PL199375B1 - Sposób otrzymywania nowych aza-analogów acyklicznych nukleozydów - Google Patents

Abstract

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania nowych azaanalogów acyklicznych nukleozydów o wzorze ogólnym 1, w którym B oznacza N9-podstawiony pierścień 6-amino-purynowy lub B oznacza N1-podstawiony pierścień pirymidynowy, w którym R oznacza atom wodoru, chloru, bromu, jodu, fluoru, grupę alkilową o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym o liczbie atomów węgla od 1 do 3, a X oznacza grupę aminową lub hydroksylową. Sposób według wynalazku polega na tym, że poddaje się reakcji N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidynę o wzorze 2 lub N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid o wzorze 3 z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 4, w którym R ma wyżej podane znaczenie, a Y oznacza grupę trimetylosililoksylową [-OSi(CH3)3], lub grupę -N(R1)[Si(CH3)3], w której R1 oznacza atom wodoru, grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 3 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym lub grupę benzoilową; lub z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 5, w którym Z oznacza atom chloru lub grupę -N(R2)[Si(CH3)3], w której R2 oznacza grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 15 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym, grupę t-butoksykarbonylową, grupę benzyloksykarbonylową, lub benzoilową, w acetonitrylu lub w chlorku etylenu, w obecności trifluorometanosulfonianu trimetylosililu lub chlorku cyny(IV), w temperaturze pokojowej, a następnie odblokowując zabezpieczone grupy funkcyjne.

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania nowych aza-analogów acyklicznych nukleozydów o wzorze ogólnym 1, w którym B oznacza N⁹-podstawiony pierścień 6-amino-purynowy lub B oznacza N¹-podstawiony pierścień pirymidynowy, w którym R oznacza atom wodoru, chloru, bromu, jodu, fluoru, grupę alkilową o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym o liczbie atomów węgla od 1 do 3, a X oznacza grupę aminową lub hydroksylową. Zwią zki te (mogące istnieć w postaci odpowiednich tautomerów) są aza-analogami acyklicznych nukleozydów i podobnie jak acykliczne nukleozydy, mogą wykazywać właściwości przeciwwirusowe i znaleźć zastosowanie w produkcji środków farmaceutycznych.

W literaturze chemicznej znajdują się przykłady syntez acyklicznych nukleozydów (C. Simons, „Nucleoside Mimetics Their Chemistry and Biological Properties, Gordon and Breach Science Publishers, 2001; E. S. H. El Ashry, Y. El Kilany, Adv. Heterocycl. Chem., 1997, 67, 391-438; Adv. Heterocycl. Chem., 1997, 68, 1-88; Adv. Heterocycl. Chem., 1997, 69, 129-215). Opisy metod otrzymywania 1-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etoksymetylo]-pirymidyn oraz 9-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)etoksymetylo]-adeniny są przedstawione w następujących pracach: K. K. Ogilvie, M. F. Gillen, Tetrahedron Letters, 1980, 21, 327-330; K. K. Ogilvie, R. G. Hamilton, M. F. Gillen, B. K. Radatus, K. O. Smith, K. S. Galloway, Can. J. Chem., 1984, 62, 16-21; K. K. Ogilvie, N. Nguyenba, M. F. Gillen, B. K. Radatus, U.O. Ukhen, Can. J. Chem., 1984, 62, 241-252; J. C. Martin, G. A. Jeffrey, D. P. Danny, M. A. Tippie, D. F. Donald, J. Med. Chem., 1985, 28(3), 358-362; L. Beauchamp, B. Serling, J. E. Kesley, K. K. Biron, P. Collins, J. Med. Chem., 1988, 31(1), 144-149; M. Azymach, C. Chavis, M. Lucas, J-L. Imbach, Tetrahedron Letters, 1989, 30(45), 6165-6168; B-C. Pan, Z-H. Chen, E. C. Rowe, S-H. Chu, J. Heterocycl. Chem., 1992, 29(4), 683-689; N. Ghali, B. Jonston, L. Beauchamp, T. Naseree, T. Scott, Nucleosides and Nucleotides, 1995,14(7), 1591 - 1600.

