MX2011000934A - Aplicaciones de glifosato en acuicultura. - Google Patents
Aplicaciones de glifosato en acuicultura.Info
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Abstract
Se proveen métodos para controlar una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático. Los métodos ejemplares incluyen aplicar una cantidad efectiva de glifosato a una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático. Las algas pueden incluir los géneros Nannochloropsis y/o Dunaliella. Las algas también pueden incluir una cepa resistente a glifosato del género Nannochloropsis. La cantidad efectiva puede resultar en una concentración aproximada de entre 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático. Adicionalmente, el ambiente acuático puede incluir agua de mar. El glifosato se puede aplicar al ambiente acuático antes y/o después de inocular el ambiente acuático con algas. Los métodos alternativos incluyen aplicar una cantidad efectiva de glufosinato a una densidad algas que crecen en un ambiente acuático.
Description
APLICACIONES DE GLIFOSATO EN ACUICULTURA
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
CAMPO DE LA INVENCIÓN
Esta invención se refiere a biología molecular, y más específicamente a aplicaciones de glifosato en acuicultura.
DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA
Por lo general glifosato es conocido como un herbicida de translocación aplicado foliar usado para controlar la mayoría de la vegetación litoral y varias hierbas emergentes tales como nenúfar amarillo (Nupharluteum) y hierba de lagarto (Alternanthera philoxeroides). Glifosato se transloca del follaje tratado a órganos de almacenamiento subterráneo como rizomas. Por lo general es muy efectivo cuando se aplica durante la etapa de floración o fructífera de una hierba. Si cae lluvia en seis horas después de la aplicación, se reduce la efectividad de glifosato. Por consiguiente, se esperaría que glifosato no fuera efectivo al aplicarse en un ambiente acuático. Adicionalmente, las autoridades tal como el Servicio de Extensión Cooperativa de Oklahoma (Aquatic Weed Management, Herbicides, SRAC-361 como se encuentra en http://osufacts.okstate.edu) han citado la respuesta pobre de algas planctónicas, filiformes y de
Chara/Nitella a glifosato, recomendando mejor el uso de cobre y complejos de cobre para controlar el crecimiento de algas. Por consiguiente, las modalidades ejemplares descritas en la presente que involucran aplicaciones de glifosato en acuicultura son novedosas y no obvias en vista de enseñanzas anteriores.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
Se proveen métodos para controlar una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático. Los métodos ejemplares incluyen aplicar una cantidad efectiva de glifosato a una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático. Las algas pueden incluir los géneros Nannochloropsis y/o Dunaliella. Las algas también pueden incluir una cepa resistente a glifosato del género Nannochloropsis. La cantidad efectiva puede resultar en una concentración aproximada de entre 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático. Adicionalmente, el ambiente acuático puede incluir agua de mar. El glifosato se puede aplicar al ambiente acuático antes y/o después de inocular el ambiente acuático con algas. Un producto ejemplar puede incluir una biomasa generada del género algal Nannochloropsis cultivado en un ambiente acuoso que comprende una cantidad efectiva de glifosato. Los métodos alternativos incluyen aplicar una cantidad efectiva de glufosinato a una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
La figura 1 muestra una gráfica de concentración de glifosato (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glifosato;
La figura 2 muestra una gráfica de concentración de glifosato (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glifosato;
La figura 3 muestra una gráfica de concentración de cloruro de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular;
La figura 4 muestra una gráfica de concentración de cloruro de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular;
La figura 5 Muestra una gráfica de concentración de hidróxido de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular;
La figura 6 muestra una gráfica de concentración de hidróxido de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular;
La figura 7 muestra una gráfica de concentración de glufosinato (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de
Nannochloropsis ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glufosinato; y
La figura 8 muestra una gráfica de flujo para un método ejemplar de controlar la densidad de alga en un ambiente acuático.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Se proveen métodos para controlar una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático. Dichos métodos pueden incluir aplicar una cantidad efectiva de glifosato a la densidad de algas. Las algas pueden incluir los géneros Nannochloropsis y/o Dunaliella. Las algas también pueden incluir una cepa resistente a glifosato del género Nannochloropsis. La cantidad efectiva puede resultar en una concentración aproximada de entre 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático. Se pueden generar productos ejemplares que incluyen una biomasa del Nannochloropsis cultivado en el ambiente acuático teniendo una cantidad efectiva de glifosato.
