MXPA00005834A - Modificacion de polisacaridos por medio de una enzima de oxidacion del fenol - Google Patents

Abstract

La presente invención con un proceso para la oxidación de un grupo hidroxi de 1átomo de carbono y/o 2átomos de carbono y/o 3átomos de carbono y/o 4átomos de carbono y/o 5átomos de carbono y/o 6átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o polisacárido que comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol y un agente mejorador, con esto se crea un oligo- o un polisacárido con características alteradas comparados con el oligo- o polisacárido natur

Description

MODIFICACIÓN DE POLISCARI DOS POR MEDIO DE UNA ENZIMA DE OXIDACIÓN DEL FENOL CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un proceso para la oxidación enzimática de oligo- o polisacáridos solubles así como también insolubles tales como una fécula o almidón y celulosa en donde el oligo- o polisacárido se oxida introduciendo grupos carbonilo y/o grupos carboxilato que dan productos con propiedades funcionales mejoradas.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La oxidación de polisacáridos por varios químicos son conocidos en la técnica: La oxidación de celulosa, por ejemplo, causa cambios en la estructura y cristalinidad de la molécula resultante, la cual afecta sus propiedades químicas y físicas. Varma y Chavan [Varma, A. J . , and Chavan, V.B. (1995), Degradation and Stability, 49, pp 245-250] encontró una proporcionalidad entre la REF.: 120726 disminución en grado de la cristalinidad y el incremento en grado de oxidación. Además, Varma y Chavan a partir de la celulosa crean 2 , 3-dicarboxi celulosa de sodio oxidando la celulosa a 2,3-dialdehído celulosa por oxidación con peryodato seguido por oxidación de la 2 , 3-di-aldehído celulosa a 2 , 3-di-dicarboxi celulosa por clorito de sodio. Se encontró el 98% de 2 , 3-dicarboxi celulosa de sodio por ser soluble en agua. Además, los poliglucósidos oxidados tienen propiedades interesantes como secuestradores de calcio y son útiles como substitutos de tripolifosfato en la formulación de detergente [Santacesaria, E., Trulli, F., Brussani, G.F., Gelosa, D., y Di Serio, M. (1994), Carbohydrate Polymers, 23, pp 35-46] . Además, varias clases de polisacáridos, en particular la fécula, son de máxima importancia como un agente de dimensionamiento en la industria textil, además de la aplicación como un adyuvante del procesamiento en la impresión o terminado. Sin embargo, las propiedades de la fécula natural no siempre son óptimas comparadas con las propiedades requeridas para la aplicación particular. Uno de los problemas de la fécula natural es el tamaño molecular muy grande, la insolubilidad, la inestabilidad de soluciones viscosas bajo temperatura variante, y su susceptibilidad a la degradación microbiana. En consecuencia, la modificación química de féculas ha llegado a ser una herramienta importante para superar los problemas y crear féculas que tienen características alteradas comparado con la fécula natural. Como tratamientos se involucran el tratamiento ácido, oxidación, eterificación, esterificación, injerción, y preparación de composiciones de poli (vinilo) -fécula [Abdel-Hafiz , S.A. (1997). Polymer Degradation and Stability, 55, pp 9-16] . Además, Hebeish et al. [Hebeish. A., El-Kashouti, M.A., Abdel-Thalouth, I., Haggag, K., and El-Halwagi, A. (1994), Cellulose Chemistry and Technology, 28, pp 409-418] han mostrado, que el grado de substitución cuando se produce Carboxi Metil Celulosa (CMC) depende del grado de oxidación del material de base de celulosa, y varias cualidades de CMC se pueden producir así usando celulosa con grados variantes de oxidación. Por consiguiente existe un incremento interesante en y necesidad por métodos capaces de introducir cambios de oxidación de varias clases en oligo- y polisacáridos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un proceso para la oxidación de un grupo hidroxi de 1 átomo de carbono y/o 2 átomos de carbono y/o 3 átomos de carbono y/o 4 átomos de carbono y/o 5 átomos de carbono y/o 6 átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o un polisacárido que comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol, conjuntamente con una fuente de peróxido de hidrógeno cuando la enzima de oxidación del fenol es una peroxidasa, y un agente mejorador, por lo que se crea un oligo- o un polisacárido con características alteradas comparado con el oligo- o polisacárido natural .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La presente invención se ilustra adicionalmente con referencia a los dibujos anexos, en los cuales : La Figura 1 ilustra un modelo idealizado para la oxidación progresiva de la celulosa de algodón.

La Figura 2 muestra el espectro FT-IR/PAS de algodón blanco sin tratar así como también algodón blanco tratado con Tempo/lacasa que cubre el rango de 1800-1500 cm" como se describe en el Ejemplo 1.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Es el propósito de la presente invención crear una modificación de oxidación enzimática de oligo- o polisacáridos por lo cual se producen nuevos grupos funcionales. Por consiguiente, se ha creado un proceso para la oxidación de un grupo hidroxi de 1 átomo de carbono y/o 2 átomos de carbono y/o 3 átomos de carbono y/o 4 átomos de carbono y/o 5 átomos de carbono y/o 6 átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o un polisacárido que comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol, conjuntamente con una fuente de peróxido de hidrógeno cuando la enzima de oxidación del fenol es ' una peroxidasa, y un agente mejorador, por lo que se crea un oligo- o un polisacárido con características alteradas comparado con el oligo- o polisacárido natural . En particular, se ha creado un proceso para la oxidación de un grupo hidroxi de 2 átomos de carbono y/o 3 átomos de carbono y/o 6 átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o un polisacárido que comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol, conjuntamente con una fuente de peróxido de hidrógeno cuando la enzima de oxidación del fenol es una peroxidasa, y un agente mejorador, por lo que se crea un oligo- o polisacárido con características alteradas comparado con el oligo-o polisacárido natural. Especialmente, se ha creado un proceso para la oxidación de un grupo hidr'oxi de 6 átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o un polisacárido que comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol, conjuntamente con una fuente de peróxido de hidrógeno cuando la enzima de oxidación del fenol es una peroxidasa, y un agente mejorador, por lo que se crea un oligo- o polisacárido con caracterís icas alteradas comparado con el oligo-o polisacárido natural.

