NO803640L

NO803640L - N-adamantan-substituerte tetrapeptidamider.

Info

Publication number: NO803640L
Application number: NO803640A
Authority: NO
Inventors: Robert Henry Mazur
Original assignee: Searle & Co
Priority date: 1979-12-03
Filing date: 1980-12-02
Publication date: 1981-06-04
Also published as: JPS5692847A; IT8050294A0; NL8006586A; ES508060A0; AU6499080A; FR2476073A1; ES8300087A1; GB2066262A; ES497353A0; ES8205753A1; CA1151642A; US4273704A; IT1127930B; BE886472A; DK513480A; ZA807513B; PT72141B; GB2066262B; PT72141A; SE8008428L

Description

Foreliggende oppfinnelse angår N-adamantan-substituerte tetrapeptide amider og deres farmakologisk akseptable salter. Disse forbindelser er analoger av enkephalin hvor methionin eller leucine i stilling 5 er blitt erstattet med adamantylamid og glycinet til stilling 2 er blitt erstattet med forskjellige aminosyre residua. Eventuelt kan tyrocinet til stilling 1 og fenylalaninet til stilling 4 også være erstattet med forskjellige, aminosyre residua. Enkephalin som er et naturlig forekommende pentapeptid, er blitt isolert og består av en blanding av 2 pentapeptider som bare skiller seg med hensyn til femte amino syre residuum. Leucine -^-enkephalin kan angis ved hjelp av følgende formel: og methionme -enkephalin kan angis ved følgende formel

hvor Tyr, Phe, Met og Leu residua alle er av den L-stereo-kjemiske konfigurasjonen.

R. Tomatis, et. al. IL Farmaco-Ed.Sc., 3_4(6) : 496-506 (1979) beskriver syntesen av leu-enkephalin-l-adamantylamid og leu-(D-ala )enkephalin-l-adamantyl-amin. Disse forbindelser er strukturelt forskjellige fra forbindelser i følge foreliggende oppfinnelse ved at de beskriver at 1-ada-matyl amidet er knyttet til hele enkephalinmolekylet, mens den foreliggende oppfinnelse beskriver at man har erstattet amino syren i stilling 5 i nevnte enkefalin peptid med adamantyl amid.

K.Q.Do, et. al., Helvetica Chimica Acta 62(4) :956-964 (1979) beskriver syntesen av (S)-(+)-2-amino-3-(l-adamantyl)-propionsyrejen forbindelse hvor fenyl radikalet i fenylalaninet er erstattet med adamantån. Foreliggende oppfinnelse beskriver nye N-adamantan-substituerte tetrapeptide amider. Disse forbindelser er analoger av enkephalin hvor det i 5-stillingen er skjedd en substitusjon med et adamantyl-amid. Adamantyl amid residuaene i forbindelser'i følge fore liggende oppfinnelse er strukturelt forskjellig fra (S)-(+)-2-amino-3-(1-adamantyl)-propionsyre ved at amino radikalet og karboksyl radikalet når dette er tilstede, er knyttet direkte til adamantan radikalet.

Foreliggende oppfinnelse angår nye N-adamantan substituerte tetrapeptide amider, derivater av disse, samt deres farmakologiske akseptable salter. Mer spesielt angår oppfinnelsen forbindelser med formelen

hvor W representerer tyrosin eller et radikal med formelen

hvor R^sR2og R-2j uavhengig av hverandre kan være hydrogen eller en alkylgruppe med fra 1 til 4 karbonatomer;

X representerer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-aminosmørsyre, 1-aminocyclopropan karboksylsyre, alanine, O-metylhomosterine, proline eller norleucine;

Y representerer fenylalanine, dehydrofenylalanine, cyclo-hexylalanine eller et radikal med formelen hvor Rjj representerer hydrogen eller en alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer og M representerer hydrogen, nitro eller halogen; og

Z representerer et radikal med formelen

hvor R,- representerer hydrogen, karboksyl, metoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0, 1 eller 2; et radikal med følgende formel hvor R^og n er som definert ovenfor; et radikal med formelen hvor R,- og n er som definert ovenfor; et radikal med formelen hvor R^og n er som definert ovenfor; et radikal med formelen hvor R^og n er som definert ovenfor, eller et radikal med formelen

hvor R^og n er som definert ovenfor; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjon på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

De forkortelser som er.brukt for aminosyrene

er i overens-stemmelse med de nomenklatur regler som er publisert av IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomen-clature in Biochem. J. 126: 773-780 (1972). Aminosyrene har den L-stereokjemiske konfigurasjonen hvis intet annet er angitt. Det tør være innlysende at man kan utføre mange variasjoner med hensyn til substituentgruppen R,- på adamantan radikalet, uten at man dermed påvirker den farmakologiske aktivitet for de foreliggende forbindelser, og at det også er mulig å hå mer enn 1 substituent-gruppe på- adamantan radikalet, og hvor disse gruppene kan være like eller forskjellige, uten at dette heller ikke påvirker den farmakologiske aktiviteten. En rekke mulige substituentgrupper er beskrevet i 1979-1980 Aldrich Catalog Handbook of Pine Chemicals'sidene 21-22.

Mulige ikke begrensende substituent grupper kan f.eks. være de følgende: halogen, nitro, hydroksy, tetrazole, amino, oxo, -CH2OB(OH2) -NHCOCH^, - (CH~2 ) 0_ijNH2 , -0 (CH2) 1_i)CH3 ,

-S03CH3, -(CH2)Q_4CHO, -(CH2)Q_4CH3, -(CH2)Q_4CN, -(CH2)Q_4

C00H, -C0C1, -COCH^, -NHC0NH2, -(CH2)Q_4OH, og -N=C=S.

Ekvivalente til de foran nevnte forbindelser for det foreliggende formål, er solvater hvor det er tilstede biologisk ubetydelige mengder av oppløsningsmiddel.

Også ekvivalent til forbindelser med formel (I) for det foreliggende formål, er farmasøytisk akseptable syre addisjonssalter. Slike syre addisjonssalter kan være fremstilt av en rekke uorganiske og organiske syrer så som svovelsyre, fosforsyre, saltsyre, hydrobromsyre, hydrojodsyre, salpetersyre, sulfaminsyre, sitronsyre, melkesyre, pyrodrue-syre, oxalsyre, maleinsyre, ravsyre, tartarsyre, kanelsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, benzosyre, salicylsyre, glukon-syre, ascorbinsyre og tilsvarende syrer.

Forbindelser i følge foreliggende oppfinnelse er verdifulle på grunn av sine farmakologiske egenskaper.

De er f.eks. agonister til opiate reseptor posisjoner og kan brukes som smertestillende midler.

Den prøve som brukes for å påvise agonist aktiviteten med hensyn til opiat reseptor posisjoner, er en modifikasjon av den teknikk som er beskrevet' av Pert, Snowman and Snyder, in Brain Research, 70, 184 (1974).

Denne prøven kan beskrives på følgende måte:

et albino marsvin av enten han eller hunkjønn og som veier mellom 300-400 g, drepes ved at nakken knekkes, hvoretter hjernen tas ut og lillehjernen fjernes. Det gjenværende vev avkjøles, veies og homogeniseres i 30 ml 0,32 mol sucrose ved hjelp av en teflon-glass homogenisator. Homogenatet sentrifugeres i 10 minutter ved 4°C ved 1000 g i en Sorvall RC-2B sentrifuge. Den resulterende klare overliggende væske helles av og sentrifugeres i 30 minutter ved 4°C og 20 000 g.

Det resulterende bunnfall vaskes,ved en resuspensjon i 0,05 mol tris-HCl buffer (pH 7,4) og sentrifugeres så i en halv time ved 4°C og 20 000 g. Det endelige bunnfall suspenderes i 30 ml buffer pr. hjerne for videre bedøvelse. Når målingene skal utføres i nærvær av natrium ion, bruker man en buffer som er Krebs-tris ved pH 7,4, mens man i et fravær av natrium ioner bruker en buffer som er 0,05 mol tris-HCl med en pH på 7,4. Levorphanol (10 — 6 mol) og dextrorphan (10 — 6mol) brukes for å bestemme spesifik binding. Reseptorbindings aktivitet bestemmes av Pert og Snyder med visse modifikasjoner.<3>H-(-)-naloxon (19,985 Ci/mmol), lot t 887-201, New. England Nuclear Corp, Boston, Mass.) brukes som radioliganden. Den vaskede membranfraksjonen fortynnes 1:10 i passende buffer og man bruker 2 ml pr. rør i prøven. Bindings undersøkelser starter ved at man preinkuberer homogenatet inneholdene forskjellige konsentrasjoner (i tre paraleller) av prøve forbindelsen eller en standard på is (4°C) i 10.minutter. Reaksjonen startes ved at man tilsetter -^H-nalaxone (endelig konsentrasjon, 2,5 nM) til røret og utfører en inkubasjon i is i ytterligere en halv time. Prøvene filtreres raskt under redusert trykk inn i Whatman GF/C glass fiber filter skiver. Filtrene blir vasket to ganger med 8 ml iskald buffer og-så oppløst i 1 ml NCS TM vevsoppløsningsmiddel (Amersham/Searle Corp., Arlington Heights, 111.) i 1 time ved 55°C. Etter av-kjøling blir prøvene surgjdrdt og tellet i en væske scintil-lasjonsteller (Mark II Nuclear Chicago). Man bestemmer en ID^0konsentrasjon for formelbindelsen som hemmer H-naloxone binding ut fra en logarytmisk kurve hvor prosentvis hemming av -^H-naloxone er avsatt i forhold til konsentrasjonen av prøve forbindelsen.

Den oven-nevnte in vitro prøven er kjent for

å kunne korreleres med de tilsvarende agonist-antagonist egenskaper in vivo (Nature, vol. 247, Ja n. li; 1974).

Når en kjent agonist, d.v.s. morfin, ble prøvet i denne prøven i et fravær av natrium ioner, så hadde deri en ID,-,-, konsentrasjon på 7,4 x 10 — 7'.

Det er også kjent at reseptor affinitetene i nedre del av tynntarmen er lik med hensyn itil bindings karak- teristika som de man finner i hjernen (Terenius, Acta. Pharma-col. et Toxicol., 37, 211-221 (1975)). Det man hittil vet indikerer at forbindelser som virker på opiate reseptoren på nedre del av tynntarmen forårsaker forstoppelse, og kan derfor brukes som et middel- mot diare.

Den smertestillende aktiviteten for forbindelser

i følge foreliggende oppfinnelse kan påvises ved å'bruke den kjente fenyl-p-benzochinon-induserte "vridning" prøve i mus. Denne prøven er en modifikasjon av den fremgangsmåte som er beskrevet av L. C. Hendershot og J. Forsaith, i J. Pharma-

col. Exp. Ther., 125:237 (1959).

Denne prøven kan beskrives på følgende måte: Grupper på 10 hannlige CD-1 mus (Charles 'River) som veier mellom 18-25 g ble forbehandlet subkutenøst (s.c.) eller i magesekken (i.g.) med en kontroll av den væske som skal brukes, eller forbindelsen i et volum på 10 ml/kg kroppsvekt. Fenyl-p-benzochinon (PBQ), i en dose på 2,5 mg/kg kroppsvekt ble tilført intraperitonalt (i.p.) 30 eller 60 minutter senere som en 0,025 % oppløsning i 5% etanol. 5 minutter etter PBQ til-førselen ble hver mus observert i en 10-minutters periode hvor man tellet antall "vridninger". En "vridning", består av en kombinasjon eller rekkefølge av vridning av ryggen,

en rotasjon av bekkenet eller en utstrekning av bakbenene. Betydélig smertestillende effekt ble angitt når man fikk en vridningsfrekvens som er lik eller mindre enn 50% av middelet på en daglig kontrollgruppe.

Bedømmelse av ED^Q definert som den dose som nedfatter vridningen med mer enn 50% i forhold til kontroll-gruppen i 50% av musene, ble bestemt. - ved å bruke den fremgangsmåte som er beskrevet av J.T. Litchfield og P. Wilcoxon J.Pharmacol. Exp. Ther., 96:99 (19^9). Når morfin ble prøvet subkutenøst i denne prøven, så fikk man en EDj-q ( 95% tillitsgrense), 60 minutter på 0,1 (0,3 til 0,37)mpk. Når en repre-sentativ forbindelse i følge foreliggendé oppfinnelse, d.v.s metyl 2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantane-karbokylate ble prøvet subkutenøst, så

ga denne en ED^0( 95% tillitsgrense), 60 minutter, på 0,31 (0,13-0,7*0 mpk.

Forbindelser i følge foreliggende oppfinnelse kan kombineres med forskjellige typiske farmasøytiske bære-stoffer eller fortynningsmidler for derved å tilveiebringe preparater som kan brukes som smertestillende midler. Dosen med hensyn til disse forbindelser vil være avhengig av forskjellige faktorer, så som den spesielle forbindelse som brukes og den spesielle reaksjon man ønsker å oppnå. Typiske doser for bruk som smertestillende midler vil variere fra 0,3 til 10 mg/kg kroppsvekt pr. døgn ved en parenteral til-førsel .

Fremstillingen av den foreliggende oppfinnelse kan hensiktsmessig oppnås ved hjelp av fremgangsmåter som er tilpasset en syntese av peptider, d.v.s både oppløsnings-synteser og peptid synteser i fast fase. I forbindelser med oppløsnings-synteser så er ikke den rekkefølge i hvilken man kobler aminosyrene kritisk, og tetrapeptid adamantyl amidet kan fremstilles ved å koble en hver kombinasjon av to egnede enheter som inneholder de ønskede amino syrer eller adamantyl amider.

