MX2014014093A - 1,3-benzoxazol-2(3h)-onas novedosas y su uso como medicamentos y cosmeticos. - Google Patents

Abstract

La invención presente se relaciona a una clase novedosa de 1,3-benzoxazol-2(3H)-onas de la fórmula (1) y su uso como un medicamento, preferiblemente como un agente dermatológico, y como un cosmético; estos compuestos novedosos son especialmente útiles para tratar y/o prevenir inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas en un paciente; generalmente son aplicados tópicamente a la piel o mucosa en forma de una composición farmacéutica o cosmética que comprende el compuesto y un portador farmacéuticamente y/o cosméticamente aceptable.

Description

1 ,3-BENZOXAZOL-2(3H)-ONAS NOVEDOSAS Y SU USO COMO MEDICAMENTOS Y COSMÉTICOS La invención presente se relaciona a una clase novedosa de 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas y su uso como un medicamento, preferiblemente como un agente dermatológico, y como cosméticos. Estos compuestos novedosos se dirigen al sistema endocanabinoide y son especialmente útiles en el tratamiento y/o la prevención de inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema, y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas en un paciente. Generalmente son aplicados tópicamente a la piel o la mucosa de un mamífero en forma de una composición farmacéutica o cosmética que comprende el compuesto y un portador farmacéuticamente y/o cosméticamente aceptable.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El sistema endocanabinoide (ECS, por sus siglas en inglés) comprende receptores canabinoides (CB^ y CB2, TRPV1 y potencialmente también GPR55), ligandos derivados del ácido araquidónico, y sus enzimas reguladoras. La importancia del sistema endocanabinoide en tejidos periféricos ha sido demostrada en numerosos estudios recientes (Di Marzo V. Targeting the endocannabinoid system: to enhance or reduce? Nat Rev Drug Discov. 2008 May; 7(5):438-55). Aunque la activación del sistema periférico endocanabinoide a menudo se asocia con efectos antiinflamatorios e inmunosupresores, el papel del ECS en la piel es más complejo. Se ha demostrado que la activación del receptor de CB2 activa las endorfinas que actúan localmente como analgésicos (Ibrahim MM, Porreca F, Lai J, Albrecht PJ, Rice FL, Khodorova A, Davar G, Makriyannis A, Vanderah TW, Mata HP, Malan TP Jr. CB2 cannabinoid receptor activation produces antinociception by stimulating peripheral reléase of endogenous opioids. Proc Nati Acad Sci U S A. 2005 Feb 22;102(8):3093-8). Estudiando a ratones knockout CB, ha sido observado que el ECS y el receptor CBi puede inhibir la patogénesis de la dermatitis alérgica por contacto (Karsak M, Gaffal E, Date R, Wang-Eckhardt L, Rehnelt J, Petrosino S, Starowicz K, Steuder R, Schlicker E, Cravatt B, Mechoulam R, Buettner R, Werner S, Di Marzo V, Tüting T, Zimmer A. Attenuation of allergic contact dermatitis through the endocannabinoid system. Science. 2007 Jun 8;316(5830): 1494-7). De manera interesante, en este estudio fue demostrado que los inhibidores de la degradación de anandamida a través de la amida de ácido graso hidrolasa (FAAH) podría ser una estrategia terapéutica prometedora para tratar formas diferentes de dermatitis. En términos generales, el sistema endocanabinoide en la piel está presente, ambos de los receptores CBi y CB2 han sido detectados en queratinocitos y fibroblastos y los endocanabinoides son liberados en la piel en donde parecen regular múltiples señales involucradas en la inflamación. La anandamida ejerce efectos antiinflamatorios y anti-alérgicos potentes (Leonti M, Casu L, Raduner S, Cottiglia F, Floris C, Altmann KH, Gertsch J. Falcarinol is a covalent cannabinoid CBi receptor antagonists and induces pro-allergic effects in skin. Biochem. Pharmacol. 2010, 79: 1815-1826). Además, se ha demostrado que los inhibidores de la recaptación de la anandamida ejercen varios efectos beneficiosos incluyendo dolor neuropático y periférico (Yates M L, Baker EL. Inactivation and Biotransformation of the endogenous cannabinoids anandamide and 2-arachidonoyl glycerol. Mol. Pharmacol. 2009, 76: 1 1-17). Sin embargo, los mecanismos fundamentales todavía no son comprendidos completamente y hay todavía muchas preguntas pendientes de ser contestadas.

La WO2010/ 36221 revela dodeca-2E,4E-dien amidas y su uso como medicamentos y cosméticos.

Así, la clase reclamada de 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas de la invención presente no se describe en la técnica previa, dejada sola para ser conveniente y activa en el tratamiento y la prevención de trastornos de la piel.

Además, incluso si se conocen muchos agentes y preparaciones dermatológicas en la técnica previa para tratar cualquier clase de molestia de la piel, hay todavía una fuerte demanda para encontrar nuevos agentes activos que son más efectivos, requiriendo incuso que se apliquen menores cantidades, y que tengan menos efectos secundarios.

Así, el objetivo fundamental de la invención presente es la provisión de nuevos compuestos convenientes como medicamentos. Es un objetivo adicional de la invención presente proporcionar nuevos compuestos convenientes como agentes dermatológicos para tratar y prevenir varias condiciones incluyendo inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema, y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas etc., especialmente de la piel y mucosa de un mamífero, cuyos compuestos son más efectivos, requieren cantidades reducidas de ingrediente activo en comparación con los compuestos de la técnica previa, y tienen menos efectos secundarios indeseables.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Los objetivos antes mencionados han sido resueltos sorprendentemente de acuerdo con la invención presente. Así, la invención presente se relaciona a 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas específicas según la fórmula (1) siguiente. fórmula (1) Los compuestos según la fórmula (1) son soluciones alternativas al mismo problema y no han sido obvios para el experto en la técnica.

En la fórmula (1) el residuo R1 es seleccionado del grupo que consiste de -(CH2)nN(R4)C(0)R5 y -C(0)NR4R6. Preferiblemente R1 es -(CH2)nN(R4)C(0)R5.

En la fórmula (1) el residuo R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno; -alquilo de C1-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OCi-6, cicloalquilo de OC3-7; -cicloalquilo de C3-7, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OC1-6, cicloalquilo de OC3-7; -(cicloalquilo de C3-7)-alquilo de Ci-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OCi_6, cicloalquilo de 003.7. Aunque los sustituyentes opcionales antes mencionados son preferibles según la invención presente, otros sustituyentes como se menciona después en la descripción también son convenientes según la invención presente.

En la fórmula (1 ) el residuo R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, metoxi o -CN.

En la fórmula (1 ) el residuo R4 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno o alquilo de C-i-6.

En la fórmula (1 ) el residuo R5 es seleccionado del grupo que consiste en alquilo de C8-15, alquenilo de C-8-15, alquinilo de C8-15, (arilo de C6- 10) -alquilo de C6-io, (arilo de C6-io) -alquenilo de C 6-io> y (arilo de C6-io) -alquinilo de C-6-??· En todos estos grupos que contienen arilo, el arilo puede estar sustituido por uno o por más del sustituyentes como es mencionado después en la descripción presente.

En la fórmula (1) el residuo R6 es seleccionado del grupo que consiste en alquilo de C9-16, alquenilo de C9-16, alquinilo de C9-i6, (arilo de Ce-10) -alquilo de C7-n , (arilo de Ce-io) -alquenilo de C 7-n , y (arilo de Ce-??) - alquinilo de C7-n. En todos estos grupos que contienen arilo, el arilo puede estar sustituido por uno o por más del sustituyentes como es mencionado después en la descripción presente.

En la fórmula (1) n es 0, 1 , o 2, preferiblemente 0 o 1 , más preferiblemente 0.

Preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R1 es -(CH2)nN(R4)C(0)R5 con n siendo 0 o 1 , preferiblemente 0; R2 es hidrógeno o alquilo de Ci-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OCi-6, cicloalquilo de OC3-7; R3 es hidrógeno o halógeno, preferiblemente hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 se selecciona de alquilo de Cs-15, alquenilo de Cs-is, (arilo de C6-io)-alquilo de C-6-10, y (arilo de Ce-io)-alquenilo de C6-io- En estas definiciones el arilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes como se menciona posteriormente.

Preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R1 es -C(O)NR R6; R2 es hidrógeno o alquilo de Ci-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OCi-6, cicloalquilo de OC3-7; R3 es hidrógeno o halógeno, preferiblemente hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de C9.16, alquenilo de C8-16, (arilo de C6-io)-alquilo de C7.11 , y (arilo de C6-io)-alquenilo de C7-n, en donde el arilo está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes como se menciona posteriormente.

Más preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R1 es -(CH2)nN(R )C(0)R5 con n siendo 0; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 se selecciona de alquilo de C8-15, alquenilo de C8-15 (en donde el alquenilo contiene de 1 , 2, o 3 dobles enlaces), (arilo de C6-io)-alquilo de Ce-io, y (arilo de C6-io)-alquenilo C6-io (en donde el alquenilo contiene 1 o 2 dobles enlaces).

Incluso preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R1 es -C(0)NR4R6; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de Cg.16, alquenilo de C9-i6 (en donde el alquenilo contiene 1 , 2, o 3 dobles enlaces), (arilo de Ce-io) -alquilo de C7-n, y (arilo de C6-io) -alquenilo de C7_n (en donde el alquenilo contiene 1 o 2 dobles enlaces).

Más preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R es -(CH2)nN(R4)C(0)R5 con n siendo 0; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 se selecciona de alquilo de C8-12, alquenilo de C8-12 (en donde el alquenilo contiene 2 dobles enlaces), (arilo de C6-io)-alquilo de C6-8, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C6-8 (en donde el alquenilo contiene 2 dobles enlaces).

