MX2011011905A - Metodo de tratamiento de debilidad. - Google Patents

Abstract

Se describe un método de tratamiento o de prevención de la debilidad en un paciente de edad avanzada, particularmente, teniendo una edad de 60 años o más. El método provee la administración parenteral acompañante de una combinación de un esteroide anabólico y un compuesto de vitamina D. Una combinación preferida comprende decanoato de nandrolona y colecalciferol (Vitamina D3). La invención, en otra preferencia, provee una terapia reforzadora para apoyar a las personas de edad avanzada débiles, que han experimentado una hospitalización o una cirugía, con el fin de retener la independencia y recuperar sus actividades físicas y mentales regulares.

Description

METODO DE TRATAMIENTO DE DEBILIDAD Campo de la Invención La invención se refiere a un método de tratamiento ;de la debilidad en un paciente de edad avanzada. La invención también se refiere a una composición farmacéutica para usar en tal método. La invención se refiere, particularmente, a una terapia con reforzador de recuperación para personas débiles de edad avanzada.

Antecedentes de la Invención La debilidad es un síndrome clínico con síntomas como bajo peso corporal, debido a una pérdida de ' peso involuntaria, agotamiento, debilidad, caminar lentamente y baja actividad física. La debilidad está caracterizada por una reserva y resistencia disminuida con respecto á los factores estresantes, a su vez, resultando del descenso acumulado a través de sistemas fisiológicos múltiples, y causando una vulnerabilidad a resultados adversos¡. La incrementada resistencia a la insulina, el síndrome metabólico y osteoporosis se suman a éstas.

Una definición ampliamente usada de este síndrome geriátrico complejo propuesta por Fried et al., (2001) J Gerontol A Biol Sci Med Sci 56 : M146 -M156 , está basada en una evaluación de cinco características distintas. Un individuo es considerado débil, si posee al menos tres de las REF. No. : 224737 siguientes cinco características: pérdida de ' peso involuntaria en el pasado año; debilidad en la fuerza de agarre; baja resistencia/agotamiento; lentitud; y nivel bajo de actividad física. i La debilidad ha sido asociada con los cambios ejn los biomarcadores como IL-6, CRP, 25-OH-Vitamina-D, lGF-1, dímeros D y es en particular, prominente en personas de edad avanzada. En el contexto de la invención, las personas de edad avanzada particularmente tienen una edad de 60 anos o más, y más particularmente de 65 o más.

La debilidad está asociada con una pérdida gradual de i metabolismo deficiente de las proteínas. A su vez, esto afecta las tasas de metabolismo, conduciendo a síndromes como los mencionados anteriormente.

Un aspecto importante de la debilidad es que afeita la I masa muscular y la resistencia, conduciendo a una incidencia incrementada de caídas y está asociada con lesiones como las fracturas y la movilidad impedida. Juntos, con la inmunidad más baja relacionada con la masa muscular, las tasas reducidas de sanación y el deterioro mental, esto conduce a una pérdida de la independencia.

Actualmente, ningún tratamiento ha sido registrado específicamente para el tratamiento de la debilidad. Algunas investigaciones clínicas han sido hechas en el efecto de varios tratamientos sobre síntomas de debilidad individuales.

Esto incluye, por ejemplo, el efecto de esteroides anabólicos sobre la' masa muscular, el cual es bien conocido por la persona experimentada.

Una referencia en el efecto del esteroide anabólico oxandrolona sobre la masa muscular en hombres de edad i avanzada, es Schroeder et al., 2005 J Gerontol A Biol S¿i Med Sci 60:1586-1592. j Las concentraciones séricas bajas de 25-OH-Vit . -D, las cuales son un marcador de la escasez de calcitriol, se ! encuentran comúnmente en las personas de edad avanzada y se encuentran acompañando el desarrollo de los síntomas de debilidad.

Una referencia que recomienda la terapia de vitamina D es Campbell y Szoeke, Journal of Pharmacy Practice y Research, vol.39, no.2, June 2009, 147-151 brindando un aspecto general de los tratamientos farmacológicos alternativos de la debilidad en las personas de ' edad avanzada . Uno de tales tratamientos es aquel de la vitamina D, el cual es referido con respecto a sus efectos sobre los huesos, los músculos y el equilibrio. Otro de los i tratamientos es con las hormonas anabólicas, pero se dice que este tratamiento no presenta beneficios claros en las personas débiles de edad avanzada.

