MX2013000545A

MX2013000545A - Composiciones farmaceuticas y metodos de tratamiento.

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Publication number: MX2013000545A
Application number: MX2013000545A
Authority: MX
Inventors: Oleg Iliich Epshtein; Svetlana Alexandrovna Sergeeva; Liudmila Fyodorovna Dolgovyh; Irina Anatolievna Kheyfets; Julia Leonidovna Dugina; Julia Alexandrovna Zabolotneva; Sergey Alexandrovich Tarasov
Original assignee: Oleg Iliich Epshtein
Priority date: 2010-07-15
Filing date: 2011-07-15
Publication date: 2013-10-28
Also published as: AR082246A1; WO2012007847A3; EA201300133A1; CN103124742A; NZ606768A; GB201302653D0; CA2805091A1; MX361778B; EA029400B1; CL2013000098A1; MY158183A; JP2013535436A; GB2496076A; BR112013000841A2; FR2962653A1; US8865163B2; DE112011102349T5; AU2011278040B2; LT5987B; SE1350179A1

Abstract

La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que constan de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano y su uso en el tratamiento de la obesidad y trastornos metabólicos relacionados. La invención presente proporciona asimismo composiciones farmacéuticas que constan de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano y de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S- 100, a usar en el tratamiento de la adicción a sustancias psicoactivas. La presente invención proporciona métodos para tratar la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados, así como la drogadicción.

Description

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y MÉTODOS DE TRATAMIENTO CAMPO La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que pueden utilizarse para tratar la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados, y para tratar la adicción a las substancias psicoactivas, la nicotina en particular. ¡ ANTECEDENTES La obesidad se reconoce en la actualidad cómo una enfermedad crónica que requiere tratamiento para reducir los riesgos para la salud con ella asociados. El aumento de la obesidad causa preocupación debido a los riesgos asociados para la salud, incluyendo enfermedades cardíaco coronarias, derrames j cerebrales, hipertensión, diabetes mellitus tipo 2, dislipidemia, apnea del sueño, osteoartritis, erifermedades de la vesícula, depresión y ciertas formas de cáncer (por ejemplo: de endometrio, senos, próstata y colon). Sus consecuencias negativas para la salud convierten a la obesidad en la segunda causa principal de muertes evitables en los Estados Unidos. Ver McGinnis M, Foege W H., "Actual Causes of Death in the United States, "JAMA, 270, 2207 12 (1993).

Se cree que una reducción entre 5 y 10% del peso corporal puede mejorar substancialmente los valores metabólicos tales como glucemia, presión sanguínea y concentraciones de lípidos.

Los medicamentos de venta con receta ¡disponibles en la actualidad para tratar la obesidad reducen por lo general el peso induciendo saciedad o disminuyendo la absorción de las grasas alimenticias. La saciedad se logra aumentando los niveles sinápticos de la norepinefrina, serotonina o de ambas. Por ejemplo, la estimulación de los receptores de la serotonina subtipos IB, ID y 2C y de los receptores adrenérgicos 1 y 2 disminuye la ingesta de alimentos regulando la ansiedad. Ver Bray G A, "The New Era of Drug Treatment. Pharmacologic Treatment of Obesity: Symposium Overview, " Obes. Res., 3(suppl 4), (1995). Los adrenérgicos (por ejemplo: dietilpropión, benzfetamina, fendimetrazina, mazindol y fentermina) actúan modulando los receptores centrales de la norepinefrina y la dopamina, lo que hacen fomentando la liberación de la catecolamina. Los adrenérgicos más antiguos para perder peso (por ejemplo: arifetamina, metanfetamina y fenmetracina), los cuales actúan fuertemente en los caminos de la dopamina, no se recomiendan ya debido al riesgo de abuso de los mismos. La ferrfluramina y la dexfenflurarnina, ambos serotonérgicos utilizados para regular el apetito, no están ya disponibles en el mercado.

Debido a los efectos secundarios mencionados y al desarrollo de la adicción resultante del uso de tales substancias psicoactivas, no se dispone aún de un medicamento efectivo y seguro de efecto central.

Existe aún, por lo tanto, la necesidad de un tratamiento terapéutico más efectivo y seguro para reducir o prevenir la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados.

I ! Además de para la obesidad, existe también la necesidad no satisfecha de un tratamiento para la ! . I drogadicción. ; I I El tabaquismo representa la causa de enfermedad y muerte evitable más importante en nuestra ! sociedad, a la que se deben miles de muertes cada año. La mitad de todos los fumadores mueren de ' enfermedades relacionadas directamente con el uso del tabaco y numerosos fumadores sufren una 1 morbilidad significativa. Aproximadamente 15 millones de fumadores tratan de dejar este vicio, pero I sólo un millón lo logra cada año. j i El humo del cigarrillo contiene un gran número de substancias muy complejas, la más importante i de las cuales es la nicotina, por ser la substancia que crea adicción en los fumadores de cigarrillos. Se ha ! comprobado que varias farmacoterapias son eficaces para tratar el tabaquismo. Tales terapias incluyen la ! sustitución de la nicotina en forma de gomas de mascar, parches, rociadores nasales e inhaladores. Se han I desarrollado terapias farmacológicas sin nicotina cómo método par tratar la adicción a la nicotina. Entre los posibles reactivos están la terapia de bloqueo de la nicotina, los medicamentos que afectan la neurotransmisión serotonérgica, los antidepresivos, ¡los anxiolíticos, la clonidina y la sustitución sensitiva i I en las vías respiratorias (Rose, 1996; and Cinciripini et al., 1998 Oncology 12: 249-256). La terapia de j bloqueo de la nicotina (también denominada antagonistas de los receptores de la nicotina) utiliza 1 compuestos que ocupan los receptores de la nicotina, atenuando así la gratificación que se obtiene con el I ! . uso del tabaco (Clarke, 1991 Br. J. Addict. 86: 501 -505). Se necesita, sin embargo, un tratamiento más eficaz para el tabaquismo. \ ' Los receptores de los canabinoides son' una clase de receptores de la membrana celular i í ! pertenecientes a la superfamilia de receptores acoplados con la proteína G. Los receptores canabinoides ! se activan por medio de tres grupos principales de ligandos: (a) los endocanabinoides (producidos por el 1 cuerpo de los mamíferos); (b) los canabinoides de plantas (tales como THC, producidos por la planta cannabis); y (c) los canabinoides sintéticos (tales como HU-210, sintetizado por primera vez en el año ! 1988 y proveniente del (lR,5S)-Myrtenol). Estos canabinoides ejercen sus efectos uniéndose a los I receptores canabinoides situados en la membrana celular. Se sabe que los endocanabinoides participan en una amplia variedad de procesos fisiológicos y patofisiológicos. A la fecha, la mayoría de los ! medicamentos utilizados para interactuar con el sistema endocanabinoide se derivan del cannabis. El hachís, y su un receptor central encontrado en los tejidos cerebrales y periféricos de los mamíferos; y el receptor canabinoide 2 ' (CB'2), un receptor canabinoide encontrado solamente en los tejidos periféricos. El receptor CB1 se l I ; manifiesta principalmente en varias zonas del cerebro, incluyendo el sistema límbico (amígdalas, ' hipocampo), el hipotálamo, la corteza cerebral, el cerebelo y los ganglios básales. Se ha demostrado que ' los compuestos que son agonistas o antagonistas! de uno de estos receptores, o ambos, tienen gran variedad de efectos farmacológicos. Ver por ejemplo: Pertwee, R.G., Pharmacolog of cannabinoid CB1 i and CB2 receptors, Pharmacol. Ther., (1997) 74:129-180 y Di Marzo, V., Melck, D., Bisogno, T., i I DePetrocellis, L., Endocannabinoids: endogenous Receptor canabinoide ligands with neuromodulatory ! action, Trends Neurosci. (1998) 21 :521-528. j I El inventor de la presente solicitud de patente, el Dr. Oleg I. Epshtein, descubrió el efecto j terapéutico de una formulación extremadamente diluida (o ultra baja) de anticuerpos potenciados i mediante tecnología homeopática (formulación activada y potenciada). La Patente estadounidense No. i 7.582.294 revela un medicamento para tratar la hiperplasia prostética benigna o prostatitis mediante la administración de una formulación, activada homeopáticamente, de anticuerpos de un antígeno específico I de la próstata (PSA, prostate specific antigen). ¡ La proteína S-100 es una proteína citoplasmatica acídica que aparece en el sistema nervioso. Se ha sugerido que la proteína S-100 juega cierto papel en la ansiedad. Ver los estudios de Ackermann et al., SlOOAl-deficient male mice exhibit increased explbratory activity and reduced anxiety-related response, Biochim. Biophys. Acta. 2006, 63(11):1307-19; Diehl et al., Long lasting sex-specific effects upon behavior and SI 00b levéis after maternal separation and exposure to a model of post-traumatic stress disorder in rats, Brain Res., 2007, 144: 107- 16, los cuales se incorporan al presente documento mediante referencia ! Se ha comprobado que dosificaciones ultra bajas de la proteína S-100 tienen una actividad ! anxiolítica, anti-asténica, anti-agresiva, protectora para el estrés, anti-hipóxica, anti-isquémica, í neuroprotectora y nootrópica. Ver los estudios dej Castagne V. et al., Antibodies to SI 00 proteins have j anxiolytic-like activity at ultra low doses in the adult rat, J. Pharm. Pharmacol. 2008, 60(3):309-16; I Epshtein O. I., Antibodies to calcium-binding S100B protein block the conditioning of long-term > semitization in the terrestrial snail, Pharmacol. Biochem. Behav., 2009, 94(l):37-42; Voronina T.A. et . al., Chapter 8. Antibodies to S-100 protein in anxiety-depressive disorders in experimental and clinical . ; i ¡ conditions. ln "Animal models in biological psychiatry", Ed. Kalueff A.V. N-Y, "Nova Science j Publishers, Inc.", 2006, pp. 137-152, los cuales se incorporan a este documento mediante referencia.

¡ Existe la necesidad continua de medicamentos nuevos con la eficacia terapéutica deseada para i tratar el exceso de masa corporal u obesidad y la drogadicción.

' I ¡ SUMARIO ! En uno de sus aspectos la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende ! una formulación activada y potenciada para un¡ anticuerpo del receptor canabinoide humano. De 1 preferencia, el receptor canabinoide humano es un ¡receptor canabinoide 1 (CB1). Se contempla que la ! formulación activada y potenciada de un anticuerpo de este aspecto de la invención sea para un receptor 1 • canabinoide enteramente humano. Se contemplan en particular las secuencias específicas suministradas 1 en la descripción detallada de la invención. Se contempla así mismo que la formulación activada y potenciada de un anticuerpo sea para un fragmento polipéptido del receptor 1 canabinoide humano. De preferencia, la formulación activada y potenciada de un anticuerpo está en forma de una mezcla de las ' diluciones homeopáticas C12, C30 y C200. En la variante preferida en particular, la formulación ! activada y potenciada de un anticuerpo está en forma de una mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnadas en un portador sólido. s!e contempla la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para un receptor canabinoide humano es un anticuerpo monoclónico, policlónico o natural. i ! · De preferencia, la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para un receptor canabinoide 1 humano es un anticuerpo policlónico. El anticuerpo para el receptor canabinoide humano puede ' prepararse mediante diluciones centesimales sucesivas junto con a la agitación de cada una de las diluciones. ¡ i En otro de sus aspectos la invención ofrece un método para tratar la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de ! cualquier variante o la incorporación del aspecto jde la composición farmacéutica de la invención. La ^ composición farmacéutica puede administrarse al paciente como una o dos formulaciones posológicas unitarias, de una a cuatro veces al día. Se contempla específicamente la administración dos veces al día. i En otro de sus aspectos la invención ofrece un método para tratar el tabaquismo, consistiendo I dicho método en administrar la composición farmacéutica de cualquier variante o la incorporación del i aspecto de la composición farmacéutica de la invención. La composición farmacéutica puede administrarse al paciente como formulaciones posológicas de una o dos unidades, de una a cuatro veces 1 i , al día. Se contempla específicamente la administración dos veces al día.

I En otro de sus aspectos la invención ? ofrece un método para alterar los parámetros ¡ i antropométricos de un mamífero que se espera obtenga un beneficio de dicha alteración, consistiendo i dicho método en administrar la composición farmacéutica de cualquier variante o la incorporación de un 1 aspecto de la composición farmacéutica de la invención. En una de las incorporaciones el parámetro ! antropométrico es la circunferencia de la cintura. En otra incorporación del parámetro antropométrico es el índice cintura-cadera. Se ofrecen variantes diversas.

En otro de sus aspectos la invención ofrece un método para reducir la masa corporal en un : mamífero, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de cualquier variante o i la incorporación de un aspecto de la composición farmacéutica de la invención. En una de las variantes la 1 masa corporal se reduce 5% por lo menos. En otra de las variantes la masa corporal se reduce 10% por lo ' menos. En otra de las variantes la masa corporal se reduce 15% por lo menos.

¡ I I En otro de sus aspectos la invención ofrece un método para reducir el crecimiento de la masa corporal en un mamífero, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de j cualquier variante o la incorporación del aspecto dejla composición farmacéutica de la invención. En una i de las variantes el crecimiento de la masa corporal se reduce 10% por lo menos. En otra de las variantes, I el crecimiento de la masa corporal se reduce 30% por lo menos.

' En otro de sus aspectos la invención ofrece' un método para facilitar la reducción del consumo de alimentos en un mamífero que se espera se beneficie de dicha reducción, consistiendo dicho método en i administrar la composición farmacéutica de cualjquier variante o la incorporación del aspecto de la i composición farmacéutica de la invención.

I En otro de sus aspectos la invención proporciona una composición farmacéutica que consiste en ' una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano y una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100. En otra de las variantes el , anticuerpo para la proteína S-100 es un anticuerpo ¡para la totalidad de la proteína S-100. Las secuencias , paira la proteína S-100 se proporcionan en las especificaciones. El anticuerpo para la proteína S-100 está ¡ preferentemente en forma de mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnadas en el ¡ portador sólido. La composición farmacéutica de este aspecto de la invención puede contener un ; anticuerpo para la proteína S- 100 que sea un anticuerpo monoclónico, policlónico o natural. El anticuerpo j para la proteína S-100 es preferiblemente un anticuerpo policlónico. El anticuerpo para la proteína S-100 ! puede prepararse mediante diluciones centesimales sucesivas junto con agitación de cada una de ellas.

En otro de sus aspectos la invención ofrece un método para tratar al paciente que sufre de adición a una substancia psicoactiva, consistiendo dicho método en administrar una composición farmacéutica j de la nicotina. De preferencia la administración de dicha combinación lleva a una reducción, ! estadísticamente significativa, del consumo de tabaco en pacientes con tabaquismo agudo, según mediciones con la Prueba de Fagerstróm para la Prueba de dependencia de la nicotina En otro de sus aspectos la invención ofrece una composición farmacéutica para usar en el tratamiento de pacientes que sufren de adicciónj a una substancia psicoactiva, obteniéndose dicha j composición suministrando: a) una solución potenciada de un anticuerpo para un receptor canabinoide humano; y b) una solución activada de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100; cada uno de ellos preparado mediante dilución repetida y consecutiva y de agitación vertical múltiple de cada una de las soluciones obtenidas de acuerdo con la tecnología homeopática y, o bien combinando después las soluciones potencias! mezclándolas, o alternativamente, impregnando una j masa portadora con dicha solución combinada o cotí las soluciones por separado.

