NO892020L - Fremgangsmaate og apparat for bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff. - Google Patents

Fremgangsmaate og apparat for bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff.

Info

Publication number
NO892020L
NO892020L NO89892020A NO892020A NO892020L NO 892020 L NO892020 L NO 892020L NO 89892020 A NO89892020 A NO 89892020A NO 892020 A NO892020 A NO 892020A NO 892020 L NO892020 L NO 892020L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
active substance
immunologically active
electrode
enzyme
bound
Prior art date
Application number
NO89892020A
Other languages
English (en)
Other versions
NO892020D0 (no
Inventor
Ivar Giaever
Charles Richard Keese
Original Assignee
Gen Electric
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gen Electric filed Critical Gen Electric
Publication of NO892020D0 publication Critical patent/NO892020D0/no
Publication of NO892020L publication Critical patent/NO892020L/no

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54373—Apparatus specially adapted for solid-phase testing involving physiochemical end-point determination, e.g. wave-guides, FETS, gratings
    • G01N33/5438—Electrodes
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/817—Enzyme or microbe electrode
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/806—Electrical property or magnetic property

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Electric Means (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte og et apparat
for bestemmelse av immunologisk aktive stoffer. Nærmere bestemt vedrører oppfinnelsen bestemmelsen av antistoffer og antigener ved hjelp av elektriske midler.
Immunologiske reaksjoner er høyspesifikke inter-aksjoner hvor et antigen bindes til en tilsvarende bestanddel som er spesifikk for antigenet og generelt kjent som antistoffet, hvorved detdannes et immunologisk kompleks. I et biologisk system for inntrengningen av en fremmed biologisk bestanddel får det biologiske system til å produsere det bestemte antistoff til antigenet. Antistoffmolekylene har kjemiske bindingsseter som er komplimentære til de på anti-genmolekylene, slik at antigenet og antistoffet bindes
sammen, hvorved det immunologiske kompleks dannes.
Antistoffer fremstilles ved hjelp av biologiske systemer som svar på inntrengning i disse av fremmede legemer. Selv antistoffet i ett system kan virke som et antigen i et annet system og fremkalle ehimmunologisk reaksjon.
Følgelig er bestemmelsen av enten antigener eller antistoffer som er til stede i et biologisk system, av medi-sinsk diagnostisk verdi for bestemmelse av hvilke antigener som er til stede, eller hvilke antigener systemet er blitt eksponert mot.
De fleste antigenene er proteiner eller inneholder proteiner som en vesentlig del, mens alle antistoffer er proteiner. Et antigen- og antistoffprotein kan begge ha flere bindingsseter.
Bortsett fra antigen/antistoff-reaksjonene er det ved oppfinnelsen også tenkt på ytterligere immunologiske reaksjoner. F.eks. omfatter de følgende systemer biologiske par-tikler som er i stand til å gjennomgå de immunologiske reaksjoner som her er beskrevet:
Virus
Bakterier og bakterietoksiner
Sopper
Parasitter
Dyrevev
Kroppsvæsker fra dyr og lignende.
Eksempler på antigener ville være geit-antistoff, humant choriont gonadotropin (HCG) og hepatitt-assosiert antigen (HAA).
Når det gjelder virus, er antigener viruspartikler,
og det tilsvarende antistoff fremstilles ved administrering av antigenet til en levende vert. Eksempler på slike antigen/antistoff -komplekser som kan anvendes i den her be-skrevne oppfinnelse, er: Rubellavirusantigener - Rubella-virusantistoff, poliovirusantigen -poliovirusantistoff, "verisicular stomatitis virus" (VSV) antigen - VSV-antistoff, og ervervet immunsviktsyndrom (AIDS) antigen - AIDS-antistoff.
Antistoffer som svarer til bakterier og bakterietoksiner fremstilles på en lignende måte som virusantistoffer. Det følgende er illustrerende eksempler på bakterie- eller bak-terietoksinantigen/antistoff-par som kan brukes ifølge foreliggende oppfinnelse: tetanus toksoidsuspensjon (antigen) - tetanusantistoff, difteritoksinsuspensjon (antigen) - dif-teriantistoff, suspensjon av Neisseria gonorrhoea (antigen) - gonore-antistoff, suspensjon av Treponema palladium (antigen) - syfilisantistoff.
Soppantigener er antigene ekstrakter av soppsuspen-sjoner, og antistoffet er soppantistoffet som fremstilles ved innføring i en levende vert. Eksempler på antigen/antistoff-komplekser i soppsystem er: suspensjon av Aspergillus-ekstrakt (antigen) - aspergillus-sopp-antistoff, suspensjon av Candida-ekstrakt (antigen) - candida-sopp-antistoff.
Antigener og antistoffer i parasittsystemer testes på en lignende måte. Systemet ekstrakt av Toxoplasma gondii (antigen) - Toxoplasma-gondii-antistoff er et eksempel.
Polysaccharid er et system hvor antigenet er et car-bohydratantigen, slik som antigen/antistoff-systemet pneumococcus-polysaccharider (antigen) -pneumococcus-antistoff.
Den antigene bestanddel når det gjelder hormoner, finnes vanligvis i et hormonekstrakt, og antistoffet er det bestemte hormonantistoff som utføres av den levende organisme etter injeksjon. Et eksempel på dette antigen/antistoff-kompleks er insulinhormon-insulinantistoff.
