PL190284B1 - Analogi nukleozydowe, ich zastosowanie i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna - Google Patents

Analogi nukleozydowe, ich zastosowanie i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna

Info

Publication number
PL190284B1
PL190284B1 PL98366358A PL36635898A PL190284B1 PL 190284 B1 PL190284 B1 PL 190284B1 PL 98366358 A PL98366358 A PL 98366358A PL 36635898 A PL36635898 A PL 36635898A PL 190284 B1 PL190284 B1 PL 190284B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
mmol
hbv
acid
formula
Prior art date
Application number
PL98366358A
Other languages
English (en)
Inventor
Xiao-Xiong Zhou
Nils-Gunnar Johansson
Horst Wähling
Original Assignee
Medivir Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Medivir Ab filed Critical Medivir Ab
Priority claimed from PCT/SE1998/001467 external-priority patent/WO1999009031A1/en
Publication of PL190284B1 publication Critical patent/PL190284B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/84—Nitriles
    • C07D213/85—Nitriles in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/56—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D307/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

1. Analogi nukleozydowe stanowiace zwiazki o wzorze I I w którym R oznacza walil lub izoleucyl, p oznacza liczbe z zakresu 0-15; oraz jego farmaceutycznie dopuszczalna sól PL PL PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku są analogi nukleozydowe takie jak analogi przeciwwirusowe obejmujące inhibitory odwróconej transkryptazy retrowirusa i polimerazy DNA wirusowego zapalenia wątroby typu B (HBV).
Wynalazek dotyczy także kompozycji farmaceutycznych zawierających te związki oraz ich zastosowania do inhibitowania chorób wirusowych i nowotworowych włącznie z HBV i HIV.
Zgłoszenie WO 88/00050 ujawnia aktywność przeciwko retrowirusowi i przeciwko HBV, serii 3'-fluorowanych nukleozydów włącznie ze związkami 2',3'-dideoksy 3'-fluoroguanozyny (FLG) i 3 'ffluorotymidyny (FLT). Drugi z tych związków przeszedł ocenę kliniczną jako środek przeciw wirusowi HIV i choć jego aktywność przeciwwirusowa była dobra, wykazywał on nieoczekiwaną toksyczność. (Flexner i in., J. Inf. Dis. 170(6) 1394-403 (1994). Pierwszy z tych związków, FLG, jest bardzo aktywny in vitro, chociaż obecnie wykryto, ze jego biodostępność jest tak uboga - około 4% - że użyteczność in vivo tego związku jest dlatego bardzo ograniczona w podawaniu dootrzewnowe i podskórnie modelom zwierzęcym.
190 284
Opis patentowy US 4 936 662 ujawnia serię 3'-fluorowanych nukleozydów i odpowiednich trifosforanów, a szczególnie przedstawia wytwarzanie 5'-O-palmitoilowej pochodnej FLT, bez odnotowania jakiejkowiek biodostępności.
Opis zgłoszenia WO 93/13778 przedstawia pochodne FLG modyfikowane w pozycji 6 zasady, szczególnie grupą n-propoksylową, cyklobutoksylową, cyklopropanyloaminową, piperydynową lub pirolidynową.
Opis zgłoszenia WO 93/14103 ujawnia pochodne FLG w których tlen w pozycji 6 guanidyny zastąpiony został grupą aminową, eterową, fluorowcową lub sulfonianową.
Przedmiotem wynalazku są nowe związki o wzorze 1,
O O
H3C - (CH2)p-1-U o
N'
N
NH.
F w którym R stanowi walił lub izoleucyl, p oznacza liczbę z zakresu 0-15, oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Korzystnie R oznacza walil.
Korzystnie p oznacza 0.
Korzystnie związkiem jest 2', 3'-dideoksy-3'-ffuoro-5'-O-[2-(L-waliloksy)propanoilo]guanozyna, w którym ugrupowanie propanoilowe określa pochodną kwasu L-mlekowego, albo jego farmaceutycznie dopuszczalna sól.
Przedmiotem wynalazku jest także związek o wzorze I określony jak wyżej, do zastosowania jako środek medyczny.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja farmaceutyczna, która zawiera związek o wzorze I określony jak wyżej, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik i ewentualnie substancje pomocnicze.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku o wzorze I określonego jak wyżej, do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania HBV lub infekcji retro wirusowej.
Produkty rozkładu takich związków, kwas mlekowy i aminokwas, są dobrze tolerowane fizjologicznie.
Reprezentatywnymi związkami tego typu są:
2',3'-dideoksy-3'-fluoro-5-O-[2-(L-waliloksy)propionylo]guanozyna, oraz
2',3'-dideoksy-3'-fluoro-5-O-[2-(L-waliloksy)stearoilo]guanozyna.
Reszta kwasu tłuszczowego stosowana jest jako łącznik z resztą alifatycznego L-aminokwasu od R która jest estryfikowana grupą hydroksylową w łańcuchu kwasu tłuszczowego, przykładowo na węglu β. W tym przypadku kwas tłuszczowy jest estryfikowany bezpośrednio w grupie 5'-hydroksy (lub równoważnej) nukleozydu, generalnie z grupą R uprzednio estryfikowaną. Alternatywnie, funkcjonalizowany kwas tłuszczowy (grupa hydroksylowa odpowiednio zabezpieczona) może być estryfikowana do nukleozydu i odbezpieczona przed wiązaniem z R.
Wynalazek dotyczy także kompozycji farmaceutycznej zawierającej związki i sole o wzorze 1 oraz farmaceutycznie dopuszczalne nośniki lub rozcieńczalniki. Kompozycja według wynalazku może być stosowana do inhibitowania HBV i retrowirusów takich jak HIV, poprzez dostarczanie związku lub soli o wzorze I, kontaktowanie związku o wzorze I lub jego soli z retrowirusem lub HBV, przykładowo przez podawanie skutecznej ilości związku lub jego soli do miejsca dotkniętego retrowirusem lub HBV.
