MX2014013949A - Composicion, en medio acuoso, que comprende al menos un acido hialuronico y al menos una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición que comprende al menos un ácido hialurónico, reticulado o no reticulado, o una de sus sales, y al menos una sal hidrosuluble de octasulfato de sacarosa, a los procedimientos de fabricación de la composición así como a la utilización de la composición para la formulación de una composición de viscosuplementación o para la formulación de una composición para el relleno de las arrugas o para la formulación de una composición cosmética.

Description

COMPOSICION, EN MEDIO ACUOSO, QUE COMPRENDE AL MENOS UN ACIDO HIALURONICO Y AL MENOS UNA SAL HIDROSOLUBLE DE OCTASULFATO DE SACAROSA Campo de la Invención La presente invención se refiere a una composición esterilizada que comprende al menos un ácido hialurónico, y al menos una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa y a un procedimiento de fabricación de la composición.

Antecedentes de la Invención El ácido hialurónico es utilizado desde hace más de quince años en el dominio de la estética, en donde el mismo ha probado su inocuidad y su eficacia. Hasta ahora, en el mercado de los geles de relleno para fines estéticos o "rellenadores", los geles a base de ácido hialurónico reticulado de origen de biofermentación son los productos más utilizados. En efecto, en el dominio de la estética, los implantes no reabsorbibles son utilizados cada vez menos y los geles a base de otros polisacáridos han sido abandonados ya sea a causa de efectos secundarios, o a causa de su origen animal, que involucra un riesgo de contaminación viral.

La utilización del ácido hialurónico de origen de la biofermentación en las dominios tales como el relleno de las arrugas, la viscosuplementación, el tratamiento oftálmico Ref . 252418 o aún el tratamiento de la incontinencia urinaria, es mucho más reconocido y apreciado que por su presencia natural en el cuerpo humano, y más particularmente en la dermis, el líquido sinovial y la córnea, y por esto los riesgos debidos a sus efectos secundarios son minimizados.

Pero debido al hecho que el ácido hialurónico está naturalmente en el cuerpo, existen enzimas endógenas susceptibles de degradarlo, como por ejemplo las hialuronidasas. Esta degradación es ilustrada en Iocono et al., J. Ped. Surg., Vol.33, No.4, 1998, 564-567, que trata de la cicatrización de las heridas. Las hialoluronidasas son enzimas que degradan el ácido hialurónico catalizando su hidrólisis en oligosacáridos del ácido hialurónico. Esta degradación tiene por efecto una disminución de la viscosidad del ácido hialurónico. Esta disminución de la viscosidad ocasiona irremediablemente una disminución en el tiempo de los efectos buscados en los dominios del relleno de las arrugas o de la viscosuplementación, y en consecuencia un acercamiento en los tiempos de las inyecciones para restaurar los efectos, susceptibles de ocasionar una moltia o dolores para el paciente.

Una primera solución para resolver este problema podría ser sustituir otros polisacáridos, menos sensibles a las hialuronidasas y presentes naturalmente en el cuerpo humano, al ácido hialurónico.

Entre los polisacáridos constitutivos de la matriz extracelular (MEC), el sulfato de condroitina, el sulfato de dermatano y el sulfato de queratano, podrían ser interesantes.

Los mismos en efecto son responsables parcialmente con el ácido hialurónico de la hidratación de la piel, de su flexibilidad, y su presencia natural en la dermis permite proveer una excelente tolerancia y eficacia para un producto de relleno de las arrugas, de rehidratación o de viscosuplementación.

Desgraciadamente, el sulfato de condroitina es de origen animal y ninguna tentativa de síntesis del sulfato de condroitina por la vía de la biofermentación ha permitido, hasta ahora, producir cantidades compatibles con una explotación industrial. Es el mismo caso para el sulfato de dermatano y el sulfato de keratano, que no están disponibles industrialmente más que como productos de origen animal.

Otra solución que contempla reducir la degradación del ácido hialurónico por las hialuronidasas es proponer composiciones que comprenden en combinación con el ácido hialurónico, un compuesto que tiene las actividades inhibidoras de la hialuronidasas.

Los grupos de los sulfatos ya son conocidos en la literatura por sus propiedades antioxidantes y anti- radicales, por su capacidad de hidratación importante e igualmente por su acción anti-hialuronidasa.

Si se trata de sus propiedades antioxidantes y anti-radicales, los mismos protegen los glucosaminoglicanos (GAGs) de la despolimerización por las especies reactivas del oxígeno como se describe en Moselcy R et al., Biochim Biophys Acta., (1995), 1244(2-3), 245-52.

Si se trata de su capacidad de hidratación, la misma ha sido demostrada, por ejemplo en R. Servati et al., International Journal of Biological Macromolecules, (2001), 28, 121-127, una capacidad de absorción más grande de las moléculas de agua por el sulfato de condroitina con relación al ácido hialurónico, que resulta de la presencia del grupo sulfato llevado por el sulfato de condroitina.

Si se trata de su acción anti-hialuronidasa, los polisacáridos sulfatados y más particularmente los glucosaminoglucanos completamente O-sulfatados son conocidos porque presentan una actividad anti-hialuronidasa importante, por ejemplo de T. Toida et al., Archives of Biochemistry and Biophysics, 1999, 370(2), 176-182. Los glucosaminoglicanos completamente O-sulfatados descritos en esta publicación son el sulfato de condroitina, el sulfato de dermatano, el sulfato de heparina y el ácido hialurónico sulfatado. Los resultados obtenidos muestran que todos los glucosaminoglicanos completamente O-sulfatados inhiben las hialuronidasas de manera dependiente de la dosis y que el ácido hialurónico completamente 0-sulfatado es el mejor inhibidor de las hialuronidasas entre los glucosaminoglicanos completamente O-sulfatados probados. El inconveniente del ácido hialurónico completamente O-sulfatado es que el mismo no puede ser reticulado.

Ahora bien, en el dominio de la estética, más del 80% de las composiciones son a base del ácido hialurónico reticulado, por lo que no es posible así desarrollar un producto de relleno a base de ácido hialurónico no reticulado.

Se podría contemplar la incorporación de una pequeña cantidad del polisacárido sulfatado de origen animal en una composición a base de ácido hialurónico, por ejemplo la solicitud de patente WO 03/041724 a nombre de Hermida, describe las composiciones inyectables estériles a base de una mezcla de hialunorato de sodio y de sulfato de condroitina para fines intraarticulares.

De la misma manera en la solicitud de patente WO 2004/034980 a nombre de Marcum, las composiciones inyectables a base de ácido hialurónico, de sulfato de condroitina y de la N-acetil-glucosamina para la regeneración del cartílago por inyección intraarticular, son descritas.

El inconveniente de tales composiciones se debe al origen animal del sulfato de condroitina.

Si se trata de los polisacáridos sulfatados de origen sintético, las pruebas de inhibición de las hialuronidasas en las composiciones de ácido hialurónico por el sulfato de dextrano han sido descritas igualmente, por ejemplo, por K. Zimmerman, J. Cáncer Res. Clin. Oncol., 1993, 105 pp 189-190. La hidrólisis del ácido hialurónico según el método de Nelson ha sido medida para las composiciones que comprenden el ácido hialurónico, de las hialuronidasas así como del sulfato de dextrano de peso molecular de 17.7 kDa a diferentes concentraciones. El sulfato de dextrano es descrito como un inhibidor poderoso de las hialuronidasas, y si las dosis activas para un sulfato de dextrano de peso molecular de 17.7 kDa están alejadas de las dosis tóxicas, la toxicidad aumenta con el peso molecular, y solo algunas moléculas de peso molecular elevado aumentan considerablemente la toxicidad, como ya ha sido demostrado por Walton, Br. J. Pharmacol., 1954, 9:1-14. Además, el sulfato de dextrano es descrito que es un anticoagulante utilizable in vivo o in vitro como ya se describe por ejemplo en US 2715091 y estas propiedades anticoagulantes no son compatibles a priori con las utilizaciones en calidad de ingrediente de las composiciones que son implantables.

