DERIVADO DE ACIDOS INDOLALCANOICOS SUBSTITUIDOS Y FORMULACIONES QUE LO CONTIENEN PARA USO EN TRATAMIENTO DE COMPLICACIONES DIABETICAS
Campo de la Invención Esta invención se relaciona compuestos y formulaciones para el tratamiento de complicaciones diabéticas así como también procesos para preparar las composiciones y métodos de tratamiento que emplean tales formulaciones. Más específicamente, la invención se relaciona a formas específicas de ácidos indolacéticos . Antecedentes de la invención El uso de inhibidores de aldosa reductasa (ARI por sus siglas en inglés) para el tratamiento de complicaciones diabéticas es bien conocido. Las complicaciones se originan de niveles elevados de glucosa en tej idos tales como el nervio, riñon, retina y lentes que entran a la trayectoria de poliol y se convierte a sorbitol por medio de aldosa reductasa. Ya que el sorbitol no cruza fácilmente las membranas celulares, se acumula dentro de ciertas células lo cual resulta en cambios en la presión osmótica, alteraciones en el estado redox de los nucleótidos piridina (es decir, relación incrementada de NADH/NAD+) y niveles intracelulares agotados de mioinositol. Estos cambios bioquímicos, los cuales han sido enlazados a complicaciones diabéticas, pueden REF: 161674
ser controlados por inhibidores de aldosa reductasa. El uso de inhibidores de aldosa reductasa para el tratamiento de complicaciones diabéticas ha sido revisado ampliamente, ver: a) Textobook of Diabetes, 2nd ed . ; Pickup, J. C. and Williams, G. (Eds.); Blackwell Science, Boston, MA 1997; (b) Aotsuka, T.; Abe, N . ; Fukushima, K. ; Ashizawa, N. and Yoshida, M . , Bioorg. & Med. Chem. Letters, 1997, 7, 1677 ; y (c) T.; Nagaki, Y.;M Ishii, A.; Konishi, Y. ; Yago, H; Seishi, S . ; Okukado, N. ; Okamoto, K. , J. Med. Chem., 1997, 40, 684. Se han descrito previamente los inhibidores de aldosa reductasa en (a) Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,700,819; (b) Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 4,868,301; (c) Patente de los Estados Unidos de Norteamérica NO. 5,330,997; (d) Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,236,945; y Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,214,991. Aunque se han desarrollado ampliamente muchos inhibidores de aldosa reductasa, ninguno ha demostrado eficacia eficiente en pruebas clínicas humanas sin efectos laterales indeseables significativos. De esta forma ningún inhibidor de aldosa reductasa está actualmente disponible como agente terapéutico aprobado en los Estados Unidos de Norteamérica; y consecuentemente, todavía hay una necesidad significativa para nuevos medicamentos, eficacez y seguros para el
tratamiento de complicaciones diabéticas. Sumario de la Invención Esta invención proporciona formas de cristales de ácido ¡3-[(4,5,7-trifluoro-l, 3-benzot iazol-2-il ) metii]-lH-mdol-l-il}acético y formulaciones farmacéuticas que contienen este compuesto y/o sus hidratos. La invención también proporciona métodos para tratar complicaciones ciaoéticas usando el compuesto, y/o sus hidratos, y/o sus sales, para interactuar con la aldosa reductasa. El compuesto ácido { 3-[ ( 4 , 5 , 7 -triflucro-1 , 3-benzotiazol-2-il ) metii]-lH-indol-l-il}acético tiene la siguiente estructura:
El ácido { 3-[ ( 4 , 5 , 7-trifluorc-1 , 3-benzotiazoi-2-il ) metil]-lH-indol-l-il}acético y/o su hidrato (referidos posteriormente como compuestos de la fórmula I) inhiben la aldcsa reductasa. Ya que la aldosa reductasa es critica para la producción de altos niveles de sorbitol en individuos con diabetes, los inhibidores de aldosa reductasa son útiles en prevenir y/o tratar varias complicaciones asociadas con la diabetes. Los compuestos y composiciones de la invención son por lo tanto efectivos para el tratamiento de complicaciones
como un resultado de su capacidad para inhibir la aldosa reductasa . De esta forma, en otro aspecto, la invención proporciona métodos para tratar y/o prevenir las complicaciones crónicas asociadas con la diabetes mellitus, incluyendo, por ejemplo, cataratas diabéticas, retinopatia, nefropatía y neuropatía. En un aspecto relacionado, la invención proporciona métodos para reducir el scrbitol en tejidos, específicamente donde el tejido es nervio ciático, lentes, retina, corteza del riñon o médula del riñon, preferentemente tales tejidos en un paciente diabético. Similarmente , la invención proporciona métodos para reducir los niveles de fructuosa en tejidos. Además, la invención proporciona métodos para incrementar el míoinositol en tejidos'. La invención también comprende métodos para inhibir la pérdida inducida por poliol de velocidad de conducción nerviosa en el nervio ciático, métodos para revertir la formación de cataratas, y métodos para prevenir la formación de cataratas. Cada uno de estos métodos es preferentemente dirigido a pacientes diabéticos, más preferentemente pacientes humanos que sufren de diabetes mellitus . En todavía otro aspecto, la invención proporciona composiciones farmacéuticas que contienen hidratos de ácido
