MXPA05000028A

MXPA05000028A - Profarmaco, uso medicinal del mismo y procedimiento para producir el mismo.

Info

Publication number: MXPA05000028A
Application number: MXPA05000028A
Authority: MX
Inventors: Takaaki Okita
Original assignee: Nippon Suisan Kaisha Ltd
Priority date: 2002-06-20
Filing date: 2003-06-20
Publication date: 2005-08-26
Also published as: BR0312442A; US20050203061A1; WO2004000863A1; KR20050027095A; AU2003244088A1; JPWO2004000863A1; CA2490626A1; ZA200500526B; CN1671724A; EP1541579A1; NZ537686A

Abstract

Un profarmaco utiliza una enzima cuya actividad enzimatica es diferente entre el sitio blanco del farmaco y el sitio para expresar los efectos laterales, el profarmaco tiene un sustituyente escindible con la enzima y se activa mediante la escision del sustituyente con la enzima; como el sitio blanco del farmaco, por ejemplo, un organo respiratorio se puede mencionar y como el sitio para expresar los efectos laterales, por ejemplo, se puede mencionar al corazon; como un ejemplo del farmaco, se puede mencionar un broncodilatador y como el ejemplo de la enzima, se puede mencionar una glicosidasa (por ejemplo, una -glucuronidasa); ademas, el sustituyente es, por ejemplo, un grupo glicosilo compuesto de un monosacarido o un oligosacarido; el uso de la enzima permite reducir los efectos laterales de un farmaco del tipo cuyo sitio blanco es diferente del sitio para expresar los efectos laterales.

Description

PROFARMACO, USO MEDICINAL DEL MISMO Y PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR EL MISMO CAMPO DE LA TECNICA La presente invención se refiere a un profármaco el cual puede reducir los efectos laterales del fármaco mediante la utilización de una enzima cuya actividad enzimática tiene una diferencia entre el sitio blanco del fármaco y el sitio para expresar los efectos laterales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Se han estudiado numerosos profármacos denominados profármacos unidos a un sustituyente de azúcar. Su objetivo principal es la mejoría de la solubilidad de los compuestos parentales difícilmente solubles y el hacerlos no tóxicos en referencia a la analogía de un conjugado glucurónico. Particularmente, estos últimos utilizan el metabolismo del cuerpo vivo. En otras palabras, los profármacos se diseñan basándose en la idea de que los efectos laterales no deseables se reducen a la vez que se permite que los compuestos parentales expresen sus efectos solamente en la parte afectada con base en los reportes de las actividades de las enzimas que escinden azúcares tales como la ß-glucuronidasa y la ß-glucosidasa en la célula cancerosa y en la célula inflamatoria que están incrementadas. Sus detalles se explicarán a continuación. Se han publicado reportes de investigación en los que las actividades de diversas glicosidasas incluyendo a la ß-glucuronidasa están aceleradas en el tejido tumoral (Fishman, Science, 105, 646-647, 1947, Fishman y Anlyan, Cáncer Res., 7, 808-814, 1947, y Bollet et al., J. Clin. Invest., 38, 451, 1989). Con otros trastornos, se ha reportado que en el paciente asmático la actividad que la ß-glucuronidasa en el fluido alveolar de lavado (BALF) mediante la liberación de la ß-glucuronidasa a partir del macrófago alveolar y el mastocito tiende a estar acelerada (Tonnel et al., Lancet, 8339, 1406-1408, 1983 y Murray et al., N. Engl. J. Med., 315, 800-804, 1986), y adicionalmente se ha reportado que las actividades de la ß-glucuronidasa y N-acetil-D-glucosaminidasa están aceleradas en el fluido sinovial de un paciente reumático (Stephens et al., L. Rheumatol., 2, 393-400, 1975), y la actividad de la ß-glucuronidasa el suero de un paciente con SIDA es alta en comparación con un individuo saludable y los similares (Saha et al., Clin. Chim. Acta., 199, 311-316, 1991), y por lo tanto en el padecimiento de diversos tipos de trastornos se sugiere la aceleración de la actividad de una giucosidasa o la liberación extracelular de una glucosidasa. De estas glicosidasas, la ß-glucuronidasa de una enzima especialmente mencionada es una enzima la cual hidroliza una ß-glucuronida para catalizar la reacción para liberar ácido D-glucurónico, y se ha reportado que la ß-glucosidasa está presente en un amplia intervalo de órganos tales como el hígado, los pulmones, el bazo, y los ríñones o células inflamatorias tales como macrófagos y eosinófilos (Hayashi, J. Histochem. Cytochem., 15, 83-92, 1967 y Conchie et al., Biochem. J. 7 , 318-325, 1959). En la quimioterapia de los cánceres un problema importante es reducir la toxicidad en contra del tejido normal o la célula normal diferente a la tumoral. Con el objeto de resolver este problema, se desarrollaron diversos agentes antitumorales los cuales actúan específicamente en los tejidos tumorales pero la reducción esperada de los efectos laterales no se ha encontrado en ninguno de estos. De Duve consideró a una hidrolasa en el lisosoma que contenía una glucosidasa en el tejido tumoral y propuso el concepto de la quimioterapia mediante el profármaco de un agente antitumoral a ser activado mediante la hidrólisis con la hidrolasa y la enzima (Biológica! approaches to cáncer chemotherapy, 101-112, Academic Press, Inc., 1961). Connors y Whisson mostraron en el experimento utilizando ratones una alta correlación entre el efecto antitumoral de la anilina mostaza de un agente antitumoral y la actividad ß-glucuronidasa de la célula tumoral (Nature, 210, 866-867, 1966). Sweeny et al., publicaron una teoría acerca del mecanismo de la acción del ácido micofenólico de un agente antitumoral, dicho ácido micofenólico está glucuronidado en un órgano y el conjugado glucuróníco resultante se hidroliza con la ß-glucuronidasa en el tejido tumoral para formar una forma activa del ácido micofenólico el cual exhibe el efecto antitumoral (Cáncer Res., 31, 477-478, 1971 ). Young et al., llevaron a cabo una prueba clínica con un paciente con cáncer en base a la hipótesis de que la anilina mostaza de un agente antitumoral está glucuronidada dentro del cuerpo y el conjugado glucurónico resultante exhibe el efecto antitumoral mediante la hidrólisis en el tejido canceroso como es el caso del ácido micofenólico de un agente antitumoral pero no se reconoció una correlación suficiente entre el efecto antitumoral y la actividad enzimática (Cáncer, 38, 1887-1895, 1976). Baba et al., reportaron que con el uso de un modelo de cáncer de mama en ratón, un derivado del ácido glucurónico de 5-fluorouracilo de un agente antitumoral se administra intravenosamente para exhibir una inhibición (Gann, 69, 283-284, 1978). No obstante, los profármacos derivados de azúcar de estos agentes antitumorales generalmente son insuficientes en la hidrólisis en el sitio blanco, y por consiguiente no se han obtenido resultados satisfactorios en sus ensayos clínicos. A continuación, se realizó un método en el que un producto obtenido mediante la unión de un anticuerpo específico al tumor a diversas enzimas se administró previamente y se utilizó con profármaco el cual se iba a convertir a la forma activa mediante la escisión con estas enzimas. Esta se denominó ADEPT (terapia de profármaco de enzima dirigida al anticuerpo) y se realizaron numerosas investigaciones y desarrollos pero existen problemas con respecto al compuesto de enzima-anticuerpo exógeno el cual tiene una inmunogenicidad y el profármaco no puede se puede activar de manera suficiente dentro del cuerpo vivo, y por lo tanto la ADEPT aún no ha tenido éxito.