Bestemte antigener eller antistoffer kan også merkes med et enzym. I en enzymbundet overflateimmunoanalyse (ELISA) adsorberes antigenet vanligvis til en overflate til en liten brønn. Prøven som mistenkes for å inneholde antistoff, tilsettes til brønnen, og får inkuberes. Dersom prøven inne-holdt antistoff, vil noe av antistoffet ha festet seg spesifikt til det foradsorberte antigen. Brønnen skylles så og et andre antistoff bundet til et enzym tilsettes til brønnen. Dette andre antistoff kan være spesifikt for enten antigenet eller for det første antistoff, men ikke for begge. Dersom det andre antistoff er spesifikt for antigenet, kalles dette en konkurranseanalyse. Dersom det andre antistoff er spesifikt for antistoffet, kalles dette en sandwich-analyse. Brønnen skylles igjen og det korrekte substrat for enzymet tilsettes til brønnen. Enzymet vil, dersom det er til stede, reagere med substratet, vanligvis på en slik måte at fargen til oppløsningen forandres. Forandringen i farge står så-ledes i korrelasjon til mengden av antistoff i den første oppløsning.
Visse andre enzymer vil forårsake at det dannes en utfelling, og bestemmelsen av, tilstedeværelsen av og mengden av utfellingen vil indikere tilstedeværelsen av og konsentrasjonen av antistoffet som var mistenkt å foreliggende i den første oppløsning.
Ifølge US patentskrift nr. 4.072.576 er enzymatiske reaksjoner forsøkt ved å måle den elektriske spenningsfor-skjell over membraner, som er spesifikt for reaksjonspro-duktet fra reaksjonen mellom et enzym og et bestemt substrat for enzymet. En slik fremgangsmåte er ikke generelt anvend-bar til et stort antall forskjellige immunologisk aktive stoffer.
Ifølge US patent nr. 4.054,646 er slike immunologiske reaksjoner påvist å finne sted på et metallkule-belagt substrat. Det resulterende antigen/antistoff-kompleks kan så undersøkes ved optiske midler, og ved å sammenligne tykkelsen til antigenet eller antistoffet alene med tykkelsen til antigen/antistoff-komplekset. Ifølge US patentskrift nr. 4.490.216 kan slike antigen/antistoff-komplekser bestemmes ved hjelp av forandringer i elektrostatisk interaksjon mellom et polart lag og et amfifilt lag bundet til antigen/ antistoff-komplekset og adskilt fra det polaritetsfølsomme lag ved hjelp av et lipidlag. Ifølge US patentskrift nr. 4.151.949 utføres bestemmelse av tilstedeværelsen av kjemiske stoffer ved å måle endringer i elektrisk ladning på en elektrode omsluttet av en membran som omfatter et hydrofobt organisk polymersubstrat med hydrocarbonkjeder med bestemte proteiner (antigen eller antistoffer) adsorbert på disse. Det er påkrevet med et langt tidsrom, i størr-elsesorden 1-2 dager, for å fullføre målingen.
Det er et formål ved foreliggende oppfinnelse å bestemme mer kvantitativt, og ved hjelp av elektriske midler immunreaksjonen ved bruk av enzym-bundne immunologisk aktive stoffer og enzym/substrat-reaksjonen.
En hovedfordel ved foreliggende oppfinnelse er enkel-heten ved de elektriske målinger som anvendes. En ytterligere fordel er at fremgangsmåten kan utføres hurtig. Ved en annen fordelaktig utførelsesform kan flere elektroder brukes i et enkelt væskemedium som skal analyseres med hensyn på tilstedeværelsen av flere immunologisk aktive stoffer. Dette tillater mange forskjellige immunologisk aktive stoffer å bli analysert samtidig.
Figur 1 viser en skjematisk form av et elektrodeappa-rat og midler for bestemmelse av immunreaksjonen ved å
måle elektrodens impedans ifølge foreliggende oppfinnelse. Figur 2 er en vertikalprojeksjon av et apparat ifølge oppfinnelsen som viser en elektrode med et andre immunologisk aktivt stoff adsorbert.
Figur 3 er en vertikalprojeksjon av apparatet i figur
2 som viser trinnene som er involvert ved fremstilling og anvendelse av apparatet i én utførelsesform som omfatter en konkurranseanalyse.
Figur 4 er en vertikalprojeksjon av apparatet i figur
2 som viser trinnene som er involvert ved fremstilling og anvendelse av apparatet i en utførelsesform som omfatter en sandwich-analyse.
Oppfinnelsen tilveiebringer en fremgangsmåte for kvan- tativ bestemmelse av tilstedeværelsen av et immunologisk aktivt stoff ved måling av endringen i impedans til en elektrode med (a) bindingsseter som er spesifikke for stoffet,
og (b) et enzymbærende reagens i et medium som omfatter et substrat for enzymet som kan reagere med enzymet, slik at det dannes et uoppløselig reaksjonsprodukt som, etter dannelse, belegger i det minste en del av elektroden og derved varierer dens impedans.
Generelt omfatter elektroden ifølge oppfinnelsen et kjemisk og elektrisk inert materiale, slik som plast, glass, keramikk eller lignende, hvorpå det er blitt avsatt en tynn metallfilm. Metallfilmen er igjen forsynt med et immunologisk aktivt stoff, slik som et antigen eller et antistoff, adsorbert på minst en del av metallfilmoverflaten. Dette immunologiske reaktive stoff gir bindingsseter for dannelse av et immunologisk kompleks og forhindrer derved videre binding i et allerede okkupert sete. Den resulterende eksistens eller ikke-eksistens av tilgjengelige bindingsseter kan ut-nyttes i en kvantitativ fremgangsmåte for frembringelse av en variasjon i impedansen til elektroden ved å eksponere den mot et reagens som kan reagere slik at det dannes et uopp-løselig reaksjonsprodukt som avsettes og fester seg til metallfilmen, og derved forårsaker en endring i impedansen. Reagenset er et enzymbærende immunologisk reaktivt materiale som vil danne kompleks i åpne bindingsseter på elektroden og derved feste enzymet på elektrodeoverflaten. Eksponering av den resulterende enzymaktive elektrode mot et egnet reaktivt substrat for enzymet vil gi det uoppløselige reaksjonsprodukt som igjen avsettes på minst en del av elektroden og derved forårsaker en variasjon i impedans målt ved hjelp av apparatet som her er beskrevet.
