MXPA03007981A - Profarmacos direccionados a tumores activados por metaloproteinasa de matriz. - Google Patents

Profarmacos direccionados a tumores activados por metaloproteinasa de matriz.

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Abstract

Un compuesto que tiene la formula general (I), en donde (A) es un radical que comprende uno de mas de un anillo heterociclico, un anillo carbociclico y un sistema de anillos fusionados, el anillo o sistema de anillos son esenciales para una actividad biologica del compuesto mediante la accion en un objetivo de acido nucleico o proteina, (B) es una molecula separadora, bivalente unida directamente al sistema de anillos, n es numero entero de 0 o 1 y (X) es un radical monovalente que contiene un enlace de amida que es escindible por la accion de una enzima metaloproteinasa de matriz de tal manera que produzca un compuesto de la formula II, en donde la eficacia de la actividad biologica del compuesto de la formula II es incrementada sobre aquella del compuesto de la formula (I).

Description

PROFÁRMACOS DIRECCIONADOS A TUMORES ACTIVADOS POR METALOPROTEINASA DE MATRIZ DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a compuestos que son activados in vivo de compuestos relativamente inactivos desde el punto de vista biológico, comúnmente llamados "profármacos", a compuestos de "fármacos" relativamente activos desde el punto de vista biológico. La invención proporciona particularmente compuestos que son inactivados debido a su inclusión de un radical peptídico o proteínico que da por resultado la supresión de su acción en un sitio de objetivo biológico, completamente o en parte, los cuales son susceptibles a la escisión de toda o una parte de esa porción del resto del compuesto por una o más enzimas metaloproteinasas (MMPs, por sus siglas en inglés) , tal como para volver el compuesto más activo en el sitio biológicamente activo. La presente invención proporciona par icularmente compuestos que incorporan el radical peptídico o proteínico que es escindible por MMP, los cuales, cuando son activados por la escisión, actúan directamente sobre una proteína o ácido nucleico, particularmente un objetivo de receptor o ADN, tal como para efectuar un cambio fisiológico deseado. Ejemplos de este cambio incluyen muerte celular, ya sea a EEP : 149696 través de la apoptosis, lisis u otros efectos intermedios y efectos mediados por receptores, tal como actividad de glucocorticoides , por ejemplo una respuesta antiinflamatoria. La capacidad de las células cancerígenas para metastatizar en sitios distantes en el cuerpo es responsable de la mayoría de muertes relacionadas con el cáncer, ya sea directamente debido a la diseminación de metástasis a órganos críticos del cuerpo, o indirectamente debido a la terapia que se está tratando de controlar la diseminación metastática. Los planteamientos quimioterapéuticos actuales para el tratamiento del cáncer están limitados por la toxicidad en tejidos normales de la mayoría de agentes, lo que conduce a un bajo índice terapéutico (Double y Bibby, 1989) . Existe aún una necesidad clara por nuevos agentes quimioterapéuticos específicos para tumores con un alto índice terapéutico. Las metaloproteinasas de matriz (MMPs) son un grupo de endopeptidasas dependientes de átomos de zinc que parecen jugar un papel principal en el proceso metastático (Stetler-Stevenson y colaboradores, 1996, Kleiner y Stetler-Stevenson, 1999, estermarck y Kahari, 1999) . Actualmente existen al menos 16 miembros de la familia de MMP que han sido clonados y secuenciados (Kleiner y Stetler-Stevenson, 1999) y éstos se pueden dividir en al menos cuatro sub-grupos basados en las especificidades de substrato: las colagenasas intersticiales, estromelisinas, gelatinasas y más reciente las MMPs del tipo membrana (MT-MMPs, por sus -siglas en inglés) . El papel de estas MMPs es degradar la membrana de basamento, la cual consiste principalmente de- colágeno (MacDougall y Matrisian 1995) . Estas enzimas proteolíticas también están enlazadas a muchos procesos normales, tales como angiogénesis y enfermedades inflamatorias, crónicas y otras enfermedades degenerativas. Las MMPs son secretadas de la célula tumoral en sus formas latentes, inactivas (proformas) con activación después de la escisión del pro-dominio de un rango de otras proteasas tales como serina proteasas y activador de plasminógeno de tipo uroquinasa (Birkedal-Hansen y colaboradores, 1993, Kleiner y Stetler-Stevenson, 1993) . La actividad de MMP también es controlada por un grupo de inhibidores endógenos, los inhibidores de tejido de metaloproteinasas (TIMPs, por sus siglas en inglés) . Esta es la relación de la actividad de MMP a la expresión de TIMP que es crucial en el proceso metastático. La baja expresión de TIMP se correlaciona con el potencial metastático de líneas de células tumorales de murino y humano (Pontón y colaboradores, 1991, Tsuchiya y colaboradores 1993) . Un planteamiento actual para controlar una enfermedad metastática es utilizar inhibidores sintéticos para inhibir la actividad de estas proteinasas . Dos de estos inhibidores que utilizan la MMPs como un objetivo terapéutico son batimastato (Wang y colaboradores, 1994, asmussen y McCann, 1997) y marimastato (Ste ard, 1999) , los cuales están actualmente bajo investigación clínica. Se ha mostrado que ambos inhiben la diseminación metastática de tumores en modelos experimentales. Existen muchos estudios detallados en los cuales se han desarrollado substratos para detectar la presencia de actividad de MMP. Estos substratos de peptidilo (con una longitud de 4, 5 o 6 aminoácidos) contienen un grupo fluorogénico, reprimido al final de la secuencia (Nagase 1994, Bickett y colaboradores, 1993, Bickett y colaboradores, 1994) que es liberado después de la actividad proteolítica. La secuencia de aminoácidos en estos substratos es obviamente crucial (Soyez y colaboradores, 1996) . Se ha mostrado que las MMP-2 y MMP-9, las cuales degradan el colágeno tipo IV, son sobre-expresadas en muchos tejidos malignos que incluyen el colon (Pyke y colaboradores, 1993) , pecho (Monteagudo y colaboradores, 1990) , NSCLC (Urbanski y colaboradores, 1992, Brown y colaboradores, 1993) y otros tipos de tumores (Sato y colaboradores, 1992) . Esta sobre-expresión se ha detectado utilizando técnicas tales como la inmunohistoquímica y la hibridización in situ y se ha correlacionado con la naturaleza invasiva de los tumores (Stetler-Stevenson y colaboradores, 1996) . Es esencial para el desarrollo de un planteamiento de profármaco que los niveles incrementados de las enzimas activadoras sean restringidos al ambiente del tumor inmediato, de otra manera resultaría una toxicidad del tejido normal. Los estudios de hibridización in situ sugieren que la expresión de ARMm de muchas de las MMPs está localizada en las células estromáticas del tumor (MacDougall y Matrisian, 1995) . Varios grupos han estudiado los niveles en el plasma/suero de MMPs como marcadores de una actividad maligna (Iizasa y colaboradores, 1999, Nikajima y colaboradores, 1993, Endo y colaboradores, 1997). Aunque los niveles son reportados frecuentemente como elevados en pacientes con cáncer, los ensayos inmunológicos utilizados no distinguen entre la proforma (latente - 92 kDa para MMP-9 y 72 kDa para MMP-2) y la forma activa (84 kDa para MMP-9 y 67 kDa para MMP-2) . Es difícil contemplar una situación donde los pacientes tienen altos niveles de enzimas proteolíticas , activas en el plasma o suero. Se sabe, por ejemplo a partir de la patente norteamericana No. 6,080,575, proporcionar pre o pro-protelnas o vectores de ácido nucleico que codifica las mismas, que son inactivas hasta que una parte de la misma es escindida por enzimas específicas del tejido para producir formas "maduras" o de otra manera fisiológicamente activas de las proteínas. También se sabe, por ejemplo a partir de O 00/59930, WO 99/44628 y WO 97/14416 (todas de Merck & Co., Inc.), conjugar compuestos diferentes de péptidos o proteínas, biológicamente activos con una porción escindible de antígenos específicos para la próstata para modular su actividad. El oligopéptido típicamente tiene carga negativa a un pH fisiológico, de tal manera que la carga inhibe su entrada en las células sin la escisión de ese radical del compuesto . Un ejemplo específico del último conjugado patentado se describe adicionalmente en Nature Medicine, , Noviembre de 2000, que describe un conjugado de doxorrubicina con el péptido N-glutaril- (4-hidroxipropil) ala-ser-ciclohexilglicil-gln-ser-leu-COOH, siendo que el péptido está enlazado covalentemente entre el aminoglicosido de doxorrubicina y la C-terminal del péptido. La escisión mediada por PSA del conjugado, presumiblemente en el enlace de wgln-ser" si la escisión es directamente análoga a aquella del péptido progenitor (la especificidad de la escisión no es reportada en el papel) , proporciona principalmente los agentes citotóxicos conocidos "leu-dox" y "dox" . Se reporta que el conjugado no es citotóxico (IC50S > ???µ?) comparado con "leu-dox" ? udox" . El mecanismo mediante el cual la conjugación de péptidos disminuye la actividad citotóxica no es examinado, pero se puede observar que el péptido tiene un grupo carboxilato con carga negativa a un pH fisiológico que conferiría capacidad reducida para la captación celular.
