NO170286B - Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive steroider med en spiranring i 17-stillingen - Google Patents

Description

Den foreliggende oppfinnelse angår fremstilling av nye, terapeutisk aktive steroider med en spiranring i 17-stillingen.

De nye forbindelser er forbindelser med den generelle formel (I):

hvor

R-l betegner fenyl, benzyl, thienyl, isothienyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl eller isoxazolyl, idet hvert av disse radikaler eventuelt er substituert med ett eller flere radikaler valgt blant: alkyl med 1-8 carbonatomer, alkoxy med 1-8 carbonatomer, vinyloxy, allyloxy, halogen, hydroxyl, trifluormethyl, alkanoyl med 1-6 carbonatomer, eventuelt forestret carboxy, alkylthio med 1-8 carbonatomer som eventuelt er oxydert til sulfoxyd-eller sulfonformen; amino som eventuelt er mono-eller disubstituert med alkyl med 1-8 carbonatomer, og som eventuelt er oxydert til N-oxydet; bis-(klor-ethyl)-amino, dimethylaminomethyl, dimethylamino-ethyl, methyl-(dimethylaminoethyl)-amino og dimethyl-aminoethoxy,

eller Rx betegner:

R2 i alfa- eller beta-stillingen er hydrogen eller methyl,

den bølgede linje i spiroetheren indikerer at oxygenatomet kan befinne seg i alfa- eller beta-stilling,

den brutte linje i 3'-, 4'-stilling indikerer eventuell tilstedeværelse av en andre binding mellom carbonatomene som bærer den,

og ringene A og B har én av de følgende strukturer:

a) A og B betegner gruppen:

hvor R' og R" er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom eller et alkylradikal med 1-4 carbonatomer,

b) A og B betegner gruppen:

hvor Re betegner hydrogen, alkyl med 1-6 carbonatomer eller

alkanoyl med 1-4 carbonatomer,

c) A, B og C betegner gruppen:

hvor Rx og R2 er som ovenfor angitt, d) A og B betegner gruppen: e) A og B betegner gruppen:

og deres i farmasøytisk henseende akseptable syreaddisjonssal-ter.

R2-radikalet er fortrinnsvis methyl, og det foretrekkes at det står i beta-stilling.

Når Rx innbefatter en carboxyfunksjon, kan denne være forsaltet. Blant mulige salter kan nevnes f.eks. natrium-, kalium-, lithium-, kalsium-, magnesium- eller ammoniumsaltene. Blant de organiske baser kan nevnes methylamin, propylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, N,N-dimethylethanolamin, tris-(hydroxymethyl)-aminomethan, ethanolamin, pyridin, picolin, dicyclohexylamin, morfolin, benzylamin, procain, lysin, arginin, histidin og N-methyl-glucamin.

Når Rj^ innbefatter en funksjon som kan forsaltes med en syre, og i særdeleshet en aminofunksjon, fåes addi-sjonssalter med syrer.

Oppfinnelsen omfatter også fremstilling av syreaddi-sjonssaltene av de forsaltbare forbindelser med formel (I), såsom f.eks. saltene dannet med de følgende syrer: saltsyre, hydrobromsyre, salpetersyre, svovelsyre, fosforsyre, eddiksyre, maursyre, propionsyre, benzoesyre, maleinsyre, fumarsyre, ravsyre, vinsyre, citronsyre, oxalsyre, glyoxyl-syre, aspartinsyre, alkansulfonsyre, såsom methan- eller ethansulfonsyre, arylsulfonsyrer, såsom benzen- eller paratoluensulfonsyre, og arylcarboxylsyrer.

Blant forbindelsene med formel (I) er de forbindelser foretrukket hvor oxygenatomet i spiroetheren står i 17-beta-stilling og ringene A og B betegner gruppen:

hvor R' og R" betegner et hydrogenatom.

Blant forbindelsene med formel (I) er foretrukkede forbindelser slike hvor Rx betegner en fenyl- eller benzylgruppe som er substituert med en aminogruppe som i sin tur er disubstituert med alkyl med 1-8 carbonatomer. Forbindelsene med formel (I) hvor Rx er fenyl som har en substituent i para-stillingen, samt saltene derav, er likeledes ansett som særlig foretrukkede. Særlig foretrukne betydninger av Rx er 4-(dimethylamino)-fenyl og 4-(methylthio)-fenyl.

Spesielt foretrekkes de nedenstående forbindelser, som er beskrevet i * de etterfølgende eksempler: (17 R)-4',5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on,

(17 R)-ll-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on,

(17 R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on,

(17 R)-4',5'-dihydro-ll-beta-[4-(dimethylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on,

(17 R)-4',5'-dihydro-ll-beta-[4-(2,3-dihydro-l-methyl)-(1H)-indol-5-yl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on,

(17 R)-11-beta-[4-(ethylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on,

og deres salter.

Forbindelsene med formelen (I) oppviser spesielt en. bemerkelsesverdig anti-progestomimetisk aktivitet.

Forbindelsene med formelen (I) oppviser også en antiglucocorticoid aktivitet, slik det fremgår av resultatene av de tester som beskrives lenger fremme.

Enkelte forbindelser oppviser imidlertid en anti-progestomimetisk aktivitet som er sterkere enn deres anti-glucocorticoide aktivitet.

Forbindelsene med formelen (I) og deres i farmasøy-tisk henseende aksepterbare salter som oppviser anti-progesto-mimetiske egenskaper, kan anvendes mot hormonforstyrrelser.

Visse forbindelser med formelen (I) og deres i farma-søytisk henseende aksepterbare salter kan også oppvise pro-gestomimetiske egenskaper og kan således anvendes ved behandling av amenorrhoea, dysmenorrhea og svikt i funksjone-ringen av corpus luteum.

Forbindelsene med formelen (I) og deres i farmasøy-tisk henseende aksepterbare salter kan derfor anvendes som legemidler-, først og fremst for å bekjempe sekundære virkninger av glucocorticoidene. De gjør det også mulig å motvirke vanskeligheter som skyldes hypersekresjon av glucocorticoidene og å motvirke elding rent generelt og mer spesielt hypertensio, atherosclerosis, osteoporosis, diabetes, obesitas, svekking av immunsystemet og søvnløshet.

Forbindelsene med formelen (I) og deres i farmasøy-tisk henseende aksepterbare salter som har anti-androgene egenskaper, kan anvendes ved behandling av hypertrophiae og av prostatakreft, samt av hyperandrogenia, anaemia, loddenhet og filipenser.

Forbindelsene med formelen (I) og deres i farmasøy-tisk henseende aksepterbare salter oppviser også veksthemmende egenskaper som gjør dem anvendelige ved behandling av hormonavhengige kreftsykdommer, spesielt brystkreftsykdommer og deres metastaser. Disse egenskaper gjør dem også anvendelige ved behandling av godartede svulster.

Noen av forbindelsene med formel (I) og deres i far-masøytisk henseende aksepterbare salter oppviser østrogene og/eller anti-østrogene egenskaper. De anti-østrogene egenskaper gjør dem anvendelige ved behandling av østrogenav-hengige kreftsykdommer.

De østrogene egenskaper som forbindelsene med formelen (I) og deres i farmasøytisk henseende aksepterbare salter også kan oppvise, gjør dem anvendelige også ved behandling av forstyrrelser som er forbundet med hypofolliculinia, f.eks. amenorrhoea, dysmenorrhoea, gjentatte aborter og førmenstruelle forstyrrelser og ved behandling av menopausen.

Dosestørrelsen varierer avhengig av lidelsen som skal behandles og administreringsmåten. Den kan f.eks. variere fra 10 mg til 1 g pr. dag oralt til en voksen person.

De nye forbindelser med formelen (I) og deres salter, som beskrevet ovenfor, kan anvendes for fremstilling av farmasøytiske preparater som inneholder i det minste én av de nevnte forbindelser som det aktive middel.

Forbindelsene med formelen (I) og deres salter benyttes oralt, parenteralt eller lokalt. De kan foreskrives i form av enkle sukkerbelagte tabletter, kapsler, granuler, stikkpiller og injiserbare preparater, salver, kremer og geler, som fremstilles etter vanlige metoder.

De nye steroidforbindelser fremstilles som følger: a) For fremstilling av forbindelsene med formel (IA): hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger og R' og R" hver betegner et hydrogenatom eller et alkylradikal eller den ene betegner et hydrogenatom og den andre betegner et alkylradikal, blir enten en forbindelse med formel (II):

hvor R-l og R2 har de ovenfor angitte betydninger og K betegner en gruppe som beskytter ketonradikalet,

eller en forbindelse med formel (III):

hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger, ringsluttet ved omsetning med tosylklorid eller methylsulfonylklorid i nærvær av pyridin, hvorved det fåes enten en forbindelsene med formel (IV):

hvor Rlr R2 og K er som ovenfor angitt,

hvilken forbindelse med formel (IV) dehydratiseres med en sul-fonisk harpiks i syreformen eller med en mineralsyre i en lavere alkanol eller med perklorsyre i eddiksyre eller med en sulfonsyre, hvorved ketofunksjonen frigjøres og det dannes en forbindelse, med. den ovenstående formel (IR) hvor R' og R" betegner et hydrogenatom,

eller det fåes en forbindelse med formelen (IA),

og en oppnådd forbindelse med formel (IA) hvor Rx innbefatter et svovel- eller nitrogenatom, om ønsket oxyderes for å danne den tilsvarende forbindelse hvor Rx innbefatter et svovelatom som er oxydert til sulfoxyd eller sulfon, eller et nitrogenatom som er oxydert til N-oxyd, og at forbindelsen med formel (IA) om ønsket overføres til et salt,

eller forbindelsen med formel (IA) om ønsket omsettes med en sterk base og deretter med et alkylhalogenid for dannelse av en forbindelse med formel (IA) hvor R' og/eller R" betegner et alkylradikal med 1-4 carbonatomer.

b) For fremstilling av forbindelsene med formel (IB):

hvor Rx og R2 og Re er som ovenfor angitt, blir en forbindelse

med formelen (I' 1 :

hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger, omsatt med et aromatiseringsmiddel bestående av et syrehaloagenid og/eller et syreanhydrid og den oppnådde forbindelse om nødvendig omsatt med et forsåpningsmiddel, hvoretter en oppnådd forbindelse med formel (IB) hvor Re er et hydrogenatom, om ønsket, omsettes med et alkyleringsmiddel. c) For fremstilling av forbindelsene med formelen (Ic):

hvor R-l og R2 er som ovenfor angitt, blir enten en forbindelse

med formelen (V):

hvor R1 og R2 er som ovenfor angitt, ringsluttet ved å omsettes med tosylklorid eller methylsulfonylklorid i nærvær av pyridin, eller en forbindelse med den ovenstående formel (I'R) omsatt med et acyleringsmiddel og den dannede forbindelse deretter forsåpet. d) For fremstilling av forbindelsene med formel (ID): hvor R x og R2 er som ovefor angitt, blir en forbindelse med formel (I'A) epoxydert med en persyre eller hydrogenperoxyd, alene eller i nærvær av hexaklor- eller hexafluoraceton; e) for fremstilling av forbindelsene med formel (IE):

hvor R2 og R2 er som ovenfor angitt, omsettes en forbindelse

med den ovenfor angitte formel (I'A) med hydroxylamin.

f) For fremstilling av forbindelsene med formel (I) hvor Rx betegner et fenyl- eller benzylradikal substituert med et carboxyradikal som kan være forestret eller forsaltet, blir en forbindelse med formel (IF): hvor A, B, C og R2 er som ovenfor angitt, og X betegner et carbocyklisk eller heterocyklisk aryl- eller aralkylradikal, underkastet en sur hydrolyse på i og for seg kjent måte, fortrinnsvis ved omsetning med en mineralsyre i vandig oppløsning for dannelse av en forbindelse med formel (IG):

som, om ønsket, omsettes med et basisk middel for dannelse av

en forbindelse med formel (IH): hvor X og R2 er som ovenfor angitt, og Alk betegner et alkylradikal med 1-6 carbonatomer, hvilken forbindelse, om ønsket, forsåpes for dannelse av en forbindelse med formel (Ij):

hvor X og R2 er som ovenfor angitt, som, om ønsket, forestres. Sluttelig blir en forbindelse oppnådd som angitt under et av punktene a)-f) ovenfor eventuelt overført til et i farmasøytisk henseende akseptabelt syreaddisjonssalt.

I en foretrukken utførelse av de ovenfor beskrevne fremgangsmåter er tosylklorid i nærvær av pyridin det cykli-seringsreagens som fortrinnsvis bringes til å virke på forbindelsene med formler (II), (III) eller (V), men methylsulfonylklorid kan også benyttes.

Omdannelsen av forbindelsene med formel (IV) ved hjelp av et dehydratiseringsmiddel som også er i stand til å frigjøre ketonfunksjonen, foretas fortrinnsvis med en sulfon-harpiks (syreform), f.eks. en kommersielt tilgjengelig sul-fonharpiks med en polystyrenbærer eller med en styren/divi-nyl/benzenpolymerbærer. Det kan imidlertid også benyttes en mineralsyre, såsom saltsyre eller svovelsyre, i en lavere alkanol eller perklorsyre i eddiksyre eller en sulfonsyre, såsom paratoluensulfonsyre.

Oxydasjonsmidlet som bringes til å virke på forbin-deisene med formel (IA) eller epoxyderingsmidlet som bringes til å reagere for dannelse av forbindelsene med formel (ID), er fortrinnsvis en persyre, såsom metaklorperbenzoesyre, peraeddiksyre eller perfthalsyre. Det kan også anvendes hydrogenperoxyd alene eller i nærvær av hexaklor- eller hexafluoraceton.