Oppfinnelsen kan beskrives som en fremgansgmåte for antigen- eller antistoffbestemmelse og -måling som er basert på en enzymreaksjon i ikke-okkuperte bindingsseter hos antigenet eller antistoffet.
Ifølge foreliggende oppfinnelse er det tilveiebragt
en fremgangsmåte for bestemmelse av tilstedeværelsen av, konsentrasjonen av eller fraværet av et første immunologisk
aktivt stoff i et væskemedium, hvor fremgangsmåten omfatter trinnene ved å tilveiebringe en elektrode med et lite areal på fra ca. 10 -10 cm 2 til ca. 10 " 2 cm 2 på et subtratsmateriale, adsorbere et andre immunologisk akivt stoff som binder det første immunologisk aktive stoff på elektroden, bringe elektroden hvorpå det andre immunologiske aktive stoff er adsorbert i kontakt med et væskemedium som skal analyseres med hensyn på tilstedeværelsen eller fraværet av det første immunologiske aktive stoff, bringe elektroden i kontakt med et væskemedium som omfatter et tredje immunologisk aktivt stoff bundet til et enzym som enten kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff og ikke kan bindes til det første immunologisk aktive stoff, eller kan bindes til det første immunologisk aktive stoff og ikke kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff, bringe elektroden i kontakt med et væskemedium som omfatter et enzymsubstrat som kan reagere med enzymet bundet til det tredje immunologisk aktive stoff, hvorved det dannes et uoppløselig reaksjonsprodukt, senke elektroden ned i en måleoppløsning og måle elektrodens elektriske impedans. Dersom det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym var av typen som kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff og ikke kan bindes til det første immunologisk aktive stoff, indikerer ingen endring eller liten endring i målt impedans at ingen enzymatisk reaksjon har funnet sted og at det mistenkte første immunologisk aktive stoff derfor er til stede. På den annen side indikerer en stor endring i impedans fravær av det første immunologisk aktive stoff. Graden av endring er proporsjonal med konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff i væskemediet. Dersom det tredje immunologisk aktive stoff var av typen som kan bindes til det første immunologisk aktive stoff og ikke kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff, ville ingen endring eller liten endring i impedans igjen indikere at ingen enzymatisk reaksjon har funnet sted, samt også indikere fravær av det første immunologisk aktive stoff. En stor endring i impedans ville indikere det motsatte, idet graden av endring igjen ville være proporsjonal med konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff i væskemediet. Målt impedans i begge analysene kan sammenlignes med en standardkurve for konsentrasjon i forhold til impedans og derved gi en kvantitativ konsentrasjonsanalyse av det første immunologisk aktive stoff.
Et annet hovedaspekt ved oppfinnelsen omfatter i en første utførelsesform apparat for bestemmelse av tilstedeværelsen, konsentrasjonen av eller fraværet av et første immunologisk aktivt stoff, hvor apparatet omfatter en elektrode med kjent impedans hvorpå et andre immunologisk aktivt stoff som kan binde det første immunologisk aktive stoff er adsorbert på minst ett område av overflaten, idet området er lite og har en størrelse i området fra ca. 10 -10cm<2>
-2 2
til ca. 10 cm . Også omfattet, som en andre utførelses-
form, er et apparat som først definert ovenfor og som videre omfatter et immunologisk bundet lag over et første lag, som omfatter (i) det første immunologisk aktive stoff, (ii) et tredje immunologisk aktivt stoff bundet til et enzym og som kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff, men ikke kan bindes til det første immunologisk aktive stoff, eller (iii) en blanding av (i) og (ii). I en tredje utførelses-form omfatter oppfinnelsen apparat som først definert ovenfor og som videre omfatter et immunologisk bundet lag adsorbert på minst en del av dette, som omfatter det første immunologisk aktive stoff og hvor det på det første immunologisk aktive stoff er adsorbert et immunologisk bundet lag som omfatter et tredje immunologisk aktivt stoff bundet til et enzym og som kan bindes til det første immunologisk aktive stoff,
men ikke kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff.
Apparatet som omfatter den andre og tredje utførelses-form kan videre omfatte, som et overlag på det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym, et reaksjonsprodukt av enzymet og et spesifikt substrat for enzymet.
I figur 1 er det vist en måleanordning for bestemmelse av endringer i impedans på elektrode 2 som omfatter bærer 4 som kan være metall, glass, glimmer, sammensmeltet silicium. oxyd, kvarts, termoplastisk varmeherdbar plast og lignende, fortrinnsvis plastiske termoplaster, slik som et polycarbonat- ark hvorpå det er avsatt metalloverflåtene 6a og 6b som f.eks. består av forstøvningsavsatt metallfilm av f.eks. gull, platina, tantal, indium, titan og lignende. Elektroden 2 er delvis nedsenket i beholder 8 som inneholder flytende måleoppløsning 10, slik som vann eller saltoppløsning. Impedansen 10. elektrode 2 måles ved å bruke motelektrode 12, elektrisk koblet til ekstern impedansmålebru 16, detektor k8 og vekselstrømkilde 20 som har en ytelse på 100 - 10.000 Hz og spenninger fra ca. 0,1 til ca. 10 millivolt. Generelt brukes apparatet ved en spenning på ca. 1 millivolt. Det er også vist en eventuell bryter 14 som gjør det mulig å foreta impedansmålinger på alternerende metallkoblinger 6a og 6b.