En una modalidad particularmente preferida de la invención presente el compuesto según la fórmula (1) contiene R1 siendo -(CH2)nN(R )C(0)R5 con n siendo 0, R2 siendo hidrógeno o metilo, y R3 siendo hidrógeno. En la definición de R1 en la presente, R4 es hidrógeno y R5 se selecciona de alquilo de C8-12, alquenilo de C8-12 que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación, (arilo de C6-io)-alquilo de Ce-8, y (arilo de C6-io)-alquenilo de Ce-8 que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación en el grupo alquenilo del mismo.

También preferiblemente, los compuestos según la invención presente son esos, en donde en la fórmula (1) R1 es -C(0)NR4R6; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de C9.13, alquenilo de Cg-13 (en donde el alquenilo contiene 2 dobles enlaces), (arilo de C6-io) -alquilo de C7-9, y (arilo de C6--io) -alquenilo de C7-9 (en donde el alquenilo contiene 2 dobles enlaces).

En otra modalidad particularmente preferida de la invención presente el compuesto según la fórmula (1) contiene R1 siendo -C(0)NR4R6, R2 siendo hidrógeno o metilo, y R3 siendo hidrógeno. En la definición de R1 en la presente, R4 es hidrógeno y R6 se selecciona de alquilo de C9-13, alquenilo de Cg.13 que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación, (arilo de C6-io)-alquilo de C7-g, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C7.g que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación en el grupo alquenilo del mismo.

Además, la invención presente se relaciona al uso de estos compuestos como un medicamento, preferiblemente un agente dermatológico, y como un cosmético. Los compuestos son efectivos en el tratamiento y/o la prevención de inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema, y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas, especialmente de la piel y mucosa de un mamífero. Condiciones adicionales incluyen el crecimiento del cabello (por ejemplo formas de alopecia, efluvio) y trastornos de las glándulas sebáceas (por ejemplo acné, seborrea), tumores benignos y malignos de la piel, enfermedades hiperproliferativas de la piel (por ejemplo soriasis), crecimiento excesivo de pelo (por ejemplo hirsutismo), formas diferentes de dermatitis, condiciones de piel seca, y esclerosis sistémica (escleroderma).

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la invención presente el solicitante ha desarrollado las nuevas 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas como se definen en la fórmula (1 ) y ha encontrado sorprendentemente que estos compuestos pueden ser utilizados efectivamente como un medicamento, preferiblemente como un agente dermatológico, y como un cosmético debido a su naturaleza lipofílica. Las condiciones y las enfermedades a ser tratadas son especialmente inflamación, comezón, prurito, irritación, dolor, edema, y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas. Los compuestos resultaron ser efectivos no sólo en el tratamiento sino también en la prevención de las condiciones antes mencionadas. Las condiciones también comprenden reacciones inflamatorias e irritación de la piel y mucosa de un mamífero, preferiblemente de un humano, por ejemplo causados por estrés e influencias ambientales, tales como irradiación UV, sustancias tóxicas, y alérgenos en general. Así, los compuestos han demostrado reducir efectivamente varias clases de molestias de la piel y de la mucosa como se mencionó antes. En particular, han demostrado proporcionar propiedades analgésicas y anti-pruríticas.

Sin pretender limitarse por ninguna teoría, el solicitante cree que la razón para la actividad de las 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas de la invención presente se basa en su función como moduladores del sistema endocanabinoide. En este sentido se sabe que los endocanabinoides N-araquidonoiletanolamida (Anandamida, AEA) y 2-araquidonoilglicerol (2-AG) se unen a los receptores canabinoides CBi y CB2 acoplados a la proteína G. El receptor CBi es expresado principalmente (pero no exclusivamente) en las neuronas, el receptor de CB2 está presente principalmente en los inmunocitos, tales como monocitos (esplenocitos), macrofagos, linfocitos B, pero también en las células astrogliales. En la piel, los receptores de CB, en particular el receptor de CB2, es expresado en los queratinocitos y fibroblastos. Con la activación del receptor de CB, los endocanabinoides son transportados activamente por la membrana celular y degradados. Las enzimas metabólicas, amida de ácido graso hidrolasa (FAAH) y monoacil glicerol lipasa (MAGL), son responsables de la hidrólisis de AEA y 2-AG, respectivamente, llevando así a la inactivación de estas moléculas de señalización. Mientras la activación del receptor de CBi ha demostrado mediar distintos efectos neurofisiológicos, se sabe que la modulación del receptor de CB2 tanto por los agonistas como por los agonistas inversos interfiere con los diferentes procesos inflamatorios. La activación del receptor de CB2 puede llevar a efectos antiinflamatorios in vivo y la modulación del receptor de CB2 ha sido implicada en la fisiopatología de varias enfermedades, incluyendo dolor crónico, inflamación del tracto gastrointestinal, osteoporosis, y afecciones hepáticas. Las plantas emplean moléculas de señalización de lípidos estructuralmente semejantes a las de los animales para procesar la información celular, incluyendo derivados de ácido graso de tipo endocanabinoide. Ya que las plantas no sintetizan generalmente el ácido araquidónico, diferentes N-aciletanolaminas como por ejemplo N-palmitoiletanolamida, se produce en las plantas y estos lípidos también han demostrados actuar en las proteínas directamente o indirectamente asociadas con el sistema endocanabinoide (ECS) en animales y humanos, tal como FAAH, el receptor vainilloide potencial del receptor transitorio (TRPV1) o el recientemente postulado receptor canabinoide GPR55.

Así, de acuerdo con la invención presente ha sido encontrado que las 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas de fórmula (1) muestran una interferencia funcional significativa con el ECS que se asume es una razón para su actividad farmacológica. En particular, las 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas reclamadas inhiben la recaptación de FAAH o AEA. Además, algunos compuestos de la invención inhiben la recaptación de FAAH además de AEA. Es decir, estos compuestos inhiben la recaptación de AEA o la actividad de FAAH o ambos sin afectar los receptores CBi y CB2.

Si no se describe en una manera diferente en la presente, los términos empleados para la definición/descripción en la fórmula (1) los respectivos grupos R (es decir R1 a R6) incluyendo sus sustituyentes, si los hay, de acuerdo con la invención presente tienen los significados como se describe en lo siguiente: Alquilo es un alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 1 , 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, ter-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, o hexilo.

Alquenilo es un alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono y uno a tres dobles enlaces, preferiblemente uno o dos dobles enlaces, más preferiblemente un doble enlace. Ejemplos preferidos de un grupo alquenilo de C2-6 son etenilo, prop-1-enilo, pro-2-enilo, isoprop-1-enilo, n-but-1-enilo, n-but-2-enilo, n-but-3-enilo, isobut-1-enilo, isobut-2-enilo, n-pent-1-enilo, n-pent-2-enilo, n-pent-3-enilo, n-pent-4-enilo, n-pent-1 ,3-enilo, isopent-1-enilo, isopent-2-enilo, neopent-1-enilo, n-hex-1-enilo, n-hex-2-enilo, n-hex-3-enilo, n-hex-4-enilo, n-hex-5-enilo, n-hex-1 ,3-enilo, n-hex-2,4-enilo, n-hex-3,5-enilo, y n-hex-1 , 3, 5-enilo. Ejemplos más preferidos de un grupo alquenilo de C2-6 son etenilo y prop-1-enilo.

Alquinilo es un alquilo de cadena recta o ramificada que tiene 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono y uno a tres enlaces triples, preferiblemente uno o dos enlaces triples, más preferiblemente un enlace triple. Ejemplos preferidos de un grupo alquinilo de C2-6 son etinilo, prop-1-inilo, pro-2-inilo, n-but-1-inilo, n-but-2-inilo, n-but-3-inilo, n-pent-1-inilo, n-pent-2-inilo, n-pent-3-inilo, n-pent-4-inilo, n-pent-1 ,3-inilo, isopent-1-inilo, neopent-1-inilo, n-hex-1 -inilo, n-hex-2-inilo, n-hex-3-inilo, n-hex-4-inilo, n-hex-5-inilo, n-hex-1, 3-inilo, n-hex-2,4-inilo, n-hex-3,5-inilo, y n-hex-1 ,3, 5-inilo. Ejemplos más preferidos de un grupo alquinilo de C2-6 son etinilo y prop-1-inilo.

El cicloalquilo es un anillo alquilo que tiene 3, 4, 5, 6 o 7 átomos de carbono como máximo, tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicioheptilo, más preferiblemente 3, 4, 5 ó 6 átomos de carbono.

Los anillos son sistemas de anillo de carbono saturados o mono-a poliinsaturados que pueden incluir uno o más heteroátomos, tales como O, N, S, y/o P. Se prefieren anillos de 5- o 6 miembros. Los anillos incluyen especialmente anillos arilo y heteroarilo, que pueden ser anillos aromáticos fusionados.

Arilo es una porción aromática que tiene 6 a 20 átomos de carbono, preferiblemente 6 a 10 átomos de carbono, e incluye anillos aromáticos fusionados. El más preferido es fenilo.

Heteroarilo es una porción aromática que tiene 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o 9 átomos de carbono y por lo menos un heteroátomo seleccionado de O, N y/o S. Preferiblemente, el heteroarilo comprende a lo más 10 átomos de anillo (incluyendo carbono y heteroátomos) y es seleccionado preferiblemente de tienilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, tiazolilo, oxazolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, furanilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, tetrazolilo y indazolilo, más preferiblemente de tienilo, furanilo, imidazolilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, tetrazolilo y pirimidinilo.

