NL1028087C2 - Sulfonamiderivaten voor de behandeling van ziekten. - Google Patents

Description

Sulfonamidederivaten voor de behandeling van ziekten 5 Deze uitvinding betreft P2-agonisten met algemene formule:

OH

ï H

‘° „oJy">co-^vq' nhso2ch3 o 15 waarbij R1, R2, n en Q1 de hieronder aangegeven betekenissen hebben, en werkwijzen voor de bereiding van, samenstellingen die deze bevatten en de toepassingen van dergelijke derivaten. 20 Adrenoceptoren zijn leden van de grote G-proteïne ge koppelde receptorsuperfamilie. De adrenoceptorsubfamilie is zelf verdeeld in de a- en β-subfamilies waarbij de β-subfamilie bestaat uit ten minste drie rèceptorsubtypen: βΐ, β2 en β3. Deze receptoren vertonen verschillende ex-25 pressiepatronen in weefsels van diverse systemen en organen van zoogdieren. β2 adrenergische (β2) receptoren worden hoofdzakelijk tot expressie gebracht in gladdespier-cellen (b.v. vaat-, luchtpijp-, uterus- of darmgladdespie-ren) , terwijl β3 adrenergische receptoren hoofdzakelijk 30 tot expressie worden gebracht in vetweefsels (derhalve zouden P3-agonisten mogelijk nuttig kunnen zijn bij de behandeling van zwaarlijvigheid en diabetes) en βΐ adrenergische receptoren worden hoofdzakelijk tot expressie gebracht in hartweefsels (derhalve worden βΐ-agonisten 35 hoofdzakelijk toegepast als hartstimuleringsmiddelen).

De pathofysiologie en behandelingen van luchtwegziek-ten zijn uitgebreid besproken in de literatuur (voor refe- 1028087 2 rentie zie Barnes, P.J. Chest, 1997, 111:2, pp. 17S-26S en Bryan, S.A. c.s., Expert Opiniori on investigational drugs, 2000, 9:1, pp. 25-42) en derhalve zal slechts een korte samenvatting hier worden opgenomen om enige achtergrondin-5 formatie te verschaffen.

Glucocorticosteroïden, anti-leukotriënen, theofylli-ne, cromonen, anti-cholinergica en p2-agonisten vormen ge-neesmiddelcategorieën die momenteel worden toegepast om allergische en niet-allergische luchtwegziekten zoals ast-10 ma en chronische obstructieve luchtwegziekte (COPD) te behandelen. Behandelingsrichtlijnen voor deze ziekten omvatten zowel kort als lang werkende geïnhaleerde P2-agonis-ten. Kort werkende, snel begin P2-agonisten worden toegepast voor "reddings"luchtpijpverwijding, terwijl lang wer-15 kende vórmen onderhouden verlichting verschaffen en worden toegepast als onderhoudstherapie.

Luchtpijpverwijding wordt gemedieerd via agonisme van de P2-adrenoceptor tot expressie gebracht op luchtweg gladdespiercellen, welke resulteert in ontspanning en der-20 halve luchtpijpverwijding. Derhalve kunnen, als functionele antagonisten, p2-agonisten de effecten van alle luchtpi jpvernauwende substanties, waaronder leukotrieen D4 (LTD4), acetylcholine, bradykinine, prostaglandinen, histamine en endothelinen voorkomen en omkeren. Omdat P2-25 receptoren zo ruim in de luchtweg verdeeld zijn, kunnen P2-agonisten ook andere typen cellen die een rol spelen bij astma beïnvloeden. Bijvoorbeeld is gerapporteerd dat P2-agonisten mastcellen kunnen stabiliseren. De remming van de afgifte van luchtpijpvernauwende substanties kan 30 zijn hoe P2-agonisten de luchtpijpvernauwing geïnduceerd door allergenen, oefening en koude lucht blokkeren. Verder remmen P2-agonisten cholinergische neurotransmissie in de menselijke luchtweg, hetgeen kan resulteren in verminderde cholinergische reflex luchtpijpvernauwing.

35 Behalve de luchtwegen, is ook vastgesteld dat P2- adrenoceptoren ook tot expressie worden gebracht in andere organen en weefsels en derhalve kunnen P2-agonisten, zoals 1028087 3 die beschreven in de onderhavige uitvinding, toepassing hebben bij de behandeling van andere ziekten zoals, maar niet beperkt tot die van het centrale zenuwstelsel, premature weeën, congestief hartfalen, depressie, ontstekings-5 en allergische huidziekten, psoriasis, proliferatieve huidziekten, glaucoom en bij aandoeningen waar er een voordeel is in het verlagen van maagzuurgraad, in het bijzonder bij maag- en peptische verzwering.

Talrijke P2-agonisten zijn echter beperkt in hun toe-10 passing ten gevolge van hun lage selectiviteit of nadelige bijwerkingen gedreven door hoge systemische blootstelling en hoofdzakelijk gemedieerd door werking op P2-adreno-receptoren tot expressie gebracht buiten de luchtwegen (spiertrillen, tachycardie, hartkloppingen, rusteloos-15 heid). Derhalve is er een behoefte aan verbeterde middelen in deze categorie.

Dienovereenkomstig is er nog altijd een behoefte aan p2-agonisten die een geschikt farmacologisch profiel zouden hebben, bijvoorbeeld in termen van kracht, farmacoki-20 netiek of duur van werking. In deze context betreft de onderhavige uitvinding nieuwe P2-agonisten.

Diverse sulfonamidederivaten zijn reeds beschreven. Bijvoorbeeld beschrijft W002066250 verbindingen actief als P3-agonist, selectief ten opzichte van P2, met formule: 25

OH

30 w Λ ^ <'> waarbij m 2 kan zijn, Ri H, OH of NR5SO2R5 kan zijn (waar-35 bij R5 H of C1-C6 alkyl is), Z een binding kan zijn, R2 H of Ci~C6 alkyl kan zijn, R4 Οχ-Οβ alkyl kan zijn, B fenyl kan zijn, Y 0χ-0β alkyl is en A fenyl kan zijn.

1028087 4 W002/000622 beschrijft selectieve p3-agonisten met formule: 5 OH R2 r1_Xi f *Χ^-*τ** ® 10 waarbij R1 fenyl gesubstitueerd met hydroxy en alkylsulfo-nylamino kan zijn, Xi een binding kan zijn, R2 waterstof kan zijn, R3 waterstof of hydroxyalkyl is, X2 CH2 kan zijn, 15 X3 een binding, O of NH is en R4 cyclische groep is.

Andere sulfonamidederivaten worden ook beschreven in Amerikaans Octrooischrift 5.776.983 als p3-agonisten. Deze hebben meer specifiek de formule:

20 ?H H

R6 R3 R*

R2 T

25 NHS02R1 waarbij R1 CH3 kan zijn, R2 OH kan zijn, R6 H kan zijn, R3 H of alkyl kan zijn, R4 H, alkyl kan zijn, R5 H kan zijn, R5' 30 C(0)NR6R6 kan zijn, waarbij R6 en R6' H of lagere alkyl kunnen zijn.

Geen van de bovenstaande sulfonamidederivaten hebben echter een P2-agonistactiviteit en een farmacologisch profiel getoond dat mogelijk maakt dat deze kunnen worden 35 toegepast als efficiënte geneesmiddelen bij de behandeling van P2-gemedieerde ziekten en/of aandoeningen, in het bij- 1028087 5 zonder allergische en niet-allergische luchtwegziekten of andere ziekten zoals de eerder aangehaalde.

De uitvinding betreft de verbindingen met algemene formule (1): 5

OH

T H

ΙΓίΓ λ (1) 10 HO Jl nhso2ch3 waarbij de (CH2)n-C (=0) Qx-groep in de meta- of para-positie 15 is, R1 en R2 onafhankelijk worden gekozen uit H en C1-C4 alkyl, n 0, 1 of 2 is en Q1 een groep is gekozen uit: R3 R3 R4 Γ \ / R8 JL /R4 ./N^AR6 ιβ 25 en een groep *-NR8-Q2-A, waarbij p 1 of 2 is, Q2 een C1-C4 alkyleen eventueel gesubstitueerd met OH is, R8 H of C1-C4 alkyl is en A pyridyl eventueel gesubstitueerd met OH, C3-C7 cycloalkyl eventueel gesubstitueerd met OH of een groep 30 R3 R4 cci* 35 RS R' R6 of 1028087 6 is, waarbij R3, R4, R5, R6 en R7 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H, C1-C4 alkyl, OR9, SR9, halogeen, CN, CF3, OCF3, COOR9, so2nr9r10, CONR9R10, NR9R10, NH-COR10 en fenyl eventueel gesubstitueerd met 1 tot 3 groepen 5 gekozen uit OR9, halogeen en C1-C4 alkyl; waarbij R9 en R10 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H of C1-C4 alkyl en de * het bevestigingspunt aan de carbonylgroep voorstelt; waarbij de groep Q1 is gesubstitueerd met ten minste één 10 hydroxygroep; of, indien geschikt, de farmaceutisch aanvaardbare zouten en/of isomeren, tautomeren, solvaten ervan of isotope variaties daarvan.

De verbindingen met formule (1) zijn agonisten van de 15 p2-receptoren, die bijzonder nuttig zijn voor de behandeling van p2-gemedieerde ziekten en/of aandoeningen, door het tonen van uitstekende kracht, in het bijzonder indien toegediend via de inhalatieroute.

In de hierboven staande algemene formule (1) duiden 20 C1-C4 alkyl en C1-C4 alkyleen een rechtketenige of vertakte groep aan met 1, 2, 3 of 4 koolstof atomen. Dit is ook van toepassing als deze substituenten dragen of voorkomen als substituenten van andere resten, bijvoorbeeld in 0-(Ci-C4)alkylresten, S-(C1-C4) alkylresten, enz.... Voorbeelden 25 van geschikte (C1-C4) alkylresten zijn methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl.... Voorbeelden van geschikte (C1-C4)alkoxyresten zijn methoxy, ethoxy, n-propyloxy, iso-propyloxy, n-butyl-oxy, iso-butyloxy, sec-butyloxy en tert-butyloxy....

30 De C3-C7 cycloalkyl omvat cyclopropyl, cyclobutyl, cy- clopentyl, cyclohexyl en cycloheptyl. C3-C7 cycloalkyl die de voorkeur hebben zijn gesubstitueerd met OH.

Tenslotte duidt halogeen een halogeenatoom aan, gekozen uit de groep bestaande uit fluor, chloor, broom en 35 jood, in het bijzonder fluor of chloor.

In het volgende betekent de vrije binding op de fe-nylgroep zoals in de onderstaande structuur, 1028087 7 5 "θ" dat de fenyl kan zijn gesubstitueerd in de meta- of para-positie.

10 De verbindingen met de formule (1) NHSOzMe 0 20 kunnen worden bereid met behulp van conventionele procedures zoals door de volgende illustratieve werkwijzen waarbij R1, R2, Q1 en n zijn zoals eerder gedefinieerd voor de verbindingen met de formule (1) tenzij anderszins vermeld. De amidederivaten met de formule (1) kunnen worden 25 bereid door een zuur met formule (2) of een zout daarvan:

QH

| H

30 ij Λ T J-iCHJL «h

0 HO'^f R1R2 ^ Y

NHS02Me ° 35 te koppelen met een amine met formule NHR8-Q2-A (3), 1028087 8 R3

Rl /RA R8 5 (CH^”VV~R5 H "UUn^ R6 (3'), of R6 (3").

De koppeling wordt in het algemeen uitgevoerd in een 10 overmaat van genoemd amine als een zuurreceptor, met een conventioneel koppelingsmiddel (b.v. 1-(3-dimethylamino- propyl ) -3-ethylcarbodiimidehydrochloride of N,N'-dicyclo-hexylcarbodiimide), eventueel in aanwezigheid van een katalysator (b.v. 1-hydroxybenzotriazoolhydraat of 1-15 hydroxy-7-azabenzotriazool), en eventueel in aanwezigheid van een tertiair amine base (b.v. N-methylmorfoline, tri-ethylamine of diisopropylethylamine). De reactie kan worden ondernomen in een geschikt oplosmiddel, zoals pyridi-ne, dimethylformamide, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxide, 20 dichloormethaan of ethylacetaat, en bij een temperatuur omvat tussen 10eC en 40°C (kamertemperatuur) gedurende een periode van 1-24 uur.

Genoemd amine (3), (3') of (3") is hetzij commercieel verkrijgbaar hetzij kan worden bereid met behulp van de 25 vakman algemeen bekende conventionele werkwijzen (b.v. reductie, oxidatie, alkylering, overgangsmetaal-gemedieerde koppeling, bescherming, ontscherming, enz...) uit commercieel verkrijgbaar materiaal.

Het zuur met formule (2) kan worden bereid uit de 30 overeenkomstige ester met formule (4):

|H H

<^V'^N'V'vYS (4) J J _A [I Tr<CH2)n^ORa ho'^t R R2 γ

35 I "O

NHS02Me 1028087 9 waarbij Ra een geschikte zuur beschermende groep is, bij voorkeur een (C1-C4) alkylgroep, welke omvat, maar niet beperkt is tot, methyl en ethyl, volgens elke de vakman algemeen bekende werkwijze om een zuur uit een ester te be-5 reiden, zonder de rest van het molecuul te modificeren. Bijvoorbeeld kan de ester worden gehydrolyseerd door behandeling met waterig zuur of base (b.v. waterstofchlori-de, kaliumhydroxide, natriumhydroxide of lithiumhydroxi-de) , eventueel in aanwezigheid van een oplosmiddel of 10 mengsel van oplosmiddelen (b.v. water, propionitril, 1,4-dioxan, tetrahydrofuran/water) , bij een temperatuur omvat tussen 20°C en 100°C, gedurende een periode van 1 tot 40 uur.

De ester met formule (4) kan worden bereid door reac-15 tie van een amine met formule (5): R?CO~(cHvoRa

20 O

waarbij Ra en n zijn zoals eerder gedefinieerd, met een bromide met formule (6) : 25

OH

IJ (6)

30 H0 T

NHS02Me

In een typerende procedure wordt het amine met formu-35 le (5) in reactie gebracht met een bromide met formule (6) eventueel in aanwezigheid van een oplosmiddel of mengsel van oplosmiddelen (b.v. dimethylsulfoxide, tolueen, N,N- 1 028087 10 dimethylformamide, propionitril, acetonitril), eventueel in aanwezigheid van een geschikte base (b.v. triethylami-ne, diisopropylethylamine, kaliumcarbonaat, kaliumwater-stofcarbonaat) bij èen temperatuur omvat tussen 80°C en 5 120°C, gedurende 12 tot 48 uur.

Het bromide met formule (6) kan worden bereid volgens de werkwijze van WO 02/06258 (p. 36, voorbeeld 14a).

Alternatief kan de ester met formule (4) waarbij n = 1 worden bereid uit het bromide met formule (7): 10

I" H

j3^VY>r (7) ho-'-'y’ r’ R2 15 NHSOzMe

In een typerende procedure wordt het bromide (7) be-20 handeld met een geschikte palladiumkatalysator (b.v. [1,1'-bis(difenylfosfino)ferroceen]dichloorpalladium(II)) onder een atmosfeer van koolmonoxide met behulp van RaOH als oplosmiddel (b.v. MeOH, EtOH) bij verhoogde temperatuur (100°C) en druk (tot 100 psi) om de ester met formule 25 (4) te geven.

Het amine met formule (5), waarbij Ri Me is en R2 H is, kan worden bereid als hetzij het (R)- hetzij (S) — enantiomeer uit het overeenkomstige beschermde amine met formule (8): 30 Rc ^ΝΧΎ^(0Η2)π^0Κ3 (8)

R1 R2 Y

O

35 1028087 11 waarbij Ra en n zijn zoals eerder gedefinieerd en Rb en Rc alle geschikte substituenten voorstellen zodat HNRbRc een chiraal amine is (bijvoorbeeld kan Rb waterstof zijn en kan Rc een α-methylbenzyl zijn), met dien verstande dat de 5 bindingen tussen N en Rb en N en Rc gemakkelijk kunnen worden gesplitst om het vrije amine met formule (5) te geven met behulp van standaard methodologie voor het afsplitsen van stikstof beschermende groepen, zoals die gevonden in het tekstboek T.W. GREENE, Protective Groups in 10 Organic Synthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981.

Het amine met formule (8) kan worden bereid als een enkelvoudig diastereomeer door reactie van een amine met formule HNRbRc met een keton met formule (9): 15 T \J)-(CH2)n^ORa

O

20 waarbij Ra, Rb, Rc en n zijn zoals eerder gedefinieerd.

In een typerende procedure leidt de reactie van het keton met formule (9) met het amine met formule HNRbRc tot 25 een chiraal tussenproduct dat op zijn beurt wordt gereduceerd door een geschikt reductiemiddel (b.v. natriumcyca-noboorhydride met formule NaCNBH3 of natriumtriacetoxy-boorhydride met formule Na(0Ac)3BH) eventueel in aanwezigheid van een droogmiddel (b.v. moleculaire zeven, magnesi-30 umsulfaat) en eventueel in aanwezigheid van een zure katalysator (b.v. azijnzuur) om het amine met formule (8) te geven als een mengsel van diastereomeren. De reactie wordt in het algemeen uitgevoerd in een oplosmiddel zoals te-trahydrofuran of dichloormethaan bij een temperatuur omvat 35 tussen 20ÖC en 80°C gedurende 3 tot 72 uur. Het resulterende product wordt vervolgens omgezet in het hydrochlori-dezout en selectief gekristalliseerd uit een geschikt op- 1028087 12 ι losmiddel of mengsel van oplosmiddelen (b.v. isopropanol, ethanol, methanol, diisopropylether of diisopropylether/ methanol) om (8) te geven als een enkelvoudig diastereo-mèer.

5 Het keton met formule (9) waarbij η = 1 kan worden bereid door palladium gemedieerde koppeling van een aryl-halogenide met formule (10): 10 Jl “j“\^ORa (10)

O

15 waarbij Ra is zoals eerder gedefinieerd en Hal een halo-geenatoom voorstelt, dat omvat, maar niet is beperkt tot, broom en jood, met een enolaat of enolaatequivalent.

In een typerende procedure wordt het arylhalogenide met formule (10) in reactie gebracht met een tinenolaat 20 in-situ gegenereerd door behandeling van isoprenylacetaat met tri-n-butyltinmethoxide met formule BuaSnOMe in aanwezigheid van een geschikte palladiumkatalysator (palladi-umacetaat/tri-ortho-tolylfosfine met formule Pd(OAc)2/P(o-T0U3) in een niet-polair oplosmiddel (b.v. tolueen, ben-25 zeen, hexaan). Bij voorkeur wordt de reactie uitgevoerd bij een temperatuur omvat tussen 80°C en 110°C gedurende 6 tot 16 uur.

Het arylhalogenide met formule (10) kan worden verkregen door verestering van het overeenkomstige zuur met 30 formule (11):

HaK

X>Y”

O

35 Ï028087 13 waarbij Hal is zoals eerder gedefinieerd, volgens elke de vakman algemeen bekende werkwijze om een ester uit een zuur te bereiden, zonder de rest van het molecuul te modificeren.

5 In een typerende procedure wordt het zuur met formule (11) in reactie gebracht met een alcoholisch oplosmiddel met formule RaOH, waarbij Ra is zoals eerder gedefinieerd, in aanwezigheid van een zuur zoals waterstofchloride bij een temperatuur tussen 10°C en 40°C (kamertemperatuur) ge- 10 durende 8 tot 16 uur.

Het zuur met formule (11) is een commercieel product. Het amine met formule (5), waarbij Ri = R2 = alkyl, kan worden bereid volgens het volgende schema: 15 Schema 1 μυύ\. a _- T ji j—(CH2)n^OH R1 R2 20 ° (13) (12) ff -- Λ II -h(CH2)n^0Ra R' R2 (5) 25 waarbij R1, R2 en Ra zijn zoals eerder gedefinieerd.

In een typerende werkwijze worde de ester met formule (12) in reactie gebracht met een "geactiveerde" alkyl (or-30 ganometallische alkyl zoals R2MgBr, R2MgCl of R2Li) om de overeenkomstige tertiaire alcohol met formule (13) te geven met behulp van de hierboven beschreven werkwijze.

Genoemde tertiaire alcohol met formule (13) wordt vervolgens behandeld met een alkylnitril (b.v. acetoni-35 tril, chlooracetonitril) in aanwezigheid van een zuur (b.v. zwavelzuur, azijnzuur) om een beschermd tussenpro-duct te geven dat op zijn beurt wordt gesplitst met behulp 1028087 14 van standaardmethodologie voor het afsplitsen van stikstof beschermende groep zoals die genoemd in tekstboeken. Het resulterende aminozuur wordt vervolgens veresterd met de hierin beschreven werkwijze om het amine met formule (5) 5 te geven.

Alternatief kan het amine met formule (5), waarbij R1 = R2 = Ci-C* alkyl en n = 0, worden bereid volgens het volgende schema: 10 Schema 2 o U"Br - —- (14) (15) 15 H2NV^V^i /° R1 R2 ^Ρ~ΒΓ R1 R2 1 ORa 20 (16) (5) waarbij R1, R2 en Ra zijn zoals eerder gedefinieerd.

In een typerende werkwijze wordt de ester met formule (14) in reactie gebracht met een "geactiveerde" alkyl (or-25 ganometaliische alkyl zoals R2MgBr, R2MgCl of RzLi) om de overeenkomstige tertiaire alcohol met formule (15) te geven met behulp van de hierboven beschreven werkwijze.

Genoemde tertiaire alcohol met formule (15) wordt vervolgens behandeld met een alkylnitril (b.v. acetoni-30 tril, chlooracetonitril) in aanwezigheid van een zuur (b.v. zwavelzuur, azijnzuur) om een beschermd tussenpro-duct te geven dat op zijn beurt wordt gesplitst met behulp van standaardmethodologie voor het afsplitsen van stikstof beschermende groep zoals die genoemd in tekstboeken om het 35 broomamine (16) te geven.

Het resulterende broomamine (16) wordt behandeld met een geschikte palladiumkatalysator (b.v. [1,1'-bis(di- 1028087 15 fenylfosfino)ferroceen]dichloorpalladiura(II)) onder een atmosfeer van koolmonoxide met behulp van RaOH als oplosmiddel (b.v. MeOH, EtOH) bij verhoogde temperatuur (100°C) en druk (100 psi) om de ester met formule (5) te geven.

5 Het keton met formule (0) waarbij n = 2 kan worden bereid door reductie van een alkeen met formule (17): 10 π π -l—^ A <17>

In een typerende procedure wordt een oplossing van 15 het olefine met formule (17) in een geschikt oplosmiddel (b.v. methanol, ethanol, ethylacetaat) behandeld met een palladiumkatalysator (b.v. 10 % palladium op kool) en geroerd onder een atmosfeer van waterstof, eventueel bij verhoogde druk (b.v. 60 psi), bij een temperatuur tussen ! 20 kamertemperatuur en 60°C gedurende 8-24 uur. i

Het alkeen met formule (17) kan worden bereid met behulp van een palladium gemedieerde koppeling van een geactiveerd olefine met een arylhalogenide met formule (18): 25 ï || —Ï-Hal (18) O 1 2 3 4 5 6 1028087

In een typerende procedure wordt het arylhalogenide 2 (18) gekoppeld met een vinylester (b.v. methylacrylaat) in 3 aanwezigheid van een geschikte palladiumkatalysator (b.v.

4 tetrakis(trifenylfosfine)palladium(O) met formule 5

Pd(PPh3)4, palladiumacetaat/tri-ortho-tolylfosfine met for- 6 mule Pd (OAc) 2/P (o-tol) 3 of (difenylfosfino) ferrocenyl-palladiumchloride met formule dppfPdCl2) in een geschikt oplosmiddel (b.v. acetonitril, N,N-dimethylformamide, to- 16 lueen), eventueel in aanwezigheid van een base zoals triethylamine bij een temperatuur tussen 40°C en 110°C gedurende 8 tot 24 uur.

Het keton met formule (18) is een commercieel pro- 5 duet.

Het amine met formule (5) waarbij R1 en R2 beide H zijn, kan worden bereid volgens het volgende schema:

Schema 3 10

H0V^r^i X ΗΟν^>Λΐ X

O 0Ra , l^<CH2)„ ORa 15 (19) (20) ~ ORa 20 waarbij R1, R2 en Ra zijn zoals eerder gedefinieerd.

In een typerende procedure wordt het zuur met formule 25 (19) bij voorkeur gereduceerd tot de overeenkomstige alco hol (20) in aanwezigheid van de ester. Dit kan worden uitgevoerd door vorming van het acylimidazool of gemengd an-hydride en daarop volgende reductie met natriumboorhydri.de of een ander geschikt reductiemiddel.

30 Genoemde primaire alcohol met formule (20) wordt ver volgens omgezet in een vertrekkende groep zoals mesylaat, tosylaat, bromide of jodide en vervangen door geschikt amine nucleofiel. Het voorkeursnucleofiel is azide-ion dat vervolgens kan worden gereduceerd tot het primaire amine 35 via hydrogenering of trifenylfosfine. Alternatieve nucleo-fielen zouden ammoniak of alkylaminen zoals benzylamine of 1028087 17 allylamine en daarop volgende afsplitsing van de alkyl-groep om het amine te leveren kunnen inhouden.

In een typerende procedure kunnen de verbindingen met formule (I) waarbij R1 en R2 beide methyl zijn en η 1 is, 5 worden bereid door het laten reageren van een verbinding met formule (21) „ x' NHS02Me (21) waarbij X Η, K, Na, Li en potentieel een organische amine 15 base of ander metaalzout is, met een geschikt amine met formule NHR8-Q2-A (3) , R3 R\ / R8 1 R4 (CH2)P-H^R5 Ö<XjCr5 HN-^y \0- . i R6 (3’)f of R6 (3”) 25 in aanwezigheid van een conventioneel koppelingsmiddel zoals 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydro-chloride of dicyclohexylcarbodiimide in een geschikt oplosmiddel zoals pyridine, dimethylformamide en dimethyla-ceetamide eventueel in aanwezigheid van een organische ba-30 se (zoals Hunig's base) en een toevoegmiddel (zoals 1-hydroxybenzotriazool) om een verbinding met formule (1) te verkrijgen: 35 1028087 18

OH

ï Η jlj <’· 5 HO ^ |j nhso2ch3 0 10 waarbij R1 en R2 methyl zijn en η 1 is.

Genoemde verbinding met formule (21) kan worden verkregen door hydrogeneren van een verbinding met formule (22) 15 Γη NHS02Me (22) 20 waarbij X H, Na, Li of K en mogelijk een organisch amine of andere metaalzouten is, in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals methanol, IPA, THF en water en in 25 aanwezigheid van een geschikte katalysator zoals palladi-umhydroxide op kool of palladium op kool.

Genoemde verbinding met formule (22) kan worden verkregen door een verbinding met formule (23)

OH

30 I H

ppoV ^ NHS02Me (23) 35 1028087 19 te laten reageren met M-OH waarbij M wordt gekozen uit Na, K of Li, eventueel in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals propionitril, tetrahydrofuran of dioxaan, bij voorkeur propionitril.

5 Genoemde verbinding met formule (23) kan worden ver kregen door een verbinding met formule (24)

OTBDMS

io ς/''V'

Q~° NHS02Me ^24) I

15 te ontschermen, met behulp van een ontschermingsmiddel zoals tetrabutylammoniumfluoride, HF of triethylaminetrihy-drofluoride in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals propionitril.

Genoemde verbinding met formule (24) kan worden ver-20 kregen door een verbinding met formule

HiNV/V;Vvv'0_Cl"C4alkyl h3c ch3 l^J || 25

te laten reageren met een verbinding met formule 30 OTBDMS

γύ^βγ hn^ch, 35 O *ö 1028087 20 in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals propio-nitril, THF, tolueen, ethylacetaat, acetonitril, propioni-tril, dioxaan, DMF, DMSO, en eventueel in aanwezigheid van een base zoals natriumwaterstofcarbonaat, kaliumwaterstof-5 carbonaat, Hunig's base of triethylamine, bij een temperatuur tussen 50°C en 150°C gedurende 12 tot 36 uur.

Voor sommige van de stappen van de hierboven beschreven werkwijze van bereiding van de verbindingen met formule (1) kan het noodzakelijk zijn om potentieel reactieve 10 functies die men niet wenst om te laten reageren te beschermen, en om genoemde beschermende groepen daarop volgend af te splitsen. In een dergelijk geval kan elke verenigbare beschermende rest worden toegepast. In het bijzonder kunnen werkwijzen van bescherming en ontscherming zo-15 als die beschreven door T.W. GREENE (Protective Groups in Organic Synthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981) of door P.J. Kocienski (Protecting groups, Georg Thieme Verlag, 1994), worden toegepast.

Alle bovenstaande reacties en de bereidingen van 20 nieuwe uitgangsmaterialen toegepast bij de voorgaande werkwijzen zijn conventioneel en geschikte reagentia en reactieomstandigheden voor de uitvoering of bereiding ervan alsmede procedures voor het isoleren van de gewenste producten zullen de vakman algemeen bekend zijn onder ver-25 wijzing naar literatuurprecedenten en de voorbeelden en bereidingen hiervoor.

Ook kunnen de verbindingen met formule (1) alsmede tussenproduct voor de bereiding daarvan worden gezuiverd volgens diverse algemeen bekende werkwijzen, zoals bij-30 voorbeeld kristallisatie of chromatografie.

Bij voorkeur is Q2 -CH2-, -(CH2)2~, -(CH2)3“/ -(C(CH3)2)-/ -(CH2)4- of -(CH(CH2OH) )-.

Bij voorkeur is Q1 35 1028087 21 R3 R4 5 Μ N-/ XR6 , waarbij één van R3, R4, R5 en Rö OH is en de andere H zijn.

