MXPA99012087A - Derivados de benzo (5,6)ciclohepta(1,2b)piridina utiles para inhibicion de farnesil proteina transferasa - Google Patents

Abstract

Nuevos compuestos de fórmula 1.0 o una sal o solvato del mismo aceptables farmacéuticamente, caracterizados porque:a representa N o NO-;R1 y R3 son los mismos o diferentes y cada uno representa halo;R2 y R4 son seleccionadas independientemente cada una de H y halo, con la condición de que al menos una de R2 y R4 es H;cada línea punteada (---) representa un enlace opcional;X es N, C cuando el enlace opcional a X estápresente, o CH cuando el enlace opcional a X estáausente;T es un sustituyente seleccionadode (A) o (B);Z representa 0 o S;R representa -C(O)N(RlO)2, -CH2C(O)N(RlO)2, -S02R10,- S02N(Rl0)2, -C(O)R1I, -C(O)-O-Rll, alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo o heteroarilo;R5 representa alquilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, cicloalquilo, OR12, NR12H, SH, SR12, SOR (en donde R12 no es H), o S02R12 (en donde R12 no es H);y cada R10 representa independientemente H, alquilo, arilo, o aralquilo;R11 es alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heterocicloalquilo;R12 se selecciona de H, alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, o heterocicloalquilo;también se describen métodos para inhibir farnesil-proteína transferasa y métodos para tratar células tumorales.

Description

DERIVADOS DE BENZO (5,6)C1CLQHEPTA(1 ,2B)P1R1DINA ÚTILES PARA INHIBICIÓN DE FARNESIL PROTEINA TRANSFERASA ANTECEDENTES WO 95/10516, publicada el 20 de abril de 1995, describe compuestos tricíclicos útiles para inhibir farnesii-proteína transferasa. En vista del actual interés en inhibidores de farnesil-proteína transferasa, una contribución bienvenida a la técnica serían compuestos útiles para la inhibición de farnesil-proteína transferasa. Tal contribución se provee mediante esta invención.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención proporciona compuestos útiles para la inhibición de famesil-proteína transferasa (FPT). Los compuestos de esta invención están representados por la fórmula: O una sal o solvato aceptable farmacéuticamente de los mismos, en la cual: a representa N o NO-; R1 y R3 son los mismos o diferentes y cada uno representa halo; R2 y R4 son seleccionados cada uno independientemente de H y halo, con la condición de que al menos uno de R2 y R4 es H; Cada línea punteada ( — ) representa un enlace opcional; X es N, C cuando el enlace opcional a X está presente, o CH cuando el enlace opcional a X está ausente; T es un sustituyente seleccionado a partir de: Z representa O u S; R representa -C(O)N(R10)2, -CH2C(O)N(R10)2, -SO2R10, -SO2N(R10)2( -C(O)R11, -C(O)-O-R11, alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo o heteroarilo; R5 representa alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, cicloalquilo, OR12, NR12H, SR12, SOR12 (en donde R12 no es H), o SO2R12 (en donde R12 no es H); y Cada R10 representa independientemente H, alquilo, arilo, o araiquiio (por ejemplo, bencilo); R11 es alquilo, arilo, araiquilo, heteroarilo, heterocicloalquilo; R12 se selecciona de H, alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo, o heterocicloalquilo. Los compuestos de esta invención: (i) inhiben potencialmente famesii-proteína transferasa, pero no geraniigeranilo-proteína transferasa I in vitro; (ii) bloquean ei cambio fenotípico inducido mediante una forma de Ras transformante el cuai es un aceptor farnesilo pero no mediante una forma de Ras transformante diseñado genéticamente para ser un aceptor geranilgeranilo; (iii) bloquean el procesamiento intracelular de Ras el cual es un aceptor farnesiio pero no de Ras diseñado genéticamente para ser un aceptor geraniigeranilo; y (iv) bloquean el crecimiento anormal de células en cultivo inducido por Ras transformante. Los compuestos de esta invención inhiben farnesil-proteína transferasa y la famesiiación de oncogen Ras de proteína. De esta manera, esta invención proporciona adicionalmente un método para inhibir farnesil-proteína transferasa, (por ejemplo, farnesil proteína transferasa ras) en mamíferos, especialmente humanos, mediante la administración de una cantidad efectiva de los compuestos de fórmula LO. La administración de los compuestos de esta invención a pacientes, para inhibir famesii-proteína transferasa, es útil en el tratamiento de los cánceres descritos enseguida.

Esta invención provee un método para inhibir o tratar ei crecimiento anormal de células, ¡ncluyendo células transformadas, mediante la administración de una cantidad efectiva dei compuesto de esta invención. El crecimiento anormal de células se refiere a crecimiento de células independiente de mecanismos reguladores normales (por ejemplo, pérdida de inhibición de contacto). Este incluye el crecimiento anormal de: (1 ) células tumorales (tumores) que expresan un oncogen Ras activado; (2) células tumorales en las cuales la proteína Ras está activada como resultado de mutación oncogénica en otro gen; y (3) células benignas y malignas de otras enfermedades proliferativas en las cuales ocurre activación de Ras aberrante. Esta invención también provee un método para inhibir o tratar el crecimiento de tumores mediante la administración de una cantidad efectiva de los compuestos de fórmula 1.0 a un mamífero (por ejemplo, un humano) en necesidad de dicho tratamiento. En particular, esta invención provee un método para inhibir o tratar el crecimiento de tumores que expresan un oncogen Ras activado mediante la administración de una cantidad efectiva de los compuestos descritos anteriormente. Ejemplos de tumores que pueden ser inhibidos o tratados incluyen, pero no están limitados a, cáncer de pulmón (por ejemplo, adenocarcinoma de pulmón), cánceres pancreáticos (por ejemplo, carcinoma pancreático como, por ejemplo, carcinoma pancreático exócrino) cánceres de colon (por ejemplo carcinomas colorectales, como, por ejemplo, adenocarcinoma de colon y adenoma de colon), leucemias mieloides (por ejemplo, leucemia mielógena aguda (AML)), cáncer folicular de tiroides, síndrome mielodisplástico (MDS), carcinoma de vejiga, carcinoma epidérmico, cáncer de pecho y cáncer de próstata. Se cree que esta invención también provee un método para inhibir o tratar enfermedades proliferativas, tanto benignas como malignas, en las cuales las proteínas Ras son activadas de manera aberrante como resultado de mutación oncogénica en otros genes -es decir, el gen Ras en sí no es activado mediante mutación a una forma oncogénica-- con dicha inhibición o tratamiento siendo logrado mediante la administración de una cantidad efectiva de los compuestos de fórmula 1.0 a un mamífero (por ejemplo, un humano) en necesidad de dicho tratamiento. Por ejemplo, el trastorno proliferativo benigno neurofibromatosis, o tumores en los cuales Ras es activado debido a mutación o sobreexpresión de oncogenes de tirosina quinasa (por ejemplo, neu, src, abl, Ick, y fyn), puede ser inhibido o tratado mediante los compuestos de fórmula 1.0. Los compuestos de fórmula 1.0 útiles en los métodos de esta invención inhiben o tratan el crecimiento anormal de células. Sin desear estar adherido por la teoría, se cree que estos compuestos pueden funcionar a través de la inhibición de la función de proteína G, como ras p21 , bloqueando la isoprenilación de proteína G, haciéndolos por lo tanto útiles en el tratamiento de enfermedades proliferativas como crecimiento de tumor y cáncer. Sin desear estar adherido por la teoría, se cree que estos compuestos inhiben farnesil-proteína transferasa ras, y por tanto muestran actividad antiproliferativa contra células transformadas por ras.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Como se utilizan en la presente, los siguientes términos se utilizan como se define en seguida a menos que se indique de otra manera: MH+- representa el ion molecular más hidrógeno de la molécula en el espectro de masa; Et (o ET)- representa etilo (C2H5); Alquilo- representa cadenas de carbono rectas o ramificadas que contienen de uno a veinte átomos de carbono; Halo- representa flúor, cloro, bromo y yodo. Cicloalquilo- representa anillos carbocíciicos saturados ramificados o no ramificados de 3 a 20 átomos de carbono, preferiblemente 3 a 7 átomos de carbono; Heterocicloalquilo- representa un anillo carbocíclico saturado, ramificado o no ramificado que contiene de 3 a 15 átomos de carbono, preferiblemente de 4 a 6 átomos de carbono, cuyo anillo carbocíclico está interrumpido por de 1 a 3 grupos hetero seleccionados de -O-, -S- o - NR12-(grupos heterocicloalquilo adecuados ¡ncluyen 2- o 3-tetrahidrofuranilo, 2- o 3-tetrahidrotienilo, 2-, 3- o 4-piperidiniio, 2- o 3-pirrolidinilo, 2- o 3-piperizinilo, 2- o 4-dioxanilo, etc.); Arilo (¡ncluyendo la porción arilo de ariloxi y aralquilo)- representa un grupo carboxílico que contiene de 6 a 15 átomos de carbono y que tiene al menos un anillo aromático (por ejemplo, arilo es un anillo fenilo (ph)), con todos los átomos de carbono sustituibles disponibles del grupo carboxílico estando diseñados como puntos posibles de adhesión, dicho grupo carboxílico estando sustituido opcionalmente (por ejemplo, 1 a 3) con uno o más halo, alquilo, hidroxi, alcoxi, fenoxi, CF3, amino, alquilamino, dialquilamino, -COOR10 o -NO2; y Heteroarilo- representa grupos cíclicos, sustituidos opcionalmente con R10, que tienen al menos un heteroátomo seleccionado de O, S o N, dicho heteroátomo interrumpe la estructura del anillo carbocíclico y tiene un número suficiente de electrones pi deslocalizados para proporcionar carácter aromático, con los grupos heterocíclicos aromáticos conteniendo preferiblemente de 2 a 14 átomos de carbono, por ejemplo, triazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, o N-óxido de piridilo (sustituido opcionalmente con R3 y R4) en el cual el N-óxido de piridilo puede ser representado como: Los siguientes solventes y reactivos son referidos en la presente mediante las abreviaturas indicadas: etanol (EtOH); metanol (MeTOH); ácido acético (HOAc o AcOH); acetato de etilo (EtOAc); N, N-dimetilformamida (DMF); ácido trifluoroacético (TFA); ácido trifluoroacético anhídrido (TFAA); clorhidrato de 1-hidroxibenzotriazola (HOBT); 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil carbamida (DEC); trimetilsililo (TMS); ácido m-cloro-peroxibenzoico (MCPBA); diisopropilamida de litio (LDA); sulfóxido de dimetilo (DMSO); borohidruro de sodio (NaBH ); hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL); y 4-metilmorfolina (NMM). Las posiciones en el sistema de anulo tricícüco son: Aquéllos expertos en la técnica apreciarán también que la estereoquímica S y R para la posición C-11 del anillo tricíclico cuando X es CH o N es como sigue: Los átomos halo preferidos para R1 , R2, R3 y R4 en ia fórmula 1.0 se seleccionan a partir de Br, Cl o I, con Br y Cl siendo preferidos. Los compuestos de la fórmula 1.0 incluyen compuestos de la fórmula: " En las cuales R1 y R3 son el mismo o diferente halo y a, X, R5, R y las líneas punteadas son como se definen anteriormente. Preferiblemente, para estos compuestos dihalo, R1 y R3 se seleccionan independientemente de Br y Cl, y más preferiblemente Br y R3 es Cl. Preferiblemente, X es CH o N, con CH siendo más preferido. Los compuestos de fórmula 1.0 incluyen compuestos de fórmulas 1.1a y 1.1b y fórmulas 1.2a y 1.2b: En las cuales R1, R3 y R4 en las fórmulas 1.1 a y 1.1b son halo, y R1, R3 y R4 en las fórmulas 1.2a y 1.2b son halo y en las cuales a, X, R, R5, y las líneas punteadas son como se describe anteriormente. Los compuestos de fórmulas 1.1a y 1.1 b son preferidos. Preferiblemente, en las fórmulas 1.1 a y 1.1b R1 es Br, R3 es Cl, y R4 es halo. Más preferiblemente, en las fórmulas 1.1 a y 1.1b R1 es Br, R3 es Cl, y R4 es Br. Preferiblemente en las fórmulas 1.2 a y 1.2b R1 es Br, R2 es halo, y R3 es Cl. Más preferiblemente, en las fórmulas 1.2 a y 1.2b R1 es Br, R2 es Br, y R3 es CI. Preferiblemente para los compuestos de fórmulas 1.1 a, 1.1b, 1.2 a y 1.2 b, X es CH o N. Para los compuestos de fórmulas 1.1 a y 1.1 b, X es preferiblemente CH. Preferiblemente, para los compuestos de esta invención, el enlace opcional entre las posiciones 5 y 6 ( es decir, C5-C6) en el sistema tricíclico está ausente.