W literaturze chemicznej brak jest przykł adów syntez takich analogów 1-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etoksymetylo]-pirymidyn i 9-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etoksymetylo]-adeniny, w których atom tlenu w pozycji-2' byłby zastąpiony ugrupowaniem sulfonimidowym. Opisane są jedynie przykłady otrzymywania takich metanosulfonamidów lub toluenosulfonamidów 1-(N-podstawionychaminometylo)-pirymidyn, w których sulfonamidowy atom azotu jest podstawiony grupą alkilową lub α-karboksyloalkilową. N-alkilo-metanosulfomanid tego typu, będący pochodną uracylu, został otrzymany w reakcji persililowanego uracylu z N-(chlorometylo)-N-metylo-metanosulfonamidem (V. N. Sergeev, E. P. Shapovalenko, Yu. l. Baukov, Zh. Obshch. Khim., 1987, 57(6), 1315-1321). Metoda ta nie została uogólniona na inne pochodne pirymidyny - ogranicza się tylko do uracylu. Pochodne 1-[N-(a-karboksyloalkilo)-tosyloaminometylo]-pirymidyn otrzymywane są z kolei w reakcji 4-alkilo-3-tosylooksazolidyn-5-onu (otrzymywanego z odpowiedniego aminokwasu) z persililowanym uracylem lub z jego persililowaną 5-podstawioną pochodną w obecności trifluorometanosulfonianu trimetylosililu (E. A. Besova, N. M. Goloshchapov, E.N. Goloshchapova, E. A. Michurina, A. G. Shipov, Yu. l. Baukov, Zh. Obshch. Khim., 1998, 68(3), 502-504).

Nieoczekiwanie okazało się, że nowe aza-analogi acyklicznych nukleozydów o wzorze ogólnym 1, w którym B oznacza N⁹-podstawiony pierścień 6-amino-purynowy lub B oznacza N¹-podstawiony pierścień pirymidynowy, w którym R oznacza atom wodoru, chloru, bromu, jodu, fluoru, grupę alkilową o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym o liczbie atomów węgla od 1 do 3, a X oznacza grupę aminową lub hydroksylową można otrzymać poddając reakcji N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidynę o wzorze 2 lub N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid o wzorze 3 z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 4, w którym R ma wyżej podane znaczenie a Y oznacza grupę trimetylosililoksylową [-OSi(CH3)3], lub grupę -N(R¹)[Si(CH3)3], w której R¹ oznacza atom wodoru, grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 3 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym lub grupę benzoilową lub z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 5, w którym Z oznacza atom chloru lub grupę -N(R²)[Si(CH3)3], w której R² oznacza grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 15 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym, grupę t-butoksykarbonylową, grupę benzyloksykarbonylową lub benzoilową, w acetonitrylu lub w chlorku etylenu, w obecności trifluorometanosulfonianu trimetylosililu lub chlorku cyny(IV), w temperaturze pokojowej, a następnie odblokowując w znany sposób zabezpieczone grupy funkcyjne. Dzięki tej metodzie można syntezować aza-analogi acyklicznych nukleozydów z zadowalającymi wydajnościami. Ponadto zaletą tej metody jest łatwy dostęp do substratów: N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)oksaPL 199 375 B1 zolidyny i N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetyio)-metanosulfonamidu, które można otrzymać z dobrą wydajnością z 2,2-dipodstawionych-5-nitro-1,3-dioksanów.

Sposób według wynalazku został bliżej przedstawiony na przykładach stosowania.

P r z y k ł a d 1: Otrzymywanie N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidyny o wzorze 2

Etap 1 : 2,2-Dipodstawione 5-(mesyloamino)-1,3-dioksany

Mieszaninę 2,2-dipodstawionego 5-nitro-1,3-dioksanu (0.1 m) i palladu osadzonego na węglu aktywnym (0.5 g) w etanolu (100 cm³) poddaje się działaniu wodoru (60 atm.) przez 1 dobę w temperaturze pokojowej. Po tym czasie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, a z przesączu oddestylowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie pozostałość rozpuszcza się w chlorku metylenu (160 cm³), do roztworu dodaje trietyloaminę (20.24 g, 0.2 m, 27.9 cm³) i miesza całość przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Następnie roztwór chłodzi się w łaźni wodno-lodowej i wkrapla do niego roztwór chlorku metanosulfonowego (17.2 g, 0.15 m, 11.7 cm³) w chlorku metylenu (40 cm³). Po zakończeniu wkraplania do mieszaniny dodaje się wodę i rozdziela fazy. Fazę organiczną przemywa się trzykrotnie wodą, a następnie 5% wodnym roztworem kwasu solnego i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po odsączeniu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, krystalizuje się lub poddaje chromatografii kolumnowej;

2,2-Dimetylo-5-(mesyloamino)-1,3-dioksan (chromatografia kolumnowa, chloroform; 57%, Tt=90-92°C):

¹H NMR (CDCl₃ 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.41 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 3.41 (m, 1H), 3.76 (m, 2H), 4.12 (m, 2H), 5.32 (dbr, ³J=9.6, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), (ppm): 19.49, 27.97, 42.50, 47.94, 64.35 (x2), 98.90;

IR (KBr), v(cm^-1): 3416, 3228, 3008, 1320, 1668, 1136;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 232.0625; masa obliczona dla wzoru sum. C7H15NO4NaS, 323.0614.

