MXPA00000009A

MXPA00000009A - Solicitud para patente de utilidad para curativo de heridas mejorado enriquecido con plaquetas.

Info

Publication number: MXPA00000009A
Application number: MXPA00000009A
Authority: MX
Inventors: Charles E Worden
Original assignee: Autologous Wound Therapy Inc
Priority date: 1998-06-22
Filing date: 1999-02-13
Publication date: 2005-09-08
Also published as: ATE378060T1; ES2297931T3; WO1999066797A1; KR20010071577A; US6303112B1; DE69937562D1; DE69937562T2; AU2763099A; BR9906477A

Abstract

Una composicion curativa de heridas que comprende una cantidad terapeuticamente efectiva de factores de crecimiento activados y acido ascorbico y/o por lo menos un retinoide, y/o por lo menos un antibiotico, que facilita el crecimiento de nuevo tejido.

Description

"SOLICITUD PARA PATENTE DE UTILIDAD PARA CURATIVO DE HERIDAS MEJORADO ENRIQUECIDO CON PLAQUETAS" Esta solicitud es una solicitud de continuación en parte de la solicitud de patente de utilidad pendiente Número PCT/US99/02981 presentada el 13 de Febrero de 1999 con la Oficina de Patentes de los Estados Unidos como la Oficina Receptora, que a su vez reclama una fecha de presentación de prioridad basada en la Solicitud Provisional de los Estados Unidos Número 60/090,167 presentada el 22 de Junio de 1998 y la solicitud provisional de los Estados Unidos Número 60/097,897 presentada el 26 de Agosto de 1998.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La invención dada a conocer en la presente por lo general se relaciona con una composición de materia usada en el tratamiento de heridas, un método para elaborar la misma y un método para usar la misma. Han habido muchas substancias diferentes y métodos desarrollados en el pasado para tratar heridas, dependiendo del tipo y ubicación y seriedad de la herida. Una herida se define generalmente como una lesión a un área del cuerpo de un ser humano o animal. Aún cuando la herida a la superficie de la piel es el tipo de herida más bien conocido, las superficies de los órganos internos pueden también herirse, tal como durante la cirugía, la rotura del bazo o el hígado, o resultante de golpes traumáticos a la superficie del cuerpo en la proximidad de un órgano interno . La práctica médica caracteriza las heridas como crónicas o agudas, de conformidad con la persistencia y seriedad de la herida. Una herida crónica es una que se prolonga o se dilata, en vez de curarse rápidamente. Una herida aguda es una que ocurre de manera relativamente rápida, y se cura de manera relativamente rápida hacia el mismo. Las heridas del tejido pueden tener un amplio espectro de manifestaciones, una rotura pequeña como simplemente una rotura microscópica normal o una fisura en el tejido (o una superficie del mismo), o tan grande como la abrasión o ablación de la piel que cubre una porción considerable del cuerpo, tal como una víctima de quemaduras. Las heridas agudas que cubren una superficie grande o movible usualmente son las más difíciles de proteger de infección, y de curar. La invención descrita en la presente está relacionada principalmente con substancias aplicadas tópicamente a la superficie exterior de las heridas crónicas, aún cuando la invención descrita en la presente tiene también ciertas aplicaciones para facilitar la curación de otras heridas tales como heridas agudas. La composición de materia descrita en la presente es especialmente apropiada para aplicación tópica a heridas de quemadura y lesiones crónicas, tales como úlceras en los pies de personas diabéticas. Sin embargo, las composiciones de materia y métodos descritos en la presente no se limitan únicamente a esa aplicación tópica. La curación de heridas es afectada mediante la presencia de varias substancias encontradas en la sangre y los fluidos del cuerpo. La sangre es el medio principal para suministrar agentes de curación al sitio de la herida, y para transportar substancias extrañas o perjudiciales alejadas de la herida. La sangre entera consiste principalmente de tres tipos principales de células suspendidas en una solución rica en proteina conocida como plasma . Los tres tipos de célula principales de la sangre entera son eritrocitos (glóbulos rojos a.k.a.), leucocitos (glóbulos blancos a.k.a.) y trombocitos (plaquetas a.k.a.). Los glóbulos rojos son las células que contienen hierro que facilitan el transporte y transferencia del oxigeno al tejido del cuerpo, y la remoción del dióxido de carbono. Los glóbulos blancos llevan a cabo funciones tales como fagocitosis de cuerpos extraños y producción de anticuerpos, principalmente responsables para combatir la infección y substancias extranjeras dentro de la sangre o el sitio de la herida. Las plaquetas llevan a cabo muchas funciones tales como obturar los escapes en los vasos sanguíneos y ayudar a comenzar el proceso que conduce a la formación de un coágulo de sangre; las plaquetas contienen substancias conocidas como factores de crecimiento que facilitan la formación del nuevo tejido. Aún cuando hay varios métodos para separar la sangre entera en sus distintos componentes, uno de los métodos más convenientes y rápidos se logran centrifugando diferencialmente la sangre o ciertos de sus componentes (es decir, aféresis) . De esta manera, los glóbulos rojos y blancos y el plasma pueden separarse y regresarse al cuerpo del donador o paciente, dejando las plaquetas secuestradas en forma esencialmente concentrada para usarse en técnicas de curación de heridas. De la sangre extraída de un paciente, las plaquetas por lo tanto se pueden obtener y activar para usarse en el mismo paciente; los métodos de usar la sangre propia del paciente son llamados "métodos donadores "autólogos" o "autógenos". Los métodos de usar la sangre donada mediante una o más de las terceras partes para usarse por los pacientes son llamados métodos donadores "homólogos" o "heterólogos" , o llamados conjuntamente métodos "alogénos".

