PL220733B1 - Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków - Google Patents
Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania lekówInfo
- Publication number
- PL220733B1 PL220733B1 PL401500A PL40150012A PL220733B1 PL 220733 B1 PL220733 B1 PL 220733B1 PL 401500 A PL401500 A PL 401500A PL 40150012 A PL40150012 A PL 40150012A PL 220733 B1 PL220733 B1 PL 220733B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- aminopropan
- thirty
- test
- cinnamic acid
- activity
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C233/00—Carboxylic acid amides
- C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
- C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
- C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
- C07C233/22—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to an acyclic carbon atom of a carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C233/00—Carboxylic acid amides
- C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
- C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
- C07C233/23—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku są nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków. Związki według wynalazku mają działanie farmakologiczne, zwłaszcza w leczeniu i/lub profilaktyce schorzeń lub symptomów o podłożu neurologicznym.
Jedną z najczęstszych chorób neurologicznych jest padaczka. Szacuje się, że jej chorobowość wynosi 0,2-4,1% [D.M. Treiman, Management of refractory complex partial seizures: current state of the art., Neuropsychiatrie Disease and Treatment. 6 (2010) 297-308]. Przekłada się to na wysoką liczbę chorych wynoszącą na świecie około 50 milionów [P.N. Banerjee, D. Filippi, W. Allen Hauser, The descriptive epidemiology of epilepsy-a review., Epilepsy Research. 85 (2009) 31-45]. W Polsce liczba chorych szacowana jest na 400 000 [J. Majkowski, Padaczka w codziennej praktyce lekarza, Przewodnik Lekarza. 3 (2000) 44-48]. Najpowszechniejszą formę terapii pacjentów z padaczką, stosowaną u co najmniej 95% chorych, stanowi leczenie farmakologiczne. Głównym celem podejmowanych działań jest całkowite opanowanie napadów drgawkowych, co w konsekwencji ma prowadzić do odczuwalnej przez pacjenta poprawy jakości życia oraz zapobiegania ponapadowym skutkom w postaci organicznego uszkodzenia mózgu [J. Jędrzejczak, Leczenie nowo zdiagnozowanej padaczki, Polski Przegląd Neurologiczny. 1,2 (2005) 65-70]. Pomimo znaczącego wzrostu liczby dostępnych leków przeciwpadaczkowych, u około 30% pacjentów nie udaje się opanować napadów drgawek, a wśród osób doświadczających drgawek częściowych (prostych, złożonych i wtórnie uogólnionych) odsetek jest jeszcze większy i wynosi około 40% [M.J. Brodie, Management strategies for refractory localization-related seizures., Epilepsia. 42 Suppl 3 (2001) 27-30]. Taką postać padaczki określa się mianem lekoopornej. Dane wskazują, iż jedną z przyczyn lekooporności jest niedostateczna skuteczność dostępnych leków przeciwpadaczkowych. Powyższe fakty stanowią przesłankę do podjęcia badań w ramach prezentowanego wynalazku.
W Zakładzie Chemii Bioorganicznej UJ CM od wielu lat prowadzone są badania mające na celu uzyskanie związków wykazujących korzystną aktywność w ośrodkowym układzie nerwowym, także wśród pochodnych alkanoloamidowych kwasu cynamonowego. Jednak dotychczasowe prace nie przyniosły satysfakcjonujących wyników. Zsyntezowane związki wykazały się jedynie umiarkowanym działaniem przeciwdrgawkowym [A. Gunia, A.M. Waszkielewicz, M. Cegła, H. Marona, Preliminary evaluation of anticonvulsant activity of some aminoalkanol and amino acid cinnamic acid derivatives, Letters in Drud Design & Discovery. 9 (2012)]. Także doniesienia innych grup badawczych nie są zadowalające pod względem aktywności przeciwdrgawkowej w standardowych testach [A. Balsamo, P.L. Barili, P. Crotti, B. Macchia, F. Macchia, A. Pecchia, Structure-Activity Relationships in Cinnamamides. 1. Synthesis and Pharmacological Evaluation of some (E)- and (Z)-N-alkyl-a^-dimethylcinnamamides, Journal of Medicinal Chemistry. 18 (1975) 842-846; A. Balsamo, P.L. Barili, P. Crotti, B. Macchia, F. Macchia, Structure-Activity Relationship in Cinnamamides. 2.Synthesis and Pharmacological Evaluation of Some (E)- and (2)-N-Alkyl-a^-dimethylcinnamamides substituted on the Phenyl Group, Journal of Medicinal Chemistry. 20 (1977) 48-53; J.R. Dimmock, S.G.R. Gunda, S.C. Vashishtha, G.A. Zello, U. Das, K.H. Nienaber, et al., Anticonvulsants Containing the N-(3-Aryl-2-propenoyl) amido Pharmacophore, Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. 19 (2004) 303-312]. Niektóre doniesienia, choć zawierają informacje o aktywności przeciwdrgawkowej, nie potwierdzają, iż badane związki były aktywne w modelach drgawek opornych czy też w modelach bólu u zwierząt [PL.-. Guan, C.-X. Wei, X.-Q. Deng, X. Sui, H.-R. Piao, Z.-S. Quan, Synthesis and anticonvulsant activity of N-(2-hydroxyethyl) cinnamamide derivatives., European Journal of Medicinal Chemistry. 44 (2009) 3654-7; L.-P. Guan, X. Sui, X.-Q. Deng, D.-H. Zhao, Y.-L. Qu, Z.-S. Quan, N-palmitoylethanolamide derivatives: synthesis and studies on anticonvulsant and antidepressant activities, Medicinal Chemistry Research. 20 (2011) 601-606].
Ze stanu techniki znane są pochodne kwasu cynamonowego, które wykazują działanie przeciwpadaczkowe. W opisie patentowym US 4107320-A, jako substancję o działaniu przeciwpadaczkowym, zastrzeżono N-(3-chlorocynamoilo)pirolidynę o wzorze
PL 220 733 B1
W opisie patentowym US 4175924-A, jako substancję o działaniu przeciwpadaczkowym, zastrzeżono N-alliloamid kwasu 3-fluorocynamonowego o wzorze, korzystnie w konfiguracji trans.
W opisie patentowym US 4190674-A, jako substancję o działaniu przeciwpadaczkowym, zastrzeżono N-cyklopropyloamid kwasu 3-fluorocynamonowego o wzorze, korzystnie w konfiguracji trans.
W opisie patentowym US 4309444-A jako substancję o działaniu przeciwpadaczkowym, zastrzeżono N-izobutyloamid kwasu cynamonowego o wzorze
Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, zwłaszcza na podstawie nadspodziewanie korzystnych wyników testów farmakologicznych in vivo, że bardzo dobre właściwości farmakologiczne, zwłaszcza w leczeniu i/lub profilaktyce schorzeń lub symptomów o podłożu neurologicznym, jak np. padaczka czy ból, wykazują będące przedmiotem wynalazku alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego.
Tak więc wynalazek dotyczy nowych alkanoloamidów kwasu cynamonowego o ogólnym wzorze 1 i konfiguracji korzystnie trans.
w którym R1 oznacza (R)-2-aminopropan-1-ol, (S)-2-aminopropan-1-ol, (S)-1-aminopropan-2-ol, (R,S)-1-aminobutan-2-ol, (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, a R2 oznacza wodór lub grupę metylową w odpowiedniej pozycji pierścienia fenylowego, korzystnie 2.