Forbindelser i følge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved den blandete anhydrid koblingsmetode som er beskrevet av G.W. Anderson et. al., J.AM.Chem. Soc., 88: 1338 (1966). Således blir en N-beskyttet amino syre eller peptid oppløst i et inert oppløsningsmiddel. Egnede oppløs-ningsmidler innebefatter, men ér ikke begrenset'til, tetrahydrofuran, dikloretan og etyl acetat. Man tilsetter en ekvivalent av et tertiært amin så som N-metylmorpholin eller N-etylmorpholin, og oppløsningen avkjøles til ca. -20°C. Man tilsetter dråpevis en ekvivalent isobutylklorformat eller etylklorformat under røring, mens temperaturen holdes under

-10°C. Etter ca. 5 minutter tilsetter man den forbindelse som skal kobles, d.v.s. en amino syre, peptid eller adamantyl amid, fortrinnsvis som, den fri basen (eller som et salt sammen med en ekvivalent N-metylmorpholin). Reaksjonsblandingen røres ved romtemperatur inntil reaksjonen er fullstendig. Dette vil vanligvis skje etter et tidsrom på fra 2 til 24 timer, men kan utføres over lengre perioder for å sikre en fullstendig reaksjon. Det N-blokkerte produkt kan så behandles

for fjerning av de beskyttende grupper på vanlig måte, hvorved man får det ønskede produkt. Reaksjonen er angitt ved det følgende skjema hvor W, X, Y og Z er som definert ovenfor,

og □ representerer en N-beskyttende gruppe:

Alternativt kan forbindelser i følge foreliggende oppfinnelser fremstilles ved en peptid syntese i fast fase, slik dette f.eks. er beskrevet av Merrifield, J.AM. Chem.Soc., 85, 2149 (1963)- Denne fremgangsmåte innebefatter at man først til et polymerunderlag, f.eks. en klormetylert sandpolymer, styren-1% divinylbenzen, fester en N-beskyttet C-terminal aminosyre, hvoretter man fjerner den N-beskyttende gruppe og kobler i nærvær av et egnet dehydrerings middel, f.eks. dicyclohexylkarbodiimid, suksessivt hver av de passende N-beskyttede amino syrene.

Amino funksjonene på mellomproduktene i foreliggende oppfinnelse bør beskyttes ved hjelp av vanlig kjente amino beskyttende grupper så som aryl-lavere alkyl grupper. Slike grupper kan være difenyl eller trifenylmetylgrupper, som eventuelt kan være substituert med halogen, nitrogen, lavere alkyl eller lavere alkoksy, f.eks.; benzhydryl, trityl og di-paramethoxybenzhydryi; acyl grupper så som formyl, trifluor-acetyl, phtaloyl, p-toluensulfonyl; grupper avledet av kar-bonsyre eller thiokarbonsyre, så som karbobenzoksy grupper som eventuelt i det aromatiske radikal kan være substituert med halogen, nitro grupper eller lavere alkyl, lavere alkoksy eller lavere karbaloksy grupper, f.eks. karbobenzoksy (Cbz), p-bromkarbobenzoksy eller p-klorkarbobenzoksy, p-nitrokarbo-benzoksy og p-methoksykarbobenzoksy; fargede benzyloksy-karbonyl grupper så som p-fenylazobenzyloksykarbonyl og p-(p-methoksyfenylazo)-benzyloksykarbonyl, tolylokskarbonyl, 2-fenyl-2-propoksykarbonyl, 2-tolyl-2-propoksykarbonyl;

og 2-(parabifenylyl)-2-propoksykarbonyl, og alifatiske oksy-karbonyl grupper så som t-butoksykarbonyl (Boe), allyloksy-karbonyl, cyclopentyloksykarbonyl, t-amyloksykarbonyl. En spesielt foretrukket N-beskyttende gruppe som kan brukes i foreliggende oppfinnelse, er nevnte t-butoksykarbonyl (Boe) gruppe.

Amino gruppene kan også beskyttes ved å danne enaminer, noe som kan gjøres ved å reagere amino gruppene med 1,3-diketoner, f.eks. benzoylaceton, eller acetylaceton.

De beskyttende grupper kan hensiktsmessig fjernes ved reaksjoner så som en reduksjon med natrium i flytende ammoniakk, hydrogenolyse (f.eks. i nærvær av palladium på trekull katalysator), behandling med en hydrohalogen syre (så som hydroklor-, hydrobrom-, hydrofluor- eller hydrojodsyre) i eddiksyre, eller en behandling med trifluor eddiksyre.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. Det er innlysende at man lett kan utføre mange modifikasjoner både med hensyn til fremgangsmåter og forbindelser uten at man derved forlater oppfinnelsens intensjon. I alle de etter-følgende eksempler er temperaturene angitt i °C og de relative mengder er angitt i gram eller milliliter hvis intet annet er angitt.

Eksempel 1

3-amino-l-adamantankarboksylsyre ble fremstilt ved hjelp av den fremgangsmåte som er beskrevet i Loevens Kemiske Fabrik Produktionsaktieselskab, Netherland Application 6,512,491, 29 mars, 1966 Chem. Abs. 65: 16975 (196.6) og 3,90

g blir tilsatt en oppløsning av 3,6 ml thionyl klorid i 125 ml metanol. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet over natten ved

koking under tilbakeløp, hvoretter metanolen ble avdestillert i våkum. Residuumet ble ristet med eter, hvorved man fikk metyl 3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som hadde følgende strukturformel

Eksempel 2

30 ml av en 1-normal natrium hydroksydoppløs-ning blir tilsatt 4,95 g L-fenylalanine. Oppløsningen ble avkjølt og rørt i et isbad, hvoretter man dråpvis tilsatte 5,4 ml av en 6,1 mol oppløsning av karbobenzoksyklorid sammen med ytterligere 1-normal natrium"hydroksydoppløsning slik at pH holdt seg på 11,0-11,5. Reaksjonsblandingen ble vasket med eter. Det vanndige laget ble surgjordt til pH 1,0 med 12-normal saltsyre, hvoretter oppløsningen ble ekstrahert med etyl acetat. Etyl acetat' ekstraktet ble utskilt og vasket tre ganger med vann og tørket over magnesium sulfat. Oppløsnings-middelet ble fjernet under våkum. Residuumet utkrystalliserte seg ved gnidning med vann til N-karbobenzoksy-L-fenylalanine . 3j99g metyl 3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid og 4,78 g karbobenzoksy-L-fenylalanine ble oppløst i 40 ml etylenklorid. Oppløsningen ble tilsatt 1,8 ml N-metyl-morpholin fulgt umiddelbart av 2,19 g dicyclohexylkarbodiimid. Blandingen ble så hensatt i romtemperatur i 24 timer, og ble så behandlet med karbobenzoksy-L-fenylalanine og dicyclohexylkarbodiimid som beskrevet ovenfor. Reaksjonsblandingen ble igjen hensatt 24 timer ved romtemperatur. Dicyclohexylurea ble fjernet ved filtrering og vasket med metylen klorid. De samlede filtrater ble vasket to ganger med 0,5 mol kalium bisulfat, vann og en 1 mol oppløsning av kalium bikarbonat og så tørket over magnesium sulfat. Diklormetanet ble fjernet under våkum, og residuumet ble renset ved lavtrykks kromatografi på silicium dioksyd gel i det man brukte blanding-

er av hexane og kloroform som elueringsmiddel, hvorved man fikk metyl karbobenzoksy-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat, som hadde følgende strukturformel

hvor Cbz representerer karbobenzoksy.

Eksempel 3

3,58 g metyl karbobenzoksy-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat ble oppløst i 10 ml eddiksyre og tilsatt 15 ml av en 5-mol oppløsning av hydrogen bromid i eddiksyre, hvoretter blandingen ble hensatt ved rom temperatur i en time. Oppløsningsmiddelet ble fjernet ved destillasjon under våkum og residuumet ble ristet med to hundre ml porsjoner hexane, så 100 ml eter, hvorved man fikk metyl L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylate hydrobromid som hadde følgende struktur formel

Eksempel 4

Urent metyl L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydrobromid fra eksempel 3 ble oppløst i 15 ml dimetylformamid. Oppløsningen ble tilsatt 1.12 ml N-metylmorpholine fulgt av 2,18 g t-butoksykarbonylglycine-N-hydro-ksysuccinimide ester. Reaksjonsblandingen ble stående 24 timer ved rom-temperatur og ble fortynnet med 300 ml etyl acetat. Etyl acetat laget ble vasket med 0,5 mol kalium bisulfat fulgt av vann, 0,5 mol kalium bikarbonat, så vann og deretter tørking over magnesiumsulfat. Oppløsningen ble filtrert for å fjerne magnesium sulfat, hvoretter oppløsnings-

middelet ble fjernet.

Rensing av residuumet ved lav trykk 'kromatografi på silicium dioksyd gel gir metyl Boc-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat som kan angis ved hjelp av følgende formel

Eksempel 5

3 a 65 g metyl Boc-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-1-adamantankarboksylat oppløst i 20 ml dioksan blir tilsatt 10 ml av en 6 molar oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i en halv time ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet og residuumet ristet med eter. Fjerningen av eter gir et hvitt pulver som er metyl glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som kan angis ved følgende formel

Eksempel 6

Det ble fremstilt et blandet anhydrid ved å reagere 2,0 g Boc-D-methionine med 0,90 ml N-metylmorpholin og 1,06 ml isobutylklorformat i 15 ml tetrahydrofuran ved

-20°C. En oppløsning av 2,84 g metyl glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i 15 ml tetrahydrofuran ble nøytralisert med 0,78 ml N-metylmorpholin og tilsatt det blandete anhydrid. Det hele ble rørt i to timer ved rom-temperatur og hensatt over natten. Blandingen ble fortynnet med 200 ml etyl acetat, og acetatlaget ble oppsamlet og vasket med vann og deretter med 0,2 mol kalium bisulfat, vann og så 1 mol kalium bikarbonat og så tørket over

magnesium sulfat. Oppløsningen ble filtrert, og oppløsnings-middelet fjernet under redusert trykk..Rensing av residuumet ved lavtrykks kromatografi på silicium dioksyd gel gir metyl Boe-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat som er representert ved følgende formel

Eksempel 7

En oppløsning av 3,383 g metyl"Boc-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat i 15 ml dioksan ble reagert med 10 ml 6 mol hydrogenklorid i dioksan i 30 minutter ved romtemperatur. Dioksanet ble fjernet, og residuumet tørket i en våkum tørker hvorved, man fikk det avblokkerte peptid som er metyl D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid. Denne forbindelse kan angis ved hjelp av følgende formel

Eksempel 8

En oppløsning av 3-513 g metyl D-methionyl-gly cyl-L- f enylalanyl- 3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i 30 ml tetrahydrofuran ble tilsatt 3,17 g Boc-L-tyrosin pentaklorfenyl ester fulgt av 1.12 ml N-metylmorpholin. Reaksjonsblandingen ble hensatt 4 timer ved romtemperatur og så fortynnet med 200 ml etyl acetat.. Etyl acetat laget ble utskilt og vasket tre ganger med 0,5 mol oppløsning av kalium bisulfat og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmid-delet ble fjernet ved redusert trykk, og residuumet renset ved lavtrykks kromatografi på* silicium dioksyd gel, hvorved man fikk metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl- 3-amino-l-adamantankarboksylat som kan angis ved hjelp av følgende formel

Eksempel 9

Til en blanding av 5,0 ml eddiksyre, 5,0 ml dioksan og 10,0 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan ble tilsatt 1,0 g metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantan-karboksylat. Reak-sj onsblandingen ble hensatt 30 minutter ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet'i våkum. Residuumet ble oppløst i en blanding av 2,0 ml metanol og 20 ml vann, hvoretter oppløsningen ble lyophilisert til metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantan-karboksylat hydroklorid som kan angis ved hjelp av følgende formel

Eksempel 10

0,285 g metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid ble oppløst i en blanding av 2,0 ml metanol og 2,0 ml vann, hvoretter man tilsatte 0,1 ml 30% hydrogen peroksyd. Reaksjonsblandingen ble hensatt i en time ved romtemperatur, hvoretter 20 ml vann ble tilsatt og blandingen lyophilisert som ga metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat sulfoksyd hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 11

Hydroklorid addisjons saltet fra eksempel 9 kan omdannes til andre egnete salter eller'den frie basen ved standard fremgangsmåter så som ione utbytter.

Således kan en svak basisk ione utbytte har-piks så som 1R-45 omdannes til acetat formen ved hjelp av følgende fremgangsmåte:

a. Vask med 2-normal natrium hydroksyd

b. Vask til nøytralisert med vann

c. Vask med 50% eddiksyre

d. Vask inntil nøytralitet med vann.

1,0 g metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i loo ml vann ble ført igjennom denne kolonnen i en mengde på 1,0 ml/min., hvoretter kolonnen ble vasket med ytterligere 100 ml vann. De samlede eluater ble lyophilisert hvorved man fikk acetat saltet metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat eddik syre salt.

Når den oven-nevnte fremgangsmåten ble gjentatt med harpiksen i hydroksyd formen (en gjentakelse bortsett fra trinnene a og b i nevnte vaskemetode), så får man fremstilt den frie basen, d.v.s. metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat.

