NO336750B1 - Reagens for detektering av en analytt - Google Patents

Reagens for detektering av en analytt

Info

Publication number
NO336750B1
NO336750B1 NO20063256A NO20063256A NO336750B1 NO 336750 B1 NO336750 B1 NO 336750B1 NO 20063256 A NO20063256 A NO 20063256A NO 20063256 A NO20063256 A NO 20063256A NO 336750 B1 NO336750 B1 NO 336750B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
alkyl
alkylene
energy
reagent
analyte
Prior art date
Application number
NO20063256A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20063256L (no
Inventor
Jens Christian Norrild
Bo Wegge Laursen
Original Assignee
Precisense As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Precisense As filed Critical Precisense As
Publication of NO20063256L publication Critical patent/NO20063256L/no
Publication of NO336750B1 publication Critical patent/NO336750B1/no

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/13—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton
    • C07C309/14—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups, bound to the carbon skeleton containing amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
    • C07D207/404—2,5-Pyrrolidine-diones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms, e.g. succinimide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
    • C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
    • C09B11/10—Amino derivatives of triarylmethanes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials
    • G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
    • G01N33/533—Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/542—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with steric inhibition or signal modification, e.g. fluorescent quenching
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measurement Of The Respiration, Hearing Ability, Form, And Blood Characteristics Of Living Organisms (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår et reagens for anvendelse ved detektering av en analytt, en fargestoff orbindelse som er egnet for bruk i et slikt reagens, en fremgangsmåte for detektering eller måling av en anlytt ved bruk av et slikt reagens og et kompleks av en analytt og et slikt reagens.
Fremgangsmåten for detektering eller måling av analytt er basert på FRET (fluorescence resonance energy transfer = fluorescensresonans overføringsenergi).
FRET er en avstandsavhengig interaksjon mellom de elektronisk eksiterte tilstander av to fargetyper hvori eksiteringsenergjen overføres fra en donor til en akseptor uten emisjon av et foton.
Effektiviteten for FRET er invers avhengig av den sjette potens av den intermolekylære separering (Ref. 1. B. Wieb Van der Meer, G. Coker III, S.-Y. Simon Chen, "Resonance energy transfer, Theory and data", VHC publishers, 1994; 2. Principles of fluorescence Spectrocopy, Joseph R. Lakowicz (red.), 2. utgave, Plenum Press, New York 1999). Detektering av FRET kan derfor benyttes for å bestemme avstanden mellom en type markert med donoren og en type markert med akseptoren. Dette kan benyttes for eksempel for å bestemme hvorvidt to typer er bundet til hverandre.
Kravene for FRET er:
Donor og akseptor må være i umiddelbar nærhet (typisk 10-100Å).
Absorpsj onsspekteret for akseptoren må overlappe
fluorescensemissjonsspekteret for donoren.
Donor- og akseptortransisj onsdipolorienteringene må være omtrent parallelle.
FRET forårsaker en reduksjon i intensitet og levetid for donorfluorescens. Hvis akseptoren er fluorescerende, kan FRET også forårsake en økning i intensiteten av akseptorfluorescens. Der donor og akseptor er de samme, forårsaker FRET fluorescens depol ari sering.
FRET kan detekteres ved illuminering av en prøve med lys i absorpsj onsspekteret til donoren og å måle en hvilken som helst av disse egenskaper.
En enkel FRET-analyse kan gjennomføres ved å merke en analytt med en donor og å merke et analyttbindingsmiddel med en akseptor (eller vise versa). Når analytten ikke er bundet til analyttbindingsmiddelet, er avstanden mellom donor og akseptor stor, og det inntrer ingen FRET.
Før analytten er bundet til analyttbindingsmiddelet er avstanden mellom donoren og akseptoren liten og FRET inntrer.
Derfor kan detektering av FRET benyttes for å bestemme hvorvidt analytt er tilstede og/eller analyttkonsentrasjon.
En kompetitiv FRET-analyse kan gjennomføres der merket analytt konkurrerer med ikke-merket analytt. I dette tilfellet og etter hvert som konsentrasjonen av ikke-merket analytt øker, vil det være mindre bundet, merket analytt. Dette betyr at mindre FRET vil inntre.
Derfor kan nok en gang detektering av FRET benyttes for å bestemme analyttkonsentrasj onen.
En analyse av denne type kan benyttes for måling av glukosekonsentrasjon. Glukose binder reversibelt til en klasse av proteiner som kalles lektiner. Konkanavalin A er et eksempel på et lektin. Komponentene i analysen er for eksempel merket konkanavalin A (analyttbindingsreagenset) og merket glukose eller en merket glukoseanalog. Dekstran er en egnet glukoseanalog. Når glukose (analytten) binder til konkanavalin A, fortrenger den merket glukose eller dekstran og mindre FRET vil inntre.
Alternativt kan donor og akseptor festes til de samme typer for å danne et enkelt FRET-reagens. Eksempel på et slikt reagens er en "molekylær beacon".
En molekylær beacon består av et enkelttrådet polynukleotid eller en polynukleotidanalog sekvens med en donor festet til en ende av sekvensen. En komplementær akseptor er festet til den andre ende av sekvensen.
Den ikke-bundne, molekylære beacon eksisterer som en stengel-og-løkke struktur. Sekvensen ved endene av den molekylære beacon stemmer overens og binder, danner stammen, mens resten av proben er utilpasset og ubundet og danner løkken. Foldet på denne måte, er donoren ved en ende av proben nær akseptoren ved den andre ende. Denne nærheten mellom donor og akseptor tillater at FRET inntrer.
Når proben gjenkjenner og binder til et mål, brettes den molekylære beaconstrukturen ut. Dette separerer akseptor fra donor slik at FRET ikke kan inntre.
Derfor kan FRET benyttes for å bestemme hvorvidt et spesielt mål er tilstede.
Molekylære beacons kan benyttes for å detektere komplementære, enkelttrådede polynukleotidsekvenser. Alternativt kan de benyttes for å detektere andre ikke-nukleotidearter. Slike molekylære beacons kalles aptamerer. For eksempel kan aptamerer benyttes for å detektere proteiner.
Den molekylære beacon har den potensielle ulempen at den er basert på FRET som opptrer når denne beacon er ubundet. Under en in vivo-analyse kan beaconsekvensen spaltes av enzymer i kroppen. Dette vil redusere FRET. Reduksjonen av FRET som er forårsaket av beaconnedbrytning kan ikke adskilles fra reduksjonen av FRET forårsaket av beaconbinding til målet, og resultatene som oppnås kan derfor være upålitelige.
Et alternativ til en molekylær beacon som angår dette problem er en dobbel probe. Denne omfatter to enkelttrådede polynukleotid- eller polynukleotidanalogesekvenser, en merket med en energidonor og en med en komplementær energiakseptor. Dobbelproben benyttes for å detektere en enkelttrådet polynukleotid målsekvens som er komplementær med sekvensen av begge deler av dobbelproben. Når delene av ddobbelproben begge er bundet til målet, inntrer FRET. Fordi FRET ikke inntrer når ddobbelproben ikke er bundet, vil ddobbelprobenedbrytning ikke påvirke inntredenen av FRET. Derfor vil nedbrytning ikke forårsake at resultatene er upålitelige.
Reagenser tilsvarende molekylære beacons kan dannes fra polypeptider.
FRET kan også benyttes i immunanalyser.
Valget av donor og akseptor som benyttes i FRET er viktig og de følgende faktorer må tas inn i betraktning.
Donoren må ha et høyt kvantumutbytte.
En egnet akseptor må ha et absorpsj onsspektrum som overlapper emisj onsspekteret for donoren. For eksempel er QSY 21™ en egnet donor for anvendelse med Alexa Fluor 21™. Det er ønskelig at en akseptor har et vidt absorpsj onsspektrum slik at den kan benyttes med et antall donorer.
Hvis akseptoren også er en fluorescerende type er det mulige at bakgrunnsfluorescensen som skyldes direkte akseptoreksitering vil inntre og detekteres så vel som donorfluorescens. Filtrering av akseptoremisjon kan resultere i tap av donorfluorescenssignal der filtrering ikke er skarp nok. Ikke-fluorescerende akseptorer som dabcyl og QSY™ kan benyttes for å unngå dette problemet. Alternativt kan problemet unngås ved å velge en akseptor hvis emisj onsspektrum er fjernt fra det til donoren.
Emisj onsspekteret for noen av donorene og absorpsj onsspekteret for noen av akseptorene (for eksempel QS 21™) skiftes når donoren eller akseptoren konjugeres til en analytt eller et analyttbindende middel. Dette er uønsket.
Der FRET-analyser skal benyttes in vivo er det ønskelig at donorene fluorescerer ved 550 til rundt 600 nm og akseptorene absorberer lys ved 650 nm. Dette unngår overlapping mellom donorfluorescens og in vivo autofluorescens ved lavere bølgelengder. Fluoresceinfluorescens ved 495 nm er derfor ikke ideelt for in vivo-anvendelse.
Alexa Fluor 594™ er et fargestoff med et egnet emisj onsspektrum for bruk in vivo. Dette fargestoff absorberer ved 594 nm og fluorescerer ved 620 nm.
Foreliggende oppfinnere har nå funnet en ny klasse akseptorer (HMCV-fargestoffer) for anvendelse ved FRET. Akseptorene er stabiliserte karbeniumioner som er strukturelt relatert til krystallfiolett og malakittgrønt. Akseptorer kan avledes fra mellomproduktene i syntesen av trioksatrianguleniumsystemer som beskrevet av Bo W. Laursen et al., J. Am. Chem. Soc, 1998, 120, 12255-12263.
I henhold til dette tilveiebringer oppfinnelsen ved et første aspekt et reagens for anvendelse ved detektering av en analytt, omfattende en fluorescerende energjdonor og en energjakseptor, der energidonoren og energiakseptoren er slik at når de er tilstrekkelig nær hverandre, blir energi ikke-radiatisk overført fra energidonoren etter eksistering derav til energjakseptorene som kvensjer fluorescensen av energidonoren, og der energidonoren har den generelle formel:
der:
R<1>, R<2>og R<3>hver uavhengig er H, elektrodonerende substituenter, eller elektrontiltrekkende substituenter eller R<3>er festet til en linkerstruktur, forutsatt at minst to av R<1>, R<2>og R<3>er elektrondonerende grupper;
R<4>,R<5>,R<6>, R<7>, R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl, S-alkyl og R<1>0,R11,R1<2>, R<13>, R<14>og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl, alkyl, eller et eller flere par av grupper R<1>og R<4>og/ellerR<1>ogR<5>og/eller R<2>og R<6>og/eller R<2>og R<7>og/eller R<3>og R8 og/ellerR3 ogR9 og/eller R<4>ogR10og/ellerR<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/eller R8 ogR14og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere SO3", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle av R<10>, R<11>, R<12>, R<13>, R1<4>og R<15>er hydrogen;
og der avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren av reagenset kan moduleres med en egnet analytt som skal detekteres.
Som benyttet her inkluderer "elektrondonerende substituent", uten begrensning, amino, primært amin, sekundært amin, alkyl, O-alkyl, S-alkyl, amid (NHCOR), ester (OCOR), OH, SH og elektronrik aryl.
Som benyttet her, inkluderer uttrykket "elektrontiltrekkende substituent", uten begrensning, NO, N02, CN, COOH, ester (COOR), COO", amid (CONR2), CHO, keto (COR), SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl og elektronfattig aryl.
Elektronrikt/fattig aryl kan defineres som aryler med elektrondonerende, henholdsvis elektrontiltrekkende substituenter.
Som benyttet her inkluderer "alkyl" og "alkylen" rette, forgrenede eller sykliske grupper, mettede og umettede grupper (inkludert grupper inneholdende trippelbindinger), grupper inneholdende en eller flere substituenter og grupper inneholdende et eller flere heteroatomer. Citil C6alkylgrupper er foretrukket.
Som benyttet her, betyr uttrykket "O-alkylen", "N-alkylen" og "S-alkylen" grupper der heteroatomet er i en hvilken som helst posisjon i gruppen. Citil C7-0-alkylen, -N-alkylen og -S-alkylen og C2til C7-alkylen er foretrukket.
Der en estersubstituent nevnes kan substituenten være bundet via karbonyldelen (som R(C=0)OR) eller via alkoksydelen (som RO(C=0)R). Tilsvarende kan, der amidsubstituenten nevnes, substituenten være bundet via karbonyldelen (som RCONR2) eller nitrogendelen (som R(NR)COR).
I en foretrukket utførelse er energidonoren og energiakseptoren forbundet via en ikke-kovalent binding. Den ikke-kovalente binding kan foreligge mellom en analytt som binder middelet forbundet med en av energidonoren og energiakseptoren, og en analyttanalog bundet til den andre av energidonoren og energiakseptoren idet den ikke-kovalente binding kan brukes opp ved hjelp av en egnet analytt for å øke avstanden mellom energidonor og energjakseptor i reagenset.
Hensiktsmessig er i denne utførelsesform det anlyttbindende middel et lektin og/eller analyttanalogen er en glukoseanalog. For eksempel kan analyttanalogen være dekstran. Dette system kan benyttes for glukosedetektering og/eller måling som beskrevet ovenfor.
