MX2008012649A - Sustitutos de aminoacido para constructos peptidicos. - Google Patents

Abstract

Sustituidos de aminoácidos de anillo-restringido de fórmula I (ver fórmula (I)) donde R1, R2, R3, R4, R5, R6a, R6b, R7, y y son como se definen en la especificación, métodos para la síntesis de sustitutos de aminoácido de anillo-restringido de formula I, métodos de uso de sustitutos de aminoácido de anillo-restringido de fórmula I, incluyendo el uso en compuestos lineales o cíclicos que incluyen una pluralidad de residuos de aminoácidos y uno o más sustitutos de aminoácido de anillo-restringido de fórmula I y compuestos lineales o cíclicos que incluyen una pluralidad de residuos de aminoácido y uno o más sustitutos de aminoácidos de anillo-restringido de fórmula I.

Description

SUSTITUTOS DE AMINOACIDO PARA CONSTRUCTOS PEPTIDICOS REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama prioridad y el beneficio de la presentación de la Solicitud de Patente Provisional de E.U.A. No. de serie 60/743,963 cuyo título es "Linear Natriuretic Peptide Constructs" (Constructos peptídicos natriuréticos lineales), presentada el 30 de marzo de 2006, de la Solicitud de Patente Provisional de E.U.A. No. de serie 60/743,964 cuyo título es "Linear Natriuretic Peptide Constructs with Prosthetic Groups" (Constructos peptídicos natriuréticos lineales con grupos protésicos), presentada el 30 de marzo de 2006, de la Solicitud de Patente Provisional de E.U.A. No. de serie 60/743,960 cuyo título es "Cyclic Natriuretic Peptide Constructs" (Constructos peptídicos natriuréticos cíclicos), presentada el 30 de marzo de 2006, y de la Solicitud de Patente Provisional de E.U.A. No. de serie 60/743,961 cuyo título es "Cyclic Natriuretic Peptide Constructs with Prosthetic Groups" (Constructos peptídicos natriuréticos cíclicos con grupos protésicos), presentada el 30 de marzo de 2006, y su especificación y reivindicaciones de cada una se incorpora aquí para referencia. Dos solicitudes relacionadas se presentan concurrentemente con la presente, Solicitud Internacional de Tratado de Cooperación de Patentes PCT/US07/ , No. de caso del apoderado 0307-042-PCT, con título "Linear Natriuretic Peptide Constructs" (Constructos peptídicos natriuréticos lineales) y la Solicitud Internacional de Tratado de Cooperación de Patentes PCT/US07/ , No. de caso del apoderado 0307-041 -PCT, cuyo título es "Cyclic Natriuretic Peptide Constructs" (Constructos peptídicos natriuréticos cíclicos), y su especificación y reivindicaciones se incorporan aquí para referencia.

CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a sustitutos de aminoácido de anillo restringido, métodos para la síntesis de sustitutos de aminoácido de anillo restringido, y métodos de uso de sustitutos de aminoácido de anillo restringido, incluyendo el uso en constructos o compuestos lineales o cíclicos que incluyen una pluralidad de residuos de aminoácido y uno o más sustitutos de aminoácido de anillo restringido.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Sustitutos de aminoácido. Un gran número de diferentes miméticos peptídicos se conoce, y se emplean para hacer míméticos de dominios de función crítica de péptidos. Ver, generalmente Bioorganic Chemistry: Peptides and Proteins, S. M. Hecht, ed., Oxford University Press, 1998, y particularmente su capítulo 12, páginas 395-419, y las referencias citadas aquí. Los péptidos y proteínas son altamente flexibles, debido en gran parte a los grados rotacionales altos de libertad de residuos de aminoácido individuales. Además, algunos enlaces en las cadenas laterales de residuos de aminoácido individuales también tienen grados rotacionales de libertad. Las interacciones estéricas no unidas entre residuos de aminoácido individuales fuerzan el péptido o proteína a lo largo de sus grados de libertad en alguna configuración de energía libre mínima. Estructuras locales, también conocidas como una "estructura secundaria", son comunes en péptidos y proteínas. Estas estructuras incluyen a-hélices, ß-doblez, hojas, cadenas extendidas, bucles y lo similar, y más frecuentemente contribuyen a la unión o especificidad-receptor de péptidos y proteínas. Existen varios tipos de -hélices conocidas, que difieren en ángulos de torsión dentro de los residuos de aminoácido del cambio real y por medio de los patrones de unión de hidrógeno intra- e intermolecular. Hay también un número de ß-dobleces diferentes conocidos, que difieren en los ángulos de torsión dihedral ? (para el enlace Ca-C) o f (para el enlace Ca-N), o ambos. Los miméticos peptídicos se emplean para proveer un componente restringido de conformación en una molécula, en parte con el objetivo de fijar los dominios de función crítica en una configuración restringida que es óptima para una respuesta biológica deseada. Normalmente los miméticos peptídicos se diseñan y pretenden fijar e imitar la función de un dipéptido o tripéptido. Por ejemplo, ver los miméticos de giro inverso descritos en las Patentes de E.U.A. 7,008,941 , 6,943,157, 6,413,963, 6,184,223, 6,013,458 y 5,929,237, y La Solicitud de Patente Publicada 2006/0084655, todas describiendo varias estructuras de anillo biciclico afirmados para imitar una secuencia de dipéptido o tripéptido. Otras solicitudes describen un número de diferentes compuestos de molécula pequeña, nuevamente afirmados para imitar una secuencia dipéptido o tripéptido. Ver, por ejemplo, las Solicitudes de Patente Publicadas de E.U.A. 2006/0234923 y 2003/0191049. Sistema de péptidos natriuréticos. Una aplicación potencial para sustitutos de aminoácido emplea el sistema peptídico natriurético, que se ha explorado de manera extensa desde la identificación de la secuencia de péptidos natriuréticos atriales humanos (ANP) y estructura génica en 1984. ANP es parte del sistema peptídico humano, que en humanos involucra un gen ANP, el cual a través de diferencias en el procesamiento post-traducción resulta en ANP y urodilatin, un gen que produce BNP, o péptido natriurético cerebral, y un gen que produce CNP, o péptido natriurético tipo c. ANP, urodilatin, BNP y CNP son cada uno estructuras de anillo, con un bucle de 17 aminoácidos formado por un enlace de disulfuro cisteína-cisteína. ANP, urodilatin, BNP y CNP están estrechamente relacionados, difiriendo por cinco o seis aminoácidos dentro del anillo, aunque las colas N- y C-terminal son sustancialmente diferentes. ANP, BNP y CNP son cada uno específicos para distintos receptores, receptores de péptido natriurético A, B y C (NPRA, NPRB y NPRC). NPRA y NPRB se enlazan a guanilil ciclasas, aunque NPRC es un receptor de depuración enlazado a proteína-G. ANP, BNP y CNP son los péptidos natriuréticos mamíferos endógenos primarios identificados hasta la fecha. Sin embargo, existe un número de péptidos natriuréticos de no mamífero que se han identificado y pueden tener aplicación terapéutica en mamíferos. Estos incluyen péptido natriurético o cardiaco de salmón (sCP), péptido natriurético ventricular (VNP), un péptido natriurético cardiaco identificado en anguilas y una variedad de pez, péptido natriurético dendroaspis (DNP), un péptido natriurético identificado en el veneno de la serpiente mamba, y tres péptidos tipo natriurético (TNP-a, TNP-b, y TNP-c) aislados de veneno de serpiente taipan. Ver, generalmente Tervonen V, Ruskoaho H, Lecklin T, Uves M, Vuolteenaho O. El péptido natriurético cardiaco de salmón es una hormona que regula el volumen. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 283:E353-61 (2002); Takei Y, Fukuzawa A, Tiara Y, Watanabe TX, Yoshizawa Kumagaye K, Nakajima K, Yasuda A, Smith MP, Duff DW, Olson KR. A new natriuretic peptide isolated from cardiac atria of trout, Oncorhynchus mykiss. FEBS Lett. 414:377-80 (1997); Schweitz H, Vigne P, Moinier D, Frelin C, Lazdunski M. A new member of the natriuretic peptide family is present in the venom of the green mamba {Dendroaspis angusticeps). J. Biol. Chem. 267:13928-32 (1992); Lisy O, Jougasaki M, Heublein DM, Schirger JA, Chen HH, Wennberg PW, Burnett JC. Renal actions of synthetic dendroaspis natriuretic peptide. Kidney Int. 56:502-8 (1999); y Fry BG, Wickramaratana JC, Lemme S, Beuve A, Garbers D, Hodgson WC, Alewood P. Novel natriuretic peptides from the venom of the inland (Oxyuranus microlepidotus): isolation, chemical and biological characterisation. Bíochem.

Biophys. Res. Comm. 327:101 1 -1015 (2005). ANP se secreta de manera endógena predominantemente en respuesta a presión atrial incrementada, pero otros factores, incluyendo estimulación del receptor de citosina, pueden contribuir a secreción endógena. Una vez liberado, ANP es un regulador hormonal de la presión sanguínea, sodio y homeostasis de fluido, proporcionando efectos vaso-relajantes, que afectan la remodelación vascular, y lo similar. De este modo ANP, incluyendo ANP endógeno, es efectivo en deficiencia cardiaca congestiva y otras enfermedades cardiovasculares, en parte al proveer una defensa contra un sistema renina-angiotensina-aldosterona activado crónicamente. ANP circulante se remueve rápidamente de la circulación por medio de dos mecanismos, uniéndose a un receptor peptídico natriurético y degradación ezimática. ANP humano también es referido como ANP humano, hANP, ANP(1 -28) y ANP(99-126) (este último referido a la secuencia relevante dentro de proANP(1 -126), que normalmente es escindido en Arg98- Ser" en la región C-terminal durante la secreción). En adelante ANP humano es a veces referido como "hANP". En general, los péptidos natriuréticos y variantes de los mismos se cree tienen utilidad en el tratamiento de deficiencia cardiaca congestiva, hipertensión renal, deficiencia del riñon aguda y condiciones relacionadas, así como cualquier condición, enfermedad o síndrome para el cual un diurético, natriurético y/o respuestas vasodilatonas pueden tener un efecto terapéutico o preventivo. Un artículo de revisión que describe péptidos natriuréticos, incluyendo ANP, y el uso del sistema peptídico natriuretico en la deficiencia cardiaca es Schmitt M., Cockcroft J.R., y Frenneaux M. P. Modulation of the natriuretic peptide system in heart failure: from bench to bedside? Clinical Science 105: 141 -160 (2003). Un gran número de miméticos de ANP y variaciones se han realizado, algunos de los cuales se reducen sustancialmente en tamaño de ANP. Una versión de ANP que se reduce en tamaño y que es todavía biológicamente activa es el péptido cíclico disulfuro 15-mer H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO:1 ) como se describe en Li B, Tom JY, Oare D, Yen R, Fairbrother WJ, Wells JA, Cunningham BC. Minimization of a polypeptide hormone. Science 270:1657-60 (1995). Este péptido 15-mer es comúnmente referido como "miní-ANP".

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En un aspecto, la invención provee un sustituto de aminoácido anillo-restringido de la fórmula general I: I o su enantiómero, estéreo-isómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R1 y R2 no sean ambos H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=O)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2 o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11, (CH2)mC(=0)OR1 1 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6b es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no sean (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=0)(CH2)m(NR8)2, alquilo, aralquilo o arilo; cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo o alquilo; R 1 es un soporte sólido de péptido; R 2 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, y es 1 . En otro aspecto, y es 0. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR1 1, (CH2)mC(=0)OR11 y R6a es H o alquilo. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, R6a es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2 o (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=O)OR11 y R4 es H o alquilo. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, R3 es un grupo de una fórmula: y R es tere-butilo, alilo, o un grupo de una fórmula: En un aspecto del sustituto de fórmula general I, R es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=O)OR8, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: 12 y R es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6.

