PL223357B1 - Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanie - Google Patents
Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanieInfo
- Publication number
- PL223357B1 PL223357B1 PL404564A PL40456413A PL223357B1 PL 223357 B1 PL223357 B1 PL 223357B1 PL 404564 A PL404564 A PL 404564A PL 40456413 A PL40456413 A PL 40456413A PL 223357 B1 PL223357 B1 PL 223357B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- ser
- radiopharmaceutical
- leu
- phe
- gly
- Prior art date
Links
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 title claims description 33
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 title claims description 33
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 title claims description 33
- 239000002243 precursor Substances 0.000 title claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 6
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 5
- 229940127044 therapeutic radiopharmaceutical Drugs 0.000 claims description 5
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 4
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 3
- 229940127043 diagnostic radiopharmaceutical Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 230000005266 beta plus decay Effects 0.000 claims description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 230000008029 eradication Effects 0.000 claims description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims 2
- 101100311302 Sordaria macrospora (strain ATCC MYA-333 / DSM 997 / K(L3346) / K-hell) pro11 gene Proteins 0.000 claims 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims 1
- 230000005271 beta minus decay Effects 0.000 claims 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims 1
- BGHSOEHUOOAYMY-JTZMCQEISA-N ghrelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C1=CC=CC=C1 BGHSOEHUOOAYMY-JTZMCQEISA-N 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 102100033367 Appetite-regulating hormone Human genes 0.000 description 9
- 101800001586 Ghrelin Proteins 0.000 description 9
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 9
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 9
- 102000000393 Ghrelin Receptors Human genes 0.000 description 7
- 108010016122 Ghrelin Receptors Proteins 0.000 description 7
- 108010051768 des-n-octanoyl ghrelin Proteins 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- -1 p-aminobenzyl Chemical group 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N lutetium-177 Chemical compound [177Lu] OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 2
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229940121382 ghrelin analogues Drugs 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N (+-)-Isoprenaline Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBWRJAOOMGASJP-UHFFFAOYSA-N 2-(3,5-diphenyl-1h-tetrazol-1-ium-2-yl)-4,5-dimethyl-1,3-thiazole;bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1N1N(C=2C=CC=CC=2)N=C(C=2C=CC=CC=2)[NH2+]1 NBWRJAOOMGASJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000252229 Carassius auratus Species 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical group FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052765 Lutetium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101500028462 Rattus norvegicus Ghrelin Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002830 appetite depressant Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940039009 isoproterenol Drugs 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N n'-ethylmethanediimine;hydrochloride Chemical compound Cl.CCN=C=N BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 235000021095 non-nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 229910052702 rhenium Chemical group 0.000 description 1
- WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N rhenium atom Chemical group [Re] WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest prekursor radiofarmaceutyku [DTPA(PABn)-Leu ]-dezacylogrelina(1 -5) o wzorze 1,
inaczej Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA; kwas glicyloseryloserylofenyloalanyloleucylofenylo-4-metyleno-(2-dietylenopentaoctowy), oparty na pentapeptydowym analogu dezacylogreliny H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OH (glicyloseryloserylofenyloalanyloleucyny), który w sposób chemiczny jest połączony z chelatorem p-NH2-Bn-DTPA (kwasem 2-(p-aminobenzylo)-dietylenotriaminopentaoctowym) i w takiej formie jest gotowy do znakowania radionuklidami zarówno terapeutycznymi jak i diagnostycznymi, sposób jego wytwarzania a także radiofarmaceutyk i jego zastosowanie.