Det er foretrukket at lektin er bundet til energidonoren og analyttanalogen er bundet til energiakseptoren (for eksempel Dekstran-HMCV og Konkanavalin A-Alexa Fluor 594™). Dekstran kan også være tyngre merket enn Konkanavalin A. Hvis dekstran er merket med en fluorofor, vil det være overskytende fluorescens som fortynner signalet i en levetidsbasert analyse.
I en alternativ utførelsesform er energidonoren og energiakseptoren bundet sammen via en kovalent binding. Den kovalente binding mellom energidonoren og energiakseptoren kan spaltes for å øke avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren i reagenset. Hensiktsmessig er energidonoren og energiakseptoren forbundet via en polynukleotidsekvens eller en polynukleotidanalogsekvens eller en polypeptidsekvens, der sekvensen har en konformasjon som er i stand til modulering med en egnet analytt for å kunne detektere slik at avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren i reagenset kan moduleres. I dette tilfellet er reagenset en "molekylær beacon" som diskutert ovenfor.
I en ytterligere, alternativ utførelsesform er energidonoren og energiakseptoren ikke forbundet i fravær av analytt. Reagenset kan være "dobbelproben" som diskutert ovenfor.
Spesielt er en linkerstruktur festet til energiakseptoren ved R<3>, eller, der en brogruppe er til stede, er eventuelt linkerstrukturen festet til energidonoren ved brogruppen.
Fortrinnsvis er de elektrondonerende substituenter valgt blant amino, primært amin, sekundært amin, O-alkyl, alkyl, S-alkyl, amid, ester, OH og SH.
Fortrinnsvis er en eller flere av R<1>til R<3>dimetylamino, dietylamino eller metyletylamino, eventuelt substituert med en eller flere av SO3", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl og S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
I en foretrukket utførelsesform er R<1>og R<2>begge dimetylamino. Alternativt kan R<1>og R<2>hver eventuelt være substituert med metyletylamino.
Fortrinnsvis er det til stede en elektrontiltrekkende substituent og denne er valgt blant NO, N02, CN, COOH, ester, COO", amid, CHO, keto, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl og S03-alkyl.
Fortrinnsvis er minst en av R<10>, R<11>, R<12>, R13, R14 og R<15>O-alkyl.
Hensiktsmessig er et eller flere par av disse grupper R<4>og R<10>og/eller R<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/ellerR8 ogR1<4>og/eller R<9>og R<15>en brodannende gruppe bestående av alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
Fortrinnsvis er R<10>til R<14>alle O-metyl eller O-etyl.
Fortrinnsvis omfatter reagenset ytterligere et eller flere motioner valgt blant halogenid, BF3", PF6<->, N03", karboksylat, CIO4", Li<+>, Na<+>, K<+>, Mg<2+>og Zn<2+>slik at reagenset totalt sett ikke er ladet.
Fortrinnsvis er det til stede en linkerstruktur og denne dannes ved omsetning av et linkerelement valgt blant en aktiv ester, et isotiocyanat, et syreklorid, et aldehyd, et azid, et a-halogenert keton og et amin med en reaksjonspartner. Hensiktsmessig er reaksjonspartneren valgt blant et polysakkarid, polynukleotid eller et protein. Hensiktsmessig er linkerelementet en aktiv ester og er valgt blant suksinimidyl- og pentafluorfenylaktive estere.
Hensiktmsessig er energidonoren Alexa Fluor 594™.
Reagenset kan benyttes for in vivo-detektering av en analytt. For eksempel kan reagenset inneholdes i en sensor som implanteres i kroppen. Hensiktsmessig blir sensoren implantet ri epidermis slik at den vil være skjermet i vanlig bruk. Egnede sensorkonstruksjoner er beskrevet i detalj i WO 02/30275. I dette tilfellet kan det være mulig å illuminere reagenset og måle reagensfluorescensen gjennom sjiktene i huden over den implanterte sensor.
Alternativt kan reagenset inneholdes i en sensor som delvis implanteres i kroppen, men strekker seg utenfor denne. En slik sensor kan ha form av an nål. I dette tilfellet kan reagenset illumineres ned gjennom nåleboren og reagensfluorescens kan detekteres på samme måte uten at lys passerer gjennom hudlagene.
Sensoren kan være permeabel for analytten.
I dette andre aspekt angår foreliggende oppfinnelse en sensor omfattende en semi-permeabel membran som innelukker et reagens for bruk ved detektering av en analytt som beskrevet ovenfor.
I et tredje aspekt angår foreliggende oppfinnelse en fargestofforbindelse med følgende generelle formel:
der:
R<4>,R<5>,R<6>, R<7>', R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl eller S-alkyl, og R<10>, R<11>, R12, R13, R14 og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl eller alkyl, eller et eller flere par av grupper R20og R<4>og/eller R<20>og R<5>og/ellerR<4>og R<10>og/ellerR5 ogR1<1>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>ogR13og/eller R8 og R<14>og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkyl en, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, s-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle R<10>, R<11>, R<12>, R<13>, R<14>og R<15>er hydrogen;
R<16>, R<17>, R<18>og R<19>hver uavhengig er H, alkyl (fortretrukket Citil C5-alkyl) eller aryl, eller en eller flere av R<16>og R<17>eller R<18>og R<19>er alkylen (fortrinnsvis C3til C7alkylen), eventuelt substituert med en eller flere av SO3", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin;
eller et eller flere av parene av grupper R og R , R og R , R og R og R og R<19>er alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, og
R<20>er et linkerelement valgt blant en aktiv ester, et isotiocyanat, et syreklorid, et a-halogenert keton og et azid.
Hensiktsmessig er minst en av R<10>, R<11>, R12, R13, R14 og R<15>O-alkyl.
I en foretrukket utførelsesform er R<1>6,R17,R18og R1<9>hver metyl eller etyl. Alternativt kan R<16>og R<18>hver være metyl ogR17og R<19>hver være etyl, substituert i 2-posisjon med S03".
Hensiktsmessig er et eller flere par av grupper R<4>og R<10>og/eller R<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/ellerR7 og R<13>og/eller R<8>og R<14>og/eller R<9>og R<15>en brodannende gruppe bestående av alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
Fortrinnsvis er R<20>et linkerelement som har formelen:
der:
R<21>er H eller alkyl eller aryl eventuelt substituert med en eller flere av SO3", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin og R<22>er alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen (fortrinnsvis C2til Ce) ellerR21og R<22>er en del av en ring (fortrinnsvis C3til C7), eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin;
og
R<23>er o-suksinimidyl, o-pentafluorfenyl, Cl eller a-halogenert alkyl.
Fortrinnsvis er R<10>til R<15>hver O-metyl eller O-etyl.
Fortrinnsvis omfatter fargestofforbindelsen videre en eller flere motioner valgt blant halogenid, BF4", PRe", N03", karboksylat, C104", Li<+>, Na<+>, K<+>, Mg<2+>og Zn<2+>.
I et fjerde aspekt angår foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for å detektere eller måle en analytt ved bruk av et reagens som beskrevet ovenfor og der fremgangsmåten omfatter trinnene: å bringe reagenset i kontakt med en prøve;
å illuminere reagenset og prøven med lys med en bølgelengde innen absorpsj onsspekteret for energidonoren;
detektering av ikke-radiativ energioverføring mellom energidonoren og energiakseptoren ved å måle fluorescensen av energidonoren; og
å assosiere fluorescensmålingene med nærværet eller konsentrasjonen av analytt.
Hensiksmessig måles fluorescensen for energidonoren ved intensitetsbasert eller tidsoppløst fluorescensmåling. Fortrinnsvis måles analytten ved å sammenligne prøvefluorescensmålingen med fluorescensmålinger foretatt ved bruk av kjente konsentrasjoner av analytten.
Lyset som benyttes for belysning har fortrinnsvis en bølgelengde over 550 nm.
I et femte aspekt angår foreliggende oppfinnelse et kompleks av en analytt og et reagens for detektering av analytten der reagenset omfatter en fluorescerende energi donor og energjakseptor der energidonoren og energiakseptoren er slik at når de er tilstrekkelig nær hverandre, blir energi overført ikke-radiatisk fra energidonoren etter eksitering av denne til energiakseptoren som kvensjer fluorescens fra energidonoren, der energiakseptoren har den generelle formel:
der:
R<1>, R<2>og R<3>uavhengig er H, elektrondonerende substituenter eller elektrontiltrekkende substituenter eller R<3>er festet til en linkerstruktur, forutsatt at minst to av R<1>, R<2>og R<3>er elektrondonerende grupper;
R<4>,R<5>,R<6>, R<7>, R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl, S-alkyl og R<1>0,R11, R12, R13, R<14>og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl, alkyl, eller et eller flere av parene av grupperR<1>og R<4>og/eller R<1>og R<5>og/eller R2 og R6 og/eller R<2>og R<7>og/ellerR3 og R8 og/eller R<3>og R<9>og/eller R<4>og R<10>og/ellerR5 og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/eller R<8>og R<14>og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere SO3", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle avR10, R11, R12, R13, R14 og R<15>er hydrogen; og
der nærværet av analytten modulerer avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren.
Oppfinnelsen skal beskrives i større detalj under henvisning til de foretrukne utførelsesformer som er illustrert ved eksempler, og som vist i Figur 1, som viser en glukose dose-responskurve og Figur 2, som viser normaliserte absorpsjons- og emisjonsspektra av Alexa Fluor 594 og HMCV-1-dekstran i vandig PBS-buffer 50 mM, pH 7,4 (eksitering av AF594 ved 570 nm er i en 0,7 uM oppløsning).
EKSEMPEL
Fremstilling av fargestofforbindelse 4
Syntesemetoder og materialer
Alle benyttede reagenser var standardkvalitet hvis ikke annet er sagt. Eter og THF ble tørket ved destillering fra natriumÆenzofenon under nitrogen. Benzen ble tørket ved henstand over natrium. NMR-spektra ble tatt opp på et 250- eller 400 MHz spektrometer. FABMS-spektra ble oppnådd ved bruk av 1,4-dicyanobutan som matriks.
Elementanalyse ble foretatt ved Universitetet i København, Kjemiinstituttet, Elementanalyse laboratoriet, Universitetsparken 5, 2100 København, Danmark.
Tris(2,4,6-trimetoksyfenyl)karbeniumtetrafluorborat (I-BF4)
En oppløsning av fenyllitium ble fremstilt ved tilsetting av brombenzen (24,5 g, 156 mmol) i 50 ml tørr eter til litiumtråd (2,30 g, 328 mmol) i 100 ml tørr eter. 1,3,5-Trimetoksybenzen (25,1 g, 149 mmol) i 100 ml tørr benzen ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur under argon i 70 timer. Dietylkarbonat (5,30 g, 45 mmol) i 150 ml tørr benzen ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble refluksert i 3 dager. Den avkjølte reaksjonsblanding ble helt i NaOH-oppløsning (300 ml, IM). Fasene ble separert og vannfasen ble ekstrahert med eter. De kombinerte, organiske faser ble tørket over MgSC>4 og filtrert og man oppnådde en klar, gul oppløsning. Tilsetning av vandig HBF4-oppløsning (12 ml, 50% rundt 100 mmol) resulterte i umiddelbar presipitering av det dypblåe karbeniumsalt. Det mørkt purpurfargede presipitat ble filtrert av, vasket grundig med tørr eter og tørket over fast KOH for å gi 26,0 g (96%) av det urene produkt. Ny presipitering ved tilsetning av vann til en acetonitriloppløsning fulgt av omkrystallisering fra metanol ga den rene forbindelse i et totalutbytte på 70%.
*H NMR (250 MHz, CDC13): 5 6,05 (6H, s), 3,99 (9H, s), 3,59 (18H, s).
<13>C NMR (400 MHz, CDCI3): 5 169,70, 166,47, 163,93, 118,62, 91,63, 56,52, 56,36.
MS (FAB<+>): m/z 513 (M<+>). UV-vis Xmaks(nm (log e)) (CH2C12): 584 (4,55), 467 (3,98), 322 (3,68), 287 (4,02).
Elementanalyse for C2gH3309BF4:
Beregnet: C 56,01, H 5,50.
Funnet: C 55,69, H 5,64.
Tris(2,4,6-trimetoksyfenyl)karbeniumklorid (1-Cl)
Denne forbindelse ble fremstilt analog med I-BF4(med utgangspunkt i 15,0 g 1,3,5-trimetoksybenzen). I stedet for HBR4ble gassformig HC1 boblet gjennom den hydrolysene og tørkede reaksjonsblanding. Det mørk purpurfargede, krystallinske presipitat ble filtrert av, vasket grundig med tørr eter og tørket over fast KOH og man oppnådde 10,1 g (66%) urent produkt. MS (FAB<+>),<*>H NMR- og<13>C NMR-spektra var identiske med de til BF4-saltet.
Syntese av HMCV-1:
4a (BFY): 4-(metylamino)smørsyrehydroklorid (1,36 g, 8,8 mmol), 1 (5,0 g, 8,3 mmol) og diisopropyletylamin (5 ml) ble oppløst i 120 ml acetonitril. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 30-35°C i en tørr nitrogenatmosfære i 22 timer. 40 ml 40% vandig dimetylaminoppløsning ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere fire dager. Oppløsningsmiddel og overskytende dimetylamin ble fjernet under vakuum og det gjenværende materialet oppløst i kloroform. Kloroformoppløsningen ble vasket to ganger med brine og tørket over MgS04 før fordamping av oppløsningsmiddelet og represipitering av produktet fra CH2Cl2L:eter. Utbytte var 4,4 g tilsvarende 70% av et mørkeblått pulver.
MS (FAB+): m/z 624 (M+).
*H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 8,34 (1H, bs), 6,03 (2H, s), 5,83 (4H, s), 3,49 (2H, m), 3,46 (6H, s), 3,44 (12H, s), 3,12 (3H, s (maskert)), 3,08 (12H, s), 1,94 (2H, t), 1,70 (2H, m).
