MXPA06011141A

MXPA06011141A - Derivados de nucleosidos y usos terapeuticos de los mismos.

Info

Publication number: MXPA06011141A
Application number: MXPA06011141A
Authority: MX
Inventors: Chang H Ahn; Won J Choi; Young B Lee; Lak S Jeong; Sang K Lee
Original assignee: Rexahn Corp
Priority date: 2004-04-01
Filing date: 2005-04-01
Publication date: 2007-08-14
Also published as: EP1732902A2; CA2562965C; BRPI0509553B1; JP2007531736A; KR20070012685A; ATE453628T1; CA2562965A1; PL1732902T3; KR100926596B1; BRPI0509553A; CN1980898B; US7405214B2; CN102091072A; JP5001832B2; AU2005230676A1; IN2014DN04587A; BRPI0509553B8; JP2012107072A; EP1732902B1; DE602005018620D1

Abstract

La presente invencion concierne a derivados de nucleosidos representados por las formulas generales (I) y (II), a sus metodos sinteticos y a sales de los mismos aceptables farmaceuticamente, y a composiciones que contienen dichos compuestos. Se incluyen tambien metodos para tratar trastornos proliferativos por administracion de los compuestos (ver formula (I)).

Description

DERIVADOS DE NÚCLEOSIDOS Y USOS TERAPÉUTICOS DE LOS MISMOS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta solicitud concierne a compuestos nucleósidos, y a métodos sintéticos relacionados, a composiciones y a sus métodos terapéuticos para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos, incluyendo cánceres, por administración de compuestos nucleósidos. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Existe una necesidad por nuevos compuestos de nucleósidos como moléculas terapéuticas para el tratamiento de trastornos tales como cánceres. Se necesitan métodos de usar ambos compuestos nucleósidos, conocidos y nuevos para el tratamiento de trastornos particulares. BREVE DESCRIPCIÓN DE IAS FIGURAS La Figura 1 es una gráfica que muestra la inhibición del crecimiento de tumor por RX-3117 en ratones desnudos inyectados subcutáneamente con células HCT116 de carcinoma de colon humano. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Se sintetizaron una serie de compuestos nucleósidos y se analizaron para actividades terapéuticas, incluyendo actividades anti-cáncer. Se demostró que los compuestos nucleósidos de la invención son útiles para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos, tales como tumores de seno, tumores de colon, tumores de pulmón y tumores de estómago. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los términos "nucleósido", "compuesto nucleósido", y "derivado de nucleósido" se usan indistintamente en esta solicitud para querer decir compuestos de fórmula I o II, como se definen posteriormente. Todos los términos científicos y técnicos usados en esta solicitud tienen los significados usados comúnmente en el arte, a menos que se especifique de otra manera. Como se usa en esta solicitud, las siguientes palabras o frases tienen los significados especificados. Como se usa en la presente, "portador aceptable farmacéuticamente" significa cualquier material que, cuando se combina con un compuesto de la invención, permite al compuesto retener actividad biológica, tal como la habilidad para potenciar actividad antibacteriana de mastocitos y macrófagos. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, cualquiera de los portadores farmacéuticos estándares tales como solución salina regulada con fosfato, agua, emulsiones tales como emulsiones aceite/agua, y varios tipos de agentes humectantes. Composiciones que comprenden dichos portadores son formuladas por métodos convencionales bien conocidos (ver, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Capitulo 43, 14ava Ed. Mack Publishing Co., Easton, PA) . El término "conjugado", significa un compuesto formado como un compuesto entre dos o más moléculas. Más específicamente, en la presente invención, el derivado de nucleósido puede ser enlazado, por ejemplo enlazado covalentemente, a porciones objetivo especificas de célula formando un compuesto conjugado para liberación eficiente y especifica del agente a una célula de interés. La frase "porción objetivo" significa una molécula que sirve para liberar el compuesto de la invención en un sitio especifico para la actividad deseada. Las porciones objetivo incluyen, por ejemplo, moléculas que específicamente enlazan a moléculas sobre una superficie celular especifica. Dichas porciones objetivo útiles en la invención incluyen anticuerpos de antigenos anti superficie celular. Las citoquinas, incluyendo interleuquinas y factores tales como el factor estimulador de granulocito/macrófago (GMCSF) son también porciones objetivo especificas, conocidas por enlazar a células especificas que expresan altos niveles de sus receptores.

El término "porción profármaco" es un grupo de substitución que facilita el uso de un compuesto de la invención, por ejemplo facilitando la entrada del fármaco en células o la administración del compuesto. La porción profármaco puede ser fragmentada a partir del compuesto, por ejemplo por fragmentación enzimática in vivo. Ejemplos de porciones profármacos incluyen grupos fosfato, enlazadores de péptidos, y azúcares, dichas porciones pueden ser hidrolizadas in vivo. "Tratar" significa inhibir, reducir, modular, mejorar, o bloquear al menos un síntoma que caracteriza a una condición patológica, en un sujeto amenazado por, o afligido con, la condición. Un "trastorno hiperproliferativo" es un trastorno caracterizado por la proliferación anormal de células, e incluye genéricamente trastornos de la piel tales como psoriasis así como también tumores benignos o malignos de todo el sistema orgánico. Esta clase de trastornos hiperproliferativos incluye, por ejemplo, carcinomas de seno (incluyendo carcinomas de ducto y lobular) y otros tumores sólidos, carcinomas, sarcomas, y cánceres que incluyen carcinomas del pulmón como el carcinoma de células pequeñas, carcinoma de grandes células, carcinoma escamoso, y adenocarcinoma, mesotelioma del pulmón, adenocarcinoma colonrectal, carcinoma del estómago, adenocarcinoma prostático, carcinoma ovárico tal como quistadenocarcinoma seroso y - quistadenocarcinoma mucinoso, tumores de células germinales ováricas, carcinomas testiculares, y tumores de células germinales, adenocarcinoma pancreático, adenocarcinoma biliar, carcinoma hepatocelular, carcinoma de vejiga, incluyendo carcinoma de células transicionales, adenocarcinoma, y carcinoma escamoso, adenocarcinoma de células renales, carcinomas endométricos incluyendo adenocarcinomas y tumores de Mullerian mezclados (carcinosarcomas) , carcinomas del endocérvix, ectocérvix, y vagina tal como adenocarcinoma y carcinoma escamoso, tumores de la piel como carcinoma de células escamosas, carcinoma de células básales, melanoma, y tumores de anejos cutáneos, carcinoma esofágico, carcinomas de la nasofaringe y orofaringe incluyendo carcinoma escamoso y adenocarcinomas, carcinomas de gándulas salivales, tumores del sistema nervioso central y de cerebro incluyendo tumores del glial, de origen neuronal, y meníngico, tumores del nervio periférico, sarcomas de tejido blando y sarcomas de hueso y de cartílago. La presente invención comprende compuestos nucleósidos y su uso en el tratamiento de un trastorno, enfermedad o condición hiperproliferativos en un sujeto (por ejemplo, un paciente humano u otro sujeto animal) .