En otro de sus aspectos la invención ofrece una composición farmacéutica para usar en el i tratamiento de la obesidad y trastornos metabólicos relacionados, obteniéndose dicha composición proporcionando una solución potenciada de uní anticuerpo para el receptor canabinoide humano preparada mediante dilución repetida y consecutivá y de agitación vertical múltiple de cada una de las soluciones obtenidas de acuerdo con la tecnología homeopática y, opcionalmente, impregnando después ! una masa portadora con dicha solución. ! ¡ DESCRIPCIÓN BREVE DE LAS ILUSTRACIONES I Ilustración 1 - Muestra el efecto de ULD anti-CBl y de Subutramine sobre el crecimiento de la masa corporal y el consumo de alimentos. j Ilustración 2 - Muestra la reducción de la masa corporal después de administrar ULD anti-CB 1. ! ! Ilustración 3 - Muestra una reducción en peso de 5% ó más en los pacientes.

I DESCRIPCIÓN DETALLADA 1 ^ I La invención se define mediante referencia a las reivindicaciones adjuntas. Con respecto a las i reivindicaciones, el glosario siguiente ofrece las definiciones pertinentes. i Tal como aquí se utiliza, el término "anticuerpo" significa una inmunoglobulina que se une específicamente y se define por lo tanto como complementaria, a una organización espacial y polar j específica de otra molécula. Tal como se enumeran en las reivindicaciones, los anticuerpos pueden incluir una inmunoglobulina completa o un fragmento de ella, pueden ser naturales, policlónicos o monoclónicos y pueden incluir clases diferentes de isotipos, tales como IgA, IgD, IgE, IgGl , IgG2a, IgG2b e IgG3, I ! ; IgM, etc. Los fragmentos de los mismos pueden incluir Fab, Fv u F(ab')2, Fab' y similares. "Anticuerpo" en singular incluye el plural "anticuerpos." ! El término "formulación activada y potenciada" o "formulación potenciada", respectivamente, 1 con respecto a los anticuerpos aquí enumerados, se'¡ utiliza para designar un producto de la potenciación homeopática de cualquier solución inicial de anticuerpos. "Potenciación homeopática" significa el uso de j métodos de homeopatía para transmitir potencia homeopática a la solución inicial de la substancia ! pertinente. Aunque no se limita a ello, la 'potenciación homeopática" puede conllevar, por ejemplo, diluciones consecutivas repetidas combinadas con un tratamiento extemo, en especial agitación (mecánica). i i En otras palabras, la solución inicial del anticuerpo está sujeta a dilución repetida consecutiva y agitación vertical múltiple de cada una de las soluciones obtenidas de acuerdo con la tecnología homeopática. La : concentración preferida de la solución inicial del anticuerpo en el solvente, preferiblemente agua o una mezcla de agua y alcohol etílico, que oscila de cerca de 0,5 a cerca de 5,0 mg ml. El procedimiento de I ' preferencia para preparar cada uno de los componentes, es decir, la solución del anticuerpo, es el uso de i una mezcla de tres diluciones acuosas, o acuoso-alcohólicas, de la solución matriz primaria (tintura madre) de los anticuerpos diluidos 10012, 10030 y 100200 veces, respectivamente, lo cual es equivalente ; a diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200. Los ejemplos de la potenciación homeopática ¡ se describen en las Patentes estadounidenses Nos. 7.572.441 y 7.582.294, las cuales se incorporan aquí mediante referencia en su totalidad y para los fines indicados. Aunque en las reivindicaciones se usa el término "formulación activada y potenciada", en ¡los ejemplos se usa el término "dosificaciones ultra ! bajéis". El término "dosis ultra bajas" se convirtió en un léxico profesional en el campo profesional ¦ creado mediante el estudio y uso de la formulación de substancia homeopáticamente diluida y potenciada. El término "dosificación ultra baja" q "dosificaciones ultra bajas" se entiende como que I apova plenamente y es un sinónimo primario del término formulación 'activada y potenciada" usado en I " j | las reivindicaciones.

I i En otras palabras, un anticuerpo está en la formulación "activada y potenciada" o "potenciada" I cuando hay tres factores presentes. Primero, la formulación "activada y potenciada" del anticuerpo es ' producto de un proceso de preparación ampliamente aceptado en la ciencia de la homeopatía. Segundo, la formulación "activada y potenciada" del anticuerpo debe tener una actividad biológica determinada ! i ¦ ¡ mediante métodos bien aceptados en la farmacología moderna. Y tercero, la actividad biológica que i presenta la formulación "activada y potenciada" del anticuerpo no puede explicarse mediante la presencia 1 de la formulación molecular del anticuerpo en el producto final del proceso homeopático.

Por ejemplo, la formulación potenciada' y activada de los anticuerpos puede prepararse sometiendo el anticuerpo inicial aislado en formulación molecular a diluciones múltiples consecutivas : acopladas con un impacto extemo, tal como la' agitación mecánica. El tratamiento extemo en el 1 transcurso de la reducción de la concentración puede lograrse también, por ejemplo, mediante la ¦ exposición a factores ultrasónicos, electromagnéticos u otros factores físicos. V. Schwabe "Homeopathic 1 medicines", M., 1967, Patentes estadounidenses Nos. 7.229.648 y 4.31 1.897, las cuales se incorporan I mediante referencia en su totalidad, para los fines indicados, describe dichos procesos, los cuales son ! . i I métodos bien aceptados de la potenciación homeopática en la ciencia de la homeopatía. Este l procedimiento da origen a una disminución uniforme de la concentración molecular de la formulación ¦ molecular inicial del anticuerpo. Este procedimiento se repite hasta obtener la potencia homeopática deseada. Para un anticuerpo específico, la potencia ¡homeopática deseada puede determinarse sometiendo l las diluciones intermedias a pruebas biológicas en él modelo farmacológico deseado. Aunque no por ello limitada, la 'potenciación homeopática" puede conllevar, por ejemplo, repetidas diluciones consecutivas ' combinadas con tratamiento externo, en especial ¡ agitación vertical (mecánica). En otras palabras, la solución inicial del anticuerpo está sujeta a dilución consecutiva repetida y a agitación vertical múltiple de cada solución obtenida, de acuerdo con la tecnología homeopática. La concentración de preferencia de la i i 1 solución inicial del anticuerpo en el solvente, preferiblemente agua o una mezcla de agua y alcohol , etílico, que oscila de cerca de 0,5 a cerca de 5,0 rhg/ml. El procedimiento preferido para preparar cada ¡ componente, es decir, la solución del anticuerpo, es el uso de una mezcla de tres diluciones acuosas o ! acuoso-alcohólicas de la solución matriz primaria (la tintura madre) de anticuerpos diluidos 10012, 10030 y 1 100200 veces, respectivamente, lo cual es equivalente a diluciones homeopáticas centesimales de C12, ¡ I C30 y C200. También se suministran ejemplos dé cómo obtener la potencia deseada, por ejemplo en las ' ¡ 8 i ' I ! Patentes Nos. 7.229.648 y 4.311.897, las cuales ; se incorporan mediante referencia para los fines indicados. El procedimiento aplicable a la formulación "activada y potenciada" de los anticuerpos aquí , explicados, se describe más detalladamente a continuación. i Ha habido considerable controversia respecto al tratamiento homeopático en seres humanos. ' Aunque la presente invención se basa en procesos homeopáticos aceptados para obtener la formulación ¡ j "activada y potenciada" de anticuerpos, no lo hace únicamente en homeopatía en seres humanos para : obtener pruebas de su actividad. El inventor de la solicitud presente ha descubierto, sorprendentemente, y ! ha demostrado ampliamente en los modelos farmacológicos aceptados, que el solvente obtenido en definitiva, después de dilución múltiple consecutiva de una formulación molecular inicial de un ! anticuerpo, tiene definitivamente actividad no relacionada con la presencia de restos de la formulación i molecular del anticuerpo en la dilución deseada. Se han hecho pruebas de la formulación "activada y i potenciada" del anticuerpo aquí suministrada con respecto a su actividad biológica en modelos i farmacológicos de actividad ampliamente aceptados, ya sea en experimentos apropiados in vitro o en 1 modelos animales adecuados in vivo. En los experimentos que se ofrecen a continuación se ofrece i prueba de la actividad biológica en tales modelos.J En los estudios clínicos en seres humanos, también j ofrecidos a continuación, se dan pruebas, entre otras, de que la actividad observada en el modelo animal 1 se traslada bien a la terapia en los seres humanos. El estudio en seres humanos brinda también pruebas de ( disponibilidad de las formulaciones "activadas y potenciadas" aquí descritas para tratar enfermedades específicas de los humanos o trastornos ampliamente aceptados en la ciencia médica como estados patológicos. 1 Así mismo, la formulación "activada y potenciada" reivindicada del anticuerpo engloba ! únicamente soluciones o preparaciones sólidas cuya actividad biológica no puede explicarse mediante la 1 presencia de la formulación molecular del anticuerpo restante de la solución de inicio. En otras palabras, ! aunque se contempla que la formulación "activada y potenciada" del anticuerpo puede contener restos de i la formulación molecular inicial del anticuerpo, cualquier persona versada en esta ciencia no podría I atribuir con algún grado de credibilidad la actividad biológica observada en los modelos farmacológicos aceptados a una formulación molecular remanente del anticuerpo, debido a las concentraciones extremadamente bajas de la formulación molecular del anticuerpo restantes después de diluciones consecutivas. Aunque la invención no está limitada por teoría específica alguna, la actividad biológica de la formulación "activada y potenciada' de los anticuerpos de esta invención no es atribuible a la foimulación molecular inicial del anticuerpo. Se ¡ prefiere la formulación "activada y potenciada" del 1 anticuerpo en forma líquida o sólida, en la cual | la concentración de la formulación molecular del 1 anticuerpo está por debajo del límite de detección de las técnicas analíticas aceptadas, tales como i i electroforesis capilar y cromatografía líquida de alta resolución. Se prefiere, en particular, la ¦ formulación "activada y potenciada" del anticuerpo'en forma líquida o sólida, en la cual la concentración ! de la formulación molecular del anticuerpo está por 'debajo del número de Avogadro. En la farmacología 1 de las formulaciones moleculares de substancias terapéuticas, es práctica común crear una curva de ' respuesta a la dosis en la cual se gráfica el nivel de respuesta farmacológica con respecto a la ' . . i I concentración del medicamento activo administrado al sujeto o según pruebas in vitro. El nivel mínimo | del medicamento que produce cualquier repuesta detectable se conoce como la dosis mínima o umbral. Se contempla específicamente y se prefiere que la formulación "activada y potenciada" de los anticuerpos j contenga un anticuerpo molecular, si acaso, a una concentración por debajo de la dosis mínima para la i formulación molecular del anticuerpo en el modelo biológico dado. i El término "receptor CB1 " tiene su significado general en la ciencia y puede incluir al receptor ; CB1 que ocurre naturalmente y a variantes y fórmülas modificadas del mismo. El receptor CB1 puede I provenir de cualquier fuente, pero usualmente proviene de un mamífero.

' El término "obesidad" significa una gama de pesos superior a los que se consideran generalmente ¡ saludables para una altura dada. Los rangos de obesidad se determinan usando el peso y la altura para 1 calcular un número llamado "índice de masa corporal" (BMI, body mass índex). Se considera que un adulto con BMI entre 25 y 29,9 tiene sobrepeso. Se considera que un adulto con BMI de 30 ó más alto, j es obeso. La fórmula del BMI es como sigue: ' I Peso - (altura en pulgadas) 2 x 703 = BMI ; i El BMI no siempre indica con exactitud el grado de gordura. En un número de estudios cada vez , mayor se indica que el grado de distribución de' la grasa central (obesidad central) puede estar más i estrechamente unido a riesgos metabólicos que ,el BMI. Pareciera que la medición del grado de , distribución de la grasa central es importante para la detección temprana de riesgos ulteriores de la salud, I incluso entre individuos con peso normal. S D Hsieh, H Yoshinaga and T Muto, International Joumal of ! Obesity (2003) 27, 610-616. Ver también Price GM, Uauy R, Breeze E, Bulpitt CJ, Fletcher AE (Agosto ¡ 2006). "Weight, shape and mortality risk in older persons: elevated waist-hip ratio, not high body mass Índex, í i is associated with a greater risk of death" Am. J. Clin. Nutr. 84 (2): 449-60. La circunferencia de la cintura y ' los índices de ella derivados tales como la relación cintura-cadera y la relación cintura-altura se han utilizado como mediciones indirectas de la obesidad central. Sung et. al., Waist circumference and waist-height ratio of HongKong Chínese children, BMC Public Health 2008, 8:324. Se cree por lo tanto que la medición de los : i i parámetros antropométricos, como por ejemplo la circunferencia de la cintura, la relación cintura-cadera y la relación cintura-altura es un indicador del grado¡ de gordura.

¦ El término "relación cintura-cadera" es la relación de la circunferencia de la cintura con la de las caderas. La relación cintura-cadera es igual a la circunferencia de la cintura dividida por la circunferencia ¡ . ¡ de la cadera. Una relación cintura-cadera de más de 0,9 en las mujeres y 1 ,0 en los hombres se asocia con ! . i i un aumento del riesgo de enfermedades cardiovasculares y es una indicación para el tratamiento de la I obesidad. Idealmente, las mujeres deben tener una¡ relación cintura-cadera de 0,8 ó menos y los hombre i de 0,95 ó menos. i 1 El término "relación cintura-altura" de una persona se define como la circunferencia de la cintura i i de la persona dividida por su peso. En personas menores de 40 años, una relación cintura-altura de más 1 _ i i de 0,5 es crítica; para personas en el grupo etario entre 40 y 50 el valor crítico está entre 0,5 y 0,6 y para ! personas de más de 50 años los valores críticos comienzan en 0,6.

El término "trastornos metabólicos relacionados con la obesidad" se refiere a enfermedades ! . . . . ! . 1 crónicas que necesitan tratamiento para reducir riesgos excesivos de la salud asociados con la obesidad y los trastornos, incluyendo las enfermedades representativas diabetes mellitus tipo 2, trastornos cardiovasculares e hipertensión, hiperlipidemias y anormalidades fibrinolíticas. í El término "Prueba de Fagerstróm" se refiere a una prueba estándar para dependencia de la I nicotina que evalúa la intensidad del tabaquismo. ! Ver Heatherton, T.F., Kozlowski, L.T., Frecker, R.C., ' Fagerstróm, K.O. The Fagerstróm test for Nicotiné Dependence: A revisión of the Fagerstróm Tolerance Questionnaire. Br J Addict 1991 ; 86:1 119-27. La prueba consiste en una breve encuesta auto-informe que I mide la dependencia de la nicotina en una escala de 0- 10, siendo 10 el nivel más alto de dependencia.

