NO881077L - Kjemo-radio-immuno-konjugater. - Google Patents
Kjemo-radio-immuno-konjugater.Info
- Publication number
- NO881077L NO881077L NO881077A NO881077A NO881077L NO 881077 L NO881077 L NO 881077L NO 881077 A NO881077 A NO 881077A NO 881077 A NO881077 A NO 881077A NO 881077 L NO881077 L NO 881077L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- conjugate
- antibody
- agent
- radionuclide
- group
- Prior art date
Links
- 229940051022 radioimmunoconjugate Drugs 0.000 title description 12
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 56
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 51
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 48
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 39
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 35
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 28
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 27
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 24
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 24
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 19
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims description 13
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 12
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 claims description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 12
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 12
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 9
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 9
- -1 67Cu Chemical compound 0.000 claims description 8
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 claims description 8
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 claims description 8
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims description 7
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 claims description 7
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 claims description 6
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 claims description 5
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 claims description 5
- UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C Chemical class CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N 0.000 claims description 4
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 241000863480 Vinca Species 0.000 claims description 3
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 claims description 3
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 229940045687 antimetabolites folic acid analogs Drugs 0.000 claims description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 2
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940015493 dihematoporphyrin ether Drugs 0.000 claims description 2
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 claims description 2
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 claims description 2
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 claims description 2
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 claims 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 claims 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 claims 1
- 150000004033 porphyrin derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims 1
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 19
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 19
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 14
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 12
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 12
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 108700033844 Pseudomonas aeruginosa toxA Proteins 0.000 description 10
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 7
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 7
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 6
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 6
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 6
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 6
- 102100027205 B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha chain Human genes 0.000 description 5
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 5
- 101000914489 Homo sapiens B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha chain Proteins 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 5
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N vinblastine Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N 0.000 description 5
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 4
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- QZRGKCOWNLSUDK-UHFFFAOYSA-N Iodochlorine Chemical compound ICl QZRGKCOWNLSUDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XNPOFXIBHOVFFH-UHFFFAOYSA-N N-cyclohexyl-N'-(2-(4-morpholinyl)ethyl)carbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NCCN1CCOCC1 XNPOFXIBHOVFFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000013077 target material Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FZQZRBQKXXGAMZ-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-3-nitropyridine Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CN=C1CC1=CC=CC=C1 FZQZRBQKXXGAMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 2
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 2
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 231100000678 Mycotoxin Toxicity 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 2
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003618 borate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- WPJRFCZKZXBUNI-HCWXCVPCSA-N daunosamine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](N)CC=O WPJRFCZKZXBUNI-HCWXCVPCSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 2
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 2
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 description 2
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 2
- 229930013292 trichothecene Natural products 0.000 description 2
- 150000003327 trichothecene derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 2
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical group C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMRXVBREYFZQHU-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichloro-1,3,5-triazine Chemical group ClC1=NC=NC(Cl)=N1 OMRXVBREYFZQHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKPPFDPXZWFDFA-UHFFFAOYSA-N 2-chloroethanamine Chemical group NCCCl VKPPFDPXZWFDFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical group NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical class C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003817 anthracycline antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008275 binding mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000003131 biological toxin Substances 0.000 description 1
- 229950008548 bisantrene Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- NRDQFWXVTPZZAZ-UHFFFAOYSA-N butyl carbonochloridate Chemical compound CCCCOC(Cl)=O NRDQFWXVTPZZAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 108010092552 carbodiimide binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 150000001913 cyanates Chemical class 0.000 description 1
- UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N cyclohexatrienamine Chemical group NC1=CC=C=C[CH]1 UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- PPRGGNQLPSVURC-ZVTSDNJWSA-N deacetylvinblastine hydrazide Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)NN)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 PPRGGNQLPSVURC-ZVTSDNJWSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007324 demetalation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000006193 diazotization reaction Methods 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000001409 effect on nucleic acids Effects 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 238000010362 genome editing Methods 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M iodine-131(1-) Chemical compound [131I-] XMBWDFGMSWQBCA-RNFDNDRNSA-M 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N isocyanuric acid Chemical compound OC1=NC(O)=NC(O)=N1 ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxybutanediamide Chemical compound NC(=O)CCC(=O)NO HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N n-[(e)-[10-[(e)-(4,5-dihydro-1h-imidazol-2-ylhydrazinylidene)methyl]anthracen-9-yl]methylideneamino]-4,5-dihydro-1h-imidazol-2-amine Chemical compound N1CCN=C1N\N=C\C(C1=CC=CC=C11)=C(C=CC=C2)C2=C1\C=N\NC1=NCCN1 NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940127073 nucleoside analogue Drugs 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 238000007039 two-step reaction Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
- A61K51/1096—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies radioimmunotoxins, i.e. conjugates being structurally as defined in A61K51/1093, and including a radioactive nucleus for use in radiotherapeutic applications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse angår antistoff-konjugater egnet ved diagnose og behandling av kreft, AIDS eller andre syk-dommer. Mer spesielt angår den foreliggende oppfinnelse et konjugat av et kjemoterapeutisk middel, en radionuklide og et antistoff som kan anvendes til kontroll av konjugatets farmakokine-tikk in vivo og med hensyn til terapeutisk virkning.
Anvendelsen av radionuklider og kjemiske terapeutiske midler med cytotoksisk virkning har lenge vært kjent når det gjelder behandling av tumorer og andre patologiske tilstander. I
den seneste tid er antistoffer også blitt anvendt mot mange forskjellige mål-antigener, innbefattende tumorceller. Monoklonale antistoffer gir spesielt en høy grad av spesifisitet som gjør ødeleggelsen av kreftceller lettere mens skaden på normale celler minimaliseres.
Kombinasjonen av antistoffer og radionuklider er beskrevet innenfor patentlitteraturen. US-patent nr. 4 472 509 fra 18. september 1984 tilhørende Gansow et al. beskriver metailchelat-konjugerte monoklonale antistoffer. Det chelaterte metall kan være et metall som sender ut alfa-, beta- eller gammastråler eller positroner, og konjugatene er beskrevet å være egnet for diagnostiske og terapeutiske anvendelser. US-patent nr.
4 430 318 fra 7. februar 1984 tilhørende Langone angår en fremgangsmåte for fremstilling av<125>I-merket protein A med høy spesifikk og funksjonell aktivitet. Andre patenter som beskriver radiomerkede antistoffer, innbefatter US-patent nr. 4 331 647 - 25. mai 1982, 4 348 376 - 7. september 1982, 4 361 544 - 30. november 1982, 4 444 744 - 24. april 1984, 4 460 559 - 17. juli 1984 og 4 460 561 - 17. juli 1984; alle tilhørende Goldenberg. Ytterligere radiomerkede antistoffer er beskrevet i US-patent
nr. 4 311 688 fra 19. januar 1982 tilhørende Burchiel et al. og 3 927 193 fra 16. desember 1975 tilhørende Hansen et al.
Komplekser av radionuklider og visse cytotoksiske kjemiske midler er også kjent innenfor patentlitteraturen. US-patent nr.
4 620 971 fra 4. november 1986 tilhørende Hou beskriver et indium-bleamycin-kompleks for klinisk anvendelse som et radio-farmasøytisk middel. US-patent nr. 4 485 086 fra 27. november 1984 tilhørende Wong beskriver en fremgangsmåte for radiomerking av porfyrinforbindelser med m-In og H3mIn. Beskrivelsen av alle de ovennevnte patenter er spesifikt medtatt i det foreliggende som referanse.
Til tross for de ovennevnte fremskritt er det et behov for terapeutiske midler som oppviser større selektivitet eller spesifisitet når det gjelder ødeleggelse av maligne celler, mens skaden på normale vev minimaliseres. Det er også et behov for forbedrede terapeutiske midler som er virkningsfulle overfor celler som har utviklet bestrålings-resistens men ikke kjemote-rapi-resistens, og overfor celler som har utviklet kjemoterapi-resistens men ikke bestrålings-resistens.
Det er nå funnet at et kompleks eller konjugat av et antistoff, en radionuklide og et kjemoterapeutisk middel med forbedret terapeutisk virkningsfullhet kan fremstilles. Ifølge den foreliggende oppfinnelse er det tilveiebrakt et kjemo-radio-immuno-konjugat. Den radioaktive komponent anvendes til forsterkning av den terapeutiske virkning av det kjemoterapeutiske middel i konjugatet, skjønt den i noen tilfeller også kan anvendes til å kontrollere fordelingen av konjugatet in vivo. Ytterligere forståelse av denne oppfinnelse vil fås ved den følgende beskrivelse.
Et kjemo-radio-immuno-konjugat ifølge den foreliggende oppfinnelse omfatter et konjugat av et kjemoterapeutisk middel, en radionuklide og et antistoff. Det kjemoterapeutiske middel er fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av antitumor-antistoffer, porfyrin og beslektede forbindelser, "vinca"-alkaloider, antitumor-alkyleringsmidler og folinsyre-analoger ("anti-fols"), og antistoffet er fortrinnsvis monoklonalt. For maksimalisering av den terapeutiske virkning av konjugatet er radionuklidet fortrinnsvis en beta- eller alfa-utstråler.