Métodos de conformidad con la .invención comprenden administrar a un sujeto una cantidad efectiva de un compuesto nucleósido de conformidad con la invención. Un tratamiento tal puede, por ejemplo, prevenir, mejorar, y/o inhibir síntomas de la condición hiperproliferativa, y/o puede prevenir o inhibir la proliferación o el crecimiento celular, por ejemplo en un tumor, tal como un neoplasma maligno. Una estrategia de tratamiento de la invención disminuiría el equilibrio tumoral, al menos a un grado medible, y mejoraría la supervivencia de pacientes que sufren de la condición hiperproliferativa. Entre las enfermedades, trastornos y condiciones susceptibles de tratamiento por medio de agentes de la invención están neoplasma, y más específicamente tumores de varios orígenes (pulmón, colon, estómago, músculo liso, esófago, linfoma no de Hodgkin, cáncer de pulmón de células no pequeñas, etc.). Compuestos Útiles en Métodos de Conformidad con la Invención Compuestos útiles en métodos de la invención incluyen nucleósidos que tienen la Fórmula I: en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, l o CH3. También se incluyen compuestos que tienen la Fórmula II : en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, o I. Aunque ilustrada en las conformaciones estereoquímicas basadas en azúcares comos e encuentran de manera natural, la invención incluye estereoisómeros y mezclas relacionadas. Los estereoisómeros relacionados incluyen enantiómeros, diastereómeros y mezclas de los mismos, y mezclas racémicas y mezclas de dos o más diastereómeros. La invención también incluye sales de estos compuestos aceptables farmacéuticamente. Los compuestos de la invención pueden ser muy activos contra un amplio intervalo de enfermedades hiperproliferativas, incluyendo tumores. Por ejemplo, compuestos de conformidad con la invención pueden ser activos contra tumores del ovario, tumores del seno, tumores cervicales, tumores de la próstata, tumores del hígado, tumores del riñon, tumores de colon, tumores pancreáticos, tumores de cerebro, tumores y melanoma de estómago. Por muy activo se quiere decir que un compuesto puede tener una IC50 de 5.0 µM o menos, 2.0 µM o menos, 1.0 µM o menos, o 0.5 µM o menos, con respecto al menos a una línea celular para un tumor particular. Las líneas celulares ejemplares para determinar la actividad incluyen OVCAR-3 humano para tumores del ovario, MCF-7 o MDA-MB-231 para tumores de seno, HeLa para tumores cervicales, PC3 o LNCap para tumores de la próstata, HepG2 para tumores del hígado, A549 o NCI-H226 para tumores de pulmón, UMRC2 para tumores de riñon, HT-29 o HCT116 para tumores de colon, PANC-1 para tumores pancreáticos, U251 para tumores de cerebro, MKN-45 para tumores de estómago y SK-MEL-28 para melanoma. Composiciones y Administración Farmacéutica Los compuestos de la invención son útiles como composiciones farmcéuticas preparadas con una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto de la invención, como se define en la presente, y un portador o diluyente aceptable farmacéuticamente. Los compuestos nucleósidos de la invención pueden ser formulados como composiciones farmacéuticas y administrados a un sujeto en necesidad de tratamiento, por ejemplo, un mamífero, tal como un paciente humano, en una variedad de formas adaptadas a la ruta de administración seleccionada por ejemplo oral o parenteralmente, por rutas intravenosa, intramuscular, tópica o subcutánea. Por consiguiente, los compuestos nucleósidos de la invención pueden ser administrados de manera generalizada, por ejemplo, oralmente, en combinación con un vehículo aceptable farmacéuticamente tal como un diluyente inerte o un portador comestible asimilable, o por inhalación o insuflación. Pueden ser encerrados en cápsulas de gelatina blanda o dura, pueden ser comprimidos en tabletas, o pueden ser incorporados directamente con el alimento de la dieta del paciente. Para administración terapéutica oral, los compuestos nucleósidos pueden ser combinados con uno o más excipientes y ser usados en la forma de tabletas ingeribles, tabletas bucales, pastillas, cápsulas, elíxires, suspensiones, jarabes, obleas, y los similares. Los compuestos nucleósidos pueden ser combinados con un portador pulverizado fino inerte e inhalado o insuflado por el sujeto. Dichas composiciones y preparaciones contendrían al menos 0.1 % de compuestos nucleósidos. El porcentaje de las" composiciones y preparaciones puede, por supuesto, variarse y puede convenientemente estar entre aproximadamente 2 % a aproximadamente 60 % del peso de una forma de dosificación unitaria dada. La cantidad de compuestos nucleósidos en dichas composiciones terapéuticas útiles es tal que se obtendrá un nivel de dosificación efectivo. Las tabletas pildoras, cápsulas y los similares pueden también contener lo siguiente: aglutinantes, tales como goma de tragacanto, acacia, almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato dicálcico; un agente desintegrante tal como almidón de maíz, almidón de papa, ácido algínico y los similares; un lubricante tal como estearato de magnesio; u un agente edulcorante tal como sacarosa, fructosa, lactosa o aspartame, o puede también añadirse un agente saborizante tal como menta piperita, aceite de gaulteria, o sabor a cereza. Cuando la forma de dosificación unitaria es una cápsula, puede contener además de los materiales del tipo anteriormente mencionados, un portador líquido, tal como aceite vegetal o un polietilen glicol. Otros varios materiales pueden estar presentes como recubrimientos o para modificar de otra manera la forma física de la forma de dosificación unitaria sólida. Por ejemplo, tabletas, pildoras, o cápsulas pueden ser recubiertas con gelatina, cera, goma laca o azúcar y los similares. Un jarabe o elíxir puede contener el compuesto activo, sacarosa o fructosa como un agente edulcorante, metil y propil parabenos como conservadores, un colorante y saborizante tal como sabor a naranja o cereza. Por supuesto, cualquier material usado en la preparación de cualquier forma de dosificación unitaria será farmacéuticamente aceptable y substancialmente no tóxico en las cantidades empleadas . Además los compuestos nucleósidos pueden ser incorporados en preparaciones y dispositivos de liberación controlada. Los compuestos nucleósidos pueden también ser administrados intravenosa o intraperitonealmente por infusión o inyección. Soluciones de compuestos nucleósidos pueden ser preparadas en agua, opcionalmente mezclados con un surfactante no tóxico. Dispersiones pueden ser preparadas en glicerol, polietilen glicoles líquidos, triacetina, y mezclas de los mismos y en aceites. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones pueden contener un conservador para prevenir el crecimiento de microorganismos. Las formas de dosificación farmacéutica adecuadas para inyección o infusión pueden incluir soluciones o dispersiones acuosas estériles o polvos estériles que comprendan los compuestos nucleósidos, los cuales son adaptados para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones infusibles o inyectables estériles, opcionalmente encapsuladas en liposomas. En todos los casos, la forma de dosificación última será estéril, fluida y estable bajo condiciones de fabricación y almacenamiento. El portador o vehículo líquido puede ser un solvente o medio de dispersión líquida que comprende por ejemplo, agua, etanol, un poliol (por ejemplo, glicerol, propilen glicol, polietilen glicoles líquidos, y los similares), aceites vegetales, esteres de glicerilo no tóxicos y mezclas adecuadas de los mismos. Puede mantenerse la fluidez apropiada, por ejemplo, por la formación de liposomas, por el mantenimiento de tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones o por el uso de surfactantes. La prevención de la acción de microorganismos puede ser realizada aproximadamente por varios agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorbutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal, y los similares. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, reguladores o cloruro de sodio. La absorción prolongada de las composiciones inyectables puede realizarse por medio del uso en las composiciones de agentes retardadores de absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina. Las soluciones inyectables estériles se prepararon por incorporación de los compuestos nucleósidos en la cantidad requerida en el solvente apropiado con varios de los otros ingredientes enumerados anteriormente, según se requiera, seguido por esterilización por filtro. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos preferidos de preparación son las técnicas de secado al vacío y de secado por congelación, los cuales produjeron un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional presente en las soluciones previamente filtradas estériles. Para administración tópica, los compuestos nucleósidos pueden ser aplicados en forma pura. No obstante, generalmente es deseable administrarlos a la piel como composiciones o formulaciones, en combinación con un portador aceptable dermatológicamente, que puede ser un sólido o un líquido. Los portadores sólidos útiles incluyen sólidos finamente divididos tales como talco, arcilla, celulosa microcristalina, sílice, alúmina y los similares. Otros portadores sólidos incluyen nanopartículas y micropartículas poliméricas no tóxicas. Los portadores líquidos útiles incluyen agua, alcoholes o glicoles o combinaciones de agua/alcohol/glicol, en las cuales los compuestos nucleósidos pueden ser disueltos o dispersos a niveles eficientes, opcionalmente con la ayuda de surfactantes no tóxicos. Los adyuvantes tales como fragancias y agentes antimicrobianos adicionales pueden ser añadidos para optimizar las propiedades para un uso dado. Las composiciones líquidas resultantes pueden ser aplicadas desde almohadillas absorbentes, usadas para impregnar vendajes y otros apositos, o extendidas sobre el área afectada usando nebulizadores de aerosol de tipo bomba. Espesantes tales como polímeros sintéticos, ácidos grasos, sales y esteres de ácidos grasos, alcoholes