MX2009002063A - Tratamiento de desordenes en cartilagos con factor de crecimiento de fibroblastos-18. - Google Patents

Abstract

Esta invención se refiere al tratamiento del desorden en cartílago y osteoartritis en particular; más específicamente, se refiere al uso de FGF-18 en regímenes de tratamiento y para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de pacientes que tienen un desorden en cartílago tal como osteoartritis, tal como por ejemplo osteoartritis de rodilla u osteoartritis de cadera secundaria; específicamente se provee un esquema de tratamiento preferido que comprende una administración de una vez por semana del compuesto FGF-18 por ciclo de tratamiento.

Description

TRATAMIENTO DE DESORDENES EN CARTILAGOS CON FACTOR DE CRECIMIENTO DE FIBROBLASTOS -18 CAMPO DE LA INVENCION Esta invención pertenece al campo de la medicina y se refiere al tratamiento de desórdenes de cartílagos y osteoartritis en particular. Más específicamente, se refiere al uso de FGF-18 en regímenes de tratamiento para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de pacientes que poseen un desorden de cartílago tal como osteoartritis, tal como, por ejemplo, osteoartritis de rodilla o osteoartritis de cadera secundaria. Específicamente se provee un esquema de tratamiento que comprende la administración de una vez por semana de un compuesto de FGF-18 por ciclo de tratamiento.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION FGF18 se identifica como un miembro de la familia FGF que fue mayormente asociada con FGF8 y FGF17. Las actividades asociadas con FGF18 incluyen la estimulación de células de linaje mesenquimal, en particular miocitos cardíacos, osteoblastos y condrocítos (Patente US No. 6.352.971 ). FGF18 se une a y active FGFR4 y la variante y la variante de empalme lile de FGFR3 y FGFR2.

El remodelamiento óseo es el procedimiento dinámico por el cual se mantienen la masa de tejido y la arquitectura esquelética. El procedimiento es un equilibrio entre la resorción ósea y la formación ósea, con dos tipos de células que se consideran los principales protagonistas. Estas células son los osteoblastos y los osteoblastos. Los osteoblastos sintetizan y depositan matriz que se convertirá en hueso nuevo. Las actividades de los osteoblastos y osteoblastos son reguladas por muchos factores, factores sistémicos y locales, incluyendo factores de crecimiento. El cartílago es un tipo de tejido conectivo denso. Está compuesto por células llamadas condrocitos, que se dispersan en una sustancia tipo gel firme, llamada matriz. El cartílago es avascular (no contiene vasos sanguíneos) y los nutrientes se diseminan a través de la matriz. El cartílago se encuentra en las articulaciones, caja torácica, la oreja, la nariz, en la garganta y entre los discos intervertebrales. Existen tres tipos principales de cartílago: hialino, elástico y fibrocartílago. La principal función del cartílago es proveer una estructura sobre la cual puede iniciarse el depósito del hueso. Otra función importante del cartílago es proveer superficies lisas y protección mecánica para el movimiento de huesos articulares. El reemplazo de cartílago dañado, en particular cartílago articular, causado por herida o enfermedad es un gran desafío para los médicos, y los tratamientos disponibles son considerados impredecibles y efectivos durante solamente un tiempo limitado. Virtualmente todos los tratamientos actualmente disponibles están dirigidos a aliviar el dolor, con poca o ninguna eficacia sobre la regeneración del tejido dañado. Por lo tanto, la mayoría de los pacientes más jóvenes no buscan tratamiento o son aconsejados para posponer el tratamiento tanto como sea posible. Cuando se requiere tratamiento, el procedimiento convencional es el reemplazo total de la articulación o microfractura, un procedimiento que comprende penetración del hueso subcondral para estimular la deposición de fibrocartílago por condorcitos. Para pacientes con osteoartritis, el tratamiento no quirúrgico consiste en terapia física, modificación del estilo de vida (por ejemplo, reducción de actividad), dispositivos de sostén, drogas orales e inyectables (por ejemplo, drogas antiinflamatonas no esteroides), y control médico. Las opciones quirúrgicas son muy específicas con respecto a la severidad de osteoartritis y pueden proveer una reducción en los síntomas que son generalmente de corta duración. La osteotomía tibial o femoral (corte de hueso para reequílibrar el desgaste de articulación) puede reducir los síntomas, ayudar a mantener un estilo de vida activo, y demorar la necesidad de reemplazo total de articulación. El reemplazo total de articulación puede proveer alivio para el síntoma de osteoartritis avanzada, pero en general requiere un cambio en el estilo de vida o nivel de actividad del paciente. Por lo tanto, sería conveniente tener un método para tratar, prevenir o aliviar los síntomas de desórdenes en cartílagos que permitiría la regeneración del tejido dañado. Además, sería conveniente que dicho método sea tan seguro y efectivo como fuera posible. Además, como los desórdenes en cartílagos pueden ser enfermedades crónicas, sería conveniente que dicho método permita el re-tratamiento del paciente.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención provee un método para tratar a un paciente que posee un desorden en cartílago y que comprende la administración de un compuesto FGF-18, en donde el compuesto FGF-18 es administrado por lo menos dos veces, y en donde dichas administraciones son espaciadas en alrededor de 4, preferentemente 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días. En las modalidades preferidas de la invención, el desorden en cartílago a ser tratado es osteoartritis, el compuesto FGF-18 es el fragmento FGF-18 que se designa en la presente como FGF-18(170AA) y el ciclo de posología es de 10 a 30 mcg por inyección intra-articular una vez por semana durante 3 semanas consecutivas (un ciclo de tratamiento). En una modalidad preferida, dichos ciclos de tratamiento pueden repetirse después de 4 o 6 meses. Por ejemplo cuando un ciclo de tratamiento es repetido después de 6 meses, si un primer ciclo de tratamiento es iniciado por ejemplo en enero de un año determinado, entonces un Segundo ciclo de tratamiento puede comenzarse en Julio de dicho año. En la presente se provee además el uso de un el compuesto FGF- 8 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de paciente que posee un desorden de cartílago, en donde el compuesto FGF-18 es administrado por lo menos dos veces, en donde dichas administraciones están separadas por períodos de alrededor de 4, preferentemente 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días. También se provee en la presente el uso de un el compuesto FGF-18 para el tratamiento de un paciente que posee un desorden en cartílago en donde el compuesto FGF-18 es administrado por lo menos dos veces, en donde dichas administraciones tienen una separación de alrededor de 4, preferentemente 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención provee modalidades de tratamiento adecuadas, incluyendo esquemas de administración adecuados para el tratamiento de varios desórdenes en cartílagos, tal como, en particular osteoartritis, con compuestos FGF- 8, tal como por ejemplo, el fragmento de proteína FGF-18(170AA). En el contexto de la presente invención, se ha encontrado en forma sorprendente que los compuestos FGF-18 poseen óptimos efectos de alivio de enfermedad o síntomas en desórdenes en cartílagos, cuando se administran de acuerdo con los métodos y usos revelados en la presente. Se ha encontrado que regímenes de dosis menos frecuentes que las contempladas por la presente invención pueden no ser totalmente efectivos, mientras que las dosis más frecuentes a las contempladas por la presente invención pueden causar inflamación y/o otros efectos adversos sobre el cartílago o el medio articular, que cuando se utilizan las dosis ¡guales o comparables a las contempladas por la presente invención. De acuerdo con esto, en un aspecto de la presente invención se provee un método para tratar a un paciente que posee un desorden en cartílago que comprende la administración de un compuesto FGF-18, en donde el compuesto FGF-18 es administrado por lo menos dos veces, y en donde dichas administraciones tienen una separación de alrededor de 4, preferentemente 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días. Por ejemplo, cuando las administraciones tienen una separación de alrededor de 4 días, una segunda administración puede realizarse alrededor de 96 horas posteriores a la primera administración; por ejemplo, cuando una administración se realiza en el día 1 , por ejemplo, en la mañana, habrá 3 días calendarios en los que el paciente no recibirá una administración (día 2, día 3, día 4) y el paciente recibirá nuevamente una administración en el día 5 en la mañana. En una modalidad particularmente preferida, dichas administraciones tienen una separación de alrededor de 6, 7 u 8 días. En una modalidad preferida, tienen una separación de alrededor de 7 días. En otro aspecto de la presente invención, se provee el uso de un el compuesto FGF-18 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un paciente que posee un desorden en cartílago en donde el compuesto FGF-18 es administrado por lo menos dos veces, y dichas administraciones se separan en alrededor de preferentemente 5, 6, 7, 8, 9 o 10 días. En una modalidad particularmente preferida, dichas administraciones tienen una separación de alrededor de, 6, 7 o 8 días. En una modalidad preferida, tienen una separación de alrededor de 7 días. En una modalidad preferida dichas administraciones tienen una separación de alrededor de 7 días cada una. Preferiblemente, el compuesto FGF-18 es administrado en intervalos regulares una vez por semana. En una modalidad preferida, el compuesto FGF-18 es administrado durante por lo menos 2 semanas consecutivas, por lo menos 3 semanas consecutivas o por lo menos 4 semanas consecutivas por ciclo de tratamiento. En una modalidad preferida, un ciclo de tratamiento es un número de semanas consecutivas en donde un el compuesto FGF-18 es administrado cada semana. En otra modalidad preferida, el compuesto FGF-18 se administra durante 2 semanas consecutivas, 3 semanas consecutivas o 4 semanas consecutivas por ciclo de tratamiento, y dicho tratamiento puede comprender 1 , 2, 3, 4, 5 o 6 ciclos de tratamiento por año. En una modalidad preferida, el compuesto FGF-18 se administra durante 3 semanas consecutivas por ciclo de tratamiento. En una modalidad preferida, dicho tratamiento comprende 2 ciclos de tratamiento por año. En una modalidad preferida, el tratamiento comprende administración intra-articular del compuesto FGF-18. Alternativamente, el tratamiento puede comprender administración intravenosa del compuesto FGF-18. En otra modalidad preferida, el tratamiento comprende la administración a una dosis de alrededor de 1-100 mcg, o preferentemente 1-60 microgramo (mcg), o preferentemente 3-50 mcg, o preferentemente 5-40 mcg, o preferentemente 10-30 mcg por administración intra-articular única del compuesto FGF-18. En una modalidad preferida el tratamiento comprende la administración a una dosis de alrededor de 3, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 mcg por administración intra-articular única del compuesto FGF-18. Las dosis preferidas incluyen 5, 10, 15, 20, 25 y 30 por administración intra-articular única del compuesto FGF-18. En otra modalidad preferida, el tratamiento comprende la administración a una dosis de 50-200 mcg/kg, preferentemente 80-120 mcg/kg por administración intravenosa única del compuesto FGF-18. En una modalidad preferida el tratamiento comprende la administración a una dosis de 80, 90, 100, 1 0 o 120 mcg/kg por administración intravenosa simple del compuesto FGF-18. En una modalidad preferida, el desorden en cartílago tratado por cualquiera de los métodos de la invención es osteoartritis, tal como por ejemplo osteoartritis que es clasificada como etapa II o etapa III de acuerdo con OARSI. En un ejemplo preferido, la osteoartritis puede ser osteoartritis de rodilla u osteoartritis de cadera, tal como osteoartritis de cadera secundaria. El experto en el arte comprenderá que las clasificaciones de osteoartritis que se utilizan en el arte. En particular, la clasificación OARSI es conocida en el arte. El experto en el arte podrá referirse a "Guidelines For The Medical Management Of Ostheoartritis" (Marc C. Hochberg, Roy D. Altman, Kenneth D. Brandt, Bruce M. Clark, Paul A. Dieppe, Marie R. Griffin, Roland W. Moskowitz, Thomas J.

Schnitzer, Arthritis & Rheumatism, Tomo 38, Número 11 , 1995. Páginas 1535-1546.) Los compuestos FGF-18 preferidos de la invención son seleccionados entre FGF-18 o FGF-18(170AA) de tipo natural humano.

