MXPA00003470A - Procedimientos para preparar azacicloalquilalcanoil pseudotetrapeptidos - Google Patents

Abstract

La presente invención est5 dirigida a un procedimiento preparar un pseudotetrapéptido de fórmula 1 (Ver Fórmula) o una sal o profármaco del mismo, en donde el compuesto 11 (Ver Fórmula) es opcionalmente azaheterocíclilo protegido con nitrógeno;.... es un enlace sencillo o doble;q es de 1 a 5;B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo alquilaralquilo;Q2 es H o un grupo protector deácido carboxílico;J es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido;L es OR1 o NR1R2, en donde R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo o alquilaralquilo;y p es 1ó2, el cual comprende el acoplamiento dedos dipéptidos o pseudopéptidos.

Description

PROCEDIMIENTOS PARA PREPARAR AZACICLOALQUILALCANOIL PSEUDOTETRAPEPTIDOS CAMPO DE LA INVENCION Esta invención esta dirigida a un procedimiento para preparar de manera convergente azacicloalcanoilpseudotetrapéptidos que comprende copular un dipéptido con un pseudodipéptido. Esta invención también esta dirigida a intermediarios y procedimientos para preparar los intermediarios útiles en la preparación del pseudotetrapéptido.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Los azacicloalquilalcanoil pseudotetrapéptidos, como el ejemplificado por la amida de N-[N-[N-(4-piperidin-4-il)butanoil)-N-etilglicil]-(L)-aspartil]-(L)-ß-ciclohexil-alanina, tienen actividad antitrombótica, incluyendo la inhibición de agregación plaquetaria y formación de trombos en mamíferos, y son útiles en la prevención de tratamiento de trombosis asociada con estado de enfermedad tales como infarto al miocardio, embolia, enfermedad arterial periférica y coagulación intravascular diseminada. Véase la solicitud de patente PCT número de publicación No. WO95/10295. Hasta hoy día estos pseudotetrapéptidos han sido preparados mediante síntesis secuencial a partir de aminoácido C-terminal utilizando procedimientos de síntesis de péptidos en fase sólida o en fase en solución estándares. Sin embargo, la copulación secuencial de aminoácidos es menos deseable para producir fármacos a granel ya que ésta restringe la fabricación a un esquema lineal. Por lo tanto, es necesario un método de preparación alternativo para pseudotetrapéptidos. Un método como tal debe sustancialmente incrementar la versatilidad y eficiencia de la producción. Un método convergente deberá proveer modificaciones especializadas del pseudotetrapéptido realizando química especializada en uno de los sintones en vez del pseudotetrapéptido completo, y deberá proveer la preparación simultánea de un número de análogos de pseudotetrapétido.

BREVE DESCIPCION DE LA INVENCION Esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un pseudotetrapéptido de la fórmula I o una sal o profármaco del mismo en la cual . es opcionalmente azaheterociclilo N-protegido; — es un enlace sencillo o un enlace doble; q es 1 -5; B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo o alquilaralquilo; Q2 es H o un grupo que protege al ácido carboxílico; J es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicicloalquilalquilo, arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido; L es OR1, o NR1R2, en la cual R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo. o alquilaralquilo; y p es 1 ó 2, que comprende (a) copular un azaheterociclil pseudodipéptido de la fórmula o una sal del mismo en la cual K es OH o un grupo activante de acilo, con un dipéptido substituido con ácido carboxílico de la fórmula •*,* o una sal del mismo, (b) eliminar opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o el grupo protector de ácido carboxílico para preparar el pseudotetrapéptido, y (c) convertir opcionalmente el pseudotetrapéptido en la sal o profármaco.

DESCIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Definición de términos Tal como se utilizaron anteriormente, y a través de la descripción de esta invención, deberá entenderse que los siguientes términos, a menos que se indique de otra manera tienen los siguientes significados: "Azaheterociclilo" significa un anillo carboxíclico saturado, insaturado o aromático de 4-8 elementos en e cual uno de los átomos de un átomo de nitrógeno. Cuando el átomo de nitrógeno se incorpora en el sistema anular mediante dos enlaces sencillos, éste está sustituido opcionalmente por un grupo protector de nitrógeno P-i. Los grupos azaheterociclilo representativos incluyen piperidinilo, N-tert-butoxicarbonilpiperidinilo, N- benciloxicarbonilpiperidinilo, pirrolidÉRiffo, N-tert-butoxicarbonilpirrolidinilo, N-benciloxicarbonipirolidinilo, pirrolilo, piridinilo, y similares. Los grupos azaheterociclilo preferidos son piridilo, N-tert-butoxicarbonilpiperidin-4-ilo y N-benciloxicarbonipiperidin-4-ilo. "Alquilo" significa un grupo alifático saturado, el cual puede ser recto o ramificado, teniendo aproximadamente 1 a aproximadamente 20 átomos de carbono en la cadena. "Ramificado" significa que un grupo alquilo inferior tal como metilo, etilo o propilo está unido a una cadena alquílica lineal. Los grupos alquilo rectos o ramificados preferidos son los grupos "alquilo inferior" los cuales son aquellos grupos alquilo que tienen desde 1 hasta aproximadamente 10 átomos de carbono. Más preferido los grupos alquilo inferior tienen desde 1 hasta aproximada 6 átomos de carbono. "Cicloalquilo" significa un grupo carbocíclico saturado que tiene uno o más anillos y que tiene aproximadamente 3 a 10 átomos de carbonos. Los grupos cicloalquilo preferidos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo y decahidronaftilo. "Cicloalquilalquilo" significa un grupo alquilo substituido con un grupo cicloalquilo. Los grupos cicloalquilalquilo preferidos incluyen ciclopentilmetilo, ciclohexilmetilo, ciclohexiletilo, decahidronaft-1-ilmetilo y decahidronaft-2-ilmetilo. "Alquilcicloalquilo" significa un grupo cicloalquilo substituido con un grupo alquilo. Los grupos de ejemplo de alquilcicloalquilo incluyen 1-, 2-, 3-, o 4- metil o etil ciciohexilo.

"Alquilcicloalquilalquilo" significa un grupo alquilo substituido con un grupo alquilcicloalquilo. Los grupos de ejemplo alquilcicloalquilo incluyen 1-, 2-, 3-, o 4-metil o etil ciclohexilmetilo o 1-, 2-, 3-, o 4-metil o etil ciclohexiletilo. "Arilo" significa un grupo fenilo o naftilo. "Arilo substituido" significa un grupo fenilo o naftilo sustituido con uno o más sustituyentes del grupo arilo los cuales pueden ser iguales o diferentes, en donde "sustituyente de grupo arilo" incluye arilo, alquenilo, alquinilo, arilo, aralquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, aralcoxi, hidroxialquilo, acilo, formilo, carboxi, alquenoilo, aroilo, halógeno, nitro, trihalogenometilo, ciano, alcoxicarbonilo, ariloxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, acilamino, aroilamino, carbamoilo, alquilcarbamoilo, dialquilcarbamoilo, arilcarbamoilo, aralquilcarbamoilo, alquilsulfonilo, alquilsulfinilo, ariisulfonilo, arilsufinilo, aralquilsulfonilo, aralquilsulfinilo, o -NRaRb en el cual Ra y Rb son independientemente hidrógeno, alquilo, arilo o aralquilo. Los sustituyentes de grupo arilo preferidos son alquilo, hidroxi, alcoxi, halógeno y trihalometilo. "Aralquilo" significa un grupo alquilo sustituido con un radical arilo. Los grupos aralquilo preferidos incluyen bencilo, naft-1-ilmetilo, naft-2-ilmetilo y fenetilo. "Aralquilo sustituido" significa un grupo aralquilo sustituido en la porción arílica con uno o más sustituyentes del grupo arilo. "Alcohol" significa un grupo alquilo como el definido en la presente invención desde 1 hasta aproximadamente 10 átomos de carbono el cual está sustituido con uno o más grupos hidroxilo. El término "alcohol inferior" significa un alcohol que tiene desde 1 hasta aproximadamente 4 átomos de carbono sustituidos con un solo grupo hidroxilo. Los alcoholes inferiores representativos incluyen metanol, etanol, 2-propanol, 1 -butanol, y similares. "Glicol" significa un alquilo sustituido con dos o más grupos hidroxilo. Los glicoles representativos incluyen etilenglicol, propilenglicol y similares. El término "éter" significa un compuesto de la fórmula R-O-R' en la cual R y R' son alquilo inferior. R y R' pueden estar conectadas mediante uno o más átomos de grupos metileno o a través de un átomo de oxígeno adicional. Los éteres representativos incluyen éter dietílico, éter metil-tert-butílico, tetrahidrofurano, dioxano, y similares. "Aprótico polar" significa solventes que no contienen grupos hidroxi pero que tienen un momento dipolar relativamente alto. Los solventes apróticos polares representativos incluyen acetonitrilo, N,N-dimetilformamida (DMF), sulfóxido de dimetilo (DMSO), 1 ,1 -dimetoxietano (DME), triamida hexametilfosfórica (HMPA), y similares. "Alcóxido" significa una base de la fórmula M-OH en la cual M es un metal alcalino que se selecciona a partir de sodio, calcio, litio y potasio. "Carbonato" significa una base de la fórmula M2CO3 en la cual M se selecciona de magnesio, sodio, calcio, litio y potasio. "Bicarbonato" significa una base de la fórmula MHCO2, en la cual M se selecciona de sodio, calcio, litio y potasio. "Aminoácido natural" significa un compuesto de ácido carboxílico que tiene un grupo amino en la posición a respecto al grupo carboxilato, es decir, un compuesto de la fórmula H2N-CHR-CO2H en donde R es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo sustituido, aralquilo, aralquilo sustituido, o -CH2CO2Q en la cual Q se define en la presente. Los aminoácidos naturales preferidos son aquellos en los cuales R es ciclohexilmetilo. Los aminoácidos preferidos tienen estereoquímica L en el carbono a. "Péptido" y "polipéptido" significa un polímero en el cual los monómeros son residuos de aminoácido natural o no naturales unidos juntos mediante enlaces amida. "Estructura base de péptidos" significa las series de enlaces amida mediante los cuales los residuos de aminoácido están unidos. "Residuo de aminoácido" significa las unidades de aminoácido individuales incorporadas en los péptidos de la invención. "Pseudopéptido" significa un péptido que incorpora uno o más monómeros de aminoácido no natural en la estructura base del péptido. Los monómeros no aminoácidos representativos incluyen ácido 1-[(fenilmetox¡)carbonil]-4-piperidinbutanoico y ácido 4-piridinbutírico. "Aminoácido no natural" significa un compuesto de ácido carboxílico que tiene un grupo en el mismo en una posición diferente a la posición a con respecto al grupo carboxilato. Los aminoácidos no naturales preferidos en la presente invención incluyen compuestos de la fórmula NH2(CH2)2CO2H y en la cual es azaheterociclilo. Los aminoácidos no naturales preferidos representativos incluyen ácido 4-piperidinbutanoico, ácido 3-(4-piperidinilmetilen)propiónico y ácido 4-piridinbutiríco. "Grupo N-protector" y "grupo protector de nitrógeno" significan un grupo fácilmente removible el cual es conocido en la técnica porque protege un grupo amino contra reacciones no deseadas durante procedimientos de síntesis y que es removible de manera selectiva. La utilización de grupos N-protectores es bien conocida en la técnica para proteger grupos en contra de reacciones no deseadas durante un procedimiento de síntesis y muchos de tales grupos protectores se conocen, por ejemplo, de T.H. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups ¡n Organic Synthesis, 2a. ed., incorporado en la presente invención para referencia. Los grupos N-protectores preferidos son acilo, incluyendo formílo, acetilo, cloroacetilo, tricloroacetilo, o-nitrofenilacetilo, o-nitrofenoxiacetilo, trifluoroacetilo, acetoacetilo, 4-clorobutirilo, isobutirilo, o-nitrocinamoilo, picolinoilo, acilisotiocianato, aminocaproilo, benzoilo y similares, y aciloxi incluyendo metoxicarbonilo, 9-fluorofenilmetoxicarbonilo, 2,2,2-trifluoroetoxicarbonilo, 2-trimetilsililetoxicarbonilo, viniloxicarbonilo, aliloxicarbonilo, f-butiloxicarbonilo (BOC), 1 ,1-dimetilpropiniloxicarbonilo, benciloxicarbonilo (CBZ), p-nitrobenciloxicarbonilo, 2,4- diclorobenciloxicarbonilo, alioxicarbonilo (AHoc), y similares. "Grupo N-protector lábil a ácido" y "grupo protector de nitrógeno lábil a ácido" significa un grupo N-protector como el definido anteriormente el cual se puede quitar fácilmente mediante tratamiento con ácido, mientras que permanece relativamente estable a otros reactivos. Un grupo N-protector lábil a ácido preferido es te/t-butoxicarbonilo (BOC). "Grupo N-protector lábil a hidrogenación" y "grupo protector de nitrógeno lábil a hidrógeno" significa un grupo N-protector tal como el definido anteriormente el cual se puede quitar fácilmente mediante hidrogenación mientras que permanece relativamente estable a otros reactivos. Un grupo N-protector lábil a hidrogenación es benciloxicarbonilo (CBZ). "Grupo protector de nitrógeno lábil a metal" significa un grupo protector de nitrógeno tal como el definido anteriormente el cual se puede retirar mediante metales. Un grupo protector de nitrógeno lábil a metal es alilo, el cual es retirado mediante tratamiento con Pd(0). "Agente N-protector" significa un reactivo utilizado para introducir un grupo N-protector en la entidad molecular. Tales grupos protectores generalmente se introducen mediante desplazamiento de un grupo saliente proveniente del agente N-protector por el átomo de nitrógeno nucleofílico que se va a proteger. Los agentes N-protectores representativos incluyen haluros de acilo y arilo incluyendo cloruro de acetilo y cloruro de benzoilo, y similares; anhídridos de acilo y arilo incluyendo anhídrido acético, anhídrido trifluoroacético y anhídrido benzoico, y similares; formiatos incluyendo cloroformiato de bencilo; y carbonatos tales como carbonato de di-te/f-butilo y carbonato de bencil-?/-succinimidilo. "Grupo protector de ácido carboxílico" y "grupo protector de ácido" significa un grupo fácilmente removible que se conoce en la técnica porque protege un grupo de ácido carboxílico (-CO2H) contra reacción no deseada durante procedimientos de síntesis y que se puede retirar de manera selectiva. La utilización de grupos protectores de ácido carboxílico se conoce bien en la técnica y muchos de tales grupos protectores se conocen por ejemplo a partir de T.H. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2a. ed., John Wiley & Sons, Nueva York (1991 ), incorporado en la presente invención para referencia. Ejemplos de grupos protectores de ácido carboxílico incluyen esteres tales como metoximetilo, metiltiometilo, tetrahidropiranilo, benciloximetilo, fenacilo sustituido y no sustituido, 2,2,2-tricloroetilo, ferí-butilo, cinamilo, bencilo sustituido y no sustituido, trimetilsililo, alilo y similares, y amidas e hidrazidas incluyendo ?/,?/-dimetilo, 7-nitroindolilo, hidrazida, ?/-fenilhidrazida, y simlares. Los grupos protectores de ácido carboxílico especialmente preferidos son fe t-butilo y bencilo. "Grupo protector de ácido carboxílico lábil a hidrogenación" y "grupo protector de ácido lábil a hidrogenación" significan un grupo protector de ácido tal como el que se define anteriormente el cual es fácilmente removible mediante hidrogenación mientras que permanece relativamente estable a otros reactivos. Un grupo protector de ácido lábil a hidrogenación preferido es bencilo.

