MXPA01001139A - Derivado de quinazolina que baja lipidos. - Google Patents

Abstract

Una quinazolina sustituida por carbonilo, preferiblemente y metodos para bajar el colesterol de la sangre, incluyendo reducir el colesterol total y los niveles de LDL-colesterol mediante la administracion de las quinazolinas de carbonilo y composiciones de las mismas.

Description

DERIVADO DE OUINAZOLINA OUE BAJA LlPIDOS Campo de la invención Esta invención se relaciona con derivados novedosos de la quinazolina, por ejemplo, 4- (3' -broraobenzoil) -6, 7- dimetoxiquinazolina) , y con los métodos para su uso. En particular, los compuestos de la invención, cuando se administran a un sujeto, son efectivos para reducir los niveles de colesterol en la sangre en el sujeto. Antecedentes de la invención La aterosclerosis y la enfermedad del corazón isquémico siguen siendo la mayor causa de muerte de los norteamericanos. Los niveles elevados de colesterol en el suero presentan un factor de riesgo mayor para la aterosclerosis y las complicaciones relacionadas que incluyen el infarto al miocardio, la falla al corazón, y el ataque cerebral. Los estudios de intervención realizados en hombres de mediana edad demostraron una reducción marcada en la incidencia de eventos cardiovasculares después de bajar los niveles elevados del colesterol de lipoproteina de baja densidad (LDL-C) y total. El ensayo de Colesterol y Eventos Recurrentes (CARE) y el Estudio de Supervivencia de Simbastatina Escandinavo (4S) (1994, Lancet 344:1383-1389) han mostrado además que tanto pacientes femeninos como ancianos con historia anterior de enfermedad del corazón isquémica se benefician de la terapia de bajar el colesterol. (Miettinen y colaboradores, 1988, Arc?. Intern . Med. 148:36-69; Sac s y colaboradores, 1996, New Eng. J. Med. 335:1001-1009) Los fármacos más efectivos que bajan el colesterol son las estatinas, que bajan los niveles de colesterol inhibiendo la 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A (HMG-CoA) reductasa, una enzima que cataliza el paso limitante en la biosintesis del colesterol (Goldstein y colaboradores, 1984, J. Lipid Res . 25, 1450-1461) . En comparación con los regímenes de tratamiento con otros agentes que bajan lipidos, tales como los secuestrantes de ácido biliar (colestipol y colestiramina) , el ácido nicotinico, ácido fibrico (gemfibrozil y clofibrato) , probucol, y los inhibidores de ACAT experimentales, la terapia con estatina se ha encontrado que tiene características favorables. Las estatinas alcanzan bajar mucho el colesterol de lipoproteina de baja densidad, conduciendo a una reducción global en la mortalidad, y son efectivos en costo debido a la reducción sustancial de las admisiones al hospital y de las tasas de intervención coronaria. Las estatinas también logran mejor cumplimiento que otros tratamientos, como un resultado de su administración una vez al dia y pocos efectos colaterales. La combinación de las estatinas con otras sustancias se considera necesaria para los pacientes con padecimientos severos, complejos o refractarios a los lipidos. Además, grandes pruebas clínicas han sugerido la regresión de las lesiones ateroscleróticas mediante la terapia que baja los lipidos agresivamente (Schell y Myers, 1997, Prog. on Cardiovascular Diseases 39:483-496). Para complementar las estatinas y lograr una reducción exitosa del colesterol en sujetos resistentes a la estatina, la identificación de nuevas sustancias que bajan los lipidos con un mecanismo diferente de acción que las estatinas sigue siendo un punto focal importante en la investigación contemporánea de la aterosclerosis. Ya que los inhibidores de 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A son ineficaces en el ratón, este animal proporciona un modelo útil para buscar sustancias novedosas capaces de bajar los niveles de colesterol mediante un mecanismo diferente de acción que las estatinas. Hay una necesidad de sustancias nuevas que bajen lipidos que sean efectivas para bajar el colesterol total y/o el colesterol de lipoproteina de baja densidad, para el tratamiento del colesterol elevado y otros desórdenes de lipidos que incluyen aquellos que son severos, complejos, y/o que son refractarios a los tratamientos actuales. Compendio de la invención Los compuestos de quinazolina que tienen una sustitución de carbonilo (carbonil-Q) como se describe más adelante y ejemplificados por 4- (3' -bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina ( HI-P164) se han identificado ahora como una clase nueva de potentes agentes que~ bajan el colesterol. Como se muestra en los ejemplos más adelante, la administración de WHI-P164 reduce los niveles de colesterol total en ratones hipercolesterolémicos C57B1/6 en una dieta alta en calorías en un 23 por ciento y el colesterol- de lipoproteixia de baja densidad en un 45 por ciento. El HI-P164 también redujo los niveles totales de colesterol y los niveles de ß-VLDL/LDL-colesterol de los ratones hipercolesterolémicos con deficiencia de apolipoproteina E { apo e'1 ') en un 41 por ciento y 63 por ciento, respectivamente. La presente invención proporciona agentes potentes que bajan el colesterol, compuestos de quinazolina que tienen un grupo carbonilo, (carbonil-Q) . Un compuesto ejemplar de la invención es 4- (3' -bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina. Los agentes novedosos que bajan el colesterol de la invención se pueden formular por medios conocidos en la técnica para administrar a áreas objetivo del cuerpo, incluyendo la sangre y/o los intestinos, por ejemplo, eligiendo un vehiculo, modo de administración, o conjugando el carbonil-Q con una fracción objetivo especifica, tal como un anticuerpo o ligando que se enlaza a un antigeno especifico o receptor de ligando en el tejido objetivo. Las formulaciones útiles para la reducción terapéutica del colesterol incluyen composiciones inyectables, composiciones orales, composiciones de depósito, y similares que contienen una cantidad efectiva que baja el colesterol de un compuesto de carbonil-Q de la invención, tal como 4-(3'-bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina. En los métodos de la invención, los agentes que bajan el colesterol carbonil-Q tales como 4- (3' -bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina se administran a un sujeto con el fin de modular los lipidos en la sangre, y particularmente para bajar el colesterol en la sangre. El resumen anterior de la presente invención no pretende describir cada modalidad revelada o toda implementación de la presente invención. Los ejemplos y la descripción detallada que siguen ejemplifican más particularmente estas modalidades. Breve descripción de los dibujos La Figura 1 es una gráfica que muestra la reducción del colesterol de lipoproteina de muy baja densidad mediante el tratamiento con HI-P164 en el modelo de hipercolesterolemia de C57B1/6. Se muestran, los perfiles de colesterol de ratones C57B1/6 