De acuerdo con la presente invención, un oligosacárido contiene al . menos 20 monómeros, preferiblemente al menos 50 monómeros, en particular al menos 100 monómeros. La oxidación de acuerdo con la invención puede resultar en la creación de grupos carbonilo (cetonas y aldehidos) y/o grupos carboxilato en el oligo- o polisacárido resultante en un oligo- o un polisacárido con características alteradas comparado con el oligo- o polisacárido natural. Un ejemplo de un modelo idealizado para la oxidación progresiva de celulosa de algodón, se ilustra en la Figura 1. Este modelo demuestra algunos de los tipos de cambios a la celulosa de algodón que debería ser esperado con la oxidación progresiva. El número de grupos carbonilo/grupos carboxilato formados se incrementará con la oxidación: A" ilustra la glucosa no modificada; "B" ilustra la formación de carbonilo de 6 átomos de carbono; w C" ilustra la formación de carbonilo de 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, y 6 átomos de carbono; D" ilustra la formación de carbonilo de 2 átomos de carbono y de 3 átomos de carbono, y la formación de carboxilato de 6 átomos de carbono; E" ilustra la formación de carbonilo de 2 átomos de carbono; la formación de carboxilato de 3 átomos de carbono y 6 átomos de carbono; y la abertura del anillo; w F" ilustra la escisión del polímero y posible pérdida de material; y " G" ilustra la exposición y oxidación del material nuevo. Normalmente, la oxidación de interés será la oxidación específica de 6 átomos de carbono (sin o sólo una oxidación limitada de los otros átomos de C) a carbonilo o carboxilato; y la oxidación enzimática descrita en la presente invención está adaptada particularmente para una oxidación específica y "delicada" . Las diferencias comparadas al oligo- o polisacárido natural, son el resultado de la oxidación como tal, pero las diferencias buscadas frecuentemente se lograrán por modificaciones adicionales de' los cambios introducidos en el oligo- o polisacárido por otros medios tales como modificaciones química y/o enzimáticamente.

Por ejemplo, nuevos oligo- o polisacáridos, derivados de, por ejemplo, celulosa o compuestos/mezclas de oligo- o polisacáridos presentes en forma natural y polímeros artificiales, se pueden preparar por la manufactura textil que tiene la carga de la superficie alterada, y/o capacidad del tinte alterada y/o especificidad alterada para el teñido, y/o que tiene nuevos grupos funcionales que hacen la unión o enlace covalente o no covalente y/o la posible adsorción de compuestos que por ellos mismos están conteniendo o portando otros grupos funcionales y así valiosos, haciendo el enlace reticulado de cadenas de polímeros posible para crear tela libre de agujas, tela de presión durable, tela con resistencia aumentada, tela repelente al agua, tela que retarda la flama, tela con suavidad durable incrementada, tela repelente a la suciedad, y/o con apariencia antiestática.

Métodos para el examen de oxidación del polisacárido Dos factores los cuales dan una indicación del grado de oxidación del algodón, son la formación de grupos funcionales tales como grupos carboxilo y carboxilato, y la pérdida de la resistencia de la tela debido a la escisión del polímero o rompimiento. Así, el análisis de oxidación se puede dar ya sea midiendo la resistencia al rompimiento de la tela, o midiendo los grupos funcionales introducidos. La prueba de resistencia al rompimiento de la tela, comúnmente involucra la medición de la fuerza requerida para propagar un rompimiento o desgarre en la tela, se puede usar para proporcionar una indicación de daño de la tela. Sin embargo, varias replicas se requieren para producir resultados razonables y variaciones grandes pueden ocurrir entre replicados debido a los defectos de la fibra [Cardamone, J. M., and Brown, P. (1986), Historie Textile and Paper, ch. 3., ACS. Washington], Cuando considerando las muestras relativamente similares, la variación entre los duplicados puede exceder la variación entre las muestras, haciendo difícil la comparación. También se debe considerar que el daño mecánico a la trama o tela durante el procesamiento contribuirá a una pérdida de resistencia de la trama o tela completa, así las mediciones de la resistencia al desgarre o rompimiento no solamente reflejan el daño oxidante .

La oxidación de la celulosa inicialmente resulta en la formación de grupo carbonilo, con oxidación adicional que resulta en la formación de ácidos carboxílicos o aniones de carboxilato dependiendo del pH . Los métodos de teñido para la determinación de grupos carbonilo y carboxilato se ha utilizado extensivamente para indicar la extensión de la oxidación en telas de algodón. La aplicación del reactivo de Tollen (Ag(NH3)2OH) para oxidar el algodón resulta en el teñido de nuevo de todos los grupos aldehidos debido a la precipitación del metal de plata [Skoog, D.A., West, D.M., and Holler, F.J. (1992), Fundamentáis of Analytical Chemistry, Ch. 20, Saunders College Publishers, Fl] . Otros agentes de teñido, tales como 2 , 4-dinitrofenilhidrazina, se pueden usar para identificar tanto cetonas como aldehidos . Las cantidades de cetona relativas se pueden determinar entonces por substracción. Las soluciones de azul de metileno se pueden usar para la identificación de grupos de carboxilato sobre telas de algodón vía el teñido que resulta de la adsorción de cationes de azul de metileno en los grupos carboxilato de celulosa [Lewin, M., and Sello, S.B. (Ed.) (1984), Chemical Processing of Fibres and Fabrics: Fundamentáis and Preparation, parte B, Marcel Dekker Inc. NY] . Mientras que los métodos de teñido son útiles para indicar las áreas de oxidación, los mismos no proporcionan medidas cuantitativas de oxidación sin la preparación de una serie estándar extensiva, y los métodos de teñido no pueden mostrar oxidaciones específicas. Los métodos de teñido son consumidores de mucho tiempo y tediosos, y se dificultan extremadamente para aplicar a telas teñidas que ya están coloreadas. La medición de grupos carbonilo y carboxilato formados, también se puede lograr por la aplicación de técnicas de espectroscopia vibracional tales como Espectroscopia Infrarroja Transformada con Fourier (por sus siglas en inglés, FTIR), FTIR de Reflectancia difusa (por sus siglas en inglés DRIFT), y FTIR/espectroscopia Fotoacústica (por sus siglas en inglés, (FTIR/PAS) . La banda de absorción infrarroja de mas grupos carbonilo sobre algodón-celulosa se observa en la región 1700 a 1750 cm" del espectro, mientras que las bandas de carboxilato de celulosa-algodón se observan típicamente en la región 1550 a 1600 cm" , facilitando así la medición de oxidación por análisis IR _[cardamone, J.M, Gould, J.M., and Gordon, S.H. (1987), Text. Res. J., 57(4), pp 235-239, Yang, C.Q., and Fateley, W.G. (1990), Appl. Spectrosc, 44, pp 1035-1041, Yang, C.Q. (1991), Appl. Spectrosc., 45(1), pp 102-108] . Cardamone y Brown [Cardamone, J.M., and Brown, P. (1986), Historie Textile and Paper, Ch . 3., ACS, Washington] comparan el algodón envejecido artificialmente y en forma natural midiendo el área integrada de la región 1540 a 1850 cm-1 del espectro FTIR/PAS, e ilustran las condiciones que mejor reproducen el proceso de envejecimiento naturalmente. Yang y varios colaboradores [Yang, C.Q., and Fateley, W.G. (1990), Appl. Spectrosc., 44, pp 1035-1041, Yang, C.Q. (1991), Appl. Spectrosc., 45(1), pp 102-108], también realizan estudios en la medición de la oxidación del algodón usando técnicas tales como DRIFTS, FTIS-PAS y Reflectancia' Total Atenuada. La comparación del material volumétrico, a partir de una muestra de algodón molido, y mediciones de la superficie realizadas por Yang y Fateley [Yang, C. Q., and Fateley, W.G. (1990), Appl. Spectrosc., 44, pp 1035-1041] usando FTIR/PAS ilustra que la oxidación de telas de algodón es típicamente una característica de la superficie y la evidencia de oxidación se reduce ampliamente, si no se remueve, cuando se estudia la muestra volumétrica.