"Grupo protector de ácido carboxílico lábil a ácido" y "grupo protector de ácido lábil a ácido" significa un grupo protector de ácido como se define anteriormente el cual es fácilmente retirado mediante tratamiento con ácido mientras que permanece relativamente estable a otro reactivos. Un grupo protector de ácido lábil a ácido preferido es terf-butilo. "Grupo protector de ácido carboxílico lábil a metal" y "grupo protector de ácido lábil a metal" significan un grupo protector de ácido como se define anteriormente el cual es fácilmente removible mediante tratamiento con metal. Los grupos protectores de ácido lábiles a metales preferidos son fenacilo y alilo, los cuales se retiran mediante tratamiento con Zn o Pd(0). "Grupo activador de acilo" significa un grupo el cual, cuando es sustituido por el grupo hidroxi de un ácido carboxílico, hace que el grupo carbonilo sea más susceptible a ataque nucleofílico, con lo cual se facilita el reemplazo del grupo hidroxilo con nucleófilos. Los grupos activantes de acilo representativos incluyen halógenos (es decir, haluros de acilo); esteres del ácido carboxílico con hidroxibenzotriazol, ?/-hidroxisuccinimida, pentafluorofenol, p-nitrofenol y similares; anhídridos simétricos; anhídridos asimétricos, preparados por ejemplo, mediante reacción del ácido carboxílico con cloroformiato de isopropilo, cloroformiato de etilo, cloroformiato de isobutilo y similares; ?/-carboxianhídridos; los productos resultantes de la reacción del ácido carboxílico con carbodiimidas tales como diciclohexil-, diisopropil-, y ?/,?/-dimetilpropiletilcarbodiimida; y los derivados resultantes de la reacción del ácido carboxílico con hexafluorofosfato de (benzotriazol-1- iloxi)tris-(dimet¡lamino)fosforonio, hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris-(pirrolidino)fosforonio, tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio, hexafluorofosfato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-1 , 1 ,3,3-tetrametiluronio, y difenilfosforozidato. "Sal" utilizado en conjunción con el pseudotetrapéptido, pseudodipéptido y dipéptido de la presente invención incluyen las sales acidas y básicas de adición. En donde el pseudotetrapéptido, pseudodipéptido y dipéptido están sustituidos con una porción básica, se forman opcionalmente las sales acidas de adición opcionalmente y pueden ser una forma más conveniente de uso. Los ácidos que pueden ser utilizados para preparar las sales acidas de adición incluyen de preferencia aquellas que producen, cuando se combinan con la base libre, sales farmacéuticamente aceptables, es decir, sales cuyos aniones no son tóxicos al paciente en dosis farmacéuticas de las sales, de modo que los efectos benéficos inherentes en la base libre no sean viciados por efectos secundarios atribuibles a los aniones. Aunque se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos básicos, todas las sales acidas de adición son útiles como fuentes de la forma de base libre incluso si la sal particular, per se, se desea únicamente como un producto intermediario tal como, por ejemplo, cuando la sal se forma únicamente para propósitos de purificación o identificación, o cuando se utiliza como intermediario para preparar una sal farmacéuticamente aceptable mediante procedimiento de intercambio iónico. Las sales farmacéuticamente aceptables dentro del campo de la invención son aquellas que se obtienen de los siguientes ácidos: ácidos minerales tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico y ácido sulfámico, y ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido malónico, ácido metansufónico, ácido etansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido ciclohexilsulfámico, ácido quínico y similares. Las sales acidas de adición correspondientes comprenden los siguientes: halohidratos, por ejemplo clorhidrato y bromhidrato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfamato, acetato, trifluoroacetato, citrato, lactato, tartrato, malonato, oxalato, salicilato, propionato, succinato, fumarato, maleato, metilen-bis-ß-hidroxinaftoatos, gentisatos, mesilatos, isetionatos y di-p-toluiltartratos, metansulfonato, etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato, ciciohexilsulfamato y quinato, respectivamente. De conformidad con una característica adicional de la invención, las sales acidas de adición del pseudotetrapéptido, pseudodipéptido o dipéptido se preparan mediante reacción de la base libre con el ácido apropiado, mediante aplicación o adaptación de métodos conocidos. Por ejemplo, las sales acidas de adición de los péptidos de esta invención se preparan ya sea disolviendo la base libre en solución acuosa o en solución acuosa alcohólica u otras mezclas de solventes acuosos apropiadas que contengan al ácido apropiado y aislando la sal mediante evaporación de la solución, o haciendo reaccionar la base libre y ácido en un solvente orgánico en cuyo caso la sal se separa directamente o se puede obtener mediante concentración de la solución. El pseudotetrapéptido, pseudodipéptido o dipéptido se puede regenerar a partir de las sales mediante la aplicación o adaptación de métodos conocidos. Por ejemplo, el pseudotetrapéptido, pseudodipéptido, o dipéptido se pueden regenerar a partir de sus sales acidas de adición mediante tratamiento con álcali, por ejemplo, solución de bicarbonato de sodio acuosa o solución de amoniaco acuosa. En donde el pseudotetrapéptido, pseudodipéptido, o dipéptido está sustituido con una porción acida, las sales de adición básica pueden ser formadas y pueden ser una forma más conveniente de uso. Las bases que pueden ser utilizadas para preparar las sales básicas de adición incluyen de preferencia a aquellas que producen, cuando se combinan con el ácido libre, sales farmacéuticamente aceptables, es decir, sales cuyos cationes no sean tóxicos al organismo animal en dosis farmacéuticas de las sales de modo que los efectos benéficos inherentes en el ácido libre no estén viciados por efectos secundarios atribuibles a los cationes. Las sales farmacéuticamente aceptables, incluyendo por ejemplo sales de metal alcalino o alcalino terreo o sales de amina, dentro del campo de la invención, son aquellas que se obtienen de la siguientes bases: hidruro de sodio, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de calcio, hidróxido de aluminio, hidróxido de litio, hidróxido de magnesio, hidróxido de zinc, amoniaco, trimetilamoniaco, trietilamoniaco, etilendiamina, n-metil-glucamina, lisina, arginina, ornitina, colina, N,N -dibenciletildiamina, cloroprocaina, dietanolamina, procaina, n- bencilfenetilamina, dietilamina diciciohexilamina, piperazina, tris(hidroximetil)-aminometano, hidróxido de tetrametilamonio y similares. Las sales de metal del pseudotetrapéptido o dipéptido se pueden obtener poniendo en contacto un hidruro, hidróxido, carbonato o compuesto reactivo similar del metal elegido en un solvente acuoso u orgánico con la forma de ácido libre del pseudotetrapéptido, pseudodipéptido, o dipéptido. El solvente acuoso utilizado puede ser agua o éste puede ser una mezcla de agua con un solvente orgánico, de preferencia un alcohol tal como metanol o etanol, una cetona tal como acetona, un éter alifático tal como tetrahidrofurano o un éster tal como acetato de etilo. Tales reacciones normalmente se conducen a temperatura ambiente pero estas pueden, sí se desea, ser llevadas a cabo con calentamiento o enfriamiento. Las sales amina pueden obtenerse poniendo en contacto una amina en un solvente acuoso u orgánico con la forma de ácido libre del pseudotetrapéptido, pseudodipéptido, o dipéptido. Los solventes acuosos apropiados incluyen agua y mezclas de agua con alcohol tales como metanol o etanol, éteres como tetrahidrofurano, nitrilos tales como acetonitrilo, o cetonas tales como acetona. Las sales de aminoácido pueden ser preparadas de manera similar. El seudotetrapéptido, seudodipéptido o dipéptido puede ser regenerado a partir de sus sales básicas de adición mediante la aplicación o adaptación de métodos conocidos, por ejemplo, mediante tratamiento de la sal básica de adición con un ácido, por ejemplo, ácido clorhídrico.

Las sales del seudotetrapéptído, seudodipéptido o dipéptido también son útiles para purificación del seudotetrapéptido, seudodipéptido o dipéptido, por ejemplo, explotando las diferencias de solubilidad entre las sales y los péptidos originales, productos secundarios y/o materiales de partida por medio de técnicas bien conocidas por los expertos en la técnica. "Ester farmacéuticamente aceptable" significa esteres los cuales se hidrolizan in vivo e incluyen a aquellos que se degradan fácilmente en el cuerpo humano para dejar al azacicloalquilalcanoil seudotetrapéptido original o una sal del mismo. Los grupos éster apropiados incluyen, por ejemplo, aquellos obtenidos de ácidos carboxílicos alifáticos farmacéuticamente aceptables, particularmente ácidos alcanóicos, alquenóicos, cicloalcanóicos y alcandióicos, en los cuales cada porción alquilo o alquenilo ventajosamente tiene no más de 6 átomos de carbono. Ejemplos de esteres particulares incluyen formiatos, acetatos, propionatos, butilatos, acrilatos y etilsuccinatos. "Profármaco farmacéuticamente aceptable" significa un péptido el cual es, dentro del campo del buen juicio médico, apropiado para uso farmacéutico en un paciente sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares indebidas, y que es efectivo para el uso pretendido, incluyendo un éster farmacéuticamente aceptable así como una forma zwiteriónica, en donde sea posible, de los péptidos de la invención. El término "profármacos" significa un péptido que es fácilmente transformado in vivo para dar al péptido original, por ejemplo, mediante hidrólisis en sangre. Los profármacos farmacéuticamente aceptables de conformidad con la invención, se describen en T. Higuchi y V. Stella, Pro-druqs as Novel Deliverv Systems, Vol 14 of the A. C. S. Symposium Series, y en Edward B Roche, ed., Bioreversible Carriers in Druq Desiqn. American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, de los cuales ambos están incorporados en la presente invención para referencia. El seudotetrapéptido, seudodipéptido o dipéptido pueden contener centro asimétricos además de los centros quirales de la estructura base del péptido. Estos centros asimétricos pueden de manera independiente estar en cualquiera de la configuración R o S. También se hará aparente a los expertos en la técnica que ciertos péptidos de la fórmula I pueden presentar isomerismo geométrico. Los isómeros geométricos incluyen las formas cis y trans de los péptidos de la invención que tengan porciones alquenilo. La presente invención comprende la preparación de los isómeros geométricos individuales y estereoisómeros y mezclas de los mismos. Tales isómeros pueden ser separados de sus mezclas mediante aplicación o adaptación de métodos conocidos, por ejemplo, técnicas cromatográficas y técnicas de recristalización, o estos pueden ser preparados de manera separada a partir de los isómeros apropiados de sus intermediarios, por ejemplo mediante la aplicación o adaptación de métodos descritos en la presente invención.

MODALIDADfiS PREFERIDAS Los seudotetrapéptidos preferidos para prepararlos utilizando los procedimientos de esta invención son aquellos de la fórmula II: en la cual Pi es un grupo protector de nitrógeno; B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico P2; J es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo; L es OR1 o -NR1R2, donde R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo, o alquilaralquilo; m es 3; y n es 3 o 4. Los seudotetrapéptidos más preferidos para prepararlos utilizando el procedimiento de esta invención son aquellos de la fórmula II en la cual B es alquilo; J es alquilo, cicloalquilo, o cicloalquilalquilo; L es OR1 o NR1R2, en donde R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo; m es 3; y n es 3 o 4; y p es 1. Los seudotetrapéptidos todavía más preferidos para prepararlos utilizando el procedimiento de esta invención son aquellos de la fórmula lll en la cual Pi es un grupo protector de nitrógeno; B es alquilo; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico P2; J es alquilo, cicloalquilo, o cicloalquilalquilo; y L es OR1 -NR1R2; en donde R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo. Los compuestos más preferidos para prepararlos de conformidad para esta invención son aquellos de la fórmula lll en la cual B es alquilo; J es cicloalquilalquilo; y L es -NR1R2; en donde R1 y R2 son independientemente H o alquilo. En otro aspecto esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual Pi es un benciloxilcarbonilo y Q2 es bencilo. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual Pi es benciloxicarbonilo, y Q2 es H. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual Pi es benciloxicarbonilo, Q2 es bencilo y L es -NR1R2. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual Pi es benciloxicarbonilo, Q2 es H y L es -NR1R2.

En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual la sal del azaheterociclilseudodipéptido es copulada con la sal del dipéptido sustituido con ácido carboxílico. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual una sal básica de adición del azaheterociclilseudodipéptido es copulada con una sal acida de adición del dipéptido de ácido carboxílico. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento en el cual la sal diciciohexilamina del azaheterociclilseudodipéptido es copulada con la sal trifloroacetato del dipéptido de ácido carboxílico. En otro aspecto, esta invención esta dirigida a un procedimiento que comprende (a) copular un azaheterociclilseudodipeptido de la fórmula o una sal básica de adición del mismo, en la cual P-i es un grupo protector de nitrógeno y B es alquilo, con un dipéptido sustituido con ácido carboxílico de la fórmula o un sal acida de adición del mismo en el cual Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; J es alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo; y L es OR1 o -NR1R2, en donde R1 y R2 son independientemente H , alquilo, cicloalquilo, cicloalquialquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo o aralquilo, para preparar un seudotetrapéptido de la fórmula (b) retirar opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o el grupo protector de ácido carboxílico y (c) convertir opcionalmente el seudotetrapéptido, su sal o profármaco. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es benciloxicarbonilo y Q2 es un bencilo. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es benciloxicarbonilo y Q2 es H. En otro aspecto del procedimiento anterior, P-i es benciloxicarbonilo; Q2 es un bencilo; B es etilo; J es ciclohexilmetilo; y L es NH2. En otro aspecto del procedimiento anterior P-i es benciloxicarbonilo; Q2 es H; B es etilo; J es ciclohexilmetilo; y L es NH2. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un dipéptido sustituido con ciclohexilmetilo de la fórmula en la cual Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico y Q3 es H o un grupo protector de nitrógeno, que comprende (a) reducir un péptido sustituido con fenilmetilo de la fórmula . y (b) retirar opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o grupo 15 protector de ácido carboxílico. En otro aspecto del procedimiento anterior, la reducción se realiza mediante hidrogenación catalítica. En otro aspecto del procedimiento anterior, la hidrogenación catalítica se realiza utilizando un catalizador de platino. 20 En otro aspecto del procedimiento anterior, el catalizador de platino es óxido de platino o platino sobre alúmina. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un amido dipéptido de la fórmula fc.*a en la cual Q2 es H o una sal básica de adición, o un grupo protector de ácido carboxílico y Q3 es H o un grupo protector de nitrógeno que comprende amidar un éster peptídico de la fórmula en la cual R3 es alquilo inferior. En otro aspecto del procedimiento anterior, la amidación se realiza utilizando amoniaco en alcohol. En otro aspecto del procedimiento anterior, el alcohol es un alcohol inferior. En otro aspecto del procedimiento anterior, la amidación se realiza utilizando amoniaco en una mezcla de solventes alcohol inferior-glicol. En otro aspecto del procedimiento anterior, la mezcla de solventes de alcohol inferior-glicol comprende metanol y etilenglicol. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un compuesto de aspartame protegido de la fórmula en la cual Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; Q3 es un grupo protector de nitrógeno; y R3 es un alquilo inferior; que comprende introducir un grupo N-protector a un compuesto de aspartame de la fórmula En otro aspecto del procedimiento anterior, Q3 es benciloxicarbonilo o t-butiloxicarbonilo. En otro aspecto del procedimiento anterior, Q2 es H. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un amido dipéptido de la fórmula en la cual Q3 es un grupo protector de nitrógeno y Q2 es H, que comprende (a) agregar base y un agente N-protector a una solución de aspartame en un solvente para formar una solución de un compuesto de la fórmula en la cual Q2 es H o una sal básica de adición, y (b) introducir amoniaco en la solución resultante del paso (a). En otro aspecto del procedimiento anterior, Q3 es tert-butiloxicarbonilo o benziloxicarbonilo. En otro aspecto del procedimiento anterior, Q3 es tert-butiloxicarbonilo. En otro aspecto del procedimiento anterior, el solvente es alcohol. En otro aspecto del procedimiento anterior, el alcohol es un alcohol inferior o una mezcla de alcohol inferior-glicol. En otro aspecto del procedimiento anterior, el alcohol es metanol o una mezcla de metanol-etilenglicol. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un procedimiento para preparar un dipéptido sustituido con ciclohexilmetilo de la fórmula o una sal acida de adición del mismo, que comprende (a) preparar una mezcla de un catalizador y un péptido sustituido con fenilmetilo de la fórmula en la cual Q3 es tert-butiloxicarbonilo en un solvente, 15 (b) tratar la mezcla con hidrógeno, (c) retirar el catalizador de la mezcla, y (d) introducir HCl gaseoso en la mezcla. En otro aspecto del procedimiento anterior, el solvente es ácido acético. 20 En otro aspecto, está invención está dirigida a un procedimiento para preparar un compuesto de ácido sustituido con azaheterociclilo de la fórmula ^|ÉÉg^ggÉÍgtt^ 5 en la cual R4 es H o alquilo inferior y Pi es un grupo protector de nitrógeno, que comprende a) descarboxilar un 2-piridiletil-di-(alquilo inferior)malonato de la fórmula en la cual R5es alquilo inferior para preparar un ácido de piridilo de la fórmula: (b) hidrogenar el ácido de piridilo con hidrógeno en presencia de un catalizador para preparar un ácido de piperidina de la fórmula (c) retirar opcionalmente el catalizador; (d) proteger en el átomo de N al ácido de piperidina para preparar un ácido de piperidina protegido en el nitrógeno de la fórmula (e) copular el ácido de piperidina protegido en el nitrógeno con un compuesto de N-etilglicina de la fórmula para preparar el compuesto ácido sustituido con azaheterociclilo; y (f) opcionalmente desesterificar el compuesto sustituido con azaheterociclilo en el cual R4 es alquilo inferior. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es benciloxicarbonilo y R es H. En otro aspecto del procedimiento anterior, la descarboxilación se realiza calentando el 2-piridiletil-d¡-(alquilo inferior)malonato en una solución acida acuosa. En otro aspecto del procedimiento anterior, ácido acuoso es HCl acuoso.