Posteriormente, Bossler et al., (Br. J. Cáncer, 65, 234-238, 1992) sintetizaron un compuesto a través de un espaciador sin unir directamente un azúcar a un agente antitumoral que tiene una baja inmunoantigenicidad con el objeto de administrar el profármaco que tiene una estructura agente antitumoral-derivado de azúcar para llevar a cabo de manera eficiente la hidrólisis en la célula cancerosa y tratar de mejorar el problema anteriormente descrito. En este procedimiento encontraron derivados los cuales exhibieron un efecto suficiente con los derivados del glicósido-espaciador solos y describieron estructuras de fármacos de glicósido-espaciador como los profármacos aplicables a sustancias anti-infiamatorias, inmunosupresoras, antagonistas de calcio, sustancias simpatomiméticas y las similares además de agentes antitu morales (Patente de E.U.A. No. 5, 621 ,002 (familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 642799, Patente Japonesa número de publicación Hei 7-149667/1995), Patente de E.U.A. No. 5,935,995 [familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 795334, Patente Japonesa Número de Publicación (Kokai) Hei 10-1495/1998], y Patente de E.U.A. No. 5,955,100 [familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 595133, Patente Japonesa Número de Publicación (Kokai) Hei 6-293665/1994]). En la Publicación de Patente Japonesa (Kokai) No. He 6- 293665/1994, se describió que "los compuestos se activan mediante enzimas las cuales en el individuo saludable se presentan principalmente dentro de las células pero las cuales bajo las condiciones patofisiológicas anteriormente mencionadas se presentan en una ubicación extracelular" y "Los profármacos de conformidad con la invención se pueden emplear para todos los trastornos no oncológicos en los cuales se presentan los macrófagos, granulocitos y plaquetas, especialmente en el estado activado. En el estado activado, las células anteriormente mencionadas secretan principalmente enzimas intracelulares las cuales hacen posible la activación sitio específica de los profármacos de conformidad con la presente invención". Además, se describe que con base en las sustancias de esta cita en el caso del uso de un agente antitumoral como el fármaco activo, éstas no son solamente reconocidas en el modelo tumoral sino que también se han reconocido en diversos modelos inflamatorios, por lo tanto se puede suponer que están implicadas en todos los trastornos en los cuales las células inflamatorias participan, con es el caso de los tumores. La ilustración de los fármacos se extiende a "una sustancia citostática, un antimetabolito, una sustancia la cual se intercala dentro del ADN, un fármaco el cual inhibe a la topoisomerasa l + II, un agente alquilatante, un compuesto el cual inactiva a los ribosomas, un inhibidor de la tirosina fosfocinasa, un inductor de la diferenciación, una hormona, un agonista hormonal, un antagonistas hormonal, una sustancia la cual altera la resistencia pleiotrópica a los citostáticos, un inhibidor de la calmodulina, un inhibidor de la proteína cinasa C, un inhibidor de la p-glicoproteína, un modulador de la hexoquinasa, un inhibidor de la p-glutamilcisteina sintetasa o de la glutationa S-transferasa, un inhibidor de la superóxido dismutasa, un inhibidor de la proteína asociada con la proliferación, una sustancia la cual tiene efectos inmunosupresores, una sustancia antiinflamatoria no esteroidea, un fármaco antirreumático, un esferoide, una sustancia la cual tiene un efecto antiinflamatorio, analgésicos o antipirético, un derivado de un ácido orgánico, un agente analgésico, un anestésico local, un antiarrítmico, un antagonistas de Ca, un antihistamínico, un inhibidor de la fosfodiesterasa, un parasimpatomimético, un simpatomimético, y una sustancia con un efecto inhibidor sobre la uroquinasa de humano". En otras palabras, se sugiere que los profármacos de esta cita tienen una posibilidad de funcionamiento en todos los fármacos en los cuales participan las células inflamatorias pero no se sugiere ningún índice de cuando dicho fármaco funciona realmente y dicho fármaco no funciona realmente. En ios ejemplos, solamente se muestran las mediciones del efecto antitumoral de los derivados de azúcar de la doxorubicina, nitrógeno mostaza, y quinina y aquellas del efecto antiinflamatorio y la toxicidad aguda de los derivados de azúcar de doxorubicina, y a pesar de la enumeración de fármacos terapéuticos descritos anteriormente, no se describe ningún ejemplo que muestre el efecto concreto del fármaco y la acción farmacológica de los fármacos diferentes a los agentes antitumorales, y por lo tanto se puede pensar que su efectividad real aún no ha sido confirmada. Por ejemplo, se han realizado hasta el momento muchos estudios de los derivados de azúcar de esferoides pero como se indica por Sugai et al., (WO95/09177), debido a los problemas de su seguridad y la expresión de efectos colaterales por la conversión hacia formas activas mediante hidrólisis enzimática en órganos diferentes al órgano blanco, su desarrollo se encuentra en una situación difícil. Incluso la doxorubicina la cual ha sido ampliamente estudiada se encuentra aún en su etapa preclínica en Europa y aún no se ha terminado clínicamente. Además, como otras aplicaciones diferentes a los cánceres, el estudio de los profármacos utilizando las glicosidasas de los esferoides anteriormente descritos se han desarrollado con anterioridad con el objeto de reducir los efectos laterales. En 1962, 1964, y 1966, un grupo de Merck Co. mostró una posibilidad para los derivados de glicósido de esteroides para reducir los efectos laterales de los esteroides tales como la atrofia adrenal, pérdida de peso, osteoporosis, la reducción del conteo de leucocitos (Patentes Británicas Nos. 1015396 y 1059548, Patente de E.U.A. No. 3,185,682, y Hirshmann et al., J. Am. Chem. Soc, 86, 3902-3904, 1964). No obstante, se aclara el problema de que los profármacos de glicósido tienen una estabilidad extremadamente inferior y el enlace glicosídico se escinde en otros sitios diferentes al sitio blanco para expresar los efectos laterales, y Sugai et al., (WO95/09177) trataron de reducir los efectos laterales. No obstante, el éxito clínico no se ha obtenido aún. Los esteroides pueden exhibir sus efectos en cantidades traza y tienen efectos fisiológicos variados en un amplio intervalo de tejidos en el cuerpo vivo, y por consiguiente se puede decir que es muy difícil que los fármacos logren la reducción de efectos laterales.

Además, Friend et al., consideró a la glicosidasa poseída por una bacteria intestinal y realizó investigaciones de los profármacos que tienen una estructura derivada de azúcar de un esteroide el cual ocasiona un problema de efectos laterales como los fármacos terapéuticos para la colitis ulcerativa {Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 123485 [familia de patentes: Patente Japonesa Número en Publicación (Tokuhyo) Sho 60-501105/1985]}, J. Med. Chem., 27, 261-266, 1984, J. Med. Chem., 28, 51-57, 1985, y Pharmaceutical Res., 10, 1553-1562, 1993). No obstante, estos ensayos no han mostrado un éxito clínico hasta la fecha. Como se describe anteriormente, el desarrollo de profármacos de derivados de fármacos del azúcar los cuales utilizan las enzimas del cuerpo vivo incluyendo a la ß-glucuronidasa, se han ensayado por largo tiempo y no han sido relacionados con éxito clínico bajo las presentes condiciones. Como la terapia del asma el cual es uno de los trastornos de los órganos respiratorios con gran número de pacientes, una terapia de conjunción utilizando un agonista ß2 de larga acción y un esteroide para inhalación se recomienda de conformidad con la presente guía. La historia del desarrollo de broncodilatadores de agonistas ß2 abarca desde agonistas ß los cuales actúan tanto en los receptores ß? como en ß2 originalmente descubiertos hasta los agonistas ß2 selectivos de corta acción de la segunda generación representados por salbutamol y que se han desarrollado hacia agonistas ß2 selectivos de larga acción de la tercera generación representados por salumeterol. Los agonistas ß2 de corta acción son los fármacos a ser utilizados en la terapia del asma que se agrava y en la prevención del broncoespasmo inducido por ejercicio y que exhiben diversos efectos laterales incluyendo muerte súbita cuya causa aún no está claramente especificada para pacientes asmáticos, tal como la disminución de la concentración de potasio en sangre, la variación de la presión sanguínea, el incremento en la velocidad cardiaca, y la prolongación del intervalo Q-T y el temblor del músculo esquelético. Se puede pensar que estos efectos laterales se pueden ocasionar particularmente por un uso excesivo (Burgraff et al., Thorax, 56, 567-569, 2001 , Bennet et al., Thorax, 49, 771-774, 1994, y Rave, Respi. Med., 95, 21-25, 2001 ).

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Como se describió anteriormente, el desarrollo de fármacos los cuales reducen adicionalmente los efectos laterales de los agonistas ß2 incluyendo el incremento de la velocidad cardiaca y la variación de la presión sanguínea se puede considerar un problema clínico extremadamente importante. Generalmente, los agonistas ß2 de corta acción se utilizan frecuentemente como inhaladores mas que mediante la administración oral. Con estos, existen ciertos efectos laterales como se describió anteriormente en otra parte.

La presente invención tiene como objetivo el reducir los efectos laterales de los fármacos del tipo, tales como los agonistas ß2, cuyo sitio blanco para llevar a cabo el efecto es diferente del sitio para expresar efectos laterales. Como se explicó en el párrafo de la técnica precedente, los fármacos de la técnica precedente son todos profármacos que se convierten a sus formas activas mediante el uso de actividad enzimática acelerada en un cáncer, un tejido inflamatorio o los similares. Por otra parte, la presente invención es un profármaco el cual utiliza diferencias en las actividades enzimática presentes entre los órganos incluso en el estado normal en la actividad enzimática presente en un tejido o en un órgano. Las presentes inventores han realizado investigaciones en el conjugado glucurónico de la 11-etil-7,9-dihidroxi-10,11-di-hidrobenzo[b,f]tiep¡na. Este compuesto lleva a cabo rápidamente glucuronidación en el hígado después de la administración oral y no menos del 99% de éste existe como el conjugado glucurónico en la sangre. No obstante, el compuesto ha exhibido una actividad farmacológica en el tejido blanco farmacológico de los pulmones. Como resultado de las investigaciones, se ha encontrado que el conjugado glucurónico del compuesto lleva a cabo la deglucuronidación en los pulmones y se supone que el compuesto parental se forma mediante la deglucuronidación con la ß-glucuronidasa que exhibe actividad, (los detalles se describen como el ejemplo de referencia 1 después de los ejemplos).

No se ha encontrado un reporte de investigación detallada sobre la localización de la ß-glucuronidasa al nivel de cada órgano o de cada célula. Por lo tanto, cuando se confirmó la localización de la ß-glucuronidasa en los bronquios, se encontró que la ß-glucuronidasa se localizaba en el epitelio de los bronquiolos como se muestra en la figura 1 (las porciones teñidas de obscuro en figura 1 siendo la ß-glucuronidasa). (El método de prueba se describe con detalle en el ejemplo de referencia 2 después de los ejemplos). Por lo tanto, la presente invención se basa en el hallazgo de que la actividad de la ß-glucuronidasa se localiza en un sitio específico. Además, el examen se realizó con respecto a que órganos en el cuerpo vivo contienen más ß-glucuronidasa. Particularmente, en consideración de la reducción de los efectos laterales de los agonistas ß2 en el latido y la presión sanguínea, el examen de la actividad que la ß-glucuronidasa en los pulmones y el corazón con respecto a diversos órganos se consideró muy importante para elaborar los profármacos de los agonistas ß2, y se midió la actividad de la ß-glucuronidasa en cada órgano de un conejillo de Indias. En este caso, con la suposición de un estado asmático real, la actividad de la ß-glucuronidasa en un estado asmático se comparó mediante el uso de un modelo animal asmático. En otras palabras, se compararon las actividades de la ß-glucuronidasa en cada órgano de un conejillo de Indias sensibilizado con un antígeno, un conejillo de Indias no sensibilizado, y un conejillo de Indias sensibilizado con un antígeno y que tenía un evento cerebrovascular inducido mediante el estímulo de la antígeno.