En otro aspecto del sustituto de fórmula general I, se provee un compuesto que tiene una fórmula: o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisomero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R6a es H o alquilo; y R9 es tere-butilo, alilo o un grupo de una fórmula: En lo anterior, R1 puede ser alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. R7 puede ser H. R4 puede ser (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, (CH2)mC(=0)NR1 1 o (CH2)mC(=0)OR11. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, se provee un compuesto que tiene una fórmula: o su enantiómero, este reo i somero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: donde R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11, (CH2)mC(=0)OR , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=O)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6a en H o alquilo; y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. En lo anterior, R1 puede ser alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n- C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: donde R12 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. R7 puede ser H. R4 puede ser (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, (CH2)mC(=0)NR \ o (CH2)mC(=0)OR11. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, se provee un compuesto que tiene una fórmula: o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es alquil-N(R8)2, (CH2)nOR8, (CH2)nC(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: R es H o alquilo; R6a es H o alquilo; y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. En lo anterior, R3 puede ser un grupo de una fórmula: y R puede ser tere-butilo, alilo o un grupo de una fórmula: R1 puede ser alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alqu¡l-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: donde R12 es H o, toluenosulfonilo, formilo, nitro benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. puede ser H. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, se provee compuesto que tiene una fórmula: p^6a p6b o su enantiómero, estereoisomero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2> alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: R es H o alquilo; y (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR 1"1 , (CH2)pOH (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)m-C(=0)N(RB)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2. En lo anterior, R3 puede ser un grupo de una fórmula: En lo anterior, R1 puede ser alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n- C(=O)OR8, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo. R puede ser (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, (CH2)mC(=0)NR11 , o (CH2)mC(=O)OR11. R7 puede ser H. En un aspecto del sustituto de la fórmula general I, se provee un compuesto que tiene una fórmula: o su enantiómero, estéreo-isómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R4 es H o alquilo; y R9 es tere-butilo, alilo, o un grupo de una fórmula: En lo anterior, alquil-N(RB)2, alquil-ORB, (CH2)n-C(=0)ORü, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8 alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de la fórmula: donde R12 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. R7 puede ser H. R4 puede ser (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, (CH2)mC(=0)NR1 1 , o (CH2)mC(=O)OR11. En un aspecto del sustituto de fórmula general I, se provee un compuesto que tiene una fórmula: o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 y R3 son grupos alquilo independiente. En lo anterior, R3 puede ser un grupo de una fórmula: donde R es tere-butilo, alilo, o un grupo de una fórmula: (CH2)mC(=O)OR1 1 , (CH2)pOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2 y R6a es H o alquilo. R6a puede ser (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11, (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2 y R4 es H o alquilo. R7 puede ser H. En otra modalidad, se provee un método de sintetizar un péptido que comprende un grupo de fórmula: dicho método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto que tiene una fórmula de estructura I: I o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, con un aminoácido N-protegido, en donde: R1 es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil- S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de una formula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R1 y R2 ambos no son H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR1 1 , (CH2)mC(=O)0R11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6a es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no son (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11 , (CH2)mC(=O)OR11 ,(CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=0)(CH2)m(NR8)2, alquilo, aralquilo o arilo; cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo, o alquilo; R es un soporte sólido de péptido; R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1. En otra modalidad, se provee un compuesto que comprende una pluralidad de residuos de aminoácido y al menos un grupo de la fórmula: o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, en donde: R es H, alquilo, arilo, alquiladlo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil- C(=0)ORs, C(=0)ORa, alquil-NH2, alquil-S-RB, alqu¡l-C(=0)N(Rs)2, o un grupo de una formula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R y R2 no son ambos R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR1 1, (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11, (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6b es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no son (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=0)OR11, (CH2)pOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=0)(CH2)m(NR8)2, alquilo, aralquilo o arilo; cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo o alquilo; R 1 es un soporte sólido de péptido; R 2 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o . En un aspecto de la invención, un sustituto de aminoácido se puede emplear en un compuesto de la invención, dos sustitutos de aminoácido se pueden emplear en un compuesto de la invención, o más de dos sustitutos de aminoácido se pueden emplear en un compuesto de la invención. En otro aspecto de la invención, se provee un compuesto que incluye un sustituto de aminoácido en donde uno o más enlaces de péptido entre residuos de aminoácido se sustituyen con un enlace de no péptido. En otro aspecto de la invención, se provee un compuesto que incluye al menos un sustituto de aminoácido y una pluralidad de residuos de aminoácido en donde el compuesto es un compuesto cíclico, cliclizado por un enlace entre cadenas laterales de dos residuos de aminoácido, entre una cadena lateral de residuo de aminoácido y un grupo de un sustituto de aminoácido, entre grupos de dos sustitutos de aminoácido, entre un grupo terminal del compuesto y una cadena lateral de residuo de aminoácido, o entre un grupo terminal del compuesto y un grupo de un sustituto de aminoácido. Sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I se pueden usar para sintetizar compuestos en donde los compuestos exhiben, en administración a un mamífero, una o más ventajas en relación con la secuencia de aminoácido correspondiente no comprendiendo el sustituto de aminoácido de la invención, las ventajas seleccionadas del grupo que consiste de resistencia incrementada a degradación enzimática, vida media de circulación incrementada, biodisponibilidad incrementada, eficiencia incrementada, duración prolongada de efecto y combinaciones de lo anterior. Otro objetivo de la presente invención es proveer sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I que se pueden emplear mediante sustitución para un residuo de aminoácido de un polipéptido de origen. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde el compuesto tiene una afinidad de unión al receptor de equilibrio, determinada por el valor Ki (nM), menor del valor Ki (nM) de la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde el compuesto tiene una afinidad de unión al receptor con respecto a un receptor de péptido natriurético mayor que la afinidad de unión al receptor de la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde el compuesto tiene una eficacia biológica al menos tan eficaz como o más eficaz que la misma dosis de la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde el compuesto tiene una eficacia biológica más eficaz que la misma dosis de la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido tiene al menos aproximadamente 60% de homología con la secuencia de un polipéptido de origen. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido tiene al menos aproximadamente 80% de homología con la secuencia de un polipéptido de origen.

Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto en donde la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido tiene al menos aproximadamente 60% de homología con la secuencia de un péptido que se une a un receptor para ANP, BNP, CNP, sCP, DNP, TNP-a, TNP-b o TNP-c. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto receptor-específico natriurético en donde la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido tiene al menos aproximadamente 80% de homología con la secuencia de un péptido que se une a un receptor para ANP, BNP, CNP, sCP, DNP, TNP-a, TNP-b o TNP-c. Otro objetivo de la presente invención es proveer un sustituto de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto que incluye un sustituto como se define aquí en donde la secuencia de aminoácido correspondiente que no comprende un sustituto de aminoácido es un polipéptido de origen que se une a un receptor conocido. Otro objetivo de la presente invención es proveer sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útiles para sintetizar compuestos con mayor biodisponibilidad y vida media que las formas naturales o recombinantes de polipéptidos de origen. Otro objetivo de la presente invención es proveer sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útiles para sintetizar compuestos con resistencia incrementada a degradación pero que tienen una afinidad de unión significativamente alta a su receptor. Otro objetivo de la presente invención es proveer sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I útiles para sintetizar compuestos es una formulación de liberación sostenida. Otros objetivos, ventajas y aspectos novedosos, y alcance adicional de aplicabilidad de la presente invención serán expuestos en parte en la descripción detallada que sigue, y en parte llegarán a ser aparentes para aquellos de experiencia en la técnica en el examen de lo siguiente, o se pueden aprender mediante la práctica de la invención. Los objetivos y ventajas de la invención se pueden realizar y alcanzar por medio de instrumentalizaciones y combinaciones particularmente señaladas en las reivindicaciones anexadas.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Definiciones "Grupo alquilo" Como se usa aquí, el término "grupo alquilo" significa una cadena de hidrocarburo no ramificada o ramificada, saturada monovalente. Ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo de (Ci-C6), tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-1 -propilo, 2-metil-2- propilo, 2-metil-1 -butilo, 3-metil-1 -butilo, 2-metil-3-butilo, 2, 2-dimetil-1 -propilo, 2-metil-1 -pentilo, 3-metil-1 -pentilo, 4-metil-1 -pentilo, 2-metil-2-pentilo, 3-metil-2-pentilo, 4-metil-2-pentilo, 2, 2-dimetil-1 -butilo, 3, 3-dimetil-1 -butilo, 2-etil-1 -butilo, butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, y hexilo, y grupos alquilo mas largos, tales como heptilo, y octilo. Un grupo alquilo puede ser no sustituido u opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes adecuados.

"Alifático" Como se usa aquí, el término "alifático" incluye compuestos con cadenas hidrocarburo, tales como por ejemplo alcanos, alquenos, alquinos, y sus derivados. Un "alifático amino omega" incluye un radical alifático con un grupo amino terminal. Ejemplos de alifáticos amino omega incluyen 7'-amino-heptanoilo y los radicales de cadena lateral de aminoácido de arnitina y lisina.

"Grupo alquenilo" Como se usa aquí, el término "grupo alquenilo" significa una cadena hidrocarburo no ramificada o ramificada, monovalente que tiene uno o más enlaces dobles aquí. El enlace doble de un grupo alquenilo puede se no conjugado o conjugado con otro grupo ¡nsaturado. Grupos alquenilo adecuados incluyen, pero no se limitan a grupos alquenilo de (C2-C6), tales como vinilo, alilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, butadienilo, pentadienilo, hexadienilo, 2-etilhexenilo, 2-propil-2-butenilo, 4-(2-metil-3-buteno)-pentenilo.

Cualquier grupo puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados.

"Grupo alquinilo" Como se usa aquí, el término "grupo alquinilo" significa cadena hidrocarburo no ramificada o ramificada, monovalente que tiene uno o más enlaces triples aquí. El enlace triple de un grupo alquinilo puede ser no conjugado o conjugado con otro grupo insaturado. Grupos alquinilo adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupo alquinilo de (C2-C6), tales como etinílo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo, metilpropinilo, 4-metil-1 -butínilo, 4-propil-2-pentinilo, y 4-butil-2-hexinilo. Un grupo alquinilo puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados.

"Aralquilo" El término "aralquilo" incluye un radical -Ra-Rb donde R2 es un grupo alquíleno (alquilo bivalente) y Rb es un grupo arilo como se define anteriormente. Ejemplos de grupos aralquilo incluyen bencilo, feniletilo, 3-(3-clorofenilo)-2-metilpentilo, y lo similar.

"Grupo arilo" Como se usa aquí, el término "grupo arilo" significa un radical aromático monocíclico o policíclíco que comprende átomos de carbono e hidrógeno. Ejemplos de grupos arilo adecuados incluyen, pero no se limitan a, fenilo, tolilo, antacenilo, fluorenilo, indenilo, azúlenlo, naftilo, -naftilo, 2-naftilo, y bifenilo así como radicales carboxilicos benzo-fusionados tales como 5,6,7,8-tetrahidronaftilo. Un grupo arilo puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados como se define posteriormente. Un grupo arilo puede ser opcionalmente fusionado a un grupo cicloalquilo, fusionado con otro grupo arilo, fusionado a un grupo heteroarilo, o fusionado a un grupo heterocicloalquilo. Grupos arilo preferidos incluyen, pero no se limitan a, radicales hidrocarburo aromático monocíclico o bicíclico de 6 a 12 átomos de anillo, y opcionalmente sustituido independientemente con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquiltio, halo, nitro, acilo, ciano, amino, amino monosustituido, amino disustituido, hidroxi, carboxi, o alcoxi-carbonilo. En una modalidad, fenilo es un grupo arilo preferido, que cuando "se sustituye" independientemente comprende grupos hidroxi, halógeno, alquilo o arilo unidos directamente o a través de un enlace de éter. Donde el anillo fenilo es así sustituido, el residuo aminoácido puede ser referido como un sustituido, como en Phe sustituido, HPhe sustituido o Pgl sustituido.

"Grupo heteroarilo" Como se usa aquí, el término "grupo heteroarilo" significa un anillo aromático monocíclico o policíclico que comprende átomos de carbono, átomos de hidrógeno, y uno o más heteroátomos, preferiblemente 1 a 4 heteroátomos, independientemente seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. Ejemplos ilustrativos de grupos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a, piridilo, piridazinilo, pirazilo, indolilo, triazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, (1 ,2,3,)-triazolilo, (1 ,2,4)-triazolilo, pirazinilo, pirimidinilo, tetrazolilo, furilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, furilo, fienilo, isoxazolilo, oxazolilo, pirazolilo, tetrazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, isoxazolilo, triazinilo, y pirazinilo. Anillos heteroaromáticos bicíclicos incluyen, pero no se limitan a, benzotiadiazolilo, indolilo, benzotiofenilo, benzofurilo, benzimidazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, quinolinilo, benzotriazolilo, benzoxazolilo, isoquinolinilo, purinilo, furopiridinilo y tienopiridinilo. Un heteroarilo puede ser no sustitudo o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados com se define posteriormente. Un grupo heteroarilo opcioalmente se puede fusionar a otro grupo heteroarilo, fusionado a un grupo arilo, fusionado a un grupo cicloalquilo, o fusionado a un grupo heterocicloalquilo.