En otro aspecto del procedimiento anterior, la hidrogenación se realiza en una solución acida acuosa. En otro aspecto del procedimiento anterior, el ácido acuoso es • HCl acuoso. 5 En otro aspecto del procedimiento anterior, la N-protección se realiza en una solución acuosa básica. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es benciloxicarbonilo. En otro aspecto del procedimiento anterior: 10 (a) una solución en ácido acuoso de 2-piridiletil-di-(alquilo inferior) malonato se calienta para preparar una solución del ácido de piridilo en ácido acuoso; (b) se agrega un catalizador a la solución de ácido de piridilo y la mezcla se trata con hidrógeno para formar una mezcla de catalizador y el ácido de piperidina; (c) el catalizador se separa de la mezcla para prepara una solución acuosa de ácido de piperidina; y (d) se agregan base y un agente N-protector a la solución acuosa para preparar el ácido de piperidina N-protegido. 20 En otro aspecto del procedimiento anterior, el ácido acuoso es HCl acuoso. En otro aspecto del procedimiento anterior, R es H. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es benciloxicarbonilo. En otro aspecto, está invención esta dirigida a un procedimiento para preparar un seudotetrapéptido de la fórmula o una sal o profármaco del mismo, en el cual m es 3; n es 2-6; B es alquilo; p es 1 o 2; J es ciclohexilmetilo; y L es OR-iO NR^, en donde Ri y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, que comprende (a) reducir un compuesto de la fórmula en la cual en donde m es 3 y Pi es H o un grupo protector de nitrógeno; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; y J es fenilmetilo; (b) retirar opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o el grupo protector de ácido carboxílico;, y (c) convertir opcionalmente el seudotetrapéptido a la sal o profármaco. En otro aspecto del procedimiento anterior, la reducción es mediante hidrogenación catalítica. En otro aspecto del procedimiento anterior, en donde m es 3 y Pi es un grupo protector de nitrógeno; n es 3; p es 1 ; y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico. En otro aspecto del procedimiento anterior, Pi es un grupo protector de nitrógeno que es lábil a la hidrogenación; y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico que es lábil a hidrogenación. En otro aspecto del procedimiento anterior, la reducción catalítica efectúa la reducción y remoción simultánea de Pi y Q2.

En otro aspecto del procedimiento anterior, es piridilo y Q2 es un grupo protector de ácido carboxilíco. En otro aspecto del procedimiento anterior Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico que es lábil a hidrogenación. En otro aspecto del procedimiento anterior, la reducción catalítica efectúa la reducción y remoción simultánea de Q2.

En otro aspecto, está invención esta dirigida a un seudotetrapéptido de la fórmula o una sal o profármaco del mismo en donde en donde m es 3; Pi es H o un grupo protector de nitrógeno; n es 2-6; B es alquilo; p es 1 o 2; Q2 es H o un grupo protector del ácido carboxílico; J es fenilmetilo; y L es ORi o NR-|R2 en donde Ri y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilaquilo alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo. En otro aspecto, esta invención está dirigida al seudotetrapéptido definido anteriormente en el cual en donde m es 3; Pi es un grupo protector de nitrógeno; n es 3; p es 1 ; y Q2 es un grupo protector del ácido carboxílico. En otro aspecto, esta invención está dirigida al seudotetrapéptido definido anteriormente en el cual Pi es un grupo protector del nitrógeno que es lábil a hidrogenación y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico que es lábil a hidrogenación. En otro aspecto, esta invención está dirigida a un seudodipéptido de la fórmula o una sal del mismo en la cual Pi es H o un grupo protector de nitrógeno; B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo o alquilaralquilo; y R es H o alquilo inferior. En otros aspecto, esta invención está dirigida al seudodipéptido definido anteriormente en el cual Pi es un grupo protector del nitrógeno, B es alquilo y R es H. En otro aspecto, esta invención está dirigida al seudodipéptido definido anteriormente en el cual Pi es benciloxicarbonilo y B es etilo. La presente invención se ¡lustra mediante los siguientes esquemas y ejemplos demostrativos, los cuales se presentan con propósito de ilustración y no se pretende que limiten el campo de la invención. Tal y como se utiliza posteriormente, las siguientes abreviaciones deberán entenderse con los siguientes significados: BOC (t-butiloxicarbonilo), CBZ o Z (benciloxicarbonilo), Gly (glicina), Asp (ácido aspártico), Obzl (benciloxi), TFA (ácido trifluoroacético), Cha (ß-ciclohexilalanina), EtOAc (acetato de etilo), DMF (dimetil formamida), DCC (diciciohexilcarbodiimida), HOBT (tiidroxibenzotriazol), TBTU, (tetrafluoroborato de 2-1 H-benzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3,-tetrametiluronio), DI (agua deionizada), PNP (p-nitrofenol), PFP (pentafluorofenol), DCU (diciclohexil • urea), NMM (?/-metilmorfolino) y MTBE (éter metil te/f-butílico). 5 Tal como se muestra en el esquema 1 , esta invención comprende la copulación de un azaheterociclil seudodipéptido de la fórmula IV con un dipéptido sustituido con ácido carboxílico de la fórmula V para formar al seudotetrapéptido de la fórmula I. Se entiende que en el esquema 1 , B, J, K, L, m, p, q y Q2 son como se definieron anteriormente. • 10 Durante la preparación de azaheterociclil seudotetrapéptido de la fórmula I o intermediarios del mismo, podría también ser deseable o necesario evitar la reacción cruzada entre los sutituyentes químicamente activos presentes en los seudoaminoácidos o péptidos presentes en la naturaleza. Los sustituyentes pueden ser protegidos mediante grupos protectores estándar, los cuales pueden ser subsecuentemente removidos o retenidos, según se requiera, mediante métodos conocidos para lograr los productos • deseados o intermediarios (véase por ejemplo, Green. "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 19811 ). Podría también ser necesaria o deseable la protección o desprotección selectiva para permitir la conversión o remoción de sustituyentes existentes, o para permitir reacción subsecuente para lograr el producto deseado final ESQUEMA 1 rv La copulación del azaheterociclil seudodipéptido de la fórmula IV con un dipéptido sustituido con ácido carboxílico de la fórmula IV descrito anteriormente se logra en presencia de una base orgánica tal como N-metilmorfolina, diisopropiletilamina o trietilamina. Los solventes apropiados para la reacción de copulación incluyen diclororometano, tolueno, N, N-dimetilformamida, acetato de etilo, acetonitrilo, dimetilacetamida, N-metilpirrolidina y agua, y mezclas de los mismos. Los tiempos de copulación varían desde aproximadamente 30 minutos hasta aproximadamente 24 horas, dependiendo del dipéptido y seudo dipéptido que se van a acoplar, agente de activación, solvente y temperatura. La copulación se logra a una temperatura desde aproximadamente -10°C hasta aproximadamente 50°C, de preferencia aproximadamente a temperatura ambiente. La porción de ácido carboxílico de IV de preferencia se activa con un agente activante apropiado. Los agentes activantes representativos incluyen cloroformiato de isopropilo en presencia de ?/-metilpiperidina, clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbod¡imida (EDC) en presencia de 1 -hidroxibenzotriazol (HOBT), cloruro bis(2-oxo-3-oxazolidinil)-fosfónico (BOP-CI) en presencia de trietilamina, tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotyriazole-1-il)-1 ,2,3,3-tetrametiuronium (TBTU) en presencia de diisopropiletilamina, /V-hidroxisuccinimida en presencia de N,N-diciclohexilcarbodiimida (DCC), y similares. Esta activación de preferencia se logra a una temperatura desde aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 10°C en aproximadamente 5 minutos hasta aproximadamente 5 horas. En los casos en los cuales la porción acilo-activada es estable, está podría ser preparada y aislada con anticipación para ser utilizada en la reacción de copulación. Los grupos acil-activadores apropiados para la preparación de seudodipéptidos aislables de la fórmula IV en la cual K es un grupo que activa al acilo incluye, los esteres con hidroxibenzotriazol, N-hidroxisuccinimida, pentafluorofenol, p-nitrofenol, anhídridos simétricos, haluros de acilo y similares. En la reacción de copulación descrita anteriormente en la cual K es OH, el azaheterociclil pseudodipéptido de la fórmula IV puede ser utilizado como el ácido carboxílico libre o como la sal básica de adición del ácido carboxílico. Las sales básicas de adición preferidas incluyen las sales con aminas tales como diciciohexilamina y trietilamina, y las sales con metales tales como sodio y potasio. La sal básica de adición con diciciohexilamina es especialmente preferida. Cuando se utiliza la sal básica de adición, el ácido libre se libera in situ antes de la copulación mediante reacción con un ácido apropiado. De manera similar, el dipéptido V puede ser utilizado como la base libre, la sal acida de adición, o la sal básica de adición. Las sales acidas de adición se prefieren. Las sales acidas de adición apropiadas incluyen clorhidrato, bromhidrato, trifluoroacetato, acetato y tosilato. Las sales acidas de adición especialmente preferidas incluyen clorhidrato y trifluoroacetato. El uso de sales acidas y básicas de adición es especialmente ventajoso ya que éste permite la purificación del bloque de construcción de azaheterociclil pseudodipéptidos y dipéptidos sustituidos con ácido carboxílico IV y V mediante técnicas de extracción en medio ácido-básico así como mediante recristalización de sal, con lo cual se elimina la necesidad de purificación mediante, por ejemplo, cromatografía, y permite la utilización de intermediarios como soluciones acuosas, con lo cual se hace innecesario el aislamiento de los intermediarios individuales. En un aspecto especialmente preferido de la reacción de copulación, Q2 es H. El hallazgo inesperado de que la copulación procede limpiamente sin protección de la porción de ácido carboxílico de la cadena lateral confiere varias ventajas al procedimiento. El número total de pasos se reduce ya que las reacciones de protección y desprotección se eliminan, y además, el ácido no protegido permite el aislamiento y purificación del dipéptido V y el producto de copulación I mediante técnicas de extracción en medio ácido-basico o recristalización de la sal básica de adición como se describió anteriormente.

El pseudotetrapéptido de la fórmula I en el cual el anillo A no está saturado puede ser convertido al derivado saturado mediante reducción selectiva de los dobles enlaces del anillo, por ejemplo mediante hidrogenación catalítica utilizando óxido de platino. Cualquiera de los grupos protectores del nitrógeno Pi y de los grupos protectores del ácido carboxílíco P2 presentes en el pseudotetrapéptido I también pueden ser retirados tal como se describe posteriormente. Los compuestos de la fórmula II de preferencia se preparan tal como se muestra en el esquema 2. En el esquema 2, m, n, B, K, J y L tienen los valores definidos anteriormente; Pi es un grupo N-protector lábil a ácido tal como ter-butiloxicarbonilo o un grupo N-protector lábil a hidrogenación tal como benciloxicarbonilo; y Q2 es H, un grupo protector del ácido carboxílico que es lábil a ácido tal como ter-butilo, un grupo protector del ácido carboxílico que es lábil a bases tal como metilo o etilo, un grupo protector de ácido carboxílico que es lábil a hidrogenación tal como bencilo o un grupo protector de ácido carboxílico el cual es fácilmente separado mediante metales tales como Zn o Pd(0), por ejemplo fenacilo.

ESQUEMA 2 De conformidad con el esquema 2 anterior, del seudodipeptido VI se copula con el dipeptido V como se describe en el esquema 1 anterior. El producto copulado II se purifica mediante recristalización a partir de un solvente orgánico o mezclas de solventes orgánicos, de preferencia acetato de etilo-heptano, o mediante precipitación de la sal básica de adición. La sal básica de adición preferida es la sal diciciohexilamina. La formación de sal típicamente se realiza a una temperatura desde aproximadamente la temperatura ambiente asta aproximadamente 75°C. Los solventes apropiados para la formación de la sal incluyen alcoholes, éteres, esteres y solventes apróticos polares, con o sin combinación con agua. Un sistema de solvente preferido para la formación de la sal es acetonitrilo-agua. Después de la copulación de VI y V para preparar II, el grupo protector del nitrógeno Pi y si está presente, el grupo protector de ácido carboxílico P2 se retiran de manera secuencial o en una sola operación para producir el tetrapéptido o seudopéptido Vil. Los grupos protectores lábiles a ácido de preferencia se retiran con ácido trifluoroacético. Los grupos protectores lábiles a hidrogenación de preferencia se retiran mediante hidrogenación con paladio sobre carbón. Los grupos protectores lábiles a metales se retiran mediante tratamiento con Zn o Pd(0). Los solventes para la reacción de hidrogenación de preferencia son alcoholes inferiores tales como metanol, etanol o propanol, o mezclas alcohol-agua tales como etanol-agua o propanol-agua. El seudotetrapéptido Vil se purifica mediante recristalización con alcoholes inferiores o mezclas de alcohol inferior-agua, de preferencia con metanol o etanol o mezclas de metanol y agua o etanol y agua. La preparación en los seudotetrapéptidos de la fórmula lll en conformidad con el procedimiento de está invención se señala en el esquema 3. En el esquema 3, Pi es un grupo N-protector lábil a hidrogenación; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico lábil a hidrogenación; P es alquilo; J es alquilo, cicloalquilo, o cicloalquilalquilo; y L es ORi o NR-|R2, en donde Ri y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo.

ESQUEMA 3 X De conformidad con el esquema 3 anterior, el seudodipéptido VIII se activa y se copula con el dipéptido IX tal como se describe en el esquema 1 anterior. Los agentes activadores preferidos incluyen tetrafluoro borato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-.1.1.3.3-tetrametiluronio (TBTU) en presencia de diisopropiletilamina y ?/-hidrox¡succin¡mida en presencia de N,N'-diciclohexicarbodiimida (DCC). La activación se consigue de preferencia a una temperatura desde aproximadamente 0°C hasta aproximadamente 10°C en aproximadamente 5 minutos hasta aproximadamente 5 horas.

En la reacción de copulación descrita en el esquema 3 anterior, el seudodipéptido VIII de preferencia se utiliza como la sal básica de adición. Las sales básicas de adición preferidas incluyen las sales con aminas tales como diciciohexilamina y trietilamina, y las sales con metales sales como sodio y potasio. La sal básica de adición con diciciohexilamina es especialmente preferida. El dipéptido IX de preferencia se utiliza como la sal acida de adición. Las sales acidas de adición apropiadas incluyen clorhidrato, bromhidrato, trifluoroacetato, acetato y tosilato. Las sales acidas de adición especialmente preferidas son clorhidrato y trifluoroacetato. El producto copulado lll se purifica mediante recristalización con un solvente orgánico o mezclas de solventes orgánicos, de preferencia acetato de etilo-etano, o mediante precipitación de la sal básica de adición. La sal básica de adición preferida es la sal diciciohexilamina. La formación de la sal típicamente se realiza a una temperatura desde aproximadamente la temperatura ambiente hasta aproximadamente 75°C. Los solventes apropiados para la formación de la sal incluyen alcoholes, éteres, esteres y solventes apróticos polares con o sin combinación con agua. Un sistema de solventes preferido para la formación de la sal es acetonítrilo-agua. En un aspecto especialmente preferido de la reacción de copulación del esquema 3, Q2 es H. Después de copular el seudodipéptido VIII y el dípéptido IX para preparar el producto lll, los grupos protectores lábiles a hidrogenación P-? y Q2 se retiran en una sola operación mediante hidrogenación con paladio sobre carbono. Los solventes para la reacción de hidrogenación son de preferencia alcoholes tales como metanol o etanol, o mezclas alcohol-agua tales como etanol-agua. El tetrapéptido o seudopéptido X se purifica mediante recristalización con un alcohol inferior o una mezcla alcohol inferior-agua, de preferencia con metanol o etanol o una mezcla metanol-agua o etanol-agua. La preparación del seudodipéptido representativo VIII en el cual P-? es benciloxicarbonilo y B es etilo se indica en el esquema 4. Se entiende que la metodología de síntesis descrita en el esquema 4 fácilmente se extiende a seudodipéptidos de la fórmula VIII en la cual Pi y B son diferentes a benciloxicarbonilo y etilo, respectivamente.

