PL167043B1 - Method of obtaining novel monomer of 3-rd order butoxycarbonyl-l-thyrosipeptide glicane and its derivative labelled with 125 j - Google Patents
Method of obtaining novel monomer of 3-rd order butoxycarbonyl-l-thyrosipeptide glicane and its derivative labelled with 125 jInfo
- Publication number
- PL167043B1 PL167043B1 PL91292898A PL29289891A PL167043B1 PL 167043 B1 PL167043 B1 PL 167043B1 PL 91292898 A PL91292898 A PL 91292898A PL 29289891 A PL29289891 A PL 29289891A PL 167043 B1 PL167043 B1 PL 167043B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- butoxycarbonyl
- pgm
- monomer
- tyr
- boc
- Prior art date
Links
- 239000000178 monomer Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims abstract description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims abstract 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000002001 anti-metastasis Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine hydrochloride Chemical compound Cl.ClCCN(C)CCCl QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 N-protected amino Chemical group 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N (2R,6R)-form-2.6-Diaminoheptanedioic acid Natural products OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]propanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 CNBUSIJNWNXLQQ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N meso-2,6-diaminopimelic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CCC[C@@H]([NH3+])C([O-])=O GMKMEZVLHJARHF-SYDPRGILSA-N 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- RUPAXCPQAAOIPB-UHFFFAOYSA-N tert-butyl formate Chemical group CC(C)(C)OC=O RUPAXCPQAAOIPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
- C07K9/005—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure containing within the molecule the substructure with m, n > 0 and m+n > 0, A, B, D, E being heteroatoms; X being a bond or a chain, e.g. muramylpeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Sposób wytwarzania nowego mono- meru III-rzed. -butoksykarbonylo-L-tyrozy- lopeptydoglikanu o wzorze przedstawionym na rysunku, znamienny tym, ze kondensuje sie III-rzed. -butoksykarbonylo-N-hydro- ksysukcynimidoester z niechronionym mo- nomerem peptydoglikanu w obecnosci trietyloaminy, a uzyskany monomer III-rzed. -butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglika nu /Boc-Tyr-PGM/ wydziela sie w wyniku chromatografii zelowej w kolumnie z wypel- nieniem Sephadex G-25, a nastepnie chroma- tografii kolumnowej w kolu m n ie z zelazem krzemionkowym oraz chromatografii zelo- wej w kolumnie z wypelnieniem Biogel P-2. W z ó r 1 PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowego monomeru HI-rzęd.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu o wzorze przedstawionym na rysunku.
Monomer ΠΙ-rzęd.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanowy jest szczególnie przydatny do stosowania w lekach wykazujących działanie immunomodulujące i przeciwnowotworowe, ajego 125J znaczona pochodna wykazuje właściwości wiązania przeciwciał przeciw -PGM.
Wiadomo, że monomer peptydoglikanu /PGM, GlcNAc-β -/1—> 4/-MurNAc-L-Ala-DiGln-[/L/-meso-A2pm-/D/-amid-/L/-D-Ala-D-Ala], będący najmniejszą powtarzalną jednostką peptydoglikanu ze ścianki komórki Brevibacterium divaricum, wykazuje działanie immunomodulujące, przeciwnowotworowe i antymetastatyczne/Tomaśić J. i Hrśakl. /1988/, Peptidoglycan monomer oryginating from Brevibacterium divaricatum - its metabolism and biological activities in the host, in: Surface Structure of Microorganisms and Their Interaction with the Mammalian Host /Schrinner E., Richmond M.H., Seibert G. i Schwarts U., Redaktorzy/, str. 113-121, VCH Verlags-gesellschaft, Weinheim/.
Wiadomo, że powstawanie wiązania peptydowego można osiągnąć pod warunkiem, że aminokwas:
- przekształca się najpierw w N-chroniony aminokwas w wyniku wprowadzenie tak zwanej grup chroniących,
- został zaktywowany przy grupie karboksylowej,
- przeprowadza się reakcję z C-końcowo chronionym aminokwasem albo dwu-, trój- lub polipeptydami, oraz
- grupy chroniące w uzyskanych dwu-, trój- lub polipeptydach ostrożnie odszczepia się za pomocą specyficznych reakcji /Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, 4. Auflage, herausgegeben von Egon Muller, Synthese von Peptiden I und II, Bd 15/1 und 15/2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974/.