10 Bij voorkeur is Q1 R3 *_N_orbc 15 « R6 , waarbij één van R3, R4, R5, en Rg 20 OH is en de andere H zijn.

Bij voorkeur is Q1 een groep *-NR8-Q2-A, waarbij R8 H, CH3 of CH2CH3 is, Q2 een C1-C4 alkyleen is en A naftyl gesubstitueerd door één hydroxy is.

Bij voorkeur is Q1 een groep *-NR8-Q2-A, waarbij R8 H, 25 CH3 of ΟΗ2ΟΗ3 is, Q2 een C1-C4 alkyleen is en A een groep R3 R4 R7 R6 is, waarbij één van R3, R4, R5, R6 en R7 OH is en de andere 35 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H, C1-C4 alkyl, OR9, SR9, halogeen, CF3, OCF3, S02NR9R10, 1028087 22 CONR9R10, NR9R10, NHCOR10, met dien verstande dat ten minste twee van R3 tot R7 gelijk zijn aan H; waarbij R9 en R10 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H of Ci~C4 alkyl.

5 Met meer voorkeur is Q1 een groep *-NH-Q2-A, waarbij Q2 een -CH2-, -(CH2)2~^ (CH2)4-, -CH2-C (CH3) 2)-, bij voorkeur -CH2-, is, en A een groep R3 R4 i-Q-»· / ''R8 15 is, waarbij één van R3, R4, R5, R6 en R7 OH is en de andere hetzelfde of verschillend zijn en wordén gekozen uit H, OH, CH3, OCH2-CH3, SCH3, halogeen, CF3, OCF3, met dien verstande dat ten minste 2 van R3 tot R7 gelijk zijn aan H.

20 Bij voorkeur is Q1 een groep *-NR8-Q2-A, waarbij R8 H, CH3 of CH2CH3 is, Q2 een Ci-C4 alkyleen is en A een groep R3 R4 j-H-»· r* 30 is, waarbij één van R3, R4, R5, R6 en R7 fenyl gesubstitueerd door OH is en de andere H zijn.

In de bovenstaande groepen van verbindingen hebben de volgende substituenten bijzondere voorkeur: R1 is H of Ci-C4 alkyl en R2 is Ci~C4 alkyl. Met meer voor-35 keur is R1 H of CH3 en is R2 CH3.

n = 0 of 1. Met meer voorkeur is η 1.

R1 is H en R2 is CH3 en n is 1.

1028087 23 R1 is CH3, R2 is CH3 en n is 1.

Bijzondere voorkeur hebben de verbindingen met de formule (1) zoals beschreven.in de Voorbeeldensectie hierna, d.w. z . : 5 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-(4-hydroxy-3-methoxybehzyl)aceetamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-10 ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(4-Chloor-2-hydroxybenzyl)-2-< 3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(4-Hydroxy-3,5-dimethylbenzyl)-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-15 2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]- 2-methylpropyl)fenyl)aceetamide; 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyl]ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[(2-hydroxy-1-naftyl)methyl]aceetamide; 20 2-(3—{2 —(((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)-N-[(6-hydroxy-2-naftyl)methyl]aceetamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3-(2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-25 ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)aceetamide; N-[(3'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide ; 2-(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-30 amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)-2-methylpropyl]aceetamide; N-(3,5-Dichloor-2-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 35 2-(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)-N-[(6-hydroxy-l-naftyl)methyl]-N-mèthylaceetamide; 1028087 24 N-[(2'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2-{3-[2-(6-hydroxy-3,4-5 dihydroisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxoethyl]fenyl}-l,1-di-methylethyl)amino]ethyl)fenyl)methaansulfonamide; 2-{3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[4-(4-hydroxyfenyl)butyl]aceetamide; 10 2—(3—(2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]aceetamide; N-(2-Chloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-15 methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(3,5-Dichloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(2,3-Dichloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3—(2—[((2R)-2-hydroxy-20 2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]- 2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)-N-[(4-hydroxy-l-naftyl)methyl]-aceetamide; 25 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[3-hydroxy-5-(trifluormethyl)benzyl]aceetamide; N-(2-Chloor-4-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-30 ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)aceetamide; N-(2-Chloor-4^hydroxybenzyl)-2-(3-(2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)-N-methylaceetamide; N-(3-Fluor-5-hydroxybenzyl)-2-(3-(2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-35 hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-methylaceetamide; 1028087 25 N-[(2'-Hydroxybifenyl-2-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-[(3'-Hydroxybifenyl-2-yl)methyl]—2 —(3—{2—[((2R)-2-5 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(4-Hydroxy-2,6-dimethylbenzyl)-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 10 N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2-{3-(2-(7-hydroxy-3,4-dihydroxyisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxoethyl]fenyl}-l,1-dimethylethyl)amino]ethyl}fenyl)methaansulfonamide; N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2-{3-[2-(5-hydroxy-3,4-dihydroxyisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxoethyl]fenyl}-l,1-15 dimethylethyl)amino]ethyl}fenyl)methaansulfonamide; 2— (3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[(IR)-2-hydroxy-l-fenylethyl]aceetamide; 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-20 amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[(IS)-2-hydroxy-l-fenylethyl]aceetamide; N-[(3'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 25 N-[(2'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-[(4’-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-3-{2-[((2R)-2-hydroxy- 2- {4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-30 2-methylpropyl}benzamide; 3- (2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}-N-[2-(4-hydroxy-fenyl)-2-methylpropyl]benzamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-3-{2-[((2R)-2-hydroxy-35 2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]- 2-methylpropyl}benzamide; 1028087 26 N-[2-(4-Hydroxy-2,5-dimethylfenyl)ethyl]-3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}benzamide; N-[2-(4-Hydroxy-2,3-dimethylfenyl)ethyl]-3-{2-[((2R)-2-5 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}benzamide; en 3—{2 —[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}-N-[2-(4-hydroxy- 3-methylfenyl)ethyl]benzamide.

10 Volgens één aspect van,de onderhavige uitvinding heb ben de verbindingen met formule (1) waarbij de {CH2) n~ C(=0)01 groep in de meta-positie is in het algemeen de voorkeur.

Farmaceutisch aanvaardbare zouten van de verbindingen 15 met formule (1) omvatten de zuuradditie- en basezouten daarvan.

Geschikte zuuradditiezouten worden gevormd uit zuren die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de acetaat-, asparagaat-, benzoaat-, besylaat-, bicarbonaat/ 20 carbonaat-, bisulfaat/sulfaat-, boraat-, camsylaat-, ci-traat-, edisylaat-, esylaat-, formiaat-, fumaraat^, glu-ceptaat-, gluconaat-, glucuronaat-, hexafluorfosfaat-, hi-benzaat-, hydrochloride/chloride-, hydrobromide/bromide-, hydrojodide/jodide-, isethionaat-, lactaat-, malaat-, ma-25 leaat-, malonaat-, mesylaat-, methylsulfaat-, naftylaat-, 2-napsylaat-, nicotinaat-, nitraat-, orotaat-, oxalaat-, palmitaat-, pamoaat-, fosfaat/waterstoffosfaat/diwater-stoffosfaat-, saccharaat-, stearaat-, succinaat-, tar-traat-, tosylaat- en trifluoracetaat- en xinafoaatzouten.

30 Geschikte basezouten worden gevormd uit basen die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de aluminium-, arginine-, benzathine-, calcium-, choline-, diethylamine-, diolamine-, glycine-, lysine-, magnesium-, meglumine-, olamine-, kalium-, natrium-, tromethamine- en 35 zinkzouten. Halfzouten van zuren en basen kunnen ook worden gevormd, bijvoorbeeld, hemisulfaat- en hemicalciumzou-ten.

1028087 27

Voor een overzicht over geschikte zouten, zie "Hand-book of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and

Use" door Stahl en Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Duitsland, 2002).

5 Farmaceutisch aanvaardbare zouten van verbindingen met formule (1) kunnen worden bereid met behulp van één of meer van drie werkwijzen: (i) door de verbinding met formule (1) te laten reageren met het gewenste zuur of de gewenste base; 10 (ii) door het verwijderen van een zuur- of base-labiele beschermende groep uit een geschikte voorloper van de verbinding met formule (1) of door ringopenen van een geschikte cyclische voorloper, bijvoorbeeld een lacton of lactam, met behulp van het gewenste zuur 15 of de gewenste base; of (iii) door het omzetten van één zout van de verbinding met formule (1) in een ander door reactie met een geschikt zuur of een geschikte base of met behulp van een geschikte ionenwisselaarkolom.

20 Alle drie de reactie worden in het algemeen uitge voerd in oplossing. Het resulterende zout kan uitprecipiteren en worden ópgevangen door filtratie of kan worden gewonnen door verdamping van het oplosmiddel. De mate van ionisatie in het resulterende zout kan variëren van volle-25 dig geïoniseerd tot vrijwel niet geïoniseerd.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen voorkomen in zowel ongesolvateerde als gesolvateerde vormen. De term "solvaat" wordt hierin gebruikt om een moleculair complex te beschrijven, omvattende de verbinding volgens 30 de uitvinding en een stoïchiometrische hoeveelheid van één of meer farmaceutisch aanvaardbare oplosmiddelmoleculen, bijvoorbeeld, ethanol De term "hydraat" wordt toegepast als genoemd oplosmiddel water is.

Omvat binnen de omvang van de uitvinding zijn com-35 plexen zoals clathraten, geneesmiddel-gastheerinsluitings-complexen waarin, in tegenstelling tot de hiervoor genoemde solvaten, het geneesmiddel en de gastheer aanwezig zijn 1028087 28 in stoïchiometrische of niet-stoïchiometrische hoeveelheden. Ook omvat zijn complexen van het geneesmiddel die twee of meer organische en/of anorganische bestanddelen bevatten welke in stoïchiometrische of niet-stoïchio-5 metrische hoeveelheden kunnen zijn. De resulterende complexen kunnen geïoniseerd, gedeeltelijk geïoniseerd of niet geïoniseerd zijn. Voor een overzicht van dergelijke complexen, zier J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 door Hale-blian (augustus 1975) .

10 Hierna omvatten alle verwijzingen naar verbindingen met formule (1) verwijzingen naar zouten, solvaten en complexen daarvan en naar solvaten en complexen van zouten daarvan.

De verbindingen volgens de uitvinding omvatten ver-15 bindingen met formule (1) zoals hiervoor gedefinieerd, waaronder alle polymorfen en kristalvormen daarvan, pro-drugs en isomeren daarvan (waaronder optische, geometrische en tautomere isomeren) zoals hierna gedefinieerd en isotoop-gelabelde verbindingen met formule (1).

20 Zoals aangegeven, zijn zogenaamde "pro-drugs" van de verbindingen met formule (1) ook binnen de omvang van de uitvinding. Derhalve kunnen bepaalde derivaten van verbindingen met formule (1) welke weinig of geen farmacologische activiteit zelf hebben> indien toegediend in of op 25 het lichaam, worden omgezet in verbindingen met formule (1) met de gewenste activiteit, bijvoorbeeld door hydroly-tische splitsing. Dergelijke derivaten worden aangeduid als "pro-drugs". Verdere informatie over de toepassingen van prodrugs kan worden gevonden in "Pro-drugs as Novel 30 Delivery Systems, band 14, ACS Symposium Series (T. Hi-guchi en W. Stella) en "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (red. E.B. Roche, American Pharmaceutical Association).

Prodrugs volgens de uitvinding kunnen bijvoorbeeld 35 worden geproduceerd door het vervangen van geschikte functionaliteiten aanwezig in de verbindingen met formule (1) met bepaalde delen de vakman bekend als "pro-delen" zoals 1028087 29 bijvoorbeeld beschreven in "Design of Prodrugs" door H. Bundgaard (Elsevier, 1985) .

Sommige voorbeelden van prodrugs volgens de uitvinding omvatten: 5 (i) waar de verbinding met formule (1) een carbonzuur- functionaliteit (-COOH) bevat, een ester daarvan, bijvoorbeeld een verbinding waarbij de waterstof van de carbonzuurfunctionaliteit van de verbinding met formule (1) wordt vervangen door (Ci-Cg) alkyl; 10 (ii) waar de verbinding met formule (1) een alcoholfunc- tionaliteit (-OH) bevat, een ether daarvan, bijvoorbeeld een verbinding waarbij de waterstof van de al-coholfunctionaliteit van de verbinding met formule (1) is vervangen door (Ci-Cg) alkanoyloxymethyl; en 15 (iii) waar de verbinding met formule (1) een primaire of secundaire aminofunctionaliteit bevat (-NH2 of -NHR waarbij R * H), een amide daarvan, bijvoorbeeld een verbinding waarbij, zoals het geval kan zijn, één of beide waterstoffen van de aminofunctionaliteit van 20 de verbinding met formule (1) is/zijn vervangen door (C1-C10) alkanoyl.

Verdere voorbeelden van vervangingsgroepen volgens de voorgaande voorbeelden en voorbeelden van andere prodrug-types kunnen worden gevonden in de hiervoor genoemde refe-25 renties.

Bovendien kunnen bepaalde verbindingen met formule (1) zelf werken als prodrugs van andere verbindingen met formule (1).

Ook omvat binnen de omvang van de uitvinding zijn me-30 tabolieten van verbindingen met formule (1), dat wil zeggen, verbindingen in vivo gevormd na toediening van het geneesmiddel. Sommige voorbeelden van metabolieten volgens de uitvinding omvatten (i) waar de verbinding met formule (1) een methylgroep 35 bevat, een hydroxymethylderivaat daarvan (-CH3 -» -CH2OH): 1028087 30 (ii) waar de verbinding met formule (1) een alkoxygroep bevat, een hydroxyderivaat daarvan (-0R -» -OH); (iii) Waar de verbinding met formule (1) een tertiair ami-nogroep bevat, een secundair aminoderivaat daarvan 5 {-NR^2 -» -NHR1 of -NHR2); (iv) waar de verbinding met formule (1) een secundaire aminogroep bevat, een primair derivaat daarvan (-NHR1 -NH2); (v) waar de verbinding met formule (1) een fenyldeel be- 10 vat, een fenolderivaat daarvan (-Ph -»· -PhOH); en (vi) waar de verbinding met formule (1) een amidegroep bevat, een carbonzuurderivaat daarvan (-CONH2 -> C0-OH) .

Verbindingen met formule (1) die één of meer asymme-15 trische koolstofatomen bevatten kunnen voorkomen als twee of meer stereoisomeren. Waar een verbinding met formule (1) een alkenyl- of alkenyleengroep bevat, zijn geometrische cis/trans (of Z/E) isomeren mogelijk. Waar structurele isomeren onderling omzetbaar zijn via een lage energie-20 barrière, kan tautomere isomerie ("tautomerie") voorkomen. Dit kan de vorm aannemen van protontautomerie bij verbindingen met formule (1) die bijvoorbeeld een imino-, keto-of oximgroep bevatten, of zogenaamde valentietautomerie bij verbindingen die een aromatisch deel bevatten. Er 25 volgt uit dat een enkelvoudige verbinding meer dan één type isomerie kan vertonen.

Omvat binnen de omvang van de onderhavige uitvinding zijn alle stereoisomeren, geometrische isomeren en tautomere vormen van de verbindingen met formule (1), waaronder 30 verbindingen die meer dan één type isomerie vertonen, en mengsels van één of meer daarvan. Ook omvat zijn zuuraddi-tie- of basezouten waarbij het tegenion optisch actief is, bijvoorbeeld d-lactaat of 1-lysine, of racemisch, bijvoorbeeld, dl-tartraat of dl-arginine.

35 Cis/trans-isomeren kunnen worden gescheiden met be hulp van de vakman algemeen gekende conventionele technie- ! 1028087 31 ken, bijvoorbeeld chromatografie en fractionele kristallisatie .

Conventionele technieken voor de bereiding/isolatie van afzonderlijke enantiomeren omvatten chirale synthese 5 uit een geschikte optisch zuivere voorloper of resolutie van het racemaat (of het racemaat van een zout of derivaat) met behulp van, bijvoorbeeld, chirale hoge druk vloeistofchromatografie (HPLC).

Alternatief kan het racemaat (of een racemische voor-10 loper) in reactie worden gebracht met een geschikte optisch actieve verbinding, bijvoorbeeld een alcohol, of, in het geval waar de verbinding met formule (1) een zuur of basisch deel bevat, een zuur of base zoals wijnsteenzuur of 1-fenylethylamine. Het resulterende diastereomere meng-15 sel kan worden gescheiden door chromatografie en/of fractionele kristallisatie en één of beide van de diaste-reoisomeren omgezet in het overeenkomstige zuivere enanti-omeer (de overeenkomstige zuivere enantiomeren) met behulp van de vakman algemeen bekende middelen.

20 Chirale verbindingen volgens de uitvinding (en chira le voorlopers daarvan) kunnen worden verkregen in enantio-meer-verrijkte vorm met behulp van chromatografie, in het bijzonder HPLC, op een asymmetrische hars met een mobiele fase die bestaat uit een koolwaterstof, in het algemeen 25 heptaan of hexaan, die 0 tot 50 vol.% isopropanol, in het algemeen 2 % tot 20 %, en 0 tot 5 vol.% van een alkylami-ne, in het algemeen 0,1 % diethylamine bevat. Concentratie van het eluaat levert het verrijkte mengsel.

Stereoisomere conglomeraten kunnen worden gescheiden 30 met behulp van de vakman algemeen bekende conventionele technieken - zie, bijvoorbeeld, "Stëreochemistry of Orga-nic Compounds door E.L. Eliel (Wiley, New York, 1994).

Vólgens één aspect van de onderhavige uitvinding heeft het (R,R)-stereoisomeer met de onderstaande formule, 35 waarbij R1 waterstof is en R2 C1-C4 alkyl, bij voorkeur methyl is, en n en Q1 zijn zoals hierboven gedefinieerd, in het algemeen de voorkeur: i 1 02 8087 32

OH

Y Η

il ] X |Γ (CHJ0v Q1 5 ηοΎ r1 R2 ^ T

nhso2ch3 ° 10 De onderhavige uitvinding omvat alle farmaceutisch aanvaardbare isotoop-gelabelde verbindingen met formule (1) waarbij één of meer atomen zijn vervangen door atomen met hetzelfde atoomnummer, maar een atoommassa of massage-tal verschillen van de atoommassa of het massagetal dat in 15 de natuur overweegt.

Voorbeelden van isotopen geschikt voor opname in de verbindingen volgens de uitvinding omvatten isotopen van waterstof, zoals 2H en 3H, koolstof, zoals nC, 13C en 14C, chloor, zoals 36C1, fluor, zoals 18F, jodium, zoals 123I en 20 125I, stikstof, zoals 13N en 15N, zuurstof, zoals 150, 170 en 180, fosfor, zoals 32P, en zwavel, zoals 35S.

Bepaalde isotoop-gelabelde verbindingen met formule (1) , bijvoorbeeld die welke een radioactief isotoop opnemen, zijn nuttig bij geneesmiddel- en/of substraatweefsel-25 verdelingsonderzoeken. De radioactieve isotopen tritium, d.w.z. 3H, en koolstof-14, d.w.z. 14C, zijn bijzonder nuttig voor dit doel met het oog op hun gemak van opname en gemakkelijke middelen van detectie.

Substitutie met zwaardere isotopen zoals deuterium, 30 d.w.z. 2H, kunnen bepaalde therapeutische voordelen leveren resulterend uit grotere metabole stabiliteit, bijvoorbeeld verhoogde in vivo halfwaardetijd of verminderde do-seringsvereisten, én kunnen derhalve de voorkeur hebben onder sommige omstandigheden.

35 Substitutie met positron emitterende isotopen, zoals nC, 18F, 150 en 13N, kunnen nuttig zijn bij Positron Emissie j i 1028087 33

Topografie (PET) onderzoeken voor het onderzoeken van sub-straatreceptorbezettingsgraad.

Isotoop-gelabelde verbindingen met formule (1) kunnen in het algemeen worden bereid met behulp van de vakman be-5 kende conventionele technieken of met behulp van werkwijzen analoog aan die beschreven in de bij gevoegde Voorbeelden en Bereidingen met behulp van een geschikt isotoop-gelabeld reagens in plaats van het eerder toegepaste niet-gelabelde reagens.

10 Farmaceutisch aanvaardbare solvaten volgens de uit vinding omvatten die, waarbij het oplosmiddel van kristallisatie isotoop gesubstitueerd kan zijn, b.v. D20, d6- aceton, d6-DMSO.

De verbindingen met formule (1), farmaceutisch aan-15 vaardbare zoute en/of afgeleide vormen ervan, zijn waarde-volle farmaceutisch actieve verbindingen, welke geschikt zijn voor de therapie en profylaxe van talrijke aandoeningen waarbij de P2-receptor is betrokken of waarbij agonis-me van deze receptor voordeel kan induceren, in het bij-20 zonder de allergische en niet-allergische luchtwegziekten maar ook bij de behandeling van andere ziekten zoals, maar niet beperkt tot die van het centrale zenuwstelsel, premature weeën, congestief hartfalen, depressie, ontstekings-en allergische huidziekten, psoriasis, proliferatieve 25 huidziekten, glaucoom en bij aandoeningen waar er een voordeel is in het verlagen van maagzuurgraad, in het bijzonder bij maag- en peptische verzwering.

Verbindingen volgens de uitvinding bedoeld voor farmaceutische toepassing kunnen worden toegediend als kris-30 tallijne of amorfe producten. Deze kunnen bijvoorbeeld worden verkregen als vaste proppen, poeders of films met behulp van werkwijzen zoals precipitatie, kristallisatie, vriesdrogen, sproeidrogen of verdampend drogen. Microgolf-of radiofrequentiedrogen kunnen voor dit doel worden toe-35 gepast.

Deze kunnen alleen wórden toegediend of in combinatie met één of meer andere verbindingen volgens de uitvinding 1028087 34 of in combinatie met één of meer andere geneesmiddelen (of als elke combinatie daarvan). In het algemeen zullen deze worden toegediend als een formulering in verbinding met één of meer farmaceutisch aanvaardbare excipiënten. De 5 term "excipiënt" wordt hierin gebruikt om elk ingrediënt anders dan de verbinding(en) volgens de uitvinding te beschrijven. De keuze van excipiënt zal in grote mate afhangen van factoren zoals de bepaalde wijze van toediening, het effect van de excipiënt of oplosbaarheid en stabili-10 teit, en de aard van de doseringsvorm.

Farmaceutische preparaten geschikt voor aflevering van verbindingen volgens de onderhavige uitvinding en werkwijzen voor de bereiding ervan zullen de vakman gemakkelijk duidelijk zijn. Dergelijke preparaten en werkwijzen 15 voor de bereiding ervan kunnen bijvoorbeeld worden gevonden in "Remington's Pharmaceutical Sciences”, 19e uitgave (Mack Publishing Company, 1995).

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook direct in de bloedstroom, in spier of in een inwendig orgaan 20 worden toegediend. Geschikte middelen voor parenterale toediening omvatten intraveneus, intra-arteriaal, intrape-ritoneaal, intrathecaal, intraventriculair, intra-urethraal, intrasternaal, intracraniaal, intramusculair en subcutaan. Geschikte inrichtingen voor parenterale toedie-25 ning omvatten naald (waaronder micronaald) injectoren, naaldvrije injectoren én infusietechnieken.

Parenterale formuleringen zijn in het algemeen waterige oplossingen die excipiënten kunnen bevatten zoals zouten, koolhydraten en buffermiddelen (bij voorkeur tot 30 een pH van 3 tot 9), maar voor sommige toepassingen kunnen deze meer geschikt worden geformuleerd als een steriele niet-waterige oplossing of als een gedroogde vorm om te worden toegepast samen met een geschikt vehikel zoals steriel, pyrogeenvrij water.

35 De bereiding van parenterale formuleringen onder ste riele omstandigheden, bijvoorbeeld door lyofilisatie, kan 1028087 35 gemakkelijk worden bewerkstelligd met behulp van de vakman algemeen bekende standaard farmaceutische technieken.

De oplosbaarheid van verbindingen met formule (1) toegepast bij de bereiding van parenterale oplossingen kan 5 worden verhoogd door de toepassing van geschikte formule-ringstechnieken, zoals de opname van oplosbaarheid-ver-sterkende middelen.

Formuleringen voor parenterale toediening kunnen worden geformuleerd onmiddellijke en/of gemodificeerde afgif-10 te te zijn. Gemodificeerde afgifteformuleringen omvatten vertraagde-, onderhouden-, gepulseerde-, geregelde^, gerichte en geprogrammeerde afgifte. Dergelijke verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden geformuleerd als een vaste stof, halfvaste stof, of thixotrope vloeistof voor 15 toediening als een geïmplanteerd depot dat gemodificeerde afgifte van de actieve verbinding verschaft. Voorbeelden van dergelijke formuleringen omvatten geneesmiddel-beklede stents en poly(dl-melk-coglycol)zuur (PGLA) mircobolle-t jes.

20 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook to- pisch worden toegediend aan de huid of slijmvlies, dat wil zeggen, dermaal of transdermaal. In het algemeen omvatten formuleringen voor dit doel gels, hydrogels, lotions, oplossingen, crèmes, zalven, stofpoeders, verbanden, schui-25 men, films, huidpleisters, wafels, implantaten, sponsen, vezels, bandages en micro-emulsies. Liposomen kunnen ook worden toegepast. In het algemeen omvatten dragers alcohol, water, minerale olie, vloeibare paraffine, witte paraffine, glycerine, polyethyleenglycol en propyleenglycol. 30 Penetratieversterkers kunnen worden opgenomen - zie bijvoorbeeld J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 door Finnin en

Morgan (oktober 1999) .

Andérè middelen van topische toediening omvatten aflevering door elektroporatie, iontoforese, fonoforese, so-35 noforese en micronaald- of naaldvrije (b.v. Powderject™, Bioject™, enz.) injectie.

1Ó28087 •36

Formuleringen voor topische toediening kunnen worden geformuleerd onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte te zijn. Gemodificeerde afgifteformuleringen omvatten vertraagde-, onderhouden-, gepulseerde-, geregeld-, gerichte 5 en geprogrammeerde afgifte.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook in-tranasaal of door inhalatie worden toegediend, in het algemeen in de vorm van een droog poeder (hetzij alleen, als een mengsel, bijvoorbeeld in een droog mengsel met lacto-10 se, of als een gemengd bestanddeeldeeltje, bijvoorbeeld, gemengd met fosfolipiden, zoals fosfatidylcholine) uit een droog poeder inhaler of als een aërosolspray voor een op druk gebrachte houder, pomp, spray, atomiseerapparaat (bij voorkeur een atomiseerapparaat dat elektrohydrodynamica 15 toepast om een fijne mist te produceren), of vernevelaar, met of zonder de toepassing van een geschikt drijfmiddel, zoals 1,1,1,2-tetrafluorethaan of 1,1,1,2,3,3,3-hepta-fluorpropaan. Voor intranasaal gebruik kan het poeder een biohechtend middel omvatten, bijvoorbeeld chitosan of cy-20 clodextrine.

De op druk gebrachte houder, pomp, spray, atomiseerapparaat of vernevelaar bevat een oplossing of suspensie van de verbinding(en) volgens de uitvinding omvattende bijvoorbeeld ethanol, waterige ethanol of een geschikt al-25 ternatief middel voor dispergeren, oplosbaar maken of uitbreiden van afgifte van het actieve middel, een drijfmiddel (drijfmiddelen) als oplosmiddel en een eventuele op-pervlakteactieve stof, zoals sorbitantrioleaat, oliezuur, of een oligomelkzuur.

30 Voorafgaande aan toepassing in een droog poeder of suspensieformulering, wordt het geneesmiddelproduct gemi-croniseerd tot een grootte geschikt voor aflevering door inhalatie (in het algemeen kleiner dan 5 micron). Dit kan worden bereid met behulp van elke geschikte verkleinings-35 werkwijze, zoals spiraalstraalmalen, fluïde bed straalma-len, superkritisch fluïdum verwerken om nanodeeltjes te vormen, hoge druk homogenisatie, of sproeidrogen.

1028087 37

Capsules (bijvoorbeeld gemaakt van gelatine of hy-droxypropylmethylcellulose), doordrukverpakkingen en patronen voor toepassing in een inhaler of insufflator kunnen worden geformuleerd om een poedermengsel van de ver-5 binding volgens de uitvinding, een geschikte poederbasis zoals lactose of zetmeel en een prestatiemodificator zoals 1-leucine, mannitol of magnesiumstearaat te bevatten. De lactose kan watervrij zijn of in de vorm van het monohy-draat, bij voorkeur de laatste. Andere geschikte excipiën-10 ten omvatten dextran, glucose, maltose, sorbitol, xylitol, fructose, sucrose en trehalose.

Een geschikte oplossingsformulering voor toepassing in een atomiseerapparaat met behulp van elektrohydrodyna-mica om een fijne mist te produceren kan 1 μg tot 20 mg 15 van de verbinding volgens de uitvinding per werking bevatten en het werkingsvolume kan variëren van 1 μΐ tot 100 μΐ. Een typerende formulering kan een verbinding met formule (1) , propyleenglycol, steriel water, ethanol en na-triumchloride omvatten. Alternatieve oplosmiddelen die 20 kunnen worden toegepast in plaatë van propyleenglycol omvatten glycerol en polyethyleenglycol.

Geschikte smaakstoffen, zoals menthol en levomenthol, of zoetstoffen zoals sacharine of sacharinenatrium, worden toegediend aan die formuleringen volgens de uitvinding be-25 doeld voor geïnhaleerde/intranasale toediening.

Formuleringen voor geïnhaleerde/intranasale toediening kunnen worden geformuleerd om onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte te zijn met behulp van, bijvoorbeeld, PGLA. Gemodificeerde afgifteformuleringen omvatten ver-30 traagde-, onderhouden-, gepulseerde-, geregelde-, gerichte en geprogrammeerde afgifte.