La figura 1 muestra una gráfica de concentración de glifosato (eje X) contra la densidad óptica (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glifosato. Como se muestra en la figura 1, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de glifosato en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de algas que crecen en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Nannochloropsis en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó glifosato a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Nannochloropsis, sin embargo, las placas de pozo no fueron tratadas con glifosato. Después de aproximadamente seis días, se tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de glifosato. Como se muestra en la figura 1, el glifosato controló (inhibió) el crecimiento de Nannochloropsis. En un punto en la gráfica ejemplar mostrada en la figura 1, aproximadamente 0.8 milimolar de glifosato inhibió el crecimiento de Nannochloropsis por aproximadamente cincuenta por ciento (50%).
La figura 2 muestra una gráfica de concentración de glifosato
(eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glifosato. Como se muestra en la figura 2, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de glifosato en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de algas que crecen en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Dunaliella en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme
entre seis placas de pozo. Se agregó glifosato a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Dunaliella, pero río fueron tratadas con glifosato. Después de aproximadamente seis días, se tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanometros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de glifosato. Como se muestra en la figura 2, el glifosato controló (inhibió) el crecimiento de Dunaliella. Una concentración de aproximadamente 1.2 milimolar de glifosato inhibió el crecimiento de Dunaliella por aproximadamente cincuenta por ciento (50%).
La figura 3 muestra una gráfica de concentración de cloruro de amonio (eje X) contra la densidad óptica (eje Y) para un cultivo de Nannochioropsis ejemplar particular. Como se muestra en la figura 3, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de cloruro de amonio en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de Nannochioropsis que crece en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanometros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Nannochioropsis en siete (7) mililitros de medió F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó cloruro de amonio a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Nannochioropsis, pero no fueron tratadas con cloruro de amonio. Después de aproximadamente seis días, se
tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de cloruro de amonio. Como se muestra en la figura 3, el cloruro de amonio no inhibió el crecimiento de Nannochloropsis. Ya que se puede formular glifosato en cloruro de amonio, los resultados mostrados en la figura 3 demuestran que los niveles aumentados de amonio tienen poco o ningún efecto perjudicial en el crecimiento de Nannochloropsis. Estos resultados sugieren fuertemente que glifosato es el ingrediente activo responsable por controlar los cultivos de alga descritos y como se ilustra en la presente.
La figura 4 muestra una gráfica de concentración de cloruro de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular. Como se muestra en la figura 4, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de cloruro de amonio en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de Dunaliella que crece en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Dunaliella en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó cloruro de amonio a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Dunaliella, pero no fueron tratadas con cloruro de
amonio. Después de aproximadamente seis días, se tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de cloruro de amonio. Como se muestra en la figura 4, el cloruro de amonio no inhibió el crecimiento de Dunaliella. Los resultados mostrados en la figura 4 demuestran que los niveles aumentados de amonio tienen poco o ningún efecto perjudicial en el crecimiento de Dunaliella. Estos resultados sugieren fuertemente que glifosato es el ingrediente activo responsable por controlar los cultivos de alga descritos y como se ilustra en la presente.
La figura 5 muestra una gráfica de la concentración de hidróxido de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Dunaliella ejemplar particular. Como se muestra en la figura 5, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de hidróxido de amonio en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de Dunaliella que crece en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Dunaliella en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó hidróxido de amonio a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Dunaliella, pero nó fueron tratadas con hidróxido de amonio. Después de aproximadamente seis días, se tomaron
mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de hidróxido de amonio. Como se muestra en la figura 5, el hidróxido de amonio no inhibió el crecimiento de Dunaliella. Ya que se puede formular glifosato en hidróxido de amonio, los resultados mostrados en la figura 5 demuestran que los niveles aumentados de amonio tienen poco o ningún efecto perjudicial en el crecimiento de Dunaliella. Estos resultados sugieren fuertemente que glifosato es el ingrediente activo responsable por controlar los cultivos de alga descritos y como se ilustra en la presente.