Ponadto wynalazek dotyczy zastosowania alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego o ogólnym wzorze 1, w którym R1 oznacza (R)-2-aminopropan-1-ol, (S)-2-aminopropan-1-ol, ('S)-1-aminopropan-2-ol, (R,S)-1-aminobutan-2-ol, (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, (R,S)-2-aminopropan-1-ol, (R,S)-1-aminopropan-2-ol, (R,S)-2-aminobutan-1-ol, (R)-2-aminobutan-1-ol, (trans)-4-aminocykloheksanol, 3-hydroksypiperydyna, a R2 oznacza wodór, chlor lub grupę metylową w odpowiedniej pozycji pierścienia fenylowego, korzystnie 4 dla chloru, 2 dla grupy metylowej, do wytwarzania leku stosowanego w leczeniu i profilaktyce schorzeń lub symptomów o podłożu neurologicznym, zwłaszcza padaczki i/lub bólu.
PL 220 733 B1
Związki o wzorze 1 i leki zawierające związki o wzorze 1 jako substancje czynne można podawać doustnie lub pozajelitowo, przy czym korzystne podawanie zależy od obrazu klinicznego choroby. Związki o wzorze 1 można stosować same lub w połączeniu z substancjami pomocniczymi.
Fachowiec na podstawie swojej wiedzy łatwo może dobrać substancje pomocnicze odpowiednie dla żądanej receptury leku. Oprócz rozpuszczalników, substancji żelotwórczych, substancji pomocniczych do tabletek i innych nośników substancji czynnej, można stosować np. przeciwutleniacze, dyspergatory, emulgatory, środki przeciwpianowe, środki smakowe, środki konserwujące, środki ułatwiające rozpuszczanie lub barwniki.
Dawkowanie substancji czynnej o ogólnym wzorze 1 i częstość podawania zależą od siły i czasu trwania działania zastosowanych związków, a ponadto od rodzaju i natężenia leczonej choroby oraz płci, wieku, masy i osobniczej reakcji organizmu na lek.
Wynalazek ilustrują poniższe przykłady, w których stosowano następujące skróty:
Związek | R1 | R2 |
KM-513 | (R)-2-aminopropan-1 -ol | H |
KM-512 | (S)-2-aminopropan-1 -ol | H |
KM-568 | (S)-1 -aminopropan-2-ol | H |
KM-626 | (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1 -ol | H |
KM-584 | (R,S)-1 -aminobutan-2-ol | -CH3 w pozycji 2 |
KM-604 | (S)-2-aminopropan-1 -ol | -CH3 w pozycji 2 |
KM-488 | (R,S)-2-aminopropan-1-ol | H |
KM-530 | (R,S)-1 -aminopropan-2-ol | H |
KM-517 | (R,S)-2-aminobutan-1 -ol | H |
KM-578 | (R,S)-1-aminobutan-2-ol | H |
KM-616 | (trans)-4-aminocykloheksanol | 4-CI |
KM-570 | (R)-2-aminobutan-1 -ol | H |
KM-608 | 3-hydroksypiperydyna | H |
KM-610 | (R,S)-1 -aminopropan-2-ol | 4-CI |
KM-612 | (R,S)-2-aminobutan-1 -ol | 4-CI |
Związki KM-488, KM-530, KM-517, KM-578, KM-616, KM-570, KM-608, KM-610, KM-612 są znane ze stanu techniki, ale ich przydatność do leczenia i profilaktyki schorzeń lub symptomów o podłożu neurologicznym, zwłaszcza padaczki i/lub bólu, jest nieoczywista.
Przykłady wykonania wynalazku nie ograniczają w żadnym stopniu jego zakresu.
P r z y k ł a d I. Związek KM-513.
Do kolby stożkowej o pojemności 250 ml odmierzono 50 ml wody destylowanej. Rozpuszczono w niej 2,78 g (0,02 mola) K2CO3, a następnie dodano 0,015 mola tj. 1,13 g (R)-2-aminopropan-1-olu, a następnie 10 ml toluenu. Kolbę umieszczono na mieszadle magnetycznym, w temperaturze pokojowej wkraplano do niej roztwór 2,5 g (0,015 mola) chlorku kwasu trans-cynamonowego w 30 ml toluenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu zawartość kolby oziębiono, powstały osad odsączono na lejku Bϋchnera, a następnie przepłukano ml 5% roztworu K2CO3 oraz 50 ml wody destylowanej. Osad wysuszono i krystalizowano z mieszaniny n-heksan:toluen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1: (R)-2-aminopropan-1-ol, R2:H). 1H NMR (δ, ppm, CDCI3 wobec TMS) (CDCI3): 1,25 (dd, J=2,6; J=6,9; 3H, -CH3); 2,93 (bs, 1H, OH); 3,58-3,64 (m, 1H, -CHH-OH); 3,73-3,77 (m, 1H, -CHH-OH); 4,17-4,24 (m, 1H, CH-(CH2OH)); 5,85 (bs, 1H, NH); 6,40 (dd, J=2,6; J=15,6; 1H, Ar-CH=CH-); 7,25-7,50 (m, 5H, Ar-H); 7,63 (dd, J=2,6; J=15,6; 1H, Ar-CH=CH), skręcalność właściwa [a]D 20 = -6,62; ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 206,11/206,18. Temperatura topnienia: 128-130°C, analiza elementarna:
Cobl/Cwyzn =70,22/70,09; Hobl/Hwyzn=7,37/7,40; Nobl/Nwyzn =6,82/6,79.
PL 220 733 B1
P r z y k ł a d II. Związek KM-512.
Do kolby stożkowej o pojemności 250 ml odmierzono 50 ml wody destylowanej. Rozpuszczono w niej 2,78 g (0,02 mola) K2CO3, a następnie dodano 0,015 mola, tj. 1,13 g (S)-2-aminopropan-1-olu, a następnie 10 ml toluenu. Kolbę umieszczono na mieszadle magnetycznym, w temperaturze pokojowej wkraplano do niej roztwór 2,5 g (0,015 mola) chlorku kwasu trans-cynamonowego w 30 ml toluenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu zawartość kolby oziębiono, powstały osad odsączono na lejku Bϋchnera, a następnie przepłukano ml 5% roztworu K2CO3 oraz 50 ml wody destylowanej. Osad wysuszono i krystalizowano z mieszaniny n-heksan:toluen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1: (S)-2-aminopropan-1-ol, R2:H). 1H NMR (δ, ppm, CDCI3 wobec TMS) (CDCI3): 1,25 (d, J=6,7; 3H, -CH3); 2,55 (bs, 1H, OH); 3,61 (dd, J=6,2; J=11,0; 1H, -CHH-OH); 3,75 (dd, J=3,6; J=10,9; 1H, -CHH-OH); 4,18-4,26 (m, 1H, CH-(CH2OH)); 5,89 (bs, 1H, NH); 6,41 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH= CH-); 7,26-7,37 (m, 3H, Ar-H); 7,46-7,50 (m, 2H, Ar-H); 7,63 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH=CH); skręcalność właściwa [ab20 =6,85; ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 206,11/206,12. Temperatura topnienia: 128-130°C, analiza elementarna: Cobl/Cwyzn =70,22/70,12; Hobl/Hwyzn =7,37/7,41; Nobl/Nwyzn =6,82/6,86.
P r z y k ł a d III. Związek KM-568.