In het geval van droog poeder inhalers en aërosols wordt de doseringseenheid bepaald met behulp van een afsluiter die een afgemeten hoeveelheid aflevert. Eenheden 35 volgens de uitvinding worden in het algemeen gerangschikt om een afgemeten dosis of "puf" toe te dienen, die 0,001 mg tot 10 mg van de verbinding met formule (1) bevat. De 1028087 - 38 totale dagelijkse dosis zal in het algemeen in het traject zijn van 0,001 mg tot 40 mg welke kan worden toegediend in een enkelvoudige dosis of, meer gebruikelijk, als verdeelde doses door de gehele dag.

5 De verbindingen met formule (1) zijn bijzonder ge schikt voor een toediening door inhalatie.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen rectaal of vaginaal worden toegediend, bijvoorbeeld in de vorm van een zetpil, pessarium of klysma. Cacaoboter is een tradi-10 tionele zetpilbasis, maar diverse alternatieven kunnen worden toegepast zoals geschikt.

Formuleringen voor rectale/vaginale toediening kunnen worden geformuleerd óm onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte te zijn. Gemodificeerde afgifteformuleringen om-15 vatten vertraagde-, onderhouden-, gepulseerde-, geregelde- , gerichte en geprogrammeerde afgifte.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen ook direct aan het oog of oor worden toegediend, in het algemeen in de vorm van druppels van een gemicroniseerde suspensie 20 of oplossing in isotone, pH-bijgestelde, steriele zoutoplossing. Andere formuleringen geschikt voor oog- en oor-toediening omvatten zalven, bioafbreekbare (b.v. absor-beerbare gelsponsen, collageen) en niet-bioafbreekbare (b.v. silicone) implantaten, wafels, lenzen en deeltjes-25 vormige of blaasvormige systemen, zoals niosomen of lipo-somen. Een polymeer zoals verknoopt polyacrylzuur, polyvi-nylalcohol, hyaluronzuur, een celluloseachtig polymeer, bijvoorbeeld hydroxypropylmethylcellulose, hydroxyethyl-cellulose of methylcellulose, of een heteropolysacharide-30 polymeer, bijvoorbeeld gelangom, kan worden opgenomen samen met een conserveermiddel, zoals benzalkoniumchloride. Dergelijke formuleringen kunnen ook worden afgeleverd door iontoforese.

Formuleringen voor oog/oortoediening kunnen worden 35 geformuleerd onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte te zijn. Gemodificeerde afgifte formuleringen omvatten ver- 1028087 39 traagde-, onderhouden-, gepulseerde-, geregelde-, gerichte of geprogrammeerde afgifte.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden gecombineerd met oplosbare macromoleculaire eenheden, zo-5 als cyclodextrine en geschikte derivaten daarvan of poly-ethyleeriglycol-bevattende polymeren, om hun oplosbaarheid, oplossnelheid, smaakmaskering, biobeschikbaarheid en/of stabiliteit voor toepassing bij elk van de hiervoor genoemde wijzen van toediening te verbeteren.

10 Geneesmiddel-cyclodextrinecomplexen worden bijvoor beeld gevonden in het algemeen nuttig te zijn voor de meeste doseringsvormen en toedieningsroutes. Zowel inslui-tings- als niet-insluitingscomplexen kunnen worden toegepast. Als een alternatief voor directe complexering met 15 het geneesmiddel kan het cyclodextrine worden toegepast als een hulptoevoegmiddel, b.v. als een drager, verdun-ningsmiddel of oplosbaar makende stof. Zeer gebruikelijk toegepast voor doeleinden zijn alfa-, bèta- en gamma-cyclodextrinen, waarvan voorbeelden kunnen worden gevonden 20 in internationale octrooiaanvragen nrs. WO 91/11172, WO 94/02518 en WO 98/55148.

Voor zover het gewenst kan zijn om een combinatie van actieve verbindingen toe te dienen, bijvoorbeeld voor het doel van het behandelen van een bepaalde ziekte of aandoe-25 ning, is het binnen de omvang van de onderhavige uitvinding dat twee of meer farmaceutische preparaten, waarvan ten minste één een verbinding volgens de uitvinding bevat, geschikt kunnen worden gecombineerd in de vorm van een pakket geschikt voor medetoediening van de preparaten.

30 Derhalve omvat het pakket volgens de uitvinding twee of meer afzonderlijke farmaceutische preparaten, waarvan ten minste één een verbinding met formule (1) volgens de uitvinding bevat, en middelen voor het afzonderlijk behouden van genoemde preparaten, zoals een houder, verdeelde 35 fles, of verdeeld foliepakket. Een voorbeeld van een dergelijk pakket is de vertrouwde doordrukverpakking toege- i 1028087 40 past voor het verpakken van tabletten, capsules en derge-lij ke.

Het pakket volgens de uitvinding is bijzonder geschikt voor het toedienen van verschillende doseringsvor-5 men, bijvoorbeeld parenterale, voor het toedienen van de afzonderlijke preparaten op verschillende doseringstussen-pozen, of voor het titreren van de afzonderlijke preparaten tegen elkaar. Om volgzaamheid te helpen, omvat het pakket in het algemeen aanwijzingen voor toediening en kan 10 zijn voorzien van een zogenaamd geheugenhulpmiddel.

Voor toediening aan menselijke patiënten is de totale dagelijkse dosis van de verbindingen volgens de uitvinding in het algemeen in het traject van 0,001 mg tot 5000 mg, vanzelfsprekend afhankelijk van de wijze van toediening. 15 Bijvoorbeeld kan een intraveneuze dagelijkse dosis slechts 0,001 mg tot 40 mg vereisen. De totale dagelijkse dosis kan worden toegediend in enkelvoudige of verdeelde doses en kan, naar het oordeel van de arts, buiten het hierin gegeven typerende traject vallen.

20 Deze doseringen zijn gebaseerd op een gemiddelde men selijke patiënt met een gewicht van ongeveer 65 kg tot 70 kg. De arts zal gemakkelijk in staat zijn doses te bepalen voor patiënten wiens gewicht buiten dit traject valt, zoals kinderen en de ouderen. Voor het vermijden van twij-25 fels omvatten verwijzingen hierin naar "behandeling" verwijzingen naar curatieve, palliatieve en profylactische behandeling.

Volgens een andere uitvoeringsvorm van de onderhavige uitvinding kunnen de verbindingen met de formule (1), of 30 farmaceutisch aanvaardbare zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, ook worden toegepast als een combinatie met één of meer additionele therapeutische middelen om mede te worden toegediend aan een patiënt om enig bepaald gewenst therapeutisch eindresultaat te verkrijgen zoals de 35 behandeling van pathofysiologisch relevante ziekteprocessen waaronder, maar niet beperkt tot (i) luchtpijpvernau-wing, (ii) ontsteking, (iii) allergie, (iv) weefselvernie- 1 028087 - 41 tiging, (v) tekenen en symptomen zoals kortademigheid, hoesten. De tweede en meer additionele therapeutische middelen kunnen ook een verbinding met de formule (1), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, afgeleide vormen of pre-5 paraten daarvan zijn, of één of meer P2-agonisten bekend in de techniek. Meer in het algemeen zullen de tweede en meer therapeutische middelen worden gekozen uit een verschillende categorie therapeutische middelen.

Zoals hierin gebruikt* zijn de termen "medetoedie-10 ning", "mede toegediend" en "in combinatie met", verwijzende naar de verbindingen met formule (1) en één of meer andere therapeutische middelen, bedoeld te betekenen, en verwijzen naar en Omvatten de volgende: • gelijktijdige toediening van een dergelijke combinatie 15 van verbinding(en) met formule (1) en therapeutisch middel (therapeutische middelen) aan een patiënt die behandeling nodig heeft, als dergelijke bestanddelen samen in een enkele doseringsvorm worden geformuleerd welke genoemde bestanddelen op in hoofdzaak dezelfde tijd aan 20 genoemde patiënt afgeeft, • in hoofdzaak gelijktijdige toediening van een dergelijke combinatie van verbinding(en) met formule (1) en therapeutisch middel (therapeutische middelen) aan een patiënt die behandeling nodig heeft, als dergelijke bestand- 25 delen apart van elkaar in afzonderlijke doseringsvormen worden geformuleerd welke op in hoofdzaak dezelfde tijd worden genomen door genoemde patiënt, waarop genoemde bestanddelen op in hoofdzaak dezelfde tijd aan genoemde patiënt worden afgegeven, 30 · achtereenvolgende toediening van een dergelijke combina tie van verbinding(en) met formule (1) en therapeutisch middel (therapeutische middelen) aan een patiënt die behandeling nodig heeft, als dergelijke bestanddelen apart van elkaar worden geformuleerd in afzonderlijke dose-35 ringsvormen welke op achtereenvolgende tijden worden genomen door genoemde patiënt met een aanzienlijke tijd-stussenpoos tussen elke toediening, waarop genoemde be- 1028087 42 standdelen worden afgegeveri op in hoofdzaak verschillende tijden aan genoemde patiënt; en • achtereenvolgende toediening van een dergelijke combinatie van verbinding(en) met formule (1) en therapeutisch 5 middel (therapeutische middelen) aan een patiënt die behandeling nodig heeft, als dergelijke bestanddelen samen worden geformuleerd in een enkelvoudige doseringsvorm welke genoemde bestanddelen op een geregelde wijze afgeeft waarop deze gelijktijdig, achtereenvolgens en/of 10 overlappend worden toegediend op dezelfde en/of verschillende tijden door genoemde patiënt, waarbij elk deel met behulp van hetzij dezelfde hetzij een verschillende route kan worden toegediend.

Geschikte voorbeelden van andere therapeutische mid-15 delen die kunnen worden toegepast in combinatie met de verbinding(en) met formule (1), of farmaceutisch aanvaardbare zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, om vatten, maar zijn op generlei wijze beperkt tot: (a) 5-Lipoxygenase (5-LO) remmers van 5-lipoxygenase ac- 20 tiverend proteïne (FLAP) antagonisten, (b) Leukotrieenantagonisten (LTRAs) waaronder antagonisten van LTB4, LTC4, LTD4 en LTE4, (c) Histaminereceptorantagonisten waaronder Hl- en H3-antagonisten, 25 (d) αχ- en <X2-adrenoceptoragonist vaatvernauwer sympatho- mimetische middelen voor decongestieve toepassing, (e) muscarinische M3-receptorantagonisten of anticho-linergische middelen, (f) PDE-remmers, b.v. PDE3-, PDE4- en PDE5-remmers, 30 (g) Theofylline, (h) Natriumcromoglycaat, (i) COX-remmers zowel niet-selectieve als selectieve COX-1- of COX-2-remmers (NSAIDs), (j) Orale en geïnhaleerde glucocorticosteroïden, zoals 35 DAGR (gedissocieerde agonist van de corticoïde recep tor) 1028087 43 (k) Monoklonale antilichamen actief tegen endogene ont-stekingseenheden, (l) Anti-tumornecrosefactor (anti-TNF-α) middelen, (m) Hechtingsmolecuulremmers zoals VLA-4-antagonisten, 5 (n) Kinine-Βι- en B2-receptorantagonisten, (o) Immuno-onderdrukkende middelen, (p) Remmers van matrixmetalloproteases (MMPs), (q) Tachykinine NKi-, NK2- en NK3-receptorantagonisten, (r) Elastaseremmers, 10 (s) Adenosine A2a-receptoragonisten, (t) Remmers van urokinase, (u) Verbindingen die werken op dopaminereceptoren, b.v. D2-agonisten, (v) Modulatoren van het ΝΙΡκβ-pad, b.v. IKK-remmers, 15 (w) Modulatoren van cytokine signalerende paden zoals p38 MAP-kinase-, syk-kinase- of JAK-kinaseremmer (x) Middelen die kunnen worden geclassificeerd als muco-lytica of antihoestmiddel, en (y) Antibiotica.

20 Volgens de onderhavige uitvinding hebben combinatie van de verbindingen met formule (1) met: H3-antagonisten, - Muscarinische M3-receptorantagonisten, PDE4-remmers, 25 - glucocórticosteroïden,

Adenosine A2a-receptoragonisten, - Modulatoren van cytokine signalerende paden zoals p38 MAP-kinase of syk-kinase, of,

Leukotrieenantagonisten (LTRAs) waaronder antagonisten 30 van LTB4, LTC4, LTD4 en LTE4, verder de voorkeur.

Volgens de onderhavige uitvinding hebben combinaties van de verbindingen met formule (1) met: - glucocorticosteroïden, in het bijzonder geïnhaleerde 35 glucocorticosteroïden met verminderde systemische bij werkingen, waaronder prednison, prednisolon, flunisoli-de, triamcinolonacetonide, beclomethasondipropionaat, 1 028087 - 44 budesonide, fluticasonpropionaat, ciclesonide en mome-tasonfuroaat, of - muscarinische M3-receptorantagonisten of anticholinergi-sche middelen waaronder in het bijzonder ipratropiumzou-5 ten, namelijk bromide, tiotropiumzouten, namelijk bromide, oxitropiumzouten, namelijk bromide, perenzepine en telenzepine, verder dé voorkeur;

Er dient te worden ingezien dat alle verwijzingen 10 hierin naar behandeling curatieve, palliatieve en profylactische behandeling omvatten. De beschrijving die volgt, betreft de therapeutische toepassingen waarvoor de verbindingen met formule (1) kunnen worden gesteld.

De verbindingen met formule (1) hebben het vermogen 15 in wisselwerking te treden met de p2-receptor en hebben daardoor een breed traject aan therapeutische toepassingen, zoals verder hieronder beschreven, vanwege de essentiële rol welke de p2-receptor speelt in de fysiologie van alle zoogdieren.

20 Derhalve betreft een verder aspect van de onderhavige uitvinding de verbindingen met formule (1) , of farmaceutisch aanvaardbare zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, voor toepassing bij de behandeling van ziekten, aandoeningen en kwalen waarbij de P2-receptor is betrok-25 ken. Meer specifiek betreft de onderhavige uitvinding de verbindingen met formule (1) of farmaceutisch aanvaardbare zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, voor toepassing bij de behandeling van ziekten, aandoeningen, en kwalen gekozen uit de groep bestaande uit: 30 · astma van om het even welk type, etiologie of pathogène- se, in het bijzonder astma die een lid is gekozen uit de groep bestaande uit atopische astma, niet-atopische astma, allergische astma, atopische bronchiale IgE-gemedi-eerde astma, bronchiale astma, essentiële astma, ware 35 astma, intrinsieke astma veroorzaakt door pathofysiolo-gische verstoringen, extrinsieke astma veroorzaakt door milieufactoren, essentiële astma van onbekende of ondui- 1028087 45 delijke oorzaak, niet-atopische astma, bronchitische astma, emfysemateuze astma, oefening-geïnduceerde astma, allergeen geïnduceerde astma, koude lucht geïnduceerde astma, beroepsastma, infectieve astma veroorzaakt door 5 bacteriële, schimmel, protozoale of virale infectie, niet-allergische astma, beginnende astma, hijgend kind syndroom en bronchiolytis, • chronische of acute luchtpijpvernauwing, chronische bronchitis, obstructie van dé kleine luchtwegen, en em- 10 fyseem, • obstructieve of ontstekingsluchtwegziekten van om het even welk type, etiologie of pathögenese, in het bijzonder een obstructieve of ontstekingsluchtwegziekte die een lid is gekozen uit de groep bestaande uit chronische 15 eosinofiele pneumonie, chronische obstructieve longziekte (COPD), COPD die chronische bronchitis, longemfyseem of dyspneu al of niet verbonden met COPD omvat, COPD die wordt gekenmerkt door onomkeerbare, progressieve lucht-wegobstructie, volwassen ademhalingsnoodsyndroom (ARDS), 20 versterking van luchtweghyperreactiviteit ten gevolge van andere geneesmiddeltherapie en luchtwegziekte die is verbonden met long hoge bloeddruk, • bronchitis van om het even welk type, etiologie of pa-thogenese, in het bijzonder bronchitis die een lid is 25 gekozen uit de groep bestaande uit acute bronchitis, acute laryngotracheale bronchitis, arachidische bronchitis, catarrale bronchitis, kroepbronchitis, droge bronchitis, infectieuze astmatische bronchitis, productieve bronchitis, staphylococcus of streptococcale bronchitis 30 en blaasjesbronchitis, • acuut longletsel, • bronchiectase van om het even welk type, etiologie of pathögenese, in het bijzonder bronchiectase die een lid is gekozen uit de groep bestaande uit cilindrische bron- 35 chiectase, blaasvormige bronchiectase, fusiforme bron chiectase, capillaire bronchiectase, cystische bron- 1 028087 - 46 chiectase, droge bronchiectase en folliculaire bron-chiectase.

Een nog verder aspect van de onderhavige uitvinding betreft ook de toepassing van de verbindingen met formule 5 (1) of farmaceutisch aanvaardbare zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, voor de bereiding van een geneesmiddel met een P2-agonistactiviteit. In het bijzonder betreft de onderhavige uitvinding de toepassing van de verbindingen met formule (1) of farmaceutisch aanvaardbare 10 zouten, afgeleide vormen of preparaten daarvan, voor de bereiding van een geneesmiddel voor de behandeling van β2-gemedieerde ziekten en/of aandoeningen, in het bijzonder de hierboven vermelde ziekten en/of aandoeningen.

Als een gevolg verschaft de onderhavige uitvinding 15 een bijzonder interessante werkwijze om een zoogdier, waaronder een menselijk wezen, te behandelen met een effectieve hoeveelheid van een verbinding met formule (1), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan. Meer precies verschaft de onderhavige 20 uitvinding een bijzonder interessante werkwijze voor de behandeling van p2-gemedieerde ziekten en/of aandoeningen bij een zoogdier, waaronder een menselijk wezen, in het bijzonder de hierboven vermelde ziekten en/of aandoeningen, omvattende het toedienen aan genoemd zoogdier van een 25 effectieve hoeveelheid van een verbinding met formule (1), de farmaceutisch aanvaardbare zouten en/of afgeleide vormen ervan.

De volgende voorbeelden illustreren de bereiding van de verbindingen met de formule (1): 30 1028087 47

Bereiding 1: Diethyl-2,21-(1,3-fenyleen)diacetaat 5 0 KJ o

Acetylchloride (12,5 ml, 175 mmol) werd toegevoegd 10 aan een suspensie van 2,2(1,3-fenyleen)diazijnzuur (50,0 g, 260 mmol) in ethanol (500 ml) en de resulterende oplossing werd 16 uur verwarmd tot koken onder terugvloeikoe-ling. De reactie werd afgekoeld tot kamertemperatuur en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. De rest werd ver-15 deeld tussen verzadigde waterige natriumwaterstofcarbonaat (300 ml) en ethylacetaat (500 ml). De organische fase werd gewassen met water (200 ml) , verzadigde waterige natrium-chloride (300 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd en gaf de titelverbinding 20 als een vaal gele olie (63,5 g).

1HNMR (CDC13, 400 MHz) δ: 1,31 (t, 6H) , 3,65 (s, 4H), 4,20 (q, 4H), 7,24-7,36 (m, 4 H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 251 [M+H]+ 25 Bereiding 2: [3-(2-Oxo-propyl)-fenyl]-azijnzuurethyl- ester Ίηοοτ0^

Een oplossing van de diester uit bereiding 1 (44,3 g, 35 177 mmol) en 2,2(1,3-fenyleen)diazijnzuur (59,2, 308 mmol) in ethanol (24 ml) en dioxan (290 ml) werd druppelsgewijs behandeld met 12 M chloorwaterstofzuur (4,9 ml, 1028087 48 58.8 mmol) . Het reactiemengsel werd 18 uur geroerd bij koeken onder terugvloeikoeling voordat men dit liet afkoelen en tot een laag volume werd geconcentreerd. Het rëac-tiemengsel werd verdund met tolueen (125 ml) en de resul- 5 terende suspensie gefiltreerd. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest opgenomen in watér en basisch gemaakt met natriumbicarbonaat tot pH neutraal. Het mengsel werd verdund met ethylacetaat (200 ml) en de organische laag werd afgescheiden en gewassen met natriumbi-10 carbonaatoplossing (5 x 30 ml) en verzadigde waterige na-triumchloride (50 ml). De gecombineerde waterige extracten werden aangezuurd tot pH 3 met 6 M chloorwaterstofzuur en geëxtraheerd met ether (3 x 30 ml) . De organische lagen werden gecombineerd, gedroogd (magnesiumsulfaat) en onder 15 vacuüm geconcentreerd. De rest werd gewreven met pentaan en gaf de titelverbinding als een kleurloze vaste stof, 10.8 g.

XHNMR (CD30D, 400 MHz) δ: 1,25 (t, 3H) , 3,60 (m, 2H), 3,63 (m, 2H), 4,15 (q, 2H), 7,18-7,32 (m, 4H) dpm.

20 MS (elektrospray): m/z 245 [MNa]+

Bereiding 3: [3[(2-Hydroxy-2-methyl-propyl)-fenyl]- azijnzuur o h3c ch3 1 2 3 4 5 6 1028087 2

Methylmagnesiumchloride (51 ml van een 3 M oplossing 3 in tetrahydrofuran, 153 mmol) werd druppelsgewijs toege 4 voegd aan een geroerde oplossing van de bereiding 2 (11,6 5 g, 51 mmol) (International Journal of Peptide and Protein 6

Research, 1987, 29(3), 331) in tetrahydrofuran (300 ml) bij 0°C onder stikstof. Men liet de reactie gedurende de nacht opwarmen tot kamertemperatuur onder de vorming van 49 een dik wit precipitaat en vervolgens werden water (50 ml) en 2 M chloorwaterstofzüur (80 ml) voorzichtig toegevoegd. De waterige laag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2 x 300 ml) en de gecombineerde organische lagen gewassen met 5 pekel (50 ml), gedroogd (natriumsulfaat) , en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om de titelverbinding te leveren als een gouden olie (11,2 g).

1HNMR (CDC13, 400 MHz) δ: 1,22 (6H, s) , 2,75 (2H, s), 3,63 (2H, s), 7,12-7,30 (4H, m).

10 MS (ESI); m/z 209 [M+H]+

Bereiding 4: (3-[2-(2-Chloor-acetylamino)-2-methyl- propyl]-fenyl}-azijnzuur

15 H

H VYYXNirCl O H3C CH3 O 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 1028087 2 2-Chlooracetonitril (8,8 ml, 140 mmol) werd toege 3 voegd aan een oplossing van de alcohol uit bereiding 3 4 (16,0 g, 70 mmol), in azijnzuur (33 ml). De resulterende 5 oplossing werd afgekoeld tot 0°C, behandeld met geconcen- 6 treerd zwavelzuur (33 ml) , en men liet het reactiemengsel 7 geleidelijk opwarmen tot kamertemperatuur. Na 4 uur werd 8 het reactiemengsel op ijs gegoten en basisch gemaakt met 9 vast natriumcarbonaat. De oplossing werd geëxtraheerd met 10 ethylacetaat (2 x 500 ml) en de gecombineerde organische 11 extracten gedroogd (magnesiumsulfaat) en onder vacuüm geconcentreerd om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof (19,0 g).

^NMR (CDCI3, 400 MHz) 6: 1,36 (s, 6H) , 3,02 (s, 2H) , 3,62 (s, 2H) , 3,95 (s, 2H), 6,19 (m, 1H), 7,06-7,31 (m, 4H) 3 5 dpm.

MS (elektrospray): m/z 282 [M-H]" 50

Bereiding 5: [3-(2-Amino-2-methyl-propyl)-fenyl]-azijn- zuurmethylester ύ h3c ch3 8 10 Een oplossing van het amide uit bereiding 4 (5,1 g, 18 nunol) , thio-ureum (1,6 g, 21 mmol) en azijnzuur (18 ml) in ethanol (80 ml) werd 16 uur onder een stikstofatmosfeer verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertemperatuur en dit werd 15 gefiltreerd. Het filtraat werd onder vacuüm geconcentreerd, de rést opgelost in methanol (150 ml) , verzadigd met waterstofchloridegas en de resulterende oplossing 16 uur Verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. Het mengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest verdeeld 20 tussen ethylacetaat (200 ml) en 5 % waterige natriumcarbo-naatoplossing (200 ml) . De organische fase werd gewassen met pekel (100 ml) , gedroogd (magnesiumsulfaat) en onder vacuüm geconcentreerd. De rest werd gezuiverd met behulp van sterke kationenwisselaarhars, eluerend met methanol en 25 vervolgens een 2 M oplossing van ammoniak in methanol, om het product te elueren. het eluent werd onder vacuüm geconcentreerd en gaf de titelverbinding als een gele olie, 2,68 g.

1HNMR (CDC13, 400 MHz) 8: 1,14 (s, 6H) , 2,68 (s, 2H) , 3,62 30 (s, 2H) , 3,69 (s, 3H) , 7,08-^7,16 (m, 3H) , 7,23-7,27 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 222[M+H]+ 1028087 51

Bereiding 6: N-{2-(benzyloxy)-5-[(IR)-2-broom-l-hydroxy- ethyl]fenyl}methaansulfonamide

OH

//n'

O O

10 u

Een oplossing van (IR)-1-[3-amino-4-(benzyloxy)-fenyl]-2-broomethanol (Org. Process Research and Develop-ment, 1998> 2, 96) (30,8 g, 95,6 inmol) in dichloormethaan 15 (300 ml) werd behandeld met pyridine (9,3 ml, 115 mmol) .

De resulterende oplossing werd afgekoeld tot. 5°C en een oplossing van methaansulfonylchloride (7,8 ml, 100,7 mmol) in dichloormethaan (10 ml) werd druppelsgewijs toegevoegd. Het mengsel werd een verdere 30 minuten bij 5°C geroerd en 20 men liet het vervolgens geleidelijk gedurende een periode van 16 uur tot kamertemperatuur opwarmen. Het reactiemeng-sel werd gewassen met 2 N chloorwaterstofzuur (110 ml) en de organische fase werd afgescheiden, gedroogd (magnesium-sulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om een 25 oranje olie te geven. De rest werd gekristalliseerd uit hete tolueen (100 ml) en gaf de titelverbinding als een vaal roze vaste stof (33,7 g).

^NMR (DMSOde, 400 MHz) δ: 2,93 (s, 3H) , 3,52-3, 66 (m, 2H) , 4,74 (m, 1H), 5,19 (s, 2H) , 7,11 (d, 1H), 7,19-7,22 (m, 30 1H), 7,33-7,36 (m, 2H) , 7,40-7,43 (m, 2H) , 7,56 (d, 2H) , 8,95 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 398/400 [M-H]~ 1028087 52

Bereiding 7: N-[2-(Benzyloxy)-5-((IR)-2-broom-l-{[tert- butyl(dimethyl)silyl]oxy}ethyl)fenyljmethaansulfonamide

OTBDMS

ίΓ»τ" HN CH3 //* 10 o 0

Een oplossing van het bromide van bereiding 6 (21,5 g, 53,7 mmol) in N,N-dimethylformamide (125 ml) werd behandeld met imidazool (4,16 g, 75,2 mmol) en tert-butyl-15 (dimethyl)silylchloride (9,73 g, 64,5 mmol) en men liet de resulterende oplossing 16 uur bij kamertemperatuur roeren. Het reactiemengsel werd verdund met ethylacetaat (200 ml) en gewassen met water (2 x 100 ml). De waterige fasen werden gecombineerd en geëxtraheerd met ethylacetaat (100 20 ml). De gecombineerde organische éxtracten werden gewassen met 2 N chloorwaterstofzuur (100 ml) , gedroogd (magnesium-sulfaat) en onder vacuüm verminderd. De rest werd gesuspendeerd in pentaan:ethylacetaat (200 ml, 1:1 op volumeba-sis) en het oplosmiddel verdampt. De rest werd gewreven 25 met verder pentaan:ethylacetaat (200 ml, 1:1 op volumeba-sis) en de resulterende vaste stof afgefiltreerd en onder vacuüm gedroogd om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof (23,7 g).

1HNMR (CDC13, 400 MHz) δ: -0,07 (s, 3H), 0,11 (s, 3H), 0,89 30 (s, 9H) , 2,91 (s, 3H) , 4,80-4,83 (m, 1H) , 6,80 (bs, 1H), 6.98 (d, 1H), 7,12 (d, 1H) , 7,36-7,44 (m, 5H) , 7,52-7,54 (m, 1H) dpm.

Alternatieve werkwijze voor de bereiding van bereiding 7: 35

Een oplossing van het bromide van bereiding 6 (10 g, 24.98 mmol) werd opgelost in DCM (20 ml, 2 ml/g) en ver- 1028087 53 volgens werd imidazool (4,58 g, 37,47 mmol, 1,5 eq) toegevoegd gevolgd door TBDMSiCl (5,27 g, 34,97 mmol, 1,4 eq). Het reactiemengsel werd 1 uur verwarmd tot koken onder te-rugvloeikoeling en men liet dit vervolgens afkoelen tot 5 30°C. Het mengsel werd verdund met isopropylacetaat (80 ml, 8 ml/g) en vervolgens geblust met 2 M HC1 (50, 5 ml/g) en 10 minuten heftig geroerd. De fasen werden gescheiden en de organische fase werd gewassen met water (50 ml, 5 ml/g). De organische fase werd vervolgens in volume ver-10 minderd onder verminderde druk bij 45°C tot 25-30 ml. De oplossing werd vervolgens afgekoeld tot kamertemperatuur en een suspensie snel gevormd en werd 30 minuten bij kamertemperatuur geroerd. Heptaan (20 ml, 2 ml/g) werd vervolgens gedurende 10 minuten toegevoegd en de suspensie 15 werd af gekoeld tot 5-10°C en 1 uur geroerd. De suspensie werd vervolgens gefiltreerd en op het filterpapier gewassen met heptaan (2 x 10 ml) . De resulterende filterkoek werd in een vacuümoven bij 50°C 12 uur gedroogd en gaf de titelverbinding als een witte vaste stof (11,05 g, 86 % 20 opbrengst).