La figura 6 muestra una gráfica de la concentración de hidróxido de amonio (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular. Como se muestra en la figura 6, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de hidróxido de amonio en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de Nannochloropsis que crece en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Nannochloropsis en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó hidróxido de amonio a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el mismo cultivo de Nannochloropsis, pero no fueron tratadas con hidróxido de amonio. Después de aproximadamente seis días, se
tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para cada una de las varias concentraciones de hidróxido de amonio. Como se muestra en la figura 6, el hidróxido de amonio no inhibió el crecimiento de Nannochloropsis. Ya que se puede formular glifosato en hidróxido de amonio, lós resultados mostrados en la figura 6 demuestran que los niveles aumentados de amonio tienen poco o ningún efecto perjudicial en el crecimiento de Nannochloropsis. Estos resultados sugieren fuertemente que glifosato es el ingrediente activo responsable por controlar los cultivos de alga descritos y como se ilustra en la presente.
La figura 7 muestra una gráfica de la concentración de glufosinato (eje X) contra la densidad óptica medida (eje Y) para un cultivo de Nannochloropsis ejemplar particular tanto antes como después de la aplicación de glufosinato. Como se muestra en la figura 7, el eje X muestra la concentración milimolar aproximada de glufosinato en un ambiente acuático. El eje Y muestra la densidad óptica promedio aproximada de algas que crecen en el ambiente acuático, como se midió a longitud de onda de tanto 680 como 750 nanómetros.
De acuerdo con un método ejemplar, se introdujo treinta (30) microlitros de un cultivo de Nannochloropsis en siete (7) mililitros de medio F2 en agua de mar. La mezcla se distribuyó de manera uniforme entre seis placas de pozo. Se agregó glufosinato a varias concentraciones. Se inocularon placas de pozo adicionales con el
mismo cultivo de Nannochloropsis, sin embargo, las placas de pozo no fueron tratadas con glufosinato. Después de aproximadamente seis días, se tomaron mediciones de densidad óptica a tanto 680 como 750 nanómetros en triplicado para Cada una de las varias concentraciones de glufosinato. Como se muestra en la figura 7, el glufosinato controló (inhibió) el crecimiento de Nannochloropsis. En un punto de la gráfica ejemplar mostrada en la figura 7, aproximadamente 25 micromolar de glufosinato inhibió el crecimiento de Nannochloropsis por aproximadamente cincuenta por ciento (50%).
La figura 8 muestra una gráfica de flujo para un método ejemplar para controlar la densidad de algas en un ambiente acuático.
En el paso opcional 805, se aplica una cantidad efectiva de glifosato al ambiente acuático antes de inocular el ambiente acuático con un cultivo algal creciente. Dicho paso se puede observar como una medida profiláctica. De acuerdo con una modalidad ejemplar, aplicar una cantidad efectiva de glifosato resulta en una concentración de entre aproximadamente 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático. Este paso se puede realizar además de o en sustitución del paso 830 como se describe en la presente.
De acuerdo con una modalidad alternativa, una cantidad efectiva de glufosinato se aplica al ambiente acuático antes de inocular el ambiente acuático con un cultivo algal creciente.