Do kolby stożkowej o pojemności 250 ml odmierzono 50 ml wody destylowanej. Rozpuszczono w niej 2,78 g (0,02 moia) K2CO3, a następnie dodano 015 moia, tj.1,13 g (S)-1-aminopropan-2-oiu, a następnie 10 ml toluenu. Kolbę umieszczono na mieszadle magnetycznym, w temperaturze pokojowej wkraplano do niej roztwór 2,5 g (0,015 mola) chlorku kwasu trans-cynamonowego w 30 mi toiuenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu zawartość kolby oziębiono, powstały osad odsączono na lejku Bϋchnera, a następnie przepłukano 20 mi 5% roztworu K2CO3 oraz 50 mi wody destyiowanej. Osad wysuszono i krystaiizowano z mieszaniny n-heksan:toiuen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1:(S)-1-aminopropan-2-oi, R2:H). 1H NMR (δ, ppm, CDCI3 wobec TMS) (CDCI3): 1,24 (d, J=3,4; 3H, -CH3); 2,64 (d, J=4,4; 1H, OH); 3,21-3,30 (m, 1H, NH-CHH-); 3,56-3,63 (m, 1H, NH-CHH-); 3,97-4,04 (m, 1H, CH(OH)-CH3); 6,12 (bs, 1H, NH); 6,43 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH=CH-); 7,34-7,41 (m, 3H, Ar-H); 7,47-7,52 (m, 2H, Ar-H); 7,64 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH=CH-); skręcalność właściwa [ab20 =22,27; ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 206,11/206,18. Temperatura topnienia: 121-123°C, analiza elementarna:
Cobl/Cwyzn =70,22/70,06; Hobl/Hwyzn =7,37/7,47; Nobl/Nwyzn =6,82/6,80.
P r z y k ł a d IV. Związek KM-626.
Do kolby stożkowej o pojemności 250 ml odmierzono 50 ml wody destylowanej. Rozpuszczono w niej 2,78 g (0,02 mola) K2CO3, a następnie dodano 0,015 mola, tj. 1,55 g (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-olu, a następnie 10 ml toluenu. Kolbę umieszczono na mieszadle magnetycznym, w temperaturze pokojowej wkraplano do niej roztwór 2,5 g (0,015 mola) chlorku kwasu trans-cynamonowego w 30 ml toluenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu zawartość kolby oziębiono, powstały osad odsączono na lejku Bϋchnera, a następnie przepłukano 20 ml 5% roztworu K2CO3 oraz 50 ml wody destylowanej. Osad wysuszono i krystalizowano z mieszaniny n-heksan:toluen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1: (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, R2: H). 1H NMR, δ ppm, CDCl3 wobec TMS) (CDCI3): 0,99 (d, J=5,4; 3H, -CH3); 1,01 (d, J=5,4; 3H, -CH3);1,97 (dqv, J=13,7; J=6,9; -CHCCHb); 2,53 (bs, 1H, OH); 3,70-3,83 (m, 2H, -CH^-OH); 3,83-3,94 (m, 1H, -NH-CH); 5,84 (d, J=8,0; NH); 6,45 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH=CH-); 7,31-7,42 (m, 3H, Ar-H); 7,45-7,56 (m, 2H, Ar-H); 7,65 (d, J=15,6; 1H, Ar-CH=CH-); ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 234,14/234,24. Temperatura topnienia: 98-100°C, analiza elementarna: Cobi/-Cwyzn=72,07/71,99; Hobi/Hwyznn=8,21/8,05/; Nobl/Nwyzn =6,00/5,84.
P r z y k ł a d V. Związek KM-584.
Etap I. Otrzymanie chlorku kwasowego.
Do kolby okrągłodennej o pojemności 250 ml odważono 5 g kwasu (trans)-2-metylocynamonowego, dodano 30 ml toluenu i 5 ml chlorku tionylu (d=1,63 g/ml). Ogrzewano pod chłodnicą zwrotną przez 4 godziny, po tym zagęszczono do oleistej pozostałości, do której dodano dwukrotnie po 10 ml toluenu każdorazowo go oddestylowując.
Etap II. N-acylowanie w środowisku dwufazowym.
W kolbie stożkowej o pojemności 250 ml sporządzono 50 ml 2% roztworu NaOH. Dodano 2,01 g (0,015 mola) szczawianu (R,S)-1-aminobutan-2-olu, mieszano na mieszadle magnetycznym przez 10 min, po czym dodano 20 ml toluenu i mieszano kolejne 10 min.
PL 220 733 B1
Do kolby wkraplano następnie roztwór 2,7 g (0,015 mola) chlorku kwasu (trans)-2-metylocynamonowego (żółtobrunatna ciecz) w 20 ml toluenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu całość oziębiono, powstały osad odsączono na lejku
Bϋchnera, a następnie przepłukano 20 ml 5% roztworu K2CO3 oraz 50 ml wody destylowanej. Osad wysuszono i krystalizowano z mieszaniny n-heksan:toluen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1:(R,S)-1-aminobutan-2-ol, R2: CH3 w pozycji 2). 1H NMR (δ, ppm, CDCI3 wobec TMS) (CDCI3): 0,98 (t, J=7,4; 3H, -CH2-CH3); 1,49-1,59 (m, 2H, -CH2-CH3); 2,42 (s, 3H, Ar-CH3); 2,64 (bs, 1H, OH); 3,23-3,59 (m, 1H, -CH(OH)-CH2-); 3,60-3,76 (m, 2H, NH-CH2-); 6,26 (bs, 1H, NH); 6,34 (d, J=15,4; 1H, Ar-CH=CH-); 7,14-7,27 (m, 3H, Ar-H); 7,48 (d, J=7,7; 1H, Ar-H); 7,92 (d, J=15,4; 1H, Ar-CH=CH-); ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 234,14/234,24. Temperatura topnienia: 89-91 °C, analiza elementarna: Cobl/Cwyzn =72,07/71,67; Hobl/Hwyzn=8,21/8,16, Nobl/Nwyzn =6,00/5,94.
P r z y k ł a d VI. Związek KM-604.
Etap I. Otrzymanie chlorku kwasowego.
Do kolby okrągłodennej o pojemności 250 ml odważono 5 g kwasu (trans)-2-metylocynamonowego, dodano 30 ml toluenu i 5 ml chlorku tionylu (d=1,63 g/ml). Ogrzewano pod chłodnicą zwrotną przez 4 godziny, po tym zagęszczono do oleistej pozostałości, do której dodano dwukrotnie po 10 ml toluenu każdorazowo go oddestylowując.
Etap II. N-acylowanie w środowisku dwufazowym.
Do kolby stożkowej o pojemności 250 ml odmierzono 50 ml wody destylowanej, rozpuszczono w niej 2,78 g (0,02 mola) K2CO3, dodano 0,015 mola 1,13 g (R)-2-aminopropan-1-olu, a następnie kolby wkraplano roztwór 2,7 g (0,015 mola) chlorku kwasu (trans)-2-metylocynamonowego (żółtobrunatna ciecz) w 20 ml toluenu. Czas wkraplania wynosił około 20 min, zawartość kolby ciągle mieszano. Po zakończeniu procesu całość oziębiono, powstały osad odsączono na lejku Bϋchnera, a następnie przepłukano 20 ml 5% roztworu K2CO3 oraz 50 ml wody destylowanej. Osad wysuszono i krystalizowano z mieszaniny n-heksan:toluen (3:1 v/v). Otrzymano związek o wzorze 1 (R1:(S)-2-aminopropan-1-ol, R2:CH3 w pozycji 2). 1H NMR (δ, ppm, CDCI3 wobec TMS) ((CDCI3): 1,26 (d, J=6,9; 3H, -CH3); 2,43 (s, 3H, Ar-CH3); 2,50 (bs, 1H, OH); 3,58-3,66 (m, 1H, -CHH-OH); 3,72-3,80 (m, 1H, -CHH-OH); 4,18-4,30 (m, 1H, NH-CH); 6,00 (bs, 1H, NH); 6,32 (d, J=15,5; 1H, Ar-CH=CH-); 7,14-7,28 (m, 3H, Ar-H); 7,50 (d, J=7,7; 1H, Ar-H6); 7,93 (d, J=15,4; 1H, Ar-CH=CH-); skręcalność właściwa [a]D 20 = 3,14; ESI-MS [M+H]+ m/z obl./wyzn. 220,13/220,14. Temperatura topnienia: 152-154°C, analiza elementarna: Cobl/Cwyzn=71,21/71,30; Hobl/Hwyzn=7,81/7,88; Nobl/Nwyzn =6,39/6,27.