Ponadto, w wielofunkcyjnych cząsteczkach o wysoce złożonej budowie, takich jak na przykłada monomer peptydoglikanu zawierający dwucukrowe pentapeptydy /grupy cukrowe i peptydowe/:
- należy chronić grupy hydroksylowe przy GlnNAC i MurNAC /grupy cykrowe cząsteczki/ oraz
- po przeprowadzeniu reakcji tworzenia wiązania peptydowego należy przeprowadzić odblokowanie grupy cukrowej.
167 043
Wiadomo także, iż znanym sposobem wprowadzania tyrozyny do peptydu lub białka jest metoda aktywnego estru, w której Boc-L-Tyr-ONS stanowi składnik acylujący /Assoian R.K. /1980/. Annal. Biochem. 130, 70/.
Wzrastające zapotrzebowanie na nowe substancje o potencjalnym działaniu immunomodulującym oraz o ewentualnym działaniu przeciwnowotworowym doprowadziły do koncepcji według wynalazku, to jest sposobu wytwarzania nowego związku - monomeru III-rzęd.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu /Boc-Tyr-PGM/ o wzorze przedstawionym na rysunku.
Nowy monomer peptydoglikanowy stanowi związek o zwiększonej lipofilowości umożliwiający łatwiejszą penetrację substancji przez ścianki komórek i przedłużony czas jej pozostawania w organiźmie. Uzyskano to wprowadzając naturalny aromatyczny aminokwas, tyrozynę do cząsteczki PGM, dzięki czemu z dwucukru-pentapeptydu uzyskano dwucukier-heksapeptyd /Boc-Tyr-PGM/.
Sposób według wynalazku polega na tym, że kondensuje się III-rzęd.-butoksykarbonyloN-hydroksysuksynimidoester z niechronionym monomerem peptydoglikanu w obecności trietyloaminy, a uzyskany monomer III-rzęd. butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu /Boc-Tyr-PGM/ wydziela się w wyniku chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Sephadex G-25, a następnie chromatografii kolumnowej w kolumnie ź żelem krzemionkowym oraz chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Biogel P-2.
W sposobie wytwarzania nowej pochodnej monomeru peptydoglikanu wykorzystano znane metody chemii peptydów, z tym, że po raz pierwszy wykonano syntezę całkowicie niechronionej cząsteczki o bardzo złożonej budowie.
Sposób wytwarzania nowej pochodnej PGM według wynalazku przedstawiono w schemacie na rysunku.
Według wynalazku przeprowadzono reakcję regio-selektywną Boc-Tyr-ONSu z ω-aminową grupą kwasu meso-diaminopimelinowego w cząsteczce PGM, w obecności trietyloaminy, uzyskując nową pochodną, dwucukier-heksapeptyd, który najpierw wydzielono metodą chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Sephadex G-25 oraz metodą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym, a następnie oczyszczono i przystosowano do badań biologicznych w wyniku chromatografii żelowej wypelńieniem Biogel P-2.
Próby biologiczne
A. Działanie immunostymulujące monomeru III-rzęd.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu/Boc-Tyr-PGM/.
Działanie immunostymulujące Boc-Tyr-PGM badano na myszach uodpornionych erytrocytami owczymi /czerwone krwinki owcze, SRBC/.
Myszy /CBA lub AKR/, po 5 w grupie, uodporniono dootrzewnowo erytrocytami owczymi /1 x 108 SRBC/ w roztworze Hanksa. Po jednym dniu /w dniu +1/ kontrolnej grupie myszy podano dożylnie sam roztwór Hanksa; jako dodatnią grupę kontrolną zastosowano grupę myszy, którym podano dożylnie 200 gg monomeru peptydoglikanu /PGM/ w roztworze Hanksa. Po 4 dniach /w dniu +4/ liczbę komórek wytwarzających przeciwciała /komórki wytwarzające płytki, PFC/ oznaczono w śledzionie metodą Jerne’a /Jerne N.K., Nordin A.A., Henry C., /1963/, The agar plaque technique for recogmzmg antibody producing cells, w: Cell Bound Antibodies, str. 109, Wistar Institute Press, Philadelphia/. Wyniki badań zestawiono w tabeli 1.