ESQUEMA 4 Z= benciloxicarbonilo &iJÉ De conformidad con el esquema 4 anterior, se descarboxila el éster dietilico del ácido 4,2-(4-piridil)et¡lmalonico (XI, preparado por ejemplo, mediante condensación de malonato de dietilo con 4-vinilpiridina) mediante calentamiento en ácido acuoso para dar ácido 4-(4-piridil)butanoico XII. El anillo de piridina se reduce después mediante hidrogenación catalítica para dar ácido 4-(piperidin-4-il)butanoico XIII. Se prefieren los catalizadores a base de platino tal como platino sobre carbón, óxido de platino (IV) y platino sobre alúmina. El platino sobre alúmina es particularmente preferido debido a que el catalizador puede ser fácilmente regenerado. La hidrogenación se lleva acabo en alcohol, alcohol acuoso o agua bajo una presión de hidrógeno desde aproximadamente presión atmosférica hasta aproximadamente 5 barias de hidrógeno a una temperatura desde temperatura ambiente hasta aproximadamente 70°C. Se pueden utilizar temperaturas inferiores si la presión de hidrógeno se incrementa. El átomo N de piperidilo después se protege, por ejemplo mediante reacción de XIII con base acuosa y cloroformiato de bencilo o carbonato de bencil-?/-succinimidilo para formar XIV. La copulación de XIV con /-etilgl¡cina o el éster etílico de ?/-etilglicina seguido por saponificación del éster con alcóxido acuoso provee VIII. La copulación de preferencia se realiza activando la porción de ácido carboxílico de XIV mediante conversión al cloruro de ácido, seguido por adición de N-etilglicina o éster etílico de ?/-etilglicina en presencia de una base. Las sales acidas de adición, de preferencia trifluoroacetato, de ?/-etilglic¡na o éster etílico de ?/-etilglicina pueden también ser utilizadas. Las bases apropiadas incluyen aminas tales como diisopropiletilamina o alcóxido acuoso. En una preparación especialmente preferida de VIII, el éster dietílico del ácido 2-(4-piridil)etilmalónico se lleva a ácido acuoso, de preferencia HCl acuoso y se descarboxila mediante calentamiento con reflujo. Después se agrega un catalizador como el descrito anteriormente a la solución resultante de ácido 4-(4-piridil)butanóico XIII y la mezcla se hidrogena catalíticamente para dar una solución acuosa de ácido 4-(4-piridil)butanóico XIV. Después el catalizador se filtra, la solución acida de XIV se hace básica con alcóxido acuoso y el grupo protector bencilo y carbonilo se introduce como se describió anteriormente. El ácido l-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutanóico es después extraído en un solvente orgánico y condensado con ?/-etilgl icina como se describe anteriormente para dar VIII. El procedimiento anterior es especialmente útil ya que evita el aislamiento de intermediarios y solo implica un solo paso de purificación. Los diversos intermediarios se utilizan en pasos posteriores como soluciones acuosas u orgánicas, con lo cual se reducen costos y se incrementa la eficiencia de producción. La preparación del dipéptido de la fórmula IX en el cual Q2 es H, J es ciclohexilmetilo y L es NH2 se indica en el esquema 5. Las características clave del procedimiento descrito en el esquema 5 incluyen la protección hasta hoy día no descrita de aspartame con un grupo protector lábil a hidrogenación o lábil a ácido Q3, seguido por una amidación suave con amoníaco que procede con retención de estereoquímica. Una aceleración no esperada de la reacción de amidación se presente cuando la reacción se corre en una mezcla de solvente metanol-etilenglicol.

ESQUEMA 5 Aspartame De conformidad con el esquema 5 anterior, el aspartame se protege con un grupo N-protector lábil a ácido, de preferencia ter-butiloxicarbonilo, o un grupo protector lábil a hidrogenación, de preferencia benciloxicarbonilo. El grupo protector fer-butiloxicarbonilo se introduce mediante reacción de aspartame con di-ter-butildicarbonato en presencia de una amina, de preferencia trietilamina, alcóxido, de preferencia hidróxido de litio o carbonato. La protección de preferencia se realiza a una temperatura desde aproximadamente temperatura ambiente hasta aproximadamente 50°C •J x en un solvente de alcohol inferior tal como metanol o una mezcla de solventes de alcohol inferior-glicol, tal como metanol-etilenglicol. El aspartame protegido después se amida mediante tratamiento de una solución del aspartame protegido con gas de amoníaco en alcohol para dar XVI. Los alcoholes apropiados para la amidación incluyen alcoholes inferiores, glicoles, o mezclas de los mismos. Los alcoholes preferidos son metanol, etilenglicol y mezclas metanol-etilenglicol. La amidación se realiza a una temperatura desde temperatura ambiente hasta aproximadamente 65°C en aproximadamente 6 horas hasta aproximadamente 2 días. El aspartame protegido puede ser aislado y purificado antes de la amidación, o de preferencia, amidado mediante introducción de gas amoníaco en la mezcla de reacción del paso de protección. El anillo de benceno de XVI se reduce después mediante hidrogenación catalítica para dar XVII. Los catalizadores a base de platino tales como óxido de platino (IV) y platino sobre alúmina se prefieren. El platino sobre alúmina es particularmente preferido debido a que es catalizador puede ser fácilmente regenerado. La hidrogenación se realiza en un alcohol inferior, de preferencia butanol, o un ácido orgánico saturado de C1-C10, de preferencia ácido acético. La hidrogenación se logra bajo una presión de hidrógeno desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 5 varias de hidrógeno a una temperatura desde aproximadamente 40°C hasta aproximadamente 80°C. Se pueden utilizar temperaturas inferiores si la presión de hidrógeno se incrementa. Cuando Q3 es un grupo protector lábil a hidrogenación, la 5 desprotección para proveer IX se logra simultáneamente con la reducción del anillo de benceno descrita anteriormente. Cuando Q3 es un grupo protector lábil a ácidos tales como fer-butiloxicarbonilo, la desprotección de preferencia se logra tratando una solución de XVII con HCl gaseoso. En un aspecto especialmente preferido, el grupo protector lábil a ácidos se retira mediante introducción de HCl gaseoso en la mezcla de reacción del paso de hidrogenación. Un experto en la técnica apreciará fácilmente que la presente invención está bien adaptada para realizar los objetivos de la invención y obtener los fines y ventajas mencionados, así como aquellos inherentes a la misma. Los compuestos, composiciones y métodos descritos en la presente se presentan como representaciones de las modalidades preferidas, o se pretende que sea ejemplos y no se pretenden que sean imitaciones del campo de la presente invención.

EJEMPLO í Preparación de ? -r?.-etil-?.-ri -oxo-4-(4-piperidin¡l)butillqlicil-(L)-aspartil-3- ciclohexil-(L)-alaninamida Método A Paso I: Ester fenilmetílico de N- N-et\\-N-\1 -oxo-4-H -r(fen¡lmetox¡)carbonill-4-p¡perid¡nil1butinql¡cil-(L)-a-aspart¡l-3-c¡clohexil-(L)-alaninamida A una solución de 25.9 g (66.4 mmoles) de ?/-[?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicina en 70 ml de dimetil formamida agitada magnéticamente a 0-5°C se agrega 20.9 g (65 mmoles) de tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotr¡azol-1-il)-1.1.3.3-tetrametiluronio, seguido por adición gota a gota de 17.6 g (130 mmoles) de diisopropiletilamina. La solución homogénea resultante se vierte en una mezcla agitada de 31.8 g (65 mmoles) de trifluoroacetato del éster fenilmetílico de (L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninamida en 30 ml de dimetilformadida a 0-5°C. Se agrega diisopropiletilamina para obtener un pH neutro a ligeramente básico. La mezcla resultante se retira del baño frío y se agita a 23°C durante la noche. La mezcla se diluye con agua y se extrae con 4 porciones de acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo combinados se lavan con ácido cítrico acuoso 0.5N (3x), salmuera, solución saturada de bicarbonato de sodio acuoso (3x) y salmuera (2x), se seca con sulfato de magnesio, se filtra y se concentra al vacío para dar un aceite que solidifica en reposo como un sólido de color canela claro (50.97 g, 90.9% puro). "Una porción de 36 g del sólido se recristalizó con acetato de etilo/heptano, para dar el compuesto del título (24 g, 95% analíticamente puro). MS (FAB)m/z 748, (M+Na)+_771.

Paso 2: ?.-r?/-et¡l-?/-í1 -oxo-4-H -[(fenilmetoxQcarbonilH-piperidin¡l1butil1ql¡cil-(L)-a-aspartil-3-c¡clohexil-(L)-alaninamida Se disolvió éster fenilmetílico de ?/-[/V-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-p¡peridinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninamida, preparado como en el paso 1 en metanol y se agregó 10% de paladio/carbón. La mezcla se agita bajo hidrógeno a 3.51 kg/cm2 durante aproximadamente 18 horas. La mezcla se filtra a través de una almohadilla de Celita y el material filtrado se evapora al vacío para dar ?/-[?/-etil-A/-[1 -oxo-4-(4-piperidinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninamida. MS (FAB) m/z 524 (M+H)+. RMN (300 MHz, D2O) d 8.4 (1 H, d), 8.1 (1 H, d), 4.2 (2H, q), 4.1 (1 H, s), 3.9 (4H, q), 3.4 (2H, q), 3.3 (4H, d), 2.8-3.0 (6H, m), 2.4, (2H, t), 2.2 (1 H, m), 1.8 (4H, d), 1.4-1.7 (7H, m), 0.7-1.3 (10H, m).

Método B Paso 1 : ?-F?-etil-?-ri -oxo-4-f 1 -[(fenilmetoxQcarbonilM-piperid¡nillbut¡pgl¡c¡l-(L)-a-aspart¡l-3-ciclohex¡l-(L)-alaninamida A una suspención de ?/-[?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1- [(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicina diciciohexilamina (112.5 kg) en tolueno (550 kg) y agua (570 kg), se agrega ácido sulfúrico acuoso (210 kg) a aproximadamente 30°C en un reactor forrado con vidrio de 2300 litros. Después de decantar, la solución de tolueno se lava con una solución de ácido sulfúrico acuoso (210 kg) y agua (390 kg). La mezcla se decanta y la fase orgánica se lava con agua (390 kg) y se seca mediante destilación hasta que el contenido de agua residual esté por debajo de 0.5%. Se agregan acetonitrilo (220 kg) y ?/-hidroxisuccinimida (27 kg) a la solución de tolueno. La suspensión resultante se enfría hasta aproximadamente 5°C bajo nitrógeno y se agrega una solución de dicilochexilcarbodiimida (45 kg) en tolueno (35 kg) en un período de 1 hora y la mezcla de reacción se agita por otras 5-6 horas. Se agrega clorhidrato de (L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninamida (75 kg) y trietilamina (80 kg) a la mezcla y la agitación se continúa durante otras 2 horas. La mezcla de reacción se diluye con agua (370 kg). La suspensión resultante se filtra, la torta de material filtrado se lava con agua (30 kg) y los filtrados combinados se transfieren a un reactor de acero inoxidable de 2300 litros. Se agrega acetato de etilo (347 kg) a la solución. Después de decantar la fase orgánica, la fase acuosa se acidifica con ácido clorhídrico (515 kg) y se extrae con acetato de etilo (347 kg). La fase orgánica se lava dos veces con cloruro de amonio al 20% acuoso (109 kg) y se concentra al vacío. Se agregan acetonitrilo (1560 kg) y agua (45 kg), la solución se calienta a aproximadamente 75°C y se agrega diciciohexilamina (35 kg) en el transcurso de 1 hora. La solución se siembra con ?/-[/V-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetox¡)carbonil]-4-piperid¡nil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninamida y se mantiene durante 1 hora a 75°C. Después la suspensión se enfría a 20°C en el transcurso de 6 horas y se filtra. La torta de filtro se lava tres veces con acetonitrilo (100 kg) y se seca a presión reducida hasta aproximadamente 40°C para dar el compuesto del título (125 kg) como la sal diciciohexilamina.

Paso 2: N-r?/-et¡l-?/-M -oxo-4-(4-piper¡din¡l)butillqlic¡l-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alaninam¡da Después de una purga completa de un hidrogenador con nitrógeno, una suspensión de diciciohexilamina de N-[?/-etil-?/-[1-oxo-4-(1-[(fenilmetoxi) carbonil]-4-piperidinil)but¡l]glicil-(L)- -aspartil-3-ciclohexi-(L)-alanineamida (124 kg) y paladio húmedo sobre carbón (2 kg, 50% húmedo, 5%) en una mezcla de etanol absoluto (440 kg) y agua purificada (42 kg), es hidrogenada a aproximadamente 25°C bajo una presión de hidrógeno de 2 barias durante 1 hora. Después de una purga con nitrógeno, el catalizador se filtra y se lava con una mezcla de etanol absoluto (65 kg) y agua purificada (5 kg). El producto filtrado se calienta a aproximadamente 60°C, se añade acetona (425 kg), y la mezcla se siembra con N-[?/-etil-?/-[1-oxo-4-(4-p¡per¡din¡l)butil]glicil-(L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida (1.1 kg). La suspensión se enfría a 20°C, y se filtra sobre un secador con filtro agitado. La torta del filtro se lava con etanol absoluto (100 kg), y se seca en vacío a aproximadamente 40°C para dar el compuesto del título (61 kg) como un sólido cristalino blanco.

Método C Paso 1 : éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-ri-oxo-4-(4-pir¡d¡nil)butill-glic¡l-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninam¡da En un matraz de un litro bajo N2, se prepara y se enfría a 1 °C una solución de 15.1 g (0.06 moles) de ?/-etil-/V-[1-oxo-4-(4-piridinil)butil]glicina en 200 ml de diclorometano. Una solución de 6.95 ml (0.055 moles) de cloroformiato de ter-butilo en 25 ml de diclorometano se prepara, se enfría a 1 °C y se añade gota a gota durante 45 minutos, mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción a 1 °C. La mezcla se agita a 1 °C durante 3 horas. En un recipiente separado de 800 ml, 20 g (0.0498 moles) de mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de L-a-aspartil-L-fenilalaninamida se disuelven en 200 ml de diclorometano, y la mezcla se trata mediante adición, gota a gota, con 15.8 ml (0.11 moles) de trietilamina, produciendo una solución la cual se añade durante 1 hora al anhídrido preparado anteriormente a 1 °C. La mezcla se agita a -2°C durante 1 hora, se lava entonces con 250 ml de agua, 250 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado, 250 ml de ácido clorhídrico acuoso a 0.14 M, y entonces 250 ml de agua. La fase orgánica se verifica mediante HPLC para la presencia del material de partida sin reaccionar, y el ciclo de lavado se repite hasta que deja de observarse reducción adicional en los valores máximos de HPLC correspondientes. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra, se concentra entonces en vacío, y el aceite residual se coloca bajo vacío para aumentar al máximo la remoción del solvente para producir 23.5 g (79.3% de rendimiento; 96.8% analíticamente puro) de éster fefvifmetílico de ?/-etil-/V-[1 -oxo-4-(4- piridinil)butil]glicil-(L)- -aspartil-(L)-fenilalaninamida.

Paso 2: AZ-etil-AZ-H -oxo-4-(4-p¡per¡din¡l)butillgl¡c¡l-(L)-a-aspartil-3- 5 c¡clohexil-(L)-alanineamida A una solución de 76 mg de éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-[1 -oxo- 4-(4-piridinil)but¡l]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida (0.126 mmoles) en 1 ml de 9:1 de isopropanol/agua, se añaden 6 mg de Pt2O-H2O (Pt de 79-84%), y entonces 1.6 µl de ácido clorhídrico acuoso a 1 N. La mezcla se agita y se expone a hidrógeno a 4 barias a 23°C durante 5 horas 40 minutos, y entonces durante 1 hora 45 minutos a 60°C. La mezcla se filtra y el producto filtrado se analiza mediante HPLC para mostrar un consumo del 100% del material de partida para producir ?/-etíl-?/-[1-oxo-4-(4-piperidinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-3- ciclohexil-(L)-alanineamida con trazas de éster ciclohexilmetílico de /V-etil-?/- 15 [1 -oxo-4-(4-piridinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida. Método D • Paso 1 : éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-ri-oxo-4-[1-f(fenilmetoxi)- carbon¡n-4-p¡perid¡n¡nbut¡llql¡cil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida 20 A una solución de 11.1 g (28.4 mmoles) de ?/-etil-A/-[1 -oxo-4-[1 - [(fenilmetoxi)carbon¡l]-4-piperidinil]butil]glicina en 44 ml de acetato de etilo, se añaden 6.13 g (28.7 mmoles) de diciciohexilcarbodiimida sólida, mientras se mantiene la temperatura entre 25°C y 33°C, tiempo durante el cual se forma un precipitado (diciclohexil urea). En un recipiente separado, una suspensión de 10.97 g (27 mmoles) de mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de L-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida en 88 ml de acetato de etilo, se trata con 4.2 ml (29.7 mmoles) de trietilamina. La mezcla se agita durante 15 minutos, dando disolución simultánea del dipéptido y precipitación del clorhidrato de trietilamina. La suspensión se añade a la suspensión de la ?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperídin¡l]butil]glicina activada preparada anteriormente, mientras se mantiene la temperatura entre 27°C y 29°C. La mezcla se agita durante 1 hora, tiempo durante el cual la suspensión se vuelve densa. Se añaden otros 100 ml de acetato de etilo, y la mezcla se agita durante otra hora. Se añade una porción de agua de 60 ml, dando una mezcla de 2 fases líquidas fácilmente agitables y dicliclohexil urea sólida suspendida, la cual se filtra. El producto filtrado se lava con 60 ml de bicarbonato de sodio acuoso saturado, 60 ml de ácido clorhídrico acuoso a 1 N y 60 ml de cloruro de sodio acuoso saturado, y entonces la fase orgánica se seca sobre sulfato de sodio. La mezcla se filtra y se concentra en vacío, y el residuo se calienta a 50°C bajo 1 mm de Hg para producir 17.6 g de éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-í1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-p¡peridinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida. Una muestra de 400 mg se carga sobre Dowex 50WX2 (10 g) lavado previamente (ácido clorhídrico acuoso a 2 N, agua, entonces 1 :1 de agua/etanol), y se recoge mediante elución con 50 ml de 70/30 de etanol/agua, y entonces sobre Amberlyst A26 (10 g) lavado previamente (hidróxido de sodio a 2 N, agua, entonces 1 :1 de etanol/agua), eluyendo con 50 ml de 70:30 de etanol/agua. El eluyente que contiene al producto se concentra en vacío, seguido de remoción de solvente adicional bajo vacío a 50°C (5 mm de Hg) para dar 350 mg de éter fenilmetílico de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-{1-[(fenilmetoxi)carbon¡l)-4-piperidinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida.

