MX2011002108A - Composicion anticoccidial. - Google Patents

Abstract

Se proporciona un agente administrable oralmente para uso médico que es utilizado para prevenir o tratar la coccidiosis y tiene un alta seguridad sin efectos secundarios, un agente para alimentos o bebidas para uso en la salud, un aditivo alimenticio y un alimento que comprende el mismo. También se proporciona un método para la alimentación de animales (en particular, ganado y aves de corral) que usa el mismo y un método para controlar la coccidiosis. Usando un producto fermentado obtenido usando una bacteria de ácido láctico y/o un producto fermentado de suero de leche obtenido usando una bacteria de ácido propiónico, se puede proporcionar un medicamente o agente preventivo de la coccidiosis, un agente para uso en la salud y un aditivo alimenticio.

Description

COMPOSICION ANTICOCCIDIAL Campo de la Invención La presente invención se refiere a un sistema para prevenir y/o tratar la coccidiosis en humanos y/o animales no humanos, y se refiere más particularmente a un agente anticoccidial, una alimentación para controlar la coccidiosis que contiene el mismo, un método para controlar la coccidiosis que comprende administrar oralmente el mismo a humanos y/o animales no humanos, y a un método de crianza de animales no humanos mientras que se controla la coccidiosis.

Antecedentes de la Invención La coccidiosis es una infección protozoárica gastrointestinal en la cual la diarrea es el síntoma primario. Esto es una enfermedad desarrollada por el parasitismo del protozoario llamado "coccidio" que tiene un tamaño de 0.01 mm a 0.05 mm en el tracto intestinal (intestino delgado a intestino grueso) de humanos y animales tales como ganado, pollos, perros, y gatos junto con varios factores. La mayor parte de la coccidiosis es una infección compleja y los síntomas no aparecen únicamente por infección con coccidios, sin embargo, un factor tal como la tensión actúa como un activador y diarrea o similares.

En animales jóvenes, la diarrea es una de las enfermedades que causa la mayor pérdida económica seria en los productores ganaderos. Por ejemplo, en el caso de ganado, se dice que la pérdida económica anual en los Estados Unidos de Norteamérica debido a la diarrea en becerros es de 10 a 50 mil millones de yenes o más, y también en Japón, la diarrea en becerros incurre en un daño extremadamente grave a la economía.

Los animales infectados con un protozoario que causa coccidiosis tal como un protozoario del género Eimeria sufren de síntomas tales como diarrea o presencia de sangre en las heces, y si no se proporciona un tratamiento apropiado o si los síntomas son severos, los animales algunas veces mueren. Incluso si los animales no mueren, el crecimiento de los animales se inhibe significativamente. Además, la coccidiosis es una de las enfermedades que causa daño particularmente a animales en períodos neonatales y juveniles, y si el crecimiento se estanca debido a la ocurrencia de diarrea, la productividad, por lo tanto, se afecta desfavorablemente, y por lo tanto, se convierte en un gran problema.

Además, se ha reportado que el índice de detección de coccidia es tanto como el 35% en un grupo de becerros negros japoneses en los cuales la diarrea ocurre frecuentemente. Por otro lado, también en el caso de cerditos, se ha reportado que los índices de detección de coccidia son del 21.6% en un grupo de lechones que sufren de diarrea y 14.7% en un grupo de cerditos de destete que sufren de diarrea. Por lo tanto, la coccidia es una causa importante de ocurrencia de diarrea en animales jóvenes sin importar las especies animales.

Un protozoario coccidial prolifera en la mucosa del tracto gastrointestinal y excreta un cuerpo infeccioso cubierto con una protección dura llamada "oocisto" en las heces. Los protozoarios coccidiales se propagan a otro animal por infección oral con este oocisto.

Generalmente como medidas para la coccidiosis, se recomienda que un granero de ganado o similares sea desinfectado con un orto-fármaco (por ejemplo, un agente de crehazol) o escaldado (vapor) o quemado. Sin embargo, el oocisto de coccidio tiene resistencia extremadamente alta al calor y a los químicos, y por lo tanto, es difícil eliminar el oocisto del ambiente usando un fungicida sintético o bajo una condición de esterilización por calor que se utilizará por medidas comunes para los microorganismos.

En la prevención o tratamiento de la coccidiosis, se han utilizado principalmente un antibiótico (un antibiótico de poliéter tal como salinomicina, o similares), un agente quimioterapéutico compuesto de un agente antimicrobiano sintético (un fármaco de sulfa, o similares) y un fármaco biológico tal como una vacuna. Sin embargo, tal agente antibiótico o quimioterapéutico tiene problemas tales como la ocurrencia de efectos secundarios y una declinación en el efecto debido a la adquisición de resistencia al agente, y únicamente se utiliza una vacuna para la prevención y no puede utilizarse para el tratamiento. Por otra parte, en el caso donde los humanos consumen carne, leche, o similares del animal al que se le ha administrado tal agente, existe un problema de migración al cuerpo humano del agente que permanece en el cuerpo animal, por lo que se ha requerido una rigurosa limitación en la cantidad utilizada y período de administración del mismo.

Por consiguiente, ha habido una fuerte demanda de un agente que se deriva de una sustancia natural y que por lo tanto sea altamente segura y tenga un efecto preventivo y terapéutico excelente en coccidiosis sin problemas tales como el antibiótico, agente antimicrobiano sintético, vacuna, etc. mencionados anteriormente.

