NO129960B - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- NO129960B NO129960B NO02633/69A NO263369A NO129960B NO 129960 B NO129960 B NO 129960B NO 02633/69 A NO02633/69 A NO 02633/69A NO 263369 A NO263369 A NO 263369A NO 129960 B NO129960 B NO 129960B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- antibioticum
- antibiotic
- solvate
- medium
- approx
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 32
- 241000218919 Micromonospora inyonensis Species 0.000 claims description 17
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000007859 condensation product Substances 0.000 claims description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 9
- URWAJWIAIPFPJE-YFMIWBNJSA-N sisomycin Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC=C(CN)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N URWAJWIAIPFPJE-YFMIWBNJSA-N 0.000 claims description 5
- 239000012458 free base Substances 0.000 claims description 4
- URWAJWIAIPFPJE-UHFFFAOYSA-N Rickamicin Natural products O1CC(O)(C)C(NC)C(O)C1OC1C(O)C(OC2C(CC=C(CN)O2)N)C(N)CC1N URWAJWIAIPFPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229930192786 Sisomicin Natural products 0.000 claims description 3
- 229960005456 sisomicin Drugs 0.000 claims description 3
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 11
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- -1 alkyl ketone Chemical class 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 2
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 2
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N salicylaldehyde Chemical compound OC1=CC=CC=C1C=O SMQUZDBALVYZAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- WJUFSDZVCOTFON-UHFFFAOYSA-N veratraldehyde Chemical compound COC1=CC=C(C=O)C=C1OC WJUFSDZVCOTFON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 241001157010 Lovoa swynnertonii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000187708 Micromonospora Species 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000606701 Rickettsia Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- YBZRLMLGUBIIDN-UHFFFAOYSA-N Spicamycin Chemical compound O1C(C(O)CO)C(NC(=O)CNC(=O)CCCCCCCCCCCCC(C)C)C(O)C(O)C1NC1=NC=NC2=C1NC=N2 YBZRLMLGUBIIDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001334 alicyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000007824 aliphatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N benzaldehyde Chemical group O=[11CH]C1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N crotonaldehyde Chemical compound C\C=C\C=O MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N crotonaldehyde Natural products CC=CC=O MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone Chemical compound OCC(=O)CO RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000012869 germination medium Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 238000002135 phase contrast microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 150000007519 polyprotic acids Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
- C07H15/222—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms
- C07H15/226—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings
- C07H15/234—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings attached to non-adjacent ring carbon atoms of the cyclohexane rings, e.g. kanamycins, tobramycin, nebramycin, gentamicin A2
- C07H15/236—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with at least two saccharide radicals directly attached to the cyclohexane rings attached to non-adjacent ring carbon atoms of the cyclohexane rings, e.g. kanamycins, tobramycin, nebramycin, gentamicin A2 a saccharide radical being substituted by an alkylamino radical in position 3 and by two substituents different from hydrogen in position 4, e.g. gentamicin complex, sisomicin, verdamycin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Mikrobiologisk fremgangsmåte til fremstilling av
et nytt antibiotikum betegnet Antibioticum 66-40,
senere også betegnet sisomicin.
Foreliggende oppfinnelse angår en mikrobiologisk fremgangsmåte til fremstilling av et nytt antibiotikum med bredt spektrum og betegnet Antibioticum 66-40. Det er senere også betegnet sisomicin. Dette nye antibiotikum motvirker veksten av grampositive og gramnegative bakterier. Det kan ifdlge oppfinnelsen fremstilles, isoleres og anvendes i sin frie form eller i form av et av fblgende derivater: et solvat, et salt, et solvat av et sådant,eller et kondensasjonsprodukt med et aldehyd.
Antibioticum 66-40 er et basisk pseudo-oligosaccharid som lett lar seg adskille fra andre pseudo-oligosaccharider ved sine biologiske, fysikalske og kjemiske egenskaper således som det beskrives i det folgende.
Antibioticum 66-40 har folgende generelle formel, som er slik å forstå at ingen stereokjemiske anvisninger må utledes av denne:
Det karakteristiske hovedtrekk ved oppfinnelsen er at en stamme av arten Micromonospora inyoensis"dyrkes i et vandig næringsmedium under aerobe betingelser, hvorpå man isolerer det nevnte antibiotisk aktive produkt i fri form eller i form av et solvat og, om onskes, overforer det således erholdte produkt til et syreaddisjonssalt eller et solvat av et sådant, eller til et kondensasjonsprodukt med et aldehyd.
Micromonospora inyoensis ble isolert fra en jordbunnspro-ve uttatt i Inyo National Forest i White Mountains, California.
(I det folgende er den i noen tilfelle referert til som M.inyoensis). Ett av denne arts karakteristika er dens evne til å danne Antibioticum 66-40. Den er aerob og vokser godt på overflaten av forskjellige faste og flytende næringsmedia. Den viser særlig god vekst og dannelse av det antibiotisk aktive produkt under submerse, aerobe betingelser.
En stamme av M.inyoensis er som levende organismer depo-nert i den permanente samling i The Northern Utilization and Research Division, Agricultural Research Service, US Department of Agriculture, Peoria, Illinois, hvor den er tildelt identifiserings-nummer NRRL 3292. Subkulturer av M.inyoensis NRRL 3292 er tilgjen-gelige for offentligheten efter anmodning til den ovennevnte insti-tusjon .
Denne stamme NRRL 3292 har vist seg å være godt egnet for anvendelse i fremgangsmåten ifolge oppfinnelsen.
M.inyoensis lar seg skille fra andre arter av Micromonospora ved forskjellige taxonomiske parametre. Dette belyses nær-mere ved nedenstående tabellariske sammenstilling. (Tabell A).