Una de las proteínas suspendida en el plasma es el fibrinógeno, que reacciona con las substancias liberadas hacia los sitios de la herida (o atraídos por) para producir torones pegajosos de fibrina. Estas reacciones dan por resultado el enlace transversal de los torones para formar una malla que retiene y sostiene el depósito o el crecimiento de otros materiales de tejido en el sitio de la herida . El proceso de curación de heridas se considera generalmente que ocurren varias etapas, conocidas generalmente como la cascada de curación. Después del daño al tejido, las plaquetas quedan entre las primeras células que aparecen en la proximidad de la herida. La activación de una plaqueta mediante un agonista tal como trombina, u otros agonistas tales como aquellos enumerados en otro sitio en la presente, conduce a la liberación del material del granulo desde dentro de la plaqueta. Esta activación de granulación da por resultado la liberación de proteínas conocidas como factores de crecimiento, concentradas principalmente en los alfa-gránulos de las plaquetas. Estos factores de crecimiento liberados estimulan la formación de nuevo tejido, cuando se aplican a las heridas, los factores de crercimiento se ha sabido que aumentan el régimen de colágeno, el crecimiento vascular, la proliferación del fibroblasto y la curación total. La liberación de una proteína conocida como factor de crecimiento derivado de plaqueta (PDGF) es un quimiotáctico para monocitos, neutrófilos y fibroblastos hacia la herida, para comenzar la etapa inflamatoria del proceso de curación. Durante este tiempo, los monocitos secretan PDGF y otra proteína de plaqueta conocida como el factor de crecimiento de transíormación-ß?, que recoge y activa los fibroblastos, un precursor del fibrinógeno, para comenzar la etapa de reparación del proceso de curación. Subsecuentemente, la curación de la herida continua a través del proceso del remodelado de colágeno dentro de la herida. La presencia de los factores de crecimiento promueve la curación de heridas. La invención descrita en la presente aumenta la cantidad de factores de crecimiento en la herida, y facilita por lo tanto la promoción del régimen de curación. Esto puede ser especialmente importante en los pacientes "heridos", especialmente aquellos con heridas crónicas que pueden carecer de circulación suficiente para facilitar la cascada de curación. La invención descrita en la presente facilita también el cubrimiento del área de la herida con una substancia que impide o ayuda a reducir la infección ocasionada por la mayoría de las bacterias; y hasta el grado en que el material de tratamiento de la herida se fabrica de sangre autóloga o materiales biológicos semejantes, la invención descrita en la presente reduce los riesgos asociados con el uso de los materiales de tratamiento fabricados de materiales biológicos obtenidos de una o más terceras partes. Un producto autólogo evita algunos de los problemas comunes asociados con el uso de materiales biológicos de terceras partes, tales como (por ejemplo) protección para asegurarse que el donador era biológica o inmunologicamente compatible con el paciente, y por lo demás exento de hepatitis, HIV y semejantes. Basándose en los principios científicos generales anteriormente citados, ya conocidos en el campo están los agentes selladores de herida fabricados de materiales biológicos obtenidos principalmente del tejido que no sea plaquetas de sangre. Por ejemplo, los agentes de sellado de heridas incluyen "goma de fibrina", que f ecuentemente es esencialmente una mezcla de co-coagulantes (trombina y calcio) , fibrinógeno concentrado y otras proteínas de coagulación. En la mayoría de las aplicaciones, los papeles principales de la goma de fibrina son sellar las superficies la herida para impedir la pérdida de sangre y otros fluidos del cuerpo después de la cirugía, y para proporcionar adhesión entre las superficies del tejido adyacentes. Estos productos forman un recubrimiento duro por encima del área que va a sellarse, y tienden a ser no cedibles para el movimiento de los miembros.

La producción de goma de fibrina frecuentemente requiere obtener fibrinógeno de la sangre a través de un proceso conocido como crioprecipitación, incluyendo tanto ciclos de congelación-descongelación como centrifugación relativamente prolongada del plasma en medios ambientes controlados, para concentrar el fibrinógeno en cantidades lo bastante grandes requeridas para uso; el material precipitante obtenido de esta manera se congela a -20° hasta -30° centígrados antes del almacenamiento. Estos requisitos hacen que estos materiales sean inapropiados para aplicación durante el curso de cirugía, especialmente cirugía de emergencia sin una hora o más de tiempo adelantado; además, hasta el grado en que este proceso depende del uso de materiales biológicos autólogos, usando este proceso al poco tiempo después o durante la cirugía puede dar por resultado la pérdida de fluidos del cuerpo cruciales durante un período de tiempo cuando el cuerpo del paciente está en necesidad urgente de estos fluidos. En contraste, pueden obtenerse de manera más conveniente cantidades considerablemente más grandes de plaquetas concentradas dentro de una cuestión de minutos de métodos más recientes de centrifugación de sangre diferencial que no requiere congelación, sin pérdida significativa de los fluidos del cuerpo.

Hasta la fecha, ha habido gran cantidad de investigación relacionada con la goma de fibrina. Esto se considera como siendo un campo separado de la invención presente, debido principalmente a que las gomas de fibrina típicamente contienen proteínas crioprecipitadas sin plaquetas. El uso de foma de fibrina se discute extensamente en la literatura científica; por ejemplo, véase las referencias citadas en la Patente Norteamericana Número 5,585,007 expedida a favor de Antanavich y otros el 17 de Diciembre de 1996. Un método para diferenciar la centrifugación esencialmente permite separar la propia sangre del paciente en por lo menos tres componentes diferentes: eritrocitos empacados (glóbulos rojos) , plasma y concentrado de plaquetas. El concentrado de plaquetas puede combinarse con una solución ya sea de sodio o calcio mezclada con trorabina ("trombina calcificada"), frecuentemente para formar una composición gelatinosa de plaquetas activadas que, cuando se fabrican con la viscosidad necesaria, pueden utilizarse como un agente de sellado de heridas. Estos agentes de sellado típicamente se convierten en una masa dura que cubre el sitio de aplicación, sellando de esta manera el sitio. El estado gelatinoso inicialmente pegajoso usualmente se endurece para servir para las funciones de (1) detener la pérdida de sangre y otros fluidos del cuerpo, debido a que actúa de manera efectiva como un parche; (2) sellar las heridas contra contaminantes externos; y (3) impedir los problemas tradicionales asociados con el mero cosido de las heridas. Las composiciones de curación de herida incluyendo plaquetas tienen ventajas en relación con materiales sin plaquetas. Una razón es que los agentes de curación de heridas naturales se liberan por las plaquetas. Además, la concentración de las plaquetas asimismo permite una cantidad concentrada de factores de curación de herida. Además, hasta el grado en que la composición de curación de heridas se fabrique de materiales biológicos del paciente, se eliminan los riesgos asociados con donadores heterólogos (tales como enfermedad, reacciones inmunológicas, o semejantes) . El trabajo que rodea el campo del gel de plaqueta autólogo hasta la fecha se ha enfocado en el tratamiento de sangre perioperativo (efecto hemostático) -- impidiendo la pérdida de sangre durante o inmediatamente después de la curugia. Normalmente, cuando un paciente está en la mesa de operaciones, el paciente perderá grandes cantidades de sangre y otros fluidos del cuerpo, dependiendo del tipo de cirugía involucrada. Para contrarrestar esta pérdida de sangre, el enfoque tradicional es infundir al paciente con sangre, que usualmente se dona de una o más partes (o algunas veces donada por el paciente en anticipación a las necesidades quirúrgicas) . Existen muchos tipos diferentes de métodos para recoger la sangre que se usa normalmente en este tipo de situación. Debido a que evidentemente hay un riesgo de enfermedad aumentado, la reacción inmunológica, u otras complicaciones asociadas con procedimientos incluyendo donación de sangre heteróloga, se han hecho esfuerzos recientemente para usar la sangre obtenida contemporáneamente del paciente durante la cirugía. Esta sangre puede fraccionarse y/o filtrarse, y re-infundirse subsecuentemente en el paciente, ahorrando gran cantidad de tiempo, gasto, fluidos del cuerpo y evitando los riesgos normales anteriormente discutidos. Es de la arena de tratamiento de sangre periopereativa que los usos para el gel de plaqueta autólogo se enfocaron. El uso del gel de plaquetas en heridas abiertas resultantes de cirugía recientemente han logrado gran éxito. Este uso específico permite que el paciente mantenga su propia sangre y también reduce los costos . Las siguientes patentes están relacionadas con la invención que se da a conocer en la presente: Número de Patente Inventor Fecha 5, 733, 545 Hood 31 de Marzo, 1998 5, 585, 007 Antanavich, y otros 17 de Diciembre, 1996 5,165,938 Knighton 24 de Noviembre, 1992 5, 674, 912 Martin 7 de Octubre, 1997 Sin embargo, las invenciones dadas a conocer en la presente son patentablemente distintas de la invención dada a conocer en la presente. La patente de Hood reclama un concentrado de capa de plasma que comprende plasma, plaquetas (a una concentración de por lo menos 109 células por mililitro) , fibrinógeno (a una concentración de por lo menos 5 miligramos por mililitro) , y glóbulos blancos (a una concentración por lo menos de 3 veces 10^ células por mililitro) . La invención de Hood logra hemoconcentración mediante remoción del agua del plasma. La invención de Hood también deja de reconocer los beneficios de los niveles aumentados de vitaminas, antibióticos y otras substancias. Por ejemplo, las cantidades más elevadas de vitamina C se cree que prolongan la viscosidad y longevidad de una composición gelatinosa de materia fibrinosa derivada esencialmente de las plaquetas. Como otro ejemplo, la invención de Hood deja de reconocer los beneficios de incluir retinoides, tales como vitamina A (retinol) y/o vitamina E. Por ejemplo, los pacientes que experimenten tratamiento incluyendo esteroides, frecuentemente tienen sistemas inmunes que se suprimen, o por lo demás no responsivos a los estímulos; cantidades aumentadas de vitamina A que se sabe que contrarrestan esa falta de respuesta, y facilitan de esta manera la promoción de curación de heridas. De manera semejante, se cree que aumentando el nivel de la vitamina E se facilita la promoción de la curación de heridas. La patente de Knighton da a conocer el uso de factores de crecimiento múltiples aislados combinados con una substancia portadora biológicamente compatible, después de secuestrar (y la remoción) de todas las membranas de la plaqueta y plasma que contienen la fibrina del exudado del factor de crecimiento preparado. Descartando estas membranas, esencialmente se remueve de los factores de crecimiento residuales de la composición que se sabe que están concentrados en las membranas, y los sitios receptores potenciales para facilitar la formación de la matriz. El método utilizado en Knighton requiere también un número de pasos retardados y de mano de obra intensa, incluyendo el almacenamiento a temperatura de -20° a -30° centígrados antes del uso. El método de Knighton requiere también que los tratamientos de la herida se repitan sobre una base diaria. La patente de Antanavich da a conocer una composición basada principalmente en plasma y, al igual que Knighton, requiere un portador biológicamente aceptable para administrar un concentrado de plasma que comprende plaquetas, fibrinógeno y fibrinectina . La composición de Antanavich es esencialmente una goma de fibrina que tiene que tener una resistencia a la tensión elevada (viscosidad), suficiente para sellar una herida. Hasta el grado en que está relacionada la patente de Martin, Martin da a conocer una composición que comprende un agente protector del sol, un agente antiinflamatorio y una composición de curación de herida. (Martin, columna 6 linea 66 hasta columna 7 linea 2) . Esta composición de curación de herida comprende la combinación de piruvato, un anti-oxidante (incluyendo vitaminas A, C y E) , y ácidos grasos requeridos para reparar las membranas celulares. (Martin, columna 7 líneas 2 a 8). La utilidad y función de estas vitaminas para la composición de Martin, destinada para usarse en la luz del sol en vez de protegida de la luz solar, son distintamente diferentes de la utilidad y función de las vitaminas a la invención que se da a conocer, en la presente, como se explicará a continuación.