Związki według wynalazku mogą tworzyć sole które są dodatkowym aspektem wynalazku. Odpowiednie farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze 1 obejmują sole kwasów organicznych, zwłaszcza kwasów karboksylowych, takie jak, ale bez ograniczenia,
190 284 octan, trifluorooctan, mleczan, glukonian, cytrynian, winian, maleinian, jabłczan, pantotenian, izotionian, adypinian, alginian, asparginian, benzoesan, butanian, diglukonian, cyklopentanian, glukoheptanian, glicerofosforan, szczawian, heptanian, heksanian, fumaran, nikotynian, palmitynian, pektynian, 3-fenylopropionian, pikrynian, trimetylooctan, propioniany, winian, laktobionian, kamforan, undekanian i bursztynian, estry organicznych kwasów sulfonowych takie jak metanosulfonian, etanosulfonian, 2-hydroksyetanosulfonian, kamforosulfonian, 2-naftalenosulfonian, benzenosulfonian, p-chlorobenzenosulfonian i p-toluenosulfonian; oraz sole nieorganicznych kwasów takie jak chlorowodorek, bromowodorek, jodowodorek, siarczan, bisiarczan, półsiarczan, tiocyjanian, nadsiarczan, fosforan i sulfonian. Związki o wzorze I mogą być w pewnych przypadkach izolowane w postaci hydratów.
Termin „grupa N-zabezpieczająca” lub „N-zabezpieczona” stosowany tutaj, oznacza grupy przeznaczone do zabezpieczenia N-końcowego aminokwasu lub peptydu, albo do zabezpieczenia grupy aminowej przed niepożądanymi reakcjami w procesie syntezy. Powszechnie stosowane grupy N-zabezpieczające są opisane przez Greene, „Protective Groups in Organie Synthesis” (John Wiley & Sons, New York, 1981), która to publikacja włączona jest tu jako odnośnik. Grupy N-zabezpieczające obejmują grupy acylowe takie jak formylowa, acetylowa, propionylowa, trimetylooctowa, t-butyloacetylowa, 2-chloroaeetylowa, 2-bromoacetylowa, trifluoroacetylowa, trichloroacetylowa, ftalilowa, O-nitrofenoksyacetylowa, a-chlorobutyrylowa, benzoilowa, 4-chlorobenzoilowa, 4-bromobenzoilowa, 4-nitrobenzoilowa, itp; grupy sulfonylowe, takie jak benzenosulfonylowa, p-toluenosulfonylowa, itp., grupy tworzące karbaminiany takie jak benzyloksykarbonylowa, p-chlorobenzyloksykarbonylowa, p-metoksybenzyloksykarbonylowa, p-nitrobenzyloksykarbonylowa, 2-nitrobenzyloksykarbonylowa, p-bromobenzyloksykarbonylowa, 3,4-dimetoksybenzyloksykarbonylowa, 4-metoksybenzyloksykarbonylowa, 2-nitro-4,5-dimetoksybenzyloksykarbonylowa, 3,4,5-trimetoksybenzyloksykarbonylowa, 1 -(p-bifenylilo)-l-metyloetoksykarbonylowa, a,a-dimetylo-3,5-dimetoksybenz.yloksykarbonyiowa. benzhydryloksykarbonylowa, t-butoksykarbonylowa, diizopropylometoksykarbonylowa, izopropyloksykarbonylowa, etoksykarbonylowa, metoksykarbonylowa, alliloksykarbonylowa, 2,2,2-trichloroetoksykarbonylowa, fenoksykarbonylowa, 4-nitrofenoksykarbonylowa, fluorenylo-9-metoksykarbonylowa, cyklopentyloksykarbonylowa, adamantyloksykarbonylowa, cykloheksyloksykarbonylowa, fenylotiokarbonylowa, itp.; grupy alkilowe takie jak benzylowa, trifenylometylowa, benzyloksymetylowa, itp,; i grupy sililowe takie jak trimetylosilil itp. Preferowane są N-zabezpiecząjące grupy takie jak formyl, acetyl, allil, F-moc, benzoil, piwaloil, t-butyloacetyl, fenylosulfonyl, benzyl, t-butoksykarbonyl (BOC) i benzyloksykarbonyl (Cbz).
Grupy hydroksy- i/lub karboksy zabezpieczające są także szeroko omówione przez Greene i obejmują etery takie jak metylowy, podstawione etery metylowe jak metoksymetylowy, metylotiometylowy, benzyloksymetylowy, t-butoksymetylowy, 2-metoksyetoksymetylowy itp., etery sililowe takie jak trimetylosililowy (TMS), t-butylodimetylosililowy (TBDMS) tribenzylosililowy, trifenylosililowy, t-butylodifenylosililowy, triizopropylosililowy itp., podstawione etery etylowe takie jak 1-etoksymetyl, 1-metylo-l-metoksyetyl, t-butyl, allil, benzyl, p-metoksybenzyl, difenylometyl, trifenylometyl itp., grupy takie jak aryloalkil, trityl, i pochodne piksylowe (9-hydroksy-9-fenyloksantenowe, zwłaszcza chlorek). Estrowe grupy zabezpieczające grupę hydroksy obejmują estry takie jak mrówczan, benzylomrówczan, cMorooctan, metoksyoctan, fenoksyoctan, piwalan, adamantan, mezytan, benzoesan itp. Węglanowe grupy zabezpieczające grupę hydroksy obejmują metylowinyl, allil, cynamyl, benzyl, itp. Wytwarzanie 3 '-fluoronukleozydów takich jak FLG jest obszernie omówione przez Herdiwijn i in. w publikacji Nucleosides and Nucleotides 8 (1) 65-96 (1989), która jest włączona jako odnośnik.
Reaktywne pochodne mogą być wstępnie wytworzone lub tworzone in situ przez zastosowanie reagentów takich jak dicykloheksylokarbodiimid (DCC) lub tetrafluoroboran-O-(1H-benzotriazol-1-ilo)N,N,N',N'-tetrametylouroniowy (TBTU). Gdy stosowany jest halogenek kwasowy taki jak chlorek kwasowy, to do mieszaniny reakcyjnej można dodać katalizator w postaci trzeciorzędowej aminy, takiej jak trietyloamina, N,N'-dimetyloanilina, w celu związania uwalnianego kwasu fluorowcowodorowego.
190 284
Reakcje korzystnie prowadzi się w niereaktywnym rozpuszczalniku takim jak N,N-dimetyloformamid, tetrahydrofuran, dioksan, acetonitryl lub fluorowcowany węglowodór taki jak dichlorometan. Jeśli to pożądane, każdy z wyżej wymienionych katalizatorów stanowiących aminę trzeciorzędową można zastosować jako rozpuszczalnik, uważając aby byl obecny odpowiedni nadmiar.