Alt etter antallet funksjoner som kan være siktemålet med en oxydasjon, kan naturligvis én eller flere ekvivalenter av oxydasjonsmidlet benyttes.

Dersom det f.eks. ønskes å oxydere svovelatomet båret av Rx til sulfon, må således naturligvis minst to ekvivalenter av oxydasjonsmidlet benyttes.

Den sterke base som benyttes på forbindelsene med formel (IA), kan være et alkalimetallamid, såsom natrium- eller lithiumamid, som eventuelt kan være fremstilt in situ.

Alkylhalogenidet som benyttes er fortrinnsvis et jodid, såsom methyljodid.

Aromatiseringsmidlet som benyttes for fremstilling av forbindelsene med formel (IB), er fortrinnsvis et acylhalogenid, såsom acetylbromid eller et syreanhydrid, såsom eddiksyreanhydrid eller en blanding av disse.

Den eventuelle acylering av forbindelsene med formel (IB) og acyleringen som fører til forbindelsene med formel (Ic) utføres etter vanlige metoder. Det foretrekkes å benytte et acylhalogenid.

Den eventuelle alkylering av forbindelsene med formel (IB) utføres etter vanlige metoder. Eksempelvis benyttes et alkylhalogenid.

Forsåpningsmidlet benyttet for å oppnå forbindelsene med formel (IB), (Ic) eller (Ij), er fortrinnsvis en alkalibase, såsom natrium- eller kaliumhydroxyd, og reaksjonen utføres i en lavere alkohol, såsom methanol eller ethanol.

Oximeringen av forbindelsene med formel (I'A) utføres ved anvendelse av hydroxylamin i form av et salt, fortrinnsvis hydrokloridet i en alkohol ved tilbakeløpstemperaturen.

Den sure hydrolyse som forbindelsene med formelen (IF) underkastes utføres i henhold til de vanlige betingelser. Eksempelvis kan en mineralsyre, fortrinnsvis saltsyre, anvendes i vandig oppløsning.

Det basiske middel som benyttes til å danne forbindelsene (IH), er fortrinnsvis et alkalisk alkoholat, såsom natriumethylat•

Forsaltingen utføres under vanlige betingelser. Eksempelvis kan behandlingen utføres i nærvær av natrium-hydroxyd i ethanol. Et natriumsalt, såsom carbonatet, eller det sure carbonat av natrium eller kalium, kan også benyttes.

På samme måte utføres også forsaltingen med en syre under de vanlige betingelser. Behandling med saltsyre foretrekkes, f.eks. i en etheroppløsning.

Forbindelsene med formlene (II), (III) og (V) som anvendes som utgangsmaterialer, er kjente forbindelser eller kan fremstilles ved vanlige fremgangsmåter, såsom dem beskrevet i europeisk patentskrift nr. 147 361.

Forbindelsene med formlene (II), (III) og (V) hvor oxygenatomet i spiroetheren befinner seg i alfa-stillingen kan fremstilles i henhold til metoden beskrevet i europeisk patentskrift nr. 129 499.

De nedenstående eksempler illustrerer fremstillingen av de nye steroidforbindelser.

EKSEMPEL 1: (17 R)-45'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(3H))-furan)-3-on.

Trinn A: Gamma-lactonet av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11 - beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-3,3-[(1,2-ethandiyl)-bisoxy]-19-nor-17-alfa-pregn-9-en-21-carboxylsyre. 60 ml tetrahydrofuran innføres ved -70°C i 60 ml av en 1,6M 15%-ig oppløsning av butyllithium i hexan. Deretter tilsettes dråpevis ved -60°C en 9,2 ml<1>s oppløsning av N,N,N<1>,N<1->tetramethylfosforamidat av allyl i 30 ml tetrahydrofuran. Etter omrøring i 45 minutter ved -10°C tilsettes 9,95 g cyklisk 3,3-(1,2-ethandiyl)-acetal av 11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-5-alfa-hydroxy-estr-9-en-3,17-dion oppløst i 20 ml tetrahydrofuran. Ytterligere 20 ml tetrahydrofuran tilsettes deretter, med omrøring i en time ved 20°C.

Reaksjonsblandingen helles over i en vandig oppløs-ning av ammoniumklorid, ekstraheres med ethylacetat, vaskes med vann, tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silicagel med en blanding av cyclohexan og ethylacetat (3:7) som elueringsmiddel, hvorved 3,9 g av det ønskede produkt fåes i uren form. Dette oppløses i methylenklorid, og det filtreres. Isopropylether settes til filtratet, og methylenklorid fjernes ved destillering. Etter fraskillelse og vaskning fåes 3,45 g av den ønskede forbindelse. Sm.p. 198°C.

IR- spektrum (kloroform)

bundet OH 351 Ocro.-"1

gamma-lacton 1760cm~''

aromatiske bånd ved 1610cm~'', 1560cm~^, 1516cm~''/ 823cm~'! .

Analyse: C31H41<O>5N (507,67)

C% H% N%

Beregnet: 73,34 8,14 2,76

Funnet: 73,1 8,3 2,8

Trinn B: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-estr-9-en-3-on.

1,014 g av forbindelsen erholdt ovenfor oppløses i 30 ml tetrahydrofuran. Deretter tilsettes porsjonsvis 500 mg lithiumaluminiumhydrid under en nitrogenstrøm og under omrø-ring. Temperaturen heves til 35 °C og etter omrøring i én time og 30 minutter ved 20°C tilsettes ethylacetat dråpevis og deretter en mettet vandig oppløsning av ammoniumklorid. Den overflytende organiske fase dekanteres fra, og residuet ekstraheres under omrøring med en blanding av tetrahydrofuran og ethylacetat (1:1). De organiske faser vaskes med saltholdig vann, tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk, hvorved man får 993 mg av den ønskede forbindelse i uren form (sm.p. 210°C), som benyttes som den er i det følgende trinn.

Den analyseprøve som erholdes etter rensning ved kromatografering på silica, eluering med en blanding av ethylacetat og ethanol (95:5) og påfølgende krystallisering fra ethanol, smelter ved 234°C.

IR- spektrum (kloroform)

OH ved 3620cm-<1> og bundet OH

Aromatiske bånd ved 161 Sem-1, 1560cm-<1>, 1517cm""1, tilstedeværelse av ketal.

Analyse: C31H45<O>5N (511,7)

C%" H% N%

Beregnet: 77,76 8,86 2,73

Funnet: 72,6 9,0 2,7

Trinn C: Blanding av cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av (17 R)-4<1>,5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-5-alfa-hydroxy-spiro-(estr-9-en-17,2'-(3H)-furan)-3-on (forbindelse A) og (17 R)-4',5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furant)-3-on (forbindelse B) 2 g av forbindelsen ovenfor oppløses i 30 ml pyridin. Ved +3°C tilsettes deretter 1,52 g tosylklorid og blandingen får stå i 40 minutter ved 20°C. Reaksjonsmediet kjøles til +3"C, det tilsettes vann og deretter en oppløsning av natriumbicrabonat etterfulgt av ekstrahering med ethylacetat, vaskning med vann, tørring og konsentrering til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Pyridinet fjernes ved azeotropdestillasjon med toluen, og residuet kromatograferes på silica og elueres med en blanding av cyclohexan og ethylacetat (7/3), hvorved det fåes 395 mg av forbindelse (B) og 500 mg av forbindelse (A).

Undersøkelse av forbindelse A:

IR- spektrum (kloroform)

fravær av CO-bånd, 50H 3512cm-<1>

Aromatiske grupper ved 161 Sem-1, 1557cm-<1>, 1517cm-<1>.

Trinn D: (17 R)-4<1>,5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on (forbindelse B) .

De i trinn C erholdte 500 mg av forbindelse A oppløses i 15 ml ethanol. Det tilsettes 10 ml av en 2N vandig oppløsning av saltsyre, og blandingen får stå i 45 minutter ved 20°C. Etter tilsetning av en vandig oppløsning av natriumbicarbonat, foretaes ekstrahering med methylenklorid, vaskning, tørring og konsentrering til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Derved fåes 390 mg av forbindelse B i uren form.

Rensning av forbindelse B.

De 395 mg av forbindelse B erholdt i trinn C og 390 mg av forbindelse B erholdt ovenfor blandes sammen og kromatograferes på silica med en blanding av cyclohexan og ethylacetat som elueringsmiddel (7:3). Det fåes 645 mg av forbindelse B.

Etter omkrystallisering fra vandig ethanol fåes

367 mg av den forventede forbindelse med smeltepunkt 100°C.

(ikke særlig ren).

Forbindelse B

IR- spektrum (kloroform)

fravær av OH; keton i 3-stilling, 1653cm~^.

C = C, aromatisk 1612cnr1 , 1597cm-1 , 1560cm_<1>, 1518cm_<1>. UV- spektrum

i ethanol: maks. 260 nm =18 900

maks. 302 nm = 22 100

i 0,1N HC1 i ethanol: maks. 300 nm = 20 500

infleksjonspunkter ved 240, 249, 270 nm.

Analyse: C29H37NO2 431,62

NMR- spektrum (deuterokloroform)

Topp ved 0,59 ppm, hydrogenatomer i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,30 ppm, hydrogenatomer i dimethylaminogruppen, Topp ved 3,76 ppm, hydrogenatomer i CH2O,

Topp ved -4,31 ppm, hydrogenatomer i 11-stillingen,

Topp ved 5,70 ppm, hydrogenatomer i 4-stillingen,

Topper ved 6,64 og 7,03 ppm, aromathydrogenatomer.

EKSEMPEL 2: (17 R)-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

1,425 g (Z)-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-estra-4,9-dien-3-on oppløses i 30 ml pyridin og 3 g tosylklorid tilsettes ved + 3°C med omrøring i 4 timer ved +20°C. Etter kjøling til +3°C tilsettes vann og det omrøres i 15 minutter, etterfulgt av ekstrahering med ethylacetat, vaskning med vann, tørring og konsentrering til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Azeotropdéstillasjon foretas med toluen for å fjerne alt pyridin. Deretter oppløses residuet i ethylether, hvoretter det filtreres og konsentreres til tørrhet, hvorved man får 1,37 g av den ønskede forbindelse i krystallinsk form.

Undersøkelser

IR- spektrum (kloroform)

3-keto, delta<4> C=0 1655cm-<1>

C=C 1612cnr<1>

aromat 1597cm-'', 1562cm-<1>, 1518cm_<l>.

UV- spektrum

Ethanol maks. ved 260 nm = 1 9 600

maks. ved 302 nm = 23 300

Ethanol/HCl 0,1N

infl. 215 nm

infl. 238 nm

maks. 300 nm = 21 600

Analyse: C29<H>35NO2 429,60

NMR-spektrum (deuterokloroform)

Topp ved 0,62 ppm, hydrogenatomer i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,92 ppm, hydrogenatomer i dimethylaminogruppen, Topp ved 4,29 ppm, hydrogenatomer i 11-stillingen,

Topp ved 4,60 ppm, hydrogenatomer i CH2O,

Topp ved 5,78 ppm, hydrogenatomer i 4-stillingen,

Topp ved 5,88 ppm, hydrogenatomer i 3'- og 4'-stillingen, Topper ved 6,69 ppm, 7,00 ppm og 7,10 ppm, aromatiske hydrogenatomer .

EKSEMPEL 3: (17 R)-11-beta-14-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk 3,3-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy,17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyrannyloxy)-1-propynyl]-estr-9(11)-en-3-on.

5,06 ml av HCEC-CH2OTHP og 30 ml tetrahydrofuran blandes sammen under en inert atmosfære og kjøles til -5°C. Det tilsettes.så dråpevis 20 ml av en 1,65M oppløsning av butyllithium i hexan, under omrøring i 30 minutter ved 0°C.

I løpet av 40 minutter ved 0°C innføres deretter 6,6 g cyklisk 3,3-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-[estra-9(11)-en-3,17-dion oppløst i 55 ml tetrahydrofuran. Etter kraftig omrøring i 16 timer ved 20°C helles reaksjonsblandingen over i en 10% vandig oppløsning av ammoniumklorid. Reaksjonsblandingen ekstraheres med ethylacetat, vaskes med vann, tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica (1:1), hvorved det fåes 8,3 g av den ønskede forbindelse, som benyttes som den er i det neste trinn.

IR- spektrum (kloroform)

Fritt OH ved 3601 cm-1 + noe absorpsjon av bundet OH,

C=C- ved 1640cm_<1>,

tilstedeværelse av OTHP.

Trinn B; Cyklisk 3,3-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-1 7-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyrannyloxy)-1-propynyl]-estra-9-en-3-on.

1 ) Fremstilling av magnesiumforbindelsen

3 g magnesiumspon og 3 ml tetrahydrofuran blandes sammen under en inert atmosfære. Temperaturen heves til 45°C, og noen få dråper av den følgende oppløsning tilsettes: 20,2

g parabromthioanisol oppløst i 70 ml tetrahydrofuran. Etter initiering av reaksjonen fortsettes innføringen av denne oppløsning, slik at temperaturen holdes rundt 50°C. Etter endt innføring fortsettes oppvarmningen i ytterligere én time ved 50°C.

2) Kondensering

80 ml av oppløsningen av magnesiumforbindelsen, 90 ml tetrahydrofuran og 887 mg kobber(I)klorid blandes sammen under en inert atmosfære og kjøles til -15°C. I løpet av 15 minutter innføres deretter en oppløsning av 12,2 g cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyrannyloxy)-1-propynyl]-estr-9(11)-en-3-on i 25 ml tetrahydrofuran, og det foretaes omrøring i én time ved 0°C. Reaksjonsblandingen helles så over i 10% vandig oppløsning av ammoniumklorid, og det ekstraheres med ethylacetat, vaskes med vann, tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica med en 1:1 blanding av cyclohexan og ethylacetat, hvorved man får 15 g av den ønskede, forbindelse i uren form. 11 g av produktet krystalliseres fra ethanol med 50% vann, hvorved man får 10,2 g av den ønskede forbindelse. Smeltepunkt 160°C.