HMCV-1 (Cl"): TSTU (2-suksinimido-l,l,3,3-tetrametyluroniumtetrafluorborat; 0,8 g, 2,6 mmol) ble satt til en oppløsning av 4a (0,9 g, 1,26 mmol) og diisopropyletylamin (0,55 g, 4,5 mmol) i 15 ml acetonitril. Reaksjonsblandingen ble omrørt i en lukket kolbe i 2 timer før den ble helt i 150 ml av iskald, nesten mettet NaCl-oppløsning, surgjort med 4 ml 2M vandig HC1. Vannfasen ble ekstrahert med 2 x 150 ml kloroform. De kombinerte kloroformfaser ble vasket med 2 x 50 ml brine og tørket over MgSCv Fordamping av oppløsningsmiddelet og represipitering fra CH2Cl2:eter ga et mørkeblått pulver (0,80 g, 84%).
MS (FAB+): m/z 721 (M+).
^NMR br (400 MHz, DMSO-d6): 5 5,88 (2H, s), 5,85 (4H, s), 3,60 (2H, s), 3,46 (12H, s), 3,45 (6H, s), 3,15 (12H, s), 3,12 (3H, s), 2,85 (4H, s), 2,80 (2H, t), 1,95 (2H, m).
Syntese av HMCV-2:
4b (PFV): En suspensjon av piperidin-4-karboksylsyre (isonipekotinsyre) (0,215 g, 1,7 mmol) og 1 ml diisopropyletylamin i 20 ml N-metyl-2-pyrrolidon i NMP ble satt til en oppløsning av 1 (1,0 g, 1,7 mmol) i 30 ml NMP. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 80-100°C i et oljebad i 2 timer (inntil reaksjonsblandingen var lyserød) og så satt hen ved romtemperatur over natten. 10 ml av en 33% oppløsning av dimetylamin i absolutty etanol ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 24 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble helt i en vandig KPF6-oppløsning (400 ml, 0,2 M) og 2M vandig HC1 ble satt til i små porsjoner inntil presipitering. Det blå presipitat ble filtrert av og vasket med rent vann, tørket, oppløst i DCM, filtrert og represipitert ved tilsetning av eter, og man oppnådde et utbytte på 0,85 g av et mørkeblått pulver, tilsvarende 64%.
MS (FAB+): m/z 636 (M+).
*H NMR (CD3CN, int. solvent ref. 1,94 ppm): 5 6,03 (2H, s), 5,81 (4H, s), 3,90 (2H, m), 3,48 (12H, s), 3,47 (6H, s), 3,14 (12H, s), 3,04 (2H, m), 2,61 (1H, m), 2,15 (1H, br), 1,97 (2H, m), 1,71 (2H, m).
HMCV-2 (PFV): TSTU(2-suksinimido-l,l,3,3-tetrametyluroniumtetrafluorborat, 0,72 g, 2,4 mmol) ble satt til en oppløsning av 4b (0,8 g, 1 mmol) og 0,47 g diisopropyletylamin i 15 ml acetonitril. Reaksjonsblandingen ble omrørt i en lukket kolbe i 2 timer før den ble helt i ca. 100 ml kald NaCl-oppløsning, surgjort med 4 ml 2M vandig HCl-oppløsning (ca. 4 mmol). Vannfasen ble ekstrahert med 2 x 100 ml kloroform. De kombinerte kloroformfaser ble vasket med 2 x 50 ml brine og tørket over MgSC>4. 10 g filterhjelpemiddel ble satt til den filtrerte kloroformfasen og oppløsningsmiddelet fjernet. Opparbeiding ved kolonnekromatografi over silika CHCl3:MeCN 5:1 ga, etter fordamping av oppløsningsmiddel (den første blå fraksjon ble samlet) og represipitering fra CJrfeC^eter, et mørkeblått pulver (0,55 g, 62%).
MS (FAB+): m/z 732 (M+).
*H NMR (DMSO, int. solvent ref 2,50 ppm): 8 6,08 (2H, s), 5,84 (4H, s), 4,91 (2H, m), 3,45 (12H, s), 3,44 (6H, s), 3,14 (12H, s), 3,14 (2H, m, (maskert)), 2,82 (4H), 2,03 (2H, m), 1,74 (2H, m).
(CDCI3, int. solvent ref. 7,76 ppm) 8 5,94 (2H, s), 5,70 (4H, S), 3,80 (2H, m), 3,53 (12H, s), 3,18 (6H), 3,16 (2H, m (maskert)), 2,97 (1H, m), 2,85 (4H, s), 2,19 (2H, m), 2,04 (2H, m).
Syntese av HMCV-3:
Syntese av HMCV-3 forløperen 4c ble gjennomført ved to synteseveier.
A: ved en "en-kolbe" prosedyre analog den som er benyttet ved syntese av HMCV-1 og HMCV-2 der linkeren som bærer aminogruppen (4-(N-metylamino)-butansyre) innføres først, fulgt av de to sulfonsyresubstituerte aminofunksjoner (N-metyltaurin) (Skjema 3).;
B: i metode B reverseres den vandige sekvens og gjennomføres i to trinn med isolering av det dobbeltsubstituerte produkt 3c (Skjema 4).
4c (Na<+>) (metode A): En oppløsning av 4-(metylamino)smørsyrehydroklorid (0,275 g, 1,8 mmol), 1 (1,0 g, 1,7 mmol) og 1 ml diisopropyletylamin i 25 ml DMSO ble omrørt i 20 timer ved romtemperatur før natrium-N-metyltaurin (2,0 g, 12 mmol), 1 ml diisopropyletylamin og 20 ml DMSO ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 dager ved rundt 70°C og rundt 2 dager ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom silika fulgt av grundig vasking med metanol. Det blå filtratet ble konsentrert og det urene produkt presipitert som et klebrig, blått vokslignende materiale, ved tilsetning av etylacetat. Kolonnekromatografi over silika med MeCN:MeOH 5:2 ga et blått faststoff (første blå fraksjon/bånd) som ble ytterligere renset ved oppløsning i varm etanol, fulgt av filtrering (varmt). Etter avkjøling ble etanoloppløsningen filtrert en gang til og presipitatet vasket med etanol (og man oppnådde et hvitt materiale). Den blå etanoloppløsning ble fordampet og ga 0,3 g 4c (18%).
MS (FAB+, glyserol): m/z 812 (MH2<+>), 834 (MNaFf), 856 (MNa2<+>)
NMR (CD3OD, int. solvent ref. 3,35 ppm): 5 5,98 (6H, s), 3,95 (4H, t), 3,62 (2H, t), 3,57 (6H, s), 3,56 (12H, s), 3,21 (3H, s), 3,20 (6H, s), 3,15 (4H, t), 2,41 (2H, t), 1,99 (2H, m).
4c ved Metode B:
3c (Na<+>): En oppløsning av natirum-N-metyltaurin (1,3 g, 8 mmol) og 1 (1,0 g, 1,7 mmol) i 25 ml DMSO ble omrørt i 3 dager ved romtemperatur. Tilsetning av rundt 500 ml etylacetat ga et blått presipitat (og en rød moderlut). Det faste materialet ble varmet opp til tilbakeløp i absolutt etanol i en mengde av rundt 150 ml og satt hen over natten ved romtemperatur. Presipitatet ble filtrert av, oppløst i metanol og filtrert gjennom silika i et 5 cm sjikt som så ble vasket med metanol. Fordamping av oppløsningsmiddelet og re-presi pi tering fra metanol: etylacetat ga et blått pulver i en mengde av 1,1 g tilsvarende 88%).
MS (FAB+, glyserol): m/z 727 (MH2<+>), 749 (MNaFf), 765 (MNaK<+>), 771 (MNa2<+>)
^NMR (CD3OD, int. solvent ref 3,35 ppm): 5 6,20 (2H, s), 5,98 (4H, s), 4,00 (4H, t), 3,87 (3H, s), 3,58 (12H, s), 3,56 (6H, s), 3,28 (6H, s), 3,17 (2H, t).
4c (Na<+>): En oppløsning av 3c (0,5 g, 0,67 mmol), 4-(N-metylamino)-butansyreklorid (0,5 g, 3,26 mmol) og tørr Na2C03(0,5 g) i 7 ml DMSO ble omrørt i 3 dager ved 70°C. Råproduktet ble presipitert fra den avkjølte reaksjonsblanding ved tilsetning av etylacetat og man oppnådde et klebrig, blått materiale i en mengde av ca. 1,1 g. Kolonnekromatografi over silika med MeCN:MeOH 5:2 ga produkt 4c som et blått faststoff etter fordamping av oppløsningsmidler (0,25 g, 44%).
MS (FAB+, glyserol): m/z 812 (MH2<+>)
^NMR (CD3OD, int. solvent ref. 3,35 ppm): 5 5,98 (6H, s), 3,95 (4H, t), 3,62 (2H, t), 3,57 (6H, s), 3,56 (12H, s), 3,21 (3H, s), 3,20 (6H, s), 3,15 (4H, t), 2,41 (2H, t), 1,99 (2H, m).
HMCV-3 (Na<+>): TSTU(2-suksinimido-l,l,3,3-tetrametyluroniumtetrafluorborat; 0,20 g, 0,6 mmol) ble satt til en oppløsning av 4c (0,25 g, 0,3 mmol) og 0,06 g diisopropyletylamin i 10 ml tørr DMSO. Reaksjonsblandingen ble omrørt i en lukket kolbe i 2 timer før råproduktet ble presipitert ved tilsetning av etylacetat. Det klebrige, blå materialet ble vasket fra filtret med metanol og tørket under høyvakuum. Opparbeiding ved kolonnekromatografi over silika med H20:MeCN 1:10 ga, etter fordamping av oppløsningsmiddelet (høyvakuum ved romtemperatur) og represipitering fra metanol:etylacetat, et mørkeblått pulver i en mengde av 0,25 g tilsvarende 90%.
MS (FAB+, glyserol): m/z 909 (MH2<+>), 931 (MNaF<f>), 947 (MKH<*>),
'HNMR (CD3OD, int. solvent ref 3,35 ppm): 5 5,99 (4H, s), 5,94 (2H, s), 3,95 (4H, t), 3,68 (2H, t), 3,57 (12H, s), 3,58 (2H, maskert), 3,55 (6H, s), 3,21 (9H, s), 3,16 (4H, t), 2,88 (4H, s), 2,80 (2H, s), 2,13 (2H, m).
Festing av HMCV- 1 til aminodekstran
Aminodekstran (130 mg, Mv 110 000, 0,5 mmol NH2/g dekstran) ble oppløst i 6,5 ml vandig natriumkarbonat (15 mM, pH = 8,5 for å gi en oppløsning med dekstrankonsentrasjon 182 uM, 20 mg/ml). Til 3,0 ml av denne oppløsningen ble det under omrøring satt HMCV-1 (5,65 mg i 200 ul DMSO) i 10 ul andeler i løpet av 10 minutter. Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og dialysert grundig (3 ml dialyse slides, 12-14 000 MwCO-membran) mot en vandig fosfatbuffer (10 mM H2P047HP04<2>", 4 mM K+, 145 mM Na+, 0,1 mM Ca<2+>, 0,1 mM Mn2+, pH = 7,4). Konsentrasjonen av merket dekstran ble bestemt fra fortynning under dialysen. Grad av merking (DOL-verdien) ble bestemt fra serier av UV-Vis spektra av den resulterende oppløsning (3,2 ml, konsentrasjon av dekstran 168 uM, DOL = 10).
Festing av Alexa Fluor 594™ til Konkanavalin A ( ConA)
En oppløsning av Con A (Type Ul, Sigma) ble dannet som følger. 0,97 g metyl-a-D-mannopyranosid (0,97 g), 0,1 M 30 ul vandig CaCl2og 30 ul vandig 0,1 M MnCl2ble blandet i 20 ml 0,5 M Na2C03-buffer (pH = 8,5). Deretter ble ConA (1,00 g -150 mg protein) tilsatt og suspensjonen omrørt heftig i 1 time. Oppløsningen ble sentrifugert og supernatanten samlet. Til 13,0 ml av denne oppløsning ble det satt Alexa Fluor 594™
(10,0 mg i 800 ml tørr DMSO) i 20 ul porsjoner i løpet av 10 min. Den resulterende, blå oppløsning ble omrørt i 1 time og deretter ble ravsyreanhydrid (18,2 mg i 867 ul tørr DMSO) tilsatt i 20 ul porsjoner i løpet av 10 minutter. Oppløsningen ble omrørt i ytterligere 1,5 time hvoretter den ble overført til en 15 ml dialyse slide og dialysert mot den samme buffer som beskrevet for HMCV-1-dekstransyntesen. Til denne buffer ble det satt 2 mM NaN3for å forhindre vekst (15,4 ml, konsentrasjon av proteindimer 59 uM, DOL = 4,0).
Bruk av analvttbindingsreagens merket med fargestofforbindelse 4 i FRET- analyse Glukosemålingsanalysekjemien av den foretrukne utførelsesform er basert på konkurransen mellom binding av dekstran og glukose til Konkanavalin A (Con A) som diskutert ovenfor.
Con A merkes med Alexa Fluor 594™ (AF594) (donor) og dekstran merkes med et ikke-fluorescerende fargestoff, HMCV-1 (akseptor), som absorberer innen emisjonsbåndet til AF594.
Fluorescenslevetiden måles ved frekvensdomene fluorimetri. Intensiteten for eksiteringslys moduleres og bringer den eksiterte donor til å emitere lys som er modulert med den samme frekvens og forsinket med levetiden for den eksiterte tilstand. Dette resulterer i et faseskift mellom eksiteringslys og emittert fluorescens.
Det ble valgt AF594-merket (ConA) som sukkerbindingslektin og HMCV-1-merket dekstran som glukoseanalog. Massekonsentrasjonen av donor- og akseptorfargestoffer som ble benyttet, AF594 og HMCV-1, var konstante under hele forsøket og forholdet var 1:6. Dette er konsistent med Forster-teoribetingelsene ved at donorkonsentrasjonen er mye mindre enn akseptorkonsentrasjonen (Ref: O.J. Rolinski, D.J.S. Birch, L.J. McCartney, J.C. Pickup, J. Photochem. Photobiol. B: Biol. 54, 26-34, 2000). Det antas at Forster-teorien best oppfylles når ConA merkes med donoren og poly-sukkerdekstran merkes med akseptoren.
Målinger
Donorkonjugatet, akseptorkonjugatet og PBS-bufferen (50 mM PBS-buffer, pH = 7,4, ionestyrke justert til 150 mM med NaCl) ble blandet slik at sluttkonsentrasjonen i analysekjemien av ConA var 20 uM og konsentrasjonen av dekstran var 50 uM. Molarforholdet ([ConA]:[Dex]) var 0,40 og konsentrasjonsforholdet ([AF594]:[HMCV-1]) var 0,16. To hul-cellulosefibere (Spectrum Laboratories Inc., regenerert cellulose, ytre fiberdiameter 216 um, indre fiberdiameter 200 um og MWCO 13 kDa Reorder nr. 132294) ble fylt med analysekjemi og deretter montert i en skreddersydd holder plassert i en fluorescenscelle inneholdende PBS-buffer.
Faseeksiteringsskiftet ble målt ved bruk av et fase- og moduleringsfluorimeter (Koala fra ISS, Inc., Champaign, Illinois). Lyskilden var en gul LED. AXF1067-bånd passfilter som transmitterte lys fra 540 til 590 nm (Glenn Spectra Ltd) ble plassert i eksiteringskanalen og også i referansekanalen. Emisj onskanalen ble utstyrt med et XF3061 båndpassfilter som transmitterte lys fra 610 til 690 nm (Glenn Spectra Ltd.).
Glukose doseresponsen ble målt ved suksessiv erstatning av PBS-buffer med PBS-buffer inneholdende økende mengder av glukosekonsentrasjon fra 0 mM til 50 mM glukose.
Resultatene er vist i Tabell 1 og i Fig. 1.
Analysene ovenfor ble testet in vivo i et sammenklemt svineforsøk. Analysene ble lastet i et hul-fiber som ved en nål ble anbrakt i underhuden. Resultatene fra fasemålingene viste et faseskift sammenlignet med in vitro-forsøket, men kunne ikke korreleres godt under henvisning til verdier for fullblod glukose.
Akseptorene av de foretrukne utførelsesformer av oppfinnelsen har et antall fordeler i forhold til de kjente akseptorer.
For det første har HMCV-akseptorene et bredt og intenst absorpsj onsspektrum (550 til 700 nm). Dette betyr at de kan benyttes med et mangfold av donorer (se Fig. 2).
For det andre absorberer akseptorene høye bølgelengder. Dette betyr at de er egnet for in vivo-anvendelse ved bølgelengder der fluorescens ikke interfererer med målingene.
For det tredje er senterkarbonatomet av fargestoffer skjermet av orto-substituenter på den aromatiske del som forbyr nedbrytingsprosesser som initierer enten reduktivt, oksidativt eller nukelofile angrep på denne posisjon.
For det fjerde er absorpsjonsspektret for akseptorene ikke signifikant påvirket ved konjugering til analytt eller analyttbindingsreagens. Dette betyr at ytelsen hos akseptorene er forutsigbar.
For det femte fluorescerer akseptorene ikke og vil ikke bidra til bakgrunns fluorescenssignal.