Compuestos de la invención FGF-18 natural o tipo salvaje es una proteína expresada por condorcitos de cartílago articular. La presente invención generalmente se refiere al uso de un compuesto de Factor de Crecimiento Fibroblasto (Fibroblast Growth Factor) (FGF-18) en el tratamiento de osteoartritis. Un el compuesto FGF-18 de la invención incluye por ejemplo FGF-18 natural o tipo salvaje, en particular FGF-18 humano, variantes bioactivas del mismo, tal como variantes alélicas bioactivas y formas truncadas bioactivas de FGF-18. La presente invención puede referirse a cualquier variante o forma modificada de FGF-18 que retiene la bioactividad de FGF-18 deseada según se describe en la presente, tal como, en particular, el aumento en deposición de cartílago. Las bioactividades de FGF-18 incluyen en particular las descriptas en los ejemplos a continuación, tal como en particular los modelos de enfermedad in vivo que se describen en la presente. La secuencia de nucleótidos de cADN FGF-18 humano se describe en SEC ID NO. 1 , y su secuencia de aminoácidos deducida se describe en SEC ID NO. 2. FGF18 fue originalmente designado como zFGF-5, y se describe en forma completa en las Patentes Nos. US6.352.971 , US5.989.866 y la Publicación de Solicitud de Patente US US2005/0043234, todas las cuales se incorporan a la presente a modo de referencia. El análisis del cADN que codifica un polipéptido de FGF18 humano (SEQ ID NO: 1 ) reveló un marco de lectura abierto que codificada 207 aminoácidos (SEQ ID NO: 2) que comprenden un polipéptido maduro de 180 aminoácidos (residuo 28 a residuo 207 de SEQ ID NO: 2). Se encontró que la secuencia de polinucleótidos FGF-18 de ratón tal como se muestra en SEQ ID NO: 3 y la correspondiente secuencia de aminoácidos tal como se muestra en SEQ ID NO: 4 tenían un alto grado de homología a la del ortólogo humano. En el nivel de aminoácidos, los polipéptidos de ratón y humano son aproximadamente 98% idénticos, con tres cambios de aminoácidos. Los expertos en el arte reconocerán que las secuencias reveladas en SEQ ID NO: 1 o SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 2 y SEQ ID NO: 4 representan un alelo simple de polipéptido y gen FGF18 humano y de ratón, respectivamente, y que se espera que ocurran la variación alélica y el empalme. Tal como se menciona anteriormente, el compuesto FGF-18 de la invención incluye, por ejemplo, FGF-18 natural o tipo salvaje, en particular, FGF-18 humano, variantes bioactivas del mismo, tal como variantes alélicas bioactivas, y formas truncadas bioactivas de FGF-18. La presente invención puede referirse a cualquier variante o forma modificada de FGF-18 que retiene la bioactividad FGF-18 tal como se describe en la presente, tal como, en particular el aumento en deposición o acumulación de cartílago.

En una modalidad de la presente invención El compuesto FGF-18 es una forma truncada de FGF-18 humano. En una modalidad particular, dicha forma truncada de FGF-18 comprende o consiste de residuos 28 a 175 de SEQ ID NO: 2, o un derivado funcional, o variante o muteína, tal como se define en la presente. En otra modalidad, dicha forma truncada de FGF-18 comprende o consiste en 28 a 176, 28 a 177, 28 a 178, 28 a 179, 28 a 180, 28 a 181 , 28 a 182, 28 a 183, 28 a 184, 28 a 185, 28 a 186, 28 a 187, 28 a 188, 28 a 189, 28 a 190, 28 a 191 , 28 a 192, 28 a 193, 28 a 194 o 28 a 195, 28 a 196, 28 a 197, 28 a 198, 28 a 199, 28 a 200, 28 a 201 , 28 a 202, 28 a 203, 28 a 204, 28 a 205, 28 a 206 o 28 a 207 de SEQ ID NO: 2, o un derivado funcional, o una variante o muteína tal como se define en la presente. Estos polipéptidos, derivados funcionales, o variante o muteína pueden comprender un residuo de aminoácidos N-terminal adicional, preferentemente una metionina. En realidad, dependiendo del sistema de expresión y las condiciones, los polipéptidos de la invención pueden expresarse en una célula huésped recombinante con una Metionina de partida. Una modalidad preferida de la presente invención es una forma truncada de FGF-18, que contiene 170 aminoácidos (AA), en adelante también designados como "FGF-18(170AA)". El tipo salvaje o la forma natural es de 207 AA de largo de los cuales 27 AA son la secuencia de señal y los últimos 11 AA se eliminan en FGF-18(170AA) (tal como se demuestra también para la forma de ocurrencia natural de FGF-18 in vivo). FGF-18( 70AA) puede expresarse en E.coli, ya que no existe secuencia de señal y la secuencia de AA comienza con una metionina seguida por AA28 y termina con AA196. El peso molecular de FGF- 8(170AA) es 19.83 kDa, pl ~ 10. FGF-18(170AA) se describe además en SEC ID NO. 5 a continuación. FGF-18(170AA) aumenta la proliferación/diferenciación de condrocito y la acumulación de cartílago que lleva a la reparación y reconstrucción de una variedad de tejidos cartilaginosos. Los miembros de la familia FGF se caracterizan por dominios de unión de heparina. Un dominio de unión de heparina para FGF-18 ha sido identificado en la región de residuo de aminoácidos 148 (Gly) hasta residuo de aminoácidos 169 (Gln) de SEQ ID NO: 2 y SEQ ID NO: 4. Se postula que la señalización mediada por receptor se inicia con la unión de ligando FGF en complejo con proteogl ¡canos de sulfato hepática de superficie celular. Muchos miembros de la familia de FGF pueden colocarse en una de las dos familias relacionadas sobre la base de sus estructuras y funciones. aFGF y bFGF consisten en tres exones separados por dos intrones de longitud variable. FGF-18 consiste de cinco exones, los primeros tres de los cuales corresponden al primer exon de aFGF y bFGF. Todos los miembros de la familia FGF están empalmados para formar polipéptidos simples. El análisis del complejo de ligando-receptor de FGF-18 ha demostrado que FGF18 posee especificidad para FGFR4 y las variantes de empalme "Ule" de FGFR3 y FGFR2. FGFR3-lllc y FGFR2-lllc se expresan por condrocitos de tejido de cartílago, y en particular, ambos receptores se han encontrado dentro del cartílago articular humano. FGFR3 y FGFR2 se han encontrado en la placa de crecimiento de mamíferos y desempeñan funciones importantes en la formación de hueso endocondral e intramembranoso. FGFR2 se expresa en primer lugar en mesenquima condensante y la expresión de FGFR3 se inicia cuando los condorcitos se diferencian y proliferan. En los huesos craneales en desarrollo, FGFR3 se encuentra en la material dura (dura mater) y periostio, mientras que FGFR2 se expresa en células osteoprogenitoras en el frente osteogénico que separa las suturas. FGFR2 también se expresa en hueso trabecular. Previamente, se ha demostrado que FGF 8 es un agente proliferativo para condorcitos y osteoblastos, dependiendo de tanto el estado diferenciado de estos tipos de células y el modo de administración (ver, Patentes US Nos. 6.352.971 y 5.989.866; Ellsworth y otros. Osteoartritis and Cartilage, 10: 308-320,2002 ; Shimoaka y otros, J. Bio. Chem. 277 (9) 7493-500,2002). Preferentemente, el compuesto FGF-18 de la invención aumenta la acumulación o depósito de cartílago. Dicho aumento puede medirse tanto in vivo como in vitro. La generación de cartílago de hialina, cartílago elástico y fibrocartílago son valiosas tanto como un terapéutico como componente para matrices biológicas. El compuesto FGF-18s, tal como FGF-18(170AA), y las composiciones que contienen compuestos FGF-18s ("composiciones de FGF-18") serán útiles para tratar defectos de cartílago articular en articulaciones sinoviales que se deben a la fibrilación superficial relacionada con la edad, la degeneración de cartílago debido a osteoartritis, y los defectos condrales focales y osteocondrales debido a daño o enfermedad.