En cuanto a pollos, los siguientes métodos para prevenir o tratar la coccidiosis utilizando los probióticos así llamados se han conocido como: un método en el cual los pollos se infectan experimentalmente con Eimeria acervulína que es una de las causas de coccidiosis, y después son alimentados con una alimentación que contiene bacterias de ácido láctico vivas, de tal modo que aumenta la inmunidad mediante células enfermas para reducir la excreción de oocistos de Eimeria acervulína de las heces (Documento de no patentable 1); un método para tratar coccidiosis en aves de corral que incluye administrar oralmente a pollos células viables activadas de bacterias de ácido láctico (Pediococcus acidilactici) o similares para modular la respuesta inmunológica ¡n vivo (Documento de Patente 1); y similar.

Sin embargo, con respecto a una bacteria de ácido láctico que pertenece a la bacteria Lactobacillus gasseri, el efecto anticoccidial por un probiotico no se ha conocido, y tampoco se ha descrito el efecto anticoccidial (efecto anticoccidial de los probioticos así llamados en donde las bacterias de ácido láctico indígenas en el tracto intestinal animal se proliferan) de un producto de fermentación del mismo.

Además, con respecto a una bacteria de ácido propiónico que pertenece a la bacteria Propionibacteriumfreudenreichii, el efecto anticoccidial de un probiotico no se ha conocido del todo. También, el efecto anticoccidial (efecto anticoccidial de los probioticos así llamados) de un producto de fermentación del mismo (particularmente, un producto de fermentación obtenido usando un medio que contiene suero) no se ha descrito totalmente.

Se conocen los siguientes efectos de los probioticos así llamados: un oligosacárido, un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico, un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico, y similares. Se conoce que el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico tiene un efecto probiotico tal como un efecto para mejorar la microflora intestinal del ganado, un efecto para prevenir la diarrea, o un efecto para aumentar el peso corporal (Documento de Patente 2). También se conoce que el producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico tiene un efecto que mejora la microflora intestinal promoviendo la proliferación de una bifidobacteria intestinal (Documento de Patente 3). Sin embargo, un material probiótico descrito como que tiene un efecto preventivo o terapéutico sobre la coccidiosis no se ha encontrado en la actualidad.

Además, el efecto preventivo y/o terapéutico (es decir, el efecto anticoccidial y el efecto que controla la coccidiosis) por el uso de ambas sustancias juntas en la coccidiosis no se ha conocido en absoluto en el pasado, y la presente invención es la primera en describir el efecto.

Los "probióticos" según lo utilizado en la presente se refieren a las células viables capaces de mejorar el balance de la flora intestinal formada por microorganismos intestinales o a un alimento que contiene los mismos. Los "probióticos" según lo utilizado en la presente se refieren a un componente digerible capaz de promover la proliferación de bacterias intestinales útiles o de controlar la proliferación de bacterias dañinas, o a un alimento que contiene los mismos. Incidentalmente, un componente digerible que se produce por la fermentación microbiana y muestra una bioactividad in vivo directamente o a través de microorganismos intestinales, o un alimento que contiene los mismos se refiere algunas veces como "biogénico". Documentos de la Técnica Anterior Documentos de Patente Documento de Patente 1: J P-A-2008-044945 Documento de Patente 2: J P-A-2004-305128 Documento de Patente 3: JP-A-2006-254841 Documentos no patentable Documento no patentable 1: Avian Diseases, 47(4), 1313-1320 (2003) Breve Descripción de la Invención Problemas que la Invención Resolverá La presente invención se ha hecho con el fin de prevenir o tratar coccidiosis en humanos y/o animales no humanos (particularmente, ganado, aves de corral, etc.), que se deriva de una sustancia natural, que puede administrarse oralmente durante un largo periodo de tiempo, y es altamente segura sin efectos secundarios, un agente para un alimento o una bebida para uso en la preservación de la salud, un aditivo alimenticio, y una alimentación que comprende el mismo. Además, la presente invención se ha hecho con el fin de proporcionar un método para controlar la coccidiosis en humanos y/o animales no humanos que usan el mismo y un método para la crianza de animales no humanos que usan el mismo. Particularmente, la presente invención tiene el objetivo de proporcionar un material probiótico y un material biogénico.

Medios para Solucionar los Problemas Para alcanzar los objetivos antes mencionados, los presentes inventores hicieron estudios intensivos, y como resultado, encontraron que la coccidiosis (diarrea) en animales y similares se controla administrando oralmente un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y/o un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico, y por lo tanto, puede proporcionarse un agente administrable oralmente para prevenir o tratar la coccidiosis, un agente para uso en la preservación de la salud, y un aditivo alimenticio, que contiene estas sustancias como ingredientes activos, y por lo tanto, la presente invención se ha completado.

A continuación, serán descritas las modalidades de la presente invención. (1) un método para controlar (prevenir y/o tratar) la coccidiosis, caracterizado por administrar oralmente lo siguiente (A) producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y (B) producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico a humanos y/o animales no humanos durante un largo periodo de tiempo más de largo de 25 días después del nacimiento: (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico (Lactobacillus gasseri): por lo menos una de las células bacterianas de ácido láctico obtenida neutralizando el cultivo de una bacteria de ácido láctico que pertenece a la bacteria Lactobacillus gasseri en un medio que contiene el derivado de la proteína de suero, un cultivo de la bacteria de ácido láctico, una célula dañada de la bacteria de ácido láctico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido láctico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, un producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado); y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Propionibacterium freudenreichii): por lo menos una de las células bacterianas de ácido propiónico obtenida cultivando una bacteria de ácido propiónico que pertenece a la bacteria Propionibacterium freudenreichii en un medio que contiene suero (suero y/o suero tratado con proteasa), un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado). (2) El método de acuerdo a (1), caracterizado en que el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico son porciones líquidas (caldo de fermentación, cultivo de sobrenadantes o frecuentemente referido simplemente como sobrenadantes) obtenidas sometiendo el cultivo de la bacteria de ácido láctico y el cultivo de la bacteria de ácido propiónico a la separación de sólido-líquido por un método de separación de líquido-sólido usado generalmente tal como filtración o centrifugación, seguido por el aislamiento y/o productos secos de los mismos. (3) El método de acuerdo a (1) ó (2), caracterizado en que el período de administración es a partir de 30 días a 90 días después del nacimiento.

