MXPA06010950A - Formulaciones en nano-particulas de compuestos de platino. - Google Patents

Abstract

Se describen Nanoparticulas Lipidicas Solidas de compuestos de compuestos de platino, particularmente de complejos de platino antitumor. Las nonoparticulas de la invencion se obtienen por medio de un proceso que comprende a) preparar una primera microemulsion por mezcla de un lipido fundido, un surfactante, y opcionalmente un co-surfactante y la solucion acuosa de compuesto de platino; b) preparar una solucion por mezcla de un surfactante y opcionalmente de un co-surfactante en agua, calentamiento hasta solucion completa, preferiblemente a la misma temperatura de fusion del lipido usada en a) y adicion de un co-surfactante; c)dispersar la microemulsion obtenida en a) en la solucion obtenida en b) obteniendo una microemulsion multiple c); d)dispersar la microemulsion obtenida en c) en medio acuoso a una temperatura que varia desde 0.5 degree C a 4 degree C obteniendo una dispersion de microesferas lipidicas solidas; e) lavar con medio acuoso a traves de ultrafiltracion las microesferas lipidicas obtenidas en d) y liofilizar, opcionalmente en la presencia de un agente para carga y de un agente crioprotector.

Description

FORMULACIONES EN NANO-PART CUIAS DE COMPUESTOS DE PLATINO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención concierne a nanopartículas lipídicas sólidas de compuestos de platino de interés terapéutico.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las nanopartículas o micropartículas lipídicas sólidas (SLNs o SLMs) o nanósferas son partículas de lípidos que tienen un diámetro promedio más pequeño que un micrón y usualmente en el intervalo de algunos cientos a unos cuantos nanómetros, los cuales han sido estudiados a fondo como portadores para liberación controlada de fármacos. Las SLNs pueden ser preparadas por numerosos métodos a partir de lípidos sólidos, incluyendo, por ejemplo, homogeneización a alta presión (EP 605497) y vía microemulsiones (US 5,250,236). Se reportan revisiones de la preparación así como también de las aplicaciones de SLNs por ejemplo en Eur. J. Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 50 (2000), 161-177, y en Pharm. Technol. Eur. 13 (2001) 32-42. Composiciones farmacéuticas en forma de SLMs adecuadas para administración parenteral de fármacos se describen de manera particular en EP 988031. Dichas formulaciones se caracterizan por compuestos específicos tales como ácidos grasos, estearato de PEG, dipalmitoilfosfatidiletanolamina-PEG y los similares, los cuales estabilizan dichas micropartículas evitando fagocitosis . Micropartículas particularmente adecuadas para liberación de fármacos a través de los tejidos mucósicos y la barrera hematocerebral se describen en WO 99/27918 y US 6,419,949. Numerosos medicamentos incluyendo antibióticos, hormonas, y agentes antitumorales de diferentes clases son citados específicamente. Los compuestos de platino están entre los fármacos anticáncer más efectivos usados para tratar tumores sólidos. Después de administración intravenosa, especies de platino tienden a enlazar irreversiblemente a proteínas plasmáticas (enlace covalente) en una cinética dependiente del tiempo, con más de 90 % de fármaco enlazado en unas cuantas horas a partir de la administración. Además, para algunos nuevos complejos de platino, la fracción de fármaco que está libre en agua plasmática y que es enlazada reversiblemente a proteínas plasmáticas parecen sufrir una degradación rápida y progresiva para formar especies desplatinadas inactivas. Estas especies son probablemente para ser generadas a causa de la inestabilidad química de compuestos de platino en plasma, posiblemente debida a la interacción con moléculas endógenas nucleofílicas que contienen tioles (por ejemplo, residuos cisteína, glutatión) . El alto grado de enlace a protéinas plasmáticas en humanos favorece a dicha interacción. Tanto el alto enlace irreversible a proteínas plasmáticas como la rápida degradación en plasma humano pueden obstaculizar la eficiencia de los compuestos de platino en ensayos clínicos.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Actualmente se encontró que compuestos de platino que tienen actividad anti-tumoral pueden ser formulados ventajosamente en SLNs o SLMs, mejorando sorprendentemente el índice terapéutico de los mismos. De conformidad con la presente invención, los compuestos de platino preferidos incluyen complejos de platino en los cuales el átomo de platino metálico es secuestrado por medio de ligandos adecuados, particularmente ligandos aniónicos y ligandos que contienen grupos amino.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Compuestos preferidos se describen en US 6,022,892, US 6,060,616, US 5,744,497, US 6,011,166, y US 6,596,889.