Eksempel 12

En anvendelse av en ekvivalent mengde L-p-nitrofenylalanin eller L-p-klorfenylalanin i stedet for L-fenylalanine i eksempel 1, og deretter en gjentakelse av den fremgangsmåte som er beskrevet i eksemplene 1 til gir metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-p-nitrofenylalanyl-3- amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid eller L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-p-klorfenylanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formeler

Eksempel 13

5,09 g Boc-L-fenylalanin ble oppløst i 25 ml tørr dimetylformamid hvoretter man tilsatte 2,13 ml N-metyl-morpholin. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -50°C og tilsatt 2,51 ml isobutylklorformat. Blandingen ble rørt 15 minutter, hvoretter man tilsatte 1,77 ml N-metylmorpholin og 3,93 metyl 3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid, og blandingen ble så rørt inntil alt metyl 3-amino-l-adamantankarboksylat

var oppløst, hvoretter blandingen ble lagret i 3 døgn ved 5°C. Den ble så helt over 100 ml vann og ekstrahert to ganger med 50 ml etylacetat. Etylacetat fraksjonen ble vasket to ganger med 50 ml vann, 5 0 ml av en 0,5 mol oppløsning av kaliumbi-sulfat, 50 ml vann, og 50 ml av en 0,5 mol oppløsning av kalium, bikarbonat og 50 ml vann, og deretter tørket over magnesiumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet ble oppløst i 150 ml 10% kloroform i hexan og renset ved lavtrykks kromatografi på silicium dioksyd gel i det man brukte en gradient fra 10 til 50 % kloroform i hexan som elueringsmiddel. Fjerning av oppløsnings-middelet i våkum gir det forønskede produkt, metyl Boc-L-fenyl-alanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat som er representert ved den følgende formel

Eksempel 14

5,48 g metyl Boc-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat ble oppløst i 15 ml dioksan, hvoretter man tilsatte 20 ml av en 5,9 mol oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Etter henstand i 10 minutter ved romtemperatur ble oppløsningsmiddelet fjernet under redusert trykk, og residuumet rørt med dietyleter. Det krystallinske produkt ble frafiltrert, vasket med dietyleter og tørket i.våkum ovn i 16 timer ved 50°C og 0,1 mm trykk, hvorved man fikk metyl L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 15

En oppløsning av 16,0 g metyl Boc-D-methionyl-glycinat i 50 ml dioksan ble tilsatt 50 ml av en oppløsning av 5,6 mol hydrogenklorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble rørt i en halv time ved romtemperatur, hvoretter oppløsnings-middelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble rørt med dietyl eter til en gummi. Eteret ble avhelt, og produktet tørket under høyvakum, hvorved man fikk metyl D-methionyl-glycinat hydroklorid som er angitt ved følgende formel

Eksempel 16

En oppløsning av 16,88 g Boc-L-tyrosin i 50 ml tørr dimetylformamid ble tilsatt 6,65 ml N-metylmorpholin. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -40°C, og deretter tilsatt 7,84 ml isobutylklorformat. Blandingen ble oppvarmet til 0°C i løpet av 15 minutter og så tilsatt 13,32 g metyl D-methionyl-glycinat hydroklorid oppløst i 50 ml dimetylformamid og deretter 5,2 ml N-metylmorpholin. Reaksjonsblandingen ble rørt i en halv time ved 0°, og etter lagring over natten ved 5°C ble 3 ml N,N-dimetyletylendiamin tilsatt og blandingen rørt i 15 minutter ved rom-temperatur. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum ved 35° og 1 mm trykk, hvoretter det oljeaktige residuumet ble oppløst i en blanding av 100 ml vann og 700 ml etyl acetat. Etyl acetat laget ble utskilt og vasket tre ganger med 80 ml av en 0,5 mol oppløsning av kalium bisulfat, to ganger med 80 ml vann, to ganger med 80. ml av en 0,5 mol oppløsning av kalium karbonat, tre ganger med 100 ml av en 10% oppløsning av nåtriumsulfat og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum. Residuumet ble oppløst i 1,2 ml av en 5% etyl acetat i kloroform og renset ved lavtrykks kromatografi på en silicium dioksyd gel og så redusert til tørrhet under redusert trykk, og deretter omkrystallisert fra etyl acetat til metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycinat som er representert ved følgende formel

Eksempel 17

6,02 g metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycinat ble oppløst i 30 ml metyl alkohol og vann ble så tilsatt inntil oppløsningen ble uklar. En 4 mol oppløsning av kalium hydroksyd ble tilsatt for å holde pH mellom 12 og 13. Når

pH var blitt stabil ved 13 i en halv time, ble metanolen fjernet under redusert trykk. Den vanndige oppløsning ble filtrert og justert til pH 3 med konsentrert saltsyre. Produktet utkrystalliserte seg og, ble fjernet ved filtrering og vasket med vann, hvorved man fikk Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycine som er representert ved følgende formel

Eksempel 18

5,06 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycine ble oppløst i 40 ml dimetylformamid og tilsatt 1,28 ml N-metyl-morpholin. Blandingen ble avkjølt til -50°C og tilsatt 1,51 ml isobutylklorformat hvorved man fikk et bunnfall. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til -20°C i løpet av 15 minutter, hvoretter man tilsatte 4,45 g metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid fulgt av 1,25 ml N-metyl-morpholin. Den dannede gummien oppløser seg i løpet av ca.

45 minutter ved oppvarming til rom-temperatur. Blandingen ble hensatt i en og fen halv time ved nevnte temperatur og så lagret ved 5°C i tre døgn. Den ble så oppvarmet til rom-temperatur, tilsatt 1,0 ml N,N-dimetyl-etylendiamid og så

rørt i 10 minutter. Dimetylformamidet ble- fjernet under redusert trykk ved 32°C, og residuumet ble oppløst i en blanding av 70 ml vann og 1.00 ml etylacetat. Det vanndige lag ble utskilt og ekstrahert en gang med etylacetat, hvoretter de samlede etyl acetat oppløsninger ble vasket tre ganger med 70 ml 0,5 mol oppløsning av kalium bisulfat, en gang med 70 ml vann,

to ganger med 0,5 mol oppløsning av kalium karbonat og så'tre ganger med 70 ml av en 10% natrium sulfat oppløsning, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, hvorved man fikk det urene produktet som så ble renset ved lavtrykks kromatografi på silicium dioksyd gel til metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat som er representert ved følgende formel

Eksempel 19

En oppløsning av 1,1 g metyl Boc-L-tyrosol-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantan-karboksylat i 10 ml metanol ble tilsatt 10 ml vann. pH ble justert til 13,0 med en 4 mol oppløsning av kalium- hydroksyd og holdt på mellom 13 og 13,5 i to og en halv time. pH ble så justert til 11,0 med 12-normal saltsyre, og metanolen ble fjernet under våkum. Den gjenværende vanndige oppløsning ble justert til pH 2,0 ved langsom tilsetning av saltsyre, og man fikk utkrystallisert produktet. Dette ble frafiltrert og vasket med vann og tørket to timer ved 50° og 0,1 mm trykk. Residuumet ble så oppløst i en 6-normal".oppløsning av ammoniakk. Overskuddet av ammoniakk ble fjernet under våkum, og den gjenværende vanndige oppløsningen justert til pH 4,0 med 1-normal eddik syre. Produktet utkrystalliserer seg og blir frafiltrert, vasket med vann, og tørk et i 16 timer ved 50°C og 0,1 mm trykk, hvorved man fikk Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksyl syre-, som er representert ved følgende formel En oppløsning av 0,94 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adåmantankarboksyl syre i 20 ml dioksan'ble tilsatt 10 ml av 5>7_normal oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i en halv time ved romtemperatur. Oppløsningsmiddel-et ble fjernet under våkum, og residuumet oppløst i vann. Den uklare oppløsning ble rørt med en liten mengde supercel-hyflo i 30 minutter, så filtrert og ly ophilisert til hvitt pulver. Dette pulveret ble tørket i 2 timer ved 50° og 0,1 mm trykk, hvorved man fikk L-tyrosyl-D-methionyl-gly'cyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylsyre hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 20

En oppløsning av 0,266 g ammoniakk i 0,007 g dimetylformamid ble fremstilt og lagret'i en tett lukket be-holder inntil den skulle brukes. En oppløsning av 1,434 g Boe-L-tyrosy1-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylsyre i 10 ml dimetylformamid ble fremstilt og tilsatt 0,200 ml N-metylmorpholin. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -60°C og tilsatt 0,237 ml isobutylklorformat. Blandingen ble rørt og oppvarmet til -10°C i løpet av 20 min., så tilsatt to suksessive 1,04 g porsjoner av en ammoniakkopp-løsning i dimetylformamid, hvoretter blandingen ble lagret i 2,5 time ved 0°C. Ytterligere 1,04 g ammoniakkoppløsning ble tilsatt, og blandingen lagret 1 time ved 0°C. Dimetylformamidet ble fjernet ved destillasjon ved 35°C, og residuumet ble oppløst i vann og etyl acetat. Etyl -acetat delen ble utskilt og vasket to ganger med en 0,5 mol oppløsning av kalium karbonat, deretter to ganger med vann, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet ved destillasjon, og residuumet ble tørket under redusert trykk, hvoretter man fikk Boc-L-tyrosol-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksamid som er representert ved følgende formel En oppløsning av 1,0 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantan-karboksamid i 5,0 ml iseddik ble tilsatt 5,0 ml av en 6-normal oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble rørt i 20 min. ved romtemperatur. Oppløsningsmiddelet'ble så fjernet under redusert trykk, og residuumet oppløst .i 125 ml vann. Oppløs-ningen ble lyophilisert til L-tyrosyl-D-methionyl-g^lycyl-L-i-'" 1 fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksamid hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 21

En oppløsning av.l4,05 g Boc-L-tyrosin og 5,55 ml N-metylmorpholin i 150 ml tetrahydrofuran som var tørket over en 5 ong^trøms silie ble rørt under^nitrogen og avkjølt til -50°C. Den avkjølte oppløsning ble tilsatt 6,5 ml iso-butylklorformat. I løpet av en halv time ble oppløsningen opp varmet til -10°C og så igjen avkjølt til -40°C og tilsatt 6,65 g L-threonin metyl ester. Blandingen ble oppvarmet til romtemperatur over natten. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum og residuumet delt mellom 100 ml etyl acetat og suksessive 20 ml porsjoner av kald 0,5 mol kalium bisulfat, mettet natrium bikarbonat og mettet natrium klorid oppløsning, og så tørket over natrium sulfat. Oppløsningen ble filtrert, og oppløsningsmiddelet fjernet hvorved man fikk Boc-L-tyrosyl-L-threonin metyl ester.

Eksempel 22

19,6 g Boc-L-tyrosyl-L-threonin metyl ester ble oppløst i 75 ml av en 2 mol kalium hydroksyd oppløsning ved romtemperatur. Etter en halv time ble den vanndige oppløsning-en ekstrahert med 20 ml etyl acetat, surgjordt med kald 1 mol kalium bisulfat og ekstrahert med fire 25 ml porsjoner av etyl acetat. De samlede ekstrakter ble vasket med mettet natrium klorid oppløsning, tørket over natrium sulfat og filtrert. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og man fikk Boc-L-tyrosyl-L-threonine.

Eksempel 23

A. Et umettet azlakton mellomprodukt ble fremstilt ved å røre 3,82 g Boc-L-tyrosyl-L-threonin med 0,82 g vannfritt natrium acetat og 5,67 ml iseddik under nitrogen atmosfære ved romtemperatur over natten. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk ved 4 0°C, og residuumet ble så behandlet med hexan. Hexanen ble avhelt, og residuumet ble tørket under redusert trykk over kalium hydroksyd pellets. Residuumet ble suspendert i 20 ml kloroform og tørket ved å tilsette molekylære siler med en diameter på 5 ongstrøm. Oppløsningen ble filtrert og satt sammen med en oppløsning

av 5 g metyl glycinat i--100 ml kloroform. Volumet ble konsentrert til ca. 50 ml under redusert trykk, og reaksjonsblandingen ble hensatt over natten ved rom-temperatur. Den ble så fortynnet med 5 0 ml kloroform og vasket med 2 0 ml porsjoner av kald 1 mol kalium bisulfat oppløsning, 2 mol kalium karbonat oppløsning og mettet natrium klorid oppløsning. Det ble

så tørket over natrium og mettet natrium klorid oppløsning. Det ble så tørket over natrium sulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk, hvorved man fikk den forønskede umettede tripeptide esteren som en blanding av metyl Boc-tyrosyl-dehydro-ct-aminobutyryl-glycinat og methyl Boc-O-acetyltyrosyl-dehydro-a-aminobutyryl glycinate. Dette tripeptide esteret kan renses ved kromatografi på silicium dioksyd gel, hvorved man får metyl Boc-O-acetyltyrosyl-dehydro-a-aminobutyryl-glycinat glycine metyl ester som er representert ved følgende formel

B. Under en nitrogen atmosfære ble tripeptid-esteren fra avsnitt A ovenfor oppløst i 30 ml 1 normal kalium hydroksydoppløsning og holdt ved romtemperatur to timer. Etter surgjøring med 3,0 ml is eddik ble blandingen ekstrahert med en 20 ml porsjon av kloroform og fire 25 ml porsjoner av etyl acetat. De samlede organiske lag ble vasket med 20 ml mettet natrium klorid oppløsning, tørket over natrium sulfat, filtrert, og konsentrert under redusert trykk, hvorved man fikk den umettede tripeptid syren, Boc-L-tyrosyl-dehydro-a-aminobutyryl-glycine som er representert ved følgende formel