"Grupo cicloalquilo" Como se usa aquí, el término "grupo cicloalquilo" significa un anillo saturado monocíclico o policíclico que comprende átomos de carbono e hidrogeno y que no tiene enlaces carbono-carbono múltiples. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, grupos cicloalquilo de (C2-C7), tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo, y terpenos cíclicos o bicíclicos saturados. Un grupo cicloalquilo puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados como se define posteriormente. Un grupo cicloalquilo puede ser opcionalmente fusionado a otro grupo cicloalquilo, fusionado a un grupo arilo, fusionado a un grupo heteroarilo, o fusionado a un grupo heterocicloalquilo.

"Grupo heterocicloalquilo" Como se usa aquí, el término "grupo heterocicloalquilo" significa un anillo monocíclico o policíclico que comprende átomos de carbono e hidrógeno y al menos un heteroatomo, preferiblemente, 1 a 3 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. Un grupo heterocicloalquilo puede ser fusionado a un grupo arilo o heteroarilo. Ejemplos de grupos heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, pirrolidinilo, pirrolidino, piperidinilo, piperidino, piperazinilo, piperazino, morfolinilo, morfolino, tiomorfolinilo, tiomorfolino, y piranilo. Un grupo heterocicloalquilo puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados como se define posteriormente. Un grupo heterocicloalquilo opcionalmente puede ser fusionado a un grupo cicloalquilo, fusionado a un grupo arilo, fusionado a grupo heteroarilo, o fusionado a otro grupo heterocicloalquilo. Por ejemplo, un grupo heterocicloalquilo puede ser fusionado a o sustituido con un grupo arilo o grupo heteroarilo, por ejemplo, pero sin limitarse a, ,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo y 1 ,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, tetrahidronaftiridinilo, fenilpiperidinilo y piperidinilpiridinilo. En una modalidad preferida, un grupo heterocicloalquilo es un anillo monocíclico o bicíclico, más preferiblemente, un anillo monocíclico, en donde el anillo comprende de 3 a 6 átomos de carbono y forman 1 a 3 heteroátomos, referidos aquí como heterocicloalquilo de (C3-C6). En otra modalidad preferida, un grupo heterocicloalquilo es fusionado a o sustituido con un grupo arilo o un grupo heteroarilo.

"Radical heterocíclico" o "anillo heterocíclico" Como se usa aquí, los términos "radical heterocíclico" o "anillo heterocíclico" significa un grupo heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo.

"Radical cíclico" Como se usa aquí, el término "radical cíclico" significa un grupo arilo, un grupo cicloalquilo, un grupo heterocicloalquilo o un grupo heteroarilo.

"Grupo alcoxi" Como se usa aquí, el término "grupo alcoxi" significa un grupo O-alquílo, en donde alquilo es como se define anteriormente. Un grupo alcoxi puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustítuyentes adecuados. Preferiblemente, la cadena alquilo de un grupo alquiloxi es de 1 a 6 átomos de carbono en longitud, referido aquí como "alcoxi de C C6)".

"Grupo ariloxi" Como se usa aqui, el término "grupo ariloxi" significa un grupo O-arilo, en donde arilo es como se define anteriormente. Un grupo ariloxi puede ser no sustituido o sustituido opcionalmente con uno o dos sustituyentes adecuados. Preferiblemente, el anillo arilo de un grupo ariloxi es un anillo monocíclico, en donde el anillo comprende 6 átomos de carbono, referido aquí como "ariloxi de (C6)".

"Alcoxicarbonilo" Como se usa aquí, el término grupo "alcoxicarbonilo" significa un grupo monovalente de la fórmula -C(=0)-alcoxi. Preferiblemente, la cadena hidrocarburo de un grupo alcoxicarbonilo es de 1 a 8 átomos de carbono en longitud, referido aquí como un grupo "alcoxicarbonilo inferior".

"Carbamoilo" Como se usa aquí, el término grupo "carbamoilo" significa el radical -C(=O)N(R )2, en donde R' se elige del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo y arilo.

"Carbonilo" Como se usa aquí, un grupo "carbonilo" es un grupo divalente fórmula C(=0).

'???" Como se usa aquí, un grupo "oxo" es un grupo de la fórmula "Acilo" El término "acilo" incluye un grupo R-C(=0)- donde R es un grupo orgánico. Un ejemplo es el grupo acetilo CH3-C(=0), referido aquí como "Ac". Un péptído o radical alifático es "acilado" cuando un grupo arilo, alquilo o alquilo sustituido como se define anteriormente se une a través de uno o más grupos carbonilo {-(C=0)-}. Un péptido es usualmente más acilado en la N-terminal.

"Amida" Una "amida" incluye compuestos que tienen un nitrógeno trivalente unido a un grupo carbonilo {-C(=0)-NH2}, tal como por ejemplo metilamida, etilamida, propilamida y lo similar.

"Imida" Una "imida" incluye compuestos que contienen un grupo imido (-C(=0)-NH-C(=0)-).

"Amina" Una "amina" incluye compuestos que contienen un grupo amino (-NH2).

"Nitrito" Un "nitrito" incluye compuestos que son derivados de carboxílico y contienen un grupo (-CN) unido a un grupo orgánico.

"Halógeno" Como se usa aquí, el término "halógeno" significa flúor, cloro, bromo o yodo. Correspondientemente, el significado de los términos "halo" y "Hal" incluye fluoro, cloro, bromo y yodo.

"Soporte sólido de péptido" Como se usa aquí, el término "soporte sólido de péptido" significa un polímero sintético para el uso en síntesis de péptido que porta grupos reactivos (libres de grupos hidroxilo o amino), generalmente a través de un enlazador, generalmente a través de un enlazador, que puede reaccionar con el grupo carboxilo de una funcionalidad de aminoácido N-protegida o un sustituto de fórmula I, con lo cual se enlaza de manera covalente al aminoácido o sustituto de fórmula I al polímero. Al final de la síntesis de péptido, el enlace entre el aminoácido N-terminal o sustituto y el soporte polimérico puede ser químicamente dividido. El péptido o compuesto que incluye uno o sustitutos de fórmula I después se lleva a solución y se puede aislar de la solución. Ejemplos de soportes sólidos de péptido incluyen, pero no se limitan a, resinas de poliamida y resinas de poliestireno con un enlazador adecuado para la síntesis de fase sólida. Ejemplos de resinas incluyen resinas Merrifield, resinas BHA, resinas MBHA. Resinas Wang, resinas oxima y lo similar. Enlazadores que se pueden emplear incluyen Fmoc-Rink, enlazador Sieber, enlazador Weinreb, y lo similar.

"Grupo protector de nitrógeno" Como se usa aquí, el término "grupo protector de nitrógeno" significa un grupo que reemplaza un hidrógeno de amino para el propósito de protección contra reacciones secundarias y degradación durante una secuencia de reacción, por ejemplo, durante síntesis de péptido. Síntesis de péptido de fase sólida involucra una serie de ciclos de reacción que comprende el acoplamiento del grupo carboxi de un aminoácido N-protegido o sustituto con el grupo amino del sustrato de péptido, seguido por la división químicamente del grupo protector de nitrógeno entonces después el sinton amino-protegido siguiente se puede acoplar. Grupos protectores de nitrógeno útiles en la invención incluyen grupos protectores de nitrógeno bien conocidos en la técnica en sistemas de péptido de fase sólidas, incluyendo, pero sin limitarse a, t-Boc (terc-butiloxicarbonilo), Fmoc (9-flourenilmetiloxicarbonilo), 2-clorobenciloxicarbonilo, aliloxicarbonilo (alloc), benciloxicarbonilo, 2-(4-bifenilil)propil-2-oxicarbonilo (Bpoc), 1 -adamantiloxicarbonilo, tritil (trifenilmetil), y tolueno sulfonilo.

"Sustituyente adecuado" Como se usa aquí, el término "sustituyente adecuado" significa un grupo que no nulifica la utilidad terapéutica o farmacéutica, sintética de los compuestos de la invención o intermedios útiles para su preparación.

Ejemplos de sustituyentes adecuados incluyen, pero no se limitan a: alquilo; alquenilo; alquinilo; arilo; heteroarilo; heterocicloalquilo; cicloalquilo; O-alquilo; O-alquenilo; O-alquinilo; O-arílo; CN; OH; oxo; halo; C(=O)OH; C(=O)halo; OC(=O)halo; CF3; N3; NO2; NH2; NH(alquilo); N(alquilo)2; NH(arilo); N(ahlo)2; C(=0)NH2; C(=0)NH(alquilo); C(=0)N(alquilo)2; C(=0)NH(arilo); C(=0)N(arilo)2; OC(=O)NH2; C(=O)NH(heteroarilo); C(=O)N(heteroarilo)2; NHOH; NOH(alquil); NOH(arilo); OC(=O)NH(alquílo); OC(=O)N(alquilo)2; OC(=O)NH(arilo); OC(=O)N(arilo)2; CHO; C(=0)(alquilo); C(=O)(arilo); C(=0) O(alquilo); C(=O)O(aril); OC(=O)(alquilo); OC(=O)(arilo); OC(=O)O(alquílo); OC(=O)O(arilo); S-alquilo; S-alquenilo; S- alquinilo; SC(=O)2-arilo, SC(=O)2-alquilo; SC(=O)2-alquenilo; SC(=O)2-alquínilo; y SC(=O)2-arilo. Una persona con experiencia en la técnica puede fácilmente elegir un sustituyente adecuado basado en la síntesis, estabilidad y actividad farmacológica del compuesto de la invención. Ei f r r r Como se usa aquí en la estructura química trazada, la "línea ondulada" anterior indica un enlace en el punto que un grupo químico de une a otro grupo químico. De esta manera, de acuerdo con esta definición, fórmula química "A" posterior: A en donde R' es un grupo de la fórmula "B", B representa el compuesto posterior: "Composición" El término "composición", como en composición farmacéutica, está destinado a incluir un producto que contiene el o los ingredientes activos, y el o los ingredientes inertes que hacen el portador, así como cualquier producto que resulta, directamente o indirectamente de la combinación, formación de complejo, o agregación de cualquiera de dos o más de los ingredientes, o de la disociación de uno o más de los ingredientes, o de otros tipos de reacciones de interacciones de uno o más de los ingredientes. En consecuencia, las composiciones farmacéuticas de la presente invención incluyen cualquier composición elaborada al mezclar un compuesto de la presente invención y un portador farmacéuticamente aceptable.

"ECsn" El término "EC5o" esta destinado a incluir la concentración molar de un agonista que produce 50% de la respuesta máxima posible para este agonista. A manera de ejemplo, un compuesto el cual, en una concentración de 72 nM, produce 50% de la respuesta máxima posible para este compuesto como se determina en un ensayo cGMP, tiene un EC50 de 72 nM. A menos que se especifique de otra manera, la concentración molar asociada con una determinación de EC50 es en nanomoles (nM).

"K¡ (nM)" El término "Ki (nM)" esta destinado a incluir la afinidad de unión del receptor de equilibrio que representa la concentración molar de un compuesto que compite que se une a la mitad de los sitios de unión de un receptor en equilibrio en la ausencia de un competidor. En general, el Ki es inversamente correlacionado con la afinidad del compuesto para el receptor, tal que si el Ki es bajo, la afinidad es alta. Ki se puede determinar usando la ecuación de Cheng and Prusoff (Cheng Y., Prusoff W. H., Biochem. Pharmacol. 22:3099-3108, 1973): EC50 Ki = [ligando] donde "ligando" es la concentración de ligando, que puede ser un radioligando, y Kd es una medida inversa de afinidad del receptor que produce 50% de ocupación del receptor. A menos que se especifique de otra manera, la concentración molar asociada con una determinación Ki es nM.

"Péptido" El término "péptido" como se usa a través de la especificación y reivindicaciones están dirigidas a incluir cualquier estructura comprendida de dos o más aminoácidos, incluyendo modificaciones químicas y derivados de aminoácidos. Los aminoácidos que forman todo o una parte del péptido pueden ser aminoácidos de origen natural, estereoisómeros y modificaciones de dichos aminoácidos, aminoácidos de no proteína, aminoácidos modificados post-traslacionalmente, aminoácidos modificados enzimáticamente, y lo similar. El término "péptido" también incluye dímeros o multímeros de péptidos. Un péptido "fabricado" incluye un péptido producido por síntesis química, tecnología de ADN recombinante, fragmentación bioquímica o enzimática de moléculas grandes, combinaciones de lo anterior o, en general, elaborados por cualquier otro método.

