CN102421450B - 治疗虚弱的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗或预防老年患者虚弱的方法，尤其是60岁或更大年龄的老年人。所述方法将合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合进行肠外相伴给药。优选的组合包括癸酸诺龙和胆钙化醇(维生素D3)。本发明进一步优选提供一种加强疗法，以支持进行了住院治疗或手术的虚弱老年人保持独立并重获正常的身体和心理活动。

Description

治疗虚弱的方法
技术领域
本发明涉及治疗老年患者虚弱的方法。本发明还涉及用于这种方法的药物组合物。本发明尤其涉及用于虚弱老年人的恢复加强疗法。
背景技术
虚弱是临床综合症，症状为没有特意减肥而体重较轻、精疲力竭、虚弱、行走缓慢以及身体活动力低。虚弱的特征在于储备和耐应激下降，这反过来是由多个生理系统的累积下降造成的，并且容易产生不良后果，其中包括抗胰岛素、代谢综合症和骨质疏松症增加。
正如Fried等在2001年J Gerontol A Biol Sci Med Sci56：M146-M156(“老年生物科学医药杂志”第56期第146-156页)提出的，该复杂的老年综合症广泛使用的定义基于对五个鲜明特征的评价。如果一个人具有下面五个特征中的至少三个特征，则被认为是虚弱的：在过去的一年中没有蓄意减肥而体重下降；握力较弱；忍耐力差/精疲力竭；缓慢；并且身体活动水平低。
虚弱与像IL-6、CRP、25-羟基维生素-D、IGF-1、D-二聚物这样的生物标记的变化相关，并且在老年人中尤其明显。在本发明中，老年人指尤其为60岁或年龄更大，更特别为65岁或年龄更大的老年人。
虚弱与有效蛋白质代谢的逐渐损耗相关，这又反过来影响代谢率，造成上述提到的综合症。
虚弱的主要方面在于会影响肌肉质量和力度，造成跌倒和相关伤害比如骨折和活动障碍的几率增大。与肌肉质量相关的免疫力下降，与治愈率减小和精神衰退都会造成独立性的损失。
目前，没有记录特别用于治疗虚弱的疗法。已经对各种疗法对个人虚弱症状的作用进行了临床研究，这包括，比如本领域技术人员熟知的合成代谢类固醇对肌肉质量的影响。
Schroeder等在2005J Gerontol A Biol Sci Med Sci60：1586-1592(“老年生物科学医药杂志”第60期第1586-1592页)提及了合成代谢类固醇氧甲氢龙对老年男性肌肉质量的影响。
低血清25-羟基维生素D浓度是缺少骨化三醇的标志，通常出现在老年人身上，并且伴有虚弱症状的发生。
Campbell和Szoeke在Journal of Pharmacy Practice and Research，vol.39，no.2，June2009147-151(“药学实践与研究杂志”2009年6月第39卷第2期第147-151页)中主张维生素D疗法，提供了治疗老年人虚弱的其他药理疗法的概述。一种疗法是使用维生素D治疗，涉及维生素D对骨骼、肌肉和平衡的影响。另一种疗法是使用同化激素，但据说该疗法对虚弱的老年人没有明显的效果。
Cherniack等在Alternative Medicine Review Volume12，Number32007，pages246-258(“替代医学评论”2007年第12卷第3期第246-258页)提及了治疗老年人虚弱症状的新疗法。此文中，重点在于使用比如维生素、类胡萝卜素、肌氨酸、DHEA(脱氢表雄酮)或者β-羟基-β-丁酸甲酯进行营养补充，以及采用运动形式(太极拳(tai chi)和在鹅卵石上行走)。补充维生素D被称为缓和虚弱症状的较好的方法。并且，结合维生素D缺乏频繁地发生在老年人身上，假设补充维生素D可防止虚弱。