Una referencia sobre terapias emergentes para tratar el síndrome de debilidad en las personas de edad avanzada, es Cherniack et al., Alternative Medicine Review Volume 12, Number 3 2007, pages 246-258. Aquí el enfoque está sobre el suplemento nutricional con, por ejemplo, las vitaminas D, carotenoides , creatina, DHEA (dehidroepiandrosteirona) , o beta-hidroxi-beta-metilbutirato, y en modalidades de ejercicios (tai chi y caminata sobre adoquines)'. El Suplemento con vitamina D es referido como un ; medio promisorio para paliar los componentes del síndrome de debilidad. También, con referencia a las deficiencias de la vitamina D, que ocurren frecuentemente en las personas de edad avanzada, se ha planteado como hipótesis que el suplemento de la vitamina D podría prevenir la debilidad.

Se demostró que el tratamiento combinado con decanoato de nandrolona, colecalciferol oral (Vitamina D3) , y suplemento de calcio en mujeres, recuperándose de fractura de cadera, mejora la BMD (densidad mineral ósea) , masa muscular y evaluación del andar (Hedstróm et al., J Bone Joint Surg Br 2002; 84: 497-503). El documento no trata sobre la debilidad. Además, los sujetos estuvieron viviendo independientemente y tenían un estado promedio de BMI (índice de masa corporal) de 23, indicando que los sujetos en este estudio noi eran débiles. Mientras el estudio provee la vitamina D en conjunto i con el esteroide anabólico, la revelación, diferente qué, por ejemplo, la referencia anterior de Campbell et al., refleja el conocimiento convencional en enfatizar el papel que desempeña la vitamina D en relación con el hueso, y el j apel que desempeña el esteroide anabólico en relación con el hueso i y el músculo.

El tratamiento eficiente de los síntomas de debilidad es una necesidad médica real no satisfecha, dada la forma én que se desarrolla la patofisiología y el incremento · del costo del cuidado médico asociado. ; i En la paliación y en la prevención de los síntomas de debilidad, se desea que más de los síntomas puedan ser tratados o prevenidos al mismo tiempo. En el tratamiento de la debilidad, se desea proveer una terapia individual que actualmente trata la enfermedad y, particularmente, apunta a la capacidad y la independencia funcionales mejoradas, las cuales son los criterios finales preferidos para los pacientes de edad avanzada. Una consecuencia típica 'de la debilidad es que los pacientes son sometidos a una espiral descendente de decadencia, y casi inevitablemente, se encaminará hacia la admisión en un cuidado a largo pla?o. Se desea prevenir y revertir la de otra forma inevitable decadencia ulterior, y permitir a los pacientes vivir independientemente durante un período de tiempo: más largo. Esto es particularmente crítico para los pacientes que están en recuperación después de la hospitalización, ya que frecuentemente es un punto crucial, en las personas débiles de edad avanzada, conduciendo a estadías prolongadas en un asilo de ancianos (y decadencia ulterior) , en lugar de retener la independencia (y recuperar la actividad física y mental, conduciendo a una salud mejorada) . Por consiguiente, es necesaria la intervención médica.

Breve Descripción de la Invención Con el fin de dirigir mejor uno o más de los deseos anteriores, la invención, en un aspecto es un método de tratamiento o de prevención de la debilidad en un paciente de edad avanzada, particularmente, teniendo una edad de 60 años o más, comprendiendo la administración parenteral acompañante de una dosis efectiva de una combinación de un estéroide anabólico y un compuesto de vitamina D.

En otro aspecto, la invención presenta una composición que comprende un estéroide anabólico y un compuesto de vitamina D, para usar en el tratamiento de la debilidad en un paciente de edad avanzada, particularmente, teniendo una. edad de 60 años o más, comprendiendo la administración parenteral acompañante de dosis efectivas de un estéroide anabólico y de un compuesto de vitamina D.

En incluso otro aspecto, la invención es una composición farmacéutica que comprende un estéroide anabólico ;y un compuesto de vitamina D en un portador líquido adecuado para la administración parenteral.

En aún otro aspecto, la invención incluye un dispositivo de inyección para la administración intramuscular de un líquido, donde el líquido es uno que comprende un estéroide anabólico y un compuesto de vitamina D, en un portador líquido adecuado para la administración parenteral.

Breve Descripción de las Figuras La Fig. 1 es un diagrama de barras que muestra el efecto de nandrolona y la, 25 -dihidroxivitamina D3 ( HVD3) sobre el cambio en el porcentaje de las células con expresión de recetor de andrógeno positivo (AR) , en las células musculares del esqueleto humano (células satélites) lote hSkMC 1, después de 5 días de tratamiento con nandrolona y/o DHVD3. Testosterona fue usada como referencia.

La Fig. 2 es análoga a la Fig.l, muestra los efectos sobre la expresión de receptor positivo de la vitamina D (VD3R) .

Las Figs . 3a y 3b son diagramas de barras que muestran el efecto de dos concentraciones de nandrolona y la, 25 -dihidroxivitamina D3 (DHVD3) sola y aquella de sus combinaciones, sobre la proliferación de células musculares del esqueleto humano (lotes hSkMC 1 y 2) que es usada como una medida para la masa muscular.

