NO864113L - Fremgangsmaate for immunoassay, samt analysesett for dens utfoerelse. - Google Patents
Fremgangsmaate for immunoassay, samt analysesett for dens utfoerelse.Info
- Publication number
- NO864113L NO864113L NO864113A NO864113A NO864113L NO 864113 L NO864113 L NO 864113L NO 864113 A NO864113 A NO 864113A NO 864113 A NO864113 A NO 864113A NO 864113 L NO864113 L NO 864113L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- analyte
- specific
- affinity
- solid phase
- bound
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 22
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 title claims description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title description 4
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 31
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 20
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims description 6
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 6
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 5
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 5
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 claims description 4
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 claims description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 claims description 4
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 3
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 2
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 claims description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 claims description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical class OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 2
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 2
- 238000013096 assay test Methods 0.000 claims 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 1
- 229910010293 ceramic material Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 15
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 15
- 238000013198 immunometric assay Methods 0.000 description 12
- HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N phenylboronic acid Chemical compound OB(O)C1=CC=CC=C1 HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 8
- 108010089417 Sex Hormone-Binding Globulin Proteins 0.000 description 7
- 102000034755 Sex Hormone-Binding Globulin Human genes 0.000 description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 102000007513 Hemoglobin A Human genes 0.000 description 5
- 108010085682 Hemoglobin A Proteins 0.000 description 5
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 5
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 5
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 5
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 102000017011 Glycated Hemoglobin A Human genes 0.000 description 2
- 108010014663 Glycated Hemoglobin A Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 1-[(4s,5s)-4-azido-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 2-(furan-2-yl)-7-methyl-1h-1,8-naphthyridin-4-one Chemical class N=1C2=NC(C)=CC=C2C(O)=CC=1C1=CC=CO1 INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 1
- 101600111816 Homo sapiens Sex hormone-binding globulin (isoform 1) Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 244000203494 Lens culinaris subsp culinaris Species 0.000 description 1
- 235000014647 Lens culinaris subsp culinaris Nutrition 0.000 description 1
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102300044179 Sex hormone-binding globulin isoform 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 125000005619 boric acid group Chemical group 0.000 description 1
- ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N boronic acid Chemical compound OBO ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005620 boronic acid group Chemical class 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000005289 controlled pore glass Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005370 electroosmosis Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 description 1
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000001573 trophoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
Denne oppfinnelse vedrører affinitets-immunometriske assay-metoder for identifisering og/eller kvantifisering av makromolekylære analytter, inkludert de som er til stede i eukaryotiske celler eller mikroorganismer til stede i biologiske prøver.
Fremgangsmåten av den foreliggende oppfinnelse for immunoassay av en makromolekylær analytt omfatter at man bringer en prøve som inneholder nevnte analytt i kontakt med en gruppe-spesifikk/affinitets-adsorbent bundet til en fast fase, idet man bringe nevnte faste fase i kontakt med et merket antistoff mot nevnte analytt, idet man separerer den faste fase med mar-kør bundet til seg og så måler den bundete eller ubundete mar-kør .
Gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter er stoffer som har høy-affinitet for spesifikke strukturelle deler til stede i et vidt område av forbindelser av biologisk opprinnelse, inkludert noen forbindelser til stede i celler. Slike adsorbenter inkluderer ikke immunoglobuliner (antistoffer) hvor affini-teten bare er for den spesifikke type av protein som fremkalte dannelsen av immunoglobulinet. Den nye fremgangsmåte kan brukes til å bestemme plasmakonsentrasjonen av fysiologisk viktige glykoproteiner, slik som kjønnshormon-bindende globulin så vel som relative mengder av proteiner som for eksempel hemoglobin og albumin, som er til stede i blodprøver i en ikke-enzymatisk glykosylert (neg) form (en parameter som er blitt forfektet som en egnet indikator for diagnostikk og håndtering av diabetes mellitus. Se I. Peacock, Journal of Clinical Pathology, 3 7;
841 (1984) og K. Miedema og T. Casparie, Annals of Clinical Biochemistry, 21; 2 (1984).
Flere fremgangsmåter er tilgjengelige for den kliniske håndtering av diabetiske pasienter, men målinger av blodnivåene av neg-proteiner er blitt vist å samsvare godt med legers vur-deringer av diabetisk kontroll, fastende blodglukosekonsentrasjoner, middels og topp-blodglukose-konsentrasjoner, hjemme-urintestresultater, 24 timers glykosuri og hjemme-måling av blodglukosekonsentrasjoner. I denne henseende er måling av glykosylert hemoglobin A, spesielt anvendbar, fordi den er mer rikelig enn de andre lett separerbare glykosylerte hemoglobiner og dens konsentrasjon varierer sterkt i relasjon til diabetisk kontroll. Glykosylert hemoglobin A^cer den mest rike-lige av en gruppe av fire glykosylerte derivater av hemoglobin A (HbA), betegnet kollektivt som HbA^ , som står for ca. 6-9 %
av de totale konsentrasjoner av hemoglobin i normale personer, og så mye som 20 % i dårlig kontrollerte diabetikere.
