NUEVAS FORMAS CRISTALINAS DE (2S) -N-5- [AMINO ( IMINO) METIL] -2- TIENILMETIL-l- (2R) -2- [ (CARBOXIMETIL) AMINO] -3 , 3- DIFENILPROPANOIL-2-PIRROLIDINCARBOXIMIDA· nH20 CAMPO TECNICO La presente invención se relaciona a formas cristalinas de (2S) -N-5- [amino (imino) raetil] -2-tienilmetil-l-(2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirroli-dincarboximida · n¾0 representada por la siguiente Fórmula (1) : [Fórmula 1]
en donde n es el número de agua combinada por molécula y representa 0, 1, 3, 4, 6 o 7.5. ANTECEDENTES DE LA INVENCION El compuesto puro de la Fórmula (1), es decir, el compuesto al cual no se adicionaron ácidos, y las sales, hidratos, solvatos e isómeros farmacéuticamente aceptables del mismo, son los temas o sujetos de la Publicación de Patente Coreana Abierta al Público No. 2000-047461 y O 0039124, y pueden ser efectivamente usados como nuevos inhibidores de trombina. La propiedad física de un fármaco tiene un efecto enorme sobre la producción y el proceso de desarrollo de su fármaco en bruto y el proceso de desarrollo de su producto final. Un fármaco puede ser aproximadamente dividido en forma cristalina y forma amorfa de acuerdo con su cristalinidad . Algunos fármacos pueden ser obtenidos en forma cristalina y forma amorfa, mientras que otros fármacos pueden ser obtenidos solamente en ya sea la forma cristalina o la forma amorfa. La forma cristalina y la forma amorfa pueden mostrar una gran diferencia en las propiedades fisicoquímicas. Por ejemplo, existe un reporte de que una proporción de absorción oral o biodisponibilidad es diferente en algunos fármacos debido a que la solubilidad y la proporción de disolución son diferentes dependiendo de sí los fármacos están en forma cristalina o forma amorfa (ver, Pharmaceutical Solids: A Strategic Approach to Regulatory Considerations, Stephen Byrn y colaboradores, Pharmaceutical Research, 945, 12(7), 1995). La biodisponibilidad de un fármaco está directamente relacionada con su efecto y el efecto secundario. En otras palabras, para obtener el efecto deseado de un fármaco, se debe alcanzar una cierta concentración deseada en la sangre. Si la concentración en la sangre llega a ser indebidamente alta, esta es acompañada por un efecto secundario o toxicidad. La biodisponibilidad puede ser mejorada al seleccionar una forma cristalina adecuada. Asi, la forma cristalina de un fármaco debe ser identificada en el curso del desarrollo y la aprobación del fármaco. Excepto en casos especiales, es fácil obtener un fármaco que tiene cristalinidad en el proceso de su investigación y desarrollo. Un reporte muestra que la cristalinidad de un fármaco puede ser una ventaja importante debido a que en la etapa final para producir el fármaco, el fármaco puede ser puramente obtenido a través de la recristalización, que es un proceso de purificación relativamente fácil y un fármaco que tiene cristalinidad, cuyas propiedades fisicoquímicas pueden ser fácilmente identificadas, es ventajoso aun en el control de - calidad de su proceso del producto (ver, An integrated approach to the selection of optimal salt form for a new drug candidate, Abu T. . Serajuddin y colaboradores, International Journal of Pharmaceutics, 209, 105, 1994) . Por otra parte, algunos fármacos que tienen cristalinidad pueden tener polimorfismo. Un artículo reportó que, generalmente hablando, en el caso de que la estructura cristalina de un fármaco sea diferente, su solubilidad y otras propiedades físicas pueden ser diferentes, y la forma cristalina de un fármaco puede ser cambiada bajo ciertas condiciones [ Pharmaceutical Solids: A Strategic Approach to Regulatory Considerations, Stephen Byrn y colaboradores, Pharmaceutical Research, 945, 12(7) 1995] .