Los compuestos y composiciones de FGF-18 pueden también se útiles para tratar enfermedades articulares causadas por Osteocondritis Dissecans y enfermedad articular degenerativa. En el campo de la cirugía reconstructiva y plástica, las composiciones de FGF-18 serán útiles para expansión y transferencia autógena o alogénica para la reconstrucción de defectos en tejidos extensivos. Los compuestos y composiciones de FGF-18 pueden también ser útiles para expandir las células e inducir la producción de cartílago elástico. Las expansiones de células y la inducción de producción de cartílago elástico serán útiles para la generación y reparación de tejido de orejas y nariz. El compuesto y las composiciones de FGF-18 pueden también utilizarse para expandir poblaciones de condrocitos en cultivo para transplante de condrocitos autógeno o alogénico y luego administrarse con o sin tratamiento concurrente que consiste en la administración de composiciones de FGF-18. En estos procedimientos, por ejemplo, los condrocitos pueden ser recolectados artroscópicamente desde un área que lleve una carga menor sin daño de la articulación dañada, y puede cultivarse en presencia de las composiciones de FGF18 para aumentar el número de células antes del transplante. Los cultivos expandidos serán luego mezclados con las composiciones de FGF-18, y colocados en el espacio de junta o directamente en el defecto. Las composiciones de FGF-18 pueden utilizarse en combinación con injertos periosteales o pericondñales que contienen células que pueden formar cartílago y/o ayudar a sostener los condorcitos transplantados o sus células precursoras en su lugar. Las composiciones de FGF-18 pueden utilizarse para reparar el daño en cartílago en conjunción con el lavado de la junta, estimulación de la médula ósea, artosplastia de abrasión, perforación subcondral, o microfractura del hueso subcondral. Adicionalmente, después del crecimiento del cartílago debido a la administración de la composición de FGF-18, puede ser necesario un tratamiento quirúrgico adicional para delimitar adecuadamente la superficie de cartílago recién formada. Un compuesto de FGF-18 de acuerdo con la presente invención pueden también ser un derivado funcional, variante o muteína de una proteína FGF-18 de tipo salvaje. "Derivados funcionales", tal como se utiliza en la presente, cubren derivados de FGF-18, o sus variantes o muteínas y proteínas fusionadas, que pueden prepararse a partir de los grupos funcionales que se producen como cadenas laterales en los residuos o los grupos terminales N o C, por medios conocidos en el arte. Estos derivados funcionales se incluyen en la invención en tanto que los mismos permanezcan farmacéuticamente aceptables, es decir, ellos no destruyen la actividad de la proteína, que es sustancíalmente similar a o menor que, la actividad de FGF-18, y no confieren propiedades tóxicas en las composiciones que los contienen. Estos derivados pueden, por ejemplo, incluir cadenas laterales de glicol polietileno, que pueden mejorar otras propiedades de la proteína, tal como estabilidad, vida media, biodisponibilidad, tolerancia por el cuerpo humano, o reducir la inmunogenicidad. Para alcanzar este objetivo, FGF-18 puede unirse, por ejemplo, a Polietilenglicol (PEG). La PEGilación puede llevarse a cabo mediante métodos conocidos, tal como, por ejemplo, se describen en WO 92/13095. En particular, PEG-IFN puede prepararse de acuerdo con lo revelado en WO 99/55377. Por lo tanto, en una modalidad preferida, el derivado funcional de FGF-18 comprende por lo menos una parte fijada a uno o más grupos funcionales, que se producen como una o más cadenas laterales en los residuos de aminoácidos. Una modalidad en la que la porción es un porción glicol polietileno (PEG) es altamente preferida. De acuerdo con la presente invención, diversas porciones PEG pueden fijarse a FGF-18. Otros derivados incluyen una proteína de FGF-18 modificada, tal como una forma de FGF-18 de acción prolongada. En particular, el FGF- 8 de acción prolongada puede seleccionarse entre FGF-18 pegilado, proteínas de fusión FGF-18-HAS, y proteínas de fusión FGF-18-Fc-. Otros derivados incluyen ésteres alifáticos de los grupos carboxilo, amidas de los grupos por reacción con amoníaco o con aminas primaria o secundaria, los derivados N-acilo de grupos amino libres de los residuos de aminoácidos formados con porciones acilo (por ejemplo, grupos alcanoilo o aroilo carbocícliclo) o derivados de O-acilo de grupos hidroxilo libres (por ejemplo de residuos serilo o treonilo) formados con porciones acilo. Las "variantes" o "muteínas", tal como se utilizan en ámbito de la presente invención, se refieren a análogos de FGF-18, en done uno o más de los residuos de aminoácidos de FGF-18 natural son reemplazados por residuos de aminoácidos diferentes, o son eliminados, o uno o más residuos aminoácidos son agregados a la secuencia natural de FGF-18, sin reducir considerablemente la actividad de los productos resultantes según se compara con el FGF-18 tipo salvaje o natural. Estas muteínas se preparan por técnicas conocidas de síntesis y/o por técnicas de mutagénesis dirigidas al sitio, o cualquier otra técnica adecuada para las mismas. La "variante" o "muteína" de acuerdo con la presente invención incluyen proteínas codificadas por un ácido nucleico, tal como ADN o ARN, que se hibridiza en ADN o ARN que codifica FGF-18 tal como se revela en, por ejemplo, US 5.989.866 en condiciones astringentes. El término "condiciones astringentes" se refiere a hibridización y posteriores condiciones de lavado, las que son convencionalmente designadas por los expertos en el arte como "astringentes". Ver Ausubel y otros, Current Protocols in Molecular Biology, Interscience, N. Y., §§6.3 y 6.4 (1987, 1992). Sin limitación, los ejemplos de condiciones astringentes incluyen las condiciones de lavado de 12-20°C debajo de la Tm calculada del híbrido en estudio en, por ejemplo, 2 x SSC y 0.5% SDS durante 5 minutos, 2 x SSC y 0.1 % SDS por 15 minutos; 0.1 x SSC y 0.5% SDS a 37°C durante 30 60 minutos y luego, 0.1 x SSC y 0.5% SDS a 68°C durante 30-60 minutos. Los expertos en la técnica comprenderán que las condiciones de astringencia dependen de la longitud de las secuencias de ADN, sondas de oligonucleótidos (tal como 10-40 bases) o sondas de oligonucléotidos mezcladas. Si se utilizan sondas mixtas, es preferible utilizan cloruro de amonio tetrametilo (TMAC) en lugar de SSC. Ver Ausubel, anterior. La identidad refleja una relación entre dos o más secuencias de polipéptidos o dos o más secuencias de polinucleótidos, determinada por la comparación de las secuencias, en general, la identidad se refiere a una correspondencia exacta de nucleótido con nucleótido o aminoácido con aminoácido de las secuencias de dos polinucleótidos o dos polipéptidos, respectivamente, con respecto a la longitud de las secuencias que se comparan. Para las secuencias en donde no hay una correspondencia exacta, puede determinarse un "% de identidad". En general, las dos secuencias a ser comparadas se alinean para dar una correlación máxima entre las secuencias. Esto puede incluir insertar "espacios" en una o ambas secuencias, para mejorar el grado de alineación. Un % de identidad puede determinarse con respecto a la longitud completa de cada una de las secuencias que se comparan (así llamada alineación global), que es particularmente adecuada para las secuencias de longitud igual o muy similar, o con respecto a longitudes más cortas y definidas (así llamadas de alineación local), que es más adecuada para secuencias de longitud desigual. Los métodos para comparar la identidad y homología y/o similitud de dos o más secuencias son bien conocidos en el arte. Así, por ejemplo, los programas disponibles en el Paquete de Análisis de Secuencia Wisconsin, versión 9.1 (Devereux J y otros, 1984), por ejemplo los programas BESTFIT y GAP, pueden utilizarse para determinar el % de identidad entre dos polinucleótidos y el % de identidad y el % de homología entre dos secuencias de polipéptidos. BESTFIT utiliza el algoritmo de "homología local" de Smith y Waterman (1981 ) y encuentra la mayor región simple de similitud entre dos secuencias. Otros programas para determinar identidad y/o similitud entre secuencias son también conocidos en el arte, por ejemplo la familia de programas BLAST (Altschul S F y otros, 1990, Altschul S F y otros, 1997, accesible a través de la página principal de NCBI en www.ncbi.nlm.nih.gov) y FASTA (Pearson W R, 1990). "Variante" o "muteína" de acuerdo con la presente invención incluyen proteínas que poseen una secuencia de aminoácidos suficientemente duplicativa de la de FGF-18, de modo de tener actividad sustancialmente similar a FGF-18. En una modalidad preferida, dicha variante o muteína posee por lo menos 40% de identidad u homología con la secuencia de FGF-18. Más preferentemente, tiene por lo menos 50%, por lo menos 60%, por lo menos 70%, por lo menos 80% o, más preferentemente, por lo menos 90% de identidad u homología con la misma. Las muteínas de FGF-18, que pueden utilizarse de acuerdo con la presente invención, o codificación de ácido nucleico, incluyen un conjunto finito de secuencias sustancialmente correspondientes como péptidos o polinucleótidos de sustitución que pueden ser obtenidos en forma rutinaria por un experto en la técnica, sin experimentación indebida, en base a lo revelado y a las directivas en la presente. Los cambios preferidos para muteínas de acuerdo con la presente invención son los que se conocen como sustituciones "conservadoras". Las sustituciones de aminoácidos conservadoras de polipéptidos FGF-18 pueden incluir aminoácidos sinónimos dentro de un grupo que posee propiedades fisicoquímicas suficientemente similares de modo que la sustitución entre los miembros del grupo conservará la función biológica de la molécula (Grantham, 1974). Resulta claro que las inserciones y eliminaciones de aminoácidos pueden realizarse en las secuencias antes definidas sin alterar la función de las mismas, particularmente si las inserciones o eliminaciones solamente comprenden unos pocos aminoácidos, por ejemplo, debajo de treinta, y preferentemente debajo de diez, y no eliminan o desplazan aminoácidos que pueden ser críticos para una conformación funcional, por ejemplo, residuos de Las proteínas y luteínas producidas por dichas eliminaciones y/o inserciones se encuentran dentro del alcance de la presente invención. Preferentemente, los grupos de aminoácidos sinónimos son aquellos definidos en el cuadro A. Más preferentemente, los grupos de aminoácidos sinónimos son aquellos definidos en el cuadro B; y más preferentemente los grupos de aminoácidos sinónimos son aquellos definidos en el cuadro C.

CUADRO A Grupos preferidos de aminoácidos sinónimos Aminoácido Grupo sinónimo Ser Ser, Thr, Gly, Asn Arg Arg, GIn, Lys, Glu, His Leu Me, Phe, Tyr, Met, Val, Leu Pro Gly, Ala, Thr, Pro Thr Pro, Ser, Ala, Gly, His, GIn, Thr Ala Gly, Thr, Pro, Ala Val Met, Tyr, Phe, He, Leu, Val Gly Ala, Thr, Pro, Ser, Gly He Met, Tyr, Phe, Val, Leu, lie Phe Trp, Met, Tyr, He, Val, Leu, Phe Tyr Trp, Met, Phe, lie, Val, Leu, Tyr Cys Ser, Thr, Cys His Glu, Lys, GIn, Thr, Arg, His GIn Glu, Lys, Asn, His, Thr, Arg, GIn Asn GIn, Asp, Ser, Asn Lys Glu, GIn, His, Arg, Lys Asp Glu, Asn, Asp Glu Asp, Lys, Asn, GIn, His, Arg, Glu Met Phe, He, Val, Leu, Met Trp Trp CUADRO B Grupos más preferidos de aminoácidos sinónimos Aminoácido Grupo sinónimo Ser Ser Arg His, Lys, Arg Leu Leu, lie, Phe, Met Pro Ala, Pro Thr Thr Ala Pro, Ala Val Val, Met, lie Gly Gly He lie, Met, Phe, Val, Leu Phe Met, Tyr, He, Leu, Phe Tyr Phe, Tyr Cys Cys, Ser His His, GIn, Arg GIn Glu, GIn, His Asn Asp, Asn Lys Lys, Arg Asp Asp, Asn Glu Glu, GIn Met Met, Phe, He, Val, Leu Trp Trp CUADRO C Grupos más preferidos aminoácidos sinónimos Aminoácidos Grupos sinónimos Ser Ser Arg Arg Leu Leu, lie, Met Pro Pro Thr Thr Ala Ala Val Val Gly Gly He lie, Met, Leu Phe Phe Tyr Tyr Cys Cys, Ser His His Gln Gln Asn Asn Lys Lys Asp Asp Glu Glu Met Met, lie, Leu Trp Met Los ejemplos de producción de sustituciones de aminoácidos en proteínas que pueden utilizarse para obtener muteínas de FGF-18 para uso en la presente invención incluyen cualquier paso de métodos conocidos, tal como los presentados en las patentes US Nos. 4.959.314, 4.588.585 y 4.737.462 de Mark y otros; 5.116.943 de Koths y otros, 4.965.195 de Ñamen y otros; 4.879.111 de Chong y otros; y 5.017.691 de Lee y otros; y proteínas sustituidas con lisina presentadas en la patente US No. 4.904.584 (Shaw y otros).

Formulación de un compuesto FGF-18 y administración Los compuestos FGF-18 pueden formularse como una composición farmacéutica, es decir, junto con un portador farmacéuticamente aceptable, excipientes y lo similar. La definición de "farmacéuticamente aceptable" comprende cualquier portador que no interfiere con la efectividad de la actividad biológica del ingrediente activo y que no es tóxico al huésped al que se administra. Por ejemplo, para la administración parenteral, las proteínas activas pueden formularse en una forma de unidad de dosis para inyección en vehículos tales como salina, solución dextrosa, albúmina de suero y solución Ringer. Dichas formulaciones de los compuestos FGF-18 que incluyen por lo menos otro portador, excipiente o lo similar farmacéuticamente aceptables son en la presente también referidas como "composiciones de FGF-18". El compuesto y las composiciones de FGF-18 pueden aplicarse por inyección directa en el fluido sinovial de la articulación o directamente en el defecto, ya sea en forma individual o en complejo con un portador adecuado para la liberación extendida de proteína (tal como por ejemplo excipientes adecuados para formulaciones de liberación retardada, tal como, por ejemplo ciclodextrina) o liberación local restringida (tal como, por ejemplo, suministro a través de esponjas biocompatibles, bio-matrices similares, células encapsuladas o lo similar). Las formulaciones para aplicación intra-articular cumplirán con la mayoría de los requerimientos que también se aplican a otras formulaciones de inyección, es decir, necesitan ser estériles y compatibles con las condiciones fisiológicas en el sitio de aplicación (por ejemplo, articulación de rodilla, SF). La esterilidad de las formulaciones de solución puede lograrse por autoclave (si todos los componentes de la formulación son suficientemente resistentes a la sensibilidad térmica) o filtración estéril, mientras que para otras formulaciones, los procesos de fabricación requeridos para asegurar un producto estéril pueden ser más complejos. Por ejemplo, la filtración estéril no es factible para las formulaciones que contienen partículas (suspensiones), formulaciones semi-sólidas o sólidas. Para la compatibilidad de la formulación con las condiciones fisiológicas en el sitio de inyección, las características de la SF deben tenerse en cuenta. Preferentemente las formulaciones de la invención son por lo tanto isotónicas. El pH de las formulaciones es cercano al pH de SF (es decir, pH 7.4) o apenas más bajo, pero preferentemente no debajo de pH ~5.5, para permitir la estabilidad óptima del ingrediente activo, mientras se minimizan los posibles efectos secundarios de valores de pH no fisiológicos tal como la activación de enzimas proteolíticas, por ejemplo, catepsinas. Los excipientes utilizados para inyección IA pueden también estar presentes en otras formulaciones de inyección, por ejemplo, para aplicación intramuscular o subcutánea. En una modalidad de la presente invención, el modo de administración del compuesto FGF-18 descrito en la presente es seleccionado entre el grupo formado por: administración intra-auricular, administración peri-auricular, administración intra-nasal, administración peri-nasal , administración endosinusial, administración intra-costal, administración peri-costal, administración intra-torácica, administración peri-torácica, administración epidural, administración peri-vertebral, administración peri-sinovial, administración intra-sinovial, administración endosinusial, administración periarticular y administración intra-articular . En una modalidad preferida, el compuesto FGF-18 que se describe en la presente se administra peri-articularmente (administración alrededor de una articulación) o intraarticularmente (administración dentro de una articulación). En una modalidad de la presente invención, la administración periarticular o intraarticular se realiza alrededor o dentro de una articulación seleccionado entre una articulación de cadera, rodilla, codo, muñeca, tobillo, columna, pie, dedo, dedo del pie, mano, hombro, costillas, omóplatos, muslos, canillas, talones y a lo largo de los puntos óseos de la columna. En otra modalidad preferida, la administración periarticular o intraarticular se realiza alrededor de o en la articulación de cadera o rodilla.

Desórdenes en cartílago La presente invención se refiere a métodos para tratar, prevenir o aliviar los síntomas de un desorden en cartílago en un mamífero. Preferentemente, dicho desorden en cartílago produce daños debido a herida traumática o condropatía. Se entiende que preferentemente los humanos son pacientes a ser tratados de acuerdo con la presente invención; sin embargo, se entiende que otros mamíferos, incluyendo, aunque sin limitarse a ello, perros, caballos y lo similar pueden tratarse con métodos de acuerdo con la presente invención.