Los resultados se muestran en la figura 2 (los detalles del método de prueba se describen como el ejemplo de referencia 3 después de los ejemplos). Como podría ser claro a partir de la figura 2, se puede entender que la actividad enzimática a ser acelerada por el estado inflamatorio es muy pequeña y la cantidad de la actividad enzimática presente en el estado normal es diferente en gran medida a partir de la que se encuentra en cada tejido. Además, se confirmó que la actividad enzimática es baja en el corazón el cual es el sitio para que los agonistas ß2 expresen sus efectos laterales. Adicionalmente, se confirmó la presencia o ausencia de la localización de la ß-glucuronidasa en el corazón, y no se reconoció una imagen positiva que mostrara la actividad de la ß-glucuronidasa como se muestra en la figura 3 (las porciones negras indicadas por flechas muestran las imágenes de los núcleos celulares teñidos con hematoxilina). (Los detalles del método de prueba se describen como el ejemplo de referencia 4 después de los ejemplos). Se ha reportado que el epitelio cultivado libera de manera constitutiva ß-glucuronidasa hacia el medio de cultivo (Scaggiante et al., Exp. Cell Res., 195, 1940198, 1991). De la misma manera el cultivo de macrófago de pulmón de humano realiza la liberación constitutiva de la ß-glucuronidasa hacia el medio de cultivo (Triggiani et al., The J. Immunol., 164, 4908-4915, 2000). Por consiguiente, con el objeto de que la ß-glucuronidasa exprese su actividad extracelular, la liberación de la ß-glucuronidasa mediante inflamación y daño celular no se requiere necesariamente pero se piensa que la elevada concentración de la ß-glucuronidasa en parte del tejido es importante. En la consideración citohistológica a partir de este punto de vista, se puede decir que el sitio vecino del epitelio bronquiolar de los pulmones es el sitio en el cual de la ß-glucuronidasa tiene una actividad local sorprendente. Los presentes inventores han sintetizado previamente un compuesto de un agonista ß2 glucuronidado basado en el conocimiento previamente descrito y realizaron la inhalación de este conjugado glucurónico para permitir que se lleve a cabo la deglucuronidaclón con la ß-glucuronidasa la cual está abundantemente presente en los bronquiolos de los pulmones para expresar un efecto broncodilatador en el sitio local y, se piensa que incluso si parte el conjugado glucurónico debe alcanzar el corazón, difícilmente cualquier efecto lateral específico de los agonistas ß2 se conocerá en el corazón en el cual ß-glucuronidasa casi nuestra presente, y actualmente se sintetizan los glucurónidos de los agonistas ß2 para administrarlos mediante inhalación a un modelo de conejillo de Indias del tipo inducido por antígeno el cual se emplea frecuentemente y de manera preferible ha mostrado una inhibición contráctil en las vías aéreas y subsecuentemente se mostrado claramente mediante el uso de ratas que el resultado de las investigaciones de los efectos laterales en la velocidad cardiaca y en la presión sanguínea que los glucurónidos de los agonistas ß2 no tienen efectos laterales, y por lo tanto han completado la presente invención. La presente invención provee un compuesto de la fórmula (1 ) R-Fármaco (1 ) (en donde R significa un sustituyante escindible con una enzima cuya actividad es diferente entre el sitio blanco del fármaco y el sitio que expresa los efectos laterales; y el fármaco es un fármaco a ser activado mediante la escisión del sustituyente con una enzima) o su sal fisiológicamente aceptable. Además, la presente invención provee un compuesto de fórmula (2) R'-Fármaco (2) (en donde R' significa un sustituyente escindible con la ß-glucuronidasa que existe a una aita actividad en los órganos respiratorios y a una baja actividad en el corazón; y fármaco significa un fármaco para que se activen los órganos respiratorios mediante la escisión del sustituyente con la enzima) o su sal fisiológicamente aceptable. Además, la presente invención provee una composición en fármaco que comprende una cantidad efectiva del compuesto de fórmula (1 ) o (2) junto con llenadores farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables, aditivos y/o otros compuestos activos y auxiliares. Además, la presente invención provee el uso del compuesto a ser representado por la fórmula (1) o (2) o su sal fisiológicamente aceptable para preparar una composición farmacéutica la cual es un profármaco que utiliza una enzima cuya actividad es diferente entre el sitio blanco del fármaco y el sitio para expresar efectos laterales y que expresa el efecto del fármaco solamente en el sitio blanco.

Aún más, la presente invención provee un método para preparar un agonista ß2 que tiene un azúcar como el sustituyente el cual comprende reaccionar un agonista ß2 que tiene un grupo hidroxilo con un derivado de haliduro de azúcar en cualesquiera de los solventes de acetona, acetonitrilo, dioxano, y tetrahidrofurano en la presencia de una base y someter el producto resultante a la desprotección mediante hidrólisis alcalina. Incluso adicionalmente, la presente invención provee un método para preparar un agonista ß2 que tiene un azúcar como el sustituyente cual comprende añadir un derivado de haliduro de bencilo a una mezcla que contiene un agonista ß2 que tiene una pluralidad de grupos hidroxilo y una base para proteger selectivamente a los grupos hidroxilo, posteriormente llevar a cabo una glicosilación, someter el intermediario a hidrólisis alcalina, y luego llevar a cabo hidrogenación. El compuesto representado por la fórmula (2) es un fármaco el cual se escinde en el epitelio de los bronquiolos de los pulmones y cuya forma activa directamente actúa sobre el músculo liso bronquial para exhibir el efecto del fármaco cuando se administra mediante inhalación y es un profármaco a ser escindido por la actividad de la ß-glucuronidasa principalmente derivada a partir del epitelio no por la actividad de la ß-glucuronidasa derivada a partir de la activación de las células mediante inflamación tales como los leucocitos.

Por lo tanto, la presente invención provee un método terapéutico para trastornos respiratorios el cual comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (2) R'-Fármaco (2) (en donde R' significa un sustituyente escindible con la ß-glucuronidasa que existe a una alta actividad en un órgano respiratorio y a una baja actividad en el corazón; y Fármaco significa un fármaco para que se activen los trastornos respiratorios mediante la escisión del sustituyente con la enzima) o su sal fisiológicamente aceptable a un paciente que necesite de terapia de trastornos respiratorios. En este método terapéutico, los broncodilatadores, agonistas ß2 y los similares se pueden ilustrar como los fármacos para órganos respiratorios y concretamente, se pueden mencionar salbutamol, salmeterol, mabuterol, clenbuterol, pirbuterol, procaterol, fenoterol, tulobuterol, formoterol, hexoprenalina, terbutalina, trimetoquinol, clorprenalina, orciprenalina, metoxifenamina, metilefedrina, efedrina, isoprenalina y los similares. Una modalidad preferible de la presente invención es un profármaco para órganos respiratorios que comprende O-glucurónido de un agonista ß2 el cual tiene un grupo hidroxilo, en particular, un grupo hidroxilo fenólico. Los ejemplos de dicho fármaco incluyen 3-0-(p-D-glucuronil)salbutamol, 3-O-^-D-glucuronil)salmeterol, 3-O-$-D-glucuronil) pirbuterol, 3-0- -D-glucuronil) fenoterol, 3-0-(p-D-glucuronil) tulobuterol, 4-0-(ß-D-glucuronil) formoterol, 3 ó 4-O-^-D-glucuronil) hexoprenalina, 3-?-(ß-?-glucuronil) terbutalina, 6 ó 7-0-^-D-glucuronil) trimetoquinol, 3-?-(ß-?- glucuronil) orciprenalina, 3 ó 4-0-(p-D-glucuronidasa) isoprenalina, y 8-0-(ß-D-glucuron¡l) procaterol. En la tecnología de la técnica precedente, se explicó en el párrafo de la técnica precedente, sin un invento incluyendo la inserción de un espaciador entre un fármaco y con ácido glucurónico, el glucurónido del fármaco podría no ser eficientemente descompuesto hacia el fármaco y el ácido glucurónico con la ß-glucuronidasa en la célula tumoral pero la presente invención- ha probado que sin insertar dicha secuencia espadadora, el fármaco de un glucurónido inhalado en el sitio local de los bronquiolos se descompone eficientemente. La presente invención no utiliza la actividad acelerada de la ß-glucuronidasa en el tejido tumoral y los tejidos inflamatorios pero ha sido completada mediante el hallazgo del tejido que tiene una actividad de ß-glucuronidasa muy alta en el estado normal. Puesto que existe una elevada actividad de la ß-glucuronidasa en el epitelio de los bronquiolos, se piensa que la inserción de un espaciador para llevar a cabo la descomposición eficiente no es necesario de manera inevitable sino que cualquier espaciador apropiado se puede insertar para bien de la simplicidad en el aspecto de la síntesis de un profármaco, seguridad y los similares. El compuesto obtenido mediante la inserción de dicho espaciador entre R y el Fármaco en la fórmula (1) o el compuesto obtenido mediante la inserción de dicho espacio entre R' y el Fármaco en la fórmula (2) se incluye en el alcance de la presente invención.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La figura 1 es una fotografía microscópica que muestra que la ß-glucuronidasa se localiza de manera importante en el epitelio bronquiolar de los pulmones del conejillo de Indias. La figura 2 es una gráfica que muestra la actividad de la ß-glucuronidasa en cada órgano de los conejillos de Indias. La figura 3 es una fotografía microscópica que no muestra el reconocimiento de la actividad de la ß-glucuronidasa en el corazón del conejillo de Indias. La figura 4 es una gráfica que muestra la inhibición del glucuronido salbutamoi sobre la reacción de contracción de las vías aéreas inducida por el antígeno en los conejillos de Indias. La figura 5 es una gráfica que muestra la inhibición del glucurónico ¡soprenalina sobre la reacción de contracción de las vías aéreas inducida por el antígeno en los conejillos de Indias. La figura 6 es una gráfica que muestra el efecto del glucurónico salbutamoi sobre la presión sanguínea y la velocidad cardiaca. La figura 7 es una gráfica que muestra el efecto del glucurónico ¡soprenalina sobre la presión sanguínea y la velocidad cardiaca.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención es un profármaco que utiliza una diferencia en actividad enzimática entre el sitio blanco y el sitio para expresar los efectos laterales el cual es diferente a partir de uno que utiliza la actividad enzimática acelerada en la célula cancerosa y el tejido inflamatorio o que utiliza la actividad enzimática poseída por la bacteria intestinal como se muestra en la técnica precedente. Por consiguiente, en la presente invención, el fármaco tiene que ser un fármaco cuyo sitio blanco es diferente a partir del sitio que expresa los efectos laterales. Particularmente, se prefiere el fármaco cuyo sitio para expresar los efectos laterales se especifica y restringe. Diversos agonistas y bloqueadores del receptor que tienen sitios restringidos en los cuales existen los receptores del sitio blanco y del sitio para expresar los efectos laterales están presentes y pueden ser los fármacos de la presente invención. Además, a partir de la necesidad del fármaco de la presente invención está unido a un sustituyente escindible con una enzima, se prefiere el fármaco que tiene una estructura química adecuada para la unión. Por ejemplo, en el caso de la unión de un azúcar escindible con una ß-glucuronidasa al fármaco, se prefieren los fármacos que tienen un grupo hidroxilo, un grupo amino, un grupo carboxilo y/o un grupo tiol. Especialmente el fármaco que tiene una estructura química que contiene un grupo hidroxilo, especialmente, un grupo hidroxilo fenólico es adecuado a partir del punto de la estabilidad del compuesto y facilidad de escisión mediante la glucuronidasa. Muchos de los agonistas ß2 tienen una estructura química que contiene un grupo hidroxilo, especialmente, un grupo hidroxilo fenólico y por lo tanto son adecuados para los fármacos de la presente invención. El sitio blanco significa células, tejidos, órganos y los similares en los cuales el fármaco exhibe el efecto del fármaco. Además, el sitio para expresar efectos laterales significa células, tejidos, órganos y los similares en los cuales el fármaco exhibe efectos desfavorables. En la presente invención, el órgano respiratorio significa las vías aéreas y los pulmones. Cuando el sitio blanco es el órgano respiratorio, los fármacos de la presente invención son fármacos terapéuticos a partir de trastornos tales como asma bronquial, asma infantil, bronquitis crónica, bronquitis aguda, neumonía, enfisema pulmonar, y tuberculosis pulmonar. Cuando el sitio para expresar los efectos laterales es el corazón, los fármacos de la presente invención son aquellos incluyendo, por ejemplo, los agonistas ß2 los cuales se dirigen hacia otros órganos diferentes al corazón y expresan efectos laterales en el corazón. En la presente invención, el broncodilatador significa un fármaco el cual directamente o indirectamente actúa sobre el músculo liso bronquial mediante la inhalación o una acción similar. En los bronquios, la ß-glucuronidasa se localiza en el epitelio de los bronquiolos y en los similares, y cuando el fármaco se libera en ese lugar, se permite que actúe efectivamente sobre el músculo liso inmediatamente bajo el epitelio. Puesto que los agonistas ß2 en la presente invención, salbutamol, salmeterol, mabuterol, clenbuterol, pirbuterol, procaterol, fenoterol, tulobuterol, formoterol, hexoprenalina, terbutalina, trimetoquinol, ciorprenalina, orciprenalina, metoxifenamina, metilefedrina, efedrina, isoprenalina y la similares se pueden ilustrar como los elementos representativos, y no solamente sus derivados sino que también se puede utilizar cualquier fármaco que tiene la acción ß2. Como las enzimas de la presente invención, se pueden ilustrar a las ß-glucuronidasa, glucosidasa, galactosidasa, N-acetil-D-glucosaminidasa, N-acetil-D-galactosaminidasa, manosidasa, y fucosidasa, y arilsulfatasa. En el caso de los agentes para los órganos respiratorios, se prefiere particularmente a la ß-glucuronidasa. Cuando las enzimas son las glicosidasas anteriormente descritas, se pueden ilustrar los azúcares a ser seleccionados a partir del ácido D-glucurónico, D-glucosa, D-galactosa, N-acetil-D-glucosamina, N-acetil-D-galactosamina, D-manosa, y L-fucosa y los similares como los monosacáridos en la presente invención, y se pueden ilustrar los oligosacáridos que consisten de dos a cinco de los monosacáridos anteriormente descritos los cuales están unidos entre sí a través de un enlace o ß-?-glicosídico. Normalmente, el enlace entre el monosacárido y el fármaco es un enlace a o ß-?-glicosídico. Cuando la enzima es la ß-glucuronidasa, se prefiere un enlace ß-glucuronilo. El sustituyente en la presente invención significa un residuo de azúcar escindible con una enzima, un grupo sulfato y los similares. Por ejemplo, cuando las enzimas son las enzimas glicosidasas, se pueden ilustrar como los residuos de azúcar al glucuronil, glucopiranosil, galactopiranosil, acetil-glucosamil, acetil-galactopiranosil, acetil-piranosil, manopiranosil, fucopiranosil y los similares. Sin la unión directamente de un fármaco al sustituyente, es posible unir el fármaco al ß-glucurónido como el activador la través de un espaciador como se muestra en J. Med. Chem., 2000, 43, 475. El espaciador es una estructura a ser colocada entre un fármaco y un sustituyente.