Compuestos preferidos son particularmente: Sal tetranitrato de trans-{bis[trans (diamina) (cloro) platino (II) (µ-1, 6-hexandiamina) ]}diaminaplatino de Fórmula I, descrita en el Ejemplo 6 de US 5,744,497: O" =O Fórmula I Sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II) } µ- (1, 16-diamino- 7, 10-diazahexadecano-Nl,N16) . 2HN03 de Fórmula II, descrita en el Ejemplo 17, página 15, línea 25-31 de US 6,022,892: Fórmula II Sal dinitrato de bis{trans (diamina) (cloro) platino (II) }µ- (1, 16-diamino- 6,11- diazahexadecano-Nl, N16) . 2HN03 de Fórmula III, descrita en el Ejemplo 17, página 15, líneas 32-38 de US 6,022,892 O Fórmula III Sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II) }- µ- (1, 12-diamino-4, 9- diazadodecano-N1, 12) . 2HN03 de Fórmula IV, descrita en el ejemplo 2 de US 6,596,889: Fórmula IV Sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II) }- µ- (1, 8-diamino- 4-azaoctan-N^N8) . HN03 de Fórmula V, descrita en el Ejemplo 1 de US 6,596,889.

Fórmula V Formulaciones en nanopartículas de lípidos sólidos (SLN) de compuestos de platino pueden ser obtenidos usando lípidos sólidos, surfactantes y cosurfactantes como excipientes, usando cualquiera de los métodos descritos en los documentos de patente mencionados anteriormente, los cuales se incorporan a la presente como referencia. Las nanopartículas de compuestos de platino se obtienen a partir de microemulsiones calientes usando la tecnología descrita (US 5,250,236). Las SLNs son cargadas con compuestos de platino hidrofóbicos o hidrofílicos que pueden ser disueltos en la fase interna de las microemulsiones . Más particularmente, las nanopartículas de complejos de platino de la invención son obtenidas por medio de un proceso que comprende: a) preparar una primera microemulsión por mezcla de un lípido fundido, un surfactante, y opcionalmente un co-surfactante y la solución acuosa de compuesto de platino. b) preparar una solución por mezcla de un surfactante y opcionalmente de un co-surfactante en agua, calentamiento hasta solución completa, preferiblemente a la misma temperatura de fusión del lípido usada en a) y adición de un co-surfactante; c) dispersar la microemulsión obtenida en a) en la solución obtenida en b) obteniendo una microemulsión múltiple c) ; d) dispersar la microemulsión obtenida en c) en medio acuoso a una temperatura que varía desde 0.5 °C a 4 °C obteniendo una dispersión de microesferas lipídicas sólidas; e) lavar con medio acuoso a través de ultrafiltración las microesferas lipídicas obtenidas en d) y liofilizar, opcionalmente en la presencia de un agente para carga y de un agente crioprotector. Los agentes de carga convencionales tales como dextrano y los similares pueden ser usados ventajosamente. Los componentes lipidíeos empleados de conformidad con la presente invención son seleccionados en el grupo que comprende: triglicéridos, tales como por ejemplo trilaurina, tripalmitina y triestearina, ácidos grasos tales como ácido láurico-, mirístico-, palmítico y esteárico; alcoholes tales como alcohol miristílico-, cetílico-, estearílico.