Den ikke-enzymatiske glykosylering av HbA forekommer grad-vis i løpet av den 120-dagers levetid for erytrocytter. Målinger av neg-Hb gjenspeiler derfor gjennomsnitts-blodglukose-verdier av de foregående uker, og forbedringer i kontrollen av diabetiske pasienter resulterer i en reduksjon i neg-Hb-nivåer bare etter en 3-4 ukers periode. Livstiden for plasma-albumin er betraktelig kortere (20-30 dager) enn den til neg-Hb. Målinger av plasma neg-albumin-nivåer kan følgelig gjenspeile forbedringer i diabetisk kontroll innen en 1-ukes periode og derved gi en mer hurtig vurdering av overensstemmelse med pasien-ten. I kontrast til intervallet mellom forbedringer i diabetisk kontroll og forandringer i neg-protein-nivåer, kan relativt kor-te perioder med dårlig kontroll hurtig og irreversibelt øke neg-Hb og neg-albumin-nivåer i blodet. Av denne grunn er målinger av disse parametere klinisk verdifulle i tillegg til urin- og blodglukose-bestemmelser, spesielt når pasient-samsvar er dårlig, for eksempel i små barn, eller når streng diabetisk kontroll er nødven-dig, som den er for eksempel under graviditet.
Flere metoder er i utbredt klinisk anvendelse for påvis-ningen av neg-protein-nivåer i blodprøver, inkludert isoelekt-risk fokusering, elektroforese/elektroendosmose, kationutveks-lings-kromatografi, affinitetskromatografi, spektrometri og koiorimetri. Mange av disse metoder er spesifikt utformet for analyse av HbA, , hvorav ca. 75 % er glykosylert, og kan ikke lett modifiseres for analyse av andre enn neg-proteiner, slik som neg-albumin. I tillegg er de generelt arbeidskrevende, følsomme for små variasjoner i temperatur, pH eller ionestyrke og i noen tilfeller krever de høy anvendelse av høyt spesialiser-te instrumenter, slik som et scanderings-densitometer som må innstilles nøye for å sikre god mellom-porsjon-assaypresisjon. Det er derfor et behov for en enkelt, nøyaktig og presis rutine-assay som er generelt anvendbar til måling av neg-former av hemoglobin og albumin eller ethvert annet klinisk viktig protein. Affinitetskromatografi basert på anvendelse av fenylboronsyre viser seg å tilfredsstille de fleste av disse kriterier, og minst to selskaper (Amicon Corporation og Pierce Chemical Company) har utviklet testsett for klinisk anvendelse, og har publisert forslag for anvendelse av immobilisert fenylboronsyre for isolering og kvantifisering av neg-proteiner (se bri-tisk patentsøknad GB 2024829 A, US-patent 4 269 605). Disse kommersielt tilgjengelige testsett er imidlertid basert på anvendelse av konvensjonelle affinitetskolonne-kromatografiske prosedyrer som krever store mengder dyre affinitetsgeler, som bare kan brukes om igjen et begrenset antall anledninger uten reduksjon i effektivitet. I sammenligning med mange andre metoder er de også arbeidsintensive, krever relativt store prøvevo-lumer og avhenger av metoder for måling av proteinkonsentrasjon-er som ikke er helt spesifikke.
Immunoassay-prosedyrer er vidt anvendt til å kvantifisere spesifikke komponentmolekyler i biologiske prøver, i spesielle blodprøver fra pasienter for prognostiske, diagnostiske eller andre kliniske formål. Forøyeblikket anvendes de mest viktige immunokjemiske analytiske metoder de såkalte markører, som er varierende stoffer som er relativt lette å måle, slik som radio-aktive isotoper, molekyler med fluorescerende eller biolumine-scerende egenskaper, eller enzymer som fremmer farveforandringer.
