NO814079L

NO814079L - Syrehalogenider og fremgangsmaate til deres fremstilling

Info

Publication number: NO814079L
Application number: NO814079A
Authority: NO
Inventors: Hans-Bodo Koenig; Karl Georg Metzger
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1980-06-06
Filing date: 1981-11-30
Publication date: 1981-12-07
Also published as: NO811756L; PT73092B; EP0041655A3; FI811739L; DE3021373A1; JPS5726693A; ZA813772B; DE3165040D1; EP0041655B1; AR228357A1; DK248781A; IL63031A0; PT73092A; EP0041655A2; AU7133381A; CA1161429A; ES8203909A1; ES502811A0

Description

I DE-OS 2 818 263 er ved siden av andre omtalt forbindelsen med formel I

Den kan såvel eksistere i syn-form (imidazol idi - nonringen er rettet mot- cephem-strukturen), som også i anti-f or m.

Etter den i DE-OS 2 818 263 omtalte fremgangs-måter for fremstilling av disse forbindelser, blir imidlér-tid alltid den forhån sretningen med 7-aminocephalosporansyren anvendte syre, såvidt den har en aminogruppe, på forhånd ved aminogruppen utstyrt med en be skyttelsesgruppe, f. eks.

Etter kobling av denne syren med 7-aminocephalosporansyren avspaltes deretter ved hjelp av trif1uoreddik-syre samtidig be skyttelsesgruppe, og under innvirkning av denne sterke syre, omdannes anti-formen delvis i syn-formen. Under innvirkning av trif1uoreddiksyre, innstiller det seg mellom syn- og nti-formen en likevekt, hvori begge former er inneholdende omtrent de like deler. At det dreier seg om- likevekt, ser man deri at også den rene anti-form i trifluoreddiksyre i løpet av få øyeblikk-gir den samme blanding. Dessuten fremkommer cephalosporinene ifølge DE-OS 28 18 263 alltid i 'amorf form.

Det er nå overraskende funnet at man direkte kan fremstille rene og under tiden krystallinske syn - cephalosporiner med den generelle formel III

i nærvær av en sterk.syre, f. eks. saltsyre, og i fravær av baser.

Den rene syn-form har vist seg vesentlig mere virksom enn anti-formen.

Oppfinnelsen vedrører, f ølgel.ig cephalosporiner

i ren form med den generelle formel III, hvori n betyr 2, 3 eller i,

R betyr hydrogen, et farmasøytisk tålbart metall kation, fortrinnsvis natrium, et ammoniumkation av en farmasøytisk til-bar nitrogenbase, fortrinnsvis lysin, orn itin eller trieta-nolamin, eller resten av en ester, fortrinnsvis

og T betyr:

- CHy -CH2-0-C0-CH3, -0-C0-NH2, med Z = 0 eller S

Oppfinnelsen vedrører videre en fremgangsmåte til fremstilling av slike cephalosporiner, der fremgangsmåten erkarakterisert vedat et tilsvarende 7-aminocephalosporansyre-derivat omsettes med et syrehalogenid med formel IV

hvori

n har den ovenfor angitte betydning, og

X betyr en halogenrest, fortrinnsvis klor.

Forbindelsene med den generelle formel III kan også foreligge som indre salter, idet R^ bortfaller og karboksylgruppen istedenfor denne har en negativ ladning, mens en annen gruppering i molekylet har en positiv ladning.

Omsetningen gjennomføres fortrinnsvis i et inert oppløsningsmiddel, f. eks. tetrahydrofuran (THF). Derved arbeides det vanligvis ved en temperatur fra -80 til +25°C,

og fortrinnsvis fra -50 til 0°C.

Fortrinnsvis silyleres cephalosporansyrederivater før omsetningen med syrehalogenidene med formel IV i aminogruppen, og karboksylgruppen f. eks. innføres trimetyl-silyl-, trietylsilyl eller andre silylrester.

Reaksjonen gjennomføres videre i fravær av baser. Dette er spesielt nødvendig, fordi syrehalogenidene (IV) er basefølsomme. Under disse reaksjonsbetingelser må imidlertid det ansees som overraskende at de ønskede forbindelser fåes i dan rene syn-form, da som nevnt ovenfor, under innvirkning av sterk syre som trifluoreddiksyre, fåes av anti-forbindelsene en likevektsblanding av syn- og anti-forbindelse.

De som utgangsprodukter anvendte syn-syrehalogenider (IV) er nye, og omfattes også av oppfinnelsen. Disse syrehalogenider kan fremstilles på følgemde måte:

Ved omsetning av aminotiazolylglyoksylsyre

med hydrazinforbindelsen hvori n har overnevnte betydning, får man overraskende syn-syren med formel V

nvon n nar overnevnteDetyanmg.

At det derved dannes syn-formen er overraskende fordi ved omsetning av en tilsvarende aminotiaxolylglyoksyl-syre som bare ved aminogruppen har en be skyttelsesgruppe (BOC-rest) med en tilsvarende hydrazinforbindelse fåes anti-

Syn- og anti-formen kan man adskille ved hjelp

av NMR-spektrum. Eksempelvis -CI^-CHj-gruppen i imidazolyl-inondelen gir i syn-formen to multipletter, mens anti-formen viser en pseudosingulett.

Syn-syren med formel V med n = 2, lar seg bare under bestemte betingelser overføre med tionylklorid i syn-syreklorid-hydroklorid med formel IV. Til disse betingelser behøver mam ikke fjerne de syrer med formel V inneholdte krystallvann, og til oppløsningsmiddelet dessuten setter så meget vann før tilsetningen av tiowylkloridet, at det i reaksjonsblandingen er inneholdt ca. 2- i molekvivalenter vann, referert til syn-syren (V). Syn-syrene med formel V med n = 3 eller 4, lar seg tørket med tionylklorid (0,4 molekvivalent H^O) eller utørket (1,7 molekvivalent H,,0) overføre i syn-syreklorid-hydrokloridet med formel (IV).