Ocena aktywności farmakologicznej związków według wynalazku została przeprowadzona w Narodowym Instytucie Zdrowia (National Institutes of Health, NIH) w Rockville, USA, w ramach Programu Rozwoju Leków Przeciwpadaczkowych (Antiepileptic Drug Development, ADD) [12 K.H. Stables JP, The NIH Anticonvulsant Drug Development (ADD) program: preclinical anticonvulsant screening project, in: M. Avanzini, G. Tanganelli, P.Avoli (Ed.), Molecular and Cellular Targets for Antiepileptic Drugs, John Libbey&Comp. Ltd, London, 1997: pp. 191 -198]. Badania farmakologiczne zostały wykonane według opublikowanych procedur, które posłużyły wcześniej do wykazania aktywności biologicznej obecnie stosowanych leków przeciwpadaczkowych i/lub przeciwbólowych. Przeprowadzone badania polegały na wywołaniu u zwierząt stanów odpowiadających stanom patologicznym w ludzkim ośrodkowym układzie nerwowym, w przebiegu chorób neurologicznych takich jak padaczka oraz ból.
Dla przykładu, poniżej opisany test MES na myszach lub szczurach odpowiada napadom typu toniczno-klonicznego w padaczce u ludzi. Test scMet (myszy, szczury) odpowiada napadom wyłączeń u ludzi. Test 6 Hz odpowiada drgawkom padaczkowym opornym na dotychczas znane leki, a także drgawkom psychogennym. Aktywność w teście 6 Hz oznacza także zahamowanie tzw. epileptogenezy czyli rozwoju padaczki jako schorzenia, podobnie jak aktywność w teście kindlingu. Aktywność w teście pilokarpinowym oznacza prewencję stanu padaczkowego. Aktywność w teście formalinowym oznacza zahamowanie bólu o podłożu neurogennym (pierwsza faza testu) i/lub bólu wynikającego ze stanu zapalnego (druga faza testu), a aktywność w teście podwiązania nerwu kulszowego oznacza działanie przeciwbólowe w przewlekłym bólu neuropatycznym.
Badania skriningowe.
W przedmiotowym wynalazku pierwsza faza oceny aktywności objęła badania przesiewowe w testach maksymalnego elektroszoku (MES) i teście chemicznym z zastosowaniem podskórnego pentetrazolu (scMet). Dodatkowo przeprowadzono badanie neurotoksyczności w celu ustalenia ewentualnych niekorzystnych efektów ze strony układu nerwowego wywoływanych przez badanie substanPL 220 733 B1 cje. Testy przeprowadzono na myszach CarworthFarms Nr 1 (podanie dootrzewnowe, i.p.) i szczurach Sprague-Dawley (podanie doustne, p.o. oraz podanie dootrzewnowe).
Związki były rozpuszczone lub zawieszone w 0,5% roztworze metylocelulozy. Próbki były przygotowane w ten sposób, aby uzyskując określoną dawkę całkowita objętość wynosiła 0,01 ml/g m.c. w przypadku myszy i 0,04 ml/10 g m.c. u szczurów. Standardowe dawki użyte w badaniach skriningowych to 30, 100 i 300 mg/kg masy ciała (m.c.) (myszy), a także 30 lub 50 mg/kg m.c. (szczury). Odpowiedni test przeprowadzany był w czasie 0,5 i 4 h od podania substancji (w niektórych sytuacjach także 0,25 i 1 h).
Badanie neurotoksyczności.
U myszy wykorzystywany był test obracającego się pręta (ang. Rotorod Test). Polega on na użyciu plastikowego chropowatego pręta obracającego się z prędkością 6 rpm. Myszy w normalnych warunkach potrafią utrzymać się na pręcie przez długi czas. Jeśli zwierzę nie jest do tego zdolne w każdym z 3 testów trwających 1 minutę uznaje się, że badana substancja wykazuje działanie neurotoksyczne.
U szczurów neurotoksyczność określano na podstawie prowadzonych obserwacji zachowania. Za oznaki neurotoksyczności uważa się objawy jak upośledzony sposób poruszania się (chodzenie „w kółko”, „zygzakiem”), ataksję, nienormalne ułożenie kończyn i postawa ciała, drżenia, nadpobudliwość, senność, odrętwienie, brak aktywności poznawczej, katalepsję. Inny test polega na powolnym przesuwaniu tylnej kończyny przy brzegu stołu tak aby znalazła się ona za jego powierzchnią. Normalne zwierzę szybko podnosi łapę i umieszcza we właściwej pozycji. Zaburzenie tej aktywności świadczy o występowaniu objawów neurotoksycznych. Neurotoksyczność można również określić na podstawie stwierdzonej utraty napięcia mięśni szkieletowych (hipotonia i zwiotczenie) [K.H. Stables JP, The NIH Anticonvulsant Drug Development (ADD) program: preclinical anticonvulsant screening project, in: M. Avanzini, G. Tanganelli, P.Avoli (Ed.), Molecular and Cellular Targets for Antiepileptic Drugs, John Libbey&Comp. Ltd, London, 1997: pp. 191-198].
Test maksymalnego elektroszoku (MES).
W teście MES do wywołania drgawek służy prąd o częstotliwości 60 Hz i natężeniu 50 mA (myszy) lub 150 mA (szczury) dostarczany przez czas 0,2 sekundy przez elektrody dorogówkowe. Związek klasyfikowany jest jako aktywny gdy chroni przed wystąpieniem charakterystycznego rozciągania kończyny tylnej. Uważa się, że test MES jest badaniem weryfikującym aktywność przeciwdrgawkową w kierunku uogólnionych napadów toniczno-klonicznych [W. Loscher, Critical review of current animal models of seizures and epilepsy used in the discovery and development of new antiepileptic drugs., Seizure: The Journal of the British Epilepsy Association. 20 (2011) 359-68].
Test pentetrazolowy (scMet).
W teście do wywołania drgawek służy pentetrazol podawany podskórnie w dawce 85 mg/kg (myszy) lub 70 mg/kg (szczury). Badane zwierzę umieszcza się w osobnej klatce i obserwuje przez 30 min. Aktywność związku ocenia się na podstawie braku wystąpienia nawet pojedynczego epizodu drgawkowego.
Skuteczność w teście scMet prognozuje aktywność związku w napadach nieświadomości (np. napady wyłączeń, miokloniczne).
Wyniki badań przedstawiono w poniższych tabelach.
T a b e l a 1. Wyniki aktywności w testach MES i scMet oraz w badaniu neurotoksyczności prowadzonych na myszach po podaniu dootrzewnowym badanych związków.