Entre los polisacáridos de origen vegetal sulfatados, ya se conocen los carrageenanos, pero se sabe que los mismos provocan reacciones inflamatorias, a tal punto que los modelos para probar los antiinflamatorios están basados en sus propiedades.

Ya se conocen igualmente de WO 03/000191 a nombre de Depuy, composiciones para el tratamiento de las articulaciones artríticas que comprenden el ácido hialurónico y un inhibidor de la hialuronidasa, como por ejemplo un polisacárido sulfatado como el sulfato de dextrano, el sulfato de xilosa, o el sulfato de heparano, cuya parte de los componentes es encapsulada en los liposomas para asegurar la difusión controlada, pero la utilización de los liposomas en las composiciones destinadas especialmente a ser reticuladas parecen difíciles de contemplar.

Así, la mayor parte de los polisacáridos que podrían ser utilizados en calidad de aditivos para el ácido hialurónico para reducir la acción de las hialuronidasas son ya sea de origen animal, o presentan una toxicidad potencial, estas dos condiciones no son compatibles con las utilizaciones contempladas.

Desde un punto de vista teórico, la incorporación de los sulfatos en una solución bajo la forma de los iones de los sulfatos podría ser contemplada; sin embargo su difusión en el seno del tejido inyectado sería demasiado rápida, incluso inmediata, volviéndolo así ineficaz para las propiedades de anti-hialuronidasas de las composiciones en el dominio del relleno de las arrugas o de la viscosuplementación. Es preferible así elegir compuestos funcionalizados por los grupos de los sulfatos.

Otra solución potencial es la utilización de compuestos sulfatados que pertenecen a las subfamilias de los monosacáridos sulfatados y de los polisacáridos sulfatados.

Esta subfamilia de mono u oligosacáridos sulfatados (formados de 1 a 10 elementos semejantes) es interesante, porque los mismos pueden estar fácilmente disponibles por síntesis, y su estructura glucídica se aproxima sin embargo a los glucosaminoglucanos constitutivos de la matriz ExtraCelular, los mismos son muy bien metabolizados generando productos de degradación no tóxicos.

Por ejemplo, los galacto-oligosacáridos activos con respecto a las hialuronidasas, se han descrito en los trabajos publicados por S. Salmen et al., Planta Medica, 71 n°8, 2005, 727-732, especialmente el barbasco, la planteosa y la neomicina, que presentan actividades anti-hialuronidasa 100 a 500 veces más elevadas que aquellas de la apigenina, que es un inhibidor de la hialuronidasa conocido.

Las propiedades anti-hialuronidasas de los oligosacáridos completamente O-sulfatados que provienen del ácido hialurónico son descritas igualmente en el arte previo como A. Susuki et al., Glycobiology, 2001 11(1), pp.57-64. Una correlación entre la inhibición de las hialuronidasas por los oligosacáridos O-sulfatados que provienen del ácido hialurónico, su grado de funcionalización por los grupos sulfatos y su tamaño, se pone en evidencia. Se menciona más particularmente que la actividad inhibidora de éstos oligosacáridos O-sulfatados está relacionada con su tamaño.

Existen igualmente monosacáridos sulfatados tales como glucosaminas sulfatadas, como por ejemplo la 3-glucosamida-3-sulfato descrita como un inhibidor de la degradación del cartílago por J.I. Fenton et al., Osteoarthritis and Cartilage, Volumen 8, Carpeta 6, 2000, 444-451.

Entre los oligosacáridos, se encuentran igualmente la sacarosa, formada por la condensación de dos elementos semejantes, una glucosa y una fructosa.

Esta sacarosa bajo la forma sulfatada, como otros oligosacáridos sulfatados, se describe que es utilizada como el agente de promoción de la cicatrización de las heridas en la aplicación tópica, en solución o en las matrices colagenosas o a base de alcohol polivinílico en la patente EP 0 230 023 a nombre de Marión Laboratories.

En WO 89/05646 y EP 0640346 a nombre de Bar-Shalom, las composiciones que comprenden las sales de octasulfato de sacarosa y más particularmente de los ejemplos con la sal de aluminio del octasulfato de sacarosa que es una sal insoluble destinada a aplicaciones tópicas o a las inyecciones en los tejidos y comprendidas comprendidos las articulaciones, son descritas. Las sales de octasulfto de sacarosa son utilizadas más particularmente por sus propiedades cicatrizantes. En el marco de la aplicación de la cicatrización, el ácido hialurónico puede ser utilizado igualmente en calidad de sustancia activa que favorece la cicatrización.

Ya se conocen de WO 98/22114 a nombre de Dumex-Alpharma, las composiciones que comprenden un complejo formado entre un polisacárido tal como la quitosana o el ácido hialurónico y un oligosacárido sulfatado tal como el octasulfato de sacarosa o una de sus sales. Estas composiciones, otra vez, están destinadas a favorecer la cicatrización de las heridas de los tejidos que comprenden el colágeno tales como la piel, los huesos y las mucosas. La formación del complejo está caracterizada por diferentes téenicas, como por ejemplo, las espectroscopias de RMN y los rayos infrarrojos, la difracción de los rayos X, la terografía y los ensayos de solubilidad en las condiciones definidas.

La fabricación de las composiciones destinadas a ser implantadas o inyectadas, implica que las mismas deben en el momento de sus procesos de fabricación ser esterilizadas para respetar las exigencias sanitarias mínimas para tales composiciones. El procedimiento de esterilización más utilizado en los procesos de fabricación de tales composiciones es la esterilización por vapor o tratamiento en autoclave y uno de tales procedimientos puede degradar los productos que constituyen las composiciones. Así es indispensable que las propiedades reológicas, las mediciones del pH y de la biocompatibilidad, sean conservadas y preservadas durante el tratamiento en autoclave. Es por esta misma razón que se tratan las exigencias de inyectabilidad a través de agujas finas, que es su modo principal de utilización.

Se ha puesto en evidencia de manera completamente sorprendente e inesperada por las pruebas, que los geles de ácido hialurónico formulados con las sales hidrosolubles de octasulfato de sacarosa (SOS) entre todos los candidatos posibles, son los únicos que permiten obtener composiciones estables durante la esterilización por vapor, llamado de otra manera tratamiento en autoclave, y que los mismos presentan además remanentes reducidos en razón de su resistencia a la degradación por las hialuronidasas, con respecto a los geles que comprenden el ácido hialurónico sin una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa.

La sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa posee 8 grupos de sulfatos por molécula de sacarosa, así, en el gel formulado con la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa, la cantidad de los sulfatos agregados por mg de SOS es importante. La solicitante ha puesto igualmente en evidencia de manera también muy sorprendente, que la adición de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa en los geles a base de ácido hialurónico no ocasiona la reducción de la viscosidad o de la elasticidad durante la esterilización.

