MXPA06014077A - Metodo para reducir hepatotoxicidad de agentes inductores de apoptosis mediada por fas. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a un metodo para prevenir o reducir efectos adversos en el higado de un paciente tratado con un agente inductor de apoptosis mediada por Fas, el metodo comprendiendo la administracion de un producto que previene la apoptosis mediada por receptores de FNT de las celulas del higado.

Description

MÉTODO PARA REDUCIR HEPATOTOXICIDAD DE AGENTES INDUCTORES DE APOPTOSIS MEDIADA POR FAS MEMORIA DESCRIPTIVA La presente invención se refiere a un nuevo método para reducir hepatotoxicidad de agentes inductores de apoptosis mediada por Fas. Se sabe que el hígado es particularmente susceptible a citotoxicidad mediada por Fas. Debido a su eficacia, algunos inductores de apoptosis mediada por Fas pueden presentar alto riesgo de toxicidad del hígado (DeVries & al. Drugs Today (Bare). 2003;39 Suppl C:95-109). La administración de anticuerpos anti-Fas agonísticos a ratones puede conducir a insuficiencia hepática aguda y la muerte dentro de unas cuantas horas (Ni & al., 1994, Exp. Cell. Res. 215, 332-337; Ogaswara & al.. 1993, Nature 364, 806-809). También se ha descubierto que la toxicidad de formas multimerizadas de ligandos de Fas solubles depende de la vía de administración. En particular, la inyección intravenosa de 50 µg/kgMega-FasL (hexámero de dominio extracelular de FasL fusionado a un fragmento de ACRP30) a ratón, da por resultado la muerte dentro de 2 a 6 horas a través de insuficiencia hepática. Por el contrario, la inyección intraperitoneal de esa dosis de Mega-FasL no causará la muerte (EP 032912473, incorporada aquí por referencia). De hecho, la muerte se observa finalmente después de la inyección intraperitoneal de dosis varias veces más altas (100-200 µg/kg). La presente invención se refiere a un nuevo método para prevenir o reducir efectos adversos del hígado en pacientes tratados con un agente inductor de apoptosis mediada por Fas. El método comprende la administración de un producto que previene apoptosis mediada por FNT de las células del hígado. Los receptores de FNT se seleccionan entre RFNT1 y RFNT2. El producto que previene apoptosis mediada por FNT preferiblemente previene la liberación de FNT y/o linfotoxinas, o preferiblemente es un producto de interacción anti-FNT/RFNT que previene la apoptosis mediada por FNT de las células del hígado. Dicha administración se puede hacer de conformidad con la invención secuencialmente, por separado o simultáneamente, con los agentes inductores de apoptosis mediada por Fas. El tratamiento secuencial significa de conformidad con la invención ya sea un pre-tratamiento con el producto que previene apoptosis mediada por FNT, antes del tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas o un post-tratamiento con el producto que previene apoptosis mediada por FNT, después y durante tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas, y combinaciones ele los mismos. El pre-tratamiento prevendrá apoptosis mediada por FNT antes del tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas. El post-tratamiento puede ser iniciado con base en la detección de concentraciones de enzimas del hígado incrementadas, tales como ALAT y ASAT, después de tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas, para reducir la toxicidad cuando es detectada. Alternativamente, el pre-tratamiento puede ser seguido por post-tratamiento. Cuando se usa secuencialmente o por separado, el agente inductor de apoptosis mediada por Fas y producto que previene apoptosis mediada por FNT se usan en composiciones farmacéuticas separadas, cada una de ellas siendo apropiada para la vía de administración escogida. Sin embargo, ambas composiciones pueden ser combinadas en el mismo empaque o equipo de tratamiento. Cuando se usa simultáneamente, el agente inductor de apoptosis mediada por Fas y el producto que previene apoptosis mediada por FNT se pueden combinar en las mismas composiciones farmacéuticas apropiadas para la vía de administración escogida. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un agente inductor de apoptosis mediada por Fas y un producto que previene apoptosis mediada por FNT así como equipos de tratamiento que en composiciones farmacéuticas separadas comprenden un agente inductor de apoptosis mediada por Fas y un producto que previene apoptosis mediada por FNT también son parte de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas adecuadas y vehículos adyuvante, conservadores, etc., usadas para preparar composiciones farmacéuticas, son bien conocidas para los expertos en la técnica (véase Gennaro (ed.), Remington's Pharmaceutical Sciences, 19a. edición (Mack Publishing Company, 1995)). De conformidad con la presente invención, los agentes inductores de apoptosis mediada por Fas comprenden anticuerpos de Fas agonísticos y moléculas de FasL solubles o multímeros de los mismos. Las enfermedades o patologías tratadas con el método de conformidad con la presente invención incluyen todas las patologías que comprenden proliferación celular. Incluye muy particularmente patologías en donde la muerte celular tiene que ser inducida para su control y/o tratamiento, tal como cáncer primario o secundario y sus metástasis, así como malignidades hematológicas, muy particularmente mesoteliomas, cánceres ováricos, cánceres de páncreas, cánceres de próstata, cánceres de mama, cánceres de pulmón de células no pequeñas, melanomas, carcinoma de colon, glioblastomas, mielomas y leucemias. La sensibilidad de diferentes líneas de células tumorales a apoptosis por hexámeros de FasL se da en el siguiente cuadro.

