PL187925B1 - Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIV - Google Patents
Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIVInfo
- Publication number
- PL187925B1 PL187925B1 PL32917497A PL32917497A PL187925B1 PL 187925 B1 PL187925 B1 PL 187925B1 PL 32917497 A PL32917497 A PL 32917497A PL 32917497 A PL32917497 A PL 32917497A PL 187925 B1 PL187925 B1 PL 187925B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hiv
- cdimi
- azt
- compounds
- cells
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 claims abstract description 50
- YQXCVAGCMNFUMQ-UHFFFAOYSA-N capravirine Chemical compound C=1C(Cl)=CC(Cl)=CC=1SC1=C(C(C)C)N=C(COC(N)=O)N1CC1=CC=NC=C1 YQXCVAGCMNFUMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 38
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 33
- 229960001852 saquinavir Drugs 0.000 claims description 12
- QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N saquinavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN1C[C@H]2CCCC[C@H]2C[C@H]1C(=O)NC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)C=1N=C2C=CC=CC2=CC=1)C1=CC=CC=C1 QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N 0.000 claims description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 229940122440 HIV protease inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- 239000004030 hiv protease inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 229940042402 non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002726 nonnucleoside reverse transcriptase inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 229940122313 Nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- WREGKURFCTUGRC-POYBYMJQSA-N Zalcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)CC1 WREGKURFCTUGRC-POYBYMJQSA-N 0.000 description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 9
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 5
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 5
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- -1 nucleoside compounds Chemical class 0.000 description 5
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 5
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BXZVVICBKDXVGW-NKWVEPMBSA-N Didanosine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 BXZVVICBKDXVGW-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 3
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XNKLLVCARDGLGL-JGVFFNPUSA-N Stavudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1C=C[C@@H](CO)O1 XNKLLVCARDGLGL-JGVFFNPUSA-N 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 3
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPJPTCHRIMPDSG-RRKCRQDMSA-N 4-amino-1-[(2S,4R,5R)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-1,3-oxathiolan-5-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)S[C@@H](CO)O1 FPJPTCHRIMPDSG-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 229940123014 DNA polymerase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N dTTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NHVNXKFIZYSCEB-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 2
- ZJAOAACCNHFJAH-UHFFFAOYSA-N phosphonoformic acid Chemical compound OC(=O)P(O)(O)=O ZJAOAACCNHFJAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 102220011161 rs727504317 Human genes 0.000 description 2
- 102200069353 rs8103142 Human genes 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- JXYPNRIYAMXJSE-UHFFFAOYSA-N 1,4-diazepin-6-one Chemical compound O=C1C=NC=CN=C1 JXYPNRIYAMXJSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MKLVKYVBEBBXTB-UHFFFAOYSA-N 2-[5-(3,5-dichlorophenyl)sulfanyl-1-ethyl-4-propan-2-ylimidazol-2-yl]ethanol Chemical compound CCN1C(CCO)=NC(C(C)C)=C1SC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1 MKLVKYVBEBBXTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000972 4,5-dimethylthiazol-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C1=C(N=C(*)S1)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 208000035943 Aphagia Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FJFDOBNDYNSKMR-UHFFFAOYSA-N CCC(C1=NC(=C(N1CC2=CC=NC=C2)SC3=CC(=CC(=C3)Cl)Cl)C(C)C)O Chemical compound CCC(C1=NC(=C(N1CC2=CC=NC=C2)SC3=CC(=CC(=C3)Cl)Cl)C(C)C)O FJFDOBNDYNSKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N CPD000469186 Natural products CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)NC(C(O)CN1C(CC2CCCCC2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010048843 Cytomegalovirus chorioretinitis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036002 Rash generalised Diseases 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N Ritonavir Natural products C=1C=CC=CC=1CC(NC(=O)OCC=1SC=NC=1)C(O)CC(CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- YMARZQAQMVYCKC-OEMFJLHTSA-N amprenavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN(CC(C)C)S(=O)(=O)C=1C=CC(N)=CC=1)NC(=O)O[C@@H]1COCC1)C1=CC=CC=C1 YMARZQAQMVYCKC-OEMFJLHTSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000006189 buccal tablet Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 208000001763 cytomegalovirus retinitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 229960002656 didanosine Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000009477 fluid bed granulation Methods 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005102 foscarnet Drugs 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960001936 indinavir Drugs 0.000 description 1
- CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N indinavir Chemical compound C([C@H](N(CC1)C[C@@H](O)C[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H]2C3=CC=CC=C3C[C@H]2O)C(=O)NC(C)(C)C)N1CC1=CC=CN=C1 CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229960002900 methylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000884 nelfinavir Drugs 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N nelfinavir Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 description 1
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000005727 virus proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/425—Thiazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
1. Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIV, znam ienna tym, ze zawiera skuteczna ilosc 2-karbamoiloksymetylo-5-(3,5-dichlorofenylotio)-4-izopropylo-1 -(pirydyn-4-ylo)me tylo1lH-imidazolu lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli i skuteczna ilosc jednego lub wiekszej ilosci innych zwiazków o aktywnosci skierowanej przeciw HIV obejmujacych nukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej, nienukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej i/lub inhibitor proteazy HIV. PL PL PL PL
Description
Wynalazek niniejszy dotyczy kompozycji farmaceutycznych przeciw HTV.
AIDS (zespół nabytego upośledzenia odporności) jest szeroko rozprzestrzeniony w świecie, i stanowi nieuleczalną chorobę powodowaną przez HIV (ludzki wirus upośledzenia odporności). Toteż, prowadzone w tej dziedzinie badania oraz rozwój wiedzy na temat środków leczniczych również mają charakter globalny, jednakże nie okazały się, jak dotychczas, zadowalające. Jak dotychczas, stosowane i testowane klinicznie kompozycje przeciw HIV reprezentowane są przez pochodne nukleozydowe, takie jak azydodeoksytymidyna (AZT), dideoksyinozyna (ddl), dideoksycytydyna (ddC), dideoksydidehydrotymidyna (d4T), 3'-tiacytydyna (3TC) itp., uważane za podstawowe środki lecznicze.
Jednakże, wszystkie te środki charakteryzują się poważnymi działaniami ubocznymi, takimi jak, na przykład, zapalenie trzustki, niedokrwistość, leukopenia, neutropenia, wymioty, afagia, zaburzenia żołądkowe, uogólniona wysypka, bezsenność, skurcz mięśnia, duszność, bolesne lub trudne oddawanie moczu, niewydolność nerek, upośledzenie słuchu itp. Stosowanie wspomnianych środków wiąże się z licznymi problemami, takimi jak spowodowane długotrwałym podawaniem leku pojawianie się wirusów lekoopornych, po którym następuje zmniejszenie się skuteczności tych środków, itp.
Jak dotychczas, do rozwiązywania problemów tego rodzaju na ogół stosuje się leczenie wieloma kompozycjami przeciw HIV.
W tym stanie rzeczy, doniesiono o zaistnieniu zjawiska synergizmu w trakcie leczenia polegającego na podawaniu kilku związków o aktywności skierowanej przeciw HIV. Przykładowe tego rodzaju działania synergiczne obserwuje się w przypadku zastosowania kombinacji 3TC z nienukleozydowymi związkami o aktywności skierowanej przeciw HTV, takimi jak, na przykład, {[(benzoksazol-2-ilo)metylo]amino}-5-alkilo-6-alkilo-2-(1H)-pirydynon itp., jak ujawniono w dokumencie patentowym JP-A 7-508997 oraz podobnej kombinacji 3TC z 11-cyklopropylo-5,1 1-dihydro-4-metylo-6H-dipirydo[3,3-b;21,31-e][1,4]diazepin-6-onem, jak ujawniono w dokumencie patentowym JP-A 7-508998.
Wskazuje się na znaczenie występowania problemów takich, jak fakt poważnego działania ubocznego związków o aktywności skierowanej przeciw HIV, pojawianie się wirusów opornych itp. Toteż, pożądana jest nowa kombinacja związków o aktywności skierowanej przeciw HIV przejawiająca synergizm ich działania, a więc kompozycja zawierająca te związki jako składnik aktywny.
Według wynalazku kompozycja przeciw HIV, charakteryzuje się tym, że zawiera skuteczną ilość 2-karbamoiloksymetylo-5-(3,5-dichlorofenylotio)-4-izopropylo-1-(pirydyn-4ylo)metylo-1H-imidazolu (określanego w dalszej części niniejszego opisu jako CDIMI) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli i skuteczną ilość jednego lub większej ilości innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV obejmujących nukleozydowy inhibitor
187 925 transkryptazy odwrotnej, nienukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej i/lub inhibitor proteazy HIV.
Kompozycja przeciw HIV według wynalazku jako związki o aktywności skierowanej przeciw HIV zawiera ddi, ddC, Saquinavir i/lub foskamet.
Kompozycje według wynalazku stosuje się do leczenia lub zapobiegania AIDS, polegającego na podawaniu CDIMI lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli jednocześnie, lub w sposób ciągły, z jednym lub większą ilością innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV.
Stosuje się CDIMI lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól i związki o aktywności skierowanej przeciw HIV do wytworzenia leku przeznaczonego do leczenia lub zapobiegania AIDS. Stwierdzono hamowanie namnażania się HIV przez kontaktowanie wirusa HIV z CDIMI, lub jego farmaceutycznie dopuszczalną solą, występującymi w kombinacji z jednym, lub większą ilością innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV.