I konvensjonelle immunoassays kobles et rent preparat av analytt eller en analog til analytten til en passende markør av-hengig av den anvendte påvisningsmetode. For eksempel brukes i en radioimmunoassay en radioaktiv isotop som markør, som kan kvantifiseres i et væske- eller krystall-scintillasjons-spektro-meter. Denne merkete analytt eller analytt-analog inkuberes ved en fiksert konsentrasjon med en fiksert mengde antistoff som gjenkjenner den merkete analytt såvel som selve analytten. Konkurranse mellom merket og umerket analytt om det antistoff-bindende sted forekommer derfor, og mengden av merket analytt bundet av antistoffet er inverst proporsjonal med mengden av den umerkede analytt til stede. Antistoff-bundete komplekser separeres for eksempel ved immunoabsorpsjon, fysisk-kjemisk adsorpsjon eller presipitering av enten antistoff-bundete komplekser eller ubundet analytt (merket og umerket). Antistoffbundet merket analytt blir så kvantifisert, og en standardkurve konstrueres fra kjente analytt-konsentrasjoner (standarder), hvorfra ukjente konsentrasjoner av analytt kan interpoleres. Dette er illustrert i den vedlagte figur 1.
Immunometriske assays involverer på den annen side anvendelse av merkete antistoffer istedenfor merket analytt, og er spesielt anvendbare til målinger av store molekyler, for eksempel proteiner, som har to eller flere adskilte antigene steder, eller epitoper. I denne type assay, illustrert i figur 2, er et antistoff (eller flere antistoffer) anvendt som "fangende antistoff", og dette kan immobiliseres på en fast-fasebærer. Det "merkete antistoff" er et preparat av et eller flere antistoffer som fortrinnsvis gjenkjenner (en) forskjellig(e) epi-top(er) mot det "fangende antistoff", selv om dette ikke er nødvendig. Under inkubering med standardmengder av analytt, eller ukjente konsentrasjoner av analytt i biologiske prøver, dannes en "sandwich" mellom det "fangende antistoff", analytten og det "merkete antistoff". Derfor er i nærvær av overskudds-mengder av både "fangende" og "merkete" antistoffer, mengden av "merket antistoff" festet til en slik "sandwich" direkte proporsjonal med mengden av analytt til stede og gir derved grunnlag for en kvantitativ måling. Immunometriske teknikker byr på tallrike fordeler i forhold til konvensjonelle immunoassays, for eksempel fjerner de behovet for rene preparater av merket analytt, anvendelse av overskudds-reagenser reduserer også nød-vendigheten for presisjons-pipettering av reagenser, øker re-aksjonshastigheter og reduserer derved inkuberingstider.
I fremgangsmåten av den foreliggende oppfinnelse brukes merkete antistoffer mot spesifikke proteiner i en overskudds-reagens-immunometrisk assay, i konjunksjon med immobiliserte, gruppespesifikke/affinitets-adsorbenter istedenfor det konvensjonelle, immobiliserte, "fangende antistoff", for å kvantifisere konsentrasjonen av en makromolekylær analytt (for eksempel et glykoprotein) i en biologisk prøve. Fremgangsmåten er føl-som, spesifikk, nøyaktig og presis, og på grunn av dens enkel-het er den egnet til rutineanalyser av store antall prøver.
Det generelle prinsipp for fremgangsmåten, illsutrert i fig. 3, kan anvendes til påvisning og bestemmelse av en lang rekke markomolekylære analytter, inkludert selv forskjellige celletyper, som kan isoleres på grunnlag av en høyaffinitets-interaksjon med en passende immobilisert gruppe-spesifikk/affinitets-adsorbent, slik som: et spesifikt bindingsprotein, for eksempel Protein A, en farve, for eksempel Cibacron ® blå F3G-A, et oligonukleotid, en aminosyre, et steroid, biotin, heparin, gelatin, en borsyre eller en plantelecitin, for eksempel lentil-lecitin, hvetekimlecitin eller concanavalin A.
Forskjellige klasser av makromolekyler eller celletyper kan isoleres ved en affinitets-interaksjon med en egnet immobilisert gruppe-spesifikk/affinitets-adsorbent, som kan festes til en ulø-selig matrikx, slik som polyakrylamid, dekstran, agarose i kuleform, et cellulosederivat, leire (kaolin), glass, nylon, en polyester, polystyren, en polyolefin, et metalloksyd, en porøs keramisk diatoméjord, eller magnetiske partikler eller ethvert annet egnet materiale. Hovedfordelen ved å bruke en immobilisert affinitetsmatrix er at den vil binde spesifikke klasser av stoffer med relativ høy affinitet, reversibelt, og derved gjøre det mulig at forurensende stoffer blir fysisk vasket bort ved anvendelse av sentrifugering og aspirering av supernatanter eller ved filtrering. Gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter kan også belegges på rør, cuvetter, magnetiske partikler eller testpinner, for å forenkle vaskingsprosessen. Det adsorberte materiale kan så fjernes fra affinitetsmatrixen, om nødvendig, ved fysisk forandring av bindingsbetingelsene (for eksempel pH), eller desorpsjon med en kompetitiv bindingsligand eller et denaturerende stoff.