Tabela 1
| Szczep myszy | Podawany środek | PFC | |||
| zakres indywidualnych wielkości | X | % | |||
| roztwór Hanksa | 95 200 - | 238 000 | 188 906 | 100 | |
| CBA | Boc-Tyr-PGM | 257 600 - | 304 266 | 295 866 | 157 |
| PGM | 198 800 - | 449 866 | 313 413 | 166 | |
| roztwór Hanksa | 20000 - | 55 200 | 37388 | 100 | |
| AKR | Boc-Tyr-PGM | 31 730 - | 68 670 | 55 974 | 150 |
| PGM | 27 200 - | 61 070 | 48 667 | 130 |
167 043
Boc-Tyr-PGM wykazuje działanie immunostymulujące /pomocnicze/ w przypadku obydwu szczepów myszy, u których wykryto wzrost liczby PFC o około 50% w porównaniu z grupą kontrolną. Skuteczność Boc-Tyr-PGM w obydwu próbach była porównywalna ze skutecznością dodatniej grupy kontrolnej, której podano monomer peptydoglikanu.
B. Działanie przeciwnowotworowe /przeciwmetastatyczne/ monomeru III-rzęd.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu.
Działanie przeciwnowotworowe Boc-Tyr-PGM badano na myszach zaszczepionych melanomąB-16.
4-miesięcznym samcom myszy C5 7 BL/6 w grupach po 5 osobników, podano dożylnie 1 x 105 komórek melanomy B-16 w dniu O.
Jedną grupę myszy wybrano jako kontrolną i nie podawano im potem żadnego środka. Myszom z grupy doświadczalnej podano dożylnie po 1 mg Boc-Tyr-PGM, zgodnie z następującą procedurą:
grupa - w dnin 3 grupa - w dmn u grupa - w ^r^iu 3 i 7 /łącznie 2 mg Boc-Tyr-PGM/.
Trzy grupy myszy, którym dożylnie podano PGM /PLIVA/ zgodnie z taką samą procedurą, wybrano jako dodatnie grupy kontrolne.
Makroskopowo wykrywalne przerzuty w płucach zliczano po zabiciu myszy w dniu 23. Wyniki przedstawiono w tabeli 2.
Tabela 2
| Stosowany środek | Dzień | Liczba przerzutów | Inhibitowanie % | |
| X | % | |||
| Roztwór Hanksa | - | 12,4 ± 6,1 | 100 | |
| 3 | 7,6 ± 1,9 | 61,3 | 38,7 | |
| Boc-Tyr-PGM | 7 | 7,2 ± 4,0 | 58,1 | 41,9 |
| 3+7 | 7,2 ± 2,7 | 56,4 | 43,6 | |
| 3 | 6,2 ± 4,4 | 50,0 | 50,0 | |
| PGM/PLIVA/ | 7 | 5,4 ± 1,7 | 43,5 | 66,5 |
| 3+7 | 5,3 ± 1,7 | 42,7 | 67,3 |
Zastosowanie Boc-Tyr-PGM wywołuje działanie przeciwmetastatyczne, którego wynikiem jest zmniejszenie liczby przerzutów we wszystkich grupach myszy, którym podano ten środek /stopień inhibitowania 37,8 - 43,6%. Nie zaobserwowano znacznych różnic w stopniu inhibitowania w przypadku myszy, którym podawano środek w różnych dniach /w dniu 3 lub 7/ lub w różnej całkowitej dawce /1 mg w dniu 3 lub 7 albo łącznie 2 mg w dniu 3 i 7/.