Stosowany w niniejszym wynalazku CDIMI opisany jest w dokumencie patentowym WO 96/10019, a synteza i skierowana przeciw HIV aktywność związku ujawnione są w opisie wynalazku.
Figura 1 przedstawia współzależność stężenia związku o aktywności skierowanej przeciw HIV i toksyczności (CC50) w stosunku do komórek GEM.
Figura 2 przedstawia współzależność stężenia związku o aktywności skierowanej przeciw HIV i toksyczności (CC50) w stosunku do komórek U937.
Figura 3 przedstawia współzależność stężenia związku o aktywności skierowanej przeciw HIV i zahamowania wzrostu (IC50) komórek CEM.
Figura 4 przedstawia współzależność stężenia związku o aktywności skierowanej przeciw HIV i zahamowania wzrostu (IC50) komórek U937.
W niniejszym opisie, określenie „farmaceutycznie dopuszczalne sole CDIMI” obejmuje, na przykład, sole z kwasami nieorganicznymi, takimi jak kwas chlorowodorowy, kwas siarkowy, kwas azotowy, kwas fosforowy, kwas fluorowodorowy, kwas bromowodorowy itp., sole z kwasami organicznymi, takimi jak kwas mrówkowy, kwas octowy, kwas winowy, kwas mlekowy, kwas cytrynowy, kwas fumarowy, kwas maleinowy, kwas bursztynowy, kwas metanosulfonowy, kwas etanosulfonowy, kwas benzenosulfonowy, kwas toluenosulfonowy, kwas naftalenosulfonowy, kwas kamforosulfonowy itp., oraz sole utworzone z metalami alkalicznymi lub metalami ziem alkalicznych, takimi jak sód, potas, wapń itp.
Stosowane w niniejszym opisie określenie „związek o aktywności skierowanej przeciw HIV” oznacza, bez konkretnych ograniczeń, jakikolwiek związek wykazujący aktywność skierowaną przeciw wirusowi HIV, na przykład związki przeciwwirusowe o aktywności skierowanej przeciw wirusowi HIV, takie jak nukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej, nienukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej, inhibitor proteazy HIV, inhibitor polimerazy DNA itp.
W ujęciu praktycznym, określenie „nukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej” obejmuje AZT, ddl, ddC, d4T, 3TC itp., określenie „nienukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej” obejmuje związki opisane w dokumencie patentowym WO 96/10019, takie jak, na przykład, 3-(5-(3,5-dichlorofenylotio)-4-izopropylo-1 (pirydyn-4-ylometylo)- 1H-imidazol-2ylopropan-1 -ol lub 2- [ 5-(3,5 -dichlorofenylotio)-1 -etylo-4-izopropylo-1 H-imidazol-2-ilo] etanol itp., a określenie „inhibitor proteazy HIV” obejmuje Saquinavir, Indinavir, Ritonavir, Nelfinavir, VX-478 itp. Do innych leków wykazujących aktywność skierowaną przeciw HIV należą, na przykład, foskamet, środek leczniczy stosowany w terapii zapalenia siatkówki oka w następstwie zakażenia wirusem cytomegalii, o aktywności inhibitora polimerazy DNA i inhibitora transkryptazy odwrotnej itp. Szczególnie korzystne są w tym przypadku aZt, ddl, ddC, 3TC, Saquinavir lub foskamet, ponieważ w działaniu łącznym z CDIMI wykazują wysoki stopień synergizmu pod względem aktywności skierowanej przeciw HTV. W szczególniejszy sposób korzystne są: AZT, ddl, ddC, Saquinavir lub foskamet, a w sposób najbardziej szczególny AZT, ddC lub Saquinavir. Najkorzystniejsze są AZT i ddC, które wyraźnie hamują pojawianie się wirusów lekoopomych.
187 925
Kompozycja przeciw HIV według niniejszego wynalazku może zapewnić skuteczne leczenie AIDS, a to ze względu na synergizm, nieobecny w przypadku stosowania pojedynczo każdego ze związków o aktywności skierowanej przeciw HIV. W szczególności, z uwagi na to, że w przypadku stosowania kompozycji przeciw HIV według niniejszego wynalazku występuje synergia aktywności skierowanej przeciw HIV, jak to przedstawiono w następujących eksperymentach, wystarczającą aktywność skierowaną przeciw HIV uzyskuje się przy stosowaniu dawek mniejszych od dawek każdego poszczególnego związku, wybranego spośród związków o aktywności skierowanej przeciw HIV, podawanego indywidualnie. Rezultatem tego jest redukcja działań ubocznych, takich jak toksyczność itp. Stosowanie kompozycji według niniejszego wynalazku, zawierającej wszystkie związki o aktywności skierowanej przeciw HIV w ilości równej dawce pojedynczego środka, skutecznie zahamowuje pojawianie się wirusów lekoopomych i w oczywisty sposób zapewnia przeprowadzenie leczenia w sposób energiczny i efektywny.
Tak więc, kompozycja przeciw HIV według niniejszego wynalazku jest skuteczną kompozycją farmaceutyczną stanowiącą lekarstwo przeznaczone do leczenia lub zapobiegania AIDS.
Wynalazek niniejszy charakteryzuje się synergicznym działaniem CDIMI w połączeniu z jednym lub większą ilością innych związków o aktywności przeciw HIV. Zgodnie z tym, wszystkie składniki aktywne można podawać jednocześnie, w postaci jednej kompozycji. Ten sam skutek daje podawanie wszystkich tych składników aktywnych osobno, w sposób ciągły i w odstępach czasu zapewniających utrzymanie działania synergicznego.
Jeśli chodzi o stosowanie kompozycji przeciw HIV według niniejszego wynalazku, to można ją bezpiecznie podawać drogą doustną lub drogą pozajelitową. W przypadku stosowania doustnego, kompozycję można podawać w postaci typowych preparatów, takich jak tabletki, granulki, proszek, kapsułki, pigułki, roztwory płynne, syrop, tabletki podpoliczkowe, tabletki podjęzykowe itp. W przypadku stosowania pozajelitowego, kompozycję korzystnie podaje się w jakichkolwiek odpowiednich postaciach, takich jak postacie do wstrzykiwania, na przykład do wstrzykiwań domięśniowych itp., czopki, wcierki przezskóme, roztwory wytwarzające parę do inhalacji itp. Szczególnie korzystne jest podawanie drogą doustną.
Kompozycję farmaceutyczną według niniejszego wynalazku można wytworzyć za pomocą zmieszania ze sobą składników aktywnych użytych w ilości skutecznej, a jeżeli to potrzebne także z udziałem dodatków medycznych odpowiadających postaci ostatecznego preparatu gotowego do podawania, takich jak nośniki, środki wiążące, środki zwilżające, środki rozsadzające, środki poślizgowe, rozcieńczalniki itp. I tak, na przykład, postacie do wstrzykiwań można wytworzyć za pomocą wyjaławiania, z użyciem odpowiednich nośników.
W praktycznym wykonaniu, jako nośników użyć można laktozy, sacharozy, glukozy, skrobi, węglanu wapnia, celulozy krystalicznej itp. Do środków wiążących należą, między innymi, metyloceluloza, karboksymetyloceluloza, hydroksypropyloceluloza, żelatyna, poliwinylopirolidon itp. Jako środki rozsadzające wymienić można, między innymi, karboksymetylocelulozę, sól sodową karboksymetylocelulozy, skrobię, alginian sodu, agar w proszku, siarczan laurylo-sodowy itp. Do środków poślizgowych należą: talk, stearynian magnezu, Macrogol itp. Jako podłoża czopkowe wymienić można masło kakaowe, Macrogol, metylocelulozę itp. W przypadku wytwarzania preparatów płynnych lub emulsji, albo postaci do wstrzykiwań, można dodatkowo wprowadzić typowe środki solubilizujące, emulgatory, stabilizatory, środki konserwujące, środki izotonizujące itp. W przypadku wytwarzania preparatów do stosowania doustnego, można dodać środki słodzące, środki aromatyzujące itp.
CDIMI, zastosowany jako składnik aktywny w kompozycji przeciw HIV według niniejszego wynalazku, można połączyć w jednym, lub większą ilością innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV.
W przypadku indywidualnego, a więc osobnego podawania CDIMI lub innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV, stosowana dawka każdego środka aktywnego wynosi zazwyczaj od 0,05 mg/dzień do 3000 mg/dzień, korzystnie od 0,1 mg/dzień do 1000 mg/dzień, a przy podawaniu drogą pozajelitową stosowana dawka wynosi od 0,01 mg/dzień do 1000 mg/dzień, korzystnie od 0,05 mg/dzień do 500 mg/dzień.