alimentados con una dieta de manteca de cacao y 0 miligramo/kilogramo/dia (circuios blancos); 1.6 miligramo/kilogramo/dia (cuadros blancos; o 16 miligramos/kilogramos/dia (circuios negros) (n=4) . La Figura 2 es una gráfica que muestra la reducción de colesterol de lipoproteina de muy baja densidad mediante tratamiento con WHI-P164 en ratones apo-e''' alimentados con alimento para roedores y tratados con WHI-P164 a 8 miligramos/kilogramos/dia (circuios negros, n=8) o con vehiculo nada más (circuios blancos, n=4) . La Figura 3 es una gráfica que muestra la reducción de colesterol de lipoproteína de muy baja densidad mediante el tratamiento con HI-P164 en ratones apo-e^' alimentados con una dieta alta en grasas, alta en colesterol. Se muestran los perfiles de colesterol de los ratones apo-e~/~ alimentados con una dieta Western y tratados con WHI-P164 a 40 miligramos/kilogramos/día durante 7 dias (círculos negros, n=2) o con vehículo solamente (círculos blancos, n=3) . Las Figuras 4A-4D son fotografías que muestran la reducción de la síntesis triglicéridos hepáticos mediante el tratamiento con WHI-P164. Los hígados de ratones apo-e'' ~ alimentados con dieta Western y tratados con vehículo nada más (Figuras 4A y 4C) o con 1 miligramo/día de WHI-P164 durante una semana (Figuras 4B y 4D) se analizaron usando manchado con Aceite Rojo O (Figuras 4A y 4B) y manchado de corte de tejido de Hemotoxilina y Eosina (Figuras 4C y 4D) . La Figura 5 es una gráfica que muestra la inhibición de la acumulación postprandial de triglicéridos mediante el tratamiento con WHI-P164. Los ratones C57B1/6 se trataron con WHI-P164 a 40 miligramos/kilogramos/día durante 7 días, y se tuvieron en ayunas 36 horas con tratamiento continuado. El alimento se volvió a administrar a las 0, 1, 3, 6, y 9 horas. Los ratones tratados con WHI-P164 (círculos negros) exhibieron una acumulación postprandial de triglicéridos muy reducida en comparación con los ratones tratados con vehículo (círculos blancos) .

Las Figuras 6A-D demuestran la regresión inducida por WHI-P164 de lesiones ateroscleróticas pre-existentes en ratones apo-e'^ hipercolesterolémicos. Las aortas de los animales no tratados (Figura 6A) , tratados con vehículo (Figura 6B) y tratados con WHI-P164 (Figura 6C) se mancharon con Sudán IV para mostrar las vetas de grasa. Las aortas de los ratones de control no tratados se obtuvieron a los 7 meses para reflejar el estado de pretratamiento de los grupos de prueba. Las aortas de los ratones de prueba tratados con vehículo o con WHI-P164 se obtuvieron a los 8 meses, después de un programa de tratamiento de un mes. Las comparaciones estadísticas indicaron **p=0.002 para los controles no tratados, contra los ratones de prueba tratados con WHI-P164 y p=0.007 para los controles de vehículo contra ratones tratados con WHI-P164. Descripción detallada de las modalidades preferidas La invención incluye un compuesto que baja colesterol que comprende una quinazolina sustituida por carbonilo (carbonil-Q) ejemplificada por 4- (3' -bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina (WHI-P164) y un método para bajar el colesterol de la sangre mediante la administración de un carbonil-Q. Compuestos que bajan el colesterol de la invención Los compuestos que bajan el colesterol de la invención incluyen quinazolinas sustituidas por carbonilo (carbonil-Q) que tienen la siguiente fórmula estructural general : (carbonil-Q) en donde X es un alquilo (de cadena recta, ramificada, o cíclica) o es una estructura de anillo aromático, tal como fenilo, naftilo, y similares. X puede estar sustituido, por ejemplo, con un halógeno, OH, SH, alquilo, alcoxi, aciloxi, NH;, y similares. El carbonil-Q puede ser sustituido, por ejemplo, con átomos de carbono o nitrógeno en las posiciones 2, 5, 6, o en la 8 puede estar unido a las mismas halo, H, OH, alquilo, alcoxi, aciloxi, y grupos similares. Un compuesto carbonil-Q ejemplar de la invención es la 4- (3' -bramobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina (WHI-P164), que tiene la siguiente estructura: (WHi-Pió-; Los compuestos que bajan el colesterol de 1 : invención se formulan en composiciones para la administracicr., preferiblemente incluyendo un vehículo que ayuda a .. administración del compuesto para los efectos que bajan el colesterol. Por ejemplo, la composición puede incluir un vehículo que ayuda a suspender o solubilizar el colesterol de la invención o a mejorar el sabor o la textura de la composición en alimentos o bebidas para la administración oral al intestino. Alternativamente, una composición que contiene el compuesto de la invención puede incluir un vehículo isotónico para facilitar la administración mediante inyección, agentes para prolongar la vida media del compuesto, y similares. Se conocen múltiples sistemas de administración para administrar compuestos a la corriente sanguínea y al intestino de un animal. Preferiblemente, el compuesto de la invención se administra al intestino, más preferiblemente mediante la administración oral en una composición de alimento, tal como un suplemento dietético o un alimento básico suplementado con la composición de la invención. Modo de administración Los compuestos que bajan el colesterol de la invención se pueden formular como composiciones farmacéuticas, suplementos nutrimentales, o como aditivos en alimentos y administrarse a un hospedero mamífero, incluyendo un humano en una variedad de formas adaptadas a la administración de un compuesto de quinazolina. Las rutas de administración preferidas incluyen inyección intravenosa, inyección intramuscular, y la inyección subcutánea. Lo más preferido es la administración oral . Se pueden preparar soluciones o suspensiones en la composición que baja el colesterol en agua, solución salina isotónica (PBS) y preferiblemente se puede mezclar con un tensoactivo no tóxico. También se pueden preparar dispersiones en glicerol, aceites vegetales y similares. Bajo condiciones ordinarias de almacenamiento y uso, estas preparaciones pueden contener un preservativo para evitar el crecimiento de micro-organismos. La dosis de la composición que se va a administrar puede variar ampliamente de acuerdo con la edad, el tamaño, y el estado del sujeto que se va a tratar. Las dosis útiles de la composición son aquellas que administrarán aproximadamente de 0.1 hasta aproximadamente 500 miligramos/kilogramo de peso corporal/día, y preferiblemente administrar aproximadamente de 0.5 hasta aproximadamente miligramos/kilogramo de peso corporal/día. La cantidad de compuesto necesario en la composición puede variar con el modo de administración, por ejemplo, mediante inyección o mediante administración oral, para tomar en cuenta la variación en el metabolismo del compuesto y la composición. Aunque la invención se presta a varias modificaciones y formas alternativas, se muestran modalidades específicas de la invención a manera de ejemplos y se describirán en detalle.