Preferiblemente el espaciador es aquel que se escinde químicamente o enzimáticamente en el órgano blanco para expresar rápidamente el compuesto parental. En este caso, se desea que el espaciador no sea selectivamente escindible, y que se utilice aquel que se descompone simplemente mediante hidrólisis y acciones similares. En la presente invención, se selecciona un órgano blanco que tiene una actividad enzimática alta, y por consiguiente el fármaco se libera completamente en el tejido blanco sin utilizar ningún espaciador como se muestra en los ejemplos. Por lo tanto, el espaciador no se requiere necesariamente sino que depende del fármaco, el órgano y la enzima a ser seleccionados, algunas veces es ventajoso del uso de un espaciador.

Cuando se realiza fácilmente la escisión con una enzima a través de un espaciador por el sustituyente que tiene una baja reactividad debido a su impedimento estérico, se puede considerar el efecto del espaciador para facilitar de conversión hacia el compuesto parental y los similares. No obstante, cuando se utiliza un espaciador, se vuelve necesario el que se aclaren de antemano las propiedades farmacológicas tales como la toxicidad del espaciador y sus metabolitos. Como los espaciadores, se utilizan ampliamente por un tiempo prolongado aquellos que son químicamente estables tales como un éster y un carbamoilo y finalmente se descomponen mediante una enzima para expresar rápidamente el compuesto parental (H. Bundgaard Ed., Design of Prodrugs, p. 262-269, 1985, Elsevier). Dependiendo de los fármacos, aquellos descritos en la Patente de E.U.A. No. 5,621 ,002 [familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 642799 y la Publicación de Patente Japonesa (Kokai) No. Hei 7-149667/1995]. También se puede utilizar la Patente de E.U.A. No. 5,935,995 [familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 795334 y la Publicación de Patente Japonesa (Kokai) No. Hei 10-1495/1998], y la Patente de E.U.A. No. 5,955,100 [familia de patentes: Solicitud de Patente Europea Número de Publicación 5935995, la Publicación de Patente Japonesa (Kokai) No. Hei 6-293665/1994] y las similares. Como la oposición de unión de un azucar o de un espaciador, se puede pensar en un grupo fenol, un grupo imino o un grupo amino en el ejemplo de los ß-agonistas. Una porción del azúcar o un grupo sulfato se encuentra directamente o indirectamente unido a estos sustituyentes como las marcas para formar un profármaco. Como los ejemplos concretos de los compuestos de la presente invención, se pueden ilustrar al 3-0-(ácido -D-glucurónico)-salbutamol, 4-0-(p-D-glucuronil)-isoprenalina, isoprenalina-4-O-sulfato y los similares. El método para la preparación de los primeros dos compuestos se presenta en los ejemplos. El último compuesto se prevé obtener mediante la reacción de la isoprenalina con un complejo de trióxido de azufre con trimetilamina. Se prefiere que el profármaco de la presente invención se utilice mediante administración local. La posibilidad de que otros sitios diferentes al sitio blanco y al sitio para expresar los efectos laterales sean susceptibles a la actividad enzimática disminuye mediante la administración local, y por lo tanto el profármaco de la presente invención se vuelve un profármaco más efectivo. En el caso de los agentes para órganos respiratorios, el profármaco preferiblemente se utiliza como la composición farmacéutica para inhalación. Cuando el profármaco se utiliza como inhalaciones, se puede utilizar cualquier aditivo que se utiliza de manera general en la composición farmacéutica para la inhalación como el aditivo para inhalación, y por ejemplo, se utiliza los propelentes,. llenadores sólidos, llenadores líquidos, aglutinantes, lubricantes, correctivos, conservadores, agentes estabilizantes, agentes para suspensión, agentes para dispersión, solventes, agentes para ajuste de la tonicidad, ajustadores de pH, agentes solubilizantes y los similares. Como los propelentes, se pueden utilizar propelentes de gas licuado, propelentes de gas comprimido y los similares. Además, la composición farmacéutica de la presente invención puede contener, como el componente activo, un componente fármaco además del profármaco de la presente invención. En la composición farmacéutica de la presente invención, el contenido del profármaco puede variar dependiendo del fármaco, el trastorno blanco, la edad y sexo del paciente sujeto, el estado del trastorno y los similares y es de aproximadamente 0.01 a 99.9% en peso, preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 50% en peso, más preferiblemente de aproximadamente 0.5 a 20% en peso basándose en la composición farmacéutica total. El contenido de los diversos aditivos tales como aditivos para inhalación puede variar dependiendo del trastorno blanco, la edad y sexo del paciente sujeto, el estado del trastorno y los similares y es de aproximadamente 0.1 a 99% en peso, preferiblemente de aproximadamente 10 a 99% en peso, más preferiblemente de aproximadamente 50 a alrededor de 99% en peso, particularmente de manera preferible de aproximadamente 70 a aproximadamente 99% en peso. Cuando la composición farmacéutica de la presente invención se utiliza como inhalaciones, ésta se puede elaborar hacia inhalaciones en polvo, suspensiones para inhalación, soluciones para inhalación o inhalaciones encapsuladas mediante el uso de métodos convencionales y se pueden aplicar mediante un inhalador apropiado en el uso, y particularmente las inhalaciones en polvo se utilizan de manera preferible. Además, la composición farmacéutica de la presente invención se puede utilizar como aerosoles. Cuando se utiliza la composición farmacéutica de la presente invención, se pueden utilizar los inhaladores comercialmente disponibles como los dispositivos a ser utilizados en esta aplicación. Por ejemplo, se pueden ilustrar el VENTOLIN ROTACAPS (Glaxo), SPENHALER (marca registrada, Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd.). INTAL SPINCAPS (Fisons), ATROVENT AND BEROTEC INHALETTEN (Boehringer Ingelheim), FORADIL (Ciba), BENTODISKS (Glaxo), Pavlyzer (marca registrada, Teijin Ltd.), BRICANYL TURBUHALER (Astra), IAT INSUFFLATOR y los similares. El profármaco de la presente invención solamente está unido a un azúcar y a los similares como el sustituyente los cuales se metabolizan normalmente de manera segura en el cuerpo, y por lo tanto es baja la posibilidad de que su toxicidad se vuelva más alta que la toxicidad del fármaco como tal. El profármaco es adecuado en el uso para la administración local, y por lo tanto se puede emplear con una dosis mínima efectiva y se puede evitar una dosis más grande generalizada. Por consiguiente, incluso los niños pueden ser dosificados de manera fácil y segura. Particularmente cuando el profármaco se elabora en inhaladores y aerosoles, se pueden exhibir acciones y efectos locales remarcables. No se necesita decir, que la administración del profármaco de la presente invención tal como en un administración intravenosa y en una administración intramuscular ocasiona una gran mejoría de la seguridad que la administración de un fármaco per se sin utilizar el profármaco del mismo. Por ejemplo, en el caso de emergencia de un ataque asmático, puede ser necesaria la administración intravenosa de un agonista ß2. En dicho caso, puesto que la actividad glucuronidasa es menor en el corazón, los efectos laterales de un agonista p2 en el corazón disminuyen más remarcablemente mediante la administración del profármaco que mediante la administración del fármaco per se. La dosis de la composición farmacéutica en la presente invención puede variar dependiendo del fármaco, el trastorno blanco, la edad, el peso, el estado del trastorno, la ruta de administración, el número de administraciones y los similares y, por ejemplo, en el caso de los agonistas ß2, se puede exhibir casi el mismo efecto que con la dosis de un fármaco activo antes de elaborar su profármaco. Como el método para preparar el profármaco de la presente invención, existe la glicosilación basada en química orgánica y glicosilación enzimática. Por ejemplo, un derivado de azúcar cuyos grupos hidroxilo han sido protegidos se somete a la reacción de glicosilación representada por la reacción de Koenigs-Knorr (Advances in Carbohydrate Chem. and Biochem., 57, 207, 2001 , Academic Press) para formar un enlace glicosídico deseado, y luego se lleva a cabo la desprotección para obtener un profármaco blanco. Mediante el método enzimático también (KISO TO RINSHOU, 30, 2403, 1996), se puede obtener el mismo resultado mediante la combinación de una glucosiltransferasa con un derivado de azúcar UDP.

