MXPA03002980A - Suspension coloidal de particulas submicronicas de vectorizacion de principios activos hidrofilicos y su modo de preparacion. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a una suspension de particulas biocompatibles de vectorizacion (PV) de principios activos (PA). Dichas PV se basan en un copolimero de doble bloque de poliaminoacido neutro hidrofilico (poliAANI)/poliaminoacido neutro hidrofobico (poliAANO). Dichas particulas de poliAANl/poliAANO son aptas para asociar en suspension coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada. La invencion comprende, igualmente, un solido pulverulento a partir del cual se emiten los PV asi como la preparacion de este solido y de esta suspension de PV a base de poliAANl/poliAANO. Estas nuevas PV se forman espontaneamente y sin la ayuda de agentes tensoactivos o solventes organicos, suspensiones acuosas estables. La invencion se refiere igualmente a PV bajo forma seca, su metodo de preparacion, asi como las composiciones farmaceuticas (forma seca o suspension) que comprenden estas PV asociadas con un principio activo.

Description

SUSPENSIÓN COLOIDAL DE PARTÍCULAS SUBMICRÓNICAS DE VECTORIZACIÓN DE PRINCIPIOS ACTIVOS HIDROFÍLICOS Y SU MODO DE PREPARACIÓN DOMINIO TÉCNICO El dominio de la presente invención es aquel de las Partículas de Vectorización (PV), útiles para la administración de principios activos (PA). Estos últimos son, de preferencia, los medicamentos o nutrientes para su administración a un organismo animal o humano por vía oral o nasal, vaginal, ocular, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, ¡ntraperitoneal, intracerebral, parenteral, etc. Pero también se tratan productos cosméticos o productos fitosanitarios, tales como los herbicidas, pesticidas, insecticidas, fungicidas, etc. En términos de naturaleza química, los PA a los que se refiere más particularmente la invención, pero no limitados, por ejemplo, proteínas, glucoproteínas, péptidos, polisacáridos, lipopolisacáridos, oligoucleótidos, polinucleótidos y moléculas orgánicas. La presente invención se refiere, de manera más precisa, a las suspensiones coloidales de Partículas de Vectorización, ventajosamente de tipo submicrónico, a base de bloques de poliaminoácidos (PAA). La presente invención comprende también las partículas matizados como tales, los sistemas de vectores de PA, constituidos por las partículas cargadas por el (los) PA considerado(s). La presente invención también se refiere a los sólidos pulverulentos que comprenden estas PV.

La invención se refiere, igualmente, a los métodos de preparación de dichas suspensiones coloidales de partículas, con o sin PA.