grasos, celulosas modificadas o materiales minerales modificados pueden también ser empleados con portadores líquidos para formar pastas, geles, ungüentos extendibles, jabones, y los similares, para aplicación directamente a la piel del usuario. Ejemplos de composiciones dermatológicas útiles que pueden ser usadas para liberar los compuestos nucleósidos a la piel son conocidos en el arte; por ejemplo, ver Jacquet y colaboradores (Patente Estadounidense 4,608,392), Geria (Patente Estadounidense 4,992,478), Smith y colaboradores Patente Estadounidense 4,559,157) y Wortzman (Patente Estadounidense 4,820,508). Pueden determinarse las dosificaciones útiles de los compuestos de Fórmula I o II comparando su actividad in vitro, y su actividad in vivo en modelos animales. Los métodos para la extrapolación de dosificaciones efectivas en ratones, y en otros animales son conocidos en el arte, por ejemplo, ver Patente Estadounidense 4,938,949. De manera general, la concentración de los compuestos nucleósidos en una composición líquida, tal como una loción será desde aproximadamente 0.1-25 % en peso, " o desde aproximadamente 0.5 - 10 % en peso. La concentración en una composición sólida o semi-sólida tal como un gel o un polvo puede ser aproximadamente de 0.1 -5 % en peso, o aproximadamente de 0.5 - 2.5 % en peso. La cantidad de los compuestos nucleósidos requerida para uso en tratamiento variará dependiendo de la sal particular seleccionada y con la ruta de administración, la naturaleza de la condición que es tratada y la edad y condición del paciente, y finalmente estará a la discreción del médico o clínico que atiende. Las dosificaciones y rutas de administración efectivas de agentes de la invención son convencionales. La cantidad exacta (dosis efectiva) del compuesto nucleósido variará de sujeto a sujeto, dependiendo de, por ejemplo, las especies, edad, peso, y condición general o clínica del sujeto, la severidad o el mecanismo de cualquier trastorno que es tratado, el agente particular o vehículo usado, el método y el programa de administración, y los similares. Una dosis efectiva terapéuticamente puede ser determinada, por medio de procedimientos convencionales conocidos por los expertos en la materia. Ver, por ejemplo, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Goodman y Gilman, eds., MacMillan Publishing, Co. New York. Por ejemplo, una dosis efectiva puede ser estimada inicialmente ya sea en ensayos de cultivo celular o en modelos animales adecuados. El modelo animal puede también ser usado para determinar los intervalos de concentración y las rutas de administración apropiados. Dicha información puede entonces ser usada para determinar dosis y rutas útiles para la administración en humanos. Una dosis terapéutica puede ser seleccionada por analogía a dosificaciones para agentes terapéuticos comparables. La modalidad de administración particular y el régimen de dosificación será seleccionado por el clínico que atiende, tomando en cuenta los particulares del caso (por ejemplo, el sujeto, la enfermedad, el estado de enfermedad involucrado y si el tratamiento es profiláctico) . El tratamiento puede involucrar dosis diarias o multi-diarias de compuestos durante un período de unos cuantos días a meses, o aún años. No obstante, en general, una dosis adecuada estará en el intervalo desde aproximadamente 0.5 a aproximadamente 100 mg/kg, por ejemplo, desde aproximadamente 10 a aproximadamente 75 mg/kg de peso corporal por día, tal como 3 a aproximadamente 50 mg por kilogramo de peso corporal del recipiente por día, 6 a 90 mg/kg/día, o en el intervalo de 15 a 60 mg/kg/día. Por ejemplo, las dosis adecuadas pueden ser de 0.5, 5, 10, 25, 50, 100, 250 o 500 mg/kg de peso corporal por día. Los compuestos nucleósidos son administrados convenientemente en forma de dosis unitaria; por ejemplo, que contengan 5 a 1000 mg, 10 a 750 mg, o 50 a 500 mg de ingrediente activo por forma de dosificación unitaria. Los compuestos nucleósidos pueden ser administrados para lograr concentraciones plasmáticas pico desde aproximadamente 0.5 a aproximadamente 75 µM, aproximadamente 1 a 50 µM, o, aproximadamente 2 a aproximadamente 30 µM. Concentraciones plasmáticas deseables ejemplares incluyen al menos o no más de 0.25, 0.5, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100 o 200 µM. Esto puede lograrse, por medio de inyección intravenosa de una solución al 0.05 a 5 % de los compuestos nucleósidos, opcionalmente en solución salina, u oralmente como un bolus que contenga aproximadamente 1-100 mg de los compuestos nucleósidos. Niveles sanguíneos deseables pueden ser mantenidos por infusión continua para proporcionar aproximadamente 0.01 -5.0 mg/kg/hr, por ejemplo al menos o no más de 0.005, 0.01, 0.1, 2.5, 5.0 o 10.0 mg/kg/hr. De manera alternativa, dichos niveles pueden ser obtenidos por infusiones intermitentes que contengan aproximadamente 0.4 - 15 mg/kg, por ejemplo al menos o no más de 0.25, 0.5, 1.0, 5.0, 10.0, 15.0 o 25.0 mg/kg de los compuestos nucleósidos. Los compuestos nucleósidos pueden presentarse' convenientemente en una dosis única o como dosis divididas administradas a intervalos apropiados, por ejemplo, como dos, tres, cuatro o más sub-dosis por día. La sub-dosis misma puede dividirse adicionalmente, por ejemplo, en un número de administraciones espaciadas discretamente, tal como inhalaciones múltiples a partir de un insuflador o por aplicación de una pluralidad de gotas en el ojo. Nucleósidos de Destino para Células En una modalidad ejemplar, el compuesto nucleósido está destinado a células donde se desea el tratamiento, por ejemplo a células de cáncer humano. El compuesto está destinado a la célula deseada por conjugación a una porción de destino que enlaza específicamente a la célula deseada, dirigiendo así la administración de una molécula conjugada. Porciones de destino útiles son ligandos que enlazan específicamente a antígenos celulares o a ligandos de superficie celular, por ejemplo, anticuerpos contra el antígeno de células B, CD19 (tal como B43) y los similares. Para formar los conjugados de la invención, porciones de destino son enlazadas covalentemente a sitios sob're el compuesto nucleósido. La porción de destino, la cual es a menudo una molécula de polipéptido, es enlazada a compuestos de la invención en sitios reactivos, incluyendo NH2, SH, CHO, COOH, y los similares. Los agentes de enlace específicos se usan para unir los compuestos. Los agentes de enlace son seleccionados de conformidad con el sitio reactivo al cual la porción de destino será fijada. Los métodos para seleccionar un agente de enlace apropiado y el sitio reactivo para la fijación de la porción de destino al compuesto de la invención son conocidos, y se describen, por ejemplo, en Hermanson, y colaboradores, Bioconjugate Techniques, Academic Press, 1996; Hermanson, y colaboradores, Immobilized Affinity Ligand Techniques, Academic Press, 1992; y Pierce Catalog and Handbook, 1996, pág. T155-T201. EJEMPLOS La invención puede ser aclarada adicionalmente por referencia a los Ejemplos siguientes, los cuales sirven para ejemplificar algunas de las modalidades preferidas, y no limitan en manera alguna la invención. Ejemplos 1-2. Síntesis de Derivados de Nucleósidos Todos los solventes anhidros tales como acetonitrilo, metanol, etanol, acetato de etilo, tetrahidrofurano, cloroformo, y cloruro de metileno fueron destilados sobre CaH2 o P205 o Na/benzofenona previamente al uso. Todos los productos químicos fueron de grado reactivo y fueron adquiridos de Aldrich Chemical Company (Milwaukee, Wis) o Sigma Chemical Company (St. Louis, Mo. ) . Caracteristicas Físicas Se registraron los espectros de NMR de protones en un espectrómetro Varian de 400 MHz en solventes deuterados tales como DMSO-d6, CDC13, acetonitrilo-d3 o acetona-d6. Se reportaron los desplazamientos químicos en partes por millón (ppm) con tetrametilsilano (TMS) como un estándar interno a cero ppm. Las constantes de acoplamiento (J) se dieron en hertzios y las abreviaciones s, d, t, q, y m se refieren a singuleto, dupleto, tripleto, cuarteto y multipleto, respectivamente. Se efectuó la TLC en placas 60F25 de Merck recubiertas. Se efectuó la cromatografía de columna usando gel de sílice 60 (230-400 mallas, Merck) . EJEMPLO 2. Sintesis de flúorciclopentenol substituido Se preparó un flúorpentenol substituido de manera adecuada a partir de isopropil-D-ribosa 1 como se indica en el Esquema de Reacción 1. Un intermediario importante en la síntesis es el alcohol ß alílico terciario 6. El alfa epímero correspondiente es resistente a la oxidación, y obstaculiza así la formación del intermediario 7. El alcohol ß alílico terciario intermediario 6 es preparado selectivamente a partir de su contraparte de anillo abierto, intermediario 5. Se encontró que la presencia de grupos protectores voluminosos sobre el alcohol primario favorece la formación del compuesto 5 sobre su epímero diastereómerico, facilitando así la preparación del alcohol ß- alílico terciario intermediario 6 y, finalmente, el producto oxidado 7. A este respecto, el grupo protector bencilo dio el a-epímero fuerte, el grupo protector ter-butildimetil sililo mostró alguna selectividad (aproximadamente 75:8 ß : a) , 1 el grupo protector ter-butildifenil sililo mostró un mejor rendimiento y aún más alta selectividad y el grupo tritilo proporcionó alto rendimiento y alta selectividad. Esquema de Reacción. 