Las cantidades relativas de grupos carbonilo y carboxilato se pueden usar como una indicación de la oxidación de celulosa y se pueden medir usando espectroscopia vibracional. El análisis de la superficie cercana de las telas de algodón usando las técnicas de espectroscopia vibracional tales como DRIFTS y PAS se han usado exitosamente para proporcionar una medida de oxidación de celulosa resultante del envejecimiento y tratamientos del procesamiento [Cardamone, J.M, Gould, J.M., and Gordon, S.H. 1987), Text . Res. J., 57(4), pp 235-239, Kokot, S., and Jermini, M., (1994), Text. Res. J., 64(2), pp 100-105, Yang, C.Q., and Fateley, W.G. (1990), Appl. Spectrosc., 44, pp 1035-1041]. Kokot y varios colaboradores [Kokot, S., and Jermini, M., (1994), Text. Res. J., 64(2), pp 100-105, Kokot, S., Marahusin, L., Schweinsberg, D.P., and Jermini, M., (1994), Text. Res. J., 4(12), pp 710-716] también aplican espectroscopia vibracional, en la forma de DRIFTS, para la medición de la oxidación del algodón. En este estudio, el espectro de una serie que padece procesos de blanqueado simulado se analizó usando métodos quimiométricos tales como Análisis del Componente Principal y Regresión de Cuadrados Al menos Parciales. Usando el número de ondas que varía de de 1750 cm-1 - 1700 cm-1 y 1575 cm-1 - 1550 crn-1, que se considera con la formación de grupos carbonilo y carboxilato, Kokot et al. separa gasa de algodón oxidado a diferentes grados entre sí así como también a partir de gasa de algodón natural. Este trabajo realza el significado de las regiones espectrales de carbonilo y carboxilato en la discriminación de algodón sujeto a niveles diferentes de oxidación así como también la necesidad para usar análisis multivariados (quimiométricos ) en el análisis de los datos espectrales. La comparación de tela desgastada y no desgastada por Yang y Fateley [Yang, C.Q., and Fateley, W.G. (1990), Appl. Spectrosc., 44, pp 1035-1041] realza las bandas de absorción en la tela desgastada a 1722 y 1704 cm"1. Estas bandas se atribuyeron a la absorción de carbonilo. Cardamone et al. [Cardamone, J.M, Gould, J.M., and Gordon, S.H. (1987), Text. Res. J., 57(4), pp 235-239] estudian textiles de algodón envejecidos naturalmente y artificialmente para comparar la extensión del daño oxidante que ocurre bajo ambientes diferentes.' Una medida de la extensión la oxidación se obtuvo en el área integrada del rango 1540 a 1850 cm-1 del espectro PA. Esta búsqueda demuestra la medición de un área de espectro seleccionada para proporcionar una indicación de la oxidación de celulosa. Kokot y Jermini [Kokot, S., and Jermini, M., (1994), Text. Res. J., 64(2), pp 100-105] utilizan DRIFTS para caracterizar las telas de algodón que se han dañado en forma oxidante usando tratamientos con el oxígeno electrogenerado . La aplicación de técnicas quimiométricas en este trabajo realza el significado de las regiones espectrales de carbonilo y carboxilato en la discriminación de algodón sometida a niveles diferentes de daño oxidante.