Deberá entenderse, sin embargo, que la intención no es limitar la invención a las modalidades particulares descritas. Por el contrario, la intención es cubrir todas las modificaciones, equivalentes, y alternativas que están dentro del espíritu y alcance de la invención. EJEMPLOS La invención se puede entender mejor haciendo referencia a los siguientes ejemplos, que no pretenden limitar la invención de ninguna manera. Ejemplo 1 Modelos animales de hipercolesterolemia v métodos analíticos Ratones machos de tres a cuatro semanas de edad C57B1/6 (Taconic, Germantown, NY, EUA) se mantuvieron en jaulas microaislantes en un ciclo de doce horas día/noche y se alimentaron con dieta de manteca de cacao Paigen (15.8 por ciento grasa, 1.25 por ciento colesterol, y 0.5 por ciento colato de sodio) (Harían Teklad, Madison, Wl, EUA) durante dos semanas antes de la iniciación de terapia para bajar lípidos. La dieta de Paigen se describe en Nishina y colaboradores, 1993, J. Lipid Res . 34:1413-1422. Ratones de tres a cuatro semanas de edad con deficiencia de apolipoproteína E (apo-e ~5 fueron la progenie de pares de crianza de ratones con genes recortados apo E (apo EKO) obtenidos de Jackson Laboratories (Gar Harbor, Maine, EUA) . Los ratones se alimentaron ya sea con alimentos regulares para roedores (5 por ciento grasa y 0 por ciento colesterol) (Teklad-LM 485, Harían Teklad, Madison, Wl, EUA), la dieta de manteca de cacao Paigen, o con la dieta Western (21.22 por ciento grasa y 0.2 por ciento colesterol) (Harían Teklad, Madison, Wl, EUA) durante dos semanas antes del tratamiento. Los animales se trataron con compuestos de prueba mediante inyección intraperitoneal diariamente durante 7 días.

Se administró un rango de dosis. Los animales de control recibieron vehículo nada más. Se analizó el efecto de los derivados de quinazolina sobre el colesterol total, LDL, HDL, enzimas del hígado, y glucosa. También se examinaron los tejidos de los ratones histológicamente. Determinaciones de lípidos : Se midió el colesterol total en suero enzimáticamente usando el juego de colesterol de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EUA). Para las mediciones de lípido en tejidos del hígado, se extrajeron lípidos de tejidos hepáticos homogeneizados usando el método de Bligh y Dyer (Bligh y colaboradores, Can J. Biochem. Phys . 1959, 37:911-917). Se homogeneizó un gramo de tejido de hígado en un mililitro de agua destilada y se extrajo con 4 mililitros de cloroformo/metanol (1:1 volumen/volumen). La fase de cloroformo que contenía los lípidos se evaporó bajo una corriente de nitrógeno, los lípidos se disolvieron en 100 microlitros de isopropanol, y se sometieron a la determinación de colesterol como se describió anteriormente. Se determinó el contenido de triglicérido (TG) usando el juego TG de Sigma Chemical Co. Se examinaron los perfiles de colesterol en suero mediante cromatografía líquida de proteína rápida (FPLC) usando 100 microlitros de suero por corrida. El suero se pasó sobre dos SuperosaD 6 HR 10/30 conectados en línea equilibrados en solución salina regulada de fosfato (PBS) , usando el sistema FPLC de Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, EUA) que consiste en un controlador LCC-501 plus conectado con un conector de ultravioleta (UV-MII) , dos bombas P500, y un recolector de fracciones Frac-100. La FPLC se controló a distancia y se operó mediante el programa director de FPLC operado en una computadora IBM. El sistema se operó a un gasto de 0.5 mililitros/minuto y se recolectaron fracciones a 0.5 mililitros/fracción. Se determinó la concentración de colesterol en cada fracción como se describió anteriormente y se gráfico contra el número de fracciones para obtener el perfil de colesterol en el suero. Para determinar las concentraciones de suero de LDL/ß-VLDL y HDL, las sumas del pico LDL/ß-VLDL (fracciones 29-35) y el pico HDL (fracciones 53-63) se dividieron entre 0.1. Para obtener el IC5o y las concentraciones mínimas de ß-VLDL y HDL, se graficaron las concentraciones de ß-VLDL y HDL contra la dosis. Se obtuvieron curvas de desintegración exponencial mejor ajustadas usando la ecuación: concentración de HDL o LDL/ß-VLDL=Aexp (-BX) + E, en donde A+E es igual a la concentración de HDL o LDL/ß-VLDL a una dosis de 0 microgramos/día y E es igual a la concentración mínima matemática de HDL o ß-VLDL, y B es igual a 0.69/IC5o. Se obtuvieron curvas mejor ajustadas usando el programa Graphpad Inplot, Graphpad Software, San Diego, CA, EUA. Determinación de VLDL-TG hepático en vivo usando Tritón R1339 Ratones C57B1/6 y con deficiencia de apoE se trataron con inyecciones intraperitoneales de 50 microlitros de vehículo o 40 miligramos/kilogramo de WHI-P164 en 50 microlitros de vehículo por 7 días consecutivos, seguidos por un ayuno de 36 horas para detener la síntesis del quilomicrón intestinal. Posteriormente, los ratones se inyectaron intravenosamente con 500 miligramos/kilogramo de Tritón WR1339 (Sigma Chemical Co.) en 0.9 por ciento NaCl para inhibir completamente su aclaramiento de VLDL de plasma, como se reportó anteriormente (Pasternali y colaboradores, 1996, Ann. Intern . Med. 125:529-540; Aalto-Setala y colaboradores, 1992, J. Clin . Invest . 90:1889-1900). Se tomaron muestras de sangre a las 0 y 4 horas después de la inyección de Tritón WR1339 y se midieron los niveles de triglicéridos en el plasma enzimáticamente usando un juego enzimático disponible -comercialmente (Sigma Chemical Co.). Alternativamente, se volvió a dar alimento a los ratones después de un ayuno de 36 horas y se recolectaron muestras de sangre a las 0, 1, 3, 6, y 9 horas después de volver a comer. La acumulación de quilomicrón-TG se determinó como acumulación de triglicéridos en plasma. Química sanguínea Se determinaron los niveles en suero de alanina aminotransferasa (ALT) , fosfatasa alcalina (ALP) , deshidrogenasa lactato (LDH) , nitrógeno urea en sangre (BUN) , creatinina, fosfoquinasa creatinina (CPK) , y glucosa usando un sistema clínico Synchron CX5 (Beckman Instruments, Inc., Fullerton, CA) siguiendo las instrucciones del fabricante. Para la prueba de tolerancia a la glucosa, se determinaron los niveles de glucosa en sangre usando el medidor de glucosa portátil One Touch Profile (Lifescan, Milpitas, CA, EUA) . Histopatología Al final de experimento, los animales se sacrificaron y los tejidos cosechados se fijaron en 10 por ciento de formalina regulada de fosfato durante la noche, se sumergieron, seccionaron y mancharon mediante hematoxilina y eosina (HyE) . Las secciones manchadas se examinaron para determinar cambios patológicos. Para el manchado de Aceite Rojo O, el hígado se cortó y se congeló en nitrógeno líquido. Se obtuvieron secciones de cinco mieras de grosor usando el criostato LeicaCM1800 (Heerbrugg, Suiza), manchado en 0.5 por ciento de Aceite Rojo O en propilenglicol durante 1 hora, se desmanchó en 85 por ciento de propilenglicol durante 1 minuto, se enjuagó dos veces en agua destilada, se contramanchó en hematoxilina de Mayer durante algunos segundos, se enjuagó dos veces en agua destilada, y se montó en Cristalmount (Biomedia Corp., Foster City, CA) . El material anchable en Aceite Rojo 0 con una amplificación de 400 X se cuantificó usando el programa ImagePro plus (Media Cybernetics, Silver Spring, MD, EUA) junto con una cámara 3CCD (DAGE-MTI Inc., Michigan City, EUA). Ejemplo 2 Síntesis química y caracterización de los derivados de quinazolina El intermediario sintético común 4-cloro-6,7-dimetoxiquinazolina 5 usado para sintetizar todos los compuestos probados por los siguientes procedimientos de literatura (Esquema 1). El ácido 4, 5-dimetoxi-2-nitrobenzoico 1 se trató con cloruro de tionilo, y luego se hizo reaccionar con amoníaco para dar 4, 5-dimetoxi-2-nitrobenzamida 2 (Nomoto y colaboradores, 1990, Chem. Pharm. Bull 38:1591-1595). El grupo nitro en el compuesto 2 fue reducido con borohidrato de sodio en presencia de sulfato de cobre (31) para dar 4, 5-dimetoxi-2-aminobenzamida 3, el cual se cicló poniéndola en reflujo con ácido fórmico para dar 6, 7-dimetoxiquinazolina-4 (3H) -ona 4. La quinazolina 4 se puso en reflujo con oxitricloruro de fósforo para proporcionar el material inicial clave 5 con buen rendimiento.

El compuesto principal 4- (3'bromobenzoil) -6, -di etoxiquinazolina WHI-P164 se sintetizó haciendo reaccionar 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5 con el 3-bromobenzaldehído comercialmente disponible en presencia de yoduro de 1,3-dimetilimidazolio y el hidruro de sodio en reflujo de dioxano durante 4 horas (Esquema 2) (32, 33) . Los derivados restantes 6, 7-dimetoxiquinazolina se sintetizaron condensando 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5 con las anilinas correspondientemente constituidas como se muestra en el Esquema 3. Esquema 1. Síntesis de intermediario sintético común, 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina .

Esquema 2 . Síntesis de WHI-P164 WHI-P164 Esquema 3. Síntesis de HI-P97 WHI-P97 : 3'-Br, 4'-OH.5'-Br WH1-P111 : 3'-Br, 4'-CH 3 WHI-P131 : 4'-OH WH(-P132:2*-OH WHI-P154:3'-Br, 4'-OH WHI-P197:3'-C1,4'-0H Procedimientos sintéticos y datos de caracterización: Todos los productos químicos se compraron de Aldrich (Milwaukee, Wl) o Sigma (St. Louis, MO) y se usaron sin purificación adicional. Excepto donde se distinguió, cada recipiente de la reacción se aseguró con un hule séptico, y la reacción se realizó bajo atmósfera de nitrógeno. Se obtuvieron espectros de resonancia magnética nuclear H y U,C en un instrumento Varian Mercury 300 a temperatura ambiente en DMSO- e. Se determinaron- los puntos de fusión usando el aparato de punto de fusión Fisher-Johns y no se corrigieron. Los espectros FT-IR se registraron en un espectrómetro Nicolet Protege 460. Se obtuvo GC/MS en un Sistema HP 6890 GC equipado con un Detector Selectivo de Masa HP 5973. Se realizó TLC en una placa de gel de sílice de recubierta (Gel de Sílice KGF; Whit an Inc) . El gel de sílice (200-400 mesh, Whitman Inc.) se usó para toda la separación de cromatografía de columna. 4, 5-Dimetoxi-2-nitrobenzamida 2. Una suspensión de ácido 4, 5-dimetoxi-2-nitrobenzoico 1 (2 gramos; 8.8 mmol) en SOCl2 (10 mililitros) se agitó bajo reflujo durante 50 minutos. Después de enfriarse, la mezcla de la reacción se vertió en una mezcla de NH4OH concentrado (50 mililitros) y hielo (30 gramos) . El precipitado se recolectó por filtración, se lavó con agua, y se secó para dar 1.85 gramos de cristales crudos. Después de la recristalización a partir de DMF, se obtuvo 1.76 gramo de producto puro (88.5 por ciento). E NMR (DMSO-db) : d 7.60 (s, 2H, -NH2), 7.57 (s, 1H, 6-H) , 7.12 (s, 1H, 3-H) , 3.90, 3.87 (s, s, 6H; -OCH3) ; IR (KBr) vmax: 3454, 2840, 1670, 1512, 1274, 1227 cm"1; GC/MS m/z 226 (M+, 10.0), 178(98.5), 163 (100.0) , 135(51.0) . 6, 7-Dimetoxiquinazolina-4 (3H) -ona 4. Se añadió NaBH4 (400 miligramos) con agitación durante 4 horas a una solución de 4, 5-dimetoxi-2-nitrobenzamida 2 (1.58 gramos; 7 mirto1) en MeOH que contiene una cantidad catalítica de CuS04. La mezcla de la reacción se vertió en agua con hielo (200 mililitros) con agitación para dar 4, 5-dimetoxi-2-arr?inobenzamida 3 que se puso en reflujo directamente con HCOOH (20 mililitros) durante 5 horas. Después de la remoción del solvente, el residuo se recristalizó a partir de DMF para dar cristales puros 4 (1.18 gramos; 81.5 por ciento) p.f. 295.0-297.0°C; aH NMR (DMSO-d : 12.03(br, s, 1H, -NH) , 7.99(s, 1H, 26-H) , 7.42 (s, 1H, 5-H) , 7.11 (s, 1H, 8-H) , 3.88, 3.85 (s, s, 6H, -0CH3) ; IR (KBr) vmax : 3015, 2840, 1648, 1504, 1261, 1070 cm"1; GC/MS m/z 206 (M+, 100), 191(M+ _CH3, 31.5), 1 63 (1 6. 7) , 120 (15. 2) . ' 4-Cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5. Una suspensión de 6, 7-dimetoxiquinazolina-4 (3H) -ona 4 (12.36 gramos, 60 mmol) en POCI3 (250 mililitros) se calentó bajo reflejo durante 4 horas, cuando se obtuvo una solución clara. La POCI3 se removió bajo presión reducida, y el residuo se disolvió en una mezcla de CHC1 y Na2C03 acuosa. La capa orgánica se secó y el solvente se removió para dar 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5 (11.2 gramos, 83 por ciento); p.f. 259.0-263.0°C; JH NMR (DMSO-d ) : d 8.75(s, 1H, 2-H) , 7.53(s, 1H, 5-H) , 7.25(s, 1H, 8H) , 3.91(s, 3H, -OCH3) , 3.89 (s, 3H, -0CH3) / IR (KBr) vmax: 2963, 2834, 1880, 1612, 1555, 1503, 1339, 1153, 962 cm"1. GC/MS m/z 224 (M+, 100), 209(M+ _CH3, 9.4), 189(19.39), 69(10.55). 4- (3' -Bromobenzoil) -6, 7-dimetoxiquinazolina HI-P164.