1 Swern 90% PDC 92% 9 TBDPSC1 96% 12 11 10 2 , 3-0-Isopropiliden-5-tritil-D-ribosa (2) Una solución de isopropiliden-D-ribosa 1 (10 g, 52.58 mmoles) y cloruro de tritilo (21.95 g, 78.88 mmoles) en piridina (250 ml) se agitó a temperatura ambiente por 20 horas. Después se añadió agua, la mezcla reactiva se extrajo con acetato de etilo, se secó, se filtró, y se evaporó al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice usando hexano y acetato de etilo (4:1) como el eluyente para dar éter tritílico 2 (21.53 g, 85 %) como un aceite incoloro; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.40-7.21 (m, 15H) , 5.72 (d, J = 4.0 Hz, 0.4H), 5.32 (s, 0.6H), 4.76 (d, J = 5.6 Hz, 0.6H), 4.72 (dd, J = 6.0, 4.0 Hz, 0.4H), 4.63 (d, J = 6.0 Hz, 0.6H), 4.57 (dd, J = 6.4, 1.2 Hz, 0.4H), 4.34- 4.33 ( , 0.6H), 4.18-4.17 (m, 0.4H), 4.09 (bs, 2H) , 3.40 (dd, J = 10.4, 2.8 Hz, 0.4H), 3.39 (dd, J = 10.0, 3.6 Hz, 0.6H), 3.32 (dd, J = 10.0, 3.6 Hz, 0.6H), 3.00 (dd, J = 10.4, 3.2 Hz, 0.4H), 1.53 (s, 1.2H), 1.46 (s, 1.8H), 1.35 (s, 1.2H) , 1.32 (s, 1.8H) . (lR)-l-((4R,5S)-2,2-Dimetil- 5- vinil- [1 , 3]dioxolan- 4- il) - 2- tritiloxi- etanol (3). A una suspensión agitada de bromuro de metil trifenilfosfonio (32.28 g, 90.36 mmoles) en tetrahidrofurano (300 ml) se añadió ter-butóxido de potasio (10.79 g, 88.26 mmoles, la pureza del reactivo: 95 %) a 0 °C, y la mezcla de agitó a temperatura ambiente por 1 hora. Después de que la mezcla se enfrió de nuevo a 0 °C, se añadió una solución de lactol 2 (18.18 g, 42.03 mmoles) en tetrahidrofurano. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C por 3 horas y a temperatura ambiente por 4 horas . La mezcla de reacción se dividió entre agua y acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó, se filtró, y se evaporó al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice usando hexano y acetato de etilo (8:1) como el eluyente para dar la olefina 3. (15.20 g, 82 %) como un sólido blanco; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.45-7.21 (m, 15H) , 5.96 (td, J = 10.4, 6.8 Hz, ÍH) , 5.37 (td, J = 16.8, 1.6 Hz, ÍH) , 5.23 (td, J = 10.8, 1.6 Hz, 1H) , 4.67 (t, J = 6.4, 1H) , 4.15 (dd, J = 8.8, 6.4 Hz, ÍH) , 3.77-3.71 (m, ÍH) , 3.36 (dd, J = 9.6, 3.6 Hz, 1H) , 3.32 (dd, J = 9.6, 6.0 Hz, 1H) , 2.37 (d, J = 4.8 Hz, 1H) , 1.36 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) . 1- ((4S,5S)-2,2-Dimetil- 5- vinil- [1 , 3]dioxolan- 4-il) - 2- tritiloxi- etanona (4) . A una solución agitada de (C0C1)2 (28.69 ml,. 57.38 mmoles, solución 2M en CH2C12) (200 ml) se añadió gota agota una solución de DMSO (8.9 ml, 125.51 mmoles) en CH2C12 (30 ml a - 78 °C, y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura por 30 minutos. Se añadió una solución de alcohol 3 (15.44 g, 35.86 mmoles) en CH2C12 (30 ml) y la mezcla de reacción se agitó a - 78 °C por 1 hora. Se añadió trietilamina (32.99 ml, 236.88 mmoles) a - 78 °C y luego la mezcla de reacción se mantuvo a temperatura ambiente y se agitó por 1 hora. Se añadió cuidadosamente a 0 °C una solución saturada de cloruro de amonio y la mezcla de reacción se dividió entre CH2C12 y agua. La capa orgánica se secó, filtró, y evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando hexano y acetato de etilo (6:1) para dar la cetona 4 (13.83 g, 90 %) como un sólido blanco; XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.46-7.23 (m, 15H) , 5.56 (ddd, J = 17.2, 10.4, 6.8 Hz, 1H) , 5.26 (td, J = 16.8, 1.2 Hz, ÍH) , 5.13 (td, J = 10.4, 1.2 Hz, ÍH) , 4.88-4.84 (m, 1H) , 4.76 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 4.06 (d, J = 18.0 Hz, ÍH) , 3.72 (d, J = 18.4 Hz, ÍH) , 1.41 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) . (2R) -2- ( (4S, 5S) -2 , 2-Dimetil-5-vinil-[l , 3]dioxolan-4- il) - 1- tritiloxi-but-3-3n-2-ol (5) . A una solución agitada de 4 (14.66 g, 34.22 mmoles) en tetrahidrofurano (150 ml) se añadió gota agota bromuro de vinilmagnesio (68.44 ml, 68.44 mmoles, solución 1M en tetrahidrofurano) a - 78 °C, y la mezcla de reacción se agitó por 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se detuvo por medio de solución saturada de cloruro de amonio y salmuera, y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se evaporó. El aceite resultante se purificó por cromatografía de columna (hexano: acetato de etilo « 9:1) para dar 5 (15.62 g, 100 %) como un semisólido blanco; XH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.43-7.22 ( , 15H) , 6.16 (dd, J = 11.2, 10.8 Hz, 1H) , 6.01-5.93 ( , ÍH) , 5.42 (dd, J = 17.2, 1.2 Hz, 1H), 5.27 (dd, J = 10.8, 1.2 Hz, ÍH) , 4.99 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 4.98 (d, J = 11.2 Hz, ÍH) , 4.54-4.47 (m, 2H) , 3.33 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 3.05 (d, J = 8.4 Hz, ÍH) , 2.54 (bs, ÍH) , 1.46 (s, 3H) , 1.40 (s, 3H) . (3aS,AR,6aS) -2,2-Dimetil- 4- tritiloximetil-4, 6a-dihidro-3aH-sislopenta[l , 3]dioxol-4-ol (6) A una solución agitada de 5 (14.55 g, 31.86 mmoles) en cloruro de metileno (100 ml) se añadió dicloruro de triciclohexilfosfina[l, 3-bis (2, 4, 6-trimetilfenil) -4-, 5-dihidroimidazol-2-iliden]- [bencilidin]rutenio (VI) (270 mg, 0.32 mmoles), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 días. Se eliminaron los materiales volátiles bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo « 5:1) para dar 6 (12.83 g, 94 %) como un semi-sólido blanco; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.47-7.21 (m, 15H) , 5.93 (dd, J = 5.6, 1.6 Hz, 1H) , 5.73 (d, J = 5.6 Hz, 1H) , 5.31 (d, J = 5.6 Hz, ÍH) , 4.56 (d, J = 5.6 Hz, ÍH) , 3.59 (d, J = 9.2 Hz, 1H) , 3.15 (d, J = 9.2 Hz, 1H) , 3.02 (s, 1H) , 1.32 (s, 3H) , 1.21 (s, 3H) . (3R, 6aR)- 2,2-Dimetil- 6- tritiloximetil-3a , 6a-dihidro- ciclo?enta[l,3]dioxol-4-ona (7) Una solución de 6 (12.17 g, 28.40 mmoles), tamices moleculares de 4 A (14.2 g) , y dicromato de piridinio (32.05 g, 85.20 mmoles) en DMF (100 ml) se agitó a temperatura ambiente por 2 días. Después, la mezcla fue diluida con éter dietílico y acetato de etilo, la mezcla se filtró a través de una almohadilla corta de una mezcla de gel de sílice y Celite. El filtrado se evaporó y el residuo resultante se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice (hexano -.acetato de etilo « 4:1) para dar la cetona 7 (11.14 g, 92 %) como un sólido blanco; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.44-7.22 (m, 15H) , 6.42 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 4.96 (d, T = 5.2 Hz, ÍH) , 4.45 (d, J= 5.6 Hz, 1H) , 4.23 (dd, J = 18.4, 2.0 Hz, 1H) , 3.93 (dd, J= 18.0, 2.0 Hz, 1H) , 1.34 (s, 6H) . (3R, 6aR)- 5- Yodo- 2,2-dimetil- 6- tritiloximetil-3a, 6a- dihidro- ciclopenta[l , 3]dioxol- 4- ona (8) A una solución agitada de 7 (17.9 g, 40.30 mmoles) y yodo (12.27 g, 48.36 mmoles) en cloruro de metileno (80 ml) se añadió piridina (3.0 ml, 36.27 mmoles) bajo atmósfera de nitrógeno a 0 °C, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 6 horas. La mezcla fue diluida con cloruro de metileno y agua y la capa orgánica fue lavada con agua, solución saturada de tiosulfato de sodio, salmuera, y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Después de evaporación de solventes, el residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice instantánea (hexano: acetato de etilo « 7:1) para dar 8 (16.03 g, 72 %) como un sólido blanco; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.43-7.15 (m, 15H) , 5.35 (d, J= 5.6 Hz, ÍH), 4.45 (d, J = 5.6 Hz, 1H) , 4.19 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 4.08 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 1.36 (s, 3H) , 1.24 (s, 3H) . (3R, 4R, 6aR)- 5- Yodo- 2, 2- dimetil- I- 6-tritiloximetil- 4, 6a- dihidro- 3aH-ciclopenta[l , 3]dioxol- 4- ol (9) . A una solución agitada de 8 (8.97 g, 16.25 mmoles) y cloruro de cerio (III) heptahidratado (6.66 g, 17.88 mmoles (80 ml) se añadió borohidruro de sodio (676 mg, 17.88 mmoles) a 0 °C y la mezcla se agitó a la misma temperatura por 1 hora. La mezcla se diluyó con salmuera y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo « 6:1) para dar 9 (8.57 g, 95 %) como un sólido blanco; 1H NMR (400 MHz, CDC13) d 7.48-7.20 (m, 15H) , 5.20 (d, J= 5.6 Hz, 1H) , 4.76 (t, J= 5.6 Hz, ÍH) , 3.88 (d, J = 12.0 Hz, ÍH), 3.79 (d, J = 12.0 Hz, ÍH) , 2.78 (d, J = 10.4 Hz, 1H) , 1.40 (s, 3H) , 1.30 (s, 3H) . (3R, 4R, 6aR)- ter- Butil- (5- iodo- 2, 2- dimetil-6- tritiloximetil- 4 , 6a- dihidro- 3aH-cislopenta[l,3]dioxol- 4- iloxi)- difenil- silano (10) A una solución agitada de 9 (8.53 g, 15.39 mmoles) e imidazol (3.14 g, 46.17 mmoles) en N, N- dimetilformamida anhidra (70 ml) se añadió TBDPSCI (4.80 ml, 18.47 mmoles) a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura toda la noche. La mezcla se extinguió con agua, se extrajo con éter dietílico, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo ~ 30:1) para dar 10 (11.66 g, 96 %) como un aceite incoloro; ÍH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.82-7.18 (m, 25H) , 4.94 (d, J = 5.6 Hz, ÍH) , 4.47 (d, J - 5.6 Hz, ÍH) , 4.05 (d, J = 5.6 Hz, 1H) , 3.89 (d, J = 12.0 Hz, ÍH) , 3.78 (d, J = 12.0 Hz, ÍH), 1.29 (s, 3H) , 1.25 (s, 3H) , 1.13 (s, 9H) . (3R, 4R, 6aR)- ter- Butil- (5- flúor- 2, 2-dioxietil- 6- tritiloximetil- 4, 6a- dihidro- 3aH-ciclopenta[l , 3]dioxol- 4- iloxi)- difenil- silano (11). A una solución agitada de 10 (11.66 g, 14.71 mmoles) y N- flúorbencensulfonamida (5.566 g, 17.65 mmoles) en tetrahidrofurano seco (100 ml) se añadió lentamente n- butil litio (27.6 ml, 44.13 mmoles, solución 1.6 M en hexano) a - 78 °C bajo atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura por 1 hora. La mezcla se extinguió con solución saturada de cloruro de amonio y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo « 6:1) para dar 11 (7.35 g, 73 %) como un sólido blanco; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.81-7.17 (m, 25H) , 4.94 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 4.35 ( , ÍH) , 4.25 (m, ÍH) , 3.89 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 3.77 (t, J = 12.0 Hz, ÍH) , 1.42 (s, 3H) , 1.38 (s, 3H) , 1.08 (s, 9H) . (3R,4R,6aR)- 5- Flúor- 2, 3- dimetil- 6-tritiloximetil- 4, 6a-dihidro- 3aH-ciclopenta[l , 3]dioxol (12) . A una solución agitada de 11 (7.35 g, 10.73 mmoles) en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió gota a gota fluoruro de tetra-n-butilamonio (12.88 ml, 12.88 mmoles), 1.0 M en tetrahidrofurano) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 hora. Después de la remoción del solvente, el residuo se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo « 4:1) para dar 12 (4.31 g, 90 %) como un aceite incoloro; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.43-7.18 (m, 15H) , 5.12 (t, J = 5.6 Hz, ÍH) , 4.69 ( , ÍH) , 4.38 (t, J = 5.6 Hz, 1H) , 3.91 (d, J = 13.2 Hz, 1H) , 3.74 (d, J = 13.2 Hz, 1H) , 2.75 (d, J = 10.4 Hz, ÍH) , 1.43 (s, 3H) , 1.39 (s, 3H) .