1HNMR (CDC13/ 400 MHz) δ: -0,07 (s, 3H), 0,11 (s, 3H) , 0,89 (s, 9H) , 2,91 (s, 3H) , 4,80-4>83 (m, 1H) , 6,80 (bs, 1H), 6,98 (d, 1H) , 7,12 (d, 1H) , 7,36-7,44 (m, 5H) , 7,52-7,54 (m, 1H) dpm.

25 1028087 54

Bereiding 8: Methyl-(3-{2-[((2R)-2-{4-(benzyloxy)-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}-2-hydroxyethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)acetaat

5 OTBDMS

Kj? HlL „CH, 10 cTo

Het bromide van bereiding 7 (36,0 g, 70,8 mmol) en het amine van bereiding 5 (36,0 g, 153 mmol) werden 72 uur 15 tot 85°C verwarmd. Het reactiemengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur en gezuiverd met behulp van kolomchroma-tografie over silicagel eluerend met pentaanrethylacetaat (50:50 op volumebasis) om het titelproduct te geven als een vaal gele olie (37,2 g).

20 XHNMR (CDC13, 400 MHz) 8: -0,15 (s, 3H) , 0,00 (s, 3H) , 0,83 (s, 9H) , 1,01 (s, 3H) , 1,04 (s, 3H) , 2,57-2,97 (m, 7H) , 3,59 (s, 2H), 3,68 (s, 3H) , 4,68-4,72 (m, 1H) , 5,09 (s, 2H), 6,79 (bs, 1H), 6,95 (d, 1H), 7,04-7,21 (m, 7H), 7,37- 7,44 (m, 5H), 7,56 (d, 1H) dpm.

25 MS (APCI): m/z 655 [M+H]+ 1 028087 - 55

Bereiding 9: Methyl-(3—{2—[((2R)-2-{[tert-butyl(di methyl) silyl]oxy}-2-[4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]-fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)acetaat

5 OTBDMS

I H

IJ h3c ch3[I I » HO' HN>^CH3 10 O 0

Een oplossing van de benzyl beschermde alcohol van bereiding 8 (36,8 g, 56 inmol) in ethanol (550 ml) werd be-15 handeld met ammoniumformiaat (16,0 g, 254 mmol) en 20 % palladiumhydroxide op kool (1,5 g) . De resulterende suspensie verwarmd tot 85°C gedurende 2 uur. Na 2 uur werd verder 20 % palladiumhydroxide op kool (1,0 g) toegevoegd en verwarmen 1 uur voortgezet. Het reactiemengsel werd af-20 gekoeld tot kamertemperatuur, gefiltreerd en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. De rest werd verdeeld tussen ethylacetaat (500 ml) én 2 N waterige ammoniak (100 ml) . De organische fase werd afgescheiden, gedroogd (magnesium-sulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. De 25 rest werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0,88 ammoniak (95:5:0,5 op volumebasis) en gaf het titelproduct als een vaal gele olie (20,6 g) .

1HNMR (400 MHz, CDCI3) δ: -0,17 (s, 3H) , -0,05 (s, 3H) , 30 0,80 (s, 9H) , 1,07 (s, 3H) , 1,09 (s, 3H) , 2,66-2,91 (m, 7H) , 3,62 (d, 2H) , 3,69 (s, 3H) , 4,71-4,74 (m, 1H) , 6,58 (d, 1H), 6,88 (dd, 1H) , 7,05-7,14 (m, 3H) , 7,21-7,25 (m, 1H), 7,30 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 565 [M+H]+ 35 1028087- 56

Bereiding 10: (3—{2—[(2R)-2-(tert-Butyl-dimethyl-silanyl- oxy) -2- (4-hydroxy-3-methaansulfonylaniino-fenvl) -ethyl-amino]-2-methyl-propyl}-fenyl)-azijnzuur

_ OTBDMS

5 I H oH

HN. .CH, 10 //*o o 0

De ester van bereiding 9 (20, 6, 36 mmol) werd opgelost in tetrahydrofuran (150 ml) en de oplossing druppels-15 gewijs behandeld met 1 M waterige lithiumhydroxide (72 ml, 72 mmol). Het reactiemengsel werd 72 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel werd geneutraliseerd door toevoegen van 1 M chloorwaterstofzuur (72 ml, 72 mmol) en tot laag volume geconcentreerd. De waterige fase werd ge-20 decanteerd en de rest gewassen mét water (2 x 50 ml) . De rest werd opnieuw opgelost in tetrahydrofuran (50 ml) en tolueen (50 ml) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om de titelverbinding te geven als een vaal bruin schuim (20,17 g) .

25 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,14 (s, 3H) , 0,07 (s, 3H) , 0,83 (s, 9H) , 1,32 (m, 6H) , 2,93 (m, 5H) , 3,23 (m, 2H) , 3,54 (m, 2H), 4,94 (m, 1H) , 6,91 (d, 1H) , 7,03-7,16 (m, 3H), 7,26 (m, 2H), 7,60 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 236 [M+H]+ 30 1028087 57

Bereiding 5a: [3-(2-Amino-2-methyl-propyl)-fenyl]-azijn zuur h3c^ch3[^J | 10 Een mengsel van het amide uit bereiding 4 (151,4 g, 534 mmol), thioureum (48,7 g, 640 mmol) en azijnzuur (303 ml) in ethanol (1,5 1) werd verwarmd tot koken onder te-rugvloeikoeling onder een stikstofatmosfeer gedurende 5 uur. Men liet het reactiemengsel afkoelen tot kamertempe-15 ratuur en de suspensie werd onder vacuüm geconcentreerd. De resten werden geazeotropeerd met tolueen (2 x 900 ml) , vervolgens behandeld met ethanol (1,5 1) en 1 uur geroerd. Het vaste precipitaat werd verwijderd door filtratie en het filtraat afgekoeld in een ijsbad, behandeld met 98 % 20 zwavelzuur (227 ml) en 1 uur bij omgevingstemperatuur geroerd. De oplossing werd onder vacuüm geconcentreerd om het meeste van de ethanol te verwijderen en bijgesteld tot pH 9 met behulp van waterige natriumbicarbonaat. Het vaste precipitaat werd verwijderd door filtratie en gewassen met 25 water (300 ml) vervolgens ethylacetaat (1,0 1). De lagen van het gecombineerde tweefasen filtraat en wasvloeistoffen werden gescheiden en de waterige laag opnieuw geëxtraheerd met ethylacetaat (1,0 1 + 500 ml). De gecombineerde ethylacetaatextracten werden gedroogd boven magnesiümsul-30 faat, gefiltreerd en onder vacuüm geconcentreerd en gaven de titelverbinding als een bruine olie (89,5 g).

1HNMR (de-DMSO, 400 MHz) δ: 0,99 (s, 6H) , 1,16 (t, 3H) , 2,59 (s, 2H) , 3,61 (s, 2H) , 4,06 (q, 2H) , 7,06 (m, 3H) , 7,21 (m, 1H) 35 1028087- 58

Bereiding 5b: [3-(2-Amino-2-^methyl-propyl)-fenyl]-azijn- zuurethylester, di-p-toluoyl-L-tartraat 5 o «*' fr^ h,c cHj M| JJ (ΤΥ^ο\°γ^

HjC JU1 «v o 10 Een oplossing van het amine uit bereiding 5a (124,9 g, 531 mmol) in acetonitril (1,0 1) werd behandeld met een oplossing van di-p-toluoyl-L-wijnsteenzuur (194,8 g, 504 mmol) in acétonitril (750 ml) . De resulterende suspensie werd 3 uur geroerd en het vaste precipitaat geïsoleerd 15 door filtratie en gewassen met acetonitril (2 x 250 ml) om de titelverbinding te geven als een gebroken-witte vaste stof (210 g).

XH NMR (de-DMSO, 400 MHz) δ: 1,13 (s, 6H) , 1,17 (t, 3H) , 2,34 (s, 6H) , 2,78 (s, 2H) , 3,63 (s, 2H) , 4,06 (q, 2H) , 20 5, 61 (s, 2H) , 7,02 (d, 2H) , 7,15 (d, 1H) , 7,25 (m, 5H), 7,80 (d, 4H)

Bereiding 5c: [3-(2-Amino-2-methyl-propyl)-fenyl]-azijn- zuurethylester 25

Hac ch3{^JJ jj 30

Een oplossing van kaliumcarbonaat (37,90 g, 274,22 mmol) in water (213 ml) werd toegevoegd aan een suspensie van bereiding 5b (42,62 g, 68,56 mmol) in propionitril 35 (213 ml) en geroerd totdat alle vaste stof was opgelost.

De fasen werden vervolgens gescheiden en de propionitril-fase werd gewassen met water (107 ml) . De oplossing werd 1028087 59 in volume verminderd onder verminderde druk tot ongeveer 30 ml en gaf de titelverbinding als een propionitriloplos-sing. Een monster werd verwijderd en droog gedampt om een gewichtsassay te verkrijgen en opbrengst werd getoond 81 % 5 te zijn.

^NMR (de-DMSO, 400 MHz) 5: 0,99 (s, 6H) , 1,16 (t, 3H) , 2,59 (s, 2H) , 3,61 (s, 2H) , 4,06 (q, 2H) , 7,06 (m, 3H) , 7,21 (m, 1H) 10 Bereiding 8a:

Ethyl-(3-{2-[((2R)-2-{(tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-ethyl)fenyl]-2-{4-benzyloxy-3-[(methylsulfonyl)amino]-fenyl}ethyl)amino]-2-methyl-propyl}fenyl)acetaat

15 OTBDMS

I Η NHS02Me 20 B-[2-(benzyloxy)-5-((lR(-2-broom-l-{[tert-butyl(dimethyl) silyl] oxy) ethyl) fenyl ]methaansulfonamide (14,34 g, 27,88 mmol) wérd toegevoegd aan de oplossing van bereiding 25 5c (13,2 g, 55,75 mmol) in propionitril (15 ml). Het mengsel werd vervolgens 3 dagen verwarmd tot koken onder te-rugvloeikoeling. De oplossing werd verdund met propionitril (55 ml) en afgekoeld tot 20-25°C. De oplossing werd gewassen met 1 M HC1 (aq) (70 ml), vervolgens water (35 30 ml) en de oplossing direct naar de volgende stap gevoerd aannemende 100 % opbrengst.

1028087 60

Bereiding 9a:

Ethyl- (R) -2- (3-{2- [2-hydroxy^2- (4-benzyloxy-3-niethaan-sulfonamidofenyl)ethylamino]-2-methylpropyl}fenyl)acetaat

5 OH

NHS02Me 10

Triethylaminetrihydrofluoride (9,1 ml, 8,99 g, 55,76 mmol) werd toegevoegd aan de oplossing van bereiding 8a (18,64 g, 27,88 mmol) in propionitril (72 ml). De oplos-15 sing werd 3 uur bij 20-25°C geroerd. De oplossing werd vervolgens geblust met 5 Μ NH3 (aq) (72 ml), 10 minuten geroerd en de fasen gescheiden. De propionitriloplossing werd vervolgens gewassen met water (72 ml) en de oplossing direct naar de volgende stap gevoerd aannemende 100 % op-20 brengst.

Bereiding 10a: (R)-2-(3—{2-[2-hydroxy-2-(4-benzyloxy-3-methaansulfon-amidofenyl)ethylamino]-2-methylpropyl}fenyl)azijnzuur 25 1 1028087 NHS02Me

Een oplossing van natriumhydroxide (6,69 g, 167,28 mmol) in water (72 ml) werd toegevoegd aan de oplossing 35 van bereiding 9a (15,47 g, 27,88 mmol) in propionitril (72 ml) . Het tweefasen mengsel werd vervolgens 3 Uur heftig geroerd. De fasen liet men scheiden en de waterige fase 61 werd gewassen met vers propionitril (72 ml), vervolgens verdund met 1,4 dioxaan (72 ml). De pH van de oplossing werd vervolgens bij gesteld tot pH 6-7 door de toevoeging van 37 gew.% HC1 (aq) en de resterende suspensie werd 1 5 uur geroerd. De suspensie werd vervolgens gefiltreerd en :gewassen op het filterpapier met water, vervolgens gedroogd en gaf de titelverbinding als een gebroken-witte vaste stof (13,55 g, 92 % over drie stappen).

NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,33 (s, 3H), 1,35 (s, 3H) , 2,89 10 (s, 3H), 2,96 (s, 2H), 3,06-3,19 (m, 2H) , 3,50 (s, 2H), 4,50 (m, 1H), 5,22 (s, 2H), 7,08 (d, 1H), 7,13 (d, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (t, 2H) , 7,27 (d, 1H) , 7,31 (d, 1H) , 7,38 (t, 2H), 7,48 (d, 2H), 7,49 (s, 1H) dpm.

15 Bereiding 10b: (R)-2-(3-(2-(2-Hydroxy-2-(4-hydroxy-3-methaansulfonamido-fenyl)ethylamino]-2-methylpropyl}fenyl)azijnzuurnatrium-zout

OH

20 I H

jry^XTX00^' NHSOaMe > 25

Een oplossing van natriumhydroxide (1,40 g, 35,05 mmol) in water (100 ml) werd toegevoegd aan een suspensie van bereiding 10a (18,46 g, 35,05 mmol) in methanol (600 30 ml). Het mengsel werd gehydrogeneerd over 20 gew.% palla-diumhydroxide op kool bij 150 psi en 60°C gedurende 5 uur. Het mengsel werd gefiltreerd om katalysatorresten te verwijderen en vervolgens in volume verminderd bij verminderde druk tot 100 ml. Het mengsel werd gedestilleerd en op-35 nieuw geplaatst bij verminderde druk aan acetonitril bij constant volume. De resulterende suspensie werd gefiltreerd en gewassen op het papier met acetonitril, vervol- 1 028087 - 62 gens gedroogd om de titelverbinding te verschaffen als een gebroken-witte vaste stof (15> 34 g, 95 %) .

XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,07 (s, 3H) , 1,09 (s, 3H), 2,70 (s, 2H) , 2,73-2,81 (m, 2H) , 2,87 .(s, 3H) , 3,44 (s, 2H) , 5 4,60-4,63 (m, 1H) , 6,84 (d, 1H) , 6,92 (d, 1H) , 7,04 (d, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,14 (d, 1H) , 7,15 (t, 1H) , 7,34 (s, 1H) dpm.

Genoemde verbindingen met formule 10b kunnen vervol- 10 gens in reactie worden gebracht met een geschikt amine met formule NHR8-Q2-A (3) R3 R\ Γ R8 X /R* _>< ixtr (C^)p-\ /) R5 Η ΠΝ—/ \β (3>)/οί R» (3") 20 in aanwezigheid van een conventioneel koppelingsmiddel zoals 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydro- chloride of dicyclohexylcarbodiimide in een geschikt oplosmiddel zoals pyridine, dimethylformamide of dimethyla-ceetamide, 25 om een verbinding met formule (1): Λ I Y(CH?)n\..pi (1)

30 Η0Λγ R’ * ^ Y

nhso2ch3 35 te verkrijgen, waarbij R1 en R2 mèthyl zijn en η 1 is.

1 028087 63

Bereiding 11: 1-(3-Broomfenyl)-2-methylpropan-2-ol 5 H3c ch3

Methylmagnesiumbromide (3 M oplossing in diethyl-10 ether, 51,6 ml, 155 mmol) werd langzaam toegevoegd aan een oplossing van 1-(3-broomfenyl)propan-2-on (15,0 g, 70 mmol) in droge diethylether (200 ml) bij 0°C. Het resulterende mengsel werd 3 uur gelaten, vervolgens afgekoeld tot 0°C en langzaam geblust met verzadigde waterige ammonium-15 chlorideoplossing. De organische fase werd gewassen met pekel, gedroogd (natriumsulfaat) . De gele olie werd vervolgens gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:pentaan:methanol (90:5:5 op volumebasis) om een vaal gele olie te leveren 20 (13,26 g).

lti NMR (400 MHz, CDC13) : δ: 1,22 (s, 6H) , 1,42 (bs, 1H) , 2,74 (s, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,40 (m, 2H) dpm.

Bereiding 12: N-[2-(3-Broomfenyl)-1,1-dimethylethyl]-2- 25 chlooraceetamide

H

O HgC CHg ü J

30

Chlooracetonitril (6,63 ml, 105 mmol) werd toegevoegd aan een geroerde oplossing van de alcohol van bereiding 11 35 (12,0 g, 52,0 mmol) in azijnzuur (25 ml) bij kamertempera tuur. De resulterende oplossing werd afgekoeld tot 0°C en geconcentreerd zwavelzuur (25 ml) werd toegevoegd waarbij 1028087 64 de temperatuur < 10°C werd gehouden. De resulterende oplossing liet men 1 uur roeren en werd vervolgens op ijs gegoten en basisch gemaakt door de toevoeging van vast ka-liumcarbonaat. Het product werd geëxtraheerd met ethylace-5 taat (2 x 500 ml), de organische lagen gecombineerd en gewassen met water (50 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om de titelverbinding te leveren als een oranje vaste stof (16,08 g).

*Η NMR (400 MHz, CDC13) : δ: 1,37 (s, 6H) , 3,02 (s, 2H) , 10 3,94 (s, 2H), 6,17 (bs, 1H), 7,03-7,08 (d, 1H), 7,11-7,13 (t, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,32-7,39 (d, 1H) dpm.

LRMS (elektrospray) m/z 306 [M+H]+

Bereiding 13: [2-(3-Broomfenyl)-1,1-dimethylethyl]amine 15

H3C CHS

20

Een oplossing van het amide uit bereiding 12 (32,0 g, 105 mmol) , thioureum (9,60 g, 126 mmol) en azijnzuur (50 ml) in ethanol (250 mij werd gedurende de nacht verwarmd 25 tot koken onder terugvloeikoeling. Het reactiemengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur en gefiltreerd, het fil- traat werd onder vacuüm geconcentreerd en basisch gemaakt ♦ met behulp van waterige natriumhydroxideoplossing (1 M, 450 ml). Het product werd geëxtraheerd met dichloormethaan 30 (2 x 500 ml) en de gecombineerde organische lagen gewassen met pekel (50 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplossing onder vacuüm verwijderd op de titelverbinding te leveren als een zwarte olie (23 g).

lH NMR (400 MHz, CDCI3) : δ: 1,12 (s, 6H) , 1,84 (bs, 2H) , 35 2,62 (s, 2H), 7,08-7,16 (m, 2H), 7,32-7,36 (m, 2H) dpm.

LRMS (elektrospray) m/z 228 [M+H]+ 1028087 65

Bereiding 14: N-[2-Benzyloxy)-5-((IR)-2-{[2-(3-broom- fenyl)-1,1-dimethylethyl]amino}-1-hydroxyethyl)fenyl]-methaansulfonamide

5 OTBDMS

Br

II J h3c ch, II J

ifY"0 ^ HNx ch3 10 O 0

Het amine van bereiding 13 (5,04 g, 22,3 mmol) werd opgelost in dichloormethaan (20 ml) en behandeld met N-[2-15 benzyloxy)-5-((IS)-2-broom-{[tert-butyl(dimethyl)silyl]-oxy)ethyl)-fenyl]methaansulfonamide (WO 02/06258, p. 36, voorbeeld 14a) (11,90 g, 45,0 mmol). De resulterende op lossing verwarmd tot 90°C tot het oplosmiddel verdampte en vervolgens een verdere 16 uur bij 90°C geroerd. Het reac-20 tiemengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur en de rest werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over si-licagel eluerend met pentaan:ethylacetaat (90:10) om het titelpröduct te geven als een bruine olie (8,36 g).

1HNMR (CD30D, 400 MHz): δ: -0,14 (s, 3H) , 0,04 (s, 3H) , 25 0,84 (s, 9H) , 1,10 (s, 3H) , 1,13 (s, 3H) , 2,87 (s, 3H) , 2,67-2,90 (m, 4H), 4,73-4,77 (m, 1H) , 5,25 (s, 2H), 7,12- 7,23 (m, 4H), 7,36-7,48 (m, 6H), 7,53-7,55 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray): m/z 661/663 [M+H]+, .683/685 [M+H] + 1 028087 - 66

Bereiding 15: Methyl-3-{2-[((2R)-2-{4-(benzyloxy)-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}-2-{[tert-butyl(dimethyl)-silyl]oxy}ethyl)amino]-2-methylpropyl)benzoaat 5 OTBDMS 0 ^oV HaC CHa ^ 10 NHS02Me

Een oplossing van het bromide van bereiding 14 (8,36 g, 12,6 mmol), (1,1'-bis(difenylfosfino)ferroceen)di- 15 chloorpalladium(II) (1,03 g, 1,26 mmol) en triethylamine (3,5 ml, 25,1 mmol) in methanol werd bij 100°C onder 100 psi koolmonoxide 16 uur verwarmd. Het reactiemengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur, gefiltreerd en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. Zuivering met behulp van 20 kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloor-methaan:methanol:0, 880 ammoniak (90:10:1) gaf de titelver-binding als een oranje olie, 7,79 g (sporen verontreiniging met katalysatorresten).

1HNMR (400 MHz, CD3OD) : δ: -0,17 (s, 3H) , 0,00 (s, 3H) , 25 0, 80 (s, 9H), 1,12 (s, 3H) , 1,15 (s, 3H) , 2,67-2,92 (m, 3H) , 3,96 (s, 3H), 4,73-4,77 (m, 1H) , 5,24 (s, 2H) , 7,11 (d, 1H), 7,19 (dd, 1H), 7,36-7,48 (m, 6H) , 7,54 (d, 2H) , 7,91-7,93 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 641 [M+H]+, 663 [M+Na]+ 30 1028087 67

Bereiding 16: Methyl-3-{2-[((2R)-2-{[tert-butyl(di methyl) silyl]oxy}-2-[4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]-fenyl}ethyl)aminol-2-methylpropyl}benzoaat 5 OTBDMS 0 HOjy h3c ch3u , n NHS02Mè 10 2

Bereid uit de ester van bereiding 15 met behulp van de werkwijze van bereiding 7 om de titelverbinding te ge-15 ven als een kleurloze olie.

XHNMR (400 MHz, CD3OD) : δ: -0,21 (s, 3H) , -0,05 (s, 3H} , 0,75 (s, 9H), 1,08 (s, 3H) , 1,12 (s, 3H) , 2,62-2,88 (m, 7H), 3,92 (s, 3H) , 4,64-4,69 (m, 1H), 6,84 (d, 1H) , 7,03 (dd, 1H), 7,35-7,36 (m, 1H), 7,39-7,42 (m, 2H), 7,87-7,89 20 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 437 [M+H]+, 559 [M+Na]+

Bereiding 17; 3-{2-[((2R)-2-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]- oxy}-2-[4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)-25 amino]-2-methylpropyl}benzoëzuur OTBDMS .n ï H ÏÏ

30 H*C

NHS02Me 35 Bereid uit de ester van bereiding 16 met behulp van de werkwijze van bereiding 8 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

1028087 68 1HNMR (400 MHz, CD3OD) : 5: -0,14 (s, 3H) , 0,04 (s, 3H) , 0,82 (s, 9H), 1,23 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 2,88-2,96 (m, 6H) , 3,00-3,14 (m, 2H) , 4,83-4,87 (m, 1H) , 6,89 (d, 1H) , 7,07 (dd, 1H), 7,24-7,26 (m, 1H), 7,32 (t, 1H), 7,37 (s, 5 1H), 7,82 (s, 1H), 7,86 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 537 [M+H]+, 559 [M+Na]+

Bereiding 18-53

Een oplossing van het geschikte carbonzuur (bereiding 10 10 of 17) (0,15 nunol), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (22 mg, 0,16 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbo- diimidehydrochloride (34 mg, 0,18 mmol) en N-ethyldiiso-propylamine (130 μΐ, 0,73 mmol) in N,N-dimethylformamide (2 ml) werd behandeld met het geschikte amine (0,23 mmol) 15 en het reactiemengsel 18 uur bij kamertemperatuur geschud. Het reactiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest verdeeld tussen dichloormethaan (3 ml) en water (1 ml) . De fasen werden gescheiden en de organische laag gewassen met pekel (1 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en on-20 der vacuüm geconcentreerd. De rest werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0,88 ammoniak (98:2:0 veranderend naar 94:6:0,5 op volumebasis) om het gewenste product te geven.

25

Alternatief kan de volgende werkwijze worden toegepast voor de synthese van bereidingen 18 tot 53:

Een oplossing van geschikt carbonzuur uit bereiding 10 óf 17 (5,08 mmol) in N, N-dimethylf ormamide (60 ml) 30 wordt behandeld met 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (0,755 g, 5,59 mmol), het geschikte amine (5,08 mmol), l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride (1,07 g, 5,59 mmol) en triethylamine (1,49 ml, 10,67 mmöl) . De resulterende suspensie laat men 18 uur bij ka-| 35 mertemperatuur roeren. Het oplosmiddel wordt onder vacuüm verwijderd en de rest verdeeld tussen dichloormethaan (100 * ml) en verzadigde waterige bicarbonaat (50 ml) . De organi- ! 1028087 69 sche fase wordt afgescheiden en de waterige fase geëxtraheerd met dichloormethaan:methanol (95:5 op volumebasis, 2 x 20 ml) . De gecombineerde organische extracten worden gescheiden, gewassen met verzadigde waterige natriumchloride 5 (100 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel on der vacuüm verwijderd. De rest werd gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0,88 ammoniak (95:5:0,5 op volumebasis) om de gewenste verbinding te geven.

1028087 70

Bereidingen 18 tot 47

OTBDMS

Q1

Ji^j Η=°Λij O

HO

Q/ ^CH3

Nr. Q1__Gegevens_ 18 XHNMR (CDC13, 400 MHz) δ: -0,19 (s, 3H), -0,11 (s, 3H), 0,75 (s, 9H), 1,03 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), <fH3 2,57-2,85 (m, 7H) , 3,57 (m, 2H) , 3,74 (s, 3H) , 4,31 (m, 2H) , 4,65 H (m, 1H), 6,22 (m, 1H) , 6,63 (d, 1H), 6,67 (m, 1H), 6,76 (m, 1H), 6,82 (d, 1H), 7,03 (m, 2H), 7,12 (m, 1H) , 7,22 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) __MS (elektrospray) m/z 686 [M+H]+ 19 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,79 (s, 9H), 1,02 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), OH 2,60-2,71 (m, 3H) , 2,82-2,87 (4H, m)' 3,52 (s/ 2H), 4,36 (s, H y jj 2H), 4,65-4,68 (m, 1H) , 6,81- ^ 6,85 (m, 3H) , 6,99-7,03 (m, 2H) , 7,10 (s, 1H), 7,16-7,22 (m, 2H), 7,24-7,26 (d, 2H), 7,35 (d, 1H), 7,40 (d, 2H), 7,45 (d, 2H).

MS (elektrospray) m/z 730 [M-H]‘ |__j_ I, 732 [M+H]+_ 1028087 71 20 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,80 (s, 9H) , 1,02 (s, 3H), 1,05 (s, 3H), ? 2,61-2,71 (m, 3H) , 2,83-2,87 H (4H, m), 3,52 (s, 2H) , 4,29 (s, 2H), 4,66-4, 69 (m, 1H) , 6,72 (d, oh 1H), 6,84 (d, 1H), 7,00-7,05 (m, 4H) , 7,08 (s, 1H) , 7,147,22 (m, 2H), 7,35 (s, 1H) MS (APCI) m/z 688 [M-H]", 690 __[M+H] *_ 21 1HNMR (400 MHz, CD3OD) 6: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,79 (s, I 9H) , 1,01 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 2,14 (s, 6H) , 2, 60-2,70 (m, 4H) , 2,82-2,87 (4H, m) , 3,48 (s, 2H) , 4,18 (s, 2H), 4,65-4,68 (m, 1H), 6,77 (s, 2H), 6,83 (d, 1H), 6,98-7,02 (m, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,14-7,21 (m, 2H), 7,35 (s, 1H).

___|_|MS (APCI) m/z 684 [M+H]+_ 1028087 72 22 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,03 (s, 3H), 0,79 (s, 9H), 0,89 (s, 3H), 0,91 (s, 3H) , 2,50-2,60 (m, 3H), 2,76-2,81 (m, HO1H), 2,85 (s, 3H) , 3,48 (s, 2H) , 4'64 (dd' 1H>' 4'78 <s' 2H>' { J 6,85 (d' 1H)' 6,95-6,97 (m, 2H) , 7,01 (d, 1H), 7,09-7,14 (m, 3H), 7,26 (dd, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,39 (dd, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,89 (d, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 706 __;__[M+H] +, 704 [M-H] ~_ 23 XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,79 (s, 9H), 1,00 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 2,60-2,71 (m, 3H) , 2, 82-2,86 (m, 1H), 2,86 (s, 3H) , 3,54 (s, 2H) , 4,45 (s, 2H) , 4,68 (dd, 1H) , 6,85 (d, 1H), 7,03 (m, 4H) , 7,09 (s, 1H), 7,17-7,27 (m, 3H), 7,35 (s, 1H), 7,54-7,61 (m, 3H).

__MS (elektrospray) m/z 704 [M-H]~ 1028087 73 24 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,79 (s, 9H), 0,99 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 2,56-2,66 (m, 3H), 2,80-2,83 (m, H f^jj 1H), 2,85 (s, 3H) , 3,53 (s, 2H) , 4,40 (s' 2H)' 4,67 (dd' ih)' sjA;. 6,81 (d, 2H), 6,84 (d, 1H) , 7,01

Un (d, 2H) , 7,09 (s, 1H), 7,13 (d, 1H), 7,18-7,20 (m, 2H), 7,29 (dd, 1H), 7,33-7,40 (m, 6H).