Los surfactantes son seleccionados del grupo que comprende; colato de sodio, desoxicolato de sodio, glicolato de sodio, taurocolato de sodio, taurodesoxicolato de sodio, bis (2-etilhexil) sulfosuccinato de sodio, lecitinas y fosfolípidos, Esteres de cidos Grasos de Polioxietilen Sorbitan (por ejemplo, Tween 20, Tween 40, Tween 80) , Esteres de Sorbitan (Span 20, Span 40, Span 60, Span 80) ceramida, shingomielina, galactocerebrosidas, copolímero en bloque no iónico polioxipropilen-polietilen glicol o un éster graso de sacarosa. Los co-surfactantes son seleccionados del grupo que comprende: alcoholes o glicoles de bajo peso molecular, tales como por ejemplo isopropanol, butanol, hexanol, hexanodiol, propilen glicol, ácidos grasos de bajo peso molecular, tales como por ejemplo, ácido butírico y ácido hexanodioico, esteres de ácido fosfórico y alcohol bencílico. Como substancia lipídica se prefiere el ácido esteárico. Los surfactantes preferidos incluyen fosfatidil colina de soya, taurocolato de sodio y mezclas de los mismos . Los co-surfactantes preferidos comprenden isopropanol. En la preparación de las microesferas de conformidad con la presente invención las varias substancias son empleadas en las proporciones siguientes: los componentes lipidíeos, que pueden contener fármacos, entre 4 y 25 %, preferiblemente 4 y 12 % en peso del total; agua entre 40 y 70 %, preferiblemente 55-65 % en peso del total; surfactantes entre 8 y 30 %, preferiblemente entre 12-22 % en peso del total; co-surfactantes 0-15 %, preferiblemente 6-12 % en peso del total. El volumen de agua para la dispersión de la microemulsión caliente es un 5 a 50 y preferiblemente 5 a 20 volúmenes de agua por volumen de microemulsión. Las SLN de compuestos de platino son de forma esférica, con diámetro promedio de entre 70 y 200 nm, y son adecuadas para administración intravenosa y oral. Las SLN de compuestos de platino son absorbidas a través de la linfa cuando se administra por la ruta oral. Cuando se administran intravenosamente, SLN son capaces de alterar significativamente las farmacocinéticas de los compuestos de platino observadas después de administración de formulaciones en solución. Además, SLN puede entrar en células tumorales en unos cuantos minutos y son capaces de vencer barreras fisiológicas como se describe en US 6,238,694, US 6,419,949. Adicionalmente, las nanopartículas pueden ser elaboradas para obtener SLN furtivas, capaces de evitar el reconocimiento del sistema endotelial-reticular, como se describe en US 6,419,949. El uso de SLN de compuestos de platino en terapia anticáncer de conformidad con la invención proporciona las siguientes ventajas: 1.Mejoramiento de la biodisponibilidad oral de compuestos de platino absorbidos pobremente o de compuestos inestables en el lumen intestinal: 2. Reducción de interacciones indeseable entre el compuesto de platino y la mucosa intestinal, estomacal después de administración oral, minimizando así la toxicidad local; 3.Maximización de la biodisponibilidad oral debida a absorción de nanopartículas vía el sistema linfático, con cingún efecto del primer paso hepático; 4. Posibilidad de administrar compuestos de platino pobremente solubles en agua por ruta parenteral; 5. Reducción del enlace proteína - compuesto de platino, e incremento de la velocidad y prolongación de la distribución del fármaco; 6. Protección del compuesto de platino de moléculas endógenas en la sangre que pueden degradar/inactivar el compuesto antes de llegar al tumor objetivo; 7. Cambio del perfil farmacocinético de los compuestos de platino dados intravenosamente por descenso lento de la liberación del fármaco desde la formulación y disminuir así las concentraciones pico e incrementar el tiempo de residencia en la circulación generalizada; 8.Mejoramiento del índice terapéutico por selección en las células tumorales (permeabilidad mejorada y efectos de retención) , y liberación gradual de compuestos de potasio en el interior de la célula con mejor eficiencia anti-cáncer; 9.Modificación del patrón de distribución del fármaco, incluyendo el pasaje de la barreara hematocerebral . Las SLN de compuestos de platino de la invención pueden ser administrados a pacientes afectados por cáncer usualmente responsables en compuestos de platino, formulados adecuadamente en formulaciones farmacéuticas para administración oral e intravenosa. Guías para los regímenes de dosificación adecuados pueden ser encontradas en las Patentes US mencionadas anteriormente que describen compuestos de platino. EJEMPLOS EJEMPLO 1 SLN de la sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II) }µ— (1, 16- diamino- 7, 10- diazahexadecano-N1, N16. 2 HN03.