Ya se sabe que, para algunas serles de compuestos de conjugados peptídicos de antraqulnona citotóxicos, la selección de conjugados de "gly-gly" , wgly-ala" y "gly-phe" con la C-terminal libre de la fórmula R= Residuo Gly-Giy.Gly^Ala, Cly-Pbe proporciona una falta completa de citotoxicidad in vitro. Esto se demuestra que es demostrable por una falta de captación celular (véase I. Meikle y colaboradores, Anti Cáncer Drug Design, 1995, 10_, 515) puesto que la carga negativa puede impedir la captación del fármaco, el cual procedería más probablemente mediante la difusión pasiva como para muchos de los fármacos anti -tumorales, establecidos (B.C. Baguley, Anti Cáncer Drug Design, 1991, 6, 1) . En contraste, sus derivados esterificados en el extremo C-terminal, hidrófobos son captados activamente por células y son relativamente citotóxicos. Un substrato de escisión preferido para MMP-9 ha sido reportado por McGeehan y colaboradores, (1994) . McGeehan y colaboradores, (1994) iniciaron con un substrato progenitor: Dnp-pro-leu-gly~leu-trp-ala- (D) arg-N¾, un substrato fluorogénico reportado al principio (Stack y Gray, 1989) y utilizaron 88 sustituciones de aminoácidos únicas en cada posición; sobre los 4 subsitios (p2 hasta P2') se evaluaron 352 substratos potenciales. Este estudio, combinado con los resultados del primer trabajo (Berman y colaboradores, 1992) , dieron un perfil extendido de las especificidades de substratos tanto de MP-1 como MMP-9 con énfasis sobre MMP-1. Los presentes inventores ahora proporcionan compuestos los cuales son activados desde un estado relativamente inactivo desde el punto de vista biológico a un estado relativamente activo desde el punto de vista biológico con la escisión de, o dentro de, un radical peptídico o proteínico que forma parte de los compuestos por la acción de una enzima metaloproteinasa de matriz. Los compuestos particularmente preferidos de la presente invención pueden entrar en las células, pero no pueden interactuar de manera efectiva con un objetivo, tal como ADN o un receptor en el mismo o sobre el mismo, sin la escisión de toda o una parte del radical peptidico o proteínico. De esta manera, en un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto de la fórmula general (I) A-(B)n-X (I) en donde A es un radical que comprende uno de más de un anillo heterocíclico, un anillo carbocíclico y sistemas de anillos fusionados, el anillo o sistema de anillos son esenciales para una actividad biológica del compuesto por la acción en un objetivo de ácido nucleico o proteína B es una molécula separadora, bivalente que está unida directamente al sistema de anillos n es número entero de 0 o 1 y X es un radical monovalente que contiene un enlace de amida que es escindible por la acción de una enzima metaloproteinasa de matriz tal como para producir un compuesto de la fórmula II A-(B)n-Q (II) en donde la eficacia de la actividad biológica del compuesto de la fórmula II es incrementada sobre aquella del compuesto de la fórmula (I) . En las formas preferidas, el anillo no es un anillo de fenilo unido directamente al carbono de un residuo de aminoácido, más preferiblemente ningún anillo es unido directamente . El enlace amida es preferiblemente un enlace de péptido entre los aminoácidos en una cadena de péptidos X, la cual es escindida para dar por resultado una cadena de péptidos más corta Q. Alternativamente, el enlace es un enlace de amida entre dos radicales Xa y Xb, uno o ambos de los cuales incluyen análogos de péptidos, tales como isósteros donde los enlaces de péptidos entre aminoácidos son reemplazados por otros enlaces de diferente naturaleza química . Por "isósteros" de los aminoácidos o péptidos se incluyen aminoácidos ? que tienen cadenas laterales que imitan las cadenas laterales características del aminoácido a y péptidos utilizados en la invención. Ejemplos de isósteros convencionales se ilustran en ? Practical Guide to Combinatorial Chemistry, (1997) Edits. Czarnik y DeWitt, American Chemical Society ISBN 0-8412-3485-X, página 57, figura 2, por ejemplo, depsipéptidos y peptoides, en donde las cadenas laterales características de los aminoácidos a son llevadas alternativamente sobre los átomos de carbono de grupos éster o sobre los átomos de nitrógeno de grupos amida; y en Medicinal Chemistry: Principies and Practice (1998) Edit: F D King, The Royal Society of Chemistry, ISBN-0-85186-494-5, capítulo 14, véase Tablas 2 página 208 con referencia a grupos amida carboxílicos en péptidos; ambos incorporados en este texto a manera de referencia. También se incluyen miméticos peptídicos que corresponden a péptidos con enlaces de amida reemplazados por enlaces olefínicos. Más preferiblemente, el primer aspecto proporciona un compuesto de la fórmula general (III) A- (B)„- (Xaa)mY (III) en donde A es un radical que comprende uno o más de un anillo heterocíclico, un anillo carbocíclico y sistema de anillos fusionados, el anillo o sistema de anillos son esenciales para una actividad terapéutica del compuesto por la acción en un objetivo de ácido nucleico o proteína B es un radical separador, bivalente n es un número entero de 0 o 1 Xaa es cualquier residuo de aminoácido m es un número entero de 2 a 100 e Y es H, un catión o grupo de extremo en donde Xaa se selecciona independientemente en cada ocurrencia de repetición de tal manera que forme un oligopéptido o protexna que sea escindible internamente por una enzima metaloproteinasa de matriz tal como para producir un compuesto de la fórmula (IV) A- (B)a- (Xaa) -qY (IV) en donde A, B, n, Xaa e Y tienen los significados descritos en la fórmula III y q es 0 o un número entero menor que m, de tal manera que la eficacia del compuesto de la fórmula IV sobre el ácido nucleico o proteína es incrementada sobre la eficacia del compuesto de la fórmula III. Preferiblemente, la actividad es una de modulación de la actividad de una membrana celular o receptor intracelular, enzima o modulación de la capacidad del ADN para ser replicado o transcrito o expresado. Preferiblemente, el compuesto de la fórmula IV tiene eficacia superior en el objetivo de ácido nucleico o proteína que un compuesto de la fórmula V A-(B)n-Y (V) en donde A, B, n e Y son como se describiera anteriormente. El radical A es. preferiblemente aquel que comprende solo uno de un sistema de anillos fusionados, el cual puede ser heterocíclico o carbocíclico, o es un anillo heterocíclico no fusionado. Los ejemplos no limitantes del radical A incluyen sistemas de anillos de esteroides, sistemas de anillos de antraceno y sistemas de anillos de mitomicina, los cuales son capaces de interactuar con receptores de proteínas o ácido nucleico. Los sistemas de anillos más específicos son aquellos que se encuentran en las moléculas biológicamente activas, conocidas: daunorrubicina, mitoxantrona, metotrexato, campotecina, quinocarmicina, clorambucil y mitomicina-C . A es enlazado covalentemente al separador B o directamente a X o (Xaa) m a través de un átomo de nitrógeno, tal como en un grupo amino unido directamente o indirectamente al anillo. Por ejemplo, donde el sistema de anillos es aquel de los antracenos dox- o daunorrubicina, B, X o Xaa se pueden unir al grupo amino primario del azúcar amino, daunosamina. • En mitoxantrona B, X o Xaa se pueden unir por medio de enlaces de amida con el grupo amino secundario en ese sistema. Con los esteroides B, X o Xaa se pueden conjugar a una o más de las posiciones 3, 17 o 7 por medio de enlaces de éter o éster a los grupos hidroxilo esferoides . El radical B puede ser cualquier separador bivalente que sea consistente con el compuesto de la fórmula II que tenga actividad en el objetivo propuesto. Los separadores típicos son radicales de alquileno, a-?-diamino, -?-dicarboxilato, -?-dialcohol , a-co-aminoalcohol , a-?-aminoácido. -Otras combinaciones de grupos alquilo a-a-sustituidos, adecuados se les ocurrirán a aquellas personas expertas en el campo . Los grupos separadores , preferidos tendrán una longitud de 2 a 10 átomos de carbono contiguos entre A y el residuo de aminoácido de (Xaa)m al cual se enlaza B. Más preferiblemente, éste tiene una longitud de 4, 5 o 6 aminoácidos, por ejemplo - H (C¾) n-C (0) - , -NH (C¾) n-NH- , -NH (CH2) n-0- , en donde n es 2, 3 o 4, por ejemplo -NH(CH2)2-C(0) -, -NH (CH2) 3-NH- , -NH (CH2) 4-0- . La cadena de oligopéptido (Xaa)m tiene preferiblemente una longitud de 4 a 30 residuos de aminoácidos, más preferiblemente una longitud de 4 a 15 y aún más preferiblemente de 4 a 10 residuos de aminoácidos, mientras que el radical (Xaa) q tiene una longitud de 1 a 8 , más preferiblemente 1 a 4 residuos de aminoácidos. Las identidades preferidas para (Xaa)m comprenden una cadena de oligopéptido de la fórmula (VI) , también proporcionada en este texto como la SEC ID No 1 : -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-en donde Xaal-4 son residuos de aminoácidos en donde Xaal es aquel de prolina o un análogo de origen no natural de la misma. Xaa2 es aquel de leucina, un análogo de origen no natural de la misma, S-mercaptoetil-cisteína (EMC), tienilalanina (THA) y p-clorofenilalanina (PFC) Xaa3 es aquel de glicina, un análogo de origen no natural de la misma, que es tienilalanina (THA) o ciclohexilalanina (CHA) y Xaa4 es aquel de leucina, un análogo de origen no natural de la misma, S-metilcisteína (SMC) , norvalina (NVA) , norleucina (NLE) o fenilglicina (PH6) . Será evidente para aquellas personas expertas en el campo que mientras que los aminoácidos pueden ser de forma L, éstos también pueden seleccionarse de manera ventajosa en la forma D, tal como de D-prolina o D-leucina. El isómero D proporcionará alguna resistencia mejorada a la degradación de su enlace con el separador B o con Xaa2 por peptidasas. Aún más preferiblemente, la cadena de oligopéptido -(Xaa)m tiene la fórmula (VII) o la SEC ID No 2: -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa -Xaa5-en donde Xaal-4 son residuos como se describiera anteriormente y Xaa5 es el residuo de cualquier aminoácido.
Preferiblemente, el residuo Xaa5 se selecciona de los L- o D-aminoácidos : tirosina, metionina, fenilglicina, isoleucina, leucina y norvalina, pero más preferiblemente es un residuo de tirosina o un análogo de origen no natural de la misma. Aún más preferiblemente, la cadena de oligopéptido -(Xaa)m tiene la fórmula (VIII) o la SEC ID No 3 : -Xaal~Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-en donde Xaal-5 son residuos como se describiera anteriormente y Xaa6 es el residuo de cualquier aminoácido, pero más pre eriblemente es de D- o L-alanina o un análogo de origen no natural de la misma. Aún más preferiblemente, la cadena de oligopéptido -(Xaa)m tiene la fórmula (IX) o la SEC ID No 4: -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-en donde Xaal-6 son residuos como se describiera anteriormente y Xaa7 es el residuo de L- o D-alanina, lisina u ornitina (ORN) . De manera ventajosa, Xaa7 es un residuo de D-aminoácido . El grupo de extremo Y puede ser H, OH, un catión o cualquier grupo utilizado convencionalmente para estar en el extremo de la cadena de péptidos en el uso farmacéutico. Los ejemplos de este grupo son descritos o e emplificados en WO 95/09149, WO 99/65886 y WO 01/44190, todas las cuales son incorporadas en este texto a manera de referencia. Los compuestos preferidos de la invención tienen una fórmula donde A es cualquier anillo como se describe en estas patentes incorporadas o cualquier grupo separador como se describe en estas patentes incorporadas para los compuestos activos, citotóxicos de sus invenciones. Una clase preferida de un compuesto de la invención se hace actuar sobre una o más metaloproteinasas de matriz especificas, particularmente por MP-2 o MMP-9, más preferiblemente por MMP9, tal como para incrementar su citotoxicidad a células tumorales. Convenientemente, este compuesto, denominado profármaco, se basa en un sistema de anillos de antraquinona enlazado para ser un péptido a través de un grupo separador, bivalente tal como aquel descrito en WO 95/09149, WO 99/65886 o WO 01/44190, todas del solicitante BTG International Ltd. Estos tienen la fórmula general en donde R1 y R2 son independientemente hidrógeno o hidroxilo, R3 y R4 son independientemente oxo o hidrógeno (el enlace individual se muestra que es doble en el caso de oxo) , uno de R5 y R6 es -B- (Xaa)p-Y, donde p es cualquier número entero y puede ser m o q como se describiera anteriormente en este texto, y el otro es hidrógeno, hidroxilo o un grupo B, en donde el grupo B o cada grupo B es independientemente un grupo separador que proporciona - H-, -C (O) - o -O- en el enlace con (Xaa)p, si está presente, al menos un grupo B no proporciona el residuo de un aminoácido a adyacente al núcleo de antraquinona y el grupo B de cualquier radical B- (Xaa) p es unido al núcleo de antraquinona por medio de un enlace de -NH- . Estos compuestos se describen como que son compuestos anti-tumorales particularmente útiles que actúan por medio de topoisomerasas y también que son útiles como tintes. Para el propósito de la presente invención, el péptido al cual A o A-B- es conjugado es un oligopéptido con una longitud de tres a diez residuos de aminoácidos. Este compuesto es activado a un compuesto de la fórmula II que tiene actividad como un inhibidor de topoisomerasa, el cual es citotóxico para las células tumorales que expresan topoisomerasa I, ??a o ??ß. Más preferiblemente, el oligopéptido tiene una longitud de cinco a ocho residuos de aminoácidos y una forma más conveniente es una secuencia heptapéptido. La secuencia de oligopéptido se puede enlazar a su vez a un grupo o grupos diferentes de péptidos, adicionales en una o más posiciones diferentes del punto de conjugación al radical del "fármaco" . De esta manera, es posible generar un profármaco el cual sea convertido a un compuesto activo y potente dentro del ambiente del tumor mediante las metaloproteinasas de matriz sobre-expresadas . Esto permite relaciones del tejido tumoral/normal mucho mayores que son actualmente disponibles con los agentes quimioterapéuticos inhibidores de topoisomerasa existentes y por lo tanto incrementa el índice terapéutico. En contraste a los profármacos de la técnica anterior, la citotoxicidad disminuida de los profármacos de la presente invención no depende de este mecanismo general y no específico de desactivación a través de la inhibición de la entrada en las células. Los compuestos preferidos son tanto catiónicos en cuanto al extremo N-terminal como hidrófobos, lo que permite una captación celular activa y la falta de citotoxicidad depende de la desactivación específica de, por e emplo, un mecanismo dirigido por ADN de eliminación de células . En el caso de los compuestos de antraquinona preferidos, existe una unión e interacción del ADN disminuida con las enzimas topoisomerasa. En un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona una preparación farmacéutica que comprende un portador y/o excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto del primer aspecto. Se puede utilizar cualquier portador f rmacéuticamente aceptable, adecuado. La preparación debe ser adecuada para la administración de la manera seleccionada. En particular debe ser estéril y, si se propone para la inyección, no pirogénica.