Angående kulturkarakteristika for M.inyoensis anfores folgende i tillegg til det som fremgår av ovenstående: Efter 14 dogns dyrkning av M.inyoensis ved 24 - 26°C i et agarmedium som inneholder 3 % "NZ Amine Type A", 1 % dextrose og 1,5 % agar observeres veksten å være fra nokså god til dårlig. Ma-kroskopisk er der ikke synlig noe luftmycelium. Fra tid til annen viser der seg noen få vel utviklede kolonier på et sent stadium i podningsområdet. På noen plater observeres der et svakt rodlig brunt diffunderbart pigment forbundet med koloniene.
Ved beskrivelsen av farvedannelsen brukes der her folgende referansesystem: FarvebetegneIsene består av to anvisere. Den fbrste er et farvenavn som er tatt fra "Descriptive Color Name Dictionary" av Tayler, Knoche og Granville, offentliggjort i 1950 av The Container Corporation of America, USA med et farvesjetong-nummer som tilsvarer farvens navn. Dette nummer taes fra "The Color Harmony Manual", 4.utgave, offentliggjort 1958 av The Container Corporation of America. Den annen anviser består av et farvenavn og nummer som refererer til synonyme eller nærliggende synonym i National Bureau of Standards (USA), Circular 553, 1.nov-ember 1955.
Farven av kolonienes overflate varierer fra Tile Red g5ne-Strong Brown 55 til Brown Mahogany mopi. Mikroskopisk sett er myceliet langstrakt og forgrenet, regulært og ikke tverrdelt, obser-vert ved fasekontrastmikroskopi. Myceliets diameter er tilnærmet 0,5 u.. Sporene bæres enkeltvis på enkle sporoforer med diameter fra 1,0 til 1,5 |x. Sporene har ru vegger og er eggformede til ku-leformede. M.inyoensis vokser godt ved 28 - 37°C, ingen vekst finner sted ved 50°C. På glucose-aspargin-agar-medium er veksten dårlig. En voksende koloni av M.inyoensis hydrolyserer gelatin, melk, stivelse og reduserer nitrater til nitriter når provene utfores således som beskrevet i Gordon et al. J. Bacteriology 69, 147 (1956) og 73, 15 (1957). Sucrose kan anvendes som kilde for carbon.
Ytterligere kulturkarakteristika for M.inyoensis er angitt i nedenstående tabell B.
M.inyoensis er istand til å nyttiggjore seg forskjellige kilder for carbon og nitrogen. I nedenstående tabell C er der oppfort observasjoner på nyttiggjorelse av carbohydrater. En visuell bedommelse av vekstgraden foretas i et medium som består av 0,5 % gjærekstrakt, 1 % carbohydrat og 1,5 % agar i destillert vann.
I nedenstående tabell D er nyttiggjorelse av nitrogen oppfort, som bestemt ved visuell bedommelse av vekst på agarplater i et medium som består av 1 % glucose, 1,5 % agar og en nitrogenkilde som angitt i tabellen, alt i destillert vann.
Antibioticum 66-40 har et karakteristisk absorpsjonsspek-trum i det infrarbde område, i mineralolje (Nujol) således som vist på fig. 1 i vedfbyede tegning. De mer betegnende absorpsjonsbånd er angitt i nedenstående tabell E hvor: S =. sterkt
M = middels
W = svakt
br = bredt VS = meget sterkt
VW = meget svakt
Antibioticum 66-40 har også et karakteristisk kjernemagne-tisk resonansespektrum [NMR spektrum], således som vist på fig. 2 i vedfoyede tegning. NMR spektret ble erholdt ved anvendelse avet "Varian A-60-A" spectrometer
på en opplosning av Antibioticum 66-40 i deu-teriumoxyd (DgO), (ca. 0,4 ml med konsentrasjon ca. 20 mg/ml). Spektret registeres i deler pr. million deler (ppm) fra natriumsaltet av 3-(trimethylsilo)-propansulfonsyre, den interne standard.
I den folgende tabell F oppfores ytterligere data angående kvalitative prover med Antibioticum 66-40 (i form av fri base) og fysikalske konstanter for samme.
TABELL F
a) FarVereaksjoner
b) Fysikalske konstanter Absorpsjon i det ultrafiolette område: gjennomsiktig i området mellom 220 og 400 mp.. c) Opplbselighet av Antibioticum 66-40-base i forskjellige opplos-ningsmidler
+) Terminologien på engelsk er iflg. U.S.Pharmacopia XVIII, side 8.
I nedenstående tabell G er angitt massespektrum for Antibioticum 66-40 i form av fri base. I denne tabell betegner m/e i overskriften forholdet masse til ladning, mens Rel. Int. betegner relativ intensitet, og som navnet angir, oppfores intensiteten for toppene ved de forskjellige forhold masse til ladning (m/e) i forhold til samme for toppen m/e = 118.
Som nevnt i det foregående omfatter oppfinnelsen også fremstilling av derivater av Antibioticum 66-40, nemlig dets solvater (f.eks. hydrater), salter og solvater av sådanne, samt dets kondensasjonsprodukter med aldehyder. Slike derivater bor selvfol-gelig være akseptable i farmasøytisk henseende.
Noen av disse derivater beskrives i detalj nedenfor.