I El término "Escala del estado de ánimo y síntomas físicos" (MPSS, Mood and Physical 1 Symptoms Scale) se refiere a una escala creada á principios de la década de 1980 que se utiliza para evaluar los síntomas cuando se deja de fumar. (West R, Hajek P: Evaluation of the mood and physical symptoms scale (MPSS) to assess cigarette withdfawal. Psychopharmacology 2004, 177(1-2): 195- 199). j Los elementos principales de la MPSS incluyen una clasificación de 5 puntos de estado de ánimo i deprimido, irritabilidad, agitación, dificultad en concentrarse y hambre; y una clasificación de 6 puntos de fuerza de los impulsos de fumar y el tiempo empleado en tales impulsos.

! El término "Escala de ansiedad y depresión hospitalaria" (HADS, Hospital Anxiety and j j Depression Scale) se refiere a una escala subjetiva para pruebas de detección de signos de ansiedad y depresión en pacientes internos y externos. Ver Zigmond, A. S., Snaith, R.P., The Hospital Anxiety and Depression scale, Acta Psychiatr. Scand., 1983, Voli 67, páginas 361-370.

Mediante la presente invención se proporciona una composición farmacéutica a administrar al paciente que la necesite, consistiendo dicha composición farmacéutica en una formulación activada y ' potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano.

' Mediante la invención presente se proporciona asimismo una composición farmacéutica a ! . . 1 administrar al paciente que la necesite, consistiendo dicha composición farmacéutica en a) una '. formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano; y b) una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100.

La composición farmacéutica para este aspecto de la invención puede estar en forma líquida o i sólida. Cada una de las formulaciones activadas y potenciadas de anticuerpos incluidas en la composición i farmacéutica se prepara sobre la base de una formulación molecular inicial del anticuerpo mediante un j proceso aceptado en la ciencia homeopática. Los anticuerpos de inicio pueden ser monoclónicos o i policlónicos, preparados de acuerdo con procesos conocidos, según se describen en los estudios 1 Immunotechniques, G. Frimel, M., "Meditsyna", ¡1987, p. 9-33; "Hum. Antibodies. Monoclonal and ¡ recombinant antibodies, 30 años after" by Laffly E., Sodoyer R. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2, páginas 33-! 55, ambos aquí incorporados mediante referencia, j ' Se contempla que la combinación farmacéutica para tratar el tabaquismo se administre en la cantidad ! I de 6 a 8 tabletas diarias. En una de las variantes el modo de administración es 2 tabletas, 3 veces al día. En otra de las variantes el modo de administración es 3 tabletas, 2 veces al día En otra variante el modo de : I administración es 4 tabletas, 2 veces al día En otra variante el modo de aclministración es 1 tableta, 6 veces al día. En otra variante el modo de administración es 2 tabletas, 4 veces al día.

I ; j Los anticuerpos monoclónicos pueden obtenerse, por ejemplo, mediante la tecnología de i hibridoma. La etapa inicial del proceso incluye inmunización basada en los principios ya desarrollados en el curso de la preparación de antisueros policlónicos. Otras etapas del trabajo incluyen la producción ¡ de células híbridas que generan clones de anticuerpos con especificidad idéntica. Su aislamiento por I separado se realiza usando los mismos métodos que para preparar antisueros policlónicos.

Los anticuerpos policlónicos pueden obtenerse mediante la inmunización activa de animales. : Para estos fines, los animales idóneos (como los conejos) reciben por ejemplo una serie de inyecciones I del antígeno apropiado, ya sea un receptor canabinoide humano o proteína S-100. El sistema inmune de - i j los ¡animales genera los correspondientes anticuerpos, los cuales se recogen de una manera conocida. I Este procedimiento permite preparar un suero monoespecífico rico en anticuerpos.

De así desearlo, el suero que contiene los ¡ anticuerpos puede purificarse, usando por ejemplo cromatografía afín, fraccionación mediante precipitación de sales o cromatografía de intercambio de j iones. El suero resultante purificado, enriquecido |con anticuerpos, puede utilizarse como material de ¡ inicio para preparar la formulación activada y potenciada de los anticuerpos. La concentración preferida de la solución inicial resultante de anticuerpos es el solvente, preferiblemente agua o una mezcla de agua y alcohol etílico que oscila de cerca de 0,5 a cerca de 5,0 mg/ml.

J El procedimiento preferido para preparar la formulación activada y potenciada de anticuerpos de la presente invención o la combinación de anticuerpos de acuerdo a la presente invención, es el uso de una mezcla de tres diluciones acuoso-alcohólicas dé la solución matriz primaria de anticuerpos diluidos 10012, 10030 y 100200 veces, respectivamente, que es equivalente a diluciones homeopáticas centesimales ¡ de C12, C30 y C200. Para preparar una fonnulación posológica sólida de una combinación de la invención, la masa portadora se trata con la dilución! deseada obtenida mediante el proceso homeopático. Para obtener una dosificación unitaria sólida de una combinación de la invención, la masa portadora se ; impregna con cada una de las diluciones. Los dos tipos de impregnación son adecuados para preparar la formulación posológica de la combinación deseada, j ! i En la realización preferida, el material d ¡e inicio para preparar la formulación activada y potenciada en que consiste la invención es un anticuerpo policlónico, generado en animales, para el ' antígeno correspondiente, a saber, receptor canabinoide humano y/o proteína S-100.

Para obtener la formulación activada y potenciada de anticuerpos policlónicos para el receptor 1 I ' canabinoide humano, el antígeno deseado puede inyectarse como inmunógeno en un animal de laboratorio, de preferencia conejos. Para obtener anticuerpos policlónicos para el receptor canabinoide humano se puede usar la molécula entera del receptor canabinoide humano. La secuencia siguiente ! (SEQ. ID. NO: 1 ) del receptor canabinoide humano se considera específicamente el antígeno adecuado: ; SEQ. ID. NO: RECEPTOR 1 HUMANO CB1 Thr Thr Phe Arg Thr 15 Asn Asp lie Gln Tyr 30 Glu Asp lie Lys Gly Asp Met Ala Ser Lys Leu Gly Tyr Phe Pro 31 35 45 ¦ Gln Lys Phe Pro Leu Thr Ser Phe Ser Pro Phe Gln Glu j I 46 50 55 60 Lys Met Thr Ala Gly Asp Asn Pro Gln Leu Val Pro Ala Asp Gln 61 65 70 75 ¡ Val Asn lie Thr Glu Phe Tyr Asn Lys Ser Leu Ser Ser Phe Lys . 76 80 85 90 ; Glu Asn Glu Glu Asn lie Gln Cys Gly Glu Asn Phe Met Asp lie 1 ! 91 95 100 105 : Glu Cys Phe Met Val Leu Asn Pro Ser Gln Gln Leu Ala lie Ala 106 110 120 , Val Leu Ser Leu Thr Leu Gly Thr Val Leu Glu Asn Leu ' 121 125 135 1 Leu Val Leu Cys Val lie Leu His Ser Leu Arg Cys Arg ; 136 140 150 ; Pro Ser Tyr His Phe lie Gly Ser Leu Ala Val Ala Asp Leu Leu 151 155 1 160 165 ! Gly Ser Val lie Phe Val Tyr Ser Phe lie Asp Phe His Val Phe ! 166 170 1 175 180 ¡ His Arg Lys Asp Ser Arg Asn Val Phe Leu Phe Lys Leu Gly Gly 181 185 1 190 195 ; Val Thr Ala Ser Phe Thr Ala Ser Val Gly Ser Leu Phe Leu Thr 1 ' 196 200 205 210 ! Ala lie Asp Arg Tyr lie Ser lie His Arg Pro Leu Ala Tyr Lys 1 211 215 220 225 Arg lie Val Thr Arg Pro Lys Ala Val Val Ala Phe Cys Leu Met 226 230 1 235 240 Trp Thr lie Ala lie Val lie Ala Val Leu Pro Leu Leu Gly Trp 241 245 250 255 Asn Cys Glu Lys Leu Gln Ser Val Cys Ser Asp lie Phe Pro His 256 260 265 270 lie Asp Glu Thr Tyr Leu Met Phe Trp lie Gly Val Thr Ser Val 271 275 280 285 Leu Leu Leu Phe lie Val Tyr Ala Tyr Met Tyr lie Leu Trp Lys 286 290 295 300 Ala His Ser His Ala Val Arg Met lie Gln Arg Gly Thr Gln Lys 301 305 310 315 Ser lie lie lie His Thr Ser Glu Ásp Gly Lys Val Gln Val Thr 316 320 325 330 Arg Pro Asp Gln Ala Arg Met Asp lie Arg Leu Ala Lys Thr Leu 331 335 340 345 Val Leu lie Leu Val Val Leu lie lie Cys Trp Gly Pro Leu Leu 346 350 355 360 Ala lie Met Val Tyr Asp Val Phe. Gly Lys Met Asn Lys Leu lie 361 360 1 370 375 Lys Thr Val Phe Ala Phe Cys Ser Met Leu Cys Leu Leu Asn Ser 376 375 390 Thr Val Asn Pro lie lie Tyr Ala Ser Lys Asp Leu Arg 391 395 405 His Ala Phe Arg Ser Met Phe Pro Glu Gly Thr Ala Gln 1 406 410 420 ' Pro Leu Asp Asn Ser Met Gly Asp Cys Leu His Lys His ¦ 421 425 435 , Ala Asn Asn Ala Ala Ser Val His Arg Ala Ala Glu Ser Cys lie ; 436 440 Lys Ser Thr Val Lys lie Ala Lys ¡ 451 455 i Asp Thr Ser Ala Glu Ala Leu ¡ 466 470 472 1 SEQ ID NO: RECEPTOR 1A HUMANO CB;2 1 Met Glu Glu Cys Trp Val Thr Glu lie Ala Asn Gly Ser Lys Asp ! 1 5 10 15 : Gly Leu Asp Ser Asn Pro Met Lys Asp Tyr Met lie Leu Ser Gly j 16 20 25 30 Pro Gln Lys Thr Ala Val Ala Val Leu Cys Thr Leu Leu Gly Leu 1 ¡ 31 35 40 45 ! Leu Ser Ala Leu Glu Asn Val Ala Val Leu Tyr Leu lie Leu Ser ! 46 50 55 60 Ser His Gln Leu Arg Arg Lys Pro Ser Tyr Leu Phe lie Gly Ser ' 61 65 1 70 75 Leu Ala Gly Ala Asp Phe Leu Ala Ser Val Val Phe Ala Cys Ser 80 85 90 ¡ Phe Val Asn Phe His Val Phe His. Gly Val Asp Ser Lys Ala Val ' 91 95 1.00 105 Phe Leu Leu Lys lie Gly Ser Val thr Met Thr Phe Thr Ala Ser 106 110 i 115 120 1 Val Gly Ser Leu Leu Leu Thr Ala lie Asp Arg Tyr Leu Cys Leu 1 , 121 125 130 135 ¡ Arg Tyr Pro Pro Ser Tyr Lys Ala Leu Leu Thr Arg Gly Arg Ala : 136 140 1 145 150 ¡ Leu Val Thr Leu Gly lie Met Trp Val Leu Ser Ala Leu Val Ser i 151 155 160 165 Tyr Leu Pro Leu Met Gly Trp Thr Cys Cys Pro Arg Pro Cys Ser '' 166 170 175 180 Glu Leu Phe Pro Leu lie Pro Asn Ásp Tyr Leu Leu Ser Trp Leu ¡ 181 185 1 190 195 Leu Phe lie Ala Phe Leu Phe Ser Gly lie lie Tyr Thr ¦Tyr Gly 196 200 i 205 210 His Val Leu Trp Lys Ala His Gln His Val Ala Ser Leu Ser Gly 211 215 220 225 1 His Gln Asp Arg Gln Val Pro Gly Met Ala Arg Met Arg Leu Asp 1 226 230 1 235 240 Val Arg Leu Ala Lys Thr Leu Gly Leu Val Leu Ala Val Leu Leu 1 1 241 245 250 '255 1 lie Cys Trp Phe Pro Val Leu Ala Ala His Ser Leu Ala 256 260 270 Thr Thr Leu Ser Asp Gln Val Lys Phe Ala Phe Cys Ser 271 275 280 285 Met Leu Cys Leu lie Asn Ser Met Val Asn Pro Val lie Tyr Ala 286 290 295 300 Leu Arg Ser Gly Glu lie Arg Ser Ser Ala His His Cys Leu Ala 301 305 310 315 His Trp Lys Lys Cys Val Arg Gly Leu Gly Ser Glu Ala Lys Glu 316 320 325 330 Glu Ala Pro Arg Ser Ser Val Thr Glu Thr Glu Ala Asp Gly Lys 331 335 340 345 lie Thr Pro Trp Pro Asp Ser •Arg Asp Leu Asp Leu Ser Asp Cys 346 350 355 360 i Para la inmunización de los conejos se utiliza preferiblemente un fragmento de polipéptido de I receptor canabinoide humano como inmunógeno; (antígeno). Con el objeto de obtener anticuerpos 1 ! policlónicos para lograr un fragmento de polipéptido del receptor canabinoide humano, se puede utilizar ! un péptido sintético de dicho receptor como inmunógeno (antígeno). Las secuencias adecuadas (receptor - I , humano CB 1 ) para dicho antígeno son las siguientes: SEQ ID NO: 2.

Gln Arg Gly Thr Gln Lys 310 315 Ser lie lie lie 316 319 ! Asp lie .Phe Pro His 270 Arg Gly Thr Gln Lys 315 ! Lys Val Gln Val Thr , 330 ! ! Lys I 300 Ala His Ser His Ala Val Arg lie Gln Arg Gly Thr Gln Lys 1 301 305 310 · 315 j Ser lie lie lie His Thr Ser Asp Gly Lys Val Gln Val Thr : 316 320 325 330' ! I SEQ ID NO: 7.

I Thr Glu Phe Tyr Lys Ser Leu Ser Ser Phe Lys 79 80 85 90 ; Glu Asn Glu Glu Asn lie Gln Gly Glu Asn Phe Met Asp lie ( 91 95 ¡ 100 105 , Glu Cys Phe Met Val Leu Asn Pro Ser 106 110 ¡ 114 I SEQ ID NO: 8. i Gln 420 Cys Leu His Lys His 435 Gly Thr Gln Lys 312 315 Val Pro Ala Asp Gln 75 Leu Ser Ser Phe Lys 90 Asn Phe Met Asp lie 105 1 i Ala Phe Cys Leu Met 240 ! I !l7 SEQ ID NO: 12.

