NO169851B - Stereospesifikk fremgangsmaate for fremstilling av 2-arylpropionsyrer med s-konfigurasjon - Google Patents

Stereospesifikk fremgangsmaate for fremstilling av 2-arylpropionsyrer med s-konfigurasjon Download PDF

Info

Publication number
NO169851B
NO169851B NO874978A NO874978A NO169851B NO 169851 B NO169851 B NO 169851B NO 874978 A NO874978 A NO 874978A NO 874978 A NO874978 A NO 874978A NO 169851 B NO169851 B NO 169851B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
compound
cbs
exophiala
configuration
naphthyl
Prior art date
Application number
NO874978A
Other languages
English (en)
Other versions
NO874978D0 (no
NO169851C (no
NO874978L (no
Inventor
Mauro Attilio Bertola
Arthur Friedrich Marx
Hein Simon Koger
Gareth Thomas Phillips
Original Assignee
Gist Brocades Nv
Shell Int Research
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gist Brocades Nv, Shell Int Research filed Critical Gist Brocades Nv
Publication of NO874978D0 publication Critical patent/NO874978D0/no
Publication of NO874978L publication Critical patent/NO874978L/no
Publication of NO169851B publication Critical patent/NO169851B/no
Publication of NO169851C publication Critical patent/NO169851C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/002—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by oxidation/reduction reactions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Control Of El Displays (AREA)
  • Magnetic Record Carriers (AREA)
  • Wire Bonding (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår en stereospesifikk fremgangsmåte for fremstilling av 2-arylpropionsyrer, nærmere bestemt av en farmasøytisk forbindelse der minst 70 vekt-# har S-konf igurasj on.
Mange biologiske forbindelser er syntetisert i form av en blanding av stereoisomerer. Slike blandinger er hyppig brukt som sådanne i agrikulturelle og farmasøytiske anvendelser. Vanligvis ligger den ønskede biologiske aktivitet hovedsakelig i en stereoisomer slik at, der blandingen inneholder to eller flere stereoisomerer er blandingens potens redusert. En hovedgrunn for den fortsatte bruk av blanding av stereoisomerer er at omkostningene ved separering av stereoisomer-ene overskrider den potensielle fordel ved en mulig økning av aktiviteten. Imidlertid er det klart at moderne farmakologer stadig blir mer klar over andre implikasjoner av administrer-ing av blandinger der en eller flere stereoisomerer må anses kun som urenheter som ikke behøver å ha den terapeutiske virkning, men som sogar kan ha andre uønskede fysiologiske virkninger inkludert toksisitet.
Mere spesielt er det kjent at den in vitro antiflammatoriske aktivitet av naproksen så vel som den til ibuprofen ligger i S-enantiomeren (optisk aktiv stereoisomer) som er opptil 150 ganger så aktiv som antipoden (S. Adams et al., "J. Pharm. Pharmac"., 28, 1976, 256, A.J. Eutt og J. Caldwell, "Clinical Pharmacokinetics" 9 og A.J. Hutt og J. Caldwell, "Clinical Pharmacokinetics" 9 (1984) 371).
Den selektive fremstilling av den inaktive R-enantiomer av ibuprofen ved mikrobiell oksydasjon av l-isobutyl-4-(1'-metyloktyl)benzen, et aromatisk hydrokarbon som har egnet ikke-funksjonell alifatisk sidekjede, er kjent fra T. Sugai og K. Mori ("Agric. Biol. Chem"., 48 (1984) 2501.
Det er fremdeles et stort behov for en fremgangsmåte i industriell målestokk som på økonomisk attraktiv måte muliggjør fremstilling av disse S-enantiomerer. Derfor er en gjenstand for foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en slik prosess.