Dezacylogrelina jest nieaktywną formą greliny - neuropeptydu powszechnie występującego w organizmach ssaków i pełniącego funkcję neuroprzekaźnika [Korbonits, M., Goldstone, A.P., Gueorguiev, M., Grossman, A.B., 2004. Ghrelin - a hormone with multiple functions. Frontiers in Neuroendocrinology 25, 27-68]. Grelina wydzielana jest przez gruczoły właściwe żołądka bezpośrednio do naczyń krwionośnych. Jednakże we krwi krąży zaledwie 10% greliny w formie acylowanej. Ogromną większość stanowi jej nieaktywna forma dezacylogrelina [Hosoda, H., Kojima, M., Matsuo, H., Kangawa, K., 2000. Ghrelin and des-acyl ghrelin: two major forms of rat ghrelin peptide in gastrointestinal tissue. Biochem. Biophys. Res. Commun. 279, 909-13]. Znane są natomiast prace, w których zastosowano analogi greliny jako nośniki radionuklidów i potencjalne radiofarmaceutyki [Rosita, D., Dewit, M.A., Luyt, L.G., 2009. Fluorine and rhenium substituted ghrelin analogues as potential imaging probes for the growth hormone secretagogue receptor. J. Med. Chem. 52(8), 2196-203]. Jednakże do tej pory nie pojawiły się żadne doniesienia dotyczące takiego zastosowania dla dezacylogreliny i jej krótkich analogów.
Dezacylogrelina wbrew wstępnym przypuszczeniom nie jest pozbawiona aktywności biologicznej, chociaż jej funkcja biologiczna nie jest do końca poznana. Istnieją doniesienia świadczące o jej działaniu hamującym apetyt i osłabiającym motorykę żołądka [Asakawa, A., Inui, A., Fujimiya, M., Sakamaki, R., Shinfuku, N., Ueta, Y., Meguid, M.M., Kasuga, M., 2005. Stomach regulates energy balance via acylated ghrelin and desacyl ghreliny. Gut 54, 18-24; Chen, C.Y., Chao, Y., Chang, F.Y., Chien, E.J., Lee, S.D., Doong, M.L., 2005a. Intracisternal des-acyl ghrelin inhibits food intake and nonnutrient gastric emptying in conscious rats. Int. J. Mol. Med. 16(4), 695-699; Matsuda, K., Miura, T., Kaiya, H., Maruyama, K., Shimakura, S., Uchiyama, M., Kangawa, K., Shioda, S., 2006. Regulation of food intake by acyl and des acyl ghrelins in the goldfish. Peptides 27, 2321 -2325]. Co ciekawe, u szczurów dezacylogrelina pobudza albo zmniejsza łaknienie. Wykazano, że w działaniu zmniejszającym łaknienie pośredniczą receptory CRF2 zlokalizowane w ośrodkowym układzie nerwowym [Chen, C.Y., Inui, A., Asakawa, A., Fujino, K., Kato, I., Chen, C.C., Ueno, N., Fujimiya, M., 2005b. Des-acyl ghrelin acts by CRF type 2 receptors to disrupt fasted stomach motility in conscious rats. Gastroenterology 129, 8-25a] stymulatorowy efekt dezacylogreliny następuje przez aktywację neuronów oreksyPL 223 357 B1 nowych w podwzgórzu przez mechanizm niezależny od GHS-R1a [Toshinai, K., Yamaguchi, H., Sun, Y., Smith, R.G., Yamanaka, A., Sakurai, T., Date, Y., Mondai, M.S., Shimbara, T., Kawagoe, T., Murakami, N., Miyazato, M., Kangawa, K., Nakazało, M., 2006. Des-acyl ghrelin induces food intake by a mechanism independent of the growth hormone secretagogue receptor. Endocrinology 147, 2306-14]. Przeprowadzone badania in vitro dowodzą także, że dezacylogrelina promuje adipogenezę [Thompson, N.M., Gill, D.A., Davies, R., Loveridge, N., Houston, P.A., Robinson, I.C., Wells, T., 2004. Ghrelin and des-octanoyl ghrelin promote adipogenesis directly in vivo by a mechanism independent of the type 1a growth hormone secretagogue receptor. Endocrinology 145, 234-42] oraz hamuje lipolizę w komórkach [Muccioli, G., Pons, N., Ghe, C., Catapano, F., Granata, R., Ghigo, E., 2004. Ghrelin and des-acyl ghrelin both inhibit isoproterenol-induced lipolysis in rat adipocytes via a nontype 1a growth hormone secretagogue receptor. Eur. J. Pharmacol. 498, 27-35)]. Ponadto zaobserwowano, iż dezacylogrelina może wpływać na proliferację komórek.