Heterociclilo es un anillo saturado o insaturado que contiene por lo menos un heteroátomo seleccionado de O, N y/o S y 1 , 2, 3, 4, 5, 6 o 7 átomos de carbono. Preferiblemente, el heterociclilo comprende a lo más 11 átomos de anillo (incluyendo carbono y heteroátomos) y más preferiblemente es un anillo de 4 a 8 miembros y aún más preferiblemente se selecciona de tetrahidrofuranilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piranilo, morfolinilo, tiazolinilo, dioxanilo, dioxolanilo, y tiomorfolinilo, más preferiblemente de piperidinilo, tiazolinilo, dioxanilo, dioxolanilo, y pirrolidinilo.

El halógeno es un átomo de halógeno seleccionado de F, Cl, Br y I, preferiblemente de F, Cl y Br.

Los compuestos de la invención presente contienen la estructura básica de 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona representada por la fórmula siguiente (1 ). fórmula (1 ) En los compuestos según la fórmula (1 ) se cree que la característica esencial para lograr la actividad moduladora/de direccionamiento del sistema endocanabinoide es la definición específica del residuo R1 , a saber siendo cualquiera de -(CH2)nN(R4)C(O)R5 (n siendo 0, 1 , o 2, preferiblemente 0 o 1 , más preferiblemente 0) o -C(0)NR4R6.

Para ambas de las definiciones antes mencionadas de R1 , y además independientemente una de la otra, las definiciones siguientes de R2 a R6 aplican según la invención presente: R2 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno; alquilo de Ci-6, tal como metilo, etilo, n- o i-propilo, n- o i-butilo, n- o i-pentilo, n- o i-hexilo, cada uno sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, alquilo de OC1-6, -Ocicloalquilo de C3-7; -cicloalquilo de C3-7, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de C i-6, Ocicloalquilo de C3-7', -(cicloalquilo de C3-7) -alquilo de Ci_6-, sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de Ci-6, Ocicloalquilo de C3-7. Preferiblemente R2 es hidrógeno o alquilo de C-i-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de C1-6, Ocicloalquilo de C3-7. Más preferiblemente, R2 es hidrógeno o metilo, especialmente hidrógeno.

R3 es seleccionado del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, metoxi o -CN. Preferiblemente R3 es hidrógeno o halógeno, más preferiblemente hidrógeno. Los compuestos según la fórmula (I) contienen tres grupos R3 que pueden ser iguales o diferentes. Más preferiblemente todos son hidrógeno.

R4 es seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno o alquilo de C-i-6, tal como metil, etil, n- o i-propilo, n- o i-butilo, n- o i-pentilo, n- o i-hexilo. Preferiblemente R4 es hidrógeno o metilo, más preferiblemente hidrógeno.

R5 es seleccionado del grupo que consiste en alquilo de Cs-is-alquenilo de C8-15, alquinilo de C8-15, (arilo de C6-io) -alquilo de C6-io, (arilo de C6-io) -alquenilo de C 6-io, y (arilo de Ce-??) -alquinilo de ?ß-??- En todos estos grupos que contienen arilo, el arilo puede estar sustituido por uno o por más del sustituyentes como es mencionado después en la descripción presente.

Preferiblemente R5 es seleccionado de alquilo de C8-15, alquenilo de C8-15, (arilo de Ce-??) -alquilo de Ce-??, y (arilo de Ce-io) -alquenilo de C6-io- Más preferiblemente, R5 es seleccionado de alquilo de C8-i5, alquenilo de C8-15 (en donde el alquenilo contiene 1 , 2, o 3, preferiblemente 2 dobles enlaces), (arilo de C6-io) -alquilo de C-6-10, y (arilo de Ce-io) -alquenilo de C-6-10 (en donde el alquenilo contiene 1 o 2, preferiblemente 2 dobles enlaces). Mas preferiblemente, R5 es seleccionado de alquilo de C8-12, alquenilo de C8-i2 que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación, (arilo de Ce-io)-alquilo de C6-8, y (arilo de C6-io)-alquenilo de Ce-d que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación en el grupo alquenilo del mismo.

R6 es seleccionado del grupo que consiste en alquilo de C9-16, alquenilo de C9-i6, alquinilo de C9-16, (arilo de ?ß-??) -alquilo de C7.11 , (arilo de C6-io) -alquenilo de C 7-n, y (arilo de C6-io) -alquinilo de C7-n. En todos estos grupos que contienen arilo, el arilo puede estar sustituido por uno o por más del sustituyentes como es mencionado después en la descripción presente. Preferiblemente R6 es seleccionado de alquilo de C9.16, alquenilo de C9-i6, (arilo de C6-io) -alquilo de C7-n, y (arilo de Ce-??) -alquenilo de C7-n. Más preferiblemente, R6 es seleccionado de alquilo de C9-i6, alquenilo de C9.16 (en donde el alquenilo contiene 1 , 2, o 3, preferiblemente 2 dobles enlaces), (arilo de C6-io) -alquilo de C7-11 , y (arilo de C6-io) -alquenilo de C7-n (en donde el alquenilo contiene 1 o 2, preferiblemente 2 dobles enlaces). Mas preferiblemente, R6 es seleccionado de alquilo de C9-13, alquenilo de Cg.13 que contiene una porción (2E, 4£)-dieno como la insaturación, (arilo de Ce-??)- alquilo de C7-9, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C7-g que contiene una porción (2E,4E)-dieno como la insaturación en el grupo alquenilo del mismo.

Específicamente, en el caso de que R1 sea -(CH2)nN(R4)C(0)R5 con n = 0, R5 no debe ser una cadena lineal de Cu con una porción (2E,4E)-dieno.

De manera similar, en el caso de que R1 sea -C(0)NR4R6 como se define en la presente, R6 no debe contener una porción (2E,4E)-dieno, o R6 no debe contener una porción lineal dodeca-(2E,4E)-dieno, aril-hexa-(2E,4E)-dieno, aril-hepta-(2E,4E)-dieno, y/o aril-octa-(2E,4E)-dieno.

Todas las combinaciones posibles de las definiciones de R1 a R6 en la fórmula (1 ) incluidas en las listas anteriores deben ser comprendidas como estando directamente e inequívocamente descritas según la invención presente.

En general, los sustituyentes de las cadenas de carbono y los anillos de acuerdo con la invención son halógenos, preferiblemente F, Cl, Br y I, alquilo de C-MO, alcoxi de C-MO, arilo de C6-2o, hidroxilo, -SH, -SO3H, grupos amina, -COOH, COOR', en donde R' es un grupo alquilo de Ci-i0 o un metal alcalino, CONHR", y CON(R")2> en donde R" es un alquilo de C1- 0. En general, los grupos alquilo y alcoxi especialmente preferidos utilizados como sustituyentes de acuerdo con la invención presente como se describe en la presente son grupos alquilo de C-i-6 y alcoxi de Ci-6, más preferiblemente metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, n-pentilo, iso-pentilo, metoxi, etoxi, n-propoxi, i-propoxi, n-butoxi, i-butoxi, n-pentoxi, iso-pentoxi. Asimismo, los grupos arilo especialmente preferidos son los grupos arilo de ?ß-??, más preferiblemente fenilo. Los sustituyentes convenientes también se seleccionan de alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heteroarilo, heterociclilo como se define en la presente.

En modalidades especialmente preferidas de la invención presente los compuestos son según la siguiente fórmula (2): fórmula (2).

En la fórmula (2) R2 es preferiblemente ya sea hidrógeno o metilo, más preferiblemente hidrógeno. Además, R1 es como se definió antes.

Según la invención presente, en los compuestos de las fórmulas (1) y/o (2), R1 también puede ser seleccionado del grupo que consiste en los radicales siguientes (que pueden ser sustituidos por grupos de sustituyentes como se define en la presente): ?? 20 21 22 Los compuestos de la fórmula estructural (1) son efectivos como moduladores del sistema endocanabinoide y son especialmente efectivos como inhibidores de AEAT (transporte de AEA) o FAAH. Son útiles para el tratamiento y/o la prevención de trastornos que responden a la inhibición de AEAT o FAAH, tal como inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema y/o condiciones pro-alérgicas y alérgicas y otras enfermedades en particular con la participación de AEAT o FAAH.

Isómeros ópticos - Diastereómeros - Isómeros Geométricos - Tautómeros Los compuestos de fórmulas estructurales (1) y/o (2) contienen uno o más centros asimétricos y pueden aparecer como mezclas racémicas y racemato, enantiómeros únicos, mezclas diastereoméricas y diastereómeros individuales. La invención presente pretende comprender todas de dichas formas isoméricas de los compuestos de las fórmulas estructurales (1) y/o (2).

Los compuestos de las fórmulas estructurales (1) y/o (2) pueden ser separados en sus diastereómeros individuales, por ejemplo, por cristalización fraccionaria de un solvente conveniente, por ejemplo metanol o acetato de etilo o una mezcla del mismo, o a través de cromatografía quiral utilizando una fase estacionaria ópticamente activa. Su estereoquímica absoluta puede determinarse por cristalografía de rayos X de productos cristalinos o intermediarios cristalinos que son derivatizados, si es necesario, con un reactivo que contiene un centro asimétrico de configuración absoluta conocida.

Alternativamente, cualquier estereoisómero de un compuesto de las fórmulas generales (1) y/o (2) puede ser obtenido por síntesis estereoespecífica utilizando materiales o reactivos de partida de configuración absoluta conocida.

Sales Los compuestos según la invención p eden estar presentes en forma de sales farmacéuticas aceptables. El término "sales farmacéuticas aceptables" se refiere a las sales preparadas de bases o ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables incluyendo bases inorgánicas u orgánicas y ácidos inorgánicos u orgánicos. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen sales de aluminio, de amonio, de calcio, de cobre, férricas, ferrosas, de litio, de magnesio, mangánicas, manganosas, de potasio, de sodio, de cinc y similares. Especialmente preferidas son las sales de amonio, de calcio, de litio, de magnesio, de potasio y de sodio. Las sales derivadas de bases no tóxicas, orgánicas y farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas y resinas básicas de intercambio iónico, tal como arginina, betaina, cafeína, colina, ?,?'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaina, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares.