Paso 2: ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-(4-p¡peridinillbutil1qlicil-(L)-a-aspartil-3-cicIohexiKD-alanineamida En tubo seco para RMN de zafiro de 2 ml se colocan 25 mg (0.03 mmoles) de éster fenilmetílico de V-etil-?/-[1-oxo-4-[1-([fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida, 12 mg de PtO2-H2O (Pt de 79-84%) y 1 ml de 85/12 en v/v de ácido acético/ácido clorhídrico acuoso a 2N. La mezcla se agita bajo 4 barias de hidrógeno a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla se filtra entonces usando un filtro Millipore Milex. El análisis de HPLC del producto filtrado mostró 100% de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-(4-piperidinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida.

Método E En un matraz de 100 ml equipado con un agitador magnético, se colocan 1.12 g (1.51 mmoles) de éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 [(fen¡lmetox¡)carbonil]-4-piperidinil]but¡l]glicil-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalanin-amida, 107 mg de Pd/C a 5% y 10 ml de 9:12 de propanol/agua. El recipiente se purga con argón a 40°C, entonces la mezcla se calienta a 50°C con agitación vigorosa, y el recipiente se purga varias veces con hidrógeno. La mezcla se agita a 50°C bajo hidrógeno a una presión de 1 baria durante 5 horas, se enfría entonces a temperatura ambiente, se filtra, y el producto filtrado se concentra en vacío para producir 713 mg (90% de rendimiento) de ?/-etil-/V-[1-oxo-4-(4-piperidin¡l)butil]glic¡l-L-a-aspart¡l-(L)-fenilalaninamida. Se coloca una porción de 50 mg, junto con 50 mg de Rh/AI2O3 (Engelhard) y 1 ml de ácido acético en una ampolleta de vidrio, y la mezcla se agita durante 17 horas a 80°C bajo hidrógeno a una presión de 4 barias. El análisis de HPLC muestra 100% por área de ?/-etil-A/-[1-oxo-4-(4-piperidinil)but¡l]gl¡cil-(L)-a-aspartil-3-c?clohexil-(L)-alanineamida.

Método F Se prepara la ?/-etil-/V-[1-oxo-4-(4-piperidinil)butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida usando el procedimiento del método A anterior, excepto sustituyendo con ?/-etil-?/-[1-oxo-3-[1-(fenilmetoxicarbonil)-4-piperidinilmetilen]propil]glicina la A/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]gl?cina.

EJEMPLO 2 Preparación de ?-r?/-etil-?-ri -oxo-4-piperid¡nipbutiHglicil-.L)-a-aspartil-3- ciclohexil- L)-alanina Paso 1 : éster bisfenilmetílico de ?/-[?/-etil-?/-f 1 -oxo-4-[1 - [(fenilmetoxi)carbon¡ll-4-piperid¡n¡l)butinqlicil-(L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina A una suspensión agitada de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil)butil]glicina (0.858 g, 1.5 mmol) en 4 g de dimetilformamida a 5°C, se añade tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-1.1.3.3-tetrametiluronio (0.482 g, 1.5 mmol) en una sola porción, y la mezcla se agita durante 3 minutos a 5°C. Se añade diisopropiletilamina (0.482 g, 1.5 mmol), y la mezcla heterogénea resultante se añade mediante pipeta Pasteur a una solución de 0.755 g (1.5 mmol) de mono(clorhidrato) de éster bisfenilmetílico de (L)-a-aspartil-3-ciclohexi-(L)-alanina en 4 g de dimetilformamida. Se usa otro gramo de dimetilformamida para el enjuague, y se añade una porción adicional de 0.16 g (0.5 mmol) de diisopropiletilamina para hacer la mezcla ligeramente básica. El baño de enfriamiento se remueve, y la suspensión se agita a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla heterogénea resultante de color anaranjado se separa entre éter ter-butílico de metilo y H2O. La fase acuosa se extrae con éter ter-butílico de metilo. Las fases orgánicas combinadas se lavan sucesivamente con HCl acuoso a 1 N, agua, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera, se secan sobre MgSO y se mgüggül concentran en vacío para producir éster bisfenilmetílico de ?/-[?/-etil-?/-[1 -oxo- 4-[1-[(fen¡lmetoxi)carbonil]-4-p¡peridinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)- alanina (1.21 g) como una resina de color ámbar. MS (aspersión de ¡ones) m/z 839 (M+H)".

Paso 2: ?/-f?/-etil-/V-f 1 -oxo-4-piperid¡nil1butil1qlicil-(L)-a-aspartil-3- cicIohexi D-alanina Una solución de 10.23 g (12.2 mmoles) de éster bisfenilmetílico de ?/-[?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicil-(L)-a- 10 aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina en 200 ml de 2-propanol/agua a 90% en v/v, se vierte sobre 2 g de Pd/C a 5% (NO/W tipo E101 Degussa, 50% en peso de agua) en un matraz de 500 ml con agitador Parr. La mezcla se agita durante la noche a 2.81 kg/cm2-3.51 kg/cm2 de hidrógeno, y entonces se filtra. El producto filtrado se concentra para dar ?/-[?/-etil-?/-[1-oxo-4- 15 piperidinil]butil]glicil-(L)- -aspartíl-3-c¡clohexil-(L)-alanina (6.47 g) como un sólido vitreo. MS (aspersión de iones) m/z 525 (M+H)". • _Í= Preparación de ácido ? -r? -et¡l-/V-ri-oxo-4-(4-piperid¡n¡l)butillqlicil-(L)-a- aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico Paso 1 : éster bisfenilmetílico de ácido ?/-r?.-etil-?/-í1 -oxo-4-f 1 -f(fenilmetoxi)carbon¡ll-4-p¡peridinil1butinql¡cil-(L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico A una solución de 0 a 5°C agitada magnéticamente de 26.38 g (44.4 mmoles) de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicina en 70 ml de dimetil formamida, se añaden 15.7 g (48.8 mmoles) de terafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1-il)-1 , 1 ,3,63-tetrametíluronio seguido de la adición, gota a gota, de 12.9 g (99.6 mmoles) de diisopropiletilamina. La solución resultante se vierte en una suspensión de 19 g (48 mmoles) de mono(trifluoroacetato) de éster bisfenilmetílico de ácido L-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico en 20 ml de dimetil formamida de 0 a 5°C. La mezcla resultante se remueve del enfriamiento, y se deja agitando a 23°C durante la noche, para dar una solución homogénea. La mezcla se diluye con agua, lo cual hace que se separe un aceite anaranjado. Se añaden éter ter-butil metílico y agua, la capa orgánica se remueve, y la capa acuosa se extrae dos veces con éter ter-butil metílico. Las capas orgánicas combinadas se lavan dos veces con ácido clorhídrico acuoso a 1 N, dos veces con hidróxido de sodio acuoso a 1N y dos veces con salmuera, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran en vacío para dar un aceite el cual se deja bajo alto vacío durante dos días. El aceite (33.4 g) se purifica mediante gel de sílice (acetato de etilo a 80%/heptano) para dar éster bisfenilmetílico de ácido ?/-[?/-etil-?/-[1-oxo-4-[1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-4-ciclohex¡l-2-(L)-am¡nobutanoico (27.8 g, 73%).

Paso 2: ácido ?/-f?/-etil-?/-|"1-oxo-4-(4-piper¡d¡nil)butinql¡c¡l-(L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico Una solución de 1.2 g (1.4 mmoles) de éster bisfenilmetílico de ácido ?/-[?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicil-(L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico, preparado como en el paso 1 , en 12 ml de dioxano, se vierte en un matraz de 500 ml con agitador Parr conteniendo 83 mg de Pd/C a 10% en 5 ml de agua y 3 ml de dioxano. La mezcla de reacción se agita durante la noche a temperatura ambiente (aproximadamente a 23°C) bajo 3.16 kg/cm2 de hidrógeno. La mezcla se filtra a través de un lecho de Celite en un embudo de vidrio concrecionado con medio, y la torta del filtro se lava con una mezcla de dioxano y agua. La solución se liofiliza, y el sólido blanco esponjoso resultante se vuelve a disolver en una cantidad mínima de agua, y se liofiliza de nuevo para dar el compuesto del título como un sólido blanco esponjoso (710 mg, 93%). MS (FAB) m/z 539,561 (M+Na)+.

EJE f LO 4 Preparación de trifluoroacetato de éster etílico de JV-etilglicina Paso 1 : éster etílico de /V-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil1-?/-etilql¡cina A una solución a 3°C de 86 g (423 mmoles) de A/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]?/-etilglicina, 21.4 g (465 mmoles de etanol y 5.17 g (42.3 mmoles) de 4-dimetilaminopiridina en 600 ml de diclorometano, se añaden 47 g (46.2 mmoles) de trietilaminna, seguido de la adición en porciones de 89.1 g (46.5 mmoles) de clorhidrato de 3-?/,?/-dimetilaminoprop¡letilcarbodiimida. La mezcla agitada se deja calentando a temperatura ambiente, y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se lava con agua, bicarbonato de sodio acuoso saturado y salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra en vacío para dar éster etílico de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-/V-etilglicina (88 g) como un aceite. MS (FAB) 232 (M+H)+.

Paso 2: trifluoroacetato de éster etílico de ?/-et¡lglic¡na Una solución agitada de 30.8 g (113 mmoles) de éster etílico de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-?/-etilglicina en 50 ml de diclorometano a 3°C, se trata con 200 ml de 1 :1 (volumen/volumen) de ácido trifluoroacético en diclorometano. La mezcla de reacción se agita durante 2 horas, mientras se calienta a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentra en vacío, y el aceite residual altamente móvil se somete a alto vacío para dar el compuesto deseado (55.2 g), el cual se usa sin purificación adicional.

EJEMPLO 5 Preparación de ? -etilglicina A una mezcla a 5°C bajo nitrógeno, de etilamina (25 kg) e isopropanol (100 kg) en un reactor de 250 litros revestido de vidrio, se añade una solución de ácido glioxílico (25 kg) en isopropanol (25 kg) durante 2 a 3 horas, y la solución se hidrogena con paladio sobre carbón (50% húmedo, 5%, 2.5 kg) durante 3 horas bajo 50 mbarias de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtra entonces, y el producto filtrado se concentra. Se añade isopropanol 10 (80 kg) a la suspensión, y el sólido se filtra, se lava dos veces con isopropanol (7 kg), y se seca en vacío a aproximadamente 40°C para dar ?/-etilglicina (21 kg) como un sólido cristalino blanco.

EJEMPLO 6 15 Preparación de ?/-etil-?f'-ri-oxo-4-f1-r(fenilmetoxi)carbonill-4- piperidinillbutinglicina • Método A Paso 1 : ácido 1-í(fenilmetoxi)carbon¡n-4-p¡perid¡nbutano¡co 20 A 100 g (622 mmoles) de malonato de dietilo a 25°C, se añaden 88 g (272 mmoles) de etóxido de sodio etanólico a 21 % (p/p) durante 20 minutos, mientras se mantiene la temperatura de 23 a 25°C. La mezcla se agita durante 10 minutos y se añaden 26.18 g (248 mmoles) de 4-vinilpiridina.

La mezcla se calienta a 85°C y se agita durante 3 horas, y entonces se agita durante 15 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentra a 44°C para remover el etanol, y el aceite amarillo resultante se • somete a alto vacío para remover el solvente residual. El aceite se separa 5 entre éter ter-butil metílico y HCl acuoso a 2.2N. La fase acuosa se ajusta a pH 6 con hidróxido de sodio acuoso a 2N. Las capas se separan y la fase orgánica se lava dos veces con salmuera. La fase orgánica se extrae entonces con HCl acuoso a 2.2N (3x). Los extractos acuosos combinados se calientan a reflujo durante la noche. La solución resultante (225 ml, 248 mmoles posibles) se vierte sobre 2.5 g de óxido de platino hidratado en un matraz de 500 ml con agitador Parr, y se agita durante la noche bajo 3.30 kg/cm2-3.86 kg/cm2 de hidrógeno. La mezcla se filtra, y el producto filtrado se enfría a 10°C y se trata con 417 ml de hidróxido de sodio acuoso, mientras se mantiene la temperatura de reacción a 10°C o menos para alcanzar un pH de 14 (se requieren aproximadamente 40 minutos). A la mezcla agitada se añaden 100 ml de terahidrofurano, seguido de la adición, durante 30 minutos, de 68 g (273 mmoles) de ?/-succinimidil carbonato de bencilo en 150 ml de tetrahidrofurano, mientras se mantiene la temperatura a 8°C. La mezcla se calienta a temperatura ambiente y se agita durante la noche. La mezcla se extrae con éter ter-butil metílico (3x), acetato de etilo, éter ter-butil metílico, acetato de etilo y éter ter-butil metílico. La fase acuosa se enfría a 5°C, se acidifica a pH 1.9 mediante la adición lenta de 27 ml de ácido clorhídrico concentrado, y se extrae con éter ter-butil metílico (3x). Las capas orgánicas combinadas de la extracción se lavan con salmuera, se secan con sulfato de magnesio, se filtran y se concentran en vacío para proveer ácido 1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutano¡co (42 g, 55% de rendimiento a partir de vinil piridina. MS (FAB) m/z 306.

Paso 2: éster etílico de ?/-etil-?/-[1-oxo-4-f1-r(fenilmetox¡)-carbonin-4-piperidinillbutillqlicina A una solución agitada a 3°C de 40.7 g (133.3 mmoles) de ácido 1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutanoico en 667 ml de diclorometano, se añaden 0.5 ml de dimetil formamida y, gota a gota, 66.8 ml de cloruro oxálico a 2M en diclorometano. La mezcla de reacción se mantiene de 3 a 4°C durante la adición, y entonces se agita a esa temperatura durante la noche. La mezcla de reacción se concentra en vacío. El aceite resultante de color miel y 133.3 mmoles de trifluoroacetato de éster etílico de /V-etilglicina, se disuelven en 250 ml de diclorometano a 3°C. A la mezcla agitada se añaden 52.84 g (408 mmoles) de diisopropiletilamma. La mezcla se deja calentando a temperatura ambiente con agitación durante 2 horas, punto en el cual la HPLC muestra que la reacción ha concluido. La mezcla de reacción se concentra en vacío, y el aceite resultante se disuelve en éter ter-butil metílico. La solución de éter ter-butil metílico se lava con agua (2x), y las capas acuosas combinadas se extraen con éter ter-butil metílico. Las soluciones orgánicas combinadas se lavan con hidróxido de sodio acuoso a 1 N (3x), salmuera (2x), se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran en vacío para dar éster etílico de ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fe^ etoxi)carbonil]-4-pipefidinil]butil]glícina (46.69 g), el cual se usa sin purificación adicional. MS (FAB) m/z 419 (M+H)+.

Paso 3: ?/-etil-?/-p -oxo-4-M -rffenilmetoxi .carbonilM-piperidinill-butillglicina A una solución de 46.7 g (112 mmoles) de éster etílico de ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicina en tetrahidrofurano a temperatura ambiente, se añaden 200 ml de hidróxido de sodio acuoso a 1N, y la mezcla heterogénea se agita vigorosamente durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentra en vacío, y la mezcla acuosa residual se diluye con agua y se extrae con éter ter-butil metílico (3x). La capa acuosa se acidifica a pH 3 con bisulfato de potasio, haciendo que se forme un aceite. La mezcla se extrae con éter ter-butil metílico (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera (2x), se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran en vacío. El aceite resultante se somete a alto vacío para dar ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-[1 -[(fen¡lmetox¡)carbonil]-4-piperidinil]-butil]glic¡na (35.5 g). MS (FAB) 391 (M+H)+.

Método B A una solución a 0°C de 2.1 g (6.88 mmoles) de ácido 1- [(fenilmetoxi)carbon¡l]-4-piperid¡nbutanoico en 36 ml de diclorometano, se añaden 3.6 ml de cloruro de oxalilo a 2 M en diclorometano y 0.25 ml de dimetilformamida. La mezcla de reacción se agita a 0°C durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se concentra en vacío, y el residuo se trata azeotrópicamente 2 veces con tolueno. Una solución acuosa de 2.06 g (19.9 mmoles) de /V-etilglicina en • 18.7 ml de agua, se enfría a 5°C y se añade en porciones 3.78 g (35 mmoles) 5 de carbonato de sodio sólido, seguido de una solución de 6.88 mmoles (crudo, supuesto), de cloruro de ácido 1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutanoico en 8 ml de tetrahidrofurano. La mezcla se calienta a temperatura ambiente y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se diluye con agua y se extrae con acetato de etilo (3x). La fase acuosa se acidifica hasta pH 2 con bisulfato de potasio acuoso, y se extrae con éter ter-butil metílico. La capa orgánica se concentra en vacío para producir 2.21 g de un aceite (MS correcta para el producto deseado). El aceite se purifica usando HPLC de fase invertida preparativa (C-18, 2" X 250 cm, tamaño de partícula de 15 µ, tamaño de poro de 300 Angstroms) usando acetonitrilo acuoso impurificado con 0.1 % en v/v ácido trifluoroacético, sobre un gradiente de 36-45% de acetonitrilo. Las fracciones que contienen al producto se reúnen, y la solución se congela y se liofiliza. El aceite resultante se recoge en acetato de etilo, la solución se concentra en vacío, y el aceite resultante se somete a alto vacío para dar N- etil-?/-[1-oxo-4-[1-[(fenilmetox¡)carbonil]-4-piperidinil]butil]glicina (1.01 g, 36% de rendimiento). MS (FAB) m/z 391 (M+H)+.