Som oppløsningsmiddel anvendes acetonitril eller en lavere nitroalifat, f. eks. nitrometan. Tionylkloridet må ved denne omsetning anvendes i stort overskudd. Mol-forholdet mellom syre (V) og tinonylklorid utgjør minst 1:3»fortrinnsvis 1:12. Man kan også anvende selve tionylklorid som fortynningsmiddel, det får imidlertid da syreklorid-hydrokloridet ikke i samme renhet.

Halogeneringen av syren V foregår vanligvis ved en temperatur fra 0 til 30°C, fortrinnsvis ved 15 til 25°C.

2-aminotiazol-rester kan også betegnes eller skrives som 2-imino-4-tiazolinrester. Fig. 1 viser IR-spektrum av forbindelser ifølge eks. 3b in nujol. Fig. 2 viser IR-spektrum av forbindelsen ifølge eksempel 4 in nujol.

Eksempel 1

2 - (2-imino-4-tiazolin-4-yl)-N-(imidazolidin -2 -on - 1-yl)-2-iminoeddiksyre (syn-form ).

Til oppløsningen av 7, 6 g 1 -amino -2 -oxoimida,-zolidin i 90 ml vann, setter man 10 g 2-(2-imino-4-tiazolin - 4.-yl ) -glyoksylsyre og omrører ved 20°C natten over. Det utkrystalliserte produkt fras.uges, vaskes med vann og tørkes i exikator.

Utbytte: 7,2 g, sm.p.: >240°C.

CgH9N503SxH20

NMR (100 HHz 6 i dg-DHSO/CD^OD) 6,88 (s tiazolin-5-H) 3,9-3,7 (m N-CH2-CH2-N), 3,5-3,27 (m N-CHj-CHj-N).

Eksempel 2a

2-(2-imino-4-tiazolin -4-yl )-N-(imidazolidin-2-on-~'

1 -yl )-2-iminoeddiksyreklorid-hydrokloiid.

4-» 65 g 2-(2-imino-4-tiazolin-4-yl) -N-(imidazolidin - 2-on-1yl)-2-iminoeddiksyre syn-form med hensyn til karboksylgruppen (kornstørrelse til 98 % <£ 5u> stoffet inneholder 1,8 molekvivalenter vann) suspenderes i 96 ml acetonitril, (vanninnhold 0,30$), og tilsettes under tørr N216 ml tionylklorid ved 20°C..Man omrører i 1,5 timer ved 20°C, frasuger deretter den utfelte krystallinske gule utfelling under fuktighetsutelukkelse, og vasker to ganger med absolutt acetonitril. Etter tørkning i exikator utgjør utbyttet: 5,0 g (ca. 100 %

av det teoretiske).

IR-spektrum (nujol) (karbonylområde): 1810 (C0-C1), 1660-1668, 1625 (f ingeravtrykkområdet): 975, 890, 855, 800,

775 oh 725 cm"<1.>

Stoffet er meget fuktighetsfølsomt. Ved absolutt utelukkelse av fuktighet og ved en temperatur på 0°C, var det også uendret etter flere uker.

Eksempel 2b

Blandingen av 5 g av den i eksempel 2 anvendte syre, 100 ml nitrometan (vanninnhold 0,17 %) og 50 ml nitrometan (vanninnhold 0,02 %) samt 5,7 ml tionylklorid ble omrørt under fuktighetsutelukkelse i 24 timer ved 20°C. Den dannede utfelling ble deretter frasuget, vasket med absolutt nitrometan, og tørket i exikator.

Utbytte: 5,3 g.

IR-spektrum: identisk med dette fra eksempel 2a.

Eksempel 2c

Anvender .man hver gang 0, 5 g av den i eksempel 2a anvendte syre som oppløsningsmiddel 1-nitropropan (15 ml) og 1,72 ml tionylklorid, så får man etter forsøksutførelsen som i eksempel 2b, syreklorid-hydroklorid i eksempel 2a i omtrent kvantitativt utbytte, når vanninnholdet av 1-nitropropan utgjør 0,19 %. Inneholder det anvendte 1-nitro-

propan bare 0,04 % vann, så oppstår praktisk talt intet syreklorid ■ (ifølge IR-spektrum).

Eksempel 2d

Anvender man istedenfor 0,5 g av den i eksempel

2a anvendte syre, som oppløsningsmiddel 15 ml nitrometan og 0,6 ml tionylklorid, så får man etter 24 timers omrøring ved 20°C syreklorid -hydroklor.id ifølge eksempel 2a i meget godt utbytte når vanninnholdet av nitrometan utgjør 0,17 %. Ved et vanninnhold av oppiøsningsmiddelet på 0,02 %, opp-■ trer reaksjonsproduktets IR-spektrum ingen bå° nd ved 1810 cm -1, d.v.s. det ble praktisk talt ikke dannet syreklorid.

Eksempel 2e

Omrører man blandingen av 10 g av den i eksempel 2a anvendte syre, 300 ml 2-nitropropan (vanninnhold 0,19 %)

og 34,4- ml tionylklorid i 24 timer ved 20°C, så får man syreklorid-hydroklor id fra eksempel 2a som utfelling og i omtrent kvantitaivt utbytte.

Senker man imidlertid ved dette forsøk bare mengden av 2-nitropropan til 150 ml (ved samme vanninnhold på 0,19 så viser-det utfelte reaksjonsprodukt i IR-spektrum intet syrekloridbånd ved 1810 cm~<1.>

Eksempel 3a 7 - /12 - am in otiazol-4 -yl) -N -(imidazol id in -2-on-1-y 1 ) - 2 -iminoacetamido7-3-acetoksymetyl -3-cephem-4-karbon surt natrium (syn-form) (amorf).