3-(Mesyloamino)-2,2-pentametyleno-1,3-dioksan (krystalizacja, octan etylu-heksan, 45 : 5, v/v;

67%, Tt=101-103°C):

¹H NMR (CDCI₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.52 (m, 8H), 1.84 (m, 2H), 3.01 (s, 3H), 3.41 (m, 1H), 3.75 (m, 2H), 4.14 (m, 2H), 5.30 (dbr, ³J=9.0, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), (ppm): 22.47, 22.56, 25.63, 28.15, 36.81, 42.51, 48.22, 63.57 (x2), 99.00;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3324, 2944, 1312, 1164, 1136, 1104;

HRMS (El, 70 eV): masa zmierzona M⁺= 249.10317; masa obliczona dla wzoru sum. C10H19NO4S, 249.10348.

Etap 2: 2,2-Dipodstawione 5-[N-mesylo-N-(piwaloiloksymetylo)]-amino-1,3-dioksany

Do chłodzonego zimną wodą roztworu 2,2-dipodstawionego 5-(mesyloamino)-1,3-dioksanu (40 mmoli) w suchym dimetyloformamidzie (DMF, 160 cm³) dodaje się porcjami zawiesinę wodorku sodowego w oleju parafinowym (63%, 4.0 g, 0.1 mola) i pozostawia całość na 1 godzinę. Po tym czasie dodaje się w jednej porcji piwalonian chlorometylu (29.8 g, 0.2 mola, 21 cm³) i pozostawia całość ma 3 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie mieszaninę poreakcyjną wylewa się na zimną wodę (400 cm³) i przerabia w następujący sposób;

2,2-Dimetylo-5-[N-mesylo-N-(piwaloiloksymetylo)]-amino-1,3-dioksan: wydzieloną fazę organiczną ekstrahuje się octanem etylu (3 x 20 cm³), a połączone ekstrakty przemywa się wodą i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Po usunięciu środka suszącego oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie pozostałość zatęża pod zmniejszonym ciśnieniem do stałej masy (80°C, 0.05 mm Hg). Uzyskany olej oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 40 g, chloroform). Otrzymuje się produkt z wydajnością 69% (Tt=105-107°C), ¹H NMR (CDCI₃, 200 MHz), σ_H (ppm): 1.21 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 1.42 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 3.90 (m, 3H), 4.13 (m, 2H), 5.74 (s, 2H);

¹³C NMR (CDCI₃, 50 MHz), (ppm): 22.03, 25.20, 27.19, 38.82, 42.25, 50.12, 63.05 (x2), 72.47, 98.75;

IR(KBr), ν (cm^-1): 2988, 1724, 1328, 1176, 1148, 1120;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 346.1307; masa obliczona dla wzoru sum. C13H25NO6NaS, 346.1295.

3-[N-Mesylo-N-(piwaloiloksymetylo)]-amino-2,2-pentametyleno-1,3-dioksan: wydzielony osad odsącza się, obficie przemywa się zimną wodą i suszy w eksykatorze próżniowym nad pięciotlenkiem fosforu. Otrzymuje się produkt z wydajnością 70% (Tt=91-93°C),

PL 199 375 B1 ¹H NMR (CDCI₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.21 (s, 9H), 1.60 (m, 10H), 3.00 (s, 3H), 3.89 (m, 3H), 4.14 (m, 2H), 5.75 (s, 2H);

/R (KBr), ν (cm^-1): 2936,1712, 1332, 1164, 1156;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]+ = 386.1627; masa obliczona dla wzoru sum. C16H29NO6NaS, 386.1608.

Etap 3: N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidyna (wzór 2)

Mieszaninę 2,2-dipodstawionego 5-[N-mesylo-N-(piwaloiloksymetylo)]-amino-1,3-dioksanu (5.5 mmola) i protonowanej żywicy jonowymiennej (Dowex-50 [H⁺], 2.4 g) w metanolu (50 cm³) wytrząsa się przez dobę w temperaturze pokojowej. Potem odsącza się żywicę, a z przesączu oddestylowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Próbkę analityczną oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, chloroform-metanol, 9:1, v/v):

¹H NMR (CDCI₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 2.69 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 3.68 (m, 3H), 3.88 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.52 (d, ³J=7.2, 1H), 5.11 (d, ³J=7.2, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ,< (ppm): 35.90, 60.13, 63.10, 68.56, 81.13;

IR (film), ν (cm^-1): 3504, 3380, 3016, 2936, 2888, 1332, 1164, 1060.