Da Antibioticum 66-40 er basisk, danner det lett ikke giftige salter med organiske og anorganiske syrer som f.eks. saltsyre, svovelsyre, fosforsyre, eddiksyre, stearinsyre, propionsyre, vinsy-re og benzoesyre. Der kan også anvendes delvis noytraliserte, flerbasiske syrer, nøytralisert f.eks. med en anorganisk base som natriumhydroxyd eller med en organisk base. I sin alminnelighet er saltene med mineralsyrer, som de salter som dannes med saltsyre, svovelsyre, fosforsyre og lignende, opplbselige i vann og kan erholdes ved konsentrering eller lyofi liser ing av vandige oppløsnin-ger av samme eller ved utfeldning med et med vann blandbart organisk opplbsningsmiddel, fortrinnsvis en lavere alifatisk alkohol eller et lavere alifatisk keton. Det er imidlertid å merke at hydro-klorider av Antibioticum 66-40 viser en vesentlig opplbselighet i methanol og derfor er atypiske. Hydrokloridene kan utfelles fra vandige oppløsninger ved tilsetning av et lavere alkylketon som aceton. Ved å titrere en vandig oppløsning av Antibioticum 66-40 med mindre enn den stokiometriske mengde syre er det mulig å danne partielle syreaddisjonssalter. Som her anvendt omfatter uttrykket "syreaddisjonssalter" alle slike forbindelser.
De ovenfor beskrevne ikke giftige syreaddisjonssalter viser i det vesentlige samme antibiotiske spektrum som den frie nit-rogenbase, de skiller seg imidlertid fra denne med hensyn til opp-loselighetsegenskaper.
Antibioticum 66-40 og dets syreaddisjonssalter danner hydrater med vann og danner andre solvater med organiske opplbsnings-midler. Det er derfor åpenbart at i de isolasjonsprosesser som her beskreves fåes dette antibiotikum normalt som et hydrat, mens dets syreaddisjonssalter normalt erholdes som solvater med lavere alifatiske alkoholer. Disse hydrater og solvater er relativt stabile. Derfor inneholder de isolerte produkter vann eller annet opplbsningsmiddel, i alminnelighet i en mengde på ca. 1 mol pr. mol antibiotikum.
Fysikalske data for noen derivater av denne art er sammen-stillet i nedenstående tabell H.
TABELL H
Fysikalske konstanter for Antibioticum 66- 40- salter Antibioticum 66- 40- hydroklorid som methanol- solvat [a]J<5> (C = 1 % i H20) + 112,2°
Analysen tilsvarer bruttoformele<n:><C>lgH37<N>5<0>7<v5>HCl-CH30H
Ultrafiolett absorpsjon: Gjennomsiktig i området mellom 220 og 400 mu-.
Antibioticum 66- 40- sulfat som methanol- solvat
[a]p<5> (C = 1 % i H20) + 105,1°
Analysen tilsvarer bruttoformelen: (C19H37N507)2•5H2S04•2CH30H
Ultrafiolett absorpsjon: Gjennomsiktig i området mellom 220 og 400 mu-.
Som nevnt i det foregående danner Antibioticum 66-40 også ikke giftige kondensasjonsprodukter med aldehyder
ved hjelp av fremgangsmåter som er i og for sig kjente. De foretrukne produkter som her kommer i betraktning og som sannsynligvis er Schiffske baser er de som fremstilles ved å kondensere Antibioticum 66-40 med aldehyder som har opp til 12 carbonatomer i molekylet. Blant slike aldehyder er alifatiske, alicyc-liske, aromatiske og heterocycliske forbindelser. Anvendte aldehyder
med lukket ringstruktur kan ha substituenter som hydroxyl, halogen, nitro, lavere alkoxy, lavere aBsanoyloxy og lignende. Sem eksempJer på aldehyder kan nevnes: acetaldehyd, crotonaldehyd, furfural, cyclopen-
tylacetaldehyd, vanillin, veratraldehyd, benzaldehyd, salicylalde-hyd og pyridoxal.
Det er å merke at disse kondensasjonsprodukter ikke er stabile i nærvær av vann.
Som nevnt i det foregående dannes Antibioticum 66-40 når den organisme som bygger opp samme, nemlig M.inyoensis, dyrkes i et vandig næringsmedium under aerobe og fortrinnsvis submerse betingelser .
For fremstilling av begrensede mengder av dette antibiotikum kan overflatekulturer i flasker eller rystekolber anvendes i stedet for submerse betingelser. Næringsmediet som organismen dyrkes i inneholder en kilde for carbon, f.eks. et assimilerbart carbohydrat. Der kreves også en assimilerbar nitrogenforbindelse eller et assimilerbart proteinholdig materiale. Blant de foretrukne kilder for carbon er glucose, maltose, mannose, sucrose, stivelse, maisstivelse og lignende. Blant de foretrukne kilder for nitrogen er maisstbpvæske, gjærekstrakter, soyabonnemel, kjottpeptoner, ka-seinhydrolysater, kjottekstrakter og lignende. Kombinasjoner av disse kilder for carbon og nitrogen kan anvendes med fordel. Det er i alminnelighet ikke nodvendig å tilsette sporelementer, da der anvendes ledningsvann i næringsmediet. Imidlertid er der funnet at tilsetning av koboltsalter er fordelaktig.
Fremstillingen av Antibioticum 66-40 kan utfores ved en hvilken som helst temperatur som forer til en tilfredsstillende vekst av mikroorganismer, f.eks. mellom 20 og 40°C, fortrinnsvis 25 - 35°C.