Glykoproteinene er spesielt godtkarakteriserti denne henseende, og et antall gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter er blitt identifisert, som kan brukes til selektivt å isolere de forskjellige klasser av glykoproteiner, og noen kan til og med skille mellom isotyper av det samme protein som bare er forskjellige i karbohydratinnhold. Det bør imidlertid nevnes at disse adsorbenter, som inkluderer plantelecitiner og bor- eller boroniske syrer, interagerer med lignende karbohydrat-komponen-ter som er til stede i et stort antall komplekse polysakkarider og glykolipider. Av denne grunn må det forstås at de gjenkjenner
en lang rekke makromolekyler med like karbohydrat-strukturer.
På tross av denne begrensning av absolutt spesifisitet som er vanlig for de fleste andre gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter er bindingsreaksjonen mellom disse adsorbenter og noen typer molekylære deler analog med interaksjonen mellom et antistoff og et antigen, og er tilstrekkelig spesifikk til å danne grunnlag for en tilfredsstillende assay-metode.
Følgelig kan enhver immobiliert gruppe-spesifikk/affinitets-adsorbent substitueres for det "fangende antistoff", anvendt i konvensjonelle immunometriske assays. Fordelene som dette byr på er tallrike; for eksempel, a) fjerner det behovet for en konstant tilførsel av store mengder av spesifikke antistoffer som kreves for immobilisering, b) affinitets-interaksjonen mellom gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter og makromolekylære analytter eller celler er nesten øyeblikkelig når man sammenligner med den relativt langsomme reaksjon mellom antistoff og antigen, c) gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter kan skille mellom små variasjoner i et spesielt makromolekyl som ikke kan gjenkjennes immunokjemisk, eller mot hvilket det er vanskelig å produsere spesifikke antisera eller monoklonale antistoffer, og d) utvinning av det adsorberte makromolekyl ved desorpsjon utelates fordi målinger utføres in situ ved anvendelse av merkete antistoffer.
Evnen hos noen gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbenter til å interagere med celleoverflateproteiner er også blitt undersøkt kromatografisk for affinitetsrensning av spesifikke celletyper. Prinsippet i affinitets-immunometriske assays kan derfor også anvendes til identifisering og kvantifisering av patogene mikroorganismer i biologiske prøver.
Den affinitets-immunometriske assay-metode av oppfinnelsen representerer derfor et viktig tillegg til det vanlige repertoar av klinisk kjemiske og mikrobiologiske laboratorietester. Spesielt kan affinitets-immunometriske assays brukes til å måle plasmakonsentrasjonene av glykoproteiner hvis biologiske aktivi-tet på noen måte kan relateres til deres karbohydrat-deler, og kan spesielt være anvendbare i påvisninger av blod-neg-protein-nivåer for klinisk håndtering av diabetiske pasienter. Assay-protokoller som illustrerer disse anvendelser og som er egnet for bruk i kommersiell testsettform, er presentert i de følgende
eksempler:
EKSEMPEL 1
Dette eksempel beskriver den affinitets-immunoradiometriske assay for påvisning av serum kjønnshormon-bindende globulin (SHBG)-konsentrasjoner. SHBG er et enzymatisk glykosylert protein som inneholder to dobbeltgrenete N-bundete oligosakkarid-kjeder og et 0-bundet oligosakkarid pr. molekyl, og er hoved-plasma-transportproteinet for kjønns-steroidhormonene, testo-steron ogøstradiol. Mer viktig er det at dets konsentrasjon er tenkt å regulere den biologiske virkning av disse hormoner, og flere kliniske assays er blitt utformet for dets kvantifisering i blodprøver, inkludert en immunoradiometrisk assay (IRMA). Se G.L. Hammond et al., J. Steroid Biochemistry (trykket 1985). Det er blitt rapportert at pasienter med en blemmeform-føflekk eller trofoblastisk sykdom kan produsere en form av SHBG som ikke binder seg til Concanavalin A (P. Englebienne&G. Doyen, IRCS Medical Science, 10; 600 (1982)). Dette sirkulerer i blodplasma og kan ikke adskilles fra SHBG ved konvensjonell steroid-bindingskapasitet eller immunoassays. I det foreliggende eksempel blir den gruppe-spesifikke/affinitets-adsorbent, Concanavalin A (Con A), immobilisert og erstatter de "fangende antistoffer" anvendt i en konvensjonell IRMA, og tilsetter derved et tilleggsnivå av spesifisitet til immunoassayen som tillater spaltning mellom Con A-bindende og ikke-bindende former av SHBG.