Breve Descripción de la Invención En la presente invención, la solicitante se propone resolver el problema de la degradación por las hialuronidasas de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico por la adición de una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa, conservando la aptitud de éstas composiciones para ser utilizadas en el dominio del relleno de las arrugas, de la viscosuplementación, de las formulaciones cosméticas o farmacéuticas debido a la estabilidad de sus propiedades reológicas durante la fase de esterilización con vapor en el trascurso de los procesos de fabricación.

La presente invención permite resolver el conjunto de los problemas citados anteriormente y permite además obtener las composiciones según la invención conservando sus propiedades reológicas durante el tratamiento en autoclave y que tienen una remanencia superior (tiempo de vida media superior) con respecto a las composiciones del arte previo.

Breve Descripción de las Figuras La figura 1 es el espectro de RMN ¾ del octasulfato potásico de sacarosa en solución en agua.

La figura 2 es una superposición de los espectros de RMN !H de la composición del ejemplo 4 antes y después de la esterilización.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención se refiere a una composición esterilizada que comprende al menos un ácido hialurónico, reticulado o no reticulado, o una de sus sales y al menos una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa, los procesos de fabricación de la composición así como la utilización de la composición para la formulación de una composición de viscosuplementación o para la formulación de una composición para el relleno de las arrugas, para la formulación de un composición cosmética o para la formulación de una composición farmacéutica.

La composición según la presente invención posee propiedades de resistencia a las hialuronidasas y está caracterizada por las propiedades reológicas conservadas después de la esterilización por vapor y al menos semejantes a aquellas de una composición que comprende solamente al menos un ácido hialurónico, reticulado o no reticulado, o una de sus sales. La presente invención se refiere igualmente a una formulación cosmética que comprende la composición según la invención y al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

De manera sorprendente, la presente invención permite obtener composiciones resistentes a las hialuronidasas que responden a las exigencias de estabilidad en el tratamiento con autoclave de las composiciones destinadas a los dominios citados precedentemente.

La presente invención se refiere a una composición en un medio acuoso, que comprende al menos un ácido hialurónico y al menos una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa, caracterizado porque la composición es una mezcla física y porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] es superior o igual a 0.1.

Se entiende por ácido hialurónico, el ácido hialurónico, reticulado o no reticulado, solo o mezclado, eventualmente modificado químicamente por sustitución, solo o mezclado, eventualmente bajo la forma de una de sus sales, solas o mezcladas.

En una modalidad, la composición según la invención comprende al menos un ácido hialurónico no reticulado o una de sus sales, solas o mezcladas.

En una modalidad, la composición según la invención comprende al menos un ácido hialurónico reticulado o una de sus sales, solas o mezcladas.

En una modalidad, la composición según la invención comprende al menos un ácido hialurónico co-reticulado o una de sus sales, solas o mezcladas.

En una modalidad, la composición según la invención comprende al menos un ácido hialurónico modificado químicamente por substitución, reticulado o no reticulado, o una de sus sales, solas o mezcladas.

En una modalidad, el ácido hialurónico está bajo la forma de la sal de sodio o de potasio.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es elegida del grupo constituido por las sales de metales alcalinos, las sales de metales alcalinotérreos, las sales de plata, las sales de amonio, las sales de aminoácidos.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es elegida del grupo constituido por las sales de metales alcalinos o las sales de metales alcalinotérreos.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la sal hidrosoluble del octasulfato de sacarosa es la sal de sodio del octasulfato de sacarosa o la sal de potasio de octasulfato de sacarosa.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es la sal de sodio del octasulfato de sacarosa.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es la sal de potasio del octasulfato de sacarosa.

La solubilidad máxima de la sal de potasio del octasulfato de sacarosa es de 40 mg/g, así la relación [HA]/[SOS] mínima en las composiciones de la presente invención es de 0.1, siempre que la concentración mínima aceptable de HA en las composiciones de la presente invención sea de 4 mg/g para de obtener una consistencia adecuada con las utilizaciones de la presente invención. La solubilidad de la sal de sodio del octasulfato de sacarosa es superior a aquella de la sal de potasio, el límite de la solubilidad de la sal de potasio del octasulfato de sacarosa ha sido tomado en consideración para determinar el valor mínimo de la relación [HA]/[SOS].

Se entiende por medio acuoso, una composición bajo la forma de una solución acuosa, eventualmente en la presencia de la sal soluble o de un amortiguador, eventualmente bajo la forma de un gel o de un hidrogel.

Se entiende por mezcla física, una mezcla en la cual la integridad de las propiedades fisicoquímicas de los constituyentes es conservada, es decir que las mismas son estrictamente idénticas a aquellas de los constituyentes de la mezcla tomados separadamente, esta integridad de las propiedades fisicoquímicas puede ser caracterizada por diferentes métodos analíticos. La solicitante ha elegido para caracterizar la mezcla física, la espectroscopia por resonancia magnética nuclear (RMN). El espectro de RMN de la mezcla según la invención es un espectro de 1 dimensión del protón 1H. Por ejemplo, el espectro de RMN de una mezcla física que comprende una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa está caracterizado porque los valores de los desplazamientos químicos de los protones de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa en solución, sola, son iguales a los valores de los desplazamientos químicos de los protones de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa en la mezcla física según la invención, lo que prueba que no existe interacción o reacción entre la sal hidrosoluble del octasulfato de sacarosa y el ácido hialurónico.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque, cuando la misma es analizada por espectroscopia de RMN del protón 1H, el valor del desplazamiento químico del protón anomérico (d=5.7 ppm) de la sal de octasulfato de sacarosa es idéntica al valor del desplazamiento químico del protón anomérico de la sal de octasulfato de sacarosa sola en solución.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 0.1 y 5000.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 0.1 y 2500.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 1 y 1000.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 10 y 500.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 0.1 y 100.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] está comprendida entre 0.5 y 50.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la relación másica entre el contenido de ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA]/[SOS] es igual a 20.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa está comprendida entre 0.01 mg/g y 40 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa está comprendida entre 0.1 mg/g y 10 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa está comprendida entre 0.1 mg/g y 1 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de ácido hialurónico está comprendido entre 2 mg/g y 50 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de ácido hialurónico está comprendido entre 4 mg/g y 40 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido de ácido hialurónico está comprendido entre 10 mg/g y 30 mg/g de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque comprende al menos un ácido hialurónico no reticulado.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la misma comprende al menos un ácido hialurónico reticulado.

En la presente invención, la tasa de reticulación X, está definida que es igual a la relación: X = (Número demoldel reticulante introducidos en elmedio de la reacción)_ (Número demolde la porción disacárida introducidos en elmedio de la reacción) En una modalidad, el ácido hialurónico reticulado presenta una tasa de reticulación X comprendida entre 0.001 y 0.5.

En una modalidad, el ácido hialurónico reticulado presenta una tasa de reticulación X comprendida entre 0.01 y 0.25.

En una modalidad, el ácido hialurónico reticulado presenta una tasa de reticulación X comprendida entre 0.1 y 0.2.

En una modalidad, el ácido hialurónico es co- reticulado tal como el que se describe en la solicitud WO 2000/0046253 a nombre de Fermentech o WO 2004/092222 a nombre de Cornéal o aún FR2865737 a nombre de ANTEIS.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque comprende una mezcla de ácidos hialurónicos reticulados y no reticulados tal como la descrita en la solicitud W02005061611 a nombre de Innomed Ltd.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque comprende una mezcla de ácidos hialurónicos reticulados.

En una modalidad, la mezcla de ácidos hialurónicos reticulados es una mezcla monofásica tal como aquellae descrita en la solicitud de patente WO 2009/071697 a nombre de la solicitante.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque comprende al menos un ácido hialurónico substituido por un grupo que aporta propiedades lipofílicas o hidratantes, como por ejemplo los ácidos hialurónicos sustituidos tales como los descritos en la solicitud W02013079889 a nombre de la solicitante.

