PL167410B1 - Sposób przygotowania testu do oznaczania antygenów grup krwi układu ABO - Google Patents

Abstract

Sposób przygotowania testu do oznaczania antygenów grup krwi układu ABO, przy wykorzystaniu karty mającej płytkę roboczą dogodnie z termoplastycznego tworzywa, którą odtłuszcza się w temperaturze około 20°C za pomocą 10% objętościowo roztworu wodnego, korzystnie środka anionowo czynnego jak alkilobenzylosulfonian sodowy, albo mieszaniny roztworu wodnego środka amonowo-czynnego jak alkilobenzylosulfonian sodowy oraz środka niejonowego w postaci oksyetylenowego alkoholu tłuszczowego, a następnie suszy w temperaturze pokojowej, znamienny tym, że na zaznaczone na wysuszonej płytce pole anty-A i anty-B dla biorcy i dawcy nanosi się surowice wzorcowe stanowiące mieszaninę dwóch surowic: surowicy polyklonalnej ludzkiej o wysokim mianie i surowicy monoklonalnej mysiej o wysokim mianie, po czym rozprowadza sięje równomiernie na całej zaznaczonej kołem powierzchni, a następnie rozprowadzone surowice wzorcowe suszy się w temperaturze 20°C przez około 3 godziny i tak przygotowaną kartę zamyka się w kopercie z folii aluminiowej polietylizowanej i przechowuje w temperaturze od +2 do +8°C w okresie 6 miesięcy od daty jej wykonania.

Description

Przedmiotem wynalazkujest sposób przygotowania testu do oznaczania antygenów grup krwi układu ABO.

Stosowanie testu służy do weryfikacji grup krwi biorcy i dawcy bezpośrednio przed transfuzją oraz w nagłych przypadkach do wstępnego oznaczania grup krwi układu ABO. Natomiast nie zaleca się stosowania takiego testu dla przypadków bakteryjnego zakażenia krwi ”in vivo lub in vitro ze względu na możliwość błędnej interpretacji grupy krwi jako AB.

Znany jest z polskiego opisu patentowego nr 162 445 sposób otrzymywania preparatu diagnostycznego do wykrywania autoprzeciwciał tyreoglobuliny w surowicy krwi. Sposób polega na tym, że nośnik polistyrenowy otrzymany przez wodno-emulsyjną polimeryzację styrenu poddaje się dodatkowemu naświetlaniu promieniami gamma do całkowitej konwersji monomeru na polimer. Następnie do zawiesiny wodnej nośnika wprowadza się albuminę ludzką i po przemyciu dodaje aldehyd glutarowy i ludzką tyreoglobulinę, przemywa buforem glicynowym i ewentualnie konserwuje.

Znany jest również sposób wytwarzania papierków wskaźnikowych przedstawiony w polskim opisie patentowym nr 151 371. Według tego sposobu dobraną wstęgę nośnika nawilża się rozcieńczonym roztworem substancji reaktywnych do uzyskania określonego stopnia retencji substancji reaktywnych i wstępnie nasyca się rozcieńczonym roztworem substancji reaktywnych również do określonego stopnia ich retencji. Następnie nasyca się ją roztworami reaktywnymi do żądanej końcowej zawartości substancji reaktywnych, suszy nadmuchem powietrza i przeznacza do dalszej obróbki znanymi sposobami.

Oprócz wynalazków dotyczących przygotowania środków wskaźnikowych znany jest i stosowany obecnie sposób badania antygenów grup układu ABO opisany w pracy zbiorowej pod redakcją Wandy Ostrowskiej i Marzanny Kaweckiej pt. Przetaczanie krwi i jej pochodnych. Przepisy dla szpitali PZWL W-wa 1987 r. str. 32-40.

Ze względu na to, że ten sposób badania antygenów jest czasochłonny i wymaga użycia sprzętu laboratoryjnego - co w wielu przypadkach jest utrudnione - konieczne było opracowanie testu o odpowiednio dużej trwałości, łatwości przechowywania i który niezależnie od warunków umożliwiałby proste i szybkie wykonanie oznaczenia antygenów grup układu ABO.

167 410

Problem ten rozwiązano zgodnie z wynalazkiem przez opracowanie karty mającej płytkę roboczą, dogodnie z termoplastycznego tworzywa, które otrzymuje się przez zmieszanie na gorąco polistyrenu, homopolimeru z kauczukiem styrenowo-butadienowym. Kartę odtłuszcza się w temperaturze około 20°C za pomocą 10% objętościowo roztworu wodnego, korzystnie środka anionowo-czynnego jak alkilobenzylo-sulfonian sodowy albo mieszaniny roztworu wodnego środka anionowo-czynnego jak alkilobenzylosulfonian sodowy oraz środka niejonowego w postaci oksyetylenowego alkoholu tłuszczowego, a następnie suszy się w temperaturze pokojowej. Istota wynalazku polega na tym, że na zaznaczone na wysuszonej płytce pole anty-A i anty-B dla biorcy i dawcy nanosi się surowice wzorcowe stanowiące mieszaninę dwóch surowic: surowicy polyklonalnej ludzkiej o wysokim mianie i surowicy monoklonalnej mysiej o wysokim mianie. Surowice wzorcowe rozprowadza się równomiernie na całej zaznaczonej kołem powierzchni, a następnie suszy się je w temperaturze 20°C przez około 3 godziny. Tak przygotowaną kartę zamyka się w kopercie z folii aluminiowej polietylizowanej i przechowuje w temperaturze od +2 do +8°C w okresie do 6 miesięcy od daty jej wykonania.