Claims (32)

1. Reagens for anvendelse ved detektering av en analytt, omfattende en fluorescerende energjdonor og en energiakseptor der energidonoren og energiakseptoren er slik at når de er tilstrekklig nær hverandre blir energi overført på ikke-radiativ måte fra energidonoren etter eksitering av denne til energiakseptoren som kvensjer fluorescensen for energidonoren, karakterisert vedat energiakseptoren har formelen:
der:R<1>, R<2>og R<3>hver uavhengig er H, elektrodonerende substituenter, eller elektrontiltrekkende substituenter eller R<3>er festet til en linkerstruktur, forutsatt at minst to av R<1>, R<2>og R<3>er elektrondonerende grupper;R<4>,R<5>,R<6>, R<7>, R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl, S-alkyl og R<1>0,R11,R1<2>, R<13>, R<14>og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl, alkyl, eller et eller flere par av grupper R<1>og R<4>og/ellerR<1>ogR<5>og/eller R<2>og R<6>og/eller R<2>og R<7>og/eller R<3>og R8 og/ellerR3 ogR9 og/eller R<4>ogR10og/ellerR<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/eller R8 ogR14og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere SO3", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle avR10,R<11>, R<12>, R<13>, R<14>og R<15>er hydrogen; og der avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren av reagenset kan moduleres med en egnet analytt som skal detekteres.
2. Reagens ifølge krav 1,karakterisert vedat energidonoren og energiakseptoren er forbundet via en kovalent binding.
3. Reagens ifølge krav 2,karakterisert vedat den kovalente binding mellom energidonoren og energiakseptoren kan spaltes for å øke avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren i reagenset.
4. Reagens ifølge krav 2,karakterisert vedat energidonoren og energiakseptoren er forbundet via en polynukleotidsekvens eller en polynukleotidanalogsekvens eller en polypeptidsekvens der sekvensen har den konformasjon som er i stand til modulering med en egnet analytt for å detekteres for derved å modulere avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren i reagenset.
5. Reagens ifølge krav 1,karakterisert vedat energidonoren og energiakseptoren er forbundet ved ikke-kovalent binding.
6. Reagens ifølge krav 5,karakterisert vedat den ikke-kovalente binding eksisterer mellom et analyttbindingsmiddel forbundet en av energidonoren og energiakseptoren og en analyttanalog bundet til den andre av energjdonorer og energiakseptorer, idet den ikke-kovalente binding kan brytes opp ved en egnet analytt for å øke avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren i reagenset.
7. Reagens ifølge krav 6,karakterisert vedat analyttbindingsmiddelet er et lektin.
8. Reagens ifølge krav 6 eller 7,karakterisert vedat analyttanalogen er en glukoseanalog.
9. Reagens ifølge krav 8,karakterisert vedat analyttanalogen er dekstran.
10. Reagens ifølge krav 1,karakterisert vedat energidonoren og energiakseptoren ikke er bundet i fravær av analytt.
11. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat en linkerstruktur er festet til energiakseptoren ved R<3>, eller der en brodannende gruppe er til stede, er linkeren eventuelt festet til energiakseptoren ved den brodannende gruppe.
12. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat de elektrondonerende substituenter er valgt blant amino, primært amin, sekundært amin, O-alkyl, alkyl, S-alkyl, amid, ester, OH og SH.
13. Reagens ifølge krav 12,karakterisert vedat en eller flere av R<1>til R<3>er dimetylamino, dietylamino eller metyletylamino, eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
1 A terisert ved at en elektrontiltrekkende substituent er til stede og at denne er valgt blant NO, N02, CN, COOH, ester, COO", amid, CHO, keto, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl og S03-alkyl.
15. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat minst en av R10, R11, R12, R13, R14 og R15 er O-alkyl.
16. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat et eller flere par av grupperR<4>og R<10>og/eller R<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/ellerR7 og R<13>og/eller R8 og R<14>og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
17. Reagens ifølge et hvilket som helst av kravene 1-14,karakterisert vedat R<10>til R<15>hver er O-metyl eller O-etyl.
18. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat den videre omfatter et eller flere motioner valgt blant halogenid, BF4", PF6", N03", karboksylat, C104", Li<+>, Na<+>, K<+>, Mg<2+>og Zn<2+>.
19. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat en linkerstruktur er til stede og er dannet ved omsetning av et linkerelement valgt blant en aktiv ester, et isotiocyanat, et syreklorid, et aldehyd, et azid eller et a-halogenert keton og et amin med en reaksjonspartner.
20. Reagens ifølge krav 19,karakterisert vedat reaksjonspartneren er valgt blant et polysakkarid, et polynukleotid og et protein.
21. Reagens ifølge krav 19 eller 20,karakterisert vedat linkerelementet er en aktiv ester og er valgt blant suksinimidyl- og pentafluorfenylaktive estere.
22. Reagens ifølge et hvilket som helst av de foregående krav,karakterisert vedat energidonoren er Alexa Fluor-594™
23. Fargestofforbindel se,karakterisert vedden generelle formel:
der:R<4>,R<5>,R<6>, R<7>', R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl eller S-alkyl, og R<10>, R<11>, R12, R13, R14 og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl eller alkyl, eller et eller flere par av grupper R20og R<4>og/eller R<20>og R<5>og/ellerR<4>og R<10>og/ellerR5 ogR1<1>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>ogR13og/eller R8 og R<14>og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere av S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, s-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle avR10,R<11>, R<12>,R13,R1<4>og R<15>er hydrogen; R<16>, R<17>, R<18>og R<19>hver uavhengig er H, alkyl eller aryl, eller en eller flere av R<16>og R<17>ellerR18og R<19>er alkylen, eventuelt substituert med en eller flere av S03", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin; £■1 £*7178 18 O eller et eller flere av parene av grupper R og R , R og R , R og R og R og R<19>er alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, og R<20>er et linkerelement valgt blant en aktiv ester, et isotiocyanat, et syreklorid, et a-halogenert keton og et azid.
24. Fargestofforbindel se ifølge krav 23,karakterisert vedat minst en av R<10>, R<11>, R12, R13, R14 og R<15>er O-alkyl.
25. Fargestoff orbindel se ifølge krav 24,karakterisert vedat et eller flere par av grupperR4 og R<10>og/eller R<5>og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/eller R8 og R<14>og/eller R<9>og R<15>en brodannende gruppe bestående av alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen eventuelt substituert med en eller flere S03", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin.
26. Fargestoff orbindel se ifølge et hvilket som helst av kravene 23-25,karakterisert vedat R<20>er et linkerelement med strukturen:
der: R<21>er H eller alkyl eller aryl eventuelt substituert med en eller flere av SO3", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin og R<22>er alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eller R<21>og R<22>er en del av en ring, eventuelt substituert med en eller flere av S03", PO3<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin; og R<23>er o-suksinimidyl, o-pentafluorfenyl, Cl eller a-halogenert alkyl.
27. Fargestoff orbindel se ifølge et hvilket som helst av kravene 23-26,karakterisert vedat R10 til R15 hver er O-metyl eller O-etyl.
28. Fargestoff orbindel se ifølge et hvilket som helst av kravene 23-27,karakterisert vedat den videre omfatter et eller flere motioner valgt blant halogenid, BF4", PRe", N03", karboksylat, C104", Li<+>, Na<+>, K<+>, Mg<2+>og Zn<2+>.
29. Fremgangsmåte for detektering eller måling av en analytt ved bruk av et reagens som angitt i et hvilket som helst av kravene 1-22,karakterisertv e d at den omfatter trinnene: å bringe reagenset i kontakt med en prøve; å belyse reagenset og prøven med lys med en bølgelengde innen absorpsj onsspekteret for energidonoren; å detektere ikke-radiativ energioverføring mellom energidonoren og energiakseptoren ved å måle fluorescensen for energidonoren; og å assosiere fluorescensmålingene med nærværet eller konsentrasjonen av analytt.
30. Fremgangsmåte ifølge krav 29,karakterisert vedat fluorescensen hos energidonoren måles ved å utføre intensitetsbaserte eller tidsoppløste fluoresensmålinger.
31. Fremgangsmåte ifølge krav 29 eller 30,karakterisertv e d at analytten måles ved å sammenligne prøvefluorescensmålingene med fluorescensmålinger foretatt ved bruk av kjente konsentrasjoner av analytt.
32. Kompleks av en analytt og et reagens for å detektere analytten der reagenset omfatter en fluorescerende energjdonor og en energiakseptor, og energidonoren og energiakseptoren er slik at når de er tilstrekkelig nær hverandre, blir energi ikke-radiativt overført fra energidonoren etter eksitering av denne til energiakseptor som kvensjer fluorescens for energidonoren,karakterisert vedat energiakseptoren har den følgende generelle formel:
R<1>, R<2>og R<3>uavhengig er H, elektrondonerende substituenter eller elektrontiltrekkende substituenter eller R<3>er festet til en linkerstruktur, forutsatt at minst to av R<1>, R<2>og R<3>er elektrondonerende grupper; R<4>,R<5>,R<6>, R<7>, R<8>og R<9>hver uavhengig er H, halogen, alkyl, aryl, O-alkyl, S-alkyl og R10, R11, R12, R13, R<14>og R<15>hver uavhengig er hydrogen, O-alkyl, S-alkyl, alkyl, eller et eller flere av parene av grupperR<1>og R<4>og/eller R<1>og R<5>og/eller R<2>og R<6>og/eller R<2>og R<7>og/ellerR3 og R8 og/eller R<3>og R<9>og/eller R<4>og R<10>og/ellerR5 og R<11>og/eller R<6>og R<12>og/eller R<7>og R<13>og/eller R<8>og R<14>og/eller R<9>og R<15>er en brodannende gruppe bestående av aryl, alkylen, O-alkylen, S-alkylen eller N-alkylen, eventuelt substituert med en eller flere SO3", P03<2>", OH, O-alkyl, SH, S-alkyl, COOH, COO", ester, amid, halogen, SO-alkyl, S02-alkyl, S02NH2, S02NH-alkyl, S02N-dialkyl, S03-alkyl, CN, sekundært amin eller tertiært amin, forutsatt at ikke alle av R10, R11, R12, R13, R<14>og R<15>er hydrogen; og der nærværet av analytten modulerer avstanden mellom energidonoren og energiakseptoren.
NO20063256A 2003-12-16 2006-07-13 Reagens for detektering av en analytt NO336750B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB0329161.4A GB0329161D0 (en) 2003-12-16 2003-12-16 Reagant for detecting an analyte
PCT/EP2004/014199 WO2005059037A1 (en) 2003-12-16 2004-12-14 Reagent for detecting an analyte