! 3 -G (4 , 5 , 7-trifluoro- 1 , 3 -benzot iazol -2 - il ) metil]- 1?- indol - 1 -iljacético y por lo menos un portador aceptable farmacéuticamente, solvente, excipiente o adyuvante. En aún otro aspecto, la invención proporciona métodos para hacer compuestos de la fórmula I y en particular, un método para hacer el monohidrato. Breve descripción de las figuras La Figura 1 es un diagrama de flujo que muestra el proceso para fabricar las tabletas y cápsulas de la invención . Descripción detallada de la Invención Como se indica anteriormente, la invención proporciona un ácido indol alcanoico substituido y/o sus hidratos; estos compuestos son útiles para tratar y/o prevenir complicaciones asociadas con o que se originan de niveles elevados de glucosa en individuos, incluyendo humanos y animales de compañía tales como perros, gatos y caballos, preferentemente humanos, que sufren de diabetes mellitus. Los compuestos y composiciones de la invención I pueden ser administrados oralmente, tópicamente, parentalmente , por inhalación o aspersión o rectalmente en formulaciones de unidad de dosis que contienen portadores, adyuvantes y vehículos aceptables farmacéuticamente no tóxicos, convencionales. Preferentemente, las composiciones farmacéuticas que contienen compuestos y/o hidratos de la
fórmula I pueden estar en una forma adecuada para uso oral, por ejemplo, como tabletas, pildoras, trocizcos, pastillas, suspensiones acuosas o aceitosas, polvos dispersables o gránulos, emulsión, cápsulas duras o suaves, o jarabes o elixires. Una ruta preferida de administración es administración oral, más preferentemente administración oral de una composición que es una tableta o cápsula. En estas composiciones, un compuesto o hidrato de la Fórmula I puede estar presente en asociación con uno o más portadores y/o diluyentes y/o adyuvantes aceptables farmacéuticamente no tóxicos y si se desea otros ingredientes activos. Las composiciones propuestas para uso oral pueden ser preparadas de acuerdo a cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consiste de agentes edulcorantes, agentes saborizantes , agentes colorantes y agentes conservadores con el f n de proporcionar preparaciones elegantes y agradables farmacéuticamente. Las tabletas contienen el ingrediente activo en mezcla con excipientes aceptables farmacéuticamente no tóxicos, los cuales son adecuados para la fabricación de tabletas. Estos excipientes pueden ser por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y
desintegrantes, por ejemplo, almidón de maíz, o ácido alglnico; agentes de enlace, por ejemplo almidón, gelatina o acacia, y agentes lubricantes, por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Las tabletas pueden ser no recubiertas o pueden ser recubiertas por técnicas conocidas para retrasar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y por lo mismo proporcionar una acción sostenida sobre un periodo mayor. Por ejemplo, un material de retraso de tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo pueden ser empleados. Las formulaciones para uso oral pueden también ser presentadas como cápsulas de gelatina dura en donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o kaolín, o como cápsulas de gelatina suaves, en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio aceitoso, por ejemplo aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de olivo. Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Tales excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa , hidroxipropilmetilcelulosa, algmato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma acacia; agentes de dispersión o de humectación pueden ser un fosfátido que se encuentra en forma natural, por ejemplo,
lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alif ticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetileneoxicetanol , o productos de condensación de óxido de etileno con esteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tal como monooletato de polioxietileno sorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con esteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietilensorbitan . Las suspensiones acuosas pueden también contener uno o más conservadores, por ejemplo p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes de coloración, uno o más agentes saborizantes , y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina. Pueden ser formuladas suspensiones aceitosas al suspender los ingredientes activos en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de cacahuate, aceite de olivo, aceite de cártamo o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones aceitosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura, o alcohol cetílico. Agentes edulcorantes tales como aquellos indicados anteriormente, y agentes saboriznates pueden ser agregados para proporcionar preparaciones orales agradables. Estas composiciones pueden ser conservadas por la
adición de un antíoxidante tal como ácido ascórbico. Polvos y granulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por la adición de agua proporcionan al ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, agente de suspensión y uno o más conservadores. Agentes de dispersión o humectantes adecuados y agentes de suspensión son ejemplificados por aquellos ya mencionados anteriormente. Excipientes adicionales, por ejemplo, agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes, pueden también estar presentes. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden también estar en la forma de emulsiones aceite en agua. La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de olivo o aceite de cacahuate , o un aceite mineral, por ejemplo parafina líquida o mezclas de estos. Agentes de emulsificación adecuados pueden ser gomas que se encuentran en forma natural, por ejemplo goma acacia o goma de tragacanto, fosfátidos que se encuentran en forma natural, por ejemplo, fríjol de soya, lecitina, y ésteres de esteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol, anhídridos, por ejemplo monoleato dé sorbitan, y productos de condensación de los ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monoleato de polioxietilensorbitan. Las emulsiones pueden también contener agentes edulcorantes y saborizantes .