Undersøkelser:

IR- spektrum (kloroform):

OH i 17-stillingen ved SeOOcm-"1 (fritt) + bundet i 5-stillingen ved 351Ocrn-1

Aromatiske grupper ved 1596cm-<1>, ISSecm-<1>, 1492cm_<1>; tilstedeværelse av OTHP.

UV- spektrum (ethanol):

Infl. 228 nm, maks 255 nm (=15 000)

Infl. 288 nm,

Infl. 297 nm.

Trinn C: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-estr-9-en-3-on.

594 mg cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-estr-9-en-3-on erholdt ovenfor oppløses i 20 ml ethylacetat. 60 mg palla-diumhydroxyd på 10% aktivt trekull tilsettes med omrøring under en hydrogenatmosfære i 14 timer. Katalysatoren fra-fUtreres / og det som blir til overs konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica og elueres med en 1:1 blanding av cyclohexan og ethylacetat, hvorved man får 151 mg av den ønskede forbindelse.

Undersøkelser;

IR- spektrum (kloroform)

Lite fritt OH,

hovedsakelig bundet OH ved 3500cm_<1>,

skulder ved 341 Ocm-''

Aromatiske grupper ved 1557cm-1 , 1492cm-'', 831 cm-1; tilstedeværelse av OTHP.

NMR-spektrum (deuterokloroform)

Topp ved 0,53 ppm, hydrogen i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,47 ppm, hydrogen i -SCH3~methylgruppen,

Topp ved 4,77 ppm, ketalhydrogen i THP-gruppen,

Topper ved 5,6 til 5,84 ppm, ethylenhydrogenatomer,

Topper fra 3,44 til 4,5 ppm, hydrogen i CH20-gruppen og hydrogen i 11-stillingen,

Topp ved 7,17 ppm, aromathydrogenatomer.

Trinn D: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on.

2,42 g cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-estr-9-en-3-on erholdt ovenfor oppløses i 44 ml methanol, og 20 ml 2N vandig saltsyreoppløsning tilsettes med omrøring under en inert atmosfære i 1 time og 30 minutter. Etter fortynning

med vann blir estråksjon foretatt med ethylacetat. Ekstraktene tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica med en 1:1 blanding av cyclohexan og ethylacetat, hvorved det fåes:

- 904 mg av den ønskede forbindelse,

- 567 mg (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on, som gjeninnføres til sur hydrolyse under de samme betingelser. Etter kromatografisk rensning fåes 188 mg av den ønskede forbindelse.

Undersøkelser:

IR- spektrum (kloroform)

OH ved 3609cm-<1> + bundet,

dienon ved 1653cm""<1>,

dienon ved 1601 cm-'',

aromatiske grupper ved 1555cm-<1>Qg I493cm~'',

NMR- spektrum (deuterokloroform):

Topp ved 0,63 ppm, hydrogen i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,47 ppm, hydrogen i -SCH3~methylgruppen,

Topp ved 4,33 ppm, hydrogen i 11-stillingen

Topp ved 4,39 ppm, hydrogenatomer i CH20-gruppen

Topper fra 5,59 til 5,92 ppm, ethylenhydrogenatomer Topper fra 7,04 til 7,24 ppm, aromathydrogenatomer.

Trinn E: (17 R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

11,04 g 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-

on erholdt ovenfor oppløses i 20 ml pyridin, og 2,1 g tosylklorid tilsettes under omrøring i 2 timer ved 20°C. Etter fortynning med vann og med is blir ekstraksjon foretatt med ethylacetat. Ekstraktene vaskes med en fortynnet saltsyreopp-løsning og med vann, tørres deretter og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica med en blanding av cyclohexan og ethylacetat i forholdet 6:4 som elueringsmiddel.

Det fåes 820 mg av den ønskede forbindelse i uren form.

Forbindelsen krystalliseres fra en blanding av methylenklorid og isopropylether, hvorved man får 694 mg av den ønskede forbindelse.

Undersøkelser:

IR- spektrum (kloroform):

- fravær av OH,

dienon, 1653cm-<1> og 1601 cm-1,

aromatiske grupper ved 1555cm-'' og 1492cm-<1>,

NMR- spektrum (deuterokloroform):

Topp ved 0,59 ppm, hydrogenatomer i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,48 ppm, hydrogenatomer i -SCH3-methylgruppen, Topp ved 4,30 ppm, hydrogen i 11-stillingen,

Topp ved 4,6 ppm, hydrogenatomer i CH20-gruppen,

Topp ved 5,81 ppm, hydrogen i 4-stillingen,

Topp ved 5,89 ppm, hydrogenatomer i 3'- og 4'-stillingen, Topper fra 7,04 til 7,27 ppm, aromathydrogenatomer.

UV- spektrum (uren formel)

Maks ved 260 nm 16 100

Maks ved 300 nm

Analyse: (m.v. 432,62)

EKSEMPEL 4: (17 R)-45'-dihydro-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11 -beta-14-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetra-hydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estra-9-en-3-on.

2,1 g cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta- l4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-13-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-estra-9-en-3-on oppløses i 21 ml benzen og 21 ml ethanol. Det tilsettes 840 mg Wilkinsons reagens (klor-tris-(trifenylfosfin)-rhodium), og det hele underkastes hydrogenering i 16 timer. 420 mg Wilkinsons reagens tilsettes, og hydrogeneringen fortsettes

i ytterligere tre timer. Etter konsentrering til tørrhet ved destillering under redusert trykk, kromatografering av residuet på silica og eluering med en 6:4 blanding av cyclohexan og ethylacetat, erholdes: - 336 mg ethylenforbindelse, lik forbindelsen erholdt i trinn C i eksempel 3. - 185 mg av en blanding av ethylenforbindelsen av utgangs-materialet og den ønskede forbindelse. - 1,082 g av den ønskede forbindelse, som benyttes som den er i de etterfølgende trinn.

IR- spektrum (kloroform):

-OH ved 3600cm_<1>,

3504cm~1 , aromatiske grupper ved 1600cm"'', 1492cm-''. NMR- spektrum (deuterokloroform):

Topp ved 0,50 ppm, hydrogenatomer i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,46 ppm, hydrogenatomer i -SCH3-methylgruppen, Topper fra 3,33 til 4,55 ppm, hydrogenatomer i 11-stillingen og hydrogenatomer i CH20-gruppen,

Topp ved 4,63 ppm, ketalhydrogen i THP-gruppen,

Topp ved 7,17 ppm, aromathydrogenatomer.

Trinn Br T7-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on.

1,51 g cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9-en-3-on erholdt i trinn A oppløses i 25 ml methanol, og det tilsettes 11,5 ml av en 50% fortynnet, vandig oppløsning av saltsyre, idet det foretas omrøring under en inert atmosfære ved 20°C i 30 minutter. Etter fortynning med vann foretas ekstrahering med methylenklorid. Ekstraktene tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum kromatograferes på silica med en 1:1 blanding av ether og ethylacetat som elueringsmiddel, hvorved det fåes:

- 768 mg av den ønskede forbindelse.

IR- spektrum (kloroform):

fritt OH ved 3620cm_<1> + bundet ved 341Ocm-<1>,

dienon ved 1653cm-<1> og 1601 cm"!,

aromatiske grupper ved 1555cm_iQg I492cm-1.

Trinn C: (17 R)-41,5 *-dihydro-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl] spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(3H)-furan)-3-on.

1,04 g 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on erholdt i trinn B oppløses i 20 ml pyridin, og 2,1 g tosylklorid tilsettes under omrøring i én time ved 20°C. Etter fortynning med vann og is foretas ekstraksjon med ethylacetat. Ekstraktene vaskes med en fortynnet, vandig saltsyreoppløsning, deretter med vann og med vandig bicarbonatoppløsning. Blandingen tørres og konsentreres til tørrhet ved destillering under redusert trykk. Det erholdte residuum krystalliseres fra en blanding av methylenklorid og ethanol, hvorved man får 818 mg av den ønskede forbindelse, sm.p. 105°C (ikke særlig skarpt).

IR- spektrum (kloroform):

-C - 0 - C - ved 1078cm"1 , 1055cm-<1>,

dienon ved 1653cm-<1>, 1602cm~<1>,

aromatiske grupper ved 1555cm_<1>, 1493cm-<1>.

NMR- spektrum (deuterokloroform):

Topp ved 0,57 ppm, hydrogenatomer i 18-methylgruppen,

Topp ved 2,46 ppm, hydrogenatomer i -SCH3-methylgruppen, Topp ved 3,78 ppm, hydrogenatomer i CH2-O—gruppen,

Topper fra 4,35 til 4,42 ppm, hydrogenatomer i 11-stilling, Topp ved 5,81 ppm, hydrogen i 4-stilling,

Topp ved 7,17 ppm, aromathydrogenatomer.

Analyse: C28H34<O>2S (434,64)

EKSEMPEL 5: (17 R)-11-beta- 12-(methoxyfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(5H)-furan-3-on.

Trinn A: (Z)-dimethylketalet av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta hydroxy-17-alfa-C 3-(tetrahydro-(2H)-2-pyranyloxy)-1 - propynyl]-estra-9(11)-en-3-on.

400 ml av en 1,6M oppløsning av butyllithium i hexan kjøles til 0°C, og ved denne temperatur tilsettes 98 g

av HC=C-CH20THP-reagens i 180 ml tetrahydrofuran under omrø-ring i 30 minutter ved 0°C.

66,4 g dimethoxyketal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-estra-9(11)-en-3,17-dion oppløst i 200 ml tetrahydrofuran tilsettes dråpevis under omrøring i 2 timer mens temperaturen får returnere til omgivelsenes temperatur. Reaksjonsblandingen helles så over i en vandig oppløsning av ammoniumklorid, og det ekstraheres med ethylacetat og deretter med methylenklorid. De organiske faser slåes sammen, vaskes med vann og tørres. Oppløsningsmidlene fjernes deretter under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3 med 1% triethylamin). Det fåes 53 g av forbindelsen i uren form, som renses ved kromatografering på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:aceton i forholdet 95:5, med 1% triethylamin).

Trinn B: (Z)-dimethylketalet av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-(2H)-2-pyranyloxy)-1 - propenyl]-estra-9(11)-en-3-on.

2,5 g av den urene forbindelse erholdt i trinn A i 400 ml ethylacetat hydrogeneres i 30 minutter under et trykk på 1100 mb i nærvær av 25 mg palladium på 10% bariumsulfat og 1 ml pyridin. Etter frafiltrering av katalysatoren, vaskning og ekstråksjon med ethylacetat ble de organiske faser slått sammen, og oppløsningsmidlene fjernet under redusert trykk. Det utvinnes 2,5 g av forbindelsen i uren form, som renses ved kromatografering på silica med methylenklorid:-aceton i forholdet 95:5 som elueringsmiddel. Det fåes 728 mg av den ønskede forbindelse.

IR- spektrum, (CHCI3):

OH 3600cm"<1>, 3400cm"1 (F)

Tilstedeværelse av alfa-epoxy.

Trinn C: (Z)-dimethylketalet av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-(2-methoxyfenyl)-17-alfa-[3-(tetrahydro-(2H)-2-pyranyloxy ) -1 -propenyl]-estr-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen:

Operasjonen foretas som i trinn B i eksempel 3, idet man går ut fra magnesium og orthobromanisol. Det fåes en oppløsning med titer 0,72 M/l.

Kondensering:

3 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn oppløses i 60 ml tetrahydrofuran under en inert atmosfære. 187 mg kopper(I)klorid tilsettes med oppvarmning til 34°C ± 1°C. I løpet av 20 minutter innføres 26,2 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt ovenfor, under omrøring i 16 timer. Temperaturen får gå tilbake til omgivelsestemperaturen. Reaksjonsblandingen helles over i en oppløsning av ammoniumklorid under omrøring i 15 minutter, hvoretter ekstrahering foretas med ethylacetat. Ekstraktene vaskes med en vandig oppløsning av natriumklorid, tørres og inndampes til tørrhet under redusert trykk. Det fåes 6,58 g av den urene forbindelse, som renses ved kromatografering på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:aceton i forholdet 92:8, med 1% triethylamin).

IR- spektrum (CHCI3):

fritt OH 3600cm"<1>, bundet 3450cm"<1>,

aromatiske grupper 1597cm-'', 1584cm~1 , 1490cm-<1>.

Trinn D: (Z)-11-beta-(2-methoxyfenyl)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-estr-4,9-dien-3-on.

1,08 g av forbindelsen erholdt i trinn B oppløses

i 10 ml ethanol ved omgivelsenes temperatur. Det tilsettes en oppløsning av 1,08 g kaliumhydrogensulfat i 6,5 ml vann under omrøring i fem timer ved omgivelsestemperaturen. Etter fjerning av ethanolen foretas ekstrahering med methylenklorid. Den organiske fase vaskes med vann, tørres og inndampes til tørrhet under redusert trykk. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 1:1) fåes 0,703 g av den ønskede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3):

fritt OH 3612cm~<1> og bundet 3415cm~<1>,

dienon 1654cm-<1>, 1597cm-<1>

aromatiske grupper ved 1488cm-<1>.

Trinn E; (17 R)-11-beta-(2-methoxyfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan-3-on.