Los anticuerpos de Fas agonistas son conocidos en la técnica, incluyendo los anticuerpos descritos en Tinel & al. (Hepatology., marzo de 2004;39(3):655-66), Rubio Pomar & al. (Biol Reprod., 5 de mayo de 2004), Pechelet & al. (Biochem Pharmacol. 1 de febrero de 2004; 67(3):523-37), Clarke & al. (Haematologica., enero de 2004; 89(l): 11-20), Imai & al. (Oncogene., 18 de diciembre de 2003; 22(58):9231 -42), Legembre & al. (J Immunol., 1 de diciembre de 2003;171(11 ):5659-62), Chun & al. (Toxicol Lett., 15 de diciembre de 2003;146(1 ):75-81 ), cuyo contenido se incorpora aquí por referencia.

Las moléculas de FasL solubles comprenden monómeros, oligómeros y multímeros de moléculas de FasL, muy particularmente del dominio extracelular soluble del ligando. En una modalidad preferida, la molécula de FasL soluble se selecciona entre moléculas de FasL multimerizadas. Las moléculas de FasL multimerizadas de conformidad con la invención comprenden por lo menos cuatro fracciones extracelulares solubles globulares del ligando Fas, preferiblemente por lo menos cinco, muy preferiblemente por lo menos seis, muy preferiblemente aún seis fracciones extracelulares solubles globulares del ligando Fas unidas a una porción de multimerización. Las moléculas de FasL multimerizadas finalmente se pueden agregar para formar grados más altos de multimerización, incluyendo dodecámero (2 hexámeros) u octodecámeros (3 hexámeros). En una modalidad preferida de la invención, la forma multimerizada de ligando Fas es un hexámero que comprende seis monómeros, ensamblados juntos, cada uno de los monómeros comprendiendo un polipéptido de la fórmula (I): H-L (l) en donde: - L representa una porción Fas C-terminal, que comprende la fracción extracelular soluble de un ligando Fas, y - H representa una porción de hexamerización N-terminal.