Descripción Detallada de la Invención La invención est relacionada con el tratamiento de la debilidad. El término "debilidad" es definido aquí, particularmente, con referencia a la definición anteriormente mencionada (Fried et al., 2001). Los pacientes a ser tratados serán, generalmente, los seres humanos de edad avanzada, ambos, hombres y mujeres, teniendo, usualmente, una edad de 60 años o más. Más particularmente, los pacientes tratados son personas de edad avanzada, teniendo una edad de 65 años o más .

En un sentido general, la invención está basada 'en el reconocimiento de que los estudios poco sistemáticos actuales orientados a los síntomas individuales de la debilidad no son suficientes para conducir a un tratamiento real. La invención se dirige a la provisión de un tratamiento por una ruta de administración específica de una combinación juiciosa de sustancias activas. Sin el deseo de estar limitado por la teoría, los inventores creen que la eficacia de la administración parenteral combinada de un esteroide anabólico, preferiblemente, decanoato de nandrolona, y un compuesto de vitamina D, preferiblemente, Vitamina D3 (colecalciferol) está basada sobre un efecto sinérgico' entre los dos compuestos, particularmente, sobre la masa muscular y la función muscular. Esta creencia está basada en la acción molecular de los receptores para los dos compuestos, y los senderos que los dos compuestos pueden activar eh los mioblastos/las células satélites. Ambos, el receptor andrógeno y el receptor de la Vitamina D pertenecen1 a la familia de los factores de transcripción nuclear, pe o su respectivo modo de acción es muy diferente. El receptor de la i Vitamina D es conocido por estar involucrado en la proliferación y en la diferenciación celular. El receptor andrógeno está involucrado en el crecimiento celular. En combinación, por consiguiente, se cree que estos conducen a una estimulación más óptima del crecimiento celular muscular. Además, la administración de un esteroide anabólico, acompañada de un compuesto de vitamina D, sé cree que afecta positivamente la actividad del receptor de la vitamina D, y la vitamina D afecta positivamente el sistema i neuromuscular .

La invención involucra la administración paréñteral acompañante de dosis efectivas de un esteroide anabólico y un compuesto de vitamina D. i El término "administración acompañante" es bien entendido en el arte, y generalmente se refiere !a la administración de dos sustancias activas al mismo tiempo, o casi al mismo tiempo. En la presente invención esto significa que ambos compuestos son administrados dentro del mismo intervalo de tiempo. Por consiguiente, si uno dé los compuestos es administrado diariamente, el otro compuesto también es administrado diariamente, en el mismo día. Si uno de los compuestos es administrado semanalmente, el otro compuesto también es administrado semanalmente, en la misma semana. Si uno de los compuestos es administrado mensualmente, el otro compuesto también es administrado mensualmente, en el mismo mes. Debe quedar entendido que los términos "día", "semana" y "mes" no necesariamente se refieren al día, semana o mes calendario, sino á los intervalos de tiempo que tienen las extensiones respectivas . Preferiblemente, ambos compuestos son administrados directamente uno después del otro y más preferiblemente son administrados simultáneamente. Mayormente preferible, la administración simultánea es efectuada a través de una composición individual comprendiendo ambos compuestos. ' El término "administración parenteral" es bien entendido en el arte y generalmente se refiere a todas las rutas de administración diferentes a aquellas realizadas a través del tracto gastrointestinal, incluyendo pero no limitándose a la administración intramuscular, intravenosa, subcutánea, transdérmica, transmucosa, o administración por inhaláción.

En la invención, la administración parenteral es I preferiblemente, intramuscular o inyección subcutánea.

Con una vista al grupo de pacientes tratados;, las personas de edad avanzada, la ruta de administración mayormente preferida es mediante la inyección subcutánea. Las personas de edad avanzada son caracterizadas frecuentemente por tener baja masa muscular (particularmente, si sufren de debilidad) . Por el otro lado, ellos tienden a tener piel relativamente grande, con muchos dobleces. Por consiguiente, especialmente en el tratamiento de la debilidad, la inyección subcutánea tiene una particular ventaja de ser mucho más fácil, y menos dolorosa para el paciente, que la inyección intramuscular .