Pozostałość rozpuszcza się w chlorku metylenu (4 cm³), a do roztworu dodaje pirydynę (0.87 g, 11 mmoli, 0.9 cm³); całość miesza się przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Następnie mieszaninę chłodzi się w łaźni wodno-lodowej i dodaje się chlorek benzoilu (1.16 g, 8.25 mmola, 1 cm³). Całość pozostawia się na dobę w temperaturze pokojowej. Po tym czasie do mieszaniny dodaje się wodę (30 cm³) i miesza przez 1 godzinę, a następnie rozdziela się fazy. Fazę wodną ekstrahuje się chlorkiem metylenu (2x10 cm³), a ekstrakty łączy z fazą organiczną. Następnie fazę organiczną przemywa się wodą i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Pozostałość po odsączeniu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, krystalizuje się z mieszaniny heksan-octan etylu, 1:1, v/v. Otrzymuje się: 72% produktu z 2,2-dimetylo-5-[N-mesylo-N-(piwaloiloksymetylo)]-amino-1,3-dioksanu oraz 83% produktu z 3-[N-mesylo-N-(piwaloiloksymetyło)]-amino2,2-pentametyleno-1,3-dioksanu, (Tt=102-103°C):

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_H (ppm): 2.91 (s, 3H), 3.78 (m, 1H), 4.29 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 4.44 (m, 2H), 4.62 (d, ³J=7.1, 1H), 5.20 (d, ³J=7.1, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.59 (m, 1H), 8.04 (m, 2H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), a_C (ppm): 37.04, 57.06, 64.70, 69.00, 80.97, 128.68, 129.52, 129.84, 133.55, 166,26;

IR (film), ν (cm^-1): 3012, 2932, 2892, 1708, 1456, 1340, 1284, 1160, 1128;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 308.0571; masa obliczona dla wzoru sum. C12H15NO5NaS, 308.0563.

P r z y k ł a d 2: Otrzymywanie N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamidu o wzorze 3

Etap 1: N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-metanosulfonamid

Mieszaninę 3-(mesyloamino)-2,2-pentametyleno-1,3-dioksanu (1 g, 4 mmole) i protonowanej żywicy jonowymiennej (Dowex-50 [H⁺], 1 g) w metanolu (20 cm³) wytrząsa się przez 24 godziny w temperaturze pokojowej. Potem odsącza się żywicę, a z przesączu oddestylowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość suszy się w eksykatorze próżniowym (P2O5, 24 godziny), a następnie rozpuszcza w suchej pirydynie i chłodzi uzyskany roztwór zimną wodą. Potem dodaje się chlorek piwaloilu w jednej porcji i pozostawia całość na 24 godziny w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje się wodę (16 cm³), chlorek metylenu (4 cm³) i rozdziela fazy. Fazę organiczną przemywa się wodą, a potem solanką i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, chloroform).

Otrzymuje się 0.76 g (56%) produktu w postaci oleju zestalającego się podczas przechowywania w temperaturze pokojowej.

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_H (ppm): 1.27 (s, 18H), 3.02 (s, 3H), 3.98 (m, 1H), 4.17 (m, 4H), 4.81 (sbr, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ,< (ppm): 22.92, 39.06, 42.33, 52.11,63.43 (x2), 97.14, 178.34;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3288, 2976, 1728, 1320, 1156;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 360.1463; masa obliczona dla wzoru sum. C14H27NO6NaS, 360.1451.

Etap 2: N-[2-Piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid

PL 199 375 B1

N-[2-Piwaloiloksy-1-(p7iwaloiloksymetylo)-etylo]-metanosulfonamid poddaje się alkilowaniu piwalonianem chlorometylu w analogicznych warunkach jak 2,2-dipodstawione 5-(mesyloamino)-1,3-dioksany. Produkt otrzymuje się z wydajnością 88% w postaci oleju zestalającego się podczas przechowywania w temperaturze pokojowej:

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.21 (s, 27H), 3.09 (s, 3H), 4.27 (m, 5H), 5.53 (s, 2H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ₀ (ppm): 27.15, 27.27, 38.95, 42.41, 54.26, 62.32(x2), 70.58, 177.55, 178.04;

IR (KBr), ν (cm^-1): 2976,1728,1340, 1148;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 474.2126; masa obliczona dla wzoru sum. C20H37NO8NaS, 474.2132.