En una modalidad, la composición comprende además, otro polisacárido.

En una modalidad, este otro polisacárido es elegido del grupo constituido por la celulosa, el ácido algínico o una de sus sales.

Se llama Mw o "masa molecular", a la masa molecular promedio en masa de los polímeros, medida en Daltons.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la masa molecular Mw del ácido hialurónico está comprendida en un intervalo de 0.01 MDa y 5 MDa.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque la masa molecular Mw del ácido hialurónico está comprendida en un intervalo de 0.1 MDa y 3.5 MDa.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque comprende, además, al menos un principio activo.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el principio activo es elegido entre los antioxidantes, los anestésicos locales, las vitaminas, solas o combinadas.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque los antioxidantes son elegidos entre los polioles.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque los antioxidantes son elegidos entre el manitol y el sorbitol, solos o combinados.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el agente antioxidante es el manitol.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el agente antioxidante es el sorbitol.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el agente antioxidante es una combinación de manitol y de sorbitol.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque los anestésicos locales son elegidos del grupo constituido por la lidocaína, la procaína, la mepivacaína, la ropivacaína, la bupivacaína, y sus sales farmacéuticamente aceptables.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el anestésico local es el clorhidrato de lidocaína.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido del principio(s) activo(s) está comprendido entre 0.01 y 10% en peso con respecto al peso total de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque el contenido del principio(s) activo(s) está comprendido entre 0.1 y 5% en peso con respecto al peso total de la composición.

En una modalidad, la composición según la invención está caracterizada porque es estable en la esterilización por tratamiento en autoclave por vapor.

En una modalidad, la invención es una composición de viscosuplementación caracterizada porque comprende al menos una composición según la invención.

En una modalidad, la invención es una composición para el tratamiento de la xeroftalmia o resequedad ocular, caracterizada porque comprende al menos una composición según la invención.

Según los modos de realización, las composiciones son utilizadas en calidad de lágrimas artificiales, geles lagrimales o lubricantes.

En una modalidad, la invención es una formulación cosmética caracterizada porque comprende una composición según la invención y al menos un excipiente cosméticamente aceptable.

En una modalidad, la formulación cosmética según la invención está caracterizada porque comprende entre 0.01 y 10% en peso de una composición según la invención con respecto al peso total de la formulación cosmética.

En una modalidad, la formulación cosmética según la invención está caracterizada porque al menos un excipiente cosméticamente aceptable es elegido ente los adyuvantes cosméticos clásicos.

Se entiende por adyuvantes cosméticos clásicos, los excipientes elegidos especialmente entre los cuerpos grasos, los solventes orgánicos, los espesadores iónicos o no iónicos, los suavizantes, los antioxidantes, los opacificantes, los agentes de estabilización, los emolientes, las siliconas, los a-hidroxiácidos, los agentes antiespumantes, los agentes hidratantes, los perfumes, los conservadores, los agentes tensioactivos, las cargas, los agentes de captura, los polímeros, los propulsores, los agentes alcalinizantes y acidificantes, los colorantes, o cualquier otro ingrediente utilizado habitualmente en cosmética.

La formulación cosmética según la invención puede comprender además otros agentes activos, especialmente agentes hidratantes, humectantes, tranquilizantes, antiinflamatorios, cicatrizantes.

La formulaciones cosméticas según la invención pueden ser preparadas según las téenicas bien conocidas por el experto en el arte, en particular aquellos destinados a la preparación de las emulsiones del tipo de aceite en agua (H/E) o de agua en aceite (E/H).

Esta formulación cosmética puede presentarse en particular en la forma de emulsión, simple o compleja (H/E, E/H, H/E/H O E/H/E) tal como una crema, una leche, un gel o un gel cremoso, un polvo, una barra sólida y eventualmente puede ser acondicionada en un aerosol y presentarse bajo la forma de una espuma o de una solución de rociado.

En una modalidad, la formulación cosmética es esterilizada según las téenicas bien conocidas por el experto en el arte, y en particular por irradiación gamma.

La presente invención se refiere igualmente a una formulación cosmética según la invención caracterizada porque es administrable por la vía tópica bajo la forma de una loción, crema, aceite, barra, champú o cualesquiera otras formas apropiadas.

La formulación cosmética, dermatológica o farmacéutica según la invención puede ser utilizada como una composición protectora de la epidermis humana contra las agresiones de los elementos exteriores y así luchar contra el envejecimiento prematuro de la epidermis.

La invención se refiere igualmente a un procedimiento de fabricación y una composición según la invención.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende al menos: - una etapa de hidratación de las fibras de al menos un ácido hialurónico, para obtener un hidrogel, - una etapa de mezclado de una solución de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa con el hidrogel obtenido en la etapa precedente, - una etapa de homogeneización, y - una etapa de tratamiento en autoclave por vapor.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque la etapa de hidratación es realizada a temperatura ambiente.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque la etapa de ho ogeneización es realizada a temperatura ambiente.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque la etapa de tratamiento en autoclave por vapor es realizada a una temperatura de 121 a 134°C, por una duración adaptada a la temperatura.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende además al menos una etapa de acondicionamiento de la mezcla homogeneizada en las jeringas.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende además una etapa de acondicionamiento de la mezcla homogeneizada en recipientes de dosis unitaria.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende además al menos una etapa de reticulación.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque la etapa de reticulación se sitúa entre la etapa de hidratación y la etapa de mezclado.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende una etapa de mezclado de dos ácidos hialurónicos previamente reticulados como en el procedimiento descrito en WO2013/079889.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque la etapa de reticulación es realizada por medio de al menos un agente de reticulación.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque el agente de reticulación es bi o polifuncional.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque el agente de reticulación bi o polifuncional es elegido entre el grupo constituido por el éter de etilenglicol-diglicidilo, el éter de butanodiol-diglicidilo (BDDE), el éter de poliglicerol-poliglicidilo, el éter de polietilenglicol-diglicidilo, el éter de polipropilenglicol-diglicidilo, un bis o un poliepoxi tal como el 1,2,3,4-diepoxibutano o el 1,2,7,8-diepoxioctano, una dialquilsulfona, la divinilsulfona, el formaldehído, la epiclorohidrina o aún el glutaraldehído, las carbodiimidas tales como por ejemplo el clorhidrato de l-etil-3[3-dimetilaminopropil]carbodiimida (EDC).

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque el agente de reticulación bifuncional es el éter de butanodiolglicidilo (BDDE) o el 1,2,7,8-diepoxioctano.

En una modalidad, el procedimiento de fabricación según la invención está caracterizado porque la etapa de reticulación es utilizada según las téenicas conocidas por el experto en el arte.

En una modalidad, el procedimiento según la invención está caracterizado porque comprende, después de la etapa de reticulación, al menos una etapa de purificación y lavado utilizada según las características conocidas por el experto en el arte.

La invención se refiere a la utilización de una composición según la invención, para la formulación de una composición de viscosuplementación.

La invención se refiere a la utilización de una composición según la invención, para la formulación de una composición para el relleno de las arrugas.