Den foreliggende oppfinnelse angår generelt et kjemo-radio-immuno-konjugat. "Kjemo"-komponenten er et kjemoterapeutisk middel. Med betegnelsen kjemoterapeutisk middel menes et kjemoterapeutisk middel med lav molekylvekt, d.v.s. mindre enn 10.000, klinisk egnet mot faste ("solid") tumorer, leukemier, virusinfeksjoner eller mange forskjellige maligniteter og patologiske tilstander. Det kjemoterapeutiske middel ifølge den foreliggende oppfinnelse er fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av antitumor-antibiotika, porfyrin og beslektede for bindelser, "vinca<ll->alkaloider, antitumor-alkyleringsmidler og "anti-fols". Mer foretrukket er det kjemoterapeutiske middel valgt fra gruppen bestående av daunorubicin, doksorubicin, metotreksat, aminopterin, vinblastin, vindesin, bleomycin, blenoksan, hematoporfyrin-derivat, dihematoporfyrineter, milamycin, mitramycin og klorambucil. Disse og andre egnede kjemoterapeutiske midler er velkjent på området og er i alminnelig klinisk anvendelse og kommersielt tilgjengelige.
Ved alternative utførelsesformer av oppfinnelsen kan andre terapeutiske midler festes til et antistoff, og en radionuklide bindes til dette under dannelse av terapeutisk-middel-radio-immuno-konjugater. Det terapeutiske middel som velges for anvendelse, vil variere i henhold til beskaffenheten av den syk-dom som skal behandles, f.eks. den type målceller som skal utryddes in vivo. Eksempler på terapeutiske midler som kan anvendes (i tillegg til de ovenfor beskrevne kjemoterapeutiske legemidler) er blant annet biologisk-respons-modifiseringsmidler, toksiner og fragmenter derav. Forskjellige konjugater omfattende et antistoff, minst ett terapeutisk middel og minst én radionuklide er tilveiebrakt ved den foreliggende oppfinnelse.
Eksempler på biologisk-respons-modifiseringsmidler (BRM'er) er interferoner (alfa, beta og gamma), tumornekrosefaktor, lymfotoksin og interleukiner (IL-1, -2, -3, -4, -5 og -6). Eksempler på toksiner som kan anvendes, er ricin, abrin, difte-ritoksin, Pseudomonas-eksotoksin A, ribosomal-inaktiverende proteiner og mycotoksiner; f.eks. trichotekener. Trichotekener er arter av mycotoksiner dannet av jordsopp ("soil fungi") av klas-sen fungi imperfecti eller isolert fra Baccharus megapotamica (J.R. Bamburg, Proe, Molec. Subcell Bio 8:41-110, 1983; Jarvis & Mazzola, Acc. Chem. Res. 15:338-395, 1982).
Terapeutisk effektive modifiserte toksiner eller biologisk-respons-modif iseringsmidler eller fragmenter derav, såsom slike som er dannet ved gen- eller protein-teknologi, kan anvendes. Hybrider fremstilt ved at man knytter sammen to eller flere toksiner eller to eller flere BRM'er, eller fragmenter derav, kan også anvendes.
Radionuklider, "radio"-komponenten, som kan anvendes ved
den foreliggende oppfinnelse, kan være hvilken som helst radio-
nuklide egnet for terapeutisk anvendelse. Radionuklider innbefatter gamma-utstrålere, positron-utstrålere, røntgen-utstrålere eller fluorescens-utstrålere, men for terapeutisk anvendelse foretrekkes beta- eller alfa-utstrålere. Det kan selvfølgelig være ønskelig å anvende en ikke-terapeutisk radiomerking for avbildnings-formål såvel som en terapeutisk radionuklide. Stort sett er radionuklider velkjente på området og innbefatter<123>I, 125lt 130I§131I§133I? 135If 47Sc>72ASf72Se, 90Yf 88Yf 97Ru>100pdf lOln<i>R<h,>119sbt128Ba>197Hg>211Atf212Bi>212pbf109pd>lllln, 67Ca>68Ga>67Cu>75Br>77Br>99mTc>llc>13N>150og<18>F. De radionuklider som er egnet for terapeutisk anvendelse, er velkjente på området. Foretrukkede radionuklider er 125I, 131If 90y>67Cu>18<8>Re>186Ret 211At og 212Bi.
Når det gjelder "immuno"-komponenten ifølge den foreliggende oppfinnelse, kan generelt hvilket som helst antistoff anvendes, innbefattende polyklonale og monoklonale antistoffer. Monoklonale antistoffer er imidlertid foretrukket fordi monoklonale antistoffer, i motsetning til de heterogene blandinger av immun-globuliner som består av polyklonale antistoffer, har en velde-finert homogen struktur. På grunn av denne homogenitet oppviser monoklonale antistoffer en høy grad av reproduserbarhet når det gjelder funksjon og spesifisitet.Fremgangsmåter for oppnåelse av monoklonale antistoffer er blitt omtalt i stor utstrekning og er velkjente på området. Monoklonale antistoffer er allerede utviklet når det gjelder mange forskjellige mål-antigener, innbefattende tumorceller. Utvelgingen av monoklonalt antistoff for utførelse av denne oppfinnelse vil avhenge av den sluttan-vendelse som konjugatet vil anvendes for, og en slik utvelging er innenfor fagkunnskapen.
Det må være klart at skjønt beskrivelsen for enkelthets skyld når det gjelder omtalen, omtaler konjugatet ifølge oppfinnelsen som omfattende et enkelt kjemoterapeutisk middel, radionuklide og antistoff, kan mer enn én av hver av disse komponenter inkorporeres i konjugatet. Konjugatet kan for eksempel omfatte mer enn én type radionuklide. Konjugatet kan dessuten omfatte mer enn ett terapeutisk middel. Ved én utførelsesform av oppfinnelsen kan et kjemoterapeutisk legemiddel, et terapeutisk toksin og en radionuklide alle festes til et antistoffmolekyl under dannelse av et konjugat. Andre utførelsesformer av oppfinnelsen er rettet mot konjugater omfattende forskjellige kom-binasjoner av diagnostiske radionuklider, terapeutiske radionuklider, toksiner eler terapeutisk effektive fragmenter derav, biologisk-respons-modifiseringsmidler eller terapeutisk effektive fragmenter derav, og kjemoterapeutiske midler, hvor konjugatet omfatter et antistoff, minst ett terapeutisk middel og minst én radionuklide.
Konjugatets terapeutiske/cytotoksiske virkning kan oppnås ved hjelp av en mangfoldighet av mekanismer. Konjugatets virk-ningsmekanisme vil selvfølgelig avhenge av hvilke komponenter som utvelges for dannelse av konjugatet og deres respektive virkningsmekanismer, såvel som av det spesifikke mål som konjugatet virker på. De kjemoterapeutiske midlers virkningsmekanismer innbefatter for eksempel enzyminhibering eller annen pro-teinbinding eller en virkning på nukleinsyrer som kan føre til celledød eller forhindre celleformering. Ioniseringsutstråling fra radionuklidet i konjugatet kan for eksempel påvirke DNA og/eller RNA og/eller cellens membran, idet celleformeringen også forhindres og virkningen av det kjemoterapeutiske middel forsterkes.
De terapeutiske virkninger av det terapeutiske middel og radicukliden kan være synergistisk snarere enn bare additiv, i noen tilfeller. Mekanismene for den synergistiske virkning kan variere ifølge kombinasjonen av terapeutisk middel og radionuklide som er tilstede på et spesielt immunokonjugat ifølge oppfinnelsen. For eksempel kan visse målceller som kan overleve den cytotoksiske virkning hos én av de terapeutiske deler, f.eks. "kjemo"- eller "radio"-delen, være tilstrekkelig svekket til å bukke under for virkningene av den annen terapeutiske del. Dessuten omfatter tumorer ofte heterogene populasjoner av kreftceller, hvorav noen kan utryddes mer effektivt ved hjelp av én av effektor-delene enn den annen. Således kan avgivelse av begge typer av effektorer øke sjansene til å ødelegge forskjellige populasjoner av kreftceller innenfor en tumor.
Den terapeutiske virkning av konjugatet in vivo er lokalisert ved antistoffet, som er valgt på grunn av sin spesifisitet når det gjelder målcellen eller biomaterialet. Kjemo-radio-immuno- konjugatene ifølge den foreliggende oppfinnelse kan således anvendes ved behandlingen av hvilken som helst patologisk tilstand hvor ødeleggelsen av et mål-område eller biomateriale er ønskelig for terapi, så lenge et antistoff mot målmaterialet kan dannes.