"Radical de cadena lateral de aminoácido" El término "radical de cadena lateral de aminoácido" usado en esta invención, incluyendo como se usa en la especificación y reivindicaciones, incluye cualquier cadena lateral de cualquier aminoácido, como el término "aminoácido" se define aquí. De esta manera esto incluye el radical de cadena lateral presente en aminoácidos de origen natural. Además incluye radicales de cadena lateral en aminoácidos de origen natural modificados, tales como aminoácidos glicosilados. Además incluye radicales de cadena lateral en estereoisómeros y modificaciones de aminoácidos de proteína de origen natural, aminoácidos de no proteína, aminoácidos modificados post-traslacionalmente, aminoácidos sintetizados enzimáticamente, aminoácidos derivados, constructos o estructuras diseñadas para imitar aminoácidos, y lo similar. Por ejemplo, el radical de cadena lateral de cualquier aminoácido descrito aquí se incluye dentro de la definición. Un "derivado de un radical de cadena lateral de aminoácido" como se define más adelante se incluye dentro de la definición de un radical de cadena lateral de aminoácido.

"Derivado de un radical de cadena lateral de aminoácido" Un "derivado de un radical de cadena lateral de aminoácido" es una modificación a, o variación de cualquier radical de cadena lateral de aminoácido, incluyendo una modificación a, o variación en un radical de cadena lateral de aminoácido de origen natural o no natural, en donde la modificación o variación incluye: (a) añadir uno o más átomos de carbono saturados o insaturados a una cadena alquilo, arilo o aralquilo existente; (b) sustituir un carbono en la cadena lateral con otro átomo, preferiblemente oxigeno o nitrógeno; (c) añadir un grupo terminal a un átomo de carbono de la cadena lateral, incluyendo metilo (-CH3), metoxi (-OCH3), nitro (-N02), hidroxilo (-OH), o ciano (-C=N); (d) para radicales de cadena lateral incluyendo un grupo hidroxi, tio o amino, añadir un grupo protector hidroxi, tio o amino; o (e) para radicales de cadena lateral incluyendo una estructura de anillo, añadir uno o sustituyentes de anillo, incluyendo grupos hidroxilo, halógeno, alquilo o arilo unidos directamente o a través de un enlace éter. Para grupos amino, grupos protectores amino adecuados incluyen, pero no se limitan a, Z, Fmoc, Boc, Pdf, Pmc y lo similar.

"Aminoácidos" Los "aminoácidos" usados en las modalidades de la presente invención, y el término como se usa en la especificación y reivindicaciones, incluyen los aminoácidos de proteína de origen natural conocidos, los cuales son referidos por su abreviatura de tres letras común y abreviatura de una letra. Véase generalmente Synthetic Peptides: A User's Guide, G. A. Grant, editor, W.H. Freeman & Co., New York (1992), las enseñanzas de las cuales se incorporan aquí para referencia, incluyendo el texto y cuadro expuestos en las páginas 1 1 hasta 24. Un "aminoácido" incluye a-aminoácidos convencionales e incluye además ß-aminoácidos y aminoácidos a,a-disustituidos en donde al menos una cadena lateral es un radical de cadena lateral de aminoácido como se define aquí. Un "aminoácido" además incluye a-aminoácidos N-alquilo, en donde el grupo amino N-terminal tiene un sustituyente alquilo lineal o ramificado de Ci a C6. Se puede observar que el término "aminoácido" incluye estereoisómeros y modificaciones de aminoácidos de proteina de origen natural, aminoácidos de no proteína, aminoácidos modificados post-traslacionalmente, aminoácidos sintetizados enzimáticamente, aminoácidos derivados, constructos o estructuras diseñadas para imitar aminoácidos, y lo similar. Aminoácidos no usuales y modificados se describen generalmente en Synthetic Peptides: A User's Guide, citado anteriormente; Hruby V. J., Al-obeidi F., Kazmierski W., Biochem. J. 268:249-262 (1990); y Toniolo C, Int. J. Peptide Protein Res. 35:287-300 (1990); las enseñanzas de todas las cuales se incorporan aquí para referencia. Además, las siguientes abreviaturas, incluyendo aminoácidos y sus grupos de protección y modificación, tienen los significados dados: Abu - ácido gamma-amino butírico 12-Ado - ácido 12-amino dodecanóico Aib - ácido alfa-aminoisobutírico 6-Ahx - ácido 6-amino hexanóico Ame - ácido 4-(aminometil)-ciclohexano carboxílico 8-Aoc - ácido 8-amino octanóico Bip bifenilalanina Boc t-butoxicarbonilo Bzl bencilo Bz benzoilo Dab ácido diaminobutirico Dap ácido diaminopropiónico Dip 3,3-difenilalanina Disc ácido ,3-dihidro-2H-isoindolcarboxílico Et etilo Fmoc fluorenilmetoxicarbonilo Hept heptanoilo (CH3-(CH2)5-C(=0)-) Hex hexanoilo (CH3-(CH2)4-C(=0)-) HArg homoarginina HCys homocisteína HLys homolisina HPhe homofenilalanina HSer homoserina Me metilo Met(O) sulíóxido de metionina Met(02) sulfona de metionina Nva norvalina Pgl fenilglicina Pr propilo Pr-i isopropilo Sar sarcosina Tle terc-butilalanina Z benciloxicarbonilo En la lista de compuestos de acuerdo con la presente invención, residuos de aminoácido convencionales tienen su significado convencional como se proporciona en el capítulo 2400 de Manual of Patent Examining Procedure, 8a Ed. De esta manera, "Nle" es norleucina, "Asp" es ácido aspártico; "His" es histidina; "Arg" es arginina; "Trp" es triptofan; "Lys" es lisina; "Gly" es glicina; "Pro" es prolina; "Tyr" es tirosina, "Ser" es serina y así sucesivamente. Todos los residuos están en la configuración de L-isómero a menos que el D-isómero se especifique, como en "D-Ala" para D-alanina. Un aminoácido sencillo, incluyendo estereosiómeros y modificaciones de aminoácidos de proteína de origen natural, aminoácidos de no proteína, aminoácidos modificados post-traslacionalmente, aminoácidos sintetizados enzimáticamente, aminoácidos derivados, un aminoácido a,a-disustituido derivado de cualquiera de lo anterior (es decir, un aminoácido a,a-disustituido en donde al menos una cadena lateral es la misma que la del residuo del cual esta se deriva), un ß-aminoácido derivado de cualquiera de los anteriores (es decir, un ß-aminoácido que es diferente de aquel para la presencia de un ß-carbono es de otra manera el mismo que el residuo del cual este se deriva) y lo similar, incluyendo todo lo anterior, es algunas veces referido aquí como un "residuo".

"Aminoácido a,a-disustituido" Un "aminoácido a, a-disustituido" incluye cualquier a-aminoácido que tiene un sustituyente adicional en la posición a, cuyo sustituyente puede ser el mismo o diferente del radical de cadena lateral del a-aminoácido. Sustituyentes adecuados, además del radical de cadena lateral del a-aminoácido, incluyen alquilo lineal o ramificado de C-i a C6. Aib es un ejemplo de un aminoácido a, a-disustituido. Aunque los aminoácidos a, -disustituidos se pueden referir para usar referencias L- y D-isoméricas convencionales, se debe entender que dichas referencias son para conveniencia, y que donde los sustituyentes en la posición a son diferentes, dicho aminoácido puede ser de manera intercambiable referido como un aminoácido a, -disustituido derivado del L- o D-isómero, como se apropiado, de un residuo con el radical de cadena lateral de aminoácido designado. De esta manera el ácido (S)-2-amino-2-metil-hexanoico se puede referir como un aminoácido a, a-disustituido derivado de L-Nle o como un aminoácido , -disustituido derivado de D-Ala. Similarmente, Aib puede ser referido como un aminoácido a,a-disustituido derivado de Ala. Cuando quiera que un aminoácido a, a-disustituido se proporciona, se debe entender como que incluye todas sus configuraciones (R) y (S).

"Aminoácido N-sustituido" Un "aminoácido N-sustituido" incluye cualquier aminoácido en donde un radical de cadena lateral de aminoácido se enlaza de manera covalente al grupo amino de cadena principal, opcionalmente donde no existen sustituyentes diferentes de H en la posición a-carbono. Sarcosina es un ejemplo de un aminoácido N-sustituido. A manera de ejemplo, la sarcosina se puede referir como un aminoácido N-sustituido derivado de Ala, en que el radical de cadena lateral de aminoácido de sarcosina y Ala es el mismo, metilo.

"Grupo de extremo bloqueado C-terminal" El término "grupo de extremo bloqueado C-terminal" incluye cualquier grupo terminal unido a través del átomo de carbono de anillo terminal o, si se provee, grupo carboxilo terminal, de la C-terminal de un compuesto. El átomo de carbono de anillo terminal, si se provee, grupo carboxilo terminal, puede formar una parte de un residuo, o puede formar una parte de un sustituto de aminoácido. En un aspecto preferido, el grupo de extremo bloqueado C-terminal forma una parte de un sustituto de aminoácido que está en la posición C-terminal del compuesto. El grupo de extremo bloqueado C-terminal incluye, pero no se limita a, -(CH2)n-OH, -(CH2)n-C(=0)-OH, -(CH2)m-OH, -(CH2)n-C(=0)-N(v1)(v2), -(CH2)n-C(=0)-(CH2)m-N(Vl)(v2), -(CH2)n-0-(CH2)m-CH3, -(CH2)n-C(=0)-NH-(CH2)m-CH3, -(CH2)n-C(=0)-NH-(CH2)m-N(Vl)(v2). -(CH2)n.C(=0)-N-((CH2)m-N(v1 )(v2))2, -(CH2)n-C(=0)-NH-CH(- C(=0)-OH)-(Ch2)m-N(v1 )(v2), -C(=0)-NH-(CH2)m-NH-C(=0)-CH(N(vl )(v2))((CH2)m-N(v1 )(v2)), o -(CH2)n-C(=0)-NH-CH(-C(=0)-NH2)-(CH2)m-N(vi)(v2), incluyendo todas las configuraciones (R) o (S) de lo anterior, donde Vi y v2 son cada uno independientemente H, una cadena alquilo lineal o ramificada de d a C17, m es 0 a 17 y n es 0 a 2; o cualquier alifático amino omega, arilo o aralquilo terminal, incluyendo grupos tales como metilo, dimetilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, alilo, ciclopropano metilo, hexanoilo, heptanoilo, acetilo, propionilo, butanoilo, fenilacetilo, ciclohexilacetilo, naftilacetilo, cinamoilo, fenilo, bencilo, benzoilo, 12-Ado, 7'-amino heptanoilo, 6-Ahx, Ame u 8-Aoc, o cualquiera a-aminoácido, ß-aminoácido o aminoácido a, a-disustituido natural o no natural sencillo, incluyendo todas las configuraciones (R) y (S) de lo anterior, opcionalmente en combinación con cualquiera de los grupos de extremo bloqueado de no aminoácido anterior. En lo anterior, se debe entender que, por ejemplo, -C(=0)-NH-(CH2)m-NH-C(=0)-CH(N(v1 )(v2))((CH2)m-N(v1)(v2)) es: "Grupo de extremo bloqueado N-terminal" El término "grupo de extremo bloqueado N-terminal" incluye cualquier grupo terminal unido a través de la amina terminal de la N-terminal de un compuesto. La amina terminal puede formar una parte de un residuo, o puede formar una parte de un sustituto de aminoácido. En un aspecto preferido, el grupo de extremo bloqueado N-terminal forma una parte de un sustituto de aminoácido el cual está en la posición N-terminal del compuesto. El grupo de extremo bloqueado N-terminal incluye, pero no se limita a, cualquier alifático amino omega, grupo acilo o arilo o aralquilo terminal incluyendo grupos tales como metilo, dimetilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, alilo, ciclopropano metilo, hexanoilo, heptanoilo, acetilo, propionilo, butanoilo, fenilacetilo, ciclohexilacetilo, naftilacetilo, cinamoilo, fenilo, bencilo, benzoilo, 2-Ado, 7'-amino heptanoilo, 6-Ahx, Ame u 8-Aoc, o de manera alternativa un grupo de extremo bloqueado N-terminal es -(CH2)m-NH(v3), -(CH2)m-CH3, -C(=0)-(CH2)m-CH3, -C(=0)-(CH2)m-NH(v3), -C(=0)-(CH2)m-C(=0)-OH, -C(=0)-(CH2)m-C(=0)-(v4), -(CH2)m-C(=0)-OH, -(CH2)m-C(=0)-(v4), -C(=0)-(CH2)m-0(v3), -(CH2)m-0(v3), -C(=0)-(CH2)m-S(v3) o -(CH2)m-S(v3), donde v3 es H o una cadena alquilo lineal o ramificada de Ci a Ci 7 , y v4 es una cadena alquilo lineal o ramificada de Ci a C17 y m es 0 a 17. El protocolo de denominación química y diagramas estructurales usados aquí emplean y dependen de los aspectos de denominación química utilizados por el programa ChemDraw (disponible de Cambridgesoft Corp., Cambridge, Mass). En particular, ciertos nombres de compuestos se derivan de las estructuras que usan el programa Autonom como se utiliza por Chemdraw o base ISIS (MDL Corp.). En general, los diagramas estructurales no representan átomos de hidrógeno asociados con átomos de carbono diferentes en grupos terminales y otras circunstancias especiales.

