PL149597B1 - SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NU - Google Patents
SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NUInfo
- Publication number
- PL149597B1 PL149597B1 PL26378387A PL26378387A PL149597B1 PL 149597 B1 PL149597 B1 PL 149597B1 PL 26378387 A PL26378387 A PL 26378387A PL 26378387 A PL26378387 A PL 26378387A PL 149597 B1 PL149597 B1 PL 149597B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- alpha
- isopropylidenedioxy
- dione
- fluoro
- culture
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 5
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 3
- 241000235555 Cunninghamella Species 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 8
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 8
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 5
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 5
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 229960000564 nitrofurantoin Drugs 0.000 description 4
- NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N nitrofurantoin Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)NC(=O)C1 NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000235556 Cunninghamella elegans Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- 241000010215 Cunninghamella bainieri Species 0.000 description 2
- 235000008694 Humulus lupulus Nutrition 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- TXHIDIHEXDFONW-UHFFFAOYSA-N benzene;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.C1=CC=CC=C1 TXHIDIHEXDFONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 pregnane steroid Chemical class 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 11-deoxycorticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- OAABHEHWRQAHEJ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCCCO OAABHEHWRQAHEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N chloroform;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.ClC(Cl)Cl OAIVIYSBZFEOIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- XTLNYNMNUCLWEZ-UHFFFAOYSA-N ethanol;propan-2-one Chemical compound CCO.CC(C)=O XTLNYNMNUCLWEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229940043075 fluocinolone Drugs 0.000 description 1
- FEBLZLNTKCEFIT-VSXGLTOVSA-N fluocinolone acetonide Chemical compound C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@]1(F)[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O FEBLZLNTKCEFIT-VSXGLTOVSA-N 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
POLSKA
RZECZPOSPOLITA
LUDOWA opis patentowy 149597
URZĄD
PATENTOWY
PRL
CZY I6LNIA
Urzędu Patentowego hUl*t llMWi «I tllMIMj
Patent dodatkowy do patentu nrZgłoszono: 87 01 23 /P. 263783/
Pierwszeństwo Int. O.4 C12P 33/08
C07J 5/00
Zgłoszenie ogłoszono: 88 09 15
Opis patentowy opublikowano: 1990 06 30
Twórcy wynalazku: Teresa Uszycka-Horawa, Jadwiga Smolińska, Romana Jaworska, Leon Sedlaczek, Krystyna Lubisz, Zofia Trzcińska,
Stefan Włodarczyk, Józefa Korbel, Hanna Goźlińska,
Jadwiga Szczepaniak, Teresa Florczak
Uprawniony z patentu: Instytut Przemysłu Farmaceutycznego, Warszawa;
Pabianickie Zakłady Farmaceutyczne POLFA, Pabianice /Polska/
SPOSÓB WYTWARZANIA
6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 /3, 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3,20-DI0NU
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 6oó-fluoro-16oC, 17oC-izopropylidenodioksy-11y3,21-dihydroksy-4-pregnen-3,20-dionu metodą mikrobiologiczną. Związek ten etanowi ważny półprodukt przy produkcji leków steroidowych pochodnych pregnanu, np. fluandrenolonu, fluocinolonu.
Znane dotychczas sposoby 11/3 -hydroksylac ji 6oć-fluoro-16oC,17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3»20-dionu pozwalają na przeprowadzenie enzymatycznej reakcji przy pomocy następujących mikroorganizmów i przy podanych stężeniach: Cunninghamella bainieri 0,3 g/l /opis patentowy St. Zjed. Ameryki nr 3 107 240/, Cunninghamella bainieri lub C. blakesleana 0,2 g/l /opis patentowy St. Zjed. Ameryki nr 3 124 571/, Culvularia lunata 0,5 g/Ι» Absidia orchldis 0,5 g/l /opis patentowy ZSRR nr 482 444/.