Alternativt kan andre måltilbindingsproteiner enn antistoffer anvendes for tilføring av de terapeutiske midler og radionukli-dene til et ønsket målsted i ét menneske eller et pattedyr. Betegnelsen "måltilbindingsprotein" som anvendt i det foreliggende beskriver proteiner som kan bindes til et ønsket målsted in vivo. Måltilbindingsproteinet kan bindes til en reseptor, et substrat, en antigen determinant eller annet bindingssted på en målcelle eller annet målsted. Eksempler på måltilbindingsproteiner innbefatter, men er ikke begrenset til, antistoffer eller antistoff-fragmenter, visse serumproteiner og hormoner. Disse proteiner kan modifiseres f.eks. for dannelse av varianter og fragmenter av proteinene så lenge den ønskede biologiske egenskap (d.v.s. evnen til å bindes til målstedet) beholdes. Proteinene kan modifiseres ved anvendelse av forskjellige gen-sløyd- eller proteinoppbygnings-teknikker.
Mål-stedet kan omfatte målceller som skal utryddes. Ved én utførelsesform av oppfinnelsen er de målceller som skal utryddes, kreftceller. En rekke monoklonale antistoffer og fragmenter derav som er spesifikke for forskjellige kreftcelle-tilknyttede antigener, er blitt utviklet. Valget av antistoff vil avhenge av den type kreft som pasienten lider av.
De terapeutiske virkninger av konjugatet kan utøves på mål-materialet på forskjellige måter. Konjugatet kan for eksemptl forbli på overflaten av en målcelle og frigjøre det kjemoterapeutiske middel i en pro-aktiv tilstand som tas opp av cellen. Alternativt kan det intakte konjugat moduleres og komme inn i cellen ved endocytose, hvoretter konjugatet spaltes og midlet utøver sin virkning. Konjugatet kan selvfølgelig også være tok-sisk uten at det kommer inn i cellen. Radionukliden i konjugatet vil, enten det er inne i eller-utenfor cellen, også utøve sin bestrålende virkning under forsterkning av konjugatets terapeutiske virkning.
De forskjellige konjugater ifølge den foreliggende oppfinnelse kan i tillegg omfatte en diagnostisk effektiv radionuklide. En fordel ved anvendelse av slike konjugater er at biofordelingen av konjugatet in vivo kan kontrolleres. En rekke diagnostisk effektive radionuklider som kan påvises ved ytre hjelpemidler, kan anvendes, såsom blant annet 99mTc, 123i og<11]>-In.Biofordelingen av disse radionuklider kan påvises ved at pasienten undersøkes ved avsøkning med et gamma-kamera etter at det har fått gå en passende tid for lokalisering av konjugatet på mål-stedet. Visse terapeutisk effektive radionuklider kan også fungere som diagnostisk effektive radionuklider. To slike radionuklider er 18<6>Re og 18<8>Re som har terapeutisk anvendelse, men som også kan påvises ved hjelp av gamma-kamera.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer således en fremgangsmåte til kontrollering av biofordelingen av et terapeutisk effektivt konjugat in vivo, omfattende følgende trinn: a) en diagnostisk effektiv radionuklide festes til et konjugat omfattende et antistoff, et terapeutisk middel og en terapeutisk effektiv radionuklide, b) det resulterende konjugat som omfatter den diagnostisk effektive radionuklide, administreres til et menneske eller et
pattedyr, og
c) biofordelingen av den diagnostisk effektive radionuklide i verten påvises.
Kontrollering av biofordelingen av det administrerte konjugat gjør det mulig for legen å bestemme hvorvidt konjugatet er blitt lokalisert på alle mål-steder (innbefattende metastaser) in vivo (mål-stedene er blitt identifisert på forhånd under en diagnostisk metode). Muligheten til å kontrollere biofordelingen kan være særlig viktig når det anvendes visse terapeutiske midler (f.eks. forholdsvis store midler såsom protein-toksiner) for å sikre at festingen av det terapeutiske middel til måltilbindingsproteinet ikke har forandret evnen hos måltilbindingsproteinet til å bindes til målstedene.
Den foreliggende oppfinnelse kan for eksempel anvendes ved behandling av tumorer, AIDS og virusinfeksjoner. Ved behandlingen av slike tilstander anvendes konjugatene ifølge den foreliggende oppfinnelse i terapeutisk sikre og effektive mengder, d.v.s. mengder som oppnår det ønskede kliniske resultat uten unødvendig toksisitet. Konjugatene kan administreres ved hvilken som helst konvensjonell fremgangsmåte, topisk, oralt, intravenøst, parenteralt og liknende. I tillegg til kjemo-radio-immuno-konjugat, kan farmasøytiske blandinger videre inne-holde komponenter såsom farmasøytisk tilfredsstillende bærer, eksipienser, additiver eller andre konjugater ifølge den foreliggende oppfinnelse. Passende konsentrasjoner av bioaktive terapeutiske materialer, såsom slike som er påtenkt ved den foreliggende oppfinnelse, i slike farmasøytiske blandinger vil avhenge av flere faktorer og kan rutinemessig bestemmes av fag-folk på området. Den effektive dose av et kjemo-radio-immuno-konjugat ifølge den foreliggende oppfinnelse ved hvilken som helst anvendelse vil avhenge av de nærmere enkeltheter ved denne anvendelse. Ved behandling av tumorer vil for eksempel dosen blant annet avhenge av tumormassen, tilgjengeligheten og andre variabler.
Det er viktig at konjugatet ifølge den foreliggende oppfinnelse fremstilles ved en fremgangsmåte som: (a) bibeholder den terapeutiske aktivitet, (b) bibeholder antistoff-aktiviteten og -spesifisiteten, (c) muliggjør tilstrekkelig molart inkorporerings-forhold for avgivelse av toksiske mengder av kjemoterapeutisk middel og radionuklide til mål-materialet, (d) minimaliserer polymerisering eller aggregering av konjugater og (e) er teknisk reproduserbare. Siden konjugatet må avgis til målcellene i en form som er bioaktiv, må man utvise forsiktighet for å unngå å påvirke reaktive grupper på komponentene som på en skadelig måte kunne forandre konjugatets biologiske aktivitet. For eksempel må kloretylamin-gruppene på alkyleringsmidler såsom L-fenylalanin-"mustard", klorambucil- eller uracil-"mustard" og de utgående kloridgrupper på cisplatin, beskyttes under syntesen for oppnåelse av aktive konjugater. På liknende måte må den aktive del av anti-fol, metotreksat (MTX), ikke modifiseres for konservering av binding til målenzym-dihydrofolat-reduktase.
Det er en rekke reaktive funksjonelle grupper tilgjengelige for binding til antistoffet. Reaktive grupper tilgjengelige på aminosyrene hos antistoffer innbefatter: (a) de C-terminale karboksylgrupper på asparaginsyre- og glutaminsyre-rester, (b) gua- nidino-gruppen på arginin, (c) imidazol-funksjonen hos histidin, (d) den fenoliske hydroksylgruppe på tyrosin, (e) aminogruppene på de N-terminale og lysin-restene, (f) sulfhydrylgruppene på cystein og tioeteren på metionin. Hydroksylgrupper på serin eller protetiske karbohydratgrupper gir ytterligere steder for binding.
Utvelgingen av en fremgangsmåte for binding av et kjemoterapeutisk middel, en radionuklide og et antistoff er vanligvis avhengig av den type binding som fordres (f.eks. kovalent eller ikke-kovalent) og de reaktive deler som deltar. Reaktive grupper som allerede finnes på komponentene i konjugatet, kan anvendes for direkte binding av disse komponenter. Alternativt kan reaktive deler innføres i én eller flere av konjugat-komponentene for tilveiebringelse av en bindingsmekanisme. For eksempel kan det innføres avstandsdeler for tilveiebringelse av en gun-stigere sterisk orientering av det kjemoterapeutiske middel og/eller radionukliden i forhold til konjugatet. Mellomledd som kan inkorporere og/eller binde komponentene i konjugatet mens konjugatets bioaktivitet konserveres, kan også anvendes. Binding kan også oppnås ved ikke-kovalente gjensidige påvirkninger mellom komponentene.
Fremgangsmåter for binding mellom et kjemoterapeutisk middel, en radionuklide og et antistoff kan således generelt grup-peres som: (1) direkte, kovalent kopling, som kan fordre modifisering av én eller flere av komponentene i konjugatet, (2) indi-rekte binding av det kjemoterapeutiske middel og/eller radionukliden til antistoffet gjennom en avstandsdel eller bro, eller når det gjelder radiometaller, gjennom en chelator, (3) kopling av komponentene gjennom nedbrytbare eller ikke-nedbrytbare mellomledd såsom dekstranene, poly-glutaminsyre og poly-lysin, eller serumalbumin eller liposomer, og (4) ikke-kovalent binding, f.eks. ved gjensidig ionisk eller hydrofob påvirkning.
Som en illustrasjon av den første fremgangsmåte kan direkte binding meilom et kjemoterapeutisk middel og et antistoff oppnås ved start-modifisering enten av antistoffet eller midlet, fulgt av direkte innbyrdes påvirkning og kovalent binding til de modifiserte grupper. For eksempel gir hydrazinolyse av kjemoterapeutisk vinblastin-middel ("Velban") deacetylvinblastin-hydra- zid. Denne forbindelse kan så omdannes til syreazidet ved innvirkning av salpetersyrling, og syreazidgruppen kan så reagere med nukleofile områder på et antistoff såsom amino- og sulfhydrylgrupper på immunglobulin G (IgG). 4-8 molekyler av vinblastin kan koples pr. IgG-molekyl ved denne fremgangsmåte. Alternativt kan N-hydroksy-suksinimidesteren av vinblastin syn-tetiseres og koples til aminogrupper på KSI/4, et IgG2a som gjenkjenner et epitelial-antigen på 40 k dalton som finnes på humane lunge- bryst- og tykktarms-adenokarsinomer.