Las reacciones químicas y cascadas que suceden normalmente cuando se añade trombina a las plaquetas concentradas son desde luego complicadas. Se discuten en el artículo científico por Reeder y otros, en Proceedings of the American Academy of Cardiovascular Perfusión, Volumen 14, Enero de 1993. Añadiendo un preservativo, o materiales de promoción de curación que no desmerecen de, interfieren esencialmente con, o aún destruyen estas reacciones diferentes, es el punto crucial de la invención dada a conocer en la presente. Un objeto de la invención es proporcionar un material de tratamiento de heridas que es capaz de la producción rápida y conveniente en presencia del paciente. Otro objeto de la invención es proporcionar un material de tratamiento de heridas que facilita la promoción de la curación de heridas. Otro objeto es proporcionar un material de tratamiento de heridas que facilita la prevención de infección de la herida. Otro objeto es proporcionar un método para fabricar un material de tratamiento de heridas que satisface los objetos expresados, implicados o inherentes a la presente.

Otro objeto es proporcionar un método de usar un material de tratamiento de heridas que satisfaga los objetos expresados, implicados o inherentes de la presente.

COMPENDIO DE LA INVENCION En la mayoría de los términos generales, la invención descrita en la presente expande los usos para materiales de plaqueta concentrados, especialmente aquellos en forma de gel, mejorando la velocidad y la conveniencia de la fabricación de la composición; la invención descrita en la presente mejora también el funcionamiento de la composición de plaquetas concentrada, haciéndolo más utilizable para aplicaciones a través de períodos de tiempo más prolongados, y mejorando las propiedades de curación de heridas y para combatir la infección. Para que el gel de plaquetas autólogo sea más útil, el estado gelatinoso debe ser capaz de permanecer estable durante un período de tiempo razonable. Un aspecto de la presente invención es añadir un preservativo al gel de plaquetas, tal como el ácido ascórbico. Otro aspecto de la presente invención involucra añadir una o más substancias antibióticas durante una o más veces durante el período de procesamiento de manera que la composición de plaquetas concentrada resultante contenga ya sea una o una variedad de antibióticos. El uso de un antibiótico en las composiciones de plaqueta concentradas que mejora la cascada de curación compleja es desde luego novedoso. La invención dada a conocer en la presente involucra añadir estas substancias de una manera que no desmerece de, interfiere esencialmente con, o aún destruye estas diferentes reacciones, equilibrios de pH y potencia. Otro aspecto de la presente invención involucra añadir una o más vitaminas que se sabe que promueven y la curación de heridas, tales como vitamina A y vitamina E. El método de la fabricación de la invención en forma de gel descrito en la presente incluye mezclar por lo menos uno de los aditivos descritos en las plaquetas concentradas deficientes en plasma, durante un periodo de tiempo suficiente antes de la adición de la trombina calcificada (u otro agonista de preferencia calcificado) para permitir que la dispersión deseada de este aditivo (s) en esta composición antes de la gelificación impida la dispersión adicional.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Antes de que la presente invención se describe en detalle, quedará comprendido que la invención no se limita a las configuraciones especificas, pasos del proceso y materiales expresados dados a conocer en la presente; la invención incluye aquellos que son implícitos o inherentes en las exposiciones señaladas en la presente, y todos los equivalentes legales de cualesquier elemento (s) o limitación (es) de la misma. Como un ejemplo, los materiales biológicos especificados en la presente pueden originarse de un paciente que va a tratarse, de una sola tercera parte, o de una pluralidad de terceras partes; además, estas terceras partes pueden ser de la misma especie que el paciente, o de cualquier otra especie, siempre y cuando el material del tratamiento de la herida derivado de estos materiales biológicos sea biocompatible con el paciente. Como otro ejemplo, cuando la invención requiere una substancia específica, es suficiente usar cualquier forma de esa substancia que tenga la característica (s) necesaria para satisfacer la necesidad manifestada; por ejemplo, a no ser que el contexto indique lo contrario, una necesidad para factores de crecimiento se podrá satisfacer proporcionando factores de crecimiento aislados o aquellos que se incluyen en plaquetas u otros tipos de células, y/o combinaciones de los mismos. De manera semejante, el proceso desplegado para obtener los factores de crecimiento puede ser cualquier proceso que lo hace satisfactoriamente, independientemente de si incluye la centrifugación.