MS (elektrospray) m/z 730 [M-H]~ ___, 732 [M+H]*, 754 [M+Na]+_ 25 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,18 (s, 3H), -0,01 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 1,01 (s, 3H), 1,04 (s, 3H), 2,58-2,68 (m, 2H) , 2,86 (s, 3H) , 3,34 (s, 2H), 3,53 (s, 2H) , 4,41 IJ (s, 2H), 4,66-4,69 (m, 1H), 6,73 (dd, 1H) , 6,84 (d, 1H) , 6,94-6,97 (m, 2H) , 6, 99-7,02 (m, 2H) , 7,08 (s, 1H), 7,16-7,21 (m, 4H) , 7,31 (t, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,40-7,42 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 730 [M-H]“ 1 028087 74 26 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,17 (s, 3H), 0,00 (s, 3H), 0,17 (s, 6H) , 0,80 (s, 9H), 1,09 (s, 3H),

HaC CHj 1,12 (s, 3H) , 1,21 (s, 6H) , 2.67- 2,78 (m, 3H) , 2,87 (s, 3H) , 2,91-2,96 (m, 1H) , 3,36 (s, 2H) , OTBDMS . 3,43 (s^ 2H), 4,71-4,75 (m, 1H) , 6,73 (d, 2H), 6,86 (d, 1H), 7,03-7,06 (m, 4H), 7,15-7,22 (m, 3H), 7,37 (d, 1H).

___MS (APCI) m/z 812 [M+H]+_ 27 XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,18 (s, 3H), -0,01 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 1,03 en 1,08 (2s, 3H), 1,01 en 1,07 (2s, 3H), 1,25-1,29 (2t, h3C JC , 3H) , 2,65-2,69 (m, 2H) , 2,87 en 2,88 (2s, 3H), 2,92 (q, 2H) , 3,75 en 3/82 (2s, 2H), 4,04 (s, °H 2H) , 4,55 en 4,57 (2s, 2H), 4.68- 4,71 (m, 1H), 6,86 (dd, 1H), 6,98 (d, 2H), 7,03 (dd, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,13-7,15 (m, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,24 (dd, 1H), 7,36 (dd, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 750/752 |__J_ [M-H]'_ 1028087 75 28 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,21 en -0,19 (2s, 3H) , -0,05 en - 0,03 (2s, 3H), 0,76 en 0,78 (2 s, 9H), 0,96 en 0,98 (2s, 3H), 0,93 en 0,97 (2s, 3H), f”* 2,52-2,56 (m, 2H) , 2,60-2,64 (m, 2H) , 2,86 (s, 3H) , 2,85 en 3.02 (2s, 2H) , 3,34 (s, 3H) , 3,84 (s, 2H), 6,84 (d, 2H), 6,97-7,01 (m, 1H) , 7,02-7,03 (m, 1H), 7,05 (d, 1H), 7,11 (d, 1H), 7,13-7,15 (m, 1H) , 7,17- 7,20 (m, 1H), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,35-7,36 (m, 1H) , 7,56- 7,60 (m, 2H) , 7,65-7,68 (m, 1H), 7,97 (d, 1H).

MS (elektrospray) m/z 750/752 __.__[M-H]~_ 29 1HNMR (400 MHz, CD30D) 5: -0,18 (s, 3H), -0,01 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 1,02 (s, 3H), 1,04 (s, 3H) , 2,582,68 (m, 2H) , 2,86 (s, 3H), 3,34 (s, 2H) , 3,52 (s, 2H)' 4,40 (s' 2H)' 4'66“4'69 (m, 1H) , 6,84 (m, 3H) , 6,97- 7.02 (m, 2H), 7,07-7,18 (m, 6H), 7,28 (t, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,40-7,42 (m, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 730 [M- |__J_[ηΓ_ 1028087 76 30 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,18 (s, 3H), 0,00 (s, 3H), 0,80 (s, 9H) , 0, 95-1,05 (m, 6H) , 2,50- 2,90 (m, 9H) , 3,68 en 3,74 (2t, 2H) , 3,82 (s, 2H) , 4,57 en 4,59 (2s, 2H), 4,62-4,69 (m, 1H), 6, 50-6, 62 (m, 2H) , 6,78-7,23 (m, 7H), 7,37-7,39 (m, 1H).

__MS (APCI) m/z 680 [M-H]~_ 31 1HNMR (400 MHz, CD3OD) 6: -0,18 (s, 3H), 0,01 (s, 3H), 0,81 (s, 9H), 1,07 (s, 3H), 1,10 (s, 3H), 1,45-1, 62 (m, 6H) , 2,45- 2,54 (m, 2H) , 2, 62-2,76 (2H, m) , 2,86 (s, 3H) , 3,15-3,22 (m, 2H), 3,44 (s, 2H), 4,65-4,70 (m, 1H) , 6, 62-6, 65 (m, 2H) , 6,83 (d, 1H), 6,93 (d, 1H), 6,96-7,22 (m, 6H), 7,36 (s, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 698 __[M+H]+, 696 [M-H]~_ 32 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,94 (s, 3H), 0,00 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 1,08 (s, 3H), 1,12 (s, Η 3H), 2,62-2,77 (m, 6H), 2,85 {<(s' 3h)' 3,36 (t'2H)'3,42 (s' 2H), 4, 64-4,70 (m, 1H) , 6,63 (d, 2H), 6,84 (d, 1H), 9,95 (d, 2H) , 7,00-7,06 (3H, m), 7,09 (d, 1H), 7,69 (t, 1H), 7,37 (s, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 668 [M- [__J_1ΗΓ____ 1028087 - 77 33 XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,16 (s, 3H), 0,01 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), 1,05 (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 2,64-2,74 (m, 3H) , 2,85- oh 2,90 (m, 4H) , 3,52 (s, 2H) , h f JJ 4,36 (s, 2H) , 4,68-4,70 (m, f 1H), 6,65 (d, 1H), 6,80-6,81

Cl (m, 1H), 6,86 (d, 1H) , 7,04 (d, 2H) , 7,10-7,12 (ra, 2H) , 7,16- 7.23 (m, 2H), 7,37-7,38 (m, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 688 [M- __ΗΓ_ 34 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,16 (s, 3H) , 0,02 (s, 3H) , 0,82 (s, 9H), 1,08 (s, 3H), 1,11 (s,

Cl 3H), 2,68-2,78 (m, 3H) , 2,89- X^OH 2,96 (m, 4H) , 3,52 (s, 2H) , 4'21 (s' 2li)' 4^71-^74 C‘ 1H), 6,86 (d, 1H), 7,03-7,07 (m, 3H) , 7,11 (s, 2H) , 7,15- 7.24 (m, 2H), 7,36-7,37 (m, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 724/726 |___J_ [M+H] *, 722/724 [M-H]~_ 1028087 78 35 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,16 (s, 3H), 0,01 (s, 3H), 0,82 (s, 9H), 1,09 (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 2,68-2,78 (ra, 3H) , 2,89- 2,96 (m, 4H) , 3,53 (s, 2H) , 4,21 (s, 2H), 4,71-4,74 (m, C' . 1H), 6,79 (d, 1H), 6,84-6,87 (m, 2H), 7,04-7,11 (m, 3H), i 7,17-7,25 (m, 2H), 7,39 (s, 1H) .

MS (APCI) m/z 724/726 [M+H]+, _____ 722/724 [M-H] ~_ 36 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: -0,20 (s, 3H), -0,04 (s, 3H), 0,78 (s, 9H), 0,93 (s, 3H), 0,95 (s, H 3H), 2,54-2,63 (m, 4H), 2,84 (s, 3H) , 3,46 (s, 2H) , 4,63- 4,67 (m, 3H) , 6,72 (d, 1H) , 6,84 (d, 1H), 6,95-7,02 (m, 2H), 7,10-7,14 (m, 2H), 7,20 (d, 1H), 7,35-7,39 (m, 4H), 7,82-7,85 (m, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,20-8,22 (m, 1H).

MS (APCI) m/z 706 [M+H]+, 728 L__L__ [M+Na] +, 704 [M-H]~_ 1028087 79 37 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,80 (s, 9H), 1,03 (s, 3H), 1,06 (s, 3H), 2,63-2,73 (m, 2H), 2,86 T (s, 3H), 3,34 (s, 2H), 3,53 (s, H [\ 2H), 4,34 (s' 2H)/ 4,66-4,69 (m, 1H), 6,84 (d, 1H) , 6,87- 6,90 :(m, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,01-7,04 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 7,15-7,22 (m, 2H), 7,35 ((d, 1H) dpm.

MS (APCI) m/z 724 [M+H]+, 746 ___[M+Na]+_ 38 2HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 en 0,18 (2s, 3H) , -0,02 en - 9H 0,01 (2s, 3H), 0,80 (s, 9H), Γ°Η|Ίΐ 1,03-1,07 (m, 6H) , 1,09 (t, 3H), 2,64-2,71 (m, 2H) , 2,87 (s, 3H) , 3,37 (q, 2H) , 3,61 en 3,69 (2s, 2H) , 3,80 en 3,82 (2s, 2H), 4,50 en 4,53 (2s, 1H) , 4,67-4,71 (m, 1H) , 6,46- 6,51 (m, 1H) , 6, 62-6, 67 (m, 1H), 6,69-6,74 (m, 1H), 6,84 (dd, 1H), 6,97-7,25 (m, 5H), 7,35 (d, 1H) dpm.

___MS (APCI) m/z 718/720 [M+H]+ i 1028087 80 39 XH NMR (400 MHz, CDC13) 6: (ro- tameren) -0,21 en -0,18 (2s, _u 3H) , -0,02 en -0,01 (2s, 3H), ïHa I T 0,76 (s' 9H)· x'24 (s' 6H)' 2,88 (m, 3H) , 2,94 en 2,95 (2s, ci 3H) , 2,98 (m, 4H) , 3,69 en 3,76 (2s, 2H), 4,53 (m, 2H) , 4,62- 4,70 (m, 1H), 6,60-7,23 (m, 10H) .

LRMS (elektrospray): m/z (M+H]+ __ 704, [M+Na]* 726._ 40 XH NMR (4 00 MHz, CD3OD) δ: (ro- tameren) -0,18 en -0,19 (2s,

OH

JT 3H) , -0,03 en -0,02 (2s, 3H) , CHS |^|| 0,79 (s, 9H) , 1,00-1,05 (m, 6H) , 2,61-2,66 (m, 2H) , 2,87 F F (s, 3H), 2,92 en 2,97 (2s, 3H), 3,77 en 3,82 (2s, 2H) , 4,58 en 4,65 (2s, 2H), 4,66-4,69 (m, 1H), 4,80 (s, 2H), 6,71 (d, 1H), 6,84 (d, 1H), 6,91 (s, 2H), 6,96-7,03 (m, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,19- 7,24 (m, 1H), 7,35 (s, 1H) dpm/ LRMS (elektrospray): m/z 738 ___[M-H]+_ 1028087 81 41 XH NMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,13 (s, 3H), 0,04 (s, 3H), 0,85 (s, 9H), 1,10 (s, 3H), 1,12 (s, ^Y°H 3H), 2,69-2,78 (m, 3H), 2,89- 2,94 (m, 4H), 3,50 (s, 2H) , η Jf J 4,28-4,29 (m, 2H), 4,71-4,74 (m, 1H), 6, 87-6, 92 (m, 3H) , 7,04-7,09 (m, 3H), 7,10 (s, 1H), 7,13-7,26 (m, 4H) , 7,27- 7,32 (m, 3H), 7,39 (d, 1H) dpm.

| LRMS (elektrospray): m/z [M+H]+ __733, [M-H]~ 731._

42 XH NMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,12 OH

I (s, 3H), 0,05 (s, 3H), 0,85 (s, [\ 9H), 1,15 (s, 3H), 1,17 (s, 3H) , 2,74-2,84 (m, 3H) , 2,92 (s, 3H) , 2,95-3,02 (m, 1H) , 3,53 (s, 2H), 4,34 (s, 2H), 4,75-4,79 (m, 1H) , 6,74-6,81 (m, 3H), 6,90 (d, 1H) , 7,06- 7,10 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 7,16-7,32 (in, 7H) , 7,40 (d, 1H) dpm.

LRMS (APCI): m/z [M+H]+ 733, [__J_ [M-H] ~ 731._ 1028087 82 43 XH NMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H), -0,02 (s, 3H), 0,79 (s, 9H), 1,01 (s, 3H), 1,04 (s, 3H)/ 2,14 (s, 6H), 2,60-2,70 H J |j (m, 3H), 2,85 (Sr 3H) , 2,82- 2,87 (m, 1H) , 3,48 (s, 2H),4,18 CHS (s, 2H) , 4,65-4,68 (m, 1H) , 6,77 (s, 2H), 6,83 (d, 1H), 6,98-7,02 (m, 2H), 7,08 (s, 1H), 7,14-7,21 (m, 2H), 7,35 (d, 1H) dpm.

__LRMS (APCI): m/z [M+H]+ 684 44 XHNMR (400 MHz, CDC13) δ: -0,81 (s, 3H), 0,00 (d, 3H), 0,81 (s, 9H) , 0, 95-1,05 (m, 6H) , 2,50- [ jl 2,90 (m, 9H) , 3, 60-3, 82 (m, 4H), 4,48-4,70 (m, 3H) , 6,40- 6,60 (m, 2H), 6,80-7,41 (m, 8H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 682 ___[M+H]+, 704 [M+Na] +_ 45 XHNMR (400 MHz, DMSOdg) δ: -0,90 (m, 3H) , 0,05 (m, 3H) , 0,8 (m, 9H 9H) , 1,21-1,29 (m, 6H) , 2,60- 2,75 (m, 2H), 2,92 (s, 3H) , 2,98 (m, 2H) , 3,30 (m, 2H) , 3,71-4,00 (m, 4H), 4,61-4,81 (m, 2H), 4,89-4,91 (m, 1H) , 6,51-6,62 (m, 2H), 6,92-7,49 (m, 8H), 7,72-7,80 (m, 1H) dpm.

__MS (elektrospray) m/z 60 [M-H]~ I 1028087 83 46 1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: -0,16 H (s, 3H) , -0,05 (s, 3H), 0,80 ^ V^0H (s, 9H) , · 1,10 (s, 3H) , 1,18 (s, 3H), 2,63 (d, 1H), 2,78 (m, 2H) , 2,83 (m, 4H) , 3,60 (d, 1H), 3,62 (d, 1H), 3,80 (m, 2H), 4,70 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 6,60 (m, 2H), 6,81 (d, 1H), 7,08 (m, 2H), 7,20 (m, 7H) dpm.

__;_MS (APCI) m/z 668 [M-H]~_ 47 1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: -0,18 H (s, 3H), -0,10 (s, 3H), 0,78 (s, 9H), 1,10 (s, 3H) , 1,18 (s, 3H) , 2,63 (d, 1H) , 2,80 (m, ij 6H), 3,60 (d, 1H), 3,78 (m, 3H) , 4,75 (m, 1H) , 5,10 (m, 1H), 6,38 (d, 1H), 5,78 (d, 2H), 7,05 (m, 1H), 7,20 (m, 8H) dpm.

_[MS (APCI) m/z 670 [M+H]+_

Bereidingen 48-53 OTBDMS 0

IJ h3c ch3 ΐ IJ

HO

HN

θ'" ''CH, 1028087 84 48 XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,16 (s, 3H), 0,00 (s, 3H), 0,82 (s, l 9H), 1,13 (s, 3H), 1,17 (s, 3H) , 2,68-2, 93 (m, 7H) , 4,64 (s, 2H), 4,69-4,74 (m, 1H) , 6, 80-6, 87 (m, 2H) , 7,05 (dd, 1H), 7,30-7,47 (m, 4h, 7,54 (d, 2H), 7,75-7,78 (m, 3H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 718 ___[M+H]+_ 49 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,15 (s, 3H), -0,01 (s, 3H), 0,22 HH3C CH3 (s, 6H), 0,83 (s, 9H) , 1,02 (s, 9H), 1,11 (s, 3H) , 1,13 (s, [I 3H) , , 1,41 (s, 6H) , 2,67-2,92 ^'^'XTTBDMS (m, 7H) , 3,59 (s, 2H) , 4,70- 4,73 (m, 1H), 6,83-6,90 (m, 3H), 7,07 (dd, 1H), 7,32-7,40 (m, 5H), 7,55-7,58 (m, 2H) dpm. MS (elektrospray) m/z 799 ___[M+H] +_ 50 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,19 (s, 3H) , -0,03 (s, 3H) , 0,79 (s, 9H) , 2, 67-2,92 (m, 7H) , |! JL 4,68-4,71 (m, 3H) , 6,86-6,88

OH

(m, 3H), 7,04 (d, 1H) , 7,31- 7,33 (m, 1H), 7,37-7,49 (m, 7H), 7,61 (m, 1H), 7,76-7,80 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 799 [M+H]+, 740 [M+H]+ 51 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,27 [__]__ (s, 3H) , -0,10 (s, 3H) , 0,71 1 028087 - 85 (s, 9H), 0,99 (s, 3H), 1,02 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,56-2,81 (m, 9H) , 3,39- | H ?h3 3, 43 (m, 2H) , 4,59-4,63 (m, {/ΝνΑΠ 1h)' 6,48 (s' 1H)' 6'77-6,79 (m, 2H) , 6, 95-6, 97 (m, 1H) , CHS 7,22-7,29 (m, 3H) , 7,55-7,59 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 685 ___[M+H] *_ 52 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,18 CH (s, 3H), -0,01 (s, 3H), 0,80 CH, <3/ 9H), 1,09 (s, 3H), 1,12 (s, 1 XjC 3 3H)' 2/14 (s' 3H)' 2'28 (s' 0H 3H) , 2,65-2,92 (m, 9H) , 3,47- 3,51 (m, 2H), 4,68-4,71 (m, 1H), 6,55 (d, 1H), 6,83-6,87 (m, 2H), 7,03-7,06 (m, 1H), 7,32-7,38 (m, 3H), 7,64-7,68 (m, 2 H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 685 ___[M+H] +_ 53 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: -0,27 (s, 3H) , -0,07 (s, 3H), 0,75 (s, 9H), 1,03 (s, 3H), 1,06 (s, ch 3H>' 2, H (s, 3H) , 2,60-2,85 { XX 9H)' 3/ 47-3,51 (m, 2H), 4,63-4,66 (m, 1H) , 6,62 (d, 1H), 6,80-6,86 (m, 2H), 6,92 (m, 1H), 6,98-7,01 (m, 1H), 7,26-7,33 (m, 3H), 7,57-7,61 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 671 _ [M+H] *__ 1 02 80 87 i 86

Bereiding 54: N-(4-Broombenzyl)-2-(3—{2—[((2R)-2-{[tert- butyl(dimethyl)silyl]oxy}-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfo-nyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)aceet-amide ^ Sr OTBDMS llf'

10 «N. ^CHS

//N' O °

Bereid met behulp van de procedure voor bereiding 18 15 met behulp van het zuur uit bereiding 10 en (4-broom- benzyl)amine om de titelverbinding te geven als een gele gom.

1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: -0,18 (s, 3H) , 0,00 (s, 3H), 0,81 (s, 9H), 1,02 (s, 3H), 1,04 (s, 3H) , 2,61-2,72 (m, 4H) , 20 2,83 (s, 3H) , 3,53 (s, 2H) , 4,33 (s, 2H) , 4,65-4,70 (m, 1H), 6,83-6,86 (d, 1H), 7,00-7,44 (m, 10H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 720 [M+H]+, 742 [M+H]+ 1 028087 87

Bereiding 55: 2-(3-{2-[ ((2R)-2-{[tert-butyl(dimethyl)- silyl]oxy}-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[(31-hydroxybifenyl- 4-yl)methyl]aceetamide

OTBDMS

H Jj °H

J J H3C CH, [I I H

10 I

HNvc/CH3 //*

O O

15 Een oplossing van het bromide uit bereiding 56 (0,50 g, 0,70 mmol), (3-hydroxyfenyl)boronzuur (0,19 g, 1,4 mmol), (1,1'-bis(difenylfofino)ferroceen)dichloórpalladi-um(II) (36 mg, 0,04 iranol) in N,N-dimethylformamide (8 ml) werd behandeld met 2 M waterige natriumcarbonaat (2 ml) en 20 de resulterende suspensie 16 uur tot 80°C verwarmd. Het reactiemengsel werd afgèkoeld tot kamertemperatuur en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. De rest werd geazeo-tropeerd met tolueen (50 ml) , opnieuw opgelost in ethyla-cetaat (50 ml) en geneutraliseerd met 1 N waterig chloor-25 waterstof zuur (tot pH 7) . De organische laag werd afge scheiden en de waterige laag geëxtraheerd met verder ethylacetaat (2 x 50 ml). De gecombineerde organische extracten werden gewassen met water (100 ml), verzadigde waterige natriumchloride (100 ml) , gedroogd (natriumsulfaat) 30 en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om een oranje gom te geven (515 mg) welke zonder verdere zuivering werd gebruikt.

1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: -0,13 (s, 3H) , 0,04 (s, 3H) , 0,84 (s, 9H) , 1,11 (s, 3H) , 1,13 (s, 3H) , 2,74-2,97 (m, 7H) , 35 3,55-3,63 (m, 2H), 4,42-4,45 (m, 2H) , 4,73-4,76 (m, 1H), 6,89-6, 94 (m, 3H) , 7,15-7,30 (m, 9H) , 7,41 (d, 1H) , 7,51 (s, 1H), 7,53 (s, 1H) dpm.

1028Ö87 88 MS (elektrospray) m/z 732 [M+H]+, 754 [M+HJ+

Bereiding 56: 2-(3-{2-[((2R)-2-([tert-Butyl(dimethyl)- silyl]oxy}-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-5 ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-[(2'-hydroxybifenyl- 4-yl)methyl]aceetamide

OTBDMS

10 °H

I „ H,C CH, I U

Ho'^f °

//\N

15 o O

Bereid uit (2-hydroxyfenyl)boronzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 55 om de titelverbinding te geven als een bruine olie.

20 1HNMR (400 MHz, CD3OD) 6: -0,13 (s, 3H), 0,04 (s, 3H) , 0,84 (s, 9H) , 1,12 (s, 3H) , 1,14 (s, 3H) , 2,72-2,99 (m, 7H) , 3,58-3,61 (m, 2H) , 4,43-4,45 (m, 2H, 4,74-4,78 (m, 1H) , 6,78-6,81 (m, 1H) , 6, 90-6, 92 (m, 1H) , 7,02-7,10 (m, 2H) , 7,15-7,39 (m, 8H, 7,41 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,55 (s, 1H) 25 dpm.

MS (elektrospray) m/z 755 [M+H]+ i

Bereiding 57: 2-Hydroxy-l-naftamide 30 35 1028087 89

Een oplossing van 2-hydroxy-l-naftoëzuur (5,0 g, 26,6 inmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydro- chloride (5,6 g, 29,2 mmol), en 1-hydroxybenzotriazopl (3,95 g, 29,2 mmol) in tetrahydrofuran (70 ml) werd 30 mi-5 nuten bij kamertemperatuur geroerd voorafgaande aan de toevoeging van 0,880 NH3 (6 ml). De resulterende suspensie werd 2 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemeng-sel werd gefiltreerd en het filtraat verdund met water (80 ml) en geëxtraheerd met ethylacetaat (4 x 80 ml) . De ge- 10 combineerde organische extracten werden gewassen met water (50 ml x 2), verzadigde waterige natriumchlori.de (50 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om een oranje olie te geven. Zuivering door ko-lomchromatografie over silicagel eluerend met dichloorme- 15 thaan:methanol:0, 880 ammoniak 95:5:0,5 gaf de titelverbin-ding als een roze vaste stof (1,83 g).

XHNMR (400 MHz, CDCI3) 6: 6,11-6,35 (bs, 2H) , 7,17 (d, 1H) , 7,36 (dd, 1H), 7,54 (dd, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,84 (d, 1H)> 8,22 (d, 1H), 11,70-11,88 (bs, 1H) dpm.

20 MS (elektrospray) m/z 186 [M-H]"

Bereiding. 58: 6-Hydroxy-2-naftamide

25 iTT

o 1 2 3 4 5 6 1028087

Een oplossing van 6-hydroxy-2-naftoëzuur (1,88 g, 2 9,99 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide- 3 hydrochloride (2,11 g, 10,98 mmol), 1-hydroxybenzotriazool 4 (1,48 g, 10,98 mmol) en ammoniumcarbonaat (4,80 g, 49,95 5 mmol) in N,N-dimethylformamide (70 ml) liet men 3 dagen 6 onder een stikstofatmosfeer bij kamertemperatuur roeren. Hét oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en de rest verdeeld tussen verzadigde waterige natriumwaterstofcarbo- 90 naat (50 ml) en ethylacetaat (6 x 50 ml). De gecombineerde organische extracten werden gewassen met water (25 ml), verzadigde waterige natriumchloride (25 ml), gedroogd (na-triumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd.

5 De vaste stof werd geabsorbeerd op silicagel en gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0, 880 ammoniak (95:5:0,5 veranderend naar 90:10:1) en gaf de titelverbinding als een vaal gele vaste stof (1,1 g).

10 1HNMR (400 MHz, CD3GD) δ: 7,14 (d, 1H) , 7,15 (s, 1H) , 7,79 (d, 1H), 7,83 (d, 2H), 8,32 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 186 [M-H]“

Bereiding 59: 1-(Aminomethyl)-2-naftol 15 n 20

Een oplossing van boraan in tetrahydrofuran (19,23 ml van een 1 M oplossing, 19,23 mmol) werd druppelsgewijs toegevoegd aan een oplossing van het amide uit bereiding 25 57 (0,90 g, 4,81 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) onder een stikstofatmosfeer. De reactie werd vervolgens 2 uur verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. De oplossing werd afgekoeld, behandeld met 6 M chloorwaterstofzuur (10 ml) en een verdere 2 uur onder terugvloeikoeling gekookt.

30 De resulterende suspensie werd afgekoeld en de pH bijgesteld tot pH 9 door toevoeging van 0, 880 NH3 en geëxtraheerd met ethylacetaat (50 ml x 3). De gecombineerde organische extracten werden gewassen met verzadigde waterige natriumchloride (20 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het 35 oplosmiddel onder verminderde druk verwijderd. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0, 880 ammoniak (95:5:0,5 ver- 1028087 91 anderd naar 90:10:1) gaf de titelverbinding als een roze vaste stof (0,19 g).

1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 4,41 (s, 2H) , 7,07 (d, 1H) , 7,23 (1H, dd), 7,43 (dd, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,87 5 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 174 [M+H]+, 172 [M-H]"

Bereiding 60: 6-(Aminomethyl)-2-naftol

10 OH

ίΐΊΊ^ 15

Bereid volgens de werkwijze voor bereiding 59 met behulp van het amide uit bereiding 58.

1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 3,91 (s, 2H) , 7,03-7,08 (m, 2H) , 7,36 (dd, 1H), 7,61 (d, 1H) , 7,66 (d, 1H), 7,69 (s, 1H) 2 0 dpm.

MS (elektrospray) m/z 172 [M-H]“

Bereiding 61: tert-Butyl-(3-joodbenzyl)carbamaat

25 CH, O

ÏVWy H [I \ 1 2 3 4 5 6 1028087 2

Een suspensie van 3-joodbenzylaminehydrochloride 3 (4,95 g, 18,4 mmol) in dichloormethaan (100 ml) werd be 4 handeld met triethylamine (3,1 ml, 22 mmol) en di-t-butyl- 5 dicarbonaat (4,40 g, 20 mmol) en de resulterende oplossing 6 liet men 1,5 uur onder een stikstofatmosfeer bij kamertemperatuur roeren. Het reactiemengsel werd gewassen met 2 M chloorwaterstofzuur (30 ml), water (30 ml), gedroogd (na- 92 triumsulfaat), en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof (6,43 g).

1HNMR (40Ó MHz, CDCI3) 8: 1,46 (s, 9H) , 4,21-4,30 (m, 2h, 5 4,79-4,89 (bs, 1H) , 7,06 (dd, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,63 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 332 [M-H]“, 356 [M-Na]+

Bereiding 62: tert-Butyl-(2-broombenzyl)carbamaat 10 (f^rBr

H

II AcH3 O CH3 15

Bereid uit 2-broombenzylamine met behulp van de werkwijze van bereiding 61 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

20 1HNMR (400 MHz, CD3OD) 8: 1,50 (s, 9H) , 4,33 (s, 2H) , 7,18- 7,22 (m, 1H), 7,35-7,38 (m, 2H), 7,59 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 308/310 [M-Na]+

Bereiding 63: tert-Butyl-[(4’-hydroxybifenyl-3-yl)- 25 methyl]carbamaat

?H3 0 ^°H

H*c A a _ _ 1 j

30 AA

Een oplossing van het jodide uit bereiding 61 (0,7 5 g, 2,25 mmol), 4-hydroxyfenylboronzuur (0,62 g, 4,50 35 mmol), 1,1'-bis(difenylfosfino)ferrocenylpalladium(II)- chloride (0,11 g, 0,14 mmol) in N,N-dimethylformamide (14 ml) werd behandeld met 2 M waterige natriumcarbonaat (4 1028087 · 93 ml) en het resulterende mengsel werd 16 uur onder een stikstofatmosfeer bij 80°C verwarmd. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en de rest gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met 5 ethylacetaatrpentaan (1:3) om de titelverbinding te geven als een vaal roze kristallijne vaste stof (0,73 g).