Además, preferiblemente, para los compuestos de esta invención, el sustituyente a en el anillo i representa N y el eniace doble opcional en la posición 11 está ausente. Aquéllos expertos en la técnica apreciarán que los compuestos de la fórmula 1.0 ¡ncluyen los compuestos de ias fórmulas 1.3 y 1.4: En las cuales X es CH o N, con los compuestos de 1.3 siendo preferidos para compuestos de fórmula 1.1 y con los compuestos de fórmula 1.4 siendo preferidos para compuestos de fórmula 1.2. Los grupos T preferidos para utilizarse en la presente invención incluyen: Ciertos compuestos de la invención pueden existir en diferentes formas isométricas (por ejemplo enantiómeros y diastereoisómeros). La invención contempla todos los dichos isómeros tanto en forma pura como en mezcla, incluyendo mezclas racémicas. También están incluidas las formas enol.

Ciertos compuestos de fórmula 1 .0 serán de naturaleza acida, por ejemplo aquellos compuestos que poseen solamente u? grupo hidroxilo carboxilo o fenólico. Estos compuestos pueden formar sales aceptables farmacéuticamente. Ejemplos de tales sales pueden incluir sales de sodio, potasio, calcio, aluminio, oro y plata. También están contempladas las sales formadas con aminas aceptables farmacéuticamente como amoníaco, alquilaminas, hidroxialquilaminas, N-metilglucamina y similares. Ciertos compuestos básicos de fórmula 1 .0 también forman sales aceptables farmacéuticamente, por ejemplo, sales acidas de adición. Por ejemplo, los átomos de pirido-nitrógeno pueden formar sales con ácido fuerte, mientras que los compuestos que tienen sustituyentes básicos como grupos amino también forman sales con ácidos más débiles. Ejemplos de ácidos adecuados para formación de sal son clorhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, cítrico, oxálico, malónico, salicíüco, málico, fumárico, succínico, ascórbico, maléico, metanesulfónico y otros ácidos minerales y carboxílicos bien conocidos para aquellos expertos en la técnica. Las sales se preparan contactando la forma de base libre con una cantidad suficiente del ácido deseado para producir una sal en la manera convencional. Las formas de base libre pueden ser regeneradas tratando la sal con una solución de base acuosa diluida adecuada como NaOH acuoso diluido, carbonato de potasio, bicarbonato de amoníaco y de sodio. Las formas de base libre difieren de alguna manera de sus respectivas formas de sales en ciertas propiedades físicas, como solubilidad en solventes polares, pero las sales de acidas y básicas son de alguna otra manera equivalentes a sus respectivas formas de base libre para objetos de la invención. Todas las mencionadas sales básicas y acidas están diseñadas para ser sales aceptables farmacéuticamente dentro del alcance de la invención y todas las sales básicas y acidas están consideradas equivalentes a las formas libres de los compuestos correspondientes para objetos de la invención. Los intermediarios útiles en la preparación de los compuestos de la invención pueden ser preparados de acuerdo con los procedimientos descritos en WO 95/10516 del 20 de abril de 1995, en WO 96/30363 del 3 de octubre de 1996, la patente de E.U.A. No. 5,151 ,423 y mediante los métodos descritos enseguida. Los compuestos de la invención pueden ser preparados de acuerdo a la reacción: En la reacción, el ácido cárboxíiico (14.0 o 14.1 ) (que puede ser también una sal de metal alcalino como sal de litio de 14.0 o 14.1 o un halogenuro ácido del ácido) está acoplado a la amina tricíclica (13.0) utilizando condiciones de formación de enlace de amina bien conocidas para aquellos expertos en la técnica. Los substituyentes son como están definidos para la fórmula 1 .0. Por ejemplo, los métodos de acopiamiento de carbodiimida (por ejemplo DEC) pueden ser utilizados. Por ejemplo, el ácido carboxílico (14.0 o 14.1 ) puede ser hecho reaccionar con la amina tricíclica (13.0) utilizando DEC/HOBT/NMM en DMF a 25°C por un tiempo suficiente, por ejemplo, aproximadamente 18 horas, para producir un compuesto de fórmula 1.0. Los ácidos carboxíiicos (14.0 y 14.1 ) se preparan mediante métodos bien conocidos en la técnica. Los procedimientos generales descritos enseguida pueden ser utilizados para preparar los compuestos de fórmulas 14.0 y 14.1 anteriores. En los esquemas mostrados enseguida, está ilustrado el grupo 4-piperdinilo, pero un. grupo 3-piperdinilo puede ser utilizado en esencialmente la misma manera. El compuesto de fórmula 16.0 está disponible comercialmente de Aldrich. El análogo 3-piperdinilo de fórmula 16.0 se describe en A. Tercinet, Bull. Soc. Chem. France 11 , p. 500 (1944). 16.0 17.0 18.0 Cuando R es un grupo R', en el cual R' es -SO2R10, -SO2N(R10)2, alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, heterocicioaiquilo o heteroarilo, el grupo R' puede ser colocado sobre nitrógeno de piperdinilo en el primer paso, es decir, mediante reacción de fórmula 16.0 con un compuesto R'Y', en donde Y' es halo como Cl, Br, o I en el caso de -SO2R10, -SO2N(R10)2, alquilo, aralquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo o heteroariio, y Y' es I en el caso de arilo (utilizando Pd catalizador y bromuro de tetrabutil amonio en DMF). Alternativamente, R' puede ser un grupo protector (Pro) como un grupo p-nitrobenzensulfonato o bencilo, el cual puede ser colocado sobre nitrógeno de piperdinilo en el primer paso mediante reacción de p-nitrobenzensulfoniio o cloruro de bencilo en presencia de TEA en CH2CI2 con el compuesto de fórmula 16.0 o su análogo 3-piperdinilo. En este caso, R' representará Pro en las fórmulas 17.0 y 18.0 anteriores. Si R' es un grupo protector (Pro), puede ser reemplazada con un grupo R adecuado como se describe más tarde enseguida. Para preparar compuestos de fórmulas 14.0 y 14.1 en las cuales R5 es R5a la cual representa alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroarilalquilo o cicloalquilo, puede ser utilizado el siguiente esquema de reacción, en donde R' es como se describe anteriormente: Si R' es un grupo protector (Pro), puede ser reemplazado con un grupo R adecuado como se describe más tarde. Estas reacciones están ilustradas en los ejemplos preparativos 10-16 enseguida. El grupo protector en 23.0 en donde R' es Pro puede ser removido mediante hidrogenación catalítica en el caso de Pro=benciio o mediante tratamiento con NaSMe en el caso de p-nitrobenzensulfonilo. Para preparar los compuestos de fórmulas 14.0 y 14.1 en los cuales R5 es SR12, SOR12 o SO2R12, puede ser utilizado el siguiente esquema de reacción, en donde R' es como se describe anteriormente: 28.0 En el primer paso, el tratamiento del compuesto 18.0 con el anión del acetato etil trimetilsililo proporciona 24.0, seguido por la adición de Michael del tiolato de sodio proporciona 25.0, el éster del cual puede saponificado con hidróxido de sodio acuoso para proporcionar 26.0 siguiendo la protonación con ácido acuoso. La oxidación de 26.0 con MCPBA en exceso proporciona 28.0 Para compuestos en los cuales R5 es SOR12, el grupo SR12 en la fórmula 26.0 enseguida puede ser oxidizado utilizando 1 equivalente de MCPBA en CH2CI2 a temperatura ambiente. Para preparar compuestos de fórmulas 14.0 y 14.1 en las cuales R5 es OR12, puede ser utilizado el siguiente esquema de reacción, en donde R' es como se describe anteriormente: El tratamiento de 24.0 con peróxido de hidrógeno básico proporciona el epóxido 29.0, el cual puede ser reducido utilizando hidrogenación catalítica para dar 30.0 La hidrólisis del éster en 30.0 proporciona 31.0 siguiendo la protonación. El tratamiento de 30.0 con hidruro de sodio y un agente alquilatador adecuado proporciona 32.0, ei cual puede ser saponificado y protonatado similarmente como anteriormente. De manera alternativa, el tratamiento de 24.0 con la sal de sodio de R12OH proporciona 34.0, el cual cuando es saponificado y protonatado da 35.0 Para preparar compuestos de fórmulas 14.0 y 14.1 en las cuales R5 es NHR12, puede ser utilizado el siguiente esquema de reacción, en donde R' es como se describe anteriormente: Cicioadición dipolar [3+2] de 24.0 con R12 azida en dioxano en • reflujo da 36.0, ei cuai puede ser reducido utilizando hidrogenación catalítica seguida por saponificación con LiOH para dar 37.0 Los compuestos de fórmula 13.0 pueden ser preparados a partir de compuestos de fórmula 13.0a: En la cual R6 es alquilo, carboalcoxi o cualquier otro grupo que puede ser convertido a un grupo T. Los compuestos de fórmula 13.0a se preparan mediante métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante métodos descritos.-en WO 95/10516 del 20 de abril de 1995, en WO 96/30363 del 3 de octubre de 1996, la patente de E.U.A. No. 5,151 ,423 y mediante los métodos descritos enseguida. Los compuestos de fórmula 13.0a en los cuales X es C (cuando el enlace doble está presente) o CH y ia posición C-3 del anillo piridina en la estructura tricíclica es sustituida por bromo (es decir, R1 es Br) también pueden ser preparados mediante un procedimiento que consta de los siguientes pasos: (a) reaccionar la amida de la fórmula En la cual R5b es hidrógeno y R6b es alquilo de C1-C6, ariio o heteroarilo; R5b es alquilo de C1-C6, arilo o heteroarilo y R6b es hidrógeno; R5b y R6b se seleccionan independientemente del grupo consistente de alquilo de C1- C6 y arilo; o R5b y R6b, juntas con el nitrógeno ai cuai están adheridas, forman un anillo que consta de 4 a 6 átomos de carbono o que consta de 3 a 5 átomos de carbono y una porción hetero seleccionada del grupo consistente de -O-, y - NR9b-, en la cual R9b es H, alquilo de C1-C6 o fenilo; Con un compuesto de la fórmula: En la cual R2, R3 y R4 son como se define anteriormente y R7b es Cl o Br, en presencia de una base fuerte para obtener un compuesto de la fórmula (b) reaccionar un compuesto del paso (a) con (i) POCI3 para obtener un compuesto de ciano de la fórmula: (ii) DIBALH para obtener un aldehido de la fórmula: (c) reaccionar el compuesto de ciano o el aldehido con un derivado de piperidina de la fórmula: En la cual L es un grupo residual seleccionado del grupo consistente de Cl y Br, para obtener una cetona de la fórmula enseguida: (d) (i) ciclizar la cetona con CF3SO3H para obtener un compuesto de fórmula 13.0a en la cual la línea punteada representa un enlace doble y en la cual R6 es metilo; o (d) (ii) ciclizar el alcohol con ácido poi.fosfórico para obtener un compuesto de fórmula 13.0a en la cual lo que la línea punteada representa está ausente (es decir, representa un enlace sencillo) y en la cual R6 es metilo. El grupo R6 metilo puede ser convertido a H mediante tratamiento con cloroformato de etilo en tolueno de reflujo, seguido por hidrólisis acida con ácido clorhídrico en reflujo.

