NO173805B - Fremgangsmaate for frysetoerking av cyklofosfamid - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en totrinnsprosess for frysetørking av cyklofosfamid (CPA) hydrat.

Farmasøytika, biologiske prøver og næringsmidler er blant de hyppigst frysetørkede eller lyofiliserte stoffer. Selv om det synes relativt lett å oppnå gode resultater, nemlig tørr tilstand, ved det å starte med en vandig oppløsning av et farmasøytikum og så fryse oppløsningen og sublimere den resulterende is, er det ikke dette. Formålet med frysetørking er å minimalisere endringene i egenskapene til stoffet mens man forbedrer stabiliteten ved eller nær romtemperatur. Meget er publisert når det gjelder hvordan dette skal gjøres effektivt, se for eksempel "Edwards Freezedrying Handbook", av Terence W.G. Rowe og John W. Snowman, publisert av Edwin High Vacuum, Crawley, England (1979). Problemet er at på et eller annet trinn av frysetørkingen blir det frysetørkede materialet forandret på uønsket måte.

En stor del av godt publiserte forsøk er rettet mot frysetør-king av biologiske stoffer på grunn av det kritiske ved prosesstrinnene som er nødvendig for å oppnå tilfredsstil-lende resultater, se til dette "Freezing and Drying of Biological Materials", utgitt av 0. St. Whitelock, "Annals of the New York Academy of Sciences", Vol. 85, art. 2, 501-734, The Academy 1960. En sammenlignbar mengde mindre godt publiserte forsøk er rettet mot frysetørking av forskjellig farmasøytika for det doble formål å bibeholde potens og stabilitet over utstrakte tidsrom under omgivelsesbetingelser og å tilveiebringe hensiktsmessighet ved utmatning eller bruk av disse farmasøytika.

Megen oppmerksomhet og mange anstrengelser er rettet mot men heller ikke så godt publisert viktigheten av å presentere en farmasøytisk elegant doseringsmengde av et farmasøytikum som også må beholde sin potens og stabilitet. I de fleste tilfeller blir det frysetørkede medikament anbragt som et produkt eller en "kake" som adherer til siden i en ampulle eller en annen beholder hvori forløperoppløsningen er fryse-tørket. Da den foretrukne form for pakking av frysetørkede medikamenter er glassampuller eller lignende vil det åpenbart være klart at en kake eller en plugg som holdes i en glass-beholder nær dennes bunn har en større visuell apell enn et løst pulver, spesielt hvis pulveret har en tendens til å støve. Når et medikament ikke med hell kan frysetørkes, det vil si reduseres til et stabilt, farmasøytisk elegant produkt, uten på ugunstig måte å påvirke de fysiologiske egenskaper av medikamentet, blir det generelt pakket som et tørt pulver.

Dette er nettopp pakkehistorien til cyklofosfamidmonohydrat og cyklofosfamid, begge herefter for enkelhets skyld kalt CPA, som er et syntetisk antineoplastisk medikament og et immunosuppressivt middel som hyppig benyttes for behandling av et antall ondartede og ikke-ondartede sykdommer. CPA beskrives i større detalj i US-PS 3.018.302 og i Merck's Index.

Medikamentet blir idag pakket som et "tørt" pulver i ampuller hvortil det fylles doseringsmengder av CPA i kombinasjon med natriumklorid som "pulveroppfylling". "Pulverfylt" betyr at medikamentet måles inn i ampullene i bestemte mengder som en blanding av pulveret. Vanninnholdet i pulveret i en doseringsmengde pulverfylt CPA ligger innen området 4,3-4,8 vekt-%, beregnet på den totale mengde av pulveret i ampullen. Akkurat før bruk blir pulveret i ampullen rekonstituert med sterilt vann for injeksjon, USP, eller andre egnéde sterile oppløsningsmidler eller fortynningsmidler, og den rekonstituerte oppløsning administreres til pasienten.

Imidlertid kan det skje at oppløsningen i vann ikke så lett kan gjennomføres, tiden for oppløsning av en 0,5 g's enhetsdose som inneholder ca. 0,225 g NaCl faststoffer ligger fra ca. 2 minutter til 2 timer eller mer, avhengig av de spesielle fysikalske/kjemiske karakteristika for CPA og NaCl i en spesiell pulverbatch, innmålt i en ampulle. Et frysetørket CPA-produkt som oppnås ifølge oppfinnelsen, rekonstitueres imidlertid så og si umiddelbart ved oppløsning i vann det vil si i løpet av mindre enn ca. 1 minutt, og vanligvis i løpet av mindre enn 30 sekunder. Hurtig rekonstituering er av stor kommersiell betydning på grunn av den tid man sparer for de som er ansvarlig for administrering av medikamentet. Uttrykkene doseringsmengde og produkt benyttes her under henvisning til det formulerte og "ferdige" CPA slik dette skal presenteres i en enhetsdose for salg i en ampulle.

Natriumkloridet benyttes for å forbedre risleegenskapene som en hjelp ved pulverfyllingen, men gjør også det resulterende rekonstituerte produkt hypertonisk, noe som ikke nødvendigvis er ønskelig. Videre er det pulver som oppnås på denne måte relativt vanskelig å dosere nøyaktig til ampuller sammenlig-net med ifylling av en vandig oppløsning. Videre er pulveret langt vanskeligere å fremstille med henblikk på å oppnå de sterkt ønskelige farmasøytiske homogenitetskarakteristika. Produkter som er frysetørket fra en homogen oppløsning er implisitt av optimal enhetlighet.