Za pomocą wykonanego testu można prowadzić badania antygenów grup krwi układu ABO w trudnych warunkach nawet w karetce pogotowia ratunkowego w czasie transportu chorego bez użycia sprzętu laboratoryjnego. Zaletą sposobu oznaczania jest ponadto łatwa interpretacja wyników.

Przedmiot wynalazku jest przedstawiony w przykładzie jego wykonania.

Przykład: Dla wstępnego oznaczenia grupy krwi w układzie ABO wykonuje się płytkę roboczą z tworzywa sztucznego, które jest obojętne serologicznie to znaczy nie reaguje z surowicami wzorcowymi krwi także w okresie przechowywania karty oraz nie reaguje z krwią pacjentów i jest obojętne chemicznie wobec poza serologicznych składników surowic wzorcowych. Odpowiada tym wymaganiom płytka robocza z termoplastycznego tworzywa otrzymywanego przez mechaniczne zmieszanie na gorąco polistyrenu, homopolimeru z kauczukiem styrenowowo-butadienowym określona jako karta szybkiej kontroli grupy krwi lub karta od przyłóżkowej kontroli grupy krwi. Otrzymana karta ma kolor jasno biały. Powierzchnia karty podzielona jest na część roboczą i część dokumentacyjną. Część robocza podzielona jest na cztery pola w kształcie okręgów. W odniesieniu do tych pól od ich góry są napisy Anty-A oraz Anty-B, przy czym dwa pola od góry odnoszą się do biorcy, a dwa pola od dołu na jednej wysokości do dawcy. Część dokumentacyjna jest formularzem, na który wpisuje się dane od góry biorcy, a od dołu dawcy.

Kartę tę odtłuszcza się za pomocą środka anionowo-czynnego w postaci roztworu wodnego alkilobenzylosulfonianu sodowego lub mieszaniny roztworu wodnego środka anionowo-czynnego alkilobenzylosulfonianu sodowego oraz środka niejonowego w postaci oksyetylenowanego alkoholu tłuszczowego. Odtłuszczanie prowadzi się za pomocą 10%o objętościowo środka odtłuszczającego w temperaturze 20°C. Odtłuszczoną kartę suszy się w temperaturze pokojowej.

Po wysuszeniu karty na pola określone jako Anty-A i Anty-B dla biorcy i dawcy nanosi się surowice wzorcowe stanowiące mieszaninę dwóch surowic;surowicy polyklonalnej ludzkiej o wysokim mianie na przykład 1 : 512-1024 i monoklonalnej mysiej o wysokim mianie na przykład: 1 : 521-1024. Naniesione surowice dla dawcy i biorcy rozprowadza się równomiernie na całej powierzchni określonej kołem. Następnie suszy się naniesione surowice w temperaturze 20°C przez około 3 godziny. Po wysuszeniu kartę zamyka się w kopercie z folii aluminiowej polietylizowanej. Kartę zamkniętą folią aluminiową polietylizowaną przechowuje się w temperaturze od +2 do +8°C przez okres do 6 miesięcy od daty jej wykonania..

167 410

Departament Wydawnictw i_J P RP. Nakład 90 egz. Cena 1,50 zł

Claims (1)

1. Zastrzeżenie patentowe

   Sposób przygotowania testu do oznaczania antygenów grup krwi układu ABO, przy wykorzystaniu karty mającej płytkę roboczą dogodnie z termoplastycznego tworzywa, którą odtłuszcza się w temperaturze około 20°C za pomocą 10% objętościowo roztworu wodnego, korzystnie środka anionowo czynnego jak alkilobenzylosulfonian sodowy, albo mieszaniny roztworu wodnego środka amonowo-czynnego jak alkilobenzylosulfonian sodowy oraz środka niejonowego w postaci oksyetylenowego alkoholu tłuszczowego, a następnie suszy w temperaturze pokojowej, znamienny tym, że na zaznaczone na wysuszonej płytce pole anty-A i anty-B dla biorcy i dawcy nanosi się surowice wzorcowe stanowiące mieszaninę dwóch surowic: surowicy polyklonalnej ludzkiej o wysokim mianie i surowicy monoklonalnej mysiej o wysokim mianie, po czym rozprowadza się je równomiernie na całej zaznaczonej kołem powierzchni, a następnie rozprowadzone surowice wzorcowe suszy się w temperaturze 20°C przez około 3 godziny i tak przygotowaną kartę zamyka się w kopercie z folii aluminiowej polietylizowanej i przechowuje w temperaturze od +2 do +8°C w okresie 6 miesięcy od daty jej wykonania.