TÉCNICA ANTERIOR La encapsulación o la absorción de PA en las PV tiene, notablemente, por objeto modificar su duración de acción y/o encaminarlas al lugar de tratamiento y/o aumentar la biodisponibilidad de dichos PA. Numerosas técnicas de encapsulación ya se han propuesto. Tales técnicas incluyen, por una parte, permitir el transporte de PA hasta su sitio de acción terapéutica, protegiéndose contra las agresiones del organismo (hidrólisis, digestión enzimática, etc.) y, por otra parte, controlar la liberación de PA sobre su sitio de acción, a fin de mantener la cantidad disponible para el organismo al nivel deseado. Los PA referidos por estas transformaciones de transporte y de estancia en el organismo son, por ejemplo, las proteínas pero también pueden ser, igualmente, diferentes productos, moléculas orgánicas de origen sintético o natural. La revista de M. J. HUMPHREY (Delivery system for peptide Drugs, editada por S. DAVIS y L. ILLUM, Plenum Press, N.Y. 1986), expone la problemática que concierne a la mejora de la biodisponibilidad de PA y el interés de los sistemas de vectorización y de liberación controlada. Las PV de la invención son del tipo de aquellas sobre las cuales PA se absorbe. Entre todas los materiales considerados para formar las PV, los polímeros se utilizan cada vez más, debido a sus propiedades intrínsecas. Se tratan de un cuaderno de cargas que se desean obtener para las PV, es particularmente exigente y comprende notablemente, las siguientes especificaciones. 1 . La primer especificación buscada para las PV será que el polímero, que constituye las PV sea biocompatible, eliminable (por excreción) y/o biodegradable y, aún mejor, que se metabolice en productos no tóxicos para el organismo. Además, convendrá que la biodegradación en el organismo sea de una duración suficientemente corta. 2. Las PV tendrán la ventaja de poder formar, sin la ayuda de un solvente orgánico y/o agente tensoactivo, una suspensión acuosa, estable. 3. Será igualmente deseable que las PV tengan un tamaño suficientemente corto para poder subir, en suspensión en un líquido, una filtración estéril por un filtro cuyo diámetro de los poros es inferior o igual a 0.2 m. 4. Es deseable que las PV y los sistemas PV-PA puedan obtenerse por un método no desnaturalizante para PA. 5. Las PV deberán, ventajosamente, permitir controlar la velocidad de liberación de PA. 6. Otra especificación importante será que los sistemas PV- PA podrán constituir excelentes medicamentos inyectables. Esta aptitud mejorada de la administración por inyección, por ejemplo, intravenosa o intramuscular, «inyectabilidad» se caracteriza por: (i) un volumen inyectado reducido (para una dosis terapéutica proporcionada), (ii) una viscosidad débil. Estas dos propiedades son satisfactorias cuando la dosis terapéutica de PA se asocia con una cantidad mínima de PV. En otros términos, PV deben tener una fuerte proporción de cargamento en PA. 7. El costo propio de las PV en una preparación inyectable debe reducirse y aún conveniente que las PV tengan una fuerte proporción de carga en PA. En definitiva, el tamaño corto y una fuerte proporción de carga son las principales especificaciones buscadas para las PV. 8. Igualmente es ventajoso que el polímero, constitutivo de PV, no induzca la respuesta inmunitaria. Las proposiciones técnicas anteriores, descritas infra, intentan satisfacer el conjunto de estas especificaciones. A manera de ilustración, se citarán las proposiciones anteriores (a) a (h): (a) La Patente de E. U. 5 286 495 se refiere a un método de encapsulación por vaporización de proteínas en fase acuosa, con la ayuda de materiales que tienen cargas opuestas, es decir: alginato (cargado negativamente) y polilisina (cargada positivamente). Este método de fabricación permite producir partículas de tamaño superior a 35 µp\. (b) Por otra parte, las técnicas de emulsión se utilizan actualmente para preparar micropartículas cargadas de PA. Por ejemplo, las solicitudes de Patente WO 91/06286, WO 91/06287 y WO 89/08449 divulgan tales técnicas de emulsión en las cuales se recurre a los solventes orgánicos para solubilizar los polímeros, por ejemplo, de tipo poliláctico. Pero se comprueba que los solventes pueden desnaturalizarse, notablemente para los PA peptídicos o polipeptídicos Se conocen, igualmente, las PV biocompatibles llamadas protenoides, descritas en 1970 por X. FOX y K. DOSE en «Molecular Evolution and the Origin of Life», Ed. Marcel DEKKER Inc (1977). Así, la solicitud de Patente WO 88/01213 propone un sistema a base de una mezcla de polipeptidos sintéticos, de los cuales la solubilidad depende del pH. Para obtener las micropartículas de las matrices según esta invención, solubilizan la mezcla de polipéptidos, después con un cambio de pH, provocan la precipitación de partículas proteinoides. Cuando la preparación se efectúa en presencia de un PA, este se encapsuia en la partícula. Se mencionará igualmente, para memoria, la Patente de E. U. 4 351 337 que revela un dominio diferente de aquel de la vectorización de PA propio de la invención. Esta Patente divulga los implantes másicos fijos y localizados en los sitios bien precisos del organismo. Estos implantes son tubos o cápsulas ahuecadas de tamaño microscópico (160 µt? y longitud igual a 2 000 µ??) , constituidos de copolímeros de copoli(aminoácidos) , por ejemplo , poli(ácido glutámico-leucina) o poli(bencilglutamato-leucina) , obtenidos por copolimerización de monómeros de N-carboxian hídridos de aminoácidos (NCA) . La inclusión de un PA se opera por una técnica de evaporación de solvente de una mezcla de polímero y de PA. La Patente de E. U . 4 450 1 50 que pertenece a la misma familia que la Patente de E. U . 4 351 337 estudiada anteriormente y tiene esencialmente el mismo objeto. Los PAA constitutivos son poli(ácido g l utámico-etilglutamato). La patente EP 0 734 720 tiene por objeto partículas de poliaminoácidos útiles para la vectorización de PA. Esas partículas tienen un tamaño comprendido entre 10 y 500 nm, de preferencia entre 30 y 400 nm. Las partículas seg ún EP 0 734 720 se forman espontáneamente al poner en contacto PAA con una solución acuosa. PAA comprenden monómeros aminoácidos neutros e hidrofóbicos AANO (Leu; l ie, Val , Ala, Pro, Phe) y monómeros ionizables e hidrofílicos AAI (Glu, Asp). Estos PAA se preparan por copolimerización de NCA de precursores de AAI (por ejemplo, Glu-OMe) y NCA de AAO (por ejemplo, Leu) en solución en una mezcla de dloxano/tolueno. Copoli(Glu-OMe) (Leu) obtenido en solución se recupera por precipitación en agua, filtración y secado. Este copolímero se somete entonces a una hidrólisis ácida al incorporarse en el ácido TriFluoroAcético (TFA), en el cual se disuelve. Un copolímero (Glu-O-Na) (Leu) se recupera después de la neutralización, diálisis, filtración y liofilización. coPAA se dispersa en una solución acuosa de NaCI y se forma espontáneamente una suspensión de nanopartículas. Que se ponen en presencia de PV en suspensión acuosa con un PA, este se asocia espontáneamente por absorción con PV. Estas últimas presentan un núcleo hidrofóbico formado por aminoácidos hidrofóbicos y una "cola" exterior hidrofílica a base de aminoácidos hidrofílicos. Se observa que las partículas de vectorización según EP 0 734 720 comprenden aminoácidos ionizables (Glu) portadores de una carga eléctrica estabilizadora, negativa, que permite prevenir la fluctuación y agregación de partículas PV. f) F -A- 2 746 035 concierne a las micropartículas de gel compuesto, fisicoquímicamente estables, integradas y susceptibles de utilizarse como vectores de principios activos. Estas micropartículas se constituyen de aceite (I), fase acuosa (I I) y de al menos un copoliaminoácido (I I I) lineal, no reticulado, sintético y que comprende al menos dos tipos diferentes de comonómeros aminoácidos AAI hidrofílicos y AAO hidrofóbicos. AAI pueden ser: Glu, Asp, Or, Arg, Lys, Asn, His y sus asociaciones, comonómeros AAO pueden ser: Leu, Tyr, Phé, Val, Cys, lie y sus asociaciones. FR- A- 2 746 035 describe notablemente en la página 27 líneas 8 a 18, una suspensión coloidal acuosa de poliaminoácidos, por ejemplo, polileucina/coglutamato de sodio. Pero FR-A-2 746 035 no divulgan el uso de copolímeros solos como un sistema farmacéutico no particular de vectorizacion de PA. AAI de FR-A-2 746 035 no son aminoácidos hidrofílicos neutros elegidos en el grupo que comprende: los aminoácidos neutros naturales siguientes: seria, treonina, hidroxiprolina, glutamina; los aminoácidos neutros, raros o sintéticos siguientes: metionina-Soxido, O-gliosidil-serina; los derivados de aminoácidos neutros: N-hidroxietil- glutamina, N-hidroxipropil-asparagina. Todas estas composiciones técnicas anteriores que se describen: o satisfacen de manera incompleta las especificaciones del cuaderno de cargas indicado arriba, y, en particular una aptitud a la esterilización por filtración, una rápida velocidad de degradación, una adaptabilidad a los límites de administración de medicamentos por inyección, un costo bajo y una fuerte proporción de carga en PA. ; o podrán reemplazarse por nuevas soluciones técnicas susceptibles de procurar nuevas ventajas (referencia anterior EP 0 734 720).