Blandingen av 16,1 g 7-aminocephalosporansyre (94$-ig) og 110 ml tørr tetrahydrofuran blandes under omrøring ved 20°C med 32 ml bis-trimetylsilylacetamid. Den går i opp-løsning under svak temperaturøkning i løpet av ca. 2 minutter. Denne oppløsning avkjøles til -50°C, og tilsettes under N220,2 g av det i følge eksempel 2a fremstilte syreklorid-hydroklorid. Man omrører ennå 10 minutter i kuldebad idet temperaturen synker til -65°C. Deretter fjernes kuldebadet. Etter ca, 20 minutter er temperaturen øket til 0 - 5°C, og alt er gått i oppløsning. Nå heller man reaksjonsoppløsningen under omrøring i 3 liter eter og omrører i et åpent kar ca. 30 minutter. Den da dannede utfelling består av det amorfe hydro-

klorid av det i overskriften nevnte cephalosporin (syn-

form). Utfellingen suges fra, vaskes med eter og deretter innføres i løpet av 20 minutter porsjonsvis i 1,2 liter vann av 0 - 5°C under omrøring. Ved samtidig tilsetning av fast NaHCO^ eller natronlut holdes blandinges pH

på ca. 3- Deretter innstilles pH på 3,2, omrøres ennå 15 -

20 minutter og deretter frasuges, eventuelt gelaktig utfelling som i det vesentlige inneholder forurensninger. Derved holdes filtratet ved tilsvarende tilsetninger av 2n natronlut ved pH 5, og avkjøles. Den gelaktige utfelling vaskes grun.dig med isvann, (200 ml). De forenede vandige filtrater innstilles på pH 6,5 og frysetørkes. Man får så-ledes det amorfe natriumsalt av det i overskriften nevnte cephalosporin (syn-form).

Utbyttet svinger ved flere blandinger mellom

24,2 og 32, 7 g.

Innholdet av syn-form utgjør ifølge HPLC ca, 75 %• Anti-form er bare til stede til<<>1 %. Råproduktet inneholder NaCl (ca. 5 %) acetamid (ca. 1 molekvivalent) og vann (ca. 1 - 2 molekvivalenter).

NMR (100 MHz, 6 i CD30D-d6DMS0) 6,78, (s, tiazolin 5-H)., 5,75 (a,. 8-lactam, I = 4,7), 5,1 (a, S-lactam, I.= 4,7).

Eksempel 3b

7- i (2-aminotiazol-4-yl)-N-(imidazolid in-2-on - 1 -yl ) -2 - iminoacetamino_/-3 -acetoksy metyl - 3-cephem-4-karbonsurt-natr ium.

(Syn-form) (krystallinsk) (etoanolat) (i vann lettoppløselig form).

62,6 g av et ifølge eksempel 3a fresmtillet

amorft syn-cephalosporin-natriumsalt oppløses i 250 ml vann ved 20°C. Til denne oppløsning setter man i første rekke under omsvinging 600 ml etanol, og etter at krystalliseringen er blitt satt i gang ved riving, ytterligere 400 ml etanol.

Man lar suspensjonen stå 5 minutter ved 20°C, frasuger, og vasker , med vandig etanol, (vann/alkohol = 1/4)^Utbytte 40,4 g«

Stoffet er krystallinsk, og -inneholder ifølge analyse og NMR-spektrum ca. 1 mol kry stallvann, og ca. 1 mol krystalletanol.

NHR (<1>H-360 MHz i D20, 6 i ppm, I i Hz )

3,210 og 3,5 (-A-CH2-, IAB ■= (-) 18,0)

5, 040 ( 6-lactam, I 4,7)

5,710 ( 3-lactara, I = 4, 7)

4,727 og 4, 560 . (-CH2-0-CO-, IAB= (-) 12,6) 1,910 (-0-C0-CH3)

6, 810 (tiazol )

3,737 og 3,393 (-N-CH2-CH2-N-)

3,460 (CH2Et0H)

0, 982 (CH3EtOH)

NMR (<13>C-25,2 MHz, 6 i ppm, i forhold til TMS = 0, i D20.

D-verdier og de dertil hørende intensiteter av en røntgenbøyeanalyse ifølge Debye-Scherrer (påvisning av kry stall initet):

Eksempel 3c

7 -/~(2 -aminotiazol -4-yl ) -N- (imidazol id in -2 -on -1 -yl - 2-iminoacetamido_/-3-acetoksymetyl -3-cephe m -4-kar bon surt - natrium (syn-form (krystallinsk).

67,3 g 7-aminocephalosporansyre (94 %- ig), 450 ml tørr tetrahydrofuran og 134 ml bis-trimetylsilylacetamid haes sammen i denne rekkefølge under tørr N2og omrøring. Etter at det er dannet en klar oppløsning ( iløpet av få minutter) avkjøles til -50°C, og tilsettes 84» 5 g av det i følge eksempel 2a fremstilte syreklorid-hydroklorid under omrøring. Man omrører deretter i ca. 10 minutter ved den samme temperatur, fjerner deretter kuldebadet, og lar temperaturen av seg selv stige til 0°C. Når da alt er gått i oppløsning, innhelles i