EJEMPLOS La presente invención se explicará a continuación con más detalle mediante los ejemplos. La presente invención no se limita en ningún sentido por estos ejemplos.

EJEMPLO 1 Preparación del salbutamol glucurónído P-O-fB-D-glucuronil)- salbutamoll (compuesto del ejemplo 1) (1) Preparación del alcohol 2-(4-metoxibencilox¡)-5-(2-(N-ter-butilamino)-1-(4-metoxibenciloxQetiD bencílico A una mezcla de 1.466 g de salbutamol, 25 mg de Nal, y 5 mL de tetrahidrofurano (THF), se le añadieron 250 mg de NaH poco a poco a-78°C. La mezcla resultante se agitó a 0°C por 15 minutos, luego se añadieron 1.125 g de cloruro dé p-metoxibencilo (cloruro de p- eO-bencilo) a-78°C, y subsecuentemente se agitó a temperatura ambiente por 16 horas. A la mezcla de reacción se le añadió acetona y se filtró, y el filtrado se concentró, y luego se sometió a cromatografía en columna para obtener 1.20 g (59%) de una sustancia blanco.

RMN (CDCI3): 1.19 (9H, s), 2.60 (2H, m), 2.62 (2H, m), 3.53 (1H, d, J = 10 Hz), 3.81 (6H, s), 3.88 (1 H, d, J = 10 Hz), 3.93 (1H, m), 4.60-4.70 (2H, m), 4.99 (1 H, s), 7.2-7.8 (1 H, m) (2) Glicosilación v desprotección A 4 mL de diclorometano se le añadieron 1.04 g de alcohol 2-(4-metox¡bencilox¡)-5-(2-(N-ter-butilamino)-1 -(4-metoxibenciloxi) etil) bencílico, 1.50 g de metil éster del ácido acetobromoglucurónico (metil éster del ácido bromo-2,3,4-tri-0-acetil-p-glucopiranurónico), 1.577 g de carbonato de plata, y .57 g de MS4A y se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. La solución de reacción se filtró con Celite y el filtrado se concentró, y luego se separó mediante cromatografía en columna para obtener 1.68 g (82%) de un producto sin purificar. Este producto se disolvió con metanol (MeOH)-THF (5 mL, una mezcla 2:3), se le añadió NaOH al 20% (2.59 mL) y se agitó temperatura ambiente por una hora. La reacción se confirmó mediante cromatografía en capa fina (CCF) [a una relación de acetato de etilo (AcOEt) a n-hexano (n-Hex) de 1/2), y el producto de reacción se neutralizó con ácido acético bajo enfriamiento con hielo. Al producto resultante se le añadió Pd-C (100 mg) y se hidrogenó (a temperatura ambiente, durante toda la noche). La solución de reacción se filtró, y luego el filtrado se concentró y se sometió a cromatografía en columna LH-20 para separar 138 mg (12%) de una sustancia blanco (compuesto del ejemplo 1 ).

RMN (DMSO-de): 1.25 (9H, s), 2.80-2.94 (2H, m), 3.05-3.35 (4H, m), 4.25 (1H, m), 4.60 (1 H, m), 4.76 (1 H, d, J = 10 Hz), 4.78 (1H, d, J = 8.8 Hz), 6.80 (1H, d, J = 8.2 Hz), 7.12 ( H, dd, J = 8.2 Hz & 1.6 Hz), 7.44 (1 H, d, J = 1.6 Hz) IR (KBr, crrf1): 3402, 2980, 1617, 1509, 1406, 276, 1200, 1118, 1074 EJEMPLO 2 Preparación de isoprenalina qlucurónido F4-Q-(B-D-glucuronil) isoprenalinal (compuesto del ejemplo 2) A una mezcla de 1.00 g de clorhidrato de isoprenalina y NaOH 1 N (4.00 mL), 4.16 mL de acetona que disolvía 1.28 g de metil éster del ácido bromo-2,3,4-tri-O-acetil-p-D-glucopiranurón¡co se le añadió poco a poco a 0°C y se dejó reposará temperatura ambiente. La reacción se llevó a cabo por dos días a temperatura ambiente mientras que se mantenía el pH en la vecindad de 7 con la adición del NaOH 1N de tiempo en tiempo. La solución de reacción se concentró, luego se le añadió NaOH al 20% (2 mL) y se agitó temperatura ambiente por 30 minutos. La solución resultante se enfrió, y luego se le añadió cuidadosamente ácido acético para volver el pH de 2 a 3, y se separó mediante una columna HP-20, y subsecuentemente se separó de manera adicional con una columna LH-20 para obtener el compuesto del ejemplo 2. El rendimiento fue de 81 mg (5.2%). RMN (DMSO-d6): 1.22 (6H, d, J = 6.5 Hz), 2.82-2.96 (2H, m), 3.05-3.35 (4H, m), 3.30 (1 H, m), 4.70 (1 H, brs), 4.70 (1 H, m), 6.80-7.50 (3H, m) IR (KBr, cm-1): 3402, 1617, 1509, 1400, 1287, 1068 EJEMPLO 3 Preparación de alcohol 3-(B-D-qlucuroniloxi)metil-4-hidroxi- -iT(4-metoxi- g-metilfen¡letil)amino1metil>bencílico El compuesto del título se obtuvo mediante el mismo procedimiento que en el ejemplo 1. RMN (DMSO-de): 0.90 (3H, d, J = 6.21 Hz), 2.82-2.96 (2H, m), 3.05-3.35 (4H, m), 3.30 (1 H, m), 3.71 (3H, s), 4.45 (1 H, brs), 4.47 ( H, m), 6.60-7.30 (7H, m) EJEMPLO 4 Actividad farmacológica del agonista ß2 qlucurónido 1. Método de prueba Con el objeto de examinar el efecto de broncodilatación de los glucurónidos de salbutamol e isoprenalina de los agonistas ß2, se utilizó un modelo asmático de un conejillo de Indias sensibilizado con ovalbúmina. La prueba se llevó a cabo de conformidad con el método de Konzett y Rossier (Arch. Exp. Pathol. Pharmakol., 195, 71-75, 1940).

Sensibilización Al día 1 y al día 8 después del inicio de la sensibilización, se administraron ¡ntramuscularmente 500 µg/0.5 mL de ovalbúmina a ambas piernas de un conejillo de Indias y se administraron intraperitonealmente 1.5x103 células/mL/animan de vacuna de tos ferina para llevar a cabo la sensibilización activa. Al día 15 después del Inicio de la sensibilización, se administraron intradérmicamente 10 y 100 9 3?*??? de ovalbúmina en la parte posterior del conejillo de Indias, respectivamente, para probar el estado de sensibilización. Solamente los animales que se encontraron positivos al monitoreo de la sensibilización 6 horas después de la sensibilización intradérmica se utilizaron en el experimento.

Método de administración Como la sustancia prueba, se atomizó una solución del fármaco mediante la reducción de la cantidad atomizante de un nebulizador ultrasónico para generar un aerosol, y el aerosol se colocó posteriormente dentro de una cámara de exposición (M.l.P.S. Co.), se absorbió a una velocidad de 3 L/minuto con el uso de una bomba de aire (SPP-3GA, Techno Takatsuki Co.) y se administró al conejillo de Indias por 10 minutos mediante inhalación 40 minutos antes de la prueba de ovalbúmina.

Medición de la presión de vías aéreas Del día 10 al 23 después del inicio de la sensibilización, los animales fueron anestesiados con pentobarbital sódico (50 mg/kg, i.p.), y se llevó a cabo la canulación dentro de la tráquea. A través de la cánula traqueal los animales se conectaron a un respirador artificial y el cambio en la presión de ventilación bajo respiración artificial (una cantidad de ventilación de 10 mL/kg, una frecuencia de ventilación de 50 veces/minuto) se registró como la presión de vías aéreas a través de un transductor de presión diferencial (Validyne, Gould Electronics) conectado a la cánula traqueal en un aparato de registro (WT-645G, Nihon Koden Co., Ltd.). La presión de las vías aéreas se midió hasta por 10 minutos después de la administración de ovalbúmina. Luego, una canulación se llevó a cabo dentro de las venas carotídeas comunes derecha e izquierda. A partir de la canulación izquierda, se introdujo intravenosamente galamina (10 mg/mL) en un volumen de 1 mL/kg (300 µg/kg) para confirmar la desaparición de la respiración espontánea. Posteriormente, la ovalbúmina se administró intravenosamente para inducir una reacción antígeno-anticuerpo. Los puntos de medición de la presión de las vías aéreas se establecieron a un tiempo después de la inducción, y la 1 , 3, 5, 7, y 10 minutos después de la inducción. La relación del incremento en la presión de las vías aéreas se representó por el porcentaje de los valores obtenidos por la sustracción del valor observado antes de la inducción a partir del valor observado en cada tiempo de medición después de la inducción basado en una oclusión máxima en cada tiempo de medición.