Ytterligere et problem forbundet med pulverfylte ampuller av CPA inneholdende NaCl, her kalt "stabilisert CPA", er at som alle andre pulvere er det vanseklig å utelukke eksterne kontaminanter, spesielt mikrofibre og lignende som på en eller annen måte finner sin vei selv inn i oppfyllingsrom som tilfredsstiller romstandarder for dette formål. Av praktiske grunner synes driften av konvensjonelle pulverfyllings-maskiner i et fyllerom å forhindre en atmosfære som er helt fri for kontaminanter. Videre gir dannelsen av luftbårne partikler av CPA-pulver en potensiell sunnhetsrisiko for operatørene fordi CPA-pulver i seg selv er et potensielt karsinogen.

I farmasøytisk teknologi er det høyst uvanlig å snakke om et medikament som kan være for tørt. I de fleste tilfelle er produktet jo mer stabilt jo tørrere det er, men når det gjelder CPA med eller uten drøyemiddel, er det funnet vesentlig, tilstrekkelig fuktighet i produktet til å vende tilbake til hydratform som er vesentlig for stabiliteten. Det er en generell hypotese at denne stabile hydratform er monohydratet men uten å ha påvist hypotesen som et faktum kalles det rehydratiserte CPA heri "CPA-hydrat". Hydratet er en forbindelse som dannes ved kjemisk kombinasjon av vann (bundet) til CPA i et definert molekylforhold.

Det skal nu være klart hvorfor frysetørking av en vandig oppløsning av CPA med eller uten drøyemiddel og justert for ønsket tonisitet ville være en foretrukket måte for markeds-føring av doseringsmengder av stabilt CPA-hydrat. Imidlertid er CPA-hydrat, enten alene eller med et drøyemiddel, kjent å være vanskelig og frysetørke under bibeholdelse av hydratfor-men som er kritisk for stabiliteten. Videre er CPA-hydrat, alene eller med et drøyemiddel, kjent for å ikke kunne frysetørkes for å gi et farmasøytisk elegant produkt. Med et farmasøytisk elegant produkt menes et produkt som er visuelt behagelig, et kriterium som vanligvis benyttes av fagfolk for å bedømme markedskvaliteten til medikamentet. For å ha markedskvalitet, det vil si for å kunne markedsføres via konvensjonelle kanaler i farmasibransjen, må frysetørket CPA-produkt både være stabilt og farmasøytisk elegant.

I mere kvantitative termer har et slikt farmasøytisk elegant produkt et enhetlig utseende og, undersøkt fra utsiden av en glassampulle eller en annen beholder, er det i det vesentlige fritt for bobler eller hulrom som individuelt ikke overskri-der 2 mm i ekvivalent diameter. Den store vanskelighet i forbindelse med frysetørking av en oppløsning av CPA, alene eller med et drøyemiddel, er spesielt bemerkelsesverdig fordi kombinasjoner av tallrike drøyemidler og mange flere medikamenter enn drøyemidler lett kan frysetørkes til elegante produkter.

Frysetørkede medikamenter er meget foretrukket fordi de i det vesentlige er frie for partikkelformige kontaminanter og mest sannsynlig har den eftertraktede farmasøytiske eleganse. De er av bedre kvalitet enn ekvivalente pulvere og kan oppløses i oppløsningsmiddel akkurat før bruk lettere enn sammenlign-bare pulverfylte medikamenter.

Frysetørkemetoden gir et produkt som er sterilt og uforuren-set fordi det tillater filtrering av en oppløsning av det ønskede produkt før ifylling. En slik filtrering skjer hensiktsmessig gjennom egnede mikrobiologiske filtre. Prosedyren er absolutt å foretrekke fremfor pulverfylling. Den filtrerte oppløsning kan så nøyaktig fordeles til egnede ampuller og disse fylles i frysetørkingskammeret der oppløs-ningen fryses og isen sublimerer under vakuum i et tørke-trinn, fulgt av et desorpsjonstrinn hvori fuktighetsnivået reduseres til mindre enn 3 vekt-#, beregnet på vekten av faststoffene, og fortrinnsvis til mindre enn 1,0 vekt-#.

Den tidligere mangel på brukbar frysetørking av CPA og det manglende aksepterbare produkt er spesielt bemerkelsesverdig fordi tallrike medikamenter rutinemessig frysetørkes for å oppnå farmasøytisk elegante produkter. Medikamentene er ofte frysetørket med sukkere som sukkrose og laktose, og poly-hydroksyalkoholer eller polyoler som sorbitol og mannitol.

Tallrike forsøk har vært gjort på å frysetørke CPA inneholdende natriumklorid alene men til idag har resultatene vært utilfredsstillende. Forsøk har også vært gjort på å trekke fordel av den overlegne markedsføringsmulighet av frysetørket CPA inneholdende et drøyemiddel i tillegg til NaCl eller uten dette, idet dette drøyemiddel velges for ønsket behandlings-evne, men opptil idag har dette også vært utilfredsstillende. Produktet med drøyemiddel, tørket til mindre enn 7 vekt-# fuktighet, beregnet på den totale produktvekt, er "uskjønt". Med dette menes en kake der det er en flakdannelse som vises ved platelignende flak eller granulære ujevnt formede agglomerater.