blandingen av 4-000 ml tetrahydrofuran og 3 ml vann under om-røring, og den dannede utfelling frasuges. Denne utfelling innføres fuktig i 2000<*>) ml isvann under omrøring med ytterligere avkjøling med is, og derved holdes pH ved hjelp av 2n natronlut ved ca. 5- - 5,5, og innstilles til slutt på 6,5. ;Den dannede oppløsning inndampes deretter fra et bad på ca. 30-35°C til et volum på 800 til 1000 ml ved hjelp av en rotasjons-fordamper i vakuum, og blandes deretter under omrøring atter hvert med ca. 3000 ml etanol. Derved podes i mellomtiden med krystallinsk material. Deretter omrører man den dann-ede suspensjon ennå ca. 30 minutter,frasuger, vasker metanol/vann (4/1) og etanol, og tørkes i vakuum. ;Utbytte: 109.4 g (74$ av det teoretiske ref. til C18<H>18N7Na07S2x H20xC2H50H) (syn-form, krystallinsk). ;IR- og NMR-spektrum er identisk med stoffet som omtalt i eksempel 3b. Tørkning, eksempelvis i sirkulasjons-tørkeskap ved 40° - 70°C, kan man fjerne den i krystallene inneholdte etylalkohol. Stoffet beholder derfor den krystallinske tilstand, og syn-formen. IR-spekteret av det faste stoff endrer seg lite. ;<*>) Som alternativ kan man også oppløse i litt

vann (ca. 1 000 ml) og- deretter tilsettes'.ca 3000 ml etanol. Også da får man cephalosporiner i tilsvarende renhet og utbytte.

Eksempel 3d

7r-./~(2 -aminotiazol-4-yl)-N-(imidazolidin-2-on-1-yl) -2 - iminoace tamido_7-3 -ace toksy metyl - 3-cephem-4 - kar bon surt - natrium (syn-form) (krystallinsk).

Blandingen av 6 g (0,022 mol) 7-aminocephalosporansyre, 60 ml acetonitril (skilt over mol-sikt) og 5,4 ml (0,26 mol) hexametyldisilåzan dyppes under omrøring i et til 100°C foroppvarmet oljebad, og derved føres en svak N2_ strøm over den hurtig under tilbakeløp kokende suspensjon.

Etter ca. 15 minutter har det dannet seg en klar oppløsning,

og etter tilsammen ca. 1 time er det i damprommet over reaksjons-

blandingen med indikatorpapir ikke mere påvisbart ammoniakk. Nå avkjøles ved 30°C, og under omrøring inndampes ved hjelp av en oljepumpe under forpumping av en kjølefelle (fl. Ng) reaksjonsoppløsningen inntil et volum på ca. 30 ml i det reaksjonskolben for å komplettere varmetapet, dyppes i et vannbad av værel sestemperatur. Den gjenblivende reaksjons-oppløsningen avkjøles deretter i is/vann til 5°C. 5,88 g

(0,019 Mol) av syrekloridhydrokloridet:

tilsettes deretter på en gang. Den indre temperatur øker derved til 26°C. Når den indre temperatur igjen har sunket til 20"C, fj ernes isbadet og videreomrøres enna i 3 timer og 4-0

min. ved værelse stemperatur. Deretter innhelles reaksjonsblandingen i 600 ml eter ..(Ferak, HgO < 0, 1$), som omrøres i et åpent kar, etteromrøres 30 minutter, den dannede utfelling frasuges gjennom glassfrittet, vaskes en gang med eter på Nutchen, avpresses, og innføres fra nutchen i 60 ml isvann idet man samtidig ved tilsvarende tilsetning av 2n natronlut holder pH mellom 5 og 6. Deretter omrører man ennå i 10 minutter ved pH 7,5, og oppdeler derved klumpene av filterkaken. Man frafiltrerer en 1iten mengde uoppløst (forurensning), innstiller det klare filtrat (hvis nødvendig) igjen til pH 7,5 (volum nå ca. 120 ml) og tilsetter deretter 150 ml EtOH, tilsetter ytterligere 150 ml EtOH, omrører ved værelsestemperatur ca. 30 min, og frasuger deretter det krystallinske natriumsalt. Man vasker på nutchen 2 x med 20 ml EtOH/H20=5/l, og deretter 1 x med 2 0 ml EtOH.

Utbytte (etter tørkning i exikator over PgO^^ 4, 7 g (45$ av det teoretiske) (krystallinsk).

Rensning av det krystallinske råprodukt.

4., 5 g av råproduktet oppløses i 45 ml vann ved værelse stemperatur under omrøring (går hurtig) og haes til en klar oppløsning med en gang '120 ml EtOH. Derved utskiller det seg få brune fnokker. Disse fjernes ved filtrering. Man ettervasker med noe EtOH. I filtratet setter man deretter under omrøring ytterligere 280 ml EtOH, river, og etterom-

rører ved værel se stemperatur ennå i 5 minutter, Deretter frasuger man, vasker 2 x med 10 ml Et0G/H20=5/1 og 1 x med EtOH.

Utbytte: (exikator,. PgO^): 3. 2 g (krystallinsk)

(tilsvarer 32$ av det teoretiske).

NMR (250 MHz, 6 i CD-^OD/DgO) 6in77 (tiazolin-5-H), 5,77(d, 1H, B-lactam), 5,07 (d, 1H, 3-lactam), 3.85 - 3.22

(m, 6H, C-2, imidazolidinon).

Eksempel 4

7-/(2-aminoriozol-4-yl)-N-(imidazolidin-2-on-1-yl)-2 - iminoace tamidq_7-3-acetoksy me tyl -3 - cephe m-4-kar bon surt - . natrium(syn-form) (krystallinsk) (i vann tungtoppløselig form).

20 g av det under eksempel 3b omtalte i vann lett oppløselige krystallinske og etanolholdig natriumsalt opp-

løses under omrøring i 100 ml vann av 20°C, og denne oppløsning videreomrøres etter podning ved den i vann tungt oppløselige form i 30 minutter. Derved har det utskilt seg den i vann tungt oppløselag krystallinske form. Utfellingen suges fra og tørkes i exikator over P^O^q. Stoffet inneholder etanol,

men ca. 2 Molekvivalent vann.