Et annet eksempel på direkte binding er bindingen mellom metotreksat og antistoff ved behandling av metotreksat med eddiksyreanhydrid under dannelse av blandet anhydrid, hvoretter det resulterende produkt tilsettes direkte til et antistoff.
En annen form for direkte binding mellom visse kjemoterapeutiske midler og antistoffer innbefatter kjemisk konjugering mellom en karbohydratgruppe på antistoffet og en aminogruppe på det kjemoterapeutiske middel eller omvendt, ved perjodat-oksydasjon av vicinalt hydroksyl på karbohydrat-delen. Kjemoterapeutiske midler som kan underkastes denne bindingsmetode, innbefatter antracyklin-antiobiotika såsom doksorubicin og daunorubucin, som inneholder en daunosamin-sukkerart. Toksiske ribonukleosider eller ribonukleosid-analoger som inneholder nabo-hydroksylgrupper, kan også koples direkte til antistoffer under anvendelse av milde, vandige reaksjonsbetingelser. For eksempel ville 2'- og 3'-hydroksylgruppene på ribosesukker-delene hos kjemoterapeutiske midler såsom cytosin-arabinosid, fluordeoksyuridin eller andre nukleosid-analoger kunne underkastes denne type binding. Alter-i.acivt kunne 5'-hydroksylgruppene katalytisk oksyderes til den tilsvarende 5'-karboksylsyre og deretter koples som ved en karboksylsyrebinding. Hydroksylgruppene på ribosesukker-holdige analoger kan perjodat-oksyderes til aldehyder og koples direkte til aminholdige proteiner såsom antistoffer.
På liknende måte kan karbohydrat-funksjoner på antistoff-immunglobuliner modifiseres for områdespesifikk kopling av aminoholdige kjemoterapeutiske midler. Det er velkjent at antistoffer inneholder variable mengder av karbohydrater, for eksempel mannose, N-acetylglukosamin, galaktose, fucose og sialinsyre. Karbohydrat-delene hos antistoffet finnes vanligvis i Fc-delen på immunglobulinet og sjelden i det variable område, idet det således blir mulig med område-spesifikk modifikasjon av immunglobulin-karbohydrater uten å bryte antigenbindingen. Perjodat-oksydasjon av nabo-hydroksylgrupper (dioler) på antistoff-karbohydrat-deler gir et aldehyd som er reaktivt med funksjonelle amino- og sulfhydryl-grupper. Andre alternative kjemiske fremgangsmåter for aktivering av karbohydratgrupper for binding er: (1) omdannelse av monosakkarider og reduksjon av oligosakkarider til aldonsyrer med Br2- eller I2-oksydasjon fulgt av direkte kopling; (2) binding av glykosider som har et p-nitro- eller p-aminofenyl-aglykon, til proteiner ved diazotering; eller (3) cyanursyreklorid kan anvendes og karboksyl- eller sulfhydryl-grupper kan innføres.
Det vil forstås at modifiseringer, såsom slike som er omtalt ovenfor, av grupper på komponentene av konjugatet under oppnåelse av reaktive områder for binding kan anvendes ikke bare for direkte å binde komponentene, men for å innføre nye grupper (innbefattende mellomledd og bindere omtalt ovenfor) på de reaktive steder, som i sin tur kan anvendes for binding av komponentene. For eksempel kan aldehydgruppene dannet ved oksydasjon av hydroksylfunksjoner på karbohydratgrupper på antistoffet anvendes for innføring av nye grupper på antistoffet for binding.
Som et ytterligere eksempel kan cyanursyreklorid (triklor-S-triazin) eller diklor-S-triazin substituert med karboksylmetyl-amingrupper anvendes til kopling av hydroksylholdige kjemoterapeutiske midler til antistoffer i en totrinns-reaksjon. En eter dannes ved omsetning av hydroksylgruppen med cyanursyre, og siden hydroksylgruppen ikke er tilstrekkelig nukleofil og ikke lett reagerer med kloridene, er det annet trinn å kople aminogruppene på antistoffet til triazin-delen på det modifiserte middel.
Radionukliden kan også bindes direkte til det kjemoterapeutiske middel eller til antistoffet. For eksempel kan radioiso-toper av jod, såsom<125>i eller<131>I, bindes til det kjemoterapeutiske middel eller antistoff ved monoklorid-mikro-fremgangsmåten beskrevet av Contreras et al. i "Iodine Monochloride (ICI) Iodination Technigues", Methods in Enzymology 92:277-292, 1983.
Som en illustrasjon av den annen fremgangsmåte kan kjemoterapeutiske midler koples til antistoffer gjennom avstandsdeler eller broer med variert men definert lengde og sammensetning. Kjemoterapeutiske midler som kan underkastes denne bindingsfrem-gangsmåte, innbefatter metotreksat, klorambucil, bleomycin og mitamycin såvel som antracyklin-derivater. Under anvendelse av denne fremgangsmåte kan det anvendes tverrbindings-reagenser,
for eksempel de bifunksjonelle tverrbindingsmidler p-benzokinon, bisoksiran og gluteraldehyd, for dannelse av broer og/eller avstands-deler mellom reaktive områder (f.eks. amino- eller sulfhydrylgruppe) på antistoffet og det kjemoterapeutiske middel. Denne fremgangsmåte er spesielt egnet for overvinning av sterisk hindring mellom disse komponenter ved at midlet "brobin-des" i en fastsatt avstand fra proteinoverflaten under tilveiebringelse av en bedre orientering av midlet. Visse bifunksjonelle reagenser, såsom bisoksiran, muliggjør også samtidig inn-føring av en avstandsgruppe i koplingsprosessen og er egnet når ytterligere avstand mellom bundne komponenter i konjugatet ønskes.
I tillegg til de typer broer og avstands-deler som er
omtalt ovenfor, kan en chelaterende brodannende mekanisme også anvendes for binding av et radiometall til konjugatet. Generelt sett bindes et metall-chelateringsmiddel eller en ligand, som binder det radioaktive metall til konjugatet, til antistoffet.
Se US-patent nr. 4 472 509 fra 18. september 1984 tilhørende Cansow et al. og US-patent nr. 4 485 086 fra 27. november 1984 tilhørende Wong. Kjemo-radio-immuno-konjugatene kan for eksempel fremstilles med mange forskjellige beta-utstrålende metalliske radionuklider under anvendelse av det bisykliske anhydrid av DTPA som det chelaterende middel. Se D.J. Hnatowich et al. i "RadioactiveLabeling of Antibody: A Simple and Efficient Method", Science 220:613-615 (1983) og D.J. Hnatowich et al. i "The Preparation of DTPA Coupled Antibodies Radiolabeled with Metallic Radionuclides: An Improved Method", J. Immunol. Methods 65:147-157 (1983). Diamid-dimerkaptid-chelaterende forbindelser egnet for binding av radionuklider såsom 99mTc, 186Re og<188>Re til antistoffer er beskrevet i publisert europeisk patentsøknad nr. 188 256. Valget av chelator eller ligand vil selvfølgelig avhenge av det metall som skal chelateres, og det chelaterte metall kan være hvilket som helst radioaktivt metall som utstråler alfa- beta- eller gammastråling eller positroner, eller alternativt et fluorogent eller paramagnetisk metall. Man må også være klar over at visse chelatorer, såsom porfyriner, bleomyciner og beslektede forbindelser selv fungerer som kjemoterapeutiske midler og kan således også omfatte "kjemo<11->kompo-nenten i konjugatet. De kjemoterapeutiske midler bleomycin, hematoporfyrin-derivat og dihematoporfyrin-eter kan for eksempel anvendes som ligander for den forholdsvis stabile festing av visse radionuklide-metaller (f.eks. 6<7>Cu, 9<0>Y og 113-In) til et antistoff.
Den tredje konjugerings-fremgangsmåte, med binding gjennom et mellomledd, innbefatter vanligvis at man fester flere molekyler av kjemoterapeutisk middel og/eller radionuklide til forholdsvis inerte polymere mellomledd og deretter kopler agens-mellomledd-komplekset til antistoffet. Fordelene ved denne kon-juger ingsmekanisme er todobbelt: for det første økes mengden av kjemoterapeutisk middel pr. konjugat og den tilsvarende cytotoksisitet hos konjugatet, og for det annet konserveres konjugatets bioaktivitet. For eksempel er metotreksat-(MTX)-antihumant-melanom-(ZME018)-konjugater dannet under anvendelse av humane serumalbumin-(HSA)-mellomledd, nylig vist å ha forbedret spesifisitet og en vesentlig økning i cytotoksisitet sammenliknet med direkte binding eller avstandsdel-(EDCI)-formidlet binding. Det skal bemerkes at anvendelse av et mellomledd for konjugering også kan anvendes i forbindelse med brodannelses- og avstands-mekanismene omtalt ovenfor.