Eksempel 24

Under en nitrogen atmosfære ble 6,5 ml isobutyl-klorformat tilsatt 100 ml av en rørt metylen klorid oppløsning inneholdene 2 g av en 5 ongstrøms siler, 13,26 g Boc-fenylalanin, og 5,5 ml N-metylmorpholin ved -50°C. I løpet av en halv time ble reaksjonsblandingen oppvarmet til -10°C og så igjen avkjølt til -4o°C, hvoretter man tilsatte 7,94 g 1-aminoadamantan. Kjølebadet ble fjernet, og blandingen ble rørt over natten ved rom-temperatur. Oppløsningen ble så filtrert og vasket med 50 ml kald 1 mol kalium bisulfat oppløsning, fulgt av vasking med 20 ml porsjoner av en 2 mol kalium karbonat opp-løsning og mettet natrium klorid oppløsning. Oppløsningen ble så tørket over natrium sulfat, filtrert og konsentrert til tørrhet, hvorved man fikk Boc-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan som er representert ved følgende formel"

Eksempel 25

Under en nitrogen atmosfære ble en oppløsning av 9,5 g Boc-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan i 25 ml kald og tørr diklormetan fortynnet med 25 ml trifluoreddiksyre. Reak-sj onsblaningen ble hensatt i 45 minutter og oppløsningen ble så konsentrert og tilsatt to ml metylénklorid. Den ble så vasket med 25 ml porsjoner av iskaldt vann, 2 mol kalium karbonat oppløsning og en mettet natrium klorid oppløsning og så tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuumet ble behandlet med etyl eter og det faste stoff isolert og tørket over kalium hydroksyd under redusert trykk, hvorved man fikk L-fenylalanyl-l-aminoadamantan som er representert ved følgende formel

Eksempel 26

En tørket oppløsning av 4,21 g Boc-L-tyrosyl-dehydro-a-aminobutylryl-glycine og 1.11 ml N-metylmorpholin i 20 ml tetrahydrofuran ble rørt under nitrogen og avkjølt til -50°C. Oppløsningen ble tilsatt 1,30 ml isobutylkior--format, og i løpet av en halv time oppvarmet til -10°C og så avkjølt til -40°C, og deretter tilsatt 3,13 g tørr L-fenylalanyl-l-aminoadamantan. Kjølebadet ble fjernet, og blandingen rørt over natten .ved rom-temperatur og så filtrert og vasket med tetrahydrofuran. De samlede filtrater ble fordampet under redusert trykk, og residuumet ble opplast i 50 ml metylen klorid og vasket suksessivt med 20 ml porsjoner av mettet natrium bikarbonat, kald 1 mol kalium bisulfat og mettet natrium klorid oppløsning, og så tørket over natrium sulfat. Den tørre opp-løsning ble så filtrert og konsentrert under våkum og renset ved kromatografi på silicium dioksyd gel i en kloroform-metanol gradient, og man fikk Boc-L-tyrosyl-dehydro-a-aminobutyryl-glycyl-L-fenylalanyl-l-amino-adamantan. Under en nitrogen atmosfære ble en oppløsning av 3,51 g av dette produkt i 10 ml is eddik fortynnet med 10 ml av en 5 mol oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 1 time-hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble lyophilisert til L-tyrosyl-dehydro-cx-amino-butyryl-glycyl-L-fenylalanyl-1-aminoadamantan hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 27

En kald og tørr oppløsning av 26,3 g Boc-methionine i 20 ml metylen klorid under nitrogen ble dråpevis under røring tilsatt 16,4 g metyl trifluormetansulfonat. Opp-løsningen ble filtrert og tilsatt 200 ml av en kraftig rørt dietyl eter. Det faste stoff ble frafiltrert, resuspendert i dietyl eter og og igjen frafiltrert og så tørket over kalium hydroksyd under redusert trykk, hvorved man fikk sulfonium saltet Boc-S-metylmethionine trifluormetansulfonat. Ved å bruke spesielt tørket utstyr ble en tørr oppløsning av 17 g av overnevnte sulfonium salt og 14,34 g tørket kalsium karbonat i 40 ml dimetylformamid, som var tørket over molekylære siler, oppvarmet til 60-70°C under en nitrogen atmosfære i 4 timer. Mesteparten av dimetylformamidet ble så fjernet under redusert trykk. Residuumet ble surgjordt med 50 ml 2-normal eddik syre, og oppløsningen ekstrahert med 50 ml porsjoner av etyl acetat. De samlede etyl acetat lag ble vasket suksessivt med 20 ml porsjoner av kald 1 mol kalium bisulfat oppløsning, mettet natrium bikarbonat oppløsning og mettet natrium klorid oppløsning, og så tørket over natrium sulfat. Oppløsnings-middelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet renset ved kromatografi på silicium dioksyd gel. Produktet, metyl Boc-l-aminocyclopropan-l-karboksylat ble fremstilt fra 50% hexan- kloroform fraksjoner som et krystallinsk stoff som smelter ved ca. 80°C og som er angitt ved følgende formel

Eksempel 28

En oppløsning av 3591 g metyl Boc-l-aminocyclopropan-l-karboksylat i 15 ml metylen klorid ble tørket over molekylære siler og filtrert. 10 ml trifluor eddiksyre ble tilsatt, og reaksjonsblandingen hensatt i 20 minutter. Opp-løsningen ble konsentrert under redusert trykk, så fortynnet med etyl eter, hvorved man fikk metyl-l-aminocyclopropan-1-karboksylat trifluoracetat. Under en nitrogen atmosfære ble en blanding av 2,29 g av dette trifluoracetat saltet, 10^9g N-t-butoksykarbonyl-tyrosine pentaklorfenyl ester og 1,11 ml N-metylmorpholin i.15 ml dimetylformamid blir rørt ved rom-temperatur i 3 døgn. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk, og deretter tilsatt 100 ml metylen klorid og 0,74 g. dimetyl-aminoetylamin. Etter 5 minutter ble oppløsningen ekstrahert med 2 20 ml porsjoner kald 2 mol kalium bisulfat opp-løsning. Metylen klorid oppløsningen ble tørket over natriumsulfat, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, noe som ga metyl Boc-L-tyrosyl-l-aminocyclopropan-l-karboksylat. Under en nitrogen atmosfære ble 3,5 g av denne esteren utrørt med 10 ml av en 3 mol kalium hydroksyd-oppløsning i 2 timer ved romtemperatur. Oppløsningen ble ekstrahert med 10 ml etyl acetat, og det vanndige lag tilsatt 15 ml av en kald, kraftig rørt 2 mol kalium bisulfat oppløsning. Den dannet seg et fint bunnfall som ble frafiltrert, vasket med vann og tørket til Boc-L-tyrosyl-l-aminocyclopropan-1-karboksylsyre som er representert ved følgende formel

Eksempel 29

En oppløsning av 1,42 g Boc-glycine og 0,90 ml N-methylmorpholin i 10 ml tørr metylenklorid under nitrogen ble hensatt for rekasjon med 1,05 ml isobutylklorformat ved -45°C. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til -20°C og så igjen avkjølt til -40°C. Den ble så tilsatt 2,38 g L-fenylalanyl-l-aminoadamantan. Kjølebadet ble fjernet, og blandingen oppvarmet til romtemperatur over natten. Blandingen ble så filtrert, fortynnet med 20 ml metylenklorid og vasket med 10 ml av en kald l--mol kalium bisulfat oppløsning fulgt av vasking med 10 ml kald 2 mol kalium karbonat oppløsning og 10 ml av en mettet natrium klorid oppløsning. Reaksjonsblandingen ble tørket over natrium sulfat, filtrert og konsentrert. Produktet skilte seg ut som krystaller ved tilsetning av eter.

Det krystallinske materialet ble oppsamlet og ga Boc-glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan. En t.ørr oppløsning av 2,8 g

Boc-glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan i 15 ml metylen klorid under nitrogen ved 5°C ble tilsatt 10 ml trifluor eddiksyre. Reaksjonsblandingen ble hensatt i en halv time ved rom-temperatur, og så konsentrert under redusert trykk og fortynnet med 10 ml 5 mol kalium karbonat oppløsning og ekstrahert med metylen klorid. Reaksjonsblandingen ble tørket over natriumsulfat, filtrert og fordampet til tørrhet under redusert trykk, hvorved man fikk glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan som er representert ved følgende formel

Eksempel 50

Under en tørr nitrogen atmosfære ble en rørt suspensjon av tørr natrium Boc-L-tyrosyl-l-amino-cyclopropan-1-karboksylat (fremstilt av 1,82 g Boc-L-tyrosyl-l-aminocyclopropan-l-karboksylsyre) i 20 ml dimetylformamid ved -70°C reagert med 0,65 ml isobutylklorformat. I løpet av en halv time bla reaksjonsblandingen oppvarmet til -10°C og så igjen avkjølt til -40°C. Den ble så tilsatt 1,78 g glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan. Kjølebadet ble fjernet, og reaksjonsblandingen rørt ved romtemperatur over natten og så konsentrert under redusert trykk. Residuumet ble delt mellom 20 ml 2 mol kalium karbonat og 50 ml etyl aceatat. Det organiske lag ble vasket med 10 ml kald 1 mol kalium bisulfat opp-løsning og 10 ml av en mettet natrium klorid oppløsning og så tørket over natrium sulfat, filtrert og tørket til tørrhet under redusert trykk. Residuumet ble renset ved kromatografi på silicium dioksyd gel, og ga Boc-L-tyrosyl-l-aminocyclopropan-l-karboksyl-glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan. En opp-løsning av 2,80 g av dette produkt i 5 ml is eddik ble fortynnet med 15 ml av en 5-normal oppløsning av hydrogen klorid i eddiksyre. Reaksjonsblandingen ble hensatt 1 time ved rom-temperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i 20 ml 10% vanndig eddik syre oppløsning og lyophilisert til hydroklorid saltet, L-.t.yrosyl^l-.aminocyclo-propan-l-karbok syl-gly cyl-L-f enylalanyl-l-aminoadamantan hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 31

En oppløsning av 1,88 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycine og 0,45 ml N-metylmorpholin i 25 ml tørr tetrahydrofuran ble under nitrogen avkjølt til -45°C under røring. Oppløsningen ble så tilsatt 0,52 ml isobutyl-klorformat. Den ble så oppvarmet til -20°C i løpet av 10 minutter og så av-kjølt til -35°C. Etter tilsetning av 1,9 g L-fenylalanyl-1-aminoadamantan ble oppløsningen oppvarmet til rom-temperatur og hensatt over natten. Den ble så filtrert, og tetra-hydrof uranen fjernet under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i metylenklorid og vasket med en kald 1 mol kalium bisulfat oppløsning og en mettet natrium klorid oppløsning. Fjerning av oppløsningsmiddelet og rensing ved kromatografi på silicium dioksyd gel gir Boc-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-fenylalanyl-l-aminoadamantan som er representert ved følgende formel

Eksempel 52

En oppløsning av 1,58 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan i 10 ml dioksan ble reagert med 30 ml 5-normal oppløsning av.saltsyre i dioksan i 1 time. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under en strøm av nitrogen. Residuumet ble så behandlet med dietyleter, og fjerning av. denne eteren gir L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenyl-alanyl-l-aminoadamantan hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 33

En anvendelse av en ekvivalent mengde av 2-aminoadamantan i stedet for 1-aminoadamantan i eksempel 24, og anvendelse av samme fremgangsmåte som er beskrevet i eksemplene 24 og 25, gir L-fenylalanyl-2-amino-adamantan. Ved å anvende en ekvivalent mengde L-fenylålanyl-l-aminoadamantan i stedet for L-fenylalanyl-l-aminoadamantan i eksempel 31 og gjenta den fremgangsmåte som er beskrevet i eksemplene 31 og 32, gir L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-aminoadamantan hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 54

En oppløsning av 15,0 ml dioksan og 15,6 ml

4 mol natrium hydroksyd oppløsning ble fremstilt, hvoretter man tilsatte 6,18 g Dl-2,6-dimetyltyrosine hydroklorid og deretter 9,23 g 2-(t-butoksykarbonyl-oksyimino)-2-fenylaceto^. nitril. Blandingen ble rørt i 24 timer ved romtemperatur og så fortynnet med 100 ml vann. Blandingen ble så ekstrahert to ganger med 50 ml etyl acetat. Det vanndige ekstrakt ble justert til pH 2 med en 5% oppløsning av kalium bisulfat og man fikk et oljeaktig fast stoff. Dette ble frafiltrert, vasket med vann og tørket under redusert trykk. Råproduktet ble oppløst i kloroform: vann: eddik syre: metanol (97-8: 0,1: 01: 2,0) og renset ved lavtrykks kromatografiv hvorved man fikk Boc-DL-2,6-dimetyltyrosine.

Eksempel 55

En oppløsning av 5,34 g Boc-DL-2,6-dimetyltyrosine og 2,0 ml N-metylmorpholine ble avkjølt til -20°C. Temperaturen ble holdt mellom -17°C og -20°C samtidig som man dråpevis tilsatte 2,4 ml isobutylklorformat. Reaksjonsblandingen ble rørt i 5 minutter, og så tilsatt en oppløsning av 2,1 ml N-metylmorpholin og 3,63 g metyl D-methlonat hydroklorid i 10 ml dimetylformamid mens temperaturen ble holdt på -20°C. Det ble så rørt i en halv time ved denne temperatur og så hensatt for oppvarming til rom-temperatur over natten.