Cuando el compuesto de la invención presente es básico, las sales pueden ser preparadas de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, incluyendo ácidos inorgánicos y orgánicos. Tales ácidos incluyen ácido acético, bencensulfónico, benzoico, alcanforsulfónico, cítrico, etanosulfónico, fórmico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maléico, málico, mandélico, metanosulfónico, malónico, múcico, nítrico, parnóico, pantoténico, fosfórico, propiónico, succínico, sulfúrico, tartárico, P-toluensulfónico, ácido trifluoroacético y similares. Especialmente preferidos son los ácidos cítrico, fumárico, bromhídrico, clorhídrico, maléico, fosfórico, sulfúrico y tartárico.

Administración, Intervalos de Dosis y Formulación Los compuestos de la invención son incorporados en preparaciones farmacéuticas o cosméticas al mezclarlos con un portador o excipiente farmacéuticamente o cosméticamente aceptable. Los portadores convenientes son conocidos por el experto. Preferiblemente la composición es una composición dermatológica conveniente para ser aplicada tópicamente en la piel o mucosa de un mamífero. La forma de la composición no se limita especialmente, sin embargo, las formas preferidas son emulsiones, suspensiones y soluciones. En ciertas modalidades, las composiciones están en forma de lociones, cremas, geles, soluciones, rocíos, limpiadores, polvos, ungüentos, ceras, lápices de labios, jabones, champús, soluciones hidroalcohólicas, suspensiones, espumas, exfoliantes, almohadillas saturadas, agentes acondicionadores de la piel o el cabello.

Las composiciones según la invención pueden ser aplicadas, sin embargo, en cualquier otra manera conocida a la persona experta tal como oral o parenteral. Ejemplos no limitativos son sublinguales, vaginales, rectales, intravenosos, nasales, intramusculares, inhalantes, ocular y percutáneo. Los portadores y excipientes convenientes son conocidos comúnmente por el experto.

Las composiciones de acuerdo con la invención presente pueden contener los compuestos de 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona en cantidades de 0.001 a 40% en peso de la composición, preferiblemente 0.01 a 5 % en peso, más preferiblemente 0.1 a 2 % en peso y más preferiblemente 0.5 a 1.5 % en peso.

Las composiciones de acuerdo con la invención presente pueden contener auxiliares cosméticamente y farmacéuticamente/dermatológicamente aceptables empleados generalmente en las preparaciones cosméticas y farmacéuticas y conocidos por los expertos. Estos incluyen, por ejemplo, conservantes, bactericidas, perfumes, espesantes, emulsionantes, surfactantes, agentes reblandecedores, agentes humectantes, aceites, grasas, ceras, solventes orgánicos, agua, alcoholes, polioles, polímeros, estabilizadores de espuma, agentes anti-espumantes, mejoradores de penetración u otros componentes convencionales de una preparación farmacéutica o cosmética.

Preparación de los Compuestos de la Invención Los compuestos de las fórmulas (1 ) y/o (2), al existir como una mezcla diastereomérica, pueden ser separados en pares diastereoméricos de enantiómeros por cristalización fraccionada de un solvente conveniente tal como metanol, acetato de etilo o una mezcla de los mismos. El par de enantiómeros así obtenido puede ser separado en estereoisómeros individuales por medios convencionales utilizando un ácido ópticamente activo como un agente de resolución. Alternativamente, cualquier enantiómero de un compuesto de las fórmulas (1 ) y/o (2) puede ser obtenido por síntesis estereoespecífica utilizando materiales de partida o reactivos ópticamente puros de configuración conocida.

Los compuestos de las fórmulas (1 ) y/o (2) de la invención presente pueden ser preparados según los procedimientos de los esquemas y ejemplos siguientes, utilizando materiales apropiados y son ejemplificados además por los ejemplos específicos siguientes. Además, utilizando los procedimientos descritos en la presente, en conjunción con un conocimiento ordinario de la técnica, pueden prepararse fácilmente compuestos adicionales de la invención presente reclamados en la presente. Sin embargo, los compuestos ilustrados en los ejemplos no serán considerados como formando el único género que se considera como la invención. Los ejemplos ilustran además detalles para la preparación de los compuestos de la invención presente. Los expertos en la técnica entenderán perfectamente que variaciones conocidas de las condiciones y procedimientos de los siguientes procedimientos de preparación pueden ser utilizadas para preparar estos compuestos. Los compuestos que contienen un grupo básico o ácido pueden ser convertidos además en la forma de sus sales farmacéuticas aceptables, tal como se describió anteriormente. Todas las temperaturas son en grados Celsius.

En los esquemas, preparaciones y ejemplos siguientes, varios símbolos y abreviaturas de los reactivos tienen los significados siguientes: AcOH ácido acético Boc ter-butoxicarbonilo Bu butilo CDI 1,1 '-carbonildiimidazol DBU 1 ,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCM diclorometano DIBAL-H hidruro de diisobutilaluminio DIEA etil-diisopropilamina DMAP 4-dimetilaminopiridina DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetil sulfóxido DPPA difenil fosforil azida EDCI N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida Et etilo Et20 dietil éter EtOH etanol h hora(s) HATU 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-N , N , N ' , N '-tetrametiluronio hexafluorofosfato HOAt 1-hidroxi-7-azabenzotriazol m/z proporción de masa a carga Me metilo min minuto(s) MeOH metanol mp punto de fusión MW peso molecular Ph fenilo RT temperatura ambiente TEA trietilamina TEMPO 2,2,6,6-tetrametilpiperidina 1-oxilo THF tetrahidrofurano TLC cromatografía de capa fina tR (min) tiempo de retención de HPLC ESQUEMA DE REACCIÓN 1 Síntesis de (2E.4E)-2.4-dienoatos de etilo v los ácidos correspondientes usando la reacción de Wittig-Horner R = alquilo de C4-Cn, alquilo de arilo de C2-C6 El material de partida para la síntesis de los compuestos de la invención presente, (2E, 4£)-2,4-dienoatos de etilo opcionalmente sustituidos, pueden ser obtenidos reaccionando un (2E)-2-enal opcionalmente sustituido con un acetato de triaqluilfosfono en la presencia de una base tal como hidruro de sodio o butil litio en un solvente inerte como tetrahidrofurano a una temperatura apropiada. La subsiguiente saponificación con una base tal como hidróxido de sodio en un solvente como una mezcla de agua y metanol a una temperatura conveniente lleva al correspondiente ácido (2E, 4£)-2,4-dienoico.

ESQUEMA DE REACCIÓN 2 Síntesis alternativa de ácidos (2E.4E)-2.4-dienoicos R = alquilo de C4-C11, alquilo de arilo de C2-C6 Como se muestra en el Esquema de Reacción 2, el material de partida para la síntesis de compuestos de la invención presente, (2E,4E)-2,4-dienoatos de etilo y ácidos (2E, 4E)-2,4-dienoicos opcionalmente sustituidos también pueden ser preparados comenzando de aldehidos saturados opcionalmente sustituidos. En este caso los dos dobles enlaces con estereoquímica trans son introducidos aplicando dos reacciones de Wittig-Horner. a,ß-éster insaturado es obtenido por reacción de un aldehido con acetato de trialquilfosfono en un solvente inerte como tetrahidrofurano en la presencia de una base tal como hidruro de sodio o butil litio a baja temperatura. La reducción con DIBAL-H en un solvente adecuado como tolueno a -78°C proporciona el correspondiente alcohol alílico que es subsiguientemente oxidado con hipoclorito de sodio y TEMPO en la presencia de bromuro de potasio en un solvente adecuado tal como una mezcla de agua y didorometano a,ß-aldehído insaturado. Alternativamente, el alcohol puede ser oxidado aplicando una oxidación de Swern utilizando cloruro de oxalilo y DMSO en un solvente apropiado como DCM en la presencia de una base tal como trietilamina a -78°C. El aldehido es sometido a una segunda reacción de Wittig-Horner aplicando las condiciones descritas antes para producir el (2E,4E)-2,4-dienoato de etilo. Por último, el ácido (2E, 4E)-2,4-dienoico es obtenido hidrolizando el éster en la presencia de una base tal como un hidróxido de sodio acuoso en metanol a temperatura elevada.

ESQUEMA DE REACCIÓN 3 Reducción de ésteres del ácido (2E.4£)-2.4-dienoico -70°C R = alquilo de C4-C11, alquilo de arito de C2-C6 El éster del ácido (2E,4E)-2,4-dienoico opcionalmente sustituido puede ser reducido al correspondiente alcohol por reacción con un agente reductor tal como DIBAL-H en un solvente inerte como heptano a una temperatura conveniente, como se representa en el Esquema de Reacción 3.

ESQUEMA DE REACCIÓN 4 Síntesis de (2£,4£)-2,4-dien-1 -aminas tolueno R = alquilo de C4-C11, alquilo de arilo de C2-C6 El Esquema de la reacción 4 muestra la preparación de (2E.4E)-2,4-dien-1 -aminas. El alcohol (2E,4E)-2,4-dien-1-íl¡co opcionalmente sustituido puede ser reaccionado con un reactivo tal como difenil fosforil azida en la presencia de una base apropiada como 1 ,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno en un solvente tal como tolueno para producir la correspondiente azida. La reducción subsiguiente con un agente reductor como hidruro de litio y aluminio en un solvente inerte tal como dietil éter a una temperatura apropiada proporciona el compuesto objetivo.

Alternativamente, la azida puede ser reducida a la correspondiente amina primaria en una reacción de Staudinger por reacción con trifenilfosfina en un solvente conveniente tal como una mezcla de agua y THF.