187 925
W przypadku podawania choremu kompozycji przeciw HIV według mniejszego wynalazku, dawka każdego składnika aktywnego obecnego w preparacie powinna być ustalona z uwzględnieniem wieku i masy ciała tego chorego, zaawansowania choroby, drogi podawania itp. Tym niemniej jednak, ilość każdego składnika aktywnego w składzie kompozycji może wynosić od 0,1 do 1,0-krotności dawki podanej powyżej w odniesieniu do każdego związku o aktywności skierowanej przeciw HIV, podawanego indywidualnie. Zgodnie z tym, w przypadku stosowania CDIMI łącznie z innymi związkami o aktywności skierowanej przeciw HIV, z więc w przypadku stosowania kompozycji według niniejszego wynalazku, dawka każdego składnika aktywnego może wynosić: przy podawaniu drogą doustną od 0,005 mg/dzień do 3000 mg/dzień, korzystnie od 0,01 mg/dzień do 1000 mg/dzień, a przy podawaniu drogą pozajelitową od 0,001 mg/dzień do 1000 mg/dzień, korzystnie od 0,005 mg/dzień do 500 mg/dzień. Kompozycję tę można podawać jednorazowo lub kilka razy dziennie, co pewien czas.
Przykład
Wynalazek niniejszy objaśniają szczegółowo następujące przykłady i opisy eksperymentów, których nie należy interpretować jako ograniczających zakres wynalazku.
Eksperyment 1. Synergizm aktywności skierowanej przeciw HIV.
W podłożu RPMI-1640, wzbogaconym 10% płodową surowicą cielęcą, przeprowadzono hodowlę linii ludzkich komórek T Molt-4, trwale zakażonych HIV-1 (szczep IIIB, klon 2), po czym supematant przesączono i przechowywano w temperaturze -80°C, po czym ustalono miano wirusa.
Sporządzono dwukrotne rozcieńczenia stężenia CDIMI z 10 ng/ml do 0,157 ng/ml i 0 ng/ml, oraz stężenia AZT ze 100 ng/ml do 0,4 ng/ml i 0 ng/ml. Połączenia tych dwóch leków dokonano metodą szachownicową, przy użyciu 96-dołkowych mikropłytek. Do każdego dołka 96-dołkowych mikropłytek wprowadzono 50 pl wyżej wspomnianego podłoża zawierającego 105 komórek MT-4/ml i 50 (ii dwukrotnego rozcieńczenia AZT tym samym podłożem. Po upływie 4 godzin dodano 50 pl supematantu hodowli wyżej wspomnianego HTV-1 (szczep IIIB, klon 2) i w tym samym czasie także 50 pl CDIMI w dwukrotnym rozcieńczeniu. Następnie przeprowadzono inkubację, w inkubatorze przy 5% CO2 i w temperaturze 37°C w ciągu 5 dni.
Miano wirusa w supematancie hodowli ustalono z wykorzystaniem, jako wskaźnika, aktywności wirusowej transkryptazy odwrotnej, w sposób następujący:
Do 100 ml mieszaniny reakcyjnej zawierającej 50 mM Tris-HCl, pH 8,3, 150 mM KC1, 10 mM MgCh, 0,1% Nonidet P-40, 10 mM ditiotreitolu, 5 pg/litr poli (A), 5 pg/ml (dT)i2-is i 1 pCi [3H]dTTP, wprowadzono 10 pl supematantu hodowli i całość inkubowano w temperaturze 37° w ciągu 3 godzin. Następnie, mieszaninę reakcyjną oziębiono lodem i przeniesiono, z zastosowaniem kolektora komórek na DEAE-Filtermat. Filtr przemyto 5% roztworem Na2HPO4.12 H2O i wodą, po czym dokonano pomiaru radioaktywności włączonej do DNA, przy użyciu licznika scyntylacyjnego LKB Beta Platę, w celu oznaczenia aktywności wirusowej transkryptazy odwrotnej.
Przeprowadzono trzy oznaczenia tego rodzaju i obliczono średnią wartość szybkości hamowania transkryptazy odwrotnej (w %) w zestawieniu z aktywnością enzymatyczną stwierdzoną w warunkach nieobecności CDIMI i AZT. Otrzymane wyniki przedstawiono w tabeli 1.
187 925
Tabela 1
| o o »*· | <© OT OT | n to σί OJ | <n <© cn OT | 9 9.55 : | 99.65 : | CD to 05 OJ | 99.67 : | ..... 40 O OT OT | |
| CM | o | OT | v-» | cn | b- | co | ty | ||
| o | <O | to | <o | to | to | to | to | 40 | |
| UD | OT | OT | OT | OT | 05 | OT | 05 | OT | |
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | ||
| b- | ty | OT | ty | CJ | tn | CD | to | ||
| <O | to | to | to | <O | <o | <O | UD | ||
| <N | OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | |
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | ||
| UD | <O | CM | ty | CM | CM | T- | CD | ||
| to | to | to | IO | to | to | ty | CD | ||
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | ||
| *** | OT | OT | OT | OT | OJ | OT | OT | OT | |
| ·—( | |||||||||
| ε | V· | O) | <o | *<y | |||||
| Ο) | UD | b* | to | to | tn | tn | ty | to | |
| cz | o> | • | • | « | 05 | OT OT | • | ao | |
| 1- | <Ó | OT | OT OT | OT OT | OT OT | OT | OT OT | OT | |
| c*> | OT | CD | ty | (O | tn | CD | CD | ||
| N | tO | to | to | tn | tn | O | |||
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | OT | to | ||
| < | Η | OT | OT | OT | OT | OT | Oj | OT | OJ |
| b- | v~ | CM | to | to | ty | O) | |||
| <o | to | to | ty | co | |||||
| OT | OT | o> | OT | OT | OT | a> | b- | ||
| OJ | OT | ot | OJ | O) | OT | OT | |||
| OT | tn | to | tn | CD | OT | CD | |||
| 03 | (O | to | to | tn | CD | T— | *r | ||
| o | OT | OT | OT | OT OT | OT | co | CM | CD | |
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | *rr | |||
| OT | b- | ty | b- | o | CM | UD | CM | ||
| tO | to | to | tn | OT | b- | ▼— | CO | ||
| OT | OT | OT | OT | OT | to | OT | b- | ||
| OT | OT | OT | OT | OT | OT | b- | ł | ||
| CM | OT | CM | ty | cu | rt | ||||
| b- | to | 40 | o | OT | |||||
| Cd | • | O | o | ||||||
| OT | OT | OT | OJ | b- | CJ | ||||
| OT | OT | OT | OT | b- | 1 | ||||
| UD CU | UD | CD | |||||||
| O) | UD | 2.5 | .62 | Cn | UD | o | |||
| o | Ó | O | |||||||
| (TUI/5U) ΙΙΛΙ1 ao |
187 925
Zakładając, że hamowanie wykazywane przez oba te związki o aktywności skierowanej przeciw HIV było addytywne, szybkość hamowania namnażania się wirusa obliczono dla wszystkich kombinacji stężeń zgodnie z równaniem (I):
Z = X + Y (1 - X) w którym:
Z oznacza addytywną szybkość hamowania,
X oznacza szybkość hamowania wykazywaną przez CDIMI, oraz
Y oznacza szybkość hamowania wykazywaną przez inny związek o aktywności skierowanej przeciw HIV.
I tak, na przykład, w przypadku, gdy stężenie CDIMI wynosiło 5 ng/ml i stężenie AZT wynosiło 0,8 ng/ml, wtedy wartość X wynosiła 99,63%, gdy stężenie CDIMI wynosiło 5 ng/ml i stężenie AZT wynosiło 0 ng/ml w tabeli 1, a wartość Y wynosiła 43,43%, gdy stężenie CDIMI wynosiło 0 ng/ml i stężenie AZT wynosiło 0,8 ng/ml w tabeli 1. Następnie, obliczono addytywną szybkość hamowania Z i wynosiła ona, zgodnie z równaniem (I), 99,79%.
Następnie, obliczono różnicę między wartościami zmierzonymi, podanymi w tabeli 1, a obliczonymi jak wyżej wartościami addytywnej szybkości hamowania. Otrzymane wyniki przedstawiono w tabeli 2, a wartości granic przedziału ufności (99%) przedstawiono w tabeli 3.