Las aplicaciones contempladas son más particularmente las aplicaciones comúnmente generalizadas en el marco de los viscoelásticos inyectables y de los polisacáridos utilizados o potencialmente utilizables en las patologías o tratamientos siguientes: - inyecciones estéticas al nivel de la cara: el relleno de las arrugas, de los defectos cutáneos o volumétricos (pómulos, mentón, labios); - inyecciones volumétricas al nivel del cuerpo: aumento de los senos y de los glúteos, aumento del punto G, vaginoplastía, reconstrucción de los labios vaginales, aumento del pene; tratamiento de la artrosis, inyección en la articulación en reemplazo o en complemento del líquido sinovial deficiente; inyección peri-uretral para el tratamiento de la incontinencia urinaria por insuficiencia esfinteriana; - inyección post-quirúrgica para evitar especialmente las adhesiones peritoneales; - la inyección seguida a una cirugía de la presbicia por incisiones esclerales o rayo láser - inyección en la cavidad vitrea.

Más particularmente, en cirugía estética, en función de sus propiedades viscoelásticas y de remanencia, el hidrogel obtenido según el procedimiento de la invención podría ser utilizado: para el relleno de las arrugas finas, promedios o profundas, y puede ser inyectado con agujas de diámetro fino (de calibre 27 por ejemplo); - como un agente que provee volumen con una inyección por las agujas de diámetro más grande, de calibre 22 a 26 por ejemplo, y más largas (de 30 a 40 mm por ejemplo); en este caso, su carácter cohesivo permitirá garantizar su mantenimiento en el lugar de la inyección.

La composición según la invención encuentra igualmente una aplicación importante en cirugía articular y en cirugía dental para el relleno de las cavidades parodontales por ejemplo.

Estos ejemplos de utilización no son limitativos de ninguna manera, la composición según la presente invención es provista más ampliamente para: - el relleno de volúmenes; generar espacios en el seno de ciertos tejidos, favoreciendo así su funcionamiento óptimo; - el reemplazo de líquidos fisiológicos deficientes.

La invención se refiere igualmente a un kit que comprende una composición según la invención, acondicionada en jeringas y esterilizada después del acondicionamiento.

La invención se refiere igualmente un kit que comprende una composición según la invención, acondicionada en recipientes de dosis unitarias y esterilizada después del acondicionamiento.

La composición según la invención encuentra igualmente una aplicación en el dominio cosmético o farmacéutico.

Más particularmente en el dominio cosmético, una composición según la invención será utilizada como el ingrediente activo hidratante en una composición cosmética.

En el dominio farmacéutico, una composición según la invención será utilizada como la composición de hidratación de los ojos penetrados de resequedad ocular, es decir como una lágrima artificial.

En las aplicaciones cosméticas y/o farmacéuticas, las composiciones pueden comprender además cualquier otro ingrediente aceptable cosméticamente o farmacéuticamente.

Las características de la composición según la presente invención así como sus procedimientos de fabricación y sus propiedades son ilustradas en los ejemplos que se dan enseguida.

Ejemplo 1 Este ejemplo ilustra una composición según la invención que comprende el ácido hialurónico no reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa.

Las fibras de hialurorato de sodio (NaHA) de calidad inyectable (1 g; masa molecular: aproximadamente 2.7 MDa) son pesadas en un recipiente. Una solución acuosa del amortiguador de fosfato (32.3 g) es agregada, la solución como un todo es homogeneizada durante aproximadamente 1 hora con la espátula, a temperatura ambiente y bajo una presión atmosférica de 900 mmHg.

El hidrogel de NaHA no reticulado así obtenido tiene una concentración de aproximadamente 30 g/g de NaHA.

El octasulfato potásico de sacarosa (KSOS) (60 mg o 4.7.10_5mol) es solubilizado en una solución de un amortiguador de fosfato (19.94 g) para obtener una solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa de una concentración de 3 mg/g.

El hidrogel NaHA obtenido en la etapa precedente es diluido por la adición de la solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa preparada precedentemente. La composición así obtenida es homogeneizada enseguida.

Se obtiene así una composición que comprende el NaHA no reticulado a una concentración de 20 mg/g y el KSOS a una concentración de 1 mg/g; la relación másica [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son esterilizadas por el tratamiento en autoclave por vapor (T= 121°C, 10 min).

Según un modo operativo idéntico a aquel descrito posteriormente adaptando las cantidades utilizadas, son preparados los geles descritos en la tabla 7.

Ejemplo 2: Este ejemplo ilustra un ejemplo de la composición según la invención que comprende el ácido hialurónico reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa.

La composición que comprende el ácido hialurónico reticulado es obtenida según el modo operativo de reticulación descrito en WO 2009/071697 (ejemplo 1, primera parte) a nombre de VIVACY a partir de las fibras de hialuronato de sodio (NaHA) (1 g; masa molecular: aproximadamente 2.7 MDa) y el éter de butanodiol-diglicidilo (BDDE) (54mg). La composición así obtenida tiene una concentración de aproximadamente 30 mg/g en NaHA reticulado con una tasa de reticulación X de aproximadamente 0.12.

Una solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa de la concentración de 3 mg/g es preparada como en el ejemplo 1.

El hidrogel de NaHA reticulado, obtenido en la etapa precedente, es diluido en la solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa preparada precedentemente. La composición así obtenida es homogeneizada enseguida.

Se obtiene así una composición que comprende el NaHA reticulado a una concentración de 20 mg/g y de octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 1 mg/g; la relación másica de [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor (T= 121°C, 10 min).

Según un modo operativo idéntico a aquel descrito posteriormente adaptando las cantidades utilizadas, se prepara el gel descrito en la tabla 8.

Ejemplo 3 Este ejemplo ilustra un ejemplo de la composición según la invención que comprende el ácido hialurónico no reticulado, el octasulfato potásico de sacarosa y el manitol.

La composición que comprende el ácido hialurónico no reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa es preparado según el modo operativo del ejemplo 1, a partir de un hidrogel el ácido hialurónico a una concentración de 30 mg/g y de una solución de octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 10 mg/g.

La adición de una solución de manitol a una concentración de 86 mg/g a la composición obtenida anteriormente, es efectuada según el modo operativo descrito en WO 2009/024670 a nombre de ANTEIS.

La composición así obtenida comprende el ácido hialurónico no reticulado a una concentración de 20 mg/g, el manitol a una concentración de 20 mg/g y el octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 1 mg/g; la relación másica de [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son esterilizadas por tratamiento en autoclave por vapor (T= 121°C, 10 min).

Ejemplo 4 Este ejemplo ilustra un ejemplo de la composición según la invención que comprende el ácido hialurónico reticulado, el octasulfato potásico de sacarosa y el manitol.

Una composición que comprende el NaHA reticulado es preparada según el modo operativo descrito en el ejemplo 2 a partir de un hidrogel de NaHA a una concentración de 30 mg/g y del octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 10 mg/g.

La adición de una solución de manitol a una concentración de 86 mg/g a la composición obtenida anteriormente es efectuada según el modo operativo descrito en WO 2009/024670 a nombre de ANTEIS.

La composición así obtenida comprende el ácido hialurónico reticulado a una concentración de 20 mg/g, el manitol a una concentración de 20 mg/g y el octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 1 mg/g; la relación másica de [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son esterilizadas por el tratamiento en autoclave con vapor (T = 121 °C, 10 min).

Ejemplo 5 Este ejemplo ilustra un ejemplo de la composición según la invención que comprende el ácido hialurónico reticulado, el octasulfato potásico de sacarosa y la lidocaína.

La composición que comprende el ácido hialurónico no reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa es preparada según el modo operativo del ejemplo 1, a partir de un hidrogel del ácido hialurónico a una concentración de 30 mg/g Y de una solución de octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 10 mg/g.