Los métodos para preparar compuestos de fórmula 13.0a descritos en WO 95/10516, la patente de E.U.A. No. 5,151 ,423 y los métodos descritos enseguida utilizan un intermediario de cetona tricíclica. Tales intermediarios de la fórmula En la cual R1, R2, R3 y R4 son como se definen anteriormente, pueden ser preparados mediante el siguiente procedimiento que consta de: (a) reaccionar el compuesto de la fórmula (i) con una amina de la fórmula NHR5aR6a en la cual R5a y R6a son como se definen en el procedimiento anterior; en presencia de un catalizador de paladio y monóxido de carbono para obtener una amida de la fórmula: Q O (ii) con un alcohol de la fórmula R 0bOH, en la cual R10b es alquilo inferior de C1-C6 o cicloalquilo de C3-C6, en presencia de un catalizador de paladio y monóxido de carbono para obtener el éster de la fórmula: Seguido por la reacción del éster con una amina de la fórmula NHR5bR6b para o tener |a amida; (b) reaccionar la amida con un compuesto de bencilo sustituido por yodo de la fórmula: En la cual R2, R3, R4 y R7b son como se definen anteriormente, en presencia de una base fuerte para obtener un compuesto de la fórmula Y (c) ciclizar un compuesto del paso (b) con un reactivo de la fórmula R8bMgL, en la cual R8b es alquilo de C1-C8, arilo o heteroarilo y L es Br o Cl, con la condición de que antes de la ciciización, los compuestos en los cuales R5b o R6b es hidrógeno son hechos reaccionar con un grupo N-protector adecuado. Los compuestos de la fórmula 13.0c enseguida están descritos en WO 95/10516 del 20 de abril de 1995, en WO 96/30363 del 3 de octubre de 1996, y en la patente de E.U.A. No. 5,151 ,423. Estos compuestos pueden ser utilizados como intermediarios para preparar compuestos de fórmula 1.0 que tienen un enlace doble entre las posiciones 5 y 6 dei anillo tricíclico mediante las reacciones ilustradas enseguida.

Un compuesto de fórmula 13.0c puede ser tratado con ácido sulfúrico concentrado y después KNO3 para dar el compuesto de fórmula 13.0d. El grupo 9-nitro puede después ser convertido a un grupo 9-amipo mediante reducción con Fe y CaCI2. El compuesto de fórmula 13.0e puede ser halogenado en la posición 10 mediante la adición de cloro o bromo en HOAc. El compuesto 10-yodo puede ser preparado mediante tratamiento de 13.0e con yodo en sulfato de plata etanólico. El grupo 9-amino puede ser removido mediante tratamiento con t-butilnitrito, DMF y calor para dar un compuesto de fórmula 13.0g, el cual puede ser tratado con HCl concentrado y calor para dar el compuesto deseado de la fórmula 13.0h.

Los compuestos de fórmula 13.0e anterior pueden ser también utilizados para preparar compuestos de fórmula 13.0 en la cual R2 es halo y hay un enlace doble entre las posiciones 5 y 6 del anillo tricíclico mediante el esquema de reacción descrito enseguida: El compuesto de fórrnula 13.0e es tratado con ácido sulfúrico concentrado, enfriado y después tratado con 1 ,3-dihalo-5,5-dimetil-hidrantoina u otro agente de halogenación adecuado. El producto de fórmula 13.0i es reducido con CaC y Fe para dar el compuesto 7-halo-9-amino de fórmula 13.0j. El grupo 9-amino puede ser removido mediante tratamiento con NaNO2y HCl concentrado y después H3PO2. El producto de fórmula 13.0m puede ser tratado con HCl concentrado para producir el, intermediario deseado de fórmula 13.0m.

Los compuestos de fórmulas 13.0h y 13.0n en los cuales hay un enlace doble en la posición 11 y X es C también pueden ser utilizados para preparar compuestos de fórmula enseguida mediante tratamiento con CH3CN/H2O y después NalÜ4 y RuO2. La reducción de la cetona con borohidruro de sodio en metanol seguido por tratamiento con cloruro de tionilo y después piperazina da un intermediario de fórmula 13.0p enseguida: Los compuestos de fórmula 1.0, en las cuales ei sustituyente a es NO (Anillo I) y X es C o CH, pueden ser fabricados a partir de compuestos de fórmula 13.0a utilizando procedimientos bien conocidos para aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo el compuesto de fórmula 13.0a puede ser hecho reaccionar con ácido m-cloroperoxibenzoico en un solvente orgánico adecuado, por ejemplo diclorometano (normalmente anhidro) o cloruro de metiieno, a una temperatura adecuada, para producir el compuesto de fórmula 13.0b En general, la solución de solvente orgánico de fórmula 13.0a se enfría a 0°C antes de que sea añadido el ácido cloroperoxibenzoico. La reacción se permite enfriar después a temperatura ambiente durante el periodo de reacción. El producto deseado puede ser recuperado mediante medios de separación estándar. Por ejemplo, la mezcla de reacción puede ser lavada con una solución acuosa de una base adecuada, por ejemplo, bicarbonato de sodio saturado o NaOH (por ejemplo 1 N NaOH), y después secada sobre sulfato de magnesio anhidro. La solución que contiene el producto puede ser concentrada in vacuo. El producto puede ser purificado por medios estándar, por ejemplo, mediante cromatografía utilizando gel de sílice (por ejemplo columna de cromatografía por vaporización). De manera alternativa, los compuestos de fórmula 1.0, en los cuales el sustituyente a es NO y X es C o CH, pueden ser fabricados a partir de compuestos de fórmula 1 .0 en los cuales el sustituyente a es N, mediante procedimiento de oxidación de ácido m-cloroperoxibenzoico descrito anteriormente. Además, de manera alternativa, los compuestos de fórmula 1.0 en los cuales el sustituyente a es NO y X es C o CH, pueden ser fabricados a partir de compuestos de cetona tricíclicos.

(I) Utilizando el procedimiento de oxidación con ácido m-cloroperoxibenzoico. Los compuestos intermediarios oxidizados Son después hechos reaccionar mediante métodos conocidos en la técnica para producir compuestos de la invención. Aquellos expertos en la técnica apreciarán que la reacción de oxidación puede ser conducida sobre mezclas racémicas y los isómeros pueden ser separados después mediante técnicas conocidas, o los isómeros pueden ser separados primero y después oxidizados al N-óxido correspondiente. Aquellos expertos en la técnica apreciarán que es preferible evitar un exceso de ácido cloroperoxibenzoico cuando la reacción de oxidación es llevada a cabo en los compuestos que tienen un enlace doble de C-1 1 al anillo IV de piperidina. En esas reacciones un exceso de ácido cloroperoxibenzoico puede causar la epoxidación del enlace doble de C-1 1. Los isómeros (+)- de compuestos de fórmula 13.0a en los cuales X es CH y R6 es H, pueden ser preparados con alta enantioseiectividad utilizando un procedimiento que comprende la transesterificación catalizada de enzima. Preferiblemente, un compuesto racémico de fórmula 13.0a, en el cual X es C, R6 es H, ei enlace doble está presente y R4 no es H, se hace reaccionar con una enzima como Toyobo LlP-300 y un agente aciiatador como isobutirato de trifluoroetilo; la amida (+)- resultante es hidrolizada después, por ejemplo bajo reflujo con un ácido como H2S04, para obtener el isómero (+)- ópticamente enriquecido correspondiente en el cual X es CH y R3 no es H. De manera alternativa, un compuesto racémico de fórmula 13.0a, en el cual X es C, R6 es H, el enlace doble está presente y R4 no es H, se reduce primero al compuesto racémico de fórmula 13.0a en el cual X es CH y después con la enzima (Toyobo LIP-300) y un agente acilatador como se describe anteriormente para obtener la amida (+)-, la cual es hidrolizada para obtener el isómero (+)- enriquecido ópticamente puro. Los compuestos de la invención, en los cuales a es NO y X es N, pueden ser preparados a partir de la cetona tricíclica (II) descrita anteriormente. La cetona (II) puede ser convertida al compuesto hidroxi de C-1 1 el cual a su vez puede ser convertido al compuesto de cloro de C-1 1 Y (IV) puede ser reaccionado con piperazina para producir el intermediario El intermediario (V) puede después ser reaccionado con los reactivos, utilizando técnicas bien conocidas en el arte, lo cuai proporciona el compuesto deseado. Los compuestos de fórmula 1 .0 en los cuales Z es S pueden ser preparados a partir de compuestos de fórmula 1 .0 en los cuales Z es O mediante tratamiento con reactivo de transferencia de azufre adecuado como reactivo de Lawsson. Los compuestos de la invención que tienen carbonos asimétricos (por ejemplo compuestos de la invención en los cuales X es CH o N que tienen un carbono asimétrico en la posición C-1 1 del anillo tricíclico) pueden ser separados en enantiómeros mediante técnicas conocidas en el arte, por ejemplo, resolución de sal quiral o mediante HPLC quirai. Los compuestos útiles de esta invención están ilustrados por los siguientes ejemplos, los cuales no deben ser considerados para limitar el alcance de la descripción.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 1 Combinar 14.95 g (39 mmoles) de 8-cloro-11-(1-etoxi-carbonii-4-piperidinil)-11 H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridina y 150 mL de CH2CI2, después añadir 13.07 g (42.9 mmoles) de (nBu) NNO3 y enfriar la mezcla a 0°C. Añadir lentamente (mediante goteo) una solución de 6.09 mL (42.9 mmoles) de TFAA en mL de CH2CI2 durante 1.5 horas. Mantener la mezcla a 0°C durante la noche, después lavar sucesivamente con NaHCO3 saturado (acuoso), agua y salmuera. Secar la solución orgánica sobre Na2SO4, concentrar in vacuo a un residuo y cromatografiar el residuo (gel de sílice, gradiente de EtOAc/exano) para dar 4.32 g y 1.90 g de los dos compuestos de producto IA(i) y IA(i¡), respectivamente. Espectro de masa para compuesto IA(i): MH+ = 428.2. Espectro de masa para compuesto IA(ii): MH+ = 428.3.