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20063256L NO20063256L (no) 2006-09-14
NO336750B1 true NO336750B1 (no) 2015-10-26

Family

ID=30471172

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20063256A NO336750B1 (no) 2003-12-16 2006-07-13 Reagens for detektering av en analytt

Country Status (12)

Country Link
US (2) US7892748B2 (no)
EP (1) EP1694775B1 (no)
JP (1) JP4959340B2 (no)
CN (1) CN100577741C (no)
AT (1) ATE551401T1 (no)
AU (1) AU2004298540B2 (no)
CA (1) CA2549741C (no)
DK (1) DK1694775T3 (no)
GB (1) GB0329161D0 (no)
NO (1) NO336750B1 (no)
NZ (1) NZ547872A (no)
WO (1) WO2005059037A1 (no)

Families Citing this family (232)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6694191B2 (en) 2000-01-21 2004-02-17 Medtronic Minimed, Inc. Ambulatory medical apparatus and method having telemetry modifiable control software
US8152789B2 (en) 2001-10-23 2012-04-10 Medtronic Minimed, Inc. System and method for providing closed loop infusion formulation delivery
US10080529B2 (en) 2001-12-27 2018-09-25 Medtronic Minimed, Inc. System for monitoring physiological characteristics
GB0329161D0 (en) * 2003-12-16 2004-01-21 Precisense As Reagant for detecting an analyte
GB0426823D0 (en) * 2004-12-07 2005-01-12 Precisense As Sensor for detection of glucose
GB0426822D0 (en) 2004-12-07 2005-01-12 Precisense As Sensor for detection of glucose
US7704704B2 (en) * 2005-09-28 2010-04-27 The Texas A&M University System Implantable system for glucose monitoring using fluorescence quenching
US9056165B2 (en) 2006-09-06 2015-06-16 Medtronic Minimed, Inc. Intelligent therapy recommendation algorithm and method of using the same
AU2008213677A1 (en) 2007-02-06 2008-08-14 Glumetrics, Inc. Optical systems and methods for rationmetric measurement of blood glucose concentration
CA2686065A1 (en) 2007-05-10 2008-11-20 Glumetrics, Inc. Equilibrium non-consuming fluorescence sensor for real time intravascular glucose measurement
US8700114B2 (en) 2008-07-31 2014-04-15 Medtronic Minmed, Inc. Analyte sensor apparatuses comprising multiple implantable sensor elements and methods for making and using them
US8070723B2 (en) 2009-12-31 2011-12-06 Medtronic Minimed, Inc. Activity guard
US10010272B2 (en) 2010-05-27 2018-07-03 Profusa, Inc. Tissue-integrating electronic apparatus
US9215995B2 (en) 2010-06-23 2015-12-22 Medtronic Minimed, Inc. Sensor systems having multiple probes and electrode arrays
CA2813041C (en) 2010-10-06 2018-08-21 Natalie Ann Wisniewski Tissue-integrating sensors
US8628510B2 (en) 2010-12-22 2014-01-14 Medtronic Minimed, Inc. Monitoring the operating health of a force sensor in a fluid infusion device
US8900206B2 (en) 2011-02-22 2014-12-02 Medtronic Minimed, Inc. Pressure vented fluid reservoir for a fluid infusion device
US11266823B2 (en) 2011-02-22 2022-03-08 Medtronic Minimed, Inc. Retractable sealing assembly for a fluid reservoir of a fluid infusion device
US9008744B2 (en) 2011-05-06 2015-04-14 Medtronic Minimed, Inc. Method and apparatus for continuous analyte monitoring
US8795231B2 (en) 2011-05-10 2014-08-05 Medtronic Minimed, Inc. Automated reservoir fill system
JP6127972B2 (ja) 2011-09-09 2017-05-17 コニカミノルタ株式会社 組織染色方法
DK2760432T3 (da) 2011-09-27 2019-06-11 Medtronic Minimed Inc Fremgangsmåde til funktionalisering af en porøs membranafdækning på en optisk sensor til fremme af kobling af et antitrombogent middel
US9989522B2 (en) 2011-11-01 2018-06-05 Medtronic Minimed, Inc. Methods and materials for modulating start-up time and air removal in dry sensors
US8999720B2 (en) 2011-11-17 2015-04-07 Medtronic Minimed, Inc. Aqueous radiation protecting formulations and methods for making and using them
US9610401B2 (en) 2012-01-13 2017-04-04 Medtronic Minimed, Inc. Infusion set component with modular fluid channel element
US9493807B2 (en) 2012-05-25 2016-11-15 Medtronic Minimed, Inc. Foldover sensors and methods for making and using them
US9861746B2 (en) 2012-06-08 2018-01-09 Medtronic Minimed, Inc. Application of electrochemical impedance spectroscopy in sensor systems, devices, and related methods
US9682188B2 (en) 2012-08-21 2017-06-20 Medtronic Minimed, Inc. Reservoir fluid volume estimator and medical device incorporating same
US9662445B2 (en) 2012-08-30 2017-05-30 Medtronic Minimed, Inc. Regulating entry into a closed-loop operating mode of an insulin infusion system
US10130767B2 (en) 2012-08-30 2018-11-20 Medtronic Minimed, Inc. Sensor model supervisor for a closed-loop insulin infusion system
US9757057B2 (en) 2012-11-07 2017-09-12 Medtronic Minimed, Inc. Dry insertion and one-point in vivo calibration of an optical analyte sensor
US9265455B2 (en) 2012-11-13 2016-02-23 Medtronic Minimed, Inc. Methods and systems for optimizing sensor function by the application of voltage
US10194840B2 (en) 2012-12-06 2019-02-05 Medtronic Minimed, Inc. Microarray electrodes useful with analyte sensors and methods for making and using them
US10426383B2 (en) 2013-01-22 2019-10-01 Medtronic Minimed, Inc. Muting glucose sensor oxygen response and reducing electrode edge growth with pulsed current plating
US9338819B2 (en) 2013-05-29 2016-05-10 Medtronic Minimed, Inc. Variable data usage personal medical system and method
US10194864B2 (en) 2013-06-21 2019-02-05 Medtronic Minimed, Inc. Anchoring apparatus and method for attaching device on body
US9880528B2 (en) 2013-08-21 2018-01-30 Medtronic Minimed, Inc. Medical devices and related updating methods and systems
US8979808B1 (en) 2013-10-14 2015-03-17 Medtronic Minimed, Inc. On-body injector and method of use
US9265881B2 (en) 2013-10-14 2016-02-23 Medtronic Minimed, Inc. Therapeutic agent injection device
US9375537B2 (en) 2013-10-14 2016-06-28 Medtronic Minimed, Inc. Therapeutic agent injection device
US8979799B1 (en) 2013-10-14 2015-03-17 Medtronic Minimed, Inc. Electronic injector
US9936905B2 (en) 2013-10-25 2018-04-10 Medtronic Minimed, Inc. Sensor with optical interface
US9226709B2 (en) 2013-11-04 2016-01-05 Medtronic Minimed, Inc. ICE message system and method
US9267875B2 (en) 2013-11-21 2016-02-23 Medtronic Minimed, Inc. Accelerated life testing device and method
US9750877B2 (en) 2013-12-11 2017-09-05 Medtronic Minimed, Inc. Predicted time to assess and/or control a glycemic state
US10105488B2 (en) 2013-12-12 2018-10-23 Medtronic Minimed, Inc. Predictive infusion device operations and related methods and systems
US9849240B2 (en) 2013-12-12 2017-12-26 Medtronic Minimed, Inc. Data modification for predictive operations and devices incorporating same
US9603561B2 (en) 2013-12-16 2017-03-28 Medtronic Minimed, Inc. Methods and systems for improving the reliability of orthogonally redundant sensors
US10638947B2 (en) 2013-12-16 2020-05-05 Medtronic Minimed, Inc. Use of electrochemical impedance spectroscopy (EIS) in intelligent diagnostics
US9779226B2 (en) 2013-12-18 2017-10-03 Medtronic Minimed, Inc. Fingerprint enhanced authentication for medical devices in wireless networks
US9143941B2 (en) 2013-12-18 2015-09-22 Medtronic Minimed, Inc. Secure communication by user selectable communication range
US9694132B2 (en) 2013-12-19 2017-07-04 Medtronic Minimed, Inc. Insertion device for insertion set
DE112014005133T5 (de) * 2013-12-26 2016-08-11 Aisin Aw Co., Ltd. Fahrzeugantriebsvorrichtung
US9861748B2 (en) 2014-02-06 2018-01-09 Medtronic Minimed, Inc. User-configurable closed-loop notifications and infusion systems incorporating same
US9388805B2 (en) 2014-03-24 2016-07-12 Medtronic Minimed, Inc. Medication pump test device and method of use
US9689830B2 (en) 2014-04-03 2017-06-27 Medtronic Minimed, Inc. Sensor detection pads with integrated fuse
US9707336B2 (en) 2014-04-07 2017-07-18 Medtronic Minimed, Inc. Priming detection system and method of using the same
US10232113B2 (en) 2014-04-24 2019-03-19 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and related methods and systems for regulating insulin on board
US9681828B2 (en) 2014-05-01 2017-06-20 Medtronic Minimed, Inc. Physiological characteristic sensors and methods for forming such sensors
US9901305B2 (en) 2014-06-13 2018-02-27 Medtronic Minimed, Inc. Physiological sensor history backfill system and method
CN106661337A (zh) * 2014-07-04 2017-05-10 富士胶片株式会社 新型化合物、染色或印花用着色组合物、喷墨用油墨、布帛印花方法及被染色或印花布帛
US10532150B2 (en) 2014-07-21 2020-01-14 Medtronic Minimed, Inc. Smart connection interface
US9717845B2 (en) 2014-08-19 2017-08-01 Medtronic Minimed, Inc. Geofencing for medical devices
US20160051755A1 (en) 2014-08-25 2016-02-25 Medtronic Minimed, Inc. Low cost fluid delivery device
US9839753B2 (en) 2014-09-26 2017-12-12 Medtronic Minimed, Inc. Systems for managing reservoir chamber pressure
US10279126B2 (en) 2014-10-07 2019-05-07 Medtronic Minimed, Inc. Fluid conduit assembly with gas trapping filter in the fluid flow path
US9841014B2 (en) 2014-10-20 2017-12-12 Medtronic Minimed, Inc. Insulin pump data acquisition device and system
US9592335B2 (en) 2014-10-20 2017-03-14 Medtronic Minimed, Inc. Insulin pump data acquisition device
US9901675B2 (en) 2014-11-25 2018-02-27 Medtronic Minimed, Inc. Infusion set insertion device and method of use
US9731067B2 (en) 2014-11-25 2017-08-15 Medtronic Minimed, Inc. Mechanical injection pump and method of use
US9943645B2 (en) 2014-12-04 2018-04-17 Medtronic Minimed, Inc. Methods for operating mode transitions and related infusion devices and systems
US9636453B2 (en) 2014-12-04 2017-05-02 Medtronic Minimed, Inc. Advance diagnosis of infusion device operating mode viability
US10307535B2 (en) 2014-12-19 2019-06-04 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and related methods and systems for preemptive alerting
US9717848B2 (en) 2015-01-22 2017-08-01 Medtronic Minimed, Inc. Data derived pre-bolus delivery
US9872954B2 (en) 2015-03-02 2018-01-23 Medtronic Minimed, Inc. Belt clip
US10307528B2 (en) 2015-03-09 2019-06-04 Medtronic Minimed, Inc. Extensible infusion devices and related methods
US10449298B2 (en) 2015-03-26 2019-10-22 Medtronic Minimed, Inc. Fluid injection devices and related methods
US10130757B2 (en) 2015-05-01 2018-11-20 Medtronic Minimed, Inc. Method and system for leakage detection in portable medical devices
US9999721B2 (en) 2015-05-26 2018-06-19 Medtronic Minimed, Inc. Error handling in infusion devices with distributed motor control and related operating methods
US10478557B2 (en) 2015-08-21 2019-11-19 Medtronic Minimed, Inc. Personalized parameter modeling methods and related devices and systems
US10463297B2 (en) 2015-08-21 2019-11-05 Medtronic Minimed, Inc. Personalized event detection methods and related devices and systems
US10293108B2 (en) 2015-08-21 2019-05-21 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and related patient ratio adjustment methods
US10201657B2 (en) 2015-08-21 2019-02-12 Medtronic Minimed, Inc. Methods for providing sensor site rotation feedback and related infusion devices and systems
US10117992B2 (en) 2015-09-29 2018-11-06 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and related rescue detection methods
US9992818B2 (en) 2015-10-06 2018-06-05 Medtronic Minimed, Inc. Protocol translation device
US11666702B2 (en) 2015-10-19 2023-06-06 Medtronic Minimed, Inc. Medical devices and related event pattern treatment recommendation methods
US11501867B2 (en) 2015-10-19 2022-11-15 Medtronic Minimed, Inc. Medical devices and related event pattern presentation methods
US9757511B2 (en) 2015-10-19 2017-09-12 Medtronic Minimed, Inc. Personal medical device and method of use with restricted mode challenge
US10146911B2 (en) 2015-10-23 2018-12-04 Medtronic Minimed, Inc. Medical devices and related methods and systems for data transfer
US10037722B2 (en) 2015-11-03 2018-07-31 Medtronic Minimed, Inc. Detecting breakage in a display element
US10827959B2 (en) 2015-11-11 2020-11-10 Medtronic Minimed, Inc. Sensor set
US9848805B2 (en) 2015-12-18 2017-12-26 Medtronic Minimed, Inc. Biostable glucose permeable polymer
US10327680B2 (en) 2015-12-28 2019-06-25 Medtronic Minimed, Inc. Sensor systems, devices, and methods for continuous glucose monitoring
US10327686B2 (en) 2015-12-28 2019-06-25 Medtronic Minimed, Inc. Sensor systems, devices, and methods for continuous glucose monitoring
US20170184527A1 (en) 2015-12-28 2017-06-29 Medtronic Minimed, Inc. Sensor systems, devices, and methods for continuous glucose monitoring
US10349872B2 (en) 2015-12-28 2019-07-16 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for sensor fusion
US20170181672A1 (en) 2015-12-28 2017-06-29 Medtronic Minimed, Inc. Sensor systems, devices, and methods for continuous glucose monitoring
CA3013053A1 (en) 2016-01-28 2017-08-03 Savor Labs, Inc. Method and apparatus for tracking of food intake and other behaviors and providing relevant feedback
US10790054B1 (en) 2016-12-07 2020-09-29 Medtronic Minimed, Inc. Method and apparatus for tracking of food intake and other behaviors and providing relevant feedback
WO2017157980A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Mipsalus Aps Detection method and means therefor
US10765348B2 (en) 2016-04-08 2020-09-08 Medtronic Minimed, Inc. Sensor and transmitter product
US10413183B2 (en) 2016-04-08 2019-09-17 Medtronic Minimed, Inc. Insertion device
US10765369B2 (en) 2016-04-08 2020-09-08 Medtronic Minimed, Inc. Analyte sensor
US10589038B2 (en) 2016-04-27 2020-03-17 Medtronic Minimed, Inc. Set connector systems for venting a fluid reservoir
US9970893B2 (en) 2016-04-28 2018-05-15 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for electrode capacitance calculation and application
US10426389B2 (en) 2016-04-28 2019-10-01 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for electrode capacitance calculation and application
US10324058B2 (en) 2016-04-28 2019-06-18 Medtronic Minimed, Inc. In-situ chemistry stack for continuous glucose sensors
US10086134B2 (en) 2016-05-26 2018-10-02 Medtronic Minimed, Inc. Systems for set connector assembly with lock
US10086133B2 (en) 2016-05-26 2018-10-02 Medtronic Minimed, Inc. Systems for set connector assembly with lock
US9968737B2 (en) 2016-05-26 2018-05-15 Medtronic Minimed, Inc. Systems for set connector assembly with lock
US11134872B2 (en) 2016-06-06 2021-10-05 Medtronic Minimed, Inc. Thermally stable glucose limiting membrane for glucose sensors
US11179078B2 (en) 2016-06-06 2021-11-23 Medtronic Minimed, Inc. Polycarbonate urea/urethane polymers for use with analyte sensors
US10485924B2 (en) 2016-09-06 2019-11-26 Medtronic Minimed, Inc. Pump clip for a fluid infusion device
US10854322B2 (en) 2016-12-21 2020-12-01 Medtronic Minimed, Inc. Infusion systems and methods for patient activity adjustments
US10709834B2 (en) 2016-12-21 2020-07-14 Medtronic Minimed, Inc. Medication fluid infusion set component with integrated physiological analyte sensor, and corresponding fluid infusion device
US10272201B2 (en) 2016-12-22 2019-04-30 Medtronic Minimed, Inc. Insertion site monitoring methods and related infusion devices and systems
US11331018B2 (en) 2016-12-22 2022-05-17 Profusa, Inc. System and single-channel biosensor for and method of determining analyte value
US11197949B2 (en) 2017-01-19 2021-12-14 Medtronic Minimed, Inc. Medication infusion components and systems
US10821225B2 (en) 2017-01-20 2020-11-03 Medtronic Minimed, Inc. Cannulas for drug delivery devices