Pueden ser formulados jarabes y elixires con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol , sorbitol o sacarosa. Tales formulaciones pueden también contener un demulcente, un conservador y agentes saborizantes y colorantes. Niveles de dosis en el orden de aproximadamente 0.01 mg a aproximadamente 100 mg, preferentemente a aproximadamente 75 mg, más preferentemente a aproximadamente 25 mg, de un compuesto o hidrato de la Fórmula I, es decir, el ingrediente activo, por kilogramo de peso corporal por día son útiles en el tratamiento de las condiciones indicadas anteriormente. Más preferentemente, los niveles de dosis son de aproximadamente 0.025 mg a aproximadamente 15 mg por kilogramo de peso corporal por día. Incluso más preferentemente, niveles de dosis son de aproximadamente 0.05 mg a aproximadamente 10 mg por kilogramo de peso corporal por día. Aún incluso más preferentemente, niveles de dosis son de aproximadamente 0.05 mg a aproximadamente 2.5 mg por kilogramo de peso corporal por día. Niveles de dosis particularmente preferidos son de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 0.5 mg por kilogramo de peso corporal por día . La cantidad del ingrediente activo que puede ser combinada con los materiales portadores para producir una forma de dosis sencilla variará dependiendo del huésped
tratado y el modo particular de administración. Las formas de dosis de unidad contendrán generalmente entre aproximadamente 0.25 mg a aproximadamente 1400 mg del ingrediente activo. Más preferentemente, las formas de dosis de unidad generalmente contendrán entre aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 100 mg del ingrediente activo. Incluso más preferentemente, las formas de dosis de unidad generalmente contendrán entre aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg del ingrediente activo. Todavía incluso más preferentemente, las formas de dosis de unidad generalmente contendrán entre aproximadamente 1 mg a aproximadamente 25 mg del ingrediente activo. Formas de dosis particularmente preferidas contendrán de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 15 mg del ingrediente activo . Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, ruta de administración y relación de excreción, combinación de fármacos y la severidad de la enfermedad particular que está bajo terapia. Las descripciones en esta solicitud de todos los artículos y referencias, incluyendo patentes, se incorporan en la presente para referencia en su totalidad.
La presente invención será ilustrada además por los siguientes ejemplos, los cuales no son para ser construidos como limitantes de la invención en alcance o espíritu a los procedimientos específicos y compuestos descritos en ellos. Ejemplo 1; Preparación del ácido 3 - (4 , 5 , 7-trifluorobenzotiazol -2 -il ) met il - indol -N-acético monohidratado 2,3,5,6-tetrafluoroacetanil ida : Se trata una solución de 2 , 3 , 5 , S-tetrofluoroanilina (200 g, 1.21 moles) en piridina anhidra (103 ral, 1.27 moles) con anhídrido acético (120 mi, 1.27 moles) y se calienta a 120°C por 2 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se vacía la solución en agua enfriada con hielo (500 mi) . Se filtra el precipitado resultante, se disuelve en acetato de etilo, se seca en MgS04, se filtra y se concentra. Se lava el material sólido con heptano (200 mi) y se seca para dar 2 , 3 , 5 , 6 - tetrafluoroacetanilída como un sólido cristalino blanco (206 g, 82%); p.f. 136-137°C; R£ 0.48 (acetato de etilo al 50% en heptano); 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz ) d 10.10 (s, 1H) , 7.87-7.74 (m, 1H) , 2.09 (s, 3H) . Análisis calculado para CBH5F4NO: C, 46.39; H, 2.43; N, 6.67. Encontrado C, 46.35; H, 2.39; N, 6.68. 2,3,5, 6 -tetrafluorotioacetañilida : Se carga un matraz de fondo redondo de 5,000 mi de cuatro cuellos, secado en flama con pentasulfuro fosforoso