También quedará comprendido que la terminología usada en la presente no se destina a ser limitativa, puesto que el alcance de la presente invención se limitará sólo por las reivindicaciones y equivalentes de las mismas. Asimismo, como se usa en la presente, las formas singulares incluyen las plurales y viceversa, a no ser que el contexto indique lo contrario. Por razones de simplificar y para proporcionar a las reivindicaciones de esta solicitud de patente las interpretaciones más amplias, y construcción posible, se aplicarán las siguientes definiciones: (a) La frase recolección de sangre o extracción de sangre (o una frase semejante) incluye técnicas, materiales y aparatos conocidos en el campo, tal como (por ejemplo) la inclusión de materiales de anticoagulación, el uso de un aparato de atracción e infusión de sangre. (b) La frase factor de crecimiento significa cualquier material (es) que promueva el crecimiento de tejido. (c) El término trombina puede incluir la trombina calcificada, en particular, aproximadamente 5,000 unidades de trombina por mililitro de cloruro de calcio acuoso; puede incluir la troiabina bovina calcificada asi como la trombina autóloga . (d) El término viscosidad significa aquellas características del material (es) especificado que determine el grado de gelificación, tal como (por ejemplo) la firmeza o dureza del material, o el grado hasta el cual el material resiste a fluir como un fluido. (e) El término cantidad terapéuticamente efectiva significa la cantidad o cantidades de los elementos constituyentes o combinación de los mismos necesarios para mejorar la curación de heridas tal como por ejemplo la reducción en el volumen o área superficial de una herida, el aumento en la cantidad de tejido de granulación u otro material biológico que facilite la colocación del colágeno, crecimiento vascular, proliferación de fibroblastos o curación total; todas las versiones de la invención descritas en la presente se supone que tienen la cantidad (es) terápeuticamente efectiva de las substancias constituyentes o combinaciones de las mismas. Asimismo por razones de simplificar, "y" también puede tomarse como incluyendo "o" y viceversa, cuando sea necesario proporcionar a las reivindicaciones de esta solicitud de patente la interpretación más amplia y construcción posible. Asimismo, cuando se usa la forma múltiple o plural, puede tomarse como que incluye la forma singular y viceversa. En la mayoría de los términos generales, la invención incluye una composición de curativo de heridas que comprende factores de crecimiento activados y ácido ascórbico. En la versión prevaleciente de la invención, los factores de crecimiento se incluyen dentro de las plaquetas. El cuerpo produce muchas substancias conocidas generalmente como factores de crecimiento, y los factores de crecimiento de la presente invención se seleccionan del grupo que consiste de un factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) , un factor de angiogenesis derivado de plaquetas (PDAF) , un factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , un factor de crecimiento epidérmico derivado de plaquetas (PDEGF) , factor de plaquetas 4 (PF-4), factor de crecimiento de transformación ß (TGF-B) , factor de crecimiento de fibroblasto acídico (FGF-A) , factor de crecimiento de fibroblasto básico (FGF-B), factor de crecimiento de transformación a(TGF-A), factores de crecimiento semejantes a insulina 1 y 2 (IGF-1 e IGF-2), proteínas relacionadas con ß tromboglobulina (BTG) , trombospondina (TSP) , fibronectina, factor de von Wallinbrand (vWF) , fibropéptido A, fibrinógeno, albúmina, inhibidor de activador de plasminógeno 1 (PAI-1), osteonectina, célula T normal regulada durante la activación expresada y supuestamente secretada (RANTES) , gro-a, vitronectina, D-dimero de fibrina, factor V, antitrombina III, inmunoglobulina-G (IgG), inmunoglobul ina-M (IgM), inmunoglobul ina-A (IgA), a2-macroglobulina, angiogenina, Fg-D, elastase, factor de crecimiento queratinocito (KGF) , factor de crecimiento epidérmico (EGF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) , factor de necrosis de tumor (TNF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) e interleucina-1 (IL-1), y combinaciones de los mismos. Una de las características importantes comunes para cada substancia, que sustenta la inclusión de cada una en un grupo específico, es que cada substancia se sabe o se cree que mejora el crecimiento de la célula o el tejido. Además, estas substancias, o varias combinaciones de las mismas, se sabe o se cree que funcionan juntas de una manera sinergética para promover la curación de heridas. Las plaquetas están separadas de los glóbulos rojos y los glóbulos blancos de la sangre entera, principalmente a través de la centrifugación diferencial. Sin embargo, la composición total de la invención dada a conocer en la presente puede contener cantidades inherentes de glóbulos blancos debido al hecho de que las plaquetas claramente se aislan totalmente de los otros componentes de la sangre. Se cree que la presente invención contiene sólo cantidades mínimas o de traza de glóbulos blancos; se cree que el recuento de glóbulos blancos de la presente invención típicamente será menor de aproximadamente 3 veces 10^ células por mililitro. La presente invención no remueve el agua para lograr concentración de células. Los biomateriales de la invención es casi exclusivamente de plaquetas. La escala del volumen de plaquetas medio de las plaquetas que se secuestran queda dentro de la escala de 6.6 a 8.4 femtolitros, con un promedio de aproximadamente 7.7 femtolitros; esto puede indicar que las plaquetas que están siendo secuestradas son relativamente más grandes o más jóvenes que la población total de las plaquetas. La activación de los factores de crecimiento puede ocurrir en una variedad de maneras, mediante una variedad de substancias conocidas como activadores o agonistas. En la invención descrita en la presente, esta activación resulta de la inclusión de una actividad o agonista que se selecciona del grupo que consiste de trombina, colágeno, serotonina, difosfato de adenosina (ADP) y acetilcolina (ACH) , y combinación de los mismos. En la versión específica de la invención, estos factores de crecimiento se incluyen dentro de plaquetas concentradas, y los resultados de la activación de la inclusión de trombina. Una de las características importantes comunes para cada substancia, que sustenta la inclusión de cada una en este grupo específico, es que esta substancia se sabe o se cree que mejora el crecimiento de la célula o el tejido. Además, estas substancias o varias combinaciones de las mismas se sabe o se cree que funcionan juntas de una manera sinergética inesperada para promover la curación de heridas . La invención no está limitada a materiales biológicos autólogos de maneera tal como cuando las plaquetas concentradas se obtienen del material biológico propio de la persona herida. La invención abarca el uso de materiales biológicos obtenidos de una o más de las terceras partes, que no necesitan ser de la misma especie que el paciente cuya herida se está tratando con la composición de un curativo de heridas que se describe en la presente a no ser que resulte una bioincompatibilidad del uso de estos materiales biológicos de la tercera parte. En una versión general de la invención, la composición de un curativo de heridas incluye plaquetas concentradas, trombina y ácido ascórbico. El ácido ascórbico se sabe que tiene propiedades de preservación, a no ser que se desintegre tal y como ocurre después de exponerse a la luz solar u otra fuente de rayos de luz ultravioleta (UV) . Sin embargo, la mayoría de las versiones de la invención que se describe en la presente están amparadas por vendajes o protegidos de otra manera de los rayos de luz ultravioleta casi inmediatamente después de la aplicación al sitio de la herida. Puesto que la mezcla de trombina u otros agonistas activará los factores de crecimiento, la trombina (u otros agonistas/activadores) usualmente será la última substancia que se mezclará inmediatamente antes de lo que se desee hacia el estado gelatinoso se solidifique. Otra versión de la invención incluye la inclusión de por lo menos un retinoide en la mezcla, además de o en substitución al ácido ascórbico. Aún cuando la composición de un curativo de heridas podría incluir una combinación de retinoides, una versión de la invención sólo incluye la vitamina A además de o en substitución del ácido ascórbico. La vitamina A se sabe que contrarresta un efecto secundario de algunos tratamientos usando esteroides, a saber la reactividad deprimida del sistema inmune del cuerpo al estímulo. Además, la vitamina A se sabe o se cree que inhibe o disminuye la bioactividad del manganeso, magnesio y cobre en un medio ambiente celular e intersticial; y estos elementos se sabe o se cree que son activos o instrumentales para los queloides y el tejido de cicatriz. (Véase, Effects of Pantothenic Acid and Ascorbic Acid Supplementation on Human Skin Wound Healing Process por Vaxman y otros, Eur. Surg. Res. 1995, 28:4, 158-166). Las versiones de la invención descritas en la presente que contienen vitamina A por consiguiente se cree que promueven la curación sin formación de queloide o cicatrices. En otra versión, el retinoide es vitamina E, que se sabe que facilita la curación. En cualquier caso, las vitaminas dadas a conocer en la presente (o las combinaciones de las mismas) parece ser que mejoran la curación de heridas en una manera inesperadamente sinergética. La utilidad y función de las vitaminas son independientes de cualesquiera de las propiedades anti-oxidativas. Debe reconocerse que ninguna de estas vitaminas de la invención exhibe posiblemente ninguna de las propiedades anti-oxidativas cuando se aplican tópicamente y se exponen a rayos de luz ultravioleta, tal como en la Patente de Martin. Los rayos ultravioleta rápidamente desintegran estas vitaminas, o