Los ejemplos de desórdenes en cartílago que pueden tratarse, prevenirse o aliviarse mediante el tratamiento que se describe en la presente incluyen sin limitarse a ello: artritis, osteocondritis, (tal como síndrome de Títese), osteomielitis, policondritis, policondritis en recidiva y Osteocondritis Dissecans. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis. Preferentemente, dicha enfermedad es seleccionada entre el grupo formado por espondilitis anquilosante, caderaerostosis esqueletal ¡diomática difusa (DISH), gota, seudogota, artritis infeccionas, osteoartritís, artritis reumatoidea, artritis psoriática, artritis reactiva, esclerodermia, síndrome de Sjógren, enfermedad de Still. En una modalidad preferida, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis reumatoidea u osteoartritis. En una modalidad particularmente preferida, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es osteoartritis. Artritis, se refiere a un daño a las estructuras articulares (articulaciones) en cuerpo y relacionado con procesos inflamatorios. La artritis, incluyendo osteoartritis, artritis reumatoidea, articulaciones artríticas como resultado de una herido y lo similar, son condiciones inflamatorias comunes que se beneficiarían con el uso terapéutico de FGF18 de acuerdo con la presente invención. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es espondilitis anquilosante. Espondilitis anquilosante (ES) es artritis que afecta la columna. Esto produce dolor y rigidez en la espalda y también una postura curvada. Esto es un resultado de hinchazón e irritación continuadas de las articulaciones espinales (vértebras). En casos graves, la inflación de las vértebras puede eventualmente hacer que las mismas se fusionen entre sí llevando a una movilidad seriamente limitada. La inflamación de los tendones y ligamentos que conectan y proveen sostén a las articulaciones puede llevar a dolor y sensibilidad en las costillas, omóplatos, caderas, muslos, canillas, talones y a lo largo de los puntos ósea de la columna. La espondilitis anquilosante es una forma inflamatoria crónica de artritis y afecta las articulaciones espinales. La característica principal o inherente de la EA es que afecta las articulaciones en la base de la columna en donde la columna se une a las articulaciones de pelvis-sacroílaco (SI). El curso de la enfermedad es altamente variable, y mientras que algunos individuos tienen episodios de dolor de columna temporario solamente, otros tienen dolor de espalda más grave y crónico que lleva a diferentes grados de rigidez espinal con el transcurso del tiempo. En casi todos los casos, la enfermedad se caracteriza por episodios de dolor aguda o remisiones (períodos en que el problema se soluciona). Con los años, la EA ha sido conocida por muchos nombres diferentes, incluyendo espondilitis deformante, espondilitis reumatoidea, y espondilitis de Marie Trumpells. Desde comienzos de los años 70 y con un mayor conocimiento de la enfermedad, se ha unlversalizado el uso del término espondilitis anquilosante. EA es miembro de la familia de enfermedades que atacan la columna vertebral. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es caderaerostosis esqueletal idiomática difusa. Caderaerostosis esqueletal idiomática difusa (DISH) se caracteriza por un excesivo desarrollo óseo a lo largo de los lados de las vértebras de la columna. También comprende inflamación y desarrollo óseo donde los tendones y ligamentos se fijan al hueso, tal como en el codo, rodilla y talón del pie. Los espolones óseos son comunes entre personas con DISH. DISH (algunas veces denominada enfermedad de Forestier) es considerada una forma de artritis degenerativa y se caracteriza por excesivo crecimiento óseo a lo largo de los lados de las vértebras de la columna. También se asocia a inflamación y calcificación (crecimiento óseo) en otras áreas del cuerpo donde los tendones y ligamentos se fijan al hueso, tal como en el codo, rodilla y talón del pie. Estos pueden llevar a espolones óseos. Espolones de talón, por ejemplo, son comunes entre las personas con DISH. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es gota. La gota es un tipo de artritis en donde ácido úrico, un producto residual que se produce naturalmente dentro del cuerpo, se eleva por encima de los niveles normales. En lugar de ser depurado por los ríñones y a través de la orina, como ocurre normalmente, forma cristales y se deposita en las articulaciones. Estos depósitos dan lugar a inflamación de las articulaciones, causando dolor, hinchazón, enrojecimiento y sensibilidad del área. Más generalmente, la articulación afectada es la del dedo grande del pie, pero la gota puede también afectar tobillo, rodilla, pie, mano, muñeca y codo. Los cristales de ácido úrico pueden también formar depósitos en otras áreas tal como debajo de la piel y en otros tejidos blandos, y en el riñon y tracto urinario. La gota típicamente afecta la junta en la base del dedo grande. En más de la mitad de los ataques iniciales, esta es la primera articulación afectada. Casi cualquier otra articulación puede ser afectada, pero las articulaciones en los miembros inferiores lo son más comúnmente que las de los miembros superiores. La mayoría de los ataques iniciales de la gota afectan solamente una articulación, y, con tratamiento, retrocede en tres a diez días. Más del 50% de las personas que han tenido un ataque agudo de gota tendrán una recidiva dentro del año. Con el tiempo, los ataques se pueden volver más frecuentes, de mayor duración y a menudo afectan más articulaciones. Para algunas personas los ataques persisten y la enfermedad se vuelve crónica. Los cristales de ácido úrico depositados dentro de la articulación y en lo tejidos blandos circundantes llevan a cambios destructivos en la articulación y causan inflamación persistente. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es seudogota. Seudogota es un tipo de artritis que es causada por la acumulación de calcio en el cuerpo. La seudogota resulta de la acumulación de cristales de calcio (dihidrato de pirofosfato de calcio) en una articulación. El calcio forma cristales que se depositan en las articulaciones entre los huesos. Esto produce hinchazón y dolor en el área. Los depósitos de calcio y la inflamación crónica hacen que partes de la estructura de articulaciones se debilite y se quiebre. Con seudogota, el cartílago puede comenzar a fracturarse y a tener orificios en el mismo que causan más dolor e hinchazón en la articulación. Con el tiempo el cartílago puede desgastarse totalmente y los huesos entran en fricción. Mucho del dolor de la seudogota es el resultado de los músculos y otros tejidos que ayudan a las articulaciones a moverse (tal como tendones y ligamentos) y que son forzados a trabajar en formas para las cuales no fueron diseñados, como resultado del daño del cartílago. El cartílago mismo no tiene células nerviosas, y por lo tanto no puede sentir dolor, pero los músculos, tendones, ligamentos y huesos lo sienten. Después de muchos años de erosión en el cartílago, los huesos pueden realmente tener rozarse entre ellos. Esta fricción de hueso contra hueso agrega más dolor. Los huesos pueden también engrosarse y formar crecimientos, llamados espolones u osteofitos, que se rozan. Como la enfermedad de la gota, la seudogota puede aparecer en forma repentina, con ataques recurrentes de dolor e hinchazón en una sola articulación. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis infecciosa. La artritis infecciosa causa dolor e hinchazón en las articulaciones. La inflamación es causada por un germen. El germen puede ser una bacteria, un virus, o un hongo. Generalmente sólo una articulación es afectada, aunque algunas veces dos o tres articulaciones pueden ser infectadas. Esto no durante generalmente un tiempo prolongado se es tratado tempranamente. Mayormente, la artritis infecciosa afecta las grandes articulaciones (hombros, caderas, rodillas), pero también pueden verse afectadas las articulaciones menores (dedos, tobillos). En una modalidad preferida de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es osteoartritis. Osteoartrítis es la forma más común de artritis. Puede ser causada por la rotura del cartílago. Los pedazos de cartílago pueden romperse y causar dolor e hinchazón en la articulación entre huesos. Con el tiempo, el cartílago puede desgastarse completamente, y los huesos se rozarán. La osteoartritis puede afectar cualquier articulación pero generalmente involucra manos y articulación que soportan peso, tal como caderas, rodillas, pies y columna. El estado de enfermedad de osteoartritis (OA) es una enfermedad compleja, multifactorial y progresiva que es no inflamatoria en su naturaleza y que se caracteriza por una degradación general relacionada con la edad del cartílago articular en las articulaciones. OA también se caracteriza por activación de condrocitos que lleva a la proliferación y apoptosis celular, expresión de proteasa y producción de matriz anormal, reparación de cartílago fallido que lleva a pérdida de matriz extracelular, calcificación de matriz y formación de osteofito. La degradación de estructuras de cartílago y extracelulares lleva a mayor fricción entre los huesos y nervios de las articulaciones afectadas. La OA causa diversos niveles de dolor y debilitamiento progresivo en aquellos afectados con la enfermedad. Las terapias actuales para OA son paliativas o quirúrgicas. En las articulaciones sanas, el cartílago actúa como un absorbente de impacto cuando se aumenta el peso sobre la articulación. La superficie deslizante del cartílago permite que los huesos se muevan suavemente. Cuando una articulación desarrolla osteoartritis, el cartílago gradualmente se vuelve áspero y delgado, y el hueso subyacente se engrosa. Aunque generalmente no se produce hinchazón en la etapa temprana de la enfermedad, cuando la artritis avanza puede haber inflamación. Trozos de cartílago pueden romperse y flotar alrededor dentro de la articulación. Esto perturba otros tejidos dentro de la articulación y pueden causar dolor e hinchazón entre los huesos. Con el tiempo, cuando el cartílago se desgasta, los huesos pueden formar protuberancias en sus extremos llamadas espolones. O el cartílago puede desgastarse totalmente, y lo huesos pueden directamente entrar en contacto entre ellos. OA puede llevar a otros problemas tales como: los músculos que sostienen la articulación en su lugar se debilitan debido a que no son utilizados, y con el tiempo la articulación pierde su forma y no trabaja por completo. OA comúnmente afectan las articulaciones que soportan peso tal como caderas, rodillas, pie y columna. Sin embargo, las articulaciones que no sostienen peso, tales como las articulaciones de os dedos y la articulación en la base del dedo gordo pueden afectarse también. Generalmente no afecta otras articulaciones, excepto cuando han sido dañadas o han sido sometidas a tensión inusual. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis reumatoidea. Artritis reumatoidea (AR) es una enfermedad inflamatoria auto inmune sistémica crónica que principalmente afecta la membrana sinovial de múltiples articulaciones con daño resultante al cartílago articular. La patogénesis es dependiente de linfocitos T y se asocia con la producción de factores reumatoides, auto-anticuerpos dirigidos contra auto IgG, con la formación resultante de complejos inmunes que alcanzan altos niveles en fluidos y sangre de articulaciones. Estos complejos en la articulación pueden inducir el infiltrado marcado de linfocitos y monicitos dentro del sinovio y posteriores cambios sinoviales marcados; el espacio/fluido de articulación es infiltrado por células similares con la adición de numerosos neutrófilos. Los tejidos afectados son principalmente las articulaciones, a menudo en forma simétrica. Las células inflamatorias liberan enzimas que pueden digerir hueso y cartílago. Como resultado de la artritis reumatoidea, el recubrimiento de la articulación inflamada, el sinovio, puede invadir y dañar hueso y cartílago llevando a deterioro de la articulación y dolor severo entre otros efectos fisiológicos. La junta afectad puede perder su forma y alineación, resultando en dolor y pérdida del movimiento. Por lo tanto, la AR puede llevar a incapacidad severa y mayor mortalidad. El daño en las articulaciones puede producirse aún en casos donde el dolor no es grave. Puede suceder aun en las etapas tempranas de la enfermedad*. Para muchas personas con AR, el daño ha aparecido en rayos X de las manos y pies dentro de los dos años del inicio de la enfermedad. Pero puede ser demasiado tarde para tratar en el momento en que los rayos x descubren el problema. El daño puede llevar a deformidad de articulaciones permanente e incapacidad. El dolor e hinchazón pueden causar dificultad para caminar. Una variedad de citocinas son producidas localmente en las articulaciones reumatoideas. Numerosos estudios han demostrado que IL-1 y TNF-alfa, dos citocinas pro-inflamatorias prototípicas, desempeñan un papel importante en los mecanismos que participan en la inflamación sinovial y en la destrucción progresiva de articulaciones. En realidad, la administración de TNF-alfa e inhibidores de IL-1 en pacientes con AR ha llevado a una mejora dramática de signos clínicos y biológicos de inflamación y a una reducción de signos radiológicos de erosión ósea y destrucción de cartílagos. Sin embargo, a pesar de estos resultados alentadores, un importante porcentaje de pacientes no responden a estos agentes, sugiriendo que otros mediadores participan también en la patofisiología de la artritis. Una forma importante de distinguir AR de otras formas de artritis es por la forma de participación de la articulación. Por ejemplo, AR afecta la muñeca y muchas de las articulaciones de la mano pero generalmente no las articulaciones que son más distantes. En la AR, las articulaciones tienden a ser afectadas en una forma simétrica. Es decir, si los nudillos de la mano derecha están inflamados, los nudillos de la mano izquierda posiblemente estarán inflamados también. Otras articulaciones comúnmente afectadas por AR incluyen los codos, hombros, cuello, mandíbula, pies, tobillos, rodillas y caderas. Con excepción del cuello, la columna generalmente no es directamente afectada por AR. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis psoriática. La artritis psoriática es una condición que causa hinchazón y dolor en y alrededor de las articulaciones. También causa un enrojecimiento con escaras en la piel. Puede afectar un número de articulaciones que incluyen los dedos, muñecas, dedos de los pies, rodillas, tobillos, codos y articulaciones de los hombros, la columna y las articulaciones en la parte inferior de la espalda (llamadas articulaciones sacro ilíacas). La artritis psoriática también afecta los tejidos que rodean las juntas y que incluyen tendones y ligamentos. Puede causar hinchazón de todo el dígito llamado dedo "salchicha" en manos o pies. Hay también inflamación de la piel, particularmente en los codos, rodillas y nuca. La artritis psoriática está relacionada con la soriasis, un desorden que hace que áreas de la piel se inflamen y se cubran de costras plateadas o grises. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es artritis reactiva. La artritis reactiva se refiere al dolor, rigidez, enrojecimiento o hinchazón de una junta que resulta de una infección previa. Mayormente se produce en las articulaciones de los miembros inferiores (rodillas, tobillos, dedos de los pies), pero puede también producirse en los miembros superiores. Los problemas pueden aparecer solamente en las articulaciones o afectar otros sistemas de cuerpo, tales como ojos, músculos de la piel o tendones. Cuando afecta áreas además de las articulaciones, la artritis reactiva es entonces llamada síndrome de Reiter. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es esclerodermia. Esclerodermia es una condición en la que la piel se vuelve gruesa y dura. Existen dos tipos principales de esclerodermia. Un tipo es esclerodermia localizada, que afecta principalmente la piel. Pueden también afectar los músculos y articulaciones. El otro tipo, la esclerodermia generalizada, afecta la piel así como los órganos internos, tales como el corazón, pulmones y ríñones. El rasgo más característico de esclerodermia es la acumulación de tejido fibroso tipo escara áspero en la piel. Los cambios menos visibles incluyen daño a las células que cubren las paredes de pequeños vasos sanguíneos. Esto puede a su vez dañar órganos importantes.