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En este caso, uno objetivo esencial es poder suministrar nuevas PV que se forman espontáneamente, y sin la ayuda de agentes tensoactivos o de solventes orgánicos, suspensiones acuosas estables de V. Otro objetivo esencial de la presente invención es suministrar nuevas PV en suspensión acuosa coloidal estable o bajo la forma pulverulenta y a base de poli(aminoácidos) (PAA), estas nuevas PV deben satisfacer lo mejor posible las especificaciones 1 a 8 del cuaderno de cargas intentado. Otro objetivo esencial de la invención es perfeccionar las partículas divulgadas en la patente PCT WO 96/29991. Otro objetivo esencial de la invención es suministrar una suspensión nueva de PV de la cual se dominan perfectamente las características, notablemente en términos de proporción de carga en PA y en términos de control de cinética de liberación de PA. Otro objetivo esencial de la invención es suministrar suspensiones médicas inyectables. Las especificaciones, requeridas para tales suspensiones, son de un volumen débil de inyección y una viscosidad débil. I mporta que la masa de partículas coloidales por dosis de inyección sea la más débil posible y sin limitar la cantidad de principio activo PA transportado por estas partículas , a fin de no perjudicar la eficacia terapéutica. Otro objetivo esencial de la invención es suministrar una suspensión coloidal acuosa o un sólido pulverulento que com prende las partículas de vectorización de principios activos que satisfacen las especificaciones intentadas anteriormente y que constituyen una forma galénica apropiada y conveniente para una ad ministración, por ejemplo, oral , al hom bre o animal . Otro objetivo esencial de la invención es su ministrar una suspensión coloidal que comprende partículas de vectorización de principios activos filtrables sobre los filtros de 0.2 µt? para los fines de esterilización . Otro objetivo esencial de la invención es proponer un método de preparación de partícu las (secas o en suspensión en un líquido) de PAA útiles, notablemente, como vectores de principios activos , dicho método deberá ser, más simple de emplear, no desnaturalizante para los principios activos y por otro lado, siempre debe permitir un dominio fino de la granulometría promedio de las partículas obtenidas. Otro objetivo esencial de la invención es el uso de dichas partículas en suspensión acuosa o bajo forma sólida para la preparación : • de medicamentos (por ejemplo, vacunas) , en particular para su adm in istración notablemente oral , nasal , vag inal, ocular, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intracerebral o parenteral, los principios activos de estos medicamentos pueden ser, notablemente, las proteínas, glucoproteínas, péptidos, polisacáridos, lipopolisacáridos, oligonucleótidos y polinucleótidos. • y/o nutrientes; • y/o productos cosméticos o fitosanitarios; • y/o moléculas orgánicas médicas. Otro objeto de la presente invención es suministrar suspensiones de PV submicrónicas a base de PAA y susceptibles para servir de vector de un PA, en particular medicamento para la administración de dicho PA a un organismo humano o animal, o bien aún un PA nutricional, fitosanitario o cosmético. Otro objetivo de la presente invención es suministrar un medicamento, de tipo sistema de liberación prolongada de principios activos, que sea fácil y económico de producir y que sea, por otro lado, biocompatible y apto para asegurar un muy alto nivel de biodisponibilidad de PA. Un objetivo esencial de la invención es suministrar un sistema de vectorización de vacuna, que no sea ¡nmunógeno de manera intrínseca y en combinación con uno o varios antígenos. Los objetivos relativos a los productos (entre otros) se logran por la presente invención que se refiere, a una suspensión coloidal estable de partículas estructuradas submicrónicas susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s) (PA), estas partículas siendo de arreglos supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente ¡n vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); caracterizadas porque los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son los aminoácidos neutros hidrofílicos AANI con la exclusión de Asparagina; los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son aminoácidos neutros hidrofóbicos AANI ; los aminoácidos recurrentes de cada tipo AAN I y AANO siendo idénticos o diferentes entre ellos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Uno de los fundamentos inventivos de estas nuevas partículas de vectorización PV, en suspensión acuosa coloidal estable o en el estado de sólido pulverulento, tiende a la selección original de un grupo de polímeros y de una metodología original que permite obtener las partículas de tamaño submicrónico, que forman una suspensión coloidal acuosa estable en la ausencia de agentes tensoactivos o solventes. Otro fundamento inventivo de estas nuevas partículas de vectorización PV, en suspensión acuosa coloidal estable o en el estado de sólido pulverulento, tienden a la selección original de dos aminoácidos neutros a manera de monómeros recurrentes hidrofílicos AANI e hidrofóbicos AANO. O, contrario a lo que el experto en la materia pueda temer, el hecho de no poder tener aminoácidos hidrofílicos ionizables AAII y por lo tanto cargas negativas, como en las partículas según WO 96/29991 , la suspensión coloidal según la presente invención no se flocula más. Las partículas a base de poli(AANI/AANO) no se auto-agregan. Por otro lado, no es absolutamente evidente antes que estas partículas de poli(AAN I/AANO) puedan asociarse espontáneamente con los principios activos PA y regular PA sobre los sitios de acción terapéutica. La estructura de polímeros PAA y la naturaleza de aminoácidos neutros, se eligen de manera que: • las cadenas de polímeros se estructuran espontáneamente bajo forma de partículas (PV) de tamaño pequeño, · las partículas forman una suspensión coloidal estable en el agua y en medio fisiológico, • PV se asocian con proteínas u otros PA hidrofílicos en medio acuoso, por un mecanismo espontáneo y no desnaturalizante para la proteína. · PV que liberan PA hidrofílicos en medio fisiológico y, más precisamente, in vivo, la cinética de liberación es función de la naturaleza de polímero PAA precursor de PV. Así, al funcionar sobre la estructura particular de PAA, se pueden controlar los fenómenos de asociación y de liberación de PA sobre el plano cinético y cuantitativo. Es mérito del Solicitante haber elegido, a manera de material constitutivo PV, una composición particular de poliaminoácidos neutros que son anfifílicos y que, por lo tanto, poseen propiedades PV en PAA, es decir: • posibilidad de formar espontáneamente suspensiones coloidales de PV compatibles con pH de medios fisiológicos reencontrados en las aplicaciones terapéuticas intentadas; • asociación espontánea de PA con PV en la ausencia de otro agente como el agua que su solvente y que, en el caso de proteínas, no es desnaturalizante; • posibilidad de liberar PA del complejo de asociación PA-PV, en las condiciones fisiológicas, con los perfiles farmacocinéticos y farmacodinámicos, que dejan predecir los usos interesantes en el dominio terapéutico (vectorización PA); • filtración con umbral de corte inferior o igual a 0.2 / m para los fines de esterilización; • biodegradabilidad mejorada; • aptitud a la inyección optimizada. Estos PAA puede ser de tipo ordenado, secuencia! alterno (bloques) o de tipo desordenado, secuencial aleatorio (estáticos). Así, según una primer forma de realización de PV según la invención, los PAA constitutivos son de tipo «bloque» y se caracterizan por un relación molar AANO/(AANI+AANO) tal que: · AANO/(AANI+AANO) > 70%, • 10% < AANO/(AANO+AANI) < 70%, • de preferencia, 20% AANO/(AANI+AANO) < 60%, • y más preferentemente todavía, 35% < AANO/(AANI+AANO) < 50%. Ventajosamente, la longitud absoluta de cada bloque de AANO, expresado en nombre de AANO es tal que: • AANO > 5 • de preferencia, AANO >_ 10, • y, más preferentemente todavía, AANO > 20. Según una segunda forma de realización de PV según la invención, PAA constitutivos son de tipo «estático» es decir preparados por copolimerización simultánea de monómeros de AANI y AANO, y la relación molar AANO/(AANO+AANI) es tal que: • AANO/(AANO+AANI) > 10%, · y de preferencia, AANO/ÍAANO+AANI) > 20%. • y más preferentemente todavía, 30% <. AA O/(AA I+AANO) < 70%. Ventajosamente, la masa molar Mw de estos PAA estáticos es tal que: · w > 2 000 g/mol, • de preferencia, w > 5 500 g/mol, • y más preferentemente todavía, 5 500 g/mol < Mw <. 200 000 g/mol. siguiendo una característica preferida de la invención, PAA en bloques o estáticos constitutivos de partículas tienen grados de polimerización de DP comprendidos entre 30 y 600, de preferencia entre 50 y 200, y más preferentemente todavía, entre 60 y 150. Ventajosamente, PAA constitutivos de partículas PV son PAA «dibloques». De preferencia, el(los) AAN I hidrofílico(s) se elige(n) del grupo que comprende: los aminoácidos neutros naturales: de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: serina, treonina, hidroxiprolina, glutamina; los aminoácidos neutros, raros o sintéticos siguientes, de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: metionina-S-óxido, O-glicosidil-serina; derivados de aminoácidos saturados, de preferencia aquellos elegidos en el grupo que comprende: N- hidroxietilglutamina, N-hidroxipropilasparagina, N- hidroxietil-asparagina, N-hidroxipropilglutamina. Ventajosamente, el(los) AANO hidrofóbico(s) se elige(n) del grupo que comprende: ? los aminoácidos neutros naturales, de preferencias aquellos elegidos del grupo que comprende: Leu, lie, Val, Ala, Pro, Phe; ? los aminoácidos neutros, raros o sintéticos, de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: norleucina, norvalina; ? derivados de aminoácidos polares, de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: glutamato de metilo, glutamato de etilo, aspartato de bencilo, N-acetillisina . Siguiendo una característica ventajosa, las partículas de vectorización (PV) de la suspensión tienen un tamaño promedio com prendido entre 0.01 y 0.5 µ?? , de preferencia entre 0.01 y 0.2 µ?? . La suspensión igualmente tiene la característica preferida de ser acuoso y estable. La presente invención propone, no solamente las suspensiones de partículas matizadas , tales como las definidas anteriormente, sino que también las partículas que comprenden al menos un principio activo. De preferencia, la suspensión según la invención es acuosa y estable. Estas partículas, cargadas o no en PA, se encuentran, ventajosamente bajo forma dispersa en un líquido (suspensión) , de preferencia acuoso, pero pueden igualmente encontrarse en el estado de sólido pulverulento, obtenido a partir de la suspensión de PV tal como se define anteriormente. También la invención se refiere además a una suspensión coloidal (de preferencia acuosa) de PV, un sólido pulverulento que comprende PV y obtenido de la suspensión según la invención. Otro objeto esencial de la invención es con respecto a la preparación: ? de partículas seleccionadas tales como aquellas descritas a anteriormente ? y otras partículas seleccionadas que son estructuradas, submicrónicas y susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo arreglos supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en el cual: V los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina; y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; estas partículas pueden encontrarse también bajo forma de suspensión coloidal que bajo forma de sólido pulverulento obtenido a partir de una suspensión coloidal estable de partículas. El método de preparación considerado consiste, esencialmente, en sintetizar PAA precursores y transformarlos en partículas estructuradas. De manera más precisa, se trata, de un método de preparación de partículas estructuradas submicrónicas susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s), estas partículas siendo de arreglos supramoleculares discretos: o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); Este método se caracterizado porque: 1 ) se realiza una copolimerizacion de monómeros formados por los anhídridos de N-CarboxiAminoácidos (NCA) de al menos dos tipo diferentes: ? por una parte, monómeros NCA de salida que comprenden NCA-Glu-Or y/o NCA-Asp-Or y/o NCA-AANI , ? y por otra parte, NCA-AANO, en presencia: de al menos un solvente polar no aromático, de preferencia elegido del grupo que comprende: N- MetiLPirrolidona (NMP), DiMetilFormamida (DMF), DiMetilsulfÓxido (DMSO), DiMetilAcetamida (DMAc), pirrolidona, NMP siendo más particularmente preferida; y eventualmente de al menos un co-solvente seleccionado entre los solventes apróticos (de preferencia el dioxano-1 ,4) y/o los solventes próticos (de preferencia la pirrolidona) y/o el agua y/o los alcoholes, metanol siendo particularmente preferido; 2) en el caso en donde los monómeros NCA de salida son NCA-Glu-OR y/o NCA-Asp-OR (R= alquilo), se emplea una aminólisis que consiste en poner en presencia el copolímero obtenido en la etapa 1 con una fase acuosa que comprende al menos una amina y que permite la transformación de Glu-OR en Gln y de Asp-OR en Asn; 3) eventualmente se dializa el medio reaccional para purificar la suspensión acuosa de partículas estructuradas; 4) eventualmente se concentra esta suspensión de la etapa 3, 5) se elimina el medio líquido para recolectar el sólido pulverulento que comprende las partículas. La primer etapa del método se inspira en las técnicas conocidas de polimerización de anhídridos de N-carboxi-(-aminoácidos (NCA), descritos, por ejemplo, en el artículo «Biopolymers, 15, 1869 (1976)» y en la obra de H. R. KRICHELDORF "a-Aminoacid-N-Carboxy Anhydride and Related Heterocycles", Springer Verlag (1987). El empleo de solventes de copolimerización apróticos no aromáticos polares, juiciosamente elegidos, evitan toda precipitación y el hecho de tener que recurrir a una hidrólisis ácida en presencia de agua y de solvente orgánico polar no aromático, permite obtener partículas estructuradas, discretas y submicrónicas con fuerte capacidad de carga de PA, y que forman una suspensión coloidal, estable en medio acuoso. Estas partículas no se comparan nulamente con un precipitado aglomerado macroscópico del genero evocado anteriormente a propósito de la proposición anterior (d). Siguiendo una variante, en el campo de la etapa 1 , se precipita, de preferencia en agua, el copolímero poli(AANO) (AANl) obtenido y se recolecta este precipitado. Esta variante corresponde a un modo discontinuo de preparación de partículas, en la cual se aisla el copolímero poli(AANO) (AAN l) bajo forma de precipitado que forma un producto intermedio estable. Este precipitado puede, por ejemplo, filtrarse, lavarse y secarse. De manera todavía preferida, NCA-pAAl son NCA de ácido glutámico o aspártico O-alquilado, por ejemplo NCA-Glu-O-Me, NCA-Glu-O-Et o NCA-Glu-O-Bz (Me = metilo - Et = Etilo - BZ = Bencilo).