Temperatura reakcji może typowo mieścić się w zakresie 0-60°C, ale korzystne jest utrzymywanie temperatury 5-50°C. Po okresie 1-60 godzin reakcja zwykle jest całkowicie zakończona. Progres reakcji można śledzić stosując chromatografię cienkowarstwową (TLC) i odpowiednie układy rozpuszczalników. Generalnie gdy reakcja jest zakończona, co potwierdza TLC, produkt ekstrahuje się organicznym rozpuszczalnikiem i oczyszcza metodą chromatografii i/lub rekrystalizacji z odpowiedniego układu rozpuszczalników.
Produkty uboczne gdzie ma miejsce acylowanie zasady nukleozydu, można wydzielić metodą chromatografii, lecz takie błędne acylowanie można zminimalizować stosując kontrolowane warunki reakcji. Warunki takie można osiągnąć przykładowo manipulując stężeniami reagentów lub szybkością dodawania, zwłaszcza środka acylującego, poprzez obniżanie temperatury lub przez dobór rozpuszczalnika. Reakcję można śledzić za pomocą TLC monitorując regulowane warunki. Może być dogodne zabezpieczenie grupy 6-okso w zasadzie, a zwłaszcza 2-amino, za pomocą konwencjonalnych grup zabezpieczających ubiegając błędne acylowanie.
Związki pośrednie wspomniane wyżej dogodnie wytwarza się przez acylowanie kwasu hydroksyalkanowego z zabezpieczoną grupą karboksy, typowo kwasu 2-hydroksy-l-alkanowego, odpowiednio aktywowaną i N-zabezpieczoną pochodną R taką jak N-CBZ walil lub izoleucyl w połączeniu z konwencjonalnym reagentem sprzęgającym takim jak DMAP/DCC lub fluorowcoaminokwasem. Grupę zabezpieczającą grupę karboksylową usuwa się przykładowo poprzez hydrolizę kwaśną, zaś uzyskany związek pośredni aktywuje się jak opisano wyżej, lub wolny kwas jest stosowany w połączeniu z reagentem sprzęgającym dla estryfikowania nukleozydu w konwencjonalnych warunkach tego procesu.
Aktywne pochodne stosowane w procesie acylowania mogą obejmować przykładowo chlorki kwasowe, bezwodniki kwasowe, aktywne estry kwasów lub kwasy w obecności reagenta sprzęgającego, przykładowo dicykloheksylokarbodiimidu. Reprezentatywne pochodne kwasowe obejmują chlorek kwasowy, bezwodniki pochodzące od alkoksykarbonylohalogenku takie jak chlorek izobutyloksykarbonylu itp., estry pochodzące od N-hydroksysukcynamidu, estry pochodzące od N-hydroksyftalimidu, estry pochodzące od N-hydroksy-5-norbomeno-2,3-dikarboksyamidu, estry pochodzące od 2,4,5-trichlorofenolu itp. Dalsze aktywne kwasy obejmują takie w których X we wzorze RX reprezentuje fragment OR' gdzie R oznacza określony tu R, a R' oznacza przykładowo COCH3, COCH2CH3 lub COCF3, lub gdzie X oznacza benzotriazol.
Właściwa metodologia będzie odpowiednia gdy wynalazek jest zastosowany do innych monohydroksylowanych nukleozydów, to znaczy aktywna pochodna jest odpowiednio estryfikowana w wolnej grupie 5'-hydroksy-(lub równoważnej) monowodorotlenowych nukleozydów takich jak acyklowir, ddl, FTC, lamiwudyna, 1592U89. DAPD, F-ddA itp.
Pochodna aminokwasu R może być alternatywnie estryfikowana w grupie łączącej z 2-oksa-4-azacykloalkano-l,3-dionem metodą opisaną w zgłoszeniu międzynarodowym WO 94/29311 stanowiącym odnośnik do niniejszego zgłoszenia.
Wynalazek dostarcza również zastosowania związków lub ich soli o wzorze I w terapii, przykładowo do wytwarzania leku do leczenia chorób retrowirusowych lub HBV.
Zgodnie z powszechną praktyką dotyczącą inhibitorów retrowirusowych i HBV, korzystne jest podawanie łączne jednego do trzech dodatkowych środków przeciwwirusowych, takich jak AZT, ddl, ddC, d4T, 3TC, H2G, foscamet, ritonavir, indinavir, saquinavir, nevirapine, delaviridine, Verteks VKS 478 lub Agouron AG1343 itp. w przypadku HIV, lub lamiwudyna, interferon, famciclovir itp., w przypadku HBV. Takie dodatkowe środki przeciwwirusowe zwykle podaje się w dawkach odpowiednio do siebie, które szeroko odzwierciedlają ich poszczególne wartości terapeutyczne. Stosunki molowe rzędu 100:1 do 1:100, zwłaszcza 25:1 do 1:25, odpowiednio do związku lub jego soli o wzorze I będą często dogodne. Podawanie
190 284 dodatkowych środków przeciwwirusowych jest zwykle mniej powszechne z nukleozydami przeciwwirusowymi przeznaczonymi do leczenia infekcji opryszczkowych.
W stanach leczonych wywołanych retrowirusami takimi jak HIV lub HBV związki lub ich sole o wzorze 1, korzystnie podaje się w ilości około 50-1500 mg, raz, dwa razy lub trzy razy dziennie, zwłaszcza 100-700 mg dwa lub trzy razy dziennie. Jest pożądane osiągnięcie stężenia aktywnego metabolitu w surowicy 0,01-100 gg/ml, zwłaszcza 0,1-5 pg/ml.
Gdy możliwe jest podawanie pojedynczo środka aktywnego, korzystne jest aby stanowił on część preparatu farmaceutycznego. Taki preparat będzie zawierał wyżej opisany środek aktywny razem z jednym lub większą ilością farmaceutycznie dopuszczalnych nośników i/lub zarobek i ewentualnie z innymi składnikami terapeutycznymi. Nośnik(i) musi być dopuszczalny, to znaczy, że musi być kompatybilny z innymi składnikami preparatu i nieszkodliwy dla pacjenta.