Dezacylogrelina wykazuje zasadniczą różnicę w swojej budowie od formy aktywnej. Mianowicie, nie zawiera grupy acylowej na serynie w pozycji trzeciej [Kojima, M., Hosoda, H., Matsuo, H., Kangawa, K., 2001. Ghrelin: discovery of the natural endogenous ligand for the growth hormone secretagogue receptor. Trends Endocrinol. Metab. 12, 118-122]. Nieobecność łańcucha alifatycznego zmienia jej strukturę przestrzenną [Staes, E., Absil, P.A., Lins, L., Brasseur, R., Deleu, M., Lecouturier, N., Fievez, V., Rieux, A.D., Mingeot-Leclercq, M.P., Raussens, V., Preat, V., 2010. Acylated and unacylated ghrelin binding to membranes and to ghrelin receptor: Towards a better understanding of the underlying mechanisms. Biochim. Biophys. Acta 1798(11), 2102-13]. Ze względu na inną strukturę przestrzenną oraz obniżoną liofilowość wynikającą z braku grupy alifatycznej dezacylogrelina nie jest w stanie związać się z receptorem greliny (GHS-R1a) [Grossauer, J., Kosol, S., Schrank, E., Zangger, K., 2010. The peptide hormone ghrelin binds to membrane-mimetics via its octanoyl chain and an adjacent phenylalanine. Bioorg. Med. Chem. 18(15), 5483-8].
Nieoczekiwanie, okazało się, że możliwe jest otrzymanie prekursora radiofarmaceutyku i radiofarmaceutyku, którego zastosowanie prowadzi do zahamowania wzrostu komórek nowotworowych wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego radiofarmaceutyk.
Prekursor radiofarmaceutyku [DTPA(PABn)-Leu5]-dezacylogrelina(1 -5) o wzorze 1,
połączony chelatorem p-NF2-Bn-DTPA, tj. kwasem 2-(p-aminobenzylo)-dietylenotriaminopentaoctowym z dezacylogreliną(1-5).
Sposób wytwarzania prekursora radiofarmaceutyku opartego na pentapeptydowym analogu dezacylogreliny, według wynalazku polega na tym, że przeprowadza się trójetapową syntezę organiczną wychodząc od Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OH, poprzez Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu i Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA finalnie otrzymując związek H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA 5 ([DTPA(PABn)-Leu ]-dezacylogrelina(1-5)), który jest gotowy do znakowania radionuklidami zarówno terapeutycznymi jak i diagnostycznymi.
PL 223 357 B1
Sposób wytwarzania prekursora radiofarmaceutyku do znakowania radionuklidami terapeutycznymi i diagnostycznymi, według wynalazku polega na tym, że przeprowadza się trójetapową syntezę organiczną:
a) Syntezę Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu z Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu, NHS (W-hydroksyimidu kwasu bursztynowego) oraz EDC (chlorowodorku W-(3-dimetyloaminopropylo)-W-etylokarbodiimidu), w rozpuszczalniku organicznym, zwłaszcza W,W’-dimetyloformamidzie, prowadząc reakcję w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza, korzystnie przez 24 godziny.
b) Sprzęganie Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu z p-NF2-Bn-DTPA w rozpuszczalniku organicznym, zwłaszcza W,W’-dimetyloformamidzie prowadząc reakcję w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza, korzystnie przez 24 godziny.
c) Deprotekcję Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA, w mieszaninie rozpuszczalników organicznych, zwłaszcza w mieszaninie W,W’-dimetyloformamidu i piperydyny, korzystnie w stosunku objętościowym 4:1 w temperaturze pokojowej, bez dostępu powietrza korzystnie przez 10 godzin, do otrzymania związku o wzorze 1, o nazwie [DTPA(PABn)-Leu ]-dezacylogrelina(1-5).