La administración de los compuestos mencionados anteriormente de la invención o una formulación de los mismos no necesita ser restringida por la ruta. Las opciones incluyen la vía enteral (por ejemplo, oral y rectal) o parenteral (por ejemplo, el suministro dentro de la nariz o pulmón o la inyección dentro de venas, arterias, cerebro, columna vertebral, vejiga, peritoneo, músculos o región subcutánea. Los compuestos pueden ser inyectados directamente en el tumor. El tratamiento puede consistir de una dosis individual o una pluralidad de dosis durante un periodo de tiempo. La dosificación será determinada preferiblemente por el médico o facultativo pero puede ser entre 0.01 mg y 1.0 g/kg/día, por ejemplo entre 0.1 y 500 mg/kg/día. En términos de dosis por metro cuadrado de superficie corporal, el compuesto puede ser administrado en 1.0 mg a 1.5 g por m2 por día, por ejemplo 3.0-200.0 mg/m2/día. Al menos algunos de los compuestos de la invención tienen una toxicidad particularmente baja para las células de mamífero normales y se podrían proporcionar en dosis muy altas, por ejemplo 50-300 mg/kg. En comparación, la doxorrubicina tiene una dosis tolerada máxima de 5 mg/kg en roedores y 1-2 mg/kg en el hombre. Mientras que es posible para un compuesto de la invención ser administrado solo, es preferible presentarlo como una formulación farmacéutica, junto con uno o más portadores y/o excipientes aceptables. El (los) portador (es) y/o excipientes deben ser "aceptables" en el sentido de que sean compatibles con el compuesto de la invención y no dañinos- para los receptores de los mismos. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en una forma de dosificación unitaria y pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en el campo de la farmacia. Una forma de dosificación unitaria puede comprender 2.0 mg a 2.0 g, por ejemplo 5.0 mg a 300.0 mg de ingrediente activo. Estos métodos incluyen el paso de poner en asociación el ingrediente activo, es decir el compuesto de la invención, con el portador y/o excipientes que constituyen uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan al poner en asociación, de manera uniforme e íntima, el ingrediente activo con los portadores líquidos o portadores sólidos finamente divididos y/o excipientes y/o dos o todos éstos, y luego, si es necesario, darle forma al producto. Las formulaciones de acuerdo con la presente invención que son adecuadas para administración oral se pueden presentar como unidades discretas tales como cápsulas, sellos o tabletas, cada una que contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o granulos; como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o un líquido no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión líquida de agua en aceite. El ingrediente activo también se puede presentar como un bolo, electuario o pasta. Una tableta se - puede elaborar mediante la compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Las tabletas comprimidas se pueden preparar mediante la compresión en una máquina adecuada del ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como un polvo o granulos, opcionalmente mezclada con una sustancia aglutinante (por ejemplo, povidona, gelatina, hidroxipropil-metilcelulosa) , lubricante, diluyente inerte, conservador, desintegrante (por ejemplo, glicolato de almidón sódico, PVP, povidona reticulada, carboximetilcelulosa de sodio reticulada) , agente tensoactivo o dispersante. Las tabletas moldeadas se. pueden elaborar mediante el moldeo en una máquina adecuada de una mezcla de compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido, inerte. Las tabletas pueden ser revestidas o marcadas opcionalmente y se pueden formular para proporcionar liberación lenta o controlada del ingrediente activo en la misma utilizando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en proporciones variantes para proporcionar un perfil de liberación deseado. Las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la boca incluyen pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base de sabor, usualmente sacarosa y acacia o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y goma acacia; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un portador líquido, adecuado. Las formulaciones adecuadas para la administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles ya sea acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener anti-oxidantes, amortiguadores, bacteriostatos y solutos, los cuales pueden volver la formulación isotónica con la sangre del receptor propuesto; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden incluir agentes de suspensión y agentes de reticulación. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitaria o de múltiples dosis, por ejemplo ampolletas selladas y frasquitos, y se pueden almacenar en una condición secada por congelación (liofilizada) que requiere únicamente la adición del portador liquido, estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones para inyección excontemporánea se pueden preparar a partir de polvos, granulos y tabletas estériles de la clase descrita previamente. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis o unidad diaria, subdosis diaria o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Se debe entender que además de los ingredientes mencionados en particular anteriormente, las formulaciones de esta invención pueden incluir otros agentes convencionales en el campo con respecto al tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, aquellos adecuados para la administración oral pueden incluir agentes saborizantes . Al menos algunos de los compuestos de la presente invención son útiles como fármacos anti-cáncer, anti-virales y/o anti-parasíticos y al menos algunos de los compuestos anti-cáncer se pueden utilizar contra la mayoría de malignidades . Los tumores particulares adecuados para el tratamiento de acuerdo con la invención incluyen canceres de la cervix uterina, cabeza, cuello, gliomas cerebrales, pecho, colon, pulmón, próstata, piel, boca, nariz, esófago, estómago, hígado, páncreas y formas metastáticas de cualquiera de éstos que expresan metaloproteinasas de matriz. Las infecciones virales, particulares que son adecuadas para el tratamiento de acuerdo con la invención incluyen aquellas causadas por los siguientes virus.- virus de herpes simple I (HSV I, por sus siglas en inglés) ; virus de herpes simple II (HSV II, por sus siglas en inglés) ; virus de varicela-zoster/Ellen (VZV Ellen) ; virus de papiloma de bovino (BPV, por sus siglas en inglés) ; y virus de inmunodeficiencia humana (HIV, por sus siglas en inglés) . Las infecciones por protozoarios particulares, que son adecuadas para el tratamiento de acuerdo con la invención incluyen tricomoniasis ; malaria (especialmente aquella causada por Plasmodium falciparum) ; tripanosomiasis (causada por Tripanosoma brucei y T. cruzi) ; y leis maniasis . Aquellas personas expertas en el campo apreciarán que el perfil novedoso de actividad de. los presentes compuestos hará más probable que algunos al menos sean útiles como agentes antibacterianos . En un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para tratar un cuerpo humano o animal en necesidad de una terapia para un trastorno en donde el tejido afectado por el trastorno produce una metaloproteinasa de matriz ( MP) , particularmente MP-9, y particularmente a un nivel incrementado comparado con otros tejidos, que comprende administrar al cuerpo humano o animal una dosis terapéutica, efectiva de un compuesto o de una preparación de la invención. Los trastornos preferidos se seleccionan del grupo que consiste de cáncer, infección viral o infección parasítica. En un cuarto aspecto de la presente invención, se proporciona un compuesto del primer aspecto de la invención para el uso en la terapia. En un quinto aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto del primer aspecto de la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un estado de enfermedad asociado con un tejido que expresa una metaloproteinasa de matriz, particularmente un cáncer.
Los compuestos de anillos de antraceno preferidos de la invención, los cuales son antraquinonas de profármacos que actúan como inhibidores de topoisomerasa, son investigados posteriormente y exhiben claramente la escisión selectiva mediada por MMP-9 de los enlaces de péptidos hendibles, por ejemplo gly-leu, in vitro y en células vivas. Además, las propiedades dobles de lipofilicidad y carga catiónica asociada con estos compuestos preferidos pueden circunvenir la resistencia a múltiples fármacos mediada por pl70 (p-glicoproteína) (T. J. Lampidis y colaboradores, Biochemistry, 1997, 36_, 2679, Circumvention of pgp MDR as a function of anthracycline lipophilicity and charge) . Un sexto aspecto de la presente invención proporciona el uso de un oligopéptido que comprende una secuencia de la fórmula general (IV) o SEC ID No 1 -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-como un modulador de actividad para la incorporación mediante la conjugación en una molécula biológicamente activa que tiene acción sobre un objetivo de proteína o ácido nucleico, la incorporación es tal que la molécula biológicamente activa se hace más activa en presencia de una metaloproteinasa de matriz que cuando está ausente. La presente invención ahora será descrita adicionalmente por referencia a los siguientes ejemplos no limitantes y las figuras. Estos se proporcionan con el propósito de ilustración únicamente y otros ejemplos que se encuentran dentro del alcance de las reivindicaciones se les ocurrirán a aquellas personas expertas en el campo en vista de los mismos . Breve descripción de los dibujos La figura 1 muestra la relación estructural de uno de los compuestos preferidos de la invención, ejemplo 8, con sus metabolitos potenciales in vivo. Los números entre paréntesis representan los ejemplos en la especificación. La figura 2 es un cromatograma de CLAR de la preparación del compuesto del ejemplo 8 (U :UB 187) y sus productos de degradación potenciales. La figura 3A es un espectro de masas de los metabolitos generados después de la incubación del compuesto del ejemplos 8 [UN:UB 187] con MMP-9 recombinante de humano y la figura 3B es el espectro de iones progenitores de los metabolitos . La figura 4 muestra los productos de la acción de homogenados de tumor de HT1080 sobre UN.-UB 227 (cuyo título es compuesto del ejemplo (15) [NU:UB 227] en el homogenado de HT1080 (1/1500) ) . Las figuras 5 a 22 muestran las estructuras de los compuestos de los ejemplos. La figura 23 muestra un esquema para la síntesis del compuesto del ejemplo 8.
MÉTODOS GENERALES SÍNTESIS DE COMPUESTOS SEPARADORES DE ANTRAQUINONA Método A; Método general para la preparación de compuestos de brazo separador de antraquinona mono-aminadas a partir de aminas La monocloroantraquinona (sustituida o no sustituida) apropiada (5 mmol) se suspendió en DMSO (15 cm3) ; se adicionó un a, co-diaminoalcano apropiado (50 mmol) y la mezcla se calentó durante 1 hora sobre un baño de agua hirviendo (o se calentó a reflujo como fuera apropiado) . La solución se enfrió y se adicionó a un exceso grande de agua (500 cm3) . El sólido precipitado, rojo se filtró, se secó y pudo ser utilizado para las reacciones subsecuentes sin purificación adicional. Las muestras analíticamente puras se obtuvieron mediante la purificación por cromatografía en columna de gel de sílice 60 [Merck] utilizando cloroformo :metanol y elución de gradiente. NOTA. En los ejemplos en los cuales la monocloroantraquinona contuvo adicionalmente grupos hidroxilo, se utilizó piridina en lugar de DMSO. Método B: Método general para la preparación de compuestos de brazo separador de antraquinona mono-aminada-4-hidroxilada a partir de aminas La 1, -dihidroxiantraquinona (1 mmol) se suspendió en etanol (20 cm3) y THF (20 cm3) que contenía un ,?-diaminoalcano apropiado (10 mmol) y se calentó sobre un baño de agua (a 95°C) durante 1.75 horas. La solución se enfrió y se adicionó gota a gota di- ter-butil -dicarbonato (20 mmol) en metanol (40 cm3) y la mezcla de reacción se dejó alcanzar la temperatura ambien e. El compuesto protegido con N-^Boc crudo se extrajo en cloroformo y se aplicó a una columna de cromatografía en gel de sílice, utilizando tolueno : acetato de etilo (4:1) como el solvente de elución, para dar el compuesto protegido con N-fcBoc, el cual se desprotegió utilizando ácido trifluoroacético para dar el compuesto de brazo separador de antraquinona 4-hidroxilada como la sal de trifluoroacetato soluble en agua. Método C; Método general para la preparación de compuestos de brazo separador de antraquinona mono-aminada-4,8-dihidroxilada La leuco-1, 4 , 5-trihidroxiantraquinona (3 mmol) se suspendió en diclorometano (200 cm3) . Se adicionó ?-'??s-a,?-diaminoalcano o a, ?-diaminoalcano* (3 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas seguido por la adición de trietilamina (2 cm3) y la ventilación durante 2 horas. La mezcla se purificó mediante la cromatografía en gel de sílice, utilizando una gradiente de diclorometano : acetato de etilo para dar el compuesto separador en su forma protegida con N-fcBoc, la cual se desprotegió utilizando ácido trifluoroacético .