Polisacáridos Varias clases de carbohidratos que están presentes en forma natural basados en polímeros (oligosacáridos y polisacáridos) así como también polímeros artificialmente hechos (hechos por el hombre) en varias clases de monómeros de carbohidratos, así como también polisacáridos presentes en forma natural o artificialmente, químicamente modificados/derivados, así como también copolímeros que contienen unidades de carbohidratos pueden ser modificados oxidativamente por medio de una enzima de oxidación del fenol en combinación con un agente mejorador adecuado. Basado en este hallazgo, ahora es posible realizar la modificación química de oligo- o polisacáridos, tela, hilado, etc., que contienen fibras poliméricas solubles o insolubles, especialmente fibras celulósicas, por un proceso enzimático en el cual una enzima de oxidación del fenol tal como una peroxidasa o una lacasa, en combinación con un agente de mejoramiento, catalizan la introducción de nuevos grupos funcionales en el oligo- o polisacárido tal como grupos carbonilo y/o grupos carboxilato. Por consiguiente, la presente invención proporciona un proceso para la oxidación enzimática de un oligo- o polisacárido soluble o insoluble que contiene grupos hidroxi libres a grupos carbonilo o grupos carboxilato, en donde el oligo- o polisacárido soluble o insoluble se hace reaccionar con una enzima oxidante del fenol en combinación con un agente del mejoramiento capaz de catalizar la oxidación. La oxidación enzimática de conformidad con la invención es normalmente una oxidación "suave o ligera" que resulta en un oligo- o polisacárido con un número incrementado de grupos carbonilo y/o carboxilato, pero sin o pocas aberturas del anillo. Para más propósitos las aberturas del anillo y/o escisión del polímero son indeseables. Este oligo- o polisacárido enzimáticamente modificado es un buen material de partida para modificaciones adicionales a causa de que los grupos carbonilo y carboxilato son grupos reactivos comparados con grupos hidroxi. Por este medio, se pueden hacer textiles, fibras, hilados, etc. con propiedades mejoradas. Los ejemplos de tales propiedades son presión permanente, suavizante, liberación de la suciedad, carácter de repelente al agua y retardo de la flama. La presente invención proporciona un proceso por el cual, dependiendo de la elección de condiciones, (enzima, agente de mejoramiento, temperatura, pH, etc.) una o más de las propiedades deseadas se pueden obtener o mejorar en una forma no dañina al medio ambiente, fácil y económica. Las propiedades de desgaste de los oligo- y polisacáridos típicamente se lograrán por modificaciones adicionales, después de que la oxidación enzimáticamente de conformidad con la invención, por otros medios tales como modificaciones químicas y/o enzimáticas. En la presente especificación y reivindicaciones, el término "oligo- o polisacárido" se propone para significar un material polimérico basado en monómeros de azúcar que tienen grupos hidroxi capaces de ser oxidados a grupos carbonilo y/o grupos carboxilato. De particular interés son los oligosacáridos o polisacáridos basados en los siguientes azúcares (monómeros), ya sea como homopolímeros (polímeros basados en un monómero sencillo), o como heteropolí eros (polímeros basados en 2 o más monómeros diferentes) : Aldo tetroses y ketotetroses tales como eritrosa y eritrulosa; aldopentoses tales como arabinosa, ribosa, y xilosa; ketopen toses tales como ribulosa y xilulosa; aldohexoses tales como glucosa, galactosa y mañosa; hetohexoses tales como fructosa y sorbosa; y derivados de azúcar incluyendo desoxiazúcares tales como desoxirribosa, ramnosa y fucosa, aminoazúcares tales como glucosamina y carbohidra tos ácidos tales como ácido glucurónico, ácido galacturónico, ácido manurónico y ácido gulurónico. De particular interés adicional son los polímeros de carbohidrato que están presentes en forma natural (oligo- y polisacáridos) así como también sus productos de hidrólisis, tal como celulosa, semicelulosa, fécula, xilano, goma de xantano, goma guar, goma arábica, goma Karaya, goma de gelano, goma de algarroba, konjak, curdlan, kappa carrageno, alginatos, agar-agar, pectinas (metoxilo elevado, metoxilo inferior y pectinas amidadas y mezcla de estos), pectato, viscosa, hidroxipropil celulosa, quitina, esquizofilano, quitosano, heparina, dextrano, inulina, levano. De manera preferida, el material polisacárido sometido al proceso de la invención esta presente como una fibra, una fibra principal tal como una fibra que gira con el solvente, un filamento, un hilo, una hilaza, o una fibra textil que puede estar tejida, no tejida o tejida a puntos. En una modalidad preferida de la invención, el polisacárido es una fibra polimérica celulósica, es decir, que contiene derivados de celulosa o celulosa, preferiblemente preparada a partir de algodón, viscosa (rayón), liocélula, fibra de lino (lino), ramina, o cualquier mezcla de los mismos; y las mezclas de los mismos con poliésteres, lana, poliamidas' y (poli) acrílicos . Ejemplos típicos de tales mezclas son viseosa/algodón, viscosa/poliéster, liocélula/poliéster , liocélula/algodón, algodón/acrílico, algodón/poliéster, algodón/poliéster/acrílico, algodón/poliamida/poliéster . En todavía otra modalidad preferida de la invención, el polisacárido es un polisacárido sintético basado en monómeros de azúcar, o monómeros de azúcar químicamente derivados así como también copolímeros de monómeros de azúcar o polisacáridos y otros monómeros poliméricos o material polimérico.

Enzimas de Oxidación de Fenol Los ejemplos de enzimas de oxidación de fenol, es decir, enzimas que actúan sobre compuestos aromáticos, en particular compuestos fenólicos y/o polifenólicos, son peroxidasas (EC 1.11.1.7), lacasas (EC 1.10.3.2), oxidasas de bilirrubina (EC 1.3.3.5) monooxigenasas monofenólicas (EC 1.14.18.1) y oxidasas de catechol (EC 1.10.3.1).

Peroxidasas Las peroxidasas adecuadas, de acuerdo a la invención, pueden ser cualquier enzima de peroxidasa comprendida por la clasificación de enzima (EC 1.11.1.7), o cualquier fragmento derivado a partir de estas, exhibiendo la actividad de peroxidasa. De manera preferida, la peroxidasa empleada en el método de la invención es producible por plantas (por ejemplo peroxidasa de rábano picante o frijol de soya) o microorganismos tal como fungi o bacterias. Algunos fungi preferidos incluyen cepas pertenecientes a la subdivisión Deuteromycotina, clase Hyphomycetes , por ejemplo, Fusarium, Humicola, Tricoderma, Myrothecium, Verticillum, Arthromyees , Caldariomyces , Ulocladium, Embellisia, Cladosporium o Dreschlera, en particular Fusarium oxysporum (DSM 2672) , Humicola insolens , Trichoderma resii , Myrothecium verrucana (IFO 6113), Verticillum alboatrum, Verticillum dahlie , Arthromyces ramosus (FERM P-7754) , Caldariomyces ' fumago, Ulocladium chartarum, Embellisia alli o Dreschlera halodes . Otros fungi preferidos incluyen cepas pertenecientes a la subdivisión Basidiomycotina, clase Basidiomycetes , por ejemplo Coprinus , Phanerochaete, Coriolus o Trametes , en particular Coprinus cinereus . microsporus ( I FO 8371) , Coprinus macrorhizus , Phanerochaete chrysosporium (por ejemplo NA-12) o Trametes , por ejemplo T . Versicolor (por ejemplo PR4 28-A) .