等在J Bone Joint Surg Br2002；84：497-503(“骨与关节杂志”2002年84期第497-503页)中指出癸酸诺龙、口服胆钙化醇(维生素D3)和补钙结合治疗妇女髋部骨折显示可提高BMD(骨矿物质密度)、肌肉质量和步态评分(gait score)，该文件没有解决虚弱，而且，受治疗者独立生活并且平均身体重量指数(BMI)为23，这表明该研究中的受治疗者并不虚弱。同时该研究将维生素D与合成代谢类固醇相结合，所公开的内容，除了比如上述Campbell等提到的，反应了强调维生素D对骨骼的作用以及合成代谢类固醇对骨骼和肌肉的作用的传统智慧。
鉴于病理生理学的发展和相关卫生保健成本的提高，虚弱症状的有效疗法并不能真正满足医疗需要。
在缓解和预防虚弱症状时，希望同时能够治疗或预防更多的症状。治疗虚弱时，希望提供真正治疗该症状的单独疗法，尤其是针对提高功能能力和独立性的单独疗法，提高功能能力和独立性是老年患者优选的临床目的。虚弱的典型结果是患者螺旋式下跌，几乎不可避免发展为需要长期看护。希望阻止和逆转其他不可避免的进一步恶化，并使患者在更长时期内独立生活。这对于住院治疗后正在恢复的患者至关重要，因为在虚弱的老年人中这通常是个转折点，造成更长时间待在疗养院(并且进一步恶化)，而非保持独立(并且重获身体和心理活动，由此健康状况得到改善)，因此需要医疗干预。
发明内容
为了更好地满足一个或多个上述需求，本发明一方面提供一种治疗或预防老年患者虚弱的方法，尤其是60岁或年龄更大的患者，包括将合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合进行有效剂量的肠外相伴给药。
在另一方面，本发明提供一种包括合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合物，以用于治疗老年患者的虚弱，尤其是60岁或年龄更大的患者，包括肠外相伴给药的有效剂量的合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合。
在又一方面，本发明提供一种药物组合物，该药物组合物包含在适于肠外给药的载体液体中的合成代谢类固醇和维生素D化合物。
在又一方面，本发明包括一种用于液体的肌肉内给药的注射装置，其中该液体包含在适于肠外给药的载体液体中的合成代谢类固醇和维生素D化合物的组合物。
附图说明
图1为条形图，显示了使用诺龙和/或1α，25-二羟维生素D3(DHVD3)治疗五天后，诺龙和1α，25-二羟维生素D3对人类骨骼肌细胞(卫星细胞)(批量hSkMC2)内具有阳性雄性激素(AR)受体表达的细胞百分比变化的影响，使用睾酮作为参考；
图2类似于图1，显示了对阳性维生素D受体(VD3R)表达的影响；
图3(a)和(b)为条形图，显示了单个诺龙和1α，25-二羟维生素D3(DHVD3)的两个浓度和它们组合的浓度对用于测量肌肉质量的人类骨骼肌细胞(批量hSkMC1和hSkMC2)的增生的影响。
具体实施方式
本发明涉及虚弱治疗，此发明中尤其参照上述的定义(Fried等2001)来定义术语“虚弱”。待治疗的患者通常是老年男性和女性，通常年龄为60岁或更大。更具体地说，待治疗的老年患者年龄为65岁或更大。
广义上来讲，本发明基于目前针对特定虚弱症状的零碎研究不足以引起实际治疗的共识。本发明旨在通过特定给药路径的活性物质的审慎结合提供这样一种疗法。不希望束缚于理论，发明人相信将合成代谢类固醇，优选为癸酸诺龙，和维生素D化合物，优选为维生素D3(胆钙化醇)结合进行肠外给药的功效基于两个化合物之间的协同效应，尤其基于肌肉质量和肌肉功能。该观念是基于两个化合物的受体的分子作用以及两个化合物可在成肌细胞/卫星细胞中激活的路径。雄性激素受体和维生素D受体均属于核转录因子家族，但是它们各自作用的方式有很大不同。已知维生素D受体与细胞增生和分化有关，该雄性激素受体与细胞增长有关。因此，认为两者相结合可较好地刺激肌肉细胞增长。而且，认为合成代谢类固醇与维生素D化合物进行相伴给药，可积极地影响维生素D受体活动。并且维生素D积极地影响了神经肌肉系统。