En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es El síndrome de Sjógren. El síndrome de Sjógren es un desorden crónico que causa daño a las glándulas salivales produciendo boca seca, y las glándulas lacrimales, produciendo ojos secos. También puede afectar otras partes del cuerpo, incluyendo articulaciones, músculos y nervios, órganos tales como pulmones, ríñones, hígado, páncreas, estómago y cerebro, o glándulas tales como la glándula tiroides. El síndrome de Sjógren puede causar la destrucción completa de cualquiera de estas áreas. Debido a que el síndrome de Sjógren puede afectar el hígado y el páncreas, existe una mayor posibilidad de desarrollar cáncer del tejido linfático. Sin embargo, esto es un resultado inusual y raro El síndrome de Sjógren puede producirse de dos formas. Es síndrome de Sjógren "secundario" cuando se produce en personas que poseen una enfermedad reumático o de tejido conectivo tal como lupus, esclerodermia o polimiositis. Se denomina síndrome de Sjógren "primario" cuando los ojos y boca seca no están asociados con una condición reumática. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es la enfermedad de Still. La enfermedad de Still es una forma de artritis caracterizada por fiebres altas, enrojecimiento color salmón e inflamación de las articulaciones. La enfermedad es mayormente común entre los niños, para los cuales es referida como una artritis idiomática juvenil sistémica. La enfermedad de Still puede también aparecer entre os adultos, aunque es mucho menos común que en niños. En este caso, se denomina como la enfermedad de Still de inicio adulto o "AOSD". Tal como se describe anteriormente, los desórdenes en cartílago que pueden tratase, prevenirse o aliviarse mediante el tratamiento que se describe en la presente incluyen: Osteocondritis Dissecans, costocondritis (tal como síndrome de Títese), osteomielitis, policondritis recidivante. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es Osteocondritis Dissecans. Osteocondritis dissecans (OCD) es un término para la fractura osteocondral. Un fragmento osteocondral puede estar presente in situ, separado en forma incompleta o completamente separado. OCD es una forma de osteocondrosis limitada a epífisis articular. La epífisis articular falla como resultado de compresión. Tanto el trauma como la isquemia probablemente participan en la patología. El trauma es más posiblemente el ataque primario, e isquemia aparece como un daño secundario. El trauma puede ser causado por trauma directo, tal como fractura por impacto, o microtrauma repetitivo, tal como sensibilidad compresiva normal excesiva. La articulación de rodilla es el lugar más comúnmente afectado. Sin embargo, la articulación de codo, la articulación de tobillo, tarsal navicular, articulación de cadena, articulación de hombro, Glenoide, articulación de muñeca, pueden también ser afectadas OCD tiende a afectar a pacientes jóvenes. En la OCD de codo, la edad del paciente promedia los 23 años y va de 4-47 años. En el tobillo, la edad del paciente promedia los 20 años y va de 8-50 años. En la cadera, la edad del paciente promedia los 24 años y va de 14-39 años. Los pacientes generalmente informan dolor en los extremos del rango de movimiento. A menudo se presenta edema periarticular con leve calentamiento al tacto. Cuando se afecta una extremidad inferior, los pacientes a menudo renguean. Los síntomas generalmente mejorar con inmovilización protegida de la articulación. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es costocondritis. Costocondritis es una inflamación de las articulaciones en donde las costillas se unen con el cartílago que las sostiene al esternón. La causa es generalmente desconocida. Cuando el dolor de costocondritis es acompañado por hinchazón, se denomina síndrome de Tietze. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es osteomielitis. Osteomielitis es un proceso inflamatorio agudo o crónico del hueso y sus estructuras secundarias a infección con organismos biogénicos. La infección asociada con osteomielitis puede ser localizada o puede expandirse a través del periostio, córtex, médula, y tejido esponjoso. El patógeno bacteriano varía en base a la edad del paciente y el mecanismo de infección. La osteomielitis hematogenosa es una infección causada por bacterias que crecen en la sangre. La osteomielitis hematogenosa aguda se caracteriza por una infección aguda del hueso causada por el desarrollo de la bacteria dentro del hueso desde una fuente remota. Esta condición se produce principalmente en niños. El sitio más común es la metafisis altamente vascular y de rápido crecimiento de los huesos en crecimiento. El aparentemente espesamiento de flujo sanguíneo cuando los vasos hacen ángulos agudos en la metafisis distal predispone a los vasos a trombosis y al hueso a necrosis localizada y desarrollo bacteriano. La osteomielitis hematogenosa aguda, a pesar de su nombre, puede tener un desarrollo clínico lento y un inicio insidioso. La inoculación directa o contigua de osteomielitis es causada por contacto directo del tejido y bacteria durante trauma o cirugía. La osteomielitis de inoculación directa (foco contiguo) es una infección en el hueso secundaria a la inoculación de organismos a partir de trauma directo, expandido a partir de un foco contiguo de infección, o sepsis posterior a procedimiento quirúrgico. Las manifestaciones clínicas de osteomielitis de inoculación directa son más localizadas que las de osteomielitis hematogenosa y tienden a involucrar a múltiples organismos. Las categorías adicionales incluyen osteomielitis crónica y osteomielitis secundaria a enfermedad vascular periférica. La osteomielitis crónica persiste o recurre, independientemente de su causa inicial y/o mecanismo y a pesar de intervención agresiva. Aunque listada como una etiología, la enfermedad vascular periférica es en realidad un factor predisponente más que una verdadera causa de infección.

Los estados de enfermedades conocidos que predisponen a pacientes a osteomielitis incluyen diabetes mellitus, enfermedad de células falciformes, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), abuso de droga IV, alcoholismo, uso de esteroides crónico, inmunodepresión, enfermedad articular crónica. Además, la presencia de un dispositivo ortopédico prostético es un factor de riesgo independiente como en cualquier cirugía ortopédica reciente o fractura abierta. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es policondritis recidivante. Policondritis recidivante (PR) es un estado inflamatorio episódico severo y poco común que afecta las estructuras cartilaginosas, predominantemente las de la oreja, nariz y árbol laringotraquobronquial. Otras estructuras afectas pueden incluir el ojo, sistema cardiovascular, articulaciones periféricas, oído medio y oído interno. La etiología de esta enfermedad es desconocida; sin embargo, la patogénesis es mayormente auto inmune en naturaleza. La evidencia de una etiología autoimune incluye su asociación clínica con otros desórdenes autoinmunes, su asociación con el haplotipo HLA-DR4, descubrimientos en patología de células CD4 T infiltrantes y complejos antígeno-anticuerpo en el cartílago afectado, respuestas celulares y humorales contra colágeno tipo II y otro antígenos de colágeno, y la observación de que los regímenes inmunodepresivos mayormente suprimen la enfermedad. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es daño de cartílago resultante de un trauma. Las lesiones en cartílago pueden producirse como resultado de unan destrucción mecánica traumática. Un golpe directo u otro trauma puede dañar el cartílago. El cartílago no posee suministro directo de sangre, así que posee poca capacidad para repararse a sí mismo. Los métodos de la presente invención mejoran la reparación del cartílago. Por lo tanto, en una modalidad de la presente invención, la lesión del cartílago resultante de un trauma es producido por un accidente o por cirugía. En una modalidad particular de la presente invención, el daño en cartílago producido a partir de un trauma es el resultado de cirugía, en particular cirugía ortopédica o cirugía plástica. La presente invención también considera el tratamiento de lesiones relacionadas con deportes o desgaste de los tejidos de la articulación asociado con deportes. En una modalidad de la presente invención, el desorden en cartílago tratado, prevenido o aliviado es un desorden de apariencia no estética. En dicha modalidad, el método y uso de la presente invención pueden utilizarse en asociación con cirugía plástica. Una vez descripta esta invención, los expertos en el arte podrán apreciar que la misma puede realizarse dentro un amplio rango de parámetros, concentraciones y condiciones equivalentes sin apartarse del espíritu y alcance de la invención y sin experimentación indebida. Mientras que la invención ha sido descripta con relación a las modalidades específicas de la misma, se entenderá que la misma puede ser modificada. Esta solicitud está destinada a cubrir cualquier variación, uso o adaptación de la invención siguiendo, en general, los principios de la invención e incluyendo aquellas desviaciones de la presente descripción según se encuentren dentro de la práctica conocida o común en la técnica a la cual pertenece la invención y según pueden aplicarse a las características esenciales antes establecidas y que se describen en el alcance de las reivindicaciones adjuntas. Todas las referencias citadas en la presente, incluyendo artículos o extractos periodísticos, solicitudes de patente de los Estados Unidos de América o extranjeras publicadas o sin publicar, patentes concedidas de los Estados Unidos de América o extranjeras o cualquier otra referencia, se incorporan totalmente a la presente a modo de referencia, incluyendo datos, cuadros y texto presentado en las referencias citadas. Adicionalmente, el contenido completo de las referencias citadas en la presente se incorporan totalmente a modo de referencia. La referencia a pasos de métodos conocidos, pasos de métodos convencionales, métodos conocidos o métodos convencionales no quiere decir en modo alguna que se admite que cualquier aspecto, descripción o modalidad de la presente invención se encuentra revelada, descripta o sugerida en el arte o técnica relevante. La siguiente descripción de las modalidades específicas revelará completamente la naturaleza general de invención de modo que otros pueden, aplicando su conocimiento dentro de la técnica (incluyendo el contenido de las referencias citadas en la presente), fácilmente modifican y/o adaptan para las solicitudes varias, las modalidades específicas, sin experimentación indebida, sin apartarse del concepto general de la presente invención. Por lo tanto, dichas adaptaciones y modificaciones se encuentran dentro del significado de un orden de equivalentes de las modalidades reveladas, en base a lo revelado en la presente. Se debe entender que la fraseología o terminología en la presente es para fines de la descripción y no de limitación, tal como la terminología o fraseología de la presente memoria descriptiva debe ser interpretada por un experto en el arte a la luz de lo revelado en la presente, en combinación con el conocimiento de un experto en la técnica.