Fig. 2 viser i skjematisk form et tverrsnitt gjennom elektrode 2 hvor et lag som omfatter det andre immunologisk aktive stoff 22 er adsorbert på en del av en metallfilmelek-trode 6 som er opplagret på et hoveddelmateriale 4. Sporene som er vist som del av stoff 22 representerer bindingsseter. De immunologisk aktive stoffer som er vist ved henvisnings-tall 22 omfatter fortrinnsvis antigener eller antistoffer, hvorav mange er illustrert her. Figur 3 hjelper til å illustrere fremgangsmåten og apparatet ifølge oppfinnelsen når det benyttes en konkurranseanalyse. Dersom en elektrode ifølge figur 2 senkes ned i væskemedium som skal analyseres med hensyn på tilstedeværelsen av et første immunologisk aktivt stoff 24. Ettersom det første immunologisk aktive stoff er spesifikt for det andre immunologisk aktive stoff 24, vil enheter av stoff 24 bindes til bindingssetene i stoff 22, slik at det dannes et antigen/antistoff-kompleks adsorbert på metall 6 i elektroden. Dessuten vil minst en del av og, avhengig av konsentrasjonen r alle de tilgjengelige bindingsseter som er vist som spor på stoff 2, bli okkupert nå og være dekket av det første immunologisk aktive stoff 24. Dersom på den annen side det første immunologisk aktive stoff 24 er fraværende, vil ikke noe bli bundet til det andre immunologisk aktive stoff 22, det vil ikke bli dannet noen antigen/antistoff-komplekser og ingen bindingsseter vil bli dekket. For å fortsette analysen bringes så elektroden i kontakt med et flytende medium som omfatter et tredje immunologisk aktivt stoff 26 som kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff 22, men som ikke kan bindes til det første immunologisk aktive stoff 24. Stoff 26 er bundet til enzym 28. Dersom det første immunologisk aktive stoff 24 var til stede i prøven som skulle testes, i konsentrasjoner tilstrekkelige til å mette bindingssetene på
det andre immunologisk aktive stoff 22, vil ikke noe av det tredje immunologisk aktive stoff 26 kunne bindes til stoff 22, og ingen enheter av stoff 26 vil derfor forbli festet til elektroden. Følgelig vil heller ikke noe enzym 2 8 være festet til elektroden. Dersom imidlertid, som vist i figur 3, det første immunlogisk aktive stoff 24 var til stede i prøven som skulle testes, i forholdsvis lav konsentrasjon, ville i det minste noen bindingsseter i stoff 22 være forblitt åpne og noe tredje immunologisk aktivt stoff 26 og enzym 28 ville bindes til disse åpne bindingssetene på det andre immunologisk aktive stoff 22. Som et direkte resultat vil noe enzym bli festet til elektroden. Dersom det første immunologisk aktive stoff 24 var fraværende i prøven som testes, ville alle bindingssetene på det andre immunologisk aktive stoff 22 nødvendigvis være åpne og tilgjengelige, og det tredje immunologisk aktive stoff 26 bundet til enzym 28 ville bindes til hver av dem. Enzym 28 ville derfor indirekte bli festet gjennom 2 6 til hvert bindingssete i det andre immunologisk aktive stoff 22. For å fortsette analysen, bringes så elektroden i kontakt med et væskemedium som inneholder et passende enzymsubstrat for enzymet bundet til det tredje immunologisk aktive stoff, idet enzymet reagerer med enzymsubstratet slik at det dannes et uoppløselig molekyllag vist som 30 som belegger elektroden og endrer dens impedans.
For å fullføre analysen bestemmes endringen i impedans til elektroder behandlet som beskrevet som skriver seg fra utfelling av lag 30, elektrisk, f.eks. i et apparat vist i figur 1.
En liten endring eller ingen endring i impedans indikerer at ingen enzymatisk reaksjon har funnet sted og derfor at det mistenkte første immunologisk aktive stoff 24 er til stede ved et tilstrekkelig nivå i prøven som skal testes,
til å mette bindingssetene på det andre iitimunologisk aktive
stoff 22. På den annen side indikerer en stor endring i impedans fravær av det første immunologisk aktive stoff i prøven som testes. Mellomliggende endringer av impedans indikerer tilstedeværelsen av det første immunologisk aktive stoff, men i konsentrasjoner som er mindre enn det som er påkrevet for å mette bindingssetene på det andre immunologisk aktive stoff. Graden av endring er proporsjonal med konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff i prøven. Prøven sammenlignes med en forhåndsbestemt standardkurve
for konsentrasjon i forhold til impedans for å bestemme konsentrasjonen av det:første immunologisk aktive atoff.
Dersom det første immunologisk aktive stoff som skal bestemmes ved hjelp av oppfinnelsen under benyttelse av en konkurranseanalyse som beskrevet ovenfor omfatter et antistoff, vil det andre immunologisk aktive stoff omfatte et antigen og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym vil omfatte et antistoff bundet til et enzym. Dersom det første immunologisk aktive stoff som skal bestemmes ved hjelp av oppfinnelsen under benyttelse av en konkurranseanalyse som beskrevet ovenfor omfatter et antigen, vil det andre immunologisk aktive stoff omfatte et antistoff og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym vil omfatte et antigen bundet til et enzym.
Illustrerende eksempler på andre immunologisk aktive stoffer er hepatitt-assosierte antigener eller antistoffer. Når det andre immunologisk aktive stoff omfatter hepatitt-assosiert antigen, kan det første immunologisk aktive stoff omfatte et hepatitt-assosiert antistoff, det tredje immunologiske stoff bundet til et enzym kan omfatte et hepatitt-assosiert antistoff bundet til pepperrotperoxydase og enzymsubstratet kan omfatte carbazol og hydrogenperoxyd.