Nieoczekiwanie stwierdzono zaskakującą selektywność 11/3-hydroksylacji szczepu Cunninghamella elegans 1785/21 Gp, w stosunku do 6c<-fluoro- 16oC, 17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-pregnen-3,20-dionu i jego 21-acylowych pochodnych. Selektywna 11/3-hydroksylacja steroidów jest węzłowym zagadnieniem w funkcjonalizacji tej pozycji. Bardzo niewiele drobnoustrojów posiada tę przemysłowo opłacalną zdolność, a metody chemiczne zawodzą. Wobec tego stwierdzenie zdolności mikroorganizmu do selektywnej 11y6-hydroksylacji 6 oC-fluoro-l6oC, 17oć-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-pregnen-3,20-dionu i Jego 21-acylowych pochodnych jest zagadnieniem bardzo ważnym w produkcji leków steroidowych pochodnych pregnanu. Ponadto okazało się, że w procesie 11β-hydroksylac ji można nawet dziesięciokrotnie zwiększyć stężenie substratu jeżeli zastosuje się odpowiednią pochodną 6oC-fluoro-16oC, 17o£-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3»20-dionu, a mianowicie: 21-monobursztynian lub 21-monoadypinian.
Sposobem według wynalazku 6oC-fluoro-16cC, 17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dion lub jego 21-acylowe pochodne a zwłaszcza w postaci 21-pćłestru dwuzasadowego kwasu
149 597
149 597 alifatycznego nasyconego o 4-7 atomach węgla, takiego jak 21-monobursztynian lub 21-monoadyplnlan, poddaje się w sposób konwencjonalny enzymatycznej 11/3-hydroksylacji za pomocą szczepu Cunninghamella elegane 1785/21 jego grzybni wegetatywnej lub zawiesiny zarodników, po ceym produkt a wyodrębnia się 1 oczyszcza w znany sposób.
. Korzystnym skutkiem sposobu według wynalazku jest możliwość znacznego zwiększenia stężenia substratu w procesie enzymatycznej hydroksylac ji, w porównaniu z dotychczas stosowanymi, co pozwala-na zwiększenie wsadu steroidu w tanku fermentacyjnym, a więc w konsekwencji zmniejszenie liczby szarż fermentacyjnych biokonwersji i dużą obniżkę bezpośrednich kosztów produkcji.
Składy pożywek, podane w poniższych przykładach, mogą być zmienne, przystosowane do potrzeb wzrostu mikroorganizmu 1 transformacji, ilustrują one jedynie sposób według wynalazku.
Przykład I. Szczep Cunninghamella elegans 1785/21 Gp hoduje się w ciągu 7 dni w temp. 28°C na podłożu stałym o składzie: ekstrakt drożdżowy Difco-4 g; glukoza - 4 g; brzeczka bez chmielu 6°Blg. - 1000 ml; agar - 20 ml; pH podłoża 6,7-7,0. Skosy sterylizuje się 20 minut w temp. 117°C. Po uzyskaniu dobrze zarodnikującej kultury skosy zmywa się wodą destylowaną. Zawiesinę uzyskaną z trzech skosów szczepi się kolbę o pojemności 1 lz 150 ml pożywki o składzie: ekstrakt drożdżowy - 10 g; glukoza - 5 g; olej sojowy - 0,7 g; tween 80 - 0,5 g; woda destylowana - uzupełnia się do 1 1; pH 5,2-5,4. Kolby sterylizuje się 30 minut w temp.. 120°C. W ten sposób przygotowuje się 3 kolby i inkuhuje je 48 h w warunkach tlenowych w temp. 28°C. Wyhodowaną 48-godzinną kulturę przeszczepia się do czterech 2 1 kolb zawierających po 300 ml pożywki przygotowanej jak wyżej. Kulturę inkubuje się 24 h w warunkach tlenowych w temp. 28°C. Dobrze wyrośnięta kultura z czterech kolb stanowi inoculum do zaszczepienia fermentatora zawierającego 10 1 wy sterylizowane j pożywki o składzie: pepton 2.5 g; ekstrakt drożdżowy - 10 g; KHgPO^ - 5 g; glukoza - 10 g; wyciąg namokowy kukurydzy 7.5 g; tween 80 - 0,5 g; olej sojowy - 0,2 g; woda destylowana - uzupełnia się do 1 1. Pożywkę sterylizuje się 30 minut w temp. 120°C, pH po sterylizacji 5,2-5,6. Hodowlę w fermentatorze prowadzi się przy mieszaniu i napowietrzaniu 0,6-0,8 1 powietrza na 1 min na 1 1 hodowli przy cienieniu 98 kPa. Po 24 h wzrostu wyhodowaną kulturę przeszczepia się do metalowego fermentatora zawierającego 100 1 pożywki o składzie podanym wyżej. Hodowlę prowadzi się identycznie jak w poprzednim fermentatorze. Po 24 h hodowli do wyrośniętej kultury dodaje się 40 g 6oć-fluoro-16 eC, 17c£ -izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dionu rozpuszczonego w acetonie. Biokonwersję prowadzi się w takich samych warunkach jak wzrost kultury w fermentatorze. Przebieg biokonwersji sprawdza się metodą chromatografii cienkowarstwowej. Po ok.