(198 g, 0.45 moles) y se diluye con benceno anhidro (3,00C mi, 0.34 ) . Se agrega 2 , 3 , 5 , 6-tetrafluoroacetanilida (185 g, 0.89 moles) en una porción y se calienta la suspensión amarilla brilante para un reflujo suave por 3 horas. Se enfría la solución a 0°C y se filtra. Se lava el material insoluble con éter (2 x 250 mi) y se extrae el filtrado combinado con 10% de NaOH acuoso (750 mi, 500 mi) . Después de enfriar la capa acuosa a 0°C, se acidifica cuidadosamente con HC1 concentrado (pH 2-3) . Se recolecta el producto precipitado por filtración y se lava con agua (500 mi) . Se disuelve el material amarillo anaranjado en acetato de etilo (1,000 mi), se seca en MgS04 y carbono activado (3 g) , se filtra a través de una almohadilla corta de sílice (50 g) , y se concentra. Se tritura el sólido resultante con heptano (500 mi) y se filtra par dar 2,3,5,6-tetrafluorotioacetanilida (174.9 g, 88%); p.f: 103-104°C; R£ 0.67 (acetato de etilo al 50% en heptano); H NMR (DMSO-d6, 300 MHz ) d 11.20 (s, 1H) , 8.00-7.88 (m, 1H) , 2.66 (s, 3H) . Análisis calculado para C8H5F4NS: C, 46.05; H, 2.26; N, 6.28. Encontrado C, 43.10; H, 2.23; N, 6.19. 4,5, 7-trifluoro-2-metilbenzotiazol : Se carga un matraz de fondo redondo de 5,000 mi secado en flama equipado con un agitador de cabeza superior con hidruro de sodio (15.9 g, 0.66 moles) y se diluye con tolueno anhidro (3,000 mi, 0.2 M) . Se enfría la suspensión a 0°C, y
se trata con 2 , 3 , 5 , 6-tetraf luorotioacetanilida (134 g, 0.60 moles) en una porción. Se calienta la solución a temperatura ambiente sobre 1 una hora, y después se calienta a un reflujo suave. Después de 30 minutos, se agrega cuidadosamente la dimetiiformamida (400 mi) y se agita la mezcla por unas 2 horas adicionales. Se enfría la solución a 0°C y se agrega a agua con hielo (2,000 mi) . Se extrae la solución con acetato de etilo (1,500 mi) y se lava con salmuera (1,000 mi) . Se concentra la capa orgánica a sequedad, se diluye con heptano y se lava sucesivamente con agua (300 mi) y NaCl acuoso saturado (1,000 mi) . Se seca la capa orgánica sobre gS0 , se filtra, y se concentra para dar 4 , 5, 7-trifluoro-2-metilbenzotiazol (116.8 g, 96%) como un sólido café claro: pf : 91-92°C; Rf 0.56 (acetato de etilo al 30% en heptano) ; H N R (DMSO-d6, 300 MHz) d 7.76-7.67 (m, 1H) , 2.87 (s, 3H) . Análisis calculado para C8H4F3NS: C, 47.29; H, 1.98; N, 6.82; S, 15.78. Encontrado C, 47.56; H, 2.07; N, 6.82; S, 15.59. Clorhidrato de 2 -amino- 3 , 4 , 6 -trifluorotiofenol Se elimina el gas de una solución de 4 , 5 , 7 - trifluoro-2 -metilbenzotiazol (25.0 g, 123 mmoles) en etilenglicol (310 mi, 0.4 M) y NaOH acuoso al 30% (310 mi, 0.4 M) usando una corriente de nitrógeno después se calienta a una reflujo suave (125°C) por 3 horas. Se enfria la solución a 0°C y se acidifica a pH 3-4 usando HC1 concentrado (aproximadamente 200 mi) . Se extrae la solución con éter (750 mi) y se lava
con agua (200 mi) . Se seca la capa orgánica sobre Na2S04, se filtra y se trata con 2 , 2 , -di-tert -butil- -ir.etilfenol (0.135 g, 0.5 % en mol) . Después de concentrar a sequedad, se disuelve el producto sin purificar en metanol anhidro (200 mi) y se trata con una solución de HC1 en 1,4-dioxano (37 mi, 4 N, 148 mmoles) . Se concentra la mezcla resultante a sequedad, se tritura con isopropiléter (100 mi) y se filtra para dar clorhidrato de 2-amino-3 , 4 , 6 -trifluorotiofenol (19.3 g, 73%) como un sólido café claro que se usa sin purificación adicional. P.f. 121-124°C; Rf 0.43 (acetato de etilo al 30% en heptano) ; Análisis calculado para C6H5C1F3NS: C, 33.42 ; H, 2.34; N, 6.50; S, 14.87. Encontrado C, 33.45; H, 2.27; N, 6.48; S, 14.96. Ácido 3-cianometil-indol-N-acético, éster etilo: Se trata bajo una atmósfera de nitrógeno, una solución de acetonitrilo de 3-indolilo (25.0 g, 160 mmoles) en acetonitrilo seco (530 mi, 0.3 M) con hidruro de sodio (95%, 4.2 g, 168 mmoles) y se agita por 30 minutos. Se agrega bromoacetato de etilo (21.3 mi, 192 mmoles) en una forma de gotas sobre 10 minutos y se agita la solución en temperatura ambiente por 16 horas. Después de concentrar bajo presión reducida, se disuelve el residuo resultante en acetato de etilo y se lava con NaCl acuoso saturado. Se secan los extractos orgánicos en MgS04, se filtra y se concentra. Se recristaliza el producto sin purificar a partir de heptano y