Działanie Boc-Tyr-PGM jest porównywalne z działaniem PGM /PLIVA/ podawanym dodatnim grupom kontrolnym.
Sposób według wynalazku ilustruje następujący przykład:
Przykład. Monomer ΕΠ-rzęd. -butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu /związek o wzorze przedstawionym na rysunku/.
100 mg /0,1 mmola/ monomeru peptydoglikanu /PGM/ rozpuszczono w 2,6 ml suchego dimetyloformamidu /DMF/ z dodatkiem 30 pl trietyloaminy. Do schłodzonego w łaźni z lodem roztworu dodano małymi porcjami, z mieszaniem, 56 mg /0,12 mmola/ stałego Boc-Tyr-ONSu. Reakcję prowadzono przez 16 godzin w temperaturze pokojowej, po czym DMF odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem wytwarzanym przez pompę mechaniczną. Gęstą, syropowatą pozostałość po odparowaniu rozpuszczono w wodzie, zakwaszono stałym kwasem cytrynowym do pH 3, po czym wyekstrahowano 3 porcjami po 10 ml octanu etylu. Fazę wodną zatężono do ml i wprowadzono do kolumny Sephadex G-25 /90 x 2,5 cm/ z wodą. Pobierano frakcje po ml, w których badano absorpcję przy 230 nm, a te frakcje, które odpowiadały związkowi o większej masie cząsteczkowej połączono i odparowano. Uzyskano 110 mg szklistej pozostałości,
167 043 którą rozpuszczono w mieszaninie 5:3:2:2 n-butanolu, etanolu, 25% NH3 i wody i poddano chromatografii w kolumnie z żelem krzemionkowym, stosując ten sam eluent. Po zobojętnieniu kwasem octowym i odparowaniu frakcji uzyskano produkt, który ostatecznie oczyszczano metodą chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Biogel P-2 /70 x 2,5 cm/, z eluowaniem wodą. Frakcje o największej ruchliwości połączono, zatężono i suszono sublimacyjnie. Uzyskano 58 mg /46%/ czystego Boc-Tyr-PGM /związku o wzorze 1/.
Analiza aminokwasu: GlcNH2 0,82 ; MurNH3 0,57 ; Ala 33 ; Glu 1:
A2pm 0,98; Tyr 0,80.
Widmo 1 H-NMR /D2O/: 1,99 /s,Me3C/, 1,34i 1,00 /np zęęściowonakaada si ę z
Me3C, 21H, 3 x Me-Ala + Me laktoliowe/, 1,89 i 1,98 /2S, 6H, 2 x NAc/, 6,77 i 7,07 /2d, każdy po 2H, Ihh 8,55 Hz, -C6H4-/. ’
Chromatografia cienkowarstwowa: n-butnnol-etanol-25% NHe-woda /5:3:2:2/, detekcja parami jodu i odczynnikiem peptydowym, Ff = 0,5.
167 043
Me-CHCONHCHWHCH^^^
Me CONH2 CH2 Me
CH2
CH2
CHCONH2 hKOęHCH2-0-OH
NHOCOOCH3)3
Wzór 1
Et3N dwusachoryd-pięciopepłyd- COOH + Boc-Tyr - ONSu f^HBoc
H0h(2h:H2 CH-CO- ^NH- PGM- COOH
Schemat
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz.
Cena 1,00 zł.