Alikvote mengder (100 ul) av en 50 % Concanavalin A-sefaro-se-oppslemming, holdt i suspensjon (magnetisk rører) i 0,1M Na-acetatbuffer som inneholder 1 M NaCl, 1 mM MnCl2, 1 mM MgCl2, 1 mM CaCl2og 0,01 % Merthiolat, pH 6, ble tilsatt til alle prø-verør, ved å bruke en positiv fortrengningspipette. 100 m1
av fortynnet (1:100 i 25 mM fosfatbufret saltvann (PBS) som inneholder 0,9 % NaCl, 0,625 % laktose, 1 % bovin-gammaglobulin og 0,05 % NaN^, pH 7,6) standarder (seriefortynninger av human graviditetsserum i bovin-serum) og humane serumprøver ble tilsatt til duplikerte rør, og disse ble vortex-blandet. Etter en 30 minutters inkubering ved romtemperatur (~21°C), ble 1 ml PBS som inneholdt 2 % bovin-serum, pH 7,4, tilsatt til alle rørene som ble vortex-blandet og etterlatt ved romtemperatur i 15 min. Rørene ble så sentrifugert (1000 G i 5 min), supernatantene ble aspirert å kaste, og alikvote mengder (100 ul) av
125
I-merket monoklonalt antistoff (-40000qpm iPBS) ble tilsatt til alle rør. Etter en videre inkubering med intermitterende rysting i 1 time ble 2 ml vask/fortynningsmiddel (0,9 %NaCl) tilsatt til alle rør som ble sentrifugert ved 1000 G i
5 min, og supernatantene ble aspirert. Gel-pelleten ble så vasket igjen på samme måte. Rørene ble tellet i en gamma-teller i 1 min og verdiene av ukjente prøver ble interpolert fra en standard kurve dannet fra en rekke standarder av kjent SHBG konsentrasjon. Et eksempel på en SHBG-affinitets-IRMA standardkurve er presentert i fig. 4, og de oppnådde referanse-verdier er presentert i tabell 1.
En sammenligning ble gjort mellom verdiene fått ved å bruke den affinitets-immunometriske assay beskrevet ovenfor og en kommersielt tilgjengelig SHBG-IRMA (Farmos Diagnostics Ltd),
og dette er presentert i figur 5.
EKSEMPEL 2
Dette eksempel demonstrerer anvendelsen av immobilisert fe-nvlboronsvre i en affinitets-immunometrisk assay for neg-hemoglobin (HbA^) .
Blodprøver og standarder ble fremstilt på samme måte, dvs.
50 ul alikvote mengder ble tilsatt til 50 ul av lyserende løs-ning som inneholdt 1 % saponin og EDTA. Rørene ble vortex-blandet og inkubert i 5 min før tilsetning av 900 ul assay-buffer (0,1 M glycin, 0,01 M MgCl2, 0,1 % NaN^ r pH 8,3). Rørene ble igjen vortex-blandet og 100 m1 prøver ble tatt i duplikat og tilsatt til rør som inneholdt 100 ul av en oppslemming av fenylboronsyre - Sepharose-affinitetsgel. Denne blanding ble rørt forsiktig i 10 min, 2 ml assay-buffer ble tilsatt til hvert rør, og disse ble så sentrifugert ved 1000 G i 5 min. Supernatantene ble sugd opp, og gel-pellets ble igjen vasket med 2
125
ml assay-buffer på samme måte. Det I-merkede hemoglobin-antistoff (MO 000 cpm/200 ul i assay-buffer som inneholdt 5 % fetalt kalveserum) ble tilsatt til alle rør, og disse ble så inkubert i 1 time med intermitterende rysting. Assay-buffer (2 ml) ble tilsatt til alle rør og de ble så sentrifugert (1000 G i 5 min) og supernatantene ble aspirert å kaste. Dette ble gjentatt og gelpellets ble tellet i 1 min i en gamma-teller. Konsentrasjonen av neg-Hb i prøvene ble interpolert fra en standardkurve (figur 6) dannet ved å bruke kontroller hvor konsentrasjonen av neg-Hb var kjent, og de totale Hb-konsentrasjoner ble målt spektrofotometrisk (430 nm) i de samme prøver etter fortynning (1:40) i assay-buffer.
En sammenligning (figur 7) ble også gjort mellom prosentene av neg-Hb målt i blodprøver ved affinitets-immunometrisk assay og kommersielt tilgjengelig elektroforetisk metode.