Utbytte: 11,65 g

NMR (250 MHz, 6 i d6~DMS0) 9,82 (d, J 7, 5 Hz,

C-CO-NH), 7,5 (s N-CO-NH), 7,5 (d, HgN-tiazol), 6,73 (s, tiazol-5-H), 5,7 (dd, J 5Hz og 7,5 Hz, C?-H), 5,03 (d, 5 Hz,

C6-H), 5,01 og 4,79 (AB, J 12,5 Hz, CHg-O-CO), 3,9-3,2 (m,

S-CH2, N-CH2-CH2-N, HgO), 2,02 (s, -CO-CHg).

D-verdier og de dertil hørende intensiteter av en røntgenbøyanalyse ifølge De bye-Scherrer (påvisning av krystallini-

tet):

Eksempel 5 7 - £{ 2 -amiriotiazol -4 -yl ) -N - (imidazol idin -2 -on -1 -yl ) - 2-iminoacetamido/-3-acetoksymetyl-3-cephe m-4-karbon surt - L-lysin (syn-form).

Blandingen av 100 g "Lewatit S 100" (H+<->form)

(sterk, sur ioneutveksier) og 500 ml vann avkjøles til 0°C. Under omrøring tilsettes deretter på en gang 10 g stoff, frem-stilt tilsvarende eksempel 3b (0,017 Mol) og videreomrøres ved samme temperatur. Etter 6 minutter er pH sunket fra til å begynne med 4,85 til 3.39. loneutveksieren filtreres deretter med en gang over et G-4 filter, og det klare filtrat innstilles med 2,15 g L-lysin (sigma) (0,015 Mol) i løpet av 20 minutter på pH 6,55. Denne oppløsningen ble deretter underkastet frysetørking.

Utbytte: 9,6 g (87 % av det teoretiske) (amorf).

NMR (250 MHz, 6 i CD^OD + D.,0) 6,96 (s, tiazolin-5-H), 5,91 (d, 1H, 3-lactam), 5,23 (d, 1H, B-lactara): 5,0 - 4,77 (AB, 2H, -CHg-O-CO-,. blant utve ksle bare ), 4,1 - 3,38 (m, 7H, C-2, imidazolidinon, lysin- a-H), 3,0 (t, 2H, lysin H2N-CH2-), 2,1 (s, 3H, -OCO-CH^), 1,96 - 1,45 (m, 6H. lysin ).

Eksempel 6

7-/(2-aminotiazol-4-yl)-N-(imidazolidin-2-on-1-yl)-2-iminoacetam idc_7-3-acetoksy metyl-3-cephem-4-karbon surt-L-lysin (syn-form).

Den til 0° - 5°C avkjølte blanding av 10 g "Lewatit S 100" (H<+>-form) og 30 ml vann (pH 3,4) blandes med 1 g stoff av eksempel 3b (0,0017 Mol) under omrøring, omrøres 10 minutter (pH deretter 3,4 konstant) og deretter frasuges ioneutveksleren. Filtratet innstilles med L-lysin (sigma) til pH 6,7, og deretter innhelles oppløsningen av 200 ml isopropanol under omrøring: Det faller ut en pulverformet utfelling som frasuges etter 3 minutter. Deretter ble utfellingen på fritten til slutt klebrig. Etter utrivning med frisk isopropanol kunne det tørrsuges. Utbytte 0,6 (50 % av det teoretiske)

(amorf).

NMR: identisk med dette fra eksempel 5.

Eksempel 7

Tilsvarende eksempel 5, ble det av hver gang 1 g stoff fra eksempel 3c med følgende base dannet de tilsvarende salter:

Eksempel 8

1-[{ 2-aminotiazol-4 -yl)-N- (imidazolidin-2-on - 1 -yl )-2-iminoacetamido_7-3-acetoksymetyl -3-cephem-4^karbon - surt -natrium-1-oksyd (syn-form).

2,88 g 7-aminocephalosporansyre -S-oksyd silyleres som .i eksempel 3c i tetrahydrofuran ved hjelp av bis-trimetylsilylacetamid, omsettes med det ifølge eksempel 2a fremstilte syreklorid-hydroklorid. Reaksjonsblandingen helles deretter i meget absolutt eter, den dannede utfelling frasuges, oppløses i vann under tilsetning av natronlut ved pH 6,5»og denne oppløsninge frysetørkes.

Utbytte: 2, 0 g

NMR (250 MHz, 6 i CD^D/DgO): 6,98 (s, 1H, tiazolin-5), 6,4 (d, 1H, J - 5HZ, 8-lactam), 5,1 u. 4.7 (AB, 2H,

-CH20Ac, J = 13,5 Hz), 4.94 (d, 1H, J = 5Hz, Ø-lactam),

4,0 - 3.8 (ra, 3H,' CH2NH.u. 2-CH), 3» 6 - 3,46 (m, 3H, N-N-CH2u. 2-XH), 2,1 (s, 3H, C0-CH3).

Man kan også fremstille dette stoff fra stoffet ifølge eksempel 3a-d ved direkte oksydasjon ,med m-klorperbenzosyre i vann.

Aminocephalosporansyre-S-oksyd ble fremstillet ved fenyl-acetylaminocephalosporansyre-S-oksyd ved enzymatisk av spaltning av fenylacetylresten.