De manera conocida, la copolimerización se desarrolla a una temperatura comprendida entre 20 y 120°C, a presión atmosférica y en presencia de un iniciador de amina, por ejemplo: N H3. Otros parámetros experimentales, como concentración en NCA y/o polímero en el solvente polar no aromático (de preferencia NMP), y/o la concentración o la naturaleza de cosolvente prótico, cuando la síntesis, se ajustarán según los efectos deseados y conocidos por el experto en la materia.. La hidrólisis ácida (etapa 2) se realiza con la ayuda de agua y al menos un ácido mineral, tal como con la ayuda fosfórica o clorhídrica, está última siendo preferida, y/o un ácido orgánico, tal como el ácido TriFluoroAcético (TFA), ácido acético, ácido dicloroacético, o ácidos organosulfónicos. Las proporciones de agua/ácido, expresadas en partes en peso, en una fase acuosa ácido de hidrólisis son, ventajosamente: • de 60/1 a 2/1 • de preferencia 40/1 a 2/1 , • y más preferentemente todavía, 20/1 a 2/1 . Las proporciones de fase acuosa de ácido de hidrólisis/NMP, ' expresadas en partes en peso, son ventajosamente: • de 5/100 a 200/100 • de preferencia 10/100 a 100/100 • y más preferentemente todavía, de 20/100 a 80/100. Otros parámetros, como la concentración en polímero, la temperatura de mezcla reaccional, el modo de adición de la fase acuosa de ácido de hidrólisis, el empleo de presión reducida, la duración de la reacción, etc., se ajustan según los efectos deseados y bien conocidos por el experto en la materia. La neutralización (etapa 3) se opera, en práctica, por ejemplo, con la ayuda de sosa. Se elimina enseguida la sal formada en el campo de la neutralización, así como el solvente, por todo tratamiento de separación física apropiado, por ejemplo diafiltración (diálisis) (etapa 4), filtración, modificación de pH, cromatografía. Se conducirá a una suspensión acuosa de partículas estructuradas que pueden concentrarse, por ejemplo, por destilación o todo otro medio físico conveniente: ultrafiltración, centrifugación. Para separar, de la etapa 6, las partículas de su medio líquido de suspensión, eliminan, eventualmente, la fase acuosa, por ejemplo por secado (por ejemplo, en la estufa), por liofilización o todo otro medio físico conveniente: ultrafiltración, centrifugación. Se recupera, en el campo de esta etapa 6, un sólido pulverulento, de color blanco. Según una variante, la etapa de concentración puede realizarse por un tratamiento químico, tal como un descenso de pH, que transforma en ácido la parte hidrofílica de los monómeros de glutamato, que los vuelven insolubles en agua. Estos compuestos intermedios PAA ácidos pueden filtrarse, lavarse, y secarse. Dichos compuestos intermedios ácidos pueden neutralizarse con una base química en una etapa ulterior a fin de obtener una suspensión de partículas.