Mellomledd som er egnet ved den foreliggende oppfinnelse, innbefatter polysakkarider såsom dekstranene, polyglutaminsyre og polylysin, serumalbumin og andre polymerer såsom mikrokuler eller liposomer. Fremstillingen av cytotoksisk-middel-bundne mellomledd og deres kopling til antistoffmolekyler innbefatter i en overveiende grad mange av de samme kjemier som er omtalt ovenfor. For eksempel kan kjemoterapeutiske midler bindes til dekstraner ved direkte forestring av dekstran-hydroksylgrupper eller ved aktivering av hydroksylgruppene ved hjelp av perjodat, cyanogenbromid, hydrazider, organiske cyanater eller halogenpro-pyl-epoksyder. Perjodat-oksydasjon og cyanogenbromid-aktivering er de fremgangsmåter som anvendes i størst utstrekning når det gjelder kopling av kjemoterapeutiske midler til dekstraner. Blant de fremgangsmåter som kan anvendes for binding av terapeutiske midler til polymere mellomledd, som i sin tur er bundet til antistoffer, er de som er beskrevet i US-patent 4 699 794 og 4 046 722.
Endelig kan komponentene i konjugatet bindes sammen ved ikke-kovalente bindinger såsom ved innbyrdes ionisk påvirkning eller hydrofob adsorpsjon av det kjemoterapeutiske middel eller radionukliden til antistoffet. For eksempel kan porfyriner bindes til antistoff ved gjensidig ionisk påvirkning.
Ved den foreliggende oppfinnelse er det dessuten tilveiebrakt en fremgangsmåte for å feste et agens til et protein, omfattende følgende trinn: a) proteinet omsettes med et molart overskudd av agenset under et første sett av reaksjonsbetingelser slik at agenset reagerer med en første funksjonell gruppe på proteinet under binding av en første del av agens-molekylene til proteinet, og b) reaksjonsbetingelsene forandres slik at ubundne agens-molekyler reagerer med en andre funksjonell gruppe på proteinet,
hvorved en ytterligere andre del av agens-molekylet bindes til proteinet.
En fordel ved å anvende denne fremgangsmåte er at flere molekyler av agenset kan festes til hvert proteinmolekyl, sammenliknet med bindings-fremgangsmåter som bare skyter inn én funksjonell gruppe på proteinet. Agenset kan være hvilket som helst av de diagnostiske eller terapeutiske midler beskrevet ovenfor, innbefattende, men ikke begrenset til, legemidler og bifunksjonelle chelaterende forbindelser. Det trinn å forandre reaksjonsbetingelsene kan innbefatte hvilken som helst forandring av betingelsene i reaksjonsblandingen som bevirker at agenset reagerer med en annen funksjonell gruppe på proteinet. Fremgangsmåter til forandring av reaksjonsbetingelsene innbefatter, men er ikke begrenset til, forandring av pH eller tempera-turen i reaksjonsblandingen, eller tilsetting av et bifunksjo-nelt bindermolekyl som er reaktivt både med agenset og den annen funksjonelle gruppe på proteinet. Forandringen i reaksjonsbetingelsene som skal utføres, vil avhenge av slike faktorer som agensets kjemiske struktur. Gruppen på agenset som reagerer med proteinet, kan være den samme eller forskjellig i det første og annet trinn, og kan reagere med proteinet direkte eller gjennom en binder.
Én utførelsesform av denne fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen er illustrert i Eksempel 10 nedenfor. I det første trinn bindes doksorubian til et antistoff under anvendelse av en vannløselig karbodiimid-binder ved en pH på ca. 5,5-6,0 og et 100-dobbelt overskudd eller mer av doksorubicin. Legemidlet festes (gjennom karbodiimid-binder) til -COOH-grupper på antistoffet. Reaksjonsblandingens pH økes så til ca. 8,0-8,5, og glutaraldehyd, et tverrbindingsreagens, tilsettes. Det ubundne legemiddel i reaksjonsblandingen (derivatisert ved hjelp av glutaraldehyd) reagerer med frie amingrupper på lysin-restene på antistoffet, hvorved en ytterligere del av legemidlet bindes til antistoffet.
En videre forståelse av den foreliggende oppfinnelse kan fås ved de følgende eksempler. I disse eksempler fås de anti-neoplastiske legemidler, d.v.s. kjemoterapeutiske midler, fra kommersielle kilder som produkter med farmasøytisk kvalitet i ampuller, bortsett fra der hvor annet er angitt. Reagenser og kjemikalier fås fra Sigma Chemical Co., (St. Louis, Mo.), PD-10-(Sephadex G-25)-kolonner fås fra Pharmacia (Uppsala, Sverige), og semi-preparative gelfiltrerings-, ionebytter- og hydroksyl-apatitt-HPLC-kolonner fås fra henholdsvis Beckman, Waters/Milli-pore og Biorad.
EKSEMPLER
Eksempel 1
Et doksorubicin-(DOX)-immunokonjugat for radionuklide-binding fremstilles ved to forskjellige fremgangsmåter: en 5-karbon-avstandsdel mellom det frie amin på daunosaminsukkeret på DOX med amino- og sulfhydrylgrupper på antistoffet og et syre-følsomt cis-aconitinsyreanhydrid (cis-AA) og karbodiimid-binder som vil muliggjøre frigjøring av DOX intracellulært etter nedbrytning i lysosomene. Doksorubicin (DOX) (100 mM sluttkon-sentrasjon) koples deretter til 443A6, et antistoff (IgG^) mot pulmonar-adenokarsinom (10 mM endelig reaksjonskonsentrasjon i PBS med pH 8,5). Se Lee et al., Cancer Research 45:5813 (1985). Fortynnet glutaraldehyd (0,125%) tilsettes dråpevis (100 pl til 900 pl DOX og antistoff i PBS med pH 8,5) i løpet av 2 minutter ved romtemperatur i mørke. Reaksjonsblandingen anbringes over en kolonne med Sephadex G-25 (PD-10) for isolering av konjugatet fra reaktantene, og konjugatfraksjonen sterilfiltreres og kvantifiseres. Konjugat-fraksjonen analyseres ved UV/synlige spektroskopiske analyser og proteinanalyser for beregning av den molare inkorporering avDOX i antistoffet. Den syre-følsomme binder, cis-AA, koples først til DOX ved tilsetning av 5 mg cis-AA til en omrørt oppløsning av DOX (5 mg i 1 ml destillert vann) justert til pH 9 med NaOH. Etter 10 minutter ved romtemperatur fortynnes oppløsningen ytterligere med 2 ml vann og anbringes på is. Saltsyre (HCl) (0,5 N) tilsettes til den kalde, omrørte oppløsning inntil det dannes en tung utfeining. Utfeiningen isoleres, oppløses i 4 ml destillert vann og surgjøres på nytt/utfelles med HCl. Slutt-utfeiningen oppløses i 0,5 ml destillert vann og pH justeres til 8,0 med natriumhydroksyd (NaOH). Antistoffet (10 mg i 0,5 ml PBS med pH 8) tilsettes til DOX-aconitinsyreanhydrid-oppløsningen og 20 mg l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid (EDCI) tilsettes langsomt under omrøring. Blandingen inkuberes i ca. 2 timer ved pH 7,0 og inkorporeringen kontrolleres ved gelfiltrering-HPLC ved detektor-bølgelengder på 280 nm og 475 nm. Blandingen ledes gjennom en PD-10-kolonne, og konjugatfraksjonen oppsamles. Inkorporerings-forholdet kvantifiseres etter sterilfiltrering og konsentrasjon.
Eksempel 2
Klorambucil-(CBL)-immunokonjugater for radionuklide-tilbin-ding fremstilles ved kovalent binding av CBL's karboksylgruppe til aminer på antistoff ifølge Eksempel 1 ved (1) vannløselig 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid (EDCI) eller (2) ved dannelse av det blandede anhydrid av CBL ved lav temperatur og alkalisk pH. Ved den første fremgangsmåte behandles CBL (62 mg i 2 ml metanol) med 12 mg natriummetoksyd under dannelse av nat-riumsaltet av CBL. Metanolen fjernes og 3 mg av saltet oppløses i 1,5 ml PBS inneholdende 15 mg antistoff, og EDCI tilsettes (3 mg). Blandingen omrøres i 2 timer ved 4°C og renses på Sephadex G-25-kolonne (PD-10). Ved den andre fremgangsmåte dannes det blandede anhydrid av CBL ved 4°C ved at CBL først omsettes med butyl-klorformiat (molart forhold 1/1) i trietylamin. Antistoff i PBS med pH 9 tilsettes dråpevis til den omrørte, urensede blanding ved 4°C (molart forhold mellom anhydrid og antistoff 50/1) og inkuberes i 1-2 timer. Etter sentrifugering ved høy hastighet (10.000 xg) renses supernatanten på en PD-10-kolonne, og eluatet undersøkes ved HPLC og nitrobenzylpyridin-(NBP)-alky-leringsanalyse.