Det ble så'tilsatt 600 ml av en kald 5% oppløsning av kalium bisulfat. Det gummiaktige bunnfallet ble frafiltrert, vasket 4 ganger med 100 ml kaldt vann og tørket under redusert trykk. Rensing ved lavtrykks kromatografi på silicium dioksyd gel i

det man brukte kloroform: metanol: eddik syre: vann (98: 1,8: 0,1: 01) som elueringsmiddel, gir metyl Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionate.

Eksempel 36

En oppløsning av 4,27 g metyl Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionate i 14 ml metanol"ble tilsatt en opp-løsning av 1,18 g lithium hydroksyd hydrat i 14 ml vann. Blandingen ble rørt i 3 timer i kulde og deretter tilsatt

100 ml av en 5% oppløsning av kalium bisulfat for.å få pH til 2,5. Det gummiaktige produkt ble ekstrahert med etyl acetat. Etyl acetat lagene ble oppsamlet og slått sammen og så vas-

ket med vann og tørket over magnesium sulfat. Oppløsningen ble filtrert for å fjerne magnesium sulfatet, hvoretter opp-løsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, noe som ga Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionine.

Eksempel 57

En oppløsning av 1,0 g metyl L-fenylalanyl-5-amino-l-adamantankarboksylat og 1,05 g 2,4,5-triklorfenyl Boc-glycinat i 5 ml dimetylformamid ble tilsatt 0,5 ml N-me tylmorpholin. Blandingen ble rørt i 3,5 time og så hensatt over natten ved rom-temperatur. Den ble så. tilsatt 75 ml av en kald 5% vanndig oppløsning av kalium bisulfat. Det gummiaktige bunnfall ble ekstrahert tre ganger med 25 ml etyl acetat. De samlede etyl acetat ekstrakter ble vasket med vann, tørket over magnesium sulfat og filtrert. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og ga et glassaktig skum. Dette råproduktet ble oppløst i kloroform og renset ved lav-trykkskromatografi på silicium dioksyd gel i det man brukte etyl acetat/kloroform som elueringsmiddel. Fjerning av opp-løsningsmiddelet gir et hvitt krystallinsk produkt som er metyl Boc-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat.

Eksempel 38

1,21 g metyl Boc-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-1-adamantankarboksylat ble oppløst i 8 ml eddik syre, hvoretter man tilsatte 4,0 ml av en 6,0 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 15 minutter ved rom-temperatur hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Tilsetning av dietyleter til residuumet gir et hvitt bunnfall som ble frafiltrert, vasket med dietyleter og tørket under redusert trykk ved.60°C i 2,5 time, noe som ga metyl glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid.

Eksempel 59

Ved å anvende ekvivalente mengder av Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionine og metyl glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i stedet for Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosine og metyl D-methionate hydroklorid henholdsvis i eksempel 35 og i alt vesentlig gjenta den fremgangsmåte som der er beskrevet, gir metyl Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. Når denne forbindelsen blir anvendt i stedet for metyl Boc-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat i eksempel 38, og anvender samme fremgangsmåte, får man-fremstilt metyl 2,6-dimetyl-DL-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er re presentert ved følgende formel

Eksempel 40

Ved å anvende Boc-B,B-dimetyl-DL-tyrosine i stedet for Boc-2,6-dimetyl-DL-tyrosine i eksempel 34, og

•bruke de fremgangsmåter som er beskrevet i eksemplene 34, 35, 36, 37 og 39 gir to diastereoisomerer som kan skilles ved lav-trykkskromatografi på silicium dioksyd gel i det man eluerer med en gradient av kloroform: Skelly B: metanol (85:5:0,5) til metanol: kloroform (5:95), gir metyl Boe-$,B-dimetyl-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat (isomer I), Rf=0,48 i 5% metanol-95% kloroform, og metyl Boe-3,B-dimetyltyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat (isomer II), R^=0,37i 5% metanol-95% kloroform. Disse isomeriske produkter ble avblokkert ved hjelp av den fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 38. Forbindelsene ble oppløst i eddik syre og så reagert med en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan i 15 minutter ved rom-temperatur. Oppløsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk, og dietyleter ble tilsatt. Det resulterende bunnfall ble frafiltrert, vasket med dietyleter og tørket under redusert trykk, hvorved man fikk metyl B,B-dimetyltyr-osy1-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid (isomer I) [ot]^ -l4°C (cl,eddik syre) og metyl B,B-dimetyltyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid (isomer II) [a] 2^5 +19,5°C (cl, eddik syre) som er representert ved følgende formel

Eksempel 4l

18,9 g Boc-D-alanin ble oppløst i 100 ml metylenklorid, og 22, 0 ml N-metylmorpholin ble tilsatt. Oppløs-ningen ble avkjølt til -70°C og 13,0 ml isobutylklorformat ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til -15°C og igjen avkjølt til -70°C, og så tilsatt 12,6 g metyl glycinat hydroklorid. Reaksjonsblandingen ble rørt i 16 timer ved rom-temperatur og så ekstrahert tre ganger med 1,0 mol oppløsning av kalium bisulfat, mettet kalim bikarbonat oppløsning og mettet natrium klorid oppløsning. Metylen klorid oppløsningen ble tørket over vannfritt natrium sulfat, filtrert og renset for oppløsningsmiddel. Produktet ble renset ved kromatografi på silicium dioksyd gel i det man brukte metanol-kloroform som elueringsmiddel. Fjerning av oppløsningsmiddelet ga metyl Boc-D-alanylglycinat.

Eksempel 42

26,0 g metyl Boc-D-alanylglycinat ble oppløst i 340 ml eddik syre, hvoretter man tilsatte 170 ml av en 6-normal oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 10 minutter, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum. Residuumet ble så behandlet med dietyl eter. Det resulterende hvite bunnfall ble frafiltrert og vasket med dietyl eter, hvorved man fikk metyl-D-alanyl-glycinat hydroklorid.

Eksempel 43

Hvis Boc-L-tyrosine og metyl-D-alanylglycinat hydroklorid anvendes i stedet for Boc-D-alanine og metyl gly cinat hydroklorid henholdsvis i eksempel 41 og man bruker samme fremgangsmåte, så får man fremstilt metyl Boc-L-tyrosyl-D-alanyl-glycinat.

Eksempel 44

42,3 g metyl Boc-L-tyrosyl-D-alanyl-glycinat

ble oppløst i 200 ml metanol og så tilsatt 200 ml av en 1-normal oppløsning av natriumhydroksyd. Raksjonsblandingen ble hensatt i 30 minutter, så justert til pH 3 med en 1 mol oppløsning av kalium bisulfat. Det resulterende bunnfall ble frafiltrert, vasket med vann og tørket, hvorved man fikk B'oc-L-tyrosyl-D-alanylglycine.

Eksempel 45

Ved å bruke Boc-L-tyrosyl-D-alanylglycine og metyl L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i stedet for Boc-D-alanin og metyi glycinat i hydroklorid henholdsvis i eksempel 4l, og i alt vesentlig bruke samme fremgangsmåte, så får man fremstilt metyl Boc-L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat.

Eksempel 46

Ved å bruke metyl Boc-L-tyrosyl-D-alanylglycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat i stedet for metyl Boc-D-alanylglycinat i eksempel 42 og i alt vesentlig bruke samme fremgangsmåte,- så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 47

En oppløsning av 100 ml 2-hydroksyadamantan ble oppløst i 250 ml pyridin og ble så dråpevis tilsatt 137,9 g trifluoreddiksyre anhydrid, hvoretter reaksjonsblandingen ble rørt over natten. Den ble så helt over is og fortynnet med 1,0 liter vann og så ekstrahert tre ganger med 500 ml dietyleter. Den samlede dietyleteren ble vasket med 5% saltsyre inntil vaskevannet var surt, så vasket 1 gang med 5% natrium bi-karbonatoppløsning og så tørket over magnesiumsulfat. Oppløs-ningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og ga 2-adamantyl trifluoracetat som en olje.

50 g 2-adamahtyl trifluoracetat ble oppløst i 500 ml hexan og fotolysert (254 nm) i.4 døgn. Oppløsnings-middelet ble fjernet under redusert trykk, og det oljeaktige residuum ble plasert på en lavtrykks kolonne og eluert med dikloretan. Utgangsmaterialet er første hoverkomponent. Den andre hovedkomponenten er produktet, 1-trifluoracetyl-2-hydroksyadamantan som blir utkrystallisert fra pentane. 100 ml av en 10% natrium hydroksyd oppløsning ble tilsatt 13,0 g

-trifluoracetyl-2-hydroksyadamantan. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet i 15 minutter på et dampbad og så fortynnet med 200 ml vann og vasket to ganger med 150 ml dietyl eter. Den vanndige oppløsning ble surgjordt med konsentrert, saltsyre. Bunnfallet ble frafiltrert, vasket med vann og tørket i et damp-rom hvorved man fikk 2-hydroksy-l-adamantankarboksylsyre. 6,7 g av dette produktet ble oppløst i 50 ml aceton og tilstrekkelig 8-normal Jones Reagent (kromsyre anhydrid i fortynnet svovelsyre) til at den røde fargen holdt seg i 1 minutt. Isopropyl alkohol ble tilsatt for å ødelegge et eventuelt.overskudd av Jones reagent, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble fortynnet med vann, frafiltrert og vasket med vann og så tøfeket ved hjelp av sug til 2-keto-l-adamantankarboksylsyre. 4,7 g av dette produkt ble oppløst i 75 ml etanol og hydrogenert over platina oksyd i nærvær av ammoniakk gass ved et trykk vå 4,3 kg pr. cm 2 og ved rom-temperatur. Oppløsningsmiddelet ble så fjernet ved redusert trykk. 15 ml vann ble tilsatt residuumet og fjernet under redusert trykk. Dette trinn ble gjentatt med ytterligere 15 ml vann, hvoretter residuumet ble tørket ved 100°C under redusert trykk i 1 time, noe som ga 2-amino-1-adamantankarboksylsyre som er representert ved følgende struktur

Eksempel 48

En rørt oppløsning av 4,4 g 2-amino-l-adamantankarboksylsyre i 100 ml tørr metanol ble véd'"-70°C tilsatt 3,21 ml thionyl klorid. Reaksjonsblandingen ble hensatt ved rom-temperatur over natten. Fjerning av oppløsningsmiddelet under redusert trykk gir metyl-2-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved formelen

Residuumet som inneholdt metyl 2-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid ble oppløst i 150 ml kloroform, filtrert gjennom filter cei, vasket med 10 ml 5 mol kalium karbonat oppløsning, utskilt og så slått sammen med et annet kloroform ekstrakt av den vanndige fasen. Kloroformekstrakt-et ble tørket over natrium sulfat, filtrert gjennom filter cel og konsentrert i våkum. Det sirupslignende residuum ble oppløst i 10 ml tetrahydrofuran og så tørket over molekylære siler i en halv time, før det ble brukt i den blandete an-hydridreaksjonen. En tørr oppløsning (tørket ved hjelp av molekylære siler) av 6,37 g Boc-L-fenylalanine og 2,66 ml N-metylmorpholin ble rørt under en nitrogen atmosfære ved

-60°C. Oppløsningen ble så tilsatt 2,12 ml isobutylklorformat. Oppløsningen ble oppvarmet til"-10°C og så igjen av-kjølt til -40°C i løpet av 10 minutter, hvoretter man tilsatte tetrahydrofuran oppløsningen av metyl 2-amino-l-ada-mantankarboksylatet. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til rom-temperatur og rørt over natten. 150 ml kloroform ble til-

satt, og kloroformoppløsningen vasket to ganger med 10 ml av en 2 mol kalium karbonat oppløsning og 1 gang med 2 0 ml av en 1 mol kalium bisulfat oppløsning. Kloroformlaget ble utskilt, tørket over natrium sulfat og konsentrert under redusert trykk til et oljeaktig residuum. Tynn sjikt kromatografi ved hjelp av 2,5 % metanol-kloroform som elueringsmiddel og NMR (CDCl^, 60 MHz, tetrametylsilan som indre standard) av det oljeaktige residuumet indikerte to diastereo isomeriske forbindelser,

A og B, av metyl Boc-L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat. Isomer A (Rf = 0,4l, -C02Me ved 216 eps) ble oppnådd fra eter som et krystallinsk fast stoff, smeltepunkt 153-158 C. Isomer B (Rf = 0,46, -C02Me ved 212 eps) og ytterligere isomer A ble oppnådd ved kromatografisk separasjon på silicium dioksyd gel ved å bruke, en hexan-kloroform gradient.