Som et resultat av utstrakt forskning og eksperimentering er det nå overraskende funnet en stereoselektiv fremgangsmåte for fremstilling av en farmasøytisk aktiv forbindelse der minst 70 vekt-# har S-konfigurasjon med formelen
eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller en ester derav, hvori R^ betyr en substituert arylgruppe som naftyl eller fenyl en fremgangsmåte som kjennetegnes ved at den omfatter å underkaste en forbindelse med formelen
der Ri er som angitt ovenfor og R£ er en alkylgruppe inneholdende minst 3 karbonatomer, påvirkning av en mikroorganisme valgt blant genera Graphium, Exophiala eller Rhinocladiella, istand til stereoselektiv oksydasjon av forbindelse II til forbindelse I, med minst 70 vekt-56 av S-konfigurasjon, i 0,5 timer til 10 dager ved en temperatur på 0 til 45°C og en pH-verdi på 3,5 til 8 under aerobe betingelser, med en kilde fra oksygen som er tilstrekkelig til å møte de metabolske krav for mikroorganismene og til å omdanne forbindelse (II) til forbindelse (I), og, hvis ønskelig, omdanning av forbindelse (I) til et farmasøytisk akseptabelt salt eller en ester derav.
Fortrinnsvis er mikroorganismen eller stoffene som avledes derfra, istand til stereoselektiv oksydasjon av forbindelse
II til en forbindelse I med minst 80 og aller helst minst 90 vekt-56 S-konf iguras jon.
De farmasøytiske aksepterbare salter eller estere av forbindelse I er fortrinnsvis et alkali- eller jordalkalimetallsalt. R2 er en alkylgruppe inneholdende minst 3 karbonatomer, eventuelt substituert med for eksempel pentan, heptan eller nonan. Fortrinnsvis er forbindelse I naproksen, ibuprofen, suprofen, fenoprofen, ketoprofen, benoksaprofen, karprofen, cikloprofen, pirprofen, lisiprofenum, flurbiprofen, flu-profen, klidanak, tertiprofen, heksaprofen, indoprofen, meksoprofen, pranoprofen, R 803, protizinsyre, tiaprofensyre eller brofezil.
I henhold til en foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse blir naproksen eller ibuprofen fremstilt i hovedsakelig S-konfigurasjon og R2 er en lineær alkyl inneholdende 3-11 karbonatomer.
Forbindelse II kan oppnås ved å benytte for fagmannen kjente metoder. For eksempel blir 2-(6-metoksy-2-naftyl)alkaner syntetisert ut fra 2-brom-6-metoksy-naftalen. Den sistnevnte forbindelse omsette med et 2-alkanon, noe som resulterer i 2-hydroksy-2-(6-metoksy-2-naftyl)alkan. Deretter blir produktet omdannet til 2-(6-metoksy-2-naftyl)-alken-2 og hydrogenert, noe som gir 2-(6-metoksy-2-naftyl)alkan.
Ikke bare kan forbindelse I som er anriket på S-isomer oppnås i henhold til oppfinnelsens fremgangsmåte, forbindelse II anriket i R-isomer er et produkt av denne prosess også. Den sistnevnte blir tilbake når S-isomeren omdannes av en mikroorganisme eller stoffer avledet derfra.
Til forskjell fra oksydasjonen av 2-arylpropan med en mulig stereoselektiv oksydasjon med 100$ omdanning til S-2-arylpropionsyrer, resulterer oksydasjonen av forbindelse II i en omdanning av maksimalt 50$ ut fra en racemisk blanding av forbindelse II.
Mikroorganismene som benyttes ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er istand til ikke bare stereoselektiv oksydasjon av forbindelse II, men også til å oksydere kun det første karbonsete i R2.
Med uttrykket "mikro-organismer med evnen til stereoselektiv oksydasjon" menes for eksempel fungi, gjærlignende fungi, jern og bakterier og inkluderer mikroorganismer tilhørende slektene Exophiala. Rhinocladiella. og Graphium.