Por ejemplo, cuando los productos de fermentación se administran por aproximadamente 60 días (entre 50 días y 70 días) después del nacimiento, el objetivo inicial puede alcanzarse. (4) El método de acuerdo con (1) a (3), caracterizado en que el medio que contiene el derivado de la proteína de suero contiene por lo menos uno de un concentrado de la proteína de suero (WPC por sus siglas en inglés), un aislante de la proteína de suero (WPI), y un hidrolizado de la misma. (5) El método de acuerdo con (1) a (4), caracterizado en que la bacteria de ácido láctico es una cepa de Lactobcillus gasseri OLL 2716 (FERM BP-6999), y la bacteria de ácido propiónico es la cepa de Propionibacterium freudenreichü ET-3 (FERM BP-8115). (6) Un agente anticoccidial, caracterizado porque comprende lo siguiente (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico como ingredientes activos (un agente administrable oralmente a humanos o animales para prevenir o tratar coccidiosis o una composición anticoccidial administrable oralmente): (A) Un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico (Lactobacíllus gasseri): por lo menos una de las células bacterianas de ácido láctico obtenida por la neutralización del cultivo de una bacteria de ácido láctico que pertenece a la bacteria Lactobacillus gasseri en un medio que contiene el derivado de la proteína de suero, un cultivo de la bacteria de ácido láctico, una célula dañada de la bacteria de ácido láctico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido láctico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado); y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Propionibacterium freudenreichii): por lo menos una de las células bacterianas de ácido propiónico obtenida cultivando una bacteria de ácido propiónico que pertenece a la bacteria Propionibacterium freudenreichii en un medio que contiene suero (suero y/o suero tratado con proteasa), un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado). (7) El agente anticoccidial (una medicina administrable oralmente, una medicina animal administrable oralmente) de acuerdo con (6), caracterizado por ser un agente anticoccidial para humanos y/o animales no humanos. (8) El agente anticoccidial de acuerdo con (7), caracterizado porque los animales son cualquier ganado, ave de corral, roedor, y animales domésticos. (9) El agente anticoccidial de acuerdo a (7) u (8), caracterizado en que los animales son ganado. (10) Un animal alimentado para prevenir y/o tratar coccidiosis, caracterizado por comprender un agente anticoccidial de acuerdo a (8) ó (9).

Un método para criar animales no humanos mientras previene y/o trata la coccidiosis (mientras que controla la coccidiosis), caracterizado por administrar al agente anticoccidial de acuerdo a (8) ó (9), o alimentar al animal de acuerdo a (10). (12) Uso de lo siguiente (A) producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y (B) producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico para la producción de un farmacéutico para prevenir y/o tratar coccidiosis: (A) Un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico (Lactobacillus gasseri): por lo menos una de las células bacterianas de ácido láctico obtenida por la neutralización del cultivo de una bacteria de ácido láctico que pertenece a la bacteria Lactobacillus gasseri en un medio que contiene el derivado de la proteína de suero, un cultivo de la bacteria de ácido láctico, una célula dañada de la bacteria de ácido láctico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido láctico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado); y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Propionibacterium freudenreichii): por lo menos una de las células bacterianas de ácido propiónico obtenida cultivando una bacteria de ácido propiónico que pertenece a la bacteria Propionibacterium freudenreichii en un medio que contiene suero (suero y/o suero tratado con proteasa), un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado).

Es decir, la presente invención se refiere a una composición anticoccidial para humanos o animales no humanos que contiene un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y/o un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico como un ingrediente activo. La composición anticoccidial de acuerdo a la presente invención incluye ampliamente un farmacéutico, un farmacéutico veterinario, un alimento o bebida, un aditivo alimenticio, y una alimentación (una alimentación mezclada) cada uno de los cuales tiene un efecto anticoccidial (un efecto para prevenir o tratar la coccidiosis, es decir, un efecto de por lo menos uno de prevención, control, alivio, y tratamiento de coccidiosis). Los presentes inventores encontraron por primera vez que los ingredientes activos tienen un nuevo y muy eficaz efecto medicinal (uso).

Además, la presente invención también proporciona un método para criar animales tales como ganado con buena salud mientras que previene o controla la ocurrencia de coccidiosis, o trata coccidiosis administrando oralmente los ingredientes activos a los animales durante un largo periodo de tiempo (de un mes a 3 meses o más, por ejemplo, 6 meses a un año después del nacimiento). Los becerros frecuentemente desarrollan coccidiosis aproximadamente dos meses después del nacimiento, y por lo tanto, administrando oralmente los ingredientes activos a los animales durante 20 a 90 días después del nacimiento, generalmente durante 25 a 70 días después del nacimiento, la presencia de los síntomas de coccidiosis puede controlarse. En todo caso, los ingredientes activos pueden administrarse oralmente durante un largo periodo de tiempo de 6 meses a un año después del nacimiento. En este tiempo, no se observaron efectos secundarios o efectos dañinos, y de hecho, incluso cuando los ingredientes activos fueron administrados oralmente durante un largo periodo de tiempo de un año y de 6 meses después del nacimiento, los ingredientes activos se encontraron como seguros. Por consiguiente, la presente invención también proporciona un método para controlar coccidiosis o un método para criar animales mientras que controla la coccidiosis, cada uno caracterizado por administrar oralmente los ingredientes activos a los animales.