Por lo tanto, en el caso de que un fármaco tenga polimorfismo, la obtención de puramente todas las formas cristalinas del fármaco y el descubrimiento de las propiedades físicas de cada forma son muy importantes en el desarrollo y la producción del fármaco. BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION Por consiguiente, los presentes inventores han encontrado formas cristalinas útiles como inhibidores de trombina al obtener varias formas cristalinas a partir del compuesto puro de la Fórmula (1) anterior y al identificar sus propiedades físicas. Por lo tanto, el propósito de la presente invención es proporcionar formas cristalinas de (2S)-N-5-[amino ( imino) metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboximida · nf^O representada por la siguiente Fórmula (1) : [Fórmula 1]
en donde n es el número de agua combinada por molécula y representa O, 1, 3, 4, 6 o 7.5. BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La Figura 1 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina I de (2S)-N-5-[ amino ( imino) metal ] -2-tienilmetil-1- ( 2R) -2- [ ( carboximetil ) -amino] -3 , 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Figura 2 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina II de (2S)-N-5-[amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3 , 3-difenilpropanoi1-2-pirrolidincarboxamida . La Figura 3 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina III de (2S)-N-5-[ amino (imino) metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3 , 3-difenilpropanoi1-2-pi rolidincarboxamida . La Figura 4 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina IV de (2S)-N-5-[amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- ( 2R) -2- [ (carboximetil ) -amino] -3 , 3-difenilpropanoi1-2-pi rolidincarboxamida . La Figura 5 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina V de (2SJ-N-5-[ amino (imino) metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Figura 6 es un diagrama de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina VI de (2S)-N-5-[amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . DESCRIPCION DETALLADA El compuesto puro de la Fórmula (1) anterior se puede preparar de acuerdo con un método conocido (ver, la Publicación de Patente Coreana Abierta al Público No. 2000-047461 y WO 0039124) . Las formas cristalinas de la Fórmula (1) de la presente invención obtenidas a partir del compuesto puro anterior u otras formas cristalinas, existen en la forma de anhídrido o hidratos que tienen diversa agua combinada. De preferencia, de acuerdo con el método de recristalización y el número de agua combinada, se pueden obtener la Forma cristalina 1 (n=7.5), la Forma cristalina II (n=4), la Forma cristalina III (n=6) , la Forma cristalina IV (n=3), la Forma cristalina V (n=0) y la Forma cristalina VI (n=l) . Por ejemplo, la Forma cristalina IV se puede obtener al disolver el compuesto puro de la Fórmula (1) en el solvente mezclado de agua, y metanol o etanol mientras que se calienta y se recristali za . La Forma cristalina V se puede obtener al secar la
Forma cristalina IV bajo vacio. La Forma cristalina VI se puede obtener mediante la absorción de humedad de la Forma V. Sin embargo, la Forma I se puede obtener al ajustar la Forma VI en agua. La Forma cristalina II se puede obtener al secar la forma I bajo vacio. Y, la Forma III se puede obtener mediante la absorción de humedad de la Forma II. Puesto que el peso molecular del compuesto puro anterior es de 533.65, los contenidos de agua teóricos de estos hidratos de la Fórmula (1) son 0, 3.3, 9.2, 11.9, 16.8 y 20.2% para los hidratos de la Fórmula (I) en donde n es O, 1, 3, 4, 6 y 7.5, respectivamente. Sin embargo, es usual que los contenidos de agua de las muestras realmente obtenidas se desvien de los valores teóricos anteriores dependiendo de la condición de secado y el tiempo de secado en la preparación, la cantidad de la humedad superficial absorbida de la superficie, etc. Por lo tanto, el contenido de agua del hidrato de la Fórmula (I) donde n es 0, es decir, el anhídrido de la Fórmula (I), puede ser 0-3%, aquel del hidrato en donde n es 1 puede ser 2-9%, aquel del hidrato donde n es 3 puede ser 4-11%, aquel del hidrato donde n es 4 puede ser 9-15%, aquel del hidrato en donde n es 6 puede ser 12-20% y aquel del hidrato donde n es 7.5 puede ser 16-26%. Asi, para identificar la forma cristalina de la Fórmula (I), el contenido de agua debe ser identificado, con la conducción de la prueba de difracción de rayos X de polvo. Cada forma cristalina puede ser distinguida por picos o máximos característicos mostrados en la prueba de difracción de rayos X de polvo. Por ejemplo, como se muestra en las Tablas 1, 2, 4, 5, 6 y 7, la Forma cristalina I tiene picos característicos distinguidos de otras formas cristalinas en 7.3°, 9.1°, 18.0° y 28.8°, la Forma cristalina II en 7.0°, 12.2°, 19.2° y 20.0°, la Forma cristalina III en 10.6°, 19.4°, 20.9°, 21.6° y 24.4°, la Forma cristalina IV en 10,0°, 16.7°, 