EJEMPLO 2. Síntesis de de 2- flúor-ciclopentenil nucleósidos Se acopló el flúor-ciclopentenol a una base N3-benzoil protegida, como se indica en el Esquema de Reacción 2. Procedimiento General para la Condensación de la Base Una solución de dietilazodicarboxilato (780 mg, 4.48 mmoles) en tetrahidrofuranos eco (30 ml) se añadió gota agota a una solución del flúor-ciclopentenol 12 (800 mg, 1.79 mmoles), trifenilfosfina (1174.8 mg, 4.48 mmoles) , y una base N3-benzoil seleccionada (derivados de uracilo, 3.58 mmoles) en tetrahidrofurano seco (10 ml) a 0 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 15 horas, y luego los materiales volátiles se evaporaron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (hexano: acetato de etilo « 4:1) para dar el producto condensado base.

Esquema de Reacción 2 X = H 19 X = H 25 X = H 14 X = F 20 X = F 26 X = F 15 X = C1 21 X = C1 27 X = C1 16 X = Br 22 X = Br 28 X = Br 17 X = I 23 X = I 29 X = I 18 X = CH3 24 X = CH3 desoxigenación 30 X = H 36:X = H 31 X = F 37: X = F 32 X = C1 38:X= C1 33 X = Br 39:X = Br 34 X = I 40:X = I 35 X = CH3 El rendimiento y los datos espectroscópicos para los productos de condensación 13-18 fueron como sigue: (3R,4S,6aR) -3-Benzoil-l- (5- flúor- 2, 2- dimetil-6- tritiloximetil- 4, 6a- dihidro- 3aH- ciclopental [l,3]dioxol- 4- il)- ÍH- pirimidin- 2, 4- diona (13). 865.5 mg, 75 %; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.97-7.24 (m, 15H) , 7.66 (d, j = 8.0 Hz, ÍH) , 5.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.49 (bs, 1H) , 4.72 (t, J = 6.0 Hz, 1H) , 4.35 (d, J = 13.2 Hz, 1H) , 4.29 (t, J = 6.0 Hz, 1H) , 4.15 (dt, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H) , 1.43 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) . (3R,4S,6aR)- 3- Benzoil- 1- (5- flúor- 2, 2-dimetil- 6- tritiloximetil- 4, 6a- dihidro- 3aH-ciclopenta[l , 3]dioxol- 4- il) - 5- flúor- 1H- pirimidin-2, 4- diona (14). 924.6 mg, 78 %; X NMR (400 MHz, CDC13) d 7.94-7.24 ( , 15H) , 7.13 (d, J = 5.2 Hz, 1H) , 5.33 (td, J = 6.0, 0.8 Hz, 1H) , 5.27 (bs, 1H) , 4.62 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 4.03 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 3.87 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, ÍH) , 1.44 (s, 3H) , 1.36 (s, 3H) . (3R,4S,6aR)- 3- Benzoil- 5- cloro- 1- (5- flúor- 2, 2- dimetil- 6- tritiloximetil- 4, 6a-dihidro- 3aH-ciclopenta[l , 3]dioxol- 4- il) - 1H- pirimidin- 2, 4- diona (15) . 875.3 mg, 72 %; aH NMR (400 MHz, CDC13) d 7.95-7.21 (m, 15H) , 7.83 (s, ÍH) , 5.42 (td, J = 6.0, 0.8 Hz, ÍH) , 5.35 (bs, 1H) , 4.65 (t, J = 7.2 Hz, ÍH) , 3.99 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 3.75 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) , 1.43 (s, 3H) , 1.32 (s, 3H) . (3R,4S,6aR)- 3- Benzoil- 5- bromo- 1- (5- flúor- 2, 2- dimetil- 6- tritiloximetil- 4, 6a-dihidro- 3aH-ciclopentafl , 3]dioxol- 4- il) - ÍH- pirimidin- 2, 4- diona (16) . 893.7 mg, 69 %; XH NMR (400 MHz, CDC13) d 8.04 (s, 1H) , 7.97-7.2$ (m, 15H) , 5.29 (td, J = 6.0, 0.8 Hz, ÍH) , 5.25 (bs, 1H) , 4.71 (t, J = 7.2 Hz, 1H) , 4.15 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 3.95 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) , 1.41 (s, 3H) , 1.37 (s, 3H) . (3R,4S,6aR)- 3- Benzoil- 1- (5- flúor- 2, 2-dimetil- 6- tritiloximetil- 4 , 6a-dihidro- 3aH-ciclopentafl , 3]dioxol- 4- il) - 5- yodo- 1H- pirimidin- 2, 4- diona (17). 855.2 mg, 62 %.