187 925
Tabela 2
| 100 | -0.36 | -0.37 | j -0.35 | -0.35 | r^· CM © | 0.01 | 0.06 | o | |
| 00 | O) | σ> | ęy | Q> | |||||
| CO | 00 | oo | 00 | CM | o | o | e> | ||
| d | d 1 | © 1 | d 1 | d 1 | d | © | |||
| 25 | CO | (O | r- | (O | § | ||||
| 00 | 00 | oo | 00 | CM | V | © | |||
| © | o | © 1 | o 1 | O 1 | © | d | |||
| 00 | (£> | r- | co | ||||||
| c\j | 00 | 00 | 00 | 00 | CM | 0M | o | ||
| *2 | d | © | © 1 | d 1 | O 1 | d | © | ||
| E | $ | oo | 38 | 38 | 60 | cn | § | ||
| ra c | US | © | d | d | O 1 | © | o | ||
| H | |||||||||
| N | 3.13 | -0.3 | 0.36 | •0.35 | 0.41 | 0.37 | 2.99 | 3.26 | o |
| < | |||||||||
| 1.57 | -0.24 | -0.3 | -0.29 1 | -0.19 i | r·» Cf> sr | 21.75 | 25.2 | o | |
| m | 00 | co | 00 | © | |||||
| Go GS | o | d | d | 2.0 | T— cn | 6.9 | o | ||
| 1 | 1 | I | r* | (O | (O | ||||
| 0.4 I | o | 07 | 05 | Io | CM T“ | oo CM | 2.5 | o | |
| o 1 | © | © | © | 23 | O T* | O v- | |||
| O | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| co >s. | 2.5 | .25 | 625 | 312 | 157 | o | |||
| ¢5 | ej | CS | |||||||
| (|iu/6u) | im | | ao |
187 925
Tabela 3
| 100 | -0.36 | -0.293 | -0.273 | -0.299 | -0.219 | o | co 00 o o o | o | |
| tn | co | cn | co | co | co | ||||
| 50 | CM CO | gj | τ— CO | T“ CO | τ· CN | o | CD CO o | o | |
| O | o | o | ó | o | |||||
| • | 1 | I | o | ||||||
| 3 | co | CM | cn | b- | co | co | |||
| 25 | 00 | o | co | oo | oo | ||||
| to o | CM Ó | 0.2 | 0.3 | 0.1 | CM O | h* o • | o | ||
| 1 | Ó | o | |||||||
| cn | co | cn | cn | CO | cn | ||||
| 00 | in | 00 | T“ | h- | y·· | ||||
| 12. | CM O | co o | 0.2 | 0.3 | 0.1 | co CM | in o | o | |
| ó | ó | ||||||||
| 00 | |||||||||
| cn | co | co | cn | co | cn | ||||
| Ε | o | o | 0.34 | T“ | CM | w | |||
| □) c | td | CM O | co o | 0.3 | 0Ό | CM 00 | oo oo | o | |
| ó | o | ||||||||
| Η | |||||||||
| Ν | co | 74 | 3 | r»- | co | I 72 | 587 | CM l·- | |
| CM | co | CM | CM | co | IO | o | |||
| «ó | O | o | Ó | O | CN | V“ | |||
| < | o | CM | có | ||||||
| CO | cn | cn | cn | Γ· | |||||
| τ— | l·- | co | CM | cn | |||||
| CM | CM | CM | r~ | O) | co | cn | o | ||
| O | Ó | Ó | ó | 10 | r· | Ό | |||
| 1 | a | CM | CM | ||||||
| cn | cn | cn | cn | .65 | r^· | ||||
| 80 | cn | 00 | CM | CM | CM | T“ | |||
| o | o | V“ | cn | cn | O- | o | |||
| ó 1 | o R | Ó 1 | o ó | τ— | CM cn | 54. | |||
| CO | co | co | cn | T“ | |||||
| 00 | co | co | cn | ||||||
| <d | o | 3 | .02 | Zn | o có | 00. | τ- Ο | o | |
| o | o | ó | CM | T“ | r— | ||||
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| o | 2.5 | .25 | 625 | 312 | «d | ||||
| >9. | cd | cd | |||||||
| (|iu/6u) l | W I | a □ |
187 925
W przypadku, gdy wartość zmierzona jest większa od wartości addytywnej szybkości hamowania, a mianowicie, gdy wartość ta jest większa od 0 w tabeli 3, sądzi się, że ma się do czynienia z synergią. Poziom synergii oznaczono jako całkowitą sumę wartości większych od 0 w tabeli 3.
W taki sam sposób dokonano analizy danych z wykorzystaniem wyników eksperymentów przeprowadzonych z udziałem ddl, ddC, Saquinaviru i foskametu zamiast AZT.
Dodawanie do komórek Saquinaviru przeprowadzono w takim samym czasie jak w przypadku CDIMI, gdy dokonywano zakażenia wirusem. W przypadku użycia kombinacji ddC, ddl i Saquinaviru, stężenie CDIMI mieściło się w zakresie od 5 ng/ml do 0,08 ng/ml w dwukrotnym rozcieńczeniu i 0 ng/ml, a stężenie ddC, ddl, Saquinaviru i foskametu mieściło się w zakresie od 500 ng/ml do 2 ng/ml w dwukrotnym rozcieńczeniu i 0 ng/ml.
Otrzymane wyniki analizy przedstawiono poniżej. W tabelach 4-6 przedstawiono wyniki dla ddl, w tabelach 7-9 przedstawiono wyniki dla ddC, w tabelach 10-12 przedstawiono wyniki dla Saquinaviru, a w tabelach 13-15 przedstawiono wyniki dla foskametu.
187 925
Tabela 4
| 500 | 99.15 | 98.91 | 98.94 | 98.87 | ! 98.84 1 | 98.3 | 91.19 | 50.13 | |
| 250 | 99.1 | 8.96 | 8.96 | 8.84 | 8.65 | 7.64 | 0.45 | S90 | |
| cn | cn | cn | cn | cn | oo | Ό | |||
| co | 00 | V“ | CM | co | «3· | »3· | CO | ||
| o | cn | o | cn | r— | cn | r- | co | ||
| cń | oó | cń | oó | oó | r-1 | cń | d | ||
| cn | cn | cn | cn | cn | cn | r- | co | ||
| to | cn | r- | T- | cn | co | w | co | ||
| r- | o | o | cn | co | co | o | co | ||
| c\j <3 | cń | cń | cń | oó | oó | U | CM | ||
| cn | cn | cn | cn | cn | cn | co | co | ||
| 1.25 | |||||||||
| έ σ> | 99.16 | in o ai | 8.98 | £ oó | 8.78 | 7.51 | 0.83 | 0.43 | |
| c | to | cn | cn | cn | cn | cn | r- | CM | |
| co | CM | r-. | co | co | 44 | CO | CO | ||
| TJ | to | τ· | T“ | en | cn | r- | oo | CM | |
| Vx. | en | cn | oo | oó | oó | r-l | o | (O | |
| TJ | cn | cn | cn | cn | cn | cn | co | CM | |
| oo | V | in | cn | 83 | |||||
| Τ” | cn | cn | cn | cn | in | v- | |||
| cń | oo | oó | oó | oó | r-1 | oó | uS | ||
| cn | cn | cn | cn | σ> | cn | ||||
| cn | CM | 00 | I5.2 | ||||||
| 66 | o σί | 8.9 | Γ- οό | 8.7 | 7.4 | o | |||
| oj | cn | cn | en | cn | r- | ||||
| ιη | CM | co | co | oo | 00 | CM | |||
| N | 9.0 | o cn | cn 00 | 98.1 | 8.7 | 6.6 | 7.0 | 2.5 | |
| Ο) | cn | cn | cn | cn | T“ | ||||
| τ· | co | r- | co | τ- | uO | co | |||
| to | ο | T-* | o | oo | Γ- | co | CM | o | |
| σί | cn | cn | oó | oó | iri | cń | |||
| cn | cn | cn | cn | en | cn | CM | |||
| to | 2.5 I | 25 | to <N to | 80 | to | ||||
| CS | ci | CS | CS | ||||||
| (|UI/6U) | ΙΛ1 | | Q3 |
187 925
Tabela 5
| 500 | -0.36 | -0.66 | -0.57 | -0.55 1 | -0.52 | 0.47 | 26.48 | o | |
| § | •ę-“ co | w in | m =4? | h- g- | s | CM CM | tn | O | |
| to | d | d 1 | d | d I | o 1 | d | 22 | ||
| to to | ą? CM | CM | 7 co | l·- CM | 8 | to cn | .67 | o | |
| O 1 | o | o | O | © | d | 28 | |||
| U) | tn | tn | tn | co | 0.63 | V | |||
| to <3 | τ- ο | co o 1 | CM ó 1 | CM o 1 | Ό- d 1 | 10.4 | o | ||
| s· | 31.25 | ||||||||
| g O) c | in | (O | co | 7“ | tn | tr | |||
| -0.0 | -0.2 | -0.2 | o 1 | © | tn d | 27.1 | o | ||
| Ό | V· d | -0.24 | -0.3 | -0.21 | -0.29 | 0.65 | 13.07 | o | |
| Ό | |||||||||
| CM | to | CM | to | co oo | |||||
| Oo | o | o | O | to | o | ||||
| d | 1 | d 1 | o | d | ΌΓ Ό- | ||||
| to | tn | h- | r- | cn | Oi | ||||
| T~ | CM | 0.1 | CM | O | o | ||||
| d | d | o | d | ||||||
| s | f | 1 | 1 | to | |||||
| to | 80* | .22 | CM | .28 | .14 | 49 | 66 | o | |
| O 1 | o | c? 1 | O | O 1 | d | oo | |||
| O | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| to | 2.5 | 25 | 625 | s to | .08 | to | |||
| ci | to | to | to | ||||||
| (|iu/6u) | | W 1 | α o |
187 925
Tabela 6
| 500 | -0.206 | ! -0.583 | -0.185 | -0.216 | -0.314 | o | 23.499 | O | |
| r- | TT | cn | cn | ca | 1» | ||||
| § | δ o | V“ cn Ó | h- M Ó | cn o o | 8 o | o | 8 s< | o | |
| • | 1 | 1 | 1 | 1 | T— | ||||
| 163 | CM | w | 219 | CM O | oo in cn | V— cn ca | o | ||
| >4 | ó | O | o | d | O | r- | CM | ||
| o | CM | ||||||||