Når produktet tørkes i et enkelt trinn har forsøk på å oppnå et fuktighetsinnhold i den rette mengde for stabilitet av CPA-produktet ved å stanse tørkingen av produktet i ampullene, ikke gitt vesentlig enhetlig fuktighetsinnhold i alle ampuller. Selv om noen ampuller kan inneholde den riktige mengde fuktighet er fuktighetsinnholdet i ampullene i kammeret ikke enhetlig og vanskelig å kontrollere ved bruk av konvensjonelle tørketeknikker. For eksempel ga en sats på 300 ampuller, hver inneholdende en 100 mg doseringsmengde CPA og ca. 75 mg mannitol som drøyemiddel, frysetørket for å oppnå et ønsket fuktighetsinnhold på 2-7 vekt-# beregent på innholdet i ampullen, mindre enn 100 ampuller som lå innenfor det ønskede fuktighetsområdet. Videre varierte det virkelige fuktighetsinnhold for de forskjellige aksepterbare ampuller sterkt innen dette området. Som angitt ovenfor er fuktighetsinnholdet for CPA-produktet vesentlig fordi utenfor det kritiske området mangler produktet den nødvendige stabilitet for et markedsførbart CPA-produkt.

Hvis det er for tørt, det vil si hvis fuktigheten som er bundet til CPA som hydrati seringsvann, reduseres vesentlig, det vil si til mindre enn 5,5 vekt-# på en drøyemiddelfri basis og spesielt hvis mengden er mindre enn 3$, smelter produktet uten drøyemiddel ved romtemperatur. Slik smelting inntrer også når et drøyemiddel er tilstede og CIA-produktet inneholder mindre enn 2 vekt-# fuktighet beregnet på produktet.

Når produktet er for fuktig, det vil si når fuktigheten som er bundet til CPA som hydratiseringsvann er over 7 vekt-#, er produktet både farmasøytisk lite elegant og ustabilt. Et slikt høyt fuktighetsinnhold er tilstede når fuktighetsinnholdet i produktet inkludert ett eller flere drøyemidler er over 7 vekt-#, beregnet på den totale vekt.

Uansett for tørt eller for fuktig vil CPA-produktet lett inneholde synlige sprekker større enn 2 mm og/eller store hulrom over 2 mm og sogar generelt større enn 3 mm i ekvivalent diameter, i kaken. Bobler, åpenbart forårsaket av bobling under frysetørkingen, dannes også på overflaten, enkelte av disse er også større enn 2 mm i ekvivalent diameter. Uansett hvorvidt disse hulrom eller bobler er tilstede eller begge deler er tilstede, blir en dosemengde CPA inneholdende begge deler ansett uegnet for markedet. Det erkjennes at en slik stabilitet kan varieres og særlig i enkelte land, men uttrykket benyttes i forbindelse med å tilfredsstille de høyeste standarder.

Selv om det generelt er erkjent at det visuelle utseende av riktig tørket CPA-produkt ikke påvirker den farmasøytiske effektivitet, forventer kjøpere og distributører av farma-søytiske produkter frysetørkede slike med en farmasøytisk eleganse, som ellers tørket, pulverfylt CPA åpenbart mangler. Fremfor alt forventer de å få det uten å gi avkall på medikamentstabilitet.

Tallrike, mindre vellykkede, tidligere forsøk på foreliggende søkers side for direkte å frysetørke, det vil si uten rehydratisering, av en vandig oppløsning av CPA inneholdende minst en ekvivalent vektmengde av et drøyemiddel, og forsøk på å gjøre dette med en oppløsning som inneholder mindre mengder eller sogar uten NaCl, forårsaket at is sublimerte så galt at resultatet var et frysetørket CPA-produkt som ble karakterisert ved flakdannelse, granulering, oppsprekking, blærer eller store bobler som nevnt ovenfor, og tilfeldige hulrom som både var store og små i samme kake. Produktet hadde et ikke-enhetlig, slamlignende visuelt lite estetisk utseeende.

Såvidt søkeren vet, er den eneste kjente teknikk som beskriver formulering av CPA med mannitol, US-PS 4.537.883. Dette patent beskriver ikke bruken av levende damp for å oppnå det ønskede fuktighetsinnhold men beskriver en strøm av vann eller vanndamp.

Bortsett fra de heri beskrevne drøyemidler har søkeren ikke funnet andre drøyemidler som i seg selv gir et markedsriktig frysetørket CPA-produkt. For de heri angitte formål er NaCl ikke et drøyemiddel. Nærværet i det frysetørkede CPA-produkt er unødvendig. NaCl kan tilsettes i en mindre vektmengde i forhold til vannfritt CPA for å justere tonisiteten til den rekonstituerte CPA-oppløsning. Nærværet av et buffersalt er generelt også unødvendig men en mindre vektmengde i forhold til vannfrie CPA som tilsettes for å sikre at pH-verdien til den rekonstiterte oppløsning ligger innen det ønskede område fra ca. 3,5 til ca. 5,5.