Estos compuestos son administrados en dosis efectivas. El término "dosis efectiva" es bien entendido en el arte. En f rmacología, la dosis efectiva es la dosis medianá que produce el efecto deseado de un fármaco. La dosis efectiva es a menudo determinada con base en el análisis de la relación dosis-respuesta específica para el fármaco. La dosificación que produce un efecto deseado en la mitad de una población de ensayo se refiere como ED-50, y esto es generalmente reconocido como una dosis efectiva. En el contexto 'de la invención, la dosis es considerada efectiva si sirve para paliar una pluralidad (es decir, dos o más) de los síntomas de la debilidad. Las dosis efectivas preferidas sirven! para tratar la enfermedad de la debilidad, como puede ser evaluada a través de los adecuados biomarcadores y/o criterios finales clínicos adecuados. En el contexto de la invención, el término "dosis efectiva" está relacionado con la dosis i combinada de las dos sustancias activas. La dosis efectiva, y el intervalo de dosificación pueden a veces ser elegidos diferentemente entre los pacientes masculinos y las pacientes femeninas. Por ejemplo, las dosis de esteroide androgénico anabólico pueden ser más altas en los hombres. Además, las mujeres tienden a sufrir de debilidad a una edad más joven que los hombres, y pueden requerir de una terapia prolongada de dosis regulares, mientras un hombre que se torna débil a una edad mayor y puede requerir de una terapia reforzadora de recuperación de una duración corta y de una intensidad más alta. ; La combinación de sustancias activas de la invención comprende un esteroide anabólico. El término "estéroide anabólico" es bien entendido en el arte como una clase de hormonas esteroides relacionada con la hormona testostérona . Para una revisión de los esteroides anabólicos, se ha hecho referencia a A.T. Kicman, British Journal of Pharmaéology (2008) 154, 502-521. Los esteroides anabólicos generalmente tienen efectos anabólicos y androgénicos sobrepuestos y por l eso algunas veces son denotados como esteroides androgénicos anabólicos (AAS, por sus siglas en inglés) . La relación androgénica: anabólica de un AAS es un factor importante cuando se determina la aplicación clínica de estos compuestos. Quedará entendido que en la presente invención, es deseado que el efecto anabólico (miotrófico) , el cual facilita el crecimiento de las células musculares, preceda el efecto androgénico. A este respecto, el esteroide anabólico es preferiblemente seleccionado entre el grupo que consta de norboletona, oximetolona, oxandrolona, nandrolona, y ésteres de éstas. El esteroide anabólico preferido para; usar en la presente invención es nandrolona o un éster de ésta, mayormente preferible, decanoato de nandrolona.

De acuerdo con la invención, decanoato de nandrolona es preferiblemente administrado (preferiblemente, mediante la inyección intramuscular y más preferiblemente, mediante la inyección subcutánea) una vez mensualmente , ¡ más preferiblemente, una vez cada tres semanas y, mayormente preferible, semanalmente . La cantidad de dosificación ; total administrada por intervalo de tiempo puede variar, generalmente, desde 15 mg, preferiblemente, 25 mg por mes hasta 600 mg, preferiblemente, 400 mg por semana. En el tratamiento de la debilidad, de acuerdo con la invención, es preferido que la dosis no sea demasiado baja. A la vista de los efectos androgénicos inevitables también es preferido que la dosificación no sea demasiado alta¡. Las dosificaciones preferidas que son lo. más bajas posible, y que son tan altas como necesario, están en el intervalo por semana desde 5 mg, preferiblemente, desde 10 mg, hasta 100 mg, preferiblemente, 50 mg, o por mes desde 20 mg, preferiblemente, 40 mg hasta 400 mg, preferiblemente, 200 mg.

Si se utiliza otro esteroide anabólico, los intervalos de dosificación preferidos son equivalentes a aquellos mencionados para el decanoato de nandrolona. La persona experimentada en el arte está al tanto de cómo calcular las conversiones de dosificación entre varios esteroides anabólicos. i La combinación de las sustancias activas de la invención comprende el compuesto de vitamina D. En el contexto de la invención, el término "compuesto de vitamina D" se refiere a la vitamina D y las varias formas de esta, así como también a los precursores y los análogos de la vitamina D. Esta ! clase de compuestos es bien conocida en el arte. Preferiblemente, I el compuesto de la vitamina D es una de las formas comunes de la vitamina D, y es seleccionada entre el grupo que con$ta de ergocalciferol, colecalciferol , calcidiol, calcitriol, doxercalciferol , y calcipotrieno . La forma mayormente preferida de la vitamina, para usar en la invención es colecalciferol (Vitamina D3) .

En la invención es preferido administrar la vitamina D en una intensidad de dosificación conduciendo a un nivel de plasma por encima de aquel asociado con el déficit 'de la vitamina D. El déficit de la vitamina D es definido, generalmente, como una concentración de plasma de 25-hidroxivitamina D de menos que 20 ng/mL (50 nmol/L)¡ . Las concentraciones de plasma de > 140 nmol/L han sido asociadas con los efectos adversos. Por eso, la dosificación preferida del compuesto de la vitamina D es seleccionada así como para i proveer un nivel de plasma de entre 50 y 70 nmol/L y 140 nmol/L.