h proces jest zakończony. Steroid odzyskuje się przez ekstrakcję chloroformem lub mieszaniną chloroform-butanol 4:1. Ekstrakt zatęża się i otrzymany surowy produkt oczyszcza przez krystalizację z acetonu lub mieszaniny aceton-benzen. Otrzymuje się 21-22 g produktu o nastę-
IR-1645,1700,1040,1075,2860,3900 cm1.
Przykład II. Szczep Cunninghamella elegans 1785/21 Gp hoduje się jak w przykładzie I. Po uzyskaniu dobrze zarodnikującej kultury, skosy zmywa się wodą destylowaną lub 0,01% wodnym roztworem Tweenu 80. Zawiesiną zarodników szczepi się kolbę o pojemności 500 ml z 100 ml pożywki o składzie: ekstrakt drożdżowy - 2,5 g; pepton Aminobak - 4 g; brzeczka bez chmielu 10% - 100 ml; woda destylowana - uzupełnia się do 1 1; pH 5,5-6,0. Kolby sterylizuje się 30 min w temp. 105°C· V ten sposób przygotowane kolby inkubuje się 24 h w warunkach tlenowych w temp. 28°C. Wyhodowaną 24-godzinną kulturę przeszczepia się w ilości 10% v/v do kolb 500 ml zawierających 100 ml pożywki o składzie: pepton - 10 g; ekstrakt drożdżowy - 6 g; KH2P0^ - 5 g; glukoza - 40 g; woda destylowana - uzupełnia się do 1 1; pH 5,5-6,0. Kolby sterylizuje się 30 minut w temp. 120°C. Hodowlę prowadzi się do 48 h w warunkach tlenowych. Do wyrośniętej jednorodnej, w postaci bardzo drobnych kuleczek, kultury dodaje się 300 mg 21-monobursztynianu 6 oC-fluoro-16 oC, 17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dionu rozpuszczonego w mieszaninie aceton-etanol 1:1. Biokonwersję prowadzi się w takich aamych warunkach jak wzrost kultury. Przebieg biokonwersji sprawdza się metodą chromatografii
149 597 cienkowarstwowej. Po ok. 30 h proces jest zakończony. Produkt odzyskuje się przez ekstrakcję mieszaniną chloroform-aceton 4:1. Ekstrakt przemywa się wodą i zatęża pod zmniejszonym ciśnieniem, a otrzymany surowy produkt oczyszcza przez krystalizację z acetonu lub mieszaniny aceton-benzen. Otrzymuje się z ok. 75% wydajnością 6ot-fluoro-16ot,17oC-izopropylidenodioksy-11/3.21-dihydroksy-4-pregnen-3,20-dion o następujących danych fizycznych: t.t. 25O°C;
Przykład III. Proces prowadzi się jak w przykładzie II z tym, że po 30 h trans- . formacji do brzeczki fermentacyjnej dodaje się dalsze 200 mg 21-monobursztynianu 6 oC-fluoro-16o£, 17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dionu i transformację prowadzi się nadal 80 h. Dalej postępuje się jak w przykładzie II.
Przykład IV. Proces prowadzi się jak w przykładzie II z tym, że steroid poddaje się działaniu samych zarodników w/w drobnoustroju namnażając go na pożywce, a następnie oddzielając go od grzybni wegetatywnej. Stężenie zarodników zawieszonych w wodzie lub w roztworze buforowym waha się w granicach 1-5χ10θ/ιη1.
Przykład V. Proces prowadzi się jak w przykładzie II z tym, że wyhodowaną kulturę przed biokonwersją odwirowuje się i grzybnię zawiesza w wodzie /13-15 g grzybni w 100 ml wody/ i dalej postępuje jak w przykładzie II.