Preparaty te są odpowiednie do podawania doodbytniczo, donosowo, miejscowo (włącznie z podawaniem do jamy ustnej i podjęzykowo), dopochwowo lub pozajelitowe (włącznie z podskórnym, domięśniowym, dożylnym i przeskómym). Korzystnie preparaty podawane są doustnie. Preparaty dogodnie mogą mieć postać dawek jednostkowych, przykładowo tabletek i kapsułek o przedłużonym uwalnianiu i mogą być wytwarzane jakąkolwiek dobrze znaną w farmacji metodą. Takie metody obejmują etap połączenia wyżej określonych składników z nośnikiem. Generalnie preparaty wytwarza się przez jednolite i dokładne wymieszanie składnika aktywnego z ciekłymi nośnikami, lub bardzo drobnymi stałymi nośnikmi, lub oboma, po czym jeśli jest to konieczne, przez ukształtowanie produktu. Sposób wytwarzania farmaceutycznej kompozycji zawierającej związek o wzorze I lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól, polega na połączeniu lub asocjacji tego związku z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub zaróbką. Jeśli wytwarzanie preparatów farmaceutycznych wymaga dokładnego wymieszania farmaceutycznych substancji pomocniczych i składnika aktywnego w postaci soli, to często preferuje się zastosowanie substancji pomocniczych które nie mają charakteru zasadowego, przykładowo kwaśnych lub obojętnych.
Preparaty do podawania doustnego według obecnego wynalazku mogą mieć postać oddzielnych jednostek takich jak kapsułki, kaszetki lub tabletki zawierające określoną wcześniej ilość składnika aktywnego; proszków lub granulek; roztworów lub zawiesin składnika aktywnego w cieczy wodnej lub niewodnej; lub ciekłej emulsji olej-w-wodzie albo woda-w-oleju, oraz bolusów.
W przypadku preparatów do podawania doustnego według obecnego wynalazku (przykładowo tabletki i kapsułki), określenie „odpowiedni nośnik” obejmuje zarobki takie jak powszechnie stosowane substancje pomocnicze, np. środki wiążące, przykładowo syrop, guma arabska, żelatyna, sorbit, tragakanta, poliwinylopirolidon (Povidone), metyloceluloza, etyloceluloza, karboksymetyloceluloza sodowa, hydroksypropylometyloceluloza, sacharoza i skrobia; wypełniacze i nośniki, przykładowo krochmal zbożowy, żelatyna, laktoza, sacharoza, mikrokrystaliczna celuloza, kaolin, mannit, fosforan diwapniowy, chlorek sodowy i kwas alginowy; oraz środki smarujące takie jak stearynian magnezowy, stearynian sodowy i inne stearyniany metali, stearynian glicerol, kwas stearynowy, olej silikonowy, woski talkowe, oleje i krzemionka koloidalna. Środki smakowe takie jak mięta pieprzowa, olej ze starzęśla, przyprawa wiśniowa itp. również mogą być stosowane. Może być pożądane dodawanie środka barwiącego w celu uzyskania postaci dawkowania łatwych do identyfikowania. Tabletki mogą być także powlekane dobrze znanymi w stanie techniki metodami. Tabletki mogą być wytworzone przez prasowanie lub wytłaczanie, ewentualnie z jednym lub większą ilością dostępnych składników. Tabletki prasowane można wytwarzać przez prasowanie w odpowiednim urządzeniu składnika aktywnego w postaci luźno płynącej takiej jak proszek lub granulki, ewentualnie zmieszane z lepiszczem, środkiem smarującym, obojętnym rozcieńczalnikiem, konserwantem, środkiem powierzchniowo-czynnym lub dyspergującym. Tabletki wytłaczane można otrzymać przez wytłaczanie w odpowiednim urządzeniu mieszaniny sproszkowanego związku zwilżonego obojętnym ciekłym rozcieńczalnikiem. Tabletki mogą być ewentualnie powlekane lub nacięte i mogą być formowane tak, aby składnik aktywny był uwalniany powoli lub w sposób regulowany.
190 284
Inne preparaty odpowiednie do podawania doustnego obejmują pastylki do ssania zawierające składnik aktywny w podłożu smakowym, takim jak sacharoza i guma arabska lub tragakanta; pastylki zawierające składnik aktywny w obojętnym podłożu takim jak żelatyna i gliceryna, lub sacharoza i guma arabska; oraz płukanki do ust zawierające składnik aktywny w odpowiednim ciekłym nośniku.
Krótki opis rysunków
Różne aspekty wynalazku będą obecnie opisane za pomocą przykładów jedynie w odniesieniu do poniższych przykładów i towarzyszących rysunków w których:
Figura 1 przedstawia poziom stężenia DNA wirusa w surowicy leczonych i nieleczonych kaczek zainfekowanych DHBV, w funkcji czasu, jak opisano w Przykładzie Biologicznym 3;
Figura 2 przedstawia przyrost wagi leczonych kaczek zainfekowanych DHBV w funkcji czasu, jak opisano w Przykładzie Biologicznym 3.
Przykła d 1
2',3 '-Dideoksy-3'-fluoro-5'-O-[2-(L-waliloksy)stearoilo]guanozyna
a) Synteza 2-hydroksystearynianu benzylu.
Do mieszanego roztworu kwasu DL-2-hydroksystearynowego (3,0 g, 10 mmoli) w 20 ml bezwodnego DMF dodano tertbutanolan potasu (1,23 g, 11 mmoli) i całość mieszano przez 1 h w temperaturze 60°C. Dodano bromek benzylu (2,14 g, 12,5 mmola) i całość mieszano przez 6 h w 80°C. Mieszaninę odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano 100 ml octanu etylu. Fazę organiczną oddzielono i przemyto dwa razy wodą. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i zatężono w próżni. Produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 3,3 g.
‘H-NMR (CDCla) 0,88 (m, 3H), 1,26 (m, 28H), 1,62 (m, 2H), 4,20 (m, 1H), 5,20 (s, 2H), 7,36 (m, 5H)
b) Synteza 2-(N-FMOC-L-wraliloksy)stearynianu benzylu.
Do roztworu 2-hydroksystearynianu benzylu (3,2 g, 8,2 mmola), N-FMOC-L-waliny (3,4 g, 10 mmoli) i DMAP (0,12 g, 1 mmol) w 80 ml dichlorometanu dodano roztwór DCC (2,5 g, 12 mmoli), po czym całość mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę ochłodzono do 5°C i odfiltrowano uretan. Filtrat odparowano, a produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 4,5 g.