P r z y k ł a d 3: 1-{N-[2-Hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-metylo-1H,3H-pirymidyn-2,4-dion

Etap 1: Do roztworu persililowanej tyminy [sporządzonego z tyminy (252 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (1.63 g, 8.0 mmoli, 2 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidynę o wzorze 2 (280 mg, 0.98 mmola) i trifluorometanosulfonian trimetylosililu (370 mg, 1.66 mmola, 0.3 cm³). Całość pozostawia się na 3 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje octan etylu (45 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (2 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się octanem etylu. Z przesączu oddziela się fazę wodną a fazę organiczną przemywa się wodą, a następnie solanką i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 45 g, chloroform-metanol, 95 : 5, v/v). Otrzymuje się 273 mg 1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)etylo]-mesyloaminometylo}-5-metylo-1H,3H-pirymidyn-2,4-dionu (67%, Tt=182-186°C).

¹H NMR (DMSO-d₆, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.42 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 3.70 (m, 2H), 4.20 (m, 3H), 5.14 (d, ²J=15.1, 1H), 5.27 (m, 1H), 5.41 (d, ²J=15.1, 1H), 7.49 (m, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.63 (m, 3H), 7.91 (m, 2H), 11.35 (sbr, 1H);

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ₀ (ppm): 11.80, 40.37, 54.82, 57.94, 58.43, 68.92, 109.77, 128.70, 129.14, 129.26, 133.39, 138.41, 151.14, 163.62, 165.26;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3408, 3036, 1724, 1692, 1668,1336, 1280, 1148;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 434.1000; masa obliczona dla wzoru sum. C17H21N3O7NaS, 434.0992.

Etap 2: Roztwór 1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-metylo1H,3H-pirymidyn-2,4-dionu (100 mg, 0.24 mmola) w mieszaninie metanol (10 cm³) - 25% wodny roztwór amoniaku (2 cm³) pozostawia się na 4 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 45 g, chloroform-metanol, 9:1, v/v). Otrzymuje się 74 mg 1-{N-[2-Hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-metylo-1H,3H-pirymidyn2,4-dionu (99%, Tt=160-187°C).

¹H NMR (DMSO-d₆, 200 MHz), σ_H (ppm): 1.77 (d, ⁴J=1.2, 3H), 3.08 (s, 3H), 3.47 (m, 4H), 3.78 (m, 1H), 4.92 (m, 2H), 5.18 (s, 2H), 7.50 (q, ⁴J=1.2, 2H);

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ₀ (ppm): 12.30, 40.20, 54.87, 59.59 (2x), 62.04, 109.55, 138.69, 150.98, 163.96;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3424, 3364, 1704, 1656, 1340, 1280, 1164, 1128;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 330.0744; masa obliczona dla wzoru sum. C10H17N3O6NaS, 330.0730.

P r z y k ł a d 4: 4-Amino-1-{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-on

Etap 1, metoda 1: Do roztworu persililowanej N⁴-benzoilocytozyny [sporządzonego z N⁴-benzoilocytozyny (430 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (1.63 g, 8.0 mmoli, 2 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)oksazolidynę o wzorze 2 (280 mg, 0.98 mmola) i trifluorometanosulfonian trimetylosililu (370 mg, 1.66 mmola, 0.3 cm³). Całość pozostawia się na 6 dób w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje octan etylu (45 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (2 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się octanem etylu. Z przesączu oddziela się fazę wodną, a fazę organiczną przemywa się wodą, a następnie so6

PL 199 375 B1 lanką i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciś nieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 25 g, chloroform-metanol, 95 : 5, v/v). Otrzymuje się 324 mg (66%) 4-(benzoiloamino)-1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (piana).

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ₀ (ppm): 40.17, 57.43, 58.62, 59.21, 62.64, 96.74, 128.47, 128.64, 129.19, 129.30, 129.38, 129.70, 132.78, 133.12, 133.35, 148.17, 155.33, 163.38, 167.23;

Etap 1, metoda 2: Do roztworu persililowanej N⁴-benzoilocytozyny [sporządzonego z N⁴-benzoilocytozyny (430 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (823 mg, 4.0 mmole, 1 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid o wzorze 3 (450 mg, 1.0 mmol) i trifluorometanosulfonian trimetylosililu (370 mg, 1.66 mmola, 0.3 cm³). Całość pozostawia się na 3 doby w temperaturze pokojowej.

Po tym czasie dodaje się octan etylu (45 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (2 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się octanem etylu.

Z przesączu oddziela się fazę wodną, a fazę organiczną przemywa się wodą a następnie solanką i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciś nieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 25 g, chlorek metylenu : metanol, 98 : 2, v/v). Otrzymuje się 402 mg 4-(benzoiloamino)-1-{N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (71%, olej):

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.18 (s, 18H), 3.06 (s, 3H), 4.32 (m, 5H), 5.49 (s, 2H), 7.55 (m, 4H), 7.90 (m, 2H), 8.17 (d, ³J=7.6, 1H), 8.78 (sbr, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ₀ (ppm): 27.26, 38.89, 41.85, 56.67, 58.42, 62.04(x2), 97.77, 127.74, 129.22(x2), 132.94, 133.51, 142.41, 155.75, 163.00, 178.05;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3308, 2976, 2932, 1732, 1696, 1676, 1556, 1484, 1340, 1312, 1276,1252,1148;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-H]⁺ = 565.2346; masa obliczona dla wzoru sum. C26H37N4O8S, 565.2327.