De acuerdo con la invención, el compuesto de vitamina D preferido, colecalciferol, es preferiblemente, administrado (mayormente preferible, mediante la inyección intramuscular) una vez mensualmente , más preferiblemente, una vez cada tres semanas y, mayormente preferible, semanalmente . La dosificación para colecalciferol está en el intervalo ' desde el equivalente parenteral de una dosis oral de 100 ¡hasta 4.000 IU/día (Unidades Internacionales), o las dosis correspondientes por semana o mes. Sin embargo, son posibles las cantidades de dosificación parenteral tan altas | como 600.000 IU (15 mg) de colecalciferol intramuscular.

Los compuestos anteriormente mencionados, preferiblemente, están comprendidos en una composición farmacéutica individual adecuada para la administración I parenteral. Más preferiblemente, esto se refiere á una composición farmacéutica que comprende un esteroide anabólico y un compuesto de vitamina D, preferiblemente, la combinación de decanoato de nandrolona y colecalciferol , en un portador líquido adecuado para la administración parenteral. El líquido portador, preferiblemente, es un aceite,, más preferiblemente, es seleccionado entre el grupo que consta de aceite de araquis, aceite de semilla de algodón, y aceite de sésamo .

Sin el deseo de estar limitado por la teoría> los inventores creen que el hecho de que ambos, el esteroide anabólico y el compuesto de la vitamina D (y particularmente ambos, el decanoato de nandrolona y el colecalciferol) , son solubles en aceite, pueden contribuir a un efecto mutualmente beneficioso en la estabilidad de una preparación de inyección basada en aceite. Además, la combinación, en una preparación de inyección individual de los dos compuestos facilita la administración acompañante, es menos invasiva para el paciente y sirve para dirigir una mejor acomodación con el régimen de administración de ambos fármacos .

Quedará entendido que la composición farmacéutica de la invención puede comprender otros excipientes como normalmente son usados en tales preparaciones. Los excipientes, los aditivos, los adyuvantes y los productos similares, para usar en las formas de dosificación parenteral, son conocidos para la persona experimentada, y no requieren de una aclaración aquí .

En el tratamiento de la debilidad, la composición 'de la invención será, generalmente, administrada durante un período de al menos 3 meses hasta 12 meses, preferiblemente, durante 4 hasta 8 meses y mayormente preferible durante 6 meses. La invención provee una - intervención médica nueva en el tratamiento de la debilidad en los pacientes de ; edad avanzada .

Mientras este tratamiento de la debilidad es sin precedentes, los inventores creen (sin el deseo de estar limitado por la teoría) , que la intervención médica ;de la invención tiene otros beneficios.

Esto se refiere, particularmente, al punto crucial mencionado anteriormente, en el cual un paciente de edad avanzada, que sufre de debilidad, después dé la hospitalización puede que no pueda ser capaz de de retener por más tiempo su independencia. Las estadías prolongadas en asilos de ancianos, también con terapias físicas y mentales apropiadas, inherentemente privan a estos pacientes de una herramienta importante en la prevención de una espiral descendente, como tal, la independencia de vivir sus propias vidas, con actividad física y mental regular día a día.

A este respecto, la invención está basada en el concepto i de que la intervención médica adecuada en un paciente en un tal punto crucial, puede no solamente tratar la enfermedad de la debilidad per se, pero sirve para apoyar al paciente en la retención de la independencia, y recuperar la actividad física y mental. Con el fin de apoyar así a estos pacientes hacia una salud mejorada, la invención también provee una terapia reforzadora de recuperación para personas débiles de edad avanzada, particularmente, después de la hospitalización o de la cirugía. En este aspecto de la invención!, una dosificación relativamente alta de las dos sustancias activas, preferiblemente, el decanoato de nandrolona ¡ y el colecalciferol, es administrado a una frecuencia relativamente alta, preferiblemente, semanalmente, durante un período de tiempo que es lo suficientemente largo para proveer la acción farmacológica requerida, incluso lo suficientemente baja para sentirla como una terapia i reforzadora a corto plazo (para recuperar la independencia) , en lugar de la medicación permanente (lo cual podría reflejar una enfermedad crónica) . Una duración preferida del Í tratamiento reforzador es desde 4 hasta 8 freses, preferiblemente, de 6 meses.

La invención también está relacionada con prevención de la debilidad en pacientes que son propensos a tornarse débiles después de ' la hospitalización. Generalmente, estos I pacientes estarán más allá de un estado de sarcopenia, y sufren de una función de inmunidad reducida.

Es preferido que la terapia reforzadora anteriormente mencionada sea conducida usando, después de cada administración, una composición farmacéutica individual comprendiendo ambos de los compuestos.