ESQUEMA DE REACCIÓN 5 Síntesis de (2E.4£)-N-alauil-2.4-dien-1 -aminas 0°C HCI C4-Cn, alquilo de arilo de C2-C6 dioxane Et,0 La (2E,4E)-2,4-dien-1-ilamina opcionalmente sustituida puede ser convertida a la correspondiente amina N-alquilada como se representa en el Esquema de Reacción 5. La reacción con bicarbonato de ter-butilo en la presencia de una base como trietilamina en un solvente conveniente como DCM es seguida por un paso de alquilación con un halogenuro de alquilo como yoduro de metilo en un solvente como DMF en la presencia de una base tal como hidruro de sodio. La amina alquilada puede ser desprotegida utilizando un reactivo como HCI en dioxano en un solvente apropiado como dietil éter. El producto puede ser aislado como sal de clorhidrato o la base libre puede ser liberada.

ESQUEMA DE REACCIÓN 6 Síntesis de amidas Pueden usarse ácidos clorhídricos de fuentes comerciales o ácido carboxílico opcionalmente sustituido puede ser reaccionado con cloruro de oxalilo en un solvente inerte tal como DCM a una temperatura apropiada para proporcionar el correspondiente cloruro ácido R5COCI. El cloruro ácido opcionalmente sustituido puede ser reaccionado con 5-(omega-aminoalquil)- 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona opcionalmente sustituida en la presencia de una base tal como trietilamina en un solvente inerte como diclorometano para dar acceso a la correspondiente amida.

Alternativamente, la síntesis también puede ser lograda reaccionando el correspondiente ácido R5COOH con 5-(omega-aminoalquil)- 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona opcionalmente sustituida en un solvente como DCM o DMF en la presencia de un reactivo tal como HOAt y EDCI.

ESQUEMA DE REACCIÓN 7 Síntesis de 2-oxo-2,3-dihidro-1 ,3-benzoxazol-5-carboxamidas El ácido 2-0X0-2, 3-dih¡dro-1 ,3-benzoxazol-5-carboxílico opcionalmente sustituido puede ser convertido al correspondiente cloruro ácido por reacción con un reactivo tal como cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo en un solvente conveniente como DCM. La reacción con un amina HNR4R6 en un solvente inerte como DCM produce el producto deseado. La reacción puede ser llevada a cabo en la presencia o sin una base tal como DMAP.

Alternativamente, la síntesis de las amidas del ácido 2-oxo-2,3- dihidro-1 ,3-benzoxazol-5-carboxílico opcionalmente sustituidas también puede ser lograda reaccionando el correspondiente ácido con una amina HNR4R6 en un solvente como DCM o DMF en la presencia de un reactivo tal como HOAt y EDCI.

ESQUEMA DE REACCIÓN 8 N-alquilación de Amida Los sustituyentes de R4 en el átomo de nitrógeno de la amida pueden ser introducidos como se muestra en el esquema de Reacción 8. La amida es desprotonada con una base adecuada tal como hidruro de sodio en un solvente adecuado como DMF y subsiguientemente reaccionado con un reactivo X-R4 en el cual X representa un grupo saliente tal como un halogenuro.

ESQUEMA DE REACCIÓN 9 Síntesis de 5-amino-1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas sustituidas Las 5-amino-1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas sustituidas pueden ser obtenidas como se representa en el esquema de Reacción 9. Opcionalmente, las 5-nitro-1 ,3-benzoxazol-2(3H)-onas R3-sustituidas son desprotonadas con una base adecuada tal como hidruro de sodio en un solvente adecuado como DMF a temperatura elevada y subsiguientemente reaccionado con un reactivo X-R2 en el cual X representa un grupo saliente tal como un halogenide. El grupo nitro puede por ejemplo, ser reducido aplicando reactivos como hierro y cloruro de amonio en una mezcla de agua y metanol a temperatura elevada para producir los compuestos objetivo.

LC-MS Analítico Resumen de Condiciones Analíticas Agilent 1 100 con ELSD (PL-ELS 2100) y detector de arreglo de diodo con detección de UV entre 220 y 320 nm y Detector Selectivo de Masa (MSD) en ESI+ y ESI- modo (intervalo de masa: m/z = 100-800), Columna: Waters Xbridge C18, 3.5 µ?t?, 2.1 mm x 50 mm; Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 30°C; Fase Móvil A:acetonitrilo (HCOOH al 0.1 %) Fase Móvil B:agua (HCOOH al 0.1 %) o Agilent 1200 con detector de arreglo de diodo con detección de UV entre 220 y 320 nm y Detector Selectivo de Masa (MSD) en ESI+ y ESI-modo (intervalo de masa: m/z = 100-800), Columna: Waters Xbridge C18, 3.5 pm, 2.1 mm x 50 mm; Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 30°C; Fase Móvil A:acetonitrilo (HCOOH al 0.1 %) Fase Móvil B:agua (HCOOH al 0.1 %) Gradiente A gradiente lineal de 2% a 98% acetonitrilo en agua (HCOOH al 0.1 %) 0.0 min 2% A 3.5 min 98% A 6.0 min 98% A Agilent 1100 con ELSD (PL-ELS 2100) y detector de arreglo de diodo (Agilent G1315B) con detección de UV entre 220 y 320 nm y Detector Selectivo de Masa (MSD, Agilent LC/MSD G6130B) en ESI+ y ESI- modo (intervalo de masa: m/z = 100-800), Columna: Waters Xbridge C18, 3.5 µ??, 2.1 mm x 50 mm; Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 30°C; Fase móvil A: 95% acetonitrilo + bicarbonato de amonio en agua al 5% 10 mM Fase móvil B: bicarbonato de amonio en agua 10 mM (pH = 9.5) Gradiente B gradiente lineal de 2% a 98% de 95% acetonitrilo + bicarbonato de amonio en agua al 5% 10 mM 0.0 min 2% A 3.5 min 98% A 6.0 min 98% A Columna: Waters Xselect C18, 3.5 µ?t?, 2.1 mm x 50 mm; Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 25°C; Fase móvil A: 95% acetonitrilo + bicarbonato de amonio en agua al 5% 10 mM Fase móvil B: bicarbonato de amonio en agua 10 mM (pH = 9.5) Gradiente C Agilent 1100 con ELSD (PL-ELS 2100) y detector de arreglo de diodo con detección de UV entre 220 y 320 nm y Detector Selectivo de Masa (MSD) en ESI+ y ESI- modo (intervalo de masa: m/z = 100-800), Columna: Waters Xselect C18, 3.5 µ??, 2.1 mm x 50 mm; Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 35°C; Fase Móvil A: acetonitrilo (HCOOH al 0.1 %) Fase Móvil B:agua (HCOOH al 0.1 %) gradiente lineal de 2% a 98% acetonitrilo en agua (HCOOH al 0.1%) 0.0 min 2% A 3.5 min 98% A 8.0 min 98%> A Gradiente D Agilent 1100 con ELSD (PL-ELS 2100) y detector de arreglo de diodo con detección de UV entre 220 y 320 nm y Detector Selectivo de Masa (MSD) en ESI+ y ESI- modo (intervalo de masa: m/z = 100-800), Caudal de flujo de 0.8 ml/min; temperatura de columna: 35°C; Fase móvil A: 95% acetonitrilo + bicarbonato de amonio en agua al 5% 10 mM Fase móvil B: bicarbonato de amonio en agua 10 mM (pH = 9.5) gradiente lineal de 2% a 98% acetonitrilo en agua (HCOOH al 0.1%) 0.0 min 2% A 3.5 min 98% A 8.0 min 98% A Lo siguiente describe ejemplos detallados de la invención que han sido preparados a través de los esquemas de reacción 1 a 9.

CUADRO 1 Los siguientes ejemplos son proporcionados para ilustrar la invención y no son limitantes del alcance de la invención en ninguna manera.

Intermediarios comunes (2E, 4E)-dodeca-2,4-d¡enoato de etilo Hidruro de sodio (60% en peso, 3.1 1 g) fue suspendido en tetrahidrofurano seco (200 mi) y enfriado a 0°C. Se añadió por goteo 0,0-Dietil etoxicarbonilmetil fosfonato (15.43 mi). La mezcla de reacción fue agitada a 0°C por 30 min y enfriada a -78°C después de lo cual se añadió por goteo (E)-dec-2-enal (1 1.90 mi). Continuó la agitación a esta temperatura por 2 h, después de lo cual la mezcla fue calentada a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue vertida en agua, y la fase acuosa fue extraída con acetato de etilo. La capa orgánica combinada fue lavada con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, y el solvente se evaporó. El producto crudo fue purificado por cromatografía en columna. Ácido (2E, 4E)-dodeca-2,4-dienoico Se disolvió (2E, 4E)-dodeca-2,4-dienoato de etilo (1 1.84 g) en metanol (130 mi) y se agregó solución acuosa 2M de hidróxido de sodio (35 mi). La mezcla de reacción fue calentada a 60°C hasta que se observó la conversión completa. Después de enfriarse a temperatura ambiente la mezcla fue acidificada con HCI acuoso diluido. La mezcla de reacción fue extraída con acetato de etilo y la capa orgánica fue lavada con salmuera, secada sobre sulfato de sodio, y los solventes fueron evaporados. El producto crudo se usó en el siguiente paso sin más purificación.