EJEMPLO 1 Modelos de enfermedad en animales y farmacología extendida In vivo, FGF-18(170AA) se sometió a ensayo en diferentes modelos de enfermedad de OA y cartílago dañado, con significante eficacia terapéutica utilizando una dosis intra-articular (i. a.). En general, una dosis terapéuticamente efectiva de 3-40 µg i. a. por animal/semana fue demostrable en diferentes especies (rata, perro). Los resultados de dichos modelos de enfermedad en animales (OA así como defectos en cartílagos) se resumen a continuación.

CUADRO 1 Resumen de estudios farmacológicos con FGF-18(170AA CUADRO 2 Resumen de estudio farmacológico con FGF-18(170AA) (cont.) Descrito en orma detallada más adelante EJEMPLO 1.1 Modelo de OA por desgarro de meniscos en ratas Método Ratas Lewis macho (5-1 O/grupo) fueron sometidas a cirugía para inducir un desgarro de meniscos medio en la articulación de rodilla derecha. La dosis por ruta i. a. se inició 19-21 días después de la cirugía a dosis de 0.3, 1 , 3 o 10 µg (formulada en salina) para determinar los efectos farmacodinámicos relacionados con el régimen de dosificación. Estas dosis totales fueron administradas como (i) dosis única, (ii) una vez por semana (1/3 de dosis total por inyección) durante 3 semanas, o (iii) tres veces por semana durante 3 semanas (1/9 de dosis total por inyección). Al final del tratamiento o después de 3 semanas de posttratamiento, las rodillas derechas fueron recolectasa para evaluación histopatológica de efectos potenciales. La evaluación de las lesiones se realizó en 3 zonas diferentes: diferencias regionales a través de la platillo de tibia medio se tomaron en consideración dividiendo cada sección 3 zonas (1-externa, 2-media, 3-interna). En el modelo de OA quirúrgica, los tercios exterior (z1 ) y medio (z2) fueron seriamente afectados, y se observaron cambios más leves en el tercio interior (z3) (véase figura 1 ).

Diseño experimental Se anestesiaron animales (5-1 O/grupo), alojados 2-3/jaula, con Isoflurano y se preparó el área de la rodilla derecha para cirugía. Se realiza una incisión en la piel sobre el aspecto medio de la rodilla y el ligamento colateral medio es expuesto por disección de corte, y luego sometido a transección. El meñisco medio es cortado a través de todo el espesor para simular un desgarro completo. La piel y subdermis se cierra con sutura 4-0 Vicryl utilizando un modelo subcuticular. La dosis por ruta intra-articular se inicia 19-21 días posteriores a la cirugía y se discontinúa después de una dosis simple o se continúa durante 3 semanas con inyecciones intra-articulares una vez por semana o 3 veces por semana. Se terminó luego con las ratas (g1-16) o se dejaron recuperar durante otras 3 semanas adicionales antes de su terminación (g17-32). Cuatro horas antes de la necropsia, todas las ratas recibieron 50 mg/kg BRDU para rotular las células activamente proliferativas. Se recolectó sangre para suero justo antes de la necropsia y se realizó lavado sinovial sobre la rodilla derecha. En la necropsia, en la articulación de rodilla derecha (operada) se recortó músculo y tejido conectivo y se recolectó en formalina amortiguado neutral al 10%. La rótula se retira para permitir la fijación adecuada de las articulaciones. Muestras de tráquea, esternón, y oreja también se colocan en formalina.

Resultados evaluados a las 6 semanas posteriores a la cirugía Controles no tratados (evaluados a las 6 semanas posteriores a cirugía) Los animales no tratados con desgarro de meniscos medio que fueron terminados a las 6 semanas posteriores a cirugía tuvieron degeneración de cartílago tibial que fue mayormente severo en 2/3 externo del platillo tibial y menos severo en el 1/3 externo. Los osteofitos fueron grandes (medio 468 µ?t?). La degeneración del cartílago femoral fue más leve y más variable que la degeneración tibial. Los animales tratados con salina una vez por semana tuvieron una zona 3 significativamente más baja total de marcas de degeneración de cartílago tibial (16%), una relación de profundidad significativamente más baja (16%), y un área significativamente más grande de cartílago viable en la tibia lateral según se compara con los animales sin tratar (13%). Los animales tratados con salina 3 veces semanalmente tuvieron degeneración de cartílago significativamente más baja en la zona 2 de la tibia (24%), una relación de profundidad significativamente más baja (13%), y un área significativamente mayor de cartílago viable en la tibia tanto media como lateral (15 y 14%). Estas diferencias en los grupos de control pueden ser el resultado de episodios de anestesia repetidos que influencian la actividad general de los anímales, aunque la posibilidad de que las inyecciones salinas repetidas influenciaron sobre la severidad de la lesión al facilitar la eliminación de mediadores y residuos no puede ser descartada.

Tratamiento de dosis única (evaluado a las 6 semanas posteriores a cirugía) Los animales que recibieron una dosis única de 10 µg FGF-18(170AA) tenían una amplitud significativamente mayor de la degeneración de cartílago total (16%) debido a un aumento en pérdida de proteoglican en zona 3. Los puntajes de osteofitos y mediciones fueron significativamente aumentados (19 y 25%, respectivamente) en animales que recibieron una dosis única de 10 µg FGF-18(170AA). El área de matriz de cartílago viable en la tibia media aumentó significativamente en un 27% en animales tratados con 10 El inmunomanchado reveló bromodeoxiuridina (BRDU) inmunopositividad en médula fibrótica subyacente a lesiones de cartílago y en células de médula ósea, fibroblastos, y cartílago de osteofito, con modelos de manchado similares en salina y articulaciones tratadas con FGF-18(170AA). Estos resultados indican que una inyección única de 10 µg FGF-18(170AA) tuvo un efecto anabólico definido, como se evidenció por el mayor tamaño de osteofito y la mayor área de cartílago tibial medio. Estos cambios, sin embargo, no fueron suficientes para mejorar los puntajes de degeneración de cartílago general. Es posible que el aumento en área de cartílago medio sea un resultado del espesor de cartílago aumentado en la superficie que soporta carga adyacente al osteofito.

Una vez por semana durante 3 semanas (evaluado a las 6 semanas posteriores a cirugía) Animales tratados con 3 µg FGF-18(170AA) una vez por semana tuvieron puntajes de degeneración de cartílago significativamente menores comparados con el control de una vez por semana de salina en la zona 2 de la tibia media. Los animales que recibieron 10 µg FGF-18(170AA) tuvieron amplitud de degeneración significativamente más baja(37%), y aquellos que recibieron 3 µg (28%) o 1 µ9 (15%) también tuvieron alguna inhibición. Las marcas de osteofitos y mediciones fueron aumentadas significativamente y en respuesta a la dosis por tratamiento con 10 (32 y 53%) o 3 (21 y 32%) µg FGF-18(170AA). El área de matriz de cartílago viable en la tibia media fue significativamente aumentada por tratamiento con 10 µg FGF-18(170AA) (27%). Se evidenció una sinovitis activa moderada a crónica con fibrosis en las articulaciones inyectadas con 10 o 3 g y aquellas inyectadas con 1 µg tuvieron sinovitis mínima. La resorción ósea subcondral fue mínimamente aumentada en algunas pocas articulaciones tratadas con 10 µg. Los animales tratados con 3 o 10 µg FGF-18(170AA) tuvieron mayor rotulación BRDU en la médula fibrótica, sinovio, y en áreas de condrogenesis u osteofitos, según se compara con controles de salina. Estos resultados demostraron el beneficio de respuesta a la dosis en el tratamiento utilizando el paradigma de una vez por semana sobre la amplitud de degeneración de cartílago significante. Este parámetro es mayormente indicativo de la presencia de una matriz viable de algún tipo dentro del área de defecto y, junto con áreas de cartílago tibial medio, demuestra la respuesta anabólica. Los resultados de rotulación BRDU indican respuestas proliferativas continuadas después del cese de la dosis.

Tres veces por semana durante 3 semanas (evaluado a las 6 semanas posteriores a cirugía) El tratamiento con 1 , 3 o 10 FGF-18(170AA) administrado como 3 inyecciones por semana resultó en una significativa reducción en marcas de degeneración de cartílago tibial comparado con el control de salina 3 veces por semana en zona 1 (animales tratados con 10 µg), zona 2 (1o 3 µg), y la zona 3 total (1 o 3 µg). El tratamiento con 10 µg significativamente aumentó la amplitud de degeneración de cartílago tibial total en 24%. El tratamiento con 1 o 3 9 redujo en forma no significativa la amplitud de degeneración de cartílago en 24% y 21 % respectivamente, indicando algún efecto beneficioso. Los animales tratados con 1 o 3 µ9 FGF-18(170AA) también tuvieron relaciones de profundidad significativamente más bajas (17% y 18% respectivamente) que los controles con salina. La marca de osteofito tibial medio aumentó después del tratamiento con 0.3, 1 , 3 o 10 µg FGF-18(170AA) (13%, 7%, 13% y 15% respectivamente), mientras que todas las 4 dosis (0.3, 1 , 3 o 10 µ? FGF-18(170AA)) aumentaron significativamente la medición de osteofitos (12, 18, 60 y 62 %, respectivamente. El tratamiento con 10 µg significativamente aumentó la marca de degeneración de cartílago femoral en 114%. Las marcas de hueso aumentaron significativamente mediante el tratamiento con 3 (60%) o 10 (88%) µg FGF-18(170AA). La marca de articulaciones total sin fémur fue significativamente reducida por el tratamiento con 3 µg FGF-18(170AA) (13%), pero la adición del fémur a la marca de articulaciones total eliminó esta variación. El tratamiento con 1 , 3 o 10 µg FGF-18(170AA) significativamente aumentó el área de cartílago viable en la tibia media (13%, 29% y 29%), y el tratamiento con 3 o 10 µg significativamente aumentó el área en la tibia lateral (22% y 13%). Las articulaciones inyectadas con 3 o 10 µg habían marcada sínovitis severa con mayor resorción ósea subcondral y cambios similares aunque de leves a moderados se observaron en las articulaciones tratadas con 1 µg. Los animales tratados con 1 , 30 o 10 µg FGF-18(170AA) tuvieron rotulación BRDU en numerosas áreas que incluyen médula, osteofitos, meniscos, sinovio y áreas de condrogenesis. Estos resultados demostraron los efectos anabólicos más pronunciados de cualquier paradigma de tratamiento, pero fueron acompañados por severa inflamación sinovial y mayor resorción ósea subcondral.

Resultados evaluados a las 9 semanas posteriores a cirugía Controles no tratados (evaluados a las 9 semanas posteriores a cirugía) Los animales no tratados con desgarro de menisco medio que fueron terminados a las 9 semanas tuvieron degeneración de cartílago tibial que fue mayormente severa en 2/3 externo del platillo tibial y menos severa en 1/3 interno. La degeneración de cartílago femoral fue menos severa y más variable. Las marcas fueron, en general, mayores que en los animales sin tratar terminados en la semana 6. Los controles de salina de dosis única tuvieron marcas de degeneración de cartílago significativamente más bajas en la zona 2 de la tibia (12%) que aquellas de los controles de salina de una vez por semana (18%). Los controles de salina de dosis única también tuvieron una amplitud significativamente mayor de degeneración de colágeno moderado (92%). Los animales que recibieron salina una vez por semana tuvieron una suma mucho menor de degeneración de colágeno severa, marcada, moderada y leve (15%), que aquella de los animales de control de 3 veces por semana (22%). Estas diferencias fueron relativamente menores ya que hubo solamente 5 ratas en cada uno de estos grupos y fueron el resultado de variación en progreso de la enfermedad en individuos.

Dosis única (evaluados a las 9 semanas posteriores a cirugía, ind. 3 semanas de post-tratamiento) No hubo efecto significativo del tratamiento en los animales que recibieron una dosis única de FGF-18(170AA) y que fueron terminados 9 semanas después de la cirugía, aunque algunas articulaciones inyectadas con 10 µg evidenciaron respuesta anabólica sobre la tibia lateral.