Glu Phe Tyr Lys Ser Leu Ser Ser Phe Lys 80 85 90 Glu Asn Glu Glu Asn lie Gln Gly Glu Asn Phe Met Asp lie 91 95 100 105 Glu Cys Phe Met Val Leu Asn Ser Gln Gln Leu Ala lie Ala 106 110 115 120 Val Leu Ser Leu Thr Leu 121 125 126 i SEQ ID NO: 13.

Asn Glu Glu Asn lie Gln Cys Gly Glu ' ¡ i SEQ ID NO: 15. ¡ , ¦ , Ala Tyr Lys ' 223 225 ! Arg lie Val Thr Arg Pro Lys Ala Val Val Ala Phe Cys Leu Met i 226 230 ' 235 ' 240 1 Trp Thr lie Ala lie Val lie Ala Val Leu Pro Leu Leu Gly Trp i 241 245 I 250 255 Asn ¡ 256 ' El procedimiento ideal para preparar los; anticuerpos policlónicos de inicio para el receptor canabinoide humano puede describirse como sigue;. De 7 a 9 días antes de tomar las muestras de sangre, se aplica a los conejos de 1 a 3 inyecciones intravenosas del antígeno deseado para aumentar el nivel de anticuerpos policlónicos de la corriente sanguínea del conejo. Después de la inmunización se toman ' muestras de sangre para examinar el nivel de anticuerpos. Usualmente el nivel máximo de la reacción 1 inmune del antígeno soluble se logra de 40 a 60 días después de la primera inyección del antígeno. Al finalizar el primer ciclo de inmunización los cortejos tienen un período de rehabilitación de 30 días, < 1 después del cual se realiza nuevamente la inmunización con otras 1 -3 inyecciones intravenosas.

Para obtener el antisuero que contiene los anticuerpos deseados, la sangre de los conejos inmunizados se extrae de ellos y se coloca en un |tubo centrífugo de 50 mi. Los coágulos del producto formados en los lados del tubo se retiran con una espátula de madera y se coloca una varilla en el centro ! del tubo. La sangre se coloca después en un refrigerador durante una noche a una temperatura de I ! . aproximadamente -40°C. Al día siguiente se saca el coágulo sobre la espátula y el líquido restante se ¡ centrifuga durante 10 minutos a 13.000 rotaciones, or minuto. El fluido sobrenadante es el antisuero ' deseado. El antisuero que se obtiene es usualmente amarillo. Se añade al antisuero 20% de NaN3 (concentración de peso) para obtener la concentración final de 0,02% y se guarda antes de usarlo, ! congelado, a una temperatura de -20°C o sin NaN3 a la temperatura de -70°C. La secuencia de absorción . de fase sólida es adecuada para separar los anticuerpos deseados para el receptor canabinoide del antisuero: \ i 10 mi. de antisuero de conejo se diluye dos veces con 0,15 M de NaCl, después de lo cual se añade 6,26 g. de Na2S04 se mezcla e incuba durante 12-16 horas a 4°C. El sedimento se extrae mediante centrifugación, se diluye en 10 mi. de amortiguadorjde fosfato y se dializa contra el mismo amortiguador i durante una noche a temperatura ambiente. Después de extraer el sedimento la solución se aplica a una columna de celulosa-DEAE equilibrada mediante el amortiguador de fosfato. La fracción del anticuerpo ¡ se determina midiendo la densidad óptica del eluato a 280 nm.

Los anticuerpos brutos aislados se purifican usando el método de la cromatografía afín para lo ' cual se adjunta los anticuerpos obtenidos al receptor canabinoide situado en la matriz insoluble de los I medios de la cromatografía, con la posterior elución¡con soluciones de sales acuosas concentradas, i La solución amortiguadora resultante se usa como solución inicial para el proceso de dilución I homeopática usado para preparar la formulación activada potenciada de los anticuerpos. La concentración preferida de la solución matriz inicial de los anticuerpos de conejo policlónicos purificados con antígeno para el receptor canabinoide es 0,5 - 5,0.mg/ml, preferiblemente 2,0 - 3,0 mg/ml.

, La proteína SI 00, expresada mediante neuronas y células gliales (astrocitos y oligodendrocitos), , directamente o a . través de interacciones con otras proteínas, ejecuta en el CNS cierto número de 1 funciones dirigidas a mantener el funcionamiento normal del cerebro, afectando inclusive los procesos de ' aprendizaje y memoria, crecimiento y viabilidad dé las neuronas, regulación de los procesos metabólicos en los tejidos neuronales y otros. Para obtener anticuerpos policlónicos para la proteína S-100 específica del cerebro, se utiliza dicha proteína S-100 cuyas propiedades físicas y químicas se describen en el artículo de M. V. Starostin, S. M. Sviridov, Neur specific Protein S-100, Progress of Modern Biology, , 1977, Vol. 5, P. 170-178; que se encuentra en el libro de M. B. Shtark, Brain-Specific Protein Antigenes and Functions ofNeuron, "Medicine", 1985; P. 12-14. Se destina proteína S-100 proveniente del tejido cerebral del toro con ayuda de la técnica siguiente: ; 1 - el tejido cerebral del toro congelado en nitrógeno líquido se convierte en polvo usando un molino j especial; J j - las proteínas se extraen en una relación 1 :3 (peso/volumen) usando una solución amortiguadora de extracción con homogenización; ! i j ! - el homogenado se calienta 10 min. a 60°C y se enfría después a 4°C en un baño de hielo; I - las proteínas termolábiles se retiran mediante centrifugación; - la fraccionación del sulfato de amonio se realiza en etapas, con el posterior retiro de las proteínas precipitadas; 1 I ' - la fracción que contiene proteína S-100 se precipita usando 100% de sulfato de amonio saturado j que se obtiene dejando caer el pH a 4,0; la fracción deseada se recoge por centrifugación; - el precipitado se disuelve en un volumen mínimo de amortiguador que contiene EDTA y I ' i ; mercaptoetanol; el precipitado se dializa con agua deionizada y liofilizada; ? - la fraccionación de las proteínas acídicas ya seguida de cromatografía en medio de intercambio de iones, DEAE-celulosa DE-52 y después DEAE-?efadex A-50; - las fracciones recogidas y dializadas, las cuales contienen proteína S-100, se dividen de acuerdo ! al peso molecular mediante filtración a través de un| gel sobre sefadex G- 100; j - la proteína S- 100 purificada se dializa y liófíliza.

El peso molecular de la proteína S- 100 purificada específica del cerebro es 21000 D. 1 Debido a la alta concentración de ácidos asparagínicos y glutamínicos, la proteína S-100 específica i del cerebro es altamente acídica y ocupa una posición anódica extrema durante la electro-endosmosis en , un sistema amortiguador discontinuo de gel de poliacrilamida, lo cual facilita su identificación.

Los anticuerpos policlónicos para la proteína S-100 pueden obtenerse también con una metodología 1 similar a la descrita para los anticuerpos del receptor canabinoide, usando un aditivo. La molécula entera i de la proteína S- 100 puede usarse como inmunógeno (antígeno) para inmunizar a los conejos: í SEQ ID NO: 16 - Bovino S100B í Met Ser Glu Leu Glu Lys Ala Val Val Ala Leu lie Asp Val Phe 1 5 15 His Gln Tyr Ser Gly Arg Glu Gly His Lys Leu Lys Lys 16 20 30 Ser Glu Leu Lys Glu Leu lie Asn Leu Ser His Phe Leu 31 35 1 40 45 Glu Glu lie Lys Glu Gln Glu Val ¡Val Asp Lys Val Met Glu Thr 46 50 55 60 ! Leu Asp Ser' Asp Gly Asp Gly Glu Cys Asp Phe Gln Glu Phe Met i 61 65 70 75 His Glu Phe Phe Glu 90 Leu lie Asp Val Phe 15 His Lys Leu Lys Lys 30 ! Ser Glu Leu Lys Glu Leu lie Asn Asn Glu Leu Ser His Phe Leu ! 31 35 40 45 , Glu Glu lie Lys Glu Gln Glu Val Val Asp Lys Val Met Glu Thr 46 50 55 60 ¦ Leu Asp Asn Asp Gly Asp Gly Glu Gys Asp Phe Gln Glu Phe Met ¡ 61 65 70 75 i Ala Phe Val Ala Met Val Thr Thr Ala Cys His Glu Phe Phe Glu ' 76 80 85 90 1 His Glu 1 91 92 ! SEQ ID NO: 18 -¦ Humano S 1.00 Al 1 Met Gly Ser Glu Leu Glu Thr Ala Üet Glu Thr Leu lie Asn Val 1 5 10 15 Phe His Ala His Ser Gly Lys Glu Gly Asp Lys Tyr Lys Leu Ser 16 20 1 25 30 i Lys Lys Glu Leu Lys Glu Leu Leu Gln Thr Glu Leu Ser Gly Phe 1 31 35 40 45 Leu Asp Ala Gln Lys Asp Val Asp Ála Val Asp Lys Val Met Lys 46 50 55 60 Glu Leu Asp Glu Asn Gly Asp Gly Glu Val Asp Phe Gln Glu Tyr 61 65 75 Val Val Leu Val Ala Ala Leu Thr Cys Asn Asn Phe Phe 76 80 90 Trp Glu Asn Ser : 91 94 ! SEQ ID NO 19 - Bovino S I 00 Al ; : Met Gly Ser Glu Leu Glu Thr Ala Met Glu Thr Leu lie Asn Val I 1 5 10 15 ' Phe His Ala His Ser Gly Lys Glu ¡Gly Asp Lys Tyr Lys Leu Ser 1 16 20 i 25. 30 I Lys Lys Glu Leu Lys Glu Leu Leu ¡Gln Thr Glu Leu Ser Gly Phe ¡ 31 35 ¡ 40 45 · ¡ I I Leu Asp Ala Gln Lys Asp Ala Asp Ala Val Asp Lys Val Met Lys ! 46 50 ¡ 55 60 ! Glu Leu Asp Glu Asn Gly Asp Gly dlu Val Asp Phe Gln Glu Tyr ¡ 61 65 i 70 . 75 Val Val Leu Val Ala Ala Leu Thr. Val Ala Cys Asn Asn Phe Phe 76 80 j 85 90 ' rp Glu Asn Ser ? 1 91 94 I j Para obtener antisuero, la proteína S-100 específica del cerebro o la mezcla de proteína S-100 s (antígenos) en combinación con seralbúmina metilada de toro como el agente portador con el aditivo completo de Freund se prepara y añade a la proteína S-100 específica del cerebro asignada, la cual se ¡ inyecta subdérmicamente a un animal de laboratorio - un conejo, en una zona de la espalda en una cantidad de 1-2 mi. La inmunización se hace repetidamente los días 8 y 15. El análisis de sangre se hace ! j j (de una vena de la oreja, por ejemplo) los días 26 y 28.

I El valor antisérico obtenido es 1 :500 - 1 :1000, forma una sola banda desencadenante con un I extracto de tejido nervioso, pero no reacciona con extractos de cuerpos heterológicos y forma un solo ! pico desencadenante, tanto con la proteína S-100 pura como con el extracto de tejido nervioso, lo que I ¡ j indica que el antisuero obtenido es monoespecífico.¡ j La formulación activada y potenciada de los anticuerpos de la invención presente puede preparase con una solución inicial mediante potenciación homeopática, preferiblemente usando el j método de disminución proporcional de la concentración a base de dilución en serie de 1 parte de cada I solución precedente (comenzando con la solución inicial) en 9 partes (para la dilución decimal), o en 99 1 partes (par la dilución centesimal), o en 999 partes (para la dilución milesimal) de un solvente neutro, I , comenzando con una concentraron de la solución ¡ inicial del anticuerpo en el solvente, preferiblemente j agua o una mezcla de agua y alcohol etílico, en el rango de cerca de 0,5 a cerca de 5,0 mg/ml., junto con ! el impacto externo. El impacto externo conlleva preferiblemente agitación vertical múltiple vertical 1 (dinamización) de cada dilución. Se utilizan preferiblemente recipientes separados para cada dilución subsecuente hasta lograr el nivel de potencia necesario o el factor de dilución. Este método se acepta , ampliamente en la ciencia homeopática. Ver por 'ejemplo V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1 1967, p. 14-29, aquí incorporado mediante referencia para los fines indicados. 1 Por ejemplo, para preparar una dilución! centesimal 12 (denominada C12), una parte de la solución matriz inicial de los anticuerpos para el receptor canabinoide humano con una concentración de ' 3,0 mg/ml se diluye en 99 partes de solvente neutro acuoso o acuoso-alcohólico (preferiblemente 15% de veces (10 y más) par crear la dilución j centesimal (denominada Cl). La 2a dilución centesimal (C2) se prepara en base a la Ia dilución ! centesimal Cl. Este procedimiento se repite 11 veces para preparar la 12a dilución centesimal C12. Así ' pues, la 12a dilución centesimal C12 representa una solución obtenida mediante 12 diluciones en serie de una parte de la solución matriz inicial de anticuerpos para el receptor canabinoide humano con una : concentración de 3,0 mg/ml en 99 partes de un solvente neutro en recipientes diferentes, lo cual es i ; equivalente a la dilución homeopática centesimal C12. Se realizan procedimientos similares con el factor : i •de dilución pertinente para obtener diluciones de C30 y C200. Pueden hacerse pruebas de las diluciones ( intermedias en el modelo biológico deseado para verificar la actividad. Las formulaciones activadas y j potenciadas preferidas para los anticuerpos de que consta la invención son una mezcla de diluciones C12, ; C30 y C200 para cada formulación activada y potenciada. Cuando se usa una mezcla de diluciones , homeopáticas diversas (principalmente centesimales) de la substancia activa como el componente liquido I biológicamente activo, cada componente de la composición (por ejemplo C12, C30, C200) se prepara por ¡ separado según procedimiento antes descrito hasta ¡obtener la dilución anterior a la última (por ejemplo, i hasta Cl l, C29 y C199 respectivamente) y después una parte de cada componente se añade en un ¡ recipiente según la composición de la mezcla y sé combina con la cantidad necesaria de solvente (por 1 ejemplo, con 97 partes para la dilución centesimal): j Se puede usar la substancia activa como mezcla de varias diluciones homeopáticas, como por í ejemplo decimal y/o centesimal (D20, C30, ! CIOO ó C12, C30, C50, etc.), determinándose 1 experimentalmente la eficiencia de la misma mediante pruebas de la dilución en un modelo biológico adecuado, como por ejemplo los modelos descritos 'en los ejemplos aquí incluidos.

En el curso de la disminución de la potenciación y concentración, la agitación vertical puede sustituirse por la exposición extema a ultrasonidos,' campos electromagnéticos o cualquier procedimiento similar externo de impacto aceptado por la ciencia homeopática.