0,661 g av .produktet erholdt i foregående trinn oppløses i 13,2 ml pyridin ved omgivelsestemperatur. Oppløs-ningen kjøles til 0°C, og i løpet av fem minutter tilsettes 1,32 g tosylklorid. Temperaturen tillates å gå tilbake til omgivelsestemperaturen, og det omrøres i én time. Temperaturen senkes igjen til 0°C, og 14 ml 6N saltsyre tilsettes. Etter dekantering blir den vandige fase ekstrahert med ethylacetat, vasket med vann og tørret og oppløsningsmidlene fjernet under redusert trykk. Etter kromatografering på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 8:2 som elueringsmiddel fåes 0,459 g av den ønskede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3):

dienon 1655cm~-', 1597cm-'',

aromatiske grupper ved 1 488cm~'' ,

1080cm_<1>, 1040cm~<1>.

EKSEMPEL 6: (17R)-11-beta-(4-klorfenyl)-4<1>,5<1->dihydro-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan-3-on.

Trinn A: Dimethylketalet av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta-hydroxy-1 7-alfa-[3-tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9(11)-en-3-on. 6 g av dimethylketalet av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1 - propynyl]-estra-9(11)-en-3-on fremstilt som i trinn A i eksempel 5 oppløses i 60 ml benzen og underkastes hydroge-_ nering ved 1860 mbar i nærvær av 1,5 g Wilkinsons reagens i syv timer. Blandingen fortynnes med ether og filtreres. Filtratet konsentreres til tørrhet under redusert trykk, og 7,7 g av den urene forbindelse oppsamles og kromatograferes på silica med petroleumether (b.p. 40-70°C) og ethylacetat i forholdet 4:6 som elueringsmiddel. Det erholdes 4,95 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Fritt OH 3620cm~<1>, 3600cm~<1>,

-C=C- 1640cm"<1>.

Trinn B: Dimethylketalet av 11-beta-(4-klorfenyl)-5-alfa, 1 7-beta-dihydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9(11)-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen:

Operasjonen foretas som i trinn B i eksempel 3, idet man går ut fra 1,22 g magnesium og 3 ml av den fremstilt oppløsning og starter med 7,65 g parabromklorbenzen i 50 ml tetrahydrofuran.

Kondensering:

Operasjonen foretas som i trinn B i eksempel 3, idet man benytter 23 ml av oppløsningen av magnesiumforbindelsen, 165 mg kopper(I)klorid og 2,46 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn A oppløst i 12 ml tetrahydrofuran. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: petroleumether (b.p. 40-70°C) og ethylacetat i forholdet 1:1) erholdes 2 g av den forventede forbindelse i uren form, som benyttes som den er i det følgende trinn.

IR- spektrum (CHCI3):

OH i 5-stillingen 3478cm-<1>,

OH i 17-stillingen maks 3620cm-<1>, skulder 3600cm-<1>,

aromatiske bånd

1599cm"<1>, 1489cm"<1>, -OCH3, 2835cm~1.

Trinn C: 11-beta-(4-klorfenyl)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-estra-4,9-dien-3-on. 15 ml 2N saltsyre tilsettes til 1,99 g av forbindelsen- erholdt i det foregående trinn, i 20 ml methanol.

Blandingen oppvarmes til 50°C i 45 minutter, helles over i en vandig oppløsning av natriumbicarbonat, og det ekstraheres med ethylacetat. De organiske faser tørres og konsentreres til tørrhet under redusert trykk. Etter omkrystallisering fra en blanding av methylenklorid og isopropylether blir det erholdt 1,42 g av den forventede forbindelse. Smeltepunkt 262°C.

IR- spektrum (CHCI3)

OH, fritt + bundet, 3620cm_<1>,

dienon 1655cm-<1>, 1602cm-<1>.

aromatiske bånd ved 1570cm-<1>, 1490cm-1. Analyse; C27H31CIO2 (422,99)

Trinn D: (17R)-11-beta-(4-klorfeny1-4'.5<1->dihydro-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

1 g av forbindelsen erholdt i trinn C oppløses i

20 ml pyridin under en inert atmosfære, og oppløsningen kjøles til 0-5°C. 2,2 g tosylklorid tilsettes under omrøring i én time og 30 minutter ved omgivelsenes temperatur. Reaksjonsblandingen helles over i isvann og omrøres i 15 minutter, og det ekstraheres deretter med ethylacetat og vaskes med en mettet, vandig oppløsning av natriumbicarbonat. Utfeiningen fraskilles og tørres, hvorved det erholdes 694 mg av den ønskede forbindelse.

Filtratet tørres, og oppløsningsmidlet fjernes under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan-ethylacetat i forholdet 6:4), og man får den ønskede forbindelse, som omkrystalliseres fra en blanding av ethanol og kloroform (2:1). Sm.p. 308CC.

IR- spektrum (CHCI3)

dienon 1654cm_<1>, 1603cm~<1>.

aromatiske grupper ved 1572cm~<1>, 1490cm-<1>.

1078cm_<1>, 1055cm_<1>.

Analyse: C27<H>31CIO2 (422,99)

EKSEMPEL 7: (17R)-4'5'-dihydro-11-beta-(4-methoxyfenyl)-spiro-(estr-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Dimethylketalet av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11 - beta-(4-methoxyfenyl)-1 7-alfa-[3-(tetrahydro-3H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen:

Operasj onen utføres som i trinn B i eksempel 2, idet man går ut fra 1,45 g magnesium og 9,15 g parabromanisol i 45 ml tetrahydrofuran. Det erholdes en magnesiumforbindelse med titer 0,9 M/l.

Kondensering:

Operasjonen utføres som i eksempel 3, idet man anvender 15 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt som beskrevet ovenfor, 15 ml tetrafuran, 165 mg kobber(I)klorid og 2,4 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 6, trinn A. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: petro-leumsether (b.p. 40-70°C) og ethylacetat i forholdet 1:1) erholdes 6 g av den ønskede forbindelse, som benyttes som den er i det etterfølgende trinn.

Trinn B: 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-(4-methoxyfenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 6, trinn C, idet man går ut fra 6 g av forbindelsen erholdt i trinn A. Det erholdes 5 g av den forventede forbindelse i uren form, og det foretas kromatografering på silica under eluering med en blanding av methylenklorid og aceton i forholdet 7:3.

IR- spektrum (CHCI3)

OH, fritt + bundet, 3620cm-<1>,

C=0 1656cm-<1>,

aromatisk C=C 1608cm-<1>, 1509cm-<1>,

Trinn C: (17R)-4<1>5'-dihydro-11-beta-(4-methoxyfenyl)-spiro-(estr-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Operasjonen-utføres som i eksempel 6, trinn D, idet man går ut fra 655 mg av forbindelsen erholdt i trinn B og 1,4 g tosylklorid. Etter kromatografering erholdes 650 mg av forbindelsen i uren form. Forbindelsen omkrystalliseres fra en blanding av methylenklorid og isopropylether, hvorved det erholdes 500 mg av den forventede forbindelse. Sm.p. 192°C.

IR- spektrum (CHCI3)

C=0 1655cm~<1>,

aromatisk C=C 1608cm_<1>, (maks) 1582cro.-1 (skulder) 1509cm-<1>, C-O-C 1078cm-<1>, lOSScrn"<1>

Analyse: C28H34<O>3 (418,58)

[o]D = + 133,5° ± 2,5° (c = 1% CHCI3).

EKSEMPEL 8: (17R)-11-beta-(3-thienyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1 - propenyl]-estr-9(11)-en-3-on.

940 mg av forbindelsen fremstilt i eksempel 3, trinn A oppløses i 20 ml ethylacetat i nærvær av 5 ml pyridin. 9 mg 10%-ig palladium på bariumsulfat tilsettes, og blandingen hydrogeneres i 24 minutter ved atmosfæretrykk. Katalysatoren frafiltreres, filtratet vaskes med ethylacetat og konsentreres til tørrhet. Det erholdes 965 mg forbindelse i uren form,

som kromatograferes på silica (elueringsmiddel: methylenklorid: ethylacetat i forholdet 8:2).

Det erholdes 795 mg av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Fritt OH 3600crrr1 , bundet * 3400cm-<1>

delta 9-11 1640cm~<1>,

epoxy 971 cm-1.

Trinn B: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa-17-beta-dihydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-11-beta-(3-thienyl)-estr-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen:

Operasjonen utføres som i trinn B i eksempel 3, idet man går ut fra magnesium og med 13-bromthiofen. Det erholdes en oppløsning med titer 0,6 M/l.

Kondensering:

En suspensjon bestående av 335,2 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt ovenfor i 14 ml tetrahydrofuran avkjøles til -20°C. Det tilsettes 0,210 g kobber(I)klorid under omrø-ring i 10 minutter. En oppløsning av 2,5 g av forbindelsen erholdt i trinn A i 25 ml tetrahydrofuran tilsettes dråpevis under omrøring i én time mens temperaturen bibeholdes ved -20°C. Etterat temperaturen har fått gå tilbake til omgivelsestemperaturen tilsettes dråpevis 10 ml mettet ammonium-kloridoppløsning. Reaksjonsmediet helles deretter over i 90 ml mettet ammoniumkloridoppløsning, og blandingen omrøres i 15 minutter. Etter dekantering ekstraheres den vandige fase med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med vann og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk.

Det erholdes 4,68 g forbindelse i uren form, hvilken forbindelse kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 6:4 med 1% triethylamin). Det fåes 2,107 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 158°C.

IR- spektrum (CHCI3 )-

OH i 5-stillingen, 3501 cm-1

Trinn C: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11 -beta-(3-thienyl)-estra-4,9-dien-3-on.

2,1 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn oppløses i 42 ml ethanol under en inert atmosfære. 6,3 ml av en 2N vandig saltsyreoppløsning tilsettes under omrøring i tre timer ved omgivelsenes temperatur. Etter kjøling til ca. 5"C tilsettes gradvis 52 ml vann under omrøring i 30 minutter. Utfeiningen fraskilles, vaskes med vann inntil nøytralitet er oppnådd, oppløses deretter i methylenklorid og tørres. Oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved det fåes 1,15 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 240"C.

IR- spektrum (CHCI3)

OH, fritt og bundet, 3611 cm-1,

dienon, 1657cm_<1>, 1603cm-<1>.

Trinn D: (17R)-11-beta-(3-thienyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen foretas som i eksempel 5, trinn D, idet man anvender 1,15 g av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn, 23 ml pyridin, 2,3 g tosylklorid og 23 ml 6N saltsyre.

Det erholdes 1,03 g av den urene forbindelse, som renses ved kromatografering på silica under eluering med ethylenklorid og aceton i forholdet 98:2. Det erholdes 0,755 g av den forventede forbindelse, som omkrystalliseres fra isopropanol. Sm.p. 242°C.

IR- spektrum (CHCI3)

dienon 1654cm~<1>, 1603cm~<1>

1520cm-1 1080cm-1. Analyse: <C>25H28°2S: 392,565

EKSEMPEL 9: (17R)-11-beta-(4-acetylfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A Cyclisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(2-methyl-1,3-dToxolan-2-yl)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-propenyl]-estra-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen

Operasjonen utføres som i eksempel 3, trinn B,

idet man går ut fra 1,45 g magnesium og 12,15 g ethylenketal av parabromacetofenon. Det fåes en suspensjon med titer 0,8 M. Kondenser ing

21 mg kobber(I)klorid tilsettes til 8 ml suspensjon av magnesiumforbindelsen under en inert atmosfære. Det foretas kjøling til 0-5°C under omrøring i 15 minutter. 1 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 8, trinn A oppløst i 15 ml tetrahydrofuran tilsettes deretter dråpevis under omrøring i én time ved omgivelsenes temperatur. Reaksjonsmediet helles over i en vandig oppløsning av ammoniumklorid og det ekstraheres med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med vann, tørres og konsentreres til tørrhet. Det erholdes 3,5 g av forbindelsen i uren form, hvilken forbindelse renses ved kromatografering på silica med cyclohexan-ethylacetat i forholdet 1:1 som elueringsmiddel.

IR- spektrum (CHCI3)

OH i 5-stilling: 3500cm_<1>,

OH, fritt + bundet : 3600cm-<1>

aromatisk C=C: 1605cm~"', 1502cm-<1>.

Trinn B: (Z)-11 -beta-(4-acetylfenyl)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1 -propenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

2,07 g av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn oppløses i 40 ml methanol. Det tilsettes 16 ml av en vandig 2N saltsyreoppløsning under omrøring i én time og 30 minutter ved 50°C. Reaksjonsmediet helles over i en vandig natriumbicarbonatoppløsning, og det ekstraheres med ethylacetat, vaskes med vann, tørres og konsentreres til tørrhet under redusert trykk. Det erholdes 1,63 g av forbindelsen i uren form, som kromatograferes på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:aceton i forholdet 7:3), og omkrystalliseres deretter fra ethanol, hvorved man får 1,48 g av den forventede forbindelse* Sm.p. ca. 130°C.

IR- spektrum (CHCI3)

C = O : 1678cm-<1>

-CH3 <:> 1359cm-1

C = C + aromatisk : 1604cm-<1>, 1565cm~<1>

dienon : 1657cm-<1>

fritt OH : 3609cm"<1>

bundet OH : 341Ocm-<1>.

Analyse: C29H34<O>4 <:> 444,57

C% H%

Beregnet : 77,99 7,67

Funnet : 78 7,7

Trinn C: (17R)-11-beta-(4-acetylfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan-3-on.