Eksempel 9 1 - [{ 2 -aminotiazol -4-yl )-N-(imidazolidin-2-on-1-yl)-2 - iminoacetamido_7-3-metyl - 3-cephem-4-kar bon surt -natrium (syn-form ). 5 g 7 aminodesacetoksycephalosporansyre silyleres som i eksempel 3d ved hjelp av hexametyldisilazan i aceton-nitril, omsettes deretter med ifølge eksempel 2a fremstillet syreklorid-hydroklorid. Reaksjonsblandingen omrøres til slutt ennå 4 timer ved 20°C, og helles deretter i 600 ml eter. Det omrøres 20 minutter, den dannede utfelling frasuges, og oppløses i isvann (60 ml) under tilsetning av 2N natronlut ved pH 6,5- Oppløsningen klarfiltreres fra små mengder forurensninger, og blandes deretter etter hvert med til sammen 600 ml EtOH. Den gel-aktige utfelling som danner seg, frasuges, vaskes godt med EtOH, og tørkes.

Utbytte: 2,15 g

NMR MHz, 6, i CD^OD/DgO): 6,86 (s, 1H, tiazolin-5), 5,72 (d, 1H, J = 5HZ, B-lactam),. 5, 06 (d, 1H, J = 5Hz, B-lactam), 3.87 (t, 2H, N-N-CHg), 1,87 (s, 3H, 3-CH^).

Eksempel 10

7- 1( 2-aminotiazol-4-yl)-N- (imidazolid in-2-on-1 -yl) - 2 -iminoacetamido_/-3-metyl -3-cephe ra- 4 -kar bon surt -natrium -1 - oksyd (syn-form).

2,14 g 7-aminodesacetoksycephalosporansyre-S-oksyd silyleres som i eksempel- 3c ved hjelp av bis-trimetylsilylacetamid i tetrahydrofuran, og omsettes deretter med syreklorid-hydroklorid ifølge eksempel 2a. Reaksjonsblandingen helles i meget eter, den dannede utfelling oppløses i isvann av pH 6,5»og oppløsningen frysetørkes.

Utbytte: 1,0 g

NMR (250 MHz , <5, i CD30D(D20): 7,0 (s, 1H, tiazolin-5-), 6,0 (d, 1H,' B-lactam, J = 5Hz), 4.92 (d, 1H, B-lactam, J = 5Hz), 4.0-3,5 (m, N-CHg-CHg-N. u. 2-H), 1,97

(s, 3H, 3-CH3).

Man kan også fremstille dette stoff fra stoffet i eksempel 9 ved direkte oksydasjon med klorperbenzosyre i vann.

Aminodesacetoksycephalosporansyre-S-oksyd ble fremstillet av fenylacetylaminodesacetyloksycephalosporansyre-S-oksyd ved enzymatisk avspaltning av fenylacetylresten.

Eksempel 11

7-/~(2 -aminotiazol -4 -yl) -N- (imidazol id in -2 -on -1 -yl ) -2 -imino - acetamido_7'-3-aminokarbonyloksymetyl - 3-cephem-4-karboPsurt-natrium (syn-form) (krystallinsk).

Blandingen av 1,68 g 7-amino-3-aminokarbonyloksy-metyl-3-cephem-4-karbonsurt natrium, 20 ml tetrahydrofuran

og 0,4.2 ml triflubreddiksyre omrøres i 20 minutter ved 20°C. Deretter tilsettes 20 ml acetonitril, og deretter 6,2 ml bis-trimetylsilylacetamid, og omrøres i ytterligere 50 minutter. Blandingen avkjøles deretter til -50°C, 1,77 g av syreklorid-hydroklorid fra eksempel 2a tilsettes og omrøres deretter 10 minutter ved -50°C. Etter fjerning av kuldebadet, øker temperaturen i løpet av 30 minutter til + 10°C. Reaksjonsblandingen helles deretter i 200 ml eter, og omrøres i 10 minutter. Den dannede utfelling frasuges deretter, og vaskes med eter, og oppløses i 20 ml isvann under tilsetning av 1n natronlut ved pH 6, 7. Man fraf iltrerer mindre mengder forurensning, og blander filtratet (40 ml) etter hvert med til sammen 200 ml EtOH. Derved faller det ut natriumsalt som krystallinsk utfelling.

Utbytte: 1,8 g.

NMR (250 MHz, 6, i CD^OD/DgO): 6,85 (s, 1H, tiazolin-5), 5,8 (d, 1H, B-lactam, J = 5Hz), 5,1 (d, 1H, B-lactam,

J = 5Hz), 4,82-4,59 (AB, CHgOCONHg blan t utveksl bare ) 3, 86

(t, 2H, =N-N-CH2, J 8Hz), 3,59-3,24 (m, 4H, CHg-NH u. C-2).

7-amino-3-aminokarbonyloksyme tyl-3-cephem-4-kar-boksyl syre -natrium ble fremstillet av 7-fenylacetylamino-3-amino-karbonyloksymetyl-3-cephem-4-karbonsurt natrium med enzymatisk avspaltning av fenylacetylresten.

Eksempel 12

7 -[(2 -aminotiazol -4-yl) -N- (imidazol id in -2 -on -1 -yl) - 2-iminoacetamido_7-3-pyridino metyl - 3-cephem-4-karbonat (syn-form).

1,68 g 7-amino-3-(1-pyridinium)-metyl-3-cephem-4-karbonat, 20 ml tetrahydrofuran, 6,15 ml bis-trimetyl-silyl-acetamid, 0,43 ml trifluoreddiksyre og 20 ml acetonitril haes sammen ved 20°C i denne rekkefølge under omrøring. Den klare oppløsning omrører man ennå i 10 minutter, avkjøler deretter til -50°C, og tilsetter 1,8 g av det i eksmepel 2a omtalte syreklorid-hydroklorid. Deretter fjernes kuldebadet-

Etter 25 minutter er temperaturen øket til 8°C, og det har dannet seg klar oppløsning. Denn heller man i 200 ml eter,

og omrører i 20 minutter i i åpent kar. Den dannede utfelling frasuges, vaskes godt med eter, og oppløses i 20 ml isvann under tilsetning av 1n natronlut ved pH 7. En liten mengde (0,1 g) av en forurensning frasuges, og filtratet blandes etter hvert med til sammen 600 ml EtOH. Etter henstand natten over, frasuges, vaskes med EtOH, og tørkes.