本发明包括将合成代谢类固醇和维生素D化合物进行有效剂量的肠外相伴给药。在本领域中术语“相伴给药”能够被很好地理解，该术语通常指同时或基本上同时进行两种活性物质的给药。在本发明中，这意味着在相同的时间段内将这两种化合物都进行给药。因此，如果其中一种化合物每天给药，那么另一种化合物也应每天给药，且都在同一天给药。如果其中一种化合物每周给药，那么另一种化合物也应每周给药，且都在同一周给药。如果其中一种化合物每月给药，那么另一种化合物也应每月给药，且都在同一个月给药。应当理解的是术语“天”、“周”和“月”不必要指日历中的天、周或月，而是指具有各个长度的时间段。优选地，直接将这两种化合物连续给药，更优选同时给药。最优选地，通过包含这两种化合物的单个组合物实现同时给药。
在本技术领域中术语“肠外给药”能够被很好地理解，该术语通常指除通过消化系统外的所有给药路径，包括但不限于肌肉内、静脉内、皮下、经皮、透粘膜(transmucosal)或吸入给药。在本发明中，肠外给药优选为肌肉内或皮下注射给药。
鉴于要治疗的患者群体为老年人，最优选的给药路径是皮下注射。老年人通常的特征在于肌肉少(尤其如果具有虚弱症状)。另一方面，他们普遍皮肤面积相对较大、褶皱多。因此，尤其在治疗虚弱时，与肌肉内注射相比，皮下注射特别的优势在于更容易实施并且带给患者的痛苦更少。
将化合物以有效剂量给药，在本技术领域中术语“有效剂量”能够被很好地理解。在药理学中，有效剂量为产生药物理想效果的中等剂量，通常基于分析针对药物的剂量反应关系来决定有效剂量。在一半参加试验的人数中产生理想效果的剂量为ED-50，并且这通常被认为是有效剂量。在本发明的上下文中，如果该剂量用于缓和多种(例如两种或更多种)虚弱的症状，那么就认为该剂量为有效剂量。优选的有效剂量用于治疗虚弱症状，这可通过合适的生物标记和/或合适的临床终点(endpoint)评估。在本发明的上下文中，术语“有效剂量”指两种活性物质相结合的剂量。针对男性和女性患者，有时可选择不同的有效剂量和剂量间隔。比如同化性类固醇剂量在男性中可更高，另外，女性患有虚弱的年龄普遍低于男性，可能需要常规剂量的更长时间的治疗，而男性变虚弱的年龄更高，需要时间短和力度更高的恢复加强疗法。
本发明活性物质的组合包括合成代谢类固醇，在本技术领域中术语“合成代谢类固醇”被理解一类与荷尔蒙睾酮相关的类固醇激素。为了回顾合成代谢类固醇，可参考A.T.Kicman在British Journal of Pharmacology(2008)154，502-521(英国药理学杂志2008年第154期第502-521页)中的描述。合成代谢类固醇通常具有重叠的合成代谢和雄性激素效应，因此有时用合成代谢-雄性激素类固醇(AAS)表示。合成代谢-雄性激素类固醇中雄性激素与合成代谢比例是决定这些化合物临床应用的重要因子。应当理解的是，在本发明中，促进肌肉细胞增长的合成代谢(肌肉营养(myotrophic))效应最好优于雄性激素效应。在这方面，合成代谢类固醇优选地选自由二乙诺酮、羟甲烯龙、氧甲氢龙、羟甲烯龙、诺龙及这些化合物的酯构成的组，用于本发明的优选的合成代谢类固醇为诺龙或其酯，最优选为癸酸诺龙。
根据本发明，癸酸诺龙优选每月给药一次，更优选每三周给药一次，最优选每周给药一次(优选地通过肌肉内注射，更优选地通过皮下注射)。每个时间间隔给药的总剂量通常从每月15毫克，优选为每月25毫克，变化到每月600毫克，优选为每月400毫克。在根据本发明治疗虚弱时，剂量最好不要太低。鉴于不可避免的雄性激素效应，剂量最好也不要太高。尽可能低和必要时尽可能高的优选的剂量为每周5毫克，优选为每周10毫克到每周150毫克，优选为每周50毫克，或者每月20毫克，优选为每月40毫克到每月600毫克，优选为每月200毫克。