Una vez por semana durante 3 semanas (evaluados a las 9 semanas posteriores a cirugía, ind. 3 semanas de post-tratamiento) Después del tratamiento con 10 µg FGF-18(170AA) una vez por semana, se observaron importantes reducciones en marcas de degeneración de cartílago en zona 1 y zona 3 total de la tibia media en 38 y 31 %. El tratamiento con 0.3 µg FGF-18(170AA) redujo significativamente las marcas en zona 2 comparado con el control de salina de una vez por semana. Los animales tratados con 10 g FGF- 8(170AA) tuvieron amplitud de degeneración de cartílago importante significativamente más baja (38%). Las relaciones de profundidad fueron significativamente reducidas por el tratamiento con 10 µg FGF-18(170AA) (22%). El tratamiento con 3 o 10 µg FGF- 8(170AA) aumentó en forma significativa e idéntica las marcas de osteofitos (25%), pero solamente los animales que recibieron 10 µg habían aumentado significativamente las medidas de osteofitos (53%). Hubo una importante reducción del 23% en la marca de articulación total con fémur en los animales que recibieron 10 µg FGF-18( 70AA). El área de cartílago viable significativamente aumentó en los animales que recibieron 10 µg FGF-18( 70AA) en tibia tanto media (40%) como lateral (81 %) tibia. El tratamiento con 10 µg FGF-18(170AA) significativamente redujo la amplitud de degeneración de colágeno severa y mínima, así como la amplitud de degeneración severa, marcada y moderada combinadas y la amplitud de severa y marcada combinadas. La inflamación sinovial fue mínima en articulaciones inyectadas con 3 o 10 y ausente en dosis menores. Las respuestas anabólicas fueron evidentes en algunas o todas las articulaciones inyectadas con alguna dosis. La rotulación BRDU se vio principalmente en médula ósea y fibroblastos de controles de salina y se observó mayor rotulación (cartílago y osteofitos) con 10 µg. Estos resultados indicaron que las respuestas de reparación de cartílago/anabólicas continuaron después del período de tratamiento y que la sinovitis se retiró, aunque las medidas de osteofito fueron comparables a 6 o 9 semanas en articulaciones con esta dosis. El beneficio de respuesta a dosis se observó utilizando el parámetro de degeneración de cartílago importante y se mejoró pérdida de matriz severa, según se midió por degeneración de colágeno.

Tres veces por semana durante 3 semanas (evaluados a las 9 semanas posteriores a cirugía, ind. 3 semanas post-tratamiento) La marca de degeneración de cartílago tibial total de zona 3 se reduce significativamente en 38% en los animales que recibieron 10 g FGF-18(170AA) como 3 inyecciones semanalmente, según se compara con las 3 veces por semana en control salina. El tratamiento con 10 µg FGF-18(170AA) también redujo significativamente la amplitud de degeneración de cartílago (48%). La relación de profundidad fue significativamente reducida en 27% en los animales tratados con 10 µg FGF-18(170AA). Las mediciones de osteofitos aumentaron significativamente en los animales tratados con 3 (57%) o 10 (103%) µg FGF-18(170AA). El tratamiento con 1 , 3, o 10 µ9 FGF-18(170AA) significativamente aumentó el área de cartílago viable en la tibia media (34%, 37% y 71 % respectivamente), mientras que el tratamiento con 0.3 o 10 µg FGF-18(170AA) significativamente aumentó las áreas en la tibia lateral (46% y 67%). La amplitud de degeneración de colágeno moderada significativamente aumentó en los animales tratados con 3 o 10 µ? FGF-18(170AA), como lo fue la amplitud de degeneración suave y mínima combinada en los animales que recibieron 10 µg. Hubo sinovitis suave en todas las articulaciones inyectadas con 10 µg (dividido) y hubo sinovitis mínima y suave en aquellos que recibieron 1 o 3 µ9. Las respuestas anabólicas fueron evidentes desde 1 µg y más. La rotulación BRDU se vio principalmente en médula ósea y fibroblastos de controles de salina y se vio mayor rotulación (cartílago y osteofitos) en las articulaciones inyectadas con 10 µg. Estos resultados indicaron que las respuestas de reparación de cartílago/anabólicos continuó después del período de tratamiento y que se retirara la sinovitis según se compara con el punto de tiempo de la semana 6. Los efectos beneficiosos sobre pérdida de colágeno fueron menos claros, aunque hubo una clara tendencia hacia menores mediciones para las áreas de pérdida marcada a severa.

EJEMPLO 1.2 Modelo de OA en menisectomía de perro Perros Beagle hembras (n=3/grupo) que tenían menisectomía media parcial unilateral en la rodilla izquierda un mes antes de la iniciación del tratamiento fueron tratados con salina o 3, 10, o 30 FGF-18(170AA) una vez, una vez por semana, o tres veces por semana (dividido en 1/3 dosis) durante 3 semanas para determinar los efectos beneficiosos sobre OA establecida. Después de tres semanas de tratamiento, se evaluaron las rodillas izquierdas con respecto a efectos sobre cambios gruesos (n=3/grupo) y microscópicos (n=3/grupo) inducidos por menisectomía y con respecto a evidencia de efectos anabólicos. Todos los perros excepto uno exhibieron apetito normal y actividad en todo el estudio. Un perro (YLI-8) del grupo 12 murió antes de la terminación (día 17) debido a neumonía de aspiración asociada con anestesia repetida para inyecciones de articulaciones. Los cambios degenerativos típicos caracterizados por la presencia de lesiones focales y bien circunscriptas de degeneración de cartílago estuvieron presentes en las tibias medias de todos los perros operados en todos los grupos. Las lesiones femorales se observaron en forma esporádica. Todos los perros tuvieron engrasamiento de cápsula de articulación media mínima. El daño de meniscos (aproximadamente 1/2 ausente en necropsia con generalmente reparación ausente a moderada) fue similar en todos los grupos. La evaluación microscópica reveló que las rodillas sin tratar y tratadas con portador a menudo tuvieron hipertrofia de cartílago con clonación en la zona 1 de niveles 1 y 2. Los efectos anabólicos finales (mayor clonación, celularidad y manchado de proteoglican en las áreas de lesión) se observaron en las rodillas tratadas con 30 µg (10 µ9 tres veces por semana) FGF-18(170AA), y estos cambios fueron más identificables en cóndilos femorales. Efectos anabólicos menores pero aún convincentes ser observaron en algunas rodillas tratadas tres veces por semana con menores dosis de FGF-18(170AA), o en rodillas tratadas con 30 o 10 µ9 una vez por semana. Cuando estuvieron presentes, estos cambios inducidos por FGF-18(170AA) estaban generalmente en los 1/3 1/2 superiores del cartílago o en la matriz adyacente a hendiduras más profundas. Los resultados de este estudio demuestran los efectos anabólicos definidos de tratamiento i. a. con 10 µ9 FGF-18(170AA) 3 veces por semana (30 µg total/semana) en todas las rodillas y efectos menores en algunas rodillas tratadas con menores dosis 3 veces por semana o con h 30 o 10 µg una vez por semana. Los cambios comprendieron clonación, mayor síntesis de proteoglican en 1/3 a 1/2 superior del cartílago o en matriz adyacente a las hendiduras. Se observaron cambios proliferativos en zona marginal moderados en algunas articulaciones pero no hubo cambios excesivos similares a los que se produjeron en ratas. Los cambios anabólicos en cartílago articular fueron mayores que los cambios anabólicos en zonas marginales en todos los casos. Las mediciones de daños de colágeno también sugirieron alguna protección de integridad de matriz.

EJEMPLO 1.3 Modelo de ligamento cruciforme anterior de perro (LCA) Para las investigaciones sobre osteoartritis progresiva severa, el modelo de ligamento cruciforme anterior de perro (LCA ) se utiliza para investigaciones de farmacología pre-clínica, incluyendo evaluación MRI al final del tratamiento y en seguimiento. Este modelo provee datos sobre eficacia (histopatológica y MRI en tiempo y seguimiento) junto con datos sobre función por medio de análisis del modo de caminar. Utilizando un MRI de lectura no invasiva ya al final del tratamiento, una reducción en lesiones de cartílago comparada con la línea de base sana resultó demostrable (-13.3, -7.5, -9.3 y -8.8 para portador, 3 g/articulación, 10 µg/ articulación y 30 µg/ articulación, respectivamente). También una mejora funcional medida vía análisis del modo de caminar en placa de fuerza ese demostrable al final de la terapia: El análisis del modo de caminar se realizó utilizando una medición de fuerza /presión en base a plataforma/ (Matscan® System, Tekscan Inc, Boston, MA, USA).

Procedimientos de adquisición de paso. El sistema Matscan® comprende 4 disposiciones de piso para caminar, en donde cada uno posee 2.288 elementos sensibles incluidos en un área sensible de 432 mm X 368 mm, produciendo una resolución espacial de 1 ,4 sensels/cm2. Este dispositivo fue calibrado con peso predefinido al inicio del estudio y la misma calibración se utilizó para todos los perros durante todo el estudio. Para el miembro trasero inducido con osteoartritis, la fuerza pico vertical y el área de contacto se adquirió a una velocidad de paso al trote del orden de 1.9 a 2.2 metros/segundo. La velocidad se aseguró utilizando un cronómetro. La ventana de adquisición de paso fue de 3 segundos con una velocidad de muestra fijada a 44 hertz, produciendo un total de 132 cuadros. Los primeros 5 ensayos válidos se obtuvieron para cada perro y luego se promediaron para caracterizar el perfil del perro a un punto dado en el tiempo. La fuerza de pico vertical se expresó en porcentaje de peso corporal (%PC) y el área de contacto se expresó en centímetros cuadrados (cm2). Con respecto a la fuerza de pico vertical del miembro posterior inducido con osteoartritis al trote, el modelo de osteoartritis canino produjo un modo de caminar o paso anormal (semana 4) discernible sobre valores pre-operativos (línea de base). La fuerza vertical pico y el área de contacto se redujeron en 4 y 8 semanas después de la cirugía cuando se observaron cambios negativos en todos los grupos (cuadros 3 & 4). Sin embargo hubo una tendencia en los perros del Grupo IV en las 8 semanas después de la cirugía a tener menos reducción severa comparado con la línea de base visa-vis con otros grupos.

CUADRO 3 Fuerza vertical pico adquirida al trote (episodio dinámico) para el miembro posterior inducido con osteoartritis.

Grupo Animales Fuerza vertical pico* 1 8 -37.34 ± 5.68 -27 AS ± 3.90 OA: placebo control II 8 -34.84 ± 3.65 -22.08 ± 2.87 FGF-18: 3 ?/ß???????ß ?? III 8 -36.59 ± 3.14 -25.11 ± 3.03 FGF-18: 10 µ?/ß?????? ?? IV 8 -32.28 ± 3.05 -15.71 + 1.85 a. Los valores presentados son Medio ± SEM. Los valores son los cambios sobre línea de base. b. Los valores son expresados en porcentaje de peso de cuerpo (% PC).

CUADRO 4 Área de contacto Adquirida al trote (episodio dinámico) para el muslo posterior inducido con osteoartritis.

Grupo Animales Área de contacto* (n) Semana 4 Semana 8 b. Los valores están expresados en centímetros cuadrados (cm ).

Los resultados de farmacología in vitro demostraron actividad específica en condrocitos (proliferación y regeneración de cartílago/síntesis de colágeno) y la ausencia de efectos adversos como proliferación de leucocitos o liberación de citocina por diferentes tipos de células después de exposición a FGF-18(170AA).

EJEMPLO 1.4 Investigaciones que utilizan FGF18 Í3H1-FGF18 radiorotulado Los niveles de radioactividad encontrados en la articulación de rodilla después de la administración intra-articular de [3H]-FGF18 se informan en el cuadro 5 (como concentraciones de radioactividad total, expresadas como ng equivalentes/g) y en el cuadro 6 (expresadas como porcentajes de dosis administrada); en los cuadros se informan los niveles de radioactividad determinados en las articulaciones tratadas analizados tanto como articulación de rodilla intacto y después de la recolección del fluido sinovial. Los parámetros farmacocinéticos correspondientes en articulación de rodilla , con o sin fluido sinovial, se informan en el cuadro 7.

CUADRO 5 Las concentraciones de radioactividad total en articulación de rodilla luego de una administración intra-articular única de [3H]-AS902330 a un nivel de dosis objetivo de 0.24 mg/kg para ratas machos. Los resultados se expresan como ng equivalentes/g.

CUADRO 6 La recuperación de radioactividad total de la articulación de rodilla después de una administración intra-articular simple de [3H]-AS902330 a un nivel de dosis objetivo de 0.24 mg/kg a ratas machos. Los resultados se expresan como % de dosis administrada.