Método C Paso 1 : clorhidrato de éster dietílico de ácido 2-(4- piridil.etilmalónico Una mezcla bajo nitrógeno de etóxido de sodio a 20% en etanol (263.2 kg) y malonato de dietilo (703 kg) en un reactor de 1600 litros revestido de vidrio, se destila a temperatura atmosférica hasta una temperatura de 108°C. Se añade 4-vinilpiridina (80.5 kg) durante 3 horas, y la mezcla de reacción se agita durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfría entonces a temperatura ambiente, y se añade agua (358 kg) durante aproximadamente 1 hora. El pH se ajusta a 4.5 con ácido clorhídrico acuoso a 33%, y la capa acuosa se extrae con éter ter-butil metílico (216 kg). Entonces, se añade agua (357.5 kg), y la mezcla bifásica se acidifica hasta pH 1 con ácido clorhídrico acuoso a 16.5% (29.6 kg). Las capas se separan, y la solución acuosa de clorhidrato de éster dietílico de ácido 2-(4-piridil)etilmalónico se usa como está.

Paso 2: clorhidrato de ácido 4-(4-pirid¡l)butanoico La solución acuosa de clorhidrato de éster dietílico de ácido 2-(4- piridil)etilmalónico preparada en el paso 1 , se destila a presión atmosférica 20 hasta una temperatura de 105°C para remover el éter ter-butil metílico y el etanol, y se añade ácido clorhídrico acuoso a 33% (67 kg) durante 50 minutos. La mezcla de reacción se agita durante aproximadamente 6 horas a aproximadamente 105°C, y se concentra entonces para obtener M-frl .¿^~ ^?ijß^^¿Mg¡ ¿É^^^^^^^ aproximadamente 530 kg de destiladora íézcla se deja enfriar a 60°C, y se añade ácido acético (591 kg). La destilación se continúa bajo presión reducida (10 mm de Hg) para obtener un nivel de 6.6% de agua en la mezcla de reacción. A la suspensión se añade acetona (374 kg), y la suspensión se enfría a 15°C durante 3 horas. La suspensión se agita a 15°C durante 1 hora, y el precipitado se filtra, se lava dos veces con acetona (94 kg) y se seca en vacío durante 24 horas a 40°C para dar clorhidrato de ácido 4-(4-piridil)butanoico (126 kg). El sólido se disuelve entonces en agua (300 kg) para dar una solución acuosa a 30% en p/p, la cual se usa como en el paso 3.

Paso 3: clorhidrato de ácido 4-(4-p¡per¡diQbutano¡co A la solución acuosa a 30% de clorhidrato de ácido 4-(4-piridil)butanoico preparada en el paso 2 (208.9 kg) y agua (145 kg), se añade platino sobre carbón (50% húmedo, 5%, 2.52 kg). La mezcla se hidrogena a aproximadamente 70°C bajo presión atmosférica durante 15 horas, y se deja entonces enfriar a temperatura ambiente. El catalizador se filtra y se lava con agua (20 kg). La solución acuosa resultante a 16% de clorhidrato de ácido 4-piperidinbutanoíco (388.5 kg), se usa como en el paso 4.

Paso 4: ácido 1-r(fen¡lmetoxi)carbon¡n-4-p¡peridinbutanoico El clorhidrato de ácido 4-(4-piperidil)butírico sólido (124 kg) se disuelve en agua (600 kg), o la solución acuosa a 16% de clorhidrato de ácido 4-(4-piperidil)butírico preparado en el paso 3 (777 kg), se diluye con hidróxido de sodio acuoso (289 kg) en un reactor de 1600 litros revestido de vidrio enfriado a 5°C. Se añade cloroformiato de bencilo (112 kg) durante un período de 2 a 3 horas, y la solución se calienta a aproximadamente 25°C. La mezcla de reacción se extrae con éter ter-butil metílico (476 kg). La capa acuosa se acidifica entonces con ácido clorhídrico (187 kg), y se extrae con tolueno (450 kg). La capa orgánica se lava con agua (240 kg) y se seca mediante destilación azeotrópica a presión atmosférica bajo nitrógeno. La solución resultante de ácido 1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutanoico en tolueno se usa como está en el paso 5. Peso del producto en solución: 179 kg. Calidad: aproximadamente 35% en p/p en tolueno.

Paso 5: diciciohexilamina de ?/-et¡l-?.-[1-oxo-4-H-f(fenilmetoxi)carbonil1-4-p¡perid¡n¡l1butil1qlicina A la solución de ácido 1-[(fenilmetoxi)carbonil]-4-piperidinbutanoico en tolueno preparada en el paso 4 (253 kg) bajo nitrógeno, se añade cloruro de tionilo (42 kg). La mezcla de reacción se diluye con éter ter-butil metílico (85 kg), y se agita durante aproximadamente 24 horas a aproximadamente 15°C en un reactor de 630 litros revestido de vidrio. Esta solución se añade a una mezcla bifásica de agua (177 kg), hidróxido de sodio acuoso a 30% (227 kg), ?/-etil glicina (36 kg) y éter ter-butil metílico (65 kg) en un reactor de 1600 litros revestido de vidrio durante 4 a 5 horas, y la mezcla se agita durante aproximadamente 30 minutos. La mezcla bifásica se diluye entonces con agua (100 kg) y se acidifica hasta pH 6.5 con ácido clorhídrico.

La fase acuosa se lava con éter ter-butil metílico (65 kg) y se añade acetato de etilo (157 kg) a la fase acuosa. La mezcla bifásica se acidifica hasta pH 4 con ácido clorhídrico (84 kg). Las capas se separan y se añade acetato de etilo (385 kg) a la fase orgánica. La fase orgánica se calienta a aproximadamente 60°C, y se añade una solución de diciciohexilamina (63 kg) en acetato de etilo (230 kg). La mezcla se siembra y se enfría a aproximadamente 10°C. El sólido se filtra, se lava dos veces con acetato de etilo (150 kg) y se seca en vacío a aproximadamente 40°C para dar el compuesto del título (139 kg) como un sólido cristalino blanco.

EJEMPLO 7 Preparación de ?/-et¡l-/V-f1-oxo-4-(4-pirid¡nil)butillglic¡na Paso 1 : mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de ?/-etil glicina A 250 ml de una solución de etilamina a 2M en tetrahidrofurano, se añaden 47.2 g (0.2 moles) de bromoacetato de bencilo en 50 ml de tetrahidrofurano durante 0.5 horas, mientras se mantienen la temperatura de reacción de 22°C a 26°C. La mezcla de reacción se enfría entonces a 2°C, punto en el cual el bromhidrato de etilamina se cristaliza y se recoge mediante filtración. El producto filtrado se concentra en vacío a 30°C para producir 39.4 g de un residuo amarillo. El residuo se recoge en 250 ml de 2-propanol con agitación, dando un sólido blanco, el cual se recoge mediante filtración. Al producto filtrado se añade, con agitación fuerte, 59 ml de ácido clorhídrico a 3.6 N en 2-propanol, la mezcla se ^gita, y el sólido blanco resultante se recoge mediante filtración. El residuo se seca para producir 32.5 g de sólido. Este material se tritura con 100 ml de tetrahidrofurano, entonces 100 ml de 2-propanol, y se seca para producir 30 g (0.13 moles, 65% de rendimiento, 87% analíticamente puro) de mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de ?/-etil glicina.

Paso 2: éster fenilmetílico de ?/-etil-?/-[1 -oxo-4-(4-piridiniPbutilIqlicina Una solución de 32.5 g (0.16 moles) de ácido 4-piridinbutírico y 17.53 ml (0.174 moles) de ?/-metil morfolina en 300 ml de diclorometano, se enfría a 0°C, y se añade durante 0.5 horas una solución enfriada previamente (0°C) de 18.75 ml (0.152 moles) de cloruro de pivaloilo en 100 ml de diclorometano, mientras se mantiene la mezcla de reacción a 0°C. En un matraz separado de 500 ml, se disuelven 33.5 g (0.145 moles) de mono(bromhidrato) de éster fenilmetílico de ?/-etilglicina en 400 ml de diclorometano, y se añaden 35 ml (0.48 moles) de /V-metilmorfolina. Esta mezcla se añade a la solución activada de ácido piridinbutírico a -0.5°C durante 2 horas. Después de 1 hora, la mezcla se diluye con agua, se agita y las capas se separan. La fase orgánica se lava con bicarbonato de sodio acuoso saturado, ácido clorhídrico acuoso a 0.1 M y agua, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra en vacío para producir 46.2 g (0.135 moles, 93% de rendimiento) de éster fenilmetílico de A/-etil-?/-[1 -oxo-4- (4-piridinil)butil]glicína como un aceite amarillo.

Paso 3: ?.-et¡l-/V-ri-oxo-4-(4-piridini0butiHqlicina Una solución de 46 g (0.135 moles) de éster fenilmetílico de N- 5 etil-?/-[1-oxo-4-(4-p¡ridinil)butil]glicina en 300 ml de metanol, se añade a 4 g de Pd/C a 10% (50% en peso de agua) en un autoclave de un litro. El recipiente se evacúa tres veces con vacío interrumpido para nitrógeno y entonces se evacúa otras tres veces con vacío interrumpido para hidrógeno a presión atmosférica. El recipiente se sella y se calienta a 25°C con agitación durante 2 horas. La mezcla se filtra bajo nitrógeno para dar un producto filtrado de color amarillo pálido, el cual se concentra en vacío a 40°C hasta que comienza a aparecer un sólido blanco. Se añade una porción de 150 ml de 2-propanol, causando la cristalización rápida del producto. La mezcla se agita durante 0.5 horas, y entonces el producto se recoge mediante filtración. El sólido se lava con porciones de 240 ml de 2-propanol, y se seca entonces para producir 19 g del producto. La solución madre se concentra, y el residuo se recoge en 2- • propanol, dando como resultado la formación de un precipitado blanco. La mezcla se agita durante 0.5 horas, entonces se filtra y el sólido se lava con 2- propanol y se seca entonces para producir 5 g de producto, para un rendimiento total de 24 g (0.095 moles; 70% de rendimiento; 99% puro) de N- etil-?/-[1-oxo-4-(4-piridinil)butil]glicina. , ^? ??^^ee??j aÉ?^ |É| tf¡É | ͧ f EJEMPLO 8 Preparación de trifluoroacetato de éster fenilmetílico de (L)-a-aspartil-3- ciclohexil-(L)-alanineamida Paso 1 : éster fenilmetílico de ?/-í1.1-dimetiletoxi)carbon¡n-(L)-a- aspartil-3-c¡clohexil-(L)-alanineam¡da A una solución a 18°C, agitada mecánicamente, de 37.5 g (116 mmoles) de ácido BOC-ß-bencil-(L)-aspártico en 270 ml de acetato de etilo, se añade una solución de 17.75 g (116 mmoles) de hidroxibenzotriazol hidratado • 10 en 25 ml de dimetilformamida. Una solución de 24.5 g (119 mmoles) de diciciohexilcarbodiimida en 50 ml de acetato de etilo se añade entonces durante 30 minutos, usando un baño de agua para mantener la temperatura de reacción a 25°C o menos. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora, y entonces se añade a 23°C un jarabe de 33 g (116 mmoles) de mono(trifluoroacetato) de éster de 3-ciclohexil-(L)-alanineamida en 25 ml de dimetilformamida, seguido de la adición, gota a gota, de /V-metilmorfolina pura • durante 2 minutos. La mezcla de reacción se deja calentando a 30°C durante la adición de ?/-metilmorfolina. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtra para remover la diciclohexil urea, y el producto filtrado se diluye con acetato de etilo, se lava dos veces con agua, una vez con salmuera, dos veces con bicarbonato de sodio acuoso saturado y una vez con 1 :1 de salmuera/ácido cítrico a 0.5 N. La fase orgánica se seca con sulfato de magnesio, se filtra y se diluye con heptano. La mezcla se deja reposando durante la noche, y los cristales resultantes se recogen mediante filtración, se lavan dos veces con heptano, y se secan bajo vacío para dar un primer cultivo de 37.5 g y un segundo cultivo de 9.5 g. Ambos cultivos muestran pureza de HPLC aceptable, y se combinan físicamente para producir 47 g de éster fenilmetílico de ?/-[(1 ,1-d¡met¡letoxi)carbonil]-(L)-a-aspartil-3-c¡clohexil-(L)-alanineamida (85% de rendimiento). MS (FAB) m/z 476 (M+H)+.

Paso 2: trifluoroacetato de éster fenilmetílico de (L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineam¡da A una solución agitada mecánicamente de 45.4 g (95.5 mmoles) de éster fenilmetílíco de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-(L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida en 350 ml de diclorometano a 20°C, se añaden 67 g (590 mmoles) de ácido trifluoroacético durante 15 minutos. La mezcla de reacción se agita durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentra en vacío para producir un aceite de color amarillo - anaranjado, el cual se trata azeotrópicamente con diclorometano, y se somete entonces a alto vacío para reducir aún más al mínimo los solventes residuales. El concentrado, un aceite, se tritura con 1 :1 de éter ter-butil metílico/heptano para dar un sólido blanco. La mezcla se agita en éter ter-butil metílico durante 2 horas, y entonces se deja reposar durante 2 días. Los cristales se recogen mediante filtración y se secan bajo vacío para dar mono(trifluoroacetato) de éster fenilmetílico de (L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida (43 g, 92% de rendimiento). MS (FAB) m/z 376 (M+H)+.

EJEMPLO 9 Preparación de trifluoroacetato de éster bisfenilmetílico de ácido (L)-a- aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico Paso 1 : éster fenilmetílico de ácido ?/-(1 ,1-dimetiletoxi)carbonin-4-c¡clohexil-2-(L)-aminobutanoico Una solución de 30 g (107.5 mmoles) de ?/-[(1 ,1dimetiletoxi)-carbonil]-(L)-homofenilalanina y 2 ml de ácido acético en 100 ml de metanol, se vierte sobre 3 g de rodio a 5%/alúmina en un matraz de 500 ml con agitador Parr. La mezcla de reacción se agita durante la noche bajo 3.23 kg/cm2 - 3.30 kg/cm2 de hidrógeno, y se filtra entonces bajo un manto de nitrógeno a través de Celite 545 en un embudo de vidrio concrecionado. La almohadilla de Celite se lava con metanol. El producto filtrado se concentra en vacío a 30°C. El aceite resultante se recoge en éter ter-butil metílico, se lava dos veces con agua y una vez con salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra en vacío. El residuo (probables 107.5 mmoles) se disuelve en 250 ml de diclorometano, y la solución se trata con 12 g (118.5 mmoles) de trietilamina, seguido de 18.4 g (107.5 mmoles) cloroformiato de bencilo, tiempo durante el cual se forma un sólido blanco. Después de la adición del cloroformiato de bencilo, se añaden 1.3 g (10.75 mmoles) de 4-dimetilaminopiridina en una sola porción. La mezcla se deja agitando durante 2 horas a 0°C. La mezcla se concentra entonces en vacío, el residuo se recoge en acetato de etilo, y la solución se lava dos veces con agua, dos veces con ácido clorhídrico acuoso a 1 N, dos veces con hidróxido de sodio acuoso a 1 N, y una vez con salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra y se concentra para dar éster fenilmetílico de ácido ? -(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico (33.8 g) como un aceite. MS (FAB) m/z 748 (M+Na)+.

Paso 2: mono(trifluoroacetato) de éster fenilmetílico de ácido 4-c¡clohexil-2-(L)-aminobutanoico A una solución de 33 g (88 moles) de éster fenilmetílico de ácido ?/-(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico en 136 ml de diclorometano, se añaden 136 ml de ácido trifluoroacetico durante 30 minutos. La temperatura de reacción se mantiene abajo de 23°C. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 3 horas, y entonces se concentra en vacío. El residuo se vuelve a disolver en diclorometano, y se vuelve a concentrar. El aceite móvil resultante se recoge en 50 ml de éter ter-butil metílico y 350 ml de heptano, la solución se siembra y se enfría entonces a -10°C durante 24 horas. Se recoge un primer cultivo mediante filtración, se lava con heptano y se seca bajo vacío (20.1 g). La solución madre se concentra en vacío, se vuelve a disolver entonces en 12 ml de éter ter-butil metílico y 84 ml de heptano. Esto, con siembra y enfriamiento a -10°C, provee un segundo cultivo de 5.2 g. Los dos cultivos son de pureza de HPLC comparable, y se mezclan físicamente para producir moTno( flu |o"acetato) de éster fenilmetílico de ácido X X 4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico (25.7 g, 75% de rendimiento). MS (FAB) 276 (M+H)+.