#NOTA: Donde la amina apropiada no fue disponible en su forma protegida con mono-N-^Boc se adicionó dicarbonato de di-ter-butilo (3 mmol) en metanol (100 cm3) a la mezcla de reacción después de la ventilación. Método D; Método general para la activación de un aminoácido N-a-protegido mediante la conversión a un éster de pentafluorofenolato Se adicionó pentafluorofenol (1.1 mmol) a una solución agitada de un aminoácido N-protegido (1 mmol) en acetato de etilo seco (40 cm3) a 0°C. Se adicionó gota a gota una solución de diciclohexilcarbodiimida (1.2 mmol) en acetato de etilo seco (10 cm3) y la agitación continuó durante 12 horas a medida que la mezcla dejara alcanzar la temperatura ambiente. La diciclohexilurea precipitada se filtró y la solución se evaporó para producir un precipitado cristalino del éster de aminoácido-O-pentafluorofenolato N-protegido, el cual se utilizó para la reacción subsecuente sin purificación adicional. Método Et Método general para el acoplamiento de un aminoácido C-activado protegido con -^oc (ter-butoxicarbonilo) a una aminoalquilamino-antraquinona o a un conjugado de antraquinona-aminoácido/péptido y_ la desproteccion subsecuente del producto de reacción El conjugado de antraquinona (1 mmol) se suspendió en DMF [y trietilamina (1 mmol) para liberar la amina libre donde el conjugado de antraquinona es una sal de trifluoroacetato] y se agitó a 0°C. Se adicionó gota a gota un éster de aminoácido-O-pentafluorofenolato protegido con N-fcBoc (1.1 mmol) en DMF .[.o un éster de aminoácido-N-hidroxisuccinimida protegido con N-fcBoc (1.1 mmol) en THF] y la mezcla de reacción se dejó alcanzar la temperatura ambiente. La agitación continuó durante 12 horas adicionales. La mezcla se dividió entre cloroformo y agua. Los extractos de cloroformo se lavaron con bicarbonato de sodio saturado(acUoso) luego agua, se secó (MgS04) , se filtró, se evaporó a un volumen bajo y se purificó mediante la cromatografía en columna de gel de sílice eluyendo inicialmente con cloroformo : acetato de etilo (4:1). El producto principal se eluyó utilizando el mismo sistema de solventes que contenía gradientes en incremento de metanol (0.5-2% v/v) . Las fracciones que contenían el producto principal se combinaron, se filtraron y se evaporaron. El compuesto - protegido con fcBoc se disolvió en ácido trifluoroacético a temperatura ambiente. Después de 0.5 horas, el solvente se evaporó y el sólido residual se re-evaporo con etanol (3x10 cm3) antes de la disolución en un volumen mínimo de etanol (3 cm3) . La adición de éter (100 cm3) dio un precipitado del conjugado de aminoácido enlazado a un separador de antraquinona desprotegida como la sal de trifluoroacetato N-terminal, la cual se filtró y se secó in vacuo. Método F: Método general para el acoplamiento de un aminoácido C-ac i ado. protegido con N-Fmoc (9-fluorenilmetoxi-carbonilo) a una aminoalquilamino-antraquinona o a un conjugado de antraquinona-aminoáeido/péptido y la desprotección subsecuente del producto de reacción El conjugado de antraquinona (1 mmol) se suspendió en DMF [y trietilamina (1 mmol) para liberar la amina libre donde el conjugado de antraquinona es una sal de trifluoroacetato] y se agitó a 0°C. Se adicionó gota a gota un éster de aminoácido-O-pentafluorofenolato protegido con N-Fmoc (1.1 mmol) en DMF [o un éster de aminoácido-N-hidroxisuccinimida protegido con N-Fmoc (1.1 mmol) en THF] y la mezcla de reacción se dejó alcanzar la temperatura ambiente. La agitación continuó durante 12 horas adicionales. La mezcla se purificó mediante la extracción de solvente y la cromatografía en columna de gel de sílice como se describiera en el método E. El compuesto protegido con Fmoc se disolvió en piperidina 20% (v/v) en DMF (20 cm3) y se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos . La solución se dividió entre cloroformo y agua (1:1, 100 cm3) se lavó con agua (3x50 cm3) , se secó (Na2S04) , se filtró y se evaporó a un volumen bajo antes de la aplicación a una columna de cromatografía de gel de sílice [cloroformo :metanol (19:1)] diluyendo con cloroformo rmetanol , (gradiente en incremento, 19:1—»5:1). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, se evaporaron a sequedad y se disolvieron en ácido trifluoroacético . Después de 5 minutos, el solvente se evaporó y se disolvió en un volumen mínimo de etanol (3 cm3) . La adición de éter (100 cm3) dio un precipitado del conjugado de aminoácido enlazado a un separador de antraquinona desprotegida como la sal de trifluoroacetato N-terminal. EJEMPLOS Ejemplo (la): 1- [ (3 -Aminopropil) amino] antraquinona [Método A] Se preparó utilizando 1-cloroantraquinona y 1,3-diaminopropano. P.f. 106-108°C. Ejemplo (Ib): Trifluoroacetato de 1- [ (3 -aminopropil) amino] -antraquinona El compuesto (la) se purificó mediante la cromatografía en columna, eluyendo con butanol : ácido acético glacial:agua (4:5:1). El acetato de l-[(3-aminopropil) amino] antraquinona se dividió entre cloroformo y agua y se neutralizó con trietilamina para dar la l-[(3-aminopropil) amino] antraquinona . El extracto de cloroformo se secó (NA2S0 ) , se filtró, se evaporó a sequedad y se disolvió en un volumen pequeño de ácido trifluoroacético (2 cm3) . La adición de éter (100 cm3) proporcionó el compuesto del título como un sólido de color rojo. P.f. 196°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 281 (100%) (RH 3)+, 263 (20%), 102 (15%).
Ejemplo (2): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de l-[(3-aminopropil) amino] antraquinona (la) con éster de N^Boc-L-prolina-N-hidroxisuccinimida en THF. P.f. 176°C. espectro de rmn XH (300 MHz, de-DMSO) d: 1.80-2.05 (4H, m) ; 2.30 (2H, m) ; 3.10-3.60 (6H, m) ; 4.10 (1H, t) ; 7.25 (1H, d) ; 7.45 (1H, d) ; 7.65 (1H, t) ; 7.80-7.95 (2Hf m) ; 8.10-8.20 (2H, m) ; 8.70 (1H, t) ; 9.00 (2H, s amplio); 9.70 (1H, t) . FABMS (+) m/z 378 (12%) (RNH2)+, 176 (31%), 89 (51%), 77 (80%), 31 (100%). , 491.
Ej emplo (3) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-L-leucin-N- idroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-prolilamino) propilamino] antraquinona (2) en THF y trietilamina. P.f. 126°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 513 (4%) (RNH2+Na) +, 491 (100%) (RNH3)+, 119 (10%), 87 (30%), 55 (2%).
ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (70%) (CF3COO)", 69 (100%). M, 604. Ejemplo (4): Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método ?] Se preparó por medio de la reacción de éster de N-^oc-glicina-N-hidroxisuccinimida con trifluoroacetato de 1-[3- (L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (3) en THF y trietilamina. P.f. 144-148 °C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 570 (15%) (RN¾+Na)+, 548 (100%) (RNH3) +, 239 (10%), 87 (75%), 55 (5%) . M, 661. Ejemplo (5): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-L-leucilglicina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3 - (L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (3) en DMF y trietilamina. P.f. 144°C. ESMS(+) (Cono 50V) m/z: 683 (10%) (RNH2+Na)+, 661 (50%) (KNH3)+, 491 (2%), 378 (100%), 155 (5%), 87 (35%) . , 774. Ejemplo (6): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método E] El éster de N-^Boc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) propilamino] antraquinona (5) en THF y trietilamina . P.f. 168°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 754 (5%) (KNH2+Na)+, 732 (45%) (RNH3)+, 239 (15%), 119 (15%), 87 (100%) . M, 846. Ejemplo (7); Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N-'iBoc-L-alanil-L-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil—L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraguinona (5) . P.f_. 132°C. ESMS(+) (Cono 50V) m/z: 825 (12%) (R H2+Na) +, 803 (25%) (RNH3)+, 378 (75%), 239 (5%), 119 (20%), 87 (100%) . ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (CF3COO)", 69 (100%) . , 917. Ejemplo (8) ; Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (7) en THF y trietilamina. P.f. 166°C. ESMS(+) (Cono 50V) m/z: 896 (25%) (RNH2+Na)+, 874 (80%) (RNH3)+, 497 (65%), 378 (100%) (Ac-separador-Pro-NH2) +, 239 (10%), 87 (100%) . ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 988. Ejemplo (9) : Trifluoroacetato de 1- [3- (D-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-D-prolina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con l-[(3-aminopropil) amino] antraquinona (la) en DMF y trietilamina. P.f. 177°C. Espectro de rmn ¾ (300 MHz, ds-DMSO) d: 1.70-2.00 (5H m) ; 2.20 (1H, m) ; 3.20-3.50 (6H, m) ; 4.05 (1H, t) ; 7.25 (1H, dd) ; 7.45 (1H, dd) ; 7.65 (1H, m) ; 7.80-7.95 (2H, m) ; 8.05-8.10 (2H, m) ; 8.60 (1H, t) ; 9.00 (2H, s amplio); 9.75 (1H, t) , C24H24N3O5F3 requerido: C 58.65, H 4.92, N, 8.55%. Encontrado C 57.84, H 4.76, N 8.35%. FABMS (+) m/z: 400 (4%), 378 (36%) (E¾)+, 263 (10%), 89 (30%), 70 (100%). M, 491. Ejemplo (10): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-D-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Métodos Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato l-[3-(D-prolilamino) ropilamino] antraquinona (9) en THF y trietilamina. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 491 (100%) (RNH3) + -ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3C00)". M, 604. Ejemplo (11): Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos E] Se preparó por medio de la reacción de éster de N-^oc-glicina-N-hidroxisuccinimida con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona (10) en THF y trietilamina. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 548 (100%) (R ¾)+. M, 661. Ejemplo (12): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N-^oc-L-leucilglicina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-D-prolilamino) ropilamino] antraquinona (10) en DMF y trietilamina. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 661 (100%) (RN¾) + . M, 774.
Ejemplo (13): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método Ej El éster de N^Boc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) ropilamino] antraquinona (12) en THF y trietilamina . P.f. 168°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 732 (100%) (RN¾)+. M, 846. Ejemplo (14): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-L-alanil-L-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3 - (L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona (12). P.f. 132°C.
ESMS(+) m/z: 825 (30%) (RN¾+Na)+, 803 (100%) (KNH3)+, 355 (10%), 114 (32%). ESMS(-) m/z: 113 (100%) (CF3COO)~, 69 (35%).
M, 917. Ejemplo (15): Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-D-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-leucil -glicil-L-leucil-D-prolilamino) -propilamino] antraquinona (14) en THF y trietilamina. P.f. 166°C. ESMS(+) (Cono 90V) m/z: 896 (5%), 874 (25%) (EN¾)+, 497 (15%), 378 (100%) (Ac-separador-Pro-NH2) +. ESMS(-) (Cono 90V) m/z: 145 (100%), 113 (88%) Ejemplo (16): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraguinona [UN:UB 260] [Métodos D y E] La N-fcBoc-L-norvalina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraguinona (4) en DMF y trietilamina. P.f. 210°C. FAB (+) m/z: 670 (50%) (RNH2+Na)+, 648 (100%) (R H3)+- M, 760. Ejemplo (17): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraguinona [UN:UB 261] [Método E] El éster de N^Boc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3 - (L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) ropilamino] antraguinona (16) en THF y trietilamina. P.f. 198°C. FAB (+) m/z: 740 (100%) (RNH2+Na)+, 718 (90%) (RNH3)+. M, 831. Ejemplo (18): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] -antraguinona [UN:UB 262] [Método E] El éster de N^Boc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (17). P.f. 197°e. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 811 (10%) (RN¾+Na)+, 789 (100%) (RN¾)+, 414 (10%), 307 (5%), 129 (55%), 97 (80%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (CF3COO)~, 69 (100%) . M, 902. Ejemplo (19): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-alanil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Métodos D y E] Se preparó a partir de la reacción de éster de BrfcBoc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (18) en THF y trietilamina. P.f. 208°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 882 (5%) (RNH2+Na)+, 860 (100%) (RH3)+, 449 (10%), 129 (70%), 97 (100%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (60%) (CF3COO)~ 69 (100%). M, 973. Ejemplo (20): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de N-Fmoc-L-norleucina-pentafluorofenolato con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (4) en DMF y trietilamina. P.f. 169°C. FABMS (+) m/z: 683 (50%) (KNH2+Na)+, 661 (75%) (RNH3) +, 378 (15%), 182 (10%), 132 (100%) . M, 77 . glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-Mdroxisuccinimida y trifluorcacetato de l-[3-(L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilartdno)propilamino] antraquinona (20) en THF y trietilamina. P.f. 185°C. FABMS(+) m/z: 754 (10%) (EN¾+Na)+, 732 (6%) (KNH3)+, 378 (6%), 132 (100%). M, 845. Ejemplo (22): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-alanil-L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N-^Boc-L-alanil-L-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (20) en DMF y trietilamina. P.f. 176°C. FABMS (+) m/z: 825(52%) (R1SIH2+Na) +, 803 (15%) (RN¾)+, 378 (45%), 132 (100%). M, 916. Ejemplo (23): Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-alanil-L-alanil-L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] ntraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-L-norleucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (22) en THF y trietilamina. P.f. 192°C. FABMS (+) m/z: 897(35%) (RNH2+Na) +, 875 (65%) (R H3)+, 497 (12%), 378 (100%), 263 (52%). M, 988.