Combinar 22.0 g (51.4 mmoles) del producto IA(i) del paso A, 150 mL de EtOH al 85% (acuoso), 25.85 g (0.463 mole) de polvo de Fe y 2.42 g (21.8 mmoles) de CaC , y calentar a reflujo durante la noche. Añadir 12.4 g (0.222 mole) de polvo de Fe y 1.2 g (10.8 mmoles) de CaC^ y calentar a reflujo durante 2 horas. Añadir otros 12.4 g (0.222 mole) de polvo de Fe y 1.2 g (10.8 mmoles) de CaCI2 y calentar a reflujo durante 2 horas más. Filtrar la mezcla caliente a través de celite®, lavar la celite® con 50 mL de EtOH caliente y concentrar el filtrado in vacuo a un residuo. Añadir 100 mL de EtOH anhidro, concentrar a un residuo y cromatografiar el residuo (gel de sílice, gradiente de MeOH/CH2CI2) para dar 16.47 g del compuesto de producto.

Combinar 16.47 g (41 .4 mmoies) del producto del Paso B, y 150 mL de HBr al 48% (acuoso) y enfriar a -3°C. Añadir lentamente (mediante goteo) 18 mL de bromo, después añadir lentamente (mediante goteo) una solución de 8.55 g (0.124 mole) de NaNÜ2 en 85 mL de agua. Agitar durante 45 minutos a -3° a 0°C, después ajustar a pH = 10 añadiendo NaOH al 50% (acuoso). Extraer con EtOAc, lavar los extractos con salmuera y secar los extractos sobre Na2SO . Concentrar a un residuo y cromatografiar (gel de sílice, gradiente de EtOAc/hexano) para dar 10.6 g y 3.28 g de los dos compuestos de producto 1 C(i) y 1C(¡¡), respectivamente. Espectro de Masa para compuesto 1 C(i): MH+= 461.2. Espectro de Masa para compuestolC(ii): MH+= 539.

Hidroiizar el producto 3C(i) dei Paso C disolviendo en HCl concentrado y calentar a aproximadamente 100°C durante aproximadamente 16 horas. Enfriar la mezcla, después neutralizar con 1 M NaOH (acuoso). Extraer con CH2CI2, secar los extractos sobre MgSO4, filtrar y concentrar in vacuo al compuesto de título. Espectro de Masa: MH+= 466.9.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 2 Combinar 25.86 g (55.9 mmoles) de éster etílico de ácido 4-(8-cloro-3-bromo-5,6-düdro-1 1 H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridin-1 1 -ilideno)-1-piperidina-1-carboxiiico y 250 mL de H2SO concentrado a -5°C, después añadir 4.8 g (56.4 mmoles) de NaNO3 y agitar durante 2 horas. Vertir la mezcla en 600 g de hielo y basificar con NH OH concentrado (acuoso). Filtrar la mezcla, lavar con 300 mL de agua, después extraer con 500 mL de CH2CI2. Lavar el extracto con 200 mL de agua, secar sobre MgSO , después filtrar y concentrar in vacuo a un residuo. Cromatografiar el residuo (gel de sílice, EtOAc al 10%/CH2CI2) para dar 24.4 g (rendimiento de 86%) del producto. P.F. = 165-167°C, Espectro de Masa. MH+ = 506 (Cl). Análisis Elemental : calculado - C, 52.13; H, 4.17; N, 8.29; encontrado -C, 52.18; H, 4.51 ; N, 8.16.

Combinar 20 g (40.5 mmoles) dei producto del Paso A y 200 mL de H2SO4 concentrado a 20°C, después enfriar la mezcla a 0°C. Añadir 7.12 g (24.89 mmoles) de 1 ,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoina a la mezcla y agitar durante 3 horas a 20°C. Enfriar a 0°C, añadir 1.0 g (3.5 mmoles) adicional de la dibromohidantoina y agitar a 20°C durante 2 horas. Vertir la mezcla en 400 g de hielo, basificar con NH4OH (acuoso) a 0°C, y reunir el sólido resultante mediante filtración. Lavar el sólido con 300 ml de agua, suspender en 200 ml de acetona y filtrar para proveer 19.79 g (rendimiento de85.6%) del producto. P.F. = 236-237°C, espectro de masa: MH+ = 584 (Cl). Análisis elemental: calculado - C, 45.11 ; H, 3.44; N, 7.17; descubierto - C, 44.95; H, 3.57; N, 7.16.

Combinar 25 g (447 mmoles) de limadura de Fe, 10 g (90 mmoles) de CaCI2 y una suspensión de 20 g (34.19 mmoles) del producto del paso B en 700 ml de 90:10 EtOH/agua a 50°C. Calentar la mezcla a reflujo durante la noche, filtrar a través de Celite® y lavar la torta de filtro con 2 X 200 ml de EtOH. Combinar el filtrado y los lavados, y concentrar in vacuo a un residuo. Extraer ei residuo con 600 ml de CH2CI2, lavar con 300 mi de agua y secar sobre MgSO4. Filtrar y concentrar in vacuo a un residuo, después cromatografiar (gel de sílice, EtOAc al 30%/CH2CI2) para dar 11.4 g (rendimiento de 60%) del producto. P.F. = 211-212°C, espectro de masa: MH+ = 554 (Cl). Análisis elemental: calculado -C, 47.55; H, 3.99; N, 7.56; descubierto -C, 47.45; H, 4.31 ; N, 7.49.

Añadir lentamente (en porciones) 20 g (35.9 mmoies) del producto del paso C a una solución de 8 g (116 mmoles) de. NaNO2 en 120 ml de HCl concentrado (acuoso) a -10°C. Agitar la mezcla resultante a 0°C durante 2 horas, después añadir lentamente (mediante goteo) 150 ml (1.44 moles) de H3PO2 ai 50% a 0°C durante un período de 1 hora. Agitar a 0°C durante 3 horas, después vertir en 600 g de hielo y basificar con NH4OH concentrado (acuoso). Extraer con 2 x 300 ml de CH2CI2, secar los extractos sobre MgSO4, después filtrar y concentrar in vacuo a un residuo. Cromatografiar el residuo (gel de sílice, EtOAc al 25%/hexanos) para dar 13.67 g (rendimiento de 70%) del producto. P.F. = 163-165°C, espectro de masa: MH+ = 539 (Cl). Análisis elemental: calculado - C, 48.97; H, 4.05; N, 5.22; descubierto - C, 48.86; H, 3.91 ; N, 5.18.

Combinar 6.8 g (12.59 mmoles) del producto del paso D y 100 ml de HCl concentrado (acuoso) y agitar a 85°C durante la noche. Enfriar la mezcla, vertirla en 300 g de hielo y basificar con NH4OH concentrado (acuoso). Extraer con 2 x 300 ml de CH2CI2, después secar los extractos sobre MgSO . Filtrar, concentrar in vacuo a un residuo, después cromatografiar (gel de sílice, MeOH al 10%/EtOAc + NH4OH al 2% (acuoso)) para dar 5.4 g (rendimiento de 92%) del compuesto del encabezado. P.F. = 172-174°C, espectro de masa: MH+ = 467 (FAB). Análisis elemental: calculado - C, 48.69; H, 3.65; N, 5.97; descubierto - C, 48.83; H, 3.80; N, 5.97.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 3 Hidrolizar 2.42 g de éster etílico de ácido 4-(8-cloro-3-bromo-5,6-dihidro-11 H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridin-11 -ilidene)-1 -piperidine-1 -carboxílico mediante sustancialmente el mismo procedimiento como se describió en el ejemplo de preparación 1 , paso D, para dar 1.39 g (rendimiento de 69%) del producto.