Figur 4 hjelper til å illustrere fremgangsmåten og apparatet ifølge oppfinnelsen ved benyttelse av en sandwich-analyse. Dersom.en elektrode ifølge figur 2 senkes ned i et væskemedium som skal analyseres med hensyn på et første immunologisk aktivt stoff 24, og det er til stede, vil det bindes til det andre immunologisk aktive stoff 22 slik at det dannes enheter av et antigen(antistoff-kompleks adsorbert på metall 6 i elektroden fordi det første immunologisk aktive stoff er spesifikt for det andre immunologisk aktive stoff. Dessuten vil minst en del av, og avhengig av konsentrasjonen, muligens alle tilgjengelige bindingssetene som er vist som spor på det andre immunologisk aktive stoff 22 nå bli dekket av det første immunologisk aktive stoff. Dersom på den annen side, det første immunologisk aktive stoff er fraværende, vil ikke noe bli bundet til det andre immunologisk aktive stoff 22, det vil ikke bli dannet noen antigen/antistoff-komplekser og ingen bindingsseter vil bli dekket.
For å fortsette analysen skylles elektroden eventuelt, men fortrinnsvis. Den bringes så i kontakt med et væskemedium som omfatter et enzym som bærer det tredje immunologisk aktive stoff 34 som kan bindes til det første immunologisk aktive stoff 24, men som ikke kan bindes til det andre immunolgisk aktive stoff 22. Dersom det første immunologisk aktive stoff var fraværende i prøven som testes, vil ikke noe av det tredje immunologisk aktive stoff bindes, og derfor vil ikke noe forbli festet til elektroden. Følgelig vil heller ikke noen enzym 36 bli festet til elektroden. Dersom imidlertid det første immunologisk aktive stoff var til stede i prøven som testes, ved forholdsvis lave konsentrasjoner, vil i det minste noe av det tredje immunologisk aktive stoff 34 og enzym 36 bindes til åpne bindingsseter på det første immunologisk aktive stoff vist som krumme overflater på 24. Som et direkte resultat vil i det minste noe enzym bli festet til elektroden. For å fortsette analysen bringes så elektrodematerialet i kontakt med et væskemedium som inneholder et passende enzymsubstrat for enzymet bundet til det tredje immunologisk aktive stoff, og enzymet reagerer med det passende enzymsubstrat slik at det dannes et uoppløselig molekyllag vist som 30 i figur 4.
For å fullføre analysen bestemmes endringen i impedans til en elektrode fremstilt som beskrevet sammenlignet med elektroden ifølge figur 2 elektrisk, f.eks. i et apparat vist i figur 1. Fraværet av en endring i impedans ville imidlertid indikere at ingen enzymatisk reaksjon har funnet sted og at det mistenkte første immunologisk aktive stoff er fraværende fra prøven som testes. På den annen side indikerer enhver endring i impedans tilstedeværelsen av det første immunologisk aktive stoff i prøven som testes, og en stor endring indikerer at det første immunologisk aktive stoff er til stede i en mengde som er tilstrekkelig til å mette bindingssetet på det andre immunologisk aktive stoff. Graden av endring er proporsjonal med konsentrasjonen av
det første immunologisk aktive stoff i prøven og sammenlignes med en forhåndsbestemt standardkurve for konsentrasjon i forhold til impedans for å bestemme konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff.
Dersom det første immunologisk aktive stoff
som skal påvises ved hjelp av oppfinnelsen under anvendelse av en sandwich-analyse som beskrevet ovenfor omfatter et antistoff, vil det andre immunologisk aktive stoff omfatte et antigen, og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym vil omfatte et antistoff bundet til et enzym. Dersom det første immunologisk aktive stoff som skal påvises ved hjelp av oppfinnelsen under benyttelse av en sandwich-analyse som beskrevet ovenfor omfatter et antigen, vil det andre immunologisk aktive stoff omfatte et antistoff og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym vil omfatte et antistoff bundet til et enzym.
Det følgende eksempel illustrerer oppfinnelsen.
Det fremstilles en elektrode ved å sprute eller for-dampe en gullfilm over på et lite område fra ca. 10 -10 cm<2>til ca. 10 -2 cm 2 på et polycarbonatunderlag. En kobbertråd festes for å lette sammenkoblingen av gullelektroden til en anordning for måling av elektrisk impedans. Bovint serum-albumin (BSA) adsorberes på gullelektroden. Elektroden senkes så ned i 30 minutter i en flytende oppløsning som mistenkes for å inneholde anti-BSA-geit-antistoff. Den fjernes og skylles i vann. Elektroden senkes så ned i en opp-løsning som inneholder en oppløsning av anti-geit-kanin-antistoff bundet til pepperrotperoxydase. Elektroden fjernes så og plasseres i en oppløsning som inneholder 3-amino-9-ethylcarbazol og hydrogenperoxyd. Elektroden fjernes og
plasseres i en anordning for måling av elektrisk impedans.
En strøm ved 1000 Hz og 1 millivolt påsettes anordningen.
Enøkning i impedans måles, noe som indikerer tilstedeværelsen av anti-BSA-geit-antistoff i prøveoppløsningen.
For fagfolk innen teknikken vil mange variasjoner av denne oppfinnelse fremstå i lys av den ovenfor, detaljerte beskrivelse. I stedet for et polycarbonatunderlag over-trukket med gull kan elektroden f.eks. omfatte en glassplate belagt med tantal eller indium. I stedet for BSA-antigen kan hepatitt-assosiert antigen, ekstrakt av Neisseria gonorrhoea (antigen) og AIDS-antigen adsorberes på gullelektroden og brukes til å bestemme tilstedeværelsen av, konsentrasjonen av eller fraværet av tilsvarende antistoffer for hen-holdsvis hepatitt, gonoré og ervervet immunsviktsyndrom.
I stedet for pepperrotperoxydase kan alkalisk fosfatase brukes som enzymer koblet til anti-geit-antistoffet. I stedet for aminocarbazol kan ortho-tolidin eller 3,3<1->diaminobenzi-din brukes som passende substrater for enzymet.