Los dispositivos para la administración parenteral de los compuestos usados en la invención, son conocidos por la persona experimentada. Basado en hardware conocido, como tal, la invención también se refiere a un dispositivo de inyección para la administración intramuscular de un líquido, doftde el líquido es una composición de acuerdo con la invención, como se describió anteriormente.

La invención es ilustrada, además, en adelante con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes, y las figuras acompañantes . ¡ Los ejemplos son estudios in vitro, los cuales han demostrado que la nandrolona y la, 25-dihidroxivitamina D3 tienen un efecto sinérgico sobre la proliferación de células satélite musculares y por consiguiente, sobre la masa muscular. En consecuencia, la invención apunta a las dosis menores de decanoato de nandrolona usada en los ¡ seres I humanos, con el fin de obtener el mismo efecto sobre la masa muscular y/o la función con la combinación como con el decanoato de nandrolona solo. Esto sirve para dirigir un mejor perfil de seguridad.

Ejemplo 1 Materiales y Métodos Dos diferentes lotes de células musculares del esqueleto humano o células satélites (hSkMCl - obtenido de una i mujer saludable de 33 años de edad- y hSkMC2 - obtenido de una mujer saludable de 64 años de edad) fueron obtenidos por un PromoCell (Heidelberg, Alemania) y cultivados en frascos de acuerdo con las instrucciones del proveedor. Las células fueron recolectadas y almacenadas en nitrógeno líquido hasta usarlas en los experimentos. Las células no fueron usadas en un número de pasaje más alto que 15. Para los experimentos, las células fueron cultivadas a 37 °C y C02 al 5% a una densidad de 3.500-7.000 células/cm2 en medio ; basal (PromoCell) , más la adición de carbón al 5% (Sigma-Aldrich) tratada con suero de bovino fetal (FBS) (PAA, Alemania) , usando placas de 24 pocilios (Costar) hasta aproximadámen e 80% de confluencia. Nandrolona, testosterona y ía,25-dihidroxivitamina D3 fueron adquiridos de Sigma-Aldrich.

Para los estudios del receptor, las células ueron cultivadas durante 5 días con la adición de 1 µ? y 10 µ? de nandrolona (el metabolito activo de decanoato de nandrólona) o 1, 10 y 100 nM de la, 25-dihidroxivitamina D3. Los protocolosde tinción de los receptores de andrógeno y vitamina D, con la visualización subsiguiente mediante los métodos de citometría de flujo, fueron derivados dé las publicaciones de Krishan et al., (2000) y Folgueira et al., (2000) . El método que produjo los mejores patrones de tinción, incluida la fijación de formalina, seguido por la permeabilización de Tween 20 y la doble tinción con anticuerpos primarios sin etiqueta (anti-receptor andrógeno (Epitomics) y receptor de anti-vitamina D (GeneT x) y anticuerpos secundarios etiquetados con fluorófero (IgG1 cabra anti-rata, conjugado con PE (picoeritrina) para la tinción del receptor de la vitamina D y cabra anti-conejo, conjugado con FITC (isotiocianato de fluoresceína) para la tinción del receptor andrógeno, ambos de Rockland) . La tinción cqn los dos anticuerpos secundarios solamente fue usada como fondo. Los receptores de la Fe fueron bloqueados por la incubación con solución amortiguadora conteniendo suero. Todas las soluciones ulteriores contenían Tween 20 (Sigma Aldrich) como detergente para mantener el estado de permeabilidad de las células a través de todo el experimento de tinción entera. La tinción en células no estimuladas y estimuladas fue comparada mediante la determinación de la intensidad de la tinción en las células, así como también la tinción en el % de células. Las mediciones fueron realizadas con un i citómetro de flujo de color dual (Beckman Coulter tipo FC500 Cytomics) . El incremento en el % de las células teñidas, más I allá del punto de ajuste del marcador (en 1% para la tinción de fondo), fue determinado con y sin tratamiento hormon l.