Søkeren har ikke vært istand til å frysetørke CPA monohydrat-produkt uten drøyemiddel, hverken med eller uten NaCl. Ikke en gang disakkarider i seg selv er spesielt ønskelige ut fra å oppnå et farmasøytisk elegant proudkt, fordi de kan vise uønskede lyof iliseringskarakteristika og kun vanskelig rekonstitueres for bruk som vandige oppløsninger. Polyoler som mannitol og sorbitol innarbeides kun med vanskelighet i aksepterbart frysetørkede CPA-produkter hvis ikke mannitol er tilstede i en ekvivalent vekt eller en større vektmengde av sukkerne inkludert polyoler som benyttes som drøyemidler, der ekvivalenten eller de mindre mengder er vannfri CPA. For foreliggende oppfinnelses formål kalles aldoser, ketoser og polyoler som benyttes som drøyemidler, kollektivt for sukkere.

I henhold til dette angår foreliggende oppfinnelse en totrinns prosess for frysetørking av cyklofosfamid (CPA) hydrat for å opprettholde integriteten til CPA-hydratet under oppnåelse av en kake av CPA hydrat og drøyemiddel med enhetlig utseende og konsistens, og prosessen karakteriseres ved at den omfatter: a) å fryse en vandig oppløsning av en doserbar mengde av CPA og et drøyemiddel valgt blant en polyhydroksyalkohol med fra 5 til 9 karbonatomer, et monosakkarid med fra 5 til 10 karbonatomer, et disakkarid og et polysakkarid, forutsatt at drøyemidlet er tilstede i en mengde på 0,5 til 5 ganger ekvivalentvekten av vannfri CPA, ved avkjøling og frysing av oppløsningen til en temperatur

innen området -20 til -50°C;

b) opprettholde vakuumkontroll efter at temperaturen i produktet ligger innen området -50 til 25° C inntil

fuktighetsinnholdet i det frysetørkede materialet er mindre enn 2$, beregnet på den totale nettovekt CPA-produkt; og, i et andre trinn,

c) å rehydratisere det frysetørkede materiale med i) å bringe dette i kontakt med frisk damp under atmosfærisk trykk i 5

minutter til 2 timer inntil den relative fuktighet materialet utsettes for er 80 til 85$, og ii) å opprettholde den relative fuktighet på dette nivå slik at materialet inntar et fuktighetsinnhold innen området 2 til 7 vekt-#, beregnet på nettovekten av CPA-produkt.

Oppfinnelsen finner anvendelse for fremstilling av et hydratisert, lyofilisert preparat med forbedret stabilitet, overlegen oppløselighet og forbedret utseende omfattende cyklofosfamid, 0,5 til 5 ganger så meget, beregnet på CPA, tatt som anhydrid, av mannitol, og et fuktighetsinnhold på fra 2 til 7 vekt-# beregnet på nettoinnholdet av preparatet.

Oppfinnelsen angår således frysetørking av en oppløsning av CPA inneholdende et drøyemiddel som er grundig blandet for å gi et stabilt, frysetørket farmasøytisk elegant CPA-produkt med markedskvalitet. Stabilt betyr evnen til CPA-produktet til innen spesifiserte (USP) grenser å bibeholde fra 9 til 110$ av den angitte potens av det frysetørkede produkt efter 6 måneders lagring og inntil den dato som er spesifisert for bruk, generelt mindre enn to år fra fremstillingsdatoen, ved de anbefalte lagringstemperaturer (omgivelsestemperatur 20-25°C) underkastet betingelser som definerer USP-prosedyren for høytrykksvæskekromatografiutprøving. Effektiviteten til medikamentet angis ved dets enhet som aktivt medikament, det vil si uten ikke-akseptabel nedbryting.

Konvensjonell frysetørking av en vandig oppløsning av cyklofosfamid med et drøyemiddel valgt blant monosakkarider og disakkarider resulterer i CPA-produkt med ikke-aksepterbar markedskvalitet fordi det har en ikke-enhetlig CPA-hydratintegritet og dårlig hyllestabilitet. Hydratintegritet henviser til det bundne fuktighetsinnhold i CPA-hydratet som er tilstrekkelig for å tilveiebringe stabilitet i produktet, et innhold som hypotetiseres og ligge innen området 5 til 7 vekt-# av hydratet. Enhetlig henviser til at i det vesentlige alle ampuller i en sats på minst flere hundre ampuller som er frysetørket til innen et fuktighetsinnhold på 2 til 7 vekt-# av nettovekten av produktet i ampullen. Det vesentlige ved å opprettholde CPA-hydratintegriteten baseres på kunnskapen om at fuktighetsinnholdet til CPA-produktet ikke må overskride 7 vekt-# og at den spesielle andel av den fuktighet i forhold til hver komponent av produktet ikke snevert er kritisk.