Al dinitrato de bis{Trans (diamina) (cloro) platino (I?)-µ-(l, 16- diamino 7, 10- diazahexadecano-N^N16) . 2HN03 de Fórmula (II) de Fórmula (II) descrita en el Ejemplo 17, página 15, línea 25-31 de US 6,022,892) es un complejo de bisplatino potente, descongelado con actividad antitumor prominente en una variedad de líneas celulares de tumor. Las nanopartículas de este compuesto fueron preparadas con el procedimiento anteriormente descrito (US 5,250,236) usando lecitina, ácido esteárico, taurocolato, ácido propiónico, y una solución acuosa (NaCl 0.01 M, HCl 0.01 M) del compuesto de bis (platino) . La microemulsión caliente fue dispersa en agua fría (1 - 4 °C) . La dispersión de nanopartículas fueron lavadas repetidamente con agua destilada. Los análisis por HPLC e ICP del SLN- complejo de bisplatino demostraron que más de 90 % del complejo de bisplatino cargado fue incorporado en las nanopartículas. SLN mediana de nano partículas. El diámetro medio de ISP fue de 120 nm como se mide por Malvern Zetasizer se midió por 3,000 Malvern/Y Zetasizer 3000 HS . El compuesto de platino es estable en plasma humano cuando se incorpora en nanopartículas de dichos sólidos y no interactúan con proteínas plasmáticas, SLN del compuesto de bisplatino es bien tolerada cuando se administra a ratones CDl y muestra un índice terapéutico mejorado cuando se compara con soluciones acuosas del mismo compuesto. EJEMPLO 2 Se fundieron 0.4 g de ácido esteárico a aproximadamente 71 °C y se añadieron 0.32 g de fosfatidilcolina de soya obteniendo una solución clara caliente. Luego se añadieron 260 µl de ácido propiónico y 200 µl de compuesto de Fórmula II en solución acuosa 0.01 N de HCl (9 mg/ml) obteniendo una microemulsión clara (micro 1) . Separadamente se preparó una solución de fosfatidilcolina de soya (0.56 g) , taurocolato de sodio (0.67 g) y ácido propiónico (560 µl) en 4 ml de agua y se llevó a 71 °C (solución 2) . Micro 1 se vertió en la solución 2 obteniendo una microemulsión clara a 71 °C, la cual es entonces dispersa bajo agitación en 8' volúmenes de agua por volumen de microemulsión a 1 °C obteniendo una dispersión de nanoesferas lipídicas de 46 ml de volumen. Finalmente, la dispersión se lavó 3 veces por filtración de flujo tangencial usando un corte de 100 kDa de VIVAFLOW 50, añadiendo cada vez 46 ml de agua. Las nanoesferas tuvieron un diámetro promedio de 141 nm que se midieron por medio de Malvern Zetasizer 3000HS y el índice de polidispersión fue de 0.36. EJEMPLO 3 Se fundieron 0.36 g de ácido esteárico, 0.36 g de ácido palmítico y 0.28 g de fosfatidilcolina de soya a aproximadamente 52 °C. Luego se añadieron 400 µl de alcohol isopropílico y 0.12 g de taurocolato de sodio. Luego se añadieron 400 µl de una solución de compuesto de Fórmula II en 0.05 mM de solución acuosa de H2S0 (9 mg/ml) obteniendo una microemulsión clara (micro 1) . Separadamente se preparó una solución de fosfatidilcolina de soya (0.35 g) , taurocolato de sodio (1.2 g) , alcohol isopropílico (800 µl) y 8 ml de solución acuosa 0.05 mM de H2S04 y se llevó a 52 °C (solución 2) . Se vertió entonces Micro 1 en la solución 2 obteniendo una microemulsión clara a 52 °C, la cual fue entonces dispersa bajo agitación en 10 volúmenes de agua por volumen de microemulsión a 1 °C obteniendo una dispersión de nanoesferas lipídicas de 96 ml de volumen. Finalmente, la dispersión fue lavada 2 veces por filtración de flujo tangencial. Usando el corte de 100 kDa de Cápsula de PALL MINIMATE TFF, cada vez que se añaden 96 ml de solución acuosa de 0.032 mM de HCl. Después de añadir dextrano (3 g para 100 ml de dispersión) la dispersión se liofilizó. Las nanoesferas obtenidas después del proceso de liofilización tuvieron un diámetro promedio de 324 nm, que se midió con Malvern Zetasizer 3000 HSA, y el índice de polidispersión fue de 0.5. EJEMPLO 4 Se fundieron 0.40 g de ácido esteárico y 0.28 g de fosfatidilcolina de soya a aproximadamente 72 °C. Luego se añadieron 200 µl de alcohol isopropílico y 0.06 g de taurocolato de sodio. Se añadieron entonces 200 µl de Compuesto de Fórmula II en solución acuosa de 10 mM de HN03 (9 mg/ml) obteniendo una microemulsión clara (Micro 1) • Separadamente se preparó una solución de fosfatidilcolina de soya (0.35 g) , taurocolato de sodio (0.67 g) y alcohol isopropílico (400 µl) en 4 ml de solución acuosa 10 M de ácido HN03 y se llevó a 72 °C (Solución 2) . Se vertió entonces Micro 1 en la Solución 2 obteniendo una microemulsión clara a 72 °C, la cual fue entonces dispersa bajo agitación en 6 volúmenes de agua por volumen de microemulsión a 1 °C, obteniendo una dispersión de nanoesferas lipídicas, de 32 ml de volumen. Finalmente, la dispersión fue lavada 2 veces por filtración de flujo tangencial usando el corte de 100 kDa de VIVAFLOW50, añadiendo cada vez 32 ml de HN03 (solución acuosa 1 M) . Las nanoesferas tuvieron un diámetro promedio de 140 nm que se midió con Malvern Zetasizer 3000HSA y el índice de polidispersión fue de 0.26.