En el paso 810, se puede inocular un ambiente acuático con un cultivo algal. De acuerdo a varias modalidades ejemplares, un ambiente acuático puede ser un estanque abierto, un estanque cerrado y/o un biorreactor. Además, un cultivo algal puede comprender una o más cepas del género Nannochloropsis, Dunaliella y/o cepas resistentes a glifosato de los mismos. Por ejemplo, un ambiente acuático puede incluir una cepa o múltiples cepas de algas resistentes a inhibición de glifosato, de modo que la adición de glifosato ayuda a mantener un cultivo uni-algal. Por ejemplo, una cepa de algas teniendo resistencia a glifosato puede sobrevivir en presencia de una concentración particular de glifosato, mientras que la misma cepa carente de resistencia de glifosato quizá no sobreviva en la misma concentración de glifosato. En tal caso, se puede generar una cepa resistente a glifosato al transformar algas con un gen de 5-endopiruvishikimate-3-fosfato (ESPS) sintasa que codifica una proteína insensible a glifosato. Alternativamente, se puede generar una cepa resistente a glifosato por mutagénesis de células de alga seguido por selección con glifosato.
De acuerdo con varias modalidades, se pueden iniciar cultivos de alga al exterior con la adición de una cantidad inicial, pequeña de cultivo de alga puro (virtualmente libre de organismos contaminantes no deseados). Dicho inoculo sé puede generar en un ambiente controlado, tal como un laboratorio o un sistema cerrado. El inoculo se puede introducir en un volumen más grande de agua que puede tener una salinidad predeterminada elegida para ser óptima para el
crecimiento de la cepa de alga deseada, y/o puede ser sub-óptima para cepas competentes.
Una vez inoculado el cultivo de alga y crecido a una densidad deseada, de acuerdo con algunas modalidades, se puede eliminar (y se puede iniciar un cultivo nuevo con un inoculo nuevo) o se puede diluir de acuerdo con un horario o velocidad prescrita. En el primer caso, el cultivo se puede realizar en un modo de tanda y puede requerir re-inoculación frecuente. En el último caso, se puede realizar cultivo en un modo continuo o semi-continuo, dependiendo de la manera en la cual en realidad se realiza la dilución. Por ejemplo, suponiendo que la velocidad de dilución deseada sea 50% diaria, la dilución de cultivo ocurre en una o más de varias técnicas. La dilución de cultivo puede ocurrir continuamente durante el día (o parte del día) a una velocidad constante o a una variable. La dilución de cultivo alternativamente puede ocurrir semi-coritinuamente una vez al día (es decir, 50% del cultivo es eliminado y reemplazado con un medio de crecimiento nuevo en un periodo de tiempo corto cada día); semi-continuamente dos veces al día (es decir, 25% del cultivo es eliminado cada vez a dos veces diferentes cada día); o semi-continuamente a cualquier otra frecuencia deseada durante el día.
En algunas modalidades, la dilución de cultivo puede comprender eliminar el medio de cultivo de alga del sistema de crecimiento - ya sea que esto está en un estanque abierto o en un fotobiorreactor cerrado - y reemplazando esta porción con medio fresco, lo que puede contener todos los nutrientes en la cantidad
suficiente para el crecimiento de las algas entre dos diluciones consecutivas. Los nutrientes se pueden agregar por separado como se menciona en la presente. También, al variar la salinidad del medio fresco, la salinidad en el cultivo microalgal se puede mantener dentro de un rango prescrito que puede ser óptimo para la cepa de alga específica y/o sub-óptimo para cepas competentes.
De acuerdo con una modalidad alternativa, un cultivo de alga puede comprender una o más cepas del género Nannochloropsis, Dunaliella, y/o cepas resistentes a glufosinato de los mismos. Por ejemplo, un ambiente acuático puede incluir una cepa o múltiples cepas de algas resistentes a inhibición de glufosinato, de modo que la adición de glufosinato ayuda a mantener un cultivo uni-algal. Una cepa de algas teniendo resistencia a glufosinato puede sobrevivir en presencia de una concentración particular de glufosinato, mientras que la misma cepa carente de resistencia a glufosinato quizá no sobreviva en la misma concentración de glufosinato. Una cepa resistente a glufosinato se puede generar por mutagenesis de células de alga seguido por selección con glufosinato.