Fungi adicionalmente preferidos incluyen cepas pertenecientes a la subdivisión Zygomycotina, clase Mycoraceae , por ejemplo Rhizopus o Mucor , en particular Mucor hiemalis . Algunas bacterias preferidas incluyen cepas del orden Actinomycetales , por ejemplo, Streptomyces spheroides (ATTC 23965), Streptomyces thermoviolaceus (IFO 12382) o Streptoverticillum verticillium ssp. verticillium. Otras bacterias preferidas incluyen Bacillus pumilus (ATCC 12905), Bacillus stearothermophilus , Rhodobacter sphaeroides , Rhodomonas palustri , i Streptococcus lactis, Pseudomonas purrocinia (ATCC 15958) o Pseudomonas fluorescens (NRRL B-ll) .

Bacterias adicionalmenté preferidas incluyen cepas pertenecientes a Myxococcus , por ejemplo, M. virescens . Particularmente, una peroxidasa producida recombinantemente es preferida, por ejemplo, una peroxidasa derivada a partir de una Coprinus sp. , en particular C . macrorhizus o C . cinereus de acuerdo a la WO 92/16634, o una variante de la misma, por ejemplo, una variante como se describe en la WO 94/12621.

Lacasas Enzimas de lacasa adecuadas son conocidas a partir del origen microbial o de planta. La enzima de lacasa microbial puede ser derivada a partir de bacterias o fungi (incluyendo fungi y levaduras filamentosos) y ejemplos adecuados incluyen una lacasa derivable a partir de una cepa de Aspergillus , Neurospora , por ejemplo, N . Crassa, Podospora, Botrytis , Collybia, Fomes , Lentinus , Pleurotus , Trametes , por ejemplo, T. Villosa y T. Versicolor, Rhizoctonia , por ejemplo, R . Solani , Coprinus , jpor ejemplo C . plicatilis y C^ cinereus , Psatyrella, Mycelioph hora , por ejemplo M . he mophila , Scytalidium, Polyporus , por ejemplo, P_;_ pinsitus , Phlebia, por ejemplo, P^ radita (WO 92/01046), o Coriolus , por ejemplo, C . hirsutus (JP 2-238885), en particular lacasas otenibles a partir de Trametes , Myceliophthora, Scytalidium o Polyporus .

Sistemas de Enzima de Oxidación del Fenol Si la enzima de oxidación del fenol requiere una fuente de peróxido de hidrógeno, la fuente puede ser peróxido de hidrógeno o un precursor de peróxido de hidrógeno para una producción in situ de peróxido de hidrógeno, por ejemplo, percarbonato o perborato, o un sistema de enzima de generación de peróxido de hidrógeno, por ejemplo una oxidasa y un substrato para la oxidasa, o una oxidasa de aminoácido y un aminoácido adecuado, o un ácido peroxicarboxílico o una sal del mismo. El peróxido de hidrógeno puede ser adicionado al inicio de o durante el proceso, por ejemplo en una concentración correspondiente a 0.001-25 M de H202. Si la enzima de oxidación del fenol requiere oxígeno molecular, el oxígeno molecular de la atmósfera estará usualmente presente en cantidad suficiente .

Agentes Mejoradores En general cualquier compuesto siendo substrato para una enzima de oxidación del fenol podría ser usado como un agente mejorador. Estos incluyen compuestos aromáticos que tienen grupos funcionales similares -OH, -NH, y -SH, además de compuestos heterocíclicos .

En' particular el agente mejorador usado en la presente invención puede ser descrito por la siguiente fórmula I : en la fórmula X representa (-O-) o (-S-) , y los grupos substituyentes R 1-R9 , los cuales pueden ser idénticos o diferentes, representan de manera independiente cualquiera de los radicales siguientes: hidrógeno, halógeno, hidroxi, formilo, carboxi, y esteres y sales de estos, cárbamoilo, sulfo, y esteres y sales de estos, sulfamoilo, nitro, amino, fenilo, alquilo de 1 a 14 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, carbonil-Ci-Cs-alquilo, aril-Ci-Cs-alquilo ; los grupos carbamoilo, sulfamoilo, y amino pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos una o dos veces con un grupo substituyente R10; y el fenilo puede adicionalmente estar no substituido o substituido con uno o más grupos subtituyentes R ; y los grupos alquilo de 1 a 14 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, carbonil-Ci-Cs-alquilo, y aril-Ci-C5-alquilo pueden estar saturados o insaturados, ramificados o no ramificados, y pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos con uno 0 más grupos substituyentes R10; El grupo substituyente R representa cualquiera de los radicales siguientes: halógeno, hidroxi, formilo, carboxi, y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, sulfamoilo, nitro, amino, fenilo, aminoalquilo, piperidino, piperazinilo, pirrolidino, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, los grupos carbamoilo, sulfamoilo, y amino pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos una o dos veces con hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono; y el fenilo puede adicionalmente estar substituido con uno o más de los siguientes radicales: halógeno, hidroxi, amino, formilo, carboxi y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, y sulfamoilo; y el alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, y los grupos alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, pueden estar adicionalmente no saturados o insaturados, ramificados o no ramificados, y pueden estar adicionalmente substituidos una o dos veces con cualquiera de los siguientes radicales: halógeno, hidroxi, amino, formilo, carboxi y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, y sulfamoilo; o en la fórmula general, dos de los grupos substituyentes R -R pueden formar juntos un grupo -B-, en el cual B representa cualquiera dé los grupos siguientes: ( -CHR10-N=N- ) , (-CH=CH-)n, (-CH=N-)n o (-N=CR °-NRp-) , en los grupos n representa un número entero desde 1 a 3, R es un grupo substituyente como se definió anteriormente y R11 es definido como t.10 En modalidades particulares, el agente mejorador es 10-metilfenotiaziná, ácido fenotiazin-10-propiónico , fenotiazin-10-propianato de N-hidroxi succinimida , ácido 10-etil-fenotiazin-4 -carboxílico, 10-etilfenotiazina , 10-propil-fenotiazina, 10-isopropilfenotiazina, fenotiazin-10-propionato de metilo, 10-fenil-fenotiazina, 10-alilfenotiazina, 10- (3- ( -metilpiperazín-1-il)propil) fenotiazina, 10- (2-pirrolidin-l-il-etil ) fenotiazina , 2-metoxi-l 0-metil-fenotiazina, 1-metoxi-10-metilfenotiazina, 3-metoxi-10-metilfenotiazina, 3 , 10-dimetilfenotiazina, 3,7,10-tri etilfenotiazina , 10- ( 2-hidroxietil ) fenotiazina, 10- (3-hidroxipropil ) fenotiazina, 3- ( 2-hidroxietil ) -10-metil-feno iazina, 3-hidroximetil-lO-metilfenotiazina , ácido 3 , 7-dibromofenotiazina-10-propiónico, fenotiazin-10 -propionamida, clorpromazina , 2-cloro-10-metilfenotiazina, 2-fenoxazina, ácido fenoxazina-10-propiónico, 10- (2-hisdroxi-etil ) fenoxazina o ácido 4 -carboxifenoxazin-10-propiónico . El agente mejorador también se puede describir por la siguiente fórmula II: en la fórmula, A es un grupo tal como -D, -CH=CH-D, -CH=CH-CH=CH-D, -CH=N-D, -N=N-D, o -N=CH-D, en los cuales D se selecciona a partir del grupo que consiste de -CO-E, -S02-E, -N-XY, y -N+-XYZ, en los cuales E pueden ser -H, -OH, -R, o -OR, y X y Y y Z pueden ser idénticos o diferentes y se seleccionan a partir de -H y -R; R siendo un alquilo de 1 a 16 átomos de carbono, de manera preferida un alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, el alquilo puede estar saturado o insaturado, ramificado o no ramificado y opcionalmente substituido con un grupo carboxi, sulfo o amino; y B y C pueden ser los mismos o diferentes y se seleccionan a partir de C-.H2m+?; 1 £ m £ 5. En una modalidad preferida A en la fórmula mencionada anteriormente es -CO-E, en la cual E puede ser -H, -OH, -R, o -OR; R siendo un alquilo de 1 a 16 átomos de carbono, de manera preferida un alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, el alquilo puede ser saturado o insaturado, ramificado o no ramificado y opcionalmente substituido con un grupo carboxi, sulfo o amino; y B y C pueden ser los mismos o diferentes y se seleccionan a partir de CmH2m+?; 1 £ m £ 5. En la fórmula mencionada anteriormente A puede estar colocado en la posición meta al grupo hidroxi en lugar de estar colocado en la posición para como se muestra. En las modalidades particulares, el agente mejorador es acetosiringona, metilsiringato, etilsiringato , propilsiringato, butilsiringato, hexilsiringato, u octilsiringato .