1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: 1,47 (s, 9H), 4,33-4,41 (m, 2H) , 4,87-4,94 (bs, 1H) , 6,89 (d, 2H) , 7,21 (d, 1H) , 7,37 (dd, 1H), 7,43-7,45 (m, 4H) dpm.

10 MS (elektrospray) m/z 298 [M-H]-, 322 [M-Na]+

Bereiding 64: tert-Butyl-[(2'-hydroxybifenyl-S-yl)- methyl]carbamaat H U -Ί

HscT T T J

CH, O JL

HO

20

Bereid uit het jodide van bereiding 61 en 2-hydroxy-boronzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 63 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

25 1HNMR (400 MHz, CDC13) 6: 1,46 (s, 9H) , 4,38 (d, 2H) , 4,90 (bs, 1H, 5,24 (bs, 1H) , 6,97-7,01 (m, 2H) , 7,22-7,47 (m, 6H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 322 [M+Na]+ 30 Bereiding 65: tert-Butyl-[(2'-hydroxybifenyl-2-yl)- methyl]carbamaat ...... Xj 35 (1 ίΓ h if Pch3 o ch3 ,1 02 8 0 87 - 94

Bereid uit het bromide van bereiding 62 en 2-hydroxy-5 boronzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 63 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof. ^NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,46 (s, 9H) , 4,15 (d, 2H), 6,91- 6,96 (m, 2H), 7,10 (dd, 1H), 7,17-7,41 (m, 5H) dpm.

MS (eléktrospray) m/z 298 [M-H]- 10

Bereiding 66: tert-Butyl-[(31-hydroxybifenyl-2-yl)- methyl]carbamaat

OH

cft 11 I ch3 on 0 CH3 20 ?

Bereid uit het bromide van bereiding 62 en 3-hydroxy-boronzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 63 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

25 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,48 (s, 9H), 4,21 (s, 2H), 6,76- 6,83 (m, 3H), 7,21-7,43 (m, 5H) dpm.

MS (elektröspray) m/z 298 [M^-H]”

Bereiding 67: tert-Butyl-[(3'-hydroxybifenyl-3-yl)- 30 methyl]carbamaat

OH- O

H3C J3 X Γ X

3 Η I

35 1028087 95

Bereid uit het jodide van bereiding 61 en 3-hydroxy-fenylboronzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 63 om de titelverbinding te geven als een bruine gom.

1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: 1,48 (s, 9.H) , 4,37 (d, 2H) , 4,86-5 4,91 (bs, 1H), 6,82 (dd, 1H), 7,04 (t, 1H), 7,11 (d, 1H), 7,24-7,30 (m, 2H) , 7,36 (t, 1H) , 7,43 (d, 1H) , 7,45 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 298 [M-H]", 597 [2M-H]" 10 Bereiding 68: 3'-(Aminomethyl)bifenyl-4-ol fY» 15 het fenol uit bereiding 63 (0,73 g, 2,43 mmol) werd behandeld met 4 M HC1 in dioxan (6 ml, 24,3 mmol) en de 20 resulterende oplossing liet men 3 uur bij kamertemperatuur roeren. Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en gaf de titelverbinding als èen kleurloze vaste stof.

^NMR (400 MHz, CD3OD) 6: 4,17 (s, 2H) , 6,87 (d, 2H) , 7,34 (d, 1H), 7,45-7,50 (m, 3H, 7,61 (d, 1H), 7,65 (s, 1H) dpm. 25 MS (elektrospray) m/z 198 [M-H]", 200 [M+H] +

Bereiding 69: 3'-(Aminomethyl)bifenyl-3-ol 30 JL jl 35 Bereid uit het fenol van bereiding 67 met behulp van de werkwijze van bereiding 68 om de titelverbinding te geven als een bruine gom.

1028087 96 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 4,17 (s, 2H), 6,80 (dd, 1H), 7,04 (t, 1H), 7,08-7,11 (m, 1H), 7,26 (t, 1H), 7,41 (d, 1H),7*50 (t, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,69 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 198 [M-H]‘, 200 (M+H]+ 5

Bereiding 70: 31-(Aminomethyl)bifenyl-2-ol 10 II 1

Bereid uit het fenol van bereiding 63 met behulp van 15 de werkwijze van bereiding 68 óm de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 4,19 (s, 2H) , 6, 93-6, 97 (m, 2H, 7,19-7,23 (m, 1H), 7,31 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,50-7,53 (m, 1H), 7,65-7,69 (m, 2H) dpm.

20 MS (elektrospray) m/z 200 [M+H]+

Bereiding 71; 21-(Aminomethyl)bifenyl-2-ol 25 30 Bereid uit bereiding 65 met behulp van de werkwijze van bereiding 68 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 4,03 (s, 2H) , 6, 99-7,40 (m, 2h, 7,19 (dd, 1H), 7,30-7,34 (m, 2H), 7,50-7,58 (m, 3H) dpm.

35 MS (elektrospray) m/z 200 [M+H]+ 1028067

Bereiding 72: 21 -(Aminomethyl)bifenyl-3-ol 97

OH

Λ 10 Bereid uit bereiding 66 met behulp van de werkwijze van bereiding 68 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 4,15 (s, 2H) , 6,79-6, 84 (m, 2H), 6,88-6,91 (m, 1H), 7,31-7,35 (m, 1H) , 7,37-7,40 (m, 1H), 15 7,48-7,54 (m, 2Hj, 7,56-7,60 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 200 [M+H]+

Bereiding 73: 4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}fenyl)- acetonitril 20 XX*

TBDMSO

25

Een oplossing van (4-hydroxyfenyl)acetonitril (6,01 g, 45,1 mmol) in N,N-dimethylformamide (60 ml) werd behandeld met imidazool (3,81 g, 58,6 mmol), tert-butyldi-30 methylsilylchloride (7,49 g, 49,6 mmol) en N,N,-dimethyl-aminöpyridine (20 mg) en de resulterende oplossing liet men 16 uur onder een stikstofatmosfeer bij kamertemperatuur roeren. Het reactiemengsel werd verdund met water (200 ml) en geëxtraheerd met ethylacetaat (200 ml x 2). De 35 gecombineerde organische extracten werden gewassen met verzadigde waterige natriumchloride (200 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwij- 1028087 98 derd. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met ethylacetaat:pentaan (0:100 veranderend naar 10:90) gaf de titelverbinding als een vaal gele olie (9,44 g).

5 1HNMR (400 MHz, CDC13) 5: 0,19 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 3,66 (s, 2H), 6,82 (d, 2H), 7,17 (d, 2H) dpmf MS (APCI) m/z 265 [M-NH4] +

Bereiding 74: 2-(4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}~ 10 fenyl)-2-methylpropaannitril 15

TBDMSO

Een oplossing van het nitril uit bereiding 73 (5,62 g, 22,7 mmol) , methyljodide (3,11 ml, 50 mmol) en 18-20 kroon-6 (1,5 g, 5,6 mmol) in droge tetrahydrofuran (300 ml) werd onder een stikstofatmosfeer afgekoeld tot -78°C. Kalium-tert-butoxide (50 ml van een 1 M oplossing in tetrahydrofuran, 50 mmol) werd druppelsgewijs gedurende 20 minuten toegevoegd en met liet het reactiemengsel vervol-25 gens geleidelijk opwarmen tot kamertemperatuur. Na 2 uur werd de reactie opnieuw afgekoeld tot -78°C en geblust door toevoeging van verzadigde waterige ammoniumchloride (2 00 ml) en men liet deze opwarmen tot kamertemperatuur.

De resulterende oplossing werd geëxtraheerd met ethylace- . 30 taat (300 ml x 2), de gecombineerde organische lagen werden gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met ethylacetaat:pentaan (0:100 veranderend naar 10:90) gaf de titelverbinding als 35 een kleurloze olie (4,75 g).

1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: 0,19 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 1,68 (s, 6H), 6,82 (d, 2H), 7,30 (d, 2H) dpm.

1028087 99 MS (APCI) m/z 293 [M+NH4] +

Bereiding 75: [2-(4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy)- fenyl)-2-methylpropyl]amine 5 TBDMSO'^^^ 10

Een oplossing van het nitril uit bereiding 74 (0,75 g, 2,7 mmol) in diethylether (5 ml) werd druppelsgewijs toegevoegd aan een koud (0°C) oplossing van lithiumalumi-15 niumhydride in diethylether (2,98 ml) van een 1 M oplossing. De resulterende oplossing werd 3 uur bij 0°C geroerd en vervolgens geblust door toevoeging van water (0,1 ml), 2 N waterige natriumchloride (0,1 ml), en verder water (0,3 ml). De resulterende suspensie werd gefiltreerd en 20 het filtraat onder vacuüm geconcentreerd. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0,880 ammoniak (97:3:0,5 veranderend naar 93:7:0,5) gaf de titelverbinding als een kleurloze olie (0,52 g).

25 1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: 0,18 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 1,00 (bs, 2H) , 1,25 (s, 6H), 2,73 (s, 2H), 6,78 (d, 2H), 7,16 (d, 2H) dpm.

MS (APCI) m/z 280 [M+H]+ 1 028087 100

Bereiding 76: 4-(Aminomethyl)-2,6-dimethylfenolhydro- chloride 10 Een oplossing van boraan in tetrahydrofuran (27,1 ml van een 1 M oplossing, 27,1 mmol) werd druppelsgewijs toegevoegd aan een oplossing van 3,5-dimethyl-4-hydroxybenzo-nitril (1,0 g, 6,79: mmol) in tetrahydrofuran (70 ml) en de resulterende oplossing werd 16 uur onder een stikstofat-15 mosfeer verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. De reactie werd afgekoeld tot kamertemperatuur en behandeld met 6 N chloorwaterstofzuur (20 ml) en een verdere 30 minuten onder terugvloeikoeling gekookt. Het reactiemengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur en het oplosmiddel onder 20 vacuüm verwijderd. Zuivering met behulp van sterke katio-nenwisselaarhars, bijproducten eluerend met methanol gevolgd door 2 M ammoniak in methanol om het product te elu-eren gaven de titelverbinding als een oranje olie. De olie werd behandeld met 1 M waterstofchloride in methanol (20 25 ml) en het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en gaf de titelverbinding als een vaal gele vaste stof (1,12 g). 1HNMR (400 MHz, CDC13) δ: 2,22 (s, 6H) , 3,75 (s, 2H) , 6,90 (s, 2H).

1028087

Bereiding 77: 2-(Aminomethyl)-4-chloorfenolhydrochloride 101

Ck 5 | ηρ nh2 t '

Bereid uit 5-chloór-2-hydroxybenzonitril met behulp 10 van de procedure beschreven in bereiding 76.

^NMR (400 MHz, CDC13) 5: 4,08 (s, 2H) , 6,87 (d, 1H) , 7,27 (d, 1H), 7,35 (s, 1H).

MS (APCI) m/z 156 [M-H]", 158 [M+H]+ 15 Bereiding 77: 41 -(Aminomethyl)bifenyl-4-olhydrochloride 20 (Γ

Bereid uit 4'-hydroxybifenyl-4-carbonitril met behulp 25 van de procedure beschreven in bereiding 76.

lHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 4,10 (s, 2H) , 6,83 (d, 2H) , 7,44- 7,46 (m, 4H), 7,60 (d, 2H) dpm.

,1 028087

Bereiding 79: 3,5-Dichloor-N-ethyl-2-hydroxvbenzamide 102 °^N^CH3 ΗΟγΙ^ 10

Bereid uit 3,5-dichloor-2-hydroxybenzoëzuur en ethylamine met behulp van de werkwijze van bereiding 57 om de titelverbinding te geven als een vaal gele vaste stof. XHNMR (400 MHz, CDC13) δ: 1,28 (t, 3H) , 3,47-3,54 (m, 2H), 15 6,29-6,36 (bs, 1H), 7,27 (d, 1H), 7,48 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 232 [Μ—H]“

Bereiding 80: 2,4-Dichloor-6-[(ethylamino)methyl]fenol

20 H

-CH, ni 25

Een oplossing van het amide uit bereiding 79 (0,77 g, 3,2 9 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) werd af gekoeld tot 30 0°C en behandeld met boraan.tetrahydrofuran complex (9,9 ml van een 1 M oplossing in tetrahydrofuran, 9,9 mmol). De resulterende oplossing liet men gedurende 20 minuten opwarmen tot kamertemperatuur en werd vervolgens 16 uur verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. Het reactiemeng-35 sel werd afgekoeld tot 0°C en geblust door toevoeging van methanol (tot bruisen ophield). De resulterende oplossing liet men opwarmen tot kamertemperatuur gedurende 2 uur en 1028087 103 vervolgens werd het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd.

De rest werd opgelost in dichloormethaan (40 ml) en gewassen met water (10 ml x 2), verzadigde waterige natrium-chloride (10 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en onder vacu-5 um dropg gedampt en gaf een kleurloze olie. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol (98:2 veranderend naar 95:5) gaf de titelverbinding als een kleurloze vaste stof (0,54 g).

1HNMR (400 MHz, CDCi3) δ: 1,17 (t, 3H) , 2,72 (q, 2H) , 3,98 10 (s, 2H), 6,86 (d, 1H), 7,23 (d, 1H) dpm.

Bereiding 81: 6-Hydroxy-N-methyl-l-naftamide

/v. .OH

15 [Λ^Υ ch3 20

Bereid uit 6-hydroxy-l-naftoëzuur en methylamine met behulp van de werkwijze van bereiding 57 om de titelverbinding te geven als een vaal oranje vaste stof.

25 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 2,97 (s, 3H) , 7,10-7,14 (m, 2H, 7,34-7,40 (m, 2H), 7,73 (dd, 1H), 8,04 (d, 1H) dpm.

J

1028087

Bereiding 82: 5-[(Methylamino)methyl]-2-naftol 104 5

^NH

CH3 10

Bereid uit het amide van bereiding 81 met behulp van de werkwijze van béreiding 80 om de titelverbinding te geven als een vaal roze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 2,48 (s, 3H) , 4,14 (s, 2H) , 7,11- 15 7,14 (m, 2H) , 7,25 (d, 1H) , 7,33 (t, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,94 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 186 [M-H]", 188 [M+H]+ | i

Bereiding 83: 3-Hydroxy-5-(trifluormethyl)benzamide 20

25 OH

Bereid uit 3-hydroxy-5-(trifluormethyl)benzoëzuur met behulp van de werkwijze van bereiding 58 om de titelverbinding te geven als een vaal gele vaste stof.

30 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 7,18 (t, 1H), 7,50 (t, 1H), 7,60- 7,61 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 204 [M-H]“ 1 028087 -

Bereiding 84: 3- (Aminomethyl)-5-(trifluormethyl)fenol 105 "TpT"

OH

Bereid uit het amide van bereiding 83 met behulp van 10 de werkwijze van bereiding 80 om de titelverbinding te geven als een vaal gele olie.

XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 3,81 (s, 2H) , 6,91 (s, 1H) , 6,98 (s, 1H), 7,09 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 192 [M+H]+ 15

Bereiding 85: 3-(Aminomethyl)-5-chloorfenol

Cl 20 Γ^Ί h2n. jl

2 OH

Bereid uit 3-chloor-5-hydroxybenzonitril met behulp 25 van de werkwijze van bereiding 76 om de titelverbinding te geven als een vaal gele vaste stof.

XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 3,69 (s, 2H) , 6,65 (d, 2H) , 6,79 (t, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 158 [M+H]+ 30 1028087 106

Bereiding 86: 3-[(Acetylamino)methyl]-5-chloorfenyl- acetaat

Cl 5 H’cr ° o ^ch3 10 Een oplossing van het amine van bereiding 85 (700 mg, 4,4 6 inmol) in tetrahydrofuran (20 ml) werd behandeld met triethylamine (1,3 ml, 8,9 mmol) en acetylchloride (0,64 ml, 8,9 mmol). Het resulterende mengsel liet men 1 uur bij kamertemperatuur roeren. Het reactiemengsel werd gefil- 15 treerd en het filtraat onder vacuüm droog gedampt en gaf de titelverbinding als een kleurloze vaste stof (1,07 g). 1HNMR (400 MHz, CDC13)6: 2,15 (s, 3H) , 2,27 (s, 3H) , 3,71- 3,75 (m, 1H), 4,38-4,41 (m, 2h, 6,92 (s, lh, 7,02 (s, 1H), 7,13 (s, 1H) dpm.

20 MS (elektrospray) m/z 264 [M+Na]+

Bereiding 87; N-(3-Chloor-5-hydroxybenzyl)aceetamide

Cl 25 H3C^.0 T I ] OH 1 2 3 4 5 6 1028087

Een oplossing van diacetaat van bereiding 86 (1,07 g, 2 4,44 mmol) in methanol (IQ ml) werd behandeld met natrium- 3 methoxide (30 mg, 0,55 mmol) en het resulterende mengsel 4 liet men 6 uur bij kamertemperatuur roeren. Het oplosmid 5 del werd onder vacuüm verwijderd en de rest gezuiverd met 6 behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met ethylacetaatrpentaan (1:1 veranderend naar 1:0) gaf de titelverbinding als een gele vaste stof (0,78 g) .

107 1HNMR (400 MHz, CDC13)5: 2,05 (s, 3H) , 4,33 (d, 2H) , 6,08- 6,14 (m, 1H), 6,73 (d, 2H), 6,79 (t, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 200 [M+H]+ 5 Bereiding 88: 3-Chloor-5-[(ethylamino)methyl]fenol

Cl 10 H,C^

^ \/ OH

Bereid uit het amide van bereiding 87 (0,75 g, 3,76 inmol) met behulp van de werkwijze van bereiding 59 om de 15 titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof (0,48 g).

1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,14 (t, 3H) , 2,71 (q, 2H), 3,25- 3,27 (m, 1H), 3,72 (s, 2H), 6,66-6,68 (m, 2H) , 6,79 (s, 1H) dpm, 20 MS (elektrospray) m/z [M-H]~

Bereiding 89: 4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-2- chloorbenzaldehyde

25 ^v^^OTBDMS

ojy

Cl 30

Een oplossing van 2-chloor-4-hydroxybenzaldehyde (5,0 g, 32 mmol), tert-butyl(dimethyl)silylchloride (5,3 g, 35 inmol) , imidazool (2,9 g, 45 mmol) en N,N-dimethylamino-pyridine (10 mg) in N,N-dimethylformamide (40 ml) werd 16 35 uur onder een stikstofatmosfeer bij kamertemperatuur geroerd, Het oplosmiddel werd onder vacuüm verwijderd en de rest verdeeld tussen ethylacetaat (100 ml) en water (100 1028087 108 ml). De organische fase werd afgescheiden, gewassen met verzadigde waterige natriumchloride (50 ml), gedroogd (na-triumsulfaat) en onder vacuüm droog gedampt. Verdere zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel 5 eluerend met pentaan:ethylacetaat (3:1 veranderend naar 2:1) gaf de titelverbinding als een kleurloze olie (6,50 g) · 1HNMR (400 MHz, CDC13)5: 0,25 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 6,80 (dd, 1H), 6,87 (d, 1H), 7,84 (d, 1H), 10,32 (s, 1H) dpm.

10

Bereiding 90: N-(4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-2- chloorbenzyl)prop-2-een-l-amine

^^.OTBDMS

Cl 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1028087

Een oplossing van het aldehyde uit bereiding 89 (6,50 2 g, 24,0 mmol) en allylamine (1,51 g, 26,4 mmol) in 3 dichloormethaan (60 ml) werd behandeld met natriumtriace- 4 toxyboorhydride (7,6 g, 35,6 mmol) en men liet de resulte 5 rende suspensie 16 uur bij kamertemperatuur roeren. Verza- 6 digde waterige natriumbicarbonaat (50 ml) werd toegevoegd 7 en de organische fase afgescheiden. De organische fase 8 werd gewassen met verzadigde waterige natriumchloride (50 9 ml), gedroogd (natriumsulfaat) en het oplosmiddel onder va 10 verwijderd om een gele olie te geven. Zuivering met behulp 11 van kolomchromatografie over silicagel eluerend met pen- 12 taan:ethylacetaat (3:1 veranderend naar 2:1) gaf de titel 13 verbinding als èen kleurloze olie (2,80 g).

14 :HNMR (400 MHz, CDC13)ö: 0,19 (s, 6H), 0,97 (s, 9H) , 1,84 15 (bs, 1H) , 3,26 (d, 2H), 3,81 (s, 2H), 5,12 (dd, 1H), 5,20 16 (dd, 1H), 5,88-5,98 (m, 1H), 6,71 (dd, 1H), 6,85-6,86 (d, 1H), 7,24 (d, 1H)dpm.

MS (elektrospray) m/z 312 [M+H]+

Bereiding 91; 4-[(Allylamino)methyl]-2,6-dichloorfenol 109

H

5 S*

OH

10

Bereid uit 3,5-dichloor-4-hydroxybenzaldehyde en al-lylamine met behulp van de werkwijze van bereiding 90 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

15 1HNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 3,11 (d, 2H) , 3,50 (s, 2H) , 5,06 (d, 1H), 5,16 (d, 1H), 5,77-5,90 (m, 1H), 7,10 (s, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 232/234 [M+H]+ 20 Bereiding 92: (4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-2- chloorbenzyl)amine

^-v^^OTBDMS

25

Cl

Een oplossing van het amine uit bereiding 91 (2,8 g, 30 9,0 mmol), dimethylbarbituurzuur (7,0 g, 45 mmol) en te- trakis(trifenylfosfine)palladium(O) (0,10 g, 0,08 mmol) in dichloormethaan (80 ml) werd 4 uur verwarmd tot koken onder terugvloeikoeling. De afgekoelde oplossing werd onder vacuüm droog gedampt en de rest verdeeld tussen ethylace-35 taat (50 ml) en 1 N waterige natriumhydroxide (50 ml) . De organische fase werd afgescheiden, gewassen met verzadigde waterige natriumchloride (50 ml), gedroogd (natriumsul- 1028087 110 faat) en onder vacuüm droog gedampt. Verdere zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan:methanol:0,880 ammoniak (98:2:0 veranderend naar 95:5:0,5) gaf de titelverbinding als een kleur-5 loze olie (1,70 g).

1HNMR (400 MHz, CDC13)6: 0,19 (s, 6H) , 0,97 (s, 9H) , 1,89 (s, 2H) , 3,85 (s, 2H) , 6,70 (dd, 1H), 6, 85-6,86 (dd, 1H) , 7,21 (d, 1H) dpm.

10 Bereiding 93: (4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxyjbenzyl)- methylamine

C1'xv/W0TBDMS

15 B

Bereid uit het aldehyde van bereiding 89 en methyla-20 mine met behulp van de werkwijze van bereiding 90 om de titelverbinding te geven als een gele olie.

1HNMR (400 MHz, CDC13)5: 0,23 (s, 6H) , 1,00 (s, 9H) , 2,50 (s, 3H) , 3,93 (s, 2H), 6,70-6,73 (m, 1H) , 6,76 (d, 1H) , 7,20 (d, 1H) dpm.

25 MS (elektrospray) m/z 286/288 [M+H]+ 1028087 111

Bereiding 94: 4-(Aminomethyl)-2, 6-dichloorfenolbarbitu- raat /NH2 5 Γ

OH

10

Bereid uit het amine van bereiding 91 met behulp van de werkwijze van bereiding 92 om de titelverbinding te geven als het barbituurzuurzout.

15 1HNMR (400 MHz, DMSOd6)ö: 2,60-4,40 (breed multiplet, 2H), 3,03 (s, 6H), 3,93 (s, 2H), 7,49 (s, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 192/194 [M+H]+

Bereiding 95: 4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy)-2,3-di- 20 chloorbenzaldehyde

Cl X /Cl °^ii 25

OTBDMS

Bereid uit 2,3-dichloor-4-hydroxybenzaldehyde volgens de werkwijze voor bereiding 89 om de titelverbinding te 30 geven als een gele olie.

1HNMR (400 MHz, CDC13)6: 0,29 (s, 6H) , 1,04 (s, 9H) , 6,88 (d, 1H), 7,76 (d, 1H), 10,32 (s, 1H) dpm.

1 028087 - 112

Bereiding 96: N-(4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyljoxy}-2,3- dichloorbenzyl)prop-2-een-l-amine

^^.OTBDMS

Cl 10 Bereid volgens bereiding 90 met behulp van allylamine en het aldehyde uit bereiding 95 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

:HNMR (400 MHz, CDC13)8: 0,20 (s, 6H) , 1,01 (s, 9 H) , 3,25 (d, 2H), 3,82 (s, 2H), 5,10 (dd, 1H), 5,18 (dd, 1H), 5,85-15 5,93 (m, 1H), 6,76 (d, 1H), 7,13 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 346/348 [M+H]+

Bereiding 97; (4 — {[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-2,3-di- chloorbenzyl)amine 20

.^.OTBDMS

^AjAcl

Cl 25

Bereid volgens bereiding 92 met behulp van amine uit bereiding 96 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

30 1HNMR (400 MHz, CD3OD) 8: 0,23 (s, 6H) , 1,03 (s, 9H) , 3,92 (s, 2H), 6,77 (d, 1H), 7,12 (d, 1H) dpm.

1 028087 - 113

Bereiding 98: (4-{[tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l-naft- aldehyde

JO

5

OTBDMS

10

Bereid uit 2,3-dichloor-4-hydroxybenzaldehyde volgens de werkwijze voor bereiding 89 om de titelverbinding te geven als bruine vaste stof.

1HNMR (400 MHz, CDC13)6: 0,36 (s, 6H) , 1,10 (s, 9H) , 6,94 15 (d, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,86 (d, 1H), 8,27 (dd, 1H), 9,30 (dd, 1H), 10,21 (s, 1H) dpm.

Bereiding 99: N-[(4-{[teft-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l- naftyl)methyl]prop-2-een-l-amine 20

H

r ^^ch2 25

OTBDMS

Bereid volgens bereiding 90 met behulp van allylamine 30 en het aldehyde uit bereiding 98 om de titelverbinding te geven als een gele olie.

1HNMR (400 MHz, CDC13)8: 0,30 (s, 6H) , 1,11 (s, 9H) , 1,97 (bs, lh, 3,39 (d, 2H) , 4,17 (s, 2H) , 5,16 (dd, 1H) , 5,25 (dd, 1H), 5,95-6, 05 (m, 1H) , 6,82 (d, 1H) , 7,32 (d, 1H), 35 7,47—7,57 (m, 2H), 8,07 (d, 1H), 8,25 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 328 [M+HJ+, 655 [2M+H]+ 1028087 114

Bereiding 100: [(4-{ [tert-Butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l-naftyl)methyl]amine .NH2 5

OTBDMS

10

Bereid volgens bereiding 92 met behulp van amine uit bereiding 99 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

15 1HNMR (400 MHz, CDC13)6: 0,28 (s, 6H) , 1,09 (s, 9H) , 2,31 (bs, 2H) , 4,24 (s, 2H) , 6,80 (d, 1H) , 7,27 (t, 1H) , 7,46- 7,55 (m, 4H), 8,00 (d, 1H), 8,25 (d, 1H).

Beréidinq 101: 3-Hydroxy-N-methyl-5-(trifluormethyl)benz-20 amide

O

I ^ H

2s V

OH

Bereid uit 3-hydroxy-5-(trifluormethyl)benzoëzuur en methylamine met behulp van de werkwijze van bereiding 58 30 om de titelverbinding te geven als een vaal oranje vaste j stof.

lHNMR (400 MHz, CD3OD)6: 2,99 (s, 3H) , 7,14 (s, 1H) , 7,43 (s, 1H), 7,52 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 218 [M-H]" 35 1 028087 -

Bereiding 102: 3-[(Methylamino)methyl]-5(trifluormethyl)- fenol 115 yi V nh s IJ 1

OH

10 Bereid uit het amide van bereiding 101 met behulp van de werkwijze van bereiding 59 om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, CD3OD)5: 2,41 (s, 3H) , 3,75 (s, 2H) , 6,93 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,09 (s, 1H) dpm.

15 MS (elektrospray) m/z 206 [M+H]+

Bereiding 103: 4-(Aminomethyl)-3,5-dimethylfenol ch3 20 1 NH2 25 Bereid uit 4-hydroxy-2,6-dimethylbenzonitril met be hulp van de werkwijze van bereiding 76 om de titelverbin^ ding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, D20) 6: 2,09 (s, 6H) , 3,90 (s, 2H) , 6,95 (s, 2H) dpm.

30 10280&7

Bereiding 104: (4-Hydroxy-2,5-dimethylfenyl)acetonitril 116 CH,

5 Ncs^ I

ch3 10 Een oplossing van (4-methoxy-2,5-dimethylfenyl)aceto nitril (0,5 g, 2,9 mmol) in dichloormethaan (10 ral) werd afgekoeld tot -80°C en behandeld met een oplossing van boortribromide in dichloormethaan (14,3 ml van een 1 M oplossing, 14,3 mmol). Het reactiemengsel werd bij -80°C een 15 verdere 80 min geroerd en men liet dit vervolgens geleidelijk opwarmen tot kamertemperatuur over een periode van 2 uur. Het reactiemengsel werd geblust met verzadigde waterige natriumbicarbonaat (20 ml) en de organische fase werd afgescheiden. De organische fasè werd gewassen met verza-20 digde waterige natriumchloride (20 ml), gedroogd (natrium-sulfaat) en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd om een vaal bruine vaste stof te geven. Zuivering met behulp van kolomchromatografie over silicagel eluerend met ethylace-taatrpentaan (1:4 veranderend naar 1:2) gaf de titelver-25 binding als een kleurloze vaste stof (0,28 g) .