acetato de etilo para dar el compuesto objetivo como un sólido cristalino blanco (19 g, 49%) : p.f. 98-99°C; Rf 0.29 (acetato de etilo al 30% en heptano) : H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) d 7.59 (dd, Hz, J2=0.6 Hz, 1H) , 7.36 (s, 1H) , 7.18 (bt, J=7.2 Hz, 1H) , 7.10 (bt, J=7.2 Hz, 1H) , 5.12 (s, 2H) , 4.14 (q, J=7.2 Hz, 2H) , 4.06 (s, 2H) , 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H) ; ) LRMS calculado para Ci4H14N202 : 242.3 ; encontrado 243.0 (M+l)+. Análisis calculado para C14H14N202 : C, 69.49; H, 5.82; N, 11.56. Encontrado C, 69.39; H, 5.89; N, 11.59. Ácido 3 - (4,5, 7 -trifluorobenzot iazol -2 - il ) metil - indol -N-acético, éster etílico: Se trata bajo una atmósfera de nitrógeno, una solución de ácido 3 -acetonitrilo- indol -N-acético , etil éster (11.0 g, 45.4 mmoles) en etanol anhidro (90 mi, 0.5 M) con clorhidrato de 2 -amino, 3 , 4 , 6 - rifluorotiofenol (12.7 g, 59.0 mmoles) y se calienta a un reflujo suave por 16 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se concentra la solución bajo presión reducida, se diluye con acetato de etilo y se lava con HC1 2N y NaCl acuoso saturado. Se seca la capa orgánica en MgS04 , se filtra y se concentra. La purificación por MPLC (acetato de etilo al 10-50% en heptano, 23 ml/min, 150 min) para dar ácido 3- (4 , 5 , 7 -trifluorobenzotiazol -2 - il ) metil - indol -N-acético, éster etilo (6.0 g, 36%) como un sólido cristalino blanco: p.f. 110-111°C; Rf 0.41 (acetato de etilo al 30% en
heptano) ; ¾ NM (DMSO-d6, 300 MHz) d 7.74-7.66 (m, 1H) , 7.54 (d, J=7.8 Hz, 1H) , 7.46 (s, 1H) , 7.40 (d, J=8.1 Hz , 1H) , 7.15 (br, t, J=6.9 Hz, 1H) , 7.04 (br t, J=7.8 Hz , 1H) , 5.14 (s,
2H) , 4.66 (s, 2H) , 4.14 (q, J=7.2 Hz, 3H) , LRMS calculado para C20H15F3N2O2S : 404.4; encontrado 405.0 (M+l)". Análisis calculado para C20H15F3N2O2S : C, 59.40; H, 3.74; N, 6.93, S,
7.93. Encontrado C, 59.52; H, 3.721; N, 6.92; S, 8.04. Ácido 3 - (4,5, 7 -trifluorobenzotiazol -2 - il ) met il - indol -N-acético Se enfría una solución para dar ácido 3- (4,5,7-trifluorobenzotiazol -2 - il ) met il - indol -N-acético, éster etilo (5.91 g, 14.6 mmoles) en 1 , 3 -dimetoxietano (73 mi, 0.2 M) a 0°C y se trata con NaOH acuoso (1.25 N, 58 mi, 73.1 mmoles) en una forma de gotas sobre 15 minutos . Después de que se completa la adición, se agita la solución por unos 30 minutos adicionales, se acidifica a pH con HC1 2N, y se concentra bajo presión reducida. Se disuelve el residuo en acetato de etilo (200 mi) y se lava con salmuera (30 mi) . Se seca el extracto orgánico en Na2S04, se filtra y se concentra. Se agita el material resultante como una suspensión en heptano, se filtra y se seca para dar ácido 3- (4,5,7-trifluorobenzotiazol-2-il) metil - indol -N-acético (5.38 g, 98%) como un sólido amarillo pálido: p.f. 177-178°C; R£ 0.44 (metanol al 20% en diclorometano) ; ¾ NMR (DMS0-d6, 300 Hz) d 7.74-7.65 (m, 1H) , 7.53 (d, J=7.5 Hz, 1H) , 7.46 (s, 1H) , 7.40
(d, J=8.1 Hz, 1H) , 7.15 (b, t, 3=6.9 Hz , 1H) , 7.03 (br t, J=7.2 Hz, 1H) , 5.03 (s, 2H) , 4.65 (s, 2H) , LRMS calculado para Ci8Hl:lF3N202S : 376.4 ; encontrado 375.0 (M-l)~. Análisis calculado para CleH1:LF3N202S : C, 57.44; H, 2.95; N, 7.44, S, 8.52. Encontrado C, 57.58; H, 2.99; N, 7.38; S, 8.51. Hidrato de ácido 3 - (4 , 5 , 7 - trifluorobenzot iazol -2 - il ) met i 1 -indol -N-acético ("hidrato de la fórmula I") Se recristaliza el ácido 3- (4,5,7-trilf orobenzotiazol -2 - il ) metil - indol -N-acético amarillo pálido a partir de acetonitrilo y agua para dar ácido 3- (4,5, 7 - trifluorobenzotiazol -2 -il ) metil - indol -N-acético (4.53 g, 92%) como un sólido cristalino blanco: p.f. 176-177°C; R£ 0.44 (metanol al 20% en diclorometano) ; XH NMR (DMS0-d6, 300 MHz) d 7.74-7.65 (m, 1H) , 7.53 (d, J=7.5 Hz, 1H) , 7.46 (s, 1H) , 7.40 (d, J=8.1 Hz, 1H) , 7.15 (b t, J=6.9 Hz, 1H) , 7.03 (b t, J=7,2 Hz, 1H) , 5.03 (s, 2H) , 4.65 (s, 2H) , LRMS calculado para C1BHHF3N2O2 S : 376.4; encontrado 375.0 (M-l) . Análisis calculado para C18H 3F3N203S : C, 54.82; H, 3.32; N, 7.10, S, 8.13. Encontrado C, 54.92; H, 3.32; N, 7.16; S, 8.23. Ejemplo 2 Se prueba el compuesto del Ejemplo 1 para su potencia, selectividad y eficacia como un inhibidor de aldosa reductasa humana. La potencia o efectos inhibidores de aldosa reductasa se prueban usando métodos similares a aquellos descritos por