Se observa que el empleo de las etapas 1 , 2, 3, 4 y eventualmente 5 del procedimiento anterior corresponde a una preparación de una suspensión coloidal de partículas submicrónicas y en fuerte proporción de carga con los PA. Cuando esta preparación de suspensión coloidal, PAA anfifílicos poli(AANO)(AANI) de la etapa 2 se colocan en un medio acuoso en el cual al menos una parte de AANI es soluble y al menos una parte de AANO es insoluble. PAA existen bajo forma de nanopartículas en medio acuoso. Una alternativa para preparar la suspensión de PV según la invención consiste en poner en presencia el sólido pulverulento, tal como se describe anteriormente y como producto y por su método de obtención, con un medio acuoso, no solvente de AANO. Para efectuar la asociación de uno o varios PA a las partículas, es posible emplear varios procedimientos conforme a la invención. Los ejemplos, no limitativos, de estos métodos se enumeran a continuación. Según un primer método, se efectúa la asociación de PA a las partículas al poner en presencia de una fase líquida (acuosa o no) que contiene PA con la suspensión coloidal de partículas que comprenden o no Asp a manera de AANI. Según un segundo método, se efectúa la asociación de PA a las partículas al poner en presencia de un PA en el estado sólido con la suspensión coloidal de partículas que comprenden o no Asp a manera de AANI. PA sólido puede encontrase, por ejemplo, bajo forma de liofilisato, precipitado, polvo u otro. Según un tercer método, se pone en presencia el sólido pulverulento (PAA que comprenden o no Asp a manera de AANI), tal como se describe en cuanto al producto y por sus características de obtención, con una fase líquida (acuosa o no) que contiene PA. Según un cuarto método, se pone en presencia el sólido pulverulento, tal como se describe en cuanto al producto y por sus características de obtención (PAA que comprenden o no Asp a manera de AANI), con PA bajo forma sólida. Se dispersa enseguida esta mezcla de sólidos, en una fase líquida, de preferencia una solución acuosa. En todos estos métodos, PA utilizados pueden encontrarse bajo forma pura o preformulada. Tomando en cuenta el tamaño nanométrico de las partículas, la suspensión puede filtrase sobre los filtros de esterilización, lo que permite obtener, fácilmente y a menos costo, líquidos médicos inyectables, estériles. El hecho de poder, gracias a la invención, controlar el tamaño de las partículas y lograr los valores de Dh entre 25 y 100 nm, es un triunfo importante. La presente invención intenta, igualmente, nuevos productos intermedios del método descrito anteriormente, caracterizados porque se constituyen por los copolímeros PAA (que comprenden o no Asp a manera de AANI) precursores de partículas.