Etap 2, metoda 1: Roztwór 4-(benzoiloamino)-1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (270 mg, 0.54 mmola) w mieszaninie metanol (32 cm³)

- 25% wodny roztwór amoniaku (8 cm³) pozostawia się na 4 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 10 g, aceton-metanol-NH3aq, 6:1 : 0.4, v/v/v). Otrzymuje się 117 mg 4-amino-1-{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (74%, Tt=212-222°C, rozkład).

¹H NMR (DMSO-d₆, 200 MHz), σ_Η (ppm): 3.06 (s, 3H), 3.44 (m, 4H), 3.79 (m, 1H), 4.90 (m, 1H), 5.19 (s, 2H), 5.76 (d, ³J=7.4, 1H), 7.22 (sbr, 2H), 7.63 (d, ³J=7.41H);

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ₀ (ppm): 39.94, 55.49, 59.57 (x2), 62.04, 94.60, 143.98, 155.63, 165.81;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3504, 3428, 3348, 3140, 1680, 1616, 1512, 1320, 1148;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 293.0925; masa obliczona dla wzoru sum. C9H17N4O5S, 293.0914.

Etap 2, metoda 2: Roztwór 4-(benzoiloamino)-1-{N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (293 mg, 0.54 mmola) w mieszaninie metanol (6 cm³)

- 25% wodny roztwór amoniaku (4 cm³) pozostawia się na 1 dobę w temperaturze 70°C. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 10 g, aceton-metanol-NH3ag, 6:1 : 0.4, v/v/v). Otrzymuje się 126 mg 4-amino-1-{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-1H-pirymidyn-2-onu (83%, Tt=212-222°C, rozkład).

P r z y k ł a d 5: 1-{N-[2-Hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-fluoro1H,3H-pirymidyn-2,4-dion

Etap 1, metoda 1: Do roztworu persililowanego 5-fluorouracylu [sporządzonego z 5-fluorouracylu (260 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (1.63 g, 8.0 mmoli, 2 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się 4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidynę o wzorze 2

PL 199 375 B1 (280 mg, 1.0 mmol) i trifluorometanosulfonian trimetylosililu (670 mg, 3.0 mmole, 0.54 cm³). Całość pozostawia się na 3 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje się octan etylu (45 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (2 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się octanem etylu. Z przesączu oddziela się fazę wodną, a fazę organiczną przemywa się wodą, a następnie solanką i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 20 g, chloroform-metanol, 93 : 7, v/v). Otrzymuje się 177 mg 1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-fluoro-1H,3H-pirymidyn-2,4-dionu (44%, Tt=183-187°C).

¹H NMR (DMSO-d₆, 200 MHz), σ_Η (ppm): 3.15 (s, 3H), 3.71 (m, 2H), 4.27 (m, 3H), 5.28 (m, 3H), 7.72 (m, 6H), 11.90 (sbr, 1H);

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ,< (ppm): 40.20, 55.84, 58.19, 58.86, 62.06, 127.08 (d, ²JC-F=33.8), 128.72, 129.13 (2x), 133.48, 139.77 (d, ¹JC-F=230.3), 149.84, 157.02 (d, ²JC-F=26.2), 165.35;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3504, 3012, 2856, 1712, 1692, 1660, 1328, 1272, 1148,1100;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 438.0738; masa obliczona dla wzoru sum. C16H18N3O7FNaS, 438.0742.

Etap 1, metoda 2: Do roztworu persililowanego 5-fluorouracylu [sporządzonego z 5-fluorouracylu (260 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (1.63 g, 8.0 mmoli, 2 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)oksazolidynę o wzorze 2 (280 mg, 1.0 mmol) i chlorek cyny(IV) (782 mg, 3.0 mmole, 0.35 cm³). Całość pozostawia się na 2 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje się chloroform (50 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (20 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się chloroformem. Następnie rozdziela się fazy przesączu i fazę wodną ekstrahuje chloroformem, a ekstrakt łączy się z fazą organiczną. Otrzymany roztwór przemywa się wodą i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 20 g, chloroform-metanol, 93 : 7, v/v). Otrzymuje się 230 mg 1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]mesyloaminometylo}-5-fluoro-1H,3H-pirymidyn-2,4-dionu (56%, Tt=183-187°C).