Ventaja de la Invención De acuerdo a la presente invención, administrando oralmente un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y/o un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico, estos productos actúan como agente preventivo o terapéutico administrable oralmente para uso médico para humanos, ganado, aves de corral, roedores, animales pequeños para mascotas, animales alojados en zoológicos, (mascotas así llamados), y similares, o un agente para un alimento o una bebida para uso en la preservación de la salud, y puede prevenirse la coccidiosis (incluyendo una infección mezclada) o puede tratarse la diarrea causada por coccidiosis. Particularmente, se confirmó que la ocurrencia de coccidiosis puede prevenirse en ganado o aves de corral, etc., criando tales animales administrando estos productos de fermentación directamente o a través de la alimentación de una alimento o similares en los cuales los productos de fermentación se mezclan (preferiblemente por un período más largo que el período neonatal, por ejemplo por 25 días después del nacimiento a 60 días después del nacimiento).

El agente anticoccidial de acuerdo a la presente invención se disolvió en sustituto de leche, y el sustituto de leche resultante se administró a becerros inmediatamente después del nacimiento durante 60 días. Como resultado, la ocurrencia de la coccidiosis se observó en el grupo de becerros de control a los cuales el agente anticoccidial no fue administrado, pero la ocurrencia de coccidiosis no se observó en el grupo de becerros de prueba aunque los becerros de prueba se criaron con los becerros de control, y se confirmó que se inhibió la ocurrencia de coccidiosis altamente infecciosa.

Breve Descripción de los Dibujos La figura 1 es una gráfica que muestra el número total de días por becerro que sufre de diarrea (presencia de sangre en las heces) durante el período de prueba.

La figura 2 es una gráfica que muestra el número total de días por becerro que sufre de diarrea (presencia de sangre en las heces) tratado por un agente antiparásito o una rehidratación durante el período de prueba.

Descripción Detallada de la Invención El producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico de acuerdo a la presente invención es por lo menos uno de un cultivo de una bacteria de ácido láctico (cultivo completo que incluye células, medio, secreciones metabólicas, y similares) obtenido cultivando una bacteria de ácido láctico que pertenece a la bacteria Lactobacillus gasseri (por ejemplo, cepa de Lactobacillus gasseri OLL 2716), células (las células viables o células muertas) aisladas desde las mismas, una célula dañada (una célula dañada de la bacteria de ácido láctico), un residuo (que incluye un líquido del cultivo o un sobrenadante del cultivo que no sea una porción turbia del líquido del cultivo sino una porción clara del mismo) del cultivo de la bacteria de ácido láctico obtenido retirando materias sólidas incluyendo células de cultivo, y un producto tratado del mismo. El "producto tratado del mismo" según lo utilizado en la presente se refiere por lo menos a uno seleccionado de un producto concentrado, un producto adherido, un producto seco (por lo menos uno de un producto secado por rocío, un producto liofilizado, producto secado al vacío, y de un producto secado por tambor), un producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado.

Incidentemente, la cepa de Lactobacillus gasseri OLL 2716 mencionado anteriormente se deposito internacionalmente el 14 de enero de 2000 como deposición No. FERM BP-6999 en el National Institute of Bioscience and Human-Technology, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International, Trade and Industry, actualmente, el International Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (Zip code: 305-8566, Central 6, 1-1-1 Higashi, Tsukuba, Ibaraki, Japan) .

La bacteria Lactobacillus gasseri puede cultivarse de acuerdo a un procedimiento común conveniente para el cultivo de una bacteria de ácido láctico o especie bacteriana, sin embargo, se utiliza preferiblemente como medio, un medio sintético o un medio semi-sintético que facilite el aislamiento de células por separación centrífuga. Como el método de cultivo, la neutralización del cultivo se lleva a cabo preferiblemente mientras que se mantiene el pH dentro de una intervalo definido (por ejemplo, pH 4.0 a 8.0) hasta que el número de células alcanza un valor predeterminado. En general, el cultivo se realiza de 20 a 40 °C (preferiblemente de 35 a 38°C) por aproximadamente 24 a 48 horas. Por el método de cultivo de alta concentración, puede obtenerse un cultivo rico en células y metabolitos.

Como medio, un medio sintético, un medio semisintético, u otro medio comúnmente utilizado (por ejemplo, caldo LBS (manufacturado por Japan Becton, Dickinson and Company)) puede utilizarse convenientemente. Se utiliza como una solución de cultivo de alta concentración preferida para la bacteria Lactobacillus gasseri, un medio al que se agrega un derivado de la proteína de suero y/o lactosa, particularmente un medio compuesto principalmente de un derivado de la proteína de suero y/o lactosa (un contenido proteínico de 0.1 a 10% y/o un contenido de lactosa de 1 a 15%), en el medio descrito anteriormente, y la neutralización del cultivo se realiza a 30 a 45°C mientras que se mantiene el pH a 4.5 a 7.0 hasta 108 a 1011 células, preferiblemente se obtienen de 109 a 1010 células. Incidentalmente, en el caso de usar un método de cultivo convencional, el número de células en el cultivo llega únicamente a 109 o menos.