APLICACIÓN INDUSTRIAL Según otro de sus aspectos, la invención se refiere a una suspensión y/o un sólido pulverulento (PAA que comprenden o no Asp a manera de AANI), tal como se define anteriormente, y/o tal como se obtienen por el método presente arriba, esta suspensión y este sólido comprendiendo al menos un principio activo hidrof ílico, elegido, de preferencia, entre: • las vacunas; • las proteínas y/o los péptidos, entre los cuales los más preferentemente retenidos son: hemoglobinas, citocromas, albúminas, interferones, antígenos, anticuerpos, eritropoyetina, insulina, hormonas de crecimiento, factores VIII y IX, interleucinas o sus mezclas, factores estimulantes de hemotopoyesis; • los polisacáridos, heparina seleccionándose más particularmente; · los ácidos nucleicos y, preferentemente, los oligonucleótidos de ARN y/o ADN; • moléculas no peptidoprotéicas que pertenecen a diversas ciases de quimioterapias anticancerosas y, en particular, antraciclinas y taxoides; « y sus mezclas. La invención intenta, igualmente, una suspensión y/o el sólido pulverulento (PAA que comprenden o no Asp a manera de AANI) cargada(s) en PA nutricional, fitosanitario o cosmético. En fin, la invención se refiere a una especialidad farmacéutica, nutricional, fitosanitaria o cosmética, caracterizada porque comprende una suspensión y/o sólido pulverulento cargado en PA hidrofílico y tales como se definen anteriormente. Según otro de sus objetos, la invención intenta, igualmente, el uso de estas PV (en suspensión o bajo forma sólida: PAA que comprenden o no Asp a manera de AAN I) cargadas en PA, para la fabricación de medicamentos de tipo sistemas de liberación controlada de PA. En particular, la invención se refiere al uso de una suspensión coloidal estable de partículas estructuradas submicronicas susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s) (PA) , estas partículas siendo de arreglos supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en el cual: V los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina; y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; para la preparación de una suspensión acuosa o de un sólido pulverulento, cargado en al menos PA y tal como se define en las reivindicaciones precedentes. En el caso de medicamentos, se puede tratar, por ejemplo, de aquellos administrables, de preferencia por vía oral, nasal, vaginal, ocular, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intracerebral o parenteral. Las aplicaciones cosméticas considerables son, por ejemplo, las composiciones que comprenden un PA asociado a PV según la invención y aplicables por vía transdérmica. Los productos fitosanitarios referidos pueden ser, por ejemplo, herbicidas, pesticidas, insecticidas, fungicidas, etc. Los siguientes ejemplos permitirán comprender mejor la invención en sus diferentes aspectos de producto/procedimiento/aplicación. Estos ejemplos ilustran la preparación de partículas de poliaminoácidos cargados o no en principios activos, como también presenta las características de estructura y las propiedades estas partículas.

EJEMPLOS Ejemplo 1 - Preparación de polímero-poli(leucina)-bloque-(glutamato de metilo) Las técnicas utilizadas, para la polimerización de NCA en polímeros de estructuras en bloques o estáticas se conocen por el hombre experto en la materia y se detallan en la obra de H. R. KRICHELDORF " -Aminoacides-N-Carboxy Anhydrides and Related Heterocycles", Springer Veriag (1987). La siguiente síntesis precisa la síntesis de uno de entre ellos. Síntesis de poli(Leu)4o-p li(GluOMe)8o: 10 g de NCA-GluOMe se solubilizan en una mezcla de 150 mi de NMP a 60°C. 5 mi de una solución de 0.91 g de bencilamina en 50 mi de NMP se agregan al monómero una vez.

Después de 1 h, se agregan 14.1 g de NCA-Leu solubilizado previamente en 20 mi de NMP. La polimerización continua aún durante 3-4 h. Una toma de medio reaccional permite conocer las siguientes caracterizaciones: Rendimiento 90%. Composición por RMN 1 H: (TFA-d) 66% Molar GluOMe. Viscosidad reducida (0.5% de TFA a 25°C) 0.4 dl/g.

Masas Molar por GPC:20 000 g/mol. Ejemplo 2 - Aminólisis de poli(leucina)-bloque-(glutamato de metilo)con hidroxietilamina A la solución de polímero en NMP preparado según el ejemplo 1 , se agregan 10 g de hidroxietilamina una vez. El medio se lleva y mantiene a 80°C durante 2 días. Se agregan enseguida 150 m de agua a la solución de polímero. Enseguida se purifica por una etapa de diálisis que asegura la eliminación del exceso de amina y NMP. Las partículas se aislan por liofilización. Rendimiento cuantitativo: RMN 1 H (TFA-d): 8% de Metoxi residual (3.5 ppm); 92% de hidroxietilglutamina. Composición RMN 1 H (TFA-d):34% Leu. Tamaño de partículas (difusión de la luz modo QLS):100 nm. Ejemplo 3 - Poner en evidencia las nanopartículas por Difusión de la Luz (DDL) y por Microscopía Electrónica en Transmisión (TEM) 10 mg de partículas de polímero 1 se suspenden en 10 mi de agua o una solución acuosa de sal. Esta solución se introduce enseguida en un granulómetro Coulter (o difractrómetro láser). Los resultados del análisis de la granulometría de diferentes productos probados se presentan en la siguiente tabla 1 .

Tabla 1 - Mediciones del tamaño de PV Ejemplo 4 - Prueba de asociación de nanopartículas con una proteína (la insulina) A partir de una solución de tapón de fosfato isotónico de pH 7.4, se prepara una solución de insulina humana concentrada a 1 .4 mg/ml que corresponde a 40 Ul/ml. En 1 mi de esta solución de insulina, se dispersan 10 mg de PV preparados en el ejemplo 1. Después de 15 horas de incubación a temperatura ambiente, la insulina asociada a PV y la insulina libre se separan por centrifugación (60 000 g, 1 hora) y ultrafiltración (umbral de filtración 300 000 D). La insulina libre recuperada en el filtrado se dosifica por CLHP o por ELISA y se deduce por diferencia la cantidad de insulina asociada. La cantidad de insulina asociada a PV es superior a 0.77 mg, que representa más de 55% de total de insulina medida.

La siguiente tabla muestra los resultados de las medidas de la relación de asociación efectuadas sobre diferentes PV. La relación de asociación expresa el porcentaje de insulina asociada con respecto a la insulina medida en una preparación concentrada a 1.4 mg/ml de insulina y 10 mg/ml de PV. Este valor se transforma en una relación de carga que expresa una formulación al 100% de fijación de la proteína, en mg de insulina por 100 mg de PV.