X NMR (400 MHz, CDC13) d 8.26 (s, ÍH) , 7.93-7.22 (m, 15H) , 5.38 (td, J = 6.0, 0.8 Hz, ÍH) , 5.29 (bs, 1H) , 4.73 (t, J - 7.2 Hz, ÍH), 4.14 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 3.97 (dt, J= 12.8, 2.4 Hz, lH) , 1.48 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) . (3R,4S,6aR)- 3- Benzoil- 1- (5- flúor- 2, 2-dimetil- 6- tritiloximetil- 4, 6a-dihidro- 3aH-cislopenta[l,3]dioxol- 4- il) - 5- metil- ÍH- pirimidin-2, 4- diona (18). 990.4 mg, 84 %. 1H NMR (400 MHz, CDC13) d 7.94-7.22 (m, 15H) , 7.25 (s, 1H) , 5.43 (td, J = 6.0, 0.8 Hz, ÍH) , 5.19 (bs, ÍH) , 4.52 (t, J = 7.2 Hz, ÍH) , 4.13 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.01 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) , 2.02 (s, 3H) , 1.44 (s, 3H) , 1.36 (s, 3H) .

Procedimiento General para la Desprotección Un compuesto protegido 13-18 (1.00 mmoles) se disolvió en 10 ml de HCl lN/metanol (2:1, v/v) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 20 horas. El solvente se eliminó bajo presión reducida, y el residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (cloruro de metileno :metanol » 10:1) para dar un derivado de N-benzoil uracilo. El derivado de N-benzoil uracilo obtenido anteriormente se trató con 10 ml de amoníaco metanólico, y la mezcla se agitó en un tubo sellado a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice (cloruro de metileno :metanol « 5:1) para dar un derivado de uracilo de la Tabla 1, el cual fue cristalizado a partir de éter dietílico/metanol. Tabla 1. Derivados de Uracilo El rendimiento y los datos espectroscópicos para los derivados de uracilo 19-24 fueron como sigue: (1S,4R,5S)- 1- (2- Flúor- 4, 5- dihidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- ÍH- pirimidin- 2, 4-diona (19, RX-3116) . 170.4 mg, 66 %; 1H NMR (400 MHz, CD30D) S 7.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.44 (bs, 1H) , 4.68 (t, J = 5.2 Hz, ÍH) , 4.37 (d, J= 12.8 Hz, 1H) , 4.20 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, 1H) , 4.12 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 5- Flúor- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2, 4- diona (20, RX-3116A) . 168.5 mg 61 %.

X NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.74 (dd, J = 6.4, 0.8 Hz, 1H), 5.46 (bs, ÍH), 4.67 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH), 4.18 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.12 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 5- Cloro- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2, 4- diona (21, RX-3116B) . 190.2 mg, 65 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.43 (s, 1H) , 5.45 (bs, ÍH) , 4.69 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, ÍH) , 4.35 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.20 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, ÍH) , 4.15 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, ÍH) . (1S,4R,5S)- 5- Bromo- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H- pirimidin- 2, 4- diona (22, RX-3116C) . 192.1 mg, 57 %; X NMR (400 MBz, CD30D) d 8.59 (s, ÍH) , 5.43 (bs, 1H), 4.64 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, ÍH) , 4.35 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.16 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, 1H) , 4.11 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, ÍH) . (1S,4R,5S)- 1- (2- Flúor- 4, 5- dihidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 5- yodo- 1H-pirimidin- 2, 4- diona (23, RX-3116D) . 195.9 mg, 51 %; 1H NMR (400 MHz, CD30D) d 8.67 (s, 1H) , 5.46 (bs, 1H) , 4.66 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.36 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.15 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.08 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, ÍH) . (1S,4R,5S)- 1- (2- Flúor- 4, 5- dihidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- 5- metil- 1H-pirimidin- 2, 4- diona (24, RX-3116E) . 204.2 mg, 75 %; X NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.62 (s, 1H) , 5.49 (bs, 1H) , 4.69 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.36 (d, J = 13.2 Hz, ÍH) , 4.17 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.10 (dt, J = 13.2, 2.4 Hz, ÍH), 1.82 (s, 3H) . Procedimiento General para la Conversión a Derivados de Citosina Una solución de un compuesto de uracilo 19-24 de la Tabla 1 (1.00 mmoles) en piridina anhidra (10 ml) se trató con anhídrido acético (540 µl, 10.0 mmoles), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 horas. El residuo obtenido después de evaporación de todo el material volátil se diluyó con cloruro de metileno; se lavó con HCl diluido, solución saturada de NaHC03 y salmuera; se secó (MgS04) ; se filtró y evaporó. El residuo que contenía el triacetato se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. Una solución de 1, 2, 4-triazol (760 mg, 11.0 mmoles) y oxicloruro de fósforo (915 µl, 10.0 mmoles) en acetonitrilo (10 ml) se trató con trietilamina (1.25 ml, 9.0 mmoles) y triacetato (1.00 mmoles) en 4 ml de acetonitrilo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 15 horas. Se añadieron trietilamina (1.5 ml) y agua (4.5 ml) adicionales, y la mezcla se agitó por 10 minutos. Después de dilución con cloruro de metileno, la mezcla se lavó con solución saturada de NaHC03 y salmuera, se secó' (MgS04), se filtró, y se evaporó. El residuo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución del residuo anterior en 1,4- dioxano (8 ml) se añadió hidróxido de amonio (28 %, 2 ml) a 0 °C, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 10 horas. Después de remoción de todos los materiales volátiles, el residuo se disolvió en amoníaco metanólico (5 ml) y se agitó a temperatura ambiente por 12 horas. La mezcla de reacción se evaporó, y el residuo se purificó por cromatografía de columna ODS (agua: acetona « 20:1) para dar el derivado de citosina de la Tabla 2, el cual fue cristalizado a partir de éter dietílico/metanol . Tabla 2.Derivados de Citosina El rendimiento y los datos espectroscópicos para los derivados de citosina 25-29 fueron como sigue: (1S,4R,5S)- 4- Amino- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- cislopent- 2- enil)- 1H-pirimidin- 2- ona (25, RX-3117) . 133.8 mg, 52 %; X NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.47 (d, J = 7.6 Hz, ÍH) , 5.92 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 5.35 (bs, 1H) , 4.69 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.26 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, ÍH), 4.11 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 4- Amino- 5- Flúor- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- 1H-pirimidin- 2- ona (26, RX-3117A) . 156.9, 57 %; XH NMR (400 MHz, CD30D) d 7.79 (d, J = 6.4 Hz, 1H) , 5.41 (bs, -1H), 4.68 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.23 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.12 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 4- Amino- 5- Cloro- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2- ona (27, RX-3117B) . 134.2 mg, 46 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.50 (s, 1H) , 5.37 (bs, 1H) , 4.70 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.41 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.25 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.17 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 4- Amino- 5- Bromo- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2- ona (28, RX-3117C) . 164.7 mg, 49 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.62 (s, ÍH) , 5.41 (bs, ÍH) , 4.69 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.40 (d, J = 12.5 Hz, ÍH) , 4.22 (td, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H) , 4.14 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, 1H) . (1S,4R,5S)- 4- Amino- 1- (2- Flúor- 4, 5-dihidroxi- 3- hidroximetil- cislopent- 2- enil) - 5- yodo-ÍH- pirimidin- 2- ona (29, RX-3117D) . 160.9 mg, 42 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.70 (s, 1H) , 5.43 (bs, ÍH) , 4.66 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, ÍH) , 4.34 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.21 (td, J = 5.6, 0.8 Hz, ÍH) , 4.08 (dt, J = 12.8, 2.4 Hz, ÍH) . Procedimiento General para la Desoxigenación A una solución agitada de un derivado de uracilo de la Tabla 1 (0.50 mmoles) en piridina (5 ml) se añadió DMAP (1.00 mmoles) y 1, 3- dicloro- 1,1,3,3-tetraisopropildisiloxano (0.75 mmoles) a temperatura ambiente. Después de 10 horas, se eliminó el solvente, y el residuo se dividió entre cloruro de metileno y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera y luego se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el residuo crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución agitada del residuo crudo en acetonitrilo anhidro (5 ml) se añadió 4- dimetilamino piridina (1.00 mmoles) y clorotioformiato de fenilo (0.60 mmoles) , y luego la mezcla de reacción se dejó calentar para agitar a temperatura arabiente por 5 horas. La mezcla fue dividida entre cloruro de metileno y salmuera, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se filtró. Los materiales volátiles fueron eliminados y el residuo que contenía el tioéter fenílico se usó en la siguiente reacción radical sin purificación adicional. A una solución agitada del residuo que contenía tioéter fenílico en benceno seco se añadió trietilborano (1.00 mmoles, solución 1.0 M en hexano) e hidruro de tributilestaño (1.00 mmoles), y la mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla se evaporó, y el residuo se purificó por cromatografía de columna sobre gel de sílice (cloruro de metileno: etanol « 20:1) para dar el producto desoxigenado. A una solución agitada del producto desoxigenado en tetrahidrofurano (5 ml) se añadió gota agota fluoruro de tetra-n-butilamonio (1.20 mmoles, 1.0 M en tetrahidrofurano) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 horas. Después de la remoción del solvente, el residuo fue purificado por cromatografía instantánea de columna sobre gel de sílice (cloruro de metileno: metanol « 5:1) para dar un derivado de uracilo 2' -desoxigenado de la Tabla 3, el cual fue cristalizado a partir de éter dietílico/metanol. Tabla 3. derivados de üracilo 2 ' -desoxigenados Los rendimientos y los datos espectroscópicos para los derivados de urasilo desoxigenados 30-35 fueron como sigue: (1S,4R)- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3- hidroximetil-ciclopent- 2- enil)- ÍH- pirimidin- 2, 4- diona (30, RX-3216) . 63.0 mg, 52 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.85 (d, J = 8.0 Hz, ÍH) , 5.52 (bs, ÍH) , 4.62 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.39 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.25 (m, 1H) , 2.05-2.18 (m, 2H) . (1S,4R)- 5- Flúor- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- ÍH- pirimidin- 2, 4-diona (31, RX-3216A) . 63.7 mg, 49 %; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.75 (d, J = 6.4 Hz, 1H) , 5.55 (bs, 1H), 4.65 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.34 (d, J = 12.8 Hz), 4.15 (m, ÍH) , 2.04-2.20 (m, 2H) . (1S,4R)- 5- Cloro- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- ÍH- pirimidin- 2 , 4-diona (32, RX-3216B) . 65.0 mg, 47 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.39 (s, ÍH) , 5.35 (bs, ÍH) , 4.69 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.20 ( , ÍH) , 2.05-2.18 (m, 2H) . (1S,4R)- 5- Bromo- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- 1H- pirimidin- 2, 4-diona (33, RX-3216C) . 72.2 mg, 45 %; 1H NMR (400 MHz, CD30D) d 8.57 (s, ÍH) , 5.35 (bs, 1H), 4.69 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.20 (m, ÍH) , 2.08-2.22 (m, 2H) . (1S,4R)- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3- hidroximetil-ciclopent- 2- enil)- 5- yodo- ÍH- pirimidin- 2, 4- diona (34, RX-3216D) . 75.5 mg, 41 %; X NMR (400 MHz, CD30D) d 8.69 (s, ÍH) , 5.39 (bs, 1H) , 4.67 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.16 (m, 1H) , 2.01-2.17 (m, 2H) . (1S,4R)- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3- hidroxxmetil-ciclopent- 2- enil)- 5- metil- ÍH- pirimidin- 2, 4- diona (35, RX-3216E) . 67.9 mg, 53 %; XH NMR (400 MHz, CD30D) d 7.72 (s, 1H) , 5.39 (bs, ÍH) , 4.68 (d, J = 12'.8 Hz, ÍH) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH), 4.15 (m, ÍH), 2.10-2.25 (m, 2H) . Procedimiento General para la Conversión a Derivados de Citosina Una solución de un compuesto de uracilo de la Tabla 3 (0.5 mmoles) en piridina anhidra (5 ml) se trató con anhídrido acético (470 µl, 5.0 mmoles), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 horas. El residuo obtenido después de evaporación de los materiales volátiles se diluyó con cloruro de metileno, se lavó con HCl diluido, solución saturada de NaHC03 y salmuera; se secó (MgS04) ; se filtró y se evaporó. El residuo que contenía triacetato se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Una solución de 1, 2, 4-triazol (760 mg, 11.0 mmoles) y oxicloruro de fósforo (915 µl, 10.0 mmoles) en acetonitrilo (10 ml) se trató con trietilamina (1.25 ml, 9.0 mmoles) y triacetato (1.00 mmoles) en 4 ml de acetonitrilo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 15 horas. Se añadieron trietilamina (1.5 ml) y agua (4.5 ml) adicionales, y la mezcla se agitó por 10 minutos. Después de dilución con cloruro de metileno, la mezcla se lavó con solución saturada de NaHC03 y salmuera, se secó (MgS0 ) , se filtró, y evaporó. El residuo fue usado en la siguiente etapa sin purificación adicional. A una solución del residuo anterior en 1,4-dioxano (8 ml) se añadió hidróxido de amonio (28 %, 2 ml) a 0 °C, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 10 horas. Después de remoción de todos los materiales volátiles, el residuo se disolvió en amoníaco metanólico (5 ml) y se agitó a temperatura ambiente por 12 horas. La mezcla de reacción se evaporó, y el residuo fue purificado por cromatografía de columna ODS (agua: acetona « 20:1) para dar el derivado de citosina 2 ' -desoxigenado de la Tabla 4, el cual fue cristalizado a partir de éter dietílico/metanol .