EKSEMPEL 3
Dette eksempel demonstrerer anvendelsen av immobilisert fenylboronsyre i en affinitets-immunometrisk assay for enneg-al bumin.
Blodprøver og standarder kan fremstilles som beskrevet i eksempel 2 eller, alternativt, blodplasma eller serum kan for-tynnes 1:20 i den samme assay-buffer som ble brukt i eksempel 2.Alikvote mengder (100 m1) av de fortynnete lyserte blod-eller plasmaprøver tilsettes til rør som inneholder 100 pl av en immobilisert oppslemming av fenylboronsyre - Sepharose-af f initetsgel . Denne blanding blir rørt svakt i 10 min, 2 ml assay-buffer blir tilsatt til hvert rør, og disse blir så sentrifugert ved 1000 x g i 5 min. Supernatantene blir aspirert,
og gel-pellets blir igjen vasket med 2 ml assay-buffer på sam-12R
me måte. Det I-merkete albumin antistoff (MO 000 cpm/200 al assay-buffer som inneholder 5 % fetalt kalveserum) blir så tilsatt til alle rør som inkuberes i 1 time med intermitterende rystning. Assay-buffer (2 ml) tilsettes alle rør, og etter
sentrifugering (1000 G i 5 min) blir supernatantene aspirert. Dette gjentas, og gelpellets telles i 1 min i en gamma-teller.
Konsentrasjonen av neg-albumin kan interpoleres fra en standardkurve (figur 8) dannet ved å bruke plasma-prøver hvor konsentrasjonen av neg-albumin ble påvist ved å bruke et kommersielt tilgjengelig boronat-affinitets-kromatografi-testsett (Pierce GlycoTest ). Disse data tjener også til å demonstrere den gode korrelasjon som eksisterer mellom verdiene som fåes ved den affinitets-immunometriske assay og en standard affinitetskromato-grafisk metode.
I alle tre eksempler ovenfor har affinitets-liganden vært festet til Sepharose som fast-fasebærer. Dette er en effektiv og egnet immobiliseringsmatrix, men den lider av den ulempe at den ikke-spesifikke oppfanging av merkete antistoffer er et sig-nifikant problem. Dette kan overvinnes ved å bruke en alterna-tiv fast-fasebærer som er assosiert med veldig lav ikke-spesifikk adsorpsjon, slik som kontrollert poreglass eller kaolin.
Claims (7)
1. Fremgangsmåte for immunoassay av en makromolekylær analytt,karakterisert vedå bringe en prøve som inneholder nevnte analytt, i kontakt med en gruppe-spesifikk/affini-tetsadsorbent bundet til en fastfase, å bringe nevnte fastfase i kontakt med et merket antistoff mot nevnte analytt, å separere den faste fase med markør bundet til seg og så måle den bundne eller ubundne markør.
2. Fremgangsmåte i henhold til krav 1,karakterisert vedat den gruppespesifikke/- affinitets-adsorbent er et oligonukleotid, en aminosyre, et steroid, en farve, biotin, et borsyrederivat, heparin, gelatin, et spesifikt bindingsprotein forskjellig fra immunoglobulin eller en platelecitin.
3. Fremgangsmåte i henhold til krav 1 eller 2,karakterisert vedat den nevnte faste fase omfatter polyakrylamid, dekstran, agarose i kuleform, et cellulosederivat, et polyamid, en polyester, polystyren, en polyolefin, et metalloksyd, et porøst keramisk materiale, kaolin, diatoméjord, glass eller magnetiske partikler.
4. Fremgangsmåte i henhold til ethvert av kravene 1 til 3,karakterisert vedat det nevnte merkede antistoff er et polyklonalt eller monoklonalt antistoff dannet mot nevnte analytt merket med en radio-isotop, et enzym, eller et fluorescerende, luminescerende, fosforescerende eller spin-merket molekyl.
5. Fremgangsmåte i henhold til et hvilket som helst av krav 1 til 4,karakterisert vedat den nevnte analytt er et glykoprotein, et hormon, et DNA eller RNA, et virus, en prokaryotisk organisme eller en spesifikk eukaryotisk celletype.
6. Assay-testsett for anvendelse ved fremgangsmåten i henhold til hvert av de foregående krav,karakterisertved at det omfatter: (1) et merket antistoff mot nevnte analytt; (2) en gruppe-spesifikk/affinitets-adsorbent som binder seg til nevnte analytt bundet til en fastfase; og (3) kalibreringsstandarder for analytt.