Tabla 2 - Mediciones de la relación de asociación con la insulina para una mezcla de 0.14 mg de INSULINA/mg PV Ejemplo 5 - Farmacocinética y farmacodinámica de PV cargadas con la insulina al perro sano en ayunas La preparación de partículas+insulina del ejemplo 4 se ha inyectado en los perros, diabéticos por pancreatectomia total, y en ayunas la noche anterior. La administración a las 1 1 horas de la mañana por vía subcutánea torácica de la preparación se ha hecho a la posología de 0.5 U l/kg de insulina por Kg de peso vivo del animal. . El volumen administrado se comprende entre 0.18 y 0.24 mi. En los tiempos -4, -2, 0, 1 , 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44 y 48 horas, 1 mi de sangre se pretoma por punción yugular al vacío sobre el tubo de heparinato de sodio. 30 µ? de sangre total se utilizan extemporáneamente para medir la glicemia. El tubo se centrifuga enseguida, decanta y el plasma se almacena a -20°C para dosificación de la insulina. Los resultados presentes en la figura 1 anterior muestran un regulado de la insulina hasta 12 horas (tratado pleno) y un efecto hipoglicemiante importante que se prolonga hasta 20 horas (tratado discontinuo) después de la inyección.

Tabla 3 - Mediciones del tiempo de acción de insulina (efecto hipoglicemiante) en presencia de PV según la invención Este ejemplo demuestra la no desnaturalización de la insulina en presencia de PV según la invención. Además, el ejemplo 2 permite poner en evidencia el aumento de la duración de acción de la insulina con respecto a la insulina no formulada, la utilidad de PV como sistema lento para la liberación controlada de insulina. Muestra igualmente como es posible dominar la duración de acción por la elección juiciosa del grupo hidrofóbico. Ejemplo 6 - Aminólisis de poli(fenilalanina)-bloque-(glutamato de metilo)con hidroxietilamina A la solución de polímero en NMP preparado según el ejemplo 1 , partiendo de los monómeros NCAGluOMe y NCAfenilalanina, se agregan 10 g de hidroxietilamina una vez. El medio se lleva y mantiene a 80°C durante 2 días. Se agregan enseguida 150 m de agua a la solución de polímero. Enseguida se purifica por una etapa de diálisis que asegura la eliminación del exceso de amina y NMP. Las partículas se aislan por liofilización. Rendimiento cuantitativo: RMN 1 H (TFA-d): 6% de Metoxi residual (3.5 ppm); 94% de hidroxietilglutamina. Composición RMN 1 H (TFA-d):34% Leu. Tamaño de partículas (difusión de la luz modo QLS): 100 nm Ejemplo 7 - Aminólisis de poli(leucina-bloque-glutamato de bencilo)con 3-amino-propileno-1 ,2-glicol A la solución de polímero en NMP preparado según el ejemplo 1 , partiendo de los monómeros NCAGluOBzl y NCALeu, se agregan 10 g de 3-amino-propileno-1 ,2-glicol una vez. El medio se lleva y mantiene a 80°C durante 2 días. Se agregan enseguida 150 m de agua a la solución de polímero. Enseguida se purifica por una etapa de diálisis que asegura la eliminación del exceso de amina y solvente. Las partículas se aislan por liofilización. Rendimiento cuantitativo. Tamaño de partículas (QLS, según el ejemplo 3): 100 nm. Ejemplo 8 - Prueba de asociación de nanopartículas con una proteína (la insulina) Según el ejemplo 4, se emplean las partículas aisladas del ejemplo 6 y de la insulina humana para obtener una proporción de carga expresada en mg de insulina por 100 mg de PV.

Ejemplo Polímero Relación de Relación de asociación carga en mg/100 mg PV 6 POLI(PHE079-BLOQUE- 99 13.6 GL -N- DIHIDROXIPROPIL02i)x 7 POLI(LEU)o.66-BLOQUE- 99 13.7 (GLN-N- DlHIDROXlPROPIL)033)x