Utbytte: 1,2 g.

NMR (250 MHz, 6, i d-6-DMS0): 6,70 (s, 1H, tiazolin-5). 9.5 (d, 2H, pyridinium), 8,6 (m, 1H, pyridinium), 8,2 (m, 2H, pyridinium).

Eksempel 13a

2-(2-imino-4-tiazolin -4- -yl )-N-(perhydro-1, 3 - diazin -2-on -1 -yl)-2-iminoeddiksyre (syn -form). 2 g 1-amino-perhydro -1,3-diazin-2-on oppløses i 30 ml vann. Etter tilsetning av 3 g 2 - (2-imino-4-tiazolin-4-yl)-glyoksylsyre omrøres 5 timer ved 20°C. Den gule utfelling frasuges, vaskes med vann, og tørkes i exikator over F^ O^.

Utbytte: 4,3 g

Sm.p. => 260°C.

IR (nujol, karbonylområde): 1640, 1600, 1490 cm"<1.>Vanninnhold (n.f.) = 11,3$.

NMR (250 MHz, 6, i NaOD(D20): 7,13 (s, 1H, tiazolin-5), 3,72 (t, 2H, N-N-CHg), 3,32 (t, 2H, NH-CHg), 2,9-1,99 (m, 2H, perhydrodiazin-5-H).

Aminoperhydrodiazinon ble dannet fra perhydro-1,3 - diazin-2-on ved nitrosering (NaNOg, HgSO^) og reduksjon med sinkstøv (sm.p. = 114 - 117°C).

Eksempel 13b

2-(2-imino-4-tiazolin-4 -yl ) -N - (perhydro -1, 3-diazin -2 -on -1 -yl)-2-iminoeddiksyreklorid-hydroklorid.

0,5 g av stoffet ifølge eksempel 13a (vanninnhold n. f. = 2,4.50 suspenderes i 15 ml acetonitril. Etter tilsetning av 1,63 ml SOClg omrøres 3 1/4 time ved 20°C.

Den dannede utfelling frasuges deretter, vaskes med aceton-nitril, og ørkes over Pg^5i exikator.

Utbytte: 0, 55 g

IR (nujol, karbonylområdet): 1800, 1665, 1625, 1560, 1505 cm"<1>.

Eksempel 13c

1~[( 2 -aminotiazol -4-yl) -N- (perhydro -1, 3-diazin-2-on-1 -yl) -2 - iminoacetamido_/-3-acetoksy metyl -3-cephem-4-karbon - surt-natrium (syn-form).

Blandingen av 5 g 7-aminocephalosporansyre, 30

ml tetrahydrofuran og 9.8 bis-trimetylsilylacetamid omrøres til en dannelse av en oppløsning av 20°C (5 minutter), av-kjøles deretter til -50°C, og tilsettes 5,3 g av det ifølge eksempel 13b fremstilte syreklorid-hydroklorid. Deretter fjernes kuldebadet. Etter 40 minutter (indre temperatur da 18°C) helles reaksjonsblandingen i 500 ml eter. Man omrører 1 åpent kar 20 minutter, frasuger, vasker med eter, og opp-løser utfellingen i 50 ml isvann, idet man innstiller slutt-pH ved hjelp av 2n natronlut, på 7,5. Man frasuger meget lite uoppløst, og tilsetter til filtratet (75 ml) 500 ml

EtOH, og deretter 500 ml isopropanol. Man omrører ennå i

20 minutter,frasuger og vasker godt med isopropanol.

Utbytte: 3.5 g.

NMR: 250 MHz, 6, i CD^OD): 7,17 (s, 1H. tiazolin-5), 5,87 (d, 1H, J = 5 Hz, B-lactam). 5,2 (d, 1H, J = 5Hz,

B-lactam), CHg-OAc blandt utveksl bare), 3,76-3,6 (m, 3H, N-N- ■' CH2og C-2), 3,45-3,28 (m, 3H, NH-CH2og C-2), 2,11 (ps.s.5H, perhydrodiazin-5-H- og 0-CO-CH^).

i<1>

Eksempel 14

7-[( 2 -aminotiazol-4-yl)-N-(perhydro-1, 3-diazin - 2 -on -1 -yl) -2 -iminoace tamido_7 -3-aminokarbonyloksy me tyl -3-cephe.m-4-karbon surt-natrium (syn-form).

Blandingen av 4, 03 g 7-amino-3-aminokarbonyloksy-metyl-3-cephem-4-karbonsurt natrium, 40 ml tetrahydrof uran, 15.7 ml bis-trimetylsilylacetamid, 40 ml acetonitril og 1,1 ml trifluoreddiksyre omrøres 40 minutter ved 20°C, og det da klare oppløsning avkjøles til -50°C Deretter tilsettes 4,27 g av det ifølge eksempel 13b fremstilte syreklorid-hydroklorid, om blandingen omrøres i 10 minutter ved -50°C.