Mikroorganismer som er istand til oksydasjon av forbindelse II til forbindelse I inkluderer: Exophiala . ieanselmei (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 537.76);
Exophiala mansonii (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 101.67);
Exophiala . Ieanselmei var, heteromorpha (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 232.33); Rhinocladiella s<p>inifera (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 269.28),
Exophiala dermatitis (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 207.35); og
Exophiala alcalo<p>hila (en stamme av denne art er deponert ved CBS under aksessnummeret 520.82).
I en utførelsesform av oppfinnelsen kan mikroorganismene som er istand til stereoselektiv oksydasjon av forbindelse II til forbindelse I velges fra en naturlig kilde ved å kontakte den naturlige kilde med et 2-(R1)-alkan (R^ er som angitt ovenfor) som karbonkilde i et egnet medium. Egnet 2-(6-metoksy-2-naftyl)alkan benyttes for seleksjon av mikroorganismer med evnen til fremstilling av naproksen, og alkanet er fortrinnsvis pentan, heptan eller nonan. Et egnet medium er for eksempel et PS III-saltmedium anriket med en vitamin-oppløsning og/eller 0,01$ gjærekstrakt.
Et antall mikroorganismer som isoleres fra naturlige kilder, spesielt fra jordprøver, ble utvalgt i henhold til den angitte prøveprosedyre, og når de ble underkastet ytterligere prøver som angitt nedenfor, viste sin evne til stereokjemisk oksydasjon av forbindelse II til forbindelse I.
Noen av mikroorganismene som ble benyttet for oppfinnelsens formål kan isoleres fra jordprøver ved bruk av 2,5 g/l 2-(6-metoksy-2-naftyl)heptan som C-kilde i PS III-saltmedium anriket med en vitaminoppløsning og/eller 0,01$ gjærekstrakt.
En PS III-saltmediumblanding inneholder: KH2PO4 (2,1 g/l), (NH4)2HP04 (1,0 g/l), (NH4)2S04 (0,9 g/l), KC1 (0,2 g/l), CaS04. 2 H20 (0,005 g/l), MgS04. 7 E20 (0,2 g/l), (N<H>4)2S04.Fes04. 6 H20 (2,5 mg/l), ZnS04. 7 H20 (0,5 mg/l), MnCl2. 4 H20 (0,3 mg/l), CuS04. 5 H20 (0,15 mg/l), CoCl2. 6 H20 (0,15 mg/l), H3BO3 (0,05 mg/l), Na2<M>o04. 2 H20 (0,055 mg/l), Kl (0,1 mg/l).
pH-verdien ble justert til 6,8. Mediet ble sterilisert i 20 minutter ved 120°C.
Sammensetningen av vitaminoppløsningen var:
Biotin (0,002 mg/l), Kalsiumpantotenat (0,4 mg/l), Inositol (2,0 mg/l), nikotinsyre (0,4 mg/l), tiamin-HCl (0,4 mg/l), pyridoksin-HCl (0,4 mg/l), p-aminobenzosyre (0,2 mg/l), riboflavin (0,2 mg/l), folsyre, (0,01 mg/l).
pH-verdien ble justert til 7,0 og mediet ble sterilisert ved bruk av et membranfilter.
De nylig oppdagede mikroorganismer ble renset med agarstørk-net medium.
Eksempler på disse kulturer ble deponert ved CBS. Mikroorganismer for oksydasjonen av forbindelse II til forbindelse I, oppnådd ved den ovenfor angitte isolasjons- og seleksjons-metode inkluderer Graphium fructicola (en stamme av denne art ble deponert ved CBS under aksessnummeret 256.86, 15. mai 1986), Exophiala mansonii (en stamme av denne art ble deponert ved CBS under aksessnummeret 257.86, 15. mai 1986),-Exophiala mansonii (en stamme av denne art ble deponert ved CBS aksessnummer 259.86 15, mai 1986), Exophiala Ieanselmei var, . ieanselmei (en stamme av denne art ble deponert ved CBS under aksessnummer 258.86, 15. mai 1986).
Alternativt kan de velges ved tverrhybridisering med et allerede valgt gen som koder et enzym for stereoseletiv epoksydering.
Mikroorganismene kan fordelaktig immobiliseres for eksempel på en polymergel. Dette kan skje med levende celler, drepte celler og/eller hvilende celler, eller med egnede enzymer avledet derfra, som kan renses i en viss grad hvis høyere spesifikk aktivitet er nødvendig.
Derfor menes det med uttrykket "mikroorganismer eller stoffer avledet derfra", mikroorganismer, drepte, levende eller hvilende, og ekstrakter derfra som enzymer eller metabolit-ter, eventuelt konsentrert og/eller renset. For eksempel kan det benyttes enzymer, eventuelt i forbindelse med for eksempel kunstig eller naturlige kofaktorer. Fortrinnsvis kan ikke fermentativt aktive celler benyttes for oksydasjon av forbindelse II. Det ble funnet at enzymene avledet fra levende celler eller avlivede celler kan fremstille S-isomeren under egnede betingelser. Mikroorganismene eller stoffene avledet derfra kan benyttes flere ganger. Selv uten et kosubstrat, for eksempel glukose, kan mikroorganismene forbli aktive. Anrikning av S-isomerer av forbindelse I kan skje i egnede buffere såvel som i fysiologiske salter. Ved gjennomføring av en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsens fremgangsmåte kan en mikroorganisme med evne til å omdanne forbindelse II til forbindelse I med minst 70 vekt-# S-konf iguras jon dyrkes i ca. 0,5 til 10 dager. Derefter kan cellene suspenderes i et flytende naeringsmedium, fortrinnsvis et minimalflytende naeringsmedium, og forbindelse II underkastes påvirkning av cellene. Alternativt kan cellene drepes, for eksempel suspenderes i et lyseringsmedium og 4-allyloksy-fenylacetatet underkastes påvirkning av stoffer avledet fra cellene. Efter denne dyrking i ca. 1 til 10 dager, kan cellene isoleres fra kulturmediet før suspendering i det flytende naeringsmedium eller suspendering i et lyseringsmedium. For å dyrke mikroorganismene som benyttes for selektiv oksydasjon av forbindelse II, kan det benyttes vanlige dyrkingsmedier inneholdende en assimilerbar kilde som for eksempel glukose, laktat, sukrose og så videre, en nitrogenkilde (som for eksempel ammoniumsulfat, ammoniumnitrat, ammoniumklorid), med et middel for en organisk næringsmiddelkilde (som for eksempel gjærekstrakt, maltekstrakt-pepton, kjøttekstrakt og så videre) og en uorganisk nærings-kilde (som for eksempel fosfat, magnesium, kalium, sink, jern og andre metaller i spormengder). Et foretrukket dyrkings-medium er et Czapek-Dox-, BHI- eller YEPD-medium, eventuelt anriket med en eller flere bestanddeler.
En temperatur på 0 til 45° C og en pH-verdi på 3,5 til 8 opprettholdes vanligvis under dyrkingen av mikroorganismen. Fortrinnsvis dyrkes mikroorganismen ved en temperatur av 20 til 37°C og en pH-verdi på 4 til 7.
De aerobe betingelser som kreves under dyrkingen av mikroorganismene kan tilveiebringes i henhold til en hvilken som helst av de veletablerte prosedyrer, forutsatt at tilførselen av oksygen er tilstrekkelig til å møte mikroorganismens metabolske krav.
Dette oppnås mest hensiktsmessig ved å tilføre oksygen, spesielt i form av luft. Under omdanningen av forbindelse II til forbindelse I kan mikroorganismene befinne seg i et voksetrinn ved bruk av et av de ovenfor nevnte vanlige dyrkingsmedier. Mikroorganismene kan suppleres med et kosubstrat.
Under omdanningen av forbindelse II til forbindelse I kan mikroorganismene holdes i et veksttrinn eller i et i det vesentlige ikke-veksttrinn ved bruk av minimalkulturmedium. Som minimalkulturmedium kan man benytte et vanlig kultur-medium inneholdende en assimilerbar karbonkilde hvis dette er nødvendig (for eksempel glukose, laktat, sukrose etc), en nitrogenkilde hvis dette er nødvendig, (for eksempel ammoniumsulfat, ammoniumnitrat, ammoniumklorid, og så videre) med et middel for en uorganisk næringsmiddelkilde hvis dette er nødvendig, (for eksempel gjærekstrakt, saltekstrakt, pepton, kjøttekstrakt og så videre, og et uorganisk næringsmedium hvis dette er nødvendig, for eksempel fosfat, magnesium, kalium sink, jern og andre metaller i spormengder. Mikroorganismene kan holdes i ikke-voksende tilstand ved for eksempel å utelukke den assimilerbare karbonkilde eller ved å utelukke nitrogenkilden. En temperatur på 0 til 45°C og en pH-verdi på 3,5 til 8 holdes vanligvis i dette trinn. Fortrinnsvis blir mikroorganismene holdt ved en temperatur ved 20 til 37° C og en pH-verdi på 4 til 7. De aerobe betingelser som kreves i dette trinn kan tilveiebringes i henhold til de ovenfor angitte prosedyrer, forutsatt at tilførselen av oksygen er tilstrekkelig til å møte de metabolske krav til mikroorganismene men også til å omdanne forbindelse II til forbindelse I. Forbindelse I som fremstil-les av mikroorganismene som nevnt ovenfor, kan gjenvinnes og renses i henhold til hvilken som helst av de prosedyrer som er kjent per se for slike produkter. Fordelaktig blir substratet som skal transformeres, altså forbindelse II, tilsatt til den voksende eller utvokste kultur og inkubert ytterligere i 5 timer til 10 dager.
Oppfinnelsen skal illustreres nærmere ved de følgende eksempler uten at disse skal påvirke oppfinnelsens ramme.
Eksempel I
Omdanning av 2-(6-metoksy-2-naftyl)-heptan til S-2-(6-metoksy-2-naftyl)propansyre ved bruk av fungi.
De fungale organismer ble holdt på agar eller dypfrosset i 50$ glyserol. For forsøkene ble de enten inokulert direkte til analysemedium eller fordyrket i YEPD-medium ved 30°C. I tilfelle fordyrking ble organismene dyrket inntil full vekst ble påvist hvoretter 2- 10% av kulturen ble inokulert i nytt analysemedium.
YEPD-medium inneholder: Baktopepton 20 g/l, gjærekstrakt 10 g/l og glukose 20 g/l. pH-verdien ble justert til 7,0. Mediumet ble sterilisert i 30 minutter ved 110°C.
For hver analyse ble det benyttet 100 ml YEPD-medium i en 500 ml kolbe. Alle analyser ble gjennomført minst i duplikat. For gjærlignende fungi ble baffle-kolber benyttet hver gang. Filamentøs fungi ble dyrket i vanlige kolber og overført til baffle-kolber på tidspunktet for tilsetning av 2-(6-metoksy-2-naftyl)-heptan.
Organismene ble tillatt å vokse i 48 timer. Derefter ble 40 jjI 2-(6-metoksy-2-naftyl )-heptan tilsatt til kulturene. Kulturene ble inkubert igjen i 1 eller 3 dager ved 30°C og så ekstrahert med 40 ml diklormetan etter surgjøring til pH 2,0 med H3PO4 og tilsetning av en liten mengde ammoniumsulfat.
Ekstraktene ble analysert på EPLC ved bruk av en silikagel-krompackkolonne (CP-Sper-Si) og eluert med etylacetat:iso-oktan 1:7, surgjort med 3,5 ml maursyre pr. liter.
Ekstrakter inneholdende forbindelsene med den samme reten-sjonstid som naproksen ble benyttet for en derivatiseringsprosedyre. Tilstedeværende naproksen ble omdannet til et naftalenmetylamidderivat for å bestemme den enatiomere renhet.
Derivatiseringsprosedyre og separering av enantiomerene
Diklormetan av 8 til 12 ml ekstraktprøve ble fordampet under en konstant N2~strøm ved 60<*>C. Den tørkede prøve ble tatt opp i 2 ml diklormetan og tillatt omsetning i 10 minutter ved 60°C med 200 pl av en oppløsning av 2-brom-l-metylpyridinio-did oppløst i dimetylformamid (50 mg/ml) og 200 jil av en oppløsning av 1-naftalen-metylamin oppløst i CE2CI2 (100 mg/ml).
Reaksjonsblandingen ble tørket under N2 ved 60°C. Resten ble så først oppløst i 2 ml isooktan:CH2CI2 v/v 2:1 og ekstrahert efter tilsetning av 2 ml 1 N HC1. Det organiske sjikt ble så analysert ved HPLC ved bruk av en kiral DNBP-kolonne eluert med isooktan:kloroform:metanol i volumforholdet 90:7:3.
Resultatene er gitt i tabell I.
Eksempel II
Omdanning av 2-(6-metoksy-2-naftyl)-pentan til S-2-(6-metoksy-2-naftyl)propansyre (S-naproksen) ved bruk av fungi.
Alle prøver ble gjennomført som beskrevet i eksempel I, men i stedet for 2-(6-metoksy-2-naftyl)-heptan ble det tilsatt 40 pl 2-(6-metoksy-2-naftyl) til kulturene.
Resultatene er vist i tabell II.
Eksempel III
Omdanning av 2-(6-metoksy-2-naftyl)-nonan til S-2-(6-metoksy-2-naftyl)propansyre (S-naproksen) ved bruk av fungi.
Alle prøver ble gjennomført som beskrevet i eksempel I, men i stedet for tilsetning av 2-(6-metoksy-2-naftyl )-heptan, ble det tilsatt 40 pl 2-(6-metoksy-2-naftyl)-nonan til kulturene.
Resultatene er gitt i tabell III.
Eksempel IV
Isolering og identifisering av S-2-(6-metoksy-2-naftyl)pro-pansyre (S-naproksen) dannet av soppen Exophida jeanselmei var. jeanselmei (CBS 258.86).
Ti 1 s ammen 500 ml Exophida jeanselmei var. jeanselmei (CBS 258.68) kulturer dyrket i YEPD-medium hvori 2-(6-metoksy-2-naftyl)heptan hie transformert til naproksen som beskrevet i eksempel I, ble benyttet for en isolasjons- og identifiser-ingsprosedyre av det dannede naproksen.