‘H-NMR (CDClj) 0,90 (m, 6H), 1,26 (m, 6H), 1,82 (m, 2H), 2,16 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,36 (m, 2H), 5,10 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 5,28 (m, 1H), 7,20-7,80 (m, 13H)
c) Synteza kwasu 2-(N-FMOC-L-waliloksy)stearynowego
Roztwór 2-(N-FMOC-L-waliloksy)stearynianu benzylu (4,4 g, 6,2 mmole) w 50 ml octanu etylu uwodorniano za pomocą 10% palladu na węglu drzewnym (0,5 g) pod normalnym ciśnieniem przez 2 h. Katalizator odfiltrowano i przemyto octanem etylu i 1,4-dioksanem. Roztwór odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem, a produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 3,4 g.
‘H-NMR (CDCl3) 0,88 (m, 6H), 1,26 (m, 28H), 1,82 (m, 2H), 2,28 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 5,41 (m, 1H), 7,26-7,82 (m, 8H),
d) Synteza 2',3 '-Dideoksy-3 '-fluoro-5 '-O-[2-(N-FMOC-L-waliloksy)stearoilo]guanozyny
Mieszaninę 2 ',3 '-dideoksy-3 '-fluoroguanozyny (404 mg, 1,5 mmola), 2-(N-FMOC-L-waliloksy)stearynowy (1,24 g, 2 mmole), DMAP (24 mg, 0,2 mmola) i HoBt (264 mg, 1,95 mmola) odparowano dwukrotnie z DMF i zmniejszono objętość do około 30 ml, dodano DCC (372 mg, 1,8 mmola) i całość mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę filtrowano, a roztwór odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano octan etylu (50 ml) i fazę organiczną przemyto dwukrotnie 5% kwasem octowym, kwaśnym węglanem sodu i wodą. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt izolowano jako octan na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 1,2 g.
‘H-NMR (DMSO d-6) 0,80 - 0,90 (m, 9H), 1,22 (m, 28H), 2,12 (m, 1H), 2,50-3,00 (m, 2H), 3,98 (m, 1H), 4,96 (m, 1H), 6,17 (m, 1H), 6,50 (s, 2H), 7,32-7,95 (m, 10H).
190 284
e) Synteza 2',3'-dideoksy-3'-fluoro-5'-O-[2-(L-waliloksy)stearoilo]guanozyny
Do roztworu 2',3 '-dideoksy-3 '-fluoro-5'-O-[2-(N-FMOC-L-waliloksy)stearoilo]guanozyny (800 mg, 0,89 mmola) w 15 ml DMF dodano dBu d, 35 g, 8,9 mmola) i całość mieszano przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Dodano kwas octowy (2 ml) i całość odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem.
Dodano wodę (20 ml) i mieszaninę ekstrahowano trzy razy dichlorometanem. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym.
Wydajność: 165 mg.
‘H-NMR (DMSO d-6) 0,87 (m, 9H), 1,22 (m, 28H), 1,70 (m, 2H), 1,88 (m, 1H), 2,50-3,00 (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 4,32 (m, 3H), 4,94 (m, 1H), 5,32-5,54 (m, 1H), 6,14(m, 1H), 6,49 (s, 2H), 7,89 (s, 1H).
Przykład 2
2',3 '-Dideoksy-3 '-fluoro-5 -O- [2-(L-waliloksy)propionylo] guanozyna
a) Synteza 4-metoksybenzylo-2-hydroksypropionianu.
Do mieszanego roztworu kwasu DL-2-hydroksypropionowego (9,0 g, 100 mmoli w 100 ml bezwodnego DMF dodano tert-butanolan potasu (12,34 g, 110 mmoli) i całość mieszano przez 1 h w 60°C. Następnie dodano chlorek 4-metoksybenzylu (18,8 g, 120 mmoli) i całość mieszano przez 8 h w 60°C. Mieszaninę odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i 250 ml octanu etylu dodano. Fazę organiczną przemyto czterokrotnie wodą. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i zatężono w próżni. Wydajność: 16,8 g.
‘H-NMR (CDClj) 1,40 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 5,14 (s, 2H), 6,90 (d, 2H), 7,28 (d, 2H).
b) Synteza 4-metoksybenzylo-2-(N-CBZ-L-waliloksy)propionianu.
Do roztworu 4-meto-ksybenzylo-2-hydroksypropionianu (4,2 g, 20 mmoli), N-CBZ-L-waliny (5,02 g, 20 mmoli) i DMAP (0,24 g, 2 mmole) w 100 ml dichlorometanu dodano roztwór DCC (4,54 g, 22 mmole) i całość mieszano przez noc w tempera turze pokojowej. Mieszaninę ochłodzono do 5°C i odfiltrowano uretan. Filtrat odparowano, a produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 7,9 g.
'H-NMR (CDClj) 0,88 (m, 6H), 1,50 (m, 3H), 2,26 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 4,34 (m, 1H), 5,04-5,30 (m, 6h), 6,88 (d, 2H), 7,26 (m, 7H).
c) Synteza kwasu 2-(N-CBZ-L-waliloksy)propionowego
Do roztworu 4-metoksybenzylo-2-(N-CBZ-L-waliloksy)propionianu (7,8 g, 17,5 mmola) w dichlorometanie (100 ml) dodano kwas trifluorooctowy (10 ml) i roztwór mieszano przez 1 h w temperaturze pokojowej. Roztwór odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem, a produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 5,0 g.
'H-NMR (CDCh) 0,94 (m, 6H), 1,56 (d, 3H), 2,30 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 5,12-5,30 (m, 4H), 7,28 (m, 5H).
d) Synteza 2',3 '-dideoksy-3 '-fluoro-5-O-[2-(N-CBZ-L-waliloksy)propionylo]guanozyny
Mieszaninę 2',3'-dideoksy-3'-fluoroguanozyny (404 mg, 1,5 mmola), kwasu 2-(N-CBZ-L-waliloksy)propionowego (0,582 5 g, 1,8 mmola), DMAP (22 mg, 0,18 mmola) i HOBT (243 mg, 1,8 mmola odparowano dwukrotnie z DMF i zredukowano do objętości około 30 ml. Dodano DCC (412 mg, 2,0 mmole) i całość mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę filtrowano, a roztwór zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem.
100 ml octanu etylu dodano i fazę organiczną przemyto dwukrotnie 5% kwasem octowym, 5% kwaśnym węglanem sodu i wodą. Fazę organiczną suszono siarczanem sodu i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt izolowano na kolumnie chromatograficznej z żelem krzemionkowym. Wydajność: 0,72g.