Como el derivado de la proteína de suero, por lo menos uno seleccionado de un concentrado de la proteína de suero (WPC), un aislante de la proteína de suero (WPI), y un hidrolizado del mismo se utilizan, y un producto comercialmente disponible puede también utilizarse convenientemente.

El WPC se obtiene tratando el suero, el cual es generado en la producción de queso o caseína, por ultrafiltración, filtración en gel, separación cristalina de la lactosa, o similares para aumentar el contenido proteínico de 35 a 85% (en términos de contenido sólido). WPI es diferente de WPC y tiene un contenido proteínico de aproximadamente 95% (en términos de contenido sólido) que se aumenta por un método de intercambio iónico o similar.

Como el hidrolizado, un producto tratado enzimáticamente obtenido tratando por lo menos uno seleccionado de WPC, WPI, suero, y una proteína de suero con una proteasa tal como pepsina, tripsina, o papaína se utiliza.

El producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico incluye un producto compuesto únicamente por células de la bacteria Lactobacíllus gasseri y otras sustancias derivadas de Lactobacillus gasseri, y también un producto obtenido agregando un excipiente (almidón, dextrina, un componente de leche, ácido silícico, o similares), agua, un componente alimenticio, o similares e estos. Este producto de fermentación puede formarse en cualquier líquido, pasta, y sólido. Este producto de fermentación puede administrarse a animales jóvenes alimentando el producto como tal, y también puede administrarse agregando el producto a un alimento o agua para beber y alimentar a los animales jóvenes con el alimento y agua para beber resultante.

En el caso de administrar el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico a, por ejemplo, becerros, la dosis diaria del mismo por becerro es desde 0.93 g a 92.52 g (0.1 a 10 g en términos de contenido sólido), preferiblemente de 4.65 g a 46.3 g (0.5 g a 5 g en términos de contenido sólido). En el caso de otros animales, la dosis puede aumentarse o disminuirse en proporción al peso corporal.

Como el residuo de un cultivo de una bacteria de ácido láctico, por ejemplo, el cultivo completo (que contiene aproximadamente 15 mil millones de células/ml) obtenido cultivando la cepa L. gasseri OLL 2716 (FERM BP-6999) en un medio que contiene WPC como se describe anteriormente se centrifuga, y la porción líquida resultante (porción sobrenadante) se esteriliza, y el líquido esterilizado puede utilizarse. Además, un producto seco obtenido secando el líquido esterilizado puede también utilizarse.

Por otra parte, el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico que es el otro ingrediente activo de acuerdo a la presente invención es por lo menos uno de un cultivo de una bacteria de ácido propiónico (el cultivo completo que incluye células, un medio, secreciones metabólicas, y similares) obtenido cultivando, por ejemplo, una bacteria que pertenece a la bacteria Propionibacterium freudenreichii la cual produce un estimulador de crecimiento bifidogénico (BGS) en un medio que contiene el suero (suero y/o suero tratado con proteasa), células (células vivas o células muertas) aisladas desde el mismo, un homogeneizado de células (una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico), un residuo (que incluye un líquido del cultivo o un sobrenadante del cultivo que no sea una porción turbia del líquido del cultivo siono una porción clara del mismo) del cultivo de la bacteria de ácido propiónico obtenido retirando materias sólidas incluyendo las células del cultivo, y un producto tratado del mismo. El "producto tratado del mismo" según lo utilizado en la presente se refiere por lo menos a uno seleccionado de un producto concentrado, un producto adherido, un producto seco (por lo menos uno de un producto secado por rocío, un producto liofilizado, producto secado al vacío, y un producto secado con tambor), un producto líquido, un producto diluido, y un producto esterilizado.

Los ejemplos de los mismos incluyen un líquido de fermentación (sobrenadante del cultivo) obtenido fermentando un 10% del líquido de reducción recubierto con suero con la cepa Propionibacterium freudenreichii ET-3 y un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Profec: ILSI, No. 80, 5-13 (2004)).

Incidentemente, la cepa Propionibacterium freudenreichii ET-3 antes mencionada se deposito ¡nternacionalmente el 11 de julio de 2002 como deposición No. FERM BP-8115 en el International Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (Zip code: 305-8566, Central 6, 1-1-1 Higashi, Tsukuba, Ibaraki, Japan).

El producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico (Cultivo Propionabacterium freudenreichii ET-3, Profec) fue aprobado por indicar que el producto puede proliferar bifidobacteria para mejorar el ambiente intestinal y por mantener el movimiento de intestino favorable como un alimento especificado para el uso de salud (TOKUHO) para bebidas y tabletas de leche 2001 y 2002.

Sin embargo, el efecto anticoccidial del Profec no se ha conocido totalmente, y no ha habido hallazgos de que el efecto anticoccidial sea confirmado administrando actualmente el Profec a animales jóvenes tales como becerros. También, no se han conocidos casos reportados de la reducción en el número de tratamientos controlando la ocurrencia de diarrea seria acompañada por sangrando utilizando Profec, y la presente invención es la primera en descubrir el efecto. Además, el excelente efecto anticoccidial de un uso combinando del mismo con el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y similar no se ha conocido totalmente en el pasado, y este nuevo hallazgo fue encontrado por primera vez por la presente invención. Por consiguiente, se puede decir que la presente invención tuvo éxito en desarrollar el segundo efecto medicinal así llamado (segundo uso) nuevamente.