1HNMR (400 MHz, CD3OD)6: 2,13 (s, 3H) , 2,23 (s, 3H) , 3,66 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 6,98 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 160 [M-H]" 1028087 1117

Bereiding 105: (4-Hydroxy-2,3-dimethylfenyl)acetonitril 9H3

Bereid uit (4-methoxy-2,3-dimethylfenyl)acetonitril 10 met behulp van de werkwijze uit bereiding 104 om de titel-verbinding te geven als een vaal gele vaste stof. lHNMR (400 MHz, CDC13)5: 2,20 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H) , 3,62 (s, 2H), 4,91 (bs, 1H), 6,64 (d, 1H), 7,03 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 160 [M-H]" 15

Bereiding 106: (4-Hydroxy-3-methylfenyl)acetonitril ch3 20 fl

Bereid, uit (4-methoxy-3-methylfenyl)acetonitril met 25 behulp van de werkwijze uit bereiding 104 om de titelver-binding te geven als een vaal gele vaste stof.

1HNMR (400 MHz, CDC13)8: 2,25 (s, 3H) , 3,65 (s, 2H) , 4,98 (bs, 1H, 6,76 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 7,07 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 146 [M-H]" 30 1028087

Bereiding 107: 4-(2-Aminoethyl)-2,5-dimêthylfenol 118 CH, [AL-°h h2n ch3 10 Een oplossing van het nitril uit bereiding 104 (0,28 g, 1,74 mmol) in ethanol (15 ml) werd 16 uur bij 60 psi over Raney-nikkel (0,1 g, 50 gew.%) gehydrogeneerd. Het reactiemengsel werd gefiltreerd en het oplosmiddel onder vacuüm verwijderd. De rest werd gezuiverd met behulp van 15 sterke kationenwisselaarhars die niet-basische verontreinigingen elueerde met methanol en vervolgens 1 N ammoniak in methanol om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

XHNMR (400 MHz, CD3OD)6: 2,11 (s, 3H) , 2,19 (s, 3H) , 2,63-20 2, 67 (m, 2H) , 2,72-2,76 (m, 2H) , 6,54 (s, 1H) , 6,81 (s, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 166 [M+H]+

Bereiding 108: 4-(2-Aminoethyl)-2,3-dimethylfenol 25 CH3 30

Bereid uit: het nitril van bereiding 105 met behulp van de werkwijze van bereiding 107 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

35 XHNMR (400 MHz, CD3OD)5: 2,12 (s, 3H) , 2,19 (s, 3H) , 2,68- 2,75 (m, 4H, 6,55 (d, 1H), 6,78 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 166 [M+H]+ 1028087

Bereiding 109: 4-(2-Aminoethyl)-2-methylfenol 119 ch3 5 10 Bereid uit het nitril van bereiding 106 met behulp van de werkwijze van bereiding 107 om de titelverbinding te geven als een kleurloze olie.

1HNMR (400 MHz, CD3OD)6: 2,15 (s, 3H), 2,60-2,64 (m, 2H) , 2,79-2,83 (m, 2H), 6,66 (d, 1H), 6,82 (d, 1H), 6,90 (s, 15 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 152 [M+H]+

Voorbeelden 1-38 20 De geschikte beschermde alcohol (0,075 mmol) werd op gelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammoniumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ) . Het reactiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet afkoelen tot kamertempe-25 ratuur. Als een vast product precipiteerde werd het reactiemengsel gefiltreerd en gewassen met methanol:water (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven. Als geen product precipiteerde werd het reactiemengsel onder vacuüm geconcentreerd en de rest gezuiverd met behulp 30 van kolomchromatografie over silicagel eluerend met dichloormethaan-.methanol:0,88 ammoniak 98:2:0 tot 95:5:0,5 tot 90:10:1 om het titelproduct te geven.

Alternatief kan de volgende werkwijze worden toegepast voor de synthese van voorbeelden 1 tot 38: 35 Een oplossing van de geschikte beschermde alcohol (2,87 mmol) in methanol (80 ml) wordt behandeld met een oplossing met airanoniumfluoride (1,06 g, 28,7 mmol) in wa- 1028087: v 120 ter (53 ml) en het resulterende mengsel werd 16 uur tot 40°C verwarmd. De reactie wordt afgekoeld tot kamertemperatuur en gefiltreerd, wassend met een mengsel van water en methanol (1:1 op volumebasis, 3 x 10 ml), methanol (2 x 5 10 ml) . De vaste stof wordt onder vacuüm gedroogd om de gewenste verbinding te geven.

Voorbeeld 1: 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}-10 fenyl)-N-(4-hydroxy-3-methoxybenzyl)aceetamide oH ^γ0Η K H3C CH3 I J ö is Ho y --- O CM3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1028087

Bereiding 18 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 2 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo- 3 niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ) . Het re- 4 actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voor 5 dat men dit liet afkoelen tot kamertemperatuur. Het reac- 6 tiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest ge 7 zuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel 8 eluerend met dichloormethaanrmethanol:0, 88 ammoniak 98:2:0 9 tot 95:5:0,5 tot 90:10:1 om het titelproduct te geven als 10 een kleurloze vaste stof.

11 XHNMR (CD3OD, 400 MHz) δ: 1,04 (s, 3H) , 1,06 (s, 3H) , 2,68- 12 2,90 (m, 7h, 3,53 (s, 2H) , 3,74 (s, 3H), 4,23 (m, 2H), 13 4,62 (m, 1H), 6,67 (m, 2H) , 6,77 (m, 1H), 6,85 (d, 1H), 14 7,01-7,22 (m, 6H), 7,37 (m, 1H) dpm.

15 MS (elektrospray) m/z 572 [M+H]+ 16

Voorbeeld 2: N-[(4'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]- fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 121 5 fY°" oh H3C cH3 o

10 H0 I

H%*° O CH3

Bereiding 19 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 15 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-niumfluoride (16 mg, 0,43 inmol) in water (300 μΐ) . Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en de vaste stof gewassen met 2 0 methanol:water (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelver-binding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,90 (s, 3H), 0,92 (s, 3H) , 2,56 (s, 2H), 2,62-2, 65 (m, 2H) , 2,88 (s, 3H) , 3,43 (s, 2H) , 4,25 (2H, d), 4,40-4,43 (m, 1H), 6,80-6,82 (m, 3H), 6,96-25 7,01 (m, 2H) , 7,07-7,10 (m, 2H) , 7,14-7,18 (m, 2H) , 7,23 (d, 2H), 7,42-7,48 (m, 4H), 8,47 (t, 1H).

MS (elektrospray) m/z 618 [M+H]+ i 1028087

Voorbeeld 3: N-(4-Chloor-2-hydroxybenzyl)-2- (3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]- fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 122

ho^N^ V ° OH

10 HNs. /P

;s.

o' CHS

Bereiding 20 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 15 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50PC geroerd voordat men dit liet afkoelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water 20 (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,90 (s, 3H) , 0,91 (s, 3H) , 2,56 (m, 2H), 2,59-2,67 (m, 2H) , 2,88 (s, 3H) , 3,44 (s, 2H) , 4,16 (s, 2H), 4,40-4,43 (m, 1H), 6,76-6,81 (m, 2H), 6,96-25 7,18 (m, 8H), 8,42 (s, 1H).

MS (elektrospray) m/z 574 [M-H]~, 576 [M+H]+ 1028087 -

Voorbeeld 4: N-(4-Hydroxy-3,5-dimethylbenzyl)-2-(3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]- fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 123 CH3

5 ?H

I Η H f II

HO 'KJ «, ü 10 hL ,0 o/ ch3

Bereiding 21 (0,075 inmol) werd opgelost in ethanol (4 15 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ) . Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water 20 (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,90 (s, 3H), 0,91 (s, 3H) , 2,08 (s, 6H) , 2,55 (s, 2H), 2,62-2,65 (m, 2H) , 2,88 (s, 3H) , 3,38 (s, 2H gedeeltelijk overschaduwd door H2O), 4,05 (d, 25 2H), 4,40-4,43 (m, 1H), 6,71 (s, 2H), 6,81 (d, 1H), 6,95- 7,01 (m, 2H), 7,05-7,09 (m, 2H), 7,13-7,18 (m, 2H), 8,28-8,31 (t, 1H).

1028087-

Voorbeeld 5: 2—(3—{2— £((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}- fenyl)-N-[(2-hydroxy-l-naftyl)methyl]aceetamide 124

5 OH

10 ΗΝ\ς^0 o' ^

Bereiding 22 (0,075 iranol) werd opgelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-15 niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel 20 eluerend met dichloormethaan:methanol:0,88 ammoniak, 98:2:0 tot 95:5:0,5 tot 90:10:1 om het titelproduct te geven als een kleurloze vaste stof.

XHNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,86 (s, 3H) , 0,87 (s, 3H) , 2,46- 2,68 (m, 4H) , 2,90 (s, 3H) , 3,40 (s, 2H) , 4,41-4,47 (m, 25 1H), 4,63 (d, 2H), 6,83 (d, 1H), 6,94-7,05 (m, 4H), 7,11- 7,16 (m, 2H), 7,19 (s, 1H) , 7,27 (t, 1H) , 7,40 (t, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,79 (d, 1H) , 7,88 (d, 1H) , 8,48-8,52 (bs, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 590 [M-H]" 30 1028087

Voorbeeld 6: 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}- fenyl)-N-[(6-hydroxy-2-naftyl)methyl]aceetamide 125

/OH

5 °H \ ll

HO

10 HN>t° o' CHs

Bereiding 23 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-15 niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven 20 als een kleurloze vaste stof* ^NMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,90 (s, 3H) , 0,92 (s, 3H) , 2,49- 2,68 (m, 4H) , 2,89 (s, 3H) , 3,44 (s, 2H) , 4,34 (d, 2H) , 4,40-4,43 (m, 1H), 6,880 (d, 1H), 6,96-7,17 (m, 7H), 7,23 (d, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,58 (d, 1H) , 7,61 (d, 1H), 8,50 25 (dd, 1H).

MS (elektrospray) m/z 590 [M-H]", 592 [M+H]+, 614 [M-Na] + 1028087

Voorbeeld 7: N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]—2—(3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]- fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 126 5 ?H f^Tl

JL Η H II

HOX^ Hs° CHa ° LA

H0 J OH

HNV

10 <Λ<*

Bereiding 24 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-15 niumiluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven 20 als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, DMSOd6)ö: 0,88 (s, 3H) , 0,90 (s, 3H) , 2,66- 2,54 (m, 4h, 2,88 (s, 3H) , 3,43 (s, 2h, 4,29 (d, 2H), 4,39-4,43 (m, 1H), 6,79-6,82 (m, 3H), 6,96-7,01 (dd, 2H), 7,07-7,17 (m, 5H), 7,27-7,31 (dd, 1H), 7,36-7,41 (m, 4H), 25 8,52 (dd, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 618 [M+H]+ 1028087

Voorbeeld 8; N- [(3'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]- fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 127

s fH

I tl H

HaC CHa 0

10 o' ^CHS

Bereiding 25 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-15 niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet af koelen tót kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven 20 als een kleurloze vaste stof.

lHNMR (400 MHz, DMSOd6)8: 1,16 (s, 6H), 2,85 (s, 2H) , 2,92 (s, 3H), 2,96-3,03 (m, 2H) , 3,57 (s, 2H) , 4,42 (s, 2H) , 4,77-4,79 (m, 1H) , 6,74 (d, 1H) , 6,90 (d, 1H) , 6,95-6,97 (m, 2H), 7,09-7,27 (m, 7H) , 7,32 (t, 1H) , 7,41-7,42 (m, 25 3H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 618 [M+H]+, 6401 [M+Na]+, 616 [M-H]“ 1028087

Voorbeeld 9: 2-(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3- [(methylsulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}- fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)-2-methylpropyl]aceetamide 128

HaC 0 ^λθΗ

HNX

10 o'

Bereiding 26 (0,075 mmol) werd opgelost in ethanol (4 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-15 niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet afkoelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd onder vacuüm geconcentreerd en de rest gezuiverd met behulp van kolomchromatografie over silicagel 20 eluerend met dichloormëthaan:methanol:0, 88 ammoniak 98:2:0 tot 95:5:0,5 tot 90:10:1 om het titelproduct te geven als een kleurloze vaste stof.

1HNMR (400 MHz, DMSOd6)5: 0,91 (s, 3H) , 0,92 (s, 3H) , 1,11 (s, 6H) , 2,56 (s, 2H), 2,64-2,66 (m, 2H) , 2,89 (s, 3H) , 25 3, 15 (s, 2H) , 3,35 (s, 2H) , 4,, 42-4,45 (m, 1H) , 6,65 (d, 2H), 6,81 (d, 1H), 6, 94-7,03 (m, 4H) , 7,07-7,14 (m, 3H) , 7,18 (s, 1H), 7,60 (t, 1H).

MS (APCI) m/z 582 [M-H]', 584 [M+H]+ | i 1028087

Voorbeeld 10: N-(3,5-Dichloor-2-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2- (3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide 129

Cl 5 HjC 1 f ^ ril

I J HSC CHj l!J o OH

10 HO'^f HN ,0 O" ^CH3

Bereiding 27 (0,075 inmol) werd opgelost in ethanol (4 15 ml) en de oplossing behandeld met een oplossing van ammo-niumfluoride (16 mg, 0,43 mmol) in water (300 μΐ). Het re-actiemengsel werd vervolgens 18 uur bij 50°C geroerd voordat men dit liet afkoelen tot kamertemperatuur. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd en gewassen met methanol:water 20 (2 ml, 1:1 op volumebasis) om de titelverbinding te geven als een kleurloze vasté stof.

^NMR (400 MHz, CD3OD)5: 1,05-1,16 (m, 9H) , 2,70-2,96 (m, 7h, 3,32 en 3,34 (2t, 2H), 3,74 en 3,83 (2s, 2H) , 4,56 en 4,58 (2s, 2H), 4,64-4,66 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 7,01-7,26 25 (m, 7H), 7,36 (dd, 1 H).

MS (elektrospray) m/z 637 [M-H]“ 1028087 130

Voorbeelden 11 tot 32

OH

I H

JL^J H3° CH3 o HN^^0 O CH3

Nr. Q1_.___Gegevens_ 11 XHNMR (400 MHz, DMS0d6) δ: 0,85 (s, 3H), 0,86 (s, 3H), 2,47 (s, CH, 3H) , 2,60-2,63 (m, 2H) , 2,84 (s, 2H) , 2,88 (s, 3H) , 3,61 en LI 3,75 (2s, 2H), 4,38-4,41 (m,

OH

1H), 4,89 en 5,03 (2s 2H), 6,80 (d, 1H), 6,93-7,18 (m, 9H), 7,28 en 7,33 (2t, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,92 en 7,74 (2d, 1H).

MS (elektrospray) m/z 604 [M- __ΗΓ_ 12 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,88 (s, 3H), 0,90 (s, 3H), 2,53 (s, Η Π ?H 2H)/ 2'61"2'63 (m/ 2H) , 2,88 (Sf 3H) , 3,42 (s, 2H) , 4,28 (d, 1H) , 4,40-4,43 (m, 2H) , 6,82 (t, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,91 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 7,00 (d, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,07-7,15 (m, 4H) , 7,17 (d, 1H), 7,28 (t, 1H), 7,36-7,40 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 616 ___[M-H]~ _ 13 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,89- |__J_;_[o,93 (m, 6H) , 2,51-2,54 (m, 2H, 1028087 131 gedeeltelijk overschaduwd door oplosmiddel) 2,58 (s, 2H) , 2,64-2,69 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 3,62-3, 66 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H), 4,43-4,46 (m, 1H) , 4.50 en 4,56 {2s, 2H) , 6,51- 6,60 (m, 2H), 6,73-7,21 (m, 8H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 568 ___[M+H]*_ 14 JHNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,90 (s, 3H) , 0,96 (s, 3H) , 1,30- 1.50 (m, 4H), 2,40 (t, 2H), 2,46 (S' 2H)' 2'60"2'65 <m' (f Ί 2H), 3,89 (s, 3H) , 2,95-3,08 0H (m, 2H), 3,25-3,30 (m, 2H), 4.40- 4,44 (m, 1H), 6,62 (d, 2H), 6,81 (d, 2H), 6,91 (d, 2H), 6,90-7,06 (m, 4H), 7,15 (t, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,94 (t, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 582 [M- __H] ~, 584 [M+H]·*·_ 15 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) 6: 0,90 <s' 3H>' °'96 <s' 3H)' 2'48" 1 [f Ί 2,64 (m, 4H) , 2,87 (s, 3H) , 3,17 (q, 2H) , 3,30 (s, 2M) , 4.40- 4,43 (m, 1H), 6,61 (d, 2H), 6,80 (d, 1H), 6,85 (d, 2H), 6,90-7,05 (m, 4H), 7,16 (t, 1H, 7,18 (s, 1H), 7,98 (t, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 554 [M- ΗΓ 16 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 1,06 |___J_I (s, 3H), 1,08 (s, 3H), 2,68-j 1028087 132 2,92 (m, 7H), 3,51 (s, 2H), QH 4,34 (s, 2H), 4,64-4,66 (m, 1H, h fXf 6,63 (d' 1H)' 6,78-6,79 (m, 1H), 6,86 (d, 1H), 7,03-7,22 ci (in, 6H) , 7,36-7,37 (m, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 574 [M- __H] ", 576 [M+H] +_ 17 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,12 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 2,79 (s, 2H), 2,92 (s, 3H), 3,00 (d, f OH 2H), 3,51 (s, 2H), 4,18 (s, H f\f 2H), 4,77-4,80 (m, 1H), 6,89 ^ (df 1H) , 6,97 (s, 1H), 7,05- 7,18 (m, 5H), 7,22-7,26 (m, 1H), 7,40 (s, 1H) .

MS (elektrospray) m/z 610/612 __[M+H]+, 608/610 [M-H] ~_ 18 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 1,12 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), jTT 2,7702,81 (m, 2H) , 2,90 (s, 3H) , 2,91-2,97 (m, 2H) , 3,53

Cl (s, 2H) , 4,36 (s, 2H) , 4,69- 4,72 (m, 1H), 6,74 (d, 1H) , 6,88 (d, 1H), 7,01-7,06 (m, ! 2H) , 7,10-7,12 (m, 2H) , 7,16- 7,25 (m, 2H), 7,38-7,39 (m, 1H) MS (elektrospray) m/z 610/612 [M+H]+, 632/634 [M+Na]+, 608/610 [M-H]" j j 19 ^NMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 1,12 (s, 6H), 2,91-2,98 (m, 7H, 3,43 (s, 2H) , 4,56 (s, 2H), 4,75- |___|_;_I 4,7 8 (m, 1H), 6,76 (d, 1H) , 1028087 133 6,91 (d, 1H), 7,04 (d, 1H), f^YW 7,09-7,24 (m, 5H) , 7,30 (s, 1H), 7,39-7,45 (m, 2H) , 7,85- 7,87 (m, 1H) , 8,13-8,15 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 592 ___[M+H] *, 614 [M+Na] *, 590 [M-H]~ 20 :HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,93 ?H (s, 3H), 0,95 (s, 3H), 2,58 (s, h r^jj 2H) , 2,65-2,66 (m, 2H) , 2,91 (s, 3H) , 3,45 (s, 2H) , 4,26- 4,27 (m, 2H), 4,42-4,46 (m, 1H), 682 (d, 1H), 6,89-6,93 (m, 2H), 6,96-7,01 (m, 3H), 7,05 (s, 1H), 7,06-7,10 (m, 1H) , 7,15-7,19 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 610 __;__[M+H] *, 632 [M+Na]+, 608 [M-H]~ 21 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,88- oh 0,91 (m, 6H) , 0,95-0, 98 (m, 3H) , 2,50-2,63 (m, 4H) , 2,86 ^NN/ivXa (s, 3H) , 3,23-3,28 (m, 2H) , 3,58 en 3,72 (2s, 2H), 4,39 en 4,47 (2s, 3H) , 6,54 (s, 1H) , 6,61-6,67 (m, 2H), 6,78 (d, 1H), 6,92-7,02 (m, 3H), 7,03 2, 1H), 7,13-7,15 (m, 2H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 604 [M+H]+, 626 [M+Na]+ 22 1HNMR (4 00 MHz, CD3OD) rotame- ✓n. ^oh ren δ: 1,16-1,25 (m, 6H) , 2,85-

CH

I 5 I IJ 3,10 (m, 10H) , 3,79 en 3,84 (2s, 2H), 4,62 en 4,63 (2s,

Cl 2H), 4,78-4,82 (m, 1H) , 6,65- _;_| 6,70 (m, 2H) , 6,80-6,84 (m, 1028087 134 2H), 6,88 (d, 1H), 7,01 (d, 1H) , 7,08-7,31 (m, 4H) .

LRMS (elektrospray) m/z [M+H]+ __;_ 590, [M+Na]*, 612._ 23 XHNMR (400 MHz, DMSOde) δ: (ro- tameren) 0,86-0,90 (m, 6H), 2,51 en 2,55 (2s, 2H) , 2,58- f"3 2,65 (m, 2H) , 2,87 (s, 3H) , 2,77 en 2,90 (2s, 3H) , 3,66 en F 3,73 (2s, 2H), 4,38-4,42 (m, 1H), 4,48 en 4,61 (2s, 2H), 6, 77-6,80 (m, 2H) , 6,89-6,91 (m, 2H), 6, 93-6, 99 (m, 3H) , 7,03-7,06 (m, 1H), 7,13-7,18 (m, 2H) dpm.

LRMS (elektrospray): m/z 624 ___[M+H] *.__ 24 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ = 1,32 0H (s, 6H), 2,97 (s, 3H), 2,99 (s, fY 2H), 3,11-3,23 (m, 2H) , 3,54 (s, 2H) , 4,2904,31 (m, 2H) , 4,82-4,86 (m, 1H) , 6,89-6,92 (m, 2H) , 6,95 (d, 1H) , 7,08 (dd, 1H), 7,17-7,24 (m, 6H), 7,29-7,35 (m, 4H), 7,46 (d, 1H) dpm.

LRMS (elektrospray): m/z [M+H]+ 618, [M+Na]+, 640, [M-H]‘ 616.

25 OH 1HNMR (4 00 MHz, CD3OD) δ = 1,33 (s, 3H) , 1,34 (s, 3H), 2,98 (s, f ]) 3H) , 3,01 (m, 2H) , 3,21-3,25 (m, 2H), 3,56 (s, 2H) , 4,35 (s, 2H) , 4,83-4,86 (dd, 1H) , 6,75- _;_6, 81 (m, 3H) , 6,95 (d, 1H) , 1028087 135 7,18-7,25 (m, 6H), 7,28-7,36 (m, 4H), 7,45 (d, 1H) dpm.

LRMS (elektrospray): m/z [M+H]+ __618, [M+Na]\ 640._ 26 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,91 HC ÖH (s, 3H) , 0,93 (s, 3H) , 2,08 (s, h * 6H), 2/57 (S' 2H)' 2,65-2,66 (m, 2H) , 2,89 (s, 3H) , 3,38 (s, ch, 2H) , 4,06-4,07 (m, 2H) , 4,33- 4,46 (m, 1H), 6,71 (s, 2H), 6,81 (d, 1H), 6,97 (d, 1H), 7,01 (d, 1H), 7,05-7,09 (m, 2H) , 7,13-7,19 (m, 2H) , 8,28- 8,31 (m, 1H) dpm.

__LRMS (APCI): m/z 570 [M+H]+ 27 XHNMR (400 MHz, DMSOd6) 6: 0,90 (m, 6H), 2,41-2,72 (m, 6H), 2,91 (s, 3H) , 3,60 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H) , 4,40-4,60 (m, 3H) , 6,41-6,59 (m, 2H) , 6,81- 7,18 (m, 8 H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 590 [M+Na]\ 566 [M-Na]‘ 28 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,9

(JH

(m, 6H), 2,41-2,46 (2H, m) , | 2,54-2,58 (2H, m) , 2,60-2,67 {2hf m) f 2,8b (s, 3H), 3,61 (m, 2H), 3,70 (m, 2H), 4,38-4,41 (m, 1H) , 4,61 (m, 2H) , 6,50- _ 6,61 (m, 2H) , 6,81 (d, 1H) , 1 028087 136 6,91-7,23 (m, 7H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 568 ___[M+H]+, 590 [M+Na]*_ 29 1HNMR (400 MHz, DMS0d6) δ: 0,81 h (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 2,58 (m, ΐ V^0H 2H) , 2,62 (m, 2H) , 2,89 (s, 3H) , 3,41 (d, 1H), 3,45 (d, 1H), 3,58 (d, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 6,80-7,20 (m, 11H), 8,40 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 578 ___[M+Na]+_ 30 1HNMR (400 MHz, DMS0d6) δ: 0,81 {^Ν"γ^0Η (s, 3H) , 0,84 (s, 3H) , 2,50 (m, J 2H), 2,63 (m, 2H), 2,85 (s, f \j 3H), 3,40 (m, 2H) , 3,57 (m, 2H) , 4,40 (m, 1H) , 4,80 (m, 1H), 6,80 (d, 1H), 6,98 (m, 1H), 7,00 (m, 9H) , 8^40 (d, 1 H) dpm.

MS (APCI) m/z 554 [M-H]' 31 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 1,25 ^ 11 (s, 3H), 1,26 (s, 3H) , 2,93 (s, oh η I 2H), 2,96 (s, 3H), 3,07-3,09 < (m, 2H), 3,62 (s, 2H), 4,44 (s, 2H) , 4,77-4,80 (m, 1H) , 6,77- 6,79 (m, 1H), 6,93 (d, 1H), 7,01-7,02 (m, 1H) , 7,05-7,07 |__J_'_ (m, 1H) , 7,14-7,18 (m, 2H) , 1 0280.87 137 7,20 7,27 (m, 3H), 7,29-7,34 (m, 3H), 7,43 (d, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,54 (s, 1H) dpm.

LRMS (elektrospray) m/z [M+H]+ ___618, [M+Na]+ 640._ 32 1HNMR (400 MHz, CD30D) δ: 1,14 (s, 3H) , 1,16 (s, 3H) , 2,77- H i^Yï 3,00 <m' 7H) ' 3'60 (S' 2H)' {ΛΑ^ oh 4,44 (s, 2H) , 4,694,72 (dd, 1H), 6, 89-6, 93 (m, 3H) , 7,09- 7,30 (m, 9H), 7,43 (d, 1H) , 7,50 (s, 1H), 7,52 (s, 1H) dpm. LRMS (elektrospray) m/z [M-H]" ___|_[616_

Voorbeelden 34-38 0

Ho H3C CH3 U

HNV° O' ^CH3 1 1028087 ^NMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,95 (s, 3H) , 0,98 (s, 3H), 2,65- 1 xX 2,71 (m' 4H) ' 2,93 (s' 3H)' h 4,46-4,52 (m, 3H) , 6,83-6,86 (m, 3H), 7,03-7,06 (m, 1H), 7,22-7,23 (m, 1H), 7,30-7,38 (m, 4H) , 7,47 (d, 2H),7,54 (d, 2H) , 7,73-7,76 (m, 2H) , 8,96- 8,99 (m, 1H) dpm.

__MS (elektrospray) m/z 604 138 ___[M+H3 +_ 34 1HNMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 0,95 h.c ch, (s-, 3H), 0,97 (s, 3H) , 1,26 (s, H 3 w * 6H) , 2, 63-2,70 (m, 4H) , 2,93 (LA (s, 3H) , 3,39-3,40 (m, 2H) ,

OH

4.44- 4,48 (m, 1H), 6,71 (d, 2H), 6,84 (d, 1H), 7,05 (d, 1H) , 7,20-7,34 (m, 4H) , 7,58- 7,60 (m, 2H) , 8,02-8,06 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 570 ___[M+H] +_ 35 1HNMR (400 MHz, DMS0d6) δ: 0,95 (s, 3H) , 0,98 (s, 3H) , 2,64- h , ffjl 2,71 (m, 4H) , 2,93 (s, 3H) , 4.45- 4,48 (m, 1H) , 4,54-4,56 (m, 2H) , 6, 82-6, 86 (m, 3H) , 7,04 (d, 1H), 7,22-7,40 (m, 5H), 7,45-7,48 (m, 3H), 7,54 (s, 1H), 7,73-7,75 (m, 2H) , 8,98-9,01 (m, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 604 [M+H]+ 36 XHNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,05 H ?*3 (s, 3H) , 1,12 (s, 3H) , 2,08 (s, ^ 3H)' 2'22 3H>' 2,70-2,97 (m, 9H) , 3,46-3,50 (m, 2H) , ch3 4,63-4,66 (m, 1H) , 6,54 (s, 1H), 6,86 (d, 1H), 6,88 (s, 1H), 7,09-7,11 (m, 1H) , 7,30- 7,38 (m, 3H), 7,61 (m, 1H), 7,66 (d, 1H) dpm.

__MS (elektrospray) m/z 570 1028087 - 139 __[M+H]*_ 37 1HNME (400 MHz, CD3OD) 6: 1,05 (s, 3H), 1,12 (s, 3H), 2,11 (s, H 3H), 2,23 (s, 3H), 2,70-2,97 f" vx'*SY'Sr'C^ (m, 9H), 3,45-3,49 (m, 2H), 4,63-4,66 (m, 1H), 6,54 (d, 1H), 6,81 (d, 1H), 6,87 (d, 1H) , 7,09-7,12 (m, 1H) , 7,30- 7,38 (m, 3H), 7,61 (m, 1H), 7,66 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 570 ___[M+H]+, 569 [M-H] ~_ 38 1HNMR (400 MHz, CD3OD) δ: 1,04 h (s, 3H), 1,11 (s, 3H), 2,12 (s, (/Nv/YY^ 3H), 2,70-2,96 (m, 9H) , 3,51- 3,54 (m, 2H), 4,63-4,66 (m, °H 1H), 6,64 (d, 1H), 6,86 (d, 2H) , 6,94 (m, 1H), 7,09 (d, 1H), 7,30-7,38 (m, 3H), 7,59 (m, 1H)’, 7,64 (d, 1H) dpm.