El agente mejorador también puede ser uno de los agentes mejoradores descritos en la WO 91/05839 tales como pHBS, pHBA, Vanilina, ácido Cumárico, o ácido Cinámico. El agente mejorador también puede ser uno de los compuestos descritos en la WO 96/18770 tal como compuestos de N-hidroxi, en particular compuestos alifáticos, cicloalifáticos, heterocíclicos o aromáticos que contienen NO-, N(OH)-, o N(OH) (Ri), especialmente N-hidroxi benzotriazol (HOBT), ácido Violúrico, o N-hidroxiacetanilida (HAA) . En una modalidad preferida de la invención el mediador es un compuesto de la fórmula general III: en donde R , R2, R , R4 son seleccionados de manera individual a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, hidroxi, formilo, carboxi y sales y esteres de estos, amino, nitro, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, carbonil (alquilo de 1 a 12 átomos de carbono), arilo, en particular fenilo, sulfo, aminosulfonilo, carbamoilo, fosfono, fosfo'nooxi, y sales y esteres de estos, en donde R1, R2, R3, R4 pueden estar substituidos con R , en donde R5 representa hidrógeno, halógeno, hidroxi, formilo, carboxi y sales y esteres de estos, amino, nitro, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, carbonil ( alquilo de 1 a 12 átomos de carbono), arilo, en particular fenilo, sulfo, aminosulfonilo, carbamoilo, fosfono, fosfonooxi, y sales y esteres de estos, [X] representa un grupo partir de ( -N=N- , (-N=CR6-)m, (-CR6=N- (-CR7=CRe , y m es 1 ó 2. En una modalidad más preferida de la invención el mediador es un compuesto de la fórmula general IV: en donde R1, R2, R3 , R4 son seleccionados de manera individual a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, hidroxi, formilo, carboxi y sales y esteres de estos, amino, nitro, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, carbonil (alquilo de 1 a 12 átomos de carbono), arilo, en particular fenilo, sulfo, aminosulfonilo, carbamoilo, fosfono, fosfonooxi, y sales y esteres de estos, en donde R , R , R , R pueden estar substituidos con R , en donde R representa hidrógeno, halógeno, hidroxi, formilo, carboxi y sales y esteres de estos, amino, nitro, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono, carbonil ( alquilo de 1 a 12 átomos de carbono) , arilo, en particular fenilo, sulfo, aminosulfonilo, carbamoilo, fosfono, fosfonooxi, y sales y esteres de estos. El mediador también puede ser una sal o un éster de la fórmula III o IV. Los mediadores preferidos aicionales son los oxoderivados y N-hidroxi derivados de los compuestos heterocíclicos y oximas de derivados de oxó- y formil- de compuestos heterocíclios , dichos compuestos heterocíclicos incluyendo los heterocíclicos de 5 elementos que contienen nitrógeno, en particular pirrólo, pirazol e imidazol y sus complementos hidrogenados (por ejemplo, pirrolidina) así como también triazoles, tales como 1 , 2 , -triazol ; heterocíclicos de 6 elementos que contienen nitrógeno, en particular mono-, di- y triazinas (tal como piperidina y piperizina), morfolina y sus complementos insaturados (por ejemplo piridina y pirimidina); y heterocíclicos condensados que contienen los heterocíclicos anteriores como subestructuras, por ejemplo, indol, benzotiazol, quinolina y benzoazepina . Ejemplos de mediadores preferidos a partir de estas clases de compuestos son las piridin aldoximas; N-hidroxipirrolidindionas tales como N-hidroxisuccinimida y N-hidroxiftalimida; 3,4-dihidro-3-hidroxibenzo [ 1 , 2 , 3 ] tria zin-4-o?a ; trímero de formaIdoxima (N,N' , N' '-trihidroxi, 1,3,5-triazinina) ; y ácido violúrico ( 1 , 3-diazinan-2 , 4 , 5 , 6-tetron-5-oxima) . Mediadores todavía adicionales los cuales pueden ser aplicados en la invención incluyen oximas de derivados de oxo- y formil- de compuestos aromáticos, tales como benzoquinona dioxima y salicilaldoxima (oxima de 2-hidroxibenzaldehído ) , y N-hidroxiamidas y N-hidroxianilidas , tal como N-hidroxiacetanilida . Los mediadores son seleccionados a partir del grupo que consiste de 1-hidroxibenzotriazol; hidrato de 1-hidroxibenzotriazol ; sal de sodio de 1-hidroxibenzotriazol ; sal de potasio de 1-hidroxibenzotriazol ; sal de litio de 1-hidroxibenzotriazol; sal de amonio de 1-hidroxibenzotriazol, sal de calcio de 1-hhiiddrrooxxiibbeennzzoottrriiaazzooll ;; sal de magnesio de 1-hidroxibenzotriazol; y ácido l-hidroxibenzotriazol-6-sulfónico . Un mediador de manera particular preferido es el 1-hidroxibenzotriazol . Todas las especificaciones de los compuestos N-hidroxi anteriores se entiende que incluyen formas tautoméricas tal como N-óxidos cada vez que son relevantes . En particular, el agente mejorador de la invención puede ser el radical libre N-oxilo correspondiente para cualquiera de los compuestos descritos in la WO 96/18770 al como • TEMPO (2,2,'6,6-tetrametilpiperidinoxilo) .