Combinar 1 g (2.48 mmoles) del producto del paso A y 25 ml de tolueno seco, añadir 2.5 ml de 1 M DIBAL en tolueno y calentar la mezcla a reflujo. Después de 0.5 horas, añadir otros 2.5 ml de 1 M DIBAL en tolueno y calentar a reflujo durante 1 hora. (La reacción es supervisada mediante TLC utilizando MeOH al 50%/CH2CI2 +NH4OH (acuoso)). Enfriar la mezcla a temperatura ambiente, añadir 50 ml de 1 N HCl (acuoso) y agitar durante 5 minutos. Añadir 100 mi de 1 N NaOH (acuoso), después extraer con EtOAc (3 X 150 ml). Secar los extractos sobre MgS04, filtrar y concentrar in vacuo para dar 1.1 g del compuesto del encabezado.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 4 [isómeros racémicos así como (+)- y (-)-] Combinar 16.6 g (0.03 moles) del producto del ejemplo de preparación 2, paso D, con una solución 3:1 de CH3CN y agua (212.65 ml CH3CN y 70.8 ml de agua) y agitar la suspensión resultante durante la noche a temperatura ambiente. Añadir 32.833 g (0.153 moles) de NalO4 y después 0.31 g (2.30 mmoles) de RuO2 y agitar a temperatura ambiente para dar 1.39 g (rendimiento de 69%) del producto. (La adición de RuO es acompañada por una reacción exotérmica y la temperatura se eleva de 20° a 30°C). Agitar la mezcla durante 1.3 horas (temperatura regresada a 25°C después de aproximadamente 30 minutos), después filtrar para remover los sólidos y lavar los sólidos con CH2CI2. Concentrar el filtrado in vacuo a un residuo y disolver el residuo en CH2CI2. Filtrar para remover los sólidos insolubles y lavar los sólidos con CH2Cl . Lavar el filtrado con agua, concentrar a un volumen de aproximadamente 200 ml y lavar con blanqueador, después con agua. Extraer con 6 N HCl (acuoso). Enfriar el extracto acuoso a 0°C y añadir lentamente NaOH al 50% (acuoso) para ajustar a pH = 4 mientras se mantiene la temperatura a <30°C. Extraer dos veces con CH2CI2, secar sobre MgSO4 y concentrar in vacuo a un residuo. Suspender el residuo en 20 mi de EtOH y enfriar a 0°C. Reunir los sólidos resultantes mediante filtración y secar los sólidos in vacuo para dar 7.95 g del producto. 1H RMN (CDCI3, 200 MHz): 8.7 (s, 1 H); 7.85 (m, 6H); 7.5 (d, 2H); 3.45 (m, 2H); 3.15 (m, 2H).

Combinar 21.58 g (53.75 mmoles) del producto del paso A y 500 ml de una mezcla 1 :1 anhidra de EtOH y tolueno, añadir 1.43 g (37.8 mmoles) de NaBH4 y calentar la mezcla a reflujo durante 10 minutos. Enfriar la mezcla a 0°C, añadir 100 ml de agua, después ajustar a pH * 4-5 con 1 M HCl (acuoso) mientras se mantiene la temperatura a <10°C. Añadir 250 ml de EtOAc y separar las capas. Lavar la capa orgánica con salmuera (3 X 50 ml) después secar sobre Na2SO4. Concentrar in vacuo a un residuo (24.01 g) y cromatografiar el residuo (gel de sílice, hexano al 30%/CH2CI2) para dar el producto. Las fracciones impuras fueron purificadas mediante recromatografía. Un total de 18.57 g del producto fueron obtenidos. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): 8.5 (s, 1 H); 7.9 (s, 1 H); 7.5 (d de d, 2H); 6.2 (s, 1 H); 6.1 (s, 1 H); 3.5 (m, 1 H); 3.4 (m, 1 H); 3.2 (m, 2H).

Combinar 18.57 g (46.02 mmoles) del producto del paso B y 500 ml de CHCI3, después añadir 6.70 ml (91.2 mmoles) de SOCI2, y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 4 horas. Añadir una solución de 35.6 g (0.413 moles) de piperazina en 800 ml de THF durante un período de 5 minutos y agitar la mezcla durante 1 hora a temperatura ambiente. Calentar la mezcla a reflujo durante la noche, después enfriar a temperatura ambiente y diluir la mezcla con 1 L de CH2CI2. Lavar con agua (5 x 200 mL), y extraer el lavado acuoso con CHCl3 (3 x 100 mL). Combinar todas las soluciones orgánicas, lavar con salmuera (3 x 200 mL) y secar sobre MgSO4. Concentrar in vacuo a un residuo y cromatografiar (gel de sílice, gradiente de 5%, 7.5%, 10% MeOH/CH2CI2 + NH4OH) para dar 18.49 g del compuesto del encabezado como una mezcla racémica.

Paso D- separación de enantiómeros: El compuesto racémico del encabezado del paso C es separado mediante cromatografía quiral de preparación (Chiralpack AD, columna de 5 cm X 50 cm, velocidad de flujo 100 mL/min., iPrOH ai 20%/hexano + dietilamina al 0.2%), para dar 9.14 g del isómero (+)- y 9.30 g del isómero (-)-. Datos físico químicos para el isómero (+)-: p.f. = 74.5°-77.5°C; espectro de masa MH+ = 471.9; [a]D25 = + 97.4° (8.48 mg/2mL MeOH). Datos físico químicos para el isómero (-)-: p.f. = 82.9°-84.5°C; espectro de masa MH+ = 471.8; [a]D25 = - 97.4° (8.32 mg/2mL MeOH).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 5 Combinar 15 g (38.5 mmoies) de éster etílico de ácido 4-(8-cloro-3-bromo-5-,6-dih¡dro-11 H-benzo[5,6]ciciohepta[1 ,2-b]piridin-11-¡liden)-1-pipeidin-1-carboxílico y 150 mL de H2SO concentrado a -5°C, después añadir 3.89g (38.5 mmoles) de KNO3 y agitar durante 4 horas. Vertir la mezcla en 3L de hielo y basificar con NaOH al 50% (acuoso). Extraer con CH2CI2, secar sobre MgSO4, después filtrar y concentrar in vacuo a un residuo. Recristalizar el residuo a partir de acetona para dar 6.69 g del producto. 1H RMN (CDCI3, 200 MHz): 8.5 (s, 1 H); 7.75 (s, 1 H); 7.6 (s, 1 H); 7.35 (s, 1 H); 4.15 (q, 2H); 3.8 (m, 2H); 3.5-3.1 (m, 4H); 3.0-2.8 (m, 2H); 2.6-2.2 (m, 4H); 1.25 (t, 3H).

Paso B: Combinar 6.69 g (13.1 mmoies) de producto del paso A y 100 mL de EtOH al 85%/agua, después añadir 0.66 (5.9 mmoies) de CaCI2 y 6.56 g (117.9 mmoles) de Fe y calentar la mezcla a reflujo durante la noche. Filtrar ia mezcla de reacción caliente a través de celite® y enjuagar la torta de filtro con EtOH caliente. Concentrar el filtrado in vacuo para dar 7.72 g del producto. Espectro de masa: MH+ = 478.0 Paso C: Combinar 7.70g del producto del paso B y 35 mL de HOAc, después añadir 45 mL de una solución de Br2 en HOAc y agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Añadir 300 mL de 1 N NaOH (acuoso), después 75 mL de NaOH al 50% (acuoso) y extraer con EtOAc. Secar el extracto sobre MgSO4 y concentrar in vacuo a un residuo. Cromatografiar ei residuo (gel de sílice, EtOAc al 20%-30%/hexano) para dar 3.47 g del producto (junto con otros 1 .28 g de producto parcialmente purificado). Espectro de masa: MH+ = 555.9. 1H RMN (CDCI3, 300 MHz): 8.5 (s, 1 H); 7.5 (s, 1 H); 7.15 (s, 1 H); 4.5 (s, 2H); 4.15 (m, 3H); 3.8 (br s, 2H); 3.4-3.1 (m, 4H); 9-2.75 (m, 1 H); 2.7-2.5 (m, 2H); 2.4-2.2 (m, 2H); 1.25 (m, 3H).

Paso D: Combinar 0.557 g (5.4 mmoles) de t-butilnitrto y 3 mL de DMF, y calentar la mezcla a 60°C-70°C. Añadir lentamente (mediante goteo) una mezcla de 2.00 g (3.6 mmoles) del producto del paso C y 4 ml de DMF, después enfriar la mezcla a temperatura ambiente. Añadir otros 0.64 mL de t-butilnitrito a 40°C y recalentar la mezcla a 60°-70°C durante 0.5 horas. Enfriar a temperatura ambiente y vertir la mezcla en 150 mL de agua. Extraer con CH2CI2, secar el extracto sobre MgSO y concentrar in vacuo a un residuo. Cromatografiar el residuo (gel de sílice, EtOAc al 10%-20%/hexano) para dar 0.74 g del producto. Espectro de masa: MH+ 0 541.0. 1H RMN (CDCI3), 200 MHz): 8.52 (s, 1 H); 7.5 (d, 2H); 7.2 (s, 1 H); 4.15 (q, 2H); 3.9-3.7 (m, 2H); 3.5-3.1 (m, 4H); 3.0-2.5 (m, 2H); 2.4-2.2 (m, 2H); 2.1-1.9 (m, 2H), 1.26 (t, 3H).

Paso E: Combinar 0.70 g (1 .4 mmoles) del producto del paso D y 8 mL de HCl concentrado (acuoso) y calentar la mezcla a reflujo durante la noche. Añadir 30 mL de 1 N NaOH (acuoso), después 5 mL de NaOH al 50% (acuoso) y extraer con CH2CI2. Secar el extracto sobre MgSO y concentrar in vacuo para dar 0.59 g del compuesto del encabezado. Espectro de masa: M+ = 468.7 p.i = 123.9o-124.2°C.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 6 [isómeros racémicos así como (+)- y (-)-] Paso A: Preparar una solución de 8.1 g del compuesto del encabezado a partir del ejemplo de preparación 5, paso E, en tolueno y añadir 17.3 mL de una solución 1 M de DIBAL en tolueno. Calentar la mezcla a reflujo y añadir lentamente (mediante goteo) otros 21 mL de solución 1 M DIBAL/tolueno en un período de 40 min. Enfriar la mezcla de reacción a aproximadamente 0°C y añadir 700 mL de 1 M HCL (acuoso). Separar y desechar la fase orgánica. Lavar la.fase acuosa con CH2CI2> desechar el extracto, después basificar la fase acuosa añadiendo NaOH al 50% (acuoso). Extraer con CH2CI2, secar el extracto sobre MgSO4 y concentrar in vacuo para dar 7.30 g del compuesto del encabezado, el cual es una mezcla racémica de enantiómeros.

Paso B-Separación de enantiómeros: El compuesto racémico del encabezado del paso A es separado mediante cormatografia quiral de preparación (Chiralpack AD, columna de 5 cm X 50 cm, utilizando iPrOH al 20%/ hexano + dietilamina al 0.2%), para dar el isómero (+)- y el isómero (-)- del compuesto del encabezado. Datos físico químicos para isómero (+)-: p.i = 148.8°C; espectro de masa MH+ = 469; [a]D25 = + 65.6° (12.93 mg/ 2 ml MeOH). Datos físico químicos para el isómero (-)-: p.f. = 112°C; espectro de masa MH+ = 469; [a]D25 = + 65.2° (3.65 mg/ 2 ml) MeOH).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 7 [isómeros racémicos así como (+) - y (-)-] Paso A: Combinar 40.0 g (0.124 moles) de la cetona de partida y 200 ml de H2SO4 y enfriar a 0°C. Añadir lentamente 13.78 g (0.136 moles) de KNO3 durante un periodo de 1.5 horas, después calentar a temperatura ambiente y agitar durante la noche. Tratar la reacción utilizando sustancialmente ei mismo procedimiento como se describe para ei ejemplo de preparación 2, paso A. Cromatografiar (gel de sílice, EtOAc al 20%, 30%, 40%, 50%/hexano, después EtOAc al 100%) para dar 28 g del producto 9-nitro, junto con una cantidad más pequeña del producto 7-nitro y 19 g de una mezcla de los compuestos 7-nitro y 9-nitro.