Para los estudios de proliferación, las células fueron cultivadas durante 8 días con 100 y 1.000 nM de nandrolona sola o con 10 y 100 nM de la, 25 -dihidroxivitamina D3 y las combinaciones de nandrolona y de la, 25-dihidroxivitamina D3. El medio y las hormonas fueron remplazados los días 1, 4 y 7. La proliferación fue medida usando el ensayo de resazurina (Stern-Straeter et al., 2008). El análisis estadístico de los datos de la proliferación fue realizado con el ensayo t de Student. , Ejemplo 2 Estudios de Receptores La acción de ambos, de nandrolona y de la,25-dihidroxivitamina D3 , sobre las células es dependiente ;de la presencia de sus receptores cognados. Por eso, nosotros investigamos la presencia de ambos, el receptor de andrógeno y de la vitamina en las usadas células musculares del esqueleto humano. Las Figuras 1 y 2 muestran el efecto de nandrolona y de IOÍ , 2 5-dihidroxivitamina D3 sobre el porcentaje de las células, en las cuales la expresión de los receptores de andrógeno y de la vitamina D cambia comparado con la tinción solo con los anticuerpos secundarios. En ellote hSkMC 2 , las células que incrementan en el número de células con el positivo receptor de andrógeno ;y de vitamina D, son observadas después de la exposición a nandrolona, así como también a la, 2 5-dihidroxivitamina D3 . Los histogramas muestran también un incremento én la intensidad de la tinción en las células, lo cual indica un incremento del número de receptores por célula, cuando estas ya contenían el receptor antes del tratamiento con hormonas . Estos resultados indican que más células recibierón el receptor de andrógeno positivo y que también el número de receptores por célula se incrementó cuando estas ! eran receptores positivos antes del tratamiento. Los efectos en las células hSkMC 1 fueron menos pronunciados (no se muestran los datos) .

Estos estudios de receptores muestran que ambos, el receptor andrógeno y de la vitamina D, están presentes én las células musculares del esqueleto humano, y que la nandrolona y de la, 2 5-dihidroxivitamina D3 , estimulan la expresión de cada uno de los otros receptores.

Ejemplo 3 Estudios de Proliferación ; El incremento en el porcentaje de las células positivas del receptor de andrógeno y de la vitamina D por lo|s dos compuestos, como se muestran en Ejemplo 1, indican que más células pueden responder potencialmente al tratamiento, j La proliferación de las células musculares del esqueleto humano, fue usada como un parámetro de repuesta, con él fin I de probar si la combinación de nandrolona y de la, 25-dihidroxivitamina D3 tiene un efecto sinérgico sobre la masa muscular.

La Figura 3 muestra (a) para las células hSkMC 1 no efecto sobre la proliferación por los compuestos individuales, pero cuando la la, 25 -dihidroxivitamina D3 fue combinada con nandrolona, un efecto significativo fue observado para todas las 4 combinaciones ensayadas (P< 0.001 excepto para 100 n de nandrolona más 100 nM de la, 25-dihidroxivitamina D3 , lo cual es significativo con P< 0.05) . Para el donante 2 (b) las concentraciones más altas de ío¡,25-dihidroxivitamina D3 , mostró un incremento en la proliferación y, nuevamente, las 4 combinaciones mostraron un efecto significativo comparado con el control (P<0.05 excepto para 100 nM de nandrolona más 10 nM de la, 25-dihidroxivitamina D3 , lo cual es significativo con P< 0.001).

Los incrementos en porcentaje sobre el control para los varios tratamientos están presentados en la Tabla 1 más adelante. Para las células hSkMC 1, los incrementos! para todas las combinaciones excede la suma de los incrementos para los compuestos individuales en la combinación. Esto prueba el efecto sinérgico de la combinación de nandrolona más la, 25-dihidroxivitamina D3 sobre las células musculares del esqueleto humano. Para las células hSkMC 2, los efectos sinérgicos son observados en tres de cuatro combinaciones ensayadas .

Tabla 1 : El incremento del porcentaje (% ?) en la proliferación de las células musculares del esqueleto humano (hSkMC 1 y hSkMC 2) mediante nandrolona y la, 25-dihidroxivitamina D3 (dhvit D3) sola, y las combinaciones de los dos compuestos comparadas con el control. ? representa: la suma de %? de nandrolona sola más el %? de dhvit D3 sola, como usado en las varias combinaciones . hSkMC 1 hSkMC 2 %? ? %? ? 100 nM de nandrolona 3 4 1000 nM de nandrolona 1 1 10 nM de dhvit D3 1 1 100 nM de dhvit D3 -5 8 hSkMC 1 hSkMC 2 %? ? %? ? 100 nM de nandrolona + 10 nM de dhvit D3 12 4 11 5 100 nM de nandrolona + lOOnM de dhvit D3 11 -2 13 12 1000 nM de nandrolona + 10 nM de dhvit D3 13 2 1 2 1000 nM de nandrolona + 100 nM de dhvit D3 10 -4 15 9 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (25)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: j

1. Un método de tratamiento de la debilidad ¡en un paciente de edad avanzada, particularmente teniendo una. edad I de 60 años o más, caracterizado porque comprende la administración parenteral acompañante de las dosis efeptivas de una combinación de un esteroide anabólico y de un compuesto de vitamina D. '

2. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la administración es hecha al I menos mensualmente y, preferiblemente, semanalmente . ¡

3. Un método de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque la administración es hecha durante un período de al menos 3 meses, preferiblemente, 6 meses. '¦

4. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el esteroide anabólico es seleccionado entre el grupo que ^consta de norboletona, oximetolona, oxandrolona, nandrolona, ¡y los ásteres de ellos y, preferiblemente, es decanoato de nandrolona. j

5. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el i i I compuesto de la vitamina D es seleccionado entre el grupo que consta de ergocalciferol , colecalciferol , calcidiol, i I calcitriol, doxercalciferol, y calcipotrieno . ¡

6. Un método de conformidad con cualquiera djs las reivindicaciones precedentes, caracterizado porqué la i administración es conducida a través de la inyección parenteral de una formulación individual comprendiendo ambos, el esteroide anabólico y el compuesto de la vitamijna D, preferiblemente, la combinación de decanoato de nandrolona y de colecalciferol . ' i

7. Un método de conformidad con la reivindicación 6, i caracterizado porque la formulación individual comprende una dosificación desde 5 hasta 600 mg de decanoato de nandrjolona, y desde 17.5 µg hasta 15 mg de colecalciferol . ¡

8. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque es como reforzador de recuperación en personas de edad avanzada débiles, particularmente, después de la hospitalización o de la cirugía. i

9. Un método de conformidad con cualquiera una Üe las reivindicaciones precedentes, caracterizado porqué el paciente tiene una edad de 65 o más. :

10. Una composición farmacéutica, caracterizada porque j comprende un esteroide anabólico y un compuesto de vitamina D, en un portador líquido adecuado para la administración parenteral.

11. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada porque el esteroide anabólico es seleccionado entre el grupo que consta de oximetolona, oxandrolona, nandrolona, y los ásteres de ellos y, preferiblemente, es decanoato de nandrolona.

12. Una composición farmacéutica de conformidad don la reivindicación 10 u 11, caracterizada porque el compuesto de la vitamina D es seleccionado entré el grupo que consta de ergocalciferol , colecalciferol , calcidiol, calcitriol, i doxercalciferol , y calcipotrieno .

13. Una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, caracterizada porque comprende desde 5 hasta 600 mg de decanoato de nandrolona, y desde 17.5 µ? hasta 15 mg de colecalciferol .

14. Una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13, caracterizada porque encuentra uso en la prevención de la debilidad, particularmente, como reforzador de recuperación eh las personas que están en estado más allá de la sarcopenia sin tener la debilidad.

15. Una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 14, caracterizada porque el líquido portador es seleccionado entre el grupo que consta de aceite de araquis, aceite de semilla de algodón, y aceite de sésamo.

.16. Un dispositivo de inyección para la administración intramuscular de un líquido, caracterizado porque el liquido es una composición de conformidad con cualquiera dé las reivindicaciones 10 a 15.

17. Una composición, caracterizada porque comprende un esteroide anabólico y un compuesto de vitamina D, para usar en el tratamiento de la debilidad en un paciente de¡ edad avanzada, particularmente, teniendo una edad de 60 años o más, comprendiendo la administración parenteral acompañante de una dosis efectiva de una combinación de un esteroide anabólico y de un compuesto de vitamina D.

18. Una composición de conformidad · con la reivindicación 17, caracterizada porque la administración es hecha al menos mensualmente y, preferiblemente, semanalniente .

19. Una composición de conformidad con la reivindicación 17 ó 18, caracterizada porque la administración es hecha durante un período de al menos 3 meses, preferiblemente, 6 meses.

20. Una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 17 a 19, caracterizada porqüe el esteroide anabólico es seleccionado entre el grupo que consta de oximetolona, oxandrolona, nandrolona, y los éster;es de éstos y preferiblemente, es decanoato de nandrolona.

21. Una composición de conformidad con cualquiera una de las reivindicaciones 17 a 20, caracterizada porque el compuesto de la vitamina D es seleccionado entre el grupo que consta de ergocalciferol , colecalciferol , calcidiol, calcitriol, doxercalciferol , y calcipotrieno .

22. Una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 17 a 21, caracterizada porque la administración es conducida a través de la inyección parenteral de una formulación individual, comprendiendo ambos, el esteroide anabólico y el compuesto de la vitamina D, preferiblemente, la combinación de decanoato de nandrolona y de colecalciferol .

23. Una composición de conformidad cort la reivindicación 22, caracterizada porque la formulación individual comprende una dosificación desde 5 hasta 600' mg de decanoato de nandrolona, y desde 17.5 pg hasta 15 ,mg de colecalciferol .

2 . Una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 17 a 23, caracterizada porque encüentra uso como reforzador de recuperación en las personas de edad avanzada débiles, particularmente, después de la hospitalización o de la cirugía. '[

25. El uso de un esteroide anabólico, preferiblemente, decanoato de nandrolona, y un compuesto de vitamina D, preferiblemente, colecalciferol en la producción de una composición parenteral para un método de tratamiento, cómo se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.