Butera et al. en J. ed. Chem. 1989, 32, 757. Usando este ensayo, se determina la concentración requerida para inhibir la actividad de aldosa reductasa humana (hARL2) por 50% (IC50) . En un segundo ensayo, se prueba el mismo compuesto para su capacidad para inhibir la aldehido reductasa (hARLl), una enzima relacionada estructuralmente . El método de prueba empleado es esencialmente el mismo como se describe por Ishii, et al., J . Med. Chem. 1996 39: 1924. Usando este ensayo, se determina la concentración requerida para inhibir la actividad de aldehido reductasa humana por 50% (IC50) . A partir de estos datos, se determinan hARLl/hALR2. Ya que es deseable alta potencia de compuestos de prueba como inhibidores de aldosa reductasa, se buscan bajos valores de hALR2 Ic50. Por otra parte, es indeseable alta potencia de compuestos de prueba como inhibidores de aldehido reductasa, y se buscan valores altos de hALRl IC50. Por consiguiente, se usa la proporción hALRl/hALR2 para determinar la selectividad de un compuesto de prueba. La importancia de esta selectividad se describe en Kotani, et al., J. Med. Chem. 40: 684, 1997. Los resultados de estas pruebas se combinan y presentan en la Tabla 1.
Ejemplo # hALR2 hALRl hALRl /hALR2 (IC50) (icso; 1 5 nM 27,000 nM 5,400
To restar 13 nM 1,940 nM 149
Los resultados anteriores muestran la potencia superior, selectividad y eficacia del compuesto del Ejemplo 1. Este compuesto es útil en el tratamiento ce complicaciones crónicas que se originan de diabetes mellitus, tales como cataratas diabéticas, retinopatia y neuropatía. Por consiguiente, un aspecto de la invención es el tratamiento de tales complicaciones con el compuesto inventivo; el tratamiento incluye tanto prevención y alivio. El compuesto es útil en el tratamiento de, por ejemplo, cataratas diabéticas,, retinopatia, nefropatía y neuropatía. Ejemplo 3 En un tercer grupo de experimentes, el compuesto del Ejemplo 1 se ensaya para su capacidad de normalizar o reducir la acumulación de sorbitol en el nervio ciático de ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina . Los métodos de prueba empleados para determinar la eficacia son esencialmente aquellos de Mylari, et al., J. Med. Chem. 34: 108, 1991. El ácido { 3-[ ( 4 , b , 7-trifluoro- 1 , 3-benzot iazol-2-
i 1 ) metiI]-lH-indol-l-il ¡acético monohidratado reduce los niveles de sorbitoi en tejidos en una forma relacionada a dcsis. En un estudio de 15 días del nervio ciático de rata, el ácido {3-[ (4, 5, -triflucro-l, 3-benzotiazol-2-ii)metil]-lH-indol-l-il}acético monchidratado tiene una ED50 de 1.3 ng/kg/dia y una inhibición de 100% de una acumulación de sorbitoi en una dosis de 4.8 mg/kg/dia. Cambios benéficos similares en fructuosa (se reducen los niveles) y misinositol !se incrementan los niveles) se observan también. Ácido {3-[ (4, 5, 7-trifluoro-1, 3-ben zot iazol -2-ii ) met i 1"|-lH-indcl-l-il}acético monohidratadc en reducción de niveles oe sorbitoi de tejido en la rata diabética inducida por STZ
Duración Dosis in Reducción del % de sorbitoi del vivo Nervio lentes Corteza Medula estudio (mg/kg/dia) ciático del de riñon riñon
30 días 5 100 88 ND ND ND
30 días 10 100 90 ND ND D
30 días 25 100 95 ND ND ND
90 días 5 100 — 89 33 36
90 días 10 100 99 25 47
90 días 25 100 96 45 58
ND- no determinado = no puede ser determinado exactamente debido a cataratas en diabetes no tratada. Ejemplo 5 Se compara el ácido { 3-[ ( , 5 , 7-trifluoro-1 , 3-be zotiazol-2-il) metil]-l.H-indol-l-il}acético monohid atado con los inhibidores de aldosa reductasa conocidos (ARI) zenarestat y zopolrestat en un modelo de rata diabética STZ ae 8 días. En una dosis de 10 mg/kg/dia, los compuestos de la fórmula 1 son significativamente más potentes que ya sea el zenarestat o zopolrestat en reducir los niveles de sorbitol en el nervio ciático y lentes.