7. Assay-testsett i henhold til krav 6,karakterisert vedat den gruppe-spesifikke affinitets-adsorbent er bundet indirekte til den faste fase ved et annet bindingsstoff.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8525475A GB2181840B (en) | 1985-10-16 | 1985-10-16 | Method for the immunoassay of a macromolecular analyte |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO864113D0 NO864113D0 (no) | 1986-10-15 |
| NO864113L true NO864113L (no) | 1987-04-21 |
Family
ID=10586733
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO864113A NO864113L (no) | 1985-10-16 | 1986-10-15 | Fremgangsmaate for immunoassay, samt analysesett for dens utfoerelse. |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0227240A1 (no) |
| JP (1) | JPS62100660A (no) |
| DK (1) | DK478086A (no) |
| FI (1) | FI863531A (no) |
| GB (1) | GB2181840B (no) |
| NO (1) | NO864113L (no) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6461825B1 (en) * | 1987-09-30 | 2002-10-08 | Sanofi (Societe Anonyme) | Immunometric assay kit and method applicable to whole cells |
| SE462165B (sv) * | 1988-02-26 | 1990-05-14 | Porath Jerker | Saett att paa en baerare adsorbera sammansatta proteinkomplex, saerskilt vid biospecifika bestaemningsmetoder |
| CA1333883C (en) * | 1988-04-07 | 1995-01-10 | Shashidhara H. M. Murthy | Immunoassay utilizing biotin bridge with universal solid phase |
| US5362624A (en) * | 1988-05-25 | 1994-11-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the determination of an immunologically detectable substance and a suitable reaction vessel therefor |
| IE64286B1 (en) * | 1988-05-25 | 1995-07-26 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the determination of an immunologically detectable substance and a suitable vessel therefor |
| GB8825290D0 (en) * | 1988-10-28 | 1988-11-30 | Hounsell E F | Characterisation of glycoproteins |
| CA2008100A1 (en) * | 1989-01-20 | 1990-07-20 | Hubert Bayer | Method for the determination of immunologically detectable substance |
| JP2543630B2 (ja) * | 1990-05-01 | 1996-10-16 | ナカライテスク株式会社 | 特定タンパク質の糖化割合の測定方法 |
| DE69229230T2 (de) * | 1991-09-25 | 2000-01-27 | Samar Makhlouf | Antikörpertest zur erkennung von alkoholikern und zur überwachung der alkoholaufnahme |
| ES2182826T3 (es) * | 1992-03-04 | 2003-03-16 | Abbott Lab | Determinacion de la hemoglobina glicosilada por reduccion de la intensidad de la fluorescencia. |
| GB2270976A (en) * | 1992-09-18 | 1994-03-30 | Marconi Gec Ltd | Immunoassay/separation process using an auxiliary species on a support |
| JP3181390B2 (ja) * | 1992-08-19 | 2001-07-03 | ナカライテスク株式会社 | タンパク質の糖化割合の測定方法 |
| GB9304979D0 (en) * | 1993-03-11 | 1993-04-28 | Sinvent As | Imobilisation and separation of cells and other particles |
| JPH08233824A (ja) * | 1994-12-19 | 1996-09-13 | Bio Rad Lab Inc | カラム再生をしないクロマトグラフィによる糖化ヘモグロビンの連続測定法 |
| US6162645A (en) * | 1997-03-13 | 2000-12-19 | Abbott Laboratories | Determination of % glycated hemoglobin |
| JP5066615B2 (ja) * | 2011-01-31 | 2012-11-07 | 株式会社日立製作所 | フェニルボロン酸基と特異的に結合するオリゴペプチド配列 |
| KR20140100843A (ko) * | 2013-02-07 | 2014-08-18 | 삼성전자주식회사 | 시료 중의 당화 단백질을 포획하는 지지체 및 이를 이용한 상기 당화 단백질을 측정하는 장치 및 방법 |
| JP7009822B2 (ja) * | 2016-08-09 | 2022-02-10 | 東ソー株式会社 | 繊維状物質を用いる検出方法 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4269605A (en) * | 1978-06-28 | 1981-05-26 | Amicon Corporation | Method and kit for separation of glycoproteins |
| GB2065298B (en) * | 1979-12-12 | 1985-02-20 | Wei Kung Wang | Method and apparatus for detecting biological particles by induced signal |
| JPS5729949A (en) * | 1980-07-30 | 1982-02-18 | Nippon Koutai Kenkyusho:Kk | Determination of sugar branch related to cancer and diagnostic technique of cancer |