Eksempel 3
Metotreksat (MTX) koples til antistoff ifølge Eksempel 1 via gamroa-karboksylgruppen på MTX med retensjon av biologisk aktivitet. MTX (0,1 mmol i 1 ml tørt dimetylformamid (DMF)), N-hydroksysuksinamid (0,1 mmol i 0,5 ml tørt DMF) og EDCI (0,1 mmol i 0,5 ml DMF) tilsettes i rekkefølge i en ravgul ("amber") reaksjonsflaske. Blandingen omrøres ved romtemperatur i 1 time og anbringes deretter i kjøleskapet (4°C) i 20 timer. Blandingen sentrifugeres (10.000 xg) og den oransje supernatant fjernes, kvantifiseres og lagres under N2ved -80°C inntil det er klart for konjugering. Den aktive ester av MTX (0,2 ml) tilsettes deretter til en omrørt oppløsning av antistoff (20 mg i 4 ml PBS med pH 7 og 2 ml DMF). Komponentene inkuberes i 4 timer ved 4°C og blandingen sentrifugeres så (10.000 xg) i 20 minutter. Supernatanten anbringes på en PD-10-kolonne og MTX-antistoff-konjugatet oppsamles og analyseres.
Eksempel 4
Doksorubicin-(DOX)-radio-immuno-konjugater fremstilles ved at man tilsetter DOX (5-10 mg i 1 ml vann) til MB-1, et monoklonalt muse-antistoff (IgG^underklasse) utviklet av Link et al.
(J. Immunology 137-3013, 1986) i en 5 ml reaksjonsflaske som inneholder en magnetisk rørestav. Antistoffet er på forhånd dialysert mot 4x4 liter PBS med pH 7, konsentrert til ca. 20 mg/ml, og 20 mg tilsettes til 5-ia mg DOX under omrøring ved 25°C. Etter 15 minutter tilsettes 10 mg l-etyl-3-(3-dimetylami-nopropyl) -karbodiimid (EDCI) eller 8 mg l-cykloheksyl-3-(2-morfolinoetyl)-karbodiimid-(CMC)-meto-p-toluensulfonat, og det
omrøres i mørke i 3 0 minutter ved 25°C. En oppløsning av friskt 0,1% glutaraldehyd tilsettes (100 pl/ml reaksjonsvolum) dråpevis i løpet av 60 sekunder med hurtig omrøring. Blandingen inkuberes i ytterligere 4-5 minutter, og deretter anbringes hele reak-sjonsoppløsningen over en kolonne av Sephadex G-25 (PD-10) som på forhånd er blitt ekvilibrert i boratbufret saltoppløsning (BBS) med pH 7,8. DOX/MB-1-konjugatet oppsamles i fjerde-syvende-ml fraksjonene (tomvolumet) fra kolonnen. En porsjon på 10-20 pl av 4 ml-fraksjonen (inneholdende ca. 15 mg MG-1 og 0,5 mg DOX pr. ml) tilsettes til en syrevasket 5 ml reaksjonsflaske, og NaI-125, NaI-123 eller NaI-131 (lav eller høy spesifikk aktivitet) tilsettes (begynnelses-volumet på 10-20 pl av porsjonen økes til 100 pl med PBS og alle de 100 pl tilsettes til reaksjonsflasken). Jodmonoklorid (ICI) ble fremstilt ved fremgangsmåten ifølge Contreras et al. (Methods in Enzymology 92:277, 1983) og 5 ekvivalenter ble anvendt når det gjaldt MB-1 som for de fleste andre IgG (mens det anvendes 10-12 ekvivalenter for IgM). Ca. 60 sekunder senere tilsettes humant serumalbumin (HSA) (2% endelig konsentrasjon) som et beskyttende protein, og kjemo-radio-immuno-konjugatet renses over en PD-10-kolonne ekvilibrert med PBS pH 7,4, og fjerde-syvende-ml oppsamles. Alternativt renses konjugatet over en Dowex-kolonne (1x4, 150 mesh, 5 ml kolonnesjikt, BioRad) for fjerning av fritt, ikke-konjugert radiojod.
Eksempel 5
Et radiometall-porfyrin-antistoff-konjugat fremstilles ved at man først tilsetter i:L1InCl3 eller<90>YC13(5-10 mCi) i 0,05 N HCl til 1 ml natriumacetatbuffer med pH 4,0 og omrører i en syrevasket ravgul reaksjonsflaske i 10 minutter. Hematoporfyrin-derivat (HPD) og/eller dihematoporfyrineter (DHE) (10 mg) tilsettes og oppløsningen omrøres og oppvarmes til 80°C på en varm plate i 1-24 timer. Oppløsningen avkjøles, justeres til pH 6,0 med 1 N NaOH, og 20 mg EDCI eller 15 mg CMC tilsettes for derivatisering av de frie karboksylgrupper på HPD eller DME. MB-l-antistoff (40-50 mg i PBS med pH 7,4) tilsettes dråpevis til den omrørte oppløsning i løpet av 1 minutt og inkuberes i ytterligere 30 minutter. De derivatiserte karboksylgrupper på radiometall-porfyrinet bindes til amino- og hydroksylgrupper på antistoffet ved hjelp av EDCI. Radiometall-porfyrin/antistoff-konjugatet renses over en Sephadex-G-25-kolonne (PD-10) ekvilibrert med PBS med pH 7,4, og 4 ml-fraksjonen inneholdende maksi-mal absorbans ved 505 nm, radioaktivitet og immunglobulinprotein oppsamles (ved HPLC og naturlig PAGE). Produktet er stabilt i sterilt PBS pH 7 i opp til 2 uker.
Eksempel 6
Bleomycin-antistoff-konjugat fremstilles som følger: bleomycin (BLEO) (10 enheter eller mg BLEO av Sigma-kvalitet) oppløst i acetatbuffer med pH 4,0 og Y-90 (5 mCi/100 pl 0,05 N HCl, Oak Ridge, Tenn.) tilsettes til en syrevasket reaksjonsflaske under omrøring ved 25°C og inkuberes i 1-2 timer. MB-l-antistoff (20 mg i 1 ml PBS pH 8,0) tilsettes, fulgt av 10 mg EDCI eller CMC, og reaksjonsblandingen omrøres i ytterligere 20 minutter
ved 25°C. Reaksjonsflasken sentrifugeres (3000 rpm i 20 minutter) og supernatanen anbringes over en kolonne av typen Sephadex G-25 (PD-10) og renses.
Eksempel 7
Doksorubicin bindes til et monoklonalt antistoff betegnet NR-LU-10, som bindes til et 37-40 kilodalton pankarsinom-glyko-protein, og det resulterende legemiddel-antistoff-konjugat blir så radioaktivt merket. Antistoffet er på forhånd dialysert mot 4x4 liter PBS med pH 7, konsentrert til ca. 20 mg/ml, og 20 mg tilsettes til 5 mg DOX (5 mg/ml i vann) i en 5 ml reaksjonsflaske som inneholder en magnetisk rørestav, under omrøring ved 25°C. Etter 15 minutter tilsettes 10 mg l-etyl-3-(3-dimetylaminopro-pyl)karbodiimid (EDCI) eller 8 mg l-cykloheksyl-3-(2-morfolino-etyl) karbodiimid- (CMC) -meto-p-toluensulf onat , og det omrøres i mørke i 60 minutter ved 37°C. Reaksjonsblandingens pH justeres deretter til ca. 8,0-8,5 ved tilsetning av bufret 1 N NaOH, pH 8,5, eller en annen egnet bufret oppløsning ved pH 8,5. En oppløsning av friskt 0,1% glutaraldehyd tilsettes (100 pl/ml reaksjonsvolum) dråpevis i løpet av 60 sekunder med hurtig omrøring. Blandingen inkuberes i ytterligere 4-5 minutter, og deretter anbringes hele reaksjonsoppløsningen over en kolonne av typen Sephadex G-25 (PD-10) som på forhånd er blitt ekvilibrert i fosfatbufret saltoppløsning (PBS) med pH 8,5. DOX/NR-LU-10-konjugatet oppsamles i fjerde-syvende-ml fraksjonene (tomvolum) fra kolonnen og dialyseres i natriumbikarbonatbuffer, pH 9,5.
Legemiddel-antistoff-konjugatet merkes radioaktivt med<21>1At,1<25>i eller<131>i under anvendelse av de radiohalogenerte molekyler og fremgangsmåter som er beskrevet i publisert europeisk patentsøknad nr. 203 764. Radiomerkings-fremgangsmåten kan for eksempel innbefatte anvendelse av en para-jod-fenyl-forbindelse omfattende en kortkjedet substituent med en funksjonell gruppe som er reaktiv med et antistoff. Den funksjonelle gruppe kan være en estergruppe som reagerer med en fri amingruppe på antistoffet under binding av den radiohalogenerte forbindelse til denne. Det radiohalogenerte molekyl kan fremstilles ved substituering av den organometalliske gruppe Sn(n-Bu)3eller SnMe3på en halogenaromatisk forbindelse som omfatter kortkjede-funksjonell-gruppe-substituenten. Den organometalliske gruppe substitueres deretter med en radioisotop av et halogen ved halogen-avmetallisering.