Vanligvis oppnåes optima 1.produksjon i lopet av 3 - 7 dogn. Mediets pH-verdi forblir i alminnelighet temmelig nær opp til 7 under fermentasjonen. Den sluttelige pH-verdi er delvis av-hengig av eventuelt nærvær av puffere, og innstilles med fordel på omkring 8,0 for steriliseringen. Når veksten foregår i store kar og tanker, er det onskelig å fremstille et vegetativt podningsmate-riale i et næringsmedium ved å pode dette med en jordbunnskultur eller en kultur på skråsubstrat eller med en lyofilisert kultur av organismen. Når der på denne måte er erholdt et aktivt podningsma-teriale, overfores dette under aseptiske betingelser til stbrre kar eller tanker. Det medium i hvilket det vegetative podningsmateria-le fremstilles kan være det samme som, eller forskjellig fra det som anvendes for fremstillingen av det antibiotiske middel i tanker, forutsatt at man oppnår en god vekst av mikroorganismen.
Efter fullfbring av fermentasjonen kan mediet opparbeides f.eks. på folgende måte: hele mediets pH-verdi innstilles på ca. 2
med mineralsyre, fortrinnsvis vandig svovelsyre, hvorved det basiske vannopplbselige antibiotikum frigjbres fra myceliet <p>g opplbses i det vandige fermentasjonsmedium. Hele blandingen filtreres for fjernelse av næringsmediet, hvorpå filtratet nbytraliseres med påfblgende tilsetning av oxalsyre for å utfelle kalsiumioner. Efter ytterligere filtrering og innstilling på nbytralitet, fortrinnsvis med ammoniakk, ledes det klare nøytraliserte filtrat gjennom en ioneutvekslende harpiks, fortrinnsvis av "IRC-50 Amberlite"-typen i ammoniumformen. Eksempler på harpikser av denne type som her kan anvendes både for an-ionisk og kationisk utveksling finnes i "Handbook of Chemistry and Phsycis", 42.utgave, Chemical Rubber Publishing Company, Cleveland, Ohio (1960). Det forbrukte næringsmedium kastes vekk, og det antibiotiske middel elueres fra harpiksen med ammoniakk. Eluatet konsentre-res og inndampes til et residuum som består av urent Antibioticum 66-40 med et potensial på ca. 5O0 mikrogram pr. mg, bestemt ved den metode som beskrives i det folgende.
Rensning av det urene antibiotikum kan utfores ved anvendelse av en anioneutvekslende harpiks, fortrinnsvis "Dowex 1 X 2" eller en "Amberlite IRA 401S" type. Det kan da adsorberes.fra en vandig opplbsning på kolonnen og elueres fra denne med destillert vann. Ma-terialet som er erholdt på denne måte viser et potensial på tilnærmel-sesvis 900 mikrogram pr. mg. Alternativt lar det urene antibiotikum sig rense ved f.eks. kromatografi i kolonnen på cellulose under anvendelse av et opplbsningsmiddel-system bestående av kloroform, methanol, 17 % ammoniumhydroxyd (2:1:1). Opplbsningsmiddelsystemets ovre fase anvendes til forst å "fukte" kolonnen mens den nedre fase anvendes til elueringsformål. Det antibiotiske middel kan anbringes i kolonnen ved adsorpsjon fra en konsentrert opplbsning i den ovre fase av det ovenfor nevnte opplbsningsmiddelsystem.
For å undersbke de forskjellige preparater på potensial uttrykt som mikrogram pr. mg av Antibioticum 66-40 anvendes i alminnelighet en standardmetode, "cylinder cup assay method", under anvendelse av Staphylococcus aureus ATCC 6538P (ATCC = American Type Culture Collection) som prbveorganisme. Denne metode er fullstendig analog med1den som er beskrevet av Oden et al. i "Antimicrobial Agents and Chemotherapy" (1963): Et mikrogram av det antibiotiske middels aktivitet er den mengde materiale som frembringer en sone-respons på 16,3 + 0,9 mm under provningsmetodéns betingelser, og uttrykkes med mikrogram pr. mg.
I det folgende beskrives som eksempler noen utforelsesfor-mer for fremgangsmåte til fremstilling av Antibioticum 66-40 ved fer-mentas jon og isolering av produktet.
Eksempel 1
Fermentasjon i tank av Micromonospora inyoensis
Spiretrinn 1
Under aseptiske betingelser tilsettes en lyofilisert kultur (eller celler erholdt fra en kultur på skråsubstrat) av M. inyoensis til en 300 ml rystekolbe som inneholder lOO ml av folgende sterile medium:
Kolben og dens innhold inkuberes i 4 dogn ved 36°C på.et roterende rysteapparat (280 omdreininger pr. minutt, 50,8 mm slag).
Spiretrinn 2
Under aseptiske betingelser overfores 25 ml av mediet fra spiretrinn 1 til en 2 liters rystekolbe som inneholder 500 ml av det ovenfor angitte sterile spiringsmedium. Kolben og dens innhold inkuberes i 3 dogn ved 28°C på et roterende rysteapparat (280 omdreininger pr. minutt, 50,8 mm slag).
Fermentasjonstrinn
Under aseptiske betingelser overfores 500 ml av mediet erholdt fra spiretrinn 2 til en 14 liters fermentasjonstank som inneholder 9,5 liter av folgende sterile medium:
For sterilisering av dette medium innstilles dets pH-verdi på 8. Der fermenteres under aerobe betingelser i 66 - 90 timer under omroring med 250 omdreininger pr. minutt og med lufttilfors el på 4,5 liter pr. liter pr. minutt og ved 22,5 atm. Potensialet av det antibiotikum som var dannet ved slutten av denne periode når en topp på 150 - 225 mikrogram pr. ml og forblir relativt konstant. Fermenta-sjonsmediets pH-verdi endres ganske lite under dannelsen av Antibioticum 66-40, idet den varierer i området mellom 6,8 og 7,3.