Ejemplo (24): Trifluoroacetato de 1- [3 - (S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propil-amino] antraquinona [Métodos D y E] La N-^Boc-S-metil-L-cisteína se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-prolilamino)propilamino] antraquinona (4) en DMF y trietilamina. P.f. 196°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 687 (70%) (EMi2+Na)+, 665 (80%) CN¾)+, 413 (100%), 378 (25%), 279 (15%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (55%) (CF3C00)~ 69 (100%) . M, 778. Ejemplo (25): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3 - (S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (24) en THP y trietilamina. P.f. 147°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 758 (15%) (RNH2+Na)+, 736 (100%) (RN¾)+, 413 (30%), 378 (5%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " 69 ' (20%) . M, 849. Ejemplo (26): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (25) en THF y trietilamina. P.f. 162°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 829 (5%) (REH2+Na)\ .807 (100%) (RN¾) +, 691 (5%), 562 (10%), 293 (15%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " 69 (20%) . M, 920. Ejemplo (27) : Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-alanil-L-analil-5-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilaminoj antraquinona [Métodos D y E] La N-^Boc-D-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona (26) en DMF y trietilamina. P.f. 191°C. ESMS(+) (Cono 90V) m/z: 900 (80%) (RN¾+Na)+, 878 (40%) (RN¾)+, 378 (100%), 102 (95%) . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)~ 69 (30%) . M, 991. Ejemplo (28) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-tirosil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-0- ter-butil-L-tirosina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (5) en THF y trietilamina [nota: después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título] . P.f. 184-188°C. FABMS (+) m/z: 846 (4%) (RN¾+Na)+, 824 (100%) (KNH3)+. M, 937. Ejemplo (29): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-tirosil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-L-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (O- ter-butil-L-tirosil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona en DMF y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título] . P.f. 182 °C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 917 (5%) (RN¾+Na) +, 895 (100%) (RN¾)+, 378 (2%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (60%) (CF3COO) " 69 (100%) . M, 1008. Ejemplo (30): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-tirosil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-D-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-O-butilo-terciario-L-tirosil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona en D F y trietilamina [nota: después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título]. P.f. 190-194°C. FABMS (+) m/z: 988 (10%) (R ¾+Na) +, 966 (100%) (RNH3)+, 378 (30%). M, 1079. Ejemplo (31) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N-^oc-L-norvalina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino)propilamino] -antraquinona (5) en DMF y trietilamina. P.f. 189°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 782 (20%) (RN¾+Na)+, 760 (40%) (RN¾)+, 378 (5%), 134 (20%), 102 (100%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)" 69 (60%). M, 873. Ejemplo (32): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-norvalil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (31) en THF y trietilamina. P.f. 192°C. FABMS (+) m/z: 853 (10%) (RNH2+Na)+, 831 (15%) (RNH3)+, 443 (10%), 378 (100%), 341 (20%). M, 944.
Ejemplo (33): Trifiuoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-norvalil-L-leucil-gl-icil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N-fcBoc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifIuoroacetato de 1-[3- (L-alanil-L-norvalil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (32) en THF y trietilamina. P.f. 174-178°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 924 (5%) (RNH2+Na)+, 902 (100%) (RN¾)+, 378 (2%), 263 (5%). M, 1015. Ejemplo (34): bis-TrifIuoroacetato de 1- [3- (D-lisil-L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Métodos F] La N-oc-Fmoc-N- -^oc-D-lisina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifIuoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propil-amino] antraquinona (7) en DMF y trietilamina (nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 20 minutos antes de la evaporación para dar el compuesto del título). P.f. 196°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 932(100%), 1158. Ejemplo (35): TrifIuoroacetato de 1- [3 - (S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-S-p-metoxibencil-L-cisteína se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (4) en DMF y trietilamina. P.f. 182°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 793 (40%) (RN¾+Na)+, 771 (100%) (RNH3)+, 413 (50%), 281 (50%), 239 (20%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " 69 (10%). M, 884. Ejemplo (36): Tri luoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-L-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona (35) en DMF y trietilamina. P.f. 187°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 864 (10%) ( NH2+Na)+, 842 (70%) (RN¾)+, 380 (10%), 317 (5%), 102 (100%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " 69 (20%). , 955. Ejemplo (37): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-L-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolílamino) propilamino] -antraquinona (36) en DMF y trietilamina. P.f. 182°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 935 (50%) (RN¾+Na)+, 913 (85%) (RN¾)+, 129 (70%), 97 (100%) . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " 69 (30%) . M, 1025. Ejemplo (38) : Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-alanil-S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-D-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-alanil-S-p-metoxibencil-L-cisteinil-glicil~L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (37) en DMF y trietilamina. P.f. 190-192°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 1006 (5%) (RNH2+Na)+, 984 (100%) (RNH3)+, ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (70%) (CF3COO)~ 69 (100%) . M, 1097. Ejemplo (39) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-tirosil-L-norvalil-glici1-L- 1euci1 -L- roli1amino) ropi1amino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-O-ter-butil-L-tirosina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) ropilamino] antraquinona (16) en DMF y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título] .
P.f. 174°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 832 (10%) (REH2+Na) +, 810 (100%) (ENH3)+, 378 (50%). M, 923. Ejemplo (40): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-tirosil-L-norvalil-glicil-L-leucil-Lrprolilamino) propilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-L-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (O-butilo-terciario-L-tirosil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) propilamino] -antraquinona en DMF y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del titulo] . P.f. 182°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 881 (100%) (KNH3) +, 378 (2%) . M, 994. Ejemplo (41): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-tirosil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la_ reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-D-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-O-butilo-terciario-L-tirosil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) propilamino] antraquinona en DMF y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título], P.f. 190°C. ESMS(÷) (Cono 20V) m/z: 974 (10%) (KNH2+Na)+, 952 (100%) (R H3)+, 378 (5%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COOr 69 (30%). M, 1065. Ejemplo (42): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-tirosil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-0- ter-butil-L-tirosina con trifluoroacetato de 1- [3 - (S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (24) en D F y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título] . P.f. 178-182°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 840 (3%) (RNH2+Na)+, 828 (100%) (R H3)+. M, 941.
Ejemplo 43): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-tirosil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-L-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (O-butilo-terciario-L-tirosil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona) en DMF y trietilamina [nota : después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título]. P.f. 166-170°C. FABMS (+) m/z: 921 (15%) (R H2+Na)+, 899 (25%) (RN¾)+, 378 (100%). , 1012. Ejemplo (44): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-tirosil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método F] Se preparó por medio de la reacción de éster de pentafluorofenolato de N-Fmoc-D-alanina con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-O-butilo-terciario-L-tirosil-S-metil-L-cisteinil-glicil-L-leucil-L-prolil-amino) propilamino] -antraquinona) en DMF y trietilamina [nota: después de la desprotección de Fmoc, el sólido se disolvió en ácido trifluoroacético durante 24 horas (para efectuar la O-desprotección del residuo de tirosilo) antes de la evaporación para dar el compuesto del título]. P.f. 195°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 992 (5%) (RNH2+Na) +, 970 (100%) (R H3) + . M, 1083. Ejemplo (45): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-norvalil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Métodos D y E] La N-^Boc-L-norvalina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (16) en DMF y trietilamina. P.f. 174-176°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 768 (15%) (RN¾+Na) +, 746 (100%) (RNH3)+, 378 (5%). M, 859. Ejemplo (46): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-norvalil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) ropil-amino] antraquinona (45) en THF y trietilamina. P.f. 196°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 839 (10%) (RNH2+Na)+, 817 (100%) (RN¾)+, 378 (2%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (40%) (CF3C00)~69 (100%). M, 930. jemplo (47): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-analil-L-norvalil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] ntraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-norvalil-L-norvalil-glicil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (46) en THF y trietilamina. P.f. 203 °C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 910 (20%) (RNH2+Na)+, 888 (80%) (RNH3)+, 413 (20%), 178 (30%), 114 (100%). ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (40%) (CF3COO) " 69 (100%). M, 1001.
Ejemplo (48): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N-fcBoc-L-norvalina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con tri luoroacetato de 1- [3- (L-prolilamino) propilamino] antraquinona (2) en DMF y trietilamina. P.f. 190-194°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 499 (4%) (R H2+Na)+, 477 (100%) (RN¾)+, ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (80%) (CF3COO) " 69 (100%). M, 590. Ejemplo (49): Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó por medio de la reacción de éster de N-^oc-glicina-N-hidroxisuccinimida con trifluoroacetato de 1- [3- (L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (48) en THF y trietilamina. P.f. 196°C. ESMS (+) (Cono 50V) m/z: 556 (3%) (KNH2+Na)+, 534 (50%) (RNH3)+, 378 (100%). ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (20%) (CF3COO)~69 (100%). M, 647. Ejemplo (50): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-gliclil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Métodos D y El La N-^Boc-L-leucilglicina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (49) en DMF y trietilamina. P.f. 172-176°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 669 (10%) (RNH2+Na)+, 647 (100%) (RNH3)+, ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (30%) (CF3COO)~ 69 (100%). M, 760. Ejemplo (51): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (50) en THF y trietilamina . P.f. 176-178°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 740 (3%) (RN¾+Na)+, 718 (100%) (R H3)+, 378 (2%). M, 831. Ejemplo (52): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (51) en THF y trietilamina. P.f. 188°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z. 811 (10%) (RNH2+Na)+, 789 (100%) ( NH3)+. M, 902. Ejemplo (53): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1-[3- (L-alanil-L-alanil-L-leucil-glicil-L-norvalil-L-prolilamino) propilaraino] -antraquinona (52) en THF y trietilamina. P.f. 192-196°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 882 (3%) (RNH2+Na)+, 860 (100%) (RN¾)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)~ 69 (65%). , 973. Ejemplo (54): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de áster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3 - (L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (3) en THF y trietilamina. P.f. 170-174°C. FABMS (+) m/z: 584 (20%) (RNH2+Na)+, 562 (30%) (RNH3)+, 378 (100%). M, 675. Ejemplo (55): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1-[3- (L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (54) en THF y trietilamina. P.f. 178-180°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 697 (5%) (RNH2+Na)+, 675 (100%) (RN¾)+. M, 788. Ejemplo (56): Trifluoroacetato de 1- [3 - (glicil-L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1-[3- (L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (55) en THF y trietilamina. P.f. 192-194°C.
ESMS(+) (Cono 20V) ra/z: 754 (15%) (RNH2+Na)+, 732 (100%) (RNH3) + . M 845. Ejemplo (57) : Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-glicil-L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (56) en THF y trietilamina. P.f. 185°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 825 (5%) (RN¾+Na) +, 803 (100%) (RNH3)+- ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (50%) (CF3C00) " 69 (100%) . M, 916. Ejemplo (58) : Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-alanil-glicil-L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-D-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3 - (L-alanil-glicil-L-leucil-L-alanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (57) en THF y trietilamina. P.f. 192°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 896 (15%) (RNH2+Na)+, 874 (100%) (KNH3)+, 378 (3%) . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (70%) (CF3COO) " 69 (100%). M, 987. Ejemplo (59) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-fcBoc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (3) en THF y trietilamina . P.f. 184-188 °C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 660 (10%) (RN¾+Na)+, 638 (100%) (RNH3) +. ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (30%) (CF3COO)~69 (100%). M, 751. Ejemplo (60): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (59) en THF y trietilamina. P.f. 184-186°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 773 (15%) (RN¾+Na)+, 751 (100%) (RN¾)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (70%) (CF3COO)" 69 (100%). M, 864. Ejemplo (61): Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino)propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato ' de 1- [3- (L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (60) en THF y trietilamina. P.f. 192°C. ESMS(+) (Cono 90V) m/z: 830 (20%) (R H2+Na)+, 808 (60%) (RNH3)+, 378 (100%). ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (40%) (CF3COO) " 69 (100%). M, 921.