Materiales de prueba Como las sustancias prueba, se utilizaron glucurónido de salbutamol y glucurónido de isoprenalina. El glucurónido de salbutamol es un polvo blanco y el glucurónido de isoprenalina es un cristal casi y ambos se almacenaron a -80°C bajo protección de la luz. Como las sustancias control para comparación, se utilizaron cada uno de los cloruros de salbutamol (en adelante refirió como sulbutamol) y cloruro de isoprenalina (en adelante referida como isoprenalina). El salbutamol y la isoprenalina son polvos blancos y se almacenaron a temperatura ambiente bajo protección de la luz. Las sustancias prueba y las sustancias control para comparación fueron pesadas en una cantidad necesaria y se disolvieron en solución salina fisiológica (productos de Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc., números de lote 1D78 y 1 E84) para llevar a cabo la preparación antes del uso. Las concentraciones de las sustancias prueba y las sustancias control para comparación en las soluciones se volvieron cantidades equivalentes mediante concentración molar. Todas las soluciones fueron casi estables a temperatura ambiente por 24 horas. Además, el glucurónido de salbutamol y el glucurónido de ¡soprenalina se utilizaron dentro de los 30 primeros minutos después de la preparación. Además, se utilizaron la ovalbúmina (OVA, un producto de Sigma Chemical Company, números de lote 120K7001 ), galamina (trietyoduro de galamina, Sigma Chemical Company, números de lote 76H1 106), pentobarbital sódico (Tokyo Chemical Company, número de lote GI01), vacuna de tos ferina (Wako Puré Chemical Industries, Ltd., número de lote SEK7880), y solución salina fisiológica (Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc., números de lotes ID78 y 1 E84). La constitución de cada grupo de prueba se muestra en el cuadro 1.

CUADRO 1 Grupo prueba Ruta de Concentración Tiempo de Número de administración del fármaco inhalación animales (%) usados Control Inhalación 0 10 minutos 8 Salbutamol Inhalación 0.05 10 minutos 8 Glucurónido Inhalación 0.072 10 minutos 8 de salbutamol Isoprenalina Inhalación 0.1 0 minutos 8 Glucurónido Inhalación 0.157 10 minutos 8 de isoprenalina Método de tratamiento del análisis estadístico Los resultados experimentales obtenidos se muestran como valores medios y desviaciones estándares con respecto a la presión de las vías aéreas. Para probar la importancia, se llevó a cabo la prueba de t de Student sin ninguna correspondencia cuando se compararon dos grupos. Cuando se compararon grupos múltiples, se llevó a cabo la prueba múltiple de Dunnett. En cualquier método el estándar de importancia se observó como del 5%. La relación de inhibición de cada sustancia prueba en contra del incremento de la resistencia de las vías aéreas se calculó como la relación de inhibición en contra del grupo control cuando la relación de inhibición del grupo control se observó como del 0%. 2. Resultado Los resultados del examen de los efectos del salbutamol y del glucurónido de salbutamol sobre la reacción asmática tipo inmediata inducida por antígeno se muestran en la figura 4. Los resultados se muestran mediante una relación en incremento basada en la presión de las vías aéreas antes de la administración (pre) del antígeno de ovalbúmina como se describió en el método. El término "pre" en la figura indica el punto de tiempo cuando se administró la galamina y se permitió que desapareciera la tensión espontánea para estabilizar las vías aéreas lo cual significó que se inició aproximadamente 5 a 10 minutos antes de la administración de la ovalbúmina. Con el grupo control de los conejillos de Indias en los cuales se indujo la reacción antígeno-anticuerpo mediante la administración intravenosa de ovalbúmina, la presión de las vías aéreas se incrementó rápidamente un minutos después de la inducción del antígeno y mostró un incremento máximo de aproximadamente 44% en tres minutos. Con el grupo de conejillos de Indias a los que se les dejó inhalar salbutamol a una concentración de 0.05%, se observó un incremento en la presión de las vías aéreas de aproximadamente 3% dentro de los primeros tres minutos después de la inducción del antígeno para inhibir fuertemente el incremento de la presión de las vías aéreas. Este resultado mostró una inhibición significativa de aproximadamente 92% en comparación con el grupo control por otra parte, el grupo que se permitió que inhalara glucurónido de salbutamol a una concentración de 0.072% también mostró una relación en incremento de aproximadamente 20% después de tres minutos para inhibir fuertemente el incremento de la presión de las vías aéreas. Este resultado mostró una inhibición significativa de aproximadamente 56% en comparación con el grupo control. Por otra parte, los resultados para examinar los efectos de la isoprenalina y del glucurónido de isoprenalina sobre la reacción asmática tipo inmediata inducida por antígeno se muestran en la figura 5. Las condiciones experimentales y la presentación de los resultados son los mismos que en el caso del salbutamol. El grupo al que se le permitió inhalar isoprenalina a una concentración de 0.1% mostró un incremento en la presión de las vías aéreas de aproximadamente 12% tres minutos después de la inducción del antígeno para inhibir fuertemente el incremento de la presión de las vías aéreas. Este resultado mostró una inhibición significativa de aproximadamente 73% en comparación con el grupo control. Por otra parte, el grupo al que se le permitió inhalar glucurónido de isoprenalina a una concentración de 0.157% también mostró una relación en incremento de aproximadamente 10% después de tres minutos para inhibir fuertemente el incremento de la presión de las vías aéreas. Este resultado mostró una inhibición significativa de aproximadamente 77% en comparación con el grupo control. A partir de lo anterior se ha aclarado que el glucurónido de salbutamol y el glucurónido de isoprenalina pueden inhibir significativamente la reacción asmática tipo inmediata de los conejillos de Indias mediante administración por inhalación. A partir de este resultado y del resultado (figura 1) de que la actividad de la ß-glucuronidasa está presente de manera evidente en el epitelio bronquiolar, se puede pensar que el glucurónido de salbutamol y el glucurónido de isoprenalina entran a la tráquea mediante la administración por inhalación y son hidrolizados con la ß-glucuronidasa en la vecindad de los bronquiolos de los pulmones y se convierten hacia las formas activas de salbutamol e isoprenalina para exhibir un efecto anti-asmático.

EJEMPLO 5 Influencia del agonista ß2 qlucurónido sobre tos efectos laterales Mediante el uso de los agonistas ß2 de la isoprenalina y del salbutamol, se confirmó la influencia de estos agonistas ß2 y sus glucurónidos (ejemplo 1 y ejemplo 2) en el corazón. 1. Método de prueba El método se llevó a cabo mediante el uso de ratas Crj:CD (SD) con cada grupo de 6 ratas.

Inhibición de la presión sanguínea y de la velocidad cardiaca La cirugía se llevó a cabo bajo la anestesia con un gas mezclado de oxígeno, oxido nitroso e isoflurano, y un extremo del tubo de poiietileno (PE50, Becton Dickinson) se llenó con solución salina fisiológica que contenía heparina (100 U/mL) se insertó dentro de una arteria carótida común y se infló, y el otro extremo se pasó a través de la vecindad del cuello de la parte trasera del animal y se conectó a una cánula (Instec Co.) instalada en la porción superior de una cámara de exposición. Esta cánula se conectó a un transductor de la presión (P23XL, Gould Electronics) a través de un tubo de poiietileno. Además, la periferia del tubo de poiietileno a partir de la parte trasera de la rata hasta esta cánula se pasó a través de un resorte metálico para prevenir que se ocasionara un daño por la rata.

La administración de los fármacos se llevó a cabo mediante la preparación de una cámara de exposición y sometiendo a la rata con una cánula para medir la presión sanguínea en el estado hinchado en la arteria carótida común hasta la exposición generalizada de la inhalación. Este método se utilizó típicamente en la exposición generalizada de la inhalación. Las señales a partir del transductor de la presión (P23XL, Gould Electronics) se dirigieron a un condicionador de la señal de procesamiento de la presión (Gould Electronics) y se registró en un registro de arreglo térmico (RS3400, Gould Electronics). La presión sanguínea y la velocidad cardiaca se registraron continuamente desde antes del inicio de la administración hasta 20 minutos después del término de la administración. La administración de los fármacos se inició cuando no había pasado menos de una hora después de la vigilia y los parámetros de medición fueron estabilizados.

Materiales de prueba Las sustancias de prueba se prepararon de la misma manera que en el ejemplo 1. La constitución de cada grupo de prueba se muestra en el cuadro 2.

CUADRO 2 Análisis estadístico del método de tratamiento Los valores representativos de cada grupo se muestra por valores medios [desviación estándar (S.E.)]. Con los valores medios de cada grupo, la prueba de importancia se llevó a cabo mediante la prueba múltiple de Tukey. Además, la importancia estándar se observó como del 5%. 2. Resultados Los resultados del examen de los efectos del salbutamoi y del glucurónido de salbutamoi en la función cardiaca, particularmente en la presión sanguínea/velocidad cardiaca se muestran en la figura 6. Además, el término "pre" en la figura significa inmediatamente antes del inicio de la administración de los fármacos mediante inhalación. Inmediatamente después de la administración del salbutamol mediante inhalación, se reconocieron la disminución de la presión sanguínea y el incremento de la velocidad cardiaca. Cinco minutos después del término de la inhalación, se observó la disminución de la presión sanguínea a 75 mmHg, y esta disminución fue una disminución de aproximadamente 26% de la presión sanguínea antes de la inhalación (pre). Además, con la velocidad cardiaca, se reconoció la misma tendencia, y después de cinco minutos se observó un incremento de un máximo de aproximadamente 36%. La relación de disminución de presión sanguínea máxima y la relación de incremento de la velocidad cardiaca máxima durante 30 minutos de la medición en el tiempo fueron 27% y 39%, respectivamente. Por lo tanto, se ha vuelto evidente que la inhalación de salbutamol afecta de manera remarcable a la presión sanguínea y a la velocidad cardiaca. En contraste con esto, como el resultado de la primera prueba conducida mediante el uso del glucurónido salbutamol, no se observó ningún efecto del todo en el grupo control (inhalación de una solución salina fisiológica). Por otra parte, con la ¡soprenalina, inmediatamente después de la administración mediante inhalación, la disminución de la presión sanguínea y el incremento de la velocidad cardiaca se reconocieron como en el caso del salbutamol, y cinco minutos después del término de la inhalación, se observó la disminución de la presión sanguínea a 72 mmHg y esta disminución fue una disminución de aproximadamente 27% antes del tratamiento. Además, con la velocidad cardiaca, se reconoció la misma tendencia, y después de cinco minutos se observó un incremento en la velocidad cardiaca de aproximadamente 49% (figura 7). La disminución máxima de la presión sanguínea y del incremento máximo de la velocidad cardiaca durante 30 minutos de la medición en el tiempo fueron del 28% y del 50%, respectivamente. Por lo tanto, es evidente que la inhalación de isoprenaiina afecta de manera remarcable a la presión sanguínea y a la velocidad cardiaca. En contraste con esto, como el resultado de llevar a cabo la misma prueba con el uso de glucurónido de isoprenaiina no se reconoció ningún efecto del todo en el caso del grupo control. Se sabe que especialmente la isoprenaiina tiene una acción ß? y fuertes efectos laterales en el corazón. Se ha mostrado que la presente invención permite la remoción completa del efecto que posee un agonista ß2 en el corazón mediante el uso del glucurónido agonista p2- Estos resultados han elucidado que los glucurónidos de salbutamol y la isoprenaiina permite que desaparezcan los efectos laterales severos de salbutamol y de la isoprenaiina sobre la presión sanguínea/velocidad cardiaca.