20.8°, 21.9° y 26.0°, la Forma cristalina V en 15.8°, 18.3°, 20.3°, 20.8° y 26.5°, la Forma cristalina VI en 13.6°, 14.7°, 23.2° y 27.5°. Además, como se muestra en las Figs. 1 a 6, se puede confirmar en el diagrama de difracción de rayos X de polvo que cada forma cristalina anterior tiene una estructura de cristal diferente entre si. Una forma cristalina puede ser cambiada de acuerdo con la condición de almacenamiento tal como la humedad relativa, etc. Asi, es importante confirmar la estabilidad de una forma cristalina de acuerdo con la condición de almacenamiento. Entre las formas cristalinas anteriores, la Forma cristalina VI se identificó como un hidrato estable cuya estructura de cristal no es cambiada bajo cualquier humedad relativa. La titrimetria de Karl-Fischer se ha utilizado ampliamente para determinar el contenido de agua en las muestras (ver, Quantitative Chemical Analysis, 4a edición, I.M. Koltmoff y colaboradores, 858. The Macmillan Company, 1969) . Cuando se aplicó la titrimetria de Karl-Fischer a las formas cristalinas anteriores, el contenido de agua de la Forma cristalina VI se probó como 3.5%, que corresponde a la relación en peso de una molécula de agua cuando n de la Fórmula (I) es 1. Por otra parte, el contenido de agua de la Forma cristalina I se probó como 20.2%, que corresponde a la relación en peso de una molécula de agua cuando n de la Fórmula (I) es 7.5 La humedad incluida en una muestra no es completamente removida aún si la muestra es secada bajo vacio. Para remover la humedad completamente, varios agentes de secado deben ser colocados con la muestra bajo vacio. Varias clases de agentes de secado pueden ser usados para la presente invención: sulfato de calcio, sulfato de sodio, cloruro de calcio, etc. El agente de secado más . ampliamente utilizada es P2O5 (ver, MIT Laboratory techniques manual, MIT dept . of Chemistry, 10:43, 1979). Si la Forma cristalina I se seca bajo vacio en un secador en el cual P2O5 se utiliza como un agente de secado, la humedad incluida en la forma cristalina puede ser removida. Luego, se confirma mediante la prueba de difracción de rayos X de polvo que se cambió la forma cristalina, y la forma cambiada se identifica como la Forma cristalina II. La Forma cristalina II llega a ser estable al absorber la humedad y su contenido de agua es de 10.8% que corresponde a la relación en peso de 4 moléculas de agua. Si la Forma cristalina II se deja bajo altamente humedad relativa, la forma se cambia a la Forma cristalina III, y su contenido de agua es de 16.9% que corresponde a la relación en peso de 6 moléculas de agua.
A partir de los resultados anteriores, se puede observar que la Forma cristalina I, Forma II y Forma III son hidratos en donde n es 7.5, 4 y 6, respectivamente. El solvente a ser utilizado en la recristalización puede ser usualmente disponible de las clases de alcoholes, que son alcoholes de alcanos que tienen el número de carbonos de 1 a 8, tales como metanol, etanol, propanol, butanol, isopropanol y octanol, etc., pero son preferibles el metanol y etanol, y metanol es el más preferible, pero no limitados a estos. Además, como un solvente a ser utilizado para recristalizar el compuesto puro anterior, además de los alcoholes ejemplificados en lo anterior, se pueden usar agua y solventes orgánicos, tales como n-hexano, acetato de etilo, acetato de butilo, acetonitrilo, cloroformo, éter dietilico, acetona, etc., y otros solventes usualmente disponibles. El compuesto puro anterior puede ser disuelto o disuelto en el calentamiento, al utilizar un solvente o más de uno en mezcla entre los anteriores y puede ser recristalizado . Si se disuelven las diversas formas cristalinas anteriores en alcoholes, una cantidad adecuada de agua se adiciona a las mismas, y la mezcla se recristaliza, se puede obtener la Forma cristalina IV, otra forma cristalina. El método de estructura de cristal de rayos X identificó la forma cristalina como el hidrato en donde n es 3. La Forma cristalina IV se secó bajo vacio en la presencia de P2O5 para II
obtener la Forma cristalina V que es el anhídrido. La Forma cristalina V se cambia en la forma cristalina VI al absorber humedad. La Forma cristalina VI tiene 3.5% de contenido de agua, y es un hidrato estable donde n es 1. La prueba de estabilidad de esfuerzo mostró que la forma cristalina del compuesto de la Fórmula (1) es fisicoquímicamente más estable que la forma amorfa. La forma amorfa mostró un contenido residual de solamente 87% así como descoloramiento después del almacenamiento de 4 semanas, especialmente a 70°C. Sin embargo, las Formas cristalinas I y IV fueron estables sin descoloramiento. Como se describen en la Publicación de Patente Coreana Abierta al Público No. 2000-047461 y WO 0039124, el compuesto puro de la Fórmula (I) de la presente invención se usa efectivamente como un inhibidor de trombina. Y, sus formas cristalinas también son útiles como inhibidores de trombina. Enseguida, la presente invención será explicada