Cloruro de (2E,4 -dodeca-2,4-dieno¡lo Se disolvió ácido (2E, £)-dodeca-2,4-dienoico (2.5 g) en diclorometano (25 mi). Se agregó cloruro de oxalilo (2.23 mi) y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por 3 h. El solvente y el exceso de cloruro de oxalilo fueron eliminados, y el residuo fue depurado varias veces con DCM. El cloruro ácido crudo fue utilizado como tal en el siguiente paso. (2E, 4E)-Dodeca-2,4-dien-1-ol Bajo atmósfera de nitrógeno, el {2E,4E)-ei\\ dodeca-2,4-dienoato (6.1 g) fue disuelto en n-heptano (120 mi) y enfriado a -70°C. Se agregó por goteo DIBAL-H en hexanos (82 mi) y la mezcla fue agitada a -70°C por 45 min. Se agregaron salmuera (60 mi) y dietil éter (100 mi) y la mezcla fue agitada por 45 min mientras se calentaba a RT. La capa orgánica fue separada y lavada con HCI 1 N, secada sobre sulfato de sodio, filtrada y concentrada. Un líquido sin color fue aislado que solidificó son un ligero enfriamiento. (2E, 4E)-1-Azidodeca-2,4-dieno Se disolvió (2E, 4E)-Dodeca-2,4-dien-1-ol (4.95 g) en tolueno seco (110 mi) y se agregó difenilfosfinil azida (7.92 g). Se agregó por goteo DBU (4.91 mi). La mezcla se volvió opaca bajo la evolución del calor. El solvente fue evaporado y se agregó dietil éter al residuo. La mezcla de reacción fue lavada con HCI 1 M, NaOH 1 M y salmuera y la capa orgánica fue secada sobre sulfato de sodio, filtrada y concentrada para dar un líquido amarillo claro. El producto crudo fue filtrado sobre gel de sílice. f2£,4E)-Dodeca-2,4-dien-1 -amina Bajo atmósfera de nitrógeno, LiAIH4 1 M en dietil éter (2.89 mi) fue diluido con dietil éter seco (30 mi) y enfriado en un baño de hielo. Se agregó lentamente una solución de (2E, 4E)-1-azidododeca-2,4-dieno (1 g) en dietil éter seco (10 mi). La mezcla fue agitada a 0°C por 1 h, el baño de hielo fue eliminado y se continuó la agitación por 1 h mientras se calentaba a temperatura ambiente. Agua fue agregada con cuidado hasta que cesó la evolución de gas y la mezcla de reacción fue secada sobre sulfato de sodio, filtrada y concentrada para dar un líquido amarillo. (2E)-5-fenilpent-2-enoato de etilo Se suspendió hidruro de sodio (60% en peso, 181 mg) en tetrahidrofurano seco (5 mi) y se enfrió a 0°C. Se agregó por goteo acetato de trietil fósfono (896 µ?). La mezcla de reacción fue agitada a 0°C por 30 min. Después de enfriar a -78°C se agregó por goteo 3-fenilpropionaldehído (500 µ?). La mezcla de reacción fue agitada a esta temperatura por 1 h. Se dejó calentar a la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se hidrolizó con agua/THF, se vertió en agua y la capa acuosa fue extraída dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, y se concentró. El crudo fue purificado por cromatografía en columna instantánea. (2a-5-fenilpent-2-enal Una solución de (£)-etil 5-fenilpent-2-enoato (732 mg) en tolueno seco (5 mi) fue enfrada a -78°C. DIBAL-H (1 M en hexanos, 7.17 mi) se agregó por goteo y la mezcla fue agitada por 3 h. Una segunda porción de DIBAL-H (1 M en hexanos, 0.717 mi) se agregó y la agitación continuó por otras 3 h. La mezcla se dejó calentar a RT y se hidrolizó con HCI acuoso 1 M (5 mi). HCI acuoso 3M adicional fue agregado hasta un pH=1 y la capa acuosa fue extraída con EtOAc (3x). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró. El producto crudo fue disuelto en diclorometano (5 mi) y se agregaron TEMPO (28.0 mg), bromuro de potasio (42.6 mg) y agua (5 mi). Se agregó por goteo solución acuosa de hipoclorito de sodio (13%, 1.642 mi). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por 15 h. Después de la separación de fase la capa acuosa fue extraída con CH2CI2. La capa orgánica combinada fue lavada con HCI 1 M, agua y salmuera, se secó sobre Na2S04 y se concentró. El producto crudo fue purificado por cromatografía instantánea en columna para producir un aceite ligeramente anaranjado. (2E,4B-7-fenilhepta-2,4-dienoato Hidruro de sodio (60% en peso, 74.0 mg) fue suspendido en tetrahidrofurano (5 mi) y enfriado a 0°C. Se agregó por goteo trietil fósfonoacetato (0.367 mi). La mezcla de reacción fue agitada a 0°C por 30 min y subsiguientemente enfriada a -78°C después de lo cual se agregó por goteo (£)-5-fenilpent-2-enal (247 mg). La mezcla de reacción fue agitada a esta temperatura por 1 h. Se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción fue agitada por una hora adicional. La mezcla de reacción fue hidrolizada con agua/THF, vertida en agua y la capa acuosa fue extraída dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró. El producro crudo fue usado como tal en el paso siguiente. Ácido (2E,4E)-7-fenilhepta-2,4-dienoico (2E,4E)-eX\\ 7-fenilhepta-2,4-dienoato (355 mg) fue disuelto en metanol (5 mi). Hidróxido de sodio acuoso 2M (1 .002 mi) fue agregado y la suspensión resultante fue calentada a 60°C. La mezcla de reacción fue agitada por 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente la mezcla fue acidificada con HCI acuoso 1 M y extraída tres veces con EtOAc. La capa orgánica combinada fue lavada con salmuera, secada sobre Na2S04 y concentrada para producir un sólido blanco mate. El residuo fue tomado con NaOH acuoso 1 M (10 mi) y se extrajo con Et2O. La capa acuosa fue acidificada con HCI acuoso 2M y se extrajo con EtOAc. La capa combinada de EtOAc fue lavada con salmuera, secada sobre Na2SO4 y concentrada. (2E,4a-7-fenilhepta-2.4-dien-1-ol Una solución de (2E, 4E)-7-fenilhepta-2,4-dienoato de etilo (7.32 g) en tolueno seco (75 mi) fue enfriada a -78°C. DIBAL-H (1 M en hexanos, 65.2 mi) fue agregado por goteo y la mezcla fue agitada por 3 h. Se dejó calentar la mezcla a temperatura ambiente y se hidrolizó con HCI acuoso 1 M con enfriamiento en un baño de hielo/agua. Se agregó más HCI acuoso 3M hasta pH=1 . Las capas fueron separadas y la capa acuosa se extrajo tres veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, y se concentró. El producto crudo fue purificado por cromatografía en columna para producir un aceite incoloro. [(3E,5E)-7-azidohepta-3,5-dien-1-il1benceno (2E, 4£)-7-fenilhepta-2,4-dien-1 -ol (6.8 g) fue disuelto en tolueno seco (130 mi) y enfriado en un baño se hielo-sal. Se agregó fosforazidato de difenilo (7.83 mi), seguido por adición por goteo de DBU (6.53 mi) en tolueno seco (15 mi). La mezcla fue agitada por 15 h mientras se calentaba a temperatura ambiente. Los solventes fueron evaporados y el residuo fue dividido entre dietil éter y NaOH IN. La capa orgánica fue lavada con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía en columna produjo un líquido incoloro. [(2£,4E)-7-fenilhepta-2,4-dien-1 -il1carbamato de ter-butilo Bajo una atmósfera de nitrógeno, LiAIH4 (4N en dietil éter, 4.50 mi) y dietil éter seco (200 mi) se enfriaron a 0°C. Una solución de [(3E, 5E)-7-azidohepta-3,5-dien-1-il]benceno (6.4 g) en dietil éter seco (70 mi) se agregó por goteo y la mezcla se agitó a 0°C por 1 h, luego a temperatura ambiente por 1 h. Se agregó agua por goteo hasta que cesó la evolución de gas. La mezcla fue secada sobre sulfato de sodio, filtrada y concentrada para dar la amina intermediaria como un líquido amarillo. La amina intermediaria (5.6 g) fue disuelta en diclorometano (150 mi) y enfriada a 0°C. Se agregó trietilamina (4.60 mi), seguido de Boc20 (6.97 mi). El baño de enfriamiento fue retirado y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por 15 h. Se agregó agua (200 mi) y se separó la capa orgánica. La capa acuosa fue extraída con diclorometano (200 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El producto crudo fue purificado por cromatografía en columna para producir un líquido incoloro. (2E,4E)-7-fenilhepta-2,4-dien-1 -amina (2E,4E)-7-fenilhepta-2,4-dienilcarbamato de ter- butilo (800 mg) se disolvió en ácido clorhídrico en dioxano (4.0M, 8.35 mi). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. El solvente se evaporó y co-evaporó dos veces con Et20, se agregó Et20, los sólidos fueron filtrados bajo una corriente de nitrógeno para producir el producto como un sólido blanco mate.

Síntesis del Ejemplo 4 EJEMPLO 4 A una solución enfriada (0°C) de ácido 2-oxo-2,3-dihidrobenzo[d]oxazol-5-carboxílico (150 mg) y (2E,4E)-dodeca-2,4-dien-1-amina (138 mg) en diclorometano (3 mi) y ?,?-dimetilformamida seca (2 mi) se agregó EDCI.HCI (161 mg) seguido por 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (10.36 mg) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El material crudo se disolvió en EtOAc y se eluyó sobre una almohadilla de gel de sílice usando EtOAc seguido por evaporación bajo presión reducida para producir un sólido amarillo crudo. Al sólido crudo se agregó H2O y EtOAc, la mezcla se calentó mientras se agitaba vigorosamente hasta que ocurrió una disolución completa. Después de la separación de las capas mientras estaba caliente, la capa orgánica de EtOAc fue filtrada usando un separador de fase y se evaporó a sequedad bajo presión reducida. Una purificación adicional vía cromatografía en columna de fase inversa dio el producto como un sólido blanco.