Slik konvensjonell frysetørking inkluderer karakteristisk følgende trinn: a) å fryse oppløsningen til en temperatur innen området -10 til -45°C i en ampulle; b) å evakuere frysetørkekammeret til et trykk under ca. 1000 pm og å holde den frosne oppløsning under redusert trykk i et tidsrom på ca. 6 timer og c) å heve temperaturen i inkrementer til over 25°C i løpet av ca. 60 timer inntil fuktighetsinnhold i kaken i ampullene ligger innen området 5 til 7 vekt-#, beregnet på CPA-hydratinnholdet i produktet. På grunn av det vesentlige ved å opprettholde integriteten til CPA-hydratet ble trinn (c) gjennomført inntil fuktighetsinnholdet i ampullene var 2 vekt-# eller lavere, basert på den totale vekt av produktet. Kammeret ble så tappet til et på forhånd bestemt trykk og ampul1ene lukket.

I praksis blir et stort antall oppløsningsampuller der hver inneholder en doseringsmengde CPA, satt opprett i en skål ved siden av hverandre for derved å danne en enhet som kan korkes når frysetørkecyklusen er ferdig. Dette gjennomføres hensiktsmessig med tilgjengelige apparaturer som for eksempel beskrevet i US-PS 3.286,366.

CPA-produktet som fremstilles ved de tidligere kjente frysetørkeprosesser er lite tiltalende, således visuelt ikke aksepterbart fra et markedsmessig synspunkt, selv om det kan være farmasøytisk like aktivt som foreliggende oppfinnelses CPA-produkt. Den dårlige visuelle kvalitet eller de kjente produkters skyldes delvis en seig hud, noe som skyldes et dårlig valg av drøyemiddel, og utilstrekkelig kontroll av frysetørkingscyklusen. Huden som dannes på produktet inter-fererer med fordampingsavkjølingen, temperaturen i det indre av produktet stiger og produktet i form av flak, granulat og lignende "puffer" og spaltes. Temperaturstigningen kan være tilstrekkelig til å smelte produktet, danne en visuelt distinkt fase og, ved avkjøling faller produktet sammen, krymper bort fra ampulleveggene og tillater at sprekker, hulrom og bobler dannes i og på produktet. Disse defekter kan lett fastslås ved observering gjennom veggene i en glassampulle med det blotte øye, slik at produktene som fremstilles ved konvensjonelle frysetørkingsprodukter ikke ansees å være farmasøytisk elegante.

En "doseringsmengde" CPA henviser til en spesifisert mengde rent vannfritt CPA som hvis ønskelig kan inkludere opptil 5$ for mye, og ett eller flere drøyemidler, eventuelt med NaCl. Karakteristisk er de her beskrevne doseringsmengder 100 mg, 200 mg, 500 mg, 1 g og 2 g CPA i vannfri tilstand, ikke inkludert overskudd, og inneholder som drøyemiddel minst en ekvivalent vektmengde mannitol, og opp til fem ganger vekt-mengden mannitol. Der mer enn ett sukker benyttes er minst en ekvivalent vekt av vannfri CPA mannitol, og alt eller en del av den gjenværende vektmengde drøyemiddel kan være annet sukker, for eksempel laktose. En typisk pulverfylt basisdoseringsmengde er 500 mg vannfri CPA, det vil si ca. 535 mg CPA monohydrat, med 225 mg NaCl i en 30 ml ampulle som rekonstituert gir en CPA-oppløsning med en pH-verdi innen området ca. 3,5 til 7, og som er hypertoniske. En annen doseringsmengde er den dobbelte basisdoseringsmengde som fordi den er dobbelt så stor pakkes i en 60 ml ampulle. Andre doseringsmengder som er multipli, inkludert brøkdeler, av basisdosen, kan også fremstilles med eller uten NaCl.

I en foretrukket utførelsesform er produktet som oppnås ifølge oppfinnelsen et frysetørket CPA-produkt som inneholder et sukker som en polyol med fra 5 til ca. 9 karbonatomer, og spesielt mannitol og sorbitol; eller, et monosakkarid som en aldose, med fra 5 til ca. 10 karbonatomer, fortrinnsvis de naturlig forekommende aldoheksoser som glukose (dekstrose), mannose, galaktose og lignende; eller et disakkarid med 12 karbonatomere, spesielt naturlig forekommende sukkrose og laktose; eller, et polysakkarid som stivelse. Kombinasjonen av drøyemidler kan inkludere et hvilket som helst av de foregående og en karboksylsyre som ravsyre, citronsyre og maleinsyre; og et buffersalt som et acetat, citrat, bi-karbonat, fosfat eller lignende av natrium eller kalium. I enhver kombinasjon av drøyemidler må imidlertid vekten av sukker eller sukkere være større enn vekten av de gjenværende drøyemidler hvis disse er tilstede. Spesielt der det ønskes en isotonisk rekonstituert oppløsning må videre mengden av sukker som er tilstede nødvendigvis minst være ekvivalent på vektbasis mengden av CPA i oppløsning.

I den mest foretrukne utførelsesform er det eneste drøyemid-del mannitol, tilstede i en mengde fra ca. 1,25 til ca. 5 ganger vekten av CPA i produktet. Selv større mengder mannitol kan benyttes uten ugunstig å påvirke markedskvaliteten eller potensen til CPA-produktet, men oppfylling av produktet med mannitol tjener ingen spesiell hensikt i denne henseende.