Hidruro de sodio (108 miligramos; 4.5 mmol) se añadió a una solución agitada de 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5 (896 miligramos; 4 mmol), 3-bromobenzaldehido (832 miligramos; 4.5 mmol) y yoduro de 1, 3-dimetilimidazolio (336 miligramos; 1.5 mmol) en dioxano (30 mililitros) y la mezcla se puso en reflujo durante 4 horas. La mezcla de la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua con hielo, y el precipitado se recolectó. La producción fue de 81.2 por ciento (1.05 gramo). p.f. 258.0-263.0°C; lE NMR (DMSO-d6) : d 9.25(s, 1H, 2-H) , 8.14 (s, 1H, 5-H) , 7.92-7.43 (m, 4H, 2', 4', 5', 6'-H) , 7.40 (s, 1H, 8H) , 4.11 (s, 3H, -OCH3) , 4.00 (s, 3H, -0CH3) ; IR(KBr) v^: 3432, 1664, 1504, 1431, 1230 cm"1. GC/MS m/z 374 (M+ +1, 48.96), 373 (M\ 34.93), 372 (M+-l, 47.67) , 357(58.74), 343(100.00), 293(M+-Br, 31.48), 189(26.27). Los procedimientos generales para los compuestos sintetizados de acuerdo con el Esquema 3. Una mezcla de 4-cloro-6, 7-dimetoxiquinazolina 5 (448 miligramos; 2 mmol) y la anilina sustituida adecuadamente (2.5 mmol") en 20 mililitros de alcohol (EtOH o MeOH) se calentó a reflujo. El calentamiento continuó durante 4-24 horas, se añadió suficiente Et3N para neutralizar la solución, y el solvente se concentró para dar un producto crudo, el cual se recristalizó a partir de DMF. 4- (3' , 5' -Dibromo-4' -hidroxi1fenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina HI-P97: producción: 72.80 por ciento; p.f. >300.0°C; 2H NMR(DMSO-d6) : d 9.71(s, 1H, -NH) , 9.39(s, 1H, -OH), 8.48(s, 1H, 2-H) , 8.07(s, 2H, 2',6'-H), 7.76(s, 1H, 5-H) , 7.17 (s, 1H, 8-H) , 3.94 (s, 3H, -OCH3) , 3.91 (s, 3H, -OCH3) ; IR (KBr) v^.: 3054 (br) , 3419, 2868, 1627, 1512, 1425, 1250, 1155 cm-1. GC/MS m/z 456(M+ +1. 54.40), 455(M+, 100.00), 454 (M+-l, 78.01), 439(M+-OH, 7.96), 376(M*+1 - Br, 9.76), 375 (M*- Br, 10.91) , 360(5.23) . 4- (3' -Bromo-4' -metilfenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina HI-P111. Producción: 82.22 por ciento; p.f. 225.0-228°C. 'H NMR (DMSO-dD) : d 10.23(s, 1H, -NH) , 8.62(s, 1H, 2-H), 8.06(d, 1H, J _.,5.=2.1 Hz, 2'-H), 7.89(5, 1H, 5-H) , 7.71 (dd, 1H, J 5'.6'= 8.7 Hz, J -,6—2.1 Hz,,6'-H), 7.37(d, 1H, J 5'6'=8.7 Hz, 5'-H), 7.21 (s, 1H, 8-H) , 3.96(s, 3H, -OCH3) , 3.93 (s, 3H, -0CH3) . IR (KBr) vm...: 3431, 3248, 2835, 1633, 1517, 1441, 1281, 1155 cm"1. GC/MS m/z 375 (M+ +1, 76.76), 374 (M+, 100.00), 373 (M+ -1, 76.91), 358 (M* +1-OH, 11.15), 357(1.42), 356(6.31). 4- (4' -Hidroxilfenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina WHI-P131. Producción: 84.29 por ciento; p.f. 245.0-248.0°C. aH NMR (DMSO-de) : d 11.21(s, 1H, -NH) , 9.70(s, 1H, -OH), 8.74(s, 1H, 2-H) , 8.22 (s, 1H, 5-H) , 7.40 (d, 2H, J =8.9 Hz, 2'6'-H), 7.29(s, 1H, 8-H) , 6.85(d, 2H, j = 8.9 Hz, 3',5'-H), 3.98(s, 3H, -OCH3) , 3.97 (s, 3H, -OCH3) - IR (KBr) vmax : 3428, 2836, 1635, 1516, 1443, 1324, cm"1. GC/MS m/z 298 (M+ +1,100.00), 297 (M+, 26.56), 296(M+ -1, 12.46). 4- (2' -Hidroxilfenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina WHI-P132. Producción: 82.49 por ciento; p.f. 255.0-258.0°C. JH NMR (DMSO-de) : d 9.78 (s, 1H, -NH) , 9.29 (s, 1H, -OH), 8.33 (s, 1H, 2-H) , 7.85 (s, 1H, 5-H) , 7.41-6.83(m, 4H, 3' , 4' , 5' , 6' -H) , 7.16 (s, 1H, 8-H) , 3.93 (s, 3H, -OCH3) , 3.92 (s, 3H, -OCH3) ; IR (KBr) v^: 3500 (br) , 3425, 2833, 1625, 1512, 1456, 1251, 1068 cm"1. GC/MS m/z 298 (M+ +1,8.91), 297 (M+, 56.64), 281 (M+ +1-OH,23.47), 280(M+-OH, 100.00). 4- (3' -Bromo-4' -hidroxilfenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina HI-P154. Producción: 89.90 por ciento; p.f. 233.0-233.5°C; ? NMR (DMSO-de) : d 10.08 (s, 1H, -NH) , 9.38(s, 1H,-0H), 8.40(s, 1H, 2-H) , 7 , 2' -H) , 7.75(s, 1H, 5-H) , 7.55(dd, 1H, Hz, , 6'-H), 7.14 (s, 1H, 8-H) , 6.97 (d, '-H), 3.92 (s, 3H,-OCHER), 3.90 (s, 3H, -OCH3) ; IR(KBr)vmax: 3431 (br) , 2841, 1624, 1498, 1423, 1244 cm"1; GC/MS m/z 378 (M+ +2, 90.68) , 377 (M+ +1,37.49), 376 (M+, 100.00) , 360(M+3.63), 298 (18.86) , 282 (6.65) . 