En el paso 820, el cultivo de alga es crecido en el ambiente acuático. De acuerdo con varias modalidades, las algas pueden ser microorganismos fotosintéticos que pueden requerir luz (natural o artificialmente suministrada) para crecer, así como nutrientes. Otros parámetros tales como temperatura, pH, y salinidad deben estar dentro de rangos aceptables. Los elementos básicos típicamente requeridos para crecimiento de algas pueden incluir carbón,
nitrógeno, fósforo, hierro, azufre, y/o rastros de varios otros elementos, tales como magnesio, potasio, etc. Las algas se pueden reproducir asexualmente vía mitosis, o se pueden reproducir sexualmente a través de la formación de gametos. Los tiempos de generación para reproducción asexual pueden variar de unas pocas horas a días.
Los nutrientes requeridos pueden estar contenidos en el agua, suministrada posteriormente en agua de dilución, o suministrada independientemente del agua de dilución, en una concentración suficiente para permitir a las algas crecer y alcanzar una'densidad final deseada. La cantidad de nutriente necesario para producir una densidad de alga prescrita se puede determinar por la cuota celular para ese nutriente. Es decir, por el por ciento de la masa seca de alga que está comprendida del elemento contenido en el nutriente. Lo inverso de la cuota celular se llama potencial de crecimiento de alga para ese nutriente o elemento. Por ejemplo, si la densidad final deseada es 1 gramo/litro y la cepa de alga bajo consideración contiene 10% de nitrógeno en su biomasa (es decir, una cuota celular de 0.1), entonces la concentración inicial del nitrógeno atómico en el cultivo debe ser por lo menos 0.1 gramo/litro. El mismo cálculo se puede realizar para todos los nutrientes para establecer su concentración inicial en el cultivo.
Cualquier sistema utilizado para cultivo de masa al exterior de algas se puede optimizar para crecimiento de alga. No se puede controlar la luz ambiental y temperatura. Sin embargo, la luz y
temperatura dentro de un sistema de cultivo pueden depender del sistema real utilizado. Por ejemplo, la intensidad de luz promediada de tiempo a la que el cultivo de alga se puede exponer se puede ajustar por cambios en la intensidad de mezcla y en la profundidad óptica del aparato. En fotobiorreactores modulares en forma de panel, lo último se puede realizar al controlar la distancia entre dos paneles consecutivos. Por el otro lado, la profundidad óptica en estanques abiertos simplemente puede ser la profundidad del estanque. De manera similar, la temperatura en fotobiorreactores cerrados se puede controlar precisamente por medio de intercambio de calor indirecto mientras que en estanques abiertos, el control de temperatura puede estar limitado y se puede realizar al ajustar profundidad de cultivo.
De acuerdo con varias modalidades, la salinidad en el medio inicial puede variar entre 1 y 60 partes por mil (ppt). Sin embargo, para mantener el dominante de Nannochloropsis en el cultivo, se puede elegir una salinidad de 15 a 35 ppt. Esto se puede lograr, por ejemplo, al mezclar 2/3 de agua de mar teniendo una salinidad de 35 ppt con 1/3 de agua fresca para obtener una salinidad de 23-24 ppt. Otras relaciones de agua de mar y agua fresca se pueden usar para lograr el nivel deseado de salinidad en el cultivo de crecimiento. El medio de crecimiento con la salinidad deseada se puede obtener por otros medios, tal como al agregar sal a agua fresca en la cantidad requerida.
Después de 2 a 10 días, los cultivos de Nannochloropsis pueden alcanzar una densidad operante productiva dependiendo de la intensidad de luz (aislamiento si se utilizan estanques abiertos), temperatura, y el tamaño de inoculo de inicio. Si se utiliza cultivo semi-continuo o continuo, el cultivo de Nannochloropsis por lo regular se puede diluir a una velocidad de dilución diaria que varía entre 20% y 70%. De esta manera, una porción del cultivo que varía entre 20% y 70% del volumen entero se puede reemplazar con agua nueva que puede tener la misma concentración de nutriente del medio inicial utilizado para inoculación, o el nutriente se puede agregar por separado. La salinidad del medio nuevo se puede ajustar al controlar la relación de agua de mar y agua fresca (o al agregar la cantidad requerida de sal a agua fresca o por otros métodos similares) para mantener la salinidad del cultivo antes de que la dilución haya aumentado a 30 ppt debido a evaporación y la velocidad de dilución deseada es 50%, entonces el medio nuevo puede necesitar tener una salinidad de aproximadamente 20 ppt para lograr una salinidad de 25 ppt después de la dilución. Esto se puede lograr manualmente o por sistemas de control automáticos.