如果使用另一种合成代谢类固醇，优选的剂量范围等于上述提到的癸酸诺龙的剂量范围。本领域的技术人员知道如何计算不同的合成代谢类固醇之间的剂量转换。
本发明的活性物质的组合包括维生素D化合物。在本发明的上下文中，术语“维生素D化合物”指维生素D和维生素D的各种形式、以及维生素D的前体和类似物，这类化合物在本技术领域中是熟知的。优选地，维生素D化合物是维生素D的普通形式之一，并选自由钙化醇、胆钙化醇、钙二醇、骨化三醇、度骨化醇和钙泊三醇构成的组。用于本发明的维生素D最优选的形式为胆钙化醇(维生素D3)。
在本发明中，维生素D给药的剂量力度最好达到使血浆水平高于与维生素D缺乏相关联的血浆水平。通常将维生素D缺乏定义为25-羟基维生素D血浆浓度低于20ng/mL(50nmol/L)。大于140nmol/L的血浆浓度已经与副作用相关联。因此选择维生素D化合物的优选剂量以使血浆水平在50-70nmol/L和140nmol/L之间。
根据本发明，优选的维生素D化合物胆钙化醇优选每个月给药一次，更优选每三周给药一次，最优选每周给药一次(最优选通过肌肉内注射)。胆钙化醇的剂量范围为与每天口服剂量100-4000IU等效的肠外给药剂量或者每周或每月相应的剂量。然而，与600000IU(15毫克)的胆钙化醇肌肉内注射一样高的肠外剂量也是可能的。
上述的化合物优选地包含在用于肠外给药的单个药物组合物中。更优选地，这是指包含在适于肠外给药的载体液体中的合成代谢类固醇和维生素D化合物(优选为癸酸诺龙和胆钙化醇的组合)的药物组合物。该载体液体优选为油，更优选地选自由花生油、棉花籽油和芝麻油构成的组。
不希望束缚于理论，发明人相信合成代谢类固醇和维生素D化合物(特别是癸酸诺龙和胆钙化醇)具有油溶性，可对基于油的注射制备的稳定性产生相互有利的效果。而且，在单个注射组合物制备时，这两个化合物的结合有助于相伴给药，对患者的侵害更小，并且能够更好地符合这两种药物的给药方案。
应当理解的是，本发明的药物组合物可包括通常用于这种制剂的其他赋形剂。本领域技术人员熟知用于肠外剂量形式的赋形剂、添加剂、佐剂等等，在此不进行说明。
在治疗虚弱时，本发明的组合物通常给药至少3到12个月，优选为4到8个月，最优选为6个月。本发明提供了一种治疗老年患者虚弱的新的医疗干预。
当这种虚弱治疗没有先例时，发明人相信(不希望束缚于理论)本发明的医疗干预进一步有益。
这尤其指上述的转折点，在该转折点患有虚弱的老年患者住院治疗后不再能够保持独立。延长在疗养院停留时间，同时进行适当的身体和心理疗法，这固有地剥夺了这些患者防止螺旋式下跌的重要方式，即独立生活，一天又一天有规律地进行身体和心理活动。
在这方面，本发明基于对处于该转折点的患者进行充分的医疗干预不仅可治疗虚弱本身的状况，而且用于支撑患者保持独立并重获身体和心理活动这一思想。为了这样支持这些患者改善身体，本发明也提供了用于虚弱的老年人的恢复加强疗法，尤其是在住院治疗或手术后。在本发明的这个方面，以相对较高的频率(优选为每周)及相对较高的剂量给药这两个活性物质(优选为癸酸诺龙和胆钙化醇)一段时间，该段时间足够长以提供所需要的药理作用，并且足够短以致感觉上为短期加强疗法(以重获独立)而非永久药疗(这反映了慢性疾病)。加强疗法优选的持续时间为4-8个月，优选为6个月。
本发明也涉及预防住院治疗后容易变虚弱的患者的虚弱。通常，这些患者并非少肌症状态，其免疫功能下降。
每次给药时最好使用包括这两个化合物的单个药物组合物进行上述的加强疗法。
本领域技术人员熟知本发明中使用的用于这些化合物肠外给药的装置。基于已知的硬件，这样本发明也涉及用于液体的肌肉内给药的注射装置，其中，该液体为如上所述根据本发明的组合物。