Alternativt radiomerkes legemiddel-antistoff-konjugatet med 99<m>Tc, 18<8>Re eller 186Re under anvendelse av de ,,N2S2,,-chelaterende forbindelser og fremgangsmåter beskrevet i publisert europeisk patentsøknad nr. 188 256. I utgangspunktet bringes radio-nuklidene i form av pertechnetat eller perrhenat i kontakt med den chelaterende forbindelse i nærvær av et reduksjonsmiddel såsom et tinn(II)-ion. De resulterende radionuklidemetall-che-later festes til antistoffet ved at en funksjonell gruppe på chelat-forbindelsen (f.eks. en aktiv ester) omsettes med en funksjonell gruppe på antistoffer (f.eks. en fri aminogruppe).
Eksempel 8
Et kjemo-radio-toksin-immunokonjugat fremstilles som føl-ger. Pseudomonas-eksotoksin A (PE) konjugeres til et monoklonalt antistoff betegnet NR-ML-05 ved en tioeterbinding. Dette monoklonale antistoff bindes til et 250 kilodalton humant melanom-tilknyttet proteoglykan.
PE omsettes først med suksinimidyl-4-(N-maleimidometyl)cyk-loheksan-l-karboksylat (SMCC) i et molart forhold på 1:10 (pro tein:binder). Overskudd av heterobifunksjonelt reagens fjernes fra derivatisert PE ved gelfiltrering. NR-ML-05 behandles med 25 mM ditiotreitol (DTT) i 0,01 M fosfatbufret saltoppløsning, pH 7,5 (PBS), og overskudd av DTT fjernes ved gelfiltrering.
Det derivatiserte toksin og de reduserte antistoff-komponenter blandes og inkuberes ved romtemperatur i ytterligere 15 minutter. Konjugerings-reaksjonsblandingen blir deretter fraksjonert ved FPLC-gelfiltrering på en kolonne av typen TSK 3000 med 0,5 ml/min. under fraskillelse av konjugat fra ukonjugert antistoff og ureagert derivatisert PE.
PE/NR-ML-05-konjugatet omsettes med doksorubicin ifølge fremgangsmåten som er beskrevet i Eksempel 4 (d.v.s. omsetting med EDCI fulgt av glutaraldehyd). Den samme fremgangsmåte anvendes ved to kontrollreaksjoner for fremstilling av et doksorubicin-PE-konjugat og et doksorubicin-NR-ML-05-konjugat. Antallet doksorubucin-molekyler festet til PE var 3, 10 var festet til NR-ML-05, mens antallet legemiddelmolekyler festet til PE/NR-ML-05 er lik 20.
En radionuklide festes til PE/NR-ML-05/doksorubicin-konjugatet under fremstilling av kjemo-radio-toksin-immunokonjugatet. Én av radiomerkings-fremgangsmåtene beskrevet i Eksempel 4 eller 7 ovenfor kan anvendes.
Eksempel 9
Fire legemidler festes hvert til et monoklonalt antistoff (MAb) betegnet NR-ML-05 i atskilte reaksjonsblandinger. NR-ML-05 bindes til et 250 kd humant melanom-tilknyttet proteoglykan. Legemidlene er anti-kreft-legemidlene doksorubicin, actinomycin D, bisantren og mitoksantron.
Reagens-oppløsninger fremstilles: en konsentrert antistoff-oppløsning (>5 mg/ml i PBS), konsentrert legemiddel (10 mg/ml i dH20) og et vannløselig karbodiimid (f.eks. EDCI) med 10 mg/ml i dH20. Fire mg (800 pl) MAb omsettes først med 2 mg (200 pl) legemiddel i 15 minutter ved 37°C i et vannbad. To mg (200 pl) karbodiimid tilsettes og omrøres i 30 minutter ved pH 5,5-6,0-Boratbuffer (pH 9) tilsettes (700 pl), og pH bør justeres til pH 8,5 (>pH 9 = purpurfarge). Fortynnet (0,25%) glutaraldehyd tilsettes (100 pl pr. 2 ml reaksjonsvolum og 4 mg protein) for å bringe sluttvolumet opp til 2 ml. Dette får reagere med legemidlet/antistoffet inntil oppløsningen begynner å bli uklar slik at en ikke lenger kan se gjennom den (ca. 15 minutter). To-ml reaksjonsblandingen anbringes over en PBS-ekvilibrert PD-10-Pharmacia-kolonne eller en HPLC/GC-kolonne, og 4 ml-fraksjonen som inneholder legemiddel/antistoff-konjugatet, oppsamles. Hvis det finner sted en omfattende utfelling, er det nødvendig med et sentrifugeringstrinn (3000 rpm ved 4°C i 20 minutter). Supernatanten anbringes over PD-10-kolonnen, og man måler proteininn-holdet (BioRad-fremgangsmåte sammenliknet med gammaglobulin-standard ved 595 nm) og legemiddelkonsentrasjonen (sammenliknet med fritt legemiddel med standard i 3 konsentrasjoner ved synlig bølgelengde ved 495 nm). Hvis nødvendig, kan produktet konsent-reres og renses ved ultrafiltrering eller kromatografisk.
Antallet legemiddel-molekyler pr. antistoffmolekyl, d.v.s. det "molare inkorporerings-forhold" (MIR) ble målt for NR-ML-05-doksorubucin-konjugatet ved synlige avsøknings-spektra oppnådd ved 400, 450, 475, 495 og 550 nm. Legemidlet var blitt tilsatt til reaksjonsblandingen med et 100 molart overskudd sammenliknet med MAb-protein, og de resulterende molare inkorporerings-forhold har et gjennomsnitt på 12 (min. 8 - maks. 18, n=10 kjørin-ger) . Konjugeringsutbyttet og MTR forbedres ved at reaksjonens slutt-pH bringes til 8,0-8,5 før glutaraldehyd-tilsetningen. MIR med glutaraldehyd alene gir et gjennomsnitt på 7-10 mens den første binder (det vannløselige karbodiimid, EDCI) bidrar med ytterligere 2-4 Dox-molekyler til proteinet, antakelig via en peptidbinding.
Denne "to-trinns"-fremgangsmåte (d.v.s. karbodiimid ved en pH på ca. 5,5-6,0 og glutaraldehyd ved en pH på ca. 8,0-8,5) kan anvendes til å binde legemidlene til andre proteiner enn antistoffer. Slike proteiner innbefatter andre måltilbindingsproteiner eller polymere mellomledd (f.eks. humant serumalbumin).
Radiomerking utføres under anvendelse av hvilken som helst egnet fremgangsmåte såsom én av de fremgangsmåter som er beskrevet i Eksempler 4 eller 7 ovenfor.
Ett konjugat fremstilt ved de ovenfor beskrevne fremgangsmåter, er doksorubicin-antistoff-<125>I, hvor antistoffet ér et F(ab)'2-fragment av monoklonalt antistoff NR-ML-05. Fremgangs måtene beskrevet i publisert europeisk patentsøknad nr. 203 764 (og p-jod-fenyl-reagensene omfattende en protein-konjugerings-gruppe beskrevet deri) ble anvendt for radio-jodering av konjugatet. Kjemo-radio-immuno-konjugatet ble funnet effektivt å lokaliseres på melanom-målceller ved biofordelings-undersøkelser under anvendelse av "nakne" mus med transplanterte tumorer. Konjugatet utryddet effektivt melanom-celler ved cytotoksisitets-analyser in vitro (f.eks. MTT-analyser).
Claims (14)
1. Konjugat, karakterisert ved at det omfatter et antistoff, minst ett terapeutisk middel og minst én radionuklide.
2. Konjugat ifølge krav 1, karakterisert ved at det omfatter minst ett terapeutisk middel valgt fra gruppen bestående av kjemoterapeutiske midler, toksiner eller terapeutisk effektive fragmenter derav, og biologisk-respons-modifiseringsmidler eller terapeutisk effektive fragmenter derav.
3. Konjugat ifølge krav 1 eller 2,
karakterisert ved at konjugatet omfatter minst én radionuklide valgt fra gruppen bestående av alfa-utstrålere og beta-utstrålere.
4. Konjugat ifølge krav 1, karakterisert ved at det omfatter en diagnostisk effektiv radionuklide.
5. Konjugat ifølge krav 1, karakterisert ved at konjugatet omfatter et toksin, et kjemoterapeutisk middel, en terapeutisk effektiv radionuklide og et monoklonalt antistoff.
6. Materialblanding omfattende et konjugat av et kjemoterapeutisk middel og et antistoff, karakterisert ved at konjugatet har en effektiv mengde av en terapeutisk radionuklide bundet til seg.
7. Blanding ifølge krav 6, karakterisert ved at det kjemoterapeutiske middel er valgt fra gruppen bestående av antitumor-antibiotika, porfyrin og porfyrin-derivater, antitumor-alkyleringsmidler, "vinca" alkaloider og folinsyre-analoger.