MS (elektrospray) m/z 556 1__J_ [M+H] *__

Tenzij anderszins vermeld werden alle reacties uitgevoerd onder een stikstofatmosfeer.

5 Afkortingen TBDMS = tert-butyl(dimethyl)silyl IPA: isopropylalcohol THF: tetrahydrofuran s = singlet 10 d = doublet dd = dubbel doublet t = triplet q = kwartet m = multiplet

15 bs = breed singlet b.v. NH, of OH

1028087 140

Het vermogen van de verbindingen met de formule (1) om te werken als krachtige P2-agonisten die derhalve glad-despierrelaxatie mediëren kan worden bepaald door de mate 5 van het effect van bèta-2-adrenergische receptorstimule-ring op elektrisch véld gestimuleerde contractie van cavi-aluchtpijpstroken.

Cavialuchtpijpen 10

Mannelijke, Dunkin-Hartley cavia's (475-525 g) worden gedood door C02-verstikking en aderlaten uit de dij slagader en de luchtpijp wordt geïsoleerd. Vier preparaten worden verkregen uit elk dier, waarbij de uitsnijding on-15 middellijk onder de larynx begint en 2,5 cm lengte luchtpijp neemt. Het stuk trachea wordt geopend door het kraakbeen tegenover de trachealisspier door te snijden, vervolgens worden dwarse secties, 3-4 kraakbeenringen breed, gesneden. De resulterende strookpreparaten worden gesuspen-20 deerd in 5 ml orgaanbaden met behulp van katoendraden vastgezet door de bovenste en onderste kraakbeenbanden. De stroken worden in evenwicht gebracht, ontspannen, gedurende 20 minuten in een gemodificeerde Krebs Ringer-buffer (Sigma K0507) die 3 μΜ Indomethacine (Sigma 17378), 10 μΜ 25 Guanethidine (Sigma G8520) en 10 μΜ Atenolol (Sigma A7655) bevatte, verwarmd tot 37 °C en begast met 95 % 02/5 % C02, voorafgaande aan het aanbrengen van een aanvankelijke spanning van 1 g. Men laat de preparaten een verdere 30-45 minuten in evenwicht komen, gedurende welke tijd deze op-30 nieuw onder spanning worden gebracht (tot 1 g) tweemaal bij tussenpozen van 15 minuten. Veranderingen in spanning worden vastgelegd en gevolgd via standaard isometrische transducers gekoppeld aan een gegevensverzamelsysteem (speciaal ontworpen bij Pfizer). Volgend op de spannings-35 evenwichtsinstelling worden de weefsels onderworpen aan elektrisch veld stimulering (EFS) met behulp van de volgende parameters: 10 s stoten elke 2 minuten, 0,1 ms puls- 1 028087 - * 141 breedte, 10 Hz, en juist-maximaal voltage (25 volt) komt nu door de gehele lengte van het experiment. EFS van post-ganglionische cholinergische zenuwen in de luchtpijp resulteert in monofasische contracties van de gladde spier 5 en trekhoogte wordt opgenomen. De orgaanbaden worden constant geperfuseerd met de hierboven beschreven Krebs Rin-ger-buffer met behulp van een peristaltisch pompsysteem (pompdebiet 7,5 ml/minuut) door het gehele experiment, met de uitzondering van als een bèta-2-agonist volgens de on-10 derhavige uitvinding wordt toegevoegd, de pomp wordt dan gestopt gedurende de duur van de cumulatieve dosering aan het pad en wederom gestart nadat maximale reactie wordt bereikt voor de uitwasperiode.

15 Experimenteel protocol voor vaststellen van kracht en werkzaamheid

Volgens op evenwichtsinstelling op EFS wordt de peristaltische pomp gestopt en worden de preparaten "geprimed" 20 met een enkelvoudige dosis van 300 nM isoprenaline (Sigma 15627) om een maximale reactie vast te stellen in termen van remming van de samentrekkende EFS-reactie. Het isoprenaline wordt vervolgens uitgewassen gedurende een periode van 40 minuten. Volgend op het primen en uitwasherstel 25 wordt een standaardkromme voor isoprenaline uit_gevoerd op alle weefsels (Isoprenaline Kromme 1) met behulp van cumulatieve, bolustoevoeging aan het bad met behulp van half-log stappen in concentratie. Het toegepaste cohcentratie-traject is le'9 tot le/3e"6 M. Aan het einde van de isopre-30 nalinekromme wórden de preparaten wederom 40 minuten gewassen voor het beginnen van een tweede kromme, hetzij voor isoprenaline (als inwendige controle) hetzij een bè-ta-2-agonist volgens de onderhavige uitvinding. Bèta-2-agonistreacties worden uitgedrukt als percentage remming 35 van de EFS-reactie. Gegevens voor bèta-2-agonist worden genormaliseerd door remming uit te drukken als een percentage van de maximale remming geïnduceerd door isoprenaline 1028087 142 in Kromme 1. De ECso-waarde voor bèta-2-agonist volgens de onderhavige uitvinding betreft de concentratie van verbinding vereist om half maximaal effect te produceren. Gegevens voor bèta-2-agonisten volgens de onderhavige uitvin-5 ding worden vervolgens tot expressie gebracht als relatieve kracht voor isoprenaline gedefinieerd door de verhouding (EC50 bèta-2-agonist) / (EC50 isoprenaline).

Bevestiging van bèta-2-gemedieerde functionele activiteit 10 Bèta-2-agonistactiviteit van testverbinding wordt bevestigd met behulp van het bovenstaande protocol, echter voorafgaande aan het construeren van de kromme voor bèta-2-agonist volgens de onderhavige uitvinding worden de pre-15 paraten voor-geïncubeerd (gedurende een minimum van 45 minuten) met 300 nM ICI 118551 (een selectieve P2-anta-gonist) hetgeen resulteert in het geval van een bèta-2-gemedieèrd effect in een verschuiving naar rechts van de dosisreactiekromme van de testverbinding.

20 Volgens een ander alternatief kan de agonistkracht voor de P2-receptor van de verbindingen met de formule (1) ook worden bepaald door de maat van de concentratie van verbinding volgens de onderhavige uitvinding vereist om half maximaal effect (EC50) voor de p2-receptor te produce-25 ren.

Verbinding preparaat 10 mM/100 % DMSO (dimethylsulfoxide) voorraad van 30 verbinding wordt verdund tot vereiste topdosis in 4 % DMSO. Deze topdosis wordt toegepast om een 10-punts half-log verdunningskromme te construeren, alle in 4 % DMSO. Isoprenaline (Sigma, 1-5627) werd toegepast als een standaard in elk experiment en voor controleputjes op elke plaat. 35 Gegevens werden uitgedrukt als % isoprenalinereactie.

Celkweek 1028087 143 CHO (Chinese Hamster Eileider) cellen die recombinant de menselijke β2 adrenergische receptor tot expressie brengen (van Kobilka c.s., PNAS 84:46-50, 1987 en Bouvier 5 c.s., Mol Pharmacol 33:133-139 CHOhP2) werden gekweekt in

Dulbeccos MEM/NUT MIX F12 (Gibco, 21331-020) aangevuld met 10 % foetaal runderserum (Sigma, F4135, partij 90K8404

Verloopdatum 09/04), 2 mM glutamine (Sigma, G7513), 500 μg/ml geheticine (Sigma, G7034) en 10 μg/ml puromycine 10 (Sigma, P8833). Cellen werden gezaaid om ongeveer 90 % samenvloeiing te geven voor testen.

Assaymethode 15 25 μΐ/putje van elke dosis verbinding werd overge bracht in een cAMP-Flashplate® (NEN, SMP004B), met 1 % DM-SO als basale controles en 100 nM isoprenaline als max-controles. Dit werd 1:2 verdund door de toevoeging van 25 μΐ/putje PBS. Cellen werden getrypsiniseerd (0,25 % Sigma, 20 T4049), gewassen met PBS (Gibco, 14040-174) en opnieuw ge suspendeerd in stimuleringsbuffer (NEN, SMP004B) om 1 x 106 cellen/ml CH0hB2 te geven. Verbindingen werden geïncubeerd met 50 μΐ/putje cellen gedurende 1 uur. Cellen werden vervolgens gelyseerd door de toevoeging van 100 μΐ/putje de-25 tectiebuffer (NEN, SMP004B) die 0,18 pCi/ml 125I-cAMP (NEN, NEX-130) bevatte en platen werden een verdere 2 uur bij kamertemperatuur geïncubeerd. De hoeveelheid 125I-cAMP gebonden aan de Flashplate® werd gekwantificeerd met behulp van een Topcount NXT (Packard), normale telefficiëntie ge-30 durende 1 minuut. Dosis-reactiegegevens werden uitgedrukt als % isoprenalineactiviteit en gepast met behulp van een vier parameter sigmoïde passing.

Er is aldus gevonden dat de verbindingen met formule (1) volgens de onderhavige uitvinding die zijn geïllu-35 streerd in voorbeelden 1 tot 38 hierboven een p2-cAMP EC50 tussen 0,02 nM en 3,03 nM vertonen. De volgende tabel il- 1 028087 - 144 lustreert de activiteit van de verbindingen volgens de uitvinding:

Voorbeeld__EC50 (nM) _1_0,03_ 2_0,24_ _3_0,02_ _6_0,16_ 7_ 0,26_ _9_0,45_ 13_ 0,08__ _15_ 0,09_ 20 [o,29 ,1 02 8 0 87

Claims (47)

1. Verbinding met algemene formule (1): c OH

5 T η f J XT A—(CHjW j* ,n R1 R2 V NHSO9CH, 0 10 waarbij de (CH2) n~C (=0) Q1-groep in de meta- of para-positie is, R1 en R2 onafhankelijk worden gekozen uit 15 H en C1-C4 alkyl, n 0, 1 of 2 is en Q1 een groep is gekozen uit: R3 R4 o» · Γ \_/ R8 20 /f»u \ ——/1 _c * N--\ II C \P \\ /? 'R5 ^ */N 'R® R6 25 en een groep *-NR8-Q2-A, waarbij p 1 of 2 is, Q2 een C1-C4 alkyleen eventueel gesubstitueerd met één hy-droxygroep is, R8 H öf C1-C4 alkyl is en A pyridyl eventueel gesubstitueerd met OH, C3-C7 cycloalkyl 30 eventueel gesubstitueerd met OH, of een groep R3 R4 yTY^p. MVR5 35 R5 , R7 R6 of 1028087 is, waarbij R3, R4, R5, R6 en R7 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H, Ci-C4 alkyl, OR9, SR9, halogeen, CN, CF3, OCF3, COOR9, S02NR9R10, CONR9R10, 5 NR9R10, NHCOR10 en fenyl eventueel gesubstitueerd met 1 tot 3 groepen gekozen uit OR9, halogeen en Cx-C4 alkyl, waarbij R9 en R10 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H of Ci-C4 alkyl en de * het be-10 vestigingspunt aan de carbonylgroep voorstelt; waarbij de groep Q1 is gesubstitueerd met ten minste één hydroxygroep; of, indien geschikt, de farmaceutisch aanvaardbare zouten en/of isomeren, tautomeren, solvaten ër-15 van of isotöpe variaties daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij Q1 een groep *-NR8-Q2-A is, waarbij R8 H, CH3 of CH2CH3 is en A naf-tyl gesubstitueerd door één hydroxy is. 20

3. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij Q1 een groep *-NR8-Q2-A is, waarbij R8 H, CH3 of CH2CH3 is en A een groep R3 R4 25 \ / t\~S—RS R7 V 30 is, waarbij één van R3, R4, R5, R6 en R7 OH is en de andere hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H, Ci-C4 alkyl, OR9, SR9, halogeen, CF3, OCF3, 35 S02NR9R10, CONR9R10, NR9R10, NHCOR10, met dien verstande dat ten minste twee van R3 tot R7 gelijk zijn aan H; 1028087 waarbij R9 en R10 hetzelfde of verschillend zijn en worden gekozen uit H of C1-C4 alkyl.

4. Verbinding volgens conclusie 3, waarbij Q1 een groep 5 *-NH-Q2-A is en A een groep R3 R4 I—(7—R5 FP R6 is, waarbij één van R3, R4, R5, R1 en R2 OH is en de 15 andere hetzelfde of verschillend zijn en worden geko zen uit H, OH, CH3, OCH2-CH3, SCH3, halogeen, CF3, OCF3, met dien verstande dat ten minste 2 van R3 tot R2 gelijk zijn aan H.

5. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij Q1 een groep *-NR3-Q2-A is, waarbij R3 H, CH3 of CH2CH3 is en A een groep R3 R4 i-thR5 R7 R6 30 is, waarbij één van R3, R4, R5, R1 en R2 fenyl gesubstitueerd door OH is en de andere H zijn. 1028087 Verbinding volgens één der conclusies 1 tot 5, waar- 2 35 bij Q2 -CH2-, - (CH2) 2-, - (CH2) 3-, - (C (CH3) 2) “, "(CH2)4- 3 of -(CH(CH2OH) )- is.

7. Verbinding volgens conclusie 6, waarbij Q2 -CH2- is.

8. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij Q1

5 F *—N—( || H J R5 R6 10 is, waarbij één van R3, R4, R5 en R6 OH is en de andere H zijn.

9. Verbinding volgens conclusie 1, waarbij Q1 15 R3 R* *-n y—%

20 R6 is, waarbij één van R3, R4, R5 I en Rö OH is en de anderen H zijn.

10. Verbinding volgens één der conclusies 1 tot 10, waar bij R1 H of Ci-C4 alkyl is en R2 Ci~C4 alkyl is.

11. Verbinding volgens conclusie 11, waarbij R1 H of CH3 is en R2 CH3 is. 30

12. Verbinding volgens conclusie 12, waarbij η 1 is. 13. (R, R)-Stereoisomeer van een verbinding volgens één der conclusies 1 tot 12. 35

14. Verbinding volgens één der conclusies 1 tot 13, waarbij de (CH2)n-C (=0) Q1 groep in de meta-positie is. 1026087 1 ^_____

15. Verbinding volgens conclusie 1, gekozen uit de groep bestaande uit 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl-5 sulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-mèthylpropylJ- fenyl)-N-(4-hydroxy-3-methoxybenzyl)aceetamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amiho]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide;

10 N-(4-Chloör-2-hydroxybenzyl)-2-(3—{2 —[((2R)-2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)aceetamide; N-(4-Hydroxy-3,5-dimethylbenzyl)-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-15 ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)aceetamide; 2—(3—{2—[((2R)-2-Hydróxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl) amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}-fenyl)-N-[(2-hydroxy-l-naftyl)methyl]aceetamide; 2-(3-(2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl-20 sulfonyl)amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}- fenyl)-N-[(6-hydroxy-2-naftyl)methyl]aceetamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]—2—(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyljethyl) amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide;

25 N-[(3'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyljethyl) amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl) amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}-30 fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)-2-methylpropyl]aceet amide; N-(3,5-Dichloor-2-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2-{3—{2— [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)-amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceet-35 amide; 2-(3-{2-[((2R)-2^Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl) amino] fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}- 1028087 fenyl)-N-[(β-hydroxy-l-naftyl)methyl]-N-methylaceet-amide; N-[(2'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-5 ethyl)amino]-2-mèthylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2-(3-[2-(6-hydroxy-3,4-dihydroisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxoethyl]-fenyl}-1,1-dimethylethyl)amino]ethyl}fenyl)methaan-sulfonamide; 10 2-(3-[2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl sulfonyl) amino] fenyl]ethyl)amino]-2-methylpropyl}-fenyl)-N-[4-(4-hydroxyfenyl)butyl]aceetamide/ 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl) amino]fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}-15 fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]aceetamide; N-(2-Chloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3—(2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(3,5-Dichloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3-{2-[((2R)-2-20 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenylj ethyl) amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-(2,3-Dichloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3—{2— £((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyljethyl) amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; 25 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl sulfonyl) amino] fenyljethyl)amino]-2-methylpropyl}-fenyl)-N-[(4-hydroxy-l-naftyl)methyl]-aceetamide; 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl) amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropylJ-30 fenyl)-N-[3-hydroxy-5-(trifluormethyl)benzyl]aceet amide ; N-(2-Chloor-4-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2-(3-(2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino)-fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide;

35 N-(2-Chloor-4-hydroxybenzyl)-2-(3-(2-[((2R)-2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}- 1028087 ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-methylaceet-amide; N-(3-Fluor-5-hydroxybenzyl)-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)ethyl)-5 amino]-2-methylpropyl}fenyl)-N-methylaceetamide; N-[(2'-Hydroxybifenyl-2-yl)methyl]-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-[(3'-Hydroxybifenyl-2-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)—2— 10 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}- ethyl)amino]-2-methylpropyl]fenyl)aceetamide; N-(4-Hydroxy-2,6-dimethylbenzyl)-2-(3—{2—[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide;

15 N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2—{3—[2-(7- hydroxy-3,4-dihydroxyisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxo-ethyl]fenyl}-1,1-dimethylethyl)amino]ethyl}fenyl)-methaansulfonamide; N-(2-Hydroxy-5-{(IR)-l-hydroxy-2-[(2—(3—[2—(5— 20 hydroxy-3f 4-dihydroxyisochinolin-2(1H)-yl)-2-oxo- ethyl]fenyl)-l,1-dimethylethyl)amino]ethyl]fenyl)-methaansulfonamide; 2-(3 —{2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl·) amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}- 25 fenyl)-N-[(IR)-2-hydroxy-l-fenylethyl]aceetamide; 2-(3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-(4-hydroxy-3-((methylsulfonyl )amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}-fenyl)-N-[(IS)-2-hydroxy-l-fenylethyl]aceetamide; N-[(3'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]—2 —(3—{2 —[((2R)-2-30 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}- ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide; N-[(2'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3—{2 —[((2R)-2-hydröxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide;

35 N-[(4'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]—3—(2—[((2R)-2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}benzamide; 1028087 3-{2-[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl-sulfonyl)amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl}-N-[2-(4-hydroxyfenyl)-2-methylpropyl]benzamide; N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-3-{2-[((2R)—2— 5 hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}- ethyl)amino]-2-methylpropyl}benzamide; N-[2-(4-Hydroxy-2,5-dimethylfenyl)ethyl]-3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]-fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropylJbenzamide;

10 N-[2-(4-Hydroxy-2f 3-dimethylfenyl)ethyl]—3—{2—[((2R)- 2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]-fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropylJbenzamide; en 3— {2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl )amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl)-N- 15 [2-(4-hydroxy-3-methylfenyl)ethyl]benzamide.

16. N-[(4'-Hydroxybifenyl-4-yl)methyl]-2-(3-{2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl)-ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)aceetamide. 20

17. N-[(4'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3-(2-[((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-f(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide. 25 18. 2-(3—(2—[((2R)-2-Hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methyl sulfonyl) amino]fenyl)ethyl)amino]-2-methylpropyl}-fenyl)-N-[2-(4-hydroxyfenyl)-2-methylpropyl]aceetamide . 30 19. N-[(3'-Hydroxybifenyl-3-yl)methyl]-2-(3—{2—[((2R)-2- hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)amino]fenyl}-ethyl)amino]-2-methylpropyl}fenyl)aceetamide.

20. N-(3,5-Dichloor-2-hydroxybenzyl)-N-ethyl-2-(3—(2 — 35 [((2R)-2-hydroxy-2-{4-hydroxy-3-[(methylsulfonyl)- amino]fenyl}ethyl)amino]-2-methylpropyl)fenyl)-aceetamide. 1028087

21. Farmaceutisch preparaat omvattende een verbinding met formule (1) zoals beschreven in één der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of af- 5 geleide vorm daarvan, samen met gebruikelijke farma ceutisch onschadelijke excipiënten en/of toevoegmid-delen.

22. Verbinding met de formule (1) zoals beschreven in één 10 der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aan vaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan, voor toepassing als een geneesmiddel.

23. Verbinding met de formule (1) zoals beschreven in één 15 der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aan vaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan, voor toepassing bij de behandeling van ziekten, aandoeningen en kwalen waarbij de p2-receptor is betrokken . 20

24. Verbinding met de formule (1) zoals beschreven in één der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aan vaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan, voor toepassing bij de behandeling van ziekten, aan- 25 doeningen en kwalen gekozen uit de groep bestaande uit: • astma van om het even welk type, etiologie of pa-thogenese, in het bijzonder astma die een lid is gekozen uit de groep bestaande uit atopische astma, 30 niet-atopische astma, allergische astma, atopische bronchiale IgE-gemedieerde astma, bronchiale astma, essentiële astma, ware astma, intrinsieke astma veroorzaakt door pathofysiologische verstoringen, extrinsieke astma veroorzaakt door milieufactoren, 35 essentiële astma van onbekende of onduidelijke oor zaak, niet-atopische astma, bronchitische astma, emfysemateuze astma, oefening-geïnduceerde astma, 1028087 allergeen geïnduceerde astma, koude lucht geïnduceerde astma, beroepsastma, infectieve astma veroorzaakt door bacteriële, schimmel-, protozoale of virale infectie, niet-allergische astma, beginnende 5 astma, hijgend kind syndroom en bronchiolytis, • chronische of acute luchtpijpvernauwing, chronische bronchitis, obstructie van de kleine luchtwegen, en emfyseem, • obstructieve of ontstekingsluchtwegziekten van om 10 het even welk type, etiologie of pathogenese, in het bijzonder een obstructieve of ontstekingslucht-wegziekte die een lid is gekozen uit de groep bestaande uit chronische eosinofiele pneumonie, chronische obstructieve longziekte (COPD), COPD die 15 chronische bronchitis, longemfyseem of dyspneu al of niet verbonden met COPD omvat, COPD die wordt gekenmerkt door onomkeerbare, progressieve lucht-wegobstructie, volwassen ademhalingsnoodsyndroom (ARDS), versterking van luchtwèghyperreactiviteit 20 ten gevolge van andere geneesmiddeltherapie en luchtwegziekte die is verbonden met long hoge bloeddruk, j · bronchitis van om het even welk type, etiologie of pathogenese, in het bijzonder bronchitis die een 25 lid is gekozen uit de groep bestaande uit acute bronchitis, acute laryngotracheale bronchitis, ara-chidische bronchitis, catarrale bronchitis, kroep-bronchitis, droge bronchitis, infectieuze astmatische bronchitis, productieve bronchitis, staphylo-30 coccus of streptococcale bronchitis en blaasjes- bronchitis, ! • acuut longletsel, • bronchiectase van om het even welk type, etiologie of pathogenese, in het bijzonder bronchiectase die 35 een lid is gekozen uit de groep bestaande uit ci lindrische bronchiectase, blaasvormige bronchiectase, fusiforme bronchiectase, capillaire bronchiec- 1028087 tase, cystische bronchiectase, droge bronchiectase en folliculaire bronchiectase.

25. Toepassing van een verbinding met de formule (1) zo- 5 als beschreven in één der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan voor de bereiding van een geneesmiddel met een P2-agonistactiviteit.

26. Toepassing van een verbinding met de formule (1) zoals beschreven in één der conclusies 1 tot 20 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout, solvaat of preparaat daarvan voor de bereiding van een geneesmiddel voor de behandeling van ziekten, aandoeningen en kwalen, 15 gekozen uit de groep zoals beschreven in conclusie 24.

27. Werkwijze voor behandeling van een zoogdier, waaronder een menselijk wezen, met een p2-agonist, omvat- 20 tende het behandelen van genoemd zoogdier met een ef fectieve hoeveelheid van een verbinding met de formule (1) zoals beschreven in één der conclusies 1 tot 20 of met een farmaceutisch aanvaardbaar zout, afgeleide vorm of preparaat daarvan. 25

28. Werkwijze volgens conclusie 26, waarbij de ziekte, aandoening of kwaal wordt gekozen uit de groep zoals beschreven in conclusie 24.

29. Werkwijze voor de bereiding van een verbinding met formule (1) volgens één der conclusies 1 tot 20, waarbij genoemde werkwijze de volgende stappen omvat: (a) het koppelen van een zuur met formule (2): 35 1028087 (2) OH XJ Λ Ur(CHsY0H

5 HO U NHS02Me waarbij R1, R2 en n zijn zoals gedefinieerd in 10 conclusie 1, met een amine met formule NR8-Q2-A (3), JK VtV R" (3·), °f R6 (3"). waarbij R3 tot R6, R8, Q2 en A zijn zoals gedefi-20 nieerd in conclusie 1, (b) het isoleren van genoemde verbinding met formule (1) ·

30. Werkwijze voor de bereiding van een verbinding met 25 formule (1) volgens conclusie 1, waarbij R1 en R2 bei de methyl zijn en η 1 is, waarbij gedoemde werkwijze de Volgende stappen omvat: (a) het laten reageren van een verbinding met formule (21)

30 OH Y"8xyf“··x* NHS02Me (21) 35 1028087 waarbij X Η, K, Na, Li en potentieel een organische amine base of ander metaalzout is, met een geschikt amine met formule NHR8-Q2-A (3), 5 R3 R\ F RS

10 J\ N—< 1 I (CHA-A/^R5 H \^y^r5 HN / \R6 (3,χ of R6 (3”) in aanwezigheid van een conventioneel koppe-15 lingsmiddel zoals 1-(3-dimethylaminopropyl)-3- ethylcarbodiimidehydrochloride of dicyclohexyl-carbodiimide in een geschikt oplosmiddel zoals pyridine, dimethylformamide en dimethylaceetami-de eventueel in aanwezigheid van een organische 20 base en een toevoegmiddél om genoemde verbinding met formule (1) te verkrijgen. (b) het isoleren van genoemde verbinding met formule (1) ·

31. Werkwijze volgens conclusie 30, waarbij genoemde ver binding met formule (21) wórdt verkregen door hydro-genering van een verbinding met formule (22) OH NHSOgMé (22) 35 waarbij X H, Na, Li of K en potentieel een organisch amine of andere metaalzouten is, in aanwezigheid van 1028087 een geschikt oplosmiddel zoals methanol, IPA, THF en water en in aanwezigheid van een geschikte katalysator zoals palladiumhydroxide op kool of palladium op kool. 5

32. Werkwijze volgens conclusie 31, waarbij genoemde verbinding met formule (22) wordt verkregen door een verbinding met formule (23) , Λ OH

10. H rr°V NHS02Me (23) 15 te laten reageren met M-OH waarbij M wordt gekozen uit Na, of LiK, eventueel in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals propionitril, tetrahydrofu-20 ran of dioxaan.

33. Werkwijze volgens conclusie 32, waarbij genoemde verbinding met formule (23) wordt verkregen door een verbinding met formule (24) | 25 j OTBDMS

30 KJ "«“V* (24) te ontschermen, met behulp van een ontschermingsmid-del zoals tetrabutylammoniumfluoride, HF of triethyl-35 aminetrihydrofluoride in aanwezigheid van een ge schikt oplosmiddel zoals propionitril. 1028087

34. Werkwijze volgens conclusie 33, waarbij genoemde verbinding met formule (24) is door een verbinding met formule

5 HïN><^v^N^^0~CrC4a'ky| H*c g 10 te laten reageren met een verbinding met formule OTBDMS HN^s/CH3 /7 n O ° 20 in aanwezigheid van een geschikt oplosmiddel zoals propionitril, THF, tolueen, ethylacetaat, acetoni-tril, propionitril, dioxaan, DMF, DMSO, en eventueel in aanwezigheid van een base zoals natriumwaterstof-carbonaat, kaliumwaterstofcarbonaat, Hunig’s base of 25 triethylamine, bij een temperatuur tussen 50°C en 150°C gedurende 12 tot 36 uur.

35. Combinatie van een verbinding volgens één der conclusies 1 tot 20 met een ander therapeutische middel 30 (andere therapeutische middelen) gekozen uit: (a) 5-Lipoxygenase (5-LO) remmers van 5-lipoxygenase activerend proteïne (FLAP) antagonisten, (b) Leukotrieenantagonisten (LTRAs) waaronder antagonisten van LTB4, LTC4, LTD4 en LTE4, 35 (c) Histaminereceptorantagonisten waaronder Hl- en H3-antagonisten, 1028087 (d) di- en a2-adrenoceptoragonist vaatvernauwer sym-pathomimetische middelen voor decongestieve toepassing, (e) muscarinische M3-receptorantagonisten of anti- 5 cholinergische middelen, (f) PDE-remmers, b.v. PDE3-, PDE4- en PDE5-remmers, (g) Theofylline, j (h) Natriumcromoglycaat, (i) COX-remmers zowel niet-selectieve als selectieve

10 COX-1- of COX-2-remmers (NSAIDs), (j) Orale en geïnhaleerde glucocorticosteroïden, zoals DAGR (gedissocieerde agonist van de cortico-ide receptor) (k) Monoklonale antilichamën actief tegen endogene 15 ontstekingseenheden, (l) Anti-tumornecrosefactor (anti-TNF-α) middelen, (m) Hechtingsmolecuulremmers zoals VLA-4-antagonis-ten, (n) Kinine-Βι- en B2-receptorantagonisten, 20 (o) Immuno-onderdrukkende middelen, (p) Remmers van matrixmetalloproteases (MMPs), (q) Tachykinine ΝΚχ-, NK2- en NK3-receptorantagonis-ten, (r) Elastaseremmers, 25 (s) Adenosine A2a-receptoragonisten, (t) Remmers van urokinase, (u) Verbindingen die werken op dopaminereceptoren, b.v. D2-agonisten, (v) Modulatoren van het ΝΕκβ-pad, b.v. IKK-remmers, 30 (w) Modulatoren van cytokine signalerende paden zo als p38 MAP-kinase-, syk-kinase- of JAK-kinase-remmer (x) Middelen die kunnen worden geclassificeerd als mucolytica of antihoestmiddel, en 35 (y) Antibiotica. 1028087