Radiofarmaceutyk terapeutyczny i/lub diagnostyczny według wynalazku charakteryzuje się tym, że stanowi go prekursor radiofarmaceutyku terapeutycznego według wynalazku, skompleksowany z radionuklidem terapeutycznym, zwłaszcza wytwarzającym podczas rozpadu cząstki alfa, pr omieniowanie beta minus o niskich i średnich energiach, elektrony Augera lub ich mieszaniny, wybrany z grupy obejmującej 67Cu, 90Y, 131l, 186Re, 188Re, 211At, 213Bi, 225Ac oraz 153Sm, korzystnie 177Lu, albo skompleksowany z radionuklidem diagnostycznym wytwarzającym podczas rozpadu promieniowanie gamma lub promieniowanie beta plus (pozytony) lub ich mieszaniny, wybrany z grupy obejmującej 11C, 13N, 15O, 18F, 62Cu, 64Cu, 67Ga, 68Ga, 82Rb, 86Y, 89Zr, 123l, 124l, 99mTc oraz 111In, korzystnie 177Lu.
Zastosowanie prekursora radiofarmaceutyku według wynalazku, do wytwarzania radiofarm aceutyku skompleksowanego z radionuklidem diagnostycznym lub terapeutycznym, do stosowania do zahamowania wzrostu lub całkowitej eradykacji nowotworów pierwotnych i/lub wtórnych (przerzutów), i/lub komórek metastazujących wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego radiofarmaceutyk według wynalazku, ewentualnie w połączeniu z innymi lekami do leczenia nowotworów, albo do wykrywania nowotworów pierwotnych i/lub wtórnych (przerzutów), i/lub komórek metastazujących wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego radiofarmaceutyk według wynalazku.
Wynalazek ilustrują podane niżej przykłady.
P r z y k ł a d I
Synteza Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu. W szklanej kolbce okrągłodennej o pojemności 2 ml zaopatrzonej w korek i mieszadełko magnetyczne umieszcza się 10 mg (13,9 μmola) Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu, 1,8 mg (15,3 μmola) NHS (W-hydroksyimid kwasu bursztynowego) oraz 3,2 mg (16,9 μmola) EDC (chlorowodorek W-(3-dimetyloaminopropylo)-W-etylokarbodiimidu). Całość rozpuszcza się w 1 ml DMF (W,W’-dimetyloformamid). Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza przez 24 godziny.
P r z y k ł a d II
Sprzęganie Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu. W szklanej kolbce okrągłodennej o pojemności 2 ml zaopatrzonej w korek i mieszadełko magnetyczne umieszcza się 10 mg Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu (7 μmoli) oraz 5 mg (10 μmoli) p-NH2-Bn-DTPA. Całość rozpuszcza się w 1 ml DMF. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza przez 24 godziny.
P r z y k ł a d III
Deprotekcja Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA. W szklanej kolbce okrągłodennej o pojemności 2 ml zaopatrzonej w korek i mieszadełko magnetyczne umieszcza się 3 mg (2,5 μmola) Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA w 0,5 ml mieszaniny WW-dimetyloformamidpiperydyna w stosunku objętościowym 4:1. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza przez 10 godzin. Otrzymano związek o wzorze 1 gotowy do znakowania radionuklidami zarówno terapeutycznymi jak i diagnostycznymi.
P r z y k ł a d IV
Znakowanie związku o wzorze 1 radionuklidem
Otrzymany związek o wzorze 1, wyznakowano radionuklidem i otrzymano znakowany radionuklidem radiofarmaceutyk gotowy do zastosowania zarówno w terapii antynowotworowej, jak i w diagnostyce obrazowej. Jako radionuklid terapeutyczny przydatny do zastosowania według wynalazku, bez ograniczania zakresu wynalazku, zastosowano do wyznakowania 90Y, 153Sm i 177Lu. Jako radioPL 223 357 B1 nuklid diagnostyczny przydatny do zastosowania według wynalazku, bez ograniczania zakresu wyn alazku, zastosowano do wyznakowania Lu, In i Ga.