‘H-NMR (DMSO d-6) 0,92 (m, 6H), 1,40 (d, 3H), 2,10 (m, 1H), 2,50-3,06 (m, 2H), 4,03 (m, 1H), 4,20-4,44 (m, 3H), 5,04 (s, 2H), 5,12 (m, 1H), 5,44-5,58 (m, 1H), 6,18 (t, 1H), 6,52 (s, 2H), 7,36 (m, 5H), 7,70 (d, 2H), 7,92 (s, 1H).
190 284
e) Syntezs 2\3 a dide oksd-3 kfluoro-5-Ο-[2--L-waliloksy)propanoilo]guanoguny
Roztwór 2',e'odideoksyoe'ofluoro-5-O-[2-(N-CBZ-L-'waliluksy)prupanoilo]guayuzany (0,6 g, 1,04 mmola) w 20 ml octanu etylu, 10 ml metanolu i 10 ml kwasu octowego uwudoryiayo na czerni palladowej (0,1 g) przez 2 h w temperaturze pukujuwej i przy ciśnieniu normalnym. Katalizator filtrowano, przemyto metanolem i roztwór odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując tytułowy związek w postaci soli octanowej. Wydajność: 0,5 g.
‘H-NMR (DMSO d-6) 0,88 (m, 6H), 1,40 (d, OH), 1,92 (m, 4H), 2,52-0,04 (m, 2H), 0,18 (m, 1H), 4,18-4,42 (m, OH), 5,06 (m, 1H), 5,02-5,58 (m, 2H), 6,18 (m, 1H), 6,52 (s, 2H), 7,90 (s, 1H).
Przykład Biologiczny 1:
F armakokinetyka
Potwierdz-yie, ze doustne podanie prul-ków według wynalazku uwalnia FLG in vivo, uzyskano na szczurzym modelu, który jest uznanym jako użyteczny model dla oceya parametrów farmakokmetyczyych analogów gukleuzyduwych. Kompozycje doustne są podawane w nośniku farmaceutycznym zawierającym glikol propylenowy, w celu otrzymania duplikatów zwierząt na czczo w dawce odpowiadającej 0,1 mmol/kg. Dla porównania, grupie szczurów podano dożylnie 0,01 mmola/kg metabolitu 2',o-dldeoksyoe'-fPuoroguanr)zyny. Poziomy tego metabolitu w osoczu są następnie monitorowane w osoczu zbieranym od każdego zwierzęcia w okresach czasu od 0,5 do 12 godzin po podaniu (5 minut do 6 godzin dla FLG).
Metabolit jest analizowany na HPLC z detekcją UV przy 254 nm, w sposób analogiczny jak u Stahle'a i wsp., 1995, J. Pharm. Biomed. Anal. 10, 069-076. Układ HPLC może być oparty na 0,05 M buforze dwuwodorofusforayoamonuwym z 1,2% rozpuszczalnikiem 2-propanolowym, zbuntowanym do pH 4,5 lub na 00 mM buforze diwodorufosforanosoduwym z 2% rozpuszczalnikiem acetomirylowym /.buforowanym do pH 7,0.
Kolumną może być 100 x 2, 1 mm BAS C18 5 pm rozmiar cząstek z 7 pm C18 zabezpieczeyi-m kolumny lub kolumna Zorbax SB-CN C18 150 x 4,6 mm, 5 pm. Białkowe wiązania związków według wynalazku jest mało znaczące tak jak metabolitu i ultrasączenie przez sączki Amicon lub Microcon 00 jest użytec/y- dla próbek osocza. Korzystnie główny pik jest poddany dalszej chromatografii kolumnowej dla lepszego rozdziału FLG na składniki o niskim ciężarze. Poziomy dożylne są myozuy- przez współczynnik 10 w celu otrzymania wartości AUC do porównania z wartościami doustnymi. Bezwzględna biodostępność doustna jest oznaczaya jako stosunek pomiędzy °’”AUCi,v a ^AUC-st
Tabela 1
6 godzin bezwzględna biodostęogość w % 12 godzin bezwzględna biodostępność w %
FLG 9%**
Przykład 1 47,5%
** wartości literaturowe
Zatem związki według wynalazku dostarczają znaczącego zwiększenia doustnej biodostępności w odyiesieyiu do metabolitu 2',0 '-dideoksa-e 'ofluoruguano/yyy. Wyraźnie związki te są raczej uwalniane do krwi we względnie stały sposób, niż jako nagły pik uwolnienia. Oznacza to, ze skuteczne ilości aktywnego metabolitu są dostępne we krwi przez ws-1- godzin wspomagając jedną dawkę dzienną. Ponadto, stałe uwalnianie usuwa problemy ostrej toksyczności widuczyej w związkach z szybszym poziom-m uwalniania.
Przykład Biologiczyy 2:
Aktywność przeciwwlrusowaoretrowirusa
Jak można wykazać na podstawie metodologii w przykładzie biologicznym 1, związek według wynalazku uwalnia in vivo metabolit 2',e'-dideoksy-e-flu-)roguan-rzyny. Pomiary in vivo aktywności przeciwwirusowej tego metabolitu będą więc odbijać aktywność faktyczną związku według wynalazku.
190 284
W badaniach wychwytu barwnika XTT, (Koshida i wsp., Antimicrob Agents Chemother. 33 778-780, 1989) wykorzystujących komórki MT4, metabolit mierzony w przykładzie biologicznym 1 powyżej, wykazuje następujące aktywności in vitro skierowane przeciwko retrowirusom:
Tabela 2
HIV lub szczep retrowirusowy ic 50*
HIV-1 1,b 1 pg/ml
HW-^1 AZTr 1 pg/ml
HIV-1. nBTIBOr 1 pg/ml
HIV-129/9 0,7 pg/ml
HIV-2sbL6669 2 pg/ml
sivsm 1 pg/ml
* stężenie metabolitu indukującego 50% hamowanie replikacji wirusa
Jest zatem oczywiste, że podawanie związków według wynalazku indukuje silną przeciwwirusową aktywność przeciwko retowirusom HIV-1, HIV-2 i SIV. Warto także zaznaczyć, na podstawie wyników z HrV-1244‘, AZTr i HIV-1inB TIOCY, że aktywność przeciwwirusowa związków według wynalazku nie wykazuje krzyżowej oporności przeciwko szczepom HIV, które stały się oporne na inne czynniki HIV takie jak nukleozydowe analogi AZT lub nienukleozydowy inhibitor odwrotnej transkryptazy TIBO.