Eksempel 2
Isolering av Antibioticum 66- 40
Hele mediet fra eksempel 1 innstilles på en pH-verdi på 2 med 6N svovelsyre. (For dette eksempels formål angis mengder bereg-net på 170 liter fermentasjonsmedium erholdt ved å blande surgjorte media fra 17 charger erholdt ved å gå frem som angitt i eksempel 1). Det surgjorte medium omrores i ca. 15 minutter, hvorpå det filtreres. Myceliet vaskes med vann, og vaskevannet blandes med filtratet. Blan-dingens pH-verdi innstilles på 7 med 6N ammoniumhydroxyd. Det således nøytraliserte filtrat tilsettes oxalsyre i en mengde som er til-strekkelig til å utfelle kalsium og filtreres. Blandingen nøytrali-seres påny med ammoniakk. Filtratet fores inn i en adsorpsjonskor-lonne for kationutveksling og som inneholder 1500 - 2000 g "IRC-50 Amberlite" i ammoniumformen. Eluatet kastes vekk, harpiksen vaskes med vann og elueres med 2N ammoniakk. Der oppsamles fraksjoner på 400 ml som evalueres ved skiveprovning med S. aureus ATCC 6538P.
De aktive fraksjoner blandes og inndampes til tbrrhet i vakuum, hvorved man får ca. 28 g uren Antibioticum 66-40 med en aktivitet på ca. 500 mikrogram pr. mg.
Eksempel 3
Rensning av Antibioticum 66- 4Q
28 g urent Antibioticum 66-40 erholdt således som angitt i eksempel 2 opploses i ICO ml destillert vann og tilfores til en ad-sorpsjonskolonne for anionutveksling med "Dowex" 1X2: hydroxylformen. 2CXX) g av denne harpiks suspenderes i vann, og suspensjonen bringes i en kolonne med diameter 63,5 mm og hoyde 914,4 mm. Kolonnen elueres med destillert vann med en hastighet på ca. 23 ml pr. minutt, idet der oppsamles fraksjoner på lOO ml. Der kontrolleres med en ledningsevnemåler og ved skiveprovning mot Staphylococcus aureus. Skiveprovningen frembringer en grov adskillelse av antibiotikumholdige eluatfraksjoner fra fraksjoner som er frie for antibiotikum. For å sikre at fraksjonene kombineres riktig, underkastes en del av hver fraksjon papirkromatografi under anvendelse av et kloroform: methanol:17 % ammoniumhydroxyd-system (2:1:1) som nedre fase. Hvert papir påfores ninhydrin ved forstbvning, og de eluater som inneholder likt materiale kombineres. De lyofiliseres derpå, hvorved man får ca. 5,7 g Antibioticum 66-40 som ved provning viser et potensial på ca. 900 mikrogram pr. mg.
Eksempel 4
Fremstilling av Antibioticum 66- 4Q- sulfat
3,9 g Antibioticum 66-40 i form av base fremstillet således som beskrevet i eksempel 3 opploses i 60 ml vann, og opplbsningens pH-verdi innstilles på 4,5 med 6N svovelsyre .Opplbsningen omrores derpå med avfarvende trekull i ca. en halv time og filtreres; filtratet tilsettes til ca. 1 liter methanol. Blandingen filtreres og torres, hvorved man får 4,8 g Antibioticum 66-40-sulfat som viser et potensial på ca. 640 mikrogram pr. mg.
Eksempel 5
Alternativ rensningsmetode for Antibioticum 66-40 over dets sulfat
200 g Whatman nr. 1 cellulosepulver blandes med 20 ml av den ovre fase av et opplosningsmiddelsystem bestående av kloroform: methanol:17 % ammoniumhydroxyd (2:1:1) og pakkes i små segmenter i en kolonne med indre diameter 6,35 mm og hoyde 508 mm. Man lar opplbs-ningsmiddelsysternets nedre fase lbpe gjennom kolonnen inntil der går ut et gult bånd av forurensninger. 2 g Antibioticum 66-40-sulfat fremstillet således som beskrevet i eksempel 4 opploses i ca. 3 ml
av den ovre opplosningsmiddel-fase, blandes med litt cellulosepulver, torres i vakuum og pakkes på cellulosekolonnens topp. Man lar den nedre fase lope gjennom kolonnen med en hastighet på 1 ml pr. minutt, idet man oppsamler 15 ml fraksjoner hvert 15.minutt.
Like deler av hver fraksjon avsettes i flekker på filter-papir og proves med ninhydrinreagens for å fastslå nærvær eller fra-vær av antibiotikum. Papirkromatografi av de antibiotikumholdige fraksjoner viser at det onskede materiale befinner sig mellom fraksjoner 121 og 190.
Fraksjonene 121 - 190 blandes og inndampes til torrhet, opploses påny i vann og ledes gjennom "IRA 401S" (en anionutveks-lerharpiks) i hydroxylkretslopet. Eluatets pH-verdi innstilles på 4,5 med svovelsyre. Eluatet behandles så med trekull, filtreres og inndampes til et mindre volum. Konsentratet tilsettes. til et overskudd av methanol, ,og det hvite bunnfall som herved dannes, fraskil-les ved filtrering. Bunnfallet opploses i vann og ledes gjennom en "IRA 401S"-harpikskolonne i hydroxylformen. Utlopet oppsamles, inndampes og lyofiliseres, hvorved man får ca. 300 mg Antibioticum 66-40 i form av base og som viser et potensial på ca. lOOO mikrogram pr. mg.