0,704 g av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn oppløses i 16 ml pyridin under en inert atmosfære og avkjøles deretter til 0°C. 1,49 g tosylklorid tilsettes under omrøring i to timer, og temperaturen får vende tilbake til omgivelsenes temperatur. Reaksjonsmediet helles over i isvann, omrøres i 15 minutter, og det ekstraheres med ethylacetat, vaskes med natriumbicarbonatoppløsning, tørres og inndampes til tørrhet. Det fåes 0,775 g av forbindelsen i uren form, som kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan-ethylacetat i forholdet 1:1), og deretter omkrystalliseres fra en blanding av ethanol og methylenklorid. Det erholdes 0,555 g av den forventede forbindelse. Sm.p. ca. 125-130°C.

IR- spektrum (CHCI3)

C = O : 1678cm-<1>

C<H>3 <:> 1359cm~1

C = 0 + aromatisk : 1604cm-<1>, 1565cm_1

dienon : 1657cm-<1>

[a]D = +231,5° ±3° (c = 1% CHCI3).

Analyse: C29H32<O>3 <:> 428,57

EKSEMPEL 10: (17R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-5(10),9(11)-dien-17,2<1->(5<1>H)-furan)-3-on og (17R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

1,5 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 3, trinn C oppløses i 30 ml methanol, og det tilsettes 15 ml 1N saltsyre. Ytterligere 30 ml methanol og 30 ml dioxan tilsettes under omrøring i to timer ved omgivelsenes temperatur. Reaksjonsmediet helles over i vann, og det ekstraheres med

methylenklorid og konsentreres til tørrhet, hvorved det erholdes 1,23 g residuum, som igjen oppløses i 25 ml pyridin. 1,91 g tosylklorid tilsettes under omrøring i én time og 30 minutter ved omgivelsenes temperatur, hvoretter blandingen helles over i isvann og ekstraheres med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med vandig saltsyreoppløsning og deretter med vandig natriumkloridoppløsning, skilles og inndampes til tørrhet. Det erholdes 1,12 g av forbindelsen i uren form, som kromatograferes på silica med methylenklorid:-ethylacetat i forholdet 9:1 som elueringsmiddel, hvorved man får 98 mg av den forventede forbindelse og 863 mg av det tilsvarende 4,9-dien. (Identisk med forbindelsen erholdt i eksempel 3, trinn E.)

IR- spektrum (CHCI3) for estra-5(10),9(11)-dienet.

C = 0 : 1712cm"<1>

C = C + aromatisk : 1590cm-<1>, 1492cm_<1>

C = C i spiroringen : 1626cm-<1>

IR- spektrum (CHCI3) for estra-4,9-dienet

C = 0 : 1653cm~<1>

C = 0 konjugert med C = 0 : 1600cm"<1>

aromatisk : 1492cm-<1>.

EKSEMPEL 11: N-oxydet av (17R)-4<1>,5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethylamino)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

1,43 g av (17R)-4',5'-dihydro-11-beta-[4-(dimethyl-amino) -fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on fremstilt i eksempel 1 (forbindelse B) oppløses i 30 ml methylenklorid og kjøles til 0-5°C. I løpet av 15 minutter tilsettes 0,666 g av en 85%-ig oppløsning av metaklorperbenzoesyre i methylenklorid.

Etter omrøring i én og en halv time ved 0-5°C helles reaksjonsmediet over i 100 ml 0,2N natriumthiosulfat-oppløsning og det ekstraheres med methylenklorid. Det vaskes med vandig natriumbicarbonatoppløsning og deretter med vann. Etter tørring og fjerning av oppløsningsmidlene fåes 11,8 g forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med methylenklorid:methanol i forholdet 7:3 som elueringsmiddel. Det erholdes 1,34 g av den forventede forbindelse (solvat inneholdende methylenklorid), som lyofiliseres.

IR- spektrum (CHCI3)

- C = 0 : 1655cm-<1>

C = C og aromatisk : 1602cm-'', 1498cm-<1>

ta]D + 128° ±2° (c = 1% ethanol).

EKSEMPEL 12: (17R)-4'5'-dihydro-11-beta-[4-(1-methylethyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9(11)-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 6, trinn A,

idet man anvender 1 g av forbindelsen cyklisk (1,2-ethandiyl) -acetal av 17-beta-hydroxy-5-alfa,10-alfa-epoxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propynyl]-estr-9(11)-en-3-on fremstilt i eksempel 3, trinn A, og 0,25 g Wilkinson-katalysator, hvorved det erholdes 1,28 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Fritt OH : 3620cm-<1>, 3605cm-<1>

Sterkt bundet OH : 3485cm.-1

C = C : 1643cm~1 .

Trinn B: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(1-methylethyl)-fenyl-17-alfa-13-(tetra-hydro-2H-2-pyranyloxy)-propyl]-estr-9-en-3-on.

2,45 g av forbindelsen fremstilt som i trinn A, oppløst i 10 ml tetrahydrofuran kjøles til 0°C og det tilsettes 110 mg kobber(I)klorid under omrøring i 10 minutter.

I løpet av 15 minutter tilsettes deretter 32 ml av en 0,66 M/l oppløsning av 4-isopropylfenylmagnesiumbromid i tetrahydrofuran. Etter omrøring i to timer ved +3 ±1°C helles blandingen over i en isavkjølt vandig ammoniumkloridoppløsning, og det ekstraheres med ether og deretter med methylenklorid. Ekstraktene tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Det erholdes 4,65 g forbindelse i uren form, som kroma-tograf eres på silica med cyclohexan:ethylacetat som elueringsmiddel. Forbindelsen benyttes som den er i det følgende trinn.

Trinn C: 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-[4-(1-methylethyl)-fenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

2,58 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn omrøres i to timer ved omgivelsenes temperatur i 20 ml ethanol med 5 ml 2N saltsyre. Etter konsentrering til et lite volum under redusert trykk foretas ekstrahering med methylenklorid, vaskning og tørring, og oppløsningsmidlet fjernes under redusert trykk, hvorved det erholdes 2,2 g av den forventede forbindelse. Denne renses ved kromatografering på silica med n-hexan:ethylacetat i forholdet 3:7 som elueringsmiddel.

IR- spektrum (CHCI3)

Fritt OH : 3620cm_<1> + bundet

dienon : 1655cm-<1> til 1601 cm-1,

aromatisk : 1590cm~<1>.

Trinn D: (17R)-4'5<1->dihydro-11-beta-[4-(1-methylethyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(3H)-furan)-3-on.

1,15 g av den tidligere erholdte forbindelse, 20

ml pyridin og 2,1 g tosylklorid omrøres i én og en halv time ved omgivelsenes temperatur. Etter fortynning med 50 ml vann og is tilsettes 20 ml konsentrert saltsyre langsomt. Den vandige fase ekstraheres deretter med methylenklorid og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved det fåes 1,686 g forbindelse i uren form. Det foretas kromatografering på silica med methylenklorid:aceton i forholdet 95:5 som elueringsmiddel og deretter omkrystallisering fra ethanol, hvorved man får 659 mg av den forventede forbindelse. Sm.p. 114°C.

IR- spektrum (CHCI3)

aromatisk

c _ c 1601 cm-1, 1510cm-<1>

Analyse: C30H38<O>2 <:> 430,635

EKSEMPEL 13: (17R)-11-beta-[3-(methylthio)-fenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa-17-beta-dihydroxy-11-beta-t3-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(1-tetra-hydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen foretas som i eksempel 8, trinn B, under anvendelse av 2,5 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 8, trinn A, og 110 mg kobber(I)klorid og 18 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt som i eksempel 3. Man går ut fra 3-bromthioanisol med titer 1,17 M/l, hvorved det erholdes 3 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Fritt OH ca. 3600cm-<1> + bundet 3498cm-<1> (maks)

3440cm-<1> (skulder)

aromatisk 1587cm~<1>, 1586cm_<1>.

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-13-(methylthio)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on. 3 g av forbindelsen erholdt tidligere, 30 ml ethanol og 5 ml 2N saltsyre sammenblandes i to timer ved omgivelsenes temperatur og konsentreres deretter til et lite volum under redusert trykk. Det foretas ekstrahering med methylenklorid, vaskning og tørring, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:3 som elueringsmiddel, hvorved det erholdes 1,083 g av den forventede forbindelse.

Sm.p. 168°C.

IR- spektrum (CHCI3)

OH : 3613cm-<1> + bundet 3440cm-<1>

dienon : 1656cm~<1> til 1601 cm-1

aromatisk : 1587cm~<1>/ 1569cm-<1>, 1474cm_<1>.

Trinn C: (17R)-11-beta-[3-(methylthio)-fenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man går ut fra 1,050 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn B, hvorved det erholdes 592 mg av den forventede forbindelse i ren form. Sm.p. 150°C.

IR- spektrum (CHCI3)

dienon : 1657cm_<1> til 1601 cm-1

aromatisk : 1587cm-1 , 1569cm-1 , 1473cm.-1

-C-O-C- : 1080cm-<1> til 1041cm-<1>.

Analyse: C28H32SO2 <:> 532,62

EKSEMPEL 14: (17R)-11-beta-(4-klorfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 11-beta-(4-klorfenyl)-5-alfa,17-beta-dihydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B,

idet man går ut fra 2,5 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 8, trinn A, 160 mg kobber(I)klorid og 18 ml av en oppløsning av magnesiumforbindelsen fremstilt i eksempel 3 ved å starte med 4-klorbrombenzen med titer 0,87 M/l. Det erholdes 3,082

g av den forventede forbindelse i ren form.

IR- spektrum

OH : 3500cm-<1> + bundet, mot 3405cm-<1>

aromatisk : 1600cm-'', 1490cm-<1>.

Trinn B: (Z)-11-beta-(4-klorfenyl)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1 -propenyl)-estr-4,9-dien-3-on.

3,05 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn omrøres i tre timer ved omgivelsenes temperatur i 30

ml ethanol og 30 ml vann i nærvær av 3 g kaliumhydrogensulfat.

Blandingen konsentreres til et lite volum under redusert trykk, fortynnes med vann og ekstraheres med methylenklorid. Ekstraktene tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved man får 2,54 g av forbindelsen i uren form. Det foretas kromatografering på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5 som elueringsmiddel og deretter omkrystallisering fra ethylacetat. Sm.p. 214°C.

IR- spektrum (CHCI3)

OH : ca. 3611 cm-1 + bundet

dienon : 1654cm~<1> til 1602cm-<1>

aromatisk : 1013cm-<1>

Trinn C: (17R)-11-beta-(4-klorfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man går ut fra 1,03 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn B, 20 ml pyridin, 3 g tosylklorid og 25 ml konsentrert saltsyre, hvorved man får 726 mg av den forventede forbindelse i krystallinsk form. Sm.p. >260°C.

IR- spektrum (CHCI3)

dienon : 1654cm~<1> til 1602cm-<1>

aromatisk : 1572cm~<1>, (skulder) 1490cm~<1>

1081 cm"1 til 1039cm-1 . Analyse: C27<H>29CIO2 : 420,98

EKSEMPEL 1-5: (1 7R) -11 -beta- [4- (1 -methylethoxy) -f enyl ] -spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(1-methylethoxy)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B, under anvendelse av 2,5 g av forbindelsen fremstilt som beskrevet i eksempel 8, trinn A, 110 mg kobber(I)klorid og 35 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt som i eksempel 3, idet man starter med 1-brom-4-(1-methylethoxy)-benzen. Det erholdes 6,764 g av forbindelsen i uren form, som kromato-graf eres på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3 med 1% triethylamin), hvorved man får 3,173 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-[4-(1 -methylethoxy)-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 13, trinn B, idet man går ut fra 3,14 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn A, 20 ml ethanol og 2 ml 2N saltsyre, hvorved man får 1,257 g av den forventede forbindelse i uren form.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-[4-(1-methylethoxy)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man går ut fra 1,22 g av forbindelsen erholdt i det

foregående trinn B, 20 ml pyridin, 2,1 g tosylklorid og 25 ml konsentrert saltsyre, hvorved man får 849 mg av forbindelsen i uren form, som omkrystalliseres fra ethanol. Sm.p. 155°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C30<H>36<O>3 : 444,619

EKSEMPEL 16: (17R)-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2 *-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyrranyloxy)-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B, idet man går ut fra 1,71 g av forbindelsen erholdt i eksempel 8, trinn A, 180 mg kobber(I)klorid og 20 ml 4-(1-pyrroli-dinyl ) -f eny Ima gnesiumbromid, med titer 1 M/l.

Etter ekstraksjon med ether, vaskning med vann og konsentrering under redusert trykk erholdes 4,39 g av forbindelsen i uren form. Denne kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3 som elueringsmiddel, hvorved det erholdes 2,3 g av den forventede forbindelse, som benyttes som den er i det etterfølgende trinn.

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-estr-4,9-dien-3-on.

2,3 g av forbindelsen fremstilt i trinn A i 25 ml methanol blandes med 10 ml 2N saltsyre i to og en halv time-ved omgivelsenes temperatur og deretter i 30 minutter ved 50°C. Blandingen kjøles, fortynnes med vann og gjøres alkalisk ved tilsetning av 20 ml av en vandig N natriumhydroxyd-oppløsning og deretter med en sur natriumcarbonatoppløsning. Etter ekstrahering med ethylacetat, vaskning med vann og tørring fjernes oppløsningsmidlene under redusert trykk, og man får 1,825 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-[1-pyrrolidinyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 2, idet man går ut fra 1,4 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn B, 30 ml pyridin og 3 g tosylklorid og ekstraherer med ether, hvorved man får 1,25 g av forbindelsen i uren form. Denne kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:-ethylacetat i forholdet 7:3, deretter med benzen-ethylacetat i forholdet 85:15), hvorved det fåes 0,9 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C31H37<N>7O2

EKSEMPEL 17: (17R)-11-beta-(2-thienyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyrranyloxy)-1 - propenyl]-11-beta-(2-thienyl)-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B,

idet man går ut fra 2,5 g av forbindelsen erholdt i eksempel 8, trinn A, 110 mg kobber(I)klorid og 22,2 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt som i eksempel 3 ved å starte med 2-bromthiofen, med titer 1,05 M/l.