4- (3' -Cloro-4' -hidroxilfenil) -amino-6, 7-dimetoxiquinazolina HI-P197. Producción: 84.14 por ciento; p.f. 245.0°C(dec) ; lK NMR (DMSO-d6) : d 10.00 (s, 1H, -NH) , 9.37(s, 1H,-0H), 8.41(s, 1H, 2-H) , 7.78(s, 1H, 5-H) , 7.49(d, 1H, J2',5'=2.7 Hz, 2'-H), 7.55 (dd, 1H, ^,,^=9.0, Hz, Jb',«,'=2.7 Hz,, 6'-H), 7.16(s, 1H, 8-H) , 6.97(d, 1H, Hz, 5'-H), 3.93 (s, 3H, -OCH3), 3.91 (s, 3H, -OCH3) ; IR(KBr)vmax: 3448, 2842, 1623, 1506, 1423, 1241 cm"1; GC/MS m/z 341 (M\ 100.0), 326 (M+-CH3, 98.50), 310(M+-OCH5, 12.5), 295(9.0), 189(13.5), 155(13.8). Ejemplo 3 Efectos de HI-P164 para bajar lípidos en ratones C57B1/6 hipercolesterolémicos. Se usó una dieta alta en colesterol y alta en grasas para inducir la hipercolesterolemia en ratones C57B1/6, usando los métodos descritos por Paigen, y colaboradores, (Nishina, y colaboradores, 1993, J. Lipid Res. 34:1413-1422) y como se describió para el Ejemplo 1. Después de dos semanas, estos ratones exhibieron una hipercolesterolemia estable con niveles totales de suero 4 veces más altos que los ratones de control en dieta para roedor regular (451.4 ± 14.8, n=69 versus 117.8 ± 4.8, n=22, p<0.0001). Los ratones hipercolesterolémicos tratados con WHI-P164 durante una semana a 1.6 miligramo/kilogramo/día de nivel de dosis exhibieron una reducción del 23 por ciento en los niveles de colesterol total en suero (348.6 ± 27.6 mg/dL, n=9 versus 451.4 ± 14.8 mg/dL, n=69, p=0.02) . Como se muestra por sus perfiles de lipoproteína en suero (Figura 1), los ratones C57B1/6 hipercolesterolémicos preferencialmente acumularon VLDL rico en colesterol (171 ± 19 mg/dL, n=4 versus 7 ± 4 mg/dL, n=3, p=0.0008) pero no hubo cambio en los niveles de colesterol HDL (90 ± 9 mg/dL, n=4 versus 86 ± 13 mg/dL, n=3, p=0.8) (Tabla 2). El tratamiento con WHI-P164 causó una reducción impresionante de colesterol de lipoproteína de muy baja densidad (Figura 1) . En los ratones tratados con WHI-P164, el colesterol de lipoproteína de muy baja densidad en suero disminuyó inmediatamente de 171 ± 19 mg/dL, (n=4) , a 99 ± 13 mg/dL, (n=4) al nivel de dosis de 1.6 miligramo/kilogramo/día (P=0.02) y disminuyó más a 78 ± 15 mg/dL (n=4) en el - nivel de dosis de 16 miligramos/kilogramos/día (p=0.01) (Tabla 1). La dosis efectiva calculada (ED5o) de WHI-P164 fue de 0.4 miligramo/kilogramo/dia con un nivel de colesterol de lipoproteína de muy baja densidad en suero mínimo de 94 ± 9 mg/dL. De este modo, el WHI-P164 solamente fue capaz de reducir el colesterol de lipoproteína de muy baja densidad en 45 por ciento. El tratamiento de WHI-P164 no afectó significativamente los niveles de HDL-C en suero (Figura 1 y Tabla 1), aunque hubo una tendencia para disminuir HDL-C con niveles de dosis de WHI-P164 crecientes. Tabla 1. Reducción de colesterol de lipoproteína de muy baja densidad mediante HI-P164 El VLDL-C y HDL-C en plasma se calcularon basándose en los perfiles de lipoproteína. Se compararon los grupos tratados y no tratados mediante la prueba t de Student. *Los valores P se refieren a las diferencias entre los ratones tratados con vehículo y los ratones tratados con WHI-P164. **P=0.01 para la diferencia de niveles de colesterol de lipoproteína de muy baja densidad de apo e_ " vía la comida para roedor contra la dieta western (1296±118 mg/dL versus 516±158 mg/dL. El tratamiento con WHI-P164 a los niveles de dosis indicadas, las cuales fueron mucho menores que la dosis no tóxica más alta de 2 kilogramos/kilogramo, no se asoció con ningún signo obvio clínico o de laboratorio de toxicidad. En particular, las enzimas del hígado (ALT, ALP, LDH) y BUN/Creatinina siguieron dentro de los límites normales (Tabla 2) . El examen histopatológico de los tejidos no reveló ninguna lesión tóxica relacionada con el fármaco. Tabla 2 Química sanguínea de ratones C57B1/6 tratados 1 semana 2 semanas Cambio de -0.26 ± 0.87 + ,"1.88 ± 3.07 ± peso neto 0.22 0.33 0.42 (n=5) 0.50 (g) (n=17) (n=10) (n=10) ALT (IU/L) 148 ± 54 177 ± 19 (n=5) (n=10) ALP(IU/L) 101 ± 3 110 ± 9 94 ± 10 132 ± 6 (n=5) (n=5) (n=5) (n=10) LDL- (IU/L) 1402 ± 144 1533 ± 189 459 ± 83 426 ± 42 (n=5) (n=5) (n=5) (n=9) BUN (mg/dL) 25.4 ± 2.0 27.6 ± 2.0 (n=5) (n=5) Glucosa 201 ± 18 144 ± 9 (mg/dL) (n=25) (n=24) Ejemplo 4 Efectos de HI-P164 para bajar lípidos en ratones hipercolesterolémicos con deficiencia Apo E La ApoE, un componente del VLDL hepático y del quilomicrón intestinal, controla el catabolismo de estas partículas sirviendo como un ligando para el receptor LDL y el receptor parecido a LDL. La mutación apo e~'~ funcionalmente defectuosa se asocia con la dislipoproteinemia tipo III, una condición imitada por los ratones apo e 1' ' . Ya que los ratones apo e '~ exhibieron hipercslesterolemia aún en ausencia de suplementación de colesterol dietético debido a eliminación retardada de las partículas de VLDL hepáticas, se analizó el WHI-P164 para determinar su capacidad para reducir el VLDL-C. En alimento para roedores regular, el nivel de colesterol total en suero de los ratones apo é~f~ fue de 836 ± 57 mg/dL (n=47) . Después de una semana con terapia con 8 miligramos/kilogramo/día WHI-P164 (n=12) , se redujo el nivel de colesterol total en suero medio a 551 ± 29 mg/dL (p=0.02). aún