De conformidad con la presente invención, la porción de ligando L incluye la "longitud completa" de la fracción extracelular soluble de ligando Fas y fragmentos biológicamente funcionales de la misma fracción. "Fragmentos biológicamente funcionales" son fragmentos de una fracción extracelular soluble de un ligando de la familia de FNT que conserva su capacidad para unirse al mismo receptor(es), con sustancialmente la misma afinidad. L preferiblemente comprende la fracción soluble extracelular de longitud completa del ligando anterior. De conformidad con una modalidad de la invención, L comprende el dominio extracelular de ligando FAS humano (hFasL), que comprende aminoácidos Glu 139 a leu 281 de hFasL. Los hexámeros de conformidad con la invención son ya sea hexámeros "verdaderos", dímeros de trímeros o trímeros de dímeros. En el primer caso, H es un polipéptido de hexamerización HP. En los últimos casos, H comprende dos porciones, una primera porción que consiste de un polipéptido de dimerización (DP) y una segunda porción que consiste de un polipéptido de trimerización (TP). Los polipéptídos de conformidad con la presente invención comprenden un polipéptido representado por una de las siguientes fórmulas (la), (Ib) y (le): HP - L (la) (hexámeros "verdaderos"), DP-TP - L (Ib) (trímeros de dímeros), y TP-DP - L (Tc) (dímeros de trímeros) en donde L, HP, DP y TP se definen anteriormente y más adelante. Ejemplos de HP, TP y DP son bien conocidos en la técnica y comprenden fragmentos de péptido aislados de polipéptidos hexaméticos, triméricos y diméricos naturales, dichos fragmentos aislados siendo responsables de la hexamerización, dimerización o trimerización de los hexámeros, dímeros o trímeros naturales. Dichas moléculas son bien conocidas en la técnica y comprenden polipéptidos de la familia de colectina, tales como las proteínas ACRP30 o similares a ACRP30 (W096/39429, WO 99/10492, WO 99/59618, WO 99/59619, WO 99/64629, WO 00/26363, WO 00/48625, WO 00/63376, WO 00/63377, WO 00/73446, WO 00/73448 o WO 01/32868), apMI (Maeda et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 221 : 286-9, 1996), Clq (Sellar et al., Biochem. J. 274: 481-90, 1991 ), o proteínas similares a Clq (WO 01/02565), dichas proteínas comprenden "dominios de colágeno" que consisten en repeticiones Gly-Xaa-Xaa' de colágeno. Otros polipéptidos oligomerizados se conocen en la técnica, incluyendo polipéptidos con un dominio de "enrollamiento en espiral" (Kammerer RA, Matrix Biol., 15 de marzo de 1997 (8-9):555-65; discusión 567-8; Lombardi & al., Bíopolymers 1996;40(5):495-504; http://mdl.ipc.pku.edu.cn/scop/data/scopJ .008.001.html), como la proteína de matriz de Carilage (CMP) (Beck & al., 1996, J. Mol. Biol1., 256, 909-923), o polipéptidos con un dominio de dimerización, polipéptidos similares con una cremallera de leucina u osteoprotegerina (Yamaguchi & al., 1998). De conformidad con una modalidad específica de la invención, HP comprende los dominios de hexamerización de cadenas de A, B o C de polipéptidos de la familia Clq. Los TP son conocidos en la técnica y comprenden los dominios de trimerización (porción C-terminal) de CMP (es decir, GeneBank 115555, aminoácidos 451-493) o el dominio de trimerización de ACRP30 y moléculas similares a ACRP30. De conformidad con una modalidad preferida de la presente invención, TP comprende una extensión de repeticiones de colágeno. De conformidad con la invención, una " extensión de repeticiones de colágeno" consiste de una serie de repeticiones de colágeno adyacentes de la fórmula (II): -( Gly-Xaa-XaaV (II) en donde: - Xaa y Xaa' representan independientemente un residuo de aminoácido, y - n representa un entero de 10 a 40. Xaa y Xaa' preferiblemente se seleccionan independientemente entre aminoácidos naturales tales como Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ue, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Tip, Tyr o Val. Xaa preferiblemente representa independientemente un residuo de aminoácido seleccionado entre Ala, Arg, Asp, Glu, Gly, His, lie, Leu, Met, Pro