Paso 3: éster bisfenilmetílico de ácido ?/-í1 ,1-d¡metiletox¡)- carbonilHL,-a-aspart¡l-4-c¡clohexil-2-(L)-aminobutaoico A una solución a 18°C, agitada mecánicamente, de 20.4 g (63 mmoles) de ácido BOC-ß-bencil-(L)-aspártico en 154 ml de acetato de etilo, se añade una solución de 9.65 g (63 mmoles) de hidroxibenzotriazol hidratado en 12 ml de dimetilformamida. Una solución de 13.3 g (64.5 mmoles) de diciciohexilcarbodiimida en 25 ml de acetato de etilo, se añade durante 15 minutos mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción a 25°C o menos. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora, y entonces se añade un jarabe de 24.5 g (63 mmoles) de trifluoroacetato de ácido 4-ciclohexil-2-(L)- aminobutanoico en 15 ml de dimetilformamida a 18°C, seguido de la adición, gota a gota, de ?/-metilmorfolina durante 15 minutos. La mezcla de reacción se deja calentando a 25°C durante la adición de A/-metilmorfolina. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtra para remover la diciclohexil urea, y el producto filtrado se lava dos veces con agua, dos veces con bicarbonato de sodio acuoso saturado, dos veces con ácido cítrico acuoso a 0.5 N y una vez con salmuera, se seca con sulfato de magnesio, se filtra y se concentra en vacío. El sólido ceroso resultante se disuelve en éter ter-butil metílico a 50°C, la solución se filtra en caliente para remover una pequeña cantidad de material insoluble blanco fino, y se diluye entonces a 50°C con heptano. La solución se enfría a temperatura ambiente y se coloca en un congelador a -10°C durante la noche. El sólido resultante se recoge mediante filtración, se lava con heptano y se seca en vacío para producir éster bisfenilmetílico de ácido N-[(1 ,1d¡met¡letoxi)carbonil]-(L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico (29.8 g, 81 % de rendimiento). MS (FAB) m/z 581.

Paso 4: mono(trifluoroacetato) de éster bisfenilmetílico de ácido (L)- -aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico A una solución agitada mecánicamente de 28.8 g (49.5 mmoles) de éster bisfenilmetílíco de ácido N-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico en 300 ml de diclorometano a 20°C, se añaden 222 g (1.94 moles) de ácido trifluoroacético durante 30 minutos, y la mezcla de reacción se agita durante 3 horas. La mezcla de reacción se concentra en vacío para producir un aceite, el cual se vuelve a disolver en diclorometano y se concentra de nuevo. El residuo se tritura con 1 :1 de éter ter-butil metílico/heptano, para producir un sólido blanco. El sólido se recoge mediante filtración, y se seca en vacío para dar trifluoroacetato de éster bisfenílmetílíco de ácido (L)-a-aspartil-4-ciclohexil-2-(L)-aminobutanoico (27.4 g, 46 mmoles, 92.9% de rendimiento). Punto de fusión de 143-144°C.

EJEMfFó iO Preparación de clorhidrato de éster bisfenilmetílico de ,L)-a-aspartil-3- ciclohexil-(L)-alanina Paso 1 : éster fenilmetílico de N-r(1 ,1-dimet¡letox¡)carbon¡p-3- ciclohexil-(L)-alanina Una solución lechosa agitada de 25.6 g (94.5 mmoles) de N- [(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-3-c¡clohexil-(L)-alanina, 11.2 g (104 mmoles) de alcohol bencílico y 1.15 g (9.45 mmoles) de 4-dimetilaminopiridina en una mezcla de 210 ml de dimetil formamida y 150 ml de diclorometano, se enfría a 5°C, y se añaden durante 5 minutos 19.2 g de clorhidrato de 3-N-N- dimetilaminopropiletilcarbodiimida. La mezcla se calienta entonces a temperatura ambiente, y se agita durante la noche. La mezcla de reacción se filtra para remover un precipitado fino, y el producto filtrado se concentra en vacío. El residuo se recoge en agua y se extrae con acetato de etilo (3x). Las soluciones orgánicas combinadas se lavan con ácido cítrico acuoso a 0.5 N y dos veces con agua, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran en vacío. El aceite resultante se somete a alto vacío para reducir al mínimo los compuestos volátiles para dar éster fenilmetílico de N-[(1 ,1- 20 dimetiletoxi)carbonil-3-ciclohexil-(L)-alanina (35.3 g). MS (aspersión de ¡ones) m/z 362 (M+H)+. gia jiitig mimüí *é A una solución agitada de 35.3 g (94.5 mmoles) de éster fenilmetílico de N-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbon^-3-c¡clohex¡l-(L)-alanina en 100 ml de diclorometano a 17°C, se añaden 100 ml de ácido trifluoroacético durante 15 minutos, tiempo durante el cual la temperatura de la mezcla de reacción se eleva hasta 21 °C. La mezcla de reacción se agita durante la noche y se concentra entonces en vacío. El residuo se trata azeotrópicamente con diclorometano, tolueno y éter ter-butil metílico. El aceite resultante se somete a alto vacío para producir trifluoroacetato de éster fenilmetílico de 3-ciclohexil-(L)-alanina (32.6 g). MS (aspersión de iones) m/z 262 (M+H)+.

Paso 3: éster bisfenilmetílico de N-f(1 ,1-d¡metiletoxi)carbon¡l1-(L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina A una solución agitada mecánicamente de 27.6 g (85.5 mmoles) de ácido BOC-ß-bencil-(L)-aspártico en 110 ml de acetato de etilo, se añade una solución de 13.1 g (85.5 mmoles) de hidroxibenzotriazol hidratado en 21.4 ml de dimetilformamida. Una solución de 18.15 g (88 mmoles) de diciciohexilcarbodiimida en 80 ml de acetato de etilo se añade durante 15 minutos, mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción a 25°C o menos. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora y se añade a 20°C una solución de 32 g (85.5 mmoles) de trifluoroacetato de éster fenilmetílíco de 3-ciclohexil-(L)-alanina en 120 ml de acetato de etilo, seguido de la adición, gota a gota, de 14.6 g dWI^-metilmorfolina durante 5 minutos (pH final de 4 a 5). La mezcla de reacción se deja calentando a 25°C durante la adición de la N-metilmorfolina. La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtra para remover la diciciohexil urea, y el producto filtrado se lava dos veces con agua, una vez con ácido cítrico acuoso a 0.5 N y dos veces con bicarbonato de sodio acuoso saturado, se seca con sulfato de magnesio, se filtra y se concentra en vacío. El aceite resultante se disuelve en éter ter-butil metílico, y la solución se filtra para remover una pequeña cantidad de material insoluble blanco fino. El producto filtrado se concentra en vacío, y el aceite resultante se somete a alto vacío para dar éster bisfenilmetílíco de N-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina (32.9 g). MS (aspersión de iones) m/z 566 (M+H)+. 584 (M+Na)+.

Paso 4: mono(clorhidrato) de éster bisfenilmetílico de (L)-a-aspartil-3-cilcohex¡l-(L)-alanina Se burbujea ácido clorhídrico a través de una solución agitada magnéticamente a 0°C de 17 g (30 mmoles) de éster bisfenilmetílico de N-[(1 ,1-d¡met¡letoxi)carbonill-(L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina en 60 g de acetato de etilo durante aproximadamente 5 minutos. Durante este tiempo, la temperatura de la solución se eleva de 5°C a 20°C, y entonces se vuelve a enfriar. El baño de hielo se remueve, y la solución se agita a temperatura ambiente durante 90 minutos. Se extrae el exceso de HCl burbujeando nitrógeno a través de la solución, des^^^ de lo cual la mezcla se solidifica. Se añade acetato de etilo (100 g) para facilitar la agitación (tixotrópica), y se burbujea nitrógeno a través de la mezcla durante otros 3 minutos. El material sólido se aisla mediante filtración en un embudo de Buchner. La torta del filtro 5 se enjuaga con acetato de etilo y se seca durante la noche bajo vacío (20 mbarias) con N2 derramado, para producir mono(clorhidrato) de éster bisfenilmetílico de (L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanina (10.7 g) como un sólido blanco. MS (aspersión de iones) m/z 467 (M+H)+.

EJEMPL0 11 Preparación de N-I?1 ,1 ,-dimetiletoxi.carbon¡p-(L)-a-aspartil-3-fenil-(L.- alanineamida Método A 15 A una mezcla a 38°C agitada mecánicamente de etilenglicol (140 g) y metanol (35 g), se añade dicarbonato de di-ter-butilo (45 g) y aspartame (5 g). Se añade entonces trietilamina (17.5 g) mediante bombeo con jeringa a 0.2 ml/min. Se añade entonces aspartame (5 g) en 9 porciones a intervalos de 12 minutos. La temperatura de reacción se mantiene a aproximadamente 38°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción es desgasificada bajo vacío hasta que deja de observarse la producción de gas (aproximadamente durante 20 minutos). Se añade entonces amoníaco (19 g) bajo la superficie de la mezcla de reacción mediante un tubo de inmersión durante 45 minutos, y la m ,^^^^^^^- ^.^^^^^, mezcla de reacción se calienta durante la noche a aproximadamente 60°C. La mezcla de reacción se diluye con agua (280 g), y la temperatura de reacción se ajusta a aproximadamente 45°C. Se añade ácido acético (55 g) para ajustar el pH a aproximadamente 5.9. La mezcla se enfría a 40°C, tiempo en el cual se empieza a formar un sólido. La mezcla se enfría a 20°C durante 2 horas, y se añade ácido acético (250 g) para ajustar el pH a aproximadamente 5, y la mezcla se agita durante 0.5 horas. El sólido se filtra, se lava con agua (3x) y se seca bajo vacío a 50°C para dar N-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-(L)-a- aspartil-3-fenil-(L)-alanineamida (53 g) como un sólido cristalino blanco. • 10 Método B Una mezcla de aspartame (25 kg) y dicarbonato de di-ter-butilo (22 kg) en metanol (250 kg) en un reactor de 400 litros revestido de vidrio, se calienta a aproximadamente 30°C, y se añade hidróxido de litio (3.6 kg) durante 30 minutos. La suspensión se agita durante aproximadamente 4 horas, y se añade amoníaco gaseoso (39 kg) bajo nitrógeno. La suspensión • se agita durante 2 días, y entonces se concentra en vacío para eliminar el amoníaco y el metanol. Se añade agua (170 kg) y ácido acético (8 kg) a la suspensión resultante, el precipitado se filtra y la torta del filtro se lava dos veces con agua (25 kg), y se seca en vacío a aproximadamente 40°C para dar N-[(1 ,1-d¡metiletoxi)carbonil]-(L)-a-aspartil-3-fenil-(L)-alanineamida (29 kg) como un sólido cristalino blanco.

EJEMPLO 12 Preparación de mono(clorhidrato) de (L)-a-aspartil-3-ciclohexil-(L)- alanineamida Una mezcla de N-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-(L)- -aspartil-3-fenil- (L)-alanineamida (129 kg) y óxido de platino (IV) (5 kg) o platino sobre alúmina (50% húmedo, 5%, 12 kg) en un reactor de 1600 litros revestido de vidrio en ácido acético (700 kg), se hidrogena a aproximadamente 60°C bajo 4 barias de hidrógeno durante 3 a 5 horas. El catalizador se filtra y se lava con ácido acético (20 kg). Se añade ácido clorhídrico gaseoso (7.8 kg) a 215 kg de solución de ácido acético durante un período de 1 a 2 horas en un reactor de 400 litros revestido de vidrio bajo nitrógeno. La suspensión se agita durante 1 hora y se filtra. La torta del filtro se lava dos veces con ácido acético (20 kg) y dos veces con acetona (20 kg), y se seca en vacío a aproximadamente 40°C para dar mono(clorhidrato) de (L)- -aspartil-3-ciclohexil-(L)-alanineamida (31 kg) como un sólido cristalino blanco. • -t?fc*: --=J..:v.i«íf£ _ /: - ..¿y EJE 3 Preparación de mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de (L)-a-aspartil- (L.-fenilalaninamida Paso 1 : sal monosódica de éster metílico de N-f(1 ,1-d¡met¡letoxi)-carbonilHL)-a-aspart¡l-(L)-fenilalan¡na Un matraz de 6 litros se carga con 294.4 g (0.68 moles) de aspartame, 2000 ml de metanol, 2000 ml de agua y 192.96 g (0.88 moles) de dicarbonato de di-ter-butilo, y la mezcla se enfría a 0°C. Se añade hidróxido de sodio acuoso (10 N, 68.6 ml) durante un período de 15 minutos, mientras se mantiene la temperatura entre 0 y 4°C. Se interrumpe entonces el enfriamiento, y la mezcla se deja calentando a temperatura ambiente y se agita durante 2 días. La solución clara se concentra en vacío para producir un aceite, el cual se recoge en 500 ml de acetato de etilo, y se vuelve a concentrar para producir 297 g de un aceite. Este se disuelve en un litro de acetato de etilo a 48°C, produciendo una solución clara. La solución se deja enfriando a temperatura ambiente durante la noche. El producto cristalizado se recoge mediante filtración, se lava con 400 ml de acetato de etilo y se seca en un horno de vacío para producir 165 g (0.42 moles, 62% de rendimiento) de sal monosódica de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalanina. Después de reducir el volumen de las soluciones madre, se obtienen otros 95.4 g (0.24 moles) del producto sólido (rendimiento total de 97%).

Paso 2: sal monosódica de /V-r(1,1-d¡met¡letoxi)carbon¡n-(L)-a-aspartil-(L.-fenilalaninam¡da Se condensa amoníaco (255 g, 15 moles) en un matraz de 4 litros. En un recipiente separado, se prepara una solución de 260 g (0.659 moles) de sal monosódica de éster metílico de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]- (L)-a-aspartil-(L)-fenilalanina en 1300 ml de metanol, y esto se añade al amoníaco durante 0.5 horas entre -32°C y -5°C. La mezcla se calienta a temperatura ambiente durante 3 horas, y se agita entonces durante otras 2 horas. El metanol se remueve en vacío a 40°C, produciendo 501 g de una pasta. Esta se recoge en un litro de acetato de etilo, a partir de lo cual se cristaliza el producto. La mezcla se diluye con otros 2 litros de acetato de etilo, y se filtra. El sólido se seca bajo vacío durante la noche a temperatura ambiente, y entonces bajo vacío a 50°C durante 1.5 horas para producir 243.5 g (0.645 moles, 98% de rendimiento) de sal monosódica de A/-[(1 ,1-dimetiletoxi)carbonil]-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalan¡namida.

Paso 3: éster fenilmetílico de ?.-r(1 ,1-dimetiletox¡)carbon¡IHL)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida A un matraz de fondo redondo de 1 litro y bajo nitrógeno, se añaden 241 g (0.635 moles) de sal monosódica de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida y 2500 ml de dimetilformamida, y la mezcla se agita hasta que se obtiene una solución. Se añade bromuro de bencilo puro, 75.4 g (0.635 moles), durante cinco minutos de 23 a 26°C. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 21.5 horas, y se diluye entonces lentamente con 2500 ml de agua, haciendo que la temperatura aumente hasta 32°C. La mezcla se agita durante 1 hora mientras se enfría a temperatura ambiente, tiempo durante el cual un sólido se cristaliza. El sólido se recoge mediante filtración, se lava con tres porciones de 1 litro de agua, y se seca a 50°C durante 2 días para producir 232 g (0495 mmoles, 78% de rendimiento) de éster fenilmetílico de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(L)-a-aspartil-(L)-fenilalaninamida.

Paso 4: mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de L-a-aspartil- (D-fenilalaninamida Una solución de éster fenílmetílico de ?/-[(1 ,1-dimetiletoxi)-carbonil]-(L)- -aspartil-(L)-fenilalaninamida en cloruro de hidrógeno a 4 N/acetato de etilo, se agita durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se concentra entonces y el residuo se recoge en 1.1 litros de acetato de etilo, y se agita durante la noche. El sólido resultante se recoge mediante filtración y se vuelve a disolver en 3 I de agua. La solución se lava con porciones de 3500 ml de diclorometano. La solución acuosa se evapora en parte mediante evaporación giratoria a 55°C. La solución se deja enfriar. Un sólido se cristaliza y se recoge mediante filtración como dos cultivos (113.6 g y 34.1 g), dando un rendimiento final de 147.7 g (0.346 moles, 79% de rendimiento) de mono(clorhidrato) de éster fenilmetílico de L- -aspartil-(L)-fenilalaninam¡da.