8. Blanding ifølge krav 7, karakterisert ved at det kjemoterapeutiske middel er valgt fra gruppen bestående av doksorubicin, daunorubicin, andre antracyklin-derivater, metotreksat, aminopterin, vinblastin, vindesin, bleomycin, hema toporfyrin-derivat, dihematoporfyrin-eter, mitramycin, mitomycin, klorambucil, cytosin-arabinosid og fluordeoksyuridin.
9. Blanding ifølge krav 6, karakterisert ved at radionukliden er valgt fra gruppen bestående av alfa-utstrålere og beta-utstrålere.
10. Blanding ifølge krav 9, karakterisert ved at radionukliden er valgt fra gruppen bestående av 125I, 131I, 90Y, 67Cu, 188Re, 186Re, 211At og 212 Bi.
11. Konjugat ifølge krav 1 eller 6,
karakterisert ved at antistoffet er et monoklonalt antistoff eller et fragment av et monoklonalt antistoff spesifikt for kreftceller.
12. Konjugat, karakterisert ved at det omfatter doksorubicin, en terapeutisk effektiv radionuklide valgt fra gruppen bestående av 125I, 131I, 90Y, 67Cu, <188> Re, 18 <6> Re, 21 <1> At og 21 <2> Bi, og et monoklonalt antistoff eller et fragment derav spesifikt for kreftceller.
13. Fremgangsmåte for utrydding av målceller hos et menneske eller et pattedyr, karakterisert ved at man til verten administrerer et konjugat ifølge krav 1 eller 6, hvor antistoffet er spesifikt for målcellene.
14. Fremgangsmåte for å feste et agens til et protein, karakterisert ved følgende trinn:
a) proteinet omsettes med et molart overskudd av agenset under et første sett av reaksjonsbetingelser slik at agenset reagerer med en første funksjonell gruppe på proteinet under binding av én første del av agens-molekylene til proteinet, og
b) reaksjonsbetingelsene forandres slik at ubundne agens-molekyler reagerer med en andre funksjonell gruppe på proteinet, hvorved en andre del av agens-molekylene bindes til proteinet.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US3070087A | 1987-03-11 | 1987-03-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO881077D0 NO881077D0 (no) | 1988-03-10 |
| NO881077L true NO881077L (no) | 1988-09-12 |
Family
ID=21855550
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO881077A NO881077L (no) | 1987-03-11 | 1988-03-10 | Kjemo-radio-immuno-konjugater. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0282057A3 (no) |
| JP (1) | JPS63301833A (no) |
| CN (1) | CN88102026A (no) |
| AU (1) | AU1301788A (no) |
| DK (1) | DK134288A (no) |
| NO (1) | NO881077L (no) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0337598A3 (en) * | 1988-02-26 | 1991-07-03 | Georgia State University Foundation, Inc. | Use of porphyrins and metalloporphyrins in the treatment of diseases caused by human immunodeficiency viruses |
| US5094950A (en) * | 1988-06-07 | 1992-03-10 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Diethylenetriamine pentaacetic acid derivatives |
| US5135736A (en) * | 1988-08-15 | 1992-08-04 | Neorx Corporation | Covalently-linked complexes and methods for enhanced cytotoxicity and imaging |
| ZA902949B (en) * | 1989-05-05 | 1992-02-26 | Res Dev Foundation | A novel antibody delivery system for biological response modifiers |
| JPH089553B2 (ja) * | 1989-06-19 | 1996-01-31 | アクゾ・エヌ・ヴエー | α粒子放出を使用する放射免疫療法 |
| US5030450A (en) * | 1989-11-28 | 1991-07-09 | Abbott Laboratories | Method for inhibiting nematode infection of plants with Nematostatic trichothecene compositions |
| WO1991013633A1 (en) * | 1990-03-12 | 1991-09-19 | Cancer Research Campaign Technology Limited | Improvements relating to immunoradiotherapy |
| DE19514088A1 (de) | 1995-04-13 | 1996-10-17 | Deutsches Krebsforsch | Konjugat zur Behandlung von Entzünduns-, Infektions- und/oder Hauterkrankungen |
| EP0855910A4 (en) * | 1995-10-18 | 2000-07-05 | Merck & Co Inc | CONJUGATES USEFUL FOR TREATING BENIN PROSTATIC ADENOMA |
| WO1998009651A1 (fr) * | 1996-09-03 | 1998-03-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | COMPLEXES D'ANTICORPS ANTI-INTEGRINE α3 |
| ES2299256T3 (es) * | 1998-05-26 | 2008-05-16 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Constructos que emiten particulas alfa y sus usos. |
| US7736651B1 (en) | 2000-11-24 | 2010-06-15 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Alpha emitting constructs and uses thereof |
| CN1110322C (zh) * | 1999-07-21 | 2003-06-04 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 单克隆抗体Fab'－平阳霉素偶联物及其抗肿瘤作用 |
| NO314537B1 (no) * | 1999-12-06 | 2003-04-07 | Anticancer Therapeutic Inv Sa | Reseptorbindende konjugater |
| ZA200305980B (en) | 2001-02-12 | 2007-01-31 | Res Dev Foundation | Modified proteins, designer toxins, and methods of making thereof |
| DK1414471T3 (da) | 2001-07-17 | 2012-07-16 | Res Dev Foundation | Terapeutiske midler omfattende pro-apoptotiske proteiner |
| DE102004016355A1 (de) * | 2004-04-02 | 2005-11-03 | Rösner Research GmbH & Co.KG | Herstellung und Verwendung des Konjugats Methotrexat-Albumin als Mittel zur Immunosuppression bei GVHD |
| DE102004057196A1 (de) * | 2004-11-26 | 2006-06-01 | Rösner Research GmbH & Co.KG | Verfahren zur Herstellung von Albumin-Konjugaten mit Nicht-steroidalen Antirheumatika (NSAR) |
| AU2007306927B2 (en) * | 2006-10-11 | 2013-10-03 | Aushealth Corporate Pty Ltd | The use of a DNA damaging agent and a ligand for the treatment of cancer |
| CN108226531A (zh) * | 2017-12-27 | 2018-06-29 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种β2-微球蛋白检测试剂盒 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1986001720A1 (en) * | 1984-09-13 | 1986-03-27 | Cytogen Corporation | Antibody therapeutic agent conjugates |
-
1988
- 1988-03-10 EP EP88103801A patent/EP0282057A3/en not_active Withdrawn
- 1988-03-10 NO NO881077A patent/NO881077L/no unknown
- 1988-03-11 JP JP63056533A patent/JPS63301833A/ja active Pending
- 1988-03-11 AU AU13017/88A patent/AU1301788A/en not_active Abandoned
- 1988-03-11 DK DK134288A patent/DK134288A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-03-11 CN CN198888102026A patent/CN88102026A/zh active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO881077D0 (no) | 1988-03-10 |
| DK134288D0 (da) | 1988-03-11 |
| AU1301788A (en) | 1988-09-15 |
| EP0282057A3 (en) | 1990-03-07 |
| CN88102026A (zh) | 1988-09-28 |
| DK134288A (da) | 1988-09-12 |
| JPS63301833A (ja) | 1988-12-08 |
| EP0282057A2 (en) | 1988-09-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO881077L (no) | Kjemo-radio-immuno-konjugater. | |
| EP0732939B1 (en) | Preparation and use of immunoconjugates comprising a VL-chain glycosylated at the Asn in position 18 | |
| US5194594A (en) | Modified antibodies | |
| US5990286A (en) | Antibodies with reduced net positive charge | |
| JPS6270377A (ja) | ハプテンで修飾された診断薬および治療薬の抗体コンプレツクス | |
| JPH0762032B2 (ja) | 改良された放射性核種抗体カツプリング | |
| JPS63503138A (ja) | 診断および治療用抗体複合体 | |
| Casey et al. | Preparation, characterisation and tumour targeting of cross-linked divalent and trivalent anti-tumour Fab'fragments | |
| JP2012131808A (ja) | 減少した正味の正電荷を有する抗体 | |
| Hudecz et al. | Immunoconjugate design: a predictive approach for coupling of daunomycin to monoclonal antibodies | |
| US20030235534A1 (en) | Methods and compositions for radioimmunotherapy of brain and CNS tumors | |
| US5380513A (en) | Methods for reducing non-target retention of immunoconjugates and metabolites thereof | |
| Hawkins et al. | Delivery of radionuclides to pretargeted monoclonal antibodies using dihydrofolate reductase and methotrexate in an affinity system | |
| WO1987004164A1 (en) | Technetium-antibody conjugate | |
| Foxwell et al. | Conjugation of monoclonal antibodies to a synthetic peptide substrate for protein kinase: a method for labelling antibodies with 32P | |
| JP4680387B2 (ja) | ジスルフィド含有標的ベクターの部位特異的標識化 | |
| AU687145C (en) | Preparation and use of immunoconjugates | |
| Wu | Novel bifunctional linkers for antibody chelation with radiometals | |
| Frey | Preparation, characterization and biological evaluation of cellobiose and dextran carriers of prosthetically labeled iodine-125 for use in radioimmunotherapy of tumors of glial origin | |
| AU6843287A (en) | Technetium-antibody conjugate |