Ciertos compuestos se representan aquí con el sustituto identificado por los diagramas estructurales y los residuos de aminoácido identificados por una abreviatura de tres letras. A menos que se especifique de otra manera, se entiende que la unión entre el sustituto y residuo, o entre el residuo y sustituto, o entre un sustituto y residuos o sus lados N-terminal y C-terminal, es un enlace de péptido convencional, -C(=0)-NH- o, en el caso donde el enlace de péptido es para el nitrógeno de anillo en la N-terminal del sustituto, -C(=O)-N. En general, en la representación de dichos enlaces los átomos del sustituto de aminoácido se representan (por ejemplo, -C(=O)- o -N), pero átomos del residuo de aminoácido no se representan. 2. Pureza y aislamiento isomérico Los sustitutos de la invención puede contener uno o más centros quirales y/o enlaces dobles y, por lo tanto, existen como estereoisomeros, tales como isómeros de doble enlace (es decir, isómeros geométricos), enantiómeros, o diastereómeros. De acuerdo con la invención, las estructuras químicas representadas aquí, y por lo tanto los compuestos de la invención, incluyen la forma racémica de compuestos de la invención así como todos los enantiómeros y estereoisomeros, esto es, ambas formas estereoméricamente puras (por ejemplo, geométricamente pura, enantiomérícamente pura, o diastereoméricamente pura) y mezclas enantíoméricas y estereoisoméricas. Un sustituto de la invención se considera óptimamente activo o enantiomérícamente puro (es decir, sustancíalmente la forma R o sustancialmente la forma S) con respecto al centro quiral cuando el compuesto es aproximadamente de 90% ee (exceso enantiomérico) o mayor, preferiblemente igual o mayor de 95% ee con respecto a un centro quiral particular. Un compuesto de la invención se considera por estar en forma enriquecida enantioméricamente cuando el compuesto tiene un exceso enantiomérico de más de aproximadamente 80% ee, preferiblemente mayor de aproximadamente 85% ee. Como se usa aquí, una mezcla racémica significa aproximadamente 50% de un enantiomero y aproximadamente 50% de su enantiomero correspondiente en relación con todos los centro quirales en la molécula. De esta manera, la invención incluye todas las mezclas enantioméricamente puras, enriquecida enantioméricamente y mezclas racémicas de compuestos de la invención. De esta manera en un aspecto, el sustituto tiene la estructura general: donde el asterisco indica cualquier conformación estereoq posible. De esta manera incluye las siguientes formas enantioméricas: Mezclas enantioméricas y esteroisoméricas se pueden resolver en sus enantiomeros o estereoisomeros de componente mediante métodos bien conocidos en la técnica, tales como cromatografía de gas fase quiral, cromatografía líquida de alto desempeño de fase quiral, cristalización de compuesto y un complejo de sal quiral, o cristalización del compuesto en un solvente quiral. Enantioméros y estereoisomeros también se pueden obtener de intermedios, reactivos y catalizadores estereoméricamente o enantioméricamente puros por métodos sintéticos asimétricos bien conocidos. 3. Compuestos de la invención La invención provee sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I y compuestos lineares o cíclicos que comprenden sustitutos de aminoácido anillo-restringido de fórmula I I o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2l alquil-OR8, alquil-C(=O)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R y R2 no sean ambos H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)pOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2 o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR11, (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6b es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no sean (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=O)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=0)(CH2)m(NR8)2, alquilo, aralquilo o arilo; cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo o alquilo; R1 1 es un soporte sólido de péptido; R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1 . Sustitutos de aminoácido anillo-restringido de la fórmula I se pueden emplear para sustitución de uno o más residuos de aminoácido de compuestos polipéptido elaborados de una pluralidad de residuos de aminoácido. Sustitutos de aminoácido anillo-restringido de la fórmula I es preferiblemente tal que se pueden elaborar con una N-terminal protegida de amino convencional, usando un grupo protector tal como Fmoc, y una C-terminal de carboxi reactivo, y así se pueden emplear en metodologías de síntesis de péptido convencional. Se entiende que sí el sustituto de aminoácido de fórmula I es para ser acoplado en la posición C-terminal del compuesto, otra diferente de la terminal carboxi se puede emplear en dicho sustituto. De esta manera en una modalidad preferida la invención se proveen sustitutos de aminoácido anillo-restringido para incorporación, a manera de metodologías de síntesis de péptido, modificados como sea apropiado, en compuestos de polipéptido, cuyos compuestos comprenden una pluralidad de residuos de aminoácido. Excepto donde R1 y R2 son H, es apreciado que cada sustituto de la invención puede ser en una de cuatro formas enantioméricas diferentes. De esta manera, a manera de ejemplo, donde e grupo R1 o R2 es un radical de cadena lateral de aminoácido de Arg, el compuesto se puede mostrar genéricamente como: donde cada asterisco representa un centro quiral que puede estar en cualquier configuración estereoquímica. De esta manera, se debe entender que cada uno de lo siguiente es posible, contemplado e intentado: De manera similar, con respecto a cada sustituto, para uso en la síntesis de compuestos que usan metodologías sintéticas de péptido convencionales, se entiende que si un sustituto es diferente en la posición N- terminal que la posición R3 incluirá un grupo protector de nitrógeno diferente de H, y de esta manera será de la siguiente estructura general: Donde PEG es un grupo protector de nitrógeno, tal como, a manera de ejemplo y no limitación, un grupo de fórmula: donde R es tere-butilo, alilo o un grupo de fórmula: De esta manera se puede observar, en el ejemplo donde el grupo R1 o R2 es un radical de cadena lateral de aminoácido de Arg y R3 es el Fmoc de grupo protector de nitrógeno, que cada uno de lo siguiente es posible, contemplado e intentado: En un ejemplo específico anterior, también es posible y contemplado que un grupo protector de nitrógeno, tal como por ejemplo Pbf, se puede emplear en el grupo guanidino. También es posible que sustitutos de análogos son posibles y contemplados empleando otro grupo como el grupo protector de nitrógeno u otro radical de cadena lateral de aminoácido o derivado de un radical de cadena lateral de aminoácido como el grupo R o R2, o de manera alternativa, donde al menos uno de los mismos es alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=O)OR8, alquil-S-R8, alquil-c(=0)N(R8)2 o un grupo de una fórmula: donde R8 es H, arilo, o alquilo y R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno. Si se emplea un sustituto en la síntesis de compuestos que usan metodologías sintéticas de péptido convencionales y está en la posición C-termínal, entonces el sustituto puede ser un compuesto que se une a un soporte sólido de péptido, tal como una resina. En este ejemplo el sustituto puede ser de la siguiente estructura general: donde el óvalo representa resina y un enlazador u otro soporte sólido de péptido. Aquí también el grupo R1 y R2 puede ser cualquier radical de cadena lateral de aminoácido o derivado de un radical de cadena lateral de aminoácido, o de manera alternativa, al menos uno de los mismos puede se alquilo, arilo, alquiladlo, alquil-N(R8)2, alquil-OR9, alquil-C(=O)OR8, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2 o un grupo de una fórmula: donde R8 es H, arilo o alquilo y R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno. En un aspecto, la invención de esta manera provee sustitutos de la siguiente estructura general: donde R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=O)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)qN(R8)2; R5 es H o alquilo; R8 es H, arilo o alquilo; R1 es un soporte sólido de péptido; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y cualquier grupo arilo se puede sustituir independientemente con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo, haloalquilo, cicloalquilo, alcoxi, alquiltio, halo, nitro, acilo, ciano, amino, amino monosustituido, amino disustituido, hidroxi, carboxi o alcoxi-carbonilo.

De esta manera en un aspecto se provee sustitutos con un grupo R1 que es un radical de cadena lateral de aminoácido de uno de los siguientes diecinueve residuos de aminoácido codificados naturalmente (omitiendo Pro), incluyendo lo siguiente: En cada uno de lo anterior, más que H en la posición R3 puede ser cualquier grupo protector de nitrógeno; más que -C(=O)OH y la posición R4 puede ser alquilo, (CH2)qC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o donde R8 es H, arilo, o alquilo, R11 es un soporte sólido de péptido, m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6, q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6 y p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10, más que H la posición R5 puede ser alquilo; y más que H la posición R7 puede ser C(=0)alquilo o C(=O)(CH2)m(NR8)2. De manera similar, más que uno de los radicales de cadena lateral de aminoácido anterior, R1 puede ser alquilo, arilo, alquilante, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: donde R8 es H, arilo, o alquilo y R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno. 4. Uso de compuestos de la invención De acuerdo con un aspecto de la presente invención se provee un método para elaborar un compuesto que incluye un sustituto, cuyo compuesto se basa en un polipeptido de origen conocido que se une a un objetivo de interés. El polipéptido de origen puede ser un péptido, un polipéptido o una proteína.