La adición de una solución de lidocaína a una concentración de 13 mg/g a la composición obtenida anteriormente es efectuada según el modo operativo descrito en WO 2009/024670 a nombre de ANTEIS o según el modo operativo descrito en las solicitudes US 61/791,977 o FR 13/52971 a nombre de VIVACY.

La composición así obtenida comprende el ácido hialurónico no reticulado a una concentración de 20 mg/g, la lidocaína a una concentración de 3 mg/g y el octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 1 mg/g; la relación m sica de [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son utilizadas para el tratamiento en autoclave con vapor (T = 121 °C, 10 min).

Ejemplo 6 Este ejemplo ilustra un ejemplo de la composición según la invención que comprende el ácido hialurónico reticulado, el octasulfato potásico de sacarosa y la lidocaína.

Una composición que comprende el NaHA reticulado es preparada según el modo operativo descrito en el ejemplo 2 a partir de un hidrogel de NaHA a una concentración de 30 mg/g y de octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 10 mg/g.

La adición de una solución de lidocaína a una concentración de 13 mg/g a la composición obtenida anteriormente es efectuada según el modo operativo descrito en WO 2009/024670 a nombre de ANTEIS o según el modo operativo descrito en las solicitudes US 61/791,977 o FR 13/52971 a nombre de VIVACY.

La composición así obtenida comprende el ácido hialurónico reticulado a una concentración de 20 mg/g, la lidocaína a una concentración de 3 mg/g y el octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 1 mg/g; la relación másica de [HA]/[SOS] es así de 20.

La composición así obtenida es acondicionada en jeringas que son esterilizadas por el tratamiento en autoclave con vapor (T = 121 °C, 10 min).

Las composiciones obtenidas en los ejemplos 1 a 6 pueden ser utilizadas en la viscosuplementación o en un fluido de relleno.

Ejemplo 7 Este ejemplo ilustra una composición según la invención que comprende el ácido hialurónico no reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa para el tratamiento de la resequedad ocular.

Las fibras de hialuronato de sodio (NaHA) de calidad inyectable (1 g; masa molecular: aproximadamente 1 MDa) son pesadas en un recipiente. Se agrega una solución acuosa de un amortiguador de fosfato (165.7 g), la solución como un todo es homogeneizada durante aproximadamente 1 hora con la espátula, a temperatura ambiente y bajo una presión atmosférica de 900 mmHg.

El hidrogel de NaHA no reticulado así obtenido tiene una concentración de aproximadamente 6 g/g de NaHA.

El octasulfato potásico de sacarosa (KSOS) (600 mg o 4.7.10-4 mol) es solubilizado en una solución del amortiguador de fosfato (19.94 g) para obtener una solución acuosa del octasulfato potásico de sacarosa de una concentración de 30 mg/g.

El hidrogel de NaHA obtenido en la etapa precedente es diluido por la adición de la solución acuosa del octasulfato potásico de sacarosa preparado precedentemente. La composición así obtenida es homogeneizada enseguida.

Se obtiene así una composición que comprende el NaHA no reticulado a una concentración de 4 mg/kg y el KSOS a una concentración de 10 mg/g; la relación másica de [HA]/[SOS] es así de 0.4.

La composición así obtenida es acondicionada en recipientes de una sola dosis, que son esterilizados.

Ejemplo 8 Este ejemplo ilustra una formulación cosmética.

Alcohol cetearílico 5 % Esteres (éter dicaprílico, miristato de miristilo) 10 % Composición de ácido hialurónico no reticulado, 1 % octasulfato potásico de sacarosa obtenido en el ejemplo 1 Glicerina Alcohol 5 % Tocoferol 0.2 % Perfume 0.1 % Agua csp 100 Ejemplo 9 Este ejemplo ilustra una formulación cosmética esterilizada.

Composición de ácido hialurónico no reticulado, 1 % octasulfato potásico de sacarosa obtenido según el ejemplo 1 con una relación de [HA]/[SOS] de 4 Carbómero 0.5 % Goma de Xantano 2.5 % Ácido cítrico 0.1 % 2-feniletanol 0.5 % Glicerina 1.2 % Agua csp 100 % La formulación cosmética es esterilizada por irradiación gamma a las dosis de 5-25 kGy y de preferencia de 7-15 kGy.

Ej emplo 10 Estabilidad en el tratamiento en autoclave con vapor Para las composiciones según la invención que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, la viscosidad h de las composiciones esterilizadas después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor es caracterizada sobre el reómetro de TA Instruments AR 2000 Ex, con una restricción impuesta a 25 °C. El valor de la viscosidad es relevante a una restricción de 0.02 s_1.

Para las composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, el porcentaje de pérdida de la viscosidad es el valor de la diferencia de la viscosidad de la composición de referencia después del tratamiento en autoclave con vapor y la viscosidad de la composición que comprende el ácido hialurónico no reticulado y un oligo-polisacárido o un elemento semejante sulfatado después del tratamiento en autoclave con vapor sobre el valor de la viscosidad de la composición de referencia después del tratamiento en autoclave con vapor.

Para las composiciones según la invención que comprenden el ácido hialurónico reticulado, el componente elástico G' de las composiciones esterilizadas después de la etapa de tratamiento en autoclave es caracterizado sobre el reómetro de TA Instruments AR 2000 Ex, en oscilación a 25 °C, los valores del componente elástico son relevantes a una frecuencia de 1 Hz.

Para las composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado, el porcentaje de pérdida del componente elástico G' es el valor de la diferencia del componente elástico G' de la composición de referencia después del tratamiento en autoclave con vapor y el componente elástico G' de la composición que comprende el ácido hialurónico reticulado y un oligo-polisacárido o un elemento semejante sulfatado después del tratamiento en autoclave con vapor sobre el valor del componente elástico G' de la composición de referencia después del tratamiento en autoclave con vapor.

Para todas estas mediciones se formula una composición de referencia, reemplazando la solución acuosa del oligosacárido o del elemento semejante sulfatado por una misma cantidad de la solución acuosa del amortiguador de fosfato, a) Estabilidad en el tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido_ hialurónico no reticulado y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado Nuevas composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g en la composición, son preparadas según el modo operativo descrito en el ejemplo 1.

Una composición de referencia es formulada igualmente, reemplazando la solución acuosa del oligo-polisacárido o del elemento semejante sulfatado por una misma cantidad de la solución acuosa del amortiguador de fosfato.

Los porcentajes de pérdida de la viscosidad de las composiciones según el modo operativo del ejemplo 1 con respecto a la composición de referencia después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor son medidos, y los resultados obtenidos son presentados en la tabla 1 que se da enseguida: Tabla 1 Porcentaje de pérdida de la viscosidad después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g con respecto a la composición de referencia. autoclave con vapor, una pérdida de la viscosidad para todas las composiciones con la excepción de aquellas que comprenden una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa. Las pérdidas más importantes son observadas para las composiciones que comprenden las glucosaminas sulfatadas (N-acetiladas o no y sulfatadas en las posiciones 2 o 6). Si se trata de aquellas que comprenden un oligo-polisacárido sulfatado tal como el sulfato de dextrano o el sulfato de condroitina, las mismas parecen menos importantes. b) Estabilidad en el tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado y manitol Una serie de composiciones de zinc que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, el manitol y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g en la composición son preparadas según el modo operativo descrito en el ejemplo 3.

Una composición de referencia es formulada igualmente, reemplazando la solución acuosa del oligo-polisacárido o el elemento semejante sulfatado por una misma cantidad de la solución acuosa del amortiguador de fosfato.