Claims (1)
- Zastrzeżenia patentoweSposób wytwarzania nowego monomeru ΙΙΙ-rzęd. -butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu o wzorze przedstawionym na rysunku, znamienny tym, że kondensuje się ΠΙ-rzęd. -butoksykarbonylo-N-hydroksysukcynimidoester z niechronionym monomerem peptydoglikanu w obecności trietyloaminy, a uzyskany monomer ΠΙ-rzęd. -butoksykarbonylo-Ltyrozylopeptydoglikanu /Boc-Tyr-PGM/ wydziela się w wyniku chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Sephadex G-25, a następnie chromatografii kolumnowej w kolumnie z żelazem krzemionkowym oraz chromatografii żelowej w kolumnie z wypełnieniem Biogel P-2.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| YU242490 | 1990-12-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL292898A1 PL292898A1 (en) | 1992-09-07 |
| PL167043B1 true PL167043B1 (en) | 1995-07-31 |
Family
ID=25557920
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL91305128A PL167068B1 (pl) | 1990-12-21 | 1991-12-20 | Sposób wytwarzania nowej 1 2 5 J-znaczonej pochodnej III-rzed.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu PL PL PL |
| PL91292898A PL167043B1 (en) | 1990-12-21 | 1991-12-20 | Method of obtaining novel monomer of 3-rd order butoxycarbonyl-l-thyrosipeptide glicane and its derivative labelled with 125 j |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL91305128A PL167068B1 (pl) | 1990-12-21 | 1991-12-20 | Sposób wytwarzania nowej 1 2 5 J-znaczonej pochodnej III-rzed.-butoksykarbonylo-L-tyrozylopeptydoglikanu PL PL PL |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5290576A (pl) |
| EP (1) | EP0492478B1 (pl) |
| JP (1) | JPH05194596A (pl) |
| CN (1) | CN1062735A (pl) |
| AT (1) | ATE125270T1 (pl) |
| BG (1) | BG95668A (pl) |
| CA (1) | CA2058247A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ394791A3 (pl) |
| DE (1) | DE69111401T2 (pl) |
| ES (1) | ES2077785T3 (pl) |
| GR (1) | GR3017349T3 (pl) |
| HU (1) | HU208160B (pl) |
| PL (2) | PL167068B1 (pl) |
| RO (1) | RO108348B1 (pl) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6558669B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-05-06 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| US7521531B2 (en) | 1996-08-28 | 2009-04-21 | Immunomedics, Inc. | Methods for the purification of stable radioiodine conjugates |
| WO1998008548A2 (en) * | 1996-08-28 | 1998-03-05 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| US6663866B1 (en) | 1996-08-28 | 2003-12-16 | Immunomedics, Inc. | Stable radioiodine conjugates and methods for their synthesis |
| CZ301451B6 (cs) * | 2005-10-18 | 2010-03-03 | Ústav organické chemie a biochemie, Akademie ved CR | Deriváty kyseliny glukosaminylmuramové |
| CN105132372B (zh) * | 2015-08-28 | 2019-04-30 | 淄博金砖生物科技有限公司 | 一种诱导dc-cik细胞的化合物在肿瘤细胞免疫治疗中的应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4310514A (en) * | 1980-05-05 | 1982-01-12 | Merck & Co., Inc. | Immunologically active dipeptidyl 5-0,6-0-acyl-2-amino-2-deoxy-D-glucofuranose derivatives and methods of preparation |
| YU62689A (en) * | 1989-03-27 | 1991-02-28 | Pliva Pharm & Chem Works | N-acyl derivatives of peptidoglican monomer, their pharmaceutically acceptable salts, process for preparing thereof and their use as immunity modulators and immunoadjuvant |
-
1991
- 1991-12-19 ES ES91121871T patent/ES2077785T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-19 EP EP91121871A patent/EP0492478B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-19 AT AT91121871T patent/ATE125270T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-12-19 DE DE69111401T patent/DE69111401T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-12-20 PL PL91305128A patent/PL167068B1/pl unknown
- 1991-12-20 CA CA002058247A patent/CA2058247A1/en not_active Abandoned
- 1991-12-20 JP JP3338725A patent/JPH05194596A/ja active Pending
- 1991-12-20 CZ CS913947A patent/CZ394791A3/cs unknown