CPA-produktet dannes innen et vidt tykkelsesområde fra ca. 0,1 mm til ca. 5 cm men spesielt innen området ca. 5 mm til ca. 3 cm. Basisdosemengden er aller helst tildannet i en tykkelse innen området ca. 1 til 1,5 cm. Produktet har en enhetlig og nær hvit farve og er i det vesentlige fritt for flak eller granulære agglomerater.

Uansett produktets tykkelse ligger massedensiteten for det frysetørkede produkt innen området ca. 0,05 til 0,2 g/c<m3>, Massedensiteten for det tørkede PCA-produkt avhenger av konsentrasjonen av tilstedeværende drøyemidler, uansett om produktet inneholder NaCl, og de spesielle frysetørkebeting-elser.

Produktet er fritt for skjemmende flak, granulater eller bobler på overflaten, eller hulrom som er større enn ca. 2 mm 1 ekvivalent diameter, eller oppsprekking som er bredere enn 2 mm. Fordi de er karakteristiske er hulrom i et produkt av uforutsigelige størrelse og form og dimensjonene angis i ekvivalente diametere. Det vil erkjennes at et produkt med en dybde på 1 mm kan ha skiveformede hulrom som har en ekvivalent diameter på 2 mm eller mer. På samme måte kan et produkt med en tykkelse på ca. 1 mm ha en eller flere bobler ved eller nær overflaten og hvis form er langstrakt og med en lengde på mer enn 2 mm men der tverrsnittet varierer innen vide grenser innen området under 2 mm, og størrelsen til boblen vil være over 2 mm ekvivalent diameter.

Det frysetørkede CPA-produkt ifølge oppfinnelsen har fortrinnsvis kun meget små bobler, hulrom og sprekker som snaut kan sees med det blotte øyet hvis tilstede. Frysetørket CPA-produkt henviser til et produkt der integriteten av CPA-hydratet opprettholdes, det vil si har et innhold av bundet fuktighet på fra 5 til 7 vekt-#, beregnet på CPA-hydratinnholdet, og aller helst fra 5,8 til 6,7$. Fordi fuktighetsinnholdet i CPA-hydratet bortsett fra fuktighetsinnholdet i drøyemidlene, er vansskelig å måle, er det hensiktsmessig å angi at dette krav oppfylles når produktet har et fuktighetsinnhold innen området 2 til 7 vekt-#, beregnet på den totale vekt av det formulerte produkt. Et slikt produkt gir den ønskede hyllelevetid, noe som påvises ved at integriteten til CPA-hydratet opprettholdes. Fuktighetsbestemmelsen skjer ved hjelp av en hvilken som helst standardmetode som for eksempel den ovenfor angitte Edwards-metode, mens Karl Fischer-prosedyren er foretrukket.

Størrelsen av ampullen som velges bestemmes av doserings-mengden idet basisdosemengden, 500 mg CPA, tilveiebringes i egnede ampuller med innhold 20 til 50 ml og helst 25 eller 30 ml. Det mest foretrukne for en basisdosemengde er en 30 ml ampulle som inneholder 15 ml oppløsning inneholdende 50 mg vannfri CPA, ca. 1 g mannitol og vann QS til 15 ml. Fordi volumet av frysetørket og rehydratisert CPA-produkt ikke endres vesentlig fra det opprinnelige volum av oppløsningen i ampullen, er massedensiteten ca. 0,1 g/cm<3>. Massedensiteten øker for den samme dosismengde men øker med økende mengde drøyemiddel hvis oppløningsvolumet ikke endres.

Nøyaktig hvordan frysetørkecyklusen overvåkes er ikke vesentlig og dette kan gjennomføres på forskjellige måter, for eksempel som foreslått i "Freeze-Drying Processes for the Food Industry", av M.H. Gutcho, Noyes Data Corporation, New Jersey (1977). Vesentlige elememter i cyklusen er overvåking av temperaturen i hyllene, temperaturen av materialet i ampullene og den tid i hvilken temepratur- og trykkbetingel-ser overvåkes.

Kammeret evakueres efter at ampullene er frosset og ved en temperatur fra ca. -20 til -50°C opprettholdes i et tidsrom nok til å sikre at alle ampuller har i det vesentlige samme temperatur. En høyere temperatur kan benyttes hvis tiden ikke er en faktor, men temperaturer vesentlig ut over -20°C er ikke økonomiske. Et trykk på ikke mer enn 1000 pm bør "benyttes og det er foretrukket å benytte et trykk innen området ca. 10 til 500 yim og som kan oppnås ved hjelp av en hvilken som helst vakuumpumpe av god kvalitet. Tiden i hvilken kammeret er evakuert er heller ikke kritisk så lenge materialet i ampullene fryses fast, en typisk evakuerings-periode ligger fra ca. 10 minutter til ca. 1 time.

Temperaturen heves så gradvis idet hastigheten styres av en kontrollanordning som en kam eller en mikroprosessor, eller ved manuell kontroll, slik at temperaturene når en sluttørke-temperatur ikke over den som på ugunstig måte påvirker CPA-materialet. En forhøyet temperatur forårsaker at materialet smelter eller nedbrytes på annen måte, noe som ugunstig påvirker både de farmasøytiske egenskaper og produktets elegante utseende.