A. En oppløsning av 1,862 g metyl Boc-L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat (isomer A) i 10 ml metylen klorid ble tilsatt 5 ml trifluoreddik syre. Etter 15 minutter ved romtemperatur ble reaksjonsblandingen konsentrert til et lite volum, og 5 ml kald kalium karbonat ble tilsatt. Blandingen ble ekstrahert to ganger med 20 ml kloroform. De samlede kloroform ekstrakter ble tørket over natrium sulfat og ga metyl L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat (isomer A) som er krystallinsk fast stoff, smeltepunkt l60-167°C Under en nitrogen atmosfære ved -50°C ble en tørket oppløsning (1 g av molekylære siler på 4 ongstrøm) av en 1,878 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycine og 0,444 ml N-metylmorpholin i 25 ml tetrahydrofuran rørt ved samtidig tilsetning av 0,52 ml isobutylklorformat. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til -10°C i 10 minutter og igjen avkjølt til

-40°C, hvoretter man tilsatte 1,2'4 g metyl"L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat. Reaksjonsblandingen ble rørt over natten ved rom-temperatur. Ved tilsetning av vann fikk man utskilt et fast stoff, og dette ble frafiltrert, vasket og tørket. Residuumet ble så oppløst i metanol, filtrert gjennom filter cel, konsentrert og fortynnet med et likt volum etyl acetat og eter. Det faste stoff ble frafiltrert, vasket med eter og tørket, noe som ga Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat (isomer A). 2,34 g av denne forbindelsen ble oppløst i 10 ml eddik syre, og man tilsatte 20 ml av en 5-normal oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble under en strøm av nitrogen konsentrert i 1\ time og så fortynnet med 150 ml eter. Det faste stoff ble frafiltrert, oppløst i metanol, konsentrert til ca. 10 ml og fortynnet med 40 ml vann, og så hensatt over natten ved rom-temperatur. Oppløsningen ble så-filtrert og lyophilisert og ga metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-1-adamantankarboksylat hydroklorid (isomer A) som er representert ved følgende formel

B. En oppløsning av 1,7 g metyl Boc-L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat (isomer B) i 10 ml metylen klorid ble tilsatt 5 ml trifluor eddiksyre. Etter 15 minutter ble reaksjonsblandingen konsentrert til et lite volum under en strøm av nitrogen, og så fordelt mellom 25 ml metylen klorid og 5 ml av en 5 mol kalium karbonat oppløsning. Metylen klorid laget ble frafiltrert, og den vanndige fasen ekstra^ hert med ytterligere 25 ml metylen klorid. Metylen klorid ekstraktene ble slått sammen, tørket over natrium sulfat og konsentrert til et lite volum og så fortynnet med hexan. Det krystallinske produkt ble frafiltrert, og var metyl L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat (isomer B), smeltepunkt 88-90°C. Det blandete anhydrid fra 1,65 g Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycine ble fremstilt som beskrevet'"under del A ovenfor. Det ble så tilsatt 1,256 g metyl L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantan-karboksylat (isomer B). Reaksjonsblandingen ble hensatt 1 time ved rom-temperatur hvoretter 50 ml metylen klorid ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble filtrert, vasket med 10 ml porsjoner av en 2 mol kalium karbonat oppløsning og en 1 mol kalium bisulfat oppløsning, deretter tørket over na trium sulfat og filtrert. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum og ga et glassaktig produkt som er metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl—2-amino-1-adamantankarboksylat. Dette produkt ble oppløst i 10 ml iseddik, hvoretter man tilsatte 20 ml av en 5-normal oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt, i 45 minutter, og ble så konsentrert under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i vanndig metanol og filtrert gjennom filter cel, så ekstrahert med seks 10 ml"porsjoner av metylen klorid og etyl acetat. Etyl acetat ekstraktene ble slått sammen og oppløsningsmiddelet fjernet ved fordampning. Residuumet ble oppløst i 40 ml vann, filtrert gjennom filter cel og lyophilisert til produktet, metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenyl-alanyl 2-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 49

A. En oppløsning av 0,798 g metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalany1-2-amino-1-adamantan-karboksylat hydroklorid (isomer A) i 10 ml 10% vanndig metanol ble tilsatt 2 ml 30% hydrogen peroksyd oppløsning. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk, og residuumet ble oppløst i vann og lyophilisert til metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-1-adamantankarboksylat sulfoksyd hydroklorid som er representert ved følgende formel B. Ved å anvende en ekvivalent mengde av isomer B av metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid i stedet for isomer A i del A ovenfor, og deretter bruke den fremgangsmåte som der er beskrevet, så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-1-adamantankarboksylat sulfoksyd hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 50

En oppløsning av 13,3 g.O-metyl^homoserine i

370 ml metanol og l80 ml av en 6-normal oppløsning av hydrogen klorid i dioksan ble hensatt ved rom-temperatur i 3 til 4 døgn. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk og residuumet lyophilisert til O-metyl homoserine metyl ester hydroklorid, som er representert ved følgende formel

Ved å bruke en ekvivalent mengde av O-metyl homoserine metyl ester hydroklorid i stedet for metyl"D-methionat hydroklorid fra eksempel 35, og i alt vesentlig bruke den fremgangsmåte som er beskrevet i eksemplene 35 til 39, så får man fremstilt DL-2,6-dimetyltyrosol-DL-O-metylhomoseryl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 51

En oppløsning av 13*7g thionyl klorid i 100 ml metanol ved -20°C ble tilsatt 5 g D-norleucine (Nie) under røring. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 16 timer ved rom-temperatur. Metanolen ble så fjernet under redusert trykk, og residuumet ristet med dietyl eter, noe som gå et krystallinsk produkt, d.v.s. metyl D-norleuciriat hydroklorid som er representert ved følgende formel

En oppløsning av 12,4 g Boc-L-tyrosine i 100 ml dimetylformamid ble avkjølt til -20°C, og omdannet til et blandet anhydrid ved å tilsette 1 ekvivalent N-metyl morpholin og 1 ekvivalent isobutylklorformat. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -30°C og 4,48 ml N-metylmorpholin ble tilsatt og 6,65 g metyl D-norleucinate hydroklorid. Reaksjonsblandingen ble rørt i tre timer ved rom-temperaturv og så hensatt i 16 timer. Dimetylformamidet ble avdestillert under høyvakum ved 40°C, og residuumet ristet med etyl acetat og vann. Etyl acetat fraksjonen ble utskilt og vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning, vann og én 1 mol kalium bikarbonat oppløsning og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmid-delet ble fjernet under redusert trykk, hvoretter produktet ble utkrystallisert fra 50 ml isopropanol og 40 ml vann, noe som ga metyl Boc-L-tyrosyl-D-norleucinate. 4,06 g av dette produktet ble suspendert i 40 ml av en 1 mol kalium hydroksyd oppløsning, og blandingen ble rørt i 1 time ved rorrr-temperatur. Et overskudd av 2 mol kalium bisulfat oppløsning ble tilsatt, og produktet ble tatt opp i etyl acetat. Etyl acetat oppløsningen ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning og vann og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmid-delet ble fjernet under redusert trykk, og man fikk Boc-L-tyrosyl-D-norleucine. En oppløsning av'1,42 g av dette produktet i 15 ml tetrahydrofuran ble avkjølt til -20°C og omdannet til et blandet anhydrid ved å tilsette 1 ekvivalent N-metylmorpholine og 1 ekvivalent iso-butylklorformat. Reaksjonsblandingen ble så tilsatt 1,24 g metyl glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. Reaksjonsblandingen ble rørt i 2 timer ved rom-temperatur og så hensatt i 16 timer ved samme temperatur. Blandingen ble så fortynnet med 200 ml etylacetat, og etyl acetat oppløsningen vasket suksessivt med0,.5nDil kalium bisulfat oppløsning, vann og en 1 mol kalium bikarbonat oppløsning, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsnings-middelet ble fjernet under redusert trykk, og produktet renset ved lavtrykks kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel i det man brukte 100 % kloroform til 5 % metanol-95%kloroform som gradient, hvorved man fikk metyl Boc-L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat.

En oppløsning av 0,896 g metyl Boc-L-tyrosyl-D-norleucyl-glyeyl-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat

i 10 ml metyl acetat ble tilsatt 10 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 1 time ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum. Residuumet ble ekstrahert med etyl acetat, og en fjerning av oppløsningsmiddelet gir metyl L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 52

500 ml metanol ved -20°C ble tilsatt l80 ml thionylklorid fulgt av 91,3 g g-hydroksyfenylalanin (g-OH-Phe). Reaksjonsblandingen ble rørt i 24 timer ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble så ristet med dietyl eter, og en fjerning av oppløsningsmiddelet gir metyl DL-B-hydroksyfenylalaninat hydroklorid som er representert ved følgende formel

23,1 g metyl DL-g-hydroksyfenylalaninat hydroklorid ble finpulverisert og suspendert i 230 ml metylenklorid. Suspensjonen ble tilsatt 19,3 g Boc-glycine og 11,2 ml Fi-me ty lmorp ho lin. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved rom-temperatur, så avkjølt til 0°C og tilsatt en oppløsning av 23,7 g dicyclohexylkarbodiimid i 100 ml metylenklorid i en porsjon. Blandingen ble rørt i 4 timer ved rom-temperatur og så filtrert for å fjerne dicyclohexylurea som danner seg under reaksjonen. Metylen klorid filtratet ble redusert til tørrhet under våkum, og residuumet ristet med etyl acetat og filtrert for å fjerne N-metylmorpholin hydroklorid. Filtratet ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat, vann og en 1 mol kalium bikarbonat oppløsning og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, hvorved man fikk metyl Boc-glycyl-DL-B-hydroksyfenylalaninat. 7,03 g av dette dipeptidet ble oppløst i 40 ml dioksan og tilsatt 20 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan.

Reaksjonsblandingen ble hensatt i 2 timer ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under våkum. Residuumet ble gnidd med dietyleter hvorved man fikk et pulver som er metyl glycyl-DL-B-hydroksyfenylalaninate hydroklorid. 5.17 g av dette dipeptid og 5,23 g av Boc-D-methionine ble oppløst i 20 ml dimetylformamid og oppløsningen ble avkjølt til -10°C. En ekvivalent N-metylmorpholine ble tilsatt fulgt umiddelbart av 4,32 g dicyclohexylcarbodiimid i 20 ml metylen klorid. Reaksjonsblandingen ble rørt i 4 timer ved romtemperatur og så filtrert. Filtratet ble fortynnet med 300 ml etyl acetat, og etyl acetat oppløsningen ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning, vann og en 1 mol kalium bikarbonat oppløsning, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og man fikk et urent glass aktig produkt som ble renset ved lavtrykks-kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel, i det man benyttet en gradient av 50% kloroform-50% Skelly B til 100% kloroform fulgt av en ny gradient på 100% kloroform til 50% metanol-50% kloroform. På denne måten fikk man fremstilt metyl Boc-D-methionyl-glycyl-DL-B-hydroksyfenylalaninat. 5,95 g av denne tripeptid esteren ble oppløst i 50 ml metanol. Oppløsningen ble avkjølt til 10°C og man tilsatte 50 ml 1 mol kalium hydroksyd oppløsning under røring. Reaksjonen var relativt raskt fullstendig. Blandingen ble så tilsatt 3,0 ml eddik syre, og metanolen ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble så ekstrahert med etyl acetat. Etyl acetat oppløsningen ble vasket med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning og vann og så tør-ket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk, hvorved man fikk Boc-D-methionyl-glycyl-DL-B-hydroksyfenylalanin. 4,69 g av dette tripeptidet ble oppløst i 10 ml eddik syre anhydrid, og man tilsatte 0,82 g vannfritt natrium acetat. Reaksjonsblandingen ble rørt i 16 timer ved rom-temperatur, og så tilsatt to 25 ml porsjoner av Skelly B for å fjerne mesteparten av eddik syre anhydridet. Skelly B vaske oppløsningen ble så kastet. Det gummi aktige residuumet ble utrørt med 2 5 ml vann, hvorved man fikk et granulært bunnfall. Dette ble frafiltrert og vasket med stort volum vann, hvorved man fikk azlakton produktet, 2-Boc-D-meth- ionylaminometyl-4-benzylidenoksazolin-5-one som er representert ved følgende formel

3,38 g av dette produktet og 1,67 g metyl J>-amino-l-adamantankarboksylat ble oppløst i 15 ml etyl acetat, og oppløsningen ble oppvarmet til 60°C i to timer. Reaksjons blandingen ble så fortynnet med 150 ml etyl acetat og etyl acetat oppløsningen ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning, vann og 1 mol kalium bikarbonat oppløs-ning og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet ble renset ved lavtrykks kromatografi på Woelm Silicium dioksyd gel, i det man brukte en gradient på 100% kloroform til 5% metanol-95% kloroform som elueringsmiddel, hvorved man fikk metyl Boc-D-methionyl-glyeyl-dehydrofenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. 3,21 g av dette produktet ble oppløst i 30 ml dioksan og tilsatt 30 ml av en 6-normal oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt 1 time ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble ristet med dietyl eter, og en fjerning av oppløsningsmiddelet ga et pulver som er metyl D-methionyl-glycyl-dehydrofenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid. Et blandet anhydrid ble fremstilt ved å tilsette en ekvivalent N-metylmorpholin og en ekvivalent iso-butylklorformat til en oppløsning av Boc-L-tyrosine i 17 ml dimetylformamid ved -20°C.■ Reaksjonsblandingen ble så tilsatt 2,9 g metyl D-methionyl-glycyl-dehydrofenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid og en ekvivalent N-metylmorpholin. Blandingen ble hensatt over natten ved rom-temperatur. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet ekstrahert med etyl acetat. Etyl acetat

oppløsningen ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning, vann og en l^mol kalium bikarbonat oppløsning og så tørket magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet ble renset ved lavtrykks-kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel i det man eluerte med en gradient på 80% kloroform-20% Skelly B til 100% kloroform fulgt av en ny gradient på 100% kloroform til 50%. metanol-50% kloroform, hvorved man fikk fremstilt metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-dehydrofenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. 0,805 g av dette beskyttede peptid ble oppløst i 10 ml metyl acetat og tilsatt 10 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Oppløsningen ble hensatt i en time ved romtemperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble ristet med etyl acetat, hvorved man fikk et pulver som ble frafiltrert, og som var produktet metyl L-tyrosyl-D-methiony.l-glycyl-dehydrofenyl-alanyl-3-amino-l-adamantankarboksylåt hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 53

Boc-N-metyl-L-fenylalanin ble fremstilt ved den fremgangsmåte, som er beskrevet av S.T. Cheung og N.L. Beno-iton, Can. J. Chem. 55:906 (1977), og 3,35 g ble oppløst i 35 ml dimetylformamid og omdannet til et blandet anhydrid ved å tilsette en ekvivalent N-metylmorpholin fulgt av en avkjøl-ing til -20°C, og så dråpevis tilsetning av en ekvivalent isobutylklorformat under røring mens temperaturen ble holdt under -10°C. Reaksjonsblandingen ble tilsatt 2,46 g metyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid fulgt av 1,1-ml N-metylmorpholin. Etter 24 timer ved romtemperatur ble dimetyl formamidet avdestillert under høyvakum. Residuumet ble opp-løst i etyl acetat og oppløsningen vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat, vann og 1 mol kalium bikarbonat, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og råproduktet ble renset ved lavtrykks kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel i det man brukte en gradient på 20% kloroform-80% Skelly B til 100 % kloroform, hvorved man fikk metyl Boc-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. 2,87 g av dette produktet ble oppløst i 25 ml dioksan og tilsatt 25 ml 6 mol oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Oppløsningen ■ ble så hensatt i en time ved rom-temperatur. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet tørket under høyvakum til metyl N-methyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid. Dette produktet (0,006 mol) ble oppløst i 10 ml metylen klorid og tilsatt 0,78 ml N-metylmorpholin.