Tabla 4. Derivados de Citosina 2' -desoxigenados Los rendimientos y datos espectroscópicos para los derivados de citosina 2 ' -desoxigenados 36-40 fueron como sigue: (1S,4R)- 4- Amino- 1- (2- Flúor- 4- hidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil)- ÍH- pirimidin- 2- ona (36, RX-3217) . 63.9 mg, 53 %; X ?MR (400 MHz, CD3OD) d 7.48 (d, J = 8.0 Hz, ÍH) , 5.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.40 (bs, ÍH) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.20 (m, ÍH) , 4.08(d, J = 12.8 Hz, 1H) , 2.04-2.19 (m, ÍH) . (1S,4R)- 4- Amino- 5- flúor- 1- (2- flúor- 4-hidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2- ona (37, RX-3217A) . 53.1 mg, 41 %; X ?MR (400 MHz, CD3OD) d 7.81 (d, J = 6.4 Hz, ÍH) , 5.39 (bs, ÍH) , 4.37 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.25 (m, ÍH) , 4.11 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 2.08-2.21 (m, 1H) . (1S,4R)- 4- Amino- 5- cloro- 1- (2- flúor- 4-hidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2- ona (38, RX-3217B) . 62.0 mg, 45 %; XH NMR (400 MHz, CD3OD) d 8.51 (s, 1H) , 5.39 (bs, 1H), 4.45 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.23 (m, ÍH) , 4.18 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 2.05-2.16 (m, 2H) . (1S,4R)- 4- Amino- 5- bromo- 1- (2- flúor- 4-hidroxi- 3- hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 1H-pirimidin- 2- ona (39, RX-3217C) . X NMR (400 MHz, CD3OD) d 8.61 (s, 1H) , 5.46 (bs, 1H) , 4.41 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.23 (m, ÍH) , 4.16 (d, J = 12.8 Hz, 1H) , 2.08-2.17 (m, 2H) . (1S,4R)- 4- Amino- 1- (2- flúor- 4- hidroxi- 3-hidroximetil- ciclopent- 2- enil) - 5- yodo- 1H-pirimidin- 2- ona (40, RX-3217D) . 64.2 mg, 35 %; X NMR (400 MHz, CD3OD) d 8.63 (s, 1H) , 5.38 (s, ÍH) , 4.35 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 4.19 (m, ÍH) , 4.11 (d, J = 12.8 Hz, ÍH) , 2.11-2.23 (m, 2H) . EJEMPLO 3. Inhibición del Crecimiento Celular de Compuestos Nucleósidos Crecimiento de lineas celulares de cáncer Se obtuvieron líneas celulares de cáncer, para determinar el efecto de compuestos nucleósidos, de las siguientes fuentes: 0VCAR-3 humano (ovario), MCF-7 (seno, dependiente de hormona), MDA-MB-231 (seno), HeLa (cérvix) , PC3 (próstata), LNCap (próstata), HepG2 (hígado), A549 (pulmón), NCI-H226 (pulmón), HT-29 (colon), HCT116 (colon), SK-MEL-28 (melanoma), y PANC-1 (páncreas) de American Type Culture Collection (ATCC) (Manassas, VA) ; U251 (cerebro) , se Riken, (Japón) MKN-45 (estómago) de DSMZ (Alemania) ; UMRC2 (riñon) del United States National Cáncer Institute (Bethesda, MD) . Todas las líneas celulares excepto MDA-MB-231, HCT116, UMRC2 y PANC-1 fueron desarrolladas en medio RPMI1640 (Invitrogen, Carlsbad, CA) suplementado con suero fetal bovino al 10 % ("FBS"), -1 mM de piruviato de sodio, 10 mM de HEPES y 100 U/ml, de penicilina y 100 µg/ml de estreptomicina ("P/S") .