Ejemplo (62): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-glicil-L- 1eucil-li-feni1alañil-L-leucil-L-prolilamino) propi1amino3 -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-alanin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (61) en THF y trietilamina. P.f. 186°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 901 (20%) (RNH2+Na)+, 879 (60%) (RN¾)+, 238 (5%). ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (75%) (CF3COO) " 69 (100%) . M, 992. Ejemplo (63): Trifluoroacetato de 1- [3- (D-alanil-L-alanil-glicil-L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-D-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-alanil-glicil-L-leucil-L-fenilalanil-L-leucil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona (62) en DMF y trietilamina. P.f. 190-194°C ESMS (+) (Cono 50V) m/z: 972 (20%) (RNH2+Na)+, 950 (60%) ( NH3)+, 378 (100%). ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (70%) (CF3COO)" 69 (100%). M, 1063. Ej emplo (64) : Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1-[3- (L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (2) en THF y trietilamina. P.f. 160-166°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 457 (5%) (KN¾+Na)+, 435 (100%) (RN¾)+. ESMS(-) (Cono 50V) m/z: 113 (40%) (CF3COO)", 69 (100%). M, 548. Ejemplo (65): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-prolllamlno) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3 - (glicil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (64) en THF y trietilamina. P.f. 172-174°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 548 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 661. Ejemplo (66): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-glicil-L-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método 11 Se preparó a partir de la reacción de éster de N-fcBoc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (65) en THF y trietilamina. P.f. 164-168°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 695 (100%) ( H3)+, ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3C00)". M, 808. Ejemplo (67): Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalanil-L-leucil-glicil-L-prolilamino) ropilamino] ntraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-glicil-L-prolilamino) ropilamino] -antraquinona (66) en THF y trietilamina . P.f. 157°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 752 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (90%) (CF3COO)~, 69 (100%). M, 865. Ejemplo (68) : Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-D-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (D-prolilamino) ropilamino] antraquinona (9) en THF y trietilamina. P.f. 156-162°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 457 (10%) (RN¾+Na)+, 435 (100%) (RN¾) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (80%) (CF3COO)", 69 (100%). M, 548. Ejemplo (69): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N- ^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona (68) en THF y trietilamina. P.f. 174-178°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 548 (100%) (RNH3) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3C00)". M, 661. Ejemplo (70): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-glicil-D-prolilamino) propilamino] ntraquinona [Método II Se preparó a partir de la reacción de éster de N-""Boc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-glicil-D-prolilamino),propilamino] antraquinona (69) en THF y trietilamina. P.f. 170°C. ESMS (+) (Cono 20V) ra/z: 695 (100%) (RNH3) +. ESMS(-) (Cono 20V) m/z : 113 (100%) (CF3COO)~. M, 808. Ejemplo (71): 'Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalanil-L-leucil-glicil-D-prolilamino) ropilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-leucil-glicil-D-prolilamino) propilamino] -antraquinona (70) en THF y trietilamina. P.f. 154-156°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 752 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (90%) (CF3COO)", 69 (100%). M, 865. Ejemplo (72): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^Boc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-prolilamino) ropilamino] antraquinona (2) en THF y trietilamina. P.f. 118-120°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 547 (10%) (R H2+Na)+, 525 (100%) (R H3) +. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 638. Ejemplo (73); Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-prolilamino)propilamino] antraguinona (72) en THF y trietilamina . P.f.-129°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 582 (100%) (RNH3) +. ESMS(-) (Cono 20V) m/z; 113 (100%) (CF3C00)". M, 695. Ejemplo (74): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-isoleucina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona (73) en THF y trietilamina. P.f. 122-124°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 695 (100%) (R ¾) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113(100%) (CF3COO)". M, 808. Ejemplo (75) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-fcBoc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona (74) en THF y trietilamina. P.f. 132-136°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 842 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 955. Ejemplo (76) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (75) en THF y trietilamina; P.f. 166-178°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 955 (100%) (RNH3) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)'. M, 1068. Ejemplo (77): Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-leucil-L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil -L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N-fcBoc-D-alanina se convirtió a su. éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-L-prolilamino) propilamino] antraquinona (76) en DMF y trietilamina. P.f. 142-148°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 1026 (100%) (RNH3) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 1139.
Ejemplo (78): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-D-prolilamino) ropilamino] ntraquinona [Métodos D y E] La N-fcBoc-L-fenilalanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (D-prolilamino) propilamino] antraquinona (9) en THF y trietilamina. P.f. 118-120°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 525 (100%) (R H3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)".
Ejemplo (79) : Trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalan.il-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Método Ej Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-glicina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de l-[3- (L-ferdlalaiiil-D-prolilamino)propilamino] antraquinona (78) en THF y trietilamina. P.f. 128-130°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 582(100%) (RN¾)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113(100%) (CF3COO)". M, 695. Ejemplo (80) : Trifluoroacetato de 1- [3- (L-isoleucil-glicil-L- enilalanil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N-fcBoc-isoleucina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino)propilamino] antraquinona (79) en DMF y trietilamina. P.f. 120-126°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 695 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO) " . M, 808. Ejemplo (81): Trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) propilamino] -antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-fcBoc-L-fenilalanina-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3~ (L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) -propilamino] antraquinona (80) en THF y trietilamina. P.f. 130-134°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 842 (100%) (R H3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)~. M, 955.
Ej emplo (82): Trifluoroacetato de 1- [3 - (L-leucil-L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Método E] Se preparó a partir de la reacción de éster de N-^oc-L-leucin-N-hidroxisuccinimida y trifluoroacetato de 1- [3- (L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona (81) en THF y trietilamina. P.f. 168-170°C. ESMS(+) (Cono 20V) m/z: 955 (100%) (RN¾) + . ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3C00)". M, 1068. Ejemplo (83): Trifluoroacetato de 1- [3 - (D-alanil-L-leucil-L-fenilalanil-L- isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) -propilamino] antraquinona [Métodos D y E] La N^Boc-D-alanina se convirtió a su éster de pentafluorofenolato y se hizo reaccionar con trifluoroacetato de 1- [3- (L-leucil-L-fenilalanil-L-isoleucil-glicil-L-fenilalanil-D-prolilamino) propilamino] antraquinona (82) en DMF y trietilamina. P.f. 144-146°C. ESMS (+) (Cono 20V) m/z: 1026 (100%) (RNH3)+. ESMS(-) (Cono 20V) m/z: 113 (100%) (CF3COO)". M, 1139. ESTUDIOS DE ACTIVIDAD BIOLÓGICA Sobre el compuesto del ejemplo 8 [NU:UB 187] y metabolitos: interacción de topoisomerasa _ propiedades de unión al AD El compuesto del ejemplo 8 y los metabolitos de productos de escisión de MMP intermediarios se caracterizaron por medio de la CLAR combinada/análisis de espectrometría de masas y MS/MS (EPSRC Center, Swansea) para generar conjuntos comprensivos y característicos de datos de iones progenitores y de producto, para definir los substratos óptimos (figuras 2 y 3) . Las incubaciones del compuesto del ejemplo 8 con MMP-9 recombinante de humano (Calbiochem-Novabiochem Ltd) han mostrado muy claramente por medio de tanto CLAR y MS/MS la escisión para antraquinolina, tripéptido enlazado al separador del ejemplo 4. Se ha mostrado que estas incubaciones contienen el ión progenitor m/z 548 para el compuesto del ejemplo 4, el cual parece ser degradado adicionalmente al compuesto del ejemplo 3 (m/z 491) . Los estudios cromatográficos adicionales con homogenados de tumores diluidos (1:500) han demostrado el metabolismo extremadamente rápido del compuesto del ejemplo 8 (1.75 µt???/minuto/g de tejido) por un homogenado de HT1080 con los productos principales que también son el producto de escisión del compuesto del ejemplo 4 y la antraquinona del ejemplo la. Estos resultados han sido conformados con MS/MS. Ni el compuesto del ejemplo (8) [NU:UB 187] (heptapéptido) ni sus metabolitos de hexa-, penta- o tetra-péptidos {ejemplos (7) [NU:UB 205], (6) [NU:UB 204] y (5) [NU:UB 186] respectivamente} inhibieron la relajación mediada por topo I de ADN de pBR322 en concentraciones de hasta 100 µ?. El producto de escisión de MMP-9 principal del ejemplo (4) [NU:UB 185] inhibió débilmente la relajación a 50 µ?. La actividad inhibitoria más grande fue observada para el compuesto del ejemplo (3) [NU:UB 184] (el producto de escisión de MMP-2 preferido del ejemplo (8) [NU:UB 187] . Las actividades de topo I del compuesto del ejemplo (2) [NU:UB 31] y el compuesto del ejemplo (Ib) [NU:UB 197] habían sido determinadas previamente [tabla 1] . Las propiedades de unión al ADN del compuesto del ejemplo 8 [ U:UB 187] han sido comparadas al compuesto del ejemplo (2) [ U:UB 31] . Se sabe que el último se une al ADN por medio de un mecanismo de fijación a un surco parcial, de intercalación parcial, de modo mezclado. El compuesto del ejemplo 8 [NU:UB 187] es un agente de fij ción a un surco débil en comparación con el compuesto del ejemplo (2) NU:UB 31 y se encontró que no se intercala en el ADN [tabla 3] . Tomados conjuntamente, los resultados anteriores sugieren que el compuesto del ejemplo 8 [NU:UB 187] debe tener una pequeña interacción con el ADN nativo y de esta manera no induce una genotoxicidad. La falta de unión al ADN y la interacción reducida o ausente con la topoisomerasa pueden estar correlacionadas con la ausencia de citotoxicidad in vitro [tabla 2] .
Datos para el compuesto del ejemplo (15) [NU;UE 227] Resultados Los estudios cromatográficos adicionales con homogenados de tumores diluidos de HT1080 (1:500) ha demostrado que el metabolismo del compuesto del ejemplo (15) (2.5 de tejido) es tan rápido como el compuesto del ejemplo (8) . El metabolito principal es el producto de escisión esperado del ejemplo (11) [NU:UB 224] . Los detalles se proporcionan en la tabla 4. Se mostró que el compuesto del ejemplo (8) tiene un periodo de vida en promedio de 1.46 horas en la sangre completa de murino y mostró que es estable (tl/2>13h) en solución salina y plasma de ratón a 37°C. TABLA 1: INHIBICIÓN DE LA RELAJACIÓN MEDIADA POR TOPO I DEL ADN DE pBR322 EJEMPL CÓDIGO NIVEL DE INHIBICIÓN 0 DE NU:UB (Ib) 197 Inhibición completa de la relajación a 25 µ? (2) 31 Inhibición completa de la relajación a 25 µ? (3) 184 Inhibición completa de la relajación a 5 µ (4) 185 Inhibición parcial de la relajación a 50 µ? (5) 186 Sin inhibición de la relajación entre 1-100 µ? (6) 204 Sin inhibición de la relajación entre 1-100 µ? (7) 205 Sin inhibición de la relajación entre 1-100 µ? (8) 187 Sin inhibición de la relajación entre 1-100 µ? TABLA 2 CITOTOXICIDAD IN VITRO DEL COMPUESTO DEL EJEMPLO (8) [NU:UB 187] Y LOS PRODUCTOS DE ESCISIÓN POTENCIALES (METABOLITOS) LÍNEA DE CÉLULAS-MAC15A NÚMERO DE CÉLULAS-1X104 células/ml (la eliminación se muestra como % de células restantes) TIEMPO DE EXPOSICIÓN-1 hora SOLVENTE-/DMSO (solución madre 100 mM en DMSO) DILUYENTE-medios DE RPMI Producto de Escisión TABLA 3 Valores QsD de Represión de Fluorescencia para el Desplazamiento de Bromuro de Etidio y Tinte Hoechst 33258 de los Complejos Unidos con ADN de Timo de Ternero EJEMPLO CÓDIGO DE NU:UB QEBO (µ?) QH50 (µ?) (2) UN:UB 31 2 0.6 (8) UN:UB 187 17 4 TABLA 4 CITOTOXICIDAD IN VITRO DE PROFÁRMACOS Y PRODUCTOS DE ESCISIÓN POTENCIALES (METABOLITOS) CONTRA ADENOCARCINOMA MAC15A DEL COLON (TIEMPO DE EXPOSICIÓN-96 HORAS) EJEMPLO CÓDIGO DE NU:UB ?s50µ? 2 31 4.3 3 184 2 8 187 36 9 46 3.5 10 223 7 11 224 22 12 225 30 14 226 38 15 227 40 45 293 4 46 294 8 47 295 22 72 254 3 73 255 2.5 74 256 2.5 75 257 20 76 258 - 21 77 259 24 PROTOCOLOS PARA ANÁLISIS METABÓLICOS Protocolo para CLAR La separación se logró utilizando la CLAR de fase inversa con gradiente en una columna Lichrospher (25x4 mm) .