Przykład VI. Proces prowadzi się jak w przykładzie III z tym, że odwirowaną jak w przykładzie V grzybnię zawiesza się w 100 ml buforu fosforanowego przygotowanego wg Sorensena. Ogólny czas konwersji skraca się do 70 h. Wydajność i jakość produktu jest podobna do wartości z przykładu II.
Przykład VII. Proces prowadzi się jak w przykładzie II z tym, źe po zakończeniu biokonwersji grzybnię odwirowuje się i ekstrahuje mieszaniną aceton-woda 1:1 lub metanol-woda 1:1. Aceton lub metanol odparowuje się^a roztwór wodny ekstrahuje chloroformem. Z odwirowanej od grzybni brzeczki steroid odzyskuje się przez ekstrakcję chloroformem, a ekstrakty chloroformowe z grzybni i brzeczki łączy się razem i dalej postępuje jak w przykładzie II.
Przykład VIII. Zawiesinę z trzech skosów dobrze zarodnikującej kultury przygotowanej jak w przykładzie Π zaszczepia się kolbę pojemności 2 1 z 80 ml pożywki o składzie: ekstrakt drożdżowy - 10 g; sacharoza - 5 g; Tween 80 - 0,5 g; olej sojowy - 0,2 g; olej silikonowy - 2 g; woda wodociągowa do 1 1; - 5>4-5,6. Po 48 h hodowli w warunkach tlenowych przeszczepia się 50 ml kultury do następnych kolb zawierających 250 ml pożywki o wyżej podanym składzie. Po 24 h inkubacji w warunkach tlenowych, 3 1 wyhodowanej kultury przeszczepia się do metalowego fermentatora zawierającego 20 1 pożywki o składzie: pepton - 10 g; ekstrakt drożdżowy - 6 g; K^HPO^ - 5 g; glukoza - 20 g; sacharoza - 20 g; nitrofurantoina - 0,05 g> olej sojowy - 0,2 g; woda wodociągowa - 1 1; pH - 5>4. Wzrost kultury w fermentatorach prowadzi się 24 h, w temp. 26-28°C, przy mieszaniu i napowietrzaniu 0,8-1 1/min powietrza na 1 1 hodowli przy ciśnieniu w fermentatorze 760-980 kPa. W czasie wzrostu dodaje się dwukrotnie po 30 mg nitrofurantoiny na 1 1 hodowli. Następny etap namnażania grzybni prowadzi się w fermentorach zawierających 140 1 pożywki o składzie podanym wyżej. Dalsze dwa etapy namnażania prowadzi się w fermentorach zawierających po 1400 1 i 9000 1 pożywki o składzie: pepton - 5 g> ekstrakt drożdżowy - 3 g; K2HP04 “ 5 g; glukoza - 20 g; namok kukurydziany - 12 g; olej sojowy - 0,2 g; nitrofurantoina - 0,05 g> woda wodociągowa - 1 1; pH - 5,4. Hodowlę prowadzi się w identyczny sposób jak podano dla fermentora 20 1.
Po uzyskaniu dobrze wyrośniętej kultury grzybnię odfiltrowuje się i zawiesza w wodzie o pH 6,8-7>4, a następnie dodaje się 0,05 g nitrofurantoiny i 2 g 21-monobursztynianu 6oC-fluoro-l6oC, 17o£-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dionu na każdy litr wody służącej do zawieszenia grzybni. Biokonwersję prowadzi się w takich samych warunkach jak wzrost kultury w fermentorze. Dalej postępuje się jak w przykładzie VII z tym, że surowy produkt z ekstraktów chloroformowych krystalizuje się z benzenu, a następnie z mieszaniny metanol-woda. .
Przykład IX. Proces prowadzi się jak w przykładzie II z tym, że biokonwersji poddaje się 21-monoadypinian 6o£-fIuoro-16cC, 17 oć-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dionu w stężeniu 300 mg/100 ml podłoża. Izolacja produktu jak w przykładzie II.
