42%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
Metoda izolowania szczepu Trichoderma atroviride KCh SB6
Próbkę gleby pobranej na Stacji Benzynowej - Wrocław, dzielnica Sępolno przeniesiono do sterylnej gilzy. Następnie w warunkach aseptycznych 1 g gleby rozpuszczono w 10 ml sterylnej wody. Pobrano 1cm3 supernatantu i wykonano posiewy z kolejnych rozcieńczeń. Kolejnymi rozcieńczeniami badanego materiału zaszczepiono płytki agarowe (sterylne plastikowe płytki z 20 ml pożywki stałej o składzie: glukoza 3%, aminobak 1%, agar 0,8%). Z jednego z rozcieńczeń wyodrębniono czystą kulturę szczepu Trichoderma atroviride KCh SB6, który wykorzystano do biotransformacji. Wyodrębniony szczep przechowywany jest na skosach agarowych w temperaturze +4°C w kolekcji Katedry Chemii Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu, ul. C.K. Norwida 25, 50-375 Wrocław.
Szczep dostępny jest również w Katedrze Biotechnologii i Mikrobiologii Żywności, Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu, ul. J. Chełmońskiego 37, 51-630 Wrocław.
P r z y k ł a d.
Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 5 g aminobaku i 15 g glukozy, wprowadza się szczep Trichoderma atroviride KCh SB6 o sekwencjach 1, 2, 3: KX538951 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 1, KX538953 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 2 oraz KX538955 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 3. Po
PL 235 022 Β1 godzinach jego wzrostu dodaje się 100 mg 33-hydroksyandrost-5-en-17-onu o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 DMSO. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 6 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksanu i acetonu w stosunku objętościowym 2:1.
Na tej drodze otrzymuje się 32,1 mg 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu (wydajność 32%, według GC > 42%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (600 MHz) (ppm) (CDCb) δ : 0.93 (s, 3H, 18-H); 0.96 (1H, ddd, J = 12.5, 10.9, 4.2 Hz, 9-H); 1.25-1.34 (m, 3H, 7-Hoc, 12-Ha, 14-H); 1.39 (s, 3H, 19-H); 1.50 (qd, 1H, J = 13.1,4.2 Hz, 11-Ηβ); 1.61 (tt, 1H, J =12.6, 9.1 Hz, 15-Ηβ); 1.67 (ddd, 1H, J = 13.7, 7.0, 3.9 Hz, 11-Ha); 1.71 (ddd, 1H, 1H, J= 14.8, 13.2, 4.0 Hz, 1-Ha); 1.86 (ddd, 1H, J = 13.2, 4.1, 2.9 Hz, 12-Ηβ); 1.98 (ddd, 1H, J = 12.5, 8.2, 5.9 Hz, 15-Ha); 2.03 (ddd, 1H, J= 13.2, 4.9, 2.7 Hz, 1-Ηβ); 2.12 (dt, 1H, J= 19.5, 9.2 Hz, 16-Ha); 2.12 (dt, 1H, J= 10.9, 3.2 Hz, 7-Ηβ); 2.18 (td, 1H, J= 11.1,3.2 Hz, 8-H); 2.38 (brdt, 1H, J= 16.8, 4.1 Hz, 2-Ha); 2.47 (dd, 1H, J = 19.6, 9.4 Hz, 16-Ηβ); 2.50 (dd, 1H, J = 17.4, 14.8, 5.0 Hz, 2-Ηβ); 4.38 (t, 1H, J = 2.8 Hz, 6-Ha); 5.81 (s, 1 Η, 4-H).
13C NMR (151 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 13,88 (C-18), 19,65 (C-19), 20,37 (C-11), 21,81 (C-15), 29,52 (C-8), 31,37 (C-12), 34,28 (C-2), 35,88 (C-16), 37,34 (C-1), 37,34 (C-7), 38,17 (C-10), 47,74 (C-13), 51,00 (C-14), 53,76 (C-9), 72,83 (C-6), 126,58 (C-4), 168,03 (C-5), 200,40 (C-3), 220,69 (C-17).
TAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTACCGAGTTTACAACTCCCAAACCCAATGTGA ACCATACCAAACTGTTGCCTCGGCGGGGTCACGCCCCGGGTGCGTCGCAGCCCCGGAACCAGGCGCCCGC CGGAGGGACCAACCAAACTCTTTTCTGTAGTCCCCTCGCGGACGTTATTTCTTACAGCTCTGAGCAAAAATT CAAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCG ATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGTATTC TGGCGGGCATGCCTGTCCGAGCGTCATTTCAACCCTCGAACCCCTCCGGGGGGTCGGCGTTGGGGACCTC GGGAGCCCCTAAGACGGGATCCCGGCCCCGAAATACAGTGGCGGTCTCGCCGCAGCCTCTCCTGCGCAGT AGTTTGCACAACTCGCACCGGGAGCGCGGCGCGTCCACGTCCGTAAAACACCCAACTTCTGAAATGTTGA CCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATAICA
Sekwencja 1
CGTTACACTTTTGCTTCTACACTTTCCCATTTGCGTCGTACCAATACACCCATCGGAAGAGATGGTAAGCTG GCGAAGCCTCGACAGCTCCACAACACACACTGGGGTTTGGTGTGCCCGGCTGAGACCCCTGAAGGTCAAG CTTGTGGTCTGGTCAAGAATTTGTCTCTCATGTGCTACGTCAGTGTTGGATCTCCTTCTGAGCCTTTGATCG AGTTTATGATCAACAGAGGTATGGAAGTCGTTGAGGAGTATGAGCCACTGAGGTATCCCCATGCTACAAA GATCTTTGTGAATGGTGTCTGGGTTGGAATCCACCAAGACCCCAAGCATCTGGTAAACCAAGTTTTGGATA CTCGTCGCAAATCCTATCTGCAGTACGAGGTCTCTCTGATCAGAGAAATTCGAGACCAAGAATTCAAAATC TTCTCTGACGCCGGCCGTGTCATGCGTCCCGTCTTCACTGTACAGCAGGAAGATGACCCGGAAACGGGTA TCAACAAGGGCCACCTGGTTTTGACCAAGGACCTTGTCAATAGACTGGCCAAAGAGCAGGCTGAGCCTCC AGAAGACCCAAGCATGAAGCTCGGATGGGAAGGGCTGATTAGAGCTGGTGCGGTGGAATATCTCGACGC CGAGGAAGAAGAAACGTCCATGATTTGCATGACACCGGAGGATCTGGAGCTCTATCGTCTTCAAAAGGCC GGCATTGCCACGGATGAAGACATAGGAGACGATCCAAATAAGCGTCTCAAGACCAAGACAAAICCGACA ACTCACATGTATACGCATTGCGAGATTCACCCGAGTATGATCTTAGGTATCTGTGCTAGTATCATTCCTTTC CCCGATCACAACCAGGTATGTCAACCCGAGAAGCTATCCTTTTCCCCCTTTGTCCAACTTTTCAGTCCCCTAC GGTCAGATCGCTAATTGATGCTATACAGTCCCCCCGTAACACCTACCAGTCTGCCATGGGTAAACAAGCCA TGGGCTTCTTCCTAACCAACTATTCTCGGCGTATGGACACCATGGCCAATATCCTCTACTACCCTCAGAAAC CGCTGGGCACTACTCGTTCTATGGAGTTTTTGAAATTCCGTGAGCTGCCAGCCGGACAAAACGCC
Sekwencja 2
PL 235 022 Β1
TGCCCGACAATTCTGTCCTCAGTCTTGTCATTTTTTTTCCCTCGCAGCATCACACCCCGCTTTACCTGTCTACC CCTCCTTTGGCACAGCAAAATTTTCTGGCTGCCTTGCTrGGCTTTTAGTGGGGTGCCAACTTTTTTTTGTTTG GCTGCAACCCCGCTATCGCGACTGTCCCGTCCCAACGAATTGTACTCAATTGCATCGTCTTCTCCATCTCTG TGTGGTTCATTGTGCTAATCATGCTTCAATCAATAGGAAGCCGCCGAGCTCGGCAAGGGTTCTTTCAAGTA TGCGTGGGTTCTTGACAAGCTCAAGGCCGAGCGTGAGCGTGGTATCACCATCGACATTGCCCTCTGGAAG TTCGAGACTCCCAAGTACTATGTCACCGTCATTGGTATGTTTTCGCTTTTCCTCATTGATACTTGGAGACCA AGATTCTAACGTGCCGCTCTGTAGACGCTCCCGGTCACCGTGATTTCATCAAGAACATGATCACTGGTACT TCCCAGGCTGACTGCGCTATCCTGATTATCGCTGCCGGTACTGGTGAGTTCGAGGCTGGTATCTCCAAGGA TGGCCAGACCCGTGAGCACGCTCTGCTCGCCTACACCCTGGGTGTCAAGCAGCTCATCGTTGCCAICAACA AGATGGACACTGCCAACTGGGCCGAGGCTCGTTACCTTGAGATCATCAAGGAGACCTCCAACTTCATCAA GAAGGTCGGCTTCAACCCCAAGACCGTTGCCTTCGTCCCCATCTCCGGCTTCAACGGCGACAACATGTTGG CTGCCTCCACCAACTGCCCCTGGTACAAGGGCTGGGAGAAGGAGACCAAGGCTGGCAAGTCCACCGGCA AGACCCTTCTCGAGGCCATTGACGCCATTGAGCCCCCCAAGCGTCCCACAGACAAGCCCCTCCGTCTTCCC CTTCAGGATGTTTACAAGATCGGTGGTATTGGAACAGTCCCTGTCGGCCGTATCGAGACTGGTATCCTCAA GCCCGGTATGGTCGTTACCTTCGCTCCCTCCAACGTCACCACTGAAGTCAAGTCCGTTGAGATGCACCACG AGCAGCTCGTCGAGGGTGTCCCCGGTGACAACGTTGGATTCAACGTCAAGAACGTCTCCGTCAAGGATAT CCGCCGTGGTAACGTTGCCGGTGACTCCAAGAACGACCCCCCCATGGGTGCCGCTTCTTTCAACGCCCAGG TCATCGTCATGAACCACCCTGGCCAGGTCGGTGCCGG
Claims (4)
1. Sposób wytwarzania 63-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Trichoderma atroviride KCh SB6 o sekwencjach 1,2,3: ΚΧ538951 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 1, ΚΧ538953 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 2 oraz ΚΧ538955 przedstawionej na rysunku jako sekwencja 3, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 33-hydroksyandrost-5-en-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, przy czym transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, przez co najmniej 3 dni, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,2 g : 1 L.
3. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
4. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 6 dni.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL420946A PL235022B1 (pl) | 2017-03-22 | 2017-03-22 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL420946A PL235022B1 (pl) | 2017-03-22 | 2017-03-22 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL420946A1 PL420946A1 (pl) | 2018-09-24 |
| PL235022B1 true PL235022B1 (pl) | 2020-05-18 |
Family
ID=63578777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL420946A PL235022B1 (pl) | 2017-03-22 | 2017-03-22 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL235022B1 (pl) |
-
2017
- 2017-03-22 PL PL420946A patent/PL235022B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL420946A1 (pl) | 2018-09-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3620528B1 (en) | Use of a mutant lacking the acyl-coenzyme a thiolase gene | |
| Ekiz et al. | Biotransformation of cyclocanthogenol by the endophytic fungus Alternaria eureka 1E1BL1 | |
| Hang et al. | A concise synthesis of β-sitosterol and other phytosterols | |
| PL235022B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu | |
| Cano et al. | Isolation of acetylated bile acids from the sponge Siphonochalina fortis and DNA damage evaluation by the comet assay | |
| PL235018B1 (pl) | Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3,17-dionu | |
| PL235399B1 (pl) | Sposób wytwarzania 17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3, 17-dionu | |
| PL235023B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β,6β-dihydroksyandrost-4-en-17-onu | |
| JP2010531660A (ja) | ９α−ヒドロキシ−ステロイドの合成方法 | |
| CN104352505B (zh) | 原人参三醇及其衍生物在制备治疗肝病药物中的应用 | |
| Atif et al. | Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum | |
| PL235287B1 (pl) | Sposób wytwarzania androst-1,4-dien-3,17-dionu | |
| PL228764B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu | |
| PL235020B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β,7α,17α-trihydroksyandrost-5-enu | |
| PL238288B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksy-16α, 17α-epoksyprogesteronu | |
| PL237135B1 (pl) | 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu | |
| PL246071B1 (pl) | Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-19-nortestosteronu | |
| PL237126B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6α-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu | |
| PL237710B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| PL237709B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| Eshrat et al. | Biotransformation of progesterone by Penicillium aurantiogriseum | |
| PL237127B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu | |
| PL237134B1 (pl) | 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17- on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19- oksidoandrostan-17-onu | |
| PL239563B1 (pl) | 3β-Hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan- 17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17aoksa- D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| PL228763B1 (pl) | Sposób wytwarzania7α-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu |