NO159103B - Forhaandslaget innretning for lagring av naeringssubtrat for kvalitativ og kvantitativ bestemmelse av mikroorganismer. - Google Patents

Description

Oppfinnelsen vedrører en forhåndslaget innretning for lagring av næringssubstrat for kvalitativ og kvantitativ bestemmelse av mikroorganismer, fortrinnsvis av sykdomsfrem-kallende organismer.

Forhåndslagede næringssubstrater er kjent og består vanligvis av (a) et objektglass som er bestrøket med et eller flere forskjellige næringsstoffer, som (b) er fast forbundet med et skrulokk og under lagringen under inkuberingen befinner seg i et med lokket fast tilskrudd transparent skrukar. De anvendes for diagnostiske formål og for testing av kiminnholdet ved industrielle prosesser såvel som ved hygienekontroll, som neddykkings- eller avklappingsnæringsstoff.

De oftest anvendte forhåndslagede næringssubstrater består for det meste av en rettvinklet plastplate som objektglass, som for det meste endog er bestrøket på begge sider med et eller forskjellige næringsstoffer.

En vesentlig ulempe ved de kjente forhåndslagede næringssubstrater er den dårlige holdbarhet. Da næringsstoffene inneholder meget vann, er det selv ved omstendelig og omsorgsfull lagring neppe å unngå at en del av vannet fordamper og avskiller seg som kondensat på karveggen, resp. lokket. Uttørkede næringsstoffer er fullstendig ubrukbare. Hvis det oppsamlede kondensvann ved bevegelse av og til eller ved transport renner tilbake til næringssubstratflåtene eller sprøytes tilbake, så fører dette til inhomogeniteter på overflaten. Særlig hvis det er tilstede forskjellige næringsstoffer ved siden av hverandre, kan det komme uønskede forskyvninger av spesifikke løselige andeler i næringsstoffene, hvorved de taper sin spesifisitet og dermed blir ubrukbare for praksis.

Fremstilling av de hittil kjente forhåndslagede næringssubstrater er teknologisk og prismessig svært kostbare. Særlig når det gjelder objektglass med forskjellige næringsstoffer, så må disse påføres etter hverandre og avkjøles enkeltvis. Disse arbeidsprosesser må utføres under absolutt kimfrie betingelser, og det helt til det forhåndslagede næringssubstrat er ferdig tillaget.

Oppfinnelsen har stilt seg den oppgave å kvitte seg med feilene og tapene ved fordampning og kondensering av vannet i næringsstoffene. I tillegg stilles den oppgave å forbedre fremgangsmåten for fremstilling av objektglassene teknologisk og dermed også prismessig.

Denne oppgave løses ved at man omgir det bestrøkne objektglass under lagring med et hylster (i det følgende kalt omhylling) som før inokuleringen lett kan fjernes. Gjennom denne omhylling frigis intet eller bare et relativt: lite volum mellom det bestrøkne objektglass og omhyllingen, slik at intet eller bare et relativt lite volum, regnet på det totale volum av karet, vanndamp kan oppnås fra næringsstoffet. Gassvolumet mellom omhyllingen og karet virker som varmeisolater og forhindrer i betydelig grad at det danner seg kondensvann på innerveggen i omhyllingen. Det forhåndslagede næringssubstrat har således verken tendens til uttørking eller til for tidlig ødeleggelse på grunn av strømmende kondensvann eller kondensvann som spruter. Det henvises forøvrig til patentkravene.

Omhyllingen kan i det enkleste tilfelle bestå av en vanndamp-ugjennomtrengelig plastfolie, som ved øvre ende er klebet eller sveiset til skrulokket og ved den andire ende likeledes lukkes ved klebning eller sveising. Ved en foretrukken utførelsesform av oppfinnelsen består omhyllingen av en stiv hylse, som likeledes bare frigir et relativt lite volum mellom seg og det bestrøkne objektglass. Den slags hylser trekkes etter bestrykningen av objektglasset over objektglasset og trykkes tettende mot lokket.

Særlig ved stive eller relativt formstabile omhyllinger er det prinsipielt også mulig å trekke disse over objektglasset allerede før bestrykningen av objektglasset med næringsstoffet eller -stoffene og først deretter å fylle mellomrommene fullstendig med næringsstoffet eller -stoffene. I disse tilfeller er volumet mellom hylse og objektglass lik null. Ved denne utførelsesform må man passe på at næringsstoffet hefter dårlig til omhyllingen og hefter særlig godt til objektglasset, slik at omhyllingen uten at næringsstofet skades, kan fjernes. Ved egnet valg av materialer lar det seg oppnå en forskjellig hefting mellom omhyllingen og objektglasset på den ene side og næringsstoffet på den annen side. I tillegg kan befestigelsen til objektglasset forsterkes ved ribber og nupper. Ved denne utførelsesform forbindes lokket med objektglasset først etter innfylling av næringsstoffet, resp. -stoffene, dette kan riktignok også finne sted ved klebning, fortrinnsvis forbindes lokket ved hjelp av en smekklås med objektglasset (fig. 12).

Noen typiske utførelsesformer av den forhåndslagede innretning i henhold til oppfinnelsen er vist i fig. 1-5.

Fig. 1 viser et lengdesnitt gjennom et slikt næringssubstrat, mens fig. 2-5 viser tverrsnitt gjennom det bestrøkne objektglass 3 og omhyllingen 5. Fig. 12 viser et objektglass som er forbundet med lokket ved hjelp av en smekklås. I disse figurer betyr: 1) det transparente skrukar som er fast tilskrudd til lokket,

2) et skrulokk

3) objektglasset

4) et næringsstoff

5) omhyllingen (hylsteret)

6) en elastisk tetning

7) en vulst ved bunnen av omhyllingen, som omhyllingen trykkes fast mot tetningen 6 med. Fig. 2 viser et objektglass i hvilket opptil fire forskjellige næringsstoffer kan innbringes. Omhyllingen er i dette tilfelle stiv og rund, og kan som i fig. 1 trykkes mot tetningen ved hjelp av en vulst på bunnen.

Fig. 3 viser en annen vanlig utførelse av objektglasset,

på hvilket to forskjellige næringsstoffer kan være påført. Omhyllingen er i dette tilfelle rettvinklet og stiv og kan likeledes trykkes mot tetningen i skrulokket via en vulst ved bunnen.

Fig. 4 og 5 viser et objektglass på hvlket igjen opptil fire forskjellige næringsstoffer kan anbringes. Omhyllingen ligger her tett an i rund eller kvadratisk form og kan også anvendes som støpeform.

Objektglasset kan naturligvis også være trearmet, femarmet eller flerarmet. Omhyllingen kan da likeledes være rund eller fortrinnsvis trekantet, femkantet eller flerkantet (fig. 6-11).

Istedenfor de hittil oftest anvendte skrukar med et skrulokk kan det i henhold til oppfinnelsen også anvendes et kar på hvilket et lokk trykkes med smekk(lås)-tetning.

Som næringsstoff kommer prinsipielt alle kjente næringsstoffer på tale, eksempelvis CLED-næringsstoffene J:or bestemmelse av totalkimtallet i urinprøver. Ved objektglass med to forskjellige næringsstoffer vil man fortrinnsvis på den ene side igjen påføre CLED-agar og på den annen side igjen en Mac-CONKEY-agar som selektivt bare gjør de Gram-negative bakterier påviselige. Ved et næringsstoff med fire forskjellige næringsstoffer er det eksempelvis mulig å kombinere en CLED, en Mac-CONKEY, en Cetrimid-agar og et Nickerson-medium med hverandre. Cetrimid-agaren er i stand til å påvise Pseudomonas-gruppen, mens Nickerson-mediumet lar sopper og gjærsopper vegetere.

Selvfølgelig lar et slikt firedelt næringsstoff seg også enda en gang underdele i en øvre og en nedre del, slik at man ialt kan påføre åtte forskjellige næringsstoffer pa ett objektglass. Bruken av næringssubstratet foregår på den måte at man skrur av det transparente skrukar og fjerner og forkaster omhyllingen. Deretter dyppes enten hele objektglasset i en væskeprøve som skal undersøkes, f.eks. urin, og innføres etter avdrypping igjen i det transparente skrukar og inkuberes. Selvfølgelig er det også mulig å påføre, istedenfor å dyppe i urinprøven eller væskeprøven, også deler derav eller kulturer på de aktuelle felt, eksempelvis med pipette eller en trådløkke. Særlig ved næringsstoffer som rager ut over objektglasset, slik som i figurene 3 og 4, kan man gjennomføre podingen ved avklapping og avrulling med den prøve som skal undersøkes.

Etter inkuberingen foregår vurderingen på vanlig måte.

For lettere vurdering er det absolutt mulig å farve objektglasset helt eller delvis, slik at bedre farvekontraster kan oppnås.

Claims (1)

1. Forhåndslaget innretning for lagring av næringssubstrat for kvalitativ og kvantitativ bestemmelse av mikroorganismer, bestående av: a) et objektglass som er belagt med ett eller flere næringsstoffer, som b) er fast forbundet med et lokk og c) under lagringen og under inkuberingen befinner seg i et transparent kar som kan lukkes tett med et lokk, karakterisert ved at det bestrøkne objektglass (3) under lagringen er omgitt av et hylster (5) som lett kan fjernes før inokuleringen, som ikke frigjør noe volum eller bare et i forhold til det totale volum i karet lite volum mellom seg og det bestrøkne objektglass.