en más detalle con referencia a los siguientes ejemplos, ejemplos comparativos y ejemplos de prueba. Sin embargo, se debe entender que estos ejemplos se han descrito como modalidades específicas preferidas de la presente invención, y no se proponen para limitar el alcance de la presente invención de ninguna manera. Otros aspectos de esta invención serán evidentes para aquellos expertos en la técnica a la cual la presente invención pertenece. EJEMPLOS Ejemplo 1 Preparación de la Forma cristalina II de (2S)-N-5-[amino (imino) metil] -2-tienilmetil- 1- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Forma cristalina I preparada en el siguiente ejemplo 8 se secó bajo vacio en la presencia de P20s durante un día y luego se colocó a la humedad relativa de 75% durante un dia para obtener la Forma cristalina II del titulo. Ejemplo 2 Preparación de la Forma cristalina III de (2S) -N-5-[amino (imino) metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Forma cristalina II preparada en el Ejemplo 1 anterior se colocó a la humedad relativa de 93% durante un dia, y luego se movió y se colocó a la humedad relativa de 64% durante un dia para obtener la Forma cristalina III del titulo . Ejemplo 3 Preparación de la Forma cristalina IV (1) de (2S)-N-5- [amino (imino)metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoi1-2-pirrolidincarboxamida . El compuesto puro (1 g) de (2S)-N-5-[amino (imino) metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida se colocó en un recipiente de vidrio y luego se adicionó metanol (5.0 mi) al mismo. Mientras que se agita, la mezcla se calentó para obtener una solución clara. Se adicionó agua (0.5 mi) a la solución y luego la solución se enfrió a temperatura ambiente. Se obtuvieron cristales blancos a partir de lo mismo. Los cristales se filtraron y luego se lavaron con agua. Ellos se secaron en el aire (0.85 g, rendimiento 85%). Ejemplo 4 Preparación de la Forma cristalina IV (2) de (2S) -N-5- [amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboxime-til) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . El compuesto puro (1 g) de (2S)-N-5-[amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida se colocó en un recipiente de vidrio y se disolvió al adicionar metanol (6.0 mililitros), agua (1.5 mililitros) y una solución de ácido clorhídrico 6N (0.65 mililitros). Después, se adicionó a lo mismo una solución ION de hidróxido de sodio (0.2 mililitros) se adicionó y se agitó. Después se adicionó adicionalmente a lo mismo una solución ION de hidróxido de sodio (0.4 mililitros) la solución se colocó a temperatura ambiente para obtener cristales en forma de aguja blancos. Los cristales se filtraron, se lavaron con agua, y luego se secaron en' aire (0.8 g, rendimiento 80%).
Ejemplo 5 Preparación de la Forma cristalina V de (2S) -N-5-[amino ( imino) metil ] -2-tienilmet il-1- (2R) -2- [ (carboximetil ) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La forma cristalina IV preparada en el Ejemplo 3 o
4 se secó bajo vacio en la presencia de P205 durante un día para obtener la Forma cristalina V del titulo. Ejemplo 6 Preparación de la Forma cristalina VI (1) de (2S)-N-5- [amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Forma cristalina V preparada en el Ejemplo 5 se colocó durante un día a la humedad relativa de 53% para obtener la Forma cristalina VI del titulo. Ejemplo 7 Preparación de la Forma cristalina VI (2) de (2S)-N-5- [amino ( imino) metil ] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Forma cristalina V preparada en el Ejemplo 5 se colocó en un recipiente de vidrio, y se pasó nitrógeno saturado con agua a través del recipiente durante una hora para obtener la forma cristalina VI del titulo. Ejemplo 8 Preparación de la Forma cristalina I de (2S)-N-5-[amino (imino)metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . Se adicionó agua a todas las formas cristalinas excepto a la Forma cristalina I y la mezcla se agitó durante una hora o más para obtener la Forma cristalina I del titulo. Ejemplo Comparativo 1 Preparación de la forma amorfa de (2S) -N-5-[amino (imino)metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ (carboximetil) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida . La Forma cristalina III obtenida en el Ejemplo 2 se secó bajo vacio en la presencia de P205 durante dos días para obtener la forma amorfa del titulo. Ejemplo de Prueba 1 Prueba de difracción de rayos X de polvo del compuesto puro de (2S) -N-5- [amino (imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirro-lidincarboxamida . Cada 40 mg de la Forma cristalina I y la Forma cristalina IV preparadas en el Ejemplo 8 y el Ejemplo 3 o 4 se recubrieron delgadamente sobre un contenedor de muestra, y después se condujo la prueba de difracción de rayos X de polvo de acuerdo con las siguientes condiciones. Mediante el uso del aparato Rigaku Geigeflex D/max-III C, la prueba se condujo a 35 kV, 20 mA. Velocidad de exploración (2T) 5°/minuto Tiempo de muestreo: 0.03 seg.