P r z y k ł a d V
Znakowanie związku o wzorze 1 radionuklidem lutetu-177. (preparatyka ogólna)
W szklanej kolbce okrągłodennej o pojemności 2 ml zaopatrzonej w korek i mieszadełko magnetyczne umieszczono 1,16 ug (1,17 nmola) [DTPA(PABn)-Leu ]-dezacylogreliny(1-5) w 700 ul bu177 foru amonowego (pH=5,4). Następnie dodano 300 ul roztworu LuCI3 (1,06 nmola lutetu-177). Reakcję prowadzono w czasie T=45 min w temperaturze pokojowej.
Otrzymano znakowany radionuklidem lutetu-177 radiofarmaceutyk gotowy do zastosowania w terapii antynowotworowej oraz diagnostyce obrazowej.
P r z y k ł a d VI
Zastosowanie radiofarmaceutyku wytworzonego w przykładzie V do wykrywania komórek wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego ten radiofarmaceutyk
Komórki ludzkiego raka prostaty DU145 cechujące się ekspresją receptora CRF2 specyficznie rozpoznającego dezacylogrelinę, wysiano w różnej gęstości na 6-studzienkowe płytki do hodowli 2 o powierzchni studzienek 9,61 cm w trzech powtórzeniach. Po przyklejeniu się komórek do każdej studzienki dodawano 5 pmola radiofarmaceutyku wytworzonego sposobem według wynalazku w 0,5 ml pożywki i inkubowano w 37°C przez 1 godzinę. Komórki po inkubacji przemyto buforem fosforanowym i odtrawiano trypsyną. Aktywność próbek badano w liczniku scyntylacyjnym. Istotny statystycznie wzrost aktywności próbek obserwowano już dla gęstości 10 000 komórek/mL.
W wyniku przeprowadzonych doświadczeń na modelu opartym na żywych koloniach komórek DU145 stwierdzono, że maksymalna zdolność wiązania radiofarmaceutyku wytworzonego sposobem według wynalazku do receptorów błonowych wynosi 70 fmol na 500 tysięcy komórek.
P r z y k ł a d VII
Zastosowanie radiofarmaceutyku wytworzonego w przykładzie V do zahamowania wzrostu komórek wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego ten radiofarmaceutyk
Komórki ludzkiego raka prostaty DU145 cechujące się ekspresją receptora CRF2 specyficznie rozpoznającego dezacylogrelinę, wysiano na 96-studzienkowe płytki do hodowli o powierzchni stu2 dzienek 0,33 cm w trzech powtórzeniach. Po przyklejeniu się komórek do studzienek dodawano różne stężenie radiofarmaceutyku wytworzonego sposobem według wynalazku i inkubowano w 37°C przez 3 godziny. Komórki po inkubacji przemyto buforem fosforanowym, dodano nowej pożywki bez radiofarmaceutyku i inkubowano przez 72 godziny.
Następnie do studzienek dodawano 20 uL barwnika MTT (bromek 3-(4,5-dimetylotiazol-2-ilo)-2,5-difenylotetrazolowy, 5 mg/mL w buforze fosforanowym, pH 7). Po 4 godzinach inkubacji pożywkę usunięto, a do studzienek dodano 100 uL DMSO w celu rozpuszczenia kryształów formazanu. Po rozpuszczeniu mierzono absorbancję próbek przy długości fali 570 nm w czytniku mikropłytek Infinite M200 (TECAN). W wyniku przeprowadzonych doświadczeń obserwowano zahamowanie wzrostu komórek DU145 przy stężeniu radiofarmaceutyku 300 uCi na poziomie 50%.