La composición farmacéutica de la invención puede estar, preferiblemente, en una formulación i líquida o en una formulación poso lógica unitaria solida. Cuando la composición farmacéutica consta de ! dos anticuerpos, la formulación líqüida de la ¡misma consta de una mezcla de dos anticuerpos, i preferiblemente en una relación 1:1 de la formulación activada y potenciada de los anticuerpos para el ! receptor canabinoide humano y la fomiulación activada y potenciada de los anticuerpos para la proteína I S- 100. El portador líquido de preferencia es agua ó una mezcla de agua y alcohol etílico. 1 La formulación posológica unitaria sólida ¡de la composición farmacéutica de la invención puede aceptable, con la mezcla de soluciones ? acuosas o acuosas-alcohólicas de la formulación activada y potenciada de los componentes activos. 1 Cuando la composición farmacéutica consta de dos anticuerpos, los componentes activos se mezclan, 1 principalmente en una relación 1 :1, y se usan en lal formulación posológica líquida. Alternativamente el portador puede impregnarse consecutivamente con cada una de las diluciones necesarias. Ambos órdenes 1 de impregnación son aceptables. ; i 1 La composición farmacéutica de la formulación posológica unitaria sólida se prepara, preferiblemente, con granulos de un portador 'farmacéuticamente aceptable que se ha saturado , previamente con las diluciones acuosas o acuoso-alcohólicas de la formulación activada y potenciada de ¦ los anticuerpos. La formulación posológica sólida puede estar en cualquier formulación conocida de la ciencia farmacéutica, incluyendo tabletas, cápsulas, 'comprimidos para chupar y otros. Como ingredientes i farmacéuticos inactivos se puede usar glucosa, sucrosa, maltosa, almidón, isomaltosa, isomalta y otros I mono- oligo- y poli-sacáridos utilizados en la fabricación de productos farmacéuticos, así como mezclas j tecnológicas de los ingredientes farmacéuticos inactivos anteriores con otros excipientes ¡ farmacéuticamente aceptables, como isomalta, crospovidona, ciclamato sódico, sacarina sódica, ácido ! cítrico anhidro, etc.), incluyendo lubricantes, desintegrantes, aglutinantes y colorantes. Los portadores preferidos son lactosa e isomalta. La formulación posológica farmacéutica puede incluir además : excipientes farmacéuticos normales como celulosa microcristalina y estearato de magnesio.

A continuación se ofrece un ejemplo de preparación de la formulación posológica unitaria sólida. ' Para preparar la formulación oral sólida se impregnan 100-300 µ??. de granulos de lactosa are con ' soluciones acuosas o acuoso-alcohólicas de la formulación activada y potenciada de los anticuerpos para el receptor canabinoide humano y/o la formulación activada y potenciada de los anticuerpos para S-100 ' en una relación de 1 Kg. de solución de anticuerpos a 5 ó 10 Kg. de lactosa (1 :5 a 1 :10). Para realizar la ; impregnación los granulos de lactosa se exponen saturación por irrigación en un lecho fluidizado en ebullición en una planta de lecho en ebullición (por ejemplo, "Hüttlin Pilotlab" de Hüttlin GmbH) con ; secado posterior mediante un flujo de aire calentado a una temperatura por debajo de 40°C. La cantidad l estimada de granulos secos (de 10 a 34 partes en peso) saturada con la formulación activada y potenciada í de los anticuerpos se coloca en la mezcladora y se mezcla con 25 - 45 partes en peso de lactosa pura "no ; saturada" (usada para reducir el costo y simplificar y acelerar el proceso tecnológico sin disminuir la ¡ eficacia del tratamiento), junto con 0, 1 - 1 partes en peso de estearato de magnesio y 3 - 10 partes en peso ! de celulosa microcristalina. La masa de la tableta; obtenida se mezcla uniformemente y se tabletea con 1 presión seca directa (por ejemplo en una prensa: de tabletas Korsch - XL 400) para formar pildoras i redondas de 150 a 500 mg., preferiblemente de 300: mg. Después del tableteado se obtienen pildoras de : 300 mg. que se saturan con una solución acuosa-alcohólica (3,0-6,0 mg/píldora) de la combinación de la ; formulación activada y potenciada de los anticuerpos. Cada componente de la combinación usada para ¡ impregnar el portador está en una formulación dé mezcla de diluciones homeopáticas centesimales, ¡ preferiblemente C 12, C30 y C200. ; Aunque la invención no está limitada a alguna teoría específica, se cree que la formulación i activada y potenciada de los anticuerpos aquí descrita no contiene la formulación molecular del anticuerpo en cantidad suficiente para tener la Jactividad biológica atribuida a dicha formulación molecular. La actividad biológica de la composición farmacéutica de la invención y la composición de la i combinación farmacéutica de la invención se demuestran ampliamente en los ejemplos adjuntos. i i La composición farmacéutica que constá de la formulación activada y potenciada de un i anticuerpo para el receptor canabinoide humano puede utilizarse para ser administrada a pacientes que I sufren de obesidad y trastornos metabólicos relacionados. ' i i Tal como se muestra en los ejemplos adjuntos, la administración de la formulación activada y í I potenciada del anticuerpo de la invención presente da como resultado una reducción de la masa corporal, ¡ una reducción de la obesidad central y facilita una reducción del consumo de alimentos.

I En una modalidad, la invención presente proporciona un método para tratar la obesidad y I trastornos metabólicos relacionados mediante la administración de composiciones farmacéuticas que I constan de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano, preferiblemente el receptor canabinoide 1. ! En otra modalidad, la invención presente proporciona un método para facilitar la reducción del i consumo de alimentos en sujetos que se espera se beneficien de dicha reducción, mediante la ! administración de una composición farmacéutica qµe consta de una formulación activada y potenciada de j un anticuerpo para el receptor canabinoide humano!, preferiblemente el receptor canabinoide 1.

En una modalidad se proporcionan los métodos para alternar los parámetros antropométricos, por I ejemplo la circunferencia de la cintura, relación cintura-cadera y relación cintura-altura. En otra ! modalidad se proporcionan métodos para reducir la circunferencia de la cintura de un sujeto, consistiendo i el método en administrar, a un sujeto que lo necesite, composiciones farmacéuticas que contienen una i formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano en una cantidad ; eficaz para reducir la circunferencia de la cintura del sujeto. En otra modalidad el receptor canabinoide ¡ humano es el receptor canabinoide humano 1. En otra modalidad la circunferencia de la cintura del sujeto se reduce por lo menos cerca de 1%. En otras modalidades la circunferencia de la cintura del sujeto se í ! ¡ reduce en por lo menos cerca de 1,5%, 2%, 2,5%, 3% ó 3,5%, comparado con el sujeto antes de administrar las composiciones farmacéuticas que contienen la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano. En otra modalidad la circunferencia de la cintura del I sujeto se reduce en por lo menos cerca de 1 cm. En! otras modalidades la circunferencia de la cintura del sujeto se reduce en por lo menos cerca de 2, 3 ó 4 cm. comparado con el sujeto antes de administrar las j composiciones farmacéuticas que contienen la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano.

: En otra modalidad se proporcionan los métodos para reducir la masa corporal de un sujeto, ' consistiendo el método en administrar, a un sujetó que lo necesita, composiciones farmacéuticas que constan de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano ; en una cantidad eficaz para reducir la masa corporal del sujeto. En otra modalidad el receptor 1 canabinoide humano es el receptor canabinoide humano 1. En otra modalidad la masa corporal del sujeto se reduce en por lo menos cerca de 15%. En otras modalidades la masa corporal del sujeto se reduce en j por lo menos cerca de 5%, 10% ó 15% comparado con el sujeto antes de administrarle las composiciones farmacéuticas que contienen la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor : canabinoide humano. ¡ ' En otra modalidad se proporcionan métodos para reducir el crecimiento de masa corporal de un sujeto, consistiendo el método en administrar, a un jsujeto que lo necesita, composiciones farmacéuticas ¡ que contienen la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano en una cantidad eficaz para reducir la masa corporal del sujeto. En otra modalidad el receptor : canabinoide humano es el receptor canabinoide humano 1. En otra modalidad el crecimiento de la masa ¡ corporal del sujeto se reduce eñ por lo menos cercaj de 60%. En otras modalidades el crecimiento de la masa corporal del sujeto se reduce en por lo menos cerca de 10, 25, 30, 50 ó 60% en una cantidad eficaz , para reducir la masa corporal del sujeto en una cantidad eficaz para reducir la masa corporal del sujeto - comparado con el sujeto antes de administrarle las composiciones farmacéuticas que contienen la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano, j La composición farmacéutica que consta de la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano y la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100 puede administrarse a pacientes que sufren de dependencia de substancias ! psicoactivas, preferiblemente dependencia de la nicdtina.

El solicitante descubrió sorpresivamente que la combinación de una formulación activada y i potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano y una formulación activada y ! potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100 es útil para tratar la drogadicción.

En otra modalidad la combinación de la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para ' el receptor canabinoide humano y la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína ¡ i S-100 es útil para tratar el tabaquismo. | La administración de una composición farmacéutica que consta de una formulación activada y I potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano 1 y una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100 para tratar a pacientes con tabaquismo, mejora los ! parámetros de calidad de vida evaluados con criterios tales como depresión y ansiedad.

Se ha demostrado experimentalmente que |la administración de una composición farmacéutica que consta de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide , humano 1 y de una formulación activada y potenciada de un anticuerpo para la proteína S-100 en el ; tratamiento de pacientes con tabaquismo, mejora! su capacidad para tolerar la abstinencia de fumar j haciéndolo más fácil y con menos dolor, según mediciones de los análisis de datos de la prueba MPSS.

I Se ha demostrado experimentalmente que la administración de la combinación a pacientes con tabaquismo no grave de > 4 según medido con la Prueba de Fagerstrom para dependencia de la nicotina, lleva a una reducción del hábito de fumar de por lo menos 23% en 4 semanas; por lo menos 36% en 8 I semanas y por lo menos 41% en 12 semanas. Se ha demostrado también experimentalmente que la j administración de la combinación a pacientes con tabaquismo no grave llega a una reducción ' estadísticamente significativa del número de puntos promedio inicial de la Prueba de Fagerstrom de por ló menos 1,34 ± 0,14. ' j Se ha demostrado experimentalmente que la administración de la combinación a pacientes con tabaquismo grave de > 7 según medido con la Prueba de Fagerstrom para dependencia de la nicotina, lleva a una reducción del hábito de fumar de por lo menos 1 1% en 4 semanas; por lo menos 22% en 8 i I semanas y por lo menos 30% en 12 semanas. Se ha demostrado experimentalmente que la administración de la combinación a pacientes con tabaquismo1 no grave lleva a una reducción estadísticamente I significativa del número de puntos promedio inicial en la Prueba de Fagerstrom de por lo menos 4,42 ± 1 0,30. ! I En una de las modalidades se contempla itambién la administración por separado de las dos 1 . . . ' 1 formulaciones posológicas unitarias preparadas independientemente, cada una de ellas consistiendo de una de las formulaciones activadas y potenciadas de ¡anticuerpos de la combinación.

' La invención se sigue demostrando mediante referencia a los ejemplos adjuntos no limitativos. ; humano tipo 1 (ULD Anti-CBl), purificado en ántígeno, obtenido por hiper-dilución de la solución ¡ matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y i C200) en funcionamiento del receptor canabinoide, tipo 1 , se probó in vitro en 2 regímenes: en el 1 régimen agonista y en el régimen antagonista. ¡ Régimen agonista: I ¦ Antes de su introducción en los pocilios de ¡la placa (placa de 96 pocilios, volumen de los pocilios I ! j 250 µ?), las células se suspendieron en un amortiguador HBSS (Invitrogen), que contenía 20 mM HEPES ¡ (pH=7,4). Las células se incubaron previamente durante 10 minutos a temperatura ambiente además de ¡; añadirles 20 µ? de ULD preparación anti-CBl . Después de la incubación previa se añadió el activador NKH477 adenilato ciclasa. Las células se incubaron durante 10 minutos a 37°C y se lisaron. Se i introdujo en los pocilios un aceptante fluorescente (cAMF, marcado D2) y un donante fluorescente ¡ (anticuerpos cAMF, marcados con criptato de europio).

! Como control basal, la suspensión dei células se incubó previamente en presencia del i amortiguador HBSS (20 µ?) en lugar de ULD anti-CBl . Como control estimulado, la suspensión de ! células se incubó previamente en presencia del agonista de referencia CP 55940 (20 µ?) en lugar de ULD 1 anti-CBl. " ¡ i i La actividad funcional (concentración cAMF) se evaluó con el método de fluorescencia i 1 ; homogénea con resolución de tiempo (HTRF). La intensidad de la fluorescencia en el control basal se I j tomó como antecedente y su valor se dedujo; de las intensidades de fluorescencia en los datos experimentales (ULD anti-CB 1 ) y el control (CP 55940): I i j La respuesta específica medida de la célula a la introducción de ULD anti-CBl se calculó de j acuerdo a la fórmula: intensidad de la fluorescencia en el experimento (ULD anti-CBl) - intensidad de la 1 fluorescencia en el control basal. ! j j I La respuesta específica medida de la célula a la introducción del agonista de referencia (CP ' 55940) se calculó de acuerdo a la fórmula: intensidad de la fluorescencia en el control (CP 55940) - Í ¦ intensidad de la fluorescencia en el control basal. ¡ ! Los resultados se expresaron en porcentajes de la respuesta específica de la célula a la ' introducción del agonista de referencia en el control estimulado: i . j Porcentaje de respuesta del agonista de referencia = (respuesta específica medida / respuesta ! i i específica en control a la introducción del agonista de referencia) x 100%).

; Régimen antagonista: ! i ! Antes de su introducción en los pocilios de ja placa (placa de 96 pocilios, volumen de los pocilios , 250 µ?), las células se suspendieron en un amortiguador HBSS (Invitrogen), que contenía 20 mM HEPES i (pH=7.4). Las células se incubaron previamente durante 5 minutos a temperatura ambiente junto con 20 : µ? de ULD anti-CBl . Después de añadir en los pocilios el agonista de referencia CP 55940, las células se ¡ incubaron durante 10 minutos a temperatura ambiente. Se añadió a los pocilios el activador adenilato I ciclasa H477. Las células se incubaron duranté 10 minutos a 37°C y se Usaron. Se introdujo en los j pocilios el aceptador fluorescente (cAMF, marcado D2) y el donante fluorescente (anticuerpos cAMF, ¡ marcados con criptato de europio). ¡ ¡ Como control basal, la suspensión de células se incubó previamente en presencia del antagonista ! de referencia AM 281 (20 µ?) en lugar de ULD anti-CBl . El agonista de referencia CP 55940 no se añadió a los pocilios con el control basal. Como ¿ontrol estimulado, la suspensión de células se incubó previamente en presencia del amortiguador HBSS, el cual contenía 20 mM HEPES (pH=7,4) y el agonista de referencia CP 55940 (20 µ?). | La actividad funcional (concentración cAMF) se evaluó con el método de fluorescencia homogénea con resolución de tiempo (HTRF). Lá intensidad de la fluorescencia en el control basal se i ¡ tomó como antecedente y su valor se dedujo de las intensidades de fluorescencia en el experimento (ULD i anti-Cbl) y el control (CP 55940): ¡ La respuesta específica medida de la célula a la introducción de ULD anti-CBl se calculó de ; acuerdo a la fórmula: intensidad de la fluorescencia en el experimento (ULD anti-CBl) - intensidad de la ¡ fluorescencia en el control basal. ¡ 1 La respuesta específica medida de la célula a la introducción del agonista de referencia (CP ; 55940) se calculó de acuerdo a la fórmula: intensidad de la fluorescencia en el control (CP 55940) - intensidad de la fluorescencia en el control basal. i Los resultados se expresaron en porcentajes de la inhibición de la respuesta específica de la cédula a la introducción del agonista de referencia en el control: Porcentaje de inhibición de respuesta del agonista de referencia = 100% - (respuesta específica medida / respuesta específica en control a la introducción del agonista de referencia) x 100%).