Vakuum opprettholdes under tørkecyklusen og i alle tilfelle bør dette være tilstrekkelig til å gi et tørket materiale med et fuktighetsinnhold på mindre enn 2 vekt-#, beregnet på det totale nettoinnhold av det tørkede materiale. Tidsrommet avhenger av dosemengden i ampullene, disses størrelse og konfigurasjon samt antallet ampuller.

Efter at ampullene er tørket i den ovenfor angitte grad i det første prosesstrinn blir frysetørket materiale rehydratisert ved innføring av vanndamp til kammeret. Et fint sprayvann kan inngis intermittent til kammeret i en mengde tilstrekkelig til å heve fuktighetsinnholdet i kammeret til over 7,5$ relativ fuktighet. Enhver kilde for rent vann kan benyttes men ren damp er foretrukket fordi det er hensiktsmessig og også nøyaktig å kontrollere. Tilstrekkelig ren damp innføres i løpet av ca. 5 minutter til ca. 2 timer for å tilveiebringe en relativ fuktighet på ca. 85$ i kammeret, og fuktigheten holdes på dette nivå inntil det er fastslått at materialet i ampullene har absorbert nok fuktighet til å tilfredsstille det foretrukne området fra ca. 5,8 til ca. 6,7 vekt-#, beregnet på CPA-monohydratinnholdet i produktet, eller fra 2 til 7 vekt-#, beregnet på det totale nettoinnhold av produktet .

På analog måte kan fremgangsmåten gjennomføres i ampuller der doseringsmengder inkluderer mindre enn en ekvivalent mengde drøyemiddel. For farmsøytisk utseende og stabilitet er det foretrukket at vektandelen drøyemiddel er minst halvparten av vekten av aktivt medikament. Doseringseneheter med mindre enn en ekvivalent mengde mannitol er hypotoniske.

Den beste metode for gjennomføring av oppfinnelsens fremgangsmåte for fremstilling av en 500 mg doseringsmengde CPA som hydrat med et drøyemiddel, skal beskrives nedenfor: CPA, angitt å være et hvitt krystallinsk pulver på leveran-dørens sertifikat, analyseres med henblikk på fuktighet. Analysen indikerer et fuktighetsinnhold på ca. 1%. En oppløsning av en CPA i injeksjonsvann, q.s., gjennomføres ved et innhold på ca. to ganger så meget mannitol som vannfri CPA på vektbasis, idet mannitolen fortrinnsvis tilsettes efter at CPA er oppløst i ca. 85$ q.s.-volumet vann, idet dette er det volum vann som' er nødvendig til å oppnå det ønskede opp-løsningsvolum i alle ampuller. Oppløsningen av mannitol understøttes ved heftig omrøring. Oppløsningen bringes til et q.s.-volum, klares gjennom et 10 pm-filter og steriliseres ved føring gjennom et 0,2 pm sterilt filter.

Denne filtrerte q.s.-oppløsning doseres til et stort antall 30 ml glassampuller slik at hver av flere tusen ampuller inneholder 535 mg CPA-monohydrat (uten overskudd) og 950 mg mannitol hvorved volumet i oppløsningen i hver ampulle er ca. 15 ml. Hvis ønskelig kan man tilsette et overskudd for spesifisert lagringstid og ampulle-sprøyte-nål-retensjon. Et buffersalt kan tilsettes for å opprettholde den ønskede pH-verdien innen orådet 3 til 6 og mer spesielt fra ca. 3,9 til 4,5.

Ampullene, enkelte med termopar, rekkes opp i fat og anbringes i hyller i et egnet f rysetørkekammer.

I det første trinn i frysetørkingen blir produktoppløsningen i ampullene frosset til en temperatur på -20°C eller lavere og efter at alle sondene gir den ønskede temepratur blir denne holdt i ca. 2 timer. Kondensatoren avkjøles til -50° C eller derunder og kammeret evakueres hvorved undertrykket justeres med en ^-spyling for å oppnå en avlesning innen området ca. 10 til 1000 Mm. Det hele oppvarmes så til ca. +22°C og når sondene i ampullene avleser ca. +20°C blir dette vakuum holdt i ca. 4 til ca. 24 timer uten å gå ut over 35°C i noen vesentlig tid.

I det andre trinn blir rehydratisering av det frysetørkede materialet gjennomført ved innføring av vanndamp direkte til kammeret inntil dette har en relativ fuktighet på ca. 85 hvorved vann fortrinnsvis tilføres i form av en ren damp som føres gjennom et sterilt mikrobiologisk filter. Når kammeret har nådd en likevektsverdi på ca. 80 til 85 relativ fuktighet blir denne opprettholdt inntil produktet har antatt et fuktighetsinnhold innen området fra 2 til 7 vekt-$, beregnet på en total vekt av det formulerte. Fuktighetsnivået overvåkes periodisk ved å fjerne representative prøver (ampuller) i en lott og å gjennomføre en Karl Fischer-analyse. Den relative fuktighet i kammeret for rehydratisering er ikke vesentlig, det skal imidlertid være klart at rehydratiseringen skjer når damptrykket i kammeret er større enn det til det frysetørkede materiale.