Ejemplo 6 En un estudio de cuatro semanas en ratas diabéticas STZ, el ácido {3-[ (4 , 5, 7-trifluoro-1, 3-benzotiazol-2-il)metil]-lH-indol-l-iljacético monohidratado, en una forma
relacionada a dosis inhibe la pérdida induciaa por poliol de velocidad de conducción nerviosa {NCVJ en el nervio ciático. Se inhibe la declinación por 14%, 41%, y 791 en dosis de 5, 10, y 25 mg/kg/dia, respectivamente. Este actividad se confirma en un segundo estudio mayor donde 5, 10, y 25 mg/kg/dia se administran a ratas diabéticas STZ por 3 meses. Los datos siguen inmediatamen e.
Ejemplo 7 El . ácido { 3-[ ( 4 , 5 , 7-trifluoro-l , 3-benzotiazol-2-i 1 ) met il]- 1H- indol- 1 - i 1 } acét ico monohidratado se compara muy favorablemente con la capacidad del zenarestat y zopolrestat para inhibir la declinación en NCV. El ácido {3—[(4,5,7 — trifluoro-1, 3-benzotiazol-2-il ) metil]-lH-indoi-l-il}acético monohidratado tiene casi dos veces la actividad de los compuestos ARI conocidos en dosis comparables. Los datos siguen inmediatamente
ARI Dosis ir. Duración Duración Mejora en NCV vivo del del mg/ kg/dia estudio tratamiento Hiarato de 25 4 3 semanas 79% la Fórmula I semanas Zenarestat 32 2 : 2 semanas 48% semanas Zopolrestat 25 4 ; 4 semanas 43% semanas
Composiciones farmacéuticas Se hacen las siguientes composiciones esencialmente acuerdo con el proceso del Ejemplo 9. Composición ? Ácido {3-[(4,5,7-trifluoro-l, 3-ber.zot azol-2-il)meti lH-indol-l-il}acético raonohidratado, tableta de 50 mg
Componente Mg/tableta % en peso
Compuesto activo* 50 15.15
Lactosa flast fio 248 75.15
PVP 16 4.85
Agua purificada car.t . suf - Croscarmelosa sódica 10 3.03
Estearato de magnesio 6.0 1.82
TOTAL 330 mg 100%
* compuesto active se refiere al ácido {3-[(4,5,7-trifiuoro-1, 3-benzctiazol-2-il) metil]-lH-indol-l -i 1} acético monchidra ado Composición B Ácido {3-[(4, 5, 7-trifluoro-l, 3-benzotiazol-2-il ) metil]-iH-indol-l-il}acético monohidratado, tableta de 200 mg Componente Mg/tableta % en peso Compuesto activo* 200 6C .61 Lactosa flast fio 93 29.69 PVP 16 4.85 Agua purificada cant . suf - Croscarmelosa sódica 10 3.03 Estearato de 6.0 1.82 magnesio TOTAL 330 rag 1001
* compuesto activo se refiere al ácido {3-[(4,5,7 trifluoro-1, 3-benzotiazol-2-il) metil]-lH-indcl-l-il } acético monohidrat do Composición C Acido {3-[(4, 5, 7-trifluoro-l, 3-benzotiazol-2-ii ) metil] lH-indol-l-il}acético monohidratado, tableta de 25 mg
Componente Mg/tabier a % en peso Compuesto activo* 25 7.57 Lactosa flast fio 273 82.73 PVP i 6 4.85 Agua purificada cant . suf - Croscarmelosa s<ódi ca 10 3.03 Estearato de 6.0 1.82 magnesio TOTAL 330 mg 100%
* compuesto activo se refiere al ácido {3-[ (4,5,7-tri flucro-1 , 3-benzot iazol-2-il ) metil]-lH-indo -l-il}acético mcnohidratado Composxción D Ácido {3-[(4,5,7-trifluoro-l, 3-benzot iazol-2-il) me il]-IH-indol-l-il }acético monohidratado, cápsula de 50 mg Componente Mg/tableta % en peso Compuesto activo* 50 15.92 Lactosa flast fio 248 78.98 PVP 16 5.10 Agua purificada cant. suf - TOTAL 314 mg 100%
* compuesto activo se refiere al ácido }3-[(4,5,7 trifluoro-l,3-benzotiazol-2-il) metil]-lH-indol- 1-il } acético monohidratado
Composición E Ácido {3-[ (4, 5, 7 -trifluoro-1 , 3-benzotiazol-2-il ) metil]-lH-indol-l-il}acético monohidratado, cápsula de 200 rr.g Componente g/tableta % en peso Compuesto activo* 200 63.69 Lactosa flast fio 93 31.21 PVP 16 5.10 Agua purificada cant. suf - TOTAL 314 mg 100%
* compuesto activo se refiere al ácido { 3-[ {4,5,7-trifluoro-1, 3-benzotia zol-2-il ) met i 1]- lH-indol- 1-i 1 } acético monohidratado Composición F Ácido {3-[(4,5,7-trifluoro-l, 3-benzotia zol-2 - il ) metil]-lH-indol-l-il}acético monohidratado, cápsula de 25 mg Componente Mq/tableta % en peso Compuesto activo* 20 7.96 Lactosa flast fio 273 86.94 PVP 16 5.10 Agua purificada cant. suf - TOTAL 314 mg 100%
* compuesto activo se refiere al ácido ¡3-[(4,5, trifluoro-1, 3-benzotiazol-2-il ) met il]- IH-indol- 1 - i 1 [acético