Man fjerner deretter kuldebadet, lar det videreomrøre ved værelse stemperatur, inntil det etter ca. 20 minutter ved en temperatur på 8°C har dannet seg en klar oppløsning. Denne helles i 600 ml eter, omrøres 20 minutter i åpent kar, den dannede utfelling frasuges, vaskes godt med eter, og innføres deretter i 50 ml isvann, og derved innstilles ved hjelp av 2n natronlut pH endelig til 7-7,5- Man frasuger en liten mengde forurensning (1,2 g) og setter deretter til filtratet etter hvert tilsammen 850 ml EtOH. Man omrører deretter ennå 1 time ved 20°C, frasuger, vaskes med EtOH og tørker med exikator over Po<0>r.

<■ 5

Utbytte: 3.15 g.

NMR (250 MHz, 6, i CD^OD/DgO)-: 7,6 (s, 1H, tiazolin-5), 5,84 (d, 1H, J = 5 Hz, B-lactam), 5,14 (d, 1H, J = 5 Hz, B-lactam), (CH^OCONHg bl andt utveksl bare), 3,76-3,56 (m, 3H, N-N-CH2og C-2), 3,42-3,22 (m, 3H, CHg-NH o.g C-2), 2,0 (m,

2H, perhydrodiazin-5-C).

Eksempel 15

7-/"(2 -aminotiazol -4-yl ) -N- (perhydro -1, 3-diazin - 2 -on -1 -yl )-2-iminoacetamido__7-3-pyridiniometyl-3-cephem-4-karbonat (syn-form).

2,52 g 7-amino-3-(1-pyridinium)-metyl-3-cephem-4-karbonat, 30 ml tetrahydrofuran, 0,64 ml trifluoreddiksyre, 9,25 ml bis-trimetylsilylacetamid og 30 ml acetonitril haes sammen i denne rekkefølge ved 20°C, og omrøres 5 til 10 minutter. Den da klare oppløsning avkjøles til -50°C, og tilsettes 3,24 g (2,81 g renstoff) av det i eksempel 13b omtalte syreklorid-hydroklorid. Deretter fjernes kuldebadet, og omrøres 2 timer..

ved værelse stemperatur. Den dannede utfelling suges fra, vaskes med tetrahydrofuran/acetonitril (1:1) og med eter og tørke s.

Utbytte: 2, 7 g.- (A)

Råmoderluten helles i 600 ml eter, den dannede utfelling frasuges, oppløses i 25 ml isvann ved hjelp av

. 300 ml EtOH utfelles en annen fraksjon.

Utbytte: 1,5 g (B).

NMR (Substans A) (250 MHz, 6, i CD 0D/D20 ref. til MeOH): 9,13 (d, 2H) og 8,63 (t, 1H) og 8,15 (m, 3H) pyridinium, 7,06 (s, 1H, tiazolin-5), 5,92 (d, 1H, J = 5Hz, B-lactam), 5, 73 og 5,35 (AB, 2H, Cu2-pyr idin ium), 5,26 (d, 1H, J = 5Hz, B-lactam), 2,07 (m, 2H, perhydrodiazin-5-C).

Eksempel 16

I- L (2-aminotiazol-4-yl)-N-(perhydro-1,3-diazin-2- on-1-yl)-2-iminoacetamido7-3-/l1-me tylte trazol-5-yl)-tiometyl7-3-cephem-4--karbonsurt natrium (syn-form).

1,75 g 7-amino-3-Z (1-me tyltetrazol-5-yl)-tiome tyl_7~ 3- cephem-4-karboksylsyre, 20 ml te trahydrof ur an, 5,65 ml bis-trimetylsilylacetamid og 20 ml acetonitril omrøres 20 minutter ved 20°C. Den da klare oppløsning avkjøles til -50°C. 2 g

( = 1,73 g rent stoff) av det i eksempel 13 b omtalte syreklorid-hydroklor id tilsettes,kuldebadet fjernes, og blandingen omrøres ca. 25 minutter ved omgivelsestemperatur. Den deretter klare oppløsning har da +10°C, og helles i 400 ml eter. Man omrører i åpent kar i 20 minutter, frasuger utfellingen, og oppløser den i 20 ml isvann under tilsetning av 2n natronlut ved pH 7 - 7,5. En liten mengde av en forurensning frasuges, og filtratet blandes med 700 ml EtOH, deretter med 500 ml eter. Den dannede utfelling frasuges, vaskes med eter og tørkes.

Utbytte: 0,9 g

NMR: (250 MHz,6, i CD^D/DgO, ref. til MeOH = 3,3 ppm): 7,05 (s, 1H, tiazolin-5), 5,83 (d, 1H, J = 5Hz, B-lactam), 5,13 (d, 1H, J = 5Hz, g-lactam), 4,38 og 4,28

(AB, 2H, CH2-S-tetrazol), 4, 0 (s, 3H, Me-tetrazol ), 3.84-3.69 (m, 3H, N-N-CH2og C-2, AB del), 3,52 (AB del v C-2, 1H), 3,3 (ps.s. 2H, CH2-NH), 2,06 (tn, 2H, perhydrodiazin-C-5)•

Claims

1. Syrehalogenider, karakterisert ved at de har den generelle formel IV

hvori; n betyr 2, 3 eller H, og X betyr et halogenatom.

2. Fremgangsmåte til fremstilling av syrehalogenid med den generelle formel IV, karakterisert ved at aminotiazolylglykolsyre

omsettes med hydrazonforbindelsen hvori n har den i krav I angitte betydning til syren V hvori n har ovennevnte betydning, og denne omsttes med et halogeneringsmiddel.

'3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at omsetningen av syren V med halogenerings-midlet gjennomføres med et tionylklorid som halogeneringsmiddel i acetonitril eller et lavere nitroalifat, idet tionylklorid anvendes i overskudd over syrer V, og idet videre reaksjonsblandingen før tilsetningen av tionylklorid bringes til et. vanninnhold som tilsvarer et molforhold syre V/H2 0 fra 1:2 til 1 :iJ.