I
I
149 597 /
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentoweI1. Sposób wytwarzania 6oC-fluoro-l6oCt17c>ó-izopropylidenodioksy-11/3,21-dihydroksy-4-pregnen-3,20-dionu metodą mikrobiologiczną, znamienny tym, że 6oC-fluoro-l6oć,17oC-izopropylidenodioksy-21-hydroksy-4-pregnen-3,20-dion lub jego 21-acylowe pochodne, a zwłaszcza w postaci 21-półestru dwuzasadowego kwasu alifatycznego nasyconego o 4-7 atomach węgla, poddaje się enzymatycznej 11/3-hydroksylacji za pomocą szczepu Cunninghamella elegans 1785/21 Gp, jego grzybni wegetatywnej lub zawiesiny zarodników, po czym produkt wyodrębnia się i oczyszcza w znany sposób.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako półester stosuje się 21-monobursztynian lub 21-monoadypinian.Pracownia Poligraficzna UP RP. Nakład 100 egz. Cena 1500 zł
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL26378387A PL149597B1 (pl) | 1987-01-23 | 1987-01-23 | SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NU |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL26378387A PL149597B1 (pl) | 1987-01-23 | 1987-01-23 | SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NU |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL263783A1 PL263783A1 (en) | 1988-09-15 |
| PL149597B1 true PL149597B1 (pl) | 1990-02-28 |
Family
ID=20034709
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL26378387A PL149597B1 (pl) | 1987-01-23 | 1987-01-23 | SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NU |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL149597B1 (pl) |
-
1987
- 1987-01-23 PL PL26378387A patent/PL149597B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL263783A1 (en) | 1988-09-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7259005B2 (en) | Microorganism having ability to convert sterol into androst-4-ene-3, 17-dione/androsta-1,4-diene-3, 17-dione and preparation method and use thereof | |
| CN102061320B (zh) | 11α，17α-二羟基-雄甾-4-烯-3，20-二酮的制备方法 | |
| JP2719377B2 (ja) | ９α―ヒドロキシ―１７―ケトステロイドの微生物学的製法 | |
| US8367394B2 (en) | Process for the synthesis of 9α-hydroxy-steroids | |
| PL149597B1 (pl) | SPOSÓB WYTWARZANIA 6CĆ-FLU0R0-16 oC, 17oC -IZ0PR0PYLIDEN0DI0KSY-11 β , 21-DIHYDR0KSY-4-PREGNEN-3»20-DI0NU | |
| EP1483395A1 (en) | Process to prepare and isolate geldanamycin | |
| KR100536676B1 (ko) | 콜히콘 화합물로부터 효소법에 의한 대응하는 3-글리코실유도체로의 변형방법 | |
| IE53238B1 (en) | Steroid transformation process | |
| US4336332A (en) | Process for the manufacture of hydroxylated steroids | |
| US4175006A (en) | Composition of matter and process | |
| EP0786011B1 (en) | Microbiological process for the preparation of 1-unsaturated 17-beta-carboxysubstituted 3-oxo-4-azaandrostan-3-ones | |
| RU2407800C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 14α-ГИДРОКСИПРОИЗВОДНЫХ Δ4-3,17-ДИКЕТО-АНДРОСТЕНОВ | |
| US4226936A (en) | Process for preparing 9α-OH BN alcohol | |
| EP1504021B1 (en) | Process for dehydrogenation of azaandrostane compounds | |
| US4223092A (en) | Process for preparing 9α-OH BN acid methyl ester | |
| US4221868A (en) | Process for preparing 9α-OH testosterone | |
| HU204575B (en) | Process for producing 1-methyl-1,4-androstadiene-3,17-dion | |
| EP0983295A2 (en) | 4-aza-steroids substituted in one or more of positions 7, 11 and 15 or with an unsaturated 14(15)-double bond as inhibitors of testosterone-5-alpha-reductase | |
| MXPA06003504A (es) | Metodo de fermentacion para la preparacion de testolactona por especies de fusarium. | |
| JPH0117678B2 (pl) | ||
| CS231651B1 (cs) | Způsob výroby prednieonu | |
| JPS62118897A (ja) | ステロイド類の１１β位の水酸化法 | |
| HU226918B1 (en) | Microbiological method for preparation of hydroxy derivatives of 4-androsten-3,17-dione | |
| PL90658B1 (pl) | ||
| JPS61205480A (ja) | 新規微生物 |