Relación Grupo 4 Grupo 3 Sin fluido MUESTRA Tiempo Articulación Sin fluido sinovial/articulación completa sinovial completa 15 m 87.87 66.23 0.75 1 h 78.43 67.39 0.86 ARTICULACIÓN DE 4 h 70.94 40.92 0.58 RODILLA 24 h 28.62 14.09 0.49 48 h 21 ,61 8.29 0.38 Grupo 3 Grupo 4 Relación Sin fluido sinovial Articulación Sin fluido sinovial/articulación completa completa Cmax (ngeq/g) 11740 26037 0.45 Rango de regresión 4-48 4-48 t1/2.z (hr) 16 20 AUC(O-tlast) 242116 393063 0.62 (ngeq h/gr) AUC(O-co) 275787 492380 0.56 (ngeq h/gr) Los niveles de radioactividad total en la articulación tratada declinaron bi-fásicamente (con una vida media terminal de 20 horas). Se obtuvo un valor comparable se obtuvo tomando en cuenta la articulación completa sin fluido sinovial (16 horas). En general, los resultados indicaron que la radioactividad total se distribuyó fuera del fluido sinovial dentro de los tejidos de la articulación de rodilla. Los resultados obtenidos después del análisis de autoradioluminografía de las articulaciones de rodilla tratadas mostraron que la mayor parte de la radioactividad se localizó en una cercana proximidad a la articulación. Los resultados de los análisis de autoradioluminografía de cuerpo completo después de administración intravenosa y de la administración intra-articular de [3H]-FGF18 se informan en el cuadro 8 y en el cuadro 9, respectivamente. Las concentraciones de radioactividad total en tejidos y órganos se expresan como ng equivalentes/g (Medio ± SD).

CUADRO 8 Las concentraciones de radioactividad total después de una administración intravenosa única de [3H]-AS902330 a un nivel de dosis objetivo de 0.24 mg/kg a ratas macho (Grupo 1 ). Los resultados se expresan como ng equivalentes/g (Medio ± SD).

* NC: No cuantificable (debajo del limite de cuantificación) CUADRO 9 Las concentraciones de radioactividad total después de una administración intravenosa única de [3H]-AS902330 a un nivel de dosis objetivo de 0.24 mg/kg a ratas macho (Grupo 2). Los resultados se expresan como ng equivalentes/g (Medio ± SD).

Después de la administración intravenosa, la radioactividad total en sangre y suero alcanzó el valor más alto a 4 horas y 24 horas después de la administración, en suero y sangre, respectivamente. La vida media medida en suero fue alrededor de 55 horas. Después de la administración intra- articular, los medios de radioactividad total aumentaron lentamente alcanzando la concentración más alta a 24 hora y 48 horas después de la administración, en suero y sangre, respectivamente. La exposición sistémica fue aproximadamente 20% de la encontrada después de administración intravenosa. La radioactividad total en suero estuvo en promedio más alta que en sangre, sugiriendo que el compuesto madre y/o sus metabolitos tuvieron baja afinidad para células sanguíneas y la radioactividad circulante fue principalmente distribuida en suero. Los niveles de radioactividad total en la articulación tratada declinaron bi-fásicamente con un vida media terminal de 20 horas. En general, los resultados indicaron que la radioactividad total se distribuyó fuera del fluido sinovial en la articulación de rodilla En general, en base a los modelos de farmacología no clínica en ratas y perros, se encontró un régimen de dosis particularmente adecuado una vez por semana durante tres semanas. La dosis efectiva observada varía de 3-30 µg/articulac¡ón.

EJEMPLO 2 Ejemplos de Compuesto FGF-18s de la invención Las secuencias del los compuestos de FGF-18s de la invención preferidos se indican en el listado de secuencias a continuación SEQ ID NO. 1 a SEQ ID NO: 5.

SEQ ID NO: 1 atgtattcag cgccctccgc ctgcacttgc ctgtgtttac acttcctgct gctgtgcttc 60 caggtacagg tgctggttgc cgaggagaac gtggacttcc gcatccacgt ggagaaccag 120 acgcgggctc gggacgatgt gagccgtaag cagctgcggc tgtaccagct ctacagccgg 180 accagtggga aacacatcca ggtcctgggc cgcaggatca gtgcccgcgg cgaggatggg 240 gacaagtatg cccagctcct agtggagaca gacaccttcg gtagtcaagt ccggatcaag 300 ggcaaggaga cggaattcta cctgtgcatg aaccgcaaag gcaagctcgt ggggaagccc 360 gatggcacca gcaaggagtg tgtgttcatc gagaaggttc tggagaacaa ctacacggcc 420 ctgatgtcgg ctaagtactc cggctggtac gtgggcttca ccaagaaggg gcggccgcgg 480 aagggcccca agacccggga gaaccagcag gacgtgcatt tcatgaagcg ctaccccaag 540 gggcagccgg agcttcagaa gcccttcaag tacacgacgg tgaccaagag gtcccgtcgg 600 atccggccca cacaccctgc ctag 624 SEQ ID NO: 2 Met Tyr Ser Ala Pro Ser Ala Cys Thr Cys Leu Cys Leu His Phe Leu 1 5 10 15 Leu Leu Cys Phe Gln Val Gln Val Leu Val Ala Glu Glu Asn Val Asp 20 25 30 Phe Arg lie His Val Glu Asn Gln Thr Arg Ala Arg Asp Asp Val Ser 35 40 45 Arg Lys Gln Leu Arg Leu Tyr Gln Leu Tyr Ser Arg Thr Ser Gly Lys 50 55 60 His lie Gln Val Leu Gly Arg Arg lie Ser Ala Arg Gly Glu Asp Gly 65 70 75 80 Val Arg lie Lys Gly Lys Glu Thr Glu Phe Tyr Leu Cys Met Asn Arg 100 105 110 Lys Gly Lys Leu Val Gly Lys Pro Asp Gly Thr Ser Lys Glu Cys Val 115 120 125 Phe lie Glu Lys Val Leu Glu Asn Asn Tyr Thr Ala Leu Met Ser Ala 130 135 140 Lys Tyr Ser Gly Trp Tyr Val Gly Phe Thr Lys Lys Gly Arg Pro Arg 145 150 155 160 Lys Gly Pro Lys Thr Arg Glu Asn Gln Gln Asp Val His Phe Met Lys 165 170 175 Arg Tyr Pro Lys Gly Gln Pro Glu Leu Gln Lys Pro Phe Lys Tyr Thr 180 185 190 Thr Val Thr Lys Arg Ser Arg Arg lie Arg Pro Thr His Pro Ala SEQ ID NO: 3 atgtattcag cgccctccgc ctgcacttgc ctgtgtttac actttctact gctgtgcttc 60 caggttcagg tgttggcagc cgaggagaat gtggacttcc gcatccacgt ggagaaccag 120 acgcgggctc gagatgatgt gagtcggaag cagctgcgct tgtaccagct ctatagcagg 180 accagtggga agcacattca agtcctgggc cgtaggatca gtgcccgtgg cgaggacggg 240 gacaagtatg cccagctcct agtggagaca gataccttcg ggagtcaagt ccggatcaag 300 ggcaaggaga cagaattcta cctgtgtatg aaccgaaaag gcaagctcgt ggggaagcct 360 gatggtacta gcaaggagtg cgtgttcatt gagaaggttc tggaaaacaa ctacacggcc 420 ctgatgtctg ccaagtactc tggttggtat gtgggcttca ccaagaaggg gcggcctcgc 480 aagggtccca agacccgcga gaaccagcaa gatgtacact tcatgaagcg ttaccccaag 540 ggacaggccg agctgcagaa gcccttcaaa tacaccacag tcaccaagcg atcccggcgg 600 atccgcccca ctcaccccgg ctag 624 SEQ ID NO: 4 Met Tyr Ser Ala Pro Ser Ala Cys Thr Cys Leu Cys Leu His Phe Leu Leu Leu Cys Phe Gln Val Gln Val Leu Ala Ala Glu Glu Asn Val Asp Arg Lys Gln Leu Arg Leu Tyr Gln Leu Tyr Ser Arg Thr Ser Gly Lys 50 55 60 His lie Gln Val Leu Gly Arg Arg lie Ser Ala Arg Gly Glu Asp Gly 65 70 75 80 Asp Lys Tyr Ala Gln Leu Leu Val Glu Thr Asp Thr Phe Gly Ser Gln 85 90 95 Val Arg lie Lys Gly Lys Glu Thr Glu Phe Tyr Leu Cys Met Asn Arg 100 105 110 Lys Gly Lys Leu Val Gly Lys Pro Asp Gly Thr Ser Lys Glu Cys Val 115 120 125 Phe lie Glu Lys Val Leu Glu Asn Asn Tyr Thr Ala Leu Met Ser Ala 130 135 140 Lys Tyr Ser Gly Trp Tyr Val Gly Phe Thr Lys Lys Gly Arg Pro Arg 145 150 155 160 Lys Gly Pro Lys Thr Arg Glu Asn Gln Gln Asp Val His Phe Met Lys 165 170 175 Arg Tyr Pro Lys Gly Gln Ala Glu Leu Gln Lys Pro Phe Lys Tyr Thr 180 185 190 Thr Val Thr Lys Arg Ser Arg Arg lie Arg Pro Thr His Pro Gly 195 200 205 SEQ ID NO : 5 Met Glu Glu Asn Val Asp Phe Arg lie His Val Glu Asn Gln Thr Arg 1 5 10 15 Ala Arg Asp Asp Val Ser Arg Lys Gln Leu Arg Leu Tyr Gln Leu Tyr 20 25 30 Ser Arg Thr Ser Gly Lys His lie Gln Val Leu Gly Arg Arg lie Ser 35 40 45 Ala Arg Gly Glu Asp Gly Asp Lys Tyr Ala Gln Leu Leu Val Glu Thr 50 55 60 Asp Thr Phe Gly Ser Gln Val Arg lie Lys Gly Lys Glu Thr Glu Phe 65 70 75 80 Thr Ala Leu Met Ser Ala Lys Tyr Ser Gly Trp Tyr Val Gly Phe Thr 115 120 125 Lys Lys Gly Arg Pro Arg Lys Gly Pro Lys Thr Arg Glu Asn Gln Gln 130 135 140 Asp Val His Phe Met Lys Arg Tyr Pro Lys Gly Gln Pro Glu Leu Gln 145 150 155 160 Lys Pro Phe Lys Tyr Thr Thr Val Thr Lys 165 170

Claims (16)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1.- El uso de un compuesto FGF-18 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un paciente que tiene un desorden en cartílago en donde el medicamento se adapta para ser administrable por lo menos dos veces, dichas administraciones tienen una separación de alrededor de por lo menos 4, preferentemente 5, 6 o 7 días.

2.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde dichas administraciones tienen una separación de alrededor de 7 días cada una.

3. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable durante por lo menos 2 semanas consecutivas, por lo menos 3 semanas consecutivas o por lo menos 4 semanas consecutivas por ciclo de tratamiento.

4. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable durante 2 semanas consecutivas, 3 semanas consecutivas o 4 semanas consecutivas por ciclo de tratamiento.

5. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde los ciclos de tratamiento se repiten después de 2, 4, 6 o 8 meses

6. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende 1 , 2, 3, 4, 5 o 6 ciclos de tratamiento por año.

7. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable por medio de una vía intra-articular.

8. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable por medio de una vía intravenosa.

9.- El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable en una sola dosis de 1-100 mcg, preferentemente 5-40 mcg, preferentemente 0-30 mcg por medio de una vía intra-articular.

10. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable en una sola dosis de alrededor de 5, 10, 5, 20,25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 mcg por medio de una vía intra-articular.

11. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable en una sola dosis de 50-200 mcg/kg, preferentemente 80-120 mcg/kg por medio de una vía intravenosa.

12. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el medicamento se adapta para ser administrable en una sola dosis de 80, 90, 100, 110 o 120 mcg/kg por medio de una vía intravenosa.

13.- El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el desorden en cartílago es osteoartritis.

14.- El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la osteoartritis es clasificada como osteoartritis leve a moderada, OARSI etapa II o etapa III, osteoartritis progresiva grave o y/o OARSI etapa IV.

15. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la osteoartritis es osteoartritis de rodilla u osteoartritis de cadera, tal como osteoartritis de cadera secundaria.

16. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el compuesto FGF-18 es seleccionado entre FGF-18 o FGF-18(170AA) tipo natural humano.