下文参考下面非限制性的实例和附图进一步说明本发明。
这些实例为体外研究，证明了诺龙和1α，25-二羟维生素D3对肌肉卫星细胞增生具有协同作用，从而对肌肉质量也具有协同作用。本发明相应地旨在减少用于人体的癸酸诺龙的剂量，以在采用组合物和单独使用癸酸诺龙时对肌肉质量和/或功能产生相同的影响，这用于达到更好的安全性。
实例1
材料和方法
从PromoCell公司(德国海德堡)获得了不同的两批人类骨骼肌细胞或卫星细胞(从33岁健康女性身上获得的hSkMC1和从64岁健康女性身上获得的hSkMC2)，并根据供应商提供的说明在培养瓶中进行培养。将细胞收集并存储在液氮中直到用于实验，细胞传代次数(passage number)高于15时不使用这些细胞。实验中，在37℃、5％CO2条件下以3500-7000细胞/平方厘米的密度使用24孔板(Costar公司)在加入5％木炭(Sigma-Aldrich公司)处理的胎牛血清(FBS)(德国PAA))的基础培养基(PromoCell公司)中培养细胞直到80％融合。从Sigma-Aldrich公司可买到诺龙、睾酮和1α，25-二羟维生素D3。
受体研究中，将这些细胞在另外加入1μM和10μM的诺龙(癸酸诺龙的活性代谢物)或1nM、10nM和100nM的1α，25-二羟维生素D3的条件下培养5天。随后通过流式细胞术可视化的雄性激素和维生素D受体染色协议来自于Krishan等(2000)和Folgueira等(2000)公布的协议。产生最好的染色图案的方法包括福尔马林固定(formalin-fixation)，随后是吐温(Tween)20透化作用和使用未标记的第一抗体(抗雄激性素受体(Epitomics(宜百康)公司)和抗维生素D受体(GeneTex公司))和荧光团标记的第二抗体(PE结合的山羊抗大鼠IgG，用于给维生素D受体染色，以及FITC结合的山羊抗兔，用于给雄性激素受体染色，二者均由Rockland提供)进行双染色。使用这两个第二抗体的染色仅仅用作背景。通过使用含血清缓冲剂进行培养阻断Fc受体。所有的解决方法进一步包含吐温20(Sigma-Aldrich公司)作为清洁剂，以在整个染色实验中保持细胞的透化状态。通过确定细胞染色的强度和细胞染色的百分比，比较非刺激和刺激细胞中的染色。使用双色流式细胞仪(贝克曼库尔特(Beckman Coulter)型FC500Cytomics)进行测量。在使用和不使用荷尔蒙处理情况下确定超过标记的设定点(以1％用于背景染色)的染色细胞的百分比的增加。
增生研究中，采用单独的100nM和1000nM的诺龙或10nM和100nM的1α，25-二羟维生素D3和这二者的组合将细胞培养8天。在第1、第4和第7天更换介质和荷尔蒙。使用刃天青试验测量增生(Stern-Straeter等2008)。使用学生t检验进行增生数据的统计分析。
实例2
受体研究
诺龙和1α，25-二羟维生素D3对细胞的作用取决于它们同源受体的存在，因此我们研究了人类骨骼肌细胞中的雄性激素和维生素受体的存在。图1和图2显示了诺龙和1α，25-二羟维生素D3对细胞百分比的影响，在这些细胞中，与单独使用第二抗体染色相比，表达雄性激素和维生素D受体具有变化。在hSkMC2细胞中，曝露于诺龙和1α，25-二羟维生素D3之后观察具有阳性雄性激素和维生素D受体的细胞数量的增加。柱状图也显示了在荷尔蒙处理之前细胞已经包含该受体时，细胞中染色强度增加，这表示每个细胞的受体数量增加。这些结果表示更多的细胞变成阳性雄性激素受体，也表示在处理前细胞为阳性受体时，每个细胞的受体数量增加。较少提及对hSkMC1细胞的影响(未显示数据)。
这些受体研究显示雄性激素和维生素D受体存在于人类骨骼肌细胞中，并显示诺龙和1α，25-二羟维生素D3刺激各自受体的表达。
实例3