monohidratado Ejemplo 9 Fabricación de la composición f rmacéutica Se almacena el ácido {3 -[ (4 , 5 , 7 - rifiuoro- 1 , 3 -benzotiazol-2-il) metil]-lH-indol-l-il}acético monohidratado en temperatura ambiente controlada (15-30°C) Lo siguiente es una descripción típica del proceso para un tamaño de lote de aproximadamente 1,2000 tabletas terminadas que tienen una cantidad de 200 mg de ácido {3-[(4,5, 7-trifluoro-1 , 3 -benzotiazol -2 - i 1 ) met il] - 1H- indol - 1 -il ¡acético monohidratado por tableta. El proceso es generalmente mostrado en la Figura 1. (1) son pesados por separado el ácido {3-[(4,5,7-trif luoro- 1 , 3 -benzotiazol - 2 - il ) metil] - lH-indol -1 - il }acético monohidratado, lactosa fat fio, y PVP en limpio, tarados y etiquetados en bolsas de polietileno (2) se mezclan el ácido ácido { 3 - [ (4 , 5 , 7 - rif luoro-1 , 3 -benzotiazol -2 -il) metil]- 1H- indol- 1 - il}acé ico monohidratado, lactosa y PVP en el mezclador Niro-fileder PP1 por 5 minutos en una velocidad impulsora de 500 rpm, sin cortador . (3) Se agrega el agua purificada al mezclador usando una bomba peristáltica mientras se mezcla en 500 rpm con el cortador (fijado en velocidad 2) . La cantidad del agua
es aproximadamente 60 mi . Se termina la adición del agua cuando los granulos están bien formados. (4) Se transfieren los gránulos húmedos a partir del mezclador a un secador de lecho fluido Aeromatic y se secan en 70°C hasta que el contenido del agua está entre 1.0 y 2.5%. (5) Se tamizan los gránulos secos usando un tamiz de 1 mm en un Erweka AR400. (6) Se obtienen aproximadamente 410 gramos de gránulos. El peso de los gránulos es corregido por contenido de agua. Cantidades requeridas de croscarmelosa sódica y estearato de magnesio son entonces calculadas en base al peso corregido de los gránulos. Los gránulos son entonces mezclados con la croscarmelosa sódica en un mezclador Turbula fijo en una velocidad media que se fija por 6 minutos. (7) Se agrega el estearato de magnesio a la mezcla y se mezcla en la velocidad más baja fijada por 4 minutos. (8) Se descarga la mezcla en bolsas de polietileno.
(9) Se comprime la mezcla usando una prensa de tabletas Manesty F3 equipado con 100 mm perforaciones cóncavas normales. La compresión produce núcleos de tabletas que pesan aproximadamente 330 mg (+ 5%) . (10) El espesor y dureza de los núcleos son determinados y los núcleos son embolsados dobles. (11) Aproximadamente 400 gramos de los núcleos de
tabletas son obtenidos y se determinan cantidades de Opadry y agua. Se mezclan el Opadrin y agua usando un agitador magnético Heidoolph por 30 minutos. (12) Se precalienta un Aeromatic Strea 1 a 65°C. Se equipa la pistola de aspersión con una boquilla de 1 mm fija en el ancho de aspersión mínimo, en la posición de aspersión más baja, y con la pistola en una posición centralizada. (13) Se precalientan los núcleos de tabletas en el Strea por 15 minutos con el ventilador fijo en 10. La solución Opadry es colocada en un agitador Heidolph en un equilibrio y el tubo a partir de la bomba peristáltica se coloca en la solución. (14) Las fijaciones iniciales para la aspersión son ajustadas a una temperatura de 65 °C, una presión de atomización de 1.2 bares, una capacidad de ventilador de 15, y una bomba peristáltica fija en 7. (15) El proceso de recubrimiento es iniciado y se hacen los ajustes para la capacidad del ventilador para asegurar que las tabletas son recubiertas uniformemente. La relación de aspersión es mantenida entre 4 y 5 gramos/minuto.
(16) Después de que toda la solución ha sido aspersada, se secan las tabletas por 10 minutos en aproximadamente 65°C, la capacidad del ventilador es 10. Las tabletas son entonces permitidas para que lleguen a una temperatura ambiente y se almacenan en bolsas de polietileno
dobles . La invención y la forma y proceso de hacer y usarla, son ahora descritos en tales términos totales, claros, concisos y exactos para permitir a cualquier experto en la técnica a la cual pertenece, hacer y usar la misma. Se entiende que lo mencionado anteriormente describe modalidades preferidas de la presente invención y que se pueden hacer modificaciones en la misma sin alejarse del espíritu y alcance de la presente invención como se indica en las reivindicaciones. Para indicar particularmente y reclamar distintamente la materia objeto con respecto a la invención, las siguientes reivindicaciones concluyen esta especificación . Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.