Las células MDA-MB-231, HCT116, UMRC2 y PANC-1 se mantuvieron en medio de Eagles modificado de Dulbecco ("DMEM", Invitrogen) suplementado con FBS al 10 %, P/S, 10 mM de HEPES y 2 mM de L-glutamina. Todas las células fueron incubadas a 37 °C bajo C02 al 5 % humidificado. Ensayo de Inhibición del Crecimiento Celular Puede evaluarse la inhibición del crecimiento de los derivados de nucleósidos contra una variedad de células tumorales humanas. Puede estudiarse la importancia relativa de grupos substituyentes particulares sobre los compuestos. Los derivados de nucleósidos, preparados como se describió anteriormente, se probaron con DMSO como un control. El ensayo de inhibición del crecimiento de RX-3117 contra 16 líneas celulares de tumor humano se realizó usando el método de la Sulforodamina B ("SRB") (Skehan y colaboradores, J. National Cáncer Institute, 82: 1107-1112 (1990)). Resumiendo se sembraron células tumorales que crecieron exponencialmente en una placa de 96 pocilios a una densidad de 2 - 3 x 103 células/pocilio y se trataron con los compuestos nucleósidos al día siguiente. Se usaron pocilios por triplicado para cada tratamiento. Las células fueron incubadas con varios compuestos por 96 horas a 37 °C en una atmósfera de C02 al 5 % humidificada. Después de 96 horas de incubación las células fueron fijadas con ácido tricloroacético ("TCA") , se incubaron por 1 hora a 4 °C, y se lavaron 3 veces con agua corriente. Subsecuentemente, las células fueron teñidas con sulforodamina B al 0.4 % en ácido acético por 30 minutos, se lavaron 4 veces con ácido acético al 1 % . , y de nuevo se secó con aire. Después de 5 minutos de agitación en 10 mM de Tris, la absorbancia de cada pocilio fue medida a 530 nm usando el lector de laboratorio BenchMark Plus Microplates (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) . Para traducir los valores de OD530 en el número de células vivas en cada pocilio, los valores de OD530 fueron comparados con los de OD530 estándar versus OD530 - versus - curvas del número de células generada por cada línea celular. El por ciento de supervivencia se calculó usando la Fórmula : % de supervivencia = número de células vivas [Prueba] /número de células vivas [control] x 100. Los valores de IC5o se calcularon por análisis de regresión no lineal. La Tabla 5 resume la inhibición del crecimiento celular (IC5o, µM) determinado para RX-3117. Tabla 5. Inhibición del crecimiento celular (IC50, µM para RX-3117 contra lineas celulares de cáncer humano Como se muestra en la Tabla 5, derivados de nucleósidos de la invención son activos contra un amplio intervalo de líneas celulares de tumor. Ejemplo 4. Estudio de Xenoinjerto Ex vivo A fin de observar la inhibición del crecimiento de tumor en un modelo animal, un estudio de xenoinjerto ex vivo de ratones desnudos se condujo utilizando RX-3117. Líneas celulares de cáncer humano adecuadas son aquellas que han sido probadas ya para inhibición de crecimiento celular canceroso, y particularmente se prefirieron HCT116 de carcinoma de colon. Se evaluó la eficiencia antitumor de RX-3117 contra xenoinjertos de tumor inyectados subcutáneamente en ratones desnudos y se midió el volumen del tumor después del tratamiento de RX-3117.

Se inyectó subcutáneamente una suspensión de células HT116 (2 x 106 células en 0.1 ml de RPMl) en el flanco derecho de ratones atímicos machos de seis semanas de edad (BALB/c nu/nu) en el día cero. Un número suficiente de ratones fueron inyectados con la suspensión celular de HCT116 de modo que los tumores en un intervalo de volumen tan estrecho como fue posible fueron seleccionados para el ensayo en el día del inicio del tratamiento. Animales con tumores en el intervalo de tamaño apropiado fueron asignados a varios grupos de tratamiento. Se disolvió RX-3117 en DMSO al 10 % en PBS y el solvente solo sirvió como control. Todos los medicamentos del estudio (control, RX-3117: 2 mg/kg/día, RX3117: 10 mg/kg/día) fueron dados por medio de inyecciones intraperitoneales tres veces por semana comenzando en el día 5 y terminando en el día 37. Para cuantificar el crecimiento de tumor, se midieron tres diámetros perpendiculares de los tumores con calibradores cada 3-5 días, y el peso corporal de los ratones fue monitoreado para toxicidad. El volumen de tumor se calculó usando la fórmula : Volumen de tumor (mm3) = (ancho) x (largo) x altura x p/6. El volumen de tumor (media ± SEM) en cada grupo de animales se presenta en la Figura 1,1a cual muestra una medición de volumen de tumor como un indicador de la eficiencia de RX-3117 contra xenoinjertos de carcinoma de colon humano HCT116. El tratamiento con RX-3117 fue bien tolerado sin muertes y se observaron fluctuaciones de peso corporal de no más de 1 g. Después del día 37, el volumen de tumor fue reducido significativamente en los ratones tratados con RX-3117 a ' 2 y 10 mg/kg de tratamiento comparado con los controles. Así, como se demuestra en la Figura 1, RX-3117 causa la inhibición del crecimiento de tumor en ratones desnudos inyectados-sc con células de carcinoma de colon humano, HCT116. Las modalidades ilustradas y discutidas en esta especificación se previeron solamente para exponer a los expertos en la materia la mejor manera conocida para los inventores hagan uso de la invención. Nada en esta especificación sería considerado como limitante del alcance de la presente invención. Todos los ejemplos presentados son representativos y no limitantes. Las modalidades de la invención descritas anteriormente pueden ser modificadas o variadas, sin alejarse de la invención, como apreciará un experto en la materia a la luz de las enseñanzas anteriores. Por consiguiente se comprenderá que en el alcance de las reivindicaciones y sus equivalentes, la invención puede ser practicada de otra manera que como se describió específicamente.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un método para tratar un trastorno hiperproliferativo caracterizado porque comprende administrar una composición que comprende un compuesto de Fórmula: en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, I o CH3. o un compuesto de la Fórmula en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, o I, o una sal de los mismos aceptable farmacéuticamente, a un sujeto en necesidad de dicho tratamiento, y tratar así el trastorno hiperproliferativo .

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, I, o CH3, o en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br o I .

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la Fórmula:

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto tiene la Fórmula:

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es:

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicho trastorno hiperproliferativo comprende un tumor.

7. El método de- conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque dicha composición comprende adicionalmente un portador o diluyente aceptable farmacéuticamente .

8. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque, dicho tumor es seleccionado de tumores de ovario, tumores del seno, tumores cervicales, tumores de la próstata, tumores del hígado, tumores del pulmón, tumores del riñon, tumores de colon, tumores pancreáticos, tumores de cerebro, tumores de estómago y melanoma .

9. Un compuesto de la Fórmula: en donde : A es Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, I o CH3; con la condición de que cuando A es , X no es CH3

10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque tiene la Fórmula en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, l o CH3.

11. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque tiene la Fórmula: en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br o I .

12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 9 caracterizado porque es:

13. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto de conformidad con la reivindicación 9, o una sal del mismo aceptable farmacéuticamente, y un portador o diluyente aceptable farmacéuticamente .

14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque tiene una IC50 de no más de 10 µM con respecto a al menos una línea celular para un tumor seleccionado de tumores de ovario, tumores del seno, tumores cervicales, tumores de la próstata, tumores del hígado, tumores del pulmón, tumores del riñon, tumores del colon, tumores pancreáticos, tumores de cerebro, tumores de estómago y melanoma.

15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque dicha línea celular es seleccionada de OVCAR-3 humano para tumores de ovario, MCF-7 o MDA-MB-231 para tumores de seno, HeLa para tumores cervicales, PC3 o LNCap para tumores de la próstata, HepG2 para tumores del hígado, A549 o NCI-H226 para tumores de pulmón, UMRC2 para tumores de riñon, HT-29 o HCT116 para tumores de colon, PANC-1 para tumores pancreáticos, U251 para tumores de cerebro, MKN-45 para tumores de estómago y SK-MEL-28 para melanoma.

16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque tiene una IC50 de no más de 1.0 µM.

17. El compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque tiene una IC50 de no más de 0.5 µM.

18. Un método de sintetizar un compuesto de Fórmula : en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br, l o CH3 O un compuesto de la Fórmula en donde Y = H u OH y X = H, F, Cl, Br o I, caracterizado porque comprende al menos una etapa seleccionada del grupo: en donde B es seleccionado de ter- butildimetil sililo, ter- butildifenil sililo, bencilo y tritilo.

19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque B es tritilo.