| U) | 47 | 17 | |||||||
| c\i | o | CM | o | o | O | o | o | ||
| M5 | O | T | |||||||
| o | |||||||||
| E~ | $ | 34 | τ- Ο | T— ω | cn | 05 | |||
| Oł | >< | o | CM | T- | o | o | .53 | uo | o |
| c | ΓΊ | O | o | d | 00 | ||||
| 1 | » | 1 | O | ||||||
| O) | r- | cn | |||||||
| T3 | <o >> | 0.11 | o o o | o | o | s o | .470 | to o T— | o |
| n | 1 | o | ca | ||||||
| 06 | 64 | in ▼— | |||||||
| «0 | o | o | o | o | o | V— | <o | o | |
| o | o | ||||||||
| 1 | d | Tf | |||||||
| O) | Tf | cn | m | cn | |||||
| o | co | cn | T— | o | |||||
| N· | o | o | o | o o | 0.1 | K o> | CM | o | |
| 1 | » | o | CM | ||||||
| T— | 1» | CM | |||||||
| r- | |||||||||
| «Ν | o | o | o ó | o | o | .28 | Tf r- | o | |
| 1 | o | cn | |||||||
| O | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| U) | 2.5 | 25 | 625 | C*5 | & | 80 | co | ||
| ς> | <3 | <5 | |||||||
| (|ui/Bu) | w 1 | a o |
187 925
Tabela 7
| 500 | 99.12 | 98.87 | 98.96 | 98.85 | 98.84 | 98.67 | 98.68 | 98.66 | |
| oo | OJ | (O | 05 | IA | T- | co | |||
| o | 05 | 00 | r- | (O | to | CM | |||
| 05 | 00 | oó | oó | OÓ | oó 05 | oó | OÓ | ||
| 05 | 05 | 0» | 05 | 05 | 05 | 05 | |||
| 125 | 9.14 | 9.05 | 8.88 | 8.76 | tO co | | 98.7 | 8.59 | 3.25 | |
| 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 00 | |||
| 62.5 | tO | 05 | 00 | r- | to | 05 | (O | ||
| O | O | oo | to | CM | to | ||||
| 05 | 05 | 05 | oó | oó | oó 05 | OÓ | CM | ||
| 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | to | |||
| Ε ty) | 25 | in V— | 02 | 05 | τ- Ο) | 88 | 57 | 36 | $ |
| 05 | 05 | 98 | oó | oó | oó | ty | CM | ||
| c U | c*l | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | ”3· | |
| CO | 00 | 00 | tn | ||||||
| Ό | tc | o | O) | b> | 00 oó | 05 | o | to | |
| V*. | 66 | 05 | oó | oó | ty | o | oó | ||
| Ό | 05 | 05 | 05 | O) | 05 | 05 | T~ | ||
| tO | 00 | 66 | 00 | oo | CM | CM | |||
| oo | o | 05 | 00 | tO | 05 | 05 | |||
| 05 | 00 | 00 | oó | oó | ty | 05 | ty | ||
| 05 | O) | 05 | 05 | 05 | 05 | OO | |||
| r- | in | (£5 | 'r· | to | *?— | 00 | to | ||
| T | 05 | O) | 00 | to | *3· | in | co | ||
| 05 | OÓ | OÓ | oó | oó | ty | CM | ty | ||
| 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | h- | T— | ||
| .04 | tO | T- | OO | to | oo | ||||
| om | 05 | 05 | co | to | C»5 | o | CM | ||
| 66 | σ> | OÓ | oó | oó | to | 05 | to | ||
| 05 | 05 | O) | 05 | CO | |||||
| r- | OO | CM | T— | I.88 | |||||
| o | σ> | 05 oó | OO OÓ | OO OÓ | 8.6 | 5.4 | O | ||
| o | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | ||||
| to | 2.5 | 25 | 625 i | 313 | 16 I | § | «i | ||
| <55 | <2> | CS | |||||||
| (łUi/Bu) i | W l | α o |
187 925
Tabela 8
| 500 | -0.87 | CM Ί— τ- ι | -1.02 i_ | co Τ- ι | τ— | I -1.27 | -0.01 | Ο | |
| § | © | g | CM | σ> τ— | R | ιη m | © | ||
| Ν | • | ( | Τ 1 | Τ- ι | 1 | Τ- ι | ο | ||
| C\j | Τ“ r- | οο r- | 00 © | § | τ- Ο | 00 ιη | .03 | ο | |
| ο | ο | ο | r- | © | ιη | ||||
| 1 | ( | 1 | β | I | Τ- | ||||
| 62.5 ί | -0.5 | -0.53 | 1 -0.55 | -0.69 | -0.82 | 0.41 | 34.93 | ο | |
| .25 | |||||||||
| ε σ) Ε, | 34 | 39 | 46 | 42 | 33 | © ν— | .33 | θ | |
| 31. | Ο 1 | Ο 1 | Ο 1 | Ο | © « | Τ“ | 53. | ||
| ο | |||||||||
| Ό | & | 03 | <\ι τ— | (D ’Γ· | .26 | ο | 65 | © | ο |
| ο | © I | © I | Ο 1 | τ- | © ιο | ||||
| Ό | |||||||||
| Ο) | .06 | CM | ”3· | ιη | © | ||||
| 0θ | τ- | οο | ΟΜ | ο | |||||
| ό | © | Ο I | © 1 | ο I | |||||
| (Ο | h- | C0 | C0 | ιη | , | ||||
| ο | ο | τ- | τ— | οο | (Ο | ο | |||
| ο I | ο I | ο | ό ι | Ο ι | τ— | 56 | |||
| CN | CO | 00 | CM | rp | |||||
| Ν | ο | ο | ο | Ο | (Ο | ο | |||
| ο 1 | Ο 1 | ο | ό I | © • | σ | Ύ“ © | |||
| ο | ο | ο | ο | ο | Ο | ο | Ο | ο | |
| 2.5 | 25 | 625 | cn | <ο | 80 | Ci | |||
| *< | ς> | ς» | <5> | <5 | |||||
| (|ω/βιι) ι | W 1 | α □ |
187 925
Tabela 9
| 500 | -0.664 | -0.786 | CM cn co o D | -1.079 | -0.832 | -1.244 | O | o | |
| to | co CM | 8 | CM to | to CM | $ | CO «e | co | ||
| 50 to | CO o | cn o | Ό· d | to O | cn o | T- | s | o | |
| 1 | 1 | 6 | 1 | » | © | ||||
| to | to | o> | CM | 09 | CM | CO | LO | ||
| o | to | O | O | to | |||||
| to | (O | co | CO | CO | to | CM | » | o | |
| *-» | o 1 | o | O | d | ó 0 | O P | Ό· | ||
| to | cn | o> | to | CO | CO | CO | |||
| to | to | CD | 7- | CM | σ> | ||||
| to to | CM o 1 | © 1 | τ- Ο 1 | -0.6 I | -0.0 | o | 34.4 | o | |
| lo | co | co | CM | co | |||||
| Ε | to | co | 00 | Τ» | ćó | LO | |||
| Si | O | 7“ | co | T- | o | cn | CM | o | |
| e, O | to | Ó 1 | o | d 1 | d 1 | o | 53 | ||
| o> | to | ||||||||
| •o | to | o | o | o | o | o | .572 | 8.85 | o |
| XI | to | ||||||||
| o> | CM | (O | |||||||
| to | 04 | o | o | 90 | o | .56 | o | ||
| o | o | CM | |||||||
| 1 | 1 | r- | h* | ||||||
| cn | CO | CM | |||||||
| CN | 00 | ||||||||
| o | 7“ | o | o | o | o | LO | o | ||
| o | o | ęy | |||||||
| 1 | 1 | *cy | |||||||
| to | o | o | o | o | o | 403 | .618 | o | |
| d | 47 | ||||||||
| to | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| to | 2.5 | 25 | 625 | to to | to | 08 | to | ||
| to | to | to | to | ||||||
| (|Ui/Bu) 1 (ΛΙ i α o |
187 925
Tabela 10
| 1 | 99.05 | 98.95 | 98.79 | 98.71 | 98.56 | 98.41 | 98.45 | 93.95 | |
| 250 | 06 | 00 oo | 72 | 55 | 54 | i— | CM | ||
| oJ | oó | oó | oó | oó | oó | oó | 3 | ||
| σ> | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | O) | |||
| 125 | 9.04 | 98.8 | 8.85 | 8.63 | 8.69 | 8.75 | 8.43 | 05 <q- eó | |
| σ> | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | |||
| tn | r- | CM | CO | 00 | tn | O) | T“ | ||
| V | 05 | CO | tn | 00 | tn | ||||
| Λ | N | 99. | 66 | OÓ | OÓ | oó | oó | OÓ | V“ |
| Ε | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | |||
| c | 25 | ||||||||
| CM | 93 | 58 | ty | 72 | <£> | 3 | 33 | ||
| 05 | oo | oó | có 05 | oó | 98 | oó | CD | ||
| > | tO | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 00 | ||
| c | 00 | (£5 | 00 | 05 | CM | ||||
| to | 05 | r*. | r*. | m | t£5 | CM | |||
| 66 | od | oó | oó | 98 | oó | ty | r>- | ||
| □ | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | ||||
| σ | |||||||||
| rt | |||||||||
| w | «0 | CM | ,07 | T“ σ> | V*· (O | .67 | 54 | .77 | .48 |
| σ> σ> | I 99. | oó | oó | oo | 00 | r*· | V“ | ||
| 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | CM | ||||
| CM | 90 | 73 | 98.6 | 56 | CM | t£5 | 49 | ||
| 66 | 99. | 98. | 98. | 98 | 97. | CM 0 | |||
| T“ | tn | 00 | r*· | r— | co | ||||
| <N | CM | C5 | 00 | ty | co | o | 05 | 05 | |
| 05 | 05 | co | oó | oó | oó | Ύ— | |||
| O) | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | |||
| w | *3“ | 8.77 | et | CO | |||||
| o | CM | T“ | o | r>- | 05 | O | |||
| 05 | 05 | 05 | oó | t£5 | V* | ||||
| 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 05 | 1 | |||
| to | 2.5 | 25 | 625 | to ł-. to | £ | 05 | to | ||
| C5 | <3 | to | |||||||