Etap 2: Roztwór 1-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-fluoro-1H,3H-pirymidyn-2,4-dionu (230 mg, 0.55 mmola) w mieszaninie metanol (12 cm³) - 25% wodny roztwór amoniaku (6 cm³) pozostawia się na 4 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 10 g, chloroform-metanol-NH3ag, 7:3: 0.5; 6:4 : 0.8, v/v/v). Otrzymuje się 137 mg 1-{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-5-fluoro-1H,3H-pirymidyn-2,4-dion (80%, Tt=172-190°C, rozkład).

¹H NMR (DMSO-d₆, 200 MHz), σ_Η (ppm): 3.10 (s, 3H), 3.49 (4H, m), 3.78 (m, 1H), 4.96 (m, 2H), 5,18 (s, 3H), 7.87 (d, ³JF-H=6.6,1H);

¹³C NMR (DMSO-d6, 50 MHz), σ,< (ppm): 39.67, 55.52, 59.48 (x2), 62.22, 127.17 (d, ²JC-F=33.8), 139.70 (d, ¹JC-F=229.5), 149.61, 157.12 (d, ²JC-F=25.8);

IR (KBr), ν (cm^-1): 3512, 3436, 3064, 2836, 1700, 1348, 1316, 1260, 1144;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 334.0496; masa obliczona dla wzoru sum. C9H14N3O6FNaS, 334.0480.

P r z y k ł a d 6: 6-Amino-9{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-9Hpuryna

Etap 1, metoda 1: Do roztworu persililowanej N⁶-(benzyloksykarbonylo)-adeniny [sporządzonego z N⁶-(benzyloksykarbonylo)-adeniny (270 mg, 1.0 mmol) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (814 mg, 4.0 mmole, 1 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid o wzorze 3 (225 mg, 0.5 mmola) i chlorek cyny(IV) (391 mg, 1.5 mmola, 176 μΐ). Całość pozostawia się na 2 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje się chloroform (50 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (10 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się chloroformem. Następnie rozdziela się fazy przesączu i fazę wodną ekstrahuje chloroformem, a ekstrakt łączy się z fazą organiczną Otrzymany roztwór przemywa się wodą i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego

PL 199 375 B1 i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 20 g, chloroform-aceton, 98 : 2, v/v). Otrzymuje się 136 mg (44%) 6-(benzyloksykarbonyloamino)-9-{N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]mesyloaminometylo}-9H-puryny (piana).

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 1.08 (m, 18H), 2.96 (s, 3H), 4.27 (m, 5H), 5.28 (s, 2H), 5.75 (s, 2H), 7.45 (m, 5H), 8.43 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 9.26 (sbr, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ₀ (ppm): 27.07, 38.72, 41.98, 52.05, 56.08, 61.93, 67.83, 121.36, 128.06, 128.62(x2), 135.46, 143.54, 149.87, 151.02, 151.16, 153.17, 177.84;

IR(KBr), ν (cm^-1): 2976, 1732, 1616, 1588, 1472, 1340, 1284, 1212, 1148;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ 641.2380, masa obliczona dla wzoru sum. C28H38N6O8NaS, 641.2364.

Etap 1, metoda 2: Do roztworu persililowanej N⁶-benzoilo-adeniny [sporządzonego z N⁶-benzoilo-adeniny (780 mg, 2.0 mmole) i N,O-bis-(trimetylosililo)-acetamidu (1.63 g, 8.0 mmoli, 2 cm³)] w acetonitrylu (10 cm³), w atmosferze gazu obojętnego, dodaje się N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)oksazolidynę o wzorze 2 (280 mg, 1.0 mmol) i chlorek cyny(IV) (782 mg, 3.0 mmole, 0.35 cm³). Całość pozostawia się na 2 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie dodaje się chloroform (50 cm³), nasycony wodny roztwór wodorowęglanu sodu (20 cm³) i miesza całość przez 30 minut. Następnie mieszaninę sączy się przez warstwę celitu, którą przemywa się chloroformem. Następnie rozdziela się fazy przesączu i fazę wodną ekstrahuje chloroformem, a ekstrakt łączy się z fazą organiczną. Otrzymany roztwór przemywa się wodą i suszy bezwodnym siarczanem magnezu. Potem pozostałość, po usunięciu środka suszącego i oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 25 g, chloroform-metanol, 95 : 5, v/v). Otrzymuje się 138 mg (26%) 6-(benzoiloamino)-9-{N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-9H-puryny (piana).