Związek | Dawka (mg/kg) | MESa) | scMeta) | TOXb) | |||||||||
0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 4,0 h | 0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 4,0 h | 0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 4,0 h | ||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-488 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | 2/5 | 0/1 | 0/5 | 0/1 | 0/5 | 0/8 | 0/5 | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-512 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 2/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 |
PL 220 733 B1 cd. tabeli 1
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-513 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 1/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-517 | 100 | - | 1/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 3/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-530 | 100 | - | 2/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 1/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 1/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-568 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-570 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-578 | 100 | - | 2/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | ||
3 | - | 0/4 | - | - | - | - | - | - | - | 0/4 | - | - | |
10 | - | 0/4 | - | - | - | - | - | - | - | 0/4 | - | - | |
KM-584 | 30 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 1/4 | - | 0/2 |
100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 2/8 | - | 0/4 | |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-604 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 3/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-608 | 100 | - | 3/3 | - | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 4/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-610 | 100 | - | 2/3 | - | 0/3 | - | 5/5 | - | 0/1 | - | 1/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 4/4 | - | 2/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-612 | 100 | - | 2/3 | - | 0/3 | - | 2/5 | - | 0/1 | - | 0/8 | - | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 3/4 | - | 1/2 | |
3 | - | - | - | 0/4 | - | - | - | - | - | - | - | 0/4 | |
10 | - | - | - | 0/4 | - | - | - | - | - | - | - | 0/4 | |
KM-616 | 30 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 |
100 | - | 0/3 | - | 3/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 2/8 | - | 1/4 | |
300 | - | 0/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 2/4 | - | 0/2 | |
30 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 0/4 | - | 0/2 | |
KM-626 | 100 | 3/3 | 0/3 | 0/3 | 0/3 | - | 0/1 | - | 0/1 | 0/3 | 0/8 | 0/3 | 0/4 |
300 | - | 1/1 | - | 1/1 | - | 0/1 | - | 0/1 | - | 2/4 | - | 0/2 |
a) Ilość zwierząt chronionych /ilość zwierząt badanych w teście MES lub scMet, b) Ilość zwierząt wykazujących objawy neurotoksyczności/ilość zwierząt badanych w teście obracającego się pręta, związek nie był badany w danych warunkach.
PL 220 733 B1
T a b e l a 2. Wyniki aktywności w testach MES i scMet oraz w badaniu neurotoksyczności prowadzonych na szczurach po podaniu doustnym badanych związków.
Związek | Test | Dawka (mg/kg) | Aktywność3) | ||||
0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 2,0 h | 4,0 h | |||
KM-488 | MES | 30 | 1/4 | 1/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-512 | MES | 30 | 0/4 | 0/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-513 | MES | 30 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 1/4 | 0/4 |
scMet | 50 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 1/4 | |
TOX | 50 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-530 | MES | 30 | 0/4 | 2/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-568 | MES | 30 | 1/4 | 3/4 | 3/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-570 | MES | 30 | 0/4 | 0/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-578 | MES | 30 | 4/4 | 0/1 | 1/4 | 1/4 | 1/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-584 | MES | 100 | 3/4 | 3/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-604 | MES | 30 | 3/4 | 3/4 | 4/4 | 2/4 | 1/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-608 | MES | 30 | 2/4 | 3/4 | 3/4 | 1/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
M-610 | MES | 30 | 1/4 | 4/4 | 1/4 | 1/4 | 0/4 |
scMet | 50 | 2/4 | 1/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
50 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | ||
KM-612 | MES | 30 | 0/4 | 2/4 | 2/4 | 1/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-616 | MES | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 4/4 | 2/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-626 | MES | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 1/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
a) llość zwierząt chronionych/ilość zwierząt badanych w testach MES i scMet lub ilość zwierząt wykazujących objawy neurotoksyczności/ilość zwierząt użytych do oceny neurotoksyczności (TOX).
Najbardziej aktywne związki poddano badaniom ilościowym mającym na celu wyznaczenie dawek ED50 (efektywnych u 50% badanych zwierząt) i TD50 (toksycznych u 50% badanych zwierząt). Wyniki badań ilościowych przedstawiono w tabelach 3 i 4.
PL 220 733 B1
T a b e l a 3. Wartości ED50 oraz TD50 w badaniach na myszach po podaniu dootrzewnowym badanych związków.
Związek | MES ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | scMet ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | TD50 [mg/kg] (przedział ufności) |
KM-488 | 86,6 (69,7-105,1)a) | 109,6 (73,8-157,6)a) | 223,2 (185,9-258,3)a) |
KM-513 | 76,7 (68,2-81,3)b) | 127,2 (102,1-157,9)a) | 208,3 (151,4-230,6)a) |
KM-530 | 47,12 (40,9-57,79)a) | 77,1 (51,88-103,59)a) | 136,12 (123,46-159,15)a) |
KM-568 | 44,46 (42,5-47,93)a) | 104,29 (74,63-130,51)a) | 148,47 (140,08-158,84)a) |
KM-604 | 42,56 (35,34-50,41)a) | 58,38 (44,44-68,84)a) | 150,19 (140,09-163,36)b) |
KM-608 | 54,98 (48,27-60,82)a) | 82,28 (62,7-102,25)a) | 138,92 (108,46-156,3)a) |
KM-616 | 186,03 (127,64-269,69) | 316,72 (172,13-745,62) | >600 |
a) Czas = 0,25 h; b)czas = 0,5 h; c)czas = 1,0 h; d)czas = 2,0 h.
T a b e l a 4. Wartości ED50 oraz TD50 w badaniach na szczurach po podaniu doustnym badanych związków.
Związek | MES ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | scMet ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | TD50 [mg/kg] (przedział ufności) |
KM-488 | 31,01 (20,30-52,10)c) | >250c) | >250 |
KM-530 | 22,8 (16,5-30,5)b) | 46,2 (21-108,2)b) | >500 |
KM-568 | 30,81 (24,16-37,13)c) | > 250c) | >500 |
KM-578 | 41,48 (29,92-58,03)b) | >250 c) | >500 |
KM-584 | 32,21 (18,62-46,77)b) | b.d. | >500 |
KM-604 | 25,77 (21,83-33,21)c) | 69,6 (44,85-83,86)c) | >500 |
KM-608 | 43,45 (31,66-57,94)b) | 118,0 (78,64-162,72)b) | >500 |
b) czas = 0,5 h; c) czas = 1,0 h.
T a b e l a 5. Wyniki badań skriningowych na szczurach po podaniu dootrzewnowym.
Związek | Test | Dawka (mg/kg) | Aktywnośća) | ||||
0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 2,0 h | 4,0 h | |||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
KM-568 | MES | 30 | 3/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-584 | MES | 30 | 4/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-604 | MES | 30 | 2/4 | 2/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-608 | MES | 30 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-610 | MES | 30 | 0/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
ScMet | 50 | 2/4 | 3/4 | 1/4 | 1/4 | 0/4 | |
TOX | 50 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-612 | MES | 30 | 4/4 | 4/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
ScMet | 50 | 2/4 | 3/4 | 3/4 | 1/4 | 0/4 | |
TOX | 50 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
PL 220 733 B1 cd. tabeli 5
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
KM-616 | MES | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 2/4 |
TOX | 30 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
a) llość zwierząt chronionych/ilość zwierząt badanych w testach MES i scMet lub ilość zwierząt wykazujących objawy neurotoksyczności/ilość zwierząt użytych do oceny neurotoksyczności (TOX).
T a b e l a 6. Wyniki badań ilościowych na szczurach po podaniu dootrzewnowym.
Związek | MES ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | scMet ED50 [mg/kg] (przedział ufności) | TD50 [mg/kg] (przedział ufności) |
KM-610 | 41,94 (33,14-52,01)b) | b.d. | 69,79 (60,58-80,05)b) |
KM-612 | 21,21 (13,63-30,04)b) | 64,43 (46,58-93,96)b) | 79,5 (66,97-91,2)c) |
b)czas = 0,5 h; c)czas = 1,0 h
Badanie aktywności w teście 6-Hz
Test przeprowadza się na myszach. Do wywołania drgawek służy stymulacja pulsowa prądem o częstotliwości 6 Hz poprzez elektrody dorogówkowe. Protekcja definiowana jest jako zachowanie normalnej aktywności w ciągu 10 s od stymulacji elektrycznej.
Skuteczność w teście 6-Hz prognozuje aktywność w drgawkach psychomotorycznych i ogniskowych u ludzi. Test 6-Hz jest uważany za model drgawek lekoopornych [W. Loscher, Critical review of current animal models of seizures and epilepsy used in the discovery and development of new antiepileptic drugs., Seizure: The Journal of the British Epilepsy Association. 20 (2011) 359-68],
T a b e l a 7. Wyniki skriningu w teście 6-Hz po podaniu dootrzewnowym badanych.