Aplicaciones Industriales El oligo- o polisacárido puede ser procesado en un medio acuoso, aunque otros medios/ solventes podrían ser adicionados en varias concentraciones, por ejemplo, detergentes, tensidas, lubricantes, solventes orgánicos, aceites de silicona, aceites minerales, y/o aceites vegetales. Típicamente una proporción de licor:oligo- o polisacárido en el rango desde 1:1 - 20:1 será usado, y típicamente el tratamiento se hará a una temperatura en el rango desde 10°C - 150°C, de manera preferida en el rango desde 40°C - 80°C. El proceso típicamente será realizado por 5-120 minutos. Típicamente las dosis de enzima serán de 0.01 - 100 µg de proteína de enzima/g de oligo- o polisacárido, y típicamente las dosis de agentes mejoradores, si se adiciona, será en el rango de 0.01 - 100 µmol/g de oligo- o polisacárido.

Evaluación del tratamiento oxidativo: Como se mencionó anteriormente el tratamiento enzimático de acuerdo a la invención puede ser evaluado por medio de las técnicas de espectroscopia vibracional tales como FTIR, DRIFT, o FTIR-PAS aunque otras técnicas de espectroscopia así como también otras técnicas podrían ser usadas. Por tales técnicas será posible evaluar el grado de oxidación obtenido así como también la naturaleza molecular de los cambios oxidativos introducidos en el oligo-/polisacárido . De manera preferida las técnicas de espectroscopia se pueden combinar con análisis multivariados (quimiométricos ) para el análisis detallado de los datos como se describió en las secciones previas, de manera preferida concentrando el análisis de los datos al rango de números de onda de 1800 cm" - 800 cm" y en particular el rango de números de onda de 1800 cm" -1500 cm" este rango en particular refleja los productos de oxidación típica formados. La presente invención es ilustrada adicionalmente en 1 ejemplo siguiente el cual no está por cualquier vía intentando limitar el alcance de la invención como se reivindica.

EJEMPLO 1 Celulosa de algodón Una tela o trama de 100% de algodón no teñida y no blanqueada, 195 g/m2 (obtenida de Grenaa Dampvaveri A/S, Oesterbrogade 45, DK-8500 Grenaa) . Previo al uso la tela se desaprestó con Aquazym Ultra 1200 (obtenible a partir de Novo Nordisk A/S) como per las instrucciones de los productores . Siguiendo el desaprestado, la tela se secó por tamboreo. La tela se corto en piezas de aproximadamente 6 g cada una (aproximadamente 12X24 cm cada una) .

Enzima : La lacasa trame t es Vi l l osa (TvL) (previamente llamada Polyporus pin i tus l a cease ) (obtenible a partir de Novo Nordisk A/S) .

Mediador : TEMPO (radical libre 2 , 2 , 6, 6-tetrametil-1-piperidiniloxi ) (Fluka cat# 87903) .

Procesamiento A un vaso LOM de acero inoxidable de un volumen total de 1200 ml se adicionó: 4X6 g de tela, 240 ml de amortiguador (0.75 g/L KH2P0 ajustado a pH 6), 4.7 mg de TvL, 0.015 g de TEMPO. El vaso LOM se tapo ajustadamente y se colocó en el medidor de lavandería (Atlas LP2 Launder-o-meter ) y se procesó a 60°C por 30 minutos. Siguiendo el procesamiento la tela se enjuagó en agua desmineralizada tres veces y se secó.

Evaluación por técnicas de espectroscopia vibracionales Preparación de muestras y aspectop espectroscopicos Las pie za s ci rculares ( ca s i 6 mm de diámetro) fueron cortadas a partir de cada muestra de tela y fueron pre-condicionadas a cierta humedad (65 R.H) y una temperatura de 22°C en un microprocesador controlador de temperatura (Clayson IM1000R Incubator) por una semana previo a cualquier trabajo experimental . Para los experimentos FT-IR/PAS sencillos las piezas circulares fueron colocadas en una taza de muestra (6 mm) y luego colocadas en el accesorio Fotoacústico (MTEC modelo 200) .

Un espectrómetro Perkin-Elmer 2000 FT-IR se usó para los estudios infrarrojos. El carbón negro se usó como un material de referencia y previo a la colección espectral la célula se purgó con helio por 10 minutos. Los espectro fueron colectados sobre el rango completo (4000-450 cm" ) . Una resolución espectral de 8 cm" , 128 exploraciones y una velocidad de reflejo de 0.2 cm/s fueron empleadas. Los espectros fueron colectados bajo condiciones de laboratorio normales (22°C) . Los espectros FT-IR/PAS del algodón blanco no tratado así como también del algodón blanco tratado con Tempo/TvL cubrieon el rango de 1800-1500 cm están mostrados en la Figura 1. A partir de la Fig. 1 es obvio, que el contenido de grupos carbonilo tiene un incremento como resultado del tratamiento *con Tempo/TvL (señalado "TEMPO" en la Fig.l) como la intensidad de los picos a 1714 cm" y especialmente 1734 cm"1 tiene incrementado [Yang, C.Q. (1991), Appl. Spectrosc., 45(1), página 102-108] .

Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes

Claims (16)

REIVINDICACIONES

1. Un proceso para la oxidación de un grupo hidroxi de 1 átomo de carbono y/o 2 átomos de carbono y/o 3 átomos de carbono y/o 4 átomos de carbono y/o 5 átomos de carbono y/o 6 átomos de carbono de un monómero de azúcar de un oligo- o polisacárido caracterizado porque comprende poner en contacto, en un medio acuoso, el oligo- o el polisacárido con una enzima de oxidación del fenol, junto con una fuente de peróxido de hidrógeno cuando la enzima de oxidación del fenol es una peroxidasa, y un agente mejorador, con esto se crea un oligo- o un polisacárido con características alteradas comparados con el oligo- o polisacárido natural.

2. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el proceso es la oxidación del grupo hidroxi de 6 átomos de carbono .

3. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el medio acuoso comprende adicionalmente un agente mejorador de fórmula I: en la fórmula X representa (-0-) o (-S-) , y los grupos substituyentes R -R9, los cuales pueden ser idénticos o diferentes, representan de manera independiente cualquiera de los radicales siguientes: hidrógeno, halógeno, hidroxi, 'formilo, carboxi, y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo, y esteres y sales de estos, sulfamoilo, nitro, amino, fenilo, alquilo de 1 a 14 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, carbonil-Ci-Cs-alquilo, aril-Ci-Cß-alquilo; los grupos carbamoilo, sulfamoilo, y amino pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos una o dos veces con un grupo substituyente R10; y el fenilo puede adicionalmente estar no substituido o substituido con uno o más grupos substituyentes R ; y los grupos alquilo de 1 a 14 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, carbonil-Ci-Cs-alquilo, y aril-Ci-Cs-alquilo pueden estar saturados o insaturados, ramificados o no ramificados, y pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos con uno 0 más grupos substituyentes R10; el grupo substituyente R representa cualquiera de los radicales siguientes: halógeno, hidroxi, formilo, carboxi, y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, sulfamoilo, nitro, amino, fenilo, aminoalquilo, piperidino, piperazinilo, pirrolidino, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono; los grupos carbamoilo, sulfamoilo, y amino pueden estar adicionalmente no substituidos o substituidos una o dos veces con hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono; y el fenilo puede adicionalmente estar substituido con uno o más de los siguientes radicales: halógeno, hidroxi, amino, formilo, carboxi y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, y sulfamoilo; y el alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, y los grupos alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, pueden estar adicionalmente no saturados o insaturados, ramificados o no ramificados, y pueden estar adicionalmente substituidos una o dos veces con cualquiera de los siguientes radicales: halógeno, hidroxi, amino, formilo, carboxi y esteres y sales de estos, carbamoilo, sulfo y esteres y sales de estos, y sulfamoilo; o en la fórmula general, dos de los grupos substituyentes R 1-R9 pueden formar juntos un grupo -B-, en el cual B representa cualquiera de los grupos siguientes: ( -CHR10-N=N- ) , (-CH=CH-)n, (-CH=N-)n o (-N=CR -NR -), en los grupos n representa un número entero desde 1 a 3, R es un grupo substituyente como se definió anteriormente y R11 es definido como

4. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el medio acuoso adicionalmente comprende un agente mejorador de fórmula II: en la fórmula, A es un grupo tal como -D, -CH=CH-D, -CH=CH-CH=CH-D, -CH=N-D, -N=N-D, o -N=CH-D, en los cuales D se selecciona a partir del grupo que consiste de -CO-E, -S02-E, -N-XY, y -N+-XYZ, en los cuales E pueden ser -H, -OH, -R, o -OR, y X y Y y Z pueden ser idénticos o diferentes y se seleccionan a partir de -H y -R; R siendo un alquilo de 1 a 16 átomos de carbono, de manera preferida un alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, el alquilo puede estar saturado o insaturado, ramificado o no ramificado y opcionalmente substituido con un grupo carboxi, sulfo o amino; y B y C pueden ser los mismos o diferentes y se seleccionan a partir de CmH2m+?; 1 £ m £ 5.

5. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el medio acuoso adicionalmente comprende un agente mejorador seleccionado a partir del grupo que consiste de pHBS, pHBA, Vanilina, ácido cumárico, y ácido cinámico.

6. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el medio acuoso adicionalmente comprende un agente mejorador seleccionado a partir del grupo que consiste de N-hidroxibenzotriazol , ácido violúrico, N-hidroxiacetanilida y TEMPO.

7. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, caracterizado porque el polisacárido es celulosa o fécula.

8. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, caracterizado porque las características alteradas son resistencia incrementada y/o capacidad del teñido alterado y/o suavidad incrementada y/o capacidad de la humedad incrementada y/o libre de desgarre y/o retardante del fuego y/o repelente de humedad y/o carga de la superficie alterada y/ cristalinidad alterada.

9. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizado porque la enzima de oxidación del fenol es una peroxidasa.

10. El proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la peroxidasa es la peroxidasa del rábano picante, peroxidasa del frijol de soya o una enzima de peroxidasa obtenible a partir de Corpinus , por ejemplo, C. cinereus o C .macrorhizus , o de Bacillus , por ejemplo, B . Pumilus , o Myxococcus , por ejemplo, M . virescens .

11. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la fuente de peróxido de hidrógeno es peróxido de hidrógeno o un precursor de peróxido de hidrógeno, por ejemplo, perborato o percarbonato, o un sistema de enzima de generación de peróxido de hidrógeno, por ejemplo, una oxidasa y su substrato, o un ácido peroxicarboxílico o una sal del mismo.

12. El proceso de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el medio acuoso contiene H202 o un precursor de H202 en' una concentración correspondiente a 0.001-25 nM de H202.

13. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la enzima de oxidación del fenol es una lacasa.

14. El proceso de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la lacasa es obtenible a partir de Trametes , por ejemplo, Trametes villosa, Coprinus, por ejemplo, Coprinus cinereus , o Myceliophthira Por ejemplo, Myceliophthora thermophila .

15. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la concentración de la enzima de oxidación del fenol corresponde a 0.01-100 mg de proteína de enzima por g de oligo- o polisacárido.

16. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente mejorador en el medio acuoso está presente en concentraciones desde 0.01 a 100 mmol por g de oligo-o polisacárido.