Kulturbuljongen ble surgjort og ekstrahert flere ganger med CH2CI2. Efter fordamping av CH2CI2, var det tilbake 0,16 g rest. Resten ble oppløst i 10 ml dietyleter og ekstrahert med 3 x 5 ml IM NaHC03. Den vandige fase ble surgjort og reekstrahert med 3 x 5 ml dimetyleter. Ef ter vasking av det organiske sjikt med 30$ NaCl, ble ekstrakten tørket over Na2S04 og efter fordamping av dietyleteren ble 20 mg rårest tilbake. Resten ble analysert ved PMR og naproksen som en av forbindelsene som var tilstede ble detektert ved de følgende karakteristiske signaler:
§ 1,59 ppm (dublet, 3E, koblingskonstant 7 Hz)
S 3,91 ppm (singlet, 3H fra 0CH3)
§ 7,12 ppm (multipelt, 2H fra naftyl)
§ 7,42 ppm (dobbelt dublet, 1H fra naftyl)
å 7,70 ppm (multiplet, 3E fra naftyl)

Claims (5)

1. Stereospesifikk fremgangsmåte for fremstilling av en farmasøytisk aktiv forbindelse der minst 70 vekt-# har S-konfigurasjon med formelen eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller en ester derav, hvori Ri betyr en substituert arylgruppe som naftyl eller fenyl, karakterisert ved at den omfatter å underkaste en forbindelse med formelen der Ri er som angitt ovenfor og R2 er en alkylgruppe inneholdende minst 3 karbonatomer, påvirkning av en mikroorganisme valgt blant genera Graphium, Exophiala eller Rhinocladiella, istand til stereoselektiv oksydasjon av forbindelse II til forbindelse I med minst 70 vekt-# S-konfigurasjon, i 0,5 timer til 10 dager ved en temperatur på 0 til 45°C og en pH-verdi på 3,5 til 8 under aerobe betingelser, med en kilde for oksygen som er tilstrekkelig til å møte de metabolske krav for mikroorganismene og til å omdanne forbindelse (II) til forbindelse (I), og, hvis ønskelig, omdanning av forbindelse (I) til et farmasøytisk akseptabelt salt eller en ester derav.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man benytter Exophiala jeanselmeiz, var. jeanselmei, CBS 258.86, Exophiala jeanselmei, CBS 537.76, Exophiala jeanselmei var. heteromorpha, CBS 232.33 og Rhinocladiella spinifera CBS 269.28, som omdanner forbindelse (II) til forbindelse (I) med i det minste 90 vekt-# S-konfigurasjon.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved ved at man benytter forbindelser med formel (II) der Ri er 6-metoksy-2-naftyl.
4. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at mikroorganismen eller stoffet avledet derfra som benyttes er immobilisert.
5. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, karakterisert ved at en mikroorganisme fra gruppen Graphium fructicola, CBS 256.86, Exophiala mansonii, CBS 257.86, Exophiala mansonii, CBS 259.86, Exophiala jeanselmei var. jeanselmei, CBS 258.86.
NO874978A 1986-12-01 1987-11-30 Stereospesifikk fremgangsmaate for fremstilling av 2-arylpropionsyrer med s-konfigurasjon NO169851C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB8628693 1986-12-01

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO874978D0 NO874978D0 (no) 1987-11-30
NO874978L NO874978L (no) 1988-06-02
NO169851B true NO169851B (no) 1992-05-04
NO169851C NO169851C (no) 1992-08-12

Family

ID=10608255

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO874978A NO169851C (no) 1986-12-01 1987-11-30 Stereospesifikk fremgangsmaate for fremstilling av 2-arylpropionsyrer med s-konfigurasjon

Country Status (14)

Country Link
EP (1) EP0274146B1 (no)
JP (1) JPS63219385A (no)
AT (1) ATE74380T1 (no)
AU (1) AU599438B2 (no)
DE (1) DE3777989D1 (no)
DK (1) DK627587A (no)
ES (1) ES2036572T3 (no)
FI (1) FI875251A (no)
GR (1) GR3004834T3 (no)
IL (1) IL84607A (no)
NO (1) NO169851C (no)
NZ (1) NZ222678A (no)
PT (1) PT86245B (no)