hace que las mismas sean virtualmente impotentes; además, cualesquiera de las propiedades anti-oxidativas son exhibidas cuando la vitamina es absorbida internamente, no a través de una aplicación solamente tópica. Además, la utilidad y función de dichas vitaminas para la invención dada a conocer en la presente tienen aquí otras diferencias distintas de la utilidad y función de las vitaminas a la composición de Martin. Por ejemplo, el ácido ascórbico disminuye el pH del medio circundante y, por lo tanto, dificulta más que las bacterias saprofíticas crezcan en el lecho de la herida. Aún la composición de un curativo de heridas podría incluir una combinación de antibióticos, una versión de la invención solamente substituye por lo menos un antibiótico además de o en substitución del ácido ascórbico. Puesto que muchos sitios de la herida ya están infectados con bacterias o son susceptibles a esta infección, es deseable que la composición de un curativo de heridas sea capaz ya sea de matar las bacterias o impedir la movilidad o reproducción de bacterias. La invención descrita en la presente incluye una composición de un curativo de heridas que comprende plaquetas concentradas, trombina y por lo menos un antibiótico. En particular, la invención incluye un curativo de heridas en donde el antibiótico es bacteriocida a por lo menos los géneros de bacterias Pseudo onas y Klebsella, que prevalecen en los sitios de la herida y son difíciles de protegerse contra los mismos. De manera alternativa, este antibiótico se selecciona del grupo que consiste de una neosporina, vancomicina y gentamicina, y combinaciones de las mismas. Una de las características importantes comunes a cada substancia, que sustenta la inclusión de cada una en este grupo específico es que cada una de estas subtancias se sabe que mata las bacterias. Como se indica en lo que antecede, la invención puede incluir una composición de un curativo de heridas que comprende plaquetas concentradas, trombina, ácido ascórbico, por lo menos un retinoide y por lo menos un bacteriocida antibiótico para los géneros de bacteria Pseudomonas y Klebsella . Además de la substancia de curativo de heridas que va a aplicarse a los sitios de la herida, la invención además incluye un método para fabricar una composición de un curativo de heridas. Una manera de fabricar las plaquetas concentradas deficientes en plasma de la presente invención es recoger aproximadamente 450 mililitros de sangre entera en el anticoagulante (tal como citrato de sodio o cualquier anticoagulante semejante conocido en el ramo) . Esa sangre luego se centrifuga a por lo menos una velocidad dentro de la escala de entre aproximadamente 2,000 revoluciones por minuto y 3,000 revoluciones por minuto (de preferencia aproximadamente 2,400 revoluciones por minuto) para una duración de entre aproximadamente 15 minutos y 25 minutos (de preferencia aproximadamente 20 minutos) para separar una banda (o un agrupamiento semejante) de: (a) plasma y en su mayoría glóbulos blancos; (b) plaquetas (y glóbulos blancos inherentes) ; y (c) glóbulos rojos. La porción de plaqueta puede luego re-centrifugarse para separar además el plasma (y glóbulos blancos inherentes) ; la re-centrifugación puede ser por lo menos una velocidad dentro de la escala de entre aproximadamente 4,000 revoluciones por minuto y 5,600 revoluciones por minuto (de preferencia aproximadamente 4,800 revoluciones por minuto) para una duración de entre aproximadamente 5 minutos y 10 minutos (de preferencia 7 y medio minutos) . El rendimiento final es de aproximadamente 40 a 50 mililitros de plaquetas concentradas deficientes en plasma (en cantidades inherentes o de traza del plasma residual y glóbulos blancos) . Tanto la porción de plasma/ leucocito como la porción de glóbulos rojos puede refundirse de nuevo en el paciente. Las plaquetas concentradas deficientes en plasma pueden luego activarse mediante una mezcla de trombina y (de preferencia) calcio. De preferencia, una solución que comprende 5,000 unidades de trombina por mililitro de la solución de cloruro de calcio dará por resultado; puesto que los anticoagulantes de la sangre típicamente recogen el calcio de la sangre para impedir que ocurra una cascada de coagulación, la trombina calcificada se usa para volver a suministrar las plaquetas concetradas deficientes en plasma con más calcio para faciliar la cascada de coagulación en el sitio de la herida. Dependiendo de las concentraciones relativas de los ingredientes, la mezcla resultante puede ya sea ser líquida o puede solidificarse como un material duro o (de preferencia) como un gel que tiene una viscosidad que depende de las cantidades relativas de trombina y plaquetas; las concentraciones relativas de la trombina calcificada a las plaquetas determina que tan rápidamente se solidifica la composición y que tan dura será eventualmente . Algunas mezclas rendirán una composición que se solidificará en un gel en varios segundos, mientras que algunas mezclas rendirán una composición que requiere varios minutos para solidificarse en un gel. Independientemente de la cantidad del tiempo de solidificación, la presente invención incluye un preservativo que permite que el gel retenga su viscosidad a través de una duración más prolongada. Por ejemplo, se cree que el ácido ascórbico preserva la longevidad de la viscosidad del gel. Otro método para producir la composición de un curativo de heridas incluye los pasos de mezclar factores de crecimiento activados con ácido ascórbico. Estos factores de crecimiento activados pueden obtenerse en una variedad de maneras tal como mediante los pasos de secuestrar las plaquetas concetradas de la sangre y mezclar la trombina con las plaquetas. Este ácido ascórbico debe ser en cantidad suficiente para mejorar la conservación del estado gelatinoso de la composición final de cicatrización de heridas, y la trombina debe ser en cantidad suficiente para facilitar la formación de un coágulo (gel) que tiene el nivel de viscosidad deseado mientras que activa suficientemente los factores de crecimiento presentes en la composición y la herida. En una versión preferida de la composición, se mezcla aproximadamente 1 mililitro de ácido ascórbico con aproximadamente 8 mililitros de las plaquetas concentradas, luego aproximadamente 1 mililitro de la trombina calcificada se mezcla en una mezcla de 9 mililitros. Sin embargo, pueden ser útiles otras relaciones de plaquetas concentradas : ácido ascórbico : trombina, dependiendo de la cantidad deseada de agentes de curación, el tiempo de gelificación, la viscosidad del gel y la longevidad. Otro método para elaborar la composición permite la extracción de sangre, el secuentro de las plaquetas concentradas deficientes en plasma, el mezclado de aditivos y el regreso de los componetes de sangre no utilizados al paciente, todo ello en aproximadamente de 20 a 30 minutos y haciendo solamente una punción en el paciente. Se extrae de un paciente aproximadamente de 125 a 250 mililitros de sangre, con el aparato de atracción de sangre permaneciendo opcionalmente en su sitio conectado con el paciente (para uso posterior para regresar al paciente los componentes de sangre no utilizados) . La sangre es transferida a un recipiente de Lathum y, usando una centrífuga, tal como la que se fabrica por Haemonetics, Inc. se centrifuga a aproximadamente 4,800 revoluciones por minuto hasta que se forme una banda (o agrupamiento semejante) de plasma en la periferia superior (de aproximadamente 5 a 15 minutos) , y una banda (o agrupamiento semejante) de glóbulos rojos se forme en el fondo del recipiente; el centro consiste de plaquetas concentradas deficientes en plasma. La banda de plasma se remueve para regresarse al paciente, y los componentes de sangre restantes se centrifugan de nuevo a esa velocidad (y duración suficiente) , removiendo además el plasma y las glóbulos blancos de las plaquetas concentradas deficientes en plasma. Las plaquetas concentradas deficientes en plasma luego se remueven para mezclarse con los otros aditivos descritos en la presente (trombina, ácido ascórbico y/o retanoides) . El método de la elaboración de un curativo de heridas además puede incluir, antes de o de manera contemporánea con el mezclado de trombina, el mezclado por lo menos de uno de los retinoides anteriormente mencionados en cantidad (es) suficiente para mejorar además la curación de heridas. En una versión, 1 mililitro de una solución acuosa homogénea de vitamina A y vitamina E se añaden 8 mililitros de plaquetas concentradas y un mililitro de ácido ascórbico antes de mezclarse en un 1 mililitro de trombina . De manera alternativa, este método puede incluir antes o de manera contemporánea con el mezclado de la trombina, el mezclar por lo menos uno de los antibióticos anteriormente mencionados en una cantidad (es) suficiente para reducir la infección mediante las bacterias. Además, un método para elaborar una composición de un curativo de heridas, la invención descrita en la presente puede también incluir un método para tratar una herida que comprende los pasos de aplicar una cantidad suficiente de una composición de bacteria que comprende factores de crecimiento y ácido ascórbico para mejorar la curación de la herida. Este método de tratamiento de una herida puede incluir el uso de cualesquiera de las composiciones descritas en la presente, y puede incluir asimismo el uso de cualquier composición elaborada mediante cualesquiera de los métodos descritos en la presente. Una vez que se aplica a una herida, la composición puede permanecer en la herida durante tanto así como durante cinco días y posiblemente de manera más prolongada dependiendo de las circunstancias, tales como la ubicación de la herida y otras características de la herida. Aún cuando la composición y el método descritos en la presente son especialmente útiles para el tratamiento de heridas crónicas, también pueden ser útiles en el tratamiento de heridas agudas .