EJEMPLO 5 Se fundieron 0.40 g de ácido esteárico y 0.32 g de fosfatidilcolina de soya a aproximadamente 70 °C. Luego se añadieron 280 µl de ácido octanoico y 0.04 g de taurocolato de sodio. Luego se añadieron 200 µl de Compuesto II en solución acuosa de HCl 0.01 N (9 mg/ml) obteniendo así una microemulsión clara (Micro 1) .

Separadamente se preparó una solución de fosfatidilcolina de soya (0.32 g) . taurocolato de sodio (0.66 g) , ácido octanoico (40 µl) y alcohol isopropílico (400 µl) y 4 ml e agua, y se llevaron a 70 °C (Solución 2) Se vertió Micro 1 en solución 2 obteniendo una micromulsión a 70 °C , la cual fue entonces dispersa bajo agitación en 8 volúmenes de agua por volumen de microemulsión a 0 °C obteniendo una dispersión de nanoesferas de 44 ml de volumen .

Al final, la dispersión fue lavada 2 veces por ultrafiltración con un corte de 100 kDa, añadir cada vez 44 ml de agua. Las nanoesferas tuvieron un diámetro promedio de 242 nm que se midió con Malvern Zetasizer 3000HSA y el índice de polidispersión fue de 0.20.

Claims (6)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1.Nanopartículas lipídicas sólidas de compuestos de platino.

2. Las nanopartículas lipídicas de sólido de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque los compuestos de platino son complejos de platino.

3.Nanopartículas lipídicas sólidas de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el complejo de platino es seleccionado de: sal tetranitrato de trans{ bis[trans (diamina) (cloro) platino (II) (µ- 1, 6-hexadiamina)]} diamina platino de Fórmula I O \ . =O Fórmula I Sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II)} µ- (1, 16-diamino- 7, 10- diazahexadecano-N1,N16) . 2HN03 de Fórmula II, Fórmula II Sal dinitrato de bis{trans (diamina) (cloro) platino (II)}µ-(l,16-diamino- 6,11- diazahexadecano-Nl, N16) . 2HN03 de Fórmula III, Fórmula III Sal dinitrato de bis {trans (diamina) (cloro) platino (II) }- µ- (1, 12-diamino-4, . 9- diazadodecano-N1, N12) . 2HN03 de Fórmula IV, Fórmula IV Sal dinitrato de bis {trans (diamina) ( cloro) platino ( II ) }- ( 1 , 8-diamino- 4-azaoctan-N ,? , N°) . HN03 de Fórmula V, Fórmula V

4. Un proceso para la preparación de Nanopartículas Lipídicas Sólidas, de conformidad con las reivindicaciones 1-3, caracterizado porque comprende: a) preparar una primera microemulsión por mezcla de un lípido fundido, un surfactante, y opcionalmente un co-surfactante y la solución acuosa de compuesto de platino. b) preparar una solución por mezcla de un surfactante y opcionalmente de un co-surfactante en agua, calentamiento hasta solución completa, preferiblemente a la misma temperatura de fusión del lípido usada en a) y adición de un co-surfactante; c) dispersar la microemulsión obtenida en a) en la solución obtenida en b) obteniendo una microemulsión múltiple c) ; d) dispersar la microemulsión obtenida en c) en medio acuoso a una temperatura que varía desde 0.5 °C a 4 °C obteniendo una dispersión de microesferas lipídicas sólidas; e) lavar con medio acuoso a través de ultrafiltración las microesferas lipídicas obtenidas en d) y liofilizar, opcionalmente en la presencia de un agente para carga y de un agente crioprotector.

5. Composiciones farmacéuticas caracterizadas porque comprende las nanopartículas lipídica sólidas de conformidad con las reivindicaciones 1-3.

6. Un método de tratar a pacientes afectados por cáncer sensibles a complejos de platino, caracterizado porque comprende administrar a dichos pacientes una cantidad efectiva terapéuticamente de las nanopartículas lipídicas sólidas de conformidad con las reivindicaciones 1-3.