ZA (1) ZA878992B (no)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2626288B1 (no) * 1988-01-27 1990-05-18 Rhone Poulenc Sante
EP0386848A1 (en) * 1989-03-09 1990-09-12 Gist-Brocades N.V. Novel Exophiala species
US5213973A (en) * 1990-06-06 1993-05-25 Lonza Ltd. Microbiological process for oxidation of methyl groups
US5242816A (en) * 1990-07-10 1993-09-07 Lonza Ltd. Microbiological oxidation of alkyl groups in heterocycles
US5273895A (en) * 1992-10-26 1993-12-28 Sepracor, Inc. Enantioselective production of chiral carboxylic acids
US5750764A (en) * 1995-11-17 1998-05-12 Aeci Limited Synthesis and resolution of propionic acid derivatives
US7291340B2 (en) * 2005-12-29 2007-11-06 Elc Management Llc Extracts from black yeast for whitening skin

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4442207A (en) * 1982-06-30 1984-04-10 Nabisco Brands, Inc. Process for production of glucosone
WO1984001154A1 (en) * 1982-09-20 1984-03-29 Amgen Method and materials for the microbiological oxidation of aromatic hydrocarbons
DE3345660A1 (de) * 1983-12-16 1985-06-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur gewinnung von d(+)naproxen
JPS6112294A (ja) * 1984-06-26 1986-01-20 Kureha Chem Ind Co Ltd ２−（置換フエニル）プロピオン酸の製造方法
GB8514489D0 (en) * 1985-06-07 1985-07-10 Shell Int Research Producing 2-arylpropionic acids

Also Published As

Publication number Publication date
IL84607A (en) 1992-07-15
FI875251A0 (fi) 1987-11-27
PT86245B (pt) 1990-11-07
EP0274146A1 (en) 1988-07-13
AU8148087A (en) 1988-06-02
DE3777989D1 (de) 1992-05-07
DK627587D0 (da) 1987-11-30
EP0274146B1 (en) 1992-04-01
IL84607A0 (en) 1988-04-29
NO874978D0 (no) 1987-11-30
FI875251A (fi) 1988-06-02
ATE74380T1 (de) 1992-04-15
NO169851C (no) 1992-08-12
AU599438B2 (en) 1990-07-19
JPS63219385A (ja) 1988-09-13
NO874978L (no) 1988-06-02
ES2036572T3 (es) 1993-06-01
NZ222678A (en) 1989-10-27
GR3004834T3 (no) 1993-04-28
ZA878992B (en) 1988-05-26
DK627587A (da) 1988-06-02
PT86245A (en) 1987-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0074169B1 (en) Micro-biological production of muconic acid
EP0205215B1 (en) Process for the preparation of 2-arylpropionic acids
US4657863A (en) Stabilization of a mutant microorganism population
NO169851B (no) Stereospesifikk fremgangsmaate for fremstilling av 2-arylpropionsyrer med s-konfigurasjon
EP0392346B1 (en) Mevalonic acid-producing microorganism
US5043274A (en) Process for producing an optically active 2-arylpropionic acid
NO168714B (no) Fremgangsmaate for fremstilling av r-2,2-r1,r2-1,3-dioksolan-4-metano
US5075233A (en) Process for the preparation of 2-aryloxypropionic acids
US4673646A (en) Production of 2-hydroxymuconic semialdehyde
EP1576147B1 (de) Bakterienstämme delftia acidovorans mc1-s, ihre herstellung sowie ihre verwendung zur produktion der s-enantiomeren von 2-phenoxypropionsäure-derivaten
US4956285A (en) Process for the preparation of S-2,2-R1,R2 -1,3 -dioxolane-4-methanols
EP1576194B1 (de) Bakterienstämme delftia acidovorans mc1-r, ihre herstellung sowie ihre verwendung zur produktion der r-enantiomeren von 2-phenoxypropionsäure-derivaten
US4617156A (en) 2-hydroxymuconic semialdehyde bisulfite adduct
EP0071446A2 (en) Construction of microorganisms
US4666841A (en) Production of picolinic acid and pyridine products
Sundaram Regulation of myo-inositol catabolism in Aerobacter aerogenes
JPH0378104B2 (no)
GB2218985A (en) Producing optically active 2-aryloxypropionic acids
JPH0378103B2 (no)
JPS63207378A (ja) 新規微生物
JPH0320228B2 (no)
JP2004254630A (ja) 生物学的変換方法による１−ペンタノールの製造方法
JPH0587233B2 (no)
JPH04237495A (ja) ジアルコールの製造方法