Związek | Test | Dawka | Aktywność3) | ||||
(mg/kg) | 0,25 h | 0,5 h | 1,0 h | 2,0 h | 4,0 h | ||
KM-488 | 6-Hz | 100 | 3/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 1/4 | 0/4 | |
KM-530 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 4/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 2/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-568 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 2/4 | 1/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-578 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 2/4 | 1/4 | 1/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-584 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 2/4 | 1/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 4/4 | 3/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-604 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 4/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 4/4 | 4/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-608 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-612 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 2/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 4/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | |
KM-616 | 6-Hz | 100 | 3/4 | 0/4 | 3/4 | 3/4 | 4/4 |
TOX | 100 | 1/4 | 0/4 | 2/4 | 4/4 | 2/4 | |
KM-626 | 6-Hz | 100 | 4/4 | 4/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
TOX | 100 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 | 0/4 |
a)Ilość zwierząt chronionych/ilość zwierząt badanych w teście 6-Hz lub ilość zwierząt wykazujących objawy neurotoksyczności/ilość zwierząt użytych do oceny neurotoksyczności (TOX).
PL 220 733 B1
Dla związków KM-488, KM-530 i KM-626 wykonano badania ilościowe i wyznaczono dawki ED50. Wynosiły one:
KM-488 ED50 = 60,9 (44,8-75,1) mg/kg (podanie dootrzewnowe, czas=0,25 h)
KM-626 ED50 = 105,88 (90,59-119,38) mg/kg (podanie dootrzewnowe, czas=0,25 h)
Dane dla obecnie stosowanych leków przeciwpadaczkowych:
leki nieaktywne: karbamazepina, gabapentyna, lamotrygina, fenytoina, topiramat
Leki aktywne (wartości w mg/kg, podanie dootrzewnowe, myszy): etosuksymid ED50 = 167 (114-223); felbamat ED50 = 73,8 (36,3-119); lewetiracetam ED50 = 19,4; fenobarbital ED50 = 14,8 (8,9-23,9); tiagabina ED50 = 0,66; kwas walproinowy ED50 = 126 (94,5-152); zonisamid ED50 = 97,4 (74,6-136).
Badanie prewencji stanu padaczkowego indukowanego pilokarpiną oraz prewencji następowych drgawek spontanicznych.
Badania prowadzi się na szczurach SpragueDawley. Związek podaje się dootrzewnowo po czym podawana jest w odpowiedniej dawce pilokarpina.
Aktywność substancji opisywana jest jako „ochrona” lub „brak ochrony przed wystąpieniem stanu padaczkowego (czas 0,0 h). Następnie obserwuje się zwierzę pod kątem wystąpienia drgawek samoistnych (czas 0,5 h). Związki wykazujące aktywność w testach skriningowych mogą zostać poddane badaniom ilościowym.
W tym celu stosuje się co najmniej 10 potencjalnych dawek u 8 szczurów.
Model pilokarpinowy jest uważany za zwierzęcy model epileptogenezy, a aktywność związków sugeruje potencjalną możliwość zapobiegania wystąpieniu padaczki [W. Loscher, Critical review of current animal models of seizures and epilepsy used in the discovery and development of new antiepileptic drugs., Seizure: The Journal of the British Epilepsy Association. 20 (2011) 359-68].
T a b e l a 8. Wyniki testu prewencji stanu padaczkowego indukowanego pilokarpiną.
Związek | Dawka (mg/kg) | Czas (h) | Aktywność3) | Liczba zgonów | Zmiana masy ciała | |||
Szczury chronione | Szczury niechronione | |||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | ||
KM-488 | 450 | 0,0 | 6/8 | 4 | + | 7,3+/-1,5 | - | 22,0+/-0,0 |
900 | 0,5 | 2/8 | 0 | - | 17,5+/-1,3 | - | 20,0+/-2,2 | |
KM-512 | 200 | 0,0 | 5/7 | 1 | - | 7,0+/-7,5 | - | 20+/-0,0 |
200 | 0,5 | 0/8 | 0 | - | - | 28,8+/-1,3 | ||
250 | 0,5 | 5/8 | 0 | - | 6,0+/-7,8 | - | 25,0+/-1,8 | |
300 | 0,5 | 6/7 | 0 | - | 10,0+/-5,4 | - | 35,0+/-0,0 | |
400 | 0,5 | 7/8 | 1 | - | 22,5+/-2,7 | - | 25,0+/-0,0 | |
KM-513 | 200 | 0,0 | 7/8 | 0 | + | 0,0+/-1,4 | - | 25+/-0,0 |
200 | 0,5 | 0/8 | 1 | - | - | 27,1+/-1,4 | ||
275 | 0,5 | 3/7 | 1 | - | 30,0+/-0,0 | - | 31,7+/-1,0 | |
350 | 0,5 | 6/8 | 0 | - | 30+/-1,1 | - | 22,5+/-3,8 | |
400 | 0,5 | 8/8 | 0 | - | 27,5 | - | ||
KM-517 | 200 | 0,0 | 7/8 | 0 | - | 5,0+/-4,8 | + | 5,0+/-0,0 |
200 | 0,5 | 1/8 | 0 | - | 10,0+/-0,0 | - | 27,1+/-2,9 | |
300 | 0,5 | 5/7 | 0 | + | 4,0+/-1,9 | - | 10,0+/-5,0 | |
400 | 0,5 | 8/8 | 0 | - | 26,9+/-4,4 | - | ||
KM-530 | 200 | 0,0 | 7/7 | 0 | + | 1/4+/-1,3 | - | |
400 | 0,5 | 0/8 | 0 | - | - | 26,3+/-0,8 | ||
KM-568 | 200 | 0,0 | 8/8 | 0 | + | 2,5+/-1,3 | - |
PL 220 733 B1 cd. tabeli 8
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | ||
200 | 0,5 | 1/8 | 0 | - | 35,0+/-0,0 | - | 30,7+/-0,7 | |
300 | 0,5 | 5/8 | 2 | - | 33,8+/-0,9 | - | 30,0+/-0,0 | |
400 | 0,5 | 7/8 | 0 | - | 20,7+/-5,5 | - | 30,0+/-0,0 | |
KM-570 | 450 | 0,0 | 8/8 | 0 | + | 0,0+/-1,3 | - | |
600 | 0,5 | 8/8 | 0 | - | 3,1+/-3,3 | - | ||
KM-610 | 300 | 0,5 | 0/8 | 1 | - | - | 24,3+/-1,9 |
a)liczba szczurów chronionych/liczba szczurów-badanych
Dla związków KM-512, KM-513, KM-517 i KM-568 zostały wyznaczone dawki ED50 i ED97 tj. dawki skuteczne odpowiednio u 50% i 97% badanych zwierząt.
T a b e l a 9
Związek | ED50 [mg/kg] (przedział ufności)3) | ED97 [mg/kg] (przedział ufności)a) |
KM-512 | 258,8 (217-302,1) | 413,9 (334,8-879,2) |
KM-513 | 294,9 (249,4-329,6) | 408,1 (355,5-611,8) |
KM-517 | 259,1 (209,7-307,9) | 385,3 (317-722,1) |
KM-568 | 279,45 (212,61-344,62) | 498,2 (378,3-1526,9) |
a)czas=0,5 h
Model drgawek rozniecanych elektrycznie.