¹H NMR (CDCl₃, 200 MHz), σ_Η (ppm): 2.74 (s, 3H), 4.06 (m, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.55 (m, 2H), 4.94 (m, 1H), 5.88 (s, 2H), 7.52 (m, 6H), 7.98 (m, 4H), 8.36 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 9.17 (sbr, 1H);

¹³C NMR (CDCl₃, 50 MHz), σ₀ (ppm): 42.90, 53.96, 60.32, 61.30, 63.38, 123.33, 128.67, 129.34, 129.72, 129.94, 130.39, 133.81, 134.11, 134.24, 145.29, 150.82, 151.80, 153.54, 165.33, 166.86;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 547.1383, masa obliczona dla wzoru sum. C24H24N6O6NaS, 547.1370.

Etap 2, metoda 1: Zawiesinę 6-(benzyloksykarbonyloamino)-9-{N-[2-piwaloiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-9H-puryny (100 mg, 0.16 mmola) i palladu osadzonego na węglu aktywnym (10%, 20 mg) w metanolu (5 cm³) poddaje się działaniu wodoru pod ciśnieniem atmosferycznym w temperaturze pokojowej przez 1 dobę. Następnie odsącza się katalizator przez warstwę celitu, a do przesączu dodaje się 25% wodny roztwór amoniaku (2 cm³) i pozostawia mieszaninę na 1 dobę w temperaturze 70°C. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, 25 g, chloroform : metanol, 9:1, v/v). Otrzymuje się 37 mg 6-amino-9{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetyol)-etylo]-mesyloaminometylo}-9H-puryny (73%, Tt=240-242°C).

¹H NMR (DMSO-d6, 200 MHz), OH (ppm): 3.10 (s, 3H), 3.47 (m, 4H), 3.82 (m, 2H), 5.00 (m, 2H), 5.65 (s, 2H), 7.36 (sbr, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.19 (s, 1H);

¹³C NMR (DMSO-d₆, 50 MHz), σ₀ (ppm): 39.97, 51.47, 59.50(x2), 61.93, 118.34, 140.29, 149.05, 152.67, 156.08;

IR (KBr), ν (cm^-1): 3324, 3160, 1664, 1600, 1332, 1152;

HRMS (ESI, MeOH): masa zmierzona [M-Na]⁺ = 317.1042, masa obliczona dla wzoru sum. C10H17N6O4S, 317.1027.

Etap 2, metoda 2: Roztwór 6-(benzoiloamino)-9-(N-[2-benzoiloksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]mesyloaminometylo}-9H-puryny (120 mg, 0.23 mmola) w mieszaninie metanol (10 cm³) - 25% wodny roztwór amoniaku (5 cm³) pozostawia się na 4 doby w temperaturze pokojowej. Po tym czasie oddestylowuje się rozpuszczalniki pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszcza się za pomocą chromatografii kolumnowej (SiO2, 200-400 mesh, SiO2, 200-400 mesh, 25 g, chloroform : metanol, 9:1, v/v). Otrzymuje się 54 mg 6-amino-9{N-[2-hydroksy-1-(hydroksymetylo)-etylo]-mesyloaminometylo}-9H-puryny (75%, Tt=240-242°C).

PL 199 375 B1

Claims (1)

1. Sposób otrzymywania nowych aza-analogów acyklicznych nukleozydów o wzorze ogólnym 1, w którym B oznacza N⁹-podstawiony pierścień 6-amino-purynowy lub B oznacza N¹-podstawiony pierścień pirymidynowy, w którym R oznacza atom wodoru, chloru, bromu, jodu, fluoru, grupę alkilową o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym o liczbie atomów węgla od 1 do 3, a X oznacza grupę aminową lub hydroksylową, znamienny tym, że poddaje się reakcji N-mesylo-4-(benzoiloksymetylo)-oksazolidynę o wzorze 2 lub N-[2-piwaioiloksy-1-(piwaloiloksymetylo)-etylo]-N-(piwaloiloksymetylo)-metanosulfonamid o wzorze 3 z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 4, w którym R ma wyżej podane znaczenie, a Y oznacza grupę trimetylosililoksylową [-OSi(CH3)3], lub grupę -N(R¹)[Si(CH3)3], w której R¹ oznacza atom wodoru, grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 3 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym lub grupę benzoilową; lub z persililowaną zasadą nukleinową o wzorze ogólnym 5, w którym Z oznacza atom chloru lub grupę -N(R²)[Si(CH3)3], w której R² oznacza grupę alkilokarbonylową o liczbie atomów węgla od 1 do 15 o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym, grupę t-butoksykarbonylową grupę benzyloksykarbonylową lub benzoilową w acetonitrylu lub w chlorku etylenu, w obecności trifluorometanosulfonianu trimetylosililu lub chlorku cyny(IV), w temperaturze pokojowej, a następnie odblokowuje się zabezpieczone grupy funkcyjne.