| (|iu/Su) l | W I | α o |
187 925
Tabela 11
| 500 | -0.9 I | τ- ι | in T“ τ- ι | -1.22 | -1.36 | Tf a | 4.57 | o | |
| cn © | CM | 00 | cn | T- | |||||
| § | O 1 | CM τ- ι | co | co • r* 1 | Tf 1 | co •ti· | o | ||
| •sr | σ> | cn | co | IO | |||||
| σ> | r- | o | CM | CM | o | o | o | ||
| >»» | O 1 | 1 | T- | r- | T“ | ui | |||
| E αϊ | 62.5 | o | -0.73 | V O 1 | -1.27 | -1.31 | -0.89 | 7.08 I | o |
| c | u> | ||||||||
| U | 0.78 | 0.95 | 1.29 | 1.13 | t— r- | 86 Ό | 2.36 | o | |
| *o | 1 | T— | |||||||
| > | |||||||||
| m | |||||||||
| c | 16 | cn | 00 | h- | m | w | |||
| — | (O © | 1^. d | 6Ό | 0.9 | 0.8 | 0.5 | cn tri | o | |
| Z3 | I | 1 | CM | ||||||
| σ | |||||||||
| ni | |||||||||
| W | 00 | CM | .25 | .34 | .42 | .32 | 94 | CO -r- | o |
| o | O 1 | O 1 | O | O * | o | ||||
| co | to | en | <± | CM | Tf | co d | |||
| N- | o ó | o | CM | r- | T“ | co | o | ||
| d | d | o | d | V— | s | ||||
| T- | |||||||||
| to | ^r | CM | to | Tf | ti· | ||||
| o | o | CO | o | r— | o | ||||
| d 1 | o I | 1 | © > | CM cn | |||||
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| Ul | 2.5 | 1.25 l | 0.625 | 0.313 | 0.16 | 0.08 | |||
| (|Ul/Bu) | | ΙΛΙ I | Ω O |
187 925
Tabela 12
| 500 | -0.515 | -0.769 | -0.996 | -1.117 | -0.975 | -0.629 | 4.1588 | © | |
| CM | CM | to | (O | cn | |||||
| cn to | § | S | b* V | m o | o co | V- 00 | o | ||
| d | d | r· | 7” | T“ • | |||||
| 1 | 1 | θ | β | B | |||||
| to | co co | 00 | to o | 02 | .87 | co cn | to | ||
| cm | oo | oo | oo | r* | ’ί | o | |||
| d | o | o | d | © | d | ŁO | |||
| 1 | 1 | 1 | |||||||
| 62.5 | T— | to | cn | co | to | co | |||
| Τ | -0.64 | d | -0.59 | -0.83 | -0.92 | -0.37 | 6.56I | o | |
| rai | |||||||||
| c | y·} | co | «3· | cn | cn | ||||
| k_ | cm | to | o> | 1.08 | cn | oo | to | ||
| w © | co d | 8Ό | 0.6 | o | CD O | o | |||
| > | 1 | 0 | V | ||||||
| <0 | |||||||||
| c | 3· | cn | cn | CM | -0.66 | in | cn | ||
| <O | CO | *3· | co | CM | co | ν | |||
| D | <Q· O | -0.5 | to d | OO d 1 | τ- Ο 1 | 25.3 | o | ||
| σ | |||||||||
| « | cn | co | τ- | cn | |||||
| w | T | (O | co | <3- | |||||
| to | o | o | o | O | o | .50 | O | o | |
| o | d 1 | có | |||||||
| 1 | o | to | |||||||
| cn | to | ||||||||
| to | co | tn | |||||||
| o | o | o d 1 | o | o | .36 | 7.9 | o | ||
| o | cn | ||||||||
| CM | r- ŁO | T· CO | |||||||
| CM | o | o | O o | o | o | τί CO | 3.5 | o | |
| d | oo | ||||||||
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| to | 2.5 | 25 | 625 | to >— to | 80 | to | |||
| to | to | to | to | ||||||
| (l lu/Bu) 1 ΙΛΙ 1 | α o |
187 925
Tabela 13
| o o Ό | 98.52 | cn co co OT | M- CO co CD | 98.52 | 86‘96 | 96.91 | 69.91 | cn CS co co | |
| CM | co | <o | co | CS | in | co | |||
| Ci | IO | b- | <d | CM | o- | cn | b- | ||
| to <N | CS | GO | 98 | bi | co | co | co | tn | |
| cn | O) | cn | cn | cn | co | b- | |||
| w | co | a | co | b- | co | a> | to | ||
| to | co | co | co | cn | tn | b- | |||
| <N >— | 98 | 98. | 86 | 96. | 92. | 90. | cn CO | TT IO | |
| o* | TT | co | co | co | co | CO | CM | ||
| to | TT | b~ | V- | o | cn | b- | |||
| c\i | co | CO | co CD | in | T- | b·- | T | O | |
| to | OT | OT | cn | cn | co | co | |||
| z—\ t—4 | 25 | .71 | b- b- | tt | in v— | I .61 | .23 | .02 | (O CM CO |
| ΕΞ | CD | co | co | in | CM | ||||
| cn | co | o | OT | cn | cn | CS | b- | TT | |
| c | |||||||||
| *»—' | ID | CM | co | <o | CD | TT | CO | ||
| 4-* | co | cn | o | CM | IO | (O | co | O | |
| O | • | IO | • | - | |||||
| c | V— | co | OT | co | CM | co | to | co | |
| k. | σ> | cn | ot | cn | (D | co | co | ||
| 0] | |||||||||
| o w | IO | co | co | co | CM | io | |||
| cn | o | TT | in | 'T | co | ||||
| 0 | co | co | σ> | cn | CM | CM | co | ó | to |
| cn | cn | cn | to | CM | CM | ||||
| co | OT | CO | ID | cn | cn | IO | |||
| b- | cn | cn | o | o | |||||
| V | co | co | 98 | CM | b- | ó | |||
| cn | cn | cn | co | to | |||||
| GO | CD | CM | O | cn | b- | ||||
| b- | cn | CO | CM | co | CM | to | co | ||
| c\j | o | CD | có | CM | b- | cn | V | IO | |
| cn | cn | cn | CD | tt | co | CM | -ł- | ||
| CM | co | cn | CD | cn | T | ||||
| ID | co | o> | b- | o | <n | Ύ— | |||
| c | CO | CO | b- | y- | Tf | CO | O) | o | |
| cn | cn | cn | cn | co | co | ||||
| to C\l | to | CO | b. | ||||||
| o | to | CM | »— | to | |||||
| to | to | co | V— | o | |||||
| ci | ó | O | |||||||
| (Tuj/bu) ι ιλι ι ao |
187 925
Tabela 14
| 500 | | -1.26 | -0.88 | ty o « | 1 -0.16 | 7.46 | 7.55 | ty OT CU | o | |
| 250 | -1.05 | b- co ó 1 | Ύ““ σ> ό 0 | -0.33 | 12.05 | 9.46 | ty LO CD | o | |
| UD cu | co co ó | 0.58 | b- o | 3.08 | τ- Ο CU | CD <<r ó | CD tr ó | o | |
| < | 1 | CU | CU | CU | |||||
| 62.5 | -0.68 | -0.26 | o | 0.05 | 29.94 | 27.42 | -16.89 ! | o | |
| LO | <D | o> | b- | cn | CD | ||||
| <—1 ε | CU | 0.3 | 6 | 0.2 | CO o | ty CD | 6.7 | ty ty | o |
| Ο) | co | < | 1 | CU | v— | ||||
| c | |||||||||
| +-> | CU | σ> | b | co | OT | ||||
| υ | <o | io | co | CO | ID | IO | o | ||
| c u | Ó • | 6 | O 1 | Ύ““ 1 | CO | b | σ> 1 | ||
| co | |||||||||
| υ | .22 ’ | ||||||||
| w | CD | io | LO | co | CO | LO | |||
| 0 | co | KT | CU | CD | co | o | CO | ||
| • | o | ||||||||
| O 1 | o | O | 1 | CU | CU | 1 | |||
| ty | CD | cn | b cn | cn | co | ||||
| O | ty | ld | CU | to | co | o | |||
| V | o « | o | o | o | CD | co | CU | ||
| <D | LO | b | ty | co ro | |||||
| cu | o o 1 | 0.3 | 0.3 | co o t | 2.0 | -5.1 | -10.: | o | |
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| 1.25 | UD | CO | b | ||||||
| o | UD | UD CU | CU to | co | LT) | Cj | |||
| o | o | o | |||||||
| (fiu/eu) i w i a o |
187 925
Tabela 15
| z—> r—I ε cn c <D C V (0 O 0 0 | 1- 1 500 | -0.566 | o | -0.06 | o | 2.9368 | 1 > 4.9029 1 | o | o |
| 1 | 250 | o | o | o | o | 7.5525 | o | 1.1641 | o | |
| 125 | o | o | o | o | 14.917 | 0.4024 | 0.0742 | o | |
| I i 62.5 | o | o | o | o | 16.242 | 19.53 | o | o | |
| 31.25 I | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| o | o | o | o | o | o | o | o | ||
| Co CO | o | o | o | o | o | o | o | ||
| o | 0.0945 | o | o | o | o | o | o | ||
| CM | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| O | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| o | o | 2.5 | 1.25 | 0 625 | co co <s | 0. 157 | Cż | ||
| (τω/Bu) ι ιλι ι ao |
187 925
Wszystkie analizy danych przeprowadzono z wykorzystaniem oprogramowania Mac Synergy II soft [M.N. Prichard i C. Shipman, jr.., Antiviral Res., 14, 181 - 206 (1990)]. Zgodnie z podręcznikiem, poziom synergii oszacowano w sposób następujący: gdy poziom synergii wynosi 25 - 50, synergia jest niewielka, ale znacząca (+), gdy poziom synergii wynosi 50 - 100, synergia jest znacząca (++) i gdy poziom synergii wynosi ponad 100, wtedy synergia jest bardzo wysoka (+++).