W modelu drgawek rozniecanych elektrycznie stosuje się szczury. Zwierzętom do hipokampa wszczepia się elektrody, przez które dostarcza się bodźce podprogowe, które po pewnym czasie wywołują szereg zmian w zachowaniu oraz czynności elektrycznej mózgu, w efekcie powodując wystąpienie drgawek. Model ten w swoim założeniu, naśladuje proces epileptogenezy i uważa się, iż można dzięki niemu przewidzieć aktywność związku zapobiegającą wystąpieniu padaczki [W. Loscher, Critical review of current animal models of seizures and epilepsy used in the discovery and development of new antiepileptic drugs., Seizure: The Journal of the British Epilepsy Association. 20 (2011) 359-68].
Związki KM-488 oraz KM-530 zostały poddane testom w modelu drgawek rozniecanych elektrycznie i wyznaczono dla nich wartości ED50 wynoszące:
dla KM-488 ED50 = 51,6 (30,8-89,4) mg/kg dla KM-530 ED50 = 50,28 (39,79-66,02) mg/kg.
Przedstawione wyniki świadczą, że prezentowana grupa związków posiada bardzo szeroką aktywność w zwierzęcych modelach drgawek. Szczególnie korzystne jest, że związki wykazują protekcję przed wystąpieniem drgawek w bardzo zróżnicowanych modelach, które są uważane za weryfikujące aktywność przeciwdrgawkową u ludzi w wielu rodzajach napadów drgawkowych jak w uogólnionych napadach toniczno-klonicznych, napadach typu nieświadomości, drgawkach psychomotorycznych. Szczególnie korzystną właściwością jest aktywność w modelach uważanych za weryfikujące zdolność związku do hamowania samego procesu epileptogenezy.
Aktywność przeciwbólową związków według wynalazku oceniono z pomocą testu formalinowego oraz modelu bólu neuropatycznego wywoływanego na nerwie kulszowym.
U podstaw możliwości wykorzystywania leków przeciwpadaczkowych w terapii bólu neuropatycznego, czyli bólu związanego z nieprawidłową funkcją neuronów komórkowy mechanizm działania. Dlatego też, celowe jest przeprowadzenie badań w kierunku oceny działania przeciwbólowego związków wykazujących aktywność w zwierzęcych modelach drgawek. Jednym z badań wykorzystywanych w tym celu jest test formalinowy. Przeprowadza się go na myszach poprzez podanie 0,5% formaliny do tylnej kończyny zwierzęcia. Powoduje to charakterystyczne odruchowe zachowanie jakim jest lizanie miejsca podania substancji. Łączny czas lizania jest uważany za odpowiednik natężenia odczuwanego przez zwierzę bólu. Charakterystyczne jest występowanie dwóch faz odpowiedzi: faza pierwsza (ostra) odpowiada bezpośredniemu pobudzeniu obwodowych włókien czuciowych i bólowych. Faza druga (zapalna) rozwija się z powodu uwalania mediatorów stanu zapalnego z uszkodzonych tkanek i zakończeń nerwowych.
PL 220 733 B1
Równolegle prowadzi się badanie kontrolne, polegające na podaniu zwierzętom samego rozpuszczalnika (np. metylocelulozy). Związek badany podaje się zazwyczaj w dawce zbliżonej do ED50 wyznaczonej w testach drgawkowych. Istotne statystycznie zmniejszenie czasu lizania kończyny jest uważane za wykazywanie aktywności przeciwbólowej.
W teście formalinowym zostały przebadane związki KM-488, KM-604, KM-608, KM-616 i KM-626.
Badania dla związku KM-488 dały następujące wyniki (przedstawione również na figurze 1).
T a b e l a 10
Dawka (mg/kg m.c.) | Faza testu | AUC (pole pod krzywą) | ||||
Kontrola | KM-488 | % Kontroli | S.E.M | Poziom ufności p | ||
85 | Ostra | 200,8 | 69,52 | 34,63 | 5,872 | <0,01 |
85 | Zapalna | 491,4 | 192,0 | 39,09 | 15,51 | <0,05 |
Badania dla związku KM-604 dały następujące wyniki (przedstawione również na figurze 2).
T a b e l a 11
Dawka (mg/kg m.c.) | Faza testu | AUC (pole pod krzywą) | ||||
Kontrola | KM-604 | % Kontroli | S.E.M | Poziom ufności p | ||
43 | Ostra | 216,38 | 74,08 | 34,23 | 6,95 | <0,01 |
43 | Zapalna | 743,87 | 627,07 | 84,29 | 14,25 | >0,05 |
Badania dla związku KM-608 dały następujące wyniki (przedstawione również na figurze 3).
T a b e l a 12
Dawka (mg/kg m.c.) | Faza testu | AUC (pole pod krzywą) | ||||
Kontrola | KM-608 | % Kontroli | S.E.M | Poziom ufności p | ||
55 | Ostra | 250,82 | 191,45 | 76,32 | 10,46 | >0,05 |
55 | Zapalna | 819,2 | 769,11 | 93,88 | 10,55 | >0,05 |
Badania dla związku KM-616 dały następujące wyniki (przedstawione również na figurze 4).
T a b e l a 13
Dawka (mg/kg m.c.) | Faza testu | AUC (pole pod krzywą) | ||||
Kontrola | KM-616 | % Kontroli | S.E.M | Poziom ufności p | ||
186,0 | Ostra | 208,94 | 45,74 | 21,89 | 4,07 | <0,01 |
186,0 | Zapalna | 898,84 | 0,0 | 0,0 | 0,0 | <0,01 |
Badania dla związku KM-626 dały następujące wyniki (przedstawione również na figurze 5).
T a b e l a 14
Dawka (mg/kg m.c.) | Faza testu | AUC (pole pod krzywą) | ||||
Kontrola | KM-626 | % Kontroli | S.E.M | Poziom ufności p | ||
106 | Ostra | 200,01 | 103,01 | 51,5 | 8,72 | <0,05 |
106 | Zapalna | 737,56 | 580,24 | 78,67 | 8,93 | >0,05 |
Reasumując, grupa związków stanowiąca przedmiot zgłoszenia wykazała korzystne właściwości zarówno w wielu modelach drgawek u zwierząt, jak i w teście formalinowym. Zaskakująco dobrą aktywność wykazał związek KM-616, działający w obu fazach testu.
Model bólu neuropatycznego wywoływanego na nerwie kulszowym (ang. Sciatic Nerve Ligation) polega na podwiązaniu za pomocą odpowiednich nici nerwu, co skutkuje rozwojem stanu zapalnego
PL 220 733 B1 jako odpowiedzi na obecność materiału nici, a w dalszej kolejności prowadzi do uszkodzenia nerwów i wystąpienia objawów bólu neuropatycznego.
W tym teście przeprowadzonym na szczurach został przebadany związek KM-604, który w dawce 50 mg/kg znamiennie statystycznie podwyższył próg pobudliwości bólowej u badanych zwierząt (maksymalny efekt 254% w porównaniu z kontrolą po 2 godzinach od podania związku). W teście oceniano odpowiedź zwierząt na bodźce mechaniczne (test von Frey'a). Szczegółowe wyniki badania dla tego związku zostały przedstawione w poniższej tabeli (oraz na figurze 6).
T a b e l a 15
Dawka [mg/kg] | Czas [h] | Średnie wartości progu bólowego ± SEM | |
Próg ± SEM | Wynik po podaniu związku % ± SEM | ||
50 | 0,0 | 2,53 ± 0,36 | 100 ± 14 |
0,5 | 4,69 ± 1,05 | 187 ± 32 | |
1,0 | 5,32 ± 0,89 | 233 ± 39* | |
2,0 | 6,46 ± 1,2 | 254 ± 30* | |
4,0 | 5,84 ± 1,06 | 249 ± 44* | |
6,0 | 5,85 ± 1,28 | 237 ± 37* |
* wynik istotny statystycznie.