Como la bacteria de ácido propiónico, una bacteria que produce BGS se utiliza convenientemente, sin embargo, la bacteria no se limita a esto. Los ejemplos de los mismos incluyen la cepa Propionibacterium freudenreichii ET-3 (antes mencionada), cepa Propionabecterium freudenreichii ATCC 6207, cepa Propionabecterium freudenreichii ATCC 8262, cepa Propionabecterium freudenreichii IFO 12424, cepa Propionabecterium freudenreichii IFO 12426, y cepa Propionabecterium freudenreichii IFO 12391.

La bacteria de ácido propiónico puede cultivarse aérobicamente o anaérobicamente (por ejemplo, bajo presión con gas de nitrógeno (0.5 kg/cm2)) de acuerdo a un procedimiento común con excepción de usar un medio que contiene suero (suero y/o suero proteasa tratado con proteasa que tienen un contenido proteínico de aproximadamente 1%). El contenido de suero en el medio es preferiblemente de 1 a 20%, más preferiblemente de 5 a 15%. En general, el cultivo del líquido puede realizarse de 20 a 40°C (preferiblemente de 35 a 38°C) en un pH de aproximadamente 6.0 a 8.0 por aproximadamente 24 a 48 horas.

El producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico incluye un producto compuesto únicamente de células de la bacteria Propionabecterium freudenreichii y otras sustancias derivadas de la bacteria Propionabecterium freudenreichii, y también un producto obtenido agregando un excipiente (almidón, dextrina, un componente de leche, ácido silícico, o similares), agua, un componente alimenticio, o similares de los mismos. Este producto de fermentación puede formularse ya sea en un líquido, pasta, y sólido. El producto de fermentación puede administrarse a animales jóvenes alimentando el producto como tal, y también puede administrarse agregando el producto a un sustituto de lecho o alimento y alimentar a los animales jóvenes con el sustituto de lecho o alimento resultante.

Como se describe más abajo, la dosis del producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico es extremadamente pequeña y no impone una carga en animales específicos tales como animales jóvenes. La presente invención es extremadamente única en términos de este punto.

En el caso de administrar el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico, por ejemplo, el Profec a becerros, la dosis diaria del mismo por becerro es de 0.04 g a 10 g, preferiblemente de 0.1 g a 4 g. De este modo, este producto de fermentación exhibe un efecto excelente suficiente en una cantidad extremadamente pequeña, y si se desea, este producto de fermentación puede proporcionarse no solo en una dosis sino en un orden de dosis divididas, tres veces al día, etc. Incidentalmente, en el caso de usar un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico con excepción del Profec, o en caso de administrar el producto a otros animales, una dosis necesaria puede determinarse convenientemente basada en la descripción antes mencionada.

En la presente invención, el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico pueden utilizarse en combinación. Estos productos de fermentación pueden utilizarse por separado, o pueden utilizarse en una mezcla de estos productos de fermentación (un material que contiene ambos productos de fermentación). La relación de la mezcla del producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico con producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico es preferiblemente de 1:10 al 100:1, más preferiblemente de 1:5 a 50:1 (relación peso seco).

Como la mezcla de estos productos de fermentación, un producto comercialmente disponible puede también utilizarse. Puede utilizarse como producto comercialmente disponible, por ejemplo, Prebio Support (marca comercial registrada de Meiji Feed Co., Ltd., PS), el cual es un producto en polvo obtenido formulando una mezcla de un residuo de un cultivo de la cepa Lactobacillus gasseri OLL 2716 (FERM BP-6999) (LG) y Profec en una preparación usando dextrina, lactosa, y sílice. En el PS, el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico se contienen en una relación (relación peso seco) de 8.5:1.5 a 9.5:0.5. Es decir, la relación de la mezcla del producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico con el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico es tal que el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico está contenido en una cantidad de 85 a 95% (% en peso seco) de la cantidad total de ambos productos de fermentación, y el resto es el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico.

Se considera que el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico produce componentes y metabilitos celulares (ácidos orgánicos, péptidos, oligosacáridos, bacteriocina, oligo-ADN, etc.) y el efecto fisiológico tal como efecto antibacteriano y efecto estimulante inmunológico de estos componentes trabaja orgánicamente para exhibir un efecto anticoccidial. La presente invención tuvo éxito en la exhibición de un excelente efecto anticoccidial deseado usando el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico, cuyo efecto no es suficiente solo, sino en combinación con el producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico.

La composición anticoccidial de acuerdo a la presente invención contiene el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico como ingredientes activos y puede utilizarse como un alimento o una bebida, una alimentación, un farmacéutico, o un farmacéutico veterinario.

En el caso donde la composición se utiliza como un alimento o bebida, la composición puede utilizarse convenientemente en una manera convencional de modo que los ingredientes activos presentes sean utilizados como tales o que la composición sea utilizada en combinación con otro alimento o componente del alimento. El agente de acuerdo a la presente invención utilizando los ingredientes activos presentes puede ser en cualquier forma de un sólido (polvo, granulo, y otros), una pasta, líquido, y una suspensión, sin embargo, se prefiere que los ingredientes activos presentes sean formulados en una bebida anticoccidial (para prevenir coccidiosis) utilizando un dulcificante, un agente amargo, una vitamina, y cualquiera de varios componentes de uso general para la producción de una preparación bebible.