EJEMPLO DE REFERENCIA 1 La presente invención se explicó mediante el uso del salbutamol y de la isoprenaiina la cual pertenece a los agonistas ß como ejemplos pero este concepto presenta un ejemplo que no muestra solamente estos dos componentes en los ejemplos sino que también otros compuestos que tienen estructuras completamente diferentes a las mismas que exhiben la misma tendencia, es decir, los fármacos glucuronidados se pueden hidrolizar en el tejido blanco para expresar la actividad de los fármacos. La 1 1-etil-7,9-dih¡droxi-10,11-d¡hidrobenzo[b,f]tiep¡na es un compuesto el cual muestra un efecto en la prueba in vitro Para la inhibición de la contracción con el uso de un músculo liso. La contracción del músculo liso inducida en la muestra de músculo liso traqueal de un cerdo con una elevada concentración de KCI o carbacol se inhibe con una IC50 de aproximadamente 5 µ?. En la administración oral de este compuesto, el modelo asmático inmediato (en el mismo sistema experimental como en el ejemplo 3) mostró la inhibición de la contracción de las vías aéreas con 10 mg/kg. Por lo tanto, se iniciaron las investigaciones con relación al metabolismo del presente compuesto, y se encontró que este compuesto se adsorbió después de la administración oral y se sometió rápidamente a glucuronidación. En los ratones, ratas, conejillos de Indias, perros, y monos, como el resultados del análisis sanguíneo después de la administración, no menos del 99% del compuesto fue el resultados glucurónico en ninguno de las especies animales. A partir este resultado, su O-glucurónido se sintetizó en consideración de la posibilidad de que la actividad pudiera existir en el conjugado. El O-glucurónido sintetizado no mostró efecto en la prueba de inhibición de la contracción in vitro utilizando el músculo liso como se describió anteriormente. Por otra parte, cuando el efecto del O-glucurónido se confirmó mediante el uso del modelo sensibilizado de un conejillo de Indias mediante la administración intravenosa como se describió anteriormente, se pudo confirmar la inhibición de la contracción de las vías aéreas. Esto se puede asumir debido al resultado de que el O-glucurónido intravenosamente administrado alcanzó los tejidos pulmonares y luego se hidrolizó para regresar a su forma original sin cambio para exhibir la inhibición de la contracción de las vías aéreas. Por lo tanto, incluso con el compuesto que tiene una estructura completamente diferente a partir de los agonistas ß, el reconocimiento del mismo resultado como en el caso de los agonistas ß muestra fuertemente la posibilidad de que el compuesto glucuronidado se hidroliza eficientemente en los pulmones para expresar la actividad. A continuación las figuras 1 , 2, y 3 se explican en el párrafo "modos de resolver los problemas" que se explicará con más detalle.

EJEMPLO DE REFERENCIA 2 Figura 1 : localización de la ß-qlucuronidasa en los pulmones La localización de la ß-glucuronidasa en los pulmones y en el corazón se analizó con el uso de una técnica histoquímica enzimática. 1. Método de prueba Se preparó un espécimen de tejido de un pulmón de un conejillo de Indias, y la tinción vital se llevó a cabo con el uso de sustrato de ß-glucurónido naftol AS-BI para la ß-glucuronidasa de conformidad con el método de Fishman et al. (J. Hist. Cytochem., 12, 298-305, 1984). El pulmón removido se fijó con una solución de paraformaldehído al 4% para preparar una sección congelada de 4 a 6 µ?? mediante un criostato. La solución de sustrato se preparó mediante la adición y disolución de 28 mg de ß-glucurónido naftol AS-BI en .2 ml_ de bicarbonato de sodio 0.05M y se añadió regulador de pH de ácido acético 0.2N/acetato de sodio (pH 5) a la solución resultante hasta 100 mL. La solución para tinción se preparó mediante la adición del 0.3 mL de un fluido de pararosanilina a 0.3 mL de una solución de nitrito de sodio al 4% para realizar la diazotización, añadiendo 10 mi de la solución para el sustrato a la solución resultante para ajustar el pH a 5.2, luego añadiendo hasta 20 mi de agua destilada a la solución obtenida, y finalmente filtrando la solución resultante con un papel filtro. La solución para tinción se colocó en la sección para llevar a cabo la reacción a 37°C por dos horas. Después de la reacción, la sección se lavó, se deshidrató, y se selló de conformidad con el método convencional. 2. Resultados El resultado de la preparación de una sección congelada y de someter el tejido a la tinción vital mediante la actividad de la ß-glucuronldasa se muestra en la figura 1. Como se muestra en la figura 1 , se reconocieron imágenes fuertemente positivas en el epitelio bronquiolar del pulmón (regiones mostradas por A en la figura) y los macrófagos alveolares (C en la figura) (una porción que se muestra como teñida en negro muestra la actividad de la ß-glucuronidasa). Se reportó que la ß-glucuronidasa de los macrófagos alveolares es alta (Hayashi, J. Histochem. Cytochem., 15, 83-92, 1967 y Barry y Robinson, Histochem. J., 1 , 505-515, 1969) pero no se ha encontrado ningún reporte de que la ß-glucuronidasa se localice en el epitelio que constituye a los bronquiolos. Se ha mostrado que la ß glucuronidasa que expresa particularmente fuerte en las regiones que tienen contacto con la parte extema de los bronquiolos de los pulmones. Se ha sugerido la posibilidad de que un grupo de células la cual participa más generalmente en la actividad de la ß-glucuronidasa de los pulmones no pertenezca a las células del sistema inflamatorio sino al epitelio bronquiolar.

EJEMPLO DE REFERENCIA 3 Figura 2: examen con relación a la actividad de la ß-glucuronidasa en cada órgano Con el objeto de investigar el nivel de la actividad de la ß glucuronidasa en cada órgano y la variación de esta actividad enzimática en un modelo animal asmático, se preparó un conejillo de Indias sensibilizado como se estableció en el modelo asmático inmediato, y la actividad enzimática de cada órgano se comparó con aquella del conejillo de Indias no sensibilizado. Además, con el conejillo de Indias sensibilizado, la actividad enzimática en un individuo inducido con el antígeno se comparó con la de un individuo no inducido con un antígeno. 1. Método de prueba Sensibilización La sensibilización se llegó a cabo activamente mediante la administración intramuscular de 500 µg/0.5 mL de ovalbúmina (OVA) a ambas piernas de un conejillo de Indias macho Hartley estándar de seis semanas de edad al día 1 y al día 8 después del inicio de la sensibilización, y la administración intraperitoneal de 1.5 x 103 células/mL/animal de vacuna de tos ferina.

Inducción del antígeno Del día 19 hasta el día 23 después de la primera sensibilización, al conejillo de indias sensibilizado se le dejó inhalar una solución de OVA al 2% por cinco minutos para ocasionar la inducción del antígeno. Cuatro horas después de la inducción, cada órgano fue recuperado.

Medición de la actividad de la ß-qlucuronidasa A partir de tres grupos de un grupo de conejillo de Indias no sensibilizados, y un grupo inducido por el antígeno de los conejillo de Indias sensibilizados (dos individuos en cada grupo), cada órgano fue removido, se le añadió solución salina en una cantidad 50 veces el volumen del órgano, de homogeneizó, y se sometió a centrifugación en frío a 4°C a 12,000 rpm por 10 minutos para obtener un sobrenadante líquido como la muestra. La actividad de la ß-glucuronidasa en cada muestra se midió mediante colorimetría de un p-nitrofenol liberado a 405 nm con el uso de p-nitrofenil-p-D-glucurónido como el sustrato de conformidad con el método convencional (Haeberlin et al., Pharmaceutical Res., 10, 1553-1562, 1993). La concentración de proteína en cada muestra se midió con el uso de un equipo comercialmente disponible. La actividad específica de la ß-glucuronidasa se mostró como la masa del producto de reacción a ser liberada por mg de la proteína por minuto. La actividad específica de cada órgano se mostró mediante el valor medio. 2. Resultados La actividad de la ß glucuronidasa en cada órgano de los tres grupos de un grupo de conejillo de Indias no sensibilizados, un grupo de conejillo de Indias sensibilizados, y uri grupo inducido con antígeno de conejillo de Indias sensibilizados se muestra en la figura 2. Las actividades de la ß-glucuronidasa en cada órgano de un grupo de conejillo de Indias no sensibilizados mostró valores elevados en los pulmones (15 nanomoles/mg/minuto), el hígado (20.7 nanomoles/mg/minuto), y el bazo (14.2 nanomoles/mg/minuto) y valores bajos en el corazón (1.9 nanomoles/mg/minuto), el cerebro (2.6 nanomoles/mg/minuto) y el músculo (1.2 nanomoles/mg/m¡nuto). Este resultado mostró la misma tendencia de los reportes de las actividades enzimática en cada órgano de ratas, ratones y los similares (Conchie et al., Biochem. J. 71, 318-325, 1959, Johnson et al., Biochemical Genetics 24, 891-909, 1986, y Hoogerfrugge et al., Transplantation 43, 609-614, 987) que hasta la fecha han sido reportados. Por otra parte, en el grupo de los conejillos de Indias sensibilizados, no se reconoció ninguna diferencia en las actividades enzimática en cada órgano en comparación con aquellas en el grupo de los conejillo de Indias no sensibilizados. Este resultado sugiere que en el estado sensibilizado las actividades enzimáticas en cada órgano no son afectadas como en el caso de la insensibilización. Además, no se reconocieron diferencias remarcables en las actividades enzimáticas en cada órgano incluso en el grupo inducido con antígeno de conejillo de Indias sensibilizados en comparación con aquellas en el grupo de conejillo de Indias no sensibilizados y en el grupo no inducido con antígeno de conejillos de Indias sensibilizados. Se ha confirmado a partir de estos resultados que los pulmones son los tejidos que tienen una muy alta actividad de la ß-glucuronidasa y la ß-glucuronidasa en el tejido pulmonar no incrementa en el modelo asmático mediante sensibilización del antígeno.