Przykład Biologiczny 3:
Aktywność przeciwirusowa - HBV
Aktywność związków przeciwirusowych przeciw wirusowi kaczego zapalenia wątroby typu B (DHBV) u kaczek jest potwierdzonym zwierzęcym modelem dla oceny aktywności zapalenia wątroby typu B in vivo u ludzi. Aktywność metabolitu mierzona in vivo w powyższym Przykładzie Biologicznym 2 badano w modelu DHBV opisanym przez Sherkera i wsp. (1986), Gastroenterology 91, strony 818-824. Wyniki są przedstawione na fig. 1 i 2. W skrócie, 4 kontrolne kaczki traktowano buforowaną fosforanem solą fizjologiczną (PBS) i 4 kaczki traktowano metabolitem aktywnym 5 mg/kg/dzień. Kaczki miały dwa dni w chwili zaszczepiania DHBV i 18 dni w chwili kiedy rozpoczęto traktowanie. Metabolit i PBS (kontrola) podawano dootrzewnowe przez 10 dni jako dwukrotne dzienne wstrzyknięcie, o godzinie 8 rano i o godzinie 4 po południu. Traktowanie trwało 33 dni i zwierzęta obserwowano 5 tygodni po zakończeniu traktowaniu.
Wydajność traktowania obserwowano przez hybrydyzację dot blot DNA DHBV w osoczu stosując sondę radioaktywną i ilość DHBV mierzono jako ilość zhybrydyzowanej radioaktywności. Wykres na fig. 1 pokazuje ilość DNA DHBV w osoczu w różnych punktach czasowych przed, w trakcie i potraktowaniu. Jak widać na fig. 1, nie zaobserwowano spadku ilości DHBV w surowicy w czasie traktowania PBS (kontrola, linia ciągła). Zwierzęta otrzymujące metabolit, mierzony w Przykładzie Biologicznym 2 (linia przerywana), wykazywały dramatyczny spadek ilości DHBV w surowicy w czasie pierwszych 10 dni traktowania, po czym dla pozostałego traktowania poziom DNA DHBV był poniżej granicy wykrywania przy dawce 5 mg/kg/dzień. Powtórzone doświadczenia przy dawce 30 i 3 mg/kg/dzień i z kaczkami z wrodzonym zakażeniem (nie pokazano), także dawały podobne wyniki, to znaczy dramatyczny spadek DNA DHBV w osoczu poniżej progu wykrywania. Nawet przy bardzo niskim poziomie dawki 0,3 mg/kg/dzień metabolit powodował znaczące hamowanie DHBV in vivo. Po zakończeniu traktowania, wirus ponownie pojawiał się w osoczu, jak pokazano na fig. 1. Ponowne pojawienie się HBV po krótkim okresie traktowania konwencjonalnymi związkami przeciwwirusowymi obserwowano wcześniej zarówno u ludzi jak i u zwierząt z chronicznym zapaleniem wątroby typu B.
Jak można zobaczyć na fig. 2, ciężar kaczek wzrastał w ten sam sposób jak zwierząt kontrolnych (traktowanych PBS). Wzrost ciężaru z 270 g do około 800 g, który obserwowany
190 284 był podczas okresu traktowania, jest tak duży, że efekt toksyczny który by wystąpił, powinien być łatwo widoczny jako zmiana w szybkości wzrostu. Podobne krzywe wzrostu były obserwowane także dla kaczek otrzymujących większą dawkę 30 mg/kg/dzień. Tak więc metabolit ten jest wyraźnie nietoksyczny. Ponieważ związki te według wynalazku są hydrolizowane in vivo dając ten metabolit, jak wykazano w przykładzie 2 powyżej i identyczny jak w naturze i dlatego łatwiej metabolizowalnym kwasem tłuszczowym, może on dlatego być wnioskowany, że nie można się spodziewać problemu długotrwałej toksyczności po podaniu związku według wynalazku. Brak ostrej (krótkotrwałej) toksyczności związku według wynalazku przy podawaniu doustnym przedstawiono w Przykładzie Biologicznym 2.
Preparat 1:
Formowanie tabletek
Następujące składniki przesiano przez sito 0,15 mm i mieszano na sucho:
g związku według wynalazku 40 g laktozy g celulozy krystalicznej 1 g stearynianu magnezu
Mieszaninę prasowano z zastosowaniem tabletkarki uzyskując tabletki zawierające 250 mg składnika aktywnego.
Preparat 2:
Tabletki powlekane rozpuszczalne w jelitach
Tabletki z przykładu preparatu 1 powlekano przez natryskiwanie w powlekarce roztworem zawierającym:
120 g etylocelulozy 30 g glikolu propylenowego 10 g sorbitanu monooleinowego do 1000 mg wody destylowanej Preparat 3:
Preparat o kontrolowanym uwalnianiu g związku według wynalazku g hydroksypropylometylocelulozy (Methocell KI5)
4,5 laktozy mieszano na sucho i granulowano z wodną pastą powidonu. Dodano stearynian magnezu (0,5 g) i mieszaninę prasowano w tabletkarce uzyskując tabletki o średnicy 13 mm zawierające 500 mg środka aktywnego.
Preparat 4:
Miękkie kapsułki 250 g związku według wynalazku 100 g lecytyny
100 g oleju arachidowego
Roztwór według wynalazku dyspergowano w lecytynie i oleju arachidowym. Otrzymaną zawiesiną napełniano miękkie kapsułki żelatynowe.
190 284
190 284
Ił c
O)
FIG 2
190 284
DHBV
DNA
u d •d fi
Φ OJ
•d N
c U
0 Φ
24 rd
d
OJ d
4J fi
d OJ
N N
υ ϋ
0 OJ
a Ή
FIG 1
Departament Wydawnictw UP RP Nakład 50 egz. Cena 4,00 zł.

Claims (7)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Aialogi nukleozydowe stanowiące związki o wzorze I w którym
    R oznacza walil lub izoleucyl;
    p oznacza liczbę z zakresu 0-15;
    oraz jego farmaceutycznie dopuszczalna sól.
  2. 2. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że R oznacza walil.
  3. 3. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że p oznacza 0 .
  4. 4. Związek według zastrz. 1, którym jest 2',3'-dideoksy-3'-fluoro-5'-O-[2-(L-waliloksy)propanoilo]guanozyna, w którym ugrupowanie propanoilowe określa pochodną kwasu L-mlekowego, albo jego farmaceutycznie dopuszczalna sól.
  5. 5. Związek o wzorze I określony jak w zastrz. 1, do zastosowania jako środek medyczny.