Ejemplo 1 Estudio del caso: El paciente P es un conductor de camión del género masculino blanco de 57 años con una úlcera diábetica en el talón derecho de duración de 11 meses. Su régimen de tratamiento ha consistido de descanso, descarga y limpieza de la herida diaria con jabón y agua seguida por aplicación de un venda de gasa. Se ordenó el gel de Carrasyn durante un periodo breve sin mejora. Al hacer referencia a un departamento de terapia físico de pacientes externo para tratamiento de la herida, la terapia actual de P consiste de desbridamiento semanal, gasa salina húmeda y vendaje enyesado P de contacto total que tiene historia de hipertensión que se controla en la actualidad. Tiene una historia de diabetes mellitus con neuropatía de 15 años que se controla con elementos orales hiploglicémicos . P comenzó el tratamiento con la invención dada a conocer en la presente. Después de que su herida se desbridó bruscamente, se aplicó un coágulo de gel y la herida se cubrió con una venda salina húmeda. Se aplicó luego un vendaje enyesado de contacto total y se dejó intacto durante una semana. A la conclusión de la semana 1 el vendaje enyesado se removió, al sitio de la herida se limpió y se recuperó con gasa húmeda; el miembro se volvió a enyesar durante la semana 2. Después de concluir la semana 2, se siguió el mismo procedimiento con la excepción de que el coágulo de gel de nuevo se aplicó al sitio de la herida antes de cubrirse con un vendaje húmedo. Después de la conclusión de la semana 3, se siguió el mismo procedimiento que para la semana 2. Este régimen continuó durante un total de 36 días. El Cuadro 1 que se presenta a continuación contiene los datos que reflejan la reducción en el volumen del sitio de la herida y el área superficial durante la semanas 1 a 4. Cuadro 1 Semana # Volumen (mm3) Área 0 3121 674 1 1561 562 2 279 301 3 26 282 4 15 159 Ejemplo 2 Pt # Volumen (mm3 ) Área (mm2) Comienzo Final Comienzo Final 1 3121 mm3 15 mm3 674 mm2 159 mm2 2 358 mm3 0.0 mm 3 65 mm 2 4 . mm2 3 293 mm3 3.0 mm3 63 mm2 3 mm2 4 192 mm3 18 mm3 104 mm2 39 mm2 5 336 mm3 0.0 mm3 181 mm2 0.0 mm2 Los cinco pacientes que entraron en este estudio lo hicieron mediante sus médicos. Los pacientes luego se seleccionaron usando el criterio de exclusión, inclusión. Los pacientes seleccionados para el estudio tenían una úlcera de la extremidad inferior que no se había curado después de cuatro a seis meses de tratamiento ya sea con cuidado de la herida tradicional solamente o con cuidado tradicional más Regranex1.