US10552580B2 (en) 2017-02-07 2020-02-04 Medtronic Minimed, Inc. Infusion system consumables and related calibration methods
US10646649B2 (en) 2017-02-21 2020-05-12 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and fluid identification apparatuses and methods
US20180249935A1 (en) 2017-03-06 2018-09-06 Medtronic Minimed, Inc. Colorometric sensor for the non-invasive screening of glucose in sweat in pre and type 2 diabetes
US11134868B2 (en) 2017-03-17 2021-10-05 Medtronic Minimed, Inc. Metal pillar device structures and methods for making and using them in electrochemical and/or electrocatalytic applications
US11064951B2 (en) 2017-03-24 2021-07-20 Medtronic Minimed, Inc. Patient data management systems and querying methods
US10543288B2 (en) 2017-04-28 2020-01-28 Medtronic Minimed, Inc. Modified-dextrans for use in optical glucose assays
US10792378B2 (en) 2017-04-28 2020-10-06 Medtronics Minimed, Inc. Using a blue-shifted reference dye in an optical glucose assay
US20180328877A1 (en) 2017-05-11 2018-11-15 Medtronic Minimed, Inc. Analyte sensors and methods for fabricating analyte sensors
US10856784B2 (en) 2017-06-30 2020-12-08 Medtronic Minimed, Inc. Sensor initialization methods for faster body sensor response
US10596295B2 (en) 2017-08-28 2020-03-24 Medtronic Minimed, Inc. Adhesive patch arrangement for a physiological characteristic sensor, and related sensor assembly
US11412960B2 (en) 2017-08-28 2022-08-16 Medtronic Minimed, Inc. Pedestal for sensor assembly packaging and sensor introducer removal
US11311217B2 (en) 2017-09-13 2022-04-26 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for calibration and optimization of glucose sensors and sensor output
US10874300B2 (en) 2017-09-26 2020-12-29 Medtronic Minimed, Inc. Waferscale physiological characteristic sensor package with integrated wireless transmitter
US10525244B2 (en) 2017-09-28 2020-01-07 Medtronic Minimed, Inc. Microneedle arrays and methods for fabricating microneedle arrays
US10524730B2 (en) 2017-09-28 2020-01-07 Medtronic Minimed, Inc. Medical devices with microneedle arrays and methods for operating such medical devices
US11676734B2 (en) 2017-11-15 2023-06-13 Medtronic Minimed, Inc. Patient therapy management system that leverages aggregated patient population data
US11471082B2 (en) 2017-12-13 2022-10-18 Medtronic Minimed, Inc. Complex redundancy in continuous glucose monitoring
US11213230B2 (en) 2017-12-13 2022-01-04 Medtronic Minimed, Inc. Optional sensor calibration in continuous glucose monitoring
US11439352B2 (en) 2018-01-17 2022-09-13 Medtronic Minimed, Inc. Medical device with adhesive patch longevity
US12042284B2 (en) 2018-01-23 2024-07-23 Medtronic Minimed, Inc. Implantable polymer surfaces exhibiting reduced in vivo inflammatory responses
US11186859B2 (en) 2018-02-07 2021-11-30 Medtronic Minimed, Inc. Multilayer electrochemical analyte sensors and methods for making and using them
US11583213B2 (en) 2018-02-08 2023-02-21 Medtronic Minimed, Inc. Glucose sensor electrode design
US11220735B2 (en) 2018-02-08 2022-01-11 Medtronic Minimed, Inc. Methods for controlling physical vapor deposition metal film adhesion to substrates and surfaces
US11672446B2 (en) 2018-03-23 2023-06-13 Medtronic Minimed, Inc. Insulin delivery recommendations based on nutritional information
US11147919B2 (en) 2018-04-23 2021-10-19 Medtronic Minimed, Inc. Methodology to recommend and implement adjustments to a fluid infusion device of a medication delivery system
US11158413B2 (en) 2018-04-23 2021-10-26 Medtronic Minimed, Inc. Personalized closed loop medication delivery system that utilizes a digital twin of the patient
US20190341149A1 (en) 2018-05-07 2019-11-07 Medtronic Minimed, Inc. Augmented reality guidance for medical devices
CN108822005B (zh) * 2018-06-13 2021-04-09 郑州大学 一种基于孔雀石绿与亚硫酸氢根加成产物的可逆比色探针及其制备、应用
US11761077B2 (en) 2018-08-01 2023-09-19 Medtronic Minimed, Inc. Sputtering techniques for biosensors
US11122697B2 (en) 2018-08-07 2021-09-14 Medtronic Minimed, Inc. Method of fabricating an electronic medical device, including overmolding an assembly with thermoplastic material
US11021731B2 (en) 2018-08-23 2021-06-01 Medtronic Minimed, Inc. Analyte sensing layers, analyte sensors and methods for fabricating the same
US10828419B2 (en) 2018-09-04 2020-11-10 Medtronic Minimed, Inc. Infusion set with pivoting metal cannula and strain relief
US11547799B2 (en) 2018-09-20 2023-01-10 Medtronic Minimed, Inc. Patient day planning systems and methods
US10980942B2 (en) 2018-09-28 2021-04-20 Medtronic Minimed, Inc. Infusion devices and related meal bolus adjustment methods
US11097052B2 (en) 2018-09-28 2021-08-24 Medtronic Minimed, Inc. Insulin infusion device with configurable target blood glucose value for automatic basal insulin delivery operation
US10894126B2 (en) 2018-09-28 2021-01-19 Medtronic Minimed, Inc. Fluid infusion system that automatically determines and delivers a correction bolus
US11071821B2 (en) 2018-09-28 2021-07-27 Medtronic Minimed, Inc. Insulin infusion device with efficient confirmation routine for blood glucose measurements
US20200116748A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods for measurement of fluid delivery
US10946140B2 (en) 2018-10-11 2021-03-16 Medtronic Minimed, Inc. Systems and methods for measurement of fluid delivery
US11367517B2 (en) 2018-10-31 2022-06-21 Medtronic Minimed, Inc. Gesture-based detection of a physical behavior event based on gesture sensor data and supplemental information from at least one external source
US20200289373A1 (en) 2018-10-31 2020-09-17 Medtronic Minimed, Inc. Automated detection of a physical behavior event and corresponding adjustment of a physiological characteristic sensor device
US11367516B2 (en) 2018-10-31 2022-06-21 Medtronic Minimed, Inc. Automated detection of a physical behavior event and corresponding adjustment of a medication dispensing system
US11363986B2 (en) 2018-10-31 2022-06-21 Medtronic Minimed, Inc. Automated detection of a physical behavior event and corresponding adjustment of a medication dispensing system
US11382541B2 (en) 2018-11-16 2022-07-12 Medtronic Minimed, Inc. Miniaturized analyte sensor
US11540750B2 (en) 2018-12-19 2023-01-03 Medtronic Minimed, Inc Systems and methods for physiological characteristic monitoring
US11439752B2 (en) 2019-02-01 2022-09-13 Medtronic Minimed, Inc. Methods and devices for occlusion detection using actuator sensors
US12114972B2 (en) 2019-02-01 2024-10-15 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for continuous glucose monitoring
US11389587B2 (en) 2019-02-06 2022-07-19 Medtronic Minimed, Inc. Patient monitoring systems and related presentation methods
US11191899B2 (en) 2019-02-12 2021-12-07 Medtronic Minimed, Inc. Infusion systems and related personalized bolusing methods
US12082910B2 (en) 2019-02-12 2024-09-10 Medtronic Minimed, Inc. Miniaturized noninvasive glucose sensor and continuous glucose monitoring system
US11311215B2 (en) 2019-04-04 2022-04-26 Medtronic Minimed, Inc. Measurement of device materials using non-Faradaic electrochemical impedance spectroscopy
US11986629B2 (en) 2019-06-11 2024-05-21 Medtronic Minimed, Inc. Personalized closed loop optimization systems and methods
US11224361B2 (en) 2019-04-23 2022-01-18 Medtronic Minimed, Inc. Flexible physiological characteristic sensor assembly
US11317867B2 (en) 2019-04-23 2022-05-03 Medtronic Minimed, Inc. Flexible physiological characteristic sensor assembly
US10939488B2 (en) 2019-05-20 2021-03-02 Medtronic Minimed, Inc. Method and system for controlling communication between devices of a wireless body area network for an medical device system
US11793930B2 (en) 2019-06-06 2023-10-24 Medtronic Minimed, Inc. Fluid infusion systems
US11448611B2 (en) 2019-07-03 2022-09-20 Medtronic Minimed, Inc. Structurally reinforced sensor and method for manufacturing the same
US11617828B2 (en) 2019-07-17 2023-04-04 Medtronic Minimed, Inc. Reservoir connection interface with detectable signature
US11718865B2 (en) 2019-07-26 2023-08-08 Medtronic Minimed, Inc. Methods to improve oxygen delivery to implantable sensors
US11523757B2 (en) 2019-08-01 2022-12-13 Medtronic Minimed, Inc. Micro-pillar working electrodes design to reduce backflow of hydrogen peroxide in glucose sensor
US20220039755A1 (en) 2020-08-06 2022-02-10 Medtronic Minimed, Inc. Machine learning-based system for estimating glucose values
US11617522B2 (en) 2019-08-06 2023-04-04 Medtronic Minimed, Inc. Sensor inserter with disposal lockout state
US11883208B2 (en) 2019-08-06 2024-01-30 Medtronic Minimed, Inc. Machine learning-based system for estimating glucose values based on blood glucose measurements and contextual activity data
US11724045B2 (en) 2019-08-21 2023-08-15 Medtronic Minimed, Inc. Connection of a stopper and piston in a fluid delivery device
US20210060244A1 (en) 2019-08-28 2021-03-04 Medtronic Minimed, Inc. Method and system for verifying whether a non-medical client device is operating correctly with a medical device controlled by the non-medical client device and causing a notification to be generated
US11571515B2 (en) 2019-08-29 2023-02-07 Medtronic Minimed, Inc. Controlling medical device operation and features based on detected patient sleeping status
US11565044B2 (en) 2019-09-12 2023-01-31 Medtronic Minimed, Inc. Manufacturing controls for sensor calibration using fabrication measurements
US11654235B2 (en) 2019-09-12 2023-05-23 Medtronic Minimed, Inc. Sensor calibration using fabrication measurements
US11241537B2 (en) 2019-09-20 2022-02-08 Medtronic Minimed, Inc. Contextual personalized closed-loop adjustment methods and systems
US11213623B2 (en) 2019-09-20 2022-01-04 Medtronic Minimed, Inc. Infusion systems and related personalized bolusing methods
US11511099B2 (en) 2019-10-08 2022-11-29 Medtronic Minimed, Inc. Apparatus for detecting mating of a cap with a fluid delivery device and method
US11638545B2 (en) 2019-10-16 2023-05-02 Medtronic Minimed, Inc. Reducing sensor foreign body response via high surface area metal structures
US11496083B2 (en) 2019-11-15 2022-11-08 Medtronic Minimed, Inc. Devices and methods for controlling electromechanical actuators
US11944784B2 (en) 2019-11-18 2024-04-02 Medtronic Minimed, Inc. Combined analyte sensor and infusion set
US11559624B2 (en) 2019-11-21 2023-01-24 Medtronic Minimed, Inc. Systems for wearable infusion port and associated pump
US11324881B2 (en) 2019-11-21 2022-05-10 Medtronic Minimed, Inc. Systems for wearable infusion port and associated pump
US20210174960A1 (en) 2019-12-09 2021-06-10 Medtronic Minimed, Inc. Generative modeling methods and systems for simulating sensor measurements
US11938301B2 (en) 2019-12-13 2024-03-26 Medtronic Minimed, Inc. Controlling medication delivery system operation and features based on automatically detected muscular movements
US11786655B2 (en) 2019-12-13 2023-10-17 Medtronic Minimed, Inc. Context-sensitive predictive operation of a medication delivery system in response to gesture-indicated activity changes
EP4073811A1 (en) 2019-12-13 2022-10-19 Medtronic MiniMed, Inc. Method and system for training a mathematical model of a user based on data received from a discrete insulin therapy system
US11488700B2 (en) 2019-12-13 2022-11-01 Medtronic Minimed, Inc. Medical device configuration procedure guidance responsive to detected gestures
US11690573B2 (en) 2019-12-18 2023-07-04 Medtronic Minimed, Inc. Systems for skin patch gravity resistance
US11375955B2 (en) 2019-12-18 2022-07-05 Medtronic Minimed, Inc. Systems for skin patch gravity resistance
US11821022B2 (en) 2019-12-23 2023-11-21 Medtronic Minimed, Inc. Ethylene oxide absorption layer for analyte sensing and method
US11244753B2 (en) 2020-01-30 2022-02-08 Medtronic Minimed, Inc. Activity monitoring systems and methods
US11957488B2 (en) 2020-02-07 2024-04-16 Medtronic Minimed, Inc. Systems for medical device breathability
US11833327B2 (en) 2020-03-06 2023-12-05 Medtronic Minimed, Inc. Analyte sensor configuration and calibration based on data collected from a previously used analyte sensor
USD958167S1 (en) 2020-03-23 2022-07-19 Companion Medical, Inc. Display screen with graphical user interface
USD958817S1 (en) 2020-03-31 2022-07-26 Medtronic Minimed, Inc. Display screen with graphical user interface
US11596359B2 (en) 2020-04-09 2023-03-07 Medtronic Minimed, Inc. Methods and systems for mitigating sensor error propagation
US11690955B2 (en) 2020-04-23 2023-07-04 Medtronic Minimed, Inc. Continuous analyte sensor quality measures and related therapy actions for an automated therapy delivery system
US11583631B2 (en) 2020-04-23 2023-02-21 Medtronic Minimed, Inc. Intuitive user interface features and related functionality for a therapy delivery system
US11272884B2 (en) 2020-06-04 2022-03-15 Medtronic Minimed, Inc. Liner for adhesive skin patch
US12064236B2 (en) 2020-06-11 2024-08-20 Medtronic Minimed, Inc. Methods, systems, and devices for improved sensors for continuous glucose monitoring
US11650248B2 (en) 2020-07-28 2023-05-16 Medtronic Minimed, Inc. Electrical current measurement system
US11960311B2 (en) 2020-07-28 2024-04-16 Medtronic Minimed, Inc. Linear voltage regulator with isolated supply current
US12082924B2 (en) 2020-07-31 2024-09-10 Medtronic Minimed, Inc. Sensor identification and integrity check design
US11445807B2 (en) 2020-07-31 2022-09-20 Medtronic Minimed, Inc. Pump clip with tube clamp for a fluid infusion device
US11839743B2 (en) 2020-10-07 2023-12-12 Medtronic Minimed, Inc. Graphic user interface for automated infusate delivery
US11737783B2 (en) 2020-10-16 2023-08-29 Medtronic Minimed, Inc. Disposable medical device introduction system
US11844930B2 (en) 2020-10-29 2023-12-19 Medtronic Minimed, Inc. User-mountable electronic device with accelerometer-based activation feature
US11806503B2 (en) 2020-10-29 2023-11-07 Medtronic Minimed, Inc. Removable wearable device and related attachment methods
US11534086B2 (en) 2020-10-30 2022-12-27 Medtronic Minimed, Inc. Low-profile wearable medical device
US11951281B2 (en) 2020-11-11 2024-04-09 Medtronic Minimed, Inc. Fluid conduit insertion devices
US11998330B2 (en) 2021-01-29 2024-06-04 Medtronic Minimed, Inc. Interference rejection membranes useful with analyte sensors
EP4288971A1 (en) 2021-02-02 2023-12-13 Medtronic MiniMed, Inc. Dynamic adjustments of physiological data
US11904146B2 (en) 2021-06-08 2024-02-20 Medtronic Minimed, Inc. Medicine injection devices, systems, and methods for medicine administration and tracking
US11792714B2 (en) 2021-06-16 2023-10-17 Medtronic Minimed, Inc. Medicine administration in dynamic networks
US11817285B2 (en) 2021-09-02 2023-11-14 Medtronic Minimed, Inc. Ingress-tolerant input devices comprising sliders
US11587742B1 (en) 2021-09-02 2023-02-21 Medtronic Minimed, Inc. Ingress-tolerant input devices
US11896447B2 (en) 2022-03-14 2024-02-13 Medtronic Minimed, Inc. Safeguards against separation from portable medicine delivery devices
US12011293B2 (en) 2022-04-26 2024-06-18 Medtronic Minimed, Inc. Energy management based on a closed switch configuration
US11997806B2 (en) 2022-04-26 2024-05-28 Medtronic Minimed, Inc. Energy management based on an open switch configuration