Claims (11)

1. Fremgansgmåte for bestemmelse av tilstedeværelsen av, konsentrasjonen av eller fraværet av et første immunologisk aktivt stoff i et flytende medium, karakterisert ved at: (i) en elektrode som omfatter en mengde metallfilm på et lite areal, x omradet fra 10 cm til 10 cm 2, på et underlag tilveiebringes, (ii) et andre immunologisk aktivt stoff som kan binde det første immunologisk aktive stoff adsorberes til elektroden, (iii) elektroden med det andre immunologisk aktive stoff adsorbert bringes i kontakt med et væskemedium som skal analyseres med hensyn på det første immunologisk aktive stoff, (iv) elektroden bringes i kontakt med et væskemedium som omfatter et tredje immunologisk aktivt stoff bundet til et enzym og som kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff, og som ikke kan bindes til det første immunlogisk aktive stoff, (v) elektroden bringes i kontakt med et væskemedium som omfatter et enzymsubstrat som kan reagere med enzymet bundet til det tredje immunologisk aktive stoff, (vi) elektroden senkes ned i en måleoppløsning, og (vii) elektrodens elektriske impedans måles, idet ingen endring eller bare en svak endring i impedans indikerer tilstedeværelse av det første immunologisk aktive stoff, og en stor endring indikerer fravær av det første immunologisk aktive stoff, idet graden av endring er proporsjonal med konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff i væskemediet.
2. Fremgansgmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at elektroden omfatter en film av gull, tantal, indium, platina, titan eller titan på et plastunderlag.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det første immunologisk aktive stoff omfatter et antistoff, det andre immunologiske aktive stoff omfatter et antigen og det tredje immunologiske stoff bundet til et enzym omfatter et antistoff bundet til et enzym.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det første immunologisk aktive stoff omfatter et antigen, det andre immunologisk aktive stoff omfatter et antistoff og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym omfatter et antigen bundet til et enzym.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at antistoffet omfatter anti-geit-antistoff, antigenet omfatter anti-geit-antigen, antistoffet bundet til et enzym omfatter anti-geit-antistoff bundet til pepperrotperoxydase og enzymsubstratet omfatter carbazol og hydrogenperoxyd.
6. Fremgangsmåte for å bestemme nærværet, konsentrasjonen av eller fraværet av et første immunologisk aktivt stoff i et væskemedium, karakterisert ved at: (i) en elektrode som omfatter metallfilm på et lite areal, i området fra 10 -10 cm <2> til 10 -2 cm <2> på et substrat tilveiebringes, (ii) et andre immunologisk aktivt stoff som kan binde det første immunologisk aktive stoff adsorberes på elektroden, (iii) elektroden hvorpå det andre immunologisk aktive stoff er adsorbert bringes i kontakt med et væskemedium som kan analyseres med hensyn på det første immunologisk aktive stoff, (iv) elektroden bringes i kontakt med et væskemedium som omfatter et tredje immunologisk aktivt stoff bundet til et enzym og som kan bindes til det første immunologisk aktive stoff og ikke kan bindes til det andre immunologisk aktive stoff, (v) elektroden bringes i kontakt med et væskemedium som omfatter et enzymsubstrat som kan reagere med enzymet bundet til det tredje immunologisk aktive stoff, (vi) elektroden senkes ned i en måleoppløsning og (vii) elektrodens elektriske impedans måles, idet ingen endring i impedans indikerer fravær av det første immunologisk aktive stoff og enhver endring i impedans indikerer tilstedeværelse av det første immunologisk aktive stoff, idet graden av endring er proporsjonal med konsentrasjonen av det første immunologisk aktive stoff i væskemediet.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at elektroden omfatter kuler av gull, tantal, indium, titan eller titan på et plastunderlag.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det første immunologisk aktive stoff omfatter et antistoff, det andre immunologisk aktive stoff omfatter et antigen og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym omfatter et antistoff bundet til et enzym.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det første immunologisk aktive stoff omfatter et antigen, det andre immunologisk - aktive stoff omfatter et antistoff og det tredje immunologisk aktive stoff bundet til et enzym omfatter et antistoff bundet til et enzym.
10. Apparat for bestemmelse av tilstedeværelsen av, konsentrasjonen av eller fraværet av et første immunologisk aktivt stoff i et væskemedium, karakterisert ved at det omfatter en elektrode med kjent impedans hvor et andre immunologisk aktivt stoff som kan binde det første immunologisk aktive stoff er adsorbert på minst ett område, idet arealet er lite og har en størrelse i området fra 10 -10 cm 2 til 10 -2 cm 2.
11. Fremgangsmåte for kvantitativ bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff, karakterisert ved en måling av en enzymreaksjon-indusert variasjon i impedansen til en elektrode som omfatter bindingsseter som er spesifikke for stoffet og et enzymbærende reagens i et medium som reagerer med enzymet slik at det dannes en uoppløselig impedansvarierende avsetning på elektroden.
NO89892020A 1988-05-20 1989-05-19 Fremgangsmaate og apparat for bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff. NO892020L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/196,718 US4920047A (en) 1988-05-20 1988-05-20 Electrical detection of the immune reaction