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1 . Suspensión coloidal de partículas submicrónicas susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s) (PA), estas partículas siendo de arreglos supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente ¡n vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); caracterizada: V porque los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son los aminoácidos neutros hidrofílicos AANI con la exclusión de Asparagina; porque los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son aminoácidos neutros hidrofóbicos AANI; porque los aminoácidos recurrentes de cada tipo AANI y AANO siendo idénticos o diferentes entre ellos. 2. La suspensión según la reivindicación 1 , caracterizada porque PAA constitutivos de partículas son PAA "bloques", en los cuales: o la relación molar AA N 0/(A A I + A A N O) es > 6%, o y la longitud absoluta del bloque AANO es > 5, de preferencia >_ 10, y más preferentemente > 20. 3. La suspensión según la reivindicación 1 , caracterizada porque PAA constitutivos de partículas son PAA "copolímeros estáticos", en los cuales: • la relación molar AANI/(AANI+AANO) es > 10%, y de preferencia > 20% y más preferentemente entre 30 y 70%, • la masa molar Mw > 2000 Da. 4. La suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque el(los) AANI hidrofílico(s) se elige(n) del grupo que comprende: los aminoácidos neutros naturales: de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: serina, treonina, hidroxiprolina, glutamina; los aminoácidos neutros, raros o sintéticos siguientes, de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: metionina-S-óxido, O-glicosidil-serina; derivados de aminoácidos saturados, de preferencia aquellos elegidos en el grupo que comprende: N- hidroxietilglutamina, N-hidroxipropilasparagina, N- hidroxietil-asparagina, N-hidroxipropilglutamina. 5. La suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el(los) AANO hidrofóbico(s) se elige(n) del grupo que comprende: los ami noácidos neutros naturales, de prefere aquellos elegidos del grupo que comprende: Leu, lie Val, Ala, Pro, Phe; ? los aminoácidos neutros, raros o sintéticos, de preferencia aquellos elegidos del grupo comprende: norleucina, norvalina; ? derivados de aminoácidos polares, de preferencia aquellos elegidos del grupo que comprende: glutamato de metilo , glutamato de etilo, aspartato de bencilo, N-acetillisina. 6. La suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 , caracterizada porque las partículas de vectorización (PV) que la contienen tienen un tamaño promedio comprendido entre 0.01 y 0.5 µt? , de preferencia entre 0.01 y 0.2 µ?? . 7. La suspensión coloidal acuosa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 , caracterizada porque es acuosa y estable. 8. La suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque las partículas comprenden al menos un principio activo. 9. Sólido pulverulento, caracterizado porque se obtiene a partir de la suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8. 1 0. Método de preparación de sólido pulverulento según la reivindicación 9 o de un sólido pulverulento obtenido a partir de una suspensión coloidal estable de partículas estructuradas submicrónicas susceptibles de utilizarse, notablemente para la vectorización de principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo de ordenes supramoleculares individuales (discretos). o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en la cual: V los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina, y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; caracterizado porque: 1 ) se realiza una copolimerizacion de monómeros formados por los anhídridos de N-CarboxiAminoácidos (NCA) de al menos dos tipo diferentes: ? por una parte, monómeros NCA de salida que comprenden NCA-Glu-Or y/o NCA-Asp-Or y/o NCA-AANI, ? y por otra parte, NCA-AANO, en presencia: de al menos un solvente polar no aromático, de preferencia elegido del grupo que comprende: N- etiLPirrolidona (NMP), DiMetiiFormamida (DMF), DiMetilsulfÓxido (DMSO), DiMetilAcetamida (DMAc), pirrolidona, NMP siendo más particularmente preferida; - y eventualmente de al menos un co-solvente seleccionado entre los solventes apróticos (de preferencia el dioxano-1 ,4) y/o los solventes próticos (de preferencia la pirrolidona) y/o el agua y/o los alcoholes, metanol siendo particularmente preferido; 2) en el caso en donde los monómeros NCA de salida son NCA-Glu-OR y/o NCA-Asp-OR (R= alquilo), se emplea una am/nólisis que consiste en poner en presencia el copolímero obtenido en la etapa 1 con una fase acuosa que comprende al menos una amina y que permite la transformación de Glu-OR en Gln y de Asp-OR en Asn; 3) eventualmente se dializa el medio reaccional para purificar la suspensión acuosa de partículas estructuradas; 4) eventualmente se concentra esta suspensión de la etapa 3, 5) se elimina el medio líquido para recolectar el sólido pulverulento que comprende las partículas. 1 1 . Método de preparación de la suspensión según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque se pone en presencia de un medio acuoso no solvente, el sólido pulverulento según la reivindicación 9 y/o el sólido pulverulento obtenido por el método según la reivindicación 10. 12. Método de preparación de la suspensión según la reivindicación 8, o de una suspensión coloidal estable de partículas estructuras submicrónicas cargadas en principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo de ordenes supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en la cual: los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina, y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; caracterizado porque se efectúa la asociación de PA a las partículas, al poner en presencia de una fase líquida que contiene PA con la suspensión coloidal de partículas y/o el sólido pulverulento obtenido por el método según la reivindicación 10. 13. Método de preparación de la suspensión según la reivindicación 8, o de una suspensión coloidal estable de partículas estructuras submicrónicas cargadas en principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo de ordenes supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente ¡n vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en la cual: los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina, ^ y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; caracterizado porque se efectúa la asociación de PA a las partículas, al poner en presencia de un PA en estado sólido con la suspensión coloidal de partículas. 14. Método de preparación de la suspensión según la reivindicación 8, o de una suspensión coloidal estable de partículas estructuras submicrónicas cargadas en principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo de ordenes supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en la cual: los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina, y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre ellos; caracterizado porque se coloca en presencia el sólido pulverulento según la reivindicación 9 y/o el sólido pulverulento obtenido por el método según la reivindicación 10, con una fase líquida que contiene PA. 15. Método de preparación de la suspensión según la reivindicación 9, caracterizado porque se pone en presencia el sólido pulverulento según la reivindicación 9 y/o el sólido pulverulento obtenido por el método según la reivindicación 10, con PA bajo forma sólida y porque se dispersa esta mezcla de sólidos en una fase líquida, de preferencia una solución acuosa. 16. Productos intermedios del método según la reivindicación 10, caracterizados porque se constituyen por los copolímeros PAA precursores de partículas. 17. Suspensión según la reivindicación 9 y/u obtenida por el método según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 15 y/o sólido pulverulento según la reivindicación 9 obtenido por el método según la reivindicación 10, que comprende al menos un principio activo hidrofílico elegido, de preferencia, entre: • las vacunas; • las proteínas y/o los péptidos, entre los cuales los más preferentemente retenidos son: hemoglobinas, citocromas, albúminas, interferones, antígenos, anticuerpos, eritropoyetina, insulina, hormonas de crecimiento, factores VI I I y IX, interleucinas o sus mezclas, factores estimulantes de hemotopoyesis; • los polisacáridos, heparina seleccionándose más particularmente; • los ácidos nucleicos y, preferentemente, los oligonucleótidos de ARN y/o ADN; • moléculas no peptidoprotéicas que pertenecen a diversas clases de quimioterapias anticancerosas y, en particular, antraciclinas y taxoides, y sus mezclas. 18. Suspensión según la reivindicación 7 y/o suspensión obtenida por el método según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 15 y/o sólido pulverulento según la reivindicación 9 u obtenido por el método según la reivindicación 10, que comprende al menos un principio activo nutricional, fitosanitario o cosmético. 19. Especialidad farmacéutica, nutricional, fitosanitaria o cosmética, caracterizada porque comprende una suspensión y/o sólido pulverulento según la reivindicación 17 ó 18. 20. Uso de una suspensión coloidal estable de partículas estructuras submicrónicas cargadas en principio(s) activo(s) PA, estas partículas siendo de ordenes supramoleculares individuales (discretos): o a base de poliaminoácidos (PAA) anfifílicos, lineales, a encadenamientos peptídicos y que comprenden al menos dos tipos diferentes de aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI e hidrofóbicos AAO, aminoácidos de cada tipo siendo idénticos o diferentes entre ellos; o aptos para asociar en suspensión coloidal al estado no disuelto, al menos un PA y para liberar este, notablemente in vivo, de manera prolongada y/o retardada; o y estables en fase acuosa a un pH comprendido entre 4 y 13, en la ausencia de agente(s) tensoactivo(s); en la cual: los aminoácidos recurrentes hidrofílicos AAI son al menos en parte constituidos por Asparagina, ¦ y los aminoácidos recurrentes hidrofóbicos AAO son los aminoácidos neutros hidrofóbicos AANO idénticos o diferentes entre el los; para la preparación de una suspensión acuosa o de un sólido pulverulento, cargado en al menos PA y tal como se define en las reivindicaciones precedentes.