Uzyskane wyniki nie odbiegają od wyników uzyskiwanych przy zastosowaniu innych radiofarmaceutyków.
Claims (6)
- Zastrzeżenia patentowe1. Prekursor radiofarmaceutyku do znakowania radionuklidami terapeutycznymi i diagnostycznymi, stanowi pentapeptydowy analog dezacylogreliny H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OH - glicyloseryloserylofenyloalanyloleucyny, połączony z chelatorem p-NH2-Bn-DTPA - kwasem 2-(p-aminobenzylo)-dietylenotriaminopentaoctowym) wzorze 1.PL 223 357 B1
- 2. Sposób wytwarzania prekursora radiofarmaceutyku do znakowania radionuklidami terapeutycznymi i diagnostycznymi, znamienny tym, że przeprowadza się trójetapową syntezę organiczną wychodząc od Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OH, poprzez Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu i Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA finalnie otrzymując związek H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA ([DTPA(PABn)-Leu5]-dezacylogrelina(1-5)).
- 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że przeprowadza się trójetapową syntezę organiczną:a) Syntezę Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu z Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu, NHS (W-hydroksyimidu kwasu bursztynowego) oraz EDC (chlorowodorku W-(3-dimetyloaminopropylo)-W-etylokarbodiimidu), w rozpuszczalniku organicznym, zwłaszcza W,W’-dimetyloformamidzie, prowadząc reakcję w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza, korzystnie przez 24 godziny.b) Sprzęganie Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-OSu z p-NF2-Bn-DTPA w rozpuszczalniku organicznym, zwłaszcza W,W’-dimetyloformamidzie prowadząc reakcję w temperaturze pokojowej bez dostępu powietrza, korzystnie przez 24 godziny.c) Deprotekcję Fmoc-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Bn-DTPA, w mieszaninie rozpuszczalników organicznych, zwłaszcza w mieszaninie W,W’-dimetyloformamidu i piperydyny, korzystnie w stosunku objętościowym 4:1 w temperaturze pokojowej, bez dostępu powietrza korzystnie przez 10 godzin, do otrzymania związku o wzorze 1, o nazwie [DTPA(PABn)-Leu5]-dezacylogrelina(1 -5).
- 4. Radiofarmaceutyk terapeutyczny i/lub diagnostyczny, znamienny tym, że stanowi go prekursor radiofarmaceutyku terapeutycznego jak określono w zastrz. 1, skompleksowany z radionuklidem terapeutycznym, zwłaszcza wytwarzającym podczas rozpadu cząstki alfa, promieniowanie beta minus o niskich i średnich energiach, elektrony Augera lub ich mieszaniny, wybrany z grupy obejmującej 67Cu, 90Y, 131I, 186Re, 188Re, 211At, 213Bi, 225Ac oraz 153Sm, korzystnie 177Lu, albo skompleksowany z radionuklidem diagnostycznym wytwarzającym podczas rozpadu promieniowanie gamma lub pro11 13 15 18 mieniowanie beta Plus (pozytony) lub ich mieszaniny, wybrany z grupy obejmującej C, N, O, F, 62Cu, 64Cu, 67Ga, 68Ga, 82Rb, 86Y, 89Zr, 123I, 124I, 99mTc oraz 111In, korzystnie 177Lu.
- 5. Zastosowanie prekursora radiofarmaceutyku określonego w zastrz. 1, do wytwarzania skomplikowanego z radionuklidem radiofarmaceutyku diagnostycznego lub terapeutycznego do wykrywania nowotworów pierwotnych i/lub wtórnych (przerzutów), i/lub komórek metastazujących wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego radiofarmaceutyk albo do hamowania wzrostu lub całkowitej eradykacji nowotworów pierwotnych i/lub wtórnych (przerzutów), i/lub komórek metastazujących wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego radiofarmaceutyk, ewentualnie w połączeniu z innymi lekami antynowotworowymi lub terapeutykami.