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO892020D0 NO892020D0 (no) 1989-05-19
NO892020L true NO892020L (no) 1989-11-21

Family

ID=22726568

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO89892020A NO892020L (no) 1988-05-20 1989-05-19 Fremgangsmaate og apparat for bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff.

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4920047A (no)
EP (1) EP0342382A3 (no)
JP (1) JPH0224548A (no)
IL (1) IL89719A0 (no)
NO (1) NO892020L (no)

Families Citing this family (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5218312A (en) * 1988-07-20 1993-06-08 Ricardo Moro Measurement apparatus for measuring a biological substance within a fluid substrate
CA2027694C (en) * 1989-10-20 2002-03-05 Tadashi Matsunaga Process and apparatus for detecting sensitized leukocyte or antigen
US5187096A (en) * 1991-08-08 1993-02-16 Rensselaer Polytechnic Institute Cell substrate electrical impedance sensor with multiple electrode array
WO1994023287A1 (en) * 1993-03-31 1994-10-13 Dkk Corporation Immunoassay and immunoassay cell used therefor
GB2276724A (en) * 1993-03-31 1994-10-05 Cambridge Life Sciences Electrochemical detection of specific binding species
EP0700520B1 (en) * 1993-05-29 1997-07-30 Cambridge Life Sciences Plc Sensors based on polymer transformation
WO1995029395A1 (en) * 1994-04-26 1995-11-02 The Regents Of University Of Michigan Unitary sandwich enzyme immunoassay cassette, device and method of use
US5620850A (en) * 1994-09-26 1997-04-15 President And Fellows Of Harvard College Molecular recognition at surfaces derivatized with self-assembled monolayers
AUPM950094A0 (en) * 1994-11-16 1994-12-08 Australian Membrane And Biotechnology Research Institute Detection device and method
WO1997025616A1 (en) * 1996-01-11 1997-07-17 Australian Membrane And Biotechnology Research Institute Ion channel sensor typing
CA2245664A1 (en) * 1996-02-08 1997-08-14 Australian Membrane And Biotechnology Research Institute Enzyme detection biosensors
AUPN980796A0 (en) * 1996-05-13 1996-06-06 Australian Membrane And Biotechnology Research Institute Improved reservoir components
US7393645B2 (en) * 1996-11-05 2008-07-01 Clinical Micro Sensors, Inc. Compositions for the electronic detection of analytes utilizing monolayers
US7014992B1 (en) 1996-11-05 2006-03-21 Clinical Micro Sensors, Inc. Conductive oligomers attached to electrodes and nucleoside analogs
US5981268A (en) * 1997-05-30 1999-11-09 Board Of Trustees, Leland Stanford, Jr. University Hybrid biosensors
US6013459A (en) * 1997-06-12 2000-01-11 Clinical Micro Sensors, Inc. Detection of analytes using reorganization energy
US7560237B2 (en) * 1997-06-12 2009-07-14 Osmetech Technology Inc. Electronics method for the detection of analytes
US7087148B1 (en) 1998-06-23 2006-08-08 Clinical Micro Sensors, Inc. Binding acceleration techniques for the detection of analytes
US6508803B1 (en) 1998-11-06 2003-01-21 Furukawa Techno Material Co., Ltd. Niti-type medical guide wire and method of producing the same
US6432723B1 (en) 1999-01-22 2002-08-13 Clinical Micro Sensors, Inc. Biosensors utilizing ligand induced conformation changes
US20020177135A1 (en) * 1999-07-27 2002-11-28 Doung Hau H. Devices and methods for biochip multiplexing
US7312087B2 (en) * 2000-01-11 2007-12-25 Clinical Micro Sensors, Inc. Devices and methods for biochip multiplexing
US6852525B1 (en) 1999-11-02 2005-02-08 Advanced Sensor Technologies Mammalian cell culture chamber
US6875619B2 (en) 1999-11-12 2005-04-05 Motorola, Inc. Microfluidic devices comprising biochannels
US6361958B1 (en) * 1999-11-12 2002-03-26 Motorola, Inc. Biochannel assay for hybridization with biomaterial
US6824669B1 (en) 2000-02-17 2004-11-30 Motorola, Inc. Protein and peptide sensors using electrical detection methods
US6602400B1 (en) 2000-06-15 2003-08-05 Motorola, Inc. Method for enhanced bio-conjugation events
WO2002012558A1 (en) * 2000-08-07 2002-02-14 Azur Environmental Ltd. Method of an apparatus for the detection of analytes
US6835552B2 (en) * 2000-12-14 2004-12-28 The Regents Of The University Of California Impedance measurements for detecting pathogens attached to antibodies
WO2002054052A1 (en) * 2001-01-08 2002-07-11 Leonard Fish Diagnostic instruments and methods for detecting analytes
US20050009101A1 (en) * 2001-05-17 2005-01-13 Motorola, Inc. Microfluidic devices comprising biochannels
US20030175947A1 (en) * 2001-11-05 2003-09-18 Liu Robin Hui Enhanced mixing in microfluidic devices
AU2003267998A1 (en) * 2002-07-20 2004-02-09 Acea Biosciences, Inc. Impedance based devices and methods for use in assays
US7732127B2 (en) * 2002-12-20 2010-06-08 Acea Biosciences, Inc. Dynamic monitoring of cell adhesion and spreading using the RT-CES system
US7192752B2 (en) * 2002-12-20 2007-03-20 Acea Biosciences Real time electronic cell sensing systems and applications for cell-based assays
US7470533B2 (en) 2002-12-20 2008-12-30 Acea Biosciences Impedance based devices and methods for use in assays
US8206903B2 (en) 2002-12-20 2012-06-26 Acea Biosciences Device and method for electroporation-based delivery of molecules into cells and dynamic monitoring of cell responses
US7560269B2 (en) * 2002-12-20 2009-07-14 Acea Biosciences, Inc. Real time electronic cell sensing system and applications for cytotoxicity profiling and compound assays
US7468255B2 (en) * 2002-12-20 2008-12-23 Acea Biosciences Method for assaying for natural killer, cytotoxic T-lymphocyte and neutrophil-mediated killing of target cells using real-time microelectronic cell sensing technology
US8263375B2 (en) 2002-12-20 2012-09-11 Acea Biosciences Dynamic monitoring of activation of G-protein coupled receptor (GPCR) and receptor tyrosine kinase (RTK) in living cells using real-time microelectronic cell sensing technology
US20040011650A1 (en) * 2002-07-22 2004-01-22 Frederic Zenhausern Method and apparatus for manipulating polarizable analytes via dielectrophoresis
US20040018611A1 (en) * 2002-07-23 2004-01-29 Ward Michael Dennis Microfluidic devices for high gradient magnetic separation
US10551371B2 (en) 2003-11-10 2020-02-04 Acea Biosciences, Inc. System and method for monitoring cardiomyocyte beating, viability and morphology and for screening for pharmacological agents which may induce cardiotoxicity or modulate cardiomyocyte function
US10215748B2 (en) 2002-12-20 2019-02-26 Acea Biosciences, Inc. Using impedance-based cell response profiling to identify putative inhibitors for oncogene addicted targets or pathways
US10539523B2 (en) 2002-12-20 2020-01-21 Acea Biosciences, Inc. System and method for monitoring cardiomyocyte beating, viability, morphology, and electrophysiological properties
US9709548B2 (en) 2008-05-05 2017-07-18 Acea Biosciences, Inc. Label-free monitoring of excitation-contraction coupling and excitable cells using impedance based systems with millisecond time resolution
US11346797B2 (en) 2002-12-20 2022-05-31 Agilent Technologies, Inc. System and method for monitoring cardiomyocyte beating, viability, morphology and electrophysiological properties
DE102005019191A1 (de) * 2005-04-26 2006-11-09 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Detektion der Abdichtung mittels Rauschanalyse
US8041515B2 (en) * 2006-09-20 2011-10-18 Acea Biosciences, Inc. Use of impedance-based cytological profiling to classify cellular response profiles upon exposure to biologically active agents
CN101038284B (zh) 2007-04-25 2011-04-27 博奥生物有限公司 一种提高电阻抗检测装置的电阻抗检测灵敏度的方法
CN101556273B (zh) * 2008-04-08 2013-03-20 博奥生物有限公司 利用电阻抗传感技术分析细胞迁移的方法及其专用装置
CN101614729B (zh) * 2008-06-27 2013-04-24 博奥生物有限公司 用于细胞操作及电生理信号检测的微电极阵列器件及专用装置
WO2011146531A1 (en) 2010-05-18 2011-11-24 Acea Biosciences, Inc Data analysis of impedance-based cardiomyocyte-beating signals as detected on real-time cell analysis (rtca) cardio instruments
CN110582569B (zh) 2017-03-03 2024-04-02 安捷伦科技有限公司 用于iPSC和ESC衍生的心肌细胞的功能成熟的方法和系统
US10830724B2 (en) * 2017-12-22 2020-11-10 International Business Machines Corporation Micro-capacitance sensor array containing spaced apart first and second overlapping and parallel electrode plates for sensing analytes
USD941488S1 (en) 2020-02-07 2022-01-18 Agilent Technologies, Inc. Instrument for analyzing biological cells