Los porcentajes de pérdida de la viscosidad de las composiciones según el modo operativo del ejemplo 3 con respecto a la composición de referencia son medidos y los resultados obtenidos son presentados en la tabla 2 que se da enseguida: Tabla 2 Porcentaje de pérdida de la viscosidad después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, el manitol y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g con respecto a la composición de referencia.

Se observa para las composiciones que comprenden el ácido hialurónico no reticulado, el manitol y un sulfato de glucosamina, una pérdida de la viscosidad con respecto a la composición de referencia.

Las composiciones solas para las cuales no se observa ninguna pérdida de la viscosidad después del tratamiento en autoclave con vapor con respecto a la composición de referencia, son las composiciones que comprenden una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa. c) Estabilidad en el tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado, un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado y manitol Una serie de cuatro composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado, el manitol y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g en la composición, son preparadas según el modo operativo descrito en el ejemplo 4.

Una composición de referencia es formulada igualmente, reemplazando la solución acuosa del oligo-polisacárido o el elemento semejante sulfatado por una cantidad equivalente de la solución acuosa del amortiguador de fosfato.

Los porcentajes de pérdida del componente elástico G' de las composiciones según el modo operativo del ejemplo 4 con respecto a la composición de referencia son medidos y los resultados obtenidos son presentados en la tabla 3 que se da enseguida: Tabla 3 Porcentaje de pérdida del componente elástico G' después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado, el manitol y un oligo-polisacárido sulfatado o un elemento semejante sulfatado a una concentración de 1 mg/g con respecto a la composición de referencia.

Se observan pérdidas del componente elástico G' con respecto a la composición de referencia para las composiciones que comprenden las glucosaminas sulfatadas (N-acetiladas o no sulfatadas en las posiciones 2 o 6).

Se observa para las composiciones que comprenden octasulfato potásico de sacarosa que no tienen ninguna pérdida del componente G' después del tratamiento en autoclave con vapor, con respecto a la composición de referencia.

En conclusión, no se observa ninguna pérdida de la viscosidad o del componente elástico G' después del tratamiento en autoclave con vapor con respecto a la composición de referencia solamente para las composiciones que comprenden las sales hidrosolubles de octasulfato sódico o potásico de sacarosa . Esta observación es la misma que el ácido hialurónico ya sea reticulado o no y que las composiciones que comprenden o no el manitol.

En consecuencia, estas composiciones son las únicas que permiten obtener productos tan estables como la composición de referencia después del tratamiento en autoclave con vapor.

Ejemplo 11 Características_ espectroscópicas de la mezcla física que comprende el ácido hialurónico y octasulfato potásico de sacarosa Un análisis de RMN ¾ ha sido realizado sobre la composición del ejemplo 4. Las características espectroscópicas han sido efectuadas sobre la composición del ejemplo 4 antes de la esterilización y después de la esterilización por tratamiento en autoclave con vapor.

Los análisis en solución son realizados sobre un espectrómetro de Bruker Avance que opera a 600 MHz (CH) y equipado con una sonda TCI (criosonda).

Los resultados son presentados posteriormente.

El espectro de RMN 1H de la figura 1 del octasulfato potásico de sacarosa solo, en solución en el agua, ha permitido la atribución parcial de señales. Se toma como referencia el valor del desplazamiento químico del protón anomérico del octasulfato potásico de sacarosa que es de d = 5.7 ppm.

Representación del protón anomérico del octasulfato de sacarosa Protón anomérico Octasulfato de sacarosa Los valores de desplazamiento químico del protón anomérico del octasulfato potásico de sacarosa solo en solución o en la composición del ejemplo 4, son idénticos. En consecuencia, el análisis de RMN confirma que el octasulfato potásico de sacarosa no reacciona con el ácido hialurónico para formar un complejo y que la composición del ejemplo 4, es una mezcla física de una solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa y del hidrogel que comprende el ácido hialurónico reticulado.

La superposición de los espectros de RMN 1H de la figura 2 de la composición del ejemplo 4 antes y después de la esterilización por tratamiento en autoclave con vapor, confirma la identidad muy grande de dos espectros. Las estructuras químicas del octasulfato potásico de sacarosa y del ácido hialurónico permanecieron sin cambio después de la esterilización por tratamiento en autoclave con vapor, como se ilustra en la figura 2. Esto confirma los resultados que se refieren a las propiedades reológicas de la composición del ejemplo 4 expuestas posteriormente .

Ejemplo 12 Pruebas de degradación enzimática La prueba de degradación ha sido puesta a punto sobre la base de la prueba descrita en la publicación "Comparison of the sensitivity of 11 crosslinked hyaluronic acid gels to bovin testis hyaluronidasa", I. Salí, G. Ferard, Polymer Deg. and Stability, (2007), 92, 915-919 y la solicitud de patente WO 2009/068215.

Las pruebas de degradación enzimática han sido realizadas sobre una composición preparada según el modo operativo del ejemplo 2 que comprende el NaHA reticulado a una concentración de 20 mg/g y del octasulfato potásico de sacarosa a una concentración de 3 mg/g en una solución amortiguadora de NaCl (composición A) así como sobre la composición del ejemplo 4 (composición B), esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor y sobre las composiciones de referencia igualmente esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor. La composición de referencia A y la composición de referencia B son formuladas reemplazando la solución acuosa del octasulfato potásico de sacarosa por una misma cantidad de la solución acuosa del amortiguador de fosfato.

Las composiciones han sido sometidas a una prueba de degradación enzimática in vitro a 37 °C. Esta prueba permite simular la remanencia ulterior in vivo de las composiciones inyectadas.

Las composiciones son degradadas por las hialuronidasas, mezclando las composiciones que se van a probar con una solución de hialuronidasa.

La degradación es seguida por reología a 37 °C (sobre el reómetro de TA Instruments AR 2000 EX), midiendo la viscosidad compleja. Las curvas de la tendencia de los resultados de la degradación de estas dos composiciones permiten evaluar enseguida los tiempos de vida media de estas diferentes composiciones (duración necesaria para tener n* = n*o / 2, en minutos), con n*0 = viscosidad compleja a t0 de la composición caracterizada.

Los tiempos de vida media obtenidos están dados en la tabla 4 que se da enseguida: Tabla 4 Pruebas de degradación enzimática sobre una composición según el ejemplo 2 con una concentración de KSOS de 3 mg/g (composición A) y sobre la composición del ejemplo 4 (composición B), esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor y sobre las composiciones de referencia a base del ácido hialurónico reticulado esterilizado por tratamiento en autoclave con vapor.

Las composiciones A y B, esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor presentan tiempos de vida media superiores a aquellos de las composiciones de referencia, esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor en las mismas condiciones; en efecto las composiciones A y B, esterilizadas por tratamiento en autoclave con vapor que poseen respectivamente remanencias superiores del 24 % y del 43 % frente a la degradación enzimática con respecto a las composiciones de referencia A y B esterizadas por tratamiento en autoclave con vapor.

Ejemplo 13 Pruebas de degradación oxidante Las pruebas de degradación oxidante han sido realizadas sobre la composición del ejemplo 4, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor y sobre una composición de referencia igualmente esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor en las mismas condiciones. La composición de referencia es formulada, reemplazando la solución acuosa de octasulfato potásico de sacarosa por una misma cantidad de la solución acuosa del amortiguador de fosfato.