Modo de exploración: continuo Cu-objetivo (filtro Ni) Los resultados de la prueba de difracción de rayos X de polvo para la Forma cristalina I y la Forma IV se muestran en las Figs. 1 y 4. Las posiciones de los picos o máximos mostrados en las figuras anteriores se listan en las Tablas 1 y 2. Como se muestra en cada resultado, cada forma cristalina tiene diferente cristalinidad . [Tabla 1] Picos o máximos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina I de (2S)-N-5-[amino (imino)metil] -2-tienilmetil-l- (2R) -2- [ ( carboximetil ) -amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirrolidincarboxamida pico 2T 7.319 7.81 9.117 10.02 10.808 11.397 13.01 13.732 14.192 15.346 16.05 16.539 18.003 19.425 20.01 21.111 21.832 22.226 22.802 23.212 24.368 24.781 25.289 26.129 26.698 27.257 27.568 28.802 29.632 30.867 [Tabla 2] Picos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina IV de (2S ) -N-5- [amino ( imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropa-noil-2-pirrolidincarboxamida .
pico
8.923 9.966 10.845 11.727 12.395 13.335 13.843 14.778 15.591 16.686 17.819 18.364 18.85 19.419 19.871 20.835 21.92 23.06 23.617 24.629 25.09 26.017 26.746 27.522 27.872 29.043 30 30.649 31.547 Ejemplo de Prueba 2 Prueba de difracción de rayos X de polvo durante la absorción de humedad y la deshumidificación de la Forma cristalina I de ( 2S) -N-5- [amino ( imino ) metil] -2-tienilmetil-l-(2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirroli-dincarboxamida . 40 mg de la Forma cristalina I anterior se recubrieron delgadamente sobre un contenedor de muestra. Y, inmediatamente después la muestra se secó bajo vacio en la presencia de P2O5, y después de que la muestra se colocó para la absorción de humedad a cada humedad relativa de 33%, 53%, 64%, 75% y 93% durante dos días o más, respectivamente, la prueba de difracción de rayos X de polvo se condujo sobre la muestra de acuerdo con las condiciones representadas en el ejemplo de Prueba 1 anterior para observar el cambio de la forma cristalina durante la absorción de humedad. Mientras que se disminuye la humedad relativa, la misma prueba se repitió para observar el cambio de la forma cristalina durante la deshumidificación .