EJEMPLO 14 Preparación de .V-etil-.V-H-oxo-3-ri-.fenilmetoxicarbonil.-4- piperidinilmetilenlpropillglicina Paso 1 : 1-fenilmetoxicarbonil-4-piper¡dona Una mezcla de 40 kg de ?/-benciloxicarbonil)succinimida y 26 kg (175 mol) de clorhidrato de 4-piperidona hidratado en 38.8 kg de agua y 88 kg de tetrahidrofurano, se agita a aproximadamente 15°C hasta que la disolución concluye (- 15 minutos). Se añade ?/-metilmorfolina (22.8 kg) a la mezcla agitada (exotérmica), mientras se mantiene la temperatura a 20°C o menos. La mezcla de reacción se agita a aproximadamente 20°C durante 2.5 horas, punto en el cual la HPLC indica que la reacción ha concluido. La mezcla se diluye con 115.2 kg de éter ter-butíl metílico y 38.8 kg de agua, y se agita a aproximadamente 20°C durante 5 minutos. La agitación se interrumpe, se deja que las capas se separen, y la capa acuosa (inferior) se remueve y se desecha. La capa orgánica se lava dos veces con 129.6 kg de agua (agitar durante 5 minutos, separar las fases, remover/desechar la fase acuosa [inferior]). La capa orgánica se lava con 5.2 kg de NaCI y 46.8 kg de agua (agitar durante 5 minutos, separar las fases, remover/desechar la capa acuosa [inferior]). La capa orgánica se trata con 11.5 kg de MgSO4, con agitación durante 1 hora, y entonces la mezcla se filtra. El reactor se enjuaga con 8 kg de éter ter-butil metílico (filtrado, combinado con el producto filtrado principal; contenido total de agua del producto filtrado: 0.52%). El volumen del producto filtrado se reduce a la mitad mediante destilación a presión reducida a 30°C.

Se interrumpe el vacío para el nitrógeno, y el residuo se enfría a 20°C (contenido de agua del residuo en el crisol: 0.43%). El residuo se diluye con 57.6 kg de éter ter-butil metílico, y entonces el volumen de la mezcla se reduce de nuevo a la mitad mediante destilación bajo vacío a 30°C. El vacío se libera para el nitrógeno, y la mezcla se enfría a 20°C (contenido de agua del residuo en el crisol: 0.25%). Esto se repite otras 5 veces. El residuo final del crisol se diluye con 28.8 kg de éter ter-butil metílico y se mezcla durante 5 minutos, y entonces se pone a prueba para contenido de agua y contenido de 1-fenilmetoxicarbonil-4-piperidona (agua: 0.05%; prueba de 1-fenilmetoxicarbonil-4-piperidona en p/p: 22.66% en peso, 35.36 kg, 155 moles, 88.6% de rendimiento).

Paso 2: ácido 3-(1-fenilmetoxicarbon¡l-4-piper¡din¡lmet¡len) propanoico A una suspensión de 82 g de bromuro de 3-carboxipropil trifenilfosfonio en 407 ml de 1 ,2-dietoxietano a 14°C, se añaden durante 25 minutos 220 g de ter-butóxido de potasio a 20% en peso en tetrahidrofurano, mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción de 24 a 28°C. La mezcla se agita durante 1 hora, se enfría a 10°C, y se añade durante 30 minutos una solución de 52.5 g de 1-fenilmetoxicarbonil-4-piperidona en 246 ml de éter ter-butil metílico, mientras se mantiene el enfriamiento. Después de que concluye la adición, la mezcla se agita a 12°C durante 10 minutos, y se calienta entonces a 20°C y se agita durante otros 30 minutos. La mezcla de reacción se trata con 410 ml de HCl acuoso a 1 N durante 10 minutos, se diluye con 328 ml de éter ter-butil metílico, y entonces las fases se separan. La fase orgánica se lava con 205 ml de agua y entonces con 210 ml de NaOH acuoso a 1 N. La capa de NaOH, que contiene al producto, se recoge por separado, se lava con tres porciones de 189 g de acetato de etilo, se acidifica hasta pH 3.48 con HCl concentrado, y se extrae entonces con 189 ml de acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se separa, se lava con 211 ml de agua, se seca entonces durante 30 minutos sobre 10 g de MgSO4, se filtra y se concentra en vacío. El residuo oleoso (50.7 g) se cristaliza a partir de tolueno/heptano para producir un total de 29.46 g (51 % de rendimiento) de ácido 3-(1 -fenilmetoxicarbonil-4-piperidinilmet¡len)propanoico. Espectrometría de masas: Mcaic, 303, M+10bserv., 304. 1H RMN: (d contra TMS, CDCI3) 2.2, t (2H); 2.25, t (2H); 2.35, m (4H); 3.45, m (4H), 5.15, s (2H); 5.2, m (1 H); 7.33, 2 (5H). 13C RMN (d contra TMS, CDCI3) 22.43, 28.2, 34.26, 35.66, 44.88, 45.74, 67.20, 122.02, 127.83, 127.95, 128.45, 128.69, 128.90, 136.17, 136.72, 155.34, 178.39. • Paso 3: ?/-etil-?/-[(1 -oxo-3-[1 -(fen¡lmetox¡carbon¡l)-4-p¡per¡d¡n¡l- metilenlpropiriqlicina 20 Se prepara ?/-etil-?/-[1-oxo-3-[1-(fenilmetoxicarbonil)-4-piperid¡n¡l- metilen]propíl]glicina usando el método del ejemplo 6, excepto sustituyendo con ácido 3-(1-fen¡lmetoxicarbonil-4-piperidinilmetilen)propanoico el ácido 4- (1-fenilmetox¡carbon¡l-4-piperid¡nil)butanoico.

Claims (63)

1. NOVEDAD DE LAJNVENCION
2. REIVINDICACIONES • 5 1.- Un procedimiento para preparar un compuesto de pseudotetrapéptido de fórmula: 10 o una sal o profármaco del mismo, en donde: es opcionalmente azaheterociclilo protegido con nitrógeno; 15 es un enlace sencillo o doble; q es de 1 a 5; B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo o alquilaralquilo; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; J es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido; L 20 es OR1 o NR1R2, en donde R y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, alquilarilo o alquilaralquilo; y p es 1 ó 2, caracterizado porque comprende (a) acoplar un pseudodipéptido de azaheterociclilo de fórmula: 5 o una sal del mismo, en donde K es OH o un grupo de activación de acilo, con un dípéptido sustituido con ácido carboxílico de fórmula: o una sal del mismo, (b) remover opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o grupo protector de ácido carboxílico, y (c) convertir opcionalmente el pseudotetrapéptido a la sal o profármaco. 2.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 1 , 15 caracterizado además porque: 20 es un grupo de fórmula: en donde m es de 1 a 5; n es de 2 a 6; y Pi es un grupo protector de nitrógeno.
3. 3.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Q2 es un grupo protector de ácido carboxílíco. 4.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo, J es -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo, m es 3, y n es 3 ó
4. 4.
5. 5.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque B es alquilo, J es alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo, R1 y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo o aralquilo, m es 3, n es 3 ó 4, y p es 1.
6. 6.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo y Q2 es bencilo.
7. 7.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque Pi es bencíloxicarbonilo y Q2 es H.
8. 8.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque L es -NR1R2.
9. 9.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque L es -NR1R2.
10. 10.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la sal de pseudodipéptido de azaheterociclilo es acoplada con la sal del dipéptido sustituido con ácido carboxílico.
11. 11.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque una sal básica de adición del pseudodipéptido de azaheterocíclilo es acoplada con una sal acida de adición del dipéptido sustituido con ácido carboxílico.
12. 12.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque la sal de diciciohexilamina del pseudodipéptido de azaheterociclilo es acoplada con la sal de trifluoroacetato del dipéptido sustituido con ácido carboxílico.
13. 13.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque comprende (a) acoplar un pseudodipéptido de azaheterociclilo de fórmula: o una sal básica de adición del mismo, en donde Pi es un grupo protector de nitrógeno; y B es alquilo, con un dipéptido sustituido con ácido carboxílico de fórmula: o una sal acida de adición del mismo, en donde Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; J es alquilo, cicloalquilo o cicloalquilalquilo; y L es OR1 o NR1R2, en donde R1 y R2 son independientemente H, alquilo, cicloalquilo, -a cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo o aralquilo, para preparar un pseudotetrapéptido de fórmula: (b) remover opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o grupo protector de ácido carboxílíco, y (c) convertir opcionalmente el pseudotetrapéptido, su sal o profármaco. 10
14. 14.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo y Q2 es bencilo.
15. 15.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo y Q2 es H.
16. 16.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 14, 15 caracterizado además porque B es etilo, J es ciclohexilmetilo y L es NH2.
17. 17.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque B es etilo, J es ciclohexilmetilo y L es NH2.
18. 18.- Un procedimiento para preparar un péptido sustituido con ciclohexilmetilo de fórmula: en donde Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; y Q3 es H o un grupo protector de nitrógeno; caracterizado porque comprende (a) reducir un péptido sustituido con fenilmetilo de fórmula: y (b) remover opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o grupo protector de ácido carboxílico.
19. 19.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque la reducción se lleva a cabo mediante hidrogenacíón catalítica.
20. 20.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque la hidrogenación catalítica se lleva a cabo usando un catalizador de platino.
21. 21.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado además porque el catalizador de platino es óxido de platino o platino sobre alúmina.
22. 22.- Un procedimiento para preparar un amido péptido de fórmula: en donde Q2 es H o una sal básica de adición, o un grupo protector de ácido carboxílico; y Q3 es H o un grupo protector de nitrógeno; caracterizado porque comprende amidar un éster de péptido de fórmula: en donde R3 es alquilo inferior.
23. 23.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque la amidacíón se lleva a cabo usando amoníaco en alcohol.
24. 24.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque el alcohol es un alcohol inferior.
25. 25.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque la amidación se lleva a cabo usando amoníaco en una mezcla de solvente de glicol - alcohol inferior.
26. 26.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque la mezcla de solvente de glicol - alcohol inferior comprende metanol y etilenglicol.
27. 27.- Un procedimiento para preparar un compuesto de aspartame protegido de fórmula: en donde Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; Q3 es un grupo protector de nitrógeno y R3 es alquilo inferior; caracterizado porque comprende introducir un péptido protector de N en un compuesto de aspartame de fórmula:
28. 28.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque Q3 es benciloxicarbonilo o t-butiloxicarbonilo.
29. 29.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado además porque Q2 es H.
30. 30.- Un procedimiento para preparar un amido dipéptido de fórmula: en donde Q3 es un grupo protector de nitrógeno y Q2 es H, caracterizado porque comprende (a) añadir una base y un agente protector de nitrógeno a una solución de apártame en un solvente para formar una solución del compuesto de fórmula: en donde Q2 es H o una sal básica de adición, y (b) introducir amoníaco en la solución resultante del paso (a).
31. 31.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque Q3 es ter-butiloxicarbonilo o benciloxicarbonilo.
32. 32.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 31 , caracterizado además porque Q3 es ter-butiloxicarbonilo.
33. 33.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado además porque el solvente es alcohol.
34. 34.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado además porque el alcohol es un alcohol inferior o una mezcla de glicol - alcohol inferior.
35. 35.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado además porque el alcohol es metanol o una mezcla de etilenglicol-metanol.
36. 36.- Un procedimiento para preparar un dipéptido sustituido con ciclohexilmetilo de fórmula: o una sal acida de adición del mismo, caracterizado porque comprende (a) preparar una mezcla de un catalizador y un péptido sustituido con fenilmetilo 15 de fórmula: en donde Q3 es ter-butiloxicarbonilo en un solvente, (b) tratar la mezcla con hidrógeno, (c) remover el catalizador de la mezcla, y (d) introducir HCl gaseoso en la mezcla.
37. 37.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado además porque el solvente es ácido acético.
38. 38.- Un procedimiento para preparar un compuesto ácido sustituido con azaheterociclilo de fórmula: en donde R4 es H o alquilo inferior, y Pi es un grupo protector de nitrógeno, caracterizado porque comprende (a) descarboxilar un malonato de 2-piridiletil-di-(alquilo inferior) de fórmula: en donde R5 es alquilo inferior, para preparar un ácido pirídílico de fórmula: (b) hidrogenar el ácido piridílico con hidrógeno en presencia de un catalizador para preparar un ácido de piperidina de fórmula: (c) remover opcionalmente el catalizador; (d) proteger con nitrógeno el ácido de piperidina para preparar un ácido de piperidina protegido con nitrógeno de fórmula: (e) acoplar el ácido de piperidina protegido con nitrógeno con un compuesto de N-etilglicina de fórmula: para preparar el compuesto ácido sustituido con azaheterociclilo; y (f) desesterificar opcionalmente el compuesto sustituido con azaheterociclilo, en 20 donde R4 es alquilo inferior.
39. 39.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo y R4 es H.
40. 40.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 39, 'eÉm tf ±amáit?i**» ~M*m* caracterizado además porque la ded lrboxilación se lleva a cabo calentando el malonato de 2-piridiletil-di-(alquilo inferior) en una solución de ácido acuoso.
41. 41.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 40, • caracterizado además porque el ácido acuoso es HCl acuoso. 5
42. 42.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado además porque la hidrogenación se lleva a cabo en una solución de ácido acuoso.
43. 43.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado además porque el ácido acuoso es HCl acuoso. 10
44. 44.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado además porque la protección con nitrógeno se lleva a cabo en una solución de base acuosa.
45. 45.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 44, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo. 15
46. 46.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado además porque (a) una solución en ácido acuoso del malonato de 2-piridiletil-di-(alquilo inferior), es calentada para preparar una solución del ácido piridílico en ácido acuoso; (b) se añade un catalizador a la solución de ácido piridílico, y la mezcla se trata con hidrógeno para formar una mezcla de 20 catalizador y el ácido de piperidina; (c) se separa el catalizador de la mezcla para preparar una solución acuosa de ácido de piperidina; y (d) se añaden una base y un agente protector de nitrógeno a la solución acuosa para preparar el ácido de piperidina protegido con nitrógeno.
47. 47.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 46, caracterizado además porque el ácido acuoso es HCl acuoso.
48. 48.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 47, caracterizado además porque R4 es H.
49. 49.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 48, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo.
50. 50.- Un procedimiento para preparar un pseudotetrapéptido de fórmula: o una sal o profármaco del mismo, en donde m es 3; n es de 2 a 6; B es alquilo; p es 1 o 2; J es ciclohexilmetilo; y L es OR1 o NR-|R2, en donde Ri y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquílalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo, caracterizado porque comprende (a) reducir un compuesto de pseudotetrapéptido de fórmula: en donde es piridilo o en donde m es 3 y Pi es H o un grupo protector de nitrógeno; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; J es fenilmetilo; (b) remover opcionalmente el grupo protector de nitrógeno o grupo protector de ácido carboxílico; y (c) convertir opcionalmente el pseudotetrapéptido a la sal o profármaco.
51. 51.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 50, caracterizado además porque la reducción es mediante hidrogenación catalítica.
52. 52.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 51 , caracterizado además porque en donde m es 3 y Pi es un grupo protector de nitrógeno; n es 3; p es 1 ; y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico.
53. 53.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 52, caracterizado además porque Pi es un grupo protector de nitrógeno lábil a hidrogenación; y Q2 es un grupo^protector de ácido carboxílico lábil a hidrogenación.
54. 54.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 53, caracterizado además porque la reducción catalítica efectúa reducción y remoción simultáneas de P^ y Q2.
55. 55.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 51 , caracterizado además porque: es piridilo; y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico.
56. 56.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 55, caracterizado además porque Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico lábil a hidrogenación.
57. 57.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 56, caracterizado además porque la reducción catalítica efectúa reducción y remoción simultáneas de Q2.
58. 58.- Un compuesto de pseudotetrapéptido de fórmula: o una sal o profármaco del mismo, en donde: es piridilo o m es 3; Pi es H o un grupo protector de nitrógeno; n es de 2 a 6; B es alquilo; p es 1 ó 2; Q2 es H o un grupo protector de ácido carboxílico; J es fenilmetilo; y L es ORi o NR?R2) en donde Ri y R2 son independientemente -H, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo o alquilcicloalquilalquilo.
59. 59.- El compuesto de pseudotetrapéptido de conformidad con la reivindicación 58, caracterizado además porque: en donde m es 3 y P1 es un grupo protector de nitrógeno; n es 3; p es 1 ; y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico.
60. 60.- El compuesto de pseudotetrapéptido de conformidad con la reivindicación 59, caracterizado además porque P1 es un grupo protector de nitrógeno lábil a hidrogenación, y Q2 es un grupo protector de ácido carboxílico lábil a hidrogenación.
61. 61.- Un compuesto de pseudodipéptido de fórmula: o una sal del mismo, en donde P1 es H o un grupo protector de nitrógeno; B es alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alquilcicloalquilo, alquilcicloalquilalquilo, arilo, aralquilo^S ílarilo o alquilaralquilo; y R4 es H o alquilo inferior.
62. 62.- El compuesto de pseudodipéptido de conformidad con la reivindicación 61 , caracterizado además porque Pi es un grupo protector de nitrógeno, B es alquilo y R es H.
63. 63.- El compuesto de pseudodipéptido de conformidad con la reivindicación 62, caracterizado además porque Pi es benciloxicarbonilo y B es etilo.