Las composiciones han sido sometidas a una prueba de degradación oxidante in vitro a 45 °C. Esta prueba permite simular la remanencia posterior in vivo de las composiciones inyectadas.

Las composiciones son degradadas en la presencia de agua oxigenada. La degradación es seguida por reología a 45 °C (sobre el reómetro de TA Instruments AR 2000 Ex), midiendo la viscosidad compleja. Las curvas de tendencia de los resultados de la degradación de estas composiciones permiten evaluar enseguida los tiempos de vida media de estas diferentes composiciones (duración necesaria para tener n* = n*0 / 2, en minutos), con n*o = viscosidad compleja a to de la composición caracterizada.

Los tiempos de vida media obtenidos están dados en la tabla 5 que se da enseguida: Tabla 5 Pruebas de degradación oxidante sobre una composición del ejemplo 4, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor y sobre una composición de referencia a base de ácido hialurónico reticulado, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor.

La composición del ejemplo 4, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor presenta un tiempo de vida media superior a aquel de la composición de referencia esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor en las mismas condiciones; en efecto, la composición del ejemplo 4, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor posee una remanencia superior al 30 % frente a la degradación oxidante con respecto a la composición de referencia, esterilizada por tratamiento en autoclave con vapor.

Ejemplo 14 Los ejemplos de los ensayos de las formulaciones de KSOS (a diferentes concentraciones) con un gel de NaHA reticulado a 20 mg/g (gel de IPN semejante al comercializado bajo la marca Stylage® M) que es el gel de referencia.

Los geles son esterilizados luego caracterizados.

El porcentaje de pérdida del componente elástico G' con respecto a la composición de referencia es medido según el ejemplo 8 y la diferencia entre la fuerza de inyectabilidad, a través de las agujas hipodérmicas 30 calibre 1/2, del gel de referencia y de los geles que comprenden el octasulfato potásico de sacarosa, es medido.

Los resultados son presentados en la tabla 6 que se da enseguida: Tabla 6 Porcentaje de pérdida del componente elástico G' después de la etapa de tratamiento en autoclave con vapor de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado en la presencia de concentraciones variables del octasulfato potásico de sacarosa.

No se observa ninguna pérdida del componente elástico G' después de la etapa de tratamiento en autoclave de las composiciones que comprenden el ácido hialurónico reticulado y el octasulfato potásico de sacarosa, cualquiera que sea la concentración del octasulfato potásico de sacarosa en la composición.

No se observa igualmente ningún aumento de la fuerza de inyectabilidad con respecto a la formulación de referencia cualquiera que sea el contenido de octasulfato potásico de sacarosa.

Ejemplo 15 Los ejemplos de los ensayos de las formulaciones de KSOS (a diferentes concentraciones) con un gel no reticulado del ejemplo 1 a las concentraciones y las relaciones descritas en la tabla 7 que se da posteriormente.

Los geles son esterilizados luego caracterizados por reología según el ejemplo 8.

Tabla 7 Porcentaje de pérdida de la viscosidad después de la etapa de tratamiento en autoclave de las composiciones a diferentes relaciones [HA]/[SOS].

Tabla 7 (Cont . ) No se observa ninguna pérdida de la viscosidad después de la etapa de tratamiento en autoclave de las composiciones, cualquiera que sea la relación de [HA]/ [SOS].

Ejemplo 16 El ejemplo del ensayo de la formulación de KSOS con un gel que comprende el ácido hialurónico reticulado a la concentración y a la relación descritas en la tabla 8 dada enseguida.

Los geles son preparados según el modo operativo descrito en el ejemplo 2 luego caracterizados por reología según el ejemplo 8.

Tabla 8 Porcentaje de pérdida del componente elástico G' después de la etapa de tratamiento en autoclave No se observa ninguna pérdida del componente elástico G' después de la etapa de tratamiento en autoclave de las composiciones, para una relación de [HA]/[SOS] de 0.4.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (28)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Una composición, esterilizada, en un medio acuoso, que comprende al menos un ácido hialurónico y al menos una sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa, caracterizada porque la composición es una mezcla física y porque la relación másica entre el contenido del ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA/SOS] es superior o igual a 0.1.

2. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque es analizada por espectroscopia de RMN del protón ¾, el valor del desplazamiento químico del protón anomérico de la sal de octasulfato de sacarosa es idéntico al valor del desplazamiento químico del protón anomérico de la sal del octasulfato de sacarosa sola en solución.

3. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la relación másica entre el contenido del ácido hialurónico [HA] y el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa [SOS], [HA/SOS] está comprendido entre 0.1 y 5000.

4. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la masa molecular Mw del ácido hialurónico está comprendida en el intervalo de 0.01 MDa y 5 MDa.

5. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el contenido de ácido hialurónico está comprendido entre 2 mg/g y 50 mg/g de la composición.

6. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el contenido de ácido hialurónico está comprendido entre 4 mg/g y 40 mg/g de la composición.

7. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende al menos un ácido hialurónico no reticulado.

8. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende además al menos un ácido hialurónico reticulado.

9. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque el ácido hialurónico reticulado presenta en una tasa de reticulación X comprendida entre 0.001 y 0.5.

10. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la misma comprende al menos un ácido hialurónico substituido por un grupo que aporta propiedades lipofílicas o hidratantes.

11. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende además otro polisacárido.

12. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es elegida del grupo constituido por las sales de metales alcalinos, las sales de metales alcalinotérreos, las sales de plata, las sales de amonio, las sales de aminoácidos.

13. La composición de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es elegida del grupo constituido por las sales de metales alcalinos o las sales de metales alcalinotérreos.

14. La composición de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa es la sal de sodio del octasulfato de sacarosa o la sal potasio del octasulfato de sacarosa.

15. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el contenido de la sal hidrosoluble de octasulfato de sacarosa está comprendido entre 0.01 g/g y 40 mg/g de la composición.

16. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque comprende además, al menos un principio activo.

17. La composición de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque el principio activo es elegido entre los antioxidantes, los anestésicos locales, las vitaminas, solas o combinadas.

18. La composición de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque los antioxidantes son elegidos entre los polioles.

19. La composición de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque los anestésicos locales son elegidos del grupo constituido por la lidocaína, procaína, mepivacaína, ropivacaína, bupivacaína, y sus sales farmacéuticamente aceptables.

20. La composición de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque el contenido del (de los) principio(s) activo(s) está comprendido entre 0.01 y 10 % en peso con respecto al peso total de la composición.

21. Un proceso de fabricación de una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado porque comprende al menos: una etapa de hidratación de las fibras de al menos un ácido hialurónico, para obtener un hidrogel, una etapa de mezclado de una solución de la sal hidrosoluble del octasulfato de sacarosa con el hidrogel obtenido en la etapa precedente, una etapa de hoogeneización, y una etapa de tratamiento en autoclave con vapor.

22. Un proceso de fabricación de una composición de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque comprende además al menos una etapa de reticulación.

23. El uso de una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 20, para la formulación de una composición de viscosuplementación.

24. El uso de una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 20, para la formulación de una composición para el relleno de las arrugas.

25 . El uso de una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 20, para la formulación de una composición para el tratamiento de la resequedad ocular.

26. Una formulación cosmética, caracterizada porque comprende una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 20, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

27. La formulación cosmética de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque comprende entre 0.01 y 10 % en peso de la composición según las reivindicaciones 1 a 20 con respecto al peso total de la formulación cosmética.

28. Un kit, caracterizado porque comprende una composición de conformidad con las reivindicaciones 1 a 20, acondicionada en jeringas o en recipientes de dosis unitarias esterilizados.