Eksempel 6
Fremstilling av Antibioticum 66- 4Q- hydroklorid
104,7 mg Antibioticum 66-40 i form av base fremstillet således som beskrevet i eksempel 2 opploses i 4 ml vann, og.oppløsnin-gens pH-verdi innstilles på 4,5 med saltsyre. Opplbsningen inndampes så til torrhet, og residuet, opploses i methanol. Den erholdte opplbsning tilsettes til et overskudd av aceton og filtreres. Som bunnfall får man 130 mg Antibioticum 66-40-hydrokiorid med et potensial på 753 mikrogram pr. mg.
Eksempel 7
Fremstilling av krystallinsk Antibioticum 66- 4Q- monohydrat Man forbereder en (26 x 2,5 cm) silicagel kromatografiko-lonne under anveldelse av den nedre (organiske) fase av en opplbsningsmiddelblanding som består av isopropanol:CHC13:ammoniumhydroxyd i volumforholdet 1:2:1 som utviklings.-elueringsmiddel. 1,0 g base opploses i 5,0 ml opplbsningsmiddelblanding. Den erholdte opplbsning adsorberes på silicagel og kromatograferes. Der oppsamles 5,0 ml fraksjoner, og de onskede fraksjoners stilling bestemmes ved tynnskiktkromatografi på silicagelplater. De onskede (44-78) fraksjoner kombineres og inndampes i vakuum, hvorved man får en blek-gul sirup som efter azeotropisk destillasjon med ethanol krystalli-serer som blekgule rosetter. Det på denne måte erholdte produkt er monohydrat som smelter ved ca. 185 - 190°C. Utbyttet er ca. 650 mg.
Eksempel 8 Fremstilling av benzaldehyd-kondensasjonsprodukter
av antibioticum 66- 4Q
5,0 g Antibioticum 66-40 i 60 ml absolutt ethanol behandles med 5,9'g benzaldehyd (et lite overskudd over 5 ekvivalenter), og blandingen kokes under tiIbakelopskjoling 1 time. Den resulter-ende opplbsning avkjbles og filtreres, hvorved man får 7,0 g av et hvitt krystallinsk fast stoff, sm.p. 123 - 126°C [a]^ = + 43,2°
(C = 0,3 % i CHC±3). Elementaranalyse indikerer 5 benzaldehydres-ter.
På lignende måte kan man ved i stedet for benzaldehyd å anvende en ekvivalent mengde av vedkommende aldehyd få folgende aldehyd-kondensasjonsprodukter som f.eks.
Antibioticum 66-40-salicylidenderivat: sm.p. 159-163°C Antibioticum 66-40-pyridoxylidenderivat: " >300°C (a)p =51,1
(methanol)
Antibioticum 66-40-n-propylidenderivat: " 129-134°C Antibioticum 66-40-n-dodecylidenderivat: (a)o =+26>3(dioxan) Antibioticum 66-40-p-klorbenzyliden-
derivat: " 208-213°C Antibioticum 66-40-5-nitrofuryliden-
derivat: " >300°C
Antibioticum 66-40 og dets i farmasøytisk henseende akseptable solvater, salter og solvater av disse samt kondensasjonsprodukter med aldehyder har et bredt antibiotisk spektrum. Dette antibiotikum har som nevnt i det foregående den egenskap at det motvirker vekst av grampositive og gramnegative bakterier og det kan anvendes alene eller i kombinasjon med andre antibiotiske midler for å forhindre veksten av eller minske antallet bakterier i forskjellige omgivelser. Det kan f.eks. anvendes til desinfeksjon av laboratorieapparatur av glass og utstyr for tannbehandling samt me-disinsk utstyr som er infisert med Staphylococcus aureus eller med andre bakterier hvis vekst motvirkes av Antibioticum 66-40. På grunn av dets særlig effektive aktivitet mot gramnegative bakterier er det fordelaktig til å bekjempe infeksjoner som forårsakes av sådanne mikroorganismer.
Aktiviteten in vitro av Antibioticum 66-40 mot forskjellige grampositive og gramnegative bakterier er angitt i nedenstående tabell J. Den minimale inhiberende konsentrasjon (MIC) ble bestemt under anvendelse av et gjær-kjottuttrekk som provningsmedium. Der ble brukt en to-gangers seriefortynningsteknikk. MIC er midtpunktet mellom det siste klare reagensror og det fbrste uklare reagensror, bestemt ved visuell observasjon. Bestemmelsene ble utfort under anven-_3
deise av en 10 fortynning av en 24 timers kultur av de bakterier som ble provet. Alle reagensror ble inkubert i 18 timer ved 37°C. I tabell j ble der anvendt Antibioticum 66-40 med et potensial på lOOO mikrogram pr. mg.
Den akutte giftighet av Antibioticum 66-40 i form av dets sulfat ble bestemt på standardisert måte efter forskjellige veier, på mus med vekt 18 - 20 g. Data for giftigheten er oppfort i nedenstående tabell K, uttrykt som fri base.
TABELL K
Antibioticum 66-4Q's akutte giftighet
Antibioticum 66-40 viser antibakterievirkning overfor pa-togene bakterieinfeksjoner frembragt hos laboratorieforsbksdyr, særlig hos mus. For å bestemme in vivo den beskyttende aktivitet av Antibioticum 66-40 mot infeksjoner hos mus med opprinnelse fra pato-gene bakterier, ble musene to ganger gitt det antibiotiske middel, én gang umiddelbart for en intraperitonal injeksjon av de infiseren-de bakterier og én gang 4 timer efter sådan injeksjon. Antallet av overlevende dyr ble bestemt 48 timer efter infeksjonen, og de erholdte data analysert efter standard metoder for å bestemme PDC_-verdier med 95 %'s toleranse. I nedenstående tabell L er angitt den beskyttende aktivitet av Antibioticum 66-40 mot forskjellige patoge-ne bakterier.