En un aspecto de la presente invención, se provee un método para identificar una estructura secundaria de un polipéptido de origen cuya estructura se involucra en o responsable de la unión a un objetivo de interés. Dicho método incluye (a) proveer un polipéptido de origen conocido que se une a un objetivo de interés con una estructura primaria conocida, tal como la estructura primaria de residuos de aminoácido; (b) construir una pluralidad de compuestos en donde un sustituto se sustituye por un residuo de aminoácido en un polipéptido de origen, el sustituto sustituido preferiblemente que tiene un grupo R o R2 que es lo mismo que el radical de cadena lateral de aminoácido del residuo de aminoácido para el cual este se sustituye, o el cual es un derivado del radical de cadena lateral de aminoácido del residuo de aminoácido para el cual se sustituye; (c) clasificación de la pluralidad de compuestos que incluyen un sustituto; y (d) selección del compuesto que exhibe la unión al objetivo de interés, con lo cual dicho compuesto comprende la estructura secundaria que se une al objetivo del interés. En un aspecto relacionado de la presente invención, se provee un método para identificar una estructura secundaria de un polipéptido de origen cuya estructura secundaria se involucra o es responsable para unir a un objetivo de interés, el método incluyendo la etapa de construir una pluralidad de compuestos en donde un sustituto se sustituye por un residuo de aminoácido en el polipéptido de origen, el sustituto sustituido preferiblemente que tiene un grupo R1 y R2 limitado a H en ambas posiciones o metilo en una posición y H en la posición restante. En esta manera el efecto del radical de cadena lateral de aminoácido en eficiencia o cualquier otro parámetro averiguable se puede determina fácilmente. En una modalidad, el método de la invención se provee para el análisis sistemático de un polipéptido de origen para determinar al menos una secuencia activa o dominio en el polipéptido de origen que se involucra en al interacción, tal como una unión, del polipéptido de origen con una sustancia objetivo. Como se usa aquí, "polipéptido de origen" se refiere a cualquier secuencia de residuos de aminoácido que exhibe interacción, tal como unión, a una sustancia objetivo, y la cual puede de esta manera constituir un péptido, polipéptido o una proteína. El polipéptido de origen es generalmente un polipéptido como se define aquí, con de aproximadamente 3 a aproximadamente 100 residuos de aminoácido, pero el término polipéptido de origen también puede incluir constructos grandes, generalmente considerados en la técnica por ser polipéptidos o proteínas grandes. Para emplear el método de la invención, la estructura primaria, que es por decir la secuencia, de al menos parte, preferiblemente de toda, del polipéptido de origen debe ser disponible. Sin embargo, no es necesario tener cualquier información que concierne la estructura secundaria o terciaria del polipéptido de origen a fin de practicar el método de la invención. El polipéptido de origen puede ser cualquier secuencia que exhibe la unión a un receptor encontrado en, por ejemplo, células, tejidos, órganos, u otros materiales biológicos. Ejemplos de polipéptidos de origen incluyen, sin limitación, péptidos activos biológicamente, hormonas, neurotransmisores, enzimas, anticuerpos y lo similar. Dichos polipéptidos de origen pueden transmitir señales, directamente o indirectamente, como un resultado de la unión a un receptor, y de esta manera un polipéptido de origen puede ser un agonista, un antagonista, o un agonista-antagonista mezclado. Ejemplos de polipéptidos de origen adecuados de la invención incluyen péptidos específicos del receptor melanocortina, proteína activadora de plasminogen de tejido tipo urocinasa, péptidos relacionados con beta-proteina amiloide, péptidos relacionados con enfermedad por prion, péptidos de vasopresina, péptidos de oxitocina, péptidos natriuréticos, péptidos de angiotesina, péptido relacionado con gen calcitonina, péptidos de opioide, hormona de crecimiento humano, ligandos del receptor prolactina humana, varios interferones tales como alfa-interferón, factor de crecimiento epidérmico, factor de necrosis tumoral, y varios péptidos hipotensivos, péptidos fibrinolíticos, péptidos quimitácticos, péptidos de promotor de crecimiento, péptidos y polipéptidos de adhesión celular, mitogenes, inmunomoduladores y lo similar. En general, a fin de emplear la invención en al menos un ensayo o prueba para determinar un parámetro de un constructo de la invención con respecto a un receptor de interés. En un aspecto, la unión de los constructos de la invención a un receptor de interés se emplea, y preferiblemente con la determinación paralela de unión del polipéptido de origen al receptor de interés. Sin embargo, otros parámetros que unen se pueden emplear, incluyendo varios sistemas de ensayo funcional, sistemas de ensayo de eficacia, y lo similar. Dichos parámetros se pueden determinar con respecto a cualquier unidad relevante de medida, incluyendo la expresión de uno o más compuestos en un sistema de ensayo funcional, valores de Ki, valores EC50> y lo similar. De esta manera en una modalidad preferida de la invención, una inhibición competitiva de ensayo similar se emplea, con lo cual la unión o actividad funcional de un constructo de la invención puede ser directamente comparada con el polipéptido de origen, y unión relativa o actividad funcional de esta manera determinada directamente. En otras modalidades se pueden emplear otros ensayos o pruebas. Estos ensayos pueden, pero no necesitan, ser ensayos funcionales. Ejemplos de ensayos incluyen cualquier variedad de ensayos de inhibición competitiva, ensayos de unión directa, ensayos funcionales, y lo similar. También es posible y contemplado emplear ensayos para determinar, por ejemplo, si un constructo de la invención es un agonista, antagonista o agonista-antagonista mezclado, y además donde la unión y función se puede determinar separadamente, para determinar independientemente la afinidad de receptor así como actividad funcional. Ejemplos de dichos ensayos y pruebas son bien conocidos y bien documentados en la técnica, y en general uno o más de dichos ensayos o pruebas son conocidos por cualquier polipéptido de origen. En un método de la invención, el polipéptido de origen se emplea como el templado para la generación de uno o más, y preferiblemente una serie de compuestos cada uno incluyendo al menos un sustituto sustituido por al menos un residuo de aminoácido del polipéptido de origen. En un aspecto, los compuestos con al menos un sustituto puede omitir uno o más residuos de aminoácido encontrados en el polipéptido de origen. En otro aspecto, los compuestos con al menos un sustituto que contiene los mismos residuos de aminoácido, o sus homólogos, como se encuentra en el polipéptido de origen, con uno o más residuos de aminoácido sustituidos con un sustituto. En un aspecto el sustituto sustituido preferiblemente tiene un grupo R1 o R2 que es el mismo como el radical de cadena lateral de aminoácido de un residuo de aminoácido para el cual se sustituye, o el cual es un derivado del radical de cadena lateral de aminoácido del residuo de aminoácido para el cual se sustituye. En otro aspecto, el sustituto sustituido preferiblemente tiene un grupo R1 o R2 limitado a H en ambas posiciones o metilo en una posición y H en la posición restante. Se asume, por ejemplo, un polipéptido de origen de seis residuos de aminoácido que se une a un receptor específico y conocido. El polipéptido de origen se puede describir como: X1-X -X3-X4-X5-X6 Un sustituto de esta invención referido como "S" se emplea para sintetizar un compuesto descrito como: X -X2-X3-S-X5-X6 En un aspecto del compuesto X1-X2-X3-S-X5-X6, donde el residuo de aminoácido X4 se reemplaza por S, S tiene un grupo R o R2 que es el mismo como el radical de cadena lateral de aminoácido de X4, o el cual es un derivado del radical de cadena lateral de aminoácido de X4. En otro aspecto, donde X4 es diferente de Gly o Ala, S tiene un H de grupo R1 y R2 en ambas posiciones o metilo en una posición y H en la posición restante. La unión del compuesto X1-X2-X3-S-X5-X6, o alguna otra medida de eficacia, se determina y se compara con el polipéptido de origen X1-X2-X3-X4-X5-X6. Es posible y se contempla que una evaluación sistemática se puede realizar. Se asume que un péptido de quince residuos de aminoácido se une a un receptor conocido especificado. El péptido se puede describir como: NH2-X -X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X 1-X 2-X13-X 4-X15-COOH En este polipéptido de origen, X puede ser cualquier residuo, cuyo residuo se puede repetir múltiples veces en cualquier orden o secuencia. De esta manera el residuo en posición X1 puede ser diferente de o el mismo como el residuo en la posición X2, el cual puede ser diferente de o el mismo como los residuos en la posición X1 o X3, y así sucesivamente. Una serie de compuestos se elaboran en donde un sustituto "S" se sustituye por un residuo de aminoácido en una manera secuencial o escalonada. De esta manera, por ejemplo, puede resultar lo siguiente: S-X2-X3-X -X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X 2-X13-X 4-X15-COOH NH2-X1-S-X3-X -X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X1 -X13-X14-X15-COOH NH2-X1-X2-S-X -X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X 2-X13-X14-X15-COOH NH2-X1-X2-X3-S-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X 1-X12-X 3-X14-X 5-COOH NH2-X -X2-X3-X4-S-X6-X7-X8-X9-X 0-X 1-X12-X13-X14-X15-COOH NH2-X -X2-X3-X4-X5-S-X7-X8-X9-X 0-X1 1-X12-X13-X14-X15-COOH NH2-X1-X2-X3-X -X5-X6-S-X8-X9-X10-X 1-X 2-X13-X14-X 5-COOH NH2-X1-X2-X3-X -X -X6-X7-S-X9-X10-X11-X 2-X13-X1 -X 5-COOH NH2-X1-X2-X3-X -X5-X6-X7-X8-S-X10-X1 -X12-X 3-X1 -X15-COOH NH2-X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-S-X 1-X12-X 3-X1 -X15-COOH N H2-X1 -X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-S-X12-X 3-X1 -X15-COOH NH2-X -X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-S-X 3-X1 -X 5-COOH NH2-X -X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X 0-X1 -X12-S-X1 -X 5-COOH NH2-X -X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X 2-X13-S-X 5-COOH ??2-??-?2-?3-?4-?5-?6-?7-?8-?9-?10-? 1-? 2-?13-? -5 En lo anterior, el sustituto S tiene, para cada compuesto, un grupo R1 o R2 que es el mismo como el radical de cadena lateral de aminoácido del residuo de aminoácido para el cual se sustituye, o el cual es un derivado del radical de cadena lateral de aminoácido del residuo de aminoácido para el cual se sustituye. De manera similar, para cada posición todas las formas enantioméricas se pueden emplear y evaluar. De manera adicional, para cada posición un método "knock-out" se puede evaluar ene. cual X es diferente de Gly o Ala, S tiene un H de grupo R1 o R2 en ambas posiciones o metilo en una posición y H en la posición restante. También es posible y se contempla sustituir uno o más residuos de aminoácido en un polipéptido de origen con otro residuo de aminoácido, aunque también se sustituye uno o más residuos de aminoácido en un polipéptido de origen con un sustituto de la invención. En un aspecto un D-isómero se sustituye por un L-isómero en un polipéptido de origen natural. La secuencia de aminoácido correspondiente que comprende al menos un sustituto de fórmula I puede ser idéntico a un polipéptido de origen conocido, o puede ser homólogo a esto, tal como una secuencia de aminoácido correspondiente que es al menos 60% homólogo, o más preferiblemente es al menos 80% homólogo. Para estos propósitos, la homología se determina mediante la referencia para identificar la secuencia de aminoácido conocida para el compuesto pero para la sustitución mediante por la adición de uno o más sustitutos de fórmula I. En otro aspecto, la invención provee sustitutos de aminoácido de anillo restringido de fórmula II útil para sintetizar un compuesto que se modela en un péptido conocido que se une a un receptor para un péptido natriurético, pero el cual incluye uno o más sustitutos de aminoácido, dichos sustitutos son sustituidos por uno o más residuos de aminoácido contenidos en el péptido conocido, o además de la secuencia que comprende el péptido conocido. El péptido conocido puede ser cualquier péptido natriurético conocido en la técnica, incluyendo pero sin limitarse a aquellos descritos en cualquier publicación, solicitud o referencia citada aquí, incluyendo pero sin limitarse a los péptidos natriuréticos descritos en las patentes de E.U.A. 4,496,544; 4,609,725; 4,656,158; 4,673,732; 4,716,147; 4,757,048; 4,764,504; 4,804,650; 4,816,443; 4,824,937; 4,861 ,755; 4,904,763; 4,935,492; 4,952,561 ; 5,047,397; 5,057,495; 5,057,603; 5,091 ,366; 5,095,004; 5,106,834; 5,1 14,923; 5,159,061 ; 5,204,328; 5,212,286; 5,352,587; 5,376,635; 5,418,219; 5,665,704; 5,846,932; 5,583,108; 5,965,533; 6,028,055; 6,083,982; 6, 124,430; 6,150,402; 6,407,21 1 ; 6,525,022; 6,586,396 o 6,818,619; en las publicaciones de solicitud de patente 2004/0002458; 2004/0063630; 2004/0077537; 2005/01 13286; 2005/0176641 ; o 2006/0030004; o en varias patentes y solicitudes de patente no de E.U.A., incluyendo WO 85/04870; WO 85/04872; WO 88/03537; WO 88/06596; WO 89/10935; WO 89/05654; WO 90/01940; WO 90/14362; WO 92/06998; WO 95/13296; WO 99/08510; WO 99/12576; WO 01 /016295; WO 2004/047871 ; WO 2005/072055; EPO 0 291 999; EPO 0 323 740; EPO 0 341 603; EPO 0 350 318; EPO 0 356 124; EPO 0 385 476; EPO 0 497 368; o EPO 0 542 863. En un aspecto, el péptido conocido es un péptido o su homólogo descrito en las patentes de E.U.A. 4,656, 158, 4,824,937, 4,935,492, 5,159,061 , 5,204,328, 5,376,635, 5,665,704, 5,846,932, 6,028,055, 6,407,21 1 , 6,525,022, 6,586,396, o 6,818,619, publicaciones de solicitud de patente de E.U.A. 2004/0002458, 2004/0063630, o 2005/0176641 , o publicaciones de solicitud de patente internacional WO 2004/047871 o WO 2005/072055. Las enseñanzas de cada una de las patentes anteñores y solicitudes de patente se incorporan para referencia como se expone en su totalidad. En un aspecto, la secuencia de aminoácido que se une a un receptor de péptido natriurético es, antes de la sustitución, H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg- NH2 (SEO ID NO:1 ). En otro aspecto la invención provee un sustituto de aminoácido anillo restringido de fórmula I útil para sintetizar un compuesto que se une a un receptor para un péptido natriurético, incluyendo un receptor para ANP o BNP. Los compuestos elaborados que usan uno o más sustitutos de fórmula I se pueden usar para aplicaciones médicas y aplicaciones en animales domésticos o veterinaria. Típicamente, el compuesto, o una composición farmacéutica que incluye el compuesto, se usa en humanos, pero también se puede usar en otros mamíferos. El término "paciente" esta destinado a denotar un individuo mamífero, y se usa por toda la especificación y en las reivindicaciones. Las aplicaciones primarias de esta invención involucran pacientes humanos, pero esta invención se puede aplicar a animales de laboratorio, granja, zoológico, vida silvestre, mascotas, deportes u otros. Los compuestos descritos aquí, o elaborados por los métodos descritos aquí, se pueden usar para el tratamiento de cualquier condición, síndrome o enfermedad, y en particular para cualquier condición, síndrome o enfermedad para la cual un polipéptido de origen tiene alguna eficacia. Los compuestos descritos aquí, o elaborados por los métodos descritos aquí, pueden tener una o más ventajas en relación al polipéptido de origen, incluyendo, sin limitación, ventajas tales como resistencia incrementada a degradación enzimática, vida medía de circulación incrementada, biodísponibilidad incrementada, eficacia incrementada, duración prolongada de efecto y combinaciones de los anteriores. Dichas ventajas se deben, en su totalidad o en parte, al uso de los sustitutos de fórmula I de la invención. En un aspecto, los compuestos descritos aquí se usan en el tratamiento de etapa temprana, tal como deficiencia cardiaca congestiva clase 1 . En otro aspecto, los compuestos descritos aquí se usan en el tratamiento de deficiencia cardiaca congestiva crónica o descompensada. En otro aspecto, los compuestos descritos aquí se usan en el tratamiento de deficiencia cardiaca congestiva aguda, incluyendo deficiencia cardiaca congestiva descompensada agudamente de pacientes con disnea en reposo o con actividad mínima. Forma salina de constructor. Los compuestos de esta invención pueden estar en la forma de cualquier sal farmacéuticamente aceptable. El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales preparadas a partir de bases o ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables incluyendo bases inorgánicas u orgánicas y ácidos inorgánicos u orgánicos. Sales derivadas de bases inorgánicas incluyen sales de aluminio, amonio, calcio, cobre, férricas, ferrosas, litio, magnesio, mangánícas, manganosas, potasio, sodio, zinc, y lo similar. Particularmente preferidas son las sales de amonio, calcio, litio, magnesio, potasio, y sodio. Sales derivadas de bases no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas que incluyen aminas de origen natural sustituidas, aminas cíclicas, y resinas de intercambio iónico básicas, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, ?,?'-dibenciletílendiamina, dietilamína, 2-dietilamínoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etil-morfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hídrabamina, ¡sopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamína, trimetilamina, tripropilamina, trometamina, y lo similar.