Con el fin de obtener cada humedad relativa anterior, como se muestra en la tabla siguiente, se prepararon soluciones acuosas saturadas de sales, luego se colocaron en un desecador y el desecador se selló. [Tabla 3]
Los resultados de la prueba de difracción de rayos
X de polvo de la Forma cristalina II mostrados inmediatamente después del secado al vacio a la humedad relativa de 75% y de la Forma cristalina III mostrados a la humedad relativa de 64% ~ 33% durante la deshumidificación, se proporcionan en las Figs. 2 y 3, respectivamente. Las posiciones de los picos mostrados en las figuras se listan en las siguientes Tablas 4 y 5. Cada resultado muestra que cada forma cristalina tiene diferente cristalinidad. [Tabla 4] Picos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina II de ( 2S ) -N-5- [amino ( imino) metil ] -2 -tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropa-noil-2-pirrolidincarboxamida . pico 2T 7.012 7.822 9.739 10.607 11.43 12.15 13.841 15.17 16.384 17.122 17.802 19.198 20.052 20.954 21.882 22.68 23.713 24.837 25.438 25.902 26.3S7 28.046 28.501 28.935 29.304 29.856 30.866 31.405 32.098 33.016 [Tabla 5] Picos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina III de (2S) -N-5- [amino (imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropa-noil-2-pirrolidincarboxamida . pico 2T 7.335 9.09 9.808 10.601 11.203 11.761 13.44 15.755 19.389 20.86 21.629 24.436 26.236 27.159 29.123 29.73 30.763 Ejemplo de Prueba 3 Prueba de difracción de rayos X de polvo durante la absorción de humedad y la deshumidificación de la Forma cristalina IV de (2S) -N-5- [amino ( imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropanoil-2-pirro-lidincarboxamida . 40 mg de la Forma cristalina IV anterior se recubrieron delgadamente sobre un contenedor de muestra. Inmediatamente después la muestra se secó bajo vacio en la presencia de P2O5, y después la muestra se colocó para la absorción de humedad a cada humedad relativa de 33%, 53%, 64%, 75% y 93% durante dos días o más respectivamente, la prueba de difracción de rayos X de polvo de la muestra se condujo de acuerdo con las condiciones representadas en el ejemplo de Prueba 1 anterior para observar el cambio de la forma cristalina durante la absorción de humedad. Mientras que se disminuye la humedad relativa, la misma prueba se repitió para observar el cambio de la forma cristalina durante la deshumidificación . Con el fin de obtener cada humedad relativa anterior, como se muestra en la Tabla 3 del ejemplo de Prueba 2, se prepararon soluciones acuosas saturadas de sales y luego se colocaron en un desecador, y el desecador se selló. Los resultados de la prueba de difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina V mostrados inmediatamente después del secado al vacio y de la forma cristalina VI mostrados después de que se ha iniciado la absorción de humedad, se proporcionan en las Figs . 5 y 6, respectivamente. Las posiciones de los picos mostrados en las figuras se listan en las siguientes Tablas 6 y 7. Cada resultado muestra que cada forma cristalina tiene diferente cristalinidad . [Tabla 6] Picos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina V de (2S) -N-5- [amino (imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2R) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropa-noil-2-pirrolidincarboxamida . pico 2T 8.739 9.878 10.789 11.716 12.451 13.965 1 .567 15.368 15.858 17.093 17.757 18.296 19.674 20.319 20.799 22.227 23.112 23.742 24.596 25.873 26.458 27.502 27.935 28.68 29.358 [Tabla 7] Picos de la difracción de rayos X de polvo de la Forma cristalina VI de (2S) -N-5- [amino (imino) metil] -2-tienilmetil-1- (2 ) -2- [ (carboximetil) amino] -3, 3-difenilpropa-noil-2-pirrolidincarboxamida . pico 2T 8.042 8.718 10.231 10.78 11.668 12.445 13.56 14.682 15.222 15.864 16.5 17.084 17.814 18.698 19.225 19.659 20.327 21.14 22.541 23.246 24.656 25.275 25.86 26.636 27.453 28.584 29.147 29.755 30.793 Ejemplo de Prueba 4. Prueba de estabilidad de esfuerzo para la forma amorfa, y la Forma cristalina I y la Forma VI. Con el fin de comparar la estabilidad fisicoquímica entre la Forma cristalina VI, la Forma cristalina I y la forma amorfa preparada en los Ejemplos 7, 8 y el Ejemplo Comparativo I, la prueba de estabilidad de esfuerzo se condujo al colocar sus muestras a las temperaturas de -20°C, 50 °C y 70°C durante 4 semanas. Los resultados se resumen en la siguiente Tabla 8. [Tabla 8] Forma I Forma VI Forma Amorfa Color Marfil Marfil Amarillo Proporción -20°C 99% 101% 96% residual después 50 °C 99% 99% 96% de 4 semanas Proporción 70°C 100% 100% 87% residual CAMPO DE APLICACION INDUSTRIAL Como se muestra a partir de los resultados anteriores, la Forma cristalina I y la Forma VI mostraron estabilidad notablemente superior sobre la forma amorfa. La forma amorfa no mostró ningún cambio en la apariencia a -20°C y 50°C, pero mostró una proporción residual de 96% después de 4 semanas. A 70°C, la forma amorfa mostró una proporción residual de 87% asi como un cambio en la apariencia. Por lo tanto, se puede observar que las formas cristalinas de acuerdo con la presente invención muestran estabilidad fisicoquímica superior sobre la forma amorfa.