TABELL L
Beskyttende virkning av Antibioticum 66- 4Q på mus
Det fremgår klart av tabell L at den terapeutiske indeks (LD5q/PD5q) ved subcutan innfbring av det antibiotiske middel varierer fra 330 til 2400 hva angår de grampositive organismer og fra 150 til 410 hva angår de gramnegative organismer.
Dessuten fikk mus som var infisert intraperitonalt med 8 doser LD,_q Rickettsia akaria en 100 %'s beskyttelse ved subcutan injeksjon av 2 mg Antibioticum 66-40 én gang pr. dogn i 4 dogn.
På grunn av de foran anforte in vivo data, og særlig på grunn av den gunstige terapeutiske indeks som vises av Antibioticum 66-40, er det åpenbart at Antibioticum 66-40 kan anvendes til å kon-trollere og behandle mange forskjellige infeksjoner hos pattedyr. Blant slike infeksjoner er de som forårsakes av organismer av genera som Streptococcus, Staphylococcus, Escherichia, Salmonella, Klebsi-ella, Proteus, Pseudomonas og lignende. Disse organismer forårsaker eller antas å forårsake mastit hos hornkveg, infeksjoner i urinveie-ne og diaré. Genera av samme organismer antas å forårsake hudsyk-dommer og sykdommer i de ovre åndedrettsorganer eller å alvorliggjo-re på forhånd eksisterende utslag av slike sykdommer hos pattedyr. Antibioticum 66-40 og dets derivater skaffer folgelig et kraftig middel til bekjempelse av slike organismer og av sykdomstilstander forårsaket av disse.
Claims (2)
1. Fremgangsmåte ved fremstilling av et nytt antibiotisk aktivt produkt betegnet Antibioticum 66-40, senere også betegnet "sisomicin", og med den generelle formel:
i den frie form eller i form av ett av folgende derivater: et salt, et solvat av den frie base, et solvat av et salt av denne, eller et kondensasjonsprodukt med et aldehyd, karakterisert ved at en stamme av arten Micromonospora inyoensis dyrkes i et vandig næringsmedium under aerobe betingelser, hvorpå man isolerer det nevnte antibiotisk aktive produkt i fri form eller i form av et solvat og, om onskes, overforer det således erholdte produkt til et syreaddisjonssalt eller et solvat av et sådant, eller til et kon-densas jonsprodukt med et aldehyd.
2. Fremgangsmåte ifolge krav 1, karakterisert ved at der som stamme anvendes Micromonospora inyoensis NRRL 3292.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO269570A NO134465C (no) | 1968-06-27 | 1970-07-09 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US74074268A | 1968-06-27 | 1968-06-27 | |
| US79730468A | 1968-12-16 | 1968-12-16 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO129960B true NO129960B (no) | 1974-06-17 |
Family
ID=27113740
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO02633/69A NO129960B (no) | 1968-06-27 | 1969-06-24 |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (2) | AT299448B (no) |
| BE (1) | BE735145A (no) |
| BG (1) | BG15881A3 (no) |
| BR (1) | BR6910078D0 (no) |
| CA (1) | CA931515A (no) |
| CH (2) | CH529833A (no) |
| CS (1) | CS149666B2 (no) |
| CY (1) | CY817A (no) |
| DE (1) | DE1932309C3 (no) |
| DK (1) | DK126510B (no) |
| ES (1) | ES368762A1 (no) |
| FI (1) | FI46177C (no) |
| FR (1) | FR2011732B1 (no) |
| GB (1) | GB1274518A (no) |
| IE (1) | IE33174B1 (no) |
| IL (1) | IL32476A (no) |
| IT (1) | IT1033250B (no) |
| KE (1) | KE2540A (no) |
| LU (1) | LU58942A1 (no) |
| MY (1) | MY7500184A (no) |
| NL (1) | NL155886B (no) |
| NO (1) | NO129960B (no) |
| OA (1) | OA04043A (no) |
| RO (1) | RO57462A (no) |
| SE (2) | SE366560B (no) |
| YU (1) | YU34906B (no) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4297486A (en) * | 1979-04-04 | 1981-10-27 | Toyo Jozo Kabushiki Kaisha | Aminoglycoside antibiotic G-367-1 and method for the production thereof |
| JPS5629598A (en) * | 1979-08-18 | 1981-03-24 | Toyo Jozo Co Ltd | Novel amino sugar antibiotic g-367-2 and its preparation |
-
1969
- 1969-06-24 GB GB31887/69A patent/GB1274518A/en not_active Expired
- 1969-06-24 SE SE08942/69A patent/SE366560B/xx unknown
- 1969-06-24 IT IT18634/69A patent/IT1033250B/it active
- 1969-06-24 OA OA53648A patent/OA04043A/xx unknown
- 1969-06-24 YU YU1616/69A patent/YU34906B/xx unknown
- 1969-06-24 IL IL32476A patent/IL32476A/en unknown
- 1969-06-24 CA CA055286A patent/CA931515A/en not_active Expired
- 1969-06-24 CY CY817A patent/CY817A/xx unknown
- 1969-06-24 LU LU58942D patent/LU58942A1/xx unknown
- 1969-06-24 SE SE7009228A patent/SE376425B/xx unknown
- 1969-06-24 CH CH976669A patent/CH529833A/de not_active IP Right Cessation
- 1969-06-24 BR BR210078/69A patent/BR6910078D0/pt unknown