| FR2502786B1 (fr) * | 1981-03-24 | 1985-06-21 | Stallergenes Laboratoire | Procede de fixation d'antigenes et d'anticorps sur support de polysaccharides, et utilisation du produit ainsi obtenu pour les dosages immunologiques |
| US4447528A (en) * | 1981-08-10 | 1984-05-08 | Corning Glass Works | Detecting intrinsic factor blocking site antibody |
| IL63855A (en) * | 1981-09-16 | 1984-10-31 | Teva Pharma | Method and kit for detecting pregnancy |
| US4478744A (en) * | 1982-01-25 | 1984-10-23 | Sherwood Medical Company | Method of obtaining antibodies |
| US4629692A (en) * | 1982-12-06 | 1986-12-16 | Miles Laboratories, Inc. | Immunoassay for nonenzymatically glucosylated proteins and protein fragments an index of glycemia |
| DE3311889A1 (de) * | 1983-03-31 | 1984-10-11 | Byk-Mallinckrodt Chemische Produkte Gmbh, 6057 Dietzenbach | Verfahren zur irreversiblen bindung von protein an polystyroloberflaechen unter erhaltung der biologischen aktivitaet, so erhaltene polystyroloberflaechen und ihre verwendung |
| EP0134868A1 (en) * | 1983-08-26 | 1985-03-27 | Anda Biologicals | Unicellular organisms activated by glutaraldehyde as solid carriers for sensitizing agents and uses of sensitized unicellular organisms |
| SE8304836D0 (sv) * | 1983-09-09 | 1983-09-09 | Pharmacia Ab | Sett att bestemma forendringar i ledbrosk |
-
1985
- 1985-10-16 GB GB8525475A patent/GB2181840B/en not_active Expired
-
1986
- 1986-09-01 FI FI863531A patent/FI863531A/fi not_active Application Discontinuation
- 1986-10-07 DK DK478086A patent/DK478086A/da not_active Application Discontinuation
- 1986-10-15 NO NO864113A patent/NO864113L/no unknown
- 1986-10-15 JP JP61245173A patent/JPS62100660A/ja active Pending
- 1986-10-16 EP EP86308044A patent/EP0227240A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB8525475D0 (en) | 1985-11-20 |
| NO864113D0 (no) | 1986-10-15 |
| FI863531A (fi) | 1987-04-17 |
| JPS62100660A (ja) | 1987-05-11 |
| EP0227240A1 (en) | 1987-07-01 |
| DK478086A (da) | 1987-04-17 |
| FI863531A0 (fi) | 1986-09-01 |
| DK478086D0 (da) | 1986-10-07 |
| GB2181840B (en) | 1989-11-29 |
| GB2181840A (en) | 1987-04-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO864113L (no) | Fremgangsmaate for immunoassay, samt analysesett for dens utfoerelse. | |
| US5571667A (en) | Elongated membrane flow-through diagnostic device and method | |
| US4143124A (en) | Antigen-antibody analysis with solid phase rf and c1q | |
| CA2573749C (en) | Immunological test element with improved control zone | |
| JP3356785B2 (ja) | グリコヘモグロビン（％）の定量 | |
| US20040018576A1 (en) | Bence Jones protein testing cassette | |
| JP3551678B2 (ja) | ヘモグロビンＡ１ｃの測定法及びキット | |
| NO327714B1 (no) | Anordning og metode for kromatografisk deteksjon av en analytt i en blodprove. | |
| Bertholf | Proteins and albumin | |
| EP0535162B1 (en) | Analyte variant analysis | |
| US6316265B1 (en) | Determination of % glycated hemoglobin | |
| EP1673635B1 (en) | Hemoglobin assay for neonatal screening | |
| JPH01248061A (ja) | 試験キットおよび免疫リガンドの測定方法 | |
| EP1301790B1 (en) | Direct assessment of analyte to reference molecule ratios | |
| EP0455225B1 (en) | Method for measuring the percentage of glycation of a particular protein | |
| CN116027035B (zh) | 一种用于提高hiv1/2尿液胶体金免疫层析检测准确率的试剂盒及制备方法 | |
| EP0402023B1 (en) | Elongated membrane flow-through diagnostic device and method | |
| NO164135B (no) | Immunometrisk metode for bestemmelse av et hapten, samt analysesett for utfoerelse av metoden. | |
| John et al. | An automated immunoradiometric assay of thyrotrophin (TSH) in dried blood filter paper spots | |
| CN206975046U (zh) | 糖化血红蛋白检测试纸条 | |
| US7544513B2 (en) | Hemoglobin assay for neonatal screening | |
| JP3292766B2 (ja) | 糖化蛋白の測定方法 | |
| JPH0666807A (ja) | タンパク質の糖化割合の測定方法 | |
| JPH0658936A (ja) | 糖化蛋白の測定方法 | |
| JPH10227793A (ja) | カルバミル化ヘモグロビンの測定方法 |