La fase móvil A consistió de acetonitrilo 10%: TFA 90% (0.05%) y la fase móvil B de acetonitrilo 60%: TFA 40% (0.05%). La detección óptima fue en el valor Imax de 248 nm utilizando una velocidad de flujo de 1.2 mi/minuto. El perfil de la gradiente fue de 60% de A a 5% de A durante 25 minutos. La preparación de muestras para la CLAR fue mediante la precipitación de proteínas simple. Se adicionaron 3 volúmenes de metanol a 1 volumen de muestra (típicamente 100 µ?) , lo cual se centrifugó a 3000 g durante 5 minutos. El sobrenadante se inyectó directamente en la columna de CLAR. Incubaciones de enzimas in vitro Los compuestos se incubaron in vitro con una enzima recombinante, purificada (ya sea MMP-9 o MMP-2) (Calbiochem, Nottingham, UK) . Típicamente, los compuestos (fármacos) se incubaron en concentraciones de 5 µ? utilizando ??µ? de enzima, 10 µ? de fármaco y 90 µ? de amortiguador a 25°C. El amortiguador utilizado consistió de NaCl 200 mM, Tris 50 mM, CaCl2 5 mM, ZnS04 20 µ? y Brij35 0.05% a pH 7.6. En diversos puntos de tiempo, se tomaron muestras de 20 µ? y se adicionaron 60 µ? de metanol para precipitar las proteínas como se describe anteriormente y el metabolismo de los compuestos se analizó mediante la CLAR (como antes) . Incubaciones de tumores in vitro El tumor sólido (HT1080-extirpado de ratones NCI-Nu conforme a una Licencia del Ministerio de Gobierno) fue homogenizado (1:4)' en amortiguador de MMP. Los Homogenados de tumor se incubaron a 25°C y los compuestos (fármacos) se adicionaron al homogenado para dar una concentración final de 10 µ? o 100 µ?. Se tomaron muestras en intervalos cronometrados y se prepararon para el análisis de CLAR como se describiera anteriormente. Donde el metabolismo fue demasiado rápido, los homogenados de tumor requirieron la dilución (a 1:500) antes del análisis. Estudios de estabilidad La estabilidad de los compuestos en solución salina, plasma y medio de cultivo de tejido a 37°C se investigó a 100 µg/ml utilizando los protocolos descritos anteriormente. En resumen, las muestras se incubaron a 37°C y se utilizó la precipitación de metanol antes del análisis de CLAR. Referencias 1. Berman J. Green M. Sugg E. Anderegg R. Millington DS . Norwood DL. McGeehan J. Wiseman J. Rapid optimization of enzyme substrates using defined substrate mixtures. Journal of Biological Chemistry. 267(3) : 1434-7, 1992 2. Bibby MC, Making the most of rodent tumour systems in cáncer drug discovery. British Journal of Cáncer 79(11-12) : 1533-40, 1999. 3. Bickett DM, Green MD, Berman J, Dezube M, Howe AS, Bro n PJ, Rot JT y McGeehan GM, A high throughput fluorogenic substrate for interstitial collagenase (MMP-1) and gelatinase (M P-9) . Analytical Biochemistry 212 (1) : 58-64, 1993. 4. Bickett DM, Green MD, Wagner C, Roth JT, Berman J y MeGleehan GM, A high throughput fluorogenic substrate for stromelysin (MMP-3) . Annals of the New York Acade y of Sciences 732: 351-5, 1994. 5. Birkedal-Hansen H, Moore G, Bodden MK, Windsor LJ, Birkedal-Hansen B, DeCarlo A y Engler JA, Matrix metalloproteinases : a review. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine 4(2) : 197-250, 1993. 6. Brown PD, Bloxidge RE, Stuart NS , Gatter KC y Carmichael J, Association between expression of activated 72 - kilodalt on gelatinase and tumor spread in non-small-cell lung carcinoma. Journal of the National Cáncer Institute 85(7) : 574-8, 1993. 7. Calabrese CR y Loadman PM, Analysis of the imidazoacridinone C1311 by high-performance liquid chrom tography. Journal of Chromatography B 690(1-2) : 275-281, 1997. 8. Calabr'ese CR, Loadman PM, Lim LSE, Bibby MC, Double JA, Brown JE y Lamb JH, In vivo metabolism of the antitumor imidazoacridinone C1311 in the mouse and in vitro comparison with humans . Drug Metabolism and Disposition 27(2): 240-245, 1999. 9. Chen El, ridel SJ, Howard E , Li W, Godzik A y Smith JW, A unique substrate recognition profile for matrix metalloproteinase-2. Journal of Biological Che istry. 277: 4485-4491, 2002. 10. Double JA y Bibby MC, Therapeutic Índex: a vital component in selection of anticancer agents for clinical trial. Journal of the National Cáncer Institute 81(13): 988-94, 1989. 11. Endo K, Maehara Y, Baba H, Yamamoto M, Tomisaki S, antanabe A, . Kakeji Y y Sugimachi K, Elevated levéis of serum and plasma metalloproteanases in patients with gastric cáncer. Anticancer Research 17: 2253-2258, 1997. 12. Fridman R, Toth M, Pena D y Mobashery S, Activation of Progelatinase B (MMP-9) by Gelatinase A (M P-2) . Cáncer Research 55; 2548-2555, 1995. 13. Iizasa T, Fujisawa T, Suzuki M, Motohashi S, Yasufuku K, Yasukawa T, Baba M y Shiba M, Elevated levéis of circulating plasma matrix metalloproteinase 9 in non-small cell l ng cáncer patients. Clinical Cáncer Research 5(1) : 149-53, 1999. 14. Jabbar SAB, Twentyman PR y atson JV, The MTT assay underestimates the growth inhibitory effects of interferons. British Journal of Cáncer 60: 85-90, 1989. 15. Kleiner DE y Stetler-Stevenson WG, structural Biochemistry and activation of matrix metalloproteinases .
Current Opinión in Cell Biology 5: 891, 1993. 16. Kleiner DE y Stetler-Stevenson WG, Matrix metalloproteinases and metástasis. Cáncer Chemotherapy & Pharmacology 43 (Suppl) : S42-51, 1999. 17. S.J. Kridel, Chen El, Kotra LP, Howard EW, Mobashery S y Smith JW, Substrate hydrolysis by matrix metalloproteinase-9. Journal of Biological Chemistry. 276: 20572-20578, 2001. 18. Lauer-Fields LJ, Broder T, Sritharan, Chung L, Nagase H y Fields GB, Kinetic analysis of MMP activity using fluorogenic triple-helical substrates . Biochemistry. 40(19) : 5795-5803, 200. 19. Loadman PM, Phillips RM, Lim LE y Bibby MC, Pharmacological properties of a new aziridinylbenzoguinone RH1 (2, 5-diaziridinyl-3- (hydroxymethyl ) -S-methyl-1, 4-benzoquinone) in mice. Biochemical Pharmacology 59, 229-234, 2000. 20. Loadman PM, Bibby MC, Double JA, Al-Shakhaa WM y Duncan R, Pharmacokinetics of PKl and doxorubicin in experimental colon tumour models with differing responses to PKl. Clinical Cáncer Research 5, 3682-3688, 1999. 21. MacDougall JR y Matrisian LM, Contributions of tumor and stromal matrix metalloproteinases to tumor progression, invasión and metástasis. Cáncer & Metástasis Reviews 14(4): 351-62, 1995. 22. Marquisee MJ y Kauer JC, Collagenase-sensitive peptidyl-nitrogen mustards as potential antitumour agents. Journal of Medicinal Chemistry 21 (12) : 1188-1194, 1978. 23. McGeehan GM, Bickett DM, Green M, Kassel D, Wiseman JS y Berman J, Characterization of the peptide substrate specificities of interstitial collagenase and 92-kDa gelatinase. Implications for substrate optimization. JOurnal of Biological Chemistry 269 (52) : 32814-20, 1994. 24. Monteagudo C, Merino MJ, Sanjuan J, Liotta LA y Stetlerstevenson WG, Immunohistoc emical distribution of type-iv collagenase in normal, benign, and malignant breast-tissue. American Journal of Pathology 136(3): 585-592, 1990.
. Moore AJ, Loadman PM, Devine DA y Bibby MC, Extraction of the Synthetic Lytic Peptide, Cecropin-B, From Biological Fluid and Analysis Using Reversed-Phase High Performance Liquid-Chromatography . JOurnal of Chromatography B-Biomedical Applications 672(2): 225-231, 1995. 26. Mucha A, Cuniasse P, Kannan R, Beau F, Yiotakis A, Basset P y Dive V, Membrane type-1 matrix metalloproteinase and stromelysin-3 cleave more efficiently synthetic substrates containing unusual amino acids in their Px' positions. Journal of Biological Chemistry. 273(5): 2763-2768, 1998. 27. Nagase H, Fields CG y Fields GB, Design and characterization of a fluorogenic substrate selectively hydrolyzed by stromelysin 1 (matrix metalloproteinase-3) . Journal of Biological Chemistry 269 (33 ) : 20952-7, 1994. 28. Nakajima M, Welch DR, Wynn DM, Tsuruo T Nicolson GL, Serum and plasma M(r) 92,000 progelatinase levéis correlate ith spontaneous metástasis of rat 13762NF mammary adenocarcinoma. C ncer Research 53(23): 5802-7, 1993. 29. Pontón A, Coulombe B y Skup D, Decreased expression of tissue inhibitor of metalloproteinases in metastatic tumor cells leading to increased levéis of collagenase activity. Cáncer Research 51(8): 2138-43, 1991. 30. Pyke C, Ralfkiaer E, Tryggvason K y Daño K, Messenger-R A for 2 type-iv collagenases is located in stromal cells in human colon cáncer. American Journal of Pathology 142(2): 359-365, 1993. 31. Rasmussen HS y cCann PP, Matrix metalloproteinase inhibition as a novel anticancer strategy: a review with special focus on batimastat and marimastat . Pharmacology & Therapeutics 75 (1) : 69-75, 1997. 32. Sato H, Kida Y, Mai M, Endo Y, Sasaki T, Tanaka J y Seiki M, Expression of genes encoding type IV collagen-degrading metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in various human tumor cells . Oncogene 7 (1) : 77-83, 1992... 33. Soyez H, Schacht E y Vanderkerken S, The crucial role of spacer groups in macromolecular prodrug design. Advanced Drug Delivery Reviews 21: 81-106, 1996. 34. Stack MS . Gray RD. Comparison of vertébrate collagenase and gelatinase using a new fluorogénic substrate peptide. Journal of Biological Chemistry. 264(8): 4277-81, 1989. 35. Stetler-Stevenson G, Hewitt R y Corcoran M, Matrix metalloproteinases and tumor invasión: from correlation and causality to the clinic. Seminars in Cáncer Biology 7(3): 147-54, 1996. 36. Steward WP, Marimastat (BB2516) : current status of development. Cáncer Chemotherapy & Pharmacology 43 (Suppl) : S56-60, 1999. 37. Swaine DJ, Loadman PM, Bibby MC, Graham MA. y Patterson LH, High-performance liguid chromatographic analysis of AQ4Nr an alkylaminoanthraquínone N-oxide. Journal of Chro atography B . in press, 2000. 38. Timar F, Botyanszki J, Suli-Vargha H, Babo I, Olah J, Pogany G y Jeney A, The antiproliferative action of a melphalan hexapeptide with collagenase-cleavable site. Cáncer Chemotherapy & Pharmacology 41(4) : 292-8, 1998. 39. Tsuchiya Y, Sato H, Endo Y, Okada Y, Mai M, Sasaki T y Seiki M, Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 is a negative regulator of the metastatic ability of a human gastric-cáncer cell-line, kkls, in the chick-embryo . Cáncer Research 53(6): 1397-1402, 1993. 40. Urbanski SJ, Edwards DR., - aitland A, Leco KJ, Watson A y Kossakowska AE, Expression of metalloproteinases and their inhibitors in primary pulmonary carcinomas. British Journal of Cáncer 66 (6) : 1188-1194, 1992. 41. Wang X, Fu X, Brown PD, Crimmin MJ y Hoffman R , Matrix metalloproteinase inhibitor BB-94 (batimastat) inhibits human colon-tumour growth and spread in a patient-like orthotopic model in nude-mice. Cáncer Research 54(17): 4726-4728, 1994. 42. Westermarck J y Kahari VM, Regulation of matrix metalloproteinase expression in tumor invasión. FASEB Journal 13 (8) : 781-92, 1999. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (34)

  1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Un compuesto de la fórmula general (I) A-(B)n-X (I) caracterizado porque A es un radical que comprende uno de más de un anillo heterocíclico, un anillo carbocíclico y un sistema de anillos fusionados, el anillo o sistema de anillos son esenciales para una actividad biológica del compuesto por la acción en un objetivo de ácido nucleico o proteína B es una molécula separadora, bivalente que está unida directamente al sistema de anillos n es número entero de 0 o 1 y X es un radical monovalente que contiene un enlace de amida que es escindible por la acción de una enzima metaloproteinasa de matriz tal como para producir un compuesto de la fórmula II A-(B)n-Q (II) en donde la eficacia de la actividad biológica del compuesto de la fórmula II es incrementada sobre aquella del compuesto de la fórmula (I) .