Reaksjonsblandingen ble tilsatt 1,58 g Boc-glycine. Det ble så avkjølt til -10°C og tilsatt 1,86 g dicyclohexylkarbodiimid i 10 ml metylenklorid. Etter 2 timer ved rom-temperatur ble blandingen filtrert og filtratet fordampet til tørrhet under redusert trykk. Residuumet ble opp-løst i etyl acetat, og etyl acetat oppløsningen vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat, vann og 1 mol kalium bikarbonat, og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsnings-middelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet renset ved lav trykks.kromatografi i det man eluerte med en gradient på 10% kloroform-90% Skelly B til 100% kloroform, hvorved man fikk et glassaktig produkt som er metyl Boc-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantan-karboksylat. 2,5 g av dette produktet ble oppløst i 10 ml dioksan, og så tilsatt 20 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 1 time/ved romtemperatur og så fordampet til tørrhet under redusert trykk, hvorved man fikk metyl glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

1,50 g Boc-D-methionine ble oppløst i 10 ml tetrahydrofuran og omdannet til det blandete anhydrid ved tilsetning av en ekvivalent N-metylmorpholin, deretter av-kjølt til -20°C og tilsatt en ekvivalent isobutylklorformat mens temperaturen ble holdt under -10°C. Nevnte metyl glycyl-N-metyl-L-f enylalanyl- 3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid fremstilt som beskrevet ovenfor, (2,18 g) ble oppløst i 10 ml tetrahydrofuran, nøytralisert ved tilsetning av 0,56 ml N-metylmorpholin, og tilsatt det blandete anhydrid ved

-30°C. Reaksjonsblandingen ble hensatt i 2 timer ved rom-temperatur, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk og residuumet oppløst i etyl acetat. Etyl acetat oppløsningen ble vasket suksessivt med 0,5 mol kalium bisulfat, vann og 1 mol kalium bikarbonat og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og man fikk metyl Boc-D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. Dette produkt ble avblokkert ved å oppløse 3,0 g av det i 20 ml dioksan og tilsette 30 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogenklorid i dioksan. Reaksjonsblandingen ble hensatt i romtemperatur i 1 time, hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, noe som ga metyl D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid. 1.31 g av dette produkt ble oppløst i 30 ml tetrahydrofuran, og deretter tilsatt 0,49 ml N-metylmorpholin fulgt av 2,33 g Boc-L-tyrosine-pentaklorfenyl ester. Reaksjonsblandingen ble hensatt ved rom temperatur og så ekstrahert med etyl acetat. Etyl acetat ekstraktet ble vasket suksessivt med 0,4 mol kalium bi-

sulfat, vann, og 1,0 mol kalium bikarbonat og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet renset med lavtrykks kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel i det man eluerte med en gradient på 100% kloroform til 5% metanol-95% kloroform, noe som ga metyl Boc-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat. 0,5 g av dette N-beskyttede peptid ble oppløst i 5,0 ml dioksan. Oppløsningen ble tilsatt 5,0 ml 6 mol oppløsning av hydrogen klorid i dioksan, og deretter hensatt 1 time ved rom-temperatur. Opp-løsningsmiddelet ble så fjernet under redusert trykk. Residuumet ble ristet med dietyl eter og man fikk et pulver. Fjerning av dietyl eteren ved filtrering gir produktet, metyl L-tyrosy1-D-methionyl-glyeyl-N-methy1-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Når 1,73 g Boc-N-metyl-L-tyrosine hydroksy-succinimin ester ble brukt i stedet for overnevnte Boc-L-tyrosine-pentaklorfenyl ester og man ellers brukte fremgangsmåten som beskrevet ovenfor, så fikk man fremstilt metyl Boc-N-mety1-L-tyrosy1-D-methionyl-glycyl-N-mety1-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid. Dette produkt ble renset ved lavtrykks kromatografi på Woelm silicium dioksyd gel i det man eluerte med en gradient på 60% kloroform-40% hexan til 100% kloroform fulgt av en ny gradient på 100% kloroform til 5% metanol-95%kloroform. 0,55 g av dette produkt ble avblokkert som beskrevet ovenfor, hvorved man fikk metyl N-metyl-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenyl alanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 54

116 g L-fenylalanin ble oppløst i 1000 ml 90% eddiksyre og hydrogenert over 23 g 5% rhodium på karbon ved trykk på 2,85 kg/cm2 og 37°C i 24 timer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og filtratet konsentrert til tørr-het under høyvakum, hvoretter residuumet ble utkrystallisert fra 2 liter 15% eddik syre slik at man fikk L-6-cyclohexylalanin som er representert ved følgende formel

Ved å bruke en ekvivalent mengde L-g-cyclohexylalanin i stedet for L-fenylalanin i eksempel 1, og i alt vesentlig gjenta fremgangsmåten fra eksemplene 1 til 9, så kan man få fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-6-cyclohexylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 55

2-amino-2-adamantankarboksylsyre ble fremstilt som beskrevet av H.T. Nogasawa, et. al., J,Med. Chem., 16: 823 (1973). Når man anvendte en ekvivalent mengde 2-amino-2-adamantankarboksylsyre i stedet for 3-amino-l-adamantankarboksylsyre fra eksempel 1 og brukte de fremgangsmåter som er beskrevet i eksemplene 1 til 9, så fikk man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-2-amino-2-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 56

4,7 g 4-oxo-2-adamantankarboksyl syre (fremstillingen er beskrevet i G. Snatzke, et. al,, Chem. Ber. 100: 1710-1724 (1967)) ble hydrogenert i 75 ml etanol over 0,47 g platina oksyd i nærvær av ammoniakk gass og et trykkpå 4,2 kg/cm 2 ved rom-temperatur. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og 15 ml vann ble tilsatt og igjen fjernet under redusert trykk. Ytterligere 15 ml vann ble tilsatt og fjernet under redusert trykk, hvoretter residuumet ble tørket ved 100°C i en våkum ovn i 1 time, noe som ga 4-aminb-2-adamantankarboksylsyre som er representert ved følgende

Ved å bruke en ekvivalent mengde 4-amino-2-adamantankarboksyl syre i stedet for 3-amino-l-adamantankarboksylsyre fra eksempel 1 og i alt vesentlig bruke de fremgangsmåter som er beskrevet i eksemplene 1 til 9, så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-4-amino-2-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 57

19,4 g 2-oxo-l-adamantankarboksyl syre ble kokt under tilbakeløp med 25 ml thionyl klorid i 1 time. Thionyl kloridet ble så fjernet under redusert trykk, og toluen tilsatt og fjernet under redusert trykk for å fjerne" et eventuelt overskudd av thionyl klorid. Residuumet ble oppløst i dietyl eter?, og ammoniakk gass ble ført over opp-løsningen inntil den eksotermiske reaksjonen stoppet opp. Det faste stoff ble frafiltrert og vasket med dietyl eter, hvorved man fikk 2-oxoadamantan-l-karboksamid, som er representert ved følgende formel

En oppløsning av 19,3 g 2-oxoadamantan-l-karboksamid og 10,9 g natrium metoksyd i 100 ml metanol ved 10°C ble dråpevis tilsatt en oppløsning av 23,97 g brom i 25 ml metanol mens temperaturen ble holdt på 10°C. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til rom-temperatur og rørt over natten og så helt over i vann og delt mellom metylen klorid og vann. Det organiske lag ble utskilt, vasket med vann og tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, hvorved man fikk metyl 2-oxoakamantan-l-karba-mat, og 22,3 g av denne forbindelsen ble oppløst i 100 ml dietyl eter. Denne oppløsningen ble dråpevis tilsatt en blanding av 86,9 g n-butyllithium og 6l,7 g methoksymetyl-trifen-yl phosphonium klorid i 1,0 liter dietyl eter. Reaksjonsblandingen ble rørt over natten, 40,88 g sink klorid ble tilsatt, hvoretter blandingen ble rørt 1 time og så filtrert. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet oppløst i 90% eddik syre. Etter røring i 18 timer ble blandingen helt over i vann og ekstrahert tre ganger med 150 ml porsjoner av dietyl eter. De samlede eter lag ble vasket med mettet natrium bikarbonat inntil nøytral reaksjon og så tørket over magnesium sulfat'. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet oppløst i aceton. Tilstrekkelig Jones reagent ble tilsatt til å holde den rød fargen i 1 minutt, hvoretter isopropyl alkohol ble tilsatt for å ødelegge et overskudd av Jones reagent. Ace-tonen ble fjernet under redusert trykk, og 150 ml vann ble tilsatt. Det faste stoff ble frafiltrert, vasket med vann, oppløst med 100 ml 5% saltsyre og oppvarmet på et dampbad i 30 minutter. pH ble justert til 7 med natrium hydroksyd, og produktet oppsamlet ved filtrering og tørket til l-amino-2-adamantankarboksylsyre som er representert ved følgende formel Ved å bruke en ekvivalent;mengde l-amino-2-adamantan karboksylsyre i stedet for 3-amino-l-adamantankarboksylsyre fra eksempel 1 og i alt vesentlig gjenta de fremgangsmåter som. er beskrevet i eksemplene 1 til 9, så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-l-amino-2-adamantankarboksylåt hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 58

En oppløsning av 1,2 g nitryltetrafluorborat

i 15 ml acetonitril ble avkjølt til 0°C, og man tilsatte en oppløsning av 2,17 g 5_brom-2-oxoadamantån (fremstilling er beskrevet i H.W. Geluk, Synthesis, side 37^ (1972)) i 15 ml acetonitril under rask røring og avkjøling. Reaksjonsblandingen ble rørt i en halv time og så helt over i vann og ekstrahert med dietyl eter. Dietyl eter ekstraktet ble vasket med 5% natrium bikarbonat oppløsning og vann og så tør-ket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, hvorved man fikk N-(2-oxoadamantan-5-yl) acetamid. Ved å bruke en ekvivalent mengde N-(2-oxoadamantan-5-yl)acetamid i stedet for metyl 2-oxoadamant.an-l-karbamat i fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel'57, så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-5-

amino-2-adamantankarboksylat hydroklorid som er representert ved formelen

Eksempel 59

En oppløsning av 5,98 g 3-amino-l-adamantankarboksyl syre i 40 ml tørr tetrahydrofuran ble rørt under nitrogen og tilsatt 6,5 ml bortrifluorid eterat. Under rør-ing tilsatte man 35 ml av en 1 mol oppløsning av boran i tetrahydrofuran slik at man opprettholdt en koking under til-bakeløp. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløp i 4,5 time og så avkjølt og så dråpevis tilsatt 20 ml av en 4-normal oppløsning av natrium hydroksyd. Den øvre fase som inneholder tetrahydrofuranet og borat esteren av produktet ble utskilt. Tetrahydrofuranen ble fjernet under redusert trykk, og residuumet ble oppvarmet med 4 0 ml 4-normal natrium hydroksyd oppløsning i 24 timer ved 100°C. Oppløsning-en ble ekstrahert tre ganger med 200 ml"kloroform. De samlede kloroformekstrakter ble tørket over kalium karbonat, og oppløsningsmiddelet fjernet under redusert trykk. Residuumet ble rørt med dietyl eter, hvorved man fikk et.krystallinsk produkt, d.v.s. 3-amino-l-adamantanmetanol som er representert ved følgende struktur

En oppløsning av 1,83 g Boc-L-fenylalanin i

15 ml dimetylformamid ble tilsatt 0,76 g N-metyl-morpholin. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -40°C, og 0,90 ml iso-butylklorformat ble tilsatt under røring. Reaksjonsblandingen ble rørt i 15 minutter ved temperaturer under -10°C og deretter tilsatt 1,04 g 3-amino-l-adamantan metanol. Reaksjonsblandingen ble rørt i 15 minutter ved -20°C og så lagret over natten ved 5°C. Dimetylformamidet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet oppløst i metylen klorid og vann. Metylen kloridfasen ble utskilt og vasket to ganger med 35 ml vann, tre ganger med 35 ml 0,5 mol kalium bisulfat oppløsning og to ganger med 35 ml vann og så tørket over magnesium sulfat. Oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk, og residuumet renset ved kromatografi på Whatman 10 mikron silicium dioksyd gel i det man eluerte med en gradient på 1:1 hexan-kloroform til kloroform, hvorved man fikk Boc-L-fenylalanyl-3-amino-adamantanmetanol. 2,0 g av dette produkt ble .oppløst i 5 ml av en 6 mol oppløsning av hydrogenklorid i dioksan, og blandingen ble hensatt i 20 minutter ved romtemperatur hvoretter oppløsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Residuumet ble utrørt med dietyl eter og man fikk produktet som et fast stoff. Dette ble frafiltrert og tørket under redusert trykk til L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantanmetanol hydroklorid som er representert ved følgende formel