Como resultado de la investigación se demostró (ver la Tabla 1) que ULD anti-CBl cambia la actividad funcional del receptor canabinoide tipo 1, según medido por la concentración intracelular de cAMF. ! La substancia a prueba (dosis ultra bajas de anticuerpos para el receptor canabinoide tipo 1 (mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y ¡C200) puso de manifiesto la actividad agonista del receptor canabinoide tipo 1. La magnitud del efecto' agonista es 21% con referencia al efecto del agonista i estándar CP 55940 (el efecto agonista estándar se toma como 100%).

Tabla 1 EJEMPLO 2. ; La substancia a prueba estaba en forma de una solución acuosa de dosis ultra bajas de anticuerpos policlónicos de conejo para el receptor canabinoide humano tipo 1 (ULD anti-CBl), purificado en antígeno, obtenido mediante hiper-dilución de la solución matriz inicial 10012, 10030, \ 0¿w veces (mezcla de las diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200).

, I 1 Se utilizaron en el estudio 40 ratones machos de la línea C57B1 (peso al comienzo del estudio: i 13,5-15,5 g). 10 ratones recibieron la alimentación: regular normal (dieta normal); 30 ratones recibieron i la alimentación normal con aditivos altos en calorías (dieta calórica alta) y, simultáneamente, o bien agua ' destilada (control, 0,4 ml/Kg.) o Subutramine (capsulas de Meridia 10 mg., Abbott GmbH, Alemania) (10 mg/Kg.) o ULD anti-CBl (0,4 ml/Kg). Todas las preparaciones se administraron intragástricamente una i j 1 vez al día en el transcurso de 5 meses. El consumo del alimento por los ratones se midió antes de I I introducir las sustancias de la prueba. El consumo dé alimentos por los ratones se midió también todas las semanas siguientes. El consumo de alimentos se evaluó como la cantidad promedio de alimentos (en ( gramos) consumida por un ratón después de 1 y 2 meses del estudio y como la cantidad promedio de alimentación por 10 g. de masa corporal del ratón.

¡ Durante todo el período de observación los ratones con dieta calórica baja consumieron, en i promedio, 15% menos de alimentos que los ratones con dieta calórica alta (Tabla 2). Tanto la ' Subutramine como ULD anti-CBl disminuyeron el consumo de alimentos. El efecto de la Subutramine : se manifestó algo más alto: el consumo de alimentos disminuyó en una semana en 19,3% (p<0,05), ! mientras que con ULD anti-CBl disminuyó en 9,3% con referencia al control (p>0,05). En la Tabla 2 se I muestran los resultados del estudio, en especial el efecto de ULD anti-CBl uy Subutramine sobre el ! consumo de alimentos por ratones C57B1 (valores promedio durante 5 meses de observación), M±m.

Tabla 2 ** - las diferencias con respecto al control son estadísticamente significativas con p<0,01 ; # - las diferencias con respecto a la dieta normal son estadísticamente significativas con p<0,05. i En la semana veinte del experimento, jlos ratones de la dieta alta en grasas que habían recibido ULD anti-CBl consumieron más alimentos, en comparación con la primera semana del experimento, lo cual se muestra en la Ilustración 1. En la Ilustración 1 se muestra el efecto de ULD anti-CBl y Subutramine sobre el crecimiento de la masa corporal de ratones C57B1 y el consumo de alimentos por 10 g. de peso después de la semana 20, la última del experimento.

Se observó una reducción del crecimiento de masa corporal del 51 ,2% en los ratones que recibieron ULD anti-CBl, comparado con el control. En la última semana del experimento, la 20, i Subutramine redujo la masa corporal en 51 ,5%, en comparación con el grupo de control.

EJEMPLO 3 ¡ j La sustancia de la prueba estaba en forma de solución acuosa de dosis ultra bajas of anticuerpos policlónicos de conejo para el receptor canabinoide humano tipo 1 (ULD anti-CBl), purificado en antígeno, obtenida mediante hiper-¡dilución de la solución matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200).

Se utilizaron en el estudio 33 ratones machos de la línea C57B1 (peso al comienzo del estudio: 13,09±0,738 g). Los ratones recibieron la dieta modificada con alto contenido de grasa (45%) y simultáneamente, o bien agua destilada ¡(control, 0,2 ml/Kg.) o Subutramine (10 mg/Kg) o ULD anti-CBl (0,2 ml/Kg). Todas las preparaciones ULD anti-CBl se administraron intragástricamente una vez al día en el transcurso de 2 meses. El peso de los ratones se midió en balanzas electrónicas Philips Cucina HR 239016 (Hungría) hasta comenzar a introducir las preparaciones (inicialmente) y también cada semana después de comenzar a introducirlas. El crecimiento de la masa corporal de los ratones se evaluó como un porcentaje del peso inicial.

Comenzando a las 6 semanas desde la introducción, ULD anti-CBl redujo el crecimiento de masa corporal de los ratones que se mantuyieron en la dieta alta en grasas. En la Tabla 3 se muestra la masa promedio semanas (gramos) de¡ los ratones C57B16 que recibieron la dieta alta en grasas y ULD anti-CBl (0,2 ml/ratón) o Subutramine (10 mg/Kg.) (M±m). En la Tabla 3 se muestra el crecimiento en masa corporal de los ratones.

Tabla 3 Nota: * - p<0,05 comparado con el grupo dé control; ** - p<0,001 comparado con el grupo de control.

Tal como se muestra, ULD anti-CB 1 reducé el crecimiento en masa corporal de los ratones en la dieta alta en grasas, disminuye el consumo de alimentos y no es inferior en eficacia al conocido t compuesto Subutramine, ampliamente utilizado, para reducir la masa corporal.

EJEMPLO 4.

Tabletas de 300 mg. agua-alcohol (6 mg/tableta) de la formulación activada y potenciada de anticuerpos policlónicos de conejo para el receptor canabinoide humano tipo 1, purificado con antígeno, en dosis ultra bajas, obtenidas mediante Kuiper-dilución de la solución matriz ínici al 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200 (ULD anti-CB 1). ! i Participaron en el estudio 80 sujetos (20 hombres y 60 mujeres) entre 20 y 69 años (la edad promedio fue 40,2 ± 1,26 años), 68,7% de los cualesj sufrían de masa corporal excesiva u obesidad (grado I-I ). A los sujetos se les dio 1 tableta, 2 veces al día. En la Tabla 4 se muestran los indicadores ! demográficos y antropométricos de los pacientes incluidos en el estudio. Se incluyeron en el análisis de seguridad los datos de todos los sujetos que participaron en el estudio (n=80). Se observó buena j tolerancia a la preparación durante todo el períodoj de observación de los sujetos. No se presentaron 1 ' efectos secundarios. Todos los sujetos de los grupos bajo estudio finalizaron el tratamiento dentro de los límites de tiempo establecidos por el protocolo del ¡ estudio; ningún paciente se retiró antes de tiempo. ¡ Durante la evaluación del efecto de ULD anti-CB 1 sobre el cambio de la masa corporal de los sujetos se descubrió que el uso de la preparación produjo una reducción de la masa corporal en 56 (70%) pacientes.

; En 24 (30%) pacientes el peso permaneció sin ckmbio o aumentó de manera insignificante. Debe ] i mencionarse, sin embargo, que entre tales pacientes, 14 (17,5%) tenían inicialmente masa corporal normal (BMI<25 Kg/m2). : ¡ Tabla 4 Se observó una reducción estadísticamente significativa de la masa corporal (p<0,001) en los pacientes que respondieron al tratamiento. Después de sólo 15 días de administrar ULD anti-, CB1 , la reducción de la masa corporal fue 1 , 1 Kg. (1 ,3%) y en 1 mes alcanzó 1 ,9 Kg (2,2%) del ( valor original (Ilustración 2).

I ¡ ' Respecto a los pacientes que respondieron al tratamiento se observó una disminución I estadísticamente significativa (p<0,001 ) de la circunferencia de la cintura y los muslos sólo una (1) : semana después de comenzar la administración de ULD anti-CB l , que al final del tratamiento j alcanzó 2,3% y 2,7%, respectivamente. En la Tabla 5 se presenta la dinámica del cambio de la circunferencia de la cintura y los muslos. ! ¡ ! Tabla 5 ** - p < 0,01 con referencia al valor inicial; *** ÷¦ p < 0,001 con referencia al valor inicial.

En la evaluación de la sensación de hambre de los pacientes con la escala analógica visual (VAS, visual analog scale), la mayor intensidad de la sensación de hambre se observó en horas de la noche. Al final de 1 mes después de comenzar la administración de ULD anti-CBl, el nivel. de hambre en horas de la noche se redujo significativamente (con p<0,00Í) de 49,4 ± 3,75 a 42,0 ± 4,32 puntos. Se observó también una tendencia en horas de la mañana y durante el día a reducirse la sensación de hambre (de 20,5 ± 3,23 a 13,6 ± 1,78 puntos en horas de la mañana, de 44,7 ± 3,45 a 27,3 ± 3,72 puntos en horas del día). i Aunque los datos relativos al hambre en la mañana, no alcanzaron valores estadísticamente significativos al final el tratamiento, cuyo observación pudiera estar relacionada con valores iniciales moderados, no puede ignorarse la dinámica. : Así pues, el estudio clínico de ULD anti-CBl que se realizó confirmó la alta tolerancia de la preparación sometida a prueba; no hubo efectos secundarios al tomar la preparación de la prueba.

EJEMPLO 5. Prueba de Fagerstrom para dependencia de la nicotina Este ejemplo es la prueba misma. Los datos pertinentes se proporcionan por separado más abajo. La Prueba de Fagerstrom para dependencia de la nicotina es una prueba para evaluar la intensidad de la adición a la nicotina. Ver Heatherton, T.F., Ko¿lowski, L.T., Frecker, R.C., Fagerstrom, K.O. The Fagerstrom test for Nicotine Dependence: A revisión of the Fagerstrom Tolerance Questionnaire. Br J i Addict 1991; 86:1119-27, aquí incorporado mediante referencia. En los estudios descritos a continuación los pacientes respondieron todas las preguntas. La puntuación total arroja el grado de dependencia de la nicotina. El grado de dependencia de la nicotina se evalúa mediante la suma de las puntuaciones como sigue: menos de 4 -dependencia leve; 4-6 - grado promedio de dependencia; y 7-10 -dependencia •fuerte.

Tabla 6 EJEMPLO 6. Prueba de la escala del estado de ánimo y síntomas físicos (MPSS). i . ¡ Este ejemplo es la prueba misma. Los datos importantes se suministran por separado más abajo. 1 En los estudios descritos a continuación los pacientes que han dejado de fumar respondieron 12 preguntas l (la puntuación se evaluó de 1 a 5 puntos para cada pregunta), evaluando los sentimiento durante las últimas 24 horas (preguntas 1-7), deseos de fumar (preguntas 8-9) y expresión de síntomas físicos 1 (preguntas 10-12). Los pacientes colocaron un círculo sólo en un número para cada pregunta. El resumen i i , de los resultados puede dividirse en tres dominios (M - preguntas 1-7, C - preguntas 8-9 y P - preguntas j 10-12) o mediante la puntuación global, la cual puede variar de mínimo (12 puntos) a máximo (60 j puntos), reflejando el nivel de los síntomas de abstinencia de nicotina.

¡ Tabla 7 Se ruega indicar para pregunta cómo se han sentido en las últimas 24 horas {Colocar un círculo sólo en No estuve En un ligero Bastante Muy Extremadam. grado fuerte fuerte fuerte 1. Deprimido 1 2 ? 3 4 5 2. Ansioso 1 2 ¡ 3 4 5 3. Irritado 1 2 | 3 4 5 4. Preocupado 1 2 : 3 4 5 5. Sensación de hambre 1 2 ¡ 3 4 5 6. Atención deficiente 1 2 ¡ 3 4 5 7. Trastorno del sueño 1 2| 3 4 5 8. ¿Durante cuánto tiempo le apeteció fumar en las últimas 24 horas? {Coloque un círculo sólo un número) Ni una vez No mucho La menor parte La mayor parte Casi Constantemente tiempo del día ¡ del día siempre 0 1 2 3 4 5 9. ¿Qué tan fuerte fue el deseo de fumar? {Coloque \un círculo sólo en un número) Ninguno Ligero Moderado 1 Fuerte Muy fuerte Extremadam. ¡ fuerte O 1 2 3 4 5 ¿Hubo alguna manifestación en las últimas 24 horas? (Coloque un círculo sólo en un número) No Ligera Moderada Fuerte Muy fuerte 10. Dolores en la boca 1 2 ! 3 4 5 11. Estreñimiento 1 2 1 3 4 5 12. Tos/dolor de garganta 1 2 : 3 4 5 West, R., Hajek, P. Escala de evaluación del estado de ánimo y los síntomas físicos (MPSS) para evaluar la abstinencia del cigarrillo. Psychopharmacology, 2004; Volume 177, Numbers 1-2, 195-199, aquí incorporado mediante referencia.

EJEMPLO 7. Escala de ansiedad y depresión hospitalaria (HADS).

Este ejemplo es la prueba misma. Los datos pertinentes se proporcionan por separado a continuación. La Escala de ansiedad y depresión hospitalaria (HADS) es una escala subjetiva y para detectar signos de ansiedad y depresión en pacientes internos y externos hospitalarios. Ver Zigmond, A. ¦ S., Snaith, R.P. The Hospital Anxiety and Depressipn scale // Acta Psychiatr. Scand. - 1983. - Vol. 67. -I P. 361-370, aquí incorporado mediante referencia. 1 Método de aplicación: El formulario de la escala se da a los pacientes para que lo llenen y va I acompañado de las instrucciones siguientes: j "Los científicos creen que las emociones juegan un papel importante en el comienzo de la j mayoría de las enfermedades. Si su doctor, sabe más acerca de sus experiencias, puede ' ayudarle mejor. Este cuestionario ha sido diseñado par ayudar a su doctor a entender cómo se siente usted. No preste atención a los números y letras en la parte izquierda del I cuestionario. Lea cuidadosamente cada unoj de los enunciados y coloque una "X" en el i espacio vacío a la izquierda, junto a la respuesta que corresponde mejor a cómo se sintió la : semana pasada. No piense mucho sobre cada enunciado. Su primera reacción será siempre ¡ la mejor". j La escala costa de 14 enunciados divididos en 2 subescalas: "ansiedad" (preguntas con números j impares - 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13) i "depresión" (preguntas con números pares - 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14). Cada 1 enunciado tiene 4 repuestas posibles que reflejan lá magnitud del sentimiento o emoción y caracterizan de manera incremental la gravedad del síntoma, de 0 (ausencia) a 3 (máximo). j Al interpretar los resultados se toma en cuenta el indicador global para cada subescala dividido en 3 rangos de valores: 0-7 que indica "normal" (ausencia de síntomas de ansiedad y depresión expresados ¡ de manera confiable); 8-10 que indica "ansiedad/clepresión subclínica"; y 1 1 y por encima que indica i "ansiedad/depresión clínica". i ; 37 I Zigrnond, A. S., Snaith, .P. The Hospital Anxiety and Depression scale // Acta Psychiatr. Scand. - 1983. - Vol. 67. - P. 361-370, aquí incorporado mediante referencia.