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4679562A (en) 1983-02-16 1987-07-14 Cardiac Pacemakers, Inc. Glucose sensor
CA1341077C (en) 1988-03-31 2000-08-08 Randell L. Mills Luminide and macroluminide class of pharmaceuticals
US5431160A (en) 1989-07-19 1995-07-11 University Of New Mexico Miniature implantable refillable glucose sensor and material therefor
US5194393A (en) 1989-11-21 1993-03-16 Bayar Aktiengesellschaft Optical biosensor and method of use
US5342789A (en) 1989-12-14 1994-08-30 Sensor Technologies, Inc. Method and device for detecting and quantifying glucose in body fluids
CA2053449A1 (en) 1990-10-16 1992-04-17 Henry K. Hui Optical fiber ph microsensor and method of manufacture
US6256522B1 (en) 1992-11-23 2001-07-03 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Sensors for continuous monitoring of biochemicals and related method
US6002954A (en) 1995-11-22 1999-12-14 The Regents Of The University Of California Detection of biological molecules using boronate-based chemical amplification and optical sensors
US5800996A (en) * 1996-05-03 1998-09-01 The Perkin Elmer Corporation Energy transfer dyes with enchanced fluorescence
US6080852A (en) 1996-06-27 2000-06-27 The Perkin-Elmer Corporation 4,7-dichlororhodamine dyes
US6008379A (en) 1997-10-01 1999-12-28 The Perkin-Elmer Corporation Aromatic-substituted xanthene dyes
JP4008996B2 (ja) * 1997-12-24 2007-11-14 浜松ホトニクス株式会社 標的核酸検出プローブ
US6485703B1 (en) * 1998-07-31 2002-11-26 The Texas A&M University System Compositions and methods for analyte detection
JP2000184894A (ja) 1998-10-15 2000-07-04 Japan Bioindustry Association 一対の核酸プロ―ブおよびそのプロ―ブを用いる複合微生物系または共生微生物系における特定グル―プ若しくは特定菌の存在量を測定する方法
US6656927B1 (en) 1999-06-02 2003-12-02 Tetsuo Nagano Ip3 receptor ligands
US20020102267A1 (en) * 1999-10-21 2002-08-01 Lu Peter S. CLASP-5 transmembrane protein
US20020076741A1 (en) * 2000-02-11 2002-06-20 Tencza Sarah Burroughs Peptide biosensors for anthrax protease
GB0025147D0 (en) * 2000-10-13 2000-11-29 Torsana Diabetes Diagnostics A Optical sensor for in situ measurement of analytes
AU2002251944A1 (en) 2001-02-15 2002-09-04 Medtronic Minimed, Inc. Polymers functionalized with fluorescent boronate motifs
US7045361B2 (en) 2001-09-12 2006-05-16 Medtronic Minimed, Inc. Analyte sensing via acridine-based boronate biosensors
US6784288B2 (en) * 2001-11-08 2004-08-31 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences of monkey cathepsin S
US7297548B2 (en) 2003-03-28 2007-11-20 Terumo Kabushiki Kaisha Solid-phase saccharide sensing compounds
GB0329161D0 (en) * 2003-12-16 2004-01-21 Precisense As Reagant for detecting an analyte