- 1969-06-24 AT AT597469A patent/AT299448B/de not_active IP Right Cessation
- 1969-06-24 CH CH971771A patent/CH529743A/de not_active IP Right Cessation
- 1969-06-24 FR FR696921096A patent/FR2011732B1/fr not_active Expired
- 1969-06-24 NL NL6909642.A patent/NL155886B/xx not_active IP Right Cessation
- 1969-06-24 IE IE865/69A patent/IE33174B1/xx unknown
- 1969-06-24 FI FI691859A patent/FI46177C/fi active
- 1969-06-24 AT AT613570A patent/AT297929B/de not_active IP Right Cessation
- 1969-06-24 NO NO02633/69A patent/NO129960B/no unknown
- 1969-06-25 ES ES368762A patent/ES368762A1/es not_active Expired
- 1969-06-25 DK DK343169AA patent/DK126510B/da not_active IP Right Cessation
- 1969-06-25 BE BE735145D patent/BE735145A/xx not_active Expired
- 1969-06-26 BG BG012532A patent/BG15881A3/bg unknown
- 1969-06-26 CS CS694518A patent/CS149666B2/cs unknown
- 1969-06-26 RO RO60355A patent/RO57462A/ro unknown
- 1969-06-26 DE DE1932309A patent/DE1932309C3/de not_active Expired
-
1975
- 1975-07-10 KE KE2540*UA patent/KE2540A/xx unknown
- 1975-12-30 MY MY1984/75A patent/MY7500184A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| YU161669A (en) | 1979-10-31 |
| CH529833A (de) | 1972-10-31 |
| DE1932309C3 (de) | 1975-02-20 |
| NL6909642A (no) | 1969-12-30 |
| DE1932309A1 (de) | 1970-01-29 |
| YU34906B (en) | 1980-04-30 |
| SE366560B (no) | 1974-04-29 |
| GB1274518A (en) | 1972-05-17 |
| FI46177C (fi) | 1973-01-10 |
| IE33174L (en) | 1969-12-27 |
| LU58942A1 (no) | 1969-11-11 |
| SE376425B (no) | 1975-05-26 |
| BE735145A (no) | 1969-12-29 |
| CY817A (en) | 1976-12-01 |
| IT1033250B (it) | 1979-07-10 |
| AT299448B (de) | 1972-06-26 |
| OA04043A (fr) | 1979-10-15 |
| BG15881A3 (bg) | 1972-04-12 |
| BR6910078D0 (pt) | 1973-02-08 |
| FR2011732A1 (no) | 1970-03-06 |
| DK126510B (da) | 1973-07-23 |
| FI46177B (no) | 1972-10-02 |
| CH529743A (de) | 1972-10-31 |
| DE1932309B2 (de) | 1974-06-20 |
| CS149666B2 (en) | 1973-07-25 |
| IL32476A0 (en) | 1969-08-27 |
| IE33174B1 (en) | 1974-04-03 |
| IL32476A (en) | 1972-09-28 |
| AT297929B (de) | 1972-04-10 |
| CA931515A (en) | 1973-08-07 |
| MY7500184A (en) | 1975-12-31 |
| KE2540A (en) | 1975-07-18 |
| RO57462A (no) | 1974-12-15 |
| ES368762A1 (es) | 1971-04-01 |
| NL155886B (nl) | 1978-02-15 |
| FR2011732B1 (no) | 1973-01-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3832286A (en) | Sisomicin and methods for its production | |
| US5814488A (en) | Semisynthetic 1-N-ethylgentamicin C1a and method for its preparation | |
| US4161523A (en) | Rosamicin esters, acid addition salts and methods for production thereof | |
| US3338786A (en) | Antibiotic av290 and production thereof | |
| US3344024A (en) | Antibiotic am-684 and method of production | |
| US3907771A (en) | Antibiotic 66-40 | |
| JPS61148189A (ja) | Ｃｌ−１５７７ｄおよびｃｌ−１５７７ｅ抗生／抗腫瘍化合物およびそれらの製法 | |
| US4011390A (en) | Semi-synthetic aminocyclitol aminoglycoside antibiotics and methods for the preparation thereof | |
| US3987029A (en) | Antibacterial antibiotics AM31α, AM31β and AM31γ | |
| NO129960B (no) | ||
| US4234690A (en) | Method for producing rosaramicin (rosamicin) | |
| US3956068A (en) | Antibiotic G-52 and method for the production thereof | |
| Murayama et al. | Fragin, a New Biologically Active Metabolite of a Pseudomonas: Part I. Isolation, Characterization and Biological Activities | |
| NL8001842A (nl) | Nieuwe antibiotica die istamycinen zijn genoemd, werk- wijzen voor de bereiding van deze antibiotica, alsmede farmaceutische preparaten met werkzaamheid tegen bacterien die deze antibiotica bevatten en werkwijze voor het remmen van de groei van bacterien. | |
| JPS5945890A (ja) | 新規抗生物質アクミマイシンおよびその製造法 | |
| US4209511A (en) | Aminoglycoside antibiotics and process for production thereof | |
| USRE29903E (en) | Antibacterial antibiotics AM31α, AM31β and AM31γ | |
| US3986929A (en) | Antibiotic from micromonospora purpurea ji-20 | |
| US4001209A (en) | Antibiotic g-52 and method for the production thereof | |
| US3903072A (en) | Antibiotic from {i micromonospora purpurea | |
| US4108724A (en) | Method for preparing antibiotic P-2563 using Pseudomonas fluorescens | |
| JPS62263196A (ja) | １４−ハイドロキシエリスロマイシン誘導体およびその製造方法 | |
| US4049498A (en) | Methods for the preparation of semi-synthetic aminocyclitol aminoglycoside antibiotics | |
| US4234685A (en) | Microbiological methylation of aminoglycosyl-aminoglycosides | |
| US3997403A (en) | Antibiotic G-418 and the production thereof |