EJEMPLO 8. Estudio clínico controlado con placebo y doblemente enmascarado para evaluar la combinación de una dosis ultra baja de anticuerpos para la proteína S-100 y dosis ultra bajas de anticuerpos para el receptor CB1, y de dosis ultra bajas de anticuerpos para el receptor CB1 en el tratamiento del tabaquismo moderado y la obesidad.

Tabletas de 300 mg. saturadas con soluciones de agua-alcohol (6 mg/tab.) de dosis ultra bajas de anticuerpos policlónicos de conejo para la proteína; S-100 específica del cerebro (ULD anti-SlOO) y para el receptor canabinoide tipo 1 (ULD anti-CBl), cada una de ellas obtenida mediante hiper-dilución de la solución matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla dé las diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200) se utilizaron en el estudio (ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl). También se utilizaron en dicho estudio tabletas de 300 mg. saturadas con una solución de agua-alcohol (6 mg/tab.) de dosis ultra bajas de anticuerpos policlónicos de conejo para el receptor canabinoide tipo 1 (ULD anti-CBl) I obtenidas mediante hiper-dilución de la solución matriz inicial 100 , 100 , 100 veces (mezcla de las diluciones homeopáticas centesimales C12, C30 y C200). i Se incluyó a 59 pacientes con el deseo de dejar de fumar en un estudio comparativo, doblemente ' enmascarado, controlado con placebo para evaluar ia eficacia de una combinación de ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl y anti-CBl para tratar el tabaquismo. 22 pacientes se incluyeron en el grupo de la preparación activa y se les dio ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl, 1 tableta 3 veces al día. 17 pacientes se I incluyeron en el grupo de preparación para comparar y se les dio ULD anti-Cbl, 1 tableta 3 veces al día. i I ; 20 pacientes se incluyeron en el grupo con placebo y se les dio 1 tableta 3 veces al día (una tableta de lactosa granulada y excipientes sin ingrediente activo alguno). El tratamiento duró 12 semanas. Los tres grupos de pacientes eran comparables en cuanto a los indicadores iniciales demográficos, antropométricos y clínicos. Todos los pacientes tenían dependencia de la nicotina en menor grado, de acuerdo a la Prueba de Fagerstróm test (menos de 4 puntos), habían fumado no menos de un año y tenía obesidad grado uno (1) (índice de masa corporal [BMI] = 30,0-34,9 kg/m2). Todos los pacientes del estudio concluyeron el tratamiento en los períodos requeridos por el protocolo del estudio; ningún l ! paciente se retiró antes de tiempo. j ! . . . 1 En el análisis de los datos puede apreciarse que el número de pacientes que dejó de fumar aumentó entre quienes recibieron ULD anti-S100HJLD anti-CBl y ULD anti-CBl (Tabla 9). En el grupo con ULD anti-S100+ULD la porción de pacientes que dejó de fumar en 4 semanas de tratamiento fue 23%; en 8 semanas, 36%; y al final de las 12 semanas alcanzó 41%. En el grupo con ULD anti-CBl 1 los indicadores correspondientes fueron 12%, 24%iy 29% (versus 5%, 5% y 10%, respectivamente, en el grupo cón placebo). La diferencia en la eficacia del tratamiento de acuerdo al parámetro principal de j eficacia, comparado al tratamiento con placebo fue 31% (para el grupo con ULD anti-S100+ULD) y I 19% (para el grupo con ULD anti-CB 1 ) y fue estadísticamente significativa. 1 I En la evaluación del efecto de ULD anti-S100+ULD anti-CBl se observó una disminución substancias del tabaquismo, tanto para el grupo como un todo como para el subgrupo de pacientes que no \ pudieron dejar de fumar. La puntuación total promedio inicial de la Prueba de Fagerstróm fue 2,67±0,14. ¡ En 12 semanas de tratamiento disminuyó a 1 ,33=1=0,14; además, la disminución fue estadísticamente significativa, no sólo al compararla con los indicadores iniciales, sino también al compararla con el grupo de placebo. Los pacientes que recibieron ULD anti-CBl y no dejaron de fumar demostraron también una ¦ dinámica positive con respecto a la manifestación de su tabaquismo, el cual fue significativamente i ! [ inferior al finalizar los 3 meses de tratamiento, en comparación con los niveles iniciales y con el placebo.

En el análisis de los datos de la Escala de estado de ánimo y síntomas físicos (MPSS, Mood and Physical Symptoms Scale) se observó que los síntomas de abstinencia de la nicotina disminuyeron I j i ¡ 40 j ¡ 1 i ¡ gradualmente entre los pacientes que dejaron de fumar, alcanzando valores mínimos 12 semanas después de comenzar el tratamiento, tanto con ULD anti-SlOO+ULD anti-CBl como con ULD anti-CBl (Tabla 9). La puntuación total más baja se registró en eí grupo con ULD anti-SlOO+ULD anti-CBl, lo que demostró que la administración de la combinación de ULD anti-SlOO+ULD anti-CBl y ULD anti-CBl hizo posible soportar dejar de fumar más fácilmente y sin dolor, incluyendo comparado con ULD anti- CB1 tomado solo. ! Tabla 9 Dinámica de los indicadores básicos de endiendo de la forma de tratamiento Nota: * importancia estadística de las diferencias con el grupo de placebo, p<0,05; ** Importancia estadística de las diferencias entre los grupos de ULD anti-SlOO+ULD anti- CBl y ULD anti-CBl, p<0,05; i # Importancia estadística de las diferencias con los valores iniciales.

Todos los grupos de pacientes incluidos en el estudio tenían obesidad en primer grado. El índice de masa corporal (BMI, Body Mass Index) se midió a intervalos regulares en los pacientes de todos los grupos del estudio. Los resultados del estudio se presentan en la Tabla 10.

Tabla 10 Diferencias romedio entre el eso inicial y actual (en kg.) en cada visita Nota: Para evaluar la importancia estadística del cambio, se utilizaron los criterios de doble cara de Student en la modificación de Dunnett para hacer comparaciones de peso en la visita de control (visita 0), con todas las visitas posteriores.

Las diferencias significativas (p<0,05) se señalan con asteriscos.

Como resultado del ciclo de tratamiento de 12 semanas, la masa corporal disminuyó significativamente en ambos grupo de prueba, en comparación con el de placebo. En 3 meses de tratamiento, casi la mitad de los pacientes (52% y 47%) de los dos grupos de tratamiento redujo su peso en 5% ó más, en comparación con el estado inicial (comparado con 15% de los pacientes del grupo con placebo; con p<0,05) (Ilustración 3).

En la evaluación de la seguridad del tratamiento, realizada sobre la base del registro de efectos secundarios durante el período del tratamiento y ; en un estudio de seguimiento de los indicadores de laboratorio se observó buena tolerancia tanto a ULD anti-S100+ULD anti-CBl como a ULD anti-CBl . En el análisis de seguridad se incluyeron los datos de todos los pacientes que participaron en el estudio (n==59). No se observó efecto secundario alguno: del tratamiento sobre el sistema nervioso central; no hubo indicadores de consecuencias psiquiátricas. Esta conclusión se confirmó monitoreando los indicadores con el uso de la Escala de ansiedad y 'depresión hospitalaria (HADS) (Tabla 9). ULD anti-S100+ULD anti-CBl demostraron tener un efecto positive sobre los síntomas de ansiedad y depresión, los cuales se redujeron significativamente hacia el final del tratamiento, en comparación tanto con los valores iniciales como los del grupo con placebo.; No hubo efectos secundarios. En los indicadores de laboratorio, incluyendo los análisis generales y bioquímicos de sangre y los análisis clínicos de orina, no se observaron desviaciones significativas con respecto a los valores normales.

Por lo tanto, en el estudio se demostró la eficacia y seguridad de la combinación de ULD anti-S100+ULD anti-CBl y ULD anti-CBl en el tratamiento del tabaquismo. Los efectos de los tratamientos resultaron evidentes por el alto porcentaje de pacientes que dejó de fumar, la reducción de los síntomas de abstinencia en el transcurso del tratamiento y la reducción de la dependencia de la nicotina en los pacientes que no pudieron dejar de fumar. Todos los efectos observados fueron estadísticamente i significativos, en comparación con el grupo de placebo. La eficacia de la combinación ULD anti- S100+ULD anti-CBl superó la eficacia de ULD ¡anti-CBl tomado solo. El perfil de seguridad fue i excelente tanto para la combinación ULD anti-S100+ULD anti-CBl como para ULD anti-CBl . Tanto la combinación ULD anti-S100+ULD anti-CBl como ULD anti-CBl no produjeron la aparición de ansiedad y/o depresión de manifestación clínica, j Se demostró además una disminución de la masa corporal en pacientes con obesidad grado 1. ¡ EJEMPLO 9. Se realizó un estudio clínico comparativo, doblemente enmascarado y controlado con placebo para evaluar la combinación de una dosis ultra baja de anticuerpos para la proteína S-100 y dosis j ultra bajas of anticuerpos to CB1 receptor, y dosis ultra bajas of anticuerpos para el receptor CB1, en el tratamiento de dependencia grave de la nicotina. ' Tabletas de 300 mg. saturadas con soluciones de agua-alcohol (6 mg/tab.) de dosis ultra bajas of i anticuerpos policlónicos de conejo para la proteíná S-100 específica del cerebro (ULD anti-SlOO) y to receptor canabinoide tipo 1 (ULD anti-CBl), cada una de ellas obtenida mediante hiper-dilución de la solución matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de las diluciones homeopáticas centesimales C12, C30, C200) se utilizaron en el estudio (ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl). También se utilizaron en dicho estudio tabletas de 300 mg. saturadas con una solución de agua-alcohol (6 mg/tab.) de dosis ultra bajas of anticuerpos policlónicos de conejo para el receptor canabinoide tipo 1 (ULD anti-CBl) obtenidas mediante hiper-dilución de la solución matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de las diluciones homeopáticas centesimales C 12, C30, C200). ¡ Para evaluar la eficacia de ULD anti-SlOO H- ULD anti-CBl en el tratamiento del tabaquismo, se realizó un estudio comparativo, controlado con placebo y doblemente enmascarado en el que participaron 61 pacientes que se asignaron aleatoriamente a tres grupo, como sigue: 18 pacientes al primer grupo (ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl, 1 tableta, 4 veces al día), 22 pacientes al segundo grupo (ULD anti-CBl, 1 tableta 4 veces al día) y 21 pacientes al grupo con placebo (1 tableta, 4 veces al día) (una tableta de lactosa granulada y excipientes sin ingrediente activo alguno) . El tratamiento duró 12 semanas. Los pacientes de los tres grupos eran comparables dé acuerdo a los indicadores iniciales, incluyendo los aspectos demográficos, físicos y de laboratorio. De acuerdo a los resultados primarios de la Prueba de Fagerstrom, todos los participantes tenían dependencia fuerte de la nicotina (> 7 puntos) y habían fumado durante más de tres años. En el transcurso de las visitas mensuales se monitoreó a los pacientes y se les hizo exámenes y análisis físicos y de laboratorio (Prueba de Fagerstrom, Escala de ansiedad y depresión hospitalaria [HADS]). Los síntomas de abstinencia se midieron (Mood and Physical Symptoms Scale [MPSS]) en los pacientes que dejaron de fumar. Todos los pacientes concluyeron el tratamiento en los periodos requeridos por el protocolo del estudio; ningún paciente se retiró antes de tiempo.

Los resultados del estudio se presentan en la1 Tabla 1 1 : Tabla 11. Dinámica de los indicadores básicos, dependiendo de la forma de tratamiento j Nota: * Las diferencias con el grupo de placebo son estadísticamente significativas, con p<0.05; * * Las diferencias entre los grupos ULD anti-S 100 + ULD anti-CB 1 y ULD anti-CB 1 son estadísticamente significativas, con p<Q.05; # Las diferencias con los indicadores iniciales son estadísticamente significativas, con p<0.05.

En el grupo ULD anti-S 100 + ULD anti-CBl la porción de pacientes que dejó de fumar en 4 semanas de tratamiento fue 11%; en 8 semanas, 22%; y al final de las 12 semanas llegó a 30%. En el grupo ULD anti-CBl, los indicadores correspondientes fueron 9%, 14%) y 23%> (versus 5%, 5% y 10%, respectivamente, en el grupo con placebo). ; Las manifestaciones del tabaquismo disminuyeron substancialmente al administrar ULD anti- S100 + ULD anti-CBl, tanto para el grupo como; un todo como para el subgrupo de pacientes que no fueron capaces de dejar de fumar (ver la Tabla 11). Sus puntos totales promedio iniciales con la Prueba de Fagerstrom fueron 8,92±0,34, los cuales disminuyeron casi dos veces en las 12 semanas de tratamiento, a 4,50±0,26. Además, la disminución fue estadísticamente significativa, no solamente en comparación con los valores iniciales, sino también comparándolos con el grupo ULD ahti-CBl y el i i grupo con placebo. i Al administrar la combinación ULD anti-SlOO + ULD anti-CBl los pacientes mostraron también ; una disminución estadísticamente significativa de los síntomas de abstinencia, en comparación tanto con I el grupo con ULD anti-CBl (with p<0,05) como con el grupo con placebo (p<0,005), sobre la base de los datos de la escala MPSS, alcanzando valores mínimos a las 12 semanas después de comenzar el i . ¡ tratamiento ! I También se realizó una evaluación de seguridad. En el análisis de seguridad se incluyeron datos ! de todos los pacientes que participaron en el estudio (n=61) y se realizó sobre la base del registro de 1 efectos secundarios y un estudio de seguimiento de los indicadores de laboratorio. En los resultados del estudio se observa no sólo buena tolerancia a la combinación ULD anti-S100 + ULD anti-CBl y a ULD anti-CBl solo, sino también la ausencia de efectos secundarios conectados a la ingesta de medicinas. No ¡ se descubrió efecto secundario alguno del tratamiento para el sistema nervioso central; no hubo , indicadores de consecuencias psiquiátricas. Esta conclusión se confirmó monitoreando los indicadores ! con el uso de la Escala de ansiedad y depresión hospitalaria (HADS) (Tabla 1 1). ULD anti-S100+ULD anti-CBl demostró tener un efectos positivo sobre los síntomas de ansiedad y depresión, los cuales se redujeron considerablemente hacia el final del tratamiento, en comparación tanto con los valores iniciales I i ! como con el grupo de placebo. No hubo efectos secundarios. En los indicadores de laboratorio, j incluyendo los análisis generales y bioquímicos de sangre y los análisis clínicos de orina, no se ! observaron desviaciones significativas con respecto a los valores normales.