Cuando el compuesto de la presente invención es básico, sales de adición ácida se pueden prepara a partir de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, incluyendo ácidos inorgánicos y orgánicos. Dichos ácidos incluyen ácido acético, bencenosulfónico, benzoico, canforsulfónico, carboxílico, cítrico, etanosulfónico, fórmico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maléico, málico, mandélico, metanosulfónico, malónico, múcico, nítrico, pamóico, pantoténico, fosfórico, propiónico, succínico, sulfúrico, tartárico, ácido p-toluenosulfónico, ácido trifluoroacético, y lo similar. Sales de adición ácida de los compuestos de esta invención se preparan en un solvente adecuado del compuesto y un exceso de un ácido, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, trifluoroacético, cítrico, tartárico, maléico, succínico o metanosulfónico. La forma salina de acetato es especialmente útil. Cuando los compuestos de las modalidades de esta invención incluyen un radical ácido, sales farmacéuticamente aceptables adecuadas pueden incluir sales de metales alcalinos, tales como sales de sodio o potasio, o sales de metales alcalinotérreos, tales como sales de calcio o magnesio. Composiciones farmacéuticas. Otra modalidad de la presente invención provee una composición farmacéutica que incluye un compuesto de esta invención y un portador farmacéuticamente aceptable. El portador puede ser una formulación líquida, y es preferiblemente una solución regulada de pH, ¡sotónica, acuosa. Portadores farmacéuticamente aceptables también incluyen excipientes, tales como diluyentes, portadores y lo similar, y aditivos, tales como agentes de estabilización, preservativos, agentes de solubilización, reguladores de pH y lo similar, como se describe más adelante. Los compuestos de las varias modalidades de la presente invención se pueden formular o formar en compuesto en composiciones farmacéuticas que incluyen al menos un compuesto de esta invención junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, incluyendo excipientes, tales como diluyentes, portadores y lo similar, y aditivos, tales como agentes de estabilización, preservativos, agentes de solubilización, reguladores de pH, y lo similar, como se puede desear. Excipientes de formulación pueden incluir polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxi celulosa, acacia, polietilenglicol, manitol, cloruro de sodio y citrato de sodio. Para inyección u otras formulaciones de administración líquida, agua que contiene al menos uno o más constituyentes reguladores de pH se prefiere, y agentes de estabilización, preservativos y agentes solubilizantes también se pueden emplear. Para formulaciones de administración sólida, cualquiera de una variedad de espesantes, sustancia de relleno, aditivos de carga y aditivos portadores se pueden emplear, tales como almidones, azúcares, ácidos grasos y lo similar. Para formulaciones de administración tópica, cualquier variedad de cremas, ungüentos, geles, lociones, y lo similar se pueden emplear. Para formulaciones más farmacéuticas, ingredientes no activos constituirán la mayor parte, en peso o volumen, de la preparación. Para formulaciones farmacéuticas, se contempla que cualquier variedad de formulaciones de liberación medida, liberación lenta o liberación temporizada y aditivos se pueden emplear, de manera que la dosificación se pueda formular para efectuar el suministro de un compuesto de esta invención sobre un periodo de tiempo. En general, la cantidad real de compuestos administrados a un paciente variará entre intervalos amplios completamente dependiendo del modo de administración, la formulación usada, y la respuesta deseada. En uso práctico, los compuestos se pueden combinar como el ingrediente activo en una mezcla con un portador farmacéutico de acuerdo con técnicas de formación de compuesto farmacéuticamente convencionales. El portador puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para administración, por ejemplo, oral, parenteral (incluyendo intravenosa), uretral, vaginal, nasal, dérmica, transdérmica, pulmonar, pulmonar profunda, inhalación, bucal, sublingual, o lo similar. En la preparación las composiciones para forma de dosificación oral, cualquier medio farmacéutico usual se puede emplear, tal como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes, preservativos, agentes de coloración y lo similar en el caso de preparaciones liquidas orales, tales como, por ejemplo, suspensiones, elíxires y soluciones; o portadores tales como almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, aglutinantes, agentes de desintegración, y lo similar en el caso de preparaciones sólidas orales tales como, por ejemplo, polvos, cápsulas duras o suaves y tabletas. Debido a su fácil administración, tabletas y cápsulas representan una forma unitaria de dosificación oral ventajosa. Si se desea, una composición que incluye un compuesto de esta invención se puede recubrir mediante técnicas acuosas o no acuosas estándar. La cantidad de compuesto activo en dichas composiciones útiles terapéuticamente es tal que la dosificación efectiva será obtenida. En otra forma unitaria de dosificación ventajosa, composiciones farmacéuticas sublinguales se pueden emplear, tal como hojas, obleas, tabletas o lo similar. El compuesto activo también se puede administrar intranasalmente, por ejemplo, mediante gotas líquidas o aspersión. Las tabletas, pildoras, cápsulas, y lo similar también pueden contener un aglutinante tal como goma de tragacanto, acacia, almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato de dicálcio; un agente de desintegración tal como almidón de maíz, almidón de papa o ácido algínico; un lubricante tal como estearato de magnesio, y un agente edulcorante tal como sucrosa, lactosa o sacarina. Cuando una forma unitaria de dosificación es una cápsula, puede contener, además de materiales del tipo anterior, un portador liquido tal como un aceite graso. Varios de otros materiales se pueden utilizar como recubrimientos o para modificar la forma física de la unidad de dosificación. Por ejemplo, las tabletas se pueden recubrir laca, azúcar o ambos. Un jarabe o elixir puede contener, además del ingrediente activo, sucrosa como un agente edulcorante, metilo y propilparabenos como preservativos, una tinta y un saborizante tal como sabor a cereza o naranja.