Síntesis del Ejemplo 10 EJEMPLO 10 A una suspensión de 5-amino-3-metil-1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona (125 mg) y ácido (2E,4E)-7-fenilhepta-2,4-dienoico (140 mg) en diclorometano (3 mi) y ?,?-dimetilformamida seca (2 mi) se agregó EDCI.HCI (146 mg) seguido por 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (9.42 mg) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla fue concentrada y purificada por cromatografía en columna instantánea (10-70% EtOAc en heptano) para producir el producto como un sólido blanco.

Los Ejemplos 1 a 3, 5 a 9 y 11 a 17 como se indican en el Cuadro 1 anterior han sido preparados en una manera análoga como los Ejemplos 4 y 10 usando los respectivos compuestos de partida.

Ensayos biológicos A. Ensayos de desplazamiento de radioligando en los receptores CB-i y CB? Para el receptor CB-?, los experimentos de unión se realizaron en la presencia de 0.5 nM del radioligando [3H]CP55,940 (168 Ci/mmoles) (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA) a 30°C en frascos de vidrio siliconizado junto con 8.0 µg de membrana que sobre-expresa recombinantemente el CBi (No. RBHCB1 M, Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA), el cual fue resuspendido en 0.5 mi (volume final) búfer de ensayo (50 mM TRIS-HCI, 2.5 mM EDTA, 5 mM MgC , 0.5 mg/ml de BSA libre de ácido graso, pH 7.4). Los compuestos de prueba estuvieron presentes en concentraciones variables y la unión no específica del radioligando fue determinada en la presencia de 10 µ? WIN55,212-2 (Tocris Cookson Ltd., Bristol, UK). Después de 2 h de incubación, la suspensión fue filtrada rápidamente a través de 0.1 % de polietilenimina remojada previamente UniFilter®-96 GF/B (Perkin Elmer, Boston MA, EUA) lavada doce veces con 167 µ? de búfer de ensayo enfriado con hielo. La radioactividad en las placas secadas y selladas fue medida en un contador de centelleo líquido Perkin Elmer 1450 Microbeta TRILUX en un cóctel de centelleo de 40 µ? MicroScint 20 (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA).

Los datos recolectados de tres experimentos independientes realizados por triplicado fueron normalizados entre 100% y 0% de unión específica para [3H]CP55,940. Estos datos fueron gráficamente linearizados proyectando gráficos de Hill, los cuales permitieron el cálculo de los valores de IC50. Derivado de la constante de disociación (KD) de [3H]CP55,940 y el desplazamiento dependiente de la concentración (el valor de IC50), las constantes de inhibición (K¡) de los compuestos competidores se calcularon usando la ecuación de Cheng-Prusoff [K¡ = IC5o/(1 + L/KD)].

Para los estudios de unión del receptor de CB2 3.8 µg de membrana que sobre-expresa recombinantemente CB2 (No. RBXCB2M, Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA) se resuspendió en 0.5 mi de búfer de ensayo (vea lo anterior) junto con 0.5 nM del radioligando [3H]CP55,940. El ensayo de unión del CB2 fue realizado en la misma manera como para CB^ B. Mediciones de la concentración miscelar crítica (CMC) La micelización seca se realizó con una versión modifcada del método descrito por Eliyahu et al., Novel dextran-spermine conjugates as transfecting agents: comparing water-soluble and micellar polymers. Gene Ther. 2005 Mar; 12(6):494-503. Los compuestos (de soluciones de reserva 2 mM) se mezclaron a concentraciones increméntales con 0.1 nM de fluoresceína (ácido libre, 99%, Fluka, Suiza) a temperatura ambiente en agua destilado Nanopure. Los experimentos se realizaron en placas de microtitulación de 96 pozos (excitación a 485 nm, emisión a 535 nm). Ya que la emisión de la fluoresceína es dependiente del pH, el pH de la mezcla se mantuvo constante a 6.9. El intervalo de CMC fue determinado como el intervalo de concentración donde se detectó el primer aumento estadísticamente significativo en la fluorescencia. A una resolución apropiada del intervalo de concentración este aumento no fue gradual sino súbito.

C. Captación celular de f3Hl-AEA Células de linfoma humano U937 se cultivaron en medio RPMI 1640 (Invitrogen, Basel, Suiza) suplementado con 10% de suero bovino fetal, 1 g/ml de fungizona (amfotericina B), 100 unidades/ml de penicilina, 100 g/ml estreptomicina, y 2 mM L-glutamina (todas de Invitrogen) y se seleccionaron para el ensayo de captación celular de AEA. 2.5 x 106 células fueron recolectadas y suspendidas en 250 µ? de medio RPMI 1640 (Invitrogen, Basel, Suiza) a 37°C usando frascos de vidrio silanizado. Las células fueron pre-incubadas 15 min a 37°C en la presencia de compuestos de prueba en un intervalo de concentración de 10"11 - 10~5 M o en la presencia de la misma cantidad (5 µ?) de control de vehículo (DMSO). Luego una mezcla de 0.5 nM [3H]-AEA (60 Ci/mmoles) (American Radiolabeled Chemicals, Inc., San Louis, MO, EL) A) y 99.5 nM de AEA no radiactivo (Tocris Cookson Ltd., Bristo!, RU) que resultó en una concentración final de 100 nM AEA fue agregado y las muestras fueron incubadas a 37°C por otros 15 minutos. La reacción fue detenida por filtración rápida sobre UniFilter®-96 GF/C (Perkin Elmer, Boston MA, EUA) pre-remojado con PBS 0.25 % BSA (p/v). Las células fueron lavadas tres veces con búfer de PBS enfriado en hielo conteniendo BSA al 1% libre de ácido graso (NaCI 137 mM, KCI 2.7 mM, Na2HP04 10 mM, KH2P04 1.76 mM, BSA al 1% libre de ácido graso, pH 7.4), se secaron y se agregó 40 µ? de cóctel de centelleo de MicroScint 20 (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA). Se midió la radioacrividad usando un contador de centelleo líquido Perkin Elmer 1450 Microbeta TRILUX. Los resultados se expresaron como % de captación de AEA contra las células tratadas con solvente y se calcularon los valores de EC50 y IC50 de las curvas sigmoideas, que se generaron usando el GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA).

CUADRO 2 Inhibición del Transporte de Araquidonoiletanolamida (AEAT) (Determinación como se Describe en los Ensayos Biológicos C) D. Inhibición de ácido graso amida hidrolasa (FAAH) La actividad de FAAH fue evaluada usando cerebro de cerdo u homogenado U937 de acuerdo con el método descrito por Omeir et. al. Arachidonoyl ethanolamide-[1 ,2-1 C] as a substrate for anandamide amidase. Life sciences 56, 1999-2005 (1995) y adaptado por Fowler et al. Selective inhibition of anandamida cellular uptake versus enzymatic hidrolysis-a difficult issue to handle. European journal of pharmacology 492, 1-11 (2004).

Brevemente, 10 µ? de vehículo o control positivo URB597 (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, EUA) resultando una concentración final de 100 nM o del inhibidor a concentraciones adecuadas fueron pre-incubados a 37°C por 15 min a 450 rpm con 490 µ? de cerebro de cerdo diluido (200 pg por muestra) u homogenado U937 (0.63 mg de proteína por muestra corr. 06 U937 células) en búfer de actividad de FAAH (10 mM Tris-HCI y EDTA 1 mM, pH 8.0, BSA al 0.1 % p/v libre de ácido graso (Sigma, San Louis, MO, EUA)). Una mezcla de 0.5 nM [3H]AEA (60 Ci/mmoles) y 99.5 nM de AEA no radioactivo lo que resulta en una concentración total de 100 nM AEA se agregó y se incubó por 15 min. Sucesivamente, 1 mi de una mezcla 1 :1 (v/v) de metanol:cloroformo se agregó a cada muestra y, después de un vórtice vigoroso, las fases acuosa y orgánica fueron separadas por centrifugación a 10?00 rpm por 10 min a 4°C. La radioactividad asociada a la [3H]-etanolamina (producida un rompimiento catalizado por FAAH de [3H]-AEA) fue medido con la adición de 3 mi de líquido de centelleo Ultima Gold (Perkin Elmer, Waltham, MA, EUA) a la fase acuosa (superior), usando un Analizador de Centelleo líquido PACKARD TRI-CARB 2100TR. Los resultados se expresaron como % de actividad de FAAH contra homogenado tratado con vehículo. Los datos recolectados fueron normalizados por sustracción de una señal no específica a una inhibición total de FAAH por URB597. Los valores únicos de la inhibición de FAAH o los valores de IC50 de las curvas sigmoideas generadas fueron calculados usando GraphPad Prism 5.0 (Software GraphPad, San Diego, CA, EUA).

E. Inhibición de monoacilglicerol lipasa (MAGL) La actividad de MAGL fue evaluada usando el Kit de Ensayo de Examen de Inhibidor de Monoacilglicerol Lipasa (Cayman Chemicals, MI, EUA) y el procedimiento experimental se realizó de acuerdo con el protocolo del kit. Brevemente, 10 µ? de compuestos de prueba a diferentes concentraciones (intervalo 0.1-20 µ?) se agregaron a 150 µ? de búfer de ensayo, 10 µ? de MAGL recombinante humano y 10 µ? de araquidonoil-1-tio-glicerol (150 µ? en el ensayo). La placa fue incubada a temperatura ambiente por 5 min, después de lo cual 10 µ? de DTNB (ácido 5, 5'-ditiobis-(2-nitrobenzoico), reactivo de Ellman) fue agregado a cada pozo. La placa fue sacudida por 10 segundos y la absorbancia fue medida a 415 nm usando un espectrofluorímetro Genius Pro (Tecan, Grodig, Austria). La actividad enzimática inicial al 100% fue calculada usando solvente en lugar de los compuestos de prueba, mientras que el fondo fue medido sin la enzima recombinante humana. La plantilla fue sustraída de cada valor y los resultados se expresaron como % de la actividad enzimática.