Det erholdes 3,6 g forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5 som elueringsmiddel, hvorved det fåes 2,196 g av

den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

OH 3600cm-<1> + bundet 3500cm_<1>

thiofen 1520cm_<1> 825cm.-1 .

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-(2-thienyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen foretas som i eksempel 13, trinn B, idet man går ut fra 2,1 g av den tidligere erholdte forbindelse, 20 ml ethanol og 2 ml 2N saltsyre, hvorved det fåes 1,1 g av den forventede forbindelse i ren form.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-(2-thienyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man går ut fra 1,03 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn, 20 ml pyridin, 2,1 g tosylklorid og 25 ml konsentrert saltsyre. Det fåes 984 mg av forbindelsen i ren form, som omkrystalliseres fra ethanol. Sm.p. 182°C. IR- spektrum (CHCI3)

thiofen : 1520

Analyse: C25H28SO2

EKSEMPEL 18: (17R)-11-beta-[4-(ethylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(ethylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2- pyranyloxy )-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen

Operasjonen utføres som i eksempel 3, idet man går ut fra 1,125 g magnesium og 9,3 g 1-brom-4-ethylthiobenzen, hvorved det fåes en oppløsning av magnesiumforbindelsen med titer 0,87 M/l.

Kondensering

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B

under anvendelse av 3 g av forbindelsen erholdt i eksempel 8, trinn A, 110 mg kobber(I)klorid og 30 ml av magnesiumforbindelsen fremstilt ovenfor. Det ekstraheres med methylenklorid, vaskes og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Det erholdes 10 g av forbindelsen i uren form, som kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5 som elueringsmiddel, hvorved man får 3,159 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: (Z)-beta-[4-(ethylthio)-fenyl]-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1 -propenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

3,474 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn omrøres i 30 minutter i 60 ml methanol med 2 ml methylenklorid og 5 ml 2N saltsyre, og konsentreres til et lite volum. 10 ml vandig N natriumhydroxydoppløsning tilsettes, etterfulgt av ekstrahering med methylenklorid. Ekstraktene vaskes med vann og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved det fåes 2,574 g forbindelse i uren form. Det foretas kromatografering på silica med cyclohexan: ethylacetat i forholdet 3:7 som elueringsmiddel, og det erholdte residuum krystalliseres fra ethanol, hvorved

man får 1,052 g av den forventede forbindelse i ren form. Sm.p. 100°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-[4-(ethylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<*->(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man starter med 600 mg av forbindelsen erholdt i det foregående trinn, 15 ml pyridin og 1,5 tosylklorid.

Det erholdes 872 mg forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5 som elueringsmiddel, og krystalliseres fra ethanol. Sm.p. 100°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C30H34O2<S> 446,657

EKSEMPEL 19: (17R)-11-beta-[4-(4,5-dihydro-4,4-dimethyl-2-oxazolyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H))-furan)-3-on

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 11-beta-t4-(4,5-dihydro-4,4-dimethyl-2-oxazolyl)-fenyl]-5-alfa,17-beta-di-hydroxy-1 7-alfa- t3-tetrahydro-2H-2- pyranyloxy )-1 -propenyl ]-estr-9-en-3-on.

Fremstilling av magnesiumforbindelsen

Operasjonen utføres som i eksempel 3, idet man går ut fra 3,5 g magnesium og 25 g 2-(4-bromfenyl-4,5-dihydro-4,4-dimethyloxazol, hvorved man får en oppløsning med titer 0,74 M/l.

Kondensering

Operasjonen utføres som i eksempel 3, idet man går ut fra 80 ml av oppløsningen av magnesiumforbindelsen ovenfor, 800 mg kobber(I)klorid og 10 g av forbindelsen fremstilt som i eksempel 8, trinn A. Etter kromatografering på silica

(elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 3:7)

fåes 14,3 g av den forventede forbindelse, som benyttes som den er i det neste trinn.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: (Z)-11-beta-[4-(4,5-dihydro-4,4-dimethyl-2-oxazolyl)-fenyl]-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Under en inert atmosfære oppløses 13,1 g av den foregående forbindelse i 130 ml dioxan og 130 ml 2N saltsyre under omrøring i én time. Oppløsningen helles deretter over i en vandig natriumbicarbonatoppløsning og det ektraheres med ethylacetat. Ekstraktene vaskes med vann og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved det fåes 10,3 g forbindelse i uren form, som omkrystalliseres fra ether. Sm.p. 269°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-[4-(4,5-dihydro-4,4-dimethyl-2-oxazolyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2 * -(5H))-furan)-3-on.

0,49 g av forbindelsen erholdt tidligere tilsettes

i suspensjon til 10 ml pyridin og det tilsettes 1 g tosylklorid. Det hele omrøres i to og en halv time. Etter fortynning med isavkjølt vann blir utfeiningen fraskilt og oppløst i methylenklorid. Den organiske fase fraskilles og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silica med methylenklorid:ethylacetat i forholdet 1:1 som elueringsmiddel, hvorved man får 0,41 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 250"C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C39H37NO3 483,65

EKSEMPEL 20: (17R)-11-beta-[4-[2-(dimethylamin)-ethoxy]-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(5H))-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4- 12-(dimethylamino)-ethoxy]-fenyl]-17-alfa- [3-(tetrahydro-2H-2- pyranyloxy )-1 -propenyl ]-estra-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 8, trinn B,

idet man starter med 75,5 ml av en oppløsning av magnesiumforbindelse fremstilt fra 4-(N,N-dimethylaminoethoxy)-brombenzen med titer 0,7 M/l, 0,25 g kobber(I)klorid og 5 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 8, trinn A. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: ethylacetat:triethylamin i forholdet 93:2) fåes 2,620 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: (Z)-11-beta-[4-[2-(dimethylamino)-ethoxy]-fenyl]-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-hydroxy-1-propenyl]-estra-4,9-dien-3-on.

En oppløsning inneholdende 2,62 g av den ovenfor erholdte forbindelse i 13 ml ethanol avkjøles til 0°C, og 7,9 ml 2N saltsyre tilsettes under omrøring i 30 minutter. 6 ml ammoniumhydroxyd og 25 ml vann tilsettes under videre omrøring i 30 minutter. Den dannede utfeining fraskilles og oppløses i methylenklorid, hvoretter oppløsningen tørres og inndampes til tørrhet under redusert trykk. Det erholdes 1,948 g forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med ethylacetat:triethylamin i forholdet 8:2 som elueringsmiddel. Residuet blir deretter omkrystallisert fra isopropanol. Sm.p. 136°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-14-[2-(dimethylamino)-ethoxy]-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man går ut fra 2,268 g av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn B, 45 ml tosylklorid og 45 ml 6N saltsyre. Det foretas kromatografering med ethylacetat:triethylamin i forholdet 95:5 som elueringsmiddel og krystallisering fra isopropanol, hvorved man får 0,815 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 136°C.

[a]D = +156,5° ± 3°. (c = 0,6% CHCI3).

IR- spektrum (CHCI3)

EKSEMPEL 21: (17R)-11-beta-(3-methoxyfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Dimethylketalet av (Z)-5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-(3-methoxyfenyl)-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-estra-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5 C, idet man starter med 3 g av forbindelsen fremstilt som i eksempel 5

B, 100 mg kobber(I)klorid og 19 ml av oppløsningen av magne-siumf orbindelse fremstilt fra 3-bromanisol med titer 1 M/l. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:-ethylacetat i forholdet 7:3 med 1% triethylamin) fåes 1,522

g av den forventede forbindelse.

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-(3-methoxyfenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5 D, med 1,5 g

av forbindelsen erholdt i det foregående trinn og 1,5 g kaliumhydrogensulfat. Etter kromatografering på silica med n-hexan:ethylacetat i forholdet 7:3 som elueringsmiddel fåes 0,8 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 167-168°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-11-beta-(3-methoxyfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5, trinn E, idet man benytter 0,77 g av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn B, 20 ml pyridin, 2,7 g tosylklorid og 25 ml konsentrert saltsyre. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5), fåes 0,624 g av den forventede forbindelse, som krystalliseres fra ethanol. Sm.p. 170°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C28H32<O>3

EKSEMPEL 22: (17R)-11 -beta-(4-methoxyfenyl)-spiro-(estr-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Dimethylketalet av (Z)-5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-(4-methoxyfenyl)-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5, trinn C,

idet man anvender 3 g av forbindelsen fremstilt som i eksempel 5, trinn B, 190 mg kobber(I)klorid og 19 ml av oppløsningen av magnesiumforbindelse fremstilt fra 4-bromanisol med titer 1 M/l. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: petroleumether (b.p. 40-60°C):ethylacetat i forholdet 7:3

med 1% triethylamin) fåes 1,078 g av den forventede forbindelse og 0,625 g av den tilsvarende 5-beta-hydroxy-11-alfa-(4-methoxyfenyl)-isomer.

Trinn B: (Z)-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy-1-propenyl)-11-beta-(4-methoxyfenyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5, trinn D,

idet man starter med 1 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn A og 1 g kaliumhydrogensulfat, hvorved det fåes 736 mg av forbindelsen i uren form, som benyttes som den er i det følgende trinn.

Trinn C: (17R)-11-beta-(4-methoxyfenyl)-spiro-(estr-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 5, trinn E,

idet man starter med 736 mg av forbindelsen fremstilt i det foregående trinn, 20 ml pyridin, 2,1 g tosylklorid og 25 ml konsentrert saltsyre. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3), fåes 383 mg av den forventede forbindelse, som krystalliseres fra ethanol. Sm.p. 170°C.

IR- spektrum (CHCI3)

EKSEMPEL 23: (17R)-4',51-dihydro-11-beta-[2,3-dihydro-1 -

methyl-(1H)-indol-5-yl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 11-beta-[2,3-dihydro-1-methyl-(1H)-indol-5-yl]-5-alfa,17-beta-dihydroxy-17-alfa-(3-(tetrahydro-2H-2- P<yr>an<y>loxypropyl)-estra-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn B, idet går ut fra 2,45 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 12, trinn A, 110 mg kobber(I)klorid og 35 ml av oppløsningen av magnesiumforbindelsen fremstilt som i eksempel 3 ved å starte med 5-brom-2-methylindolin, med titer 0,6 M/l. Det fåes 1,218 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: 11-beta-12,3-dihydro-1-methyl-(1H)-indol-5-yl]-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn C, idet man starter med 3/025 g av forbindelsen fremstilt som i det foregående trinn, 30 ml ethanol og 5 ml 2N saltsyre, hvorved det fåes 1,658 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-4',5'-dihydro-11-beta-[2,3-dihydro-1-methyl-(1H)-indol-5-yl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn D, idet man starter med 1,658 g av forbindelsen fremstilt i trinn B, 20 ml pyridin, 2,1 g tosylklorid og 20 ml konsentrert saltsyre. Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3), fåes 0,729 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C30<H>37NO2 443,634

EKSEMPEL 24: (17R)-4',5'-dihydro-11 -beta-[4-t(3-methylbutyl)-thio]-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-[(3-methylbutyl)-thio]-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-; pyranyloxy )-propyl ]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 12, trinn B,

idet man starter med 3,5 g av forbindelsen fremstilt i eksempel

12, trinn A, 1,24 g kobber(I)klorid og 22 ml av en oppløs-ning av magnesiumforbindelse fremstilt som i eksempel 3 fra 4-[(3-methyl)-butylthio]-brombenzen, med titer 0,7 M/l.

Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:aceton i forholdet 95:5 med 1% triethylamin) fåes 4,08 g av den forventede forbindelse.

IR-spektrum (CHCl-s)

Trinn B: 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-[4-[(3-methylbutyl)-thio]-fenyl]-estra-4,9-dien-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 16, trinn B, idet man starter med 4,05 g av den ovenfor fremstilte forbindelse, 30 ml methanol og 12 ml 2N saltsyre, hvorved det fåes 3,34 g forbindelse i uren form. Det foretas kromatografering på silica med methylenklorid:acetylacetat i forholdet 3:7 som elueringsmiddel, hvorved man får 2,3 g av den forventede forbindelse i ren form.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: (17R)-4<1>,5'-dihydro-11-beta-14-[(3-methylbutyl)-thio]-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 2, idet man går ut fra 2,3 g av den ovenfor erholdte forbindelse, 45 ml pyridin og 4,3 g tosylklorid.

Det erholdes 2,14 g forbindelse i uren form, som renses ved omkrystallisering fra ethanol. Sm.p. 200°C. IR- spektrum (CHCI3)

EKSEMPEL 25: (17R)-4<1>,5<1->dihydro-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-17-alfa-[3-[ (tetrahydro-2H-2- pyranyloxy ]-1-propynyl ]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 3, trinn B, idet man går ut fra 3,5 g av forbindelsen fremstilt som i eksempel 3, trinn A, 73 mg kobber(I)klorid og 23 ml av opp-løsningen av magnesiumforbindelsen fremstilt som angitt i eksempel 3 ved å starte med N-(4-bromfenyl)-pyrrolidin og med titer 1,3 M/l.

Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:aceton i forholdet 92:8 med 1% triethylamin og deretter ethylacetat:n-hexan i forholdet 5:5 med 2% triethylamin) fåes 3,52 g av den forventede forbindelse i ren form.