Also Published As

Publication number Publication date
ATE551401T1 (de) 2012-04-15
EP1694775A1 (en) 2006-08-30
WO2005059037B1 (en) 2005-09-15
GB0329161D0 (en) 2004-01-21
AU2004298540B2 (en) 2009-04-23
DK1694775T3 (da) 2012-07-09
EP1694775B1 (en) 2012-03-28
CN100577741C (zh) 2010-01-06
US20110111519A1 (en) 2011-05-12
US20070148652A1 (en) 2007-06-28
WO2005059037A1 (en) 2005-06-30
NO20063256L (no) 2006-09-14
JP4959340B2 (ja) 2012-06-20
US7892748B2 (en) 2011-02-22
CA2549741A1 (en) 2005-06-30
NZ547872A (en) 2010-03-26
CN1902283A (zh) 2007-01-24
CA2549741C (en) 2013-02-05
US8318443B2 (en) 2012-11-27
AU2004298540A1 (en) 2005-06-30
JP2007518844A (ja) 2007-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO336750B1 (no) Reagens for detektering av en analytt
Charier et al. An efficient fluorescent probe for ratiometric pH measurements in aqueous solutions
Parkesh et al. Highly selective 4-amino-1, 8-naphthalimide based fluorescent photoinduced electron transfer (PET) chemosensors for Zn (II) under physiological pH conditions
US10352938B2 (en) Macrocyclic HOPO chelators
CA2449201C (en) Acridone derivatives as labels for fluorescence detection of target materials
US20050227299A1 (en) Fluorescent dyes (AIDA) for solid phase and solution phase screening
DE3526565A1 (de) Resorufin-derivate, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung in fluoreszenzimmunoassays
JP2020506163A (ja) クリプテート誘導体、及び発光ランタニド錯体としてのそれらの使用
US9745318B2 (en) Fluorescent red emitting functionalizable calcium indicators
JP6275689B2 (ja) 蛍光プローブ
Hovor et al. Water-soluble norsquaraine dyes for protein labeling and pH-sensing applications
US20110117666A1 (en) Fluorescent probe
Di Maria et al. Live cell cytoplasm staining and selective labeling of intracellular proteins by non-toxic cell-permeant thiophene fluorophores
JP7231621B2 (ja) 新規水溶性一分枝状および二分枝状錯化剤並びに対応するランタニド錯体
US9958452B2 (en) Highly fluorogenic protein labelling agents
CN112851575B (zh) 具有聚集诱导发光性质的比率型溶酶体pH探针及应用
Nacheva et al. Fluorescent properties and resonance energy transfer of 3, 4-bis (2, 4-difluorophenyl)-maleimide
CN115028562A (zh) 一种多硫芳香化合物及其制备方法和应用
Yao Design and Synthesis of Luminescent Lanthanide Complexes as Hydrogen Sulfide Probes
JP2018065768A (ja) レシオ法を用いた細胞内酸素濃度測定試薬

Legal Events

Date Code Title Description
MM1K Lapsed by not paying the annual fees