  6. 6. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, ze zawiera związek o wzorze I określony w zastrz. 1, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik i ewentualnie substancje pomocnicze.
  7. 7. Zastosowanie związku o wzorze I określonego w zastrz. 1, do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania HBV lub infekcji retrowirusowej.
PL98366358A 1998-02-13 1998-08-14 Analogi nukleozydowe, ich zastosowanie i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna PL190284B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9800452A SE9800452D0 (sv) 1998-02-13 1998-02-13 Antivirals
PCT/SE1998/001467 WO1999009031A1 (en) 1997-08-15 1998-08-14 Nucleosides analogues, such as antivirals including inhibitors of retroviral reverse transcriptase and the dna polymerase of hepatitis b virus (hbv)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL190284B1 true PL190284B1 (pl) 2005-11-30

Family

ID=20410196

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL98366358A PL190284B1 (pl) 1998-02-13 1998-08-14 Analogi nukleozydowe, ich zastosowanie i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna

Country Status (22)

Country Link
EP (1) EP1058687B1 (pl)
JP (1) JP4413427B2 (pl)
KR (1) KR100565388B1 (pl)
CN (1) CN1255422C (pl)
AT (1) ATE256140T1 (pl)
AU (1) AU732408B2 (pl)
CA (1) CA2318975A1 (pl)
DE (1) DE69913499T2 (pl)
DK (1) DK1058687T3 (pl)
ES (1) ES2211116T3 (pl)
HK (1) HK1035907A1 (pl)
HU (1) HUP0100879A3 (pl)
IL (1) IL137605A (pl)
MY (1) MY121813A (pl)
NZ (1) NZ506033A (pl)
PL (1) PL190284B1 (pl)
PT (1) PT1058687E (pl)
SE (1) SE9800452D0 (pl)
SI (1) SI1058687T1 (pl)
TR (1) TR200002318T2 (pl)
WO (1) WO1999041268A1 (pl)
ZA (1) ZA991148B (pl)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6432966B2 (en) * 1999-10-29 2002-08-13 Smithkline Beecham Corporation Antiviral combinations
EP1610782A1 (en) * 2003-03-27 2006-01-04 Boehringer Ingelheim International GmbH Antiviral combination of a dipyridodiazepinone and a further antiretroviral compound
EP1610797A1 (en) * 2003-03-27 2006-01-04 Boehringer Ingelheim International GmbH Antiviral combination of nevirapine and a further antiretroviral compound
EP1610781A1 (en) 2003-03-27 2006-01-04 Boehringer Ingelheim International GmbH Antiviral combination of tipranavir and a further antiretroviral compound
DE10321905A1 (de) * 2003-05-05 2004-12-09 Eberhard-Karls-Universität Tübingen Verwendung von Kombinationen aus Hemmern der reversen Transkriptase und Hemmern der viruscodierten DNA-Polymerase

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE8602981D0 (sv) * 1986-07-04 1986-07-04 Astra Laekemedel Ab Novel medicinal use
WO1992013561A1 (en) * 1991-02-08 1992-08-20 Pro-Neuron, Inc. Oxypurine nucleosides and their congeners, and acyl derivatives thereof, for improvement of hematopoiesis
DE4311801A1 (de) * 1993-04-09 1994-10-13 Hoechst Ag Neue Carbonsäureester von 2-Amino-7-(1,3-dihydroxy-2-propoxymethyl)purin, deren Herstellung sowie deren Verwendung
US5543414A (en) * 1994-07-28 1996-08-06 Syntex (Usa) Inc. Achiral amino acid acyl esters of ganciclovir and its derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
AU732408B2 (en) 2001-04-26
EP1058687A1 (en) 2000-12-13
HUP0100879A2 (hu) 2002-04-29
DK1058687T3 (da) 2004-03-15
ATE256140T1 (de) 2003-12-15
CN1290268A (zh) 2001-04-04
TR200002318T2 (tr) 2000-11-21
DE69913499T2 (de) 2004-10-28
KR100565388B1 (ko) 2006-03-30
EP1058687B1 (en) 2003-12-10
CN1255422C (zh) 2006-05-10
SE9800452D0 (sv) 1998-02-13
JP4413427B2 (ja) 2010-02-10
ES2211116T3 (es) 2004-07-01
MY121813A (en) 2006-02-28
HUP0100879A3 (en) 2002-08-28
DE69913499D1 (en) 2004-01-22
HK1035907A1 (en) 2001-12-14
WO1999041268A1 (en) 1999-08-19
NZ506033A (en) 2002-02-01
PT1058687E (pt) 2004-03-31
KR20010074428A (ko) 2001-08-04
SI1058687T1 (en) 2004-02-29
CA2318975A1 (en) 1999-08-19
JP2002503670A (ja) 2002-02-05
AU3281999A (en) 1999-08-30
IL137605A (en) 2006-12-31
ZA991148B (en) 1999-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR970001529B1 (ko) 메틸아미노 질소에서 치환된 스타우로스포린 유도체 및 이를 함유하는 약제학적 조성물
EP1123935B1 (en) 3'-Fluorinated guanosine derivatives for the treatment or prophylaxis of HBV or retroviral infections
WO2000047561A1 (en) Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors
AU735438B2 (en) Nucleosides
PL190284B1 (pl) Analogi nukleozydowe, ich zastosowanie i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna
TWI198092B (en) Nucleosides
CN100460417C (zh) 用作逆转录病毒的逆转录酶及dna聚合酶抑制剂的抗病毒药的核苷类似物
AU775578B2 (en) Nucleosides analgoues, such as antivirals including inhibitors of retroviral reverse transcriptase and the DNA polymerase of hepatitis B virus (HBV)
MXPA00007903A (en) Nucleosides
PL192112B1 (pl) Związki nukleozydowe, kompozycja przeciw HIV i przeciw HBV je zawierająca oraz ich zastosowanie do leczenia HIV i HBV
JP2004502780A (ja) アデノシン化合物及びそれを含む医薬組成物
NZ508502A (en) Nucleosides analogues, such as antivirals including inhibitors of retroviral reverse transcriptase and the DNA polymerase of hepatitis B virus (HBV)
MXPA00001593A (es) Analogos de nucleosidos, tales como antivirales incluyendo inhibidores de transcriptasa inversa retroviral y la adn-polimerasa del virus de hepatitis b (vhb)
EP1150956A1 (en) Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20140814