IR-spektrum (CHCl-a)

Trinn B: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,17-beta-dihydroxy-11 -beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-17-alfa- [3-(tetrahydro-2H-2- pyranyloxy )-propyl]-estr-9-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 4, trinn A,

idet man går ut fra 2,62 g av den ovenfor fremstilte forbindelse oppløst i en 172 ml av en 1:1 oppløsning av benzen og ethanol og med 1,048 g Wilkinsons reagens, og foretar hydrogenering i fire timer og 45 minutter. Derved det fåes 2,1 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: 17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxypropyl)-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-estra-4,9-dien-5-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 4, trinn B, idet man går ut fra 2,09 g av den ovenfor erholdte forbindelse, 32 ml methanol og 10,45 ml 2N saltsyre.

Etter kromatografering på silica (elueringsmiddel: methylenklorid:methanol i forholdet 95:5 med 2% triethylamin) fåes 1,31 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn D: (17R)-4<1>,5'-dihydro-11-beta-[4-(1-pyrrolidinyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(3H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 4, trinn C, idet man går ut fra 1,28 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn, 20 ml pyridin og 2,6 g tosylklorid.

Ettér kromatografering på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 75:25 med 2% triethylamin) fåes 0,73 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C31<H>39NO2 457,66

EKSEMPEL 26: (17R)-11-beta-[4-methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-1,3,5(10)-trien-17,21 -(5H)-furan)-3-ol.

1 . Dannelse av fenolacetat

0,5 g av forbindelsen fremstilt som i eksempel 3E oppløst i 10 ml methylenklorid avkjøles til 3°C. Deretter tilsettes dråpevis 0,5 ml eddiksyreanhydrid etterfulgt av 0,25 ml acetylbromid under omrøring i 50 minutter. Reak-sj onsmediet fortynnes med 20 ml isavkjølt vann, og 5 ml av en N vandig natriumhydroxydoppløsning tilsettes under omrøring i 30 minutter. Etter ekstrahering med methylenklorid blir den organiske fase vasket og tørret, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Det erholdes 0,584 g av forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med n-hexan:ethylacetat i forholdet 7:3 som elueringsmiddel, hvorved man får 0,241 g av det forventede acetat.

2. Forsåpning

Forbindelsen erholdt ovenfor taes opp i 3 ml ethanol, og 4 dråper av en N vandig natriumhydroxydoppløsning tilsettes. Etter omrøring og fortynning med 10 ml vann blir utfeiningen frafiltrert og vasket, og deretter tørret under redusert trykk. Residuet renses ved kromatografering på silica med n-hexan:ethylacetat i forholdet 8:2 som elueringsmiddel, hvorved man får 0,205 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

EKSEMPEL 27: (17R)-2-beta-methyl-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-1 7,2'-(5H)-furan)-3-on og den tilsvarende 2-alfa-isomeren, og (17R)-2,2-dimethyl-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(5H)-furan)-3-on.

2,45 ml n-butyllithium oppløst i 1,6M hexan og

5 ml tetrahydrofuran kjøles til -65/-70°C under en inert atmosfære. I løpet av 20 minutter tilsettes 0,66 ml cyclo-hexylisopropylamin i 5 ml tetrahydrofuran. Etter omrøring i 15 minutter tilsettes i løpet av 30 minutter 1,4 g av det i eksempel 3 erholdte (17R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<*->(5H)-furan)-3-on oppløst i 15 ml tetrahydrofuran, og blandingen omrøres i 15 minutter. Det tilsettes så 0,4 ml methyljodid. Temperaturen får vende tilbake til omgivelsenes temperatur under omrøring i én time, hvoretter 20 ml av en vandig ammoniumkloridoppløsning tilsettes. Etter dekantering blir den organiske fase vasket med saltholdig vann. Det foretas ekstrahering igjen med ethylacetat, og ekstraktene tørres og inndampes til tørrhet, hvorved man får 1,5 g av forbindelsen i uren form. Det foretas kromatografering på silica med en blanding av petrolether (kokepunkt 40-70°C) og ethylacetat i forholdet 9:1 som elueringsmiddel , hvorved man- f år:.

290 mg av (17R)-2-beta-methyl-11-beta-[4-(methyl-thio )-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-1 7,21-(5H)-furan)-3-on-isomer, som omkrystalliseres fra isopropylether. Sm.p. 176°C. 355 mg av 2-alfa-methylisomeren, som omkrystalliseres fra isopropylether, sm.p. 164°C, og

65 mg (17R)-2,2-dimethyl-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->(5H)-furan)-3-on. IR- spektrum (CHCI3)

2-beta-methyl-) C=0, 1 656cm_1 , C=C, 1605 og 865^-^

isomer '

2-alfa-methyl-) C=0, 1654cm-<1>, C=C kompleks, maks 1595cm_<1 >isomer ) aromatisk, 1492cm-'' skulder 1607cm-<1>

2,2-dimethyl- ) C=0, 1651cm_<1>, C=C, 1603cm-<1>

forbindelse aromatisk, 1492cm-<1>

EKSEMPEL 28: (E)-(17R)-oximet av 11-beta-(4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on og den tilsvarende (Z)-isomer

1,36 g (17R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on erholdt i eksempel 3 oppvarmes ved tilbakeløpskjøling i 75 minutter under en

inert atmosfære i 14 ml ethanol med 3,6 ml pyridin og 0,44 g hydroxylaminhydroklorid. Temperaturen tillates å vende tilbake til omgivelsenes temperatur, og reaksjonsmediet helles over i 100 ml vann og ekstraheres med ethylacetat. Den organiske fase vaskes, tørres og inndampes til tørrhet under redusert trykk, hvorved det fåes 1,47 g forbindelse i uren form. Det foretas kromatografering på silica, idet det elueres med en blanding av petrolether (kokepunkt 40-70°C) og ethylacetat i forholdet 8:2.

Det erholdes 805 mg av (E)-isomeren, som oppløses varm i methylenklorid og omkrystalliseres fra isopropylether, sm.p. 250°C, sammen med 390 mg av (Z)-isomeren, som omkrystalliseres på samme måte, sm.p. 266°C.

(E)-isomeren:

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C28<H>33NO2S 447,64 (Z)-isomeren: IR- spektrum (CHCI3)

Analyse:

EKSEMPEL 29: (17R)-4'51-dihydro-9-alfa,10-alfa-epoxy-11 -

beta-[4-[3-methylbutyl)-sulfonyl]-fenyl]-spiro-(estra-4-en-17,2<1->(3H)-furan)-3-on.

0,8 g av forbindelsen erholdt i eksempel 24 oppløses i 20 ml methylenklorid, oppløsningen kjøles til 0°C, og 1,64

g metaklorperbenzoesyre tilsettes i små porsjoner under omrøring i én time. En 0,2N natriumthiosulfatoppløsning tilsettes under omrøring i fem minutter, hvoretter reak-sj onsmediet helles over i en mettet vandig natriumbicarbonat-oppløsning og ekstraheres med methylenklorid. Den organiske fase vaskes, med vann. og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved man får 0,980 g av den forventede forbindelse, som omkrystalliseres fra en blanding av methylenklorid og isopropylether. Sm.p. 203°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C32H42<O>5S 538,75

EKSEMPEL 30: (17R)-4-[3-oxo-spiro-(estra-4,9-dien-17,2<1->

(5H)-furan)-11-beta-yl]-benzoat av 2-amino-2-methylpropy1.

4,32 g (17R)-11-beta-[4-(4,5-dihydro-4,4-dimethyl-2- oxazolyl)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2 * -(5H))-furan)-3- on fremstilt som i eksempel 19 oppløses i 40 ml dioxan og 40 ml 2N saltsyre. Oppløsningen oppvarmes i tre og en halv time ved 60°C og avkjøles. Reaksjonsmediet helles over i en isavkjølt vandig natriumbicarbonatoppløsning og ekstraheres med methylenklorid. Ekstraktene vaskes med vann og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk.

Det fåes 4,5 g forbindelse i uren form. Det foretas kromatografering på silica (elueringsmiddel: ethylacetat, deretter ethylacetat med triethylamin, i forholdet 9:1). Etter krystallisering fra ether, og deretter fra ethylacetat, fåes 2,54 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 178°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Analyse: C32<H>39NO4 501,67

EKSEMPEL 31: Ethyl-(17R)-4-[3-oxo-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-11-beta-yl]-benzoat og (17R)-4-13-oxo-spiro-(estra-4,9-dien-17,21 -(5H)-furan)-11-beta-yl]-N-2-hydroxy-(1,1-dimethylethyl)-benzamid.

2,06 g av forbindelsen fremstilt i eksempel 30 suspendert i 50 ml ethanol og 8 ml av en 0,7M-oppløsning i ethanol og natriumethylat omrøres i to timer under en inert atmosfære og ved omgivelsenes temperatur.

Suspensjonen helles over i en isavkjølt vandig saltsyreoppløsning og det ekstraheres med methylenklorid. Den organiske fase vaskes og tørres, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk. Residuet kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3, deretter ethylacetat:triethylamin i forholdene 9:1 og 6:4), hvorved man får: 1,375 g av den forventede forbindelse i form av ethylbenzoat (forbindelse A), som omkrystalliseres fra ether, og deretter fra ethanol. Sm.p. 140°C, og 182°C, og

0,385 g av den forventede forbindelse, N-2-hydroxy-(1 ,1-dimeth<y>leth<y>D-benzamid (forbindelse B), som omkrystalliseres fra ether, deretter fra isopropanol. Sm.p. 147 til 157°C.

IR- spektrum for forbindelse A (CHCI3)

IR- spektrum av forbindelse B (CHCI3)

EKSEMPEL 32: (17R)-4-[spiro-(3-oxo-estra-4,9-dien-17,2<1->

(5H)-furan)-11-beta-yl]-benzoesyre.

0,3 g av forbindelse A erholdt i eksempel 3 suspendert i 3 ml ethanol overstrykes med nitrogen i 20 minutter, hvoretter 1 ml av en N vandig natriumhydroxydoppløsning tilsettes. Suspensjonen oppvarmes i én og en halv time ved 60°C, avkjøles, og helles deretter over i fortynnet saltsyre-oppløsning. Etter ekstrahering med ethylacetat vaskes den organiske fase med vann og tørres. Oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved man får 0,250 g av forbindelse i uren form, som renses ved kromatografering på silica med ethylacetat som elueringsmiddel. Sm.p. ca. 170°C.

EKSEMPEL 33: (17R)-13-beta-ethyl-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(gona-4,9-dien-17,21 -(5H)-furan)-3-on.

Trinn A: Cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa,10-alfa-epoxy-13-beta-ethyl-gona-9(11)-en-3,17-dion. 21 ,3 g hexafluoraceton-sesquihydrat tilsettes til en oppløsning bestående av 21,36 g cyklisk (1,2-ethandiyl)-acetal av 13-beta-ethyl-gona-5(10),9(11)-en-1 7-on i 213 ml methylenklorid, og blandingen avkjøles til 0-5°C. I løpet av fem minutter tilsettes 42,7 ml hydrogenperoxyd med omrøring i to timer og 15 minutter under en inert atmosfære. Natrium-thiosulfat tilsettes, og det foretas ekstrahering med methylenklorid. Ekstraktene vaskes, og oppløsningsmidlene fjernes under redusert trykk, hvorved man får 26,41 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn B: Cyklisk (Z)-3,3-(ethandiyl)-acetal av 5,10-epoxy-13-beta-ethyl-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(1-tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)]-1-propynyl-gona-9(11)-en-3,17-dion.

Operasjonen utføres som i eksempel 5, trinn A, idet man går ut fra 19,9 g av forbindelsen erholdt ovenfor og 14,6 ml av HC = C-CH^OTHP-reagenset og lar omsetningen pågå i 15 minutter ved omgivelsenes temperatur. Det erholdes 33,533 g av forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med methylenklorid:ethylacetat i forholdet 9:1 som elueringsmiddel, hvorved man får 15,498 g av den forventede forbindelse.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn C: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa-10-alfa-epoxy-13-beta-ethyl-17-beta-hydroxy-17-alfa-[3-(tetra-hydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-gona-9(11)-en-3-on.

15,45 g av forbindelsen erholdt i trinn B i 320 ml ethylacetat og 3,2 ml pyridin hydrogeneres i fire timer under et trykk på 1,2 bar i nærvær av 154 mg bariumsulfat med 10% palladium. Katalysatoren frafiltreres og vaskes med ethylacetat, og filtrat og vaskevæske inndampes til tørrhet. Det fåes 14,705 g forbindelse i uren form, som kromatografere på silica med methylenklorid:ethylacetat i forholdet 9:1 som elueringsmiddel, hvorved man får 9,819 g av den forventede forbindelse.

IR-spektrum (CHCIt)

Trinn D: Cyklisk (Z)-(1,2-ethandiyl)-acetal av 5-alfa-17-beta-dihydroxy-13-beta-ethyl-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-17-alfa-[3-(tetrahydro-2H-2-pyranyloxy)-1-propenyl]-gona-9(11)-en-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 3, trinn B, idet man går ut fra 3,5 gav forbindelsen erholdt i det foregående trinn, 178 mg kobber(I)klorid og 16,3 ml av en oppløsning av parabromthioanisolmagnesiumforbindelse, med titer 1,1 M/l.

Etter kromatografering på silica med cyclohexan: ethylacetat i forholdet 7:3 som elueringsmiddel fåes 3,46 g av den forventede forbindelse.

IR-spektrum (CHCI3)

Trinn E: (Z)-13-beta-ethyl-17-beta-hydroxy-17-alfa-(3-hydroxy 1-propenyl)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-gona-4,9-dien-3-on. 17 ml 2N saltsyre tilsettes til en suspensjon bestående av 3,4 g av forbindelsen erholdt i det foregående trinn i 68 ml ethanol, og det omrøres i én time og 30 minutter ved omgivelsenes temperatur. Reaksjonsmediet helles over på is, og det tilsettes 5 ml konsentrert ammoniakk. Det vaskes med vann, tørres og inndampes til tørrhet under redusert trykk, hvorved man får 2,961 g forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica med cyclohexan:ethylacetat i forholdet 5:5 som elueringsmiddel. Etter krystallisering fra isopropylether fåes 1,816 g av den forventede forbindelse. Sm.p. 186°C.