en ausencia de estímulo de colesterol dietético, estos ratones apo e~'~ exhibieron un VLDL-C (516 ± 158 mg/dL, n=4 versus 7 ± 4 mg/dL, n=3, p=0.04) y niveles de HDL-C más bajos que los ratones C57B1/6 apo e 'x en comida para roedores (21 ± 3 mg/dL, n=4 versus 86 ± 13 mg/dL, n=3, p=0.0024) (Tabla 1). Después de una semana de terapia con 8 miligramos/kilogramo/día de WHI-P164 se disminuyó el VLDL-C de 516 ± 158 mg/dL, n=4, a 190 ± 13 mg/dL, n=8, p=0.01 y HDL-C aumentó ligeramente de 21 ± 3 mg/dL, n=4, hasta 50 ± 10 mg/dL (Tabla 1, Figura 2) . Cuando se estimularon con una dieta rica en colesterol, estos animales desarrollaron franca hipercolesterolemia debido a la eliminación retardada de los quilomicrones intestinales los cuales cambian el colesterol dietético del intestino al higado. En el presente estudio, todos los 46 ratones con deficiencia de ApoE que fueron alimentados con dieta Western (14) se volvieron severamente hipercolesterolémicos con un nivel de colesterol total medio en suero de 1491 ± 59 mg/dL. Una terapia de una semana con WHI-P164 redujo el nivel de colesterol total en suero medio de los ratones hipercolesterolémicos apo é -/- 1194 84 mg/dL (p=0.006) a un nivel de dosis de 8 miligramos/kilogramo/día (n=19) y a 876 ± 57 mg/dL (p<0.0001) a un nivel de dosis de 40 miligramos/kilogramo/día (n=17) (Tabla 3) . Como se muestra en la Tabla 1, el estímulo de colesterol en la dieta aumentó los niveles de VLDL-C de 516 ± 158 mg/dL, (n=3) hasta 1296 ± 118 mg/dL (n=3) , p=0.01. Después de una semana de terapia con 40 miligramos/kilogramo/día WHI-P164, disminuyó el VLDL-C de 1296 ± 118 mg/dL, n=3, hasta 587 ± 4 mg/dL, n=2, p=0.02 y HDL-C aumentó ligeramente de 50 ± 9 mg/dL, n=3, hasta 90 ± 4 mg/dL, n=2, p=0.04 (Tabla 1, Figura 3). En contraste con WHI-P164, otros derivados de dimetoxiquinazolina no exhibieron actividad que baja el colesterol en ratones CTUB1/6 o apo e_ " (Tabla 4) . Tabla 3. Evaluación de la función de la estructura de HI-P164 y otros derivados de dimetoxiquinazolina Compuestos apo e~'~ (C57B1/6) b apo e+ + (C57B1/6) N Colesterol N Colesterol La terapia con WHI-P164, ya sea a 8 miligramos/kilogramo/día o 40 miligramos/kilogramo/día, no se asoció con signos clínicos o de laboratorio obvios de toxicidad. En particular, los niveles de CPK de las enzimas del hígado 8ALT, AST, ALP, LDH) , y la BUN/Creatinina siguieron en límites normales. El examen histopatológico de los tejidos no reveló ninguna lesión tóxica relacionada con el fármaco. Ejemplo 5 Efectos del HI-P164 sobre la síntesis de trislicéridos (TG) Los ratones apo e '~ acumularon-grandes cantidades de gotas de lípidos ricos en triglicéridos en sus huesos, debido a una secreción bloqueada de VLDL-TG (Kuipers y colaboradores, 1997, J. Clin. Invest. 100:2915-2922). El tratamiento con 40 miligramos/kilogramo/día de WHI-P164 durante una semana redujo significativamente el material lípido manchable con Aceite Rojo O en los hígados de los ratones con deficiencia de Apo E que fueron alimentados con una dieta Western (Figuras 4A-4D) . El análisis de la imagen demostró una reducción del 75 por ciento de material lípido en los ratones tratados (658 ± 256 pixeles rojos/campo, n=ll versus 2590 ± 401 pixeles rojos/campo, n=12; p=0.0007). Cuando los lípidos del tejido se midieron, había una reducción del 22 por ciento en el colesterol hepático 39 por ciento de reducción en triglicéridos hepáticos. Como se muestra en la Tabla 4, la reducción en .acumulación de triglicéridos hepáticos no se debió al agotamiento de precursores para la acumulación de triglicéridps hepáticos, a saber plasma libre de ácidos grasos (FFA) y triglicérido.

Tabla 4 Análisis de lípidos del tejido Ejemplo 6 Regresión de lesiones ateroscleróticas pre-existentes Se examinó la efectividad del WHI-P164 contra las lesiones ateroscleróticas pre-existentes en ratones apo é~'~ que tuvieron 7 meses dieta Western alta en grasas. Los ratones apo -/- fueron tratados ya sea con control vehículo o con WHI-P164 a 40 miligramos/kilogramo/día durante un mes. Como se muestra en la Figura 6A, antes del tratamiento, las vetas de grasa manchables por Sudan IV cubrieron 40 ± 5 por ciento (n=3) de la superficie aórtica de estos ratones. El tratamiento con WHI-P164 causó una regresión marcada de las lesiones ateroscleróticas con vetas de grasa cubriendo solamente 23 ± 2 por ciento (n=7) de la superficie aórtica (Figura 6B) , en comparación con 40 ± 5 por ciento en ratones no tratados (n=3) (Figura 6A) (p=0.002) y 40 ± 5 por ciento en los ratones tratados con vehículo (n=8) (Figura 6C) (p=0.007).