En el paso 830, una cantidad efectiva de glifosato se aplica al cultivo de algas en crecimiento en el ambiente acuático. De acuerdo con una modalidad ejemplar, aplicar una cantidad efectiva de glifosato resulta en una concentración de entre aproximadamente 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático. De acuerdo con algunas modalidades, se cultiva Nannochloropsis a una
salinidad mayor de 25 ppt, el cultivo exterior es más propenso a ser invadido por otros microorganismos que finalmente sobrepasan Nannochloropsis. Sin embargo, se puede mantener dominancia de Nannochloropsis al aplicar una cantidad efectiva de glifosato. A concentraciones menores de algas, se requerirá menos glifosato; a concentraciones mayores de algas, probablemente se pueda requerir más glifosato.
De acuerdo con una modalidad alternativa, una cantidad efectiva de glufosinato se aplica al cultivo de algas en crecimiento en el medio acuático.
Aunque varias modalidades se describen en la presente, se debe entender que están presentadas por medio de ejemplo solamente, y no limitación. De esta manera, la anchura y alcance de una modalidad preferida no debe limitarse por ninguna de las modalidades ejemplares descritas.
Claims (21)
1. - Un método para controlar una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático, el método que comprende: aplicar una cantidad efectiva de glifosato a la densidad de alga que crece en el ambiente acuático.
2. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la alga incluye el género Nannochloropsis.
3. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la alga incluye el género Dunaliella.
4. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la alga incluye una cepa resistente a glifosato del género Nannochloropsis.
5. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde aplicar la cantidad efectiva resulta en una concentración aproximada de entre 0.1 milimolar a 0.3 milimolar de glifosato en el ambiente acuático.
6. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la densidad de la alga antes de aplicar la cantidad efectiva tiene una densidad óptica normalizada aproximada de 1.0 como se midió a una longitud de onda aproximada de 750 nanómetros.
7. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático incluye agua de mar.
8. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático incluye agua fresca.
9. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático incluye una mezcla de agua de mar y agua fresca.
10. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la cantidad efectiva de glifosato en el ambiente acuático es aproximadamente 0.8 milimolar.
11. - El método de conformidad con la reivindicación 10, en donde la cantidad efectiva de glifosato inhibe el crecimiento de Nannochloropsis por aproximadamente cincuenta por ciento.
12.- El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la cantidad efectiva de glifosato en el ambiente acuático es aproximadamente 1.2 milimolar.
13. - El método de conformidad con la reivindicación 12, en donde la cantidad efectiva de glifosato inhibe el crecimiento de Dunaliella por aproximadamente cincuenta por ciento.
14. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático está en un biorreactor.
15. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático está en un estanque abierto.
16.- El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático está en un recipiente abierto.
17. - El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el ambiente acuático está en un recipiente cerrado.
18. - El método de conformidad con la reivindicación 1, el método que comprende además: dejar que la densidad de las algas regrese a una densidad óptica observada antes de realizar el método de la reivindicación 1.
19. - El método de conformidad con la reivindicación 1, el método que comprende además. generar una cepa resistente a glifosato de Nannochioropsis al introducir un gen de 5-endopiruvilshikimate-3-fosfato (ESPS) sintasa insensible a glifosato en Nannochioropsis de tipo silvestre.
20. - Un producto que comprende: una biomasa generada de algas del género Nannochioropsis cultivadas en un ambiente acuático que comprende una cantidad efectiva de glifosato.
21. - Un método para controlar una densidad de algas que crecen en un ambiente acuático, el método que comprende: aplicar una cantidad efectiva de glufosinato a la densidad de algas que crecen en el ambiente acuático.
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