o Thr, muy preferiblemente Arg, Asp, Glu, Gly, His o Thr. Xaa' preferiblemente representa independientemente un residuo de aminoácido seleccionado entre Ala, Asn, Asp, Glu, Leu, Lys, Phe, Pro, Thr o Val, muy preferiblemente Asp, Lys, Pro o Thr. Cuando Xaa' representa un residuo de Pro, la repetición de colágeno Gly-Xaa-Pro se designa para ser una repetición de colágeno "perfecta", las otras repeticiones de colágeno siendo designadas como "imperfectas". De conformidad con una modalidad preferida de la invención, la extensión de repeticiones de colágeno comprende por lo menos 1 repetición de colágeno perfecta, muy preferiblemente por lo menos 5 repeticiones de colágeno perfectas. De conformidad con una modalidad preferida de la invención, n es un entero de 15 a 35, muy preferiblemente de 20 a 30, muy preferiblemente 21 , 22, 23 0 24. De conformidad con la presente invención, la extensión de repeticiones de colágeno puede comprender hasta tres "residuos que no son colágeno" insertados entre dos repeticiones de colágeno adyacentes. Estos "residuos que no son colágeno" consisten de 1 , 2 ó 3 residuos de aminoácidos, siempre que cuando el "residuo que no es colágeno" consista de 3 residuos de aminoácidos, el primer aminoácido no es Gly. De conformidad con una modalidad preferida de la invención, TP consiste de una extensión ininterrumpida de 22 repeticiones de colágeno. Muy preferiblemente, TP consiste de la extensión de 22 repeticiones de colágeno de SEQ ID NO 1 , correspondientes a los aminoácidos 45 a 1 10 de mACRP30, como se representa en SEQ ID NO 2 de WO 96/39429: Glv lie Pro Glv His Pro Glv His Asn Glv Thr Pro Glv Arq Asp Glv Arq Asp Glv Thr Pro Glv Glu Lys Glv Glu Lvs Glv Asp Ala Glv Leu Leu Glv Pro Lvs Glv Glu Thr Glv Asp Val Glv Met Thr Glv Ala Glu Glv Pro Arq Glv Phe Pro Glv Thr Pro Glv Arq Lys Glv Glu Pro Glv Glu Ala De conformidad con otra modalidad preferida de la invención, TP consiste de la extensión de 22 repeticiones de colágeno correspondientes a los aminoácido 42 a 1107 de hACRP30, como se representa en SEQ ID NO 7 de WO 96/39429: DP se conocen en la técnica y comprenden fragmentos de dimerización de inmunoglobulinas (fragmentos Fc), el dominio de dimerización C-terminal de osteoprotegerina (Receptor: dN- OPG; aminoácidos 187-401 ), o secuencias de polipéptídos que comprenden por lo menos 6, preferiblemente 8 a 30 aminoácidos y que permiten dimerización. Estos péptidos generalmente comprenden por lo menos un residuo de cisteína que permite la formación de enlaces de disulfuro. Otros polipéptidos útiles como DP de conformidad con la invención son péptidos designados como "cremalleras de leucina" que comprenden un residuo de leucina que está presente cada séptimo residuo. Ejemplos de dichos péptidos que comprenden por lo menos un residuo de cisteína comprenden los siguientes péptidos: Val Asp Leu Glu Gly Ser Thr Ser Asn Gly Arg Gln Cys Ala Gly lie Arg Leu Glu Asp Asp Val Thr Thr Thr Glu Glu Leu Ala Pro Ala Leu Val Pro Pro Pro Lys Gly Thr Cys Ala Gly Trp Met Ala Gly His Asp Gln Glu Thr Thr Thr Gln Gly Pro Gly Val Leu Leu Pro Leu Pro Lys Gly Ala Cys Thr Gly Trp Met Ala. La segunda secuencia anterior corresponde a los aminoácidos 17 a 44 de mACRP30 como se representa en SEQ ID NO 2 de WO 96/39429, y la tercera secuencia anterior corresponde a los aminoácidos 15 a 41 de SEQ ID NO 7 de WO 96/39429. Otros péptidos que comprenden por lo menos un residuo de cisteína, se pueden encontrar en la secuencia de aminoácidos hacia el extremo 5' la extensión de repeticiones de colágeno de moléculas que tienen una estructura análoga a ACRP30 (similar a ACRP30) como se describe en WO 99/10492, WO 99/59618, WO 99/59619, WO 99/64629, WO 00/26363, WO 00/48625, WO 00/63376, WO 00/63377, WO 00/73446, WO 00/73448 o WO 01/32868. Las cremalleras de leucina son bien conocidas en la técnica y se pueden encontrar en proteínas naturales y finalmente identificar usando herramientas de bioinformática disponibles para un experto en la técnica (http://www.bioinf.man.ac.uk/zip/faq. shtml: http://2zip.molgen.mpg.de/: Hirst, J.D., Vieth, M., Skolnick, J. & Brooks, CL. lll, Predicting Leucine Zipper Structures from Sequence, Proteín Engineering, 9, 657-662 (1996)). Los elementos constitutivos L, H, HP, TP y/o DP en los polipéptídos de la fórmula I, la, Ib o le, de conformidad con la invención, son ensambladas por enlaces de péptidos. Pueden ser separados por "enlazadores" que no afectarán la funcionalidad del polipéptido de conformidad con la invención, su capacidad para formar hexámeros y unirse con el receptor correspondiente al ligando L. Dichos enlazadores son bien conocidos en la técnica de biología molecular. El polipéptido de conformidad con la invención también puede comprender secuencias de péptído en su N-terminal y/o C-terminal, que no afectará la funcionalidad del polipéptido de conformidad con la invención. Estos péptidos pueden comprender etiquetas de afinidad, para purificación o detección del polipéptido de conformidad con la invención. Dichas etiquetas de afinidad son bien conocidas en la técnica y comprenden un péptido de FLAG (Hopp et al., Biotechnology 6: 1204 (1988)) o una etiqueta de Myc-KGs. De conformidad con una modalidad preferida de la invención, H comprende un polipéptido de dimerización (DP) y un polipéptido de trimerización (TP), y muy preferiblemente está representado por la siguiente fórmula: DP-TP - L (Ib) en donde R, DP y TP se definen anteriormente y más adelante. Muy preferiblemente, DP y TP representan juntos los aminoácidos 17 a 110 de mACRP30 como se representan en SEQ ID NO 2 de WO 96/39429 o los aminoácidos 15 a 107 de hACRP30 como se representan en SEQ ID NO 7 de WO 96/39429. Como una modalidad preferida de la invención, el polipéptido comprende el polipéptido de fusión m o hACRP30:hFasL (MegafasL), muy particularmente m o hACRP30:hPasL descrito en WO 01/49866 cuyo contenido se incorpora aquí por referencia. De conformidad con otra modalidad de la invención, la porción de hexamerización comprende una porción Fc de IgG que comprende los aminoácidos 248 a 473 de gi2765420, como se describe en la solicitud del PCT No. PCT/EP02/09354, cuyo contenido se incorpora aquí por referencia. Los productos que previenen apoptosis mediada por FNT de las células del hígado, y muy particularmente productos de interacción anti-FNT/RFNT que previenen apoptosis mediada por FNT también son conocidos en la técnica. Incluyen agentes anti-tumorales conocidos tales como anticuerpos anti-FNT y receptores de FNT solubles. También incluyen moléculas de peso molecular bajo que interfieren con la actividad de FNT, tales como talidomida o suramina. También incluyen inhibidores de otros ligandos de RFNT1 y RFNT2, tales como linfotoxina-alfa. Los anticuerpos anti-FNT se conocen en la técnica. En una modalidad preferida, el anticuerpo anti-FNT es un anticuerpo monoclonal, muy preferiblemente un anticuerpo monoclonal recombinante tal como infliximab, vendido bajo el nombre comercial Remicade por Centocor. Los receptores solubles comprenden preferiblemente la fracción extracelular soluble del receptor de FNT. En una modalidad preferida, el receptor de FNT soluble es un multímero, tal como un tetradímero, un pentámero (WO 01/49866) o un hexámero (WO 03/095489). En una modalidad preferida, el receptor soluble es etanercept, vendido bajo el nombre comercial Embrel por Wyeth. En el método de conformidad con la invención, el tratamiento con agentes inductores de apoptosis mediada por Fas se pueden combinar con otros medios de tratamiento que comprenden otras moléculas o composiciones adecuadas para el tratamiento de las mismas enfermedades, pero también otros medios de tratamiento conocidos en la técnica de tratamiento de las mismas enfermedades tales como terapia de radiaciones, quimioterapia o finalmente cirugía. Otras moléculas o composiciones adecuadas para el tratamiento de las mismas enfermedades son bien conocidas en la técnica, tales como cualquiera de las moléculas o composiciones listadas bajo el encabezado "Cancerologíe" en el Dictionaire Vidal (2003 ed.), en el Merk Index (índice Merck) o en la Physícian Desk Referente (referencia del consultorio médico). El uso del agente inductor de apoptosis mediada por Fass anteriormente definido y muy particularmente hexámeros de la fracción soluble de FasL como se definió antes como un adyuvante con quimioterapias existentes es otra modalidad de la presente invención. Como un ejemplo, la muerte celular se incrementó en gran medida cuando se combinó MegaFasL con cisplatin, cuando sólo se midió la muerte celular marginal con cualquiera de estos compuestos sotos. En realidad, la efectividad antitumoral de MegaFasL como un agente individual y en combinación con cisplatín se evaluó primero en mesotelioma y líneas de células cancerosas de ovario in vitro. Los experimentos de citotoxicidad mostraron que el pretratamiento de células con dosis sub-tóxicas de quimioterapia hasta 3 días antes del tratamiento con MegaFasI indujeron un fuerte efecto sinergístico entre los tratamientos. La presente invención también se refiere al uso de un producto que previene la apoptosis mediada por FNT/linfotoxina de las células del hígado como se definió anteriormente para la preparación de un medicamento usado en la prevención o reducción de efectos adversos en el hígado de un paciente tratado con un agente inductor de apoptosis mediada por Fas como se definió antes. La presente invención también se refiere al uso de un producto que previene la apoptosis mediada por FNT/linfotoxina de las células del hígado como se definió antes y un agente inductor de apoptosis mediada por Fas como se definió antes para la preparación de un medicamento para el tratamiento de cáncer. La presente invención también se refiere a un producto que comprende un producto que previene apoptosis mediada por FNT de las células del hígado como se definió antes y un agente inductor de apoptosis mediada por Fas como se definió antes para uso simultáneamente, por separado o secuencialmente, en el tratamiento de patologías en donde la muerte celular ha sido inducida para su control y/o tratamiento como se definió antes. Los siguientes tratamientos se pueden conducir de conformidad con la invención. El paciente que padece de algunas malignidades de etapa avanzada (mesotelioma o cáncer de ovario) es primero inyectado repetidamente con Embrel. Alternativamente, se le administra algún tratamiento con talidomida estándar, tal como aquellos prescritos para la terapia de condiciones inflamatorias. Después, el paciente es tratado con quimioterapia estándar (es decir, cis-platino o 5-fluorouracilo) antes de empezar la administración con Mega-FasL (intravenosa o intraperitoneal, inyección de bolo o perfusión). Se realizan los siguientes experimentos in vivo en curso. 1 ) Ratones doblemente desprovistos de RFNTI y RFNT2 y ratones de tipo silvestre de control son inyectados con dosis cada vez mayores de Mega-FasL. Los niveles y supervivencia de ALAT y ASAT se monitorean. Se espera que los ratones deficientes en receptor de FNT muestren una susceptibilidad más baja a toxicidad del hígado que los ratones normales. 2) A los ratones normales se les administrará proteína de fusión RFNTI-Fc recombinante (neutraliza FNT-alfa y linfotoxina-alfa) antes de la inyección de dosis cada vez más altas de Mega-FasL. Los niveles y supervivencia de ALAT y ASAT se monitorean. Se espera que los ratones tratados con proteína RFNTI-Fc muestren una susceptibilidad más baja a toxicidad del hígado que los ratones no tratados. 3) A los ratones normales se les administrará suramina o talidomida. Subsecuentemente, a los animales se les inyectarán dosis cada vez mayores de Mega-FasL. Los niveles y supervivencia de ALAT y ASAT se monitorean después con el tiempo. Se espera que los ratones tratados talidomida o suramina muestren una susceptibilidad más baja a toxicidad del hígado inducida por Mega-FasL que los ratones no tratados (Eichhorst et al 2004. Suramin ¡nhibits death receptor-induced apoptosis in vitro and fulminant apoptotic liver damage in mice. Nature Medicine 10:602).