  2. 2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el enlace de amida es un enlace de péptido entre aminoácidos en una cadena de péptidos X, la cual es escindida para dar por resultado una cadena de péptidos más corta Q.
  3. 3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o reivindicación 2, caracterizado porque el enlace es un enlace amida entre dos radicales Xa y Xb, uno o ambos de los cuales incluyen análogos de péptidos, tales como isósteros donde los enlaces de péptido entre aminoácidos son reemplazados por otros enlaces de diferente naturaleza química .
  4. 4. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque tiene la fórmula (III) A- (B)n- (Xaa)my (III) en donde A es un radical que comprende uno o más de un anillo heterociclico, un anillo carbocíclico y un sistema de anillos fusionados, el anillo o sistema de anillos están en una forma no unida directamente al carbono a de un residuo de aminoácido y son esenciales para una actividad terapéutica del compuesto por la acción en un objetivo de ácido nucleico o proteina B es un radical separador, bivalente n es un número entero de 0 o 1 Xaa es cualquier residuo de aminoácido m es un número entero de 2 a 100 e ? es H, un catión o un grupo de extremo en donde Xaa se selecciona independientemente en cada ocurrencia de repetición de tal manera que forme un oligopéptido o una proteína que sea escindible internamente por una enzima metaloproteinasa de matriz de tal manera que produzca un compuesto de la fórmula (IV) A- (B)n- (Xaa) -gY (IV) en donde A, B, n, Xaa e Y tienen los significados descritos en la fórmula I y q es 0 o un número entero menor que m, de tal manera que la eficacia del compuesto de la fórmula II en el ácido nucleico o proteína se incremente sobre la eficacia del compuesto de la fórmula I .
  5. 5. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la actividad del compuesto es una de modulación de la actividad de una membrana celular o receptor intracelular, una enzima, o la modulación de la actividad de ADN para ser replicado o transcrito o expresado.
  6. 6. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 3 o reivindicación 4, caracterizado porque el compuesto de la fórmula III tiene una eficacia superior en el objetivo de ácido nucleico o proteína que un compuesto de la fórmula IV. A-(B)a-Y (V) en donde A, B , n e Y son como se describiera anteriormente.
  7. 7. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical A se selecciona del grupo que consiste de radicales que comprenden un sistema de anillos fusionados, el cual puede ser heterocíclico o carbocíclico y radicales que comprenden un anillo heterocíclico no fusionado.
  8. 8. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical A se selecciona del grupo que comprende radicales que comprenden un sistema de anillos de esteroides, un sistema de anillos de antraceno y un sistema de anillos de mitomicina, los cuales son capaces de interactuar con los receptores de proteínas o ácidos nucleicos .
  9. 9. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical A se selecciona del grupo que consiste de radicales que comprenden los anillos de daunorrubicina, mitoxantrona, metotrexato, campotecina, quinocarmicina, clorambucilo y mitomicina-C .
  10. 10. Un compuesto de conformidad con cualquiera de " las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque A se enlaza directamente al separador B o directamente a (Xaa)ra, a través de un átomo de nitrógeno.
  11. 11. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el átomo de nitrógeno es aquel de un grupo amino unido directamente o indirectamente al anillo.
  12. 12. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical B se selecciona del grupo que consiste de los radicales de alquileno, -?-diamino, -?-dicarboxilato, a-co-dialcohol, -?-aminoalcohol , a-?-aminoácido.
  13. 13. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical B tiene una longitud de 2 a 10 átomos contiguos entre A y el residuo de aminoácido de (Xaa)m al cual está unido B.
  14. 14. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el radical B tiene una longitud de 4, 5 o 6 átomos.
  15. 15. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el radical B se selecciona del grupo que consiste de -NH (C¾) n-C (O) - , NH (CH2) n~NH- , - H (CH2) n-0- , en donde n es un número entero de 2 a 4.
  16. 16. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la cadena de oligopéptido (Xaa)n tiene una longitud de 4 a 30 residuos de aminoácidos .
  17. 17. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la cadena de oligopéptido tiene una longitud de 4 a 10 residuos de aminoácidos .
  18. 18. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical (Xaa)q tiene una longitud de 1 a 8 residuos de aminoácidos .
  19. 19. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el radical (Xaa)q tiene una longitud de 1 a 4" residuos de aminoácidos.
  20. 20. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el radical (Xaa) m es una cadena de oligopeptido de la fórmula (IV) , también dada en este texto como la SEC ID No 1: -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4- en donde Xaal es aquel de prolina o un análogo de origen no natural de la misma. Xaa2 es aquel de leucina, un análogo de origen no natural de la misma, S-mercaptoetil-cisteína (EMC) , tienilalanina (THA) y p-clorofenilalanina (PFC) Xaa3 es aquel de glicina, un análogo de origen no natural de la misma, es tienilalanina (THA) o ciclohexilalanina (CHA) , y Xaa4 es aquel de leucina, un análogo de origen no natural de la misma, S-metilcisteína (SMC) , norvalina (NVA) , norleucina (NLE) o fenilglicina (PHG) .
  21. 21. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la cadena de oligopéptido -(Xaa)m tiene la fórmula (VII) o la SEC ID No 2: -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-en donde Xaal-4 se seleccionan como se describiera anteriormente y Xaa5 es el residuo de cualquier aminoácido.
  22. 22. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque Xaa5 se selecciona del grupo de residuos de aminoácidos que consisten de aquellos de tirosina, L- o D-aminoácidos tirosina, metionina, fenilglicina, isoleucina, leucina, y norvalina y análogos de origen no natural de los mismos.
  23. 23. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 21 o 22, caracterizado porque la cadena de oligopéptido -(Xaa)m- tiene la fórmula (VIII) o la SEC ID No 3 : -Xaal-Xaa2 -Xaa3 -Xaa4-Xaa5-Xaa6-en donde Xaal-5 se seleccionan como se describiera en las reivindicaciones 18 y 19 y Xaa6 es el residuo de cualquier aminoácido .
  24. 24. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque Xaa5 es el residuo de D- o L-alanina o un análogo de origen no natural de la misma.
  25. 25. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20 a 24, caracterizado porque la cadena de oligopéptido -(Xaa)m_ tiene la fórmula (X) o la SEC ID No 4 : -Xaal-Xaa2-Xaa3 -Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-en donde los residuos Xaal-6 son como se describiera anteriormente y el residuo Xaa7 es aquel de L- o D-alanina, lisina u ornitina (OR ) . 26. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20 a 24, caracterizado porque el residuo
  26. Xaa7 es un residuo de D-aminoácido.
  27. 27. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el grupo de extremo Y se selecciona del grupo que consiste de H, OH, un catión y cualquier grupo utilizado convencionalmente como extremo en una cadena de péptidos en el uso farmacéutico.
  28. 28. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porgue se hace actuar mediante una o más metaloproteinasas de matriz específicas para incrementar su citotoxicidad hacia las células tumorales .
  29. 29. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque las metaloproteinasas de matriz se seleccionan de MMP-2 o MMP-9.
  30. 30. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, caracterizado porque comprende un sistema de anillos de antraquinona enlazado para ser péptido a través de un grupo separador, bivalente.
  31. 31. Una preparación farmacéutica, caracterizada porque comprende un portador y/o excipiente farmacéuticamente aceptable y un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30.
  32. 32. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 para el uso en la terapia.
  33. 33. El uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30 para la preparación de un médicamente para el tratamiento de un estado de enfermedad asociado con un tejido que expresa una metaloproteinasa de matriz.
  34. 34. Uso de conformidad con la reivindicación 33 en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de cáncer, infección viral, infección parasitica e inflamación 36. El uso de un radical de la fórmula X -(B)n-X X en donde B es una molécula separadora, bivalente que está unida directamente al sistema de anillos n es un número entero de 0 o 1 y X es un radical monovalente que contiene un enlace amida que es escindible por la acción de una enzima metaloproteinasa de matriz de tal manera que produzca un compuesto de la fórmula XI - (B) n-Q (XI) como un modulador de actividad para la incorporación mediante la conjugación en una molécula biológicamente activa, esa molécula tiene acción en un objetivo de proteína o ácido nucleico, la incorporación es tal que la molécula biológicamente activa se hace más activa en presencia de una metaloproteinasa de matriz que cuando está ausente. 37. El uso de un oligopéptido que comprende una secuencia de la fórmula general (XII) o la SEC ID No 1: -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4- como un modulador de actividad para la incorporación mediante la conjugación en una molécula biológicamente activa, esa molécula tiene acción en un objetivo de proteína o ácido nucleico, la incorporación- es tal que la molécula biológicamente activa se hace más activa en presencia de una metaloproteinasa de matriz que cuando está ausente. 38. El uso de conformidad con la reivindicación 37, en donde el oligopéptido tiene la fórmula (XIII) o la SEC ID No 2 : -Xaal-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-en donde Xaal-4 son residuos descritos anteriormente y Xaa5 es el residuo de cualquier aminoácido pero más preferiblemente es un residuo tirosina o un análogo de origen no natural de la misma. Preferiblemente, el residuo Xaa5 se selecciona de los L- o D-aminoácidos : tirosina, metionina, fenilglicina, isoleucina, leucina y norvalina. 39. El uso de conformidad con la reivindicación 37 o 38, en donde el oligopéptido tiene la fórmula (VII) u (VIII) , también proporcionada como la SEC ID No 3 o 4.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2075256A2 (en) 2002-01-14 2009-07-01 William Herman Multispecific binding molecules
WO2006124711A1 (en) 2005-05-16 2006-11-23 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Composition and method for providing localized delivery of a therapeutic agent
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EP2575897A4 (en) * 2010-06-01 2016-06-01 Advanced Proteome Therapeutics Inc CROSSLINKING OF PROTEINS AND OTHER ENTITIES THROUGH ALPHA-HALO-ACETOPHENONES CONJUGATES, BENZYL HALIDES, QUINONES
GB2516882A (en) 2013-08-02 2015-02-11 Univ Bradford Tumour-targeted theranostic

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2546163B1 (fr) * 1983-05-16 1987-10-09 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives acyles hydrosolubles de peptides ou d'amino-acides, leur preparation et leur application
US5618528A (en) * 1994-02-28 1997-04-08 Sterling Winthrop Inc. Biologically compatible linear block copolymers of polyalkylene oxide and peptide units
PT769967E (pt) * 1994-08-19 2008-02-18 Univ Catholique Louvain Conjugados que compreendem um agente antitumoral e a sua utilização
US5770691A (en) * 1995-06-05 1998-06-23 Regents Of The University Of Minnesota Discriminatory substrates for MMP hydrolysis
DE19701141C1 (de) * 1997-01-16 1998-04-09 Hoechst Ag Genkonstrukte für durch Proteasen aktivierbare Wirksubstanzen
US5965119A (en) * 1997-12-30 1999-10-12 Enzon, Inc. Trialkyl-lock-facilitated polymeric prodrugs of amino-containing bioactive agents

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