; Por lo tanto, en los resultados del estudió se demostró la eficacia y seguridad de ULD anti- S100+ULD anti-CBl para el tratamiento de la dependencia aguda de la nicotina. Casi un tercio de los ' fumadores pudieron librarse de su dependencia (de la nicotina durante el ciclo de tratamiento de 12 semanas. Según se muestra en la Tabla 1 1 , la eficacia de ULD anti-S100+ULD anti-CBl superó la ; eficacia del placebo de manera estadísticamente significativa. ULD anti-S100+ULD anti-CBl aumentó i considerablemente la capacidad de los pacientes para soportar el dejar de fumar más fácilmente y sin I dolor. Entre los pacientes que no pudieron dejar de fumar en el transcurso de la observación, la ' manifestación de la dependencia de la nicotina disminuyó significativamente al administrarles ULD anti-i S 100+ULD anti-CB 1 en comparación con ambos ULD anti-CB 1 y placebo. i Tanto ULD anti-S l 00+ULD anti-CBl como ULD anti-CBl se caracterizaron por un excelente ! perfil de seguridad y ausencia de efectos secundarios para el sistema nervioso central.

! EJEMPLO 10. : i Se estudiaron los efectos de: i) la combinación de dosis ultra bajas of anticuerpos policlónicos de ; conejo para la proteína S-100 específica del cerebro (ULD anti-SlOO) y dosis ultra bajas of anticuerpos 1 para el receptor canabinoide tipo 1 (ULD anti-CBl), ambas obtenidas mediante hiper-dilución de la i solución matriz inicial 10012, 10030, 100200 veces (mezcla de diluciones homeopáticas centesimales C12, : C30, C200) (ULD anti-S100 + ULD anti-CBl); ii) ULD anti-CBl solo; y iii) ULD anti-S100 solo, sobre I la actividad motora de los ratones para evaluar sus propiedades antinicotínicas. j Se utilizaron 40 ratones blancos mestizos (22-25 g, 1,5 mo.) 10 ratones se dejaron intactos. Al ' resto de los ratones se les administró nicotina subcutáneamente durante 4 días en una dosis de 0,3 mg/kg. ; La administración de nicotina estuvo precedida (1 hora antes) de la administración intragástrica, o bien de agua destilada (control, 0,4 ml/ratón), o ULD anti-S100 (0,4 ml/ratón), o ULD anti-CBl (0,4 ml/ratón), o ! ULD anti-S100 + ULD anti-CBl (0,4 ml/ratón). 1 30 minutos después de la última administración de I nicotina se realizó una prueba "campo abierto". Se colocó a los animales en el centro de una instalación ' foto-sensible TruScan (Coulbourn, USA) donde se registró automáticamente su actividad locomotora vertical y horizontal durante dos (2) minutos. El modelo "campo abierto" permite evaluar el efecto de los \ compuestos sobre la actividad locomotora de los animales (Gershenfield H.K., Neumann P.E., Mathis C, 1 Crawley J.N., Li X., Paul S.M. Mapping quntátive Trait Lóci for Open-Field Behavior in Mice. j Behavioral Genetics. - 1997. - Vol. 27. - No 3. - p. 201-209, el cual se incorporado aquí mediante ' referencia en su totalidad y para los fines indicados). Parámetros de la instalación: tamaño 270x270x360 mm., dividido en 64 cuadrados, 2,5 x 2,5, con aberturas de 25 mm. situadas en el piso de la plataforma, iluminación con lámpara de 150 vatios. i ! La nicotina es un alcaloide que se encuentra en las plantas de la familia Solanaceae, j predominantemente en el tabaco, y que posee actividad psicotrópica. Se cree que el efecto de la nicotina es indirecto, a través de los receptores N-colina periféricos y centrales. Dependiendo de la dosis, la I introducción de este alcaloide en el cuerpo puede causar el desarrollo de sintomatología de ansiedad- depresión, euforia, excitación o, vice versa, tranquilidad. Además, la aplicación prolongada de la nicotina I produce dependencia. Las preparaciones utilizadas' para hacer más fácil dejar de fumar, tienen el objeto, j enlre otros, de eliminar los cambios patológicos déla esfera psico-emocional, lo cual facilita la liberación ; del paciente de la predilección patológica del tabaco.

En el presente estudio la administración de nicotina produjo un aumento de la actividad motora de los ratones: el tiempo de actividad aumentó en 8;,2% (p<0,05), la distancia viajada en 5,1%, la cantidad i ' de aberturas investigadas en -78,2% (p<0,05), el tiempo de reacción al estudio en 76,9%, mientras que el ! tiempo de inmovilidad, a la inversa, disminuyó en 13,5% (p<0,05), comparado con los animales intactos. I ULD anti-SlOO solo no tuvo un efecto significativo para el control con respecto a los parámetros j específicos investigados. ULD anti-CBl redujo el tiempo de actividad y la distancia viajada por los ratones en el grupo bajo prueba al nivel de los ratones intactos. Sin embargo, ULD anti-CBl no tuvo i efecto alguno sobre el período de inmovilidad, la j cantidad de aberturas y el período de reacción. Al mismo tiempo, la administración combinada de ULD anti-CBl y ULD anti-Sl OO redujo el tiempo de actividad y, correspondientemente, aumentó el tiempo de inmovilidad al nivel de los animales intactos, i reduciendo considerablemente la distancia viajada (en 29,2% comparado con el control y en 25,5% comparado con los animales intactos) y disminuyó algo la actividad (la cantidad de aberturas cayó en 15,3%, el tiempo de reacción cayó en 17,4%).

¦ Así pues, la administración de ULD anti-CB 1 y la administración combinada de ULD anti-CB 1 y ULD anti-Sl OO, contribuye a la eliminación de cambios en el comportamiento de animales causados por la administración de nicotina. El uso de una combinación de ULD anti-CB 1+ULD anti-SlOO füe más eficaz, en comparación con la administración de ULD anti-CB 1 solo.

Tabla 12. Efecto de las preparaciones sobre la actividad motora de los ratones (pruebas a campo abierto , M±m Las diferencias respecto al intacto son estadísticamente significativas: - con p<0,05.

La diferencia respecto al control es estadísticamente significativa; # - con p<0,05; ## - con p<0,01. ; i ¡47 i

Claims

1 Reivindicaciones: I

! 1. Una composición farmacéutica que; consta de una formulación activada y potenciada de ' un anticuerpo para el receptor canabinoide humano.;
' 2. La composición farmacéutica dé la reivindicación 1, en la cual dicho receptor í canabinoide humano es el receptor canabinoide 1 (CB1). 1 3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2, en la cual la formulación activada y : potenciada de un anticuerpo es para la totalidad del receptor canabinoide humano 1.
I
4. La composición farmacéutica de la reivindicación 3, en la cual la totalidad de dicho , receptor canabinoide humano 1 consta de la secuencia proporcionada en SEQ ID No: 1.
; 5. La composición farmacéutica de , la reivindicación 2, en la cual dicha formulación : activada y potenciada de un anticuerpo es para un fragmento de polipéptido del receptor canabinoide ¡ humano 1. ¡ i 6. La composición farmacéutica de da reivindicación 5, en la cual dicho fragmento de
I polipéptido del receptor canabinoide humano 1 ¡se selecciona a partir del grupo que consta de las secuencias proporcionadas en SEQ ID Nos: 2-15. j
7. La composición farmacéutica de¡ la reivindicación 1, en la cual dicha formulación í activada y potenciada de un anticuerpo están en forma de mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y I C200. ;
8: La composición farmacéutica de1 la reivindicación 1, en la cual dicha formulación activada y potenciada de un anticuerpo está en forma de una mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnadas en un portador sólido, j i
9. La composición farmacéutica de la reivindicación 1 , en la cual la formulación activada y potenciada de un anticuerpo para un receptor canabinoide humano es un anticuerpo monoclónico, policlónico o natural.
; 10. La composición farmacéutica de la reivindicación 9, en la cual dicha formulación activada y potenciada de un anticuerpo para un receptor canabinoide humano es un anticuerpo policlónico. I
11. La composición farmacéutica de; la reivindicación 1, en la cual el anticuerpo para el 1 receptor canabinoide humano se prepara mediante diluciones centesimales sucesivas junto con agitación de cada dilución. ¡ I 1
12. El método para tratar la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de las reivindicaciones 1 ó 2. ¡ 1 ! . ¡ 48 i ! ' I
13. El método de la reivindicación 12, en la cual dicha composición farmacéutica se administra a un paciente como una o dos formulaciones posológicas unitarias de una a cuatro veces al día.
14. El método de la reivindicación 13, ¡en el cual dicha(s) formulación(es) posológica(s) se administra(n) dos veces al día. j
15. El método para alterar los parámetros antropométricos de un mamífero, que se espera se beneficie de dicha alteración, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de i las reivindicaciones 1 ó 2.
16. El método de la reivindicación 15, en la que el parámetro antropométrico es la circunferencia de la cintura. i
17. El método de la reivindicación 15, en la que dicho parámetro antropométrico es la relación cintura-altura. !
18. El método de la reivindicación en la que dicho parámetro antropométrico es la relación cintura-cadera.
19. El método de la reivindicación 16, ,en la que la circunferencia de la cintura se reduce por lo menos 1%. ¡
20. El método de la reivindicación 16, ¡en la que la circunferencia de la cintura se reduce por lo menos 2%. '
21. El método de la reivindicación 16,' en la que la circunferencia de la cintura se reduce por lo menos 3%. ¡
22. El método de la reivindicación 16,¡ en la que la circunferencia de la cintura se reduce por lo menos 1 cm. ;
23. El método de la reivindicación 16¿ en la que la circunferencia de la cintura se reduce por i lo menos 3 cm. ¡
24. El método para reducir la masa corporal de un mamífero, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de las reivindicaciones 1 ó 2.
25. El método de la reivindicación 24, en la cual la masa corporal se reduce por lo menos 5%.
26. El método de la reivindicación 24, en la cual la masa corporal se reduce por lo menos 10%.
27. El método de la reivindicación 24, en la cual la masa corporal se reduce por lo menos 15%. i
28. El método de la reivindicación 24,1 en la cual la masa corporal se reduce en menos 15%.
29. El método para reducir el crecimiento de masa corporal de un mamífero, consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de las reivindicaciones 1 ó 2. i i
30. El método de la reivindicación 29, en la cual el crecimiento de masa corporal se reduce i por ló menos 10%. i 1
31. El método de la reivindicación 29, én la cual el crecimiento de masa corporal se reduce por lo menos 30%. ' i ¡
32. El método para facilitar la reducción del consumo de alimentos en un mamífero, que se ! espera se beneficie de dicha reducción, consistiendo dicho método en administrar la composición ' farmacéutica de la reivindicación 1. ¡ I
33. La composición farmacéutica de las reivindicaciones 1 ó 2, que consiste además en la : formulación activada y potenciada de un anticuerpo ,para la proteína S-100. i
34. La composición farmacéutica de la reivindicación 33, en la cual el anticuerpo para la ¡ proteína S- 100 es un anticuerpo para la totalidad de la proteína S- 100.
' 35. La composición farmacéutica de la reivindicación 34, en la cual la totalidad de dicha I proteína S- 100 consiste en la secuencia proporcionada en SEQ ID No: 16. I
36. La composición farmacéutica de la reivindicación 33, en la cual el anticuerpo para la ' proteína S-100 está en forma de una mezcla de diluciones homeopáticas C12, C30 y C200 impregnadas en el portador sólido. j 37. La composición farmacéutica de la reivindicación 33, en la cual el anticuerpo para la proteína S-100 es un anticuerpo monoclóriico, policlónico o natural. 38. La composición farmacéutica de la reivindicación 37, en la cual el anticuerpo para la proteína S-100 es un anticuerpo policlónico. 1 i 39. La composición farmacéutica de la reivindicación 36, en la cual el anticuerpo para la proteína I S- 100 se prepara mediante diluciones centesimales sucesivas j unto con agitación de cada dilución.
' 37. (sic) El método para tratar a un paciente que sufre de adicción a sustancias psicoactivas, ' consistiendo dicho método en administrar la composición farmacéutica de la reivindicación 33.
38. El método de la reivindicación 37, en la cual dicha sustancia psicoactiva es la nicotina. I ¡
¡ 39. El método de la reivindicación 38, en la cual la administración de dicha combinación ; produce una mejoría estadísticamente significativa de la capacidad para tolerar el abandono del tabaquismo, medido con un análisis de datos de la prueba MPSS.
40. El método de la reivindicación 38, en la cual la administración de dicha combinación ! i ¡ produce una reducción estadísticamente significativa del hábito de fumar en pacientes con tabaquismo ¡ moderado, medido con la Prueba de Fagerstrom para dependencia de la nicotina. I i I
41. El método de la reivindicación 38!, en la cual la administración de dicha combinación I produce una reducción estadísticamente significativa del hábito de fumar en pacientes con fuerte adicción a la nicotina, según mediciones de la Prueba de Fagerstróm para dependencia de la nicotina. i ¡
! 42. El método de adicción a sustancias psicoactivas que consiste en administrar la ' composición farmacéutica de la reivindicación 33. !
43. La composición farmacéutica para usar en el tratamiento de pacientes que sufren de adicción a sustancias psicoactivas, habiéndose obtenido dicha composición proporcionando: a) una í . ¡ . , solución potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano; y b) una solución potenciada de una formulación activada y potenciada de un ¡anticuerpo para la proteína S-100, cada una de ellas preparada mediante dilución repetida consecutiva y agitación vertical múltiple de cada solución obtenida, de acuerdo con la tecnología homeopática, y después, o bien combinando las soluciones potenciadas mediante su mezclado o, alternativamente, impregnando una pasa portadora con dicha solución combinada o con las soluciones por separado. !
44. La composición farmacéutica para usar en el tratamiento de la obesidad y trastornos j metabólicos relacionados, habiendo sido obtenida dicha composición proporcionando una solución potenciada de un anticuerpo para el receptor canabinoide humano, preparada mediante dilución repetida ' consecutiva y agitación vertical múltiple de cada solución obtenida, de acuerdo con la tecnología j homeopática, e impregnando después opcionalmenté una masa portadora con dicha solución. j
45. El método de la reivindicación 37,; en la cual la adicción a la sustancia psicoactiva es a la i I , nicotina. 1