F. Modelo ih vivo para prurito asociado con el modelo de oxazolona de una reacción de ultrasensibilidad del tipo retardado La actividad del rascado en ratones se mide después de la aplicación tópica del compuesto de prueba. Se midió el grosor de la oreja y se determinaron los parámetros de histología (vea, por ejemplo Elliott G.R. An automated metod for registering and quantifying scratching activity in mice: use for drug evaluation. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 2000;44:453-459 y Gijbels MJ. Therapeutic interventions in mice with chronic proliferative dermatitis (cpdm/cpdm). Exp. Dermatol. 2000;9:351-358).

EJEMPLOS DE COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA Composición del Ejemplo 9 Crema Compuesto del Ejemplo 9 1.00 Alcohol cetoestearílico 7.00 Macrogol-6-cetoestearil éter 1.50 acrogol-25-cetoestearil éter 1.50 Parafina líquida 12.00 Propilenglicol 8.00 Metilparabeno 0.15 Etilparabeno 0.08 Butilhidroxitolueno 0.04 edetato disódico 0.05 Agua 68.68 Composición del Ejemplo 7 Aplicación Industrial - Utilidad Los resultados antes mencionados muestran claramente los efectos técnicos mejorados proporcionados por los compuestos 1 ,3-benzoxazol-2(3H)-ona de la invención presente. Ha sido encontrado sorprendentemente por los inventores presentes que estos compuestos son convenientes como ingredientes activos en las composiciones cosméticas y farmacéuticas, preferiblemente los agentes dermatológicos. Además, los compuestos han mostrado ser efectivos para tratar y/o prevenir varias enfermedades y condiciones incluyendo, pero no limitada a inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema, y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas, en particular cuando son aplicadas tópicamente a la piel o la mucosa en forma de producto farmacéutico o composiciones cosméticas que contienen un portador conveniente, preferiblemente un portador apolar. En particular, la inflamación inducida por las señales de estrés celular pueden ser atenuadas efectivamente por estos compuestos. Además, los compuestos de la invención son efectivos en el tratamiento/prevención de condiciones de crecimiento del cabello (por ejemplo alopecia, efluvio), trastornos de las glándulas sebáceas (por ejemplo acné, seborrea), tumores benignos y malignos de la piel, enfermedades hiperproliferativas de la piel (por ejemplo soriasis), crecimiento excesivo del cabello (por ejemplo hirsutismo), diferentes formas de dermatitis, condiciones de la piel seca y/o esclerosis sistémica (por ejemplo escleroderma). Los compuestos de las fórmulas (1 ) y/o (2) son moduladores del sistema endocanabinoide y como tal son útiles en el tratamiento, control o prevención de las enfermedades, trastornos o condiciones antes mencionadas, que responden a uno o más constituyentes del sistema endocanabinoide incluyendo, pero no limitado a CB y CB2, TRPV1 , GPR55, FAAH, monoacilgliceol lipasa (MAGL) o AEAT. Las composiciones y preparaciones farmacéuticas (dermatológicas) que contienen los compuestos de la invención presente son sumamente activos, incluso si la cantidad de compuesto activo se reduce en comparación con los compuestos de la técnica previa, y muestra menos efectos secundarios indeseables.

Aunque la invención ha sido descrita y ha sido ilustrada con respecto a ciertas modalidades preferidas de la misma, los expertos en la técnica apreciarán que varios cambios, modificaciones y sustituciones pueden ser hechas en la presente sin separarse del espíritu y el alcance de la invención. Por ejemplo, las dosis efectivas, diferentes de las dosis preferidas como fue expuesto antes, pueden ser aplicables como resultado de las respuestas farmacológicas específicas observadas y pueden variar dependiendo del compuesto activo particular seleccionado, así como del tipo de formulación y del modo de administración empleado, y tales variaciones o diferencias esperadas en los resultados son contempladas de acuerdo con los objetivos y las prácticas de la invención presente. Por lo tanto, se pretende que la invención sea limitada sólo por el alcance de las reivindicaciones siguientes y que tales reivindicaciones sean interpretadas tan ampliamente como sea razonable.

Claims (15)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1 - Un compuesto de fórmula (1 ) fórmula (1 ) y los enantiómeros, diastereómeros, tautómeros, solvatos y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde R1 se selecciona del grupo que consiste en -(CH2)nN(R4)C(O)R5 y -C(O)NR4R6; R2 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, -alquilo de C-i-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de C-i-6, Ocicloalquilo de C3-7, -cicloalquilo de C3-7, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de Ci-6, Ocicloalquilo de C3-7, -(cicloalquilo de C3-7)-alquilo de C-i-6-, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de Ci-6, Ocicloalquilo de C3-7; R3 es hidrógeno, halógeno, hidroxi, metoxi o -CN; R4 es hidrógeno o alquilo de Ci-6; R5 se selecciona de alquilo de C8-15, alquenilo de C8-15, alquinilo de C8-15, (arilo de C6-io)-alquilo de C6-io, (arilo de C6--io)-alquenilo de C6-io, y (arilo de C6-io)-alquinilo de C6-io, en donde el arilo está opcionalmente sustituido; R6 se selecciona de alquilo de C9-16, alquenilo de Cg.16, alquinilo de C9-16, (arilo de C6-io)-alquilo de C7-n, (arilo de C6-io)-alquenilo de C7-11 , y (arilo de C6-io)-alquinilo de C7-n, en donde el arilo está opcionalmente sustituido; n es 0, 1 , ó 2.

2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque en la fórmula (1) R1 es -(CH2)nN(R4)C(0)R5, en donde n es 0 o 1 , preferiblemente 0; R2 es hidrógeno o alquilo de Ci_6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de Ci-6, Ocicloalquilo de C3-7; R3 es hidrógeno o halógeno, preferiblemente hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 es seleccionado de alquilo de C8-15, alquenilo de C8-15, (arilo de C6-io)-alquilo de C6-10, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C-6-10, en donde el arilo está opcionalmente sustituido.

3 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque en la fórmula (1) R es -C(O)NR4R6; R2 es hidrógeno o alquilo de C-i-6, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados de halógeno, OH, Oalquilo de Ci-6, Ocicloalquilo de C3-7; R3 es hidrógeno o halógeno, preferiblemente hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de C8-16, alquenilo de C9-i6, (arilo de C6-io)-alquilo de C7-n, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C7-n, en donde el arilo está opcionalmente sustituido.

4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y/o la reivindicación 2, caracterizado además porque R1 es -(CH2)nN(R4)C(O)R5, en donde n es 0; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 es seleccionado de alquilo de C8_i5, alquenilo de C-8-15 que tiene 1 , 2, o 3 dobles enlaces, (arilo de C6-io)-alquilo de C6-io, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C-6-10 que tiene 1 o 2 dobles enlaces.

5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y/o la reivindicación 3, caracterizado además porque en la fórmula (1) R1 es -C(0)NR4R6; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de Cg-ie, alquenilo de C9-i6 que tiene 1 , 2, o 3 dobles enlaces, (arilo de C6-io)-alquilo de C7-n, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C-7-11 que tiene 1 o 2 dobles enlaces.

6 - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 , 2 y/o 4, caracterizado además porque R1 es -(CH2)nN(R4)C(0)R5, en donde n es 0; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R5 es seleccionado de alquilo de C8-12, alquenilo de C-8-12 que tiene 2 dobles enlaces, (arilo de C6-io)-alquilo de C6-8, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C6-e que tiene 2 dobles enlaces.

7. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque R5 es seleccionado de alquilo de C8-12, alquenilo de C-8-12 que contiene una porción (2E,4E)-dieno, (arilo de C6-io)-alquilo de C6-8l y (arilo de C6-io)-alquenilo de C6-8 que contiene una porción (2E,4E)-dieno.

8. - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 , 3 y/o 5, caracterizado además porque en la fórmula (1) R1 es -C(0)NR4R6; R2 es hidrógeno o metilo; R3 es hidrógeno; R4 es hidrógeno; y R6 es seleccionado de alquilo de Cg_i3, alquenilo de Cg-13 que tiene 2 dobles enlaces, (arilo de C6-io)-alquilo de C7-9, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C -g que tiene 2 dobles enlaces.

9 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque R6 es seleccionado de alquilo de 09.13, alquenilo de C9-13 que contiene una porción (2E,4E)-dieno, (arilo de C6-io)-alquilo de C7- 9, y (arilo de C6-io)-alquenilo de C7-g que contiene una porción (2E,4E)-dieno.

10.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para usarse como un medicamento, preferiblemente como un agente dermatológico.

11. - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para usarse en el tratamiento y/o prevención de inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas, preferiblemente en la piel y/o mucosa de un mamífero, y/o alopecia, efluvio, trastornos de las glándulas sebáceas, tumores benignos y malignos de la piel, enfermedades hiperproliferativas de la piel, crecimiento excesivo del cabello, dermatitis, condiciones de piel seca y/o esclerosis sistémica.

12. - El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 , caracterizado además porque se aplica tópicamente en la piel o la mucosa de un mamífero.

13. - El uso no terapéutico del compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 como un cosmético, preferiblemente para el tratamiento cosmético de la piel y/o la mucosa de un mamífero.

14. - El uso no terapéutico como el que se reclama en la reivindicación 13 para reducir la inflamación, irritación, comezón, prurito, dolor, edema y/o condiciones pro-alérgicas o alérgicas, y alopecia, efluvio, trastornos de las glándulas sebáceas, enfermedades hiperproliferativas de la piel, crecimiento excesivo del cabello, dermatitis, condiciones de piel seca y/o esclerosis sistémica.

15 - Una composición que comprende el compuesto como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 y un portador farmacéuticamente y/o cosméticamente aceptable, preferiblemente un portador apolar, en donde la composición preferiblemente es un linimento, crema de la piel, gel, o loción.