IR- spektrum (CHCI3)

Trinn F: (1 7R)-13-beta-ethyl-11 -beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(gona-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on.

Operasjonen utføres som i eksempel 3, trinn E,

idet man går ut fra 5 g av den foregående forbindelse, 30 ml pyridin, 3 g tosylklorid og 180 ml 2N saltsyre. Det erholdes 1,981 g forbindelse i uren form, som kromatograferes på silica (elueringsmiddel: cyclohexan:ethylacetat i forholdet 7:3, og deretter i forholdet 8:2).

IR- spektrum (CHCI3)

FARMAKOLOGISK UNDERSØKELSE AV DE NYE FORBINDELSER

I. Undersøkelse av aktiviteten av de nye forbindelser på hormonreseptorene.

Proqestogenreseptoren i livmoren hos kaniner.

Kaniner som ikke er fullvoksne, og som veier ca.

1 kg, gies subkutant 25 mg østradiol. Fem dager etter denne behandling blir dyrene avlivet og livmoren fjernet, veiet og homogenisert ved 0°C, under anvendelse av et Potter Teflon - glass, i en puffret TS-oppløsning (10 mM Tris, 0,25 M saccharose, HCL til pH 7,4) (1 g vev pr. 50 ml TS). Homogenatet ultrasentrifugeres deretter (105 000 g x 90 min.) ved 0°C.

Alikvoter av den således erholdte overflytende

væske inkuberes ved 0°C i en tid t, med en konstant konsentrasjon (T) av tritiert forbindelse R (17,21-dimethyl-19-nor-4,9-pregnadien-3,20-dion) i nærvær av økende konsentrasjoner (0-2500.1 0~9m av enten kald R eller av kaldt progesteron eller av kald forbindelse som skal testes. Konsentrasjonen

(B) av bundet tritiert forbindelse (R) måles deretter i hvert inkubat ved hjelp av teknikken med adsorpsjon på

dextrancarbon.

Glucocorticoidreseptoren i brisselen fra rotter: Sprague-Dawley EOPS hanrotter som veier 160-200 g, underkastes suprarenalectomia. Fra fire til åtte dager etter denne ablasjon avlives dyrene, og brisselen fjernes og homo-geniseres ved 0°C i en buffer inneholdende 10 mM Tris, 0,25M saccharose, 2 mM dithiothreitol og HC1 inntil pH 7,4, under anvendelse av et Potter polytetrafluorethylen-glass (1 g vev pr. 10 ml TS). Homogenisatet ultrasentrifugeres deretter 105 000 g x 90 min.) ved 0°C. Alikvoter av den således erholdte overflytende væske inkuberes ved 0"C i en tid t, med en konstant konsentrasjon (T) av tritiert dexamethason i nærvær av økende konsentrasjoner (0-2500.10~^M av enten kaldt dexamethason eller av den kalde forbindelse som skal testes. Konsentrasjonen av bundet, tritiert dexamethason (B) måles deretter i hvert inkubat ved hjelp av teknikken med adsorpsjon på dextrancarbon.

Beregning av den relative bindingsaffinitet.

Beregningen av den relative bindingsaffinitet

(RBA) er den samme for alle reseptorer.

De to følgende kurver trekkes opp: prosentmengden bundet tritiert hormon B/T som funksjon av konsentrasjonen av det kalde referansehormon, og B/T som funksjon av logaritmen til konsentrasjonen av den kalde forbindelse som testes. Den rette linje som beskrives av ligningen 150= (B maks + B min) 12

T T

bestemmes.

B/T maks = prosentmengden tritiert hormon som bindes ved inkubering av dette tritierte hormon ved konsentrasjonen (T). B/T min = prosentmengden tritiert hormon som bindes ved inkubering av dette tritierte hormon ved konsentrasjonen (T)

i nærvær av et stort overskudd av kaldt hormon (2500.10-^M).

Punktene hvor den rette linje I50 skjærer kurvene, muliggjør beregning av de konsentrasjoner av det kalde referansehormon (CH) og av den kalde forbindelse som testes (CX), som gir 50% hemning av bindingen av det tritierte hormon til reseptoren.

Den relative bindingsaffinitet (RBA) av forbindelsen som testes, bestemmes ved ligningen:

De følgende resultater oppnås:

Konklusjon

De undersøkte forbindelser, spesielt forbindelsen ifølge eksempel 4, oppviser en meget markert affinitet til glucocorticoid- og progestogenreseptorene.

Av de oppnådde resultater kan det konkluderes med at forbindelsene kan oppvise agonistisk eller antagonistisk aktivitet overfor glucocorticoidene og progestogenene.

II. Antiglucocorticoid aktivitet.

Teknikken som benyttes, er avledet fra metoden som beskrives av Dausse et Col. i "Molecular Pharmacology", 13, 948-953 (1977) ("The Relationship between glucocorticoid Structure and Effects upon Thymocytes" for brisselblærer fra mus.

Brisselblærene fra rotter som er blitt underkastet suprarenalectomia, inkuberes ved 37°C i 30 timer i et nærings-medium inneholdende 5.10-^M dexamethason i nærvær av en forbindelse som skal undersøkes, i ulike konsentrasjoner, eller i fravær av forbindelse. Det tilsettes tritiert uridin, og inkuberingen fortsettes i én time. Inkubatene kjøles og behandles med en 5%-ig oppløsning av trikloreddiksyre, hvoretter de filtreres på Whatman GF/A papir og vaskes tre ganger med en 5%-ig trikloreddiksyreoppløsning. Radioaktiviteten som tilbakeholdes på filteret, bestemmes.

Glucocorticoider, og spesielt dexamethason, for-årsaker en reduksjon i innlemmelsen av tritiert uridin. Forbindelsene ifølge eksempler 1-4 motvirker denne effekt.

Det er for øvrig blitt fastslått at anvendelse av de testede forbindelser alene ikke gir noen virkning av glucocorticoidtypen.

Konklusjon:

De undersøkte forbindelser oppviser en meget markert antiglucocorticoid aktivitet, samtidig som de ikke oppviser noen glucocorticoid aktivitet.

III. Abortfremkallende aktivitet hos rotter.

Dagen J1 for besvangring bestemmes gjennom til-stedeværelsen av spermatozoider i slimvæske fra vagina. Den niende dag (J9) av drektighetsperioden administreres forbindelsen oralt oppslemmet i carboxymethylcellulose inneholdende 0,5% Tween .

Dyrene avlives 72 timer etter behandlingen, og livmoren undersøkes for å bestemme drektighetstilstanden.

En fullstendig abortering ble påvist hos samtlige av dyrene i gruppen behandlet med forbindelsene ifølge eksempler 1-4, administrert i en dose på 3 mg/kg.

Claims (3)

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive steroider som har en spiranring i 17-stillingen, og som har den generelle formel (I): hvor R-l betegner fenyl, benzyl, thienyl, isothienyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl eller isoxazolyl, idet hvert av disse radikaler eventuelt er substituert med ett eller flere radikaler valgt blant: alkyl med 1-8 carbonatomer, alkoxy med 1-8 carbonatomer, vinyloxy, allyloxy, halogen, hydroxyl, trifluormethyl, alkanoyl med 1-6 carbonatomer, even- „ tuelt forestret carboxy, alkylthio med 1-8 carbonatomer som eventuelt er oxydert til sulfoxyd-eller sulfonformen; amino som eventuelt er mono-eller disubstituert med alkyl med 1-8 carbonatomer, og som eventuelt er oxydert til N-oxydet; bis-(klor-ethyl)-amino, dimethylaminomethyl, dimethylamino-ethyl, methyl-(dimethylaminoethyl)-amino og dimethyl- aminoethoxy, eller Rx betegner: R2 i alfa- eller beta-stillingen er hydrogen eller methyl, den bølgede linje i spiroetheren indikerer at oxygenatomet kan befinne seg i alfa- eller beta-stilling, den brutte linje i 3'-, 4'-stilling indikerer eventuell tilstedeværelse av en andre binding mellom carbonatomene som bærer den, og ringene A og B har én av de følgende strukturer: a) A og B betegner gruppen: hvor R' og R" er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom eller et alkylradikal med 1-4 carbonatomer, b) A og B betegner gruppen: hvor Re betegner hydrogen, alkyl med 1-6 carbonatomer eller alkanoyl med 1-4 carbonatomer, c) A, B og C betegner gruppen: hvor Rx og R2 er som ovenfor angitt, d) A og B betegner gruppen: e) A og B betegner gruppen: og deres i farmasøytisk henseende akseptable syreaddisjonssal-ter, karakterisert ved at: a) for fremstilling av forbindelsene med formel (Ia): hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger og R' og R" hver betegner et hydrogenatom eller et alkylradikal eller den ene betegner et hydrogenatom og den andre betegner et alkylradikal, blir enten en forbindelse med formel (II): hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger og K betegner en gruppe som beskytter ketonradikalet, eller en forbindelse med formel (III): hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger, ringsluttet ved omsetning med tosylklorid eller methylsulfonylklorid i nærvær av pyridin, hvorved det fåes enten en forbindelsene med formel (IV): hvor Rx, R2 og K er som ovenfor angitt, hvilken forbindelse med formel (IV) dehydratiseres med en sul-fonisk harpiks i syreformen eller med en mineralsyre i en lavere alkanol eller med perklorsyre i eddiksyre eller med en sulfonsyre, hvorved ketofunksjonen frigjøres og det dannes en forbindelse med den ovenstående formel (IA) hvor R' og R" betegner et hydrogenatom, eller det fåes en forbindelse med formelen (IA), og en oppnådd forbindelse med formel (IA) hvor Rx innbefatter et svovel- eller nitrogenatom, om ønsket oxyderes for å danne den tilsvarende forbindelse hvor Rx innbefatter et svovelatom som er oxydert til sulfoxyd eller sulfon, eller et nitrogenatom som er oxydert til N-oxyd, og at forbindelsen med formel (IA) om ønsket overføres til et salt, eller forbindelsen med formel (IA) om ønsket omsettes med en sterk base og deretter med et alkylhalogenid for dannelse av en forbindelse med formel (IA) hvor R' og/eller R" betegner et alkylradikal med 1-4 carbonatomer; b) for fremstilling av forbindelsene med formel (IB): hvor Rx og R2 og Re er som ovenfor angitt, blir en forbindelse med formelen (I' A): hvor Rx og R2 har de ovenfor angitte betydninger, omsatt med et aromatiseringsmiddel bestående av et syrehalogenid og/eller et et syreanhydrid og den oppnådde forbindelse om nødvendig omsatt med et forsåpningsmiddel, hvoretter en oppnådd forbindelse med formel (IB) hvor Re er et hydrogenatom, om ønsket, omsettes med et alkyleringsmiddel, c) for fremstilling av forbindelsene med formelen (Ic): hvor Rx og R2 er som ovenfor angitt, blir enten en forbindelse med formelen (V): hvor R-l og R2 er som ovenfor angitt, ringsluttet ved å omsettes med tosylklorid eller methylsulfonylklorid i nærvær av pyridin, eller en forbindelse med den ovenstående formel (I'A) omsatt med et acyleringsmiddel og den dannede forbindelse deretter forsåpet; d) for fremstilling av forbindelsene med formel (ID): hvor Rx og R2 er som ovenfor angitt, blir en forbindelse med formel (I'A) epoxydert med en persyre eller hydrogenperoxyd, alene eller i nærvær av hexaklor- eller hexafluoraceton; e) for fremstilling av forbindelsene med formel (IE): hvor R2 og R2 er som ovenfor angitt, omsettes en forbindelse med den ovenfor angitte formel (I'a) med hydroxylamin; f) for fremstilling av forbindelsene med formel (I) hvor Rx betegner et fenyl- eller benzylradikal substituert med et carboxyradikal som kan være forestret eller forsaltet, blir en forbindelse med formel (IF): hvor A, B, C og R2 er som ovenfor angitt, og X betegner et carbocyklisk eller heterocyklisk aryl- eller aralkylradikal, underkastet en sur hydrolyse på i og for seg kjent måte, fortrinnsvis ved omsetning med en mineralsyre i vandig oppløs-ning, for dannelse av en forbindelse med formel (IG): som, om ønsket, omsettes med et basisk middel for dannelse av en forbindelse med formel (IH): hvor X og R2 er som ovenfor angitt, og Alk betegner et alkylradikal med 1-6 carbonatomer, hvilken forbindelse, om ønsket, forsåpes for dannelse av en forbindelse med formel (Ij): hvor X og R2 er som ovenfor angitt, som, om ønsket, forestres, og at en forbindelse oppnådd som angitt under et av punktene a)-f) ovenfor eventuelt overføres til et i farmasøytisk henseende akseptabelt syreaddisjonssalt.

2. Analogifremgangsmåte ifølge krav 1 , for fremstilling av forbindelsen (17R)-11-beta-[4-(methylthio)-fenyl]-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on og dets i farmakologisk henseende akseptable salter, karakterisert ved at de tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.

3. Analogifremgangsmåte ifølge krav 1, for fremstilling av forbindelsen (17R)-11-beta-(4-acetylfenyl)-spiro-(estra-4,9-dien-17,2'-(5H)-furan)-3-on og dets i farmakologisk henseende akseptable salter, karakterisert ved at de tilsvarende utgangsmaterialer anvendes.