Paso B: Reaccionar 28 g (76.2 mmoles) del producto 9-nitro dei paso A, 400 ml de EtOH al 85%/agua, 3.8 g (34.3 mmoles) de CaCI2 y 38.28 g (0.685 moles) de Fe utilizando sustancialmente el mismo procedimiento como se describió para el ejemplo de preparación 2, paso C para dar 24 g del producto.

Paso C: Combinar 13 g (38.5 mmoles) del producto del paso B, 140 ml de HOAc y añadir lentamente una solución de 2.95 ml (57.8 mmoles) de Br2 en 10 ml de HOAc durante un periodo de 20 min. Agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente, después concentrar in vacuo a un residuo. Añadir CH2CI2 y agua, después ajustar a pH = 8-9 con NaOH al 50% (acuoso). Lavar la fase orgánica con agua, después salmuera y secar sobre Na2SO . Concentrar in vacuo para dar 1 1.3 g del producto.

Paso D: Enfriar 100 mi de HCl concentrado (acuoso) a 0°C, después añadir .61 g (81.4 mmoles) de NaNO2 y agitar durante 10 minutos. Añadir lentamente (en porciones) 11.3 g (27.1 mmoles) del producto del paso C y agitar ia mezcla a 0°-3°C durante 2.25 horas. Añadir lentamente (mediante goteo) 180 ml de H3PO2 al 50% (acuoso) y permitir que la mezcla repose a 0°C durante la noche. Añadir lentamente (mediante goteo) 150 ml de NaOH al 50% durante 30 min, para ajustar a pH = 9, después extraer con CH2CI2. Lavar el extracto con agua, después salmuera y secar sobre Na2S04. Concentrar in vacuo a un residuo y cromatografiar (gel de sílice, EtOAc al 2%/CH2CI2) para dar 8.6 g del producto.

Paso E: Combinar 8.6 g (21 .4 mmoles) del producto del paso D y 300 ml de MeOH y enfriar a 0°-2°C. Añadir 1 .21 g (32.1 mmoles) de NaBH y agitar la mezcla a ~0°C durante 1 hora. Añadir otros 0.121 g (3.21 mmoles) de NaBH4, agitar durante 2 horas a 0°C, después dejar reposar durante la noche a 0°C.

Concentrar ín vacuo a un residuo después partir el residuo entre CH2Cl2 y agua.

Separar la fase orgánica y concentrar in vacuo (50°C) para dar 8.2 g del producto.

Paso F: Combinar 8.2 (20.3 mmoles) del producto del paso E y 160 ml de CH CI2, enfriar a 0°C, después añadir lentamente (mediante goteo) 14.8 mi (203 mmoles) de SOCI2 durante un periodo de 30 min. Calentar la mezcla a temperatura ambiente y agitar durante 4.5 horas, después concentrar in vacuo a un residuo, añadir CH2CI2 y lavar con 1 N NaOH (acuoso) después salmuera y secar sobre Na2SO4. Concentrar /'/, vacuo a un residuo, después añadir THF seco y 8.7 g (101 mmoles) de piperazina y agitar a temperatura ambiente durante la noche. Concentrar in vacuo a un residuo, añadir CH2CI2, y lavar con 0.25 N NaOH (acuoso), agua, después salmuera. Secar sobre Na2SO4 y concentrar in vacuo para dar 9.46 g del producto crudo. Cromatografiar (gel de sílice, MeOH al %/CH2CI2 + NH3) para dar 3.59 g dei compuesto del encabezado, como un racemato. 1H RMN (CDCI3, 200 MHz): 8.43 (d, 1 H); 7.55 (d, 1 H), 7.45 (d, 1 H), 7.11 (d, 1 H), 5.31 (s, 1 H); 4.86-4.65 (m, 1 H); 3.57-3.40 (m, 1 H), 2.98-2.55 (m, 6H); 2.45-2.20 (m, 5H).

El compuesto racémico del encabezado a partir del paso F (5.7 g) es cromatografiado como se describe para el ejemplo de preparación 4, paso D, utilizando iPrOH al 30%/hexano + dietilamina al 0.2%, para dar 2.88 g del isómero R-(+)- y 2.77 g del isómero S-(-)- del compuesto dei encabezado. Datos físico químicos para el isómero R-(+)-: espectro de masa MH+ =470.0; [a]D25 = + 12.1 ° (10.9 mg/ 2 mi MeOH). Datos físico químicos para el isómero S-(-)-: espectro de masa MH+ = 470.0; [a]D25 = -13.2° (11.51 mg/ 2ml MeOH).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 8 [isómeros racémicos así como (+)- y (-)-] Paso A: Combinar 13 g (33.3 mmoles) del compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 2, paso E, y 300 ml de tolueno a 20°C, después añadir 32.5 ml (32.5 mmoles) de una solución 1 M de DIBAL en tolueno. Calentar la mezcla a reflujo durante 1 hora, enfriar a 20°C, añadir otros 32.5 ml de solución 1 M DIBAL y calentar a reflujo durante 1 hora. Enfriar la mezcla a 20°C y vertirla en una mezcla de 400 g de hielo, 500 ml de EtOAc y 300 ml de NaOH al 10% (acuoso). Extraer la capa acuosa con CH2CI2 (3 x 200 ml), secar las capas orgánicas sobre MgSO4, después concentrar in vacuo a un residuo. Cromatografiar (gel de sílice, MeOH al 12%/CH2CI2 + NH4OH al 4%) para dar 10.4 g del compuesto del encabezado como un racemato. Espectro de masa: MH+ = 469 (FAB). 1 H RMN parcial (CDCI3, 400 MHz): 8.38 (s, 1 H), 7.57 (s, 1 H), 7.27 (d, 1 H), 7.06 (d, 1 H), 3.95 (d, 1 H).

Paso B - Separación de enantiómeros: El compuesto racémico del encabezado del paso A es separado mediante cromatografía quiral de preparación (Chiraipck AD, columna de 5 cm x 50 cm, utilizando iPrOH al 5%/hexano + dietilamina al 0.2%), para dar el isómero (+)- y el isómero (-)- del compuesto del encabezado. Datos físico químicos para el isómero (+)-: espectro de masa MH+ = 469 (FAB); [a]25D = + 43.5° (c=0.402, EtOH); 1 H RMN parcial (CDCI3, 400 MHz): 8.38 (s, 1 H); 7.57 (s, 1 H); 7.27 (d, 1 H); 7.05 (d, 1 H); 3.95 (d, 1 H).

Datos físico químicos para el isómero (-)-: espectro de masa MH+ = 469 (FAB); [ ]25D = + 41.8° (c=0.328, EtOH); 1H RMN parcial (CDCI3, 400 MHz): 8.38 (s, 1H); 7.57 (s, 1H); 7.27 (d, 1H); 7.05 (d, 1H); 3.95 (d, 1H).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 9 [isómeros racémicos así como R-(+)- y S-(-)-] El compuesto Se prepara de acuerdo con los precedimientos del ejemplo de preparación 40 de WO 95/10516 (publicada ei 20 de abril, de 1995), siguiendo los procedimientos descritos en el ejemplo 193 de WO 95/10516. Los isómeros (+)- y (-)- pueden ser separados siguiendo esencialmente el mismo procedimiento que el paso D del ejemplo de preparación 4. Datos físico químicos para el isómero R-(+)-: 13C RMN (CDCI3): 155.8 (C); 146.4 (CH); 140.2 (C); 136.2 (C); 135.3 (C); 133.4 (C); 132.0 (CH); 129.9 (CH); 125.6 (CH); 1 19.3 (C); 79.1 (CH); 52.3 (CH2); 52.3 (CH); 45.6 (CH2); 45.6 (CH2); 30.0 (CH2); 29.8 (CH2); [ ]25D = + 25.8° (8.46 mg/2 mL MeOH). Datos físico químicos para el isómero S-(-)-: 13C RMN (CDCI3): 155.9 (C); 146.4 (CH); 140.5 (CH); 140.2 (C); 136.2 (C); 135.3 (C); 133.3 (C); 132.0 (CH); 129.9 (CH); 125.5 (CH); 1 19.2 (C); 79.1 (CH); 52.5 (CH2); 52.5 (CH); 45.7 (CH2); 45.7 (CH2); 30.0 (CH2); 29.8 (CH2); [a]25D = -27.9° (8.90 mg/2 mL MeOH).-' EJEMPLO DE PREPARACIÓN 10 CH3 A una solución de 1 ,4-dioxa-8-azaspiro(4,5)decano (14.3) mL, 0.1 12 mole) disuelta en diclorometano anhidro (300 mL) fueron añadidos trietilamina (23.5 mL, 0.168 mole) y cloruro de metansulfonilo (8.68 mL, 0.112 mole) a 0°C. La mezcla de reacción fue calentada a temperatura ambiente y agitada durante la noche. NaH2PO4 (10%) acuoso fue añadido a la mezcla y agitada durante 1 hora. Las fases fueron separadas y la fase acuosa fue extraída con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas fueron lavadas con salmuera, secadas sobre MgSO anhidro, filtradas y concentradas in vacuo para proporcionar 1 ,4-dioxa-8-(metilsuifonil)azaspiro-(4,5)decano (22.9 g, 92%).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 11 CH3 Una mezcla del compuesto del ejemplo de preparación 10 (22.9 g 0.103 mole), tetrahidrofurano-agua (1 :1 v/v 600 mL) y ácido oxálico (228 g, 2.53 mole) fue sometida a reflujo durante 1 hora. Fue añadido ácido acético (60 mL, 1.048 mole) y la mezcla resultante fue sometida a reflujo durante 3 horas adicionales. La mezcla de reacción fue concentrada in vacuo, diluida con diclorometano y lavada con bicarbonato de sodio acuoso (solución saturada). La fase orgánica fue lavada con salmuera, secada sobre MgSO anhidro, filtrada y concentrada in vacuo para . proporcionar 4-[1-(metilsulfonil)piperidona [14.04 g 77%, FAB-MS 178 (MH+, 100%)]. EJEMPLO DE PREPARACIÓN 12 Una mezcla del compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 11 (12.9 g, 73 mmoles), cianoacetato etílico (11.7 mL, 0.11 mole), acetato de amonio (0.88 g, 14.7 mmoles), ácido acético (3.4 mL, 59 mmoles) y benceno (250 mL) fue sometida a reflujo en un matraz de fondo redondo adherido con una trampa Dean-Stark durante la noche. La mezcla de reacción fue enfriada a temperatura ambiente, concentrada in vacuo, diluida con diclorometano y lavada con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturada.