Claims (15)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- El uso de un producto que previene la apoptosis mediada por receptores de FNT de las células del hígado en la elaboración de un medicamento para prevenir o reducir efectos adversos en el hígado de un paciente tratado con un agente inductor de apoptosis mediada por Fas.

2.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicho medicamento es adecuado para ser administrable de manera secuencial, separada o simultánea, con los agentes inductores de apoptosis mediada por Fas.

3.- El uso que se reclama en la reivindicación 2, en donde dicho medicamento es adecuado para ser administrable en un tratamiento secuencial ya sea como un pre-tratamiento en donde el medicamento es admínistrable antes del tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas o como un post-tratamiento en donde el medicamento es administrable después y durante el tratamiento con el agente inductor de apoptosís mediada por Fas, y combinaciones de los mismos.

4.- El uso que se reclama en la reivindicación 3, en donde el pretratamiento prevendrá la apoptosis mediada por FNT/linfotoxina antes del tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas.

5.- El uso que se reclama en la reivindicación 3, en donde el post-tratamiento es iniciado con base en la detección de concentraciones de enzimas del hígado incrementadas, tales como ALAT y ASAT, después del tratamiento con el agente inductor de apoptosis mediada por Fas, para reducir la toxicidad cuando es detectada.

6.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde los agentes inductores de apoptosis mediada por Fas comprenden anticuerpos de Fas agonísticos y moléculas de FasL solubles.

7.- El uso que se reclama en la reivindicación 6, en donde la molécula de FasL soluble se selecciona entre moléculas multimerizadas del dominio extracelular de FasL soluble.

8.- El uso que se reclama en la reivindicación 7, en donde la fracción extracelular de Fas-L soluble comprende los aminoácidos Glu 139 a leu 281 de hFasL.

9.- El uso que se reclama en la reivindicación 7, en donde la porción de multimerización comprende los aminoácidos 17 a 110 de mACRP30 o los aminoácidos 15 a 107 de hACRP30.

10.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el producto que previene apoptosis mediada por FNT de las células del hígado es un producto de interacción anti-FNT/RFNT seleccionado entre anticuerpos anti-FNT y receptores de FNT solubles.

11.- El uso que se reclama en la reivindicación 10, en donde el anticuerpo anti-FNT es Infliximab.

12.- El uso que se reclama en la reivindicación 10, en donde el receptor soluble es Etanercept.

13.- El uso que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el producto que previene la apoptosis mediada por receptores de FNT de las células del hígado es un compuesto que interfiere con las funciones del FNT, preferiblemente, talidomida.

14.- Composiciones farmacéuticas que comprenden un agente inductor de apoptosis mediada por Fas y un producto que previene apoptosis mediada por FNT de las células del hígado.

15.- Un equipo de tratamiento que comprende, en composiciones farmacéuticas separadas, un agente inductor de apoptosis mediada por Fas y producto que previene apoptosis mediada por FNT de las células del hígado.