Lo mismo se aplicará al caso donde la composición se utiliza como alimentación, y la composición puede utilizarse convenientemente en una manera convencional de modo que los ingredientes activos presentes sean utilizados como tales o la composición sea utilizada en combinación con otra alimentación o componente alimenticio. Además, también es posible utilizar la composición agregando los ingredientes activos presentes al sustituto de lecho o agua bebible.

En el caso donde la composición se utiliza como un farmacéutico o farmacéutico veterinario, aunque puede ser administrado parenteralmente, la composición se administra generalmente de forma oral. Los ejemplos de la preparación para la administración oral incluyen una tableta, pildora, gránulo, cápsula suave o dura, polvo, gránulo fino, emulsión, suspensión, jarabe, y elixir. Estas varias preparaciones pueden formularse de una manera convencional agregando un auxiliar de formulación conocido que puede usarse comúnmente en el campo técnico de la formulación farmacéutica tal como un excipiente, aglutinante, desintegrante, lubricante, correctivo, agente de solubilización, agente de suspensión, o agente de recubrimiento con el agente principal.

Como se describe anteriormente, la presente invención finalmente se completo como resultado de los estudios intensivos de la efectividad del producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y del producto de fermentación del suero de una bacteria de ácido propiónico. De acuerdo a la presente invención, la coccidiosis en animales puede ser prevenida o la diarrea causada por coccidiosis puede tratarse. Particularmente, para el ganado o aves de corral, etc., criando tales animales administrando estos productos de fermentación directamente o a través de la alimentación de un alimento o similares en los cuales se mezclen los productos de fermentación, la ocurrencia de coccidiosis puede prevenirse. Como el método de crianza, es deseable realizar la alimentación del mismo preferiblemente por un período más de largo que el período neonatal (preferiblemente por un período más de largo que el período neonatal por 60 días o más, por ejemplo, por un período más de largo que el período neonatal por 80 a 100 días).

Incidentemente, en la descripción antes mencionada, un caso del ganado, el cual es ganado bovino se describe principalmente como un ejemplo, sin embargo, la presente invención puede también aplicarse al ganado tal como pollos, cerdos, ovejas, y caballos además del ganado; aves de corral; y roedores tales como ratones, ratas, cerdos de guinea, hámsteres, y hurones; y también puede aplicarse a animales pequeños para mascotas tales como perros y gatos; animales alojados en zoológicos (mascotas así llamadas); y humanos.

Más abajo, la presente invención será descrita específicamente con referencia a los ejemplos, sin embargo, el alcance técnico de la presente invención no se limita a estos ejemplos.

Ejemplos A 37 becerros recién nacidos (Ganado Negro Japonés) se les proporcionaron calostro enriquecido con IgG artificial inmediatamente después del nacimiento durante 3 días. Los becerros se dividieron en 2 grupos cuando ellos cumplieron 4 días de nacidos, y a los becerros en un grupo de prueba (18 becerros) se les proporcionaron sustituto de leche que contenía Prebio Support (marca comercial registrada Miji Feed Co., Ltd.,) de modo que la dosis de Prebio Support fue 20 g/día, y a los becerros en un grupo de control (19 becerros) se proporcionaron únicamente con el sustituto de leche hasta que los becerros cumplieron 60 días de nacidos. Después de esto, solo a los becerros en el grupo de prueba se les proporciono un alimento con (50 g/día) obtenido formulando el PS en tabletas hasta que los becerros alcanzaron 90 días de nacidos. Durante el período de prueba, a todos los becerros se les proporciono un concentrado para becerros (arrancador) a placer, y las condiciones de salud de los becerros y el número de veces de los tratamientos se registraron.

Incidentemente, Prebio Support (PS) es un nombre comercial de Meiji Feed Co., Ltd. y es un producto en polvo obtenido formulando una mezcla de un residuo de un cultivo de la cepa de Lactobacillus gasseri OLL 2716 (FERM BP-6999) (LG) y un producto de fermentación de la cepa Propionibacterium freudenreichii ET-3 (FERM BP-8115) (un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico) en una preparación usando dextrina, lactosa, y dióxido de silicio. En este ejemplo, un producto en el cual la relación de la mezcla del LG con el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico que es de 9:1 fue utilizado.

Incidentemente, como el calostro artificial, un producto de Bayer Medical Co., Ltd. (nombre comercial: Head Start (marca registrada), valor componente: proteína (el 45%)) que tiene un contenido de IgG de 26.7% (60 g/225 g) se utilizó. Como el sustituto de leche, un producto de Meiji Feed Co., Ltd. (nombre comercial: Premium Meirac (marca registrada de Meiji Dairies Corporation), valores del componente: proteína (el 24%), grasa (20%)) que contiene proteína de leche y aceite vegetal y grasa como ingredientes principales se utilizaron. Como alimentación mezclada para becerros, un producto de Meiji Feed Co., Ltd. (nombre comercial: Premium Meistarter, valores del componente: proteína (20%), alimentos digeribles totales (75%)) que contiene comida de maíz y de soja como ingredientes principales se utilizaron.

Como resultado, durante el período de prueba, 3 becerros entre los 19 becerros en el grupo de control desarrollaron presencia de sangre en las heces (índice de incidencia: 15.8%), sin embargo, los 18 becerros en el grupo de prueba no desarrollaron ninguna presencia de sangre en las heces (índice de incidencia: 0.0%) (Tabla 1). En este tiempo, cada uno de los becerros que desarrollaron presencia de sangre en las heces se examinó y se confirmó que la presencia de sangre en las heces fue causada por coccidiosis en todos los casos.