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4054646A (en) * 1973-07-30 1977-10-18 General Electric Method and apparatus for detection of antibodies and antigens
SE407115B (sv) * 1975-10-06 1979-03-12 Kabi Ab Forfarande och metelektroder for studium av enzymatiska och andra biokemiska reaktioner
DE2711270A1 (de) * 1976-03-16 1977-09-22 Ici Ltd Organische materialien mit spezifisch reaktiven gruppen
EP0085276A1 (de) * 1981-12-10 1983-08-10 Greiner Electronics Ag Verfahren zur immunchemischen Bestimmung einer Substanz
US4490216A (en) * 1983-02-03 1984-12-25 Molecular Devices Corporation Lipid membrane electroanalytical elements and method of analysis therewith
GB2136130B (en) * 1983-02-28 1987-02-11 Theodore Henry Krueger Chemical assay systems and methods
FR2598227B1 (fr) * 1986-04-30 1989-07-28 Bio Merieux Procede de detection et/ou d'identification d'une substance biologique dans un milieu liquide a l'aide de mesures electriques, et dispositif destine a la mise en oeuvre de ce procede

Also Published As

Publication number Publication date
EP0342382A3 (en) 1990-10-31
JPH0224548A (ja) 1990-01-26
US4920047A (en) 1990-04-24
NO892020D0 (no) 1989-05-19
IL89719A0 (en) 1989-09-28
EP0342382A2 (en) 1989-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO892020L (no) Fremgangsmaate og apparat for bestemmelse av et immunologisk aktivt stoff.
US4092116A (en) Method for binding antibodies to a surface such that they remain active
US3960491A (en) Method and apparatus for detecting immunologically reactive biological particles
EP0553229B1 (en) Improvement in solid phase binding assay
US3926564A (en) Substrate for immunological tests and method of fabrication thereof
US6770190B1 (en) Method of electrochemical analysis of an analyte
US3960488A (en) Method and apparatus for quantitative surface inhibition test
AU648625B2 (en) Test method and reagent kit therefor
Giaever Visual detection of carcinoembryonic antigen on surfaces
Aizawa Immunosensors
JPS5944583B2 (ja) 蛋白質の検出法
WO1998037409A1 (en) Method of electrochemical detection of immunoactive macromolecules
GB2218808A (en) Detecting device
JPH01221665A (ja) 単一エピトープ分折物検出のための競合固体相イムノアッセイ法、及びそのためのキット
EP0333801B1 (en) Test strip for diagnosis by multi-immunoassay system
US20050130223A1 (en) Method, system and kit for detecting an analyte in a sample
GB1564333A (en) Method for contrast in surface immunological tests
CA1048409A (en) Method for improving contrast in surface immunological tests with large size proteins
CA1049398A (en) Method and apparatus for detecting immunological reactive biological particles
Warkentin et al. Direct immunodetection of surface adsorbed proteins
GB1562804A (en) Detection of antibodies and antigens
OTHMANE et al. Development of impedemetric immunosensors: Application to red blood cell antigens
Thomas et al. Immunosensors
Smith Fundamentals and applications of a non-separation electrochemical enzyme immunoassay (NEEIA) system
JP2001124773A (ja) 標識特異的結合体およびこれを用いてなる免疫クロマトグラフ法、ならびに免疫クロマトグラフ用検査片