Poziom synergii w obrębie granic przedziału ufności (99%) i wyniki oszacowania przedstawiono w tabeli 16.
Tabela 16
| Związek o aktywności skierowanej przeciw HIV | Poziom synergii | Synergia |
| CDIMI + AZT | 405 | + + + |
| CDIMI + ddl | 163 | + + + |
| CDIMI + ddC | 341 | + + + |
| CDIMI + Saquinavir | 314 | + + + |
| CDIMI + foskarnet | 76 | + + |
Tabela 16 uwidacznia bardzo wysoką synergię wykazywaną przez CDIMI użyty w kombinacji z innymi związkami o aktywności skierowanej przeciw HiV.
Eksperyment: 2. Cytotoksyczność i hamowanie wzrostu.
Do przeprowadzenia testu cytotoksyczności i testu hamowania wzrostu użyto 96-dołkowych mikropłytek płaskodennych. Sporządzono roztwory CDIMI o stężeniu od 50 pg/ml do 0,78 g/ml w dwukrotnym rozcieńczeniu i 9 g/ml, oraz roztwory AZT o stężeniu od 200 g/ml do 0,18 g/ml w dwukrotnym rozcieńczeniu i 0 ng/ml. Oba te leki połączono ze sobą metodą szachownicową.
Test cytotoksyczności.
Przeprowadzono hodowlę komórek CEM, lub komórek U937, w podłożu RPMI-1640, wzbogaconym 10% płodową surową cielęcą. Komórki wprowadzono do wszystkich dołków 96-dołkowej mikropłytki płaskodennej w ilości 1 x 104 komórek/dołek, po czym do każdego dołka dodano, zgodnie z powyżej opisanym sposobem postępowania, CDIMI i AZT w rozcieńczeniu w takim samym podłożu. Następnie płytki inkubowano w inkubatorze przy 5% CO2, w temperaturze 37°C, w ciągu 3 dni, po czym do wszystkich dołków dodano po 5 mg/ml MTT [bromku 3-(4,5-dimetylotiazol-2-ilo)-2,5-difenylotetrazoliowego] i 30 pl PBS i przeprowadzono inkubację w ciągu 1 godziny. W trakcie tej inkubacji, komórki przeżywające redukowały MTT do nierozpuszczalnego formazanu. Pobrano po 150 pl supematantu hodowli ze wszystkich dołków i następnie dodano po 150 pl roztworu (złożonego z izopropanolu zawierającego 10% Triton X-ł00 i 0,4% HC1). Formazan przeprowadzono do roztworu za pomocą wytrząśnięcia i przeprowadzono pomiar OD560 przy użyciu OD 690 jako odniesieniowej długości fali. Obliczono wartość 50% stężenia cytotoksycznego (CC50) i naniesione na wykres dane uwidoczniono na fig. 1 i na fig. 2. Figura 1 przedstawia wyniki otrzymane dla komórek CEM, a fig. 2 przedstawia wyniki otrzymane dla komórek U937.
Test hamowania wzrostu komórek.
Przeprowadzono hodowlę komórek CEM, lub komórek U937, w podłożu RPMI-1640, wzbogaconym 10% płodową surową cielęcą. Komórki wprowadzono do wszystkich dołków 96-dołkowej mikropłytki płaskodennej w ilości 1 x 104 komórek/dołek, po czym do każdego dołka dodano, zgodnie z powyżej opisanym sposobem postępowania, CDIMI i AZT w rozcieńczeniu w takim samym podłożu. Następnie płytki inkubowano w inkubatorze przy 5% CO2, w temperaturze 37°C, w ciągu 5 godzin, po czym do wszystkich dołków dodano po 0,2 pCi [3H]tymidyny i przeprowadzono inkubację w ciągu 24 godzin. W trakcie tej inkubacji, komórki przeżywające redukowały MTT do nierozpuszczalnego formazanu. Komórki zebrano przy użyciu kolektora komórek na filtr DEAE. Zmierzono radioaktywność włączoną
187 925 do komórek przy użyciu licznika scyntylacyjnego Beta Platę w celu określenia wzrostu komórek. Obliczono pobór [3H]tymidyny dla 50% stężenia hamującego (IC 50) i naniesione na wykres dane uwidoczniono na fig. 3 i na fig. 4. Figura 3 przedstawia wyniki otrzymane dla komórek CEM, a fig. 4 przedstawia wyniki otrzymane dla komórek U937.
Figury 1-4 pokazuje że kombinacja CDIMI z AZT nie przejawia działania synergistycznego zarówno pod względem cytotoksyczności jak i hamowania wzrostu komórek.
Eksperyment 3. Tłumienie pojawiania się odmian lekoopomych.
W podłożu RPMI-1640, wzbogaconym 10% płodową surowicą cielęcą, przeprowadzono hodowlę linii ludzkich komórek T Molt-4, trwale zakażonych HIV-1 (szczep IIIB, klon 3), po czym supematant przesączono i przechowywano w temperaturze -80°C, po czym ustalono miano wirusa.
Do każdego dołka 12-dołkowych płytek wprowadzono po 1 ml powyższego podłoża zawierającego 106 komórek M 8166, po czym dodano 100 μΐ powyższego HIV-1 (szczep IIIB, klon 3) i całość inkubowano w ciągu 2 godzin w celu zakażenia komórek wirusem. Komórki przemyto wyżej wspomnianym podłożem, po czym do każdego dołka dodano po 4 ml podłoża zawierającego CDIMI lub inne związki o aktywności skierowanej przeciw HIV, same lub w kombinacji, i przeprowadzono inkubację w inkubatorze przy 5% CO2, w temperaturze 37°C. CDIMI dodawano w stężeniu wynoszącym 1 ng/ml, a ddC dodawano w stężeniu wynoszącym, odpowiednio, 50 ng/ml. Takich samych stężeń użyto w przypadku dodawania kombinacji omawianych związków. Dwa razy na tydzień dokonywano przesiewu hodowli i po zaobserwowaniu namnażania się wirusa, stężenie związku o aktywności skierowanej przeciw HIV podwojono. W przypadku, gdy nie stwierdzono namnożenia się wirusa, stężenie leku utrzymywano na poziomie takim samym, jak w ostatniej hodowli.
Miano wirusa ustalono z wykorzystaniem jako markera aktywności wirusowej transkryptazy odwrotnej, w sposób następujący.
Do 100 ml mieszaniny reakcyjnej zawierającej 50 mM Tris-HCl, pH 8,3, 150 mM KC1, 10 mM MgCh, 0,1% Nonidet P-40, 10 mM ditiotreitolu, 5 pg/litr poli (A), 5 pg/ml (dT^-is i 1 pCi [3H]dTTP, wprowadzono 10 pl supematantu hodowli i całość inkubowano w temperaturze 37° w ciągu 3 godzin. Następnie, mieszaninę reakcyjną oziębiono lodem i przeniesiono, z zastosowaniem kolektora komórek, na DEAE-Filtermat Filtr przemyto 5% roztworem Na2HPO4.12 H2O i wodą, po czym dokonano pomiaru radioaktywności włączonej do DNA, przy użyciu licznika scyntylacyjnego LKB Beta Platę, w celu oznaczenia aktywności wirusowej transkryptazy odwrotnej.
W przypadku zaobserwowania namnażania się wirusa, wirusy wyodrębniono i w zwykły sposób zbadano wrażliwość na każdy z badanych składników aktywnych. Otrzymane wyniki przedstawiono w tabeli 17.
Tabela 17
| Związek o aktywności skierowanej przeciw HIV | Po ilu tygodniach pojawiły się oporne mutanty | Stosunek oporności w porównaniu ze szczepem macierzystym |
| CDIMI | po 4 tygodniach | 10 razy |
| ddC | po 1 tygodniu | 20 razy |
| CDIMI + ddC | po ponad 5 tygodniach | - |
Tabela 17 uwidacznia, że w przypadku użycia kombinacji złożonej z ddC i CDIMI odmiana oporna nie występuje.
Eksperyment 4. Powrót do wirusa wrażliwego na lek przez kombinację mutacji lekoopomych.