Således blir det frysetørkede materiale rehydratisert ved i) å eksponere det til en fuktig atmosfære med en relativ fuktighet på minst 75$, og ii) å opprettholde den relative fuktighet på dette nivå i et tidssrom tilstrekkelig til å tillate at materialet inntar et fuktighetsinnhold innen området 2 til 7 vekt-$ beregnet på nettovekten av CPA-produtket. Det er foretrukket at fuktigheten i kammeret er 80 til 85$ fordi rehydratisering er upraktisk ved lavere fuktighet.

Rehydratiseringen av det frysetørkede materiale som oppnås efter det første trinn kan altså gjennomføres som følger: A. Ampullene til frysetørket materiale fjernes fra fryse-tørkekammeret og anbringes i et kabinett med konstant fuktighet for rehydratisering. Materialet holdes i kammeret inntil det er bestemt at materialeet i ampullene har absorbert nok fuktighet til å tilfredsstille kravet til kristisk fuktighet i CPA-produktet. Ampullene med rehydratisert CPA-produktet fjernes så fra kammeret og lukkes.

B. Ampullene av frysetørket materiale anbringes i et kammer med konstant fuktighet med en verdi på ca. 80 til 90. Materialet holdes i kammeret over oppløsningen inntil det bestemmes at materialet har absorbert nok fuktighet til å tilfredsstille spesifikasjonene til innholdet av kritisk fuktighet i CPA-produktet. Ved slutten av rehydrati-seringstrinnet gjenopprettes kammeret til et på forhånd bestemt trykk og ampullene lukkes.

Den frysetørkede kake som oppnås har farmasøytisk eleganse, og udmerket stabilitet som krevet ved de standarder som er satt for doseringsmengder av CPA.

På en måte analog det som er beskrevet ovenfor ble flere CPA-produktsatser frysetørket i forskjellige doseringsmengder med mannitol som eneste drøyemiddel og mere enn 100 ampuller fra hver sats ble kjørt gjennom en stabilitetsprøve i et rom med kontrollert atmosfære ved omgivelsestemperaturer 20 til 25'C. Prøver på ampuller med tre for hvert prøveintervall ble tatt vilkårlig fra hver sats og analysert ved de angitte intervaller og resultatene er angitt i den nedenfor følgende tabell. Analysene skjedde i henhold til den prosedyre som er beskrevet i USP-monograf HPLC-metoden. Variasjonen i analysen ligger innenfor det spesifikke område på 90 til 110 CPA som angitt i USP-monografen. Nedbrytning som indikerer mangel på tilstrekkelig stabilitet vil påvises av en signifikant lavere analyse (også tatt i betraktning eksperimentelle feil) ved slutten av prøveperioden enn det man hadde ved den opprinnelige prøve.

Slik det vil være klart fra de representative prøver som angitt nedenfor er det ingen tegn på nedbrytning efter 6 måneder. Analyser gjennomført efter 1 måned og ved slutten av 3 måneder er ikke anført.

Claims (7)

1. To-trinnsprosess for frysetørking av cyklofosfamid (CPA)-hydrat for å opprettholde integriteten til CPA-hydratet under oppnåelse av en kake av CPA-hydrat og drøyemiddel med enhetlig utseende og konsistens, karakterisert ved at den omfatter: a) å fryse en vandig oppløsning av en doserbar mengde av CPA og et drøyemiddel valgt blant en polyhydroksyalkohol med fra 5 til 9 karbonatomer, et monosakkarid med fra 5 til 10 karbonatomer, et disakkarid og et polysakkarid, forutsatt at drøyemidlet er tilstede i en mengde på 0,5 til 5 ganger ekvivalentvekten av vannfri CPA, ved avkjøling og frysing av oppløsningen til en temperatur innen området-20 til -50°C; b) opprettholde vakuumkontroll efter at temperaturen i produktet ligger innen området -50 til 25°C inntil fuktighetsinnholdet i det frysetørkede materialet er mindre enn 2$, beregnet på den totale nettovekt CPA-produkt; og, i et andre trinn, c) å rehydratisere det frysetørkede materiale med i) å bringe dette i kontakt med frisk damp under atmosfærisk trykk i 5 minutter til 2 timer inntil den relative fuktighet materialet utsettes for er 80 til 85$, og ii) å opprettholde den relative fuktighet på dette nivå slik at materialet inntar et fuktighetsinnhold innen området 2 til 7 vekt-$, beregnet på nettovekten av CPA-produkt.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at innholdet av bundet fuktighet i trinn (c) (ii) i CPA-hydratet ligger innen området 5 til 7 vekt-$ av CPA-hydratet .

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at drøyemidlet er tilstede i en mengde fra 1,25 til 5 ganger vekten av vannfri CPA.

4 . Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 1 til 3, karakterisert ved at også en karboksyl syre eller et buffersalt er tilstede i den vandige oppløsning.

5 . Fremgangsmåte ifølge kravene 1 til 4, karakterisert ved at det anvendes en polyhydroksyalkohol valgt blant mannitol og sorbitol, at monosakkaridet er en aldoheksose, og polysakkaridet er en stivelse og at det også tilsettes en karboksylsyre valgt blant maleinsyre, citronsyre og ravsyre.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at mannitol benyttes som eneste polyhydroksyalkohol i en mengde fra 1,25 til 5 ganger vekten av vannfri CPA.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at polyhydroksyalkohol anvendes i en mengde innen området 1,25 til 5 ganger vekten av vannfri CPA.