Tabla 1 Además, el número promedio de días por becerro que sufre de presencia de sangre en las heces durante el período de prueba fue de 0.58 en el grupo de control, sin embargo, fue de 0 en el grupo de prueba (figura 1 o tabla 2). Además, el número total promedio de tratamientos por becerro requerido por diarrea coccidial tal como un agente antiparásito o rehidratación durante el período de prueba fue de 0.58 en el grupo de control, sin embargo, fue 0 en el grupo de prueba (figura 2 o tabla 2).

Tabla 2 Por consiguiente, se encontró que administrando un material (mezcla) que contiene ambos, el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico a través de la alimentación, la ocurrencia de coccidiosis en un ambiente de crianza normal fue controlada, y se reveló que estos ingredientes activos tienen un efecto anticoccidial.

La conclusión de la presente invención es como sigue. Es decir, un objetivo de la presente invención es proporcionar una composición anticoccidial para humanos y/o animales no humanos (particularmente, ganado y aves de corral), la cual es altamente segura sin efectos secundarios, un agente para uso médico para prevenir o tratar coccidiosis, un agente para un alimento o una bebida para uso en la prevención de la coccidiosis o preservación de la salud, un aditivo alimenticio, y una alimentación que comprende la misma. Además, otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método para controlar coccidiosis en humanos y/o animales no humanos que usan el mismo y un método para criar animales no humanos que usan los mismos. Los medios para alcanzar los objetivos son como sigue. Usar un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y/o un producto de fermentación de suero de una bacteria de ácido propiónico como un ingrediente activo, un agente administrable oralmente para prevenir y/o tratar coccidiosis (un farmacéutico o farmacéutico veterinario), un agente para un alimento o bebida para uso en la prevención o tratamiento de la coccidiosis o la preservación de la salud (un alimento o una bebida), una alimentación, y un aditivo alimenticio.

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1. Un método para controlar la coccidiosis, caracterizado por administrar oralmente lo siguiente (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico a los animales durante un largo periodo de tiempo mayor de 25 días después del nacimiento: (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico (Lactobacillus gasseri): por lo menos una de las células bacterianas de ácido láctico obtenida neutralizando el cultivo de una bacteria de ácido láctico que pertenece al genero Lactobacillus gasseri en un medio que contiene el derivado de la proteína de suero, un cultivo de la bacteria de ácido láctico, una célula dañada de la bacteria de ácido láctico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido láctico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, un producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado); y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Propionibacterium freudenreichii): por lo menos una de las células bacterianas de ácido propiónico obtenida cultivando una bacteria de ácido propiónico que pertenece al genero Propionibacterium freudenreichii en un medio que contiene suero (suero y/o suero tratado con proteasa), un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado).

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado en que el producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y el producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico son líquidos de fermentación obtenidos tratando el cultivo de la bacteria de ácido láctico y el cultivo de la bacteria de ácido propiónico por separación de sólido-líquido y/o los productos secos de los mismos.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado en que el período de administración es de 30 días después del nacimiento a 90 días después del nacimiento.

4. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado en que el medio que contiene el derivado de proteína de suero contiene por lo menos uno de un concentrado de la proteína (WPC), un aislante de la proteína de suero (WPI), y un hidrolizado del mismo.

5. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado en que la bacteria de ácido láctico es la cepa Lactobacillus gasseri OLL 2716 (FERN BP-6999), y la bacteria de ácido propiónico es la cepa Propionibactrium freudenreichii ET-3 (FERM BP-8115).

6. Un agente anticoccidial, caracterizado porque comprende lo siguiente (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico como ingredientes activos: (A) un producto de fermentación de una bacteria de ácido láctico (Lactobacillus gasseri): por lo menos una de las células bacterianas de ácido láctico obtenida neutralizando el cultivo de una bacteria de ácido láctico que pertenece al genero Lactobacillus gasseri en un medio que contiene el derivado de la proteína de suero, un cultivo de la bacteria de ácido láctico, una célula dañada de la bacteria de ácido láctico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido láctico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, un producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado); y (B) un producto de fermentación de una bacteria de ácido propiónico (Propionibacterium freudenreichii): por lo menos una de las células bacterianas de ácido propiónico obtenida cultivando una bacteria de ácido propiónico que pertenece al genero Propionibacterium freudenreichii en un medio que contiene suero (suero y/o suero tratado con proteasa), un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, una célula dañada de la bacteria de ácido propiónico, un residuo de un cultivo de la bacteria de ácido propiónico, y un producto tratado del mismo (por lo menos uno seleccionado de un producto concentrado, producto adherido, producto seco, producto líquido, producto diluido, y un producto esterilizado).

7. El agente anticoccid ¡al de acuerdo con la reivindicación 6, caracterizado por ser un agente anticoccidial para humanos y/o animales no humanos.

8. El agente anticoccidial de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizado en que los animales son cualquiera de ganado, aves de corral, roedores, y animales domésticos.

9. El agente anticoccidial de acuerdo con la reivindicación 7 u 8, caracterizado en que los animales son ganado bovino.

10. Un alimento de animal para prevenir y/o tratar la coccidiosis, caracterizado porque comprende el agente anticoccidial de acuerdo con la reivindicación 8 ó 9.

11. Un método para criar animales mientras previene y/o trata la coccidiosis, caracterizado por administrar el agente anticoccidial de acuerdo con la reivindicación 8 ó 9, o el alimento de animal de acuerdo con la reivindicación 10.