Ejemplo 7 Efecto de HI-P164 en la determinación de la síntesis de lipoproteínas del hígado en la producción de VLDL-TG hepático en vivo usando Tritón WR1339 Para determinar si el WHI-P164 evita la acumulación de triglicéridos hepáticos liberando 9 bloques en la secreción de VLDL-TG o inhibiendo la síntesis de triglicéridos corriente arriba, se analizó la síntesis de VLDL-TG hepático en vivo. La síntesis se determinó siguiendo la acumulación del VLDL-TG después _ de interrumpir el catabolismo de VLDL con Tritón WR1339 en inyección y con la síntesis de quilomicrón intestinal con un ayuno de 36 horas . Ratones C57B1/6 y con deficiencia de apoE fueron tratados con inyecciones intraperitoneales de vehículo o 40 miligramos/kilogramo de WHI-P164 (en 50 microlitros de vehículo) durante 7 días consecutivos, seguidos por un ayuno de 36 horas para interrumpir la síntesis de quilomicrón intestinal. Posteriormente, los ratones fueron inyectados intraperitonealmente (i.p.) con 500 miligramos/kilogramo de Tritón WR1339 (Sigma Chemical Co.) en 0.9 por ciento de NaCl para inhibir completamente su eliminación de VLDL en plasma, como previamente se reportó (Kuipers y colaboradores, 1996, Heptology 24:241-247). Se tomaron muestras de sangre (50 microlitros) a las 0 y 4 horas después de la inyección de Tritón WR1339 y se midieron los triglicéridos del plasma enzimáticamente usando un juego enzimático comercialmente disponible (Sigma Chemical Co.), como se reportó previamente (Kuipers, supra) . Ratones apo e '~ tratados con WHI-P164 exhibieron significativamente menos acumulación de VLDL-TG que los ratones de control tratados con vehiculo después del tratamiento con Tritón WR1339 (p=0.0002), aunque exhibieron niveles similares de triglicéridos en suero antes de Tritón WR1339 (Tabla 5) . Ratones C57B1/6 tratados con WHI-P164 también exhibieron significativamente menos acumulación de VLDL-TG que los ratones de control tratados con vehículo (p=0.0003), aunque exhibieron niveles similares de triglicéridos en suero antes de Tritón WR1339 (Tabla 5) . Los datos apoyan la hipótesis de que el WHI-P164 inhibió la síntesis de triglicéridos, evitando mediante esto la acumulación hepática de triglicéridos en los ratones apo é~'~ . Tabla 5 Inhibición de la síntesis de VLDL-TG hepático mediante WHI-P164 Triglicérido (mg/dL) Pre-Triton WR1339 Post-Triton WR1339 apo e~' (C57B1/6) Vehículo 110±12 (n=8) 744±37 (n=14) WHI-P164 155±14 (n=10) 465±46 (n=8)* apo e+/+ (C57B1/6) Vehículo 143±6 (n=5) 1354±44 (n=12) WHI-P164 124±12 (n=5) 1031±95 (n=8)** El VLDL-TG hepático se determinó como la acumulación de triglicéridos después de la inyección de Tritón WR1339, el cual interrumpió el catabolismo de VLDL, y 36 horas de ayuno lo cual interrumpió la síntesis de quilomicrón intestinal. Se usó la prueba de Student t para comparar el grupo tratado con WHI-P164 contra el grupo tratado con vehículo. *P=0.0002 **p=0.003 La disminución en la síntesis de triglicérido no fue específico al hígado, ya que el quilomicrón-TG intestinal también fue inhibido por terapia con WHI-P164. Cuando los ratones con 36 horas de ayuno se alimentaron de nuevo, inmediatamente consumieron los alimentos y exhibieron una acumulación dependiente del tiempo de triglicérido en plasma, debido a la síntesis de triglicérido quilomicrón intestinal. La acumulación postprandial fue inhibida mediante terapia con WHI-P164 (Figura 5) . La inhibición alcanzó la significancia estadística a las 6 horas en los ratones tratados con vehículo que tenían un nivel de triglicérido en plasma de 272 ± 25 mg/dL, n=5, en comparación con un nivel de triglicérido en plasma de 155 ± 32 mg/dL, n=5, p=0.004 en ratones tratados con WHI-P164. La presente invención no deberá considerarse limitada a los ejemplos particulares descritos anteriormente, sino deberá entenderse que cubre todos los aspectos de la invención como se presentan en las reivindicaciones anexas. Varias modificaciones, procesos equivalentes, así como numerosas estructuras a las cuales la presente invención se puede aplicar serán fácilmente aparentes para los expertos en la técnica a quienes la presente invención se dirige después de la consideración de la especificación presente. Todas las publicaciones y solicitudes de patentes en esta especificación son indicadores del nivel de experiencia ordinaria en la técnica a la cual se refiere esta invención. Todas las publicaciones y solicitudes de patente se incorporan en la presente mediante referencia al mismo grado que si dada publicación individual o solicitud de patente individual se indicara específicamente e individualmente mediante referencia.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Un compuesto que comprende la fórmula: en donde X comprende una cadena recta o ramificada o alquilo cíclico, o una estructura de anillo aromático, y en donde cada una de Ri - R5 se seleccionan independientemente entre H, OH, NH2, SH, alquilo, alcoxi, y aciloxi. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde la cadena recta o ramificada o el alquilo cíclico, o una estructura de anillo aromático incluye una o más sustituciones seleccionadas de halo, OH, NH;, SH, alquilo, alcoxi, y aciloxi. 3. El compuesto de la reivindicación 1 que comprende la fórmula: en donde cada una de Ri - R; independientemente comprende H, OH, alcoxi, aciloxi, SH, NH; o halo. 4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es 4- (3' -bromobenzoíl) 6, 7-dimetoxi quinazolina (WHI-P164) . 5. Una composición que comprende el compuesto de la reivindicación 1 y un vehículo. 6. La composición de la reivindicación 5, que comprende 4- (3' -bromobenzoil) 6, 7-dimetoxi quinazolina (WHI-P164) . 7. Un método para reducir el colesterol en la sangre en un sujeto que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva para bajar el colesterol del compuesto de la reivindicación 1. 8. El método de la reivindicación 7, en donde el compuesto de la reivindicación 1 es 4- (3' -bromobenzoil) 6, 7-dimetoxi quinazolina (WHI-P164) . 9. El método de la reivindicación 7, en donde el compuesto se coadministra con un inhibidor de HMG CoA reductasa. 10. El método de la reivindicación 7, en donde el compuesto se administra a una dosis diaria de desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 500 microgramos/día. 11. Un suplemento dietético que comprende el compuesto de la reivindicación 1. 12. Una composición que baja el colesterol que comprende una cantidad efectiva que baja el colesterol del compuesto de la reivindicación 1.