La fase orgánica fue secada sobre MgSO3 anhidro, filtrada y concentrada in vacuo para proporcionar un sólido que fue combinado con éter dietílico (200 mL) y filtrado para proporcionar 4-[1-met¡isulfonii)piperidinilidenil]cianoacetato de etilo [16 g, 81%, FAB-MS 273 (MH+, 100%)].

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 13 A una mezcla de Cu(l)C1 (350 mg) en tetrahidrofurano anhidro (2mL) a 0°C fue añadido mediante goteo yoduro de metilmagnesio (2.5 mL de una solución 3.0 M en eterdietílico). El compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 12 disuelto en tetrahidrofurano (THF, 150 mL) vía cánula durante 1 hora. El baño de agua congelante fue removido y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción fue vertida en una mezcla de ácido sulfúrico al 10% (50 mL) y hielo (50 g), después extraída con diclorometano. La fase orgánica fue secada sobre MgS?4 anhidro, filtrada y concentrada in vacuo para proporcionar 4-[4-metil-1-(metilsulfonil)-piperidiniljcianoacetato de etilo [1.49 g, 100%, FAB-MS 289 (MH+, 100%)].

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 14 Una mezcla del compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 13 (3.06 g, 10.6 mmoles) y hidróxido de sodio acuoso al 10% (10 mL) fue agitada a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. La mezcla de reacción fue lavada con éter dietílico, dicloromentano, y acetato etílico' y la fase acuosa fue acidificada con ácido clorhídrico al 10% a un pH de 1.0. El volumen de agua fue reducido in vacuo, fue añadida salmuera y la mezcla restante fue extraída con diclorometano. La fase orgánica fue secada sobre MgSO4 anhidro, filtrada y concentrada in vacuo para proporcionar ácido 4-[4-metil-1 -(metilsuifonil)-piperidin¡l]cianoacético [0.80 g, 29%, FAB-MS 261 (MH+, 38%)], 283 (M+Na+,100%)].

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 15 3 El compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 14 (0.60 g, 2.3 mmoles) disuelto en N, N-dimetilformamida anhidra (20 mL) fue agitada a 130°C durante la noche. La concentración in vacuo proporcionó 4-cianometil-4-metil-1-(metilsulfonil)-peiperidina que fue utilizada directamente en ei ejemplo de preparación 16 [FAB-MS 289 (MH+, 100%)].

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 16 Una mezcla del compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 15 y ácido clorhídrico concentrado (10 mL) fue agitada a reflujo durante 3 días. La mezcla de reacción fue concentrada in vacuo, diluida con dicloromentano y lavada con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La fase orgánica fue secada sobre MgSO anhidro, filtrada y concentrada in vacuo para proporcionar ácido 4-[4-metil-1-(met¡lsulfon¡l)-piperidinil]acético (90 mg, 17%, FAB-MS 236 (MH+, 100%)].).

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 17 A una solución enfriada (-78°C) de diisopropiiamida de litio (0.5 mL, 1 mmoles) en 0.5 mL de THF fue añadido acetato de tert-butiltrimetilsililo (0.22 mL, 1 mmoles). Después de agitar durante 10 min, ei compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 1 1 (0.18 g, 1 mmoles) disueito en THF (1 mL) fue añadido mediante goteo y la mezcla de reacción se permitió calentar a temperatura ambiente y se agitó durante varias horas. La reacción fue apagada con ácido clorhídrico al 10%, extraída con diclorometano, secada sobre MgSO anhidro, filtrada y concentrada in vacuo. El residuo fue purificado mediante cromatografía de placa de preparación (sílice) utilizando acetato etílico al 25% -hexano para dar 4-[1-(metilsulfonil)p¡perid¡nil¡den¡l]acetato de etilo [0.14 g, 50%, CI-MS 276 (MH+)].

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 18 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 17 (1 mmoles) en metanol (10 ml) y a este añadir peróxido de hidrógeno al 30% (3 mmoles) e hidróxido de sodio acuoso (1.5 mmoles). Agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Diluir la reacción con diclorometano, lavar con salmuera, secar sobre MgSO anhidro, filtrar y concentrar / , vacuo para dar 4-[1-(metilsulfonil)p¡peridin¡ldenii]-a-ß -epoxiacetato de etilo.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 19 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 18 (1 mmoles) en metanol (10 ml), combinar con paladio sobre carbón al 10% y agitar en un hidrogenador Parr bajo atmósfera de gas de hidrógeno. Filtra y concentrar el filtrado para proporcionar 4-hidroxi-4-[1- (metilsulfonil)piper¡d¡nil¡denil]-acetato de etilo.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 20 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 19 (1 mmoles) en DMF (10 ml) y a esta solución añadir hidruro de sodio (1 mmoles). Después de que cesa la evolución de gas, añadir yoduro de metilo y agitar la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante varias horas. Concentrar in vacuo, diluir con diclorometano y lavar con agua para dar 4-hidroxi-4-[1-(metilsulfonil)piperidinilidenil]-acetato de etilo.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 21 Agitar el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 17 (1 mmoies) en DMSO (10 ml) con cianuro de sodio (1 mmoles) y calentar a 50°C durante varios días. Enfriar a temperatura ambiente, vertir en agua, acidificar a pH 4 con ácido acético glacial, y extraer con diclorometans. Concentrar in vacuo, secar sobre MgSO4 anhidro, filtrar y concentrar in vacuo para dar 4-ciano-4-[1 -(metilsulfonil)piperidinildenil]acetato de etilo.

EJEMPLO DE PREPRACION 22 Agitar el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 21 (1 mmoles) en 3M hidróxido de potasio acuoso (5 mmoles) a 50-100°C durante varios días. Enfriar a temperatura ambiente, acidificar a pH 4 con 1M HCl, y concentrar in vacuo para dar ácido 4-carboxi-4-[1-(metiIsulfon¡l)piper¡d¡nilidenil]-acético.

EJEMPLO DE PREPARACIÓN 23 Agitar el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 21 (1 mmoles) en hidróxido de litio acuso (1 mmoles) a 25°C durante varias horas. Enfriar a temperatura ambiente, acidificar a pH 4 con 1 M HCl, y concentrar in vacuo para dar ácido 4-ciano-4-[1-(metilsulfonil)piperidinilidenii]acético.

Al compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 16 (90 mg, 0.38 mmoles) disuelto en N, N-dimetilformamida anhidra (DMF, 3 ml)fue añadido hidrato de 1-hidroxibenzotriazola (52 mg, 0.38 mmoles), clorhidrato de 1- (3-d¡metiiaminopropil)-3-etilcarbodümida (73 mg, 0.38 mmoles), (+)-3,10-dibromo-8-cloro-6,11-dihidro-1 1-(4-piperidinil)-5H-benzo[5,6] ciclohepta[1 ,2-bjpiridina del ejemplo de preparación 6 (100 mg, 0.21 mmoles) y N-metilmorfolina (0.042 ml, 0.38 mmoles) y ia mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. La concentración in vacuo proporcionó un residuo que fue diluido con diclorometano, lavado con 1 M ácido clorhídrico y 1 M hidróxido de sodio acuoso y salmuera, después secado sobre sulfato de magnesio anhidro. La filtración y la concentración in vacuo proporcionaron (+) -4-(3,10-dibromo-8-cloro-6, 11 -dihidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridin-11 (R)-il)-1-[[4-metil-1 -(metilsulfonil)-4-piridinil]acetii]piperidina [43 mg, 30%, p.f. = 105-109°C: FAB-MS 688 (MH+, 100%)].

EJEMPLO 2 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 22 (1 mmoles) en N, N-dimetilformamida anhidra (DMF, 10 ml) y añadir hidrato de 1 -hidroxibenzotriazola (1 mmoies), clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (1 mmoles), (+)-3,10-dibromo-8-cloro-6,1 1 -dihidro-1 1-(4- piperidinil)-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piperidina del ejemplo de preparación 6 (1 mmoles) y N-metilmorfolina (1 mmoles). Agitar la mezcla resultante a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. Concentrar in vacuo para proveer un residuo y diluir con diclorometano, lavar con 1 M ácido clorhídrico y salmuera, después secar sobre sulfato de magnesio anhidro. Filtrar y concentrar in vacuo para proporcionar (+) -4-(3,10-dibromo-8-cioro-6,H-dihidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridin-1 1 (R)-ii)-1 -[[4-carboxi-1 -(metiisulfonii)-4-piridinil]acetil]piperdin.

EJEMPLO 3 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo de preparación 23 (1 mmoles) en N, N-dimetilformamida anhidra (DMF, 10 ml) y añadir hidrato de 1-hidroxibenzotriazola (1 mmoles), clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, (1 mmoles), (+)-3,10-dibromo-8-cloro-6,11-dihidro-11-(4-p¡peridipil)-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridina dei ejemplo de preparación 6 (1 mmoles). Agitar la mezcla resultante a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. Concentrar in vacuo para proporcionar un residuo y diluir con diclorometano, lavar con 1 M ácido clorhídrico y salmuera, después secar sobre sulfato de magnesio anhidro. Filtrar y concentrar in vacuo proporciona (+) -4-(3,10-dibromo-8-cloro-6,H-dihidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]p¡ridin-11 (R)-il)-1 -[[4-ciano-1 -(metilsulfonil)-4-piridinil]acetil]piperdina.

EJEMPLO 4 Disolver el compuesto del encabezado del ejemplo 2 (1 mmoles) en N, N-dimetilformamida anhidra (DMF, 10 ml) y añadir hidrato de 1-hidroxibenzotriazola (1 mmoleses), clorhidrato de 1-(3-dimetilamino-propil)-3-et.lcarbodiimida (1 mmoles), cloruro de amonio (1 mmoles) y N-metilmorfolina (1 mmoles). Agitar la mezcla resultante a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. Concentrar in vacuo para proporcionar un residuo y diluir con diclorometano, lavar con 1M ácido clorhídrico y salmuera, después secar sobre sulfato de magnesio anhidro. Filtrar y concentrar in vacuo para proporcionar (+) -4-(3,10-dibromo-8-cloro-6,11-dihidro-5H-benzo[5,6]ciclohepta[1 ,2-b]piridin-1 1(R)-il)-1-[[4-ciano-1-(metilsulfonil)-4-pir¡din¡l]acetil]piperidina.