EJEMPLO DE REFERENCIA 4 Figura 3: Localización de la B-glucuronidasa en el corazón 1. Método de prueba El método de prueba es el mismo como el que se describió en la figura 1: Localización de la ß-glucuronidasa en los pulmones. Los núcleos celulares se tiñeron con hematoxilina y se contratiñeron. 2. Resultados Una sección congelada del corazón se preparó, y el resultado de la tinción vital del tejido mediante la actividad de la ß-glucuronidasa se muestra en la figura 3. Como se muestra en la figura 3, en la sección del corazón de los conejillos de Indias, no se observó ninguna imagen positiva que mostrara la actividad de la ß-glucuronidasa .

Aplicabilidad industrial La presente invención puede proveer un profármaco capaz de reducir los efectos laterales de un fármaco en órganos no blanco mediante el uso de una actividad enzimática que tiene una diferencia de la actividad entre el sitio blanco del fármaco y el sitio para expresar los efectos laterales. La presente invención ha permitido la provisión de agonistas ß2 los cuales no expresan los efectos laterales en el corazón. Además, la presente invención ha permitido el uso de agonistas ß2 a un paciente el cual tuvo una enfermedad cardiaca la cual limitó el uso de agonistas ß2·

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- Un profármaco para reducir los efectos laterales de un fármaco, caracterizado porque se considera el sitio de los efectos laterales expresado por el fármaco, el sitio blanco del cual es un órgano que tiene células epidérmicas, en las cuales la glicosidasa se localiza a una alta concentración en el estado normal, en el caso en donde la actividad glicosidasa del sitio de los efectos laterales es baja en el estado normal, un grupo funcional escindible por la glicosidasa se une al fármaco por lo tanto reduciendo los efectos laterales de dicho fármaco.

2. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glicosilo de un monosacárido o de un oligosacárido.

3. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la glicosidasa es ß-glucuronidasa.

4. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo.

5.- El profármaco de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque el enlace entre el grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß.

6. - El profármaco de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico.

7. - Un profármaco para reducir los efectos laterales de un fármaco para un órgano respiratorio, caracterizado porque se considera el sitio de los efectos laterales expresado por el fármaco, el sitio blanco del cual es un órgano respiratorio, un órgano que tiene células epidérmicas, en las cuales la glicosidasa se localiza a una alta concentración en el estado normal, un grupo funcional escindible por la glicosidasa se une a dicho fármaco por lo tanto reduciendo los efectos laterales del fármaco.

8. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glicosilo de un monosacárido o un oligosacárido.

9. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque la glicosidasa es ß-glucuronidasa.

10. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo.

11. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque el enlace entre grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß.

12. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico.

13. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque el sitio para exhibir los efectos laterales es un sistema cardiovascular.

14. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 7 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.

15. - La composición farmacéutica para inhalación de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico.

16. - Un profármaco para reducir los efectos laterales de un agonista ß el cual es un fármaco para un órgano respiratorio, caracterizado porque se considera un órgano respiratorio, el cual es el sitio blanco de un agonista ß2 y un sistema cardiovascular el cual es el sitio de efectos laterales exhibidos por un agonista p2, se selecciona la ß-glucuronidasa, la cual es una enzima presente en los órganos respiratorios y tiene una alta actividad enzimática en órganos respiratorios en el estado normal y una baja actividad enzimática en el un sistema cardiovascular, y un grupo funcional escindible por la ß-glucuronidasa se une al agonista ß2 por lo tanto reduciendo los efectos laterales del agonista ß2.

17. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el agonista ß2 tiene un grupo hidroxilo en su estructura.

18. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el fármaco es cualesquiera de salbutamol, salmeterol, mabuterol, clenbuterol, pirbuterol, procaterol, fenoterol, tulobuterol, formoterol, hexoprenalina, terbutalina, trimetoquinol, clorprenalina, orciprenalina, metoxifenamina, metilefedrina, efedrina, e isoprenaiina.

19. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo.

20. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque el enlace entre el grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß.

21. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque el grupo glucuronilo se une al fármaco sin la intervención de un espaciador.

22. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 16 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.

23. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 17 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.

24. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 18 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.

25. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 21 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.

26. - Un método para preparar un profármaco del agonista ß2 de conformidad con la reivindicación 17 que tiene un azúcar como un sustituyente el cual comprende hacer reaccionar un agonista ß2 que tiene un grupo hidroxilo con un derivado de haliduro de azúcar en cualesquiera de los solventes de acetona, acetonitrilo, dioxano, y tetrahidrofurano en la presencia de una base y desproteger el producto resultante mediante hidrólisis alcalina.

27. - El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque la base es ya sea hidróxido de sodio o hidróxido de potasio.

28. - Un método para preparar un profármaco de un agonista ß2 que tiene un azúcar como un sustituyente el cual comprende añadir un derivado de haliduro de bencilo a una mezcla que contiene un agonista ß2 que tiene una pluralidad de grupos hidroxilo y una base para proteger selectivamente a los grupos hidroxilo, luego llevar a cabo glucosilación, someter el intermediario resultante a hidrólisis alcalina, y luego llevar a cabo la hidrogenación.

29.- Un método para reducir los efectos laterales de un fármaco, el sitio blanco del cual es un órgano que tiene células epidérmicas, en las cuales la glicosidasa se localiza a una alta concentración en el estado normal, caracterizado porque se considera el sitio de los efectos laterales que se expresan por el fármaco, en el caso en donde la actividad glicosidasa del sitio de los efectos laterales es baja en el estado normal, un grupo funcional escindible por la glicosidasa se une al fármaco por lo tanto produciendo un profármaco. 30 - El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque la glicosidasa es ß-glucuronidasa. 31 - El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucurónico. 32.- El método de conformidad con la reivindicación 31 , caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo. 33.- El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado además porque el enlace entre el grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß. 34. - El método de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 29 a 31 , caracterizado además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico. 35. - Un método para reducir los efectos laterales de un fármaco, para un órgano respiratorio, el sitio blanco del cual es un órgano que tiene células epidérmicas, en las cuales la glicosidasa se localiza a una alta concentración en el estado normal, caracterizado porque se considera el sitio de los efectos laterales que se expresan por el fármaco, en el caso en donde la actividad glicosidasa del sitio de los efectos laterales es baja en el estado normal, un grupo funcional escindible por la glicosidasa se une al fármaco por lo tanto produciendo un profármaco. 36. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glicosilo de un monosacárido o un oligosacárido. 37. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque la glicosidasa es una ß-glucuronidasa. 38. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo. 39. - El método de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado además porque el enlace entre el grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß. 40 - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico. 41. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el sitio para exhibir los efectos laterales es un sistema cardiovascular. 42. - Un método para reducir los efectos laterales del fármaco de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque comprende preparar una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 35 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables, y administrar la composición a un paciente que necesite de dicho tratamiento por medio de inhalación. 43. - El método de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque el fármaco tiene un grupo hidroxilo fenólico. 44. - Un profármaco para reducir los efectos laterales de un agonista ß2, caracterizado porque se considera de un órgano respiratorio, el cual es el sitio blanco de un agonista ß2 y un sistema cardiovascular el cual es el sitio de efectos laterales exhibidos por un agonista ß2, se selecciona la ß-glucuronidasa, la cual es una enzima presente en los órganos respiratorios y tiene una alta actividad enzimática en órganos respiratorios en el estado normal y una baja actividad enzimática en un sistema cardiovascular, y un grupo funcional escindible por la ß-glucuronidasa se une al agonista ß2 por lo tanto preparando un profármaco. 45. - El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque el agonista ß2 tiene un grupo hidroxilo en su estructura. 46.- El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque el fármaco es cualesquiera de salbutamol, salmeterol, mabuterol, clenbuterol, pirbuterol, procaterol, fenoterol, tulobuterol, formoterol, hexoprenalina, terbutalina, trimetoquinol, clorprenalina, orciprenalina, metoxifenamina, metilefedrina, efedrina, e isoprenalina. 47.- El método de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque el sustituyente es un grupo glucuronilo. 48.- El método de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado además porque el enlace entre el grupo glucuronilo y el fármaco es un enlace ß. 49.- Un método para reducir los efectos laterales del fármaco de la reivindicación 44, que comprende preparar una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva del profármaco de conformidad con la reivindicación 44 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables, y administrar la composición a un paciente que necesite de dicho tratamiento por medio de inhalación. 50.- El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el agonista ß2 tiene un grupo hidroxilo en su estructura y el profármaco es un O-glucurónido en el cual un grupo glucuronilo se une al grupo hidroxilo. 51. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el agonista ß2 tiene un grupo hidroxilo fenólico en su estructura. 52. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el agonista ß2 tiene un grupo hidroxilo fenólico en su estructura y el profármaco es un O-glucurónico en el cual un grupo glucuronll se une al grupo hidroxilo fenólico. 53. - El profármaco de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el profármaco es cualesquiera de 3-0-(p-D-glucuronil)salbutamol, 3-0-(p-D-glucuronil)salmeterol, 3-0-(p-D-glucuronil) pirbuterol, 3-0-(p-D-glucuronil) fenoterol, 3-0-(p-D-glucuronil) tulobuterol, 4-0-(ß-D-glucuronil) formoterol, 3 ó 4-0-(p-D-glucuronil) hexoprenalina, 3-0-(p-D-glucuronil) terbutalina, 6 ó 7-0-(p-D-glucuronil) trimetoquinol, 3-0-(p-D-glucuronil) orciprenalina, 3 ó 4-0-(p-D-glucuronidasa) isoprenalina, y 8-0-(ß-D-glucuronil) procaterol. 54. - Una composición farmacéutica para inhalación que comprende una cantidad efectiva de uno o más profármacos de conformidad con la reivindicación 53 junto con llenadores, aditivos y/u otros compuestos activos y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente aceptables.