Ved å bruke en ekvivalent mengde L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantanmetanol hydroklorid i stedet for metyl L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid fra eksempel 4 og bruke de fremgangsmåter som er beskrevet i eksemplene 4 til 9, så får man fremstilt L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-1-adamantanmetanol hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 60

Når man bruker en ekvivalent mengde Boc-D-proline eller Boc-L-proline i stedet for Boc-D-alanin i eksempel 4l og bruker de fremgangsmåter som er beskrevet i eksemplene 4l til 48, så får man fremstilt metyl L-tyrosyl-D-proly1-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat hydroklorid eller metyl L-tyrosyl-L-prolyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat som er representert ved formelene

Eksempel 61

Ved å bruke en ekvivalent mengde 1-(aminometyl)-adamantan i stedet for 1-aminoadamantan i eksempel 24 og bruke den fremgangsmåte som er beskrevet i eksemplene 24 og 25, så får man fremstilt L-fenylalanyl-l-(aminometyl)adamantan. Ved å bruke en ekvivalent mengde L-fenylalanyl-1-(aminometyl)-adamantan i stedet for L-fenylalanyl-l-aminoadamantan i eksempel 31 og i alt vesentlig bruke samme fremgangsmåte som beskrevet i eksemplene 31 og 32, så får man fremstilt L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-1-(aminometyl)adamantan hydroklorid som er representert ved følgende formel

Eksempel 62

Under nitrogen ble en rørt DMP oppløsning

(50 ml) av 17,7 g Boe-in3-TyrOH og 6,66 ml N-metylmorpholin med 5 g 3 ongstrøms molekylære siler ved -70°C behandlet med 7,8 ml isobutylklorformat. Kjølebadet ble fjernet, og opp-løsningen oppvarmet til -20°C og så behandlet med en tørr DMP oppløsning (75 ml) av HCl-H-MetGlyOMe fulgt av 6,66 ml

N.M.M.

Etter røring ved romtemperatur over natten

ble oppløsningen filtrert og fortynnet med etyl acetat (500 ml) og oppløsningen ble så vasket med to 500 ml porsjoner 11 mol K^ COj, 100 ml 1 mol KHSO^og 100 ml mettet natrium klorid opp-løsning. Den tørkede .natrium sulfat oppløsning ble konsentrert i våkum til en viskøs olje, og NMR (CDCl^) var i overensstemmelse med det forønskede produkt, og tynnsjikt kromatografi viste at produktet var i alt vesentlig homogent.

Den overnevnte esteren ble forsåpet ved ut-røring med en oppløsning .av 5,94 g KOH i 250 ml vann og 50 ml metanol. Etter 45 minutter ble metanolen fjernet i våkum, og det vanndige residuum ekstrahert med to 100 ml porsjoner av eter.

Det vanndige lag ble surgjordt med KHSO^til pH

3 og ekstrahert med to ganger 150 ml etyl acetat. Etyl acetatlaget ble vasket med en mettet natrium klorid oppløsning, tørket over natrium sulfat og konsentrert i våkum, hvorved man fikk 25 g av den forønskede tripeptidsyren.

Under nitrogen og ved -70°C tilsatte man en metylen klorid oppløsning på 200 ml av 11,17 g Boc-<CH>3-PheOH og 4,4 ml N.M.M. med 2 g 4 ongstrøms molekylære siler til 5,2 ml (40 mm) 2-BU0C0C1 og oppløsningen ble oppvarmet til

-10°C og behandlet med 6,05 g 1-adamantylamin. Etter røring

ble oppløsningen filtrert og vasket med 1-mol kalium hydrogen sulfat, som det 100 ml kalium karbonat. Den tørkete natrium sulfat oppløsning ble filtrert gjennom et filtersjikt og konsentrert i våkum.

"Ved henstand utkrystalliserte residuumet seg,

og en del av dette ble omkrystallisert fra hexan og hadda da et smeltepunkt fra 97-99°C og viste homogenitet ved tynnsjikt kromatografi og kjernemagnetisk resonans spektrum, og det-siste var i overensstemmelse med det forønskede amid.

En metylenklorid oppløsning på 25 ml av 11,8 g Boc-amidet ble behandlet med tilsvarende volum F^3 CCU3H. Etter 1 time ble oppløsningsmiddelet fjernet i våkum, og residuumet fordelt mellom metylen klorid og en mettet natrium bikarbonat oppløsning. Det organiske lag ble konsentrert i våkum, og residuumet behandlet med hexan, hvorved man fikk den frie basen. Til en metylen klorid oppløsning på 45 ml og ved 0° inneholdene 10,83 g Boc-?<H>3-TyrDMetGlyOH og 7,0 g H-?<H>3-Phe-NH-l-Ad ble tilsatt 4,62 g cyclohexyl-karbodiamid. Reaksjonsblandingen ble holdt på ca. 5°C over natten, og det faste stoff ble frafiltrert og vasket med metylenklorid. Filtratet ble konsentrert i våkum og behandlet med eter. Man fikk utskilt et fast stoff fra etyl acetat som nåler, smeltepunkt 116-120°C. 25 ml eddiksyre inneholdende 6,9 g av det Boc-beskyttede materialet ble behandlet med tilsvarende volum 5-normal HC1 i dioksan. Etter 30 minutter ble oppløsnings-middelet fjernet i våkum ved ca. 4o°C. Produktet ble behandlet med eter og residuumet fordelt mellom 300 ml vann og 100 ml etyl acetat. Det vanndige lag ble ekstrahert med to ytterligere porsjoner etyl"acetat. De samlede etyl acetat lag ble tørket over natrium sulfat og konsentrert i"vakum ved ca. 40°C. Residuumet ble vasket med eter og det rene hydroklorid ble frafiltrert som en fint fast stoff.

Man fikk således fremstilt N-metyl-L-tyrosyl-D-methionyl^gl-ycyl-N-methyl-L-fenylålanyl-l-aminoadamantan hydroklorid.

Claims

1. Kjemisk forbindelse, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine eller en radikal med formelen

hvor R-^ , R2 og R^ uavhengig kan være hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer; X representerer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-a-aminosmørsyre, 1-aminocyclopropan karboksyl syre, alanin, O-metylhomosérine, prolin eller norleucine; Y representerer fenylalanin, dehydrofenylalanin, cyclohexylalanin eller et radikal med formelen

hvor Rjj representerer hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer, og M.representerer hydrogen, nitro eller halogen; Z representerer et radikal med formelen

hvor R^ representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0, 1 eller 2; et radikal med formelen

hvor R,- og n er som definert ovenfor; et radikal med formelen

hvor R^ og n er som definert ovenfor; eller et radikal med formelen

hvor R,- og n er som definert ovenfor; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive aminosyre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av nevnte forbindelser.

2. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine eller et radikal med formelen

hvor R^, R2 og R^ uavhengig av hverandre kan være hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomerj X representerer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-a-amino-smørsyre, . 1-aminocyclopropan karboksylsyre, alanin, O-metylhomoserine, prolin eller norleucine; Y representerer fenylalanin, dehydrofenylalanin, cyclohexylalanin eller et radikal med formelen

hvor R^ representerer hydrogen eller en alkylgruppe med fra 1 til 4 karbonatomer, og M representerer hydrogen, nitro, eller halogen; Z representerer et radikal med formelen

hvor Rp- representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0,'l eller 2; og hvor den- stereo kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuane uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologiske akseptable salter av slike forbindelser.

3. Kjemisk forbindelse i følge krav 2, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine eller et radikal med formelen

hvor R^ , R2 og R-,, uavhengig av hverandre kan være hydrogen, eller en alkylgruppe med fra 1 til 4 karbonatomer; X representerer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-a-aminosmørsyre, 1-aminocyclopropan karboksyl syre, alanin, O-metylhomoserine, proline eller norleucine; Y representerer fenylalanin, dehydrofenylalanin, cyclohexylalanin eller et radikal med formelen

hvor R^ representerer hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer, og M representerer hydrogen, nitro eller halogen; R,_ representerer hydrogen eller methoksykarbonyl; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjon på hver av de optisk aktive aminosyre residuaene--.uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

4. Kjemisk forbindelse i følge krav 2, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine, 2,6-dimetyltyrosine, B,f3-dimetyltyrosine og N-metyltyrosine •, X representerer methionine, methionine sulfoksyd, 1-aminocyclopropan karboksyl syre, alanin, proline, eller norleucine; Y representerer fenylalanin, N-metylfenylalanin eller p-nitro-fenylalanin; R^ representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0 eller 1, og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

5- Kjemisk forbindelse i følge krav 2, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine, 2,6-dimetyltyrosine, 6,6- dimetyltyrosine eller N-metyltyrosine., X representerer methionine, methionine sulfoksyd, 1-aminocyclopropan karboksyl syre, alanine, proline eller norleucine; Y representerer fenylalanine, N-metylfenylalanine eller p-nitrof enylalanine •, R,- representerer hydrogen eller methoksykarbonyl; den stereo-kj emiske konfigurasjon på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

6. Kjemisk forbindelse i følge krav 4, karakterisert ved formelen

hvor R,- representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid,.eller hydroksymetyl og n er 0 eller 1; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen for-hver av de optiske aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D eller L eller DL; samt farmakologiske akseptable salter av slike forbindelser.

7. Kjemisk forbindelse ■ i følge krav 1, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine eller et radikal med formelen

hvor R^ , R2 og R^ uavhengig av hverandre kan være hydrogen eller en alkylgruppe- med fra 1 til 4 karbonatomer, X representer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-a-aminosmørsyre, 1-aminocyclopropan karboksylsyre, alanin, 0-metylhomoserine, proline eller norleucine; Y representerer fenylalanin, dehydrofenylalanin, cyclohexylalanin eller et radikal med formel

hvor Rjj representerer hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer, og M representerer hydrogen, nitro eller halogen; Z representerer et- radikal med formelen

hvor Rp. representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0 eller 1 eller 2; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene^ uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologiske akseptable salter av slike forbindelser.

8. Kjemisk forbindelse i følge krav 7, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine eller et radikal med formelen hvor R^ , og R^ uavhengig av hverandre kan være hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer; X representerer methionine, methionine sulfoksyd, dehydro-a-aminosmørsyre, 1-aminocyclopropan karboksylsyre, alanin, O-metylhomoserine, proline eller norleucine; Y representerer fenylalanin, dehydrofenylalanin, .cyclohexylalanin eller en radikal med formelen

hvor R^ representerer hydrogen eller en alkyl gruppe med fra 1 til 4 karbonatomer og M representerer hydrogen, nitro eller halogen; R^ representerer hydrogen.eller^ methoksykarbonyl; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

9« Kjemisk forbindelse i følge krav 7, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine, 2,6-dimetyltyrosine, 3,3-dimetyltyrosine eller N-metyltyrosine; X representerer methionine, methionine sulfoksyd,. 1-amin-cyclopropan karboksyl syre, alanin,^ proline eller norleucine; Y representerer fenylalanin, N-metylfenylalanin, eller p-nitrofenylalanin; R^ representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl og n er 0 eller 1; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig avhverandre kan være D, L eller DL, samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser.

10. Kjemisk forbindelse i følge krav 7, karakterisert ved formelen

hvor W representerer tyrosine, 2,6-dim etyltyrosine, 3,3-dimetyltyrosine, eller N-metyltyrosine; X representerer methionine, methionine sulfoksyd, 1-aminocyclopropan karboksyl syre, alanin, proline eller horleu-cine; Y representerer fenylalanin^ N-metylfenylalanin, eller p-nitrofenylalanin} R,- representerer hydrogen eller methoksykarbonyl; og hvor den stereo-kjemiske konfigurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologisk akseptable salter av slike forbindelser .

11. Kjemisk forbindelse i følge krav 7, karakterisert ved formelen

hvor R representerer hydrogen, karboksyl, methoksykarbonyl, karboksamid eller hydroksymetyl, og n er 0 eller 1; og hvor den stereo-kjemiske konfigrurasjonen på hver av de optisk aktive amino syre residuaene uavhengig av hverandre kan være D, L eller DL; samt farmakologiske akseptable salter av slike forbindelser.

12. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat sulfoksyd.

13. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være L-tyrosyl-D-methionyl-glycy1-L-fenylalanyl-1-amino-adamantan.

14. Kjemisk forbindelse i følge krav J., . karakterisert ved å være metyl 2,6-dimetyl-DL-tyrosy1-D-methionyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat .

15. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være metyl L-tyrosyl-D-norleucyl-glycyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat.

16. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være metyl L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-3-amino-l-adamantankarboksylat .

17. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være metyl N-metyl-L-tyrosyl- D-methiony1-glyeyl-N-mety1-L-fenylalanyl-3-amino-1-adamantankarboksylat.

18. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved å være N-metyl-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-N-mety1-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan hydroklorid .

19. Kjemisk forbindelse i følge krav 1, karakterisert ved følgende formel

d.v.s. N-metyl-L-tyrosyl-D-methionyl-glycyl-N-metyl-L-fenylalanyl-l-aminoadamantan hydroklorid.