PRUEBAS FPT IC5o (inhibición de farnesil-proteína transferasa, prueba de enzima in vitro) y COS Cell IC50 (Prueba basada en célula) fueron determinados siguiendo los procedimientos de prueba descritos en WO 95/10516, publicada el 20 de abril de 1995. GGPT IC50 (inhibición de geranilgeraniio-proteína transferasa, prueba de enzima in vitro), prueba de acopiamiento de célula, y actividad antitumor (estudios antitumor in vivo) pudieron ser determinados mediante los procedimientos de prueba descritos en WO 95/10516. La descripción de WO 95/10516 está incorporada en la presente por referencia a la misma. El compuesto del ejemplo 1 anterior demostró un FPT IC50 de 19nM y un COS Cell IC50 de 22nM. Las pruebas adicionales pueden ser llevadas a cabo siguiendo esencialmente el mismo procedimiento como se describió anteriormente, pero con la sustitución de las líneas de células tumorales indicadoras alternativas en lugar de las células T24-BAG. Las pruebas pueden ser conducidas utilizando ya sea células de carcinoma de colon humano DLD-1 -BAG que expresan un gen K-ras activado o células de carcinoma de colon humano SW620-BAG que expresan un gen K-ras activado. Utilizando otras líneas de células tumorales conocidas en la técnica, la actividad de los compuestos de esta invención contra otros tipos de células cancerosas podría ser demostrada.

Prueba de agar blanda: El crecimiento independiente de anclaje es una característica de las líneas de células tumorigénicas. Las células tumorales humanas están suspendidas en medio de crecimiento que contiene agarosa al 0.3% y una concentración indicada de un inhibidor de farnesii transferasa. La solución se extiende sobre medio de crecimiento solidificada con agarosa al 0.6% que contiene la misma concentración de inhibidor de farnesii transferasa que la capa superior. Después de que la capa superior es solidificada, las placas son incubadas durante 10-16 días a 37°C bajo CO2 al 5% para permitir ei crecimiento de colonia. Después de la incubación, las colonias son teñidas cubriendo el agar con una solución de bromuro de MTT (3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniitetrazolio, azul tiazolilo) (1 mg/mL en PBS). Las colonias pueden ser contadas y los IC50 S pueden ser determinados. Para preparar composiciones farmacéuticas a partir de los compuestos descritos mediante esta invención, portadores inertes, aceptables farmacéuticamente pueden ser ya sea sólidos o líquidos. Las preparaciones de forma sólida incluyen polvos, tabletas, granulos dispersables, cápsulas, cápsulas lisas y supositorios. Los polvos y tabletas pueden constar de 5 a 70% de ingrediente activo. Los portadores sólidos adecuados son conocidos en la técnica, por ejemplo carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar,, lactosa. Las tabletas, polvos, cápsulas lisas y cápsulas pueden ser utilizadas como formas de dosificación sólida adecuadas para administración oral.

Para preparar supositorios, se funde primero una cera de fundición lenta como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cocoa, y el ingrediente activo es dispersado de manera homogénea en la misma mediante agitación. La mezcla homogénea fundida es después vertida en moldes de tamaño conveniente, se permite enfriar y por io tanto solidificar, Las preparaciones de forma líquida incluyen soluciones, suspenciones y emulsiones. Como un ejemplo pueden ser mencionadas soluciones de agua o agua-propilenglicol para inyección parenterai. Las preparaciones de forma líquida también pueden incluir soluciones para administración intranasai. Las preparaciones en aerosol adecuadas para inhalación pueden incluir soluciones y sólidos en forma de polvo los cuales pueden estar en combinación con un portador aceptable farmacéuticamente, como un gas inerte comprimido. También incluidas están las preparaciones de forma sólida que están diseñadas para ser convertidas, poco antes de utilizarse, a preparaciones en forma líquida para administración oral o parenteral. Tales formas liquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Los compuestos de la invención también pueden ser suministrables transdérmicamente. Las composiciones transdérmicas pueden tomar la forma de cremas; lociones, aerosoles y/o emulsiones y pueden ser incluidas en un parche transdérmico del tipo matriz o reserva como es convencional en la técnica para este objeto.

Preferiblemente el compuesto se administra de manera oral. Preferiblemente, la preparación farmacéutica está en forma de dosis unitaria. De tal forma, la preparación es subdividida en dosis unitarias que contienen cantidades adecuadas dei componente activo, por ejemplo, una cantidad efectiva para lograr ei objeto deseado. La cantidad de compuesto activo en una dosis unitaria de preparación puede ser variada o ajustada de 0.1 mg a 1000 mg, mas preferiblemente de 1 mg a 300 mg de acuerdo con la aplicación particular. La dosificación actual utilizada puede ser variada dependiendo de los requerimientos del paciente y la severidad de la enfermedad siendo tratada. La determinación de la dosis adecuada para una situación particular está dentro de la habilidad de la técnica. En general, el tratamiento es iniciado con dosis más pequeñas que son menores que las dosis óptimas del compuesto. Es seguida, la dosis es incrementada mediante incrementos pequeños hasta que el efecto óptimo bajo las circunstancias es alcanzado. Por conveniencia, la dosis diaria total puede ser dividida y administrada en porciones durante el día si se desea. La cantidad y frecuencia de administración de los compuestos de la invención y de las sales aceptables farmacéuticamente de la misma estarán reguladas de acuerdo al juicio del médico que atiende considerando factores como edad, condición y tamaño del paciente así como de la severidad de los síntomas siendo tratados. Un régimen de dosificación recomendada típica es administración oral de 10 mg a 2000 mg/día preferiblemente 10 a 1000 mg/día en dos a cuatro dosis divididas para bloquear crecimiento de tumor. Los compuestos son no tóxicos cuando se administran dentro de esta escala de dosificación. Los siguientes son ejemplos de formas de dosificación farmacéutica que contiene un compuesto de la invención. El alcance de la invención en su aspecto de composición farmacéutica no debe estar limitado por los ejemplos proporcionados.

EJEMPLOS DE FORMA DE DOSIFICACIÓN FARMACÉUTICA EJEMPLO A TABLETAS Método de fabricación Mezclar los elementos Nos. 1 y 2 en un mezclador adecuado durante 10-15 minutos. Granular la mezcla con el elemento No. 3. Moler los granulos húmedos a través de un tamiz para partículas gruesas (por ejemplo 0.63 cm, %") si es necesario. Secar los granulos húmedos. Tamizar los granulos secos si es necesario y mezclar con el elemento No. 4 y mezclar durante 10-15 minutos. Añadir el elemento No. 5 y mezclar durante 1-3 minutos. Comprimir la mezcla al tamaño y peso adecuado sobre una maquina para tabletas adecuada.

EJEMPLO B Cápsulas Método de fabricación Mezclar los elementos No. 1 ,2 y 3 en un mezclador adecuado durante 10-15 minutos. Añadir el elemento No. 4 y mezclar durante 1-3 minutos. Llenar la mezcla en cápsulas adecuadas de gelatina dura de dos piezas sobre una maquina encapsuladora adecuada. Aunque la presente invención ha sido descrita en conjunto con las modalidades especificas expuestas anteriormente, serán evidentes muchas alternativas, modificaciones y variaciones de la misma a aquellos de habilidad en la técnica. Todas estas alternativas, modificaciones y variaciones están diseñadas para caer dentro del espíritu y alcance de la presente invención.

Claims (15)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de la fórmula:

O una sal o solvato aceptable farmacéuticamente de los mismos, en la cual: a representa N o NO-; R1 y R3 son los mismos o diferentes y cada uno representa halo; R2 y R4 son seleccionados cada uno independientemente de H y halo, con la condición de que al menos uno de R2 y R4 es H; cada línea punteada ( — ) representa un enlace opcional; X es N, C cuando el enlace opcional a X está presente, o CH cuando el enlace opcional a X está ausente; T es un sustituyente seleccionado a partir de:

Z representa O u S; R representa -C(O)N(R10)2, -CH2C(O)N(R10)2, -SO2R10, -SO2N(R10)2, -C(O)R11, -C(O)-O-R11, alquilo, ariio, aralquilo, cicloalquilo, heterocicioalquilo o heteroarilo; R5 representa alquilo, arilo, aralquilo, heteroariio, heteroarilalquiio, cicloalquilo, OR12, NR12H, SR12, SOR12 (en donde R12 no es H), o SO2R12 (en donde R 2 no es H); y cada R10 representa independientemente H, alquilo, arilo, o aralquiio (por ejemplo, bencilo); R11 es alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heterocicloalquilo; R12 se selecciona de H, alquilo, arilo, aralquilo, heteroarilo, heteroariialquilo, o heterocicloalquiio. 2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2 seleccionado a partir de: en las cuales R1, R2, R3, R4, a, X, R5, R y las líneas punteadas son como se definen en la reivindicación 1 ; en las cuales R > 1 , R r->2y R ?-)3y r R->44, a, X, Ry R y las líneas punteadas son como se definen en la reivindicación 1 ; en las cuales R1, R2, R3, R4, a, X, R5, R y las líneas punteadas son como se definen en la reivindicación 1 ; o (4) en las cuales R1, R2, R3, R4, a y T son como se definen en la reivindicación 1 y X es N o CH. 3.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2 caracterizado porque dicho compuesto es un compuesto de fórmula 1.0 a o 1.0b en la cual R1 es bromo, R3 es cloro, a es N, y R y R5 son como se definen en la reivindicación 1.

4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto es un compuesto de fórmula 1.1 a o 1.1b en la cual R1 es bromo, R3 es cloro, R4 es bromo, a es N, y R y R5 son como se definen en la reivindicación 1.

5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto es un compuesto de fórmula 1.2 a o 1.2b en la cual R1 es bromo, R2 es bromo, R3 es cloro, a es N, y R y R5 son como se definen en la reivindicación 1.

6.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque dicho compuesto es un compuesto de fórmula 1.3 o 1.4 en la cual R1 es bromo, R2 es H o bromo, R3 es cloro, R4 es H o bromo, a es N, X es CH o N y R5 y R son como se definen en la reivindicación 1.

7.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque X es CH.

8.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque X es N.

9.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque T se selecciona de:

10.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque T se selecciona de:

11.- Ei uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , para la fabricación de un medicamento para tratar células tumorales que expresan un oncogen ras activado.

12.- El uso de conformidad con la reivindicación 11 caracterizado porque las células tumorales tratadas son células tumorales pancreáticas, células de cáncer en el pulmón, células tumorales de leucemia mieloide, células tumorales de tiroides folicular, células tumorales mielodisplásticas, células tumorales de carcinoma epidérmico, células tumorales de carcinoma de vejiga, células tumorales de colon, células tumorales de pecho, y células tumorales de próstata.

13.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , para la fabricación de un medicamento para tratar células tumorales caracterizado porque la proteína ras es activada como resultado de mutación oncogénica en genes diferentes al gen ras.

14.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , para la fabricación de un medicamento para inhibir farnesil-proteína transferasa.

15.- Una composición farmacéutica para inhibir farnesil-proteína transferasa que consta de una cantidad efectiva del compuesto de conformidad con la reivindicación 1 en combinación con un portador aceptable farmacéuticamente.