增生研究
实例1中显示了这两个化合物增加了雄性激素受体和维生素D受体阳性细胞的百分比，这表示更多的细胞潜在地响应该处理。
人类骨骼肌细胞的增生作为响应参数，以检测诺龙和1α，25-二羟维生素D3的结合是否对肌肉质量具有协同效应。
图3显示了，(a)对于hSkMC1细胞，单个化合物对增生没有影响，但是当1α，25-二羟维生素D3与诺龙组合时，所试验的所有4个组合均对增生有明显的影响(除了明显为P＜0.05的100nM诺龙加上100nM1α，25-二羟维生素D3，P＜0.001)。对于(b)hSkMC2细胞，1α，25-二羟维生素D3的浓度在增生过程中增加，并且与对照相比，这4个组合再次显示了明显的影响(除了明显为P＜0.001的100nM诺龙加上10nM1α，25-二羟维生素D3，P＜0.05)。下面的表1显示了用于各种处理的基于对照的百分比的增加。对于hSkMC1细胞，所有组合的增加超过了该组合中单个化合物的增加的总和。这证明了诺龙和1α，25-二羟维生素D3的组合对人类骨骼肌细胞的协同效应。对于hSkMC2细胞，在四个试验组合的三个中观察到协同效应。
表1：
与对照相比，单独通过诺龙和1α，25-二羟维生素D3(dhvit D3)和通过这两种化合物的组合，人类骨骼肌细胞(hSkMCl和hSkMC2)增生的百分比增加(％△)。∑表示：与各种组合中所用的诺龙和dhvit D3相同时，采用单个诺龙的％△和单个dhvit D3的％△的和。

Claims (12)

1.一种药物组合物，其特征在于，该药物组合物包含由在适于肠外给药的载体液体中的5毫克到200毫克的癸酸诺龙和17.5微克到15毫克的胆钙化醇组成的活性物质；且
所述癸酸诺龙和所述胆钙化醇肠外相伴组合给药。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，用于预防虚弱。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，用作住院治疗后容易变虚弱的患者的恢复加强辅剂。
4.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述载体液体选自由花生油、棉花籽油和芝麻油构成的组。
5.根据权利要求1到4中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗或预防老年患者的虚弱的药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述老年患者为60岁或年龄更大的患者。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物组合物至少每月进行给药。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物组合物至少每周进行给药。
9.根据权利要求5到8中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物组合物给药至少进行三个月的时间。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物组合物给药进行六个月的时间。
11.根据权利要求5到8中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物组合物用作虚弱老年人的恢复加强辅剂。
12.根据权利要求5到8中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物组合物用作虚弱老年人在住院治疗或手术后的恢复加强辅剂。
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