- 1991-12-20 HU HU914066A patent/HU208160B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-12-20 US US07/810,010 patent/US5290576A/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-12-20 BG BG095668A patent/BG95668A/bg unknown
- 1991-12-20 PL PL91292898A patent/PL167043B1/pl unknown
- 1991-12-21 CN CN91111723A patent/CN1062735A/zh active Pending
-
1992
- 1992-03-19 RO RO92-200368A patent/RO108348B1/ro unknown
-
1995
- 1995-09-13 GR GR950402464T patent/GR3017349T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RO108348B1 (ro) | 1994-04-28 |
| HUT60509A (en) | 1992-09-28 |
| HU208160B (en) | 1993-08-30 |
| DE69111401D1 (de) | 1995-08-24 |
| EP0492478B1 (en) | 1995-07-19 |
| EP0492478A2 (en) | 1992-07-01 |
| GR3017349T3 (en) | 1995-12-31 |
| ATE125270T1 (de) | 1995-08-15 |
| BG95668A (bg) | 1993-12-24 |
| HU914066D0 (en) | 1992-03-30 |
| PL292898A1 (en) | 1992-09-07 |
| CZ394791A3 (en) | 1993-02-17 |
| DE69111401T2 (de) | 1996-02-22 |
| EP0492478A3 (en) | 1993-05-12 |
| US5290576A (en) | 1994-03-01 |
| ES2077785T3 (es) | 1995-12-01 |
| CA2058247A1 (en) | 1992-06-22 |
| PL167068B1 (pl) | 1995-07-31 |
| JPH05194596A (ja) | 1993-08-03 |
| CN1062735A (zh) | 1992-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ferreira et al. | Isolation of bradykinin-potentiating peptides from Bothrops jararaca venom | |
| Adam et al. | Correlation of structure and adjuvant activity of N-acetyl muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine (MDP), its derivatives and analogues. Anti-adjuvant and competition properties of stereoisomers | |
| DE69125537T2 (de) | Alpha-keto-amidderivate mit Protease inhibierender Aktivität | |
| DE69615838T2 (de) | Cyclische wirkstoff-vorläufer verbindungen von peptiden und peptid-nukleicsäuren mit verbesserter metabolischer stabilität und zellmembran permeabilität | |
| EP0506748B1 (en) | Amino acids, peptides or derivatives thereof coupled to fats | |
| US5869606A (en) | Amino acids peptides or derivatives thereof coupled to fats | |
| JPS6118799A (ja) | 効力のあるサイモペンチン類似体 | |
| PL167043B1 (en) | Method of obtaining novel monomer of 3-rd order butoxycarbonyl-l-thyrosipeptide glicane and its derivative labelled with 125 j | |
| DE69108392T2 (de) | Zusammensetzung zur aktivierung der makrophagen. | |
| JPH0288595A (ja) | 免疫刺激性ペプチド、その製法、及び該ペプチドを含有する薬剤組成物 | |
| CA1321993C (en) | Substituted n-glycosylamides, process for their preparation, and their use as medicaments | |
| Ljevaković et al. | Synthesis of novel adamantylacetyl derivative of peptidoglycan monomer—biological evaluation of immunomodulatory peptidoglycan monomer and respective derivatives with lipophilic substituents on amino group | |
| US4399124A (en) | Peptides having immunostimulating properties and pharmaceutical compositions containing them | |
| EP0382251B1 (en) | New adamantyl comprising tripeptides, derivatives and hydrochlorides thereof, their preparation and use | |
| Tomašić et al. | Peptidoglycan monomer originating from Brevibacterium divaricatum—its metabolism and biological activities in the host | |
| GB2185486A (en) | Conjugate of alpha-melanotropin with p-L-sarcolysine (melphalan) | |
| RU2046799C1 (ru) | Мономер трет-бутилоксикарбонил-l-тирозил пептидогликана и его 125j -меченое производное и способ их получения | |
| AU617487B2 (en) | Sialic acid-bonded octapeptide and preparation thereof | |
| Metzger et al. | Synthesis of a B-lymphocyte activating α-methylserine containing lipopentapeptide | |
| US5656601A (en) | Acylated splenopentins, methods for their synthesis and their use | |
| PT86489B (pt) | Processo para a preparacao de derivados de aminoacidos lipofilicos | |
| US5225400A (en) | Immunostimulating peptides, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| CH636343A5 (de) | Verfahren zur herstellung eines neuen tridecapeptids. | |
| KR790001842B1 (ko) | 신규 폴리펩티드의 제조법 | |
| JPS63141998A (ja) | 新規活性ペプチド |