- 6. Zastosowanie radiofarmaceutyku określonego w zastrz. 4, do wytwarzania leków i środków diagnostycznych w terapii nowotworów pierwotnych i/lub wtórnych (przerzutów), i/lub komórek metastazujących wykazujących ekspresję receptora specyficznie rozpoznającego zastosowany radionuklid.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL404564A PL223357B1 (pl) | 2013-07-04 | 2013-07-04 | Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanie |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL404564A PL223357B1 (pl) | 2013-07-04 | 2013-07-04 | Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL404564A1 PL404564A1 (pl) | 2015-01-05 |
| PL223357B1 true PL223357B1 (pl) | 2016-10-31 |
Family
ID=52126404
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL404564A PL223357B1 (pl) | 2013-07-04 | 2013-07-04 | Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanie |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL223357B1 (pl) |
-
2013
- 2013-07-04 PL PL404564A patent/PL223357B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL404564A1 (pl) | 2015-01-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nock et al. | [99mTc] Demobesin 1, a novel potent bombesin analogue for GRP receptor-targeted tumour imaging | |
| Reubi et al. | A new peptidic somatostatin agonist with high affinity to all five somatostatin receptors | |
| Koopmans et al. | Molecular imaging in neuroendocrine tumors: molecular uptake mechanisms and clinical results | |
| US11992536B2 (en) | Dual-targeting compound and preparation method and application thereof | |
| EP0436005B1 (en) | Labeled polypeptide derivatives | |
| EP2252628B1 (en) | Bombesin analog peptide antagonist conjugates | |
| CN104837819B (zh) | 神经降压肽受体配体 | |
| DK175338B1 (da) | Somatostatinoktapeptid, fremgangsmåde til fremstilling deraf, farmaceutisk præparat og pakning med indhold deraf | |
| Lin et al. | Effects of chelator modifications on 68Ga-labeled [Tyr3] octreotide conjugates | |
| Ginj et al. | New pansomatostatin ligands and their chelated versions: affinity profile, agonist activity, internalization, and tumor targeting | |
| CZ297381B6 (cs) | Somatostatinové peptidy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem | |
| CN115304582B (zh) | FAP-α特异性肿瘤诊断显像剂 | |
| CN115583989B (zh) | 一种靶向sstr2的化合物及其制备方法和应用 | |
| Yan et al. | Synthesis and preclinical evaluation of a heterodimeric radioligand targeting fibroblast activation protein and integrin-αvβ3 | |
| WO2013181119A1 (en) | Molecular probes for multimodality imaging and tracking of stem cells | |
| Lymperis et al. | Comparative evaluation of the new GRPR‐antagonist 111In‐SB9 and 111In‐AMBA in prostate cancer models: Implications of in vivo stability | |
| Van Eijck et al. | Somatostatin receptor imaging and therapy of pancreatic endocrine tumors | |
| PL223357B1 (pl) | Prekursor radiofarmaceutyku, sposób jego wytwarzania, radiofarmaceutyk oraz jego zastosowanie | |
| US20140377171A1 (en) | Imaging and Treatment of Neuroendocrine Tumors with Glucose - Dependent Insulinotropic Polypeptide or Analogues or Antagonists Thereof | |
| US12208145B2 (en) | [161 tb]-based radiopeptides | |
| Varshney et al. | 68Ga-labeled bombesin analogs for receptor-mediated imaging | |
| PL233534B1 (pl) | Prekursor radiofarmaceutyku, radiofarmaceutyki oparte na analogach dezacylogreliny, oraz ich zastosowanie | |
| CA2518406A1 (en) | Thiol-mediated drug attachment to targeting peptides | |
| EP2695891B1 (en) | Octapeptide, radiopharmaceutical agent based thereon and method for diagnosing tumors | |
| Nock et al. | [[sup 99m] Tc] Demobesin 1, a novel potent bombesin analogue for GRP receptor-targeted tumour imaging. |