Un solo producto de factor de crecimiento de Ortho-McNeal vendido por Johnson & Johnson.

Todos los cinco de los pacientes del estudio tenían recuento de plaquetas de 100,000 células por milímetro cúbico o mayor, y tenían una homoglobina > 10 gramos y un HCT de 30 por ciento mayor. Los pacientes se evaluaron para infeccioón en la herida y para osteomielitis. Niguno de los pacientes estudiados mostraron señales de infecciópn ni se involucraron con el hueso. El desbridamiento agresivo para cambiar esencialmente la herida crónica a una aguda fue el que se usó. La úlcera y los callos circundantes se cortaron completamente hasta un tejido no involucrado normal. Todos los pacientes se trataron como pacientes externos. Todos los pacientes convinieron totalmente estando dentro del peso. Con la excepción de uno, los pacientes se suministraron con un medio zapato que transfirió el peso al área no afectada del pie. Un paciente que no se ajustó con el medio zapato se proporcionó con un vendaje enyesado completo de la pierna inferior. Las preguntas directas de pacientes y de la familia evaluaron el asunto de cumplimiento. Solamente un paciente demostró que no era cumplido. El azúcar de la sangre del paciente 4 excedió 400 miligramos por decilitro y se desorientó, y caminó en su pie durante el día 2 postratamiento. Esto dio por resultado un re- tratamiento del paciente 42. El Cuadro 2 muestra el tamaño de la herida y el volumen al camienzo y a la conclusión del tratamiento con el coágulo que se da a conocer en la presente. El cierre en promedio requirió menos de cuatro semanas. La herida del paciente promedio se llevó a 99 por ciento de cierre en 25 días.

Pt#4 NG no cumplió este estudio faltando tres visitas clínicas.

Claims

R E I V I N D I C A C I O N E S

1. Una composición curativa de heridas que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de factores de crecimiento activados y ácido ascórbico.

2. Un curativo de heridas que se describe en la reivindicación 1, en donde los factores de crecimiento se originan en plaquetas.

3. Un curativo de heridas que se describe en la reivindicación 1, en donde los factores de crecimiento se seleccionan del grupo que consiste de un factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) , un factor de angiogénesis derivado de plaquetas (PDAF) , un factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , un factor de crecimiento epidérmico derivado de plaquetas (PDEGF) un factor de plaquetas 4 (PF-4), un factor de crecimiento de transformación ß (TGF-B) , un factor de crecimiento de fibroblasto acídico (FGF-A) , un factor de crecimiento de fibroblasto básico (FGF-B) , un factor de crecimiento de transformación a (TGF-A) , factores de crecimiento semejantes a insulina 1 y 2 (IGF-1 e IGF-2), proteínas relacionadas con ß tromboglobulina (BTG) , trombospondina (TSP) , fibronectina, factor de von Wallinbrand (vWF) , fibropéptido A, fibrinógeno, albúmina, inhibidor de activador de plasminogeno 1 (PAI-1) , osteonectina , regulado durante activación de la célula T normal que se expresa y supuestamente se secreta (RANTES) , gro-ct, vitronectina , D-dímero de fibrina, factor V, antitrombina III; inmunoglobulina-G (IgG) , inmunoglobulina-M (IgM), inmunoglobulina-A (IgA), a2-macroglobulina, angiogenina, Fg-D, elastasa, factor de crecimiento de queratinocito (KGF) , factor de crecimiento epidérmico (EGF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) , factor de necrosis de tumor (TNF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) e interleucina- 1 (IL-1), y combinaciones de los mismos.

4. Un curativo de heridas descrita en la reivindicación 1, en donde los resultados de la activación de la inclusión de un agonista seleccionado del grupo que consiste de trombina, colágeno, serotonina, difosfato de adenosina (ADP) y acetilcolina (ACH) , y combinaciones de los mismos.

5. Un curativo de heridas descrita en la reivindicación 1, en donde los factores de crecimiento se incluyen dentro de las plaquetas concentradas, y los resultados de activación de la inclusión de trombina.

6. Un curativo de heridas que se describe en la reivindicación 5, en donde las plaquetas concentradas se obtienen del material biológico propio de la persona herida y que tiene un recuento de glóbulos blancos de menos de aproximadamente 3 veces 107 células por mililitro.

7. Una composición curativa de heridas que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de plaquetas concentradas, ácido ascórbico y trombina.

8. Una composición curativa de heridas que 5 comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de plaquetas concentradas, por lo menos un retinoide y trombina .

9. Una composición curativa de heridas que se describe en la reivindicación 8, en donde el retinoide es

10 la vitamina A. 10. Una composición curativa de heridas que se describe en la reivindicación 8, en donde el retinoide es la vitamina E.

11. Una composición curativa de heridas que 15 comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de plaquetas concentradas, por lo menos un antibiótico y trombina .

12. Un curativo de heridas descrita en la reivindicación 11, en donde el antibiótico es bacteriocida 20 a por lo menos las bacterias Pseudo onas y Klebsella .

13. Un curativo de heridas descrita en la reivindicación 11, en donde el antibiótico se selecciona del grupo que consiste de una neosporina, vancomicina y gentamicina, y combinaciones de las mismas. -'-.:,: . . ;· .. .

14. Una composición curativa de heridas que comprende plaquetas concentradas, ácido ascórbico y por lo menos un retinoide, por lo menos un bacteriocida antibiótico para por lo menos Pseudomonas y Klebsella y trombina.

15. Una composición curativa de heridas que comprende aproximadamente 8 mililitros de plaquetas concentradas, aproximadamente 1 mililitro de ácido ascórbico y aproximadamente 1 mililitro de trombina.

16. Una composición curativa de heridas como se describe en la reivindicación 15, que además comprende aproximadamente 1 mililitro de vitamina A y de vitamina E.

17. Un método para elaborar una composición curativa de heridas que comprende los pasos de mezclar, en una cantidad (es) terapéuticamente efectiva, los factores de crecimiento activados con ácido ascórbico.

18. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 17, en donde los factores de crecimiento activados se obtienen mediante los pasos de secuestrar las plaquetas concentradas y mezclar la trombina con las plaquetas .

19. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 18, el secuestro comprende los pasos de separar las plaquetas de los otros componentes de la sangre centrifugando la sangre durante por lo menos una velocidad dentro de la escala de entre aproximadamente 2,000 revoluciones por minuto y aproximadamente 3,000 revoluciones por minuto para una duración dentro de la escala de aproximadamente 15 minutos y aproximadamente 25 minutos, luego además concentrar las plaquetas centrifugando las mismas por lo menos a una velocidad dentro de la escala de entre aproximadamente 4,000 revoluciones por minuto y aproximadamente 5,600 revoluciones por minuto para una duración dentro de la escala de entre aproximadamente 5 minutos y aproximadamente 10 minutos, y mezclar el ácido ascórbico y luego la trombina con las plaquetas concentradas en cantidades suficientes para dar por resultado la gelificación que tiene un nivel deseado de viscosidad y longevidad, y cantidades terapéuticamente efectivas de un curativo.

20. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 19, en donde: para separar primero las plaquetas, la velocidad de la centrífuga es de aproximadamente 2,400 revoluciones por minuto y la duración de centrifugación es de aproximadamente 20 minutos; para concentrar además las plaquetas, la velocidad de la centrífuga es de aproximadamente 4,800 revoluciones por minuto y la duración de centrifugación es por lo menos de 7 minutos y medio; y aproximadamente 1 mililitro del ácido ascórbico mezclado en aproximadamente 8 mililitros de las plaquetas concentradas .

21. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 20, en donde la cantidad de trombina es de aproximadamente 5,000 unidades en aproximadamente 1.0 mililitro de una solución de cloruro de calcio acuosa.

22. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 17, el método además comprende, antes de mezclar la trombina, mezclar por lo menos un retinoide en una cantidad (es) suficiente para mejorar además la curación de heridas.

23. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 22, en donde el retinoide es vitamina A en cantidad suficiente para reducir cualquier no respuesta del sistema inmune de la persona herida a los estímulos, y la vitamina E en cantidad suficiente para mejorar además la curación de la herida.

24. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 23, en donde aproximadamente 1 mililitro de la vitamina A y la vitamina E se mezclan con aproximadamente 8 mililitros de las plaquetas concentradas y aproximadamente 1 mililitro del ácido ascórbico, luego se mezclan con aproximadamente 5,000 unidades de trombina en aproximadamente 1.0 mililitro de la solución de cloruro de calcio acuosa.

25. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 17, el método además comprende, antes de mezclar la trombina, mezclar por lo menos un antibiótico en cantidad (es) suficiente para reducir la infección mediante bacterias.

26. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 25, en donde el antibiótico es por lo menos un bacteriocida para las bacterias Pseudomonas y Klebsella .

27. Un método para elaborar un curativo de heridas descrito en la reivindicación 25, en donde el antibiótico se selecciona del grupo que consiste de una neosporina, vancomicina y gentamicina, y combinaciones de las mismas.

28. Un método para elaborar un curativo de heridas que comprende los pasos de, antes de mezclar la trombina, mezclar en cantidad (es) terapéuticamente efectiva para las plaquetas concentradas, el ácido ascórbico, por lo menos un retinoide y por lo menos un bacteriocida antibiótico a por lo menos las bacterias Pseudomonas y Klebsella .

29. Un método para elaborar una composición curativa de heridas que comprende los pasos de extraer la sangre de un paciente, centrifugar la sangre hasta que aparezca una banda de plasma esencialmente separada, una banda esencialmente separada de glóbulos rojos y un agrupamiento esencialmente intermedio consistente de plaquetas concentradas entre las mismas; remover la banda de plasma, centrifugar los componentes de sangre restantes a la velocidad y a una duración suficiente; remover las plaquetas concentradas; y mezclar, en cantidad (es) terapéuticamente efectiva, las plaquetas concentradas con la trombina.

30. Un método para elaborar una composición curativa de heridas descrita en la reivindicación 29, en donde: de aproximadamente 125 a 250 mililitros de sangre se extrae de un paciente; la sangre es transferida a un recipiente Lathum y se centrifuga a aproximadamente 4,800 revoluciones por minuto durante aproximadamente 10 minutos hasta que la banda de plasma se forme en la periferia superior, la banda de glóbulos rojos se forma en la parte inferior del recipiente, y el agrupamiento esencialmente intermedio que consiste de plaquetas concentradas se forma entre las mismas; la segunda centrifugación o los componentes de sangre restantes está a la velocidad y duración .

31. Un método para tratar una herida que comprende los pasos de aplicar una cantidad suficiente de una composición de materia que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de factores de crecimiento activados y ácido ascórbico para mejorar la curación de la herida .

32. Un método para tratar una herida que se describe en la reivindicación 31, en donde los factores de crecimiento se derivan de plaquetas.

33. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, en donde los factores de crecimiento se seleccionan del grupo que consiste de un factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) , un factor de angiogénesis derivado de plaquetas (PDAF) , un factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , un factor de crecimiento epidérmico derivado de plaquetas (PDEGF) un factor 4 de plaquetas (PF-4) , un factor ß de crecimiento de transformación (TGF-B) , un factor de crecimiento de fibroblasto acídico (FGF-A) , un factor de crecimiento de fibroblasto básico (FGF-B) , un factor a de crecimiento de transformación (TGF-A) , factores 1 y 2 de crecimiento semejantes a insulina (IGF-1 e IGF-2), proteínas relacionadas con ß tromboglobulina (BTG) , trombospondina (TSP) , fibronectina, factor de von Wallinbrand (vWF) , fibropéptido A, fibrinógeno, albúmina, inhibidor activador de plasminógeno 1 (PAI-1) , osteonectina , regulado durante activación de la célula T normal expresada y supuestamente secretada (RA TES) , gro-a, vitronectina , D-dímero de fibrina, factor V, antitrombina III, inmunoglobulina-G (IgG), inraunoglobulina- (Ig ), inmunoglobul ina-A (IgA), a2-macroglobulina, angiogenina, Fg-D, elastasa, factor de crecimiento de queratinocito (KGF) , factor de crecimiento epidérmico (EGF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) , factor de necrosis de tumor (TNF) , factor de crecimiento de fibroblasto (FGF) e interleucina- 1 (IL-1) , y combinaciones de las mismas.

34. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, en donde los resultados de activación de la inclusión de un agonista que se selecciona del grupo que consiste de trombina, colágeno, serotonina, ADP y acetilcolina (ACH) , y combinaciones de los mismos.

35. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, en donde los factores de crecimiento se derivan de plaquetas concentradas, y los resultados de activación de la inclusión de trombina.

36. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, en donde las plaquetas concentradas se obtienen del material biológico propio de la persona herida .

37. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, en donde la composición curativa de heridas comprende plaquetas concentradas, ácido ascórbico y trombina .

38. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, comprendiendo la composición curativa de heridas, plaquetas concentradas y trombina, y además comprende por lo menos un retinoide .

39. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 38, en donde el retinoide es vitamina A.

40. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 38, en donde el retinoide es vitamina E.

41. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, comprendiendo la composición curativa de heridas, plaquetas concentradas y trombina, que además comprende por lo menos un antibiótico.

42. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 41, en donde el antibiótico es bacteriocida a por lo menos las bacterias Pseudomonas y Klebsella .

43. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 41, en donde el antibiótico se selecciona del grupo que consiste de una neosporina, vancomicina y gentamicina, y combinaciones de las mismas.

44. Un método para tratar una herida descrito en la reivindicación 31, la composición curativa de heridas comprende plaquetas concentradas, ácido ascórbico, por lo menos un retinoide, por lo menos un bacteriocida antibiótico para las bacterias Pseudomonas y Klebsella , y trombina .