Na drodze in vitro mutagenezy w obrębie cząsteczki cDNA klonu NL432 HIV, otrzymano różne zmutowane klony genu transkryptazy odwrotnej, znane jako mutanty oporne na CDIMI lub mutanty oporne na AZT. cDNA mutantowych klonów transfekowano do komórek SW480. Utworzonymi mutantami wirusów zakażono komórki MT-4 stosując taki sam sposób postępowania jaki podano w opisie eksperymentu 1, w obecności leku. Po upływie 4 dni, zba187 925 dano namnażanie się wirusa, z wykorzystaniem aktywności transkryptazy odwrotnej jako markera. Obliczono 50% zahamowanie namnażania się wirusa (EC50) i 90% zahamowanie namnażania się wirusa (EC90) Otrzymane wyniki przedstawiono w tabeli 18.
Tabela 18
| Wirus | CDIMI | AZT | ||
| EC50 (ng/ml) | EC90 (ng/ml) | EC50 (ng/ml) | EC90 (ng/ml) | |
| NL432 (szczep dziki) | 0,31 | 1,1 | 1,2 | 5,6 |
| Y181C | 4,2 | 18 | 0,9 | 3,6 |
| F227C | 2,4 | 9,8 | 0,14 | 1,1 |
| L2341 | 6,8 | 14 | 0,78 | 3,0 |
| VI06 A + F227L | 117 | 310 | 0,58 | 6,0 |
| D67N + K70R | 0,31 | 1,0 | 2,0 | 32 |
| T215Y | 0,17 | 0,4 | 5,6 | 37 |
| T215Y + L234I | 0,69 | 2,7 | 1,6 | 6,8 |
Szczepy Y181C, F227C, L234I iV106A + F22iL, związane z opornością na CDIMI, były wrażliwe na AZT. Na odwrót, wrażliwość klonów opornych na AZT, a mianowicie klonów szczepów D67N + K70R i T215Y na CDIMI była równoważna wrażliwości szczepu dzikiego. Tak więc, CDIMI i AZT nie wykazują oporności krzyżowej.
Szczep T215Y + L234I wykazujący zarówno oporną na AZT mutację T215Y, jak i oporną na CDIMI mutację L234I był wrażliwy na CDIMI i AZT w takim samym stopniu, jak szczep dziki, co wskazuje na powrót szczepu opornego do szczepu wrażliwego. Ten uzyskany in vitro wynik pokazuje, że pojawienie się odmian opornych tak na CDIMI jak i na AZT jest mało prawdopodobne u zakażonych chorych, którym podaje się równocześnie CDIMT i AZT.
Preparat 1. Granulki.
Granulki wytworzono za pomocą jednolitego zmieszania ze sobą wszystkich następujących składników, a następnie fluidyzacyjnego granulowania, wysuszenia i przesiania.
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIV, znamienna tym, że zawiera skuteczną ilość 2-karbamoiloksymetylo-5 -(3,5 -dichlorofenylotio)-4-izopropylo-1 -(pirydyn-4-ylo)metylo1H-imidazolu lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli i skuteczną ilość jednego lub większej ilości innych związków o aktywności skierowanej przeciw HIV obejmujących nukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej, nienukleozydowy inhibitor transkryptazy odwrotnej i/lub inhibitor proteazy HIV.
- 2. Kompozycja przeciw HIV według zastrz. 1, znamienna tym, że jako związki o aktywności skierowanej przeciw HIV zawiera ddi, ddC, Saquinavir i/lub foskamet.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8256396 | 1996-04-04 | ||
| JP8513296 | 1996-04-08 | ||
| PCT/JP1997/000812 WO1997037657A1 (en) | 1996-04-04 | 1997-03-14 | Anti-hiv composition containing imidazole derivative |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL329174A1 PL329174A1 (en) | 1999-03-15 |
| PL187925B1 true PL187925B1 (pl) | 2004-11-30 |
Family
ID=26423589
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL32917497A PL187925B1 (pl) | 1996-04-04 | 1997-03-14 | Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIV |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6083958A (pl) |
| EP (1) | EP0906756A4 (pl) |
| JP (1) | JP3272369B2 (pl) |
| KR (1) | KR100310888B1 (pl) |
| CN (1) | CN1111406C (pl) |
| AU (1) | AU712071B2 (pl) |
| BR (1) | BR9708592A (pl) |
| CA (1) | CA2250844C (pl) |
| MX (1) | MXPA98008158A (pl) |
| NO (1) | NO984616L (pl) |
| PL (1) | PL187925B1 (pl) |
| TW (1) | TW477701B (pl) |
| WO (1) | WO1997037657A1 (pl) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR9911457A (pt) * | 1998-06-24 | 2001-12-11 | Univ Emory | Uso de 3'-azida-2', 3'-dideoxiuridina em combinaçãocom drogas anti-hiv adicionais para a manufaturade um medicamento para o tratamento de hiv |
| GB9909154D0 (en) * | 1999-04-22 | 1999-06-16 | Nippon Glaxo Limited | Pharmaceutical formulation |
| HUP0301713A3 (en) * | 2000-06-13 | 2005-04-28 | Shionogi & Co | Pharmaceutical compositions containing propenone derivatives and their use |
| WO2005016912A1 (en) * | 2003-08-19 | 2005-02-24 | Pfizer Inc. | An efficient microbial preparation of capravirine metabolites m4 and m5 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2032259A1 (en) * | 1989-12-18 | 1991-06-19 | Wayne J. Thompson | Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids |
| IL99843A0 (en) * | 1990-11-01 | 1992-08-18 | Merck & Co Inc | Synergistic combination of hiv reverse transcriptase inhibitors |
| TW235963B (pl) * | 1992-01-16 | 1994-12-11 | Shionogi & Co | |
| KR100387157B1 (ko) * | 1994-09-26 | 2003-09-29 | 시오노기세이야쿠가부시키가이샤 | 이미다졸유도체 |
-
1997
- 1997-03-14 KR KR1019980707756A patent/KR100310888B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1997-03-14 CN CN97195090A patent/CN1111406C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-03-14 AU AU19407/97A patent/AU712071B2/en not_active Ceased
- 1997-03-14 US US09/155,655 patent/US6083958A/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-03-14 CA CA002250844A patent/CA2250844C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-03-14 EP EP97907315A patent/EP0906756A4/en not_active Withdrawn
- 1997-03-14 PL PL32917497A patent/PL187925B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1997-03-14 WO PCT/JP1997/000812 patent/WO1997037657A1/ja not_active Ceased
- 1997-03-14 JP JP.3603697A patent/JP3272369B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-03-14 BR BR9708592A patent/BR9708592A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-03-14 MX MXPA98008158A patent/MXPA98008158A/es not_active IP Right Cessation
- 1997-04-02 TW TW086104234A patent/TW477701B/zh not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-10-02 NO NO984616A patent/NO984616L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MXPA98008158A (es) | 2002-02-08 |
| KR20000005115A (ko) | 2000-01-25 |
| CA2250844C (en) | 2002-09-10 |
| EP0906756A1 (en) | 1999-04-07 |
| AU712071B2 (en) | 1999-10-28 |
| AU1940797A (en) | 1997-10-29 |
| US6083958A (en) | 2000-07-04 |
| CN1111406C (zh) | 2003-06-18 |
| CA2250844A1 (en) | 1997-10-16 |
| EP0906756A4 (en) | 2000-11-22 |
| NO984616L (no) | 1998-11-26 |
| WO1997037657A1 (en) | 1997-10-16 |
| JP3272369B2 (ja) | 2002-04-08 |
| CN1220604A (zh) | 1999-06-23 |
| NO984616D0 (no) | 1998-10-02 |
| KR100310888B1 (ko) | 2001-12-12 |
| PL329174A1 (en) | 1999-03-15 |
| BR9708592A (pt) | 1999-08-03 |
| TW477701B (en) | 2002-03-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5820045B2 (ja) | ピリミジンを含有するｎｎｒｔｉとｒｔインヒビターとの組み合わせ物 | |
| EP2051703B1 (en) | Pharmaceutical combination comprising nucleotide and nucleoside reverse transcriptase inhibitors (such as tenofovir and lamivudine) in different parts of the dosage unit | |
| CN113509480A (zh) | 治疗和预防hiv和aids的方法 | |
| PL187925B1 (pl) | Kompozycja farmaceutyczna przeciw HIV | |
| RU2188638C2 (ru) | Анти-вич-композиция, содержащая имидазольные производные | |
| Murphy et al. | Antiviral activity and tolerability of amdoxovir with zidovudine in a randomized double-blind placebo-controlled study in HIV-1-infected individuals | |
| JPWO1997037657A1 (ja) | イミダゾール誘導体を含有する抗ｈｉｖ組成物 | |
| HUP9902175A2 (hu) | Imidazolszármazékot tartalmazó anti-HIV készítmények | |
| HK40054462A (en) | Methods for treatment and prophylaxis of hiv and aids | |
| AU2006286314A1 (en) | Pharmaceutical combinations containing lamivudine, stavudine and nevirapine | |
| HK1092698B (en) | Combinations of a pyrimidine containing nnrti with rt inhibitors | |
| KR20110132475A (ko) | Ｒｔ 저해제와 ｎｎｒｔｉ를 포함하는 피리미딘 배합물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20070314 |