Claims (8)
1. Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego o ogólnym wzorze 1 i konfiguracji korzystnie trans w którym R1 oznacza (R)-2-aminopropan-1-ol, (S)-2-aminopropan-1-ol, (S)-1-aminopropan-2-ol, (R,S)-1-aminobutan-2-ol, (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, a R2 oznacza wodór lub grupę metylową w odpowiedniej pozycji pierścienia fenylowego, korzystnie w pozycji 2.
2. Alkanoloamid według zastrz. 1, w którym R1 oznacza (R)-2-aminopropan-1-ol, a R2 oznacza H.
3. Alkanoloamid według zastrz. 1, w którym R1 oznacza (S)-2-aminopropan-1-ol, a R2 oznacza H.
4. Alkanoloamid według zastrz.1, w którym R1 oznacza (S)-1-aminopropan-2-ol, a R2 oznacza H.
5. Alkanoloamid według zastrz. 1, w którym R1 oznacza (R,S)-1-aminobutan-2-ol, a R2 oznacza H.
6. Alkanoloamid według zastrz. 1, w którym R1 oznacza (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, a R2 oznacza CH3 w pozycji 2.
7. Alkanoloamid według zastrz.1, w którym R1 oznacza (S)-2-aminopropan-1-ol, a R2 oznacza CH3 w pozycji 2.
8. Zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego o ogólnym wzorze 1, w którym R1 oznacza (R)-2-aminopropan-1-ol, (S)-2-aminopropan-1-ol, (S)-1-aminopropan-1-ol, (R,S)-1-aminobutan-2-ol, (R,S)-2-amino-3-metylobutan-1-ol, (R,S)-2-aminopropan-1-ol, (R,S)-1-aminopropan-2-ol, (R,S)-2-aminobutan-1-ol, (R)-2-aminobutan-1-ol, (trans)-4-aminocykloheksanol, 3-hydroksypiperydyna, a R2 oznacza wodór, chlor lub grupę metylową w odpowiedniej pozycji pierścienia fenylowego, korzystnie 4 dla chloru, 2 dla grupy metylowej, do wytwarzania leku stosowanego w leczeniu i profilaktyce schorzeń lub symptomów o podłożu neurologicznym, zwłaszcza padaczki i/lub bólu.
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PL401500A PL220733B1 (pl) | 2012-11-07 | 2012-11-07 | Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków |
PCT/PL2013/000139 WO2014073994A2 (en) | 2012-11-07 | 2013-10-31 | New alkanolamide derivatives of cinnamic acid and use of alkanolamide derivatives of cinnamic acid for preparation of drugs |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PL401500A PL220733B1 (pl) | 2012-11-07 | 2012-11-07 | Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
PL401500A1 PL401500A1 (pl) | 2014-05-12 |
PL220733B1 true PL220733B1 (pl) | 2015-12-31 |
Family
ID=49880910
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PL401500A PL220733B1 (pl) | 2012-11-07 | 2012-11-07 | Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
PL (1) | PL220733B1 (pl) |
WO (1) | WO2014073994A2 (pl) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PL225258B1 (pl) | 2013-08-09 | 2017-03-31 | Univ Jagielloński | Nowe pochodne N-[(fenoksy)etoksy]alkiloaminoalkanoli oraz ich zastosowanie do wytwarzania leków |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2040181A1 (pl) * | 1969-04-02 | 1971-01-22 | Lipha | |
US4190674A (en) | 1976-02-03 | 1980-02-26 | Burroughs Wellcome Co. | 3-Fluoro-N-cyclopropylcinnamide |
US4309444A (en) | 1976-02-03 | 1982-01-05 | Burroughs Wellcome Co. | Biologically active amides |
US4107320A (en) | 1976-08-06 | 1978-08-15 | Burroughs Wellcome Co. | Biologically active amides |
US4175924A (en) | 1977-02-10 | 1979-11-27 | Hazen Research, Inc. | Treatment of coal with metal containing compounds |
-
2012
- 2012-11-07 PL PL401500A patent/PL220733B1/pl unknown
-
2013
- 2013-10-31 WO PCT/PL2013/000139 patent/WO2014073994A2/en active Application Filing
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
PL401500A1 (pl) | 2014-05-12 |
WO2014073994A2 (en) | 2014-05-15 |
WO2014073994A3 (en) | 2014-07-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1106379C (zh) | 2-丙基戊酰胺和2-丙基戊烯酰胺衍生物及作抗惊厥药用 | |
TWI419681B (zh) | 胺基甲酸酯用於製造供治療白天過度嗜睡(eds)的藥物之用途 | |
CN102170787B (zh) | 用于治疗β-淀粉样蛋白病和突触核蛋白病的化合物、组合物和方法 | |
CN1193965A (zh) | 用于治疗神经系统疾病的10-酰氧基-10,11-二氢二苯并/b,f/氮杂䓬-5-甲酰胺 | |
CN1750839A (zh) | 类辣椒素的给药 | |
CN103889968A (zh) | 氨基苯并二氢吡喃、氨基苯并二氢噻喃及氨基-1,2,3,4-四氢喹啉衍生物,包含这些化合物的药用组合物,及其在治疗中的用途 | |
KR20110044166A (ko) | 통증 및 소양증 치료용 방법, 조성물 및 키트 | |
Tripathi et al. | Design, synthesis and anticonvulsant evaluation of novel N-(4-substituted phenyl)-2-[4-(substituted) benzylidene]-hydrazinecarbothio amides | |
RU2718049C2 (ru) | Замещенные триаозлы и способы, касающиеся их | |
CN103209964A (zh) | 苯烷基胺衍生物、含其的药物组合物及其在治疗中的用途 | |
Wang et al. | Merging structural motifs of functionalized amino acids and α-aminoamides results in novel anticonvulsant compounds with significant effects on slow and fast inactivation of voltage-gated sodium channels and in the treatment of neuropathic pain | |
DK2247571T3 (en) | DERIVATIVES OF aminoalkanols, METHOD FOR OBTAINING aminoalkanols AND THEIR USE | |
Obniska et al. | Synthesis and Anticonvulsant Properties of New Mannich Bases Derived from 3‐Aryl‐pyrrolidine‐2, 5‐diones. Part 1 | |
EP1084098A1 (en) | Inhibitors of the anandamide transporter as analgesic agents | |
Gupta et al. | Synthesis and anticonvulsant activity of some substituted 1, 2, 4-thiadiazoles | |
Gunia et al. | Preliminary evaluation of anticonvulsant activity of some aminoalkanol and amino acid cinnamic acid derivatives | |
WO2005067930A2 (en) | Serotonin receptor antagonists for the treatment of neurological disease | |
JP2002502375A (ja) | 脳アミロイドーシスを治療するための薬物 | |
Park et al. | Chimeric agents derived from the functionalized amino acid, lacosamide, and the α-aminoamide, safinamide: evaluation of their inhibitory actions on voltage-gated sodium channels, and antiseizure and antinociception activities and comparison with lacosamide and safinamide | |
PL220733B1 (pl) | Nowe alkanoloamidowe pochodne kwasu cynamonowego oraz zastosowanie alkanoloamidowych pochodnych kwasu cynamonowego do wytwarzania leków | |
AU763245B2 (en) | Anticonvulsant and central nervous system-active bis(fluorophenyl)alkylamides | |
RU2643091C2 (ru) | Производные оксимов 4-бензоилпиридина, обладающие противосудорожной активностью, как средства лечения эпилепсии и пароксизмальных состояний | |
Lee et al. | Substituted N-(biphenyl-4′-yl) methyl (R)-2-acetamido-3-methoxypropionamides: Potent anticonvulsants that affect frequency (use) dependence and slow inactivation of sodium channels | |
CN104411683A (zh) | 新颖的胆囊收缩素受体配体 | |
US8829242B2 (en) | Amide derivatives of valproic acid and uses thereof |