Compuestos también se pueden administrar parenteralmente. Soluciones o suspensiones de estos péptidos activos se pueden preparar en agua adecuadamente mezclada con un agente tensioactivo tal como hidroxi-propilcelulosa. Las dispersiones también se pueden preparar en glicerol, polietilenglicoles líquidos y sus mezclas en aceites. Estas preparaciones pueden contener opcionalmente un preservativo para prevenir el crecimiento de microorganismos. Formulaciones unitarias sencillas liofilizadas también se pueden utilizar, las cuales son reconstituidas con solución salina, antes de la administración, y de esta manera no requieren un preservativo. Las formas farmacéuticas adecuadas para uso inyectable incluyen, por ejemplo, soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles, tales como formulaciones liofilizadas, para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. En todos los casos, la forma debe ser estéril y debe ser fluida al grado que se puede administrar mediante jeringa. La forma debe ser estable bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento y debe ser preservada contra la acción de contaminación de microorganismos tales como bacterias y hongos. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, un poliol, por ejemplo, glicerol, propilenglicol, o polietilenglicol líquido, sus mezclas adecuadas, y aceites vegetales. Compuestos como se describen aquí se pueden aplicar terapéuticamente por medio de administración nasal. Por "administración nasal" significa cualquier forma de administración intranasal de cualquiera de los compuestos de esta invención. Los compuestos pueden estar en una solución acuosa, tal como una solución que incluye solución salina, citrato u otros excipientes o preservativos comunes. Los compuestos también pueden estar en una formulación en polvo o seca. En una modalidad alternativa, compuestos se pueden administrar directamente en el pulmón. Administración intrapulmonar se puede realizar por medio de un inhalador de dosis medida, un dispositivo que permite la auto-administración de un bolo medido de un compuesto de esta invención cuando se activa por un paciente durante inspiración. La inhalación en polvo seco y aerosoles nebulizados se pueden emplear. De acuerdo con otra modalidad de la presente invención, los compuestos de esta invención se pueden formular con cualquiera de una variedad de agentes que incrementan la absorción nasal efectiva de fármacos, incluyendo fármacos de péptido. Estos agentes deben incrementar la absorción nasal sin daño inaceptable a la membrana mucosal. Las patentes de E.U.A. 5,693, 5,977,070 y 5,908,825, entre otras, muestran un número de composiciones farmacéuticas que se pueden emplear, incluyendo intensificadores de absorción, y las enseñanzas de cada una de las anteriores, y todas las referencias y patentes citadas aquí, se incorporan para referencia. Si en una solución acuosa, ciertos compuestos de la presente invención se pueden regular de pH apropiadamente por medio de solución salina, acetato, fosfato, citrato, acetato u otros agentes reguladores de pH, que pueden estar en cualquier pH aceptable fisiológicamente, generalmente de aproximadamente pH 4 a aproximadamente pH 7. Una combinación de agentes reguladores de pH también se puede emplear, tal como solución salina regulada de pH de fosfato, una solución salina y regulador de pH de acetato, y lo similar. En el caso de solución salina, una solución salina al 0.9% se puede emplear. En el caso de acetato, fosfato, citrato, acetato y lo similar, una solución de 50 mM se puede emplear. Además de agentes de regulación de pH, un preservativo adecuado se puede emplear, para prevenir o limitar el crecimiento de bacterias y otros microbios. Un preservativo que se puede emplear es cloruro de benzalconio al 0.05%. También es posible y se contempla que el compuesto puede estar en una forma particulada y secada. En una modalidad preferida, las partículas están entre aproximadamente 0.5 a 6.0 µ??, tal que las partículas tienen masa suficiente para asentar en la superficie del pulmón, y no ser exhaladas, pero son suficientemente pequeñas que no son depositadas en las superficies de los pasajes de aire antes de alcanzar el pulmón. Cualquiera de una variedad de diferentes técnicas se puede usar para elaborar polvo seco de microparticulas, incluyendo pero sin limitarse a micro-molido, secado por aspersión y un aerosol de congelamiento rápido seguido por liofilización. Con micro-partículas, los compuestos se pueden depositar al pulmón profundo, con lo cual proveen absorción rápida y eficiente en la corriente sanguínea. Además, con dicha penetración planteada los intensificadores no se requieren, como es algunas veces el caso en rutas de suministro transdérmico, nasal o mucosal. Cualquiera de una variedad de inhaladores se pueden emplear, incluyendo aerosoles basados en propulsante, nebulizadores, inhaladores de polvo seco de dosis sencilla e inhaladores de polvo seco de dosis múltiples. Dispositivos comunes en uso actual incluyen inhaladores de dosis medida, los cuales se usan para medicaciones suministradas para el tratamiento de asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y lo similar. Dispositivos preferidos incluyen inhaladores de polvo seco, diseñados para formar una neblina o aerosol de polvo fino con un tamaño de partícula que es siempre de menos de aproximadamente 6.0 µ??. El tamaño de microparticula, incluyendo distribución de tamaño media, puede ser controlado por medio del método de elaboración. Para la micro-molienda, el tamaño de cabezal de molienda, velocidad del rotor, tiempo de procesamiento y lo similar controlan el tamaño de microparticula. Para secado por aspersión, el tamaño de boquilla, velocidad de flujo, calor del secador y lo similar controla el tamaño de microparticula. Para elaborar por medio de aerosol de congelamiento rápido seguido por liofilización, el tamaño de boquilla, velocidad de flujo, concentración de solución en aerosol y lo similar controla el tamaño de microparticula. Estos parámetros y otros se pueden emplear para controlar el tamaño de microparticula. Los compuestos de esta invención se pueden administrar terapéuticamente por medio de una inyección, usualmente una inyección intramuscular profunda, tal como en el músculo gluteal o deltoides, de una formulación inyectable de liberación temporizada. En una modalidad, un compuesto de esta invención se fórmula con un PEG, tal como poli(etilenglicol) 3350, y opcionalmente uno o más excipientes y preservativos adicionales, incluyendo pero sin limitarse a excipientes tales como sales, polisorbato 80, hidróxido de sodio o ácido clorhídrico para ajustar el pH, y lo similar. En otra modalidad, un compuesto de esta invención se fórmula con un poli(ortoéster), que puede ser poli(orto éster) auto-catalizado con cualquiera de un porcentaje variable de ácido láctico en la cadena principal polimérica, y opcionalmente uno o más excipientes adicionales. En una modalidad, polímero de poli(D,L-lactida-co-glícolido) (polímero (PLGA) se emplea, preferiblemente un polímero de PLGA con un grupo final hidrofílico, tal como PLGA RG502H de Boehringer Ingelheim, Inc. (Ingelheim, Alemania). Dichas formulaciones se pueden hacer, por ejemplo, al combinar un compuesto de esta invención en un solvente adecuado, tal como metanol, con una solución de PLGA en cloruro de metileno, y añadiendo a esto una solución de fase continua de alcohol polivinílico bajo condiciones de mezclado adecuadas en un reactor. En general, cualquier número de polímeros inyectables y biodegradables, los cuales son preferiblemente también polímeros adhesivos, se pueden emplear en formulación inyectable de liberación temporizada. Las enseñanzas de las patentes de E.U.A. 4,938,763, 6,432,438 y 6,673,767, y los polímeros biodegradables y métodos de formulación descritos aquí, son incorporados aquí para referencia. La formulación puede ser tal que una inyección se requiere en una base periódica semanal, mensual u otra, dependiendo de la concentración y cantidad de compuesto, la velocidad de biodegradación del polímero, y otros factores conocidos para aquellos de experiencia en la técnica. Rutas de administración. Si se administra mediante inyección, la inyección puede ser intravenosa, subcutánea, intramuscular, intraperitoneal u otros medios conocidos en la técnica. Los compuestos de esta invención se pueden formular por cualquier medio conocido en la técnica, incluyendo pero sin limitarse a formulación como tabletas, cápsulas, capletas, suspensiones, polvos, preparaciones liofilizadas, supositorios, gotas oculares, parches para la piel, formulaciones solubles orales, aspersiones, aerosoles y lo similar, y se pueden mezclar y formular con reguladores de pH, aglutinantes, excipientes, estabilizadores, anti-oxidantes y otros agentes conocidos en la técnica. En general, cualquier ruta de administración por la cual los compuestos de esta invención se introducen a través de una capa epidérmica de células se puede emplear. Medios de administración de esta manera pueden incluir la administración a través de membranas mucosas, administración bucal, administración oral, administración dérmica, administración por inhalación, administración pulmonar, administración nasal, administración uretral, administración vaginal, y lo similar. En un aspecto, un compuesto de esta invención se administra por medio de una formulación inyectable de liberación temporizada, tal como un compuesto de esta invención en una formulación con un polímero de PEG, poli(orto éster) o PLGA. En otro aspecto, un compuesto de esta invención se administra por medio de un dispositivo de suministro automático que provee suministro subcutáneo, ya sea continuo o intermitente. Cualquiera de los métodos y formulaciones anteriores son aplicables particularmente para el tratamiento de condiciones crónicas o síndromes, incluyendo deficiencia cardiaca congestiva crónica y particularmente deficiencia cardiaca congestiva descompensada crónica. En un aspecto, cualquier compuesto de esta invención se puede administrar mediante administración subcutánea, incluyendo todos los métodos descritos en la patente de E.U.A. 6,586,396. En otro aspecto, un paciente, particularmente un paciente quien es relativamente compensado o es un paciente con deficiencia cardiaca congestiva en una instalación fuera del hospital, se puede administrar un compuesto de esta invención por métodos y en dosis como se describe en la publicación de solicitud de patente de E.U.A. 2004/077537 y publicación de solicitud de patente internacional WO 2003/079979. En otro aspecto, un paciente se puede administrar con un compuesto de esta invención por medio de los métodos descritos en la publicación de solicitud de patente de E.U.A. 2005/01 13286. En aún otro aspecto, un paciente quien ha experimentado lesión miocardial se puede tratar para remodelación cardiaca por medio de los métodos como se describe en la publicación de solicitud de patente de E.U.A. 2006/0019890. Un compuesto de esta invención también se puede administrar mediante administración transdérmica, incluyendo por medio del sistema de suministro, incluyendo los aparatos, y los métodos como se describe en la publicación de solicitud de patente de E.U.A. 2006/0034903. De manera similar, las formulaciones de hidrogel y formulaciones en estado sólido descritas aquí se pueden adaptar para el uso con los compuestos de esta invención. Cantidad terapéuticamente efectiva. En general, la cantidad real de un compuesto de esta invención administrada a un paciente variará entre intervalos amplios completamente dependiendo del modo de administración, la formulación usada, y la respuesta deseada. La dosificación para el tratamiento es administración, por cualquier medio anterior o cualquier otro medio conocido en la técnica, de una cantidad suficiente para lograr aproximadamente el efecto terapéutico deseado. De esta manera, una cantidad terapéuticamente efectiva incluye una cantidad de un compuesto o composición farmacéutica de esta invención que es suficiente para inducir un efecto deseado. En un aspecto donde un péptido natriurético se emplea como el polipéptido de origen en la elaboración del compuesto incluyendo uno o sustitutos de fórmula I, una cantidad terapéuticamente efectiva es una cantidad que resulta en natriuresis, diuresis y/o vasodilatación deseados. En general, los compuestos de esta invención son altamente efectivos. Por ejemplo, el compuesto se puede administrar en aproximadamente 0.01 , 0.05, 0.1 , 0.5, 1.5, 10, 50, o 100 µg/kg de peso del cuerpo dependiendo del compuesto específico seleccionado, la respuesta terapéutica deseada, la ruta de administración, la formulación y otros factores conocidos para aquellos de experiencia en la técnica.

Métodos sintéticos para sustitutos de fórmula I Los sustitutos de fórmula I de la invención se pueden obtener vía metodología estándar, sintética. Algunos métodos convenientes se ilustran en los esquemas posteriores. Materiales de inicio útiles para la preparación de los compuestos de la invención y sus intermedios, son comercialmente disponibles o se pueden preparar de materiales disponibles comercialmente usando métodos sintéticos y reactivos conocidos. Los grupos de protección utilizados aquí denotan grupos que generalmente no se encuentran en los compuestos terapéuticos finales pero que se introducen intencionalmente en alguna etapa de la síntesis con el fin de proteger grupos que de otra manera pueden ser alterados en el curso de manipulaciones químicas. Dichos grupos de protección se remueven o convierten al grupo deseado en una etapa posterior de la síntesis y compuestos que portan dichos grupos protectores, de esta manera son de importancia primariamente como intermedios químicos (aunque algunos derivados también exhiben actividad biológica). En consecuencia, la estructura precisa del grupo protector no es crítica. Numerosas reacciones para la formación y remoción de dichos grupos de protección se describen en un número de trabajos estándar incluyendo, por ejemplo, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, Londres y New Cork, 1973; Greene, Th. W. Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New Cork, 1981 ; The peptides, Vol. I, Schroeder y Lubkje, Academia Press, Londres y New Cork, 1965; y Methoden der organischen CEIME, Houben-Weyl, 4a edición, Vol.15/1, Georg Thireme Verlag, Stuttgart 1974, cuyas descripciones se incorporan aquí para referencia. Los siguientes ejemplos de métodos de síntesis de sustitutos de aminoácido de fórmula I de la invención se destinan a ser ejemplares, y se debe entender que variaciones en estos se pueden tomar por una persona con experiencia en la técnica, y dichas variaciones se destinan a ser incluidas aquí.

Síntesis de andamios de cetopiperazina que imitan aminoácidos sin cadena lateral R funcionalizada (Métodos A y B) Los constructos se preparan por una variedad de métodos como se describe en métodos A y B.

Método A Se forman los dipéptidos (3) por el método anhídrido mezclado, usando Boc-serina (OBn)-(OH) (1 ), y un éster a-amino (2). Los dipéptidos se obtienen en rendimientos altos, y usualmente no se requiere purificación. La reducción del éster metílico y el grupo amida se hace usando diborano-tetrahidrofurano, con las aminas secundarias protegidas para proveer los intermedios de alcohol amino di-Boc protegido (4). La oxidación de alcoholes con dicromato de piridinio (PDC) con ciclizacion concomitante proporciona piperazina-2-onas (5) en una etapa. La remoción de éster bencílico mediante hidrogenación, después el intercambio del grupo protector proporciona las piperazina-2-onas Fmoc protegidas (6). Finalmente, el alcohol primario se oxida para el ácido por cualquier número de diferentes métodos (PDC, oxidación de Jones, cloruro de rutenio-peryodato de sodio, 2,2,6,6-tetrametil- 1 -piperidiniloxi, oxidación de radical libre (TEMPO)) para proporcionar los productos finales (7).

Método A 1. 'BuOCOCl, EtgN, THF, -20 C OH 2. H2NCHRC02Me (2) , Et3N, -20 C a t.a. Bo O (1 ) O R (4) (5) (6) Oxidación Síntesis de éster metílico del ácido 2-(3-benciloxi-2-terc-butoxicarbonilamino-propionilamino)-2-sustituido acético (3): A una solución de 10 mmol de éster Boc serina bencílico (1 ) en 30 mi de tetrahidrofurano seco, mantenida a -20°C bajo nitrógeno, se añaden 22 mmol de trietilamina, seguido por la adición lenta de 1 1 .4 mmol de isobutilcloroformiato. Un sólido blanco precipita. La suspensión se agita durante 15 minutos, y después se añaden en una porción 1 1 .1 mmol de a-amino éster (2). La suspensión se agita a -20°C durante 30 minutos, y después se deja calentar a temperatura ambiente, se agita durante 2 horas, y después se concentra a sequedad. La mezcla después se divide entre 50 mi de acetato de etilo/30 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con 1 x 20 mi de ácido clorhídrico 1 N, y 1 x 20 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio, se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra. Los compuestos (3) se obtienen usualmente en rendimientos de aproximadamente 90%, y no se requiere purificación.

Síntesis de Di-Boc-2-sustituido -(2-amino-3-benciloxi-propil-amino)-etanol (4): A una solución de 35 mmol de (3) en 50 mi de tetrahídrofurano seco, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden 200 mi de solución de diborano 1 N en tetrahidrofurano. La solución se agita a temperatura ambiente toda la noche, y después se vierte lentamente sobre una solución enfriada con hielo de 200 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N. La solución bifásica después se neutraliza con hidróxido de sodio sólido. Se añaden 140 mi de una solución saturada de bicarbonato de sodio, seguido por 70 mmol de di-terc-butil-dicarbonato, y la mezcla de agita durante 2 días a temperatura ambiente, se diluye con 200 mi de acetato de etilo y las capas se separan. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los productos (4) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de 1 ,4-di-Boc-6-benciloximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (5): A una solución de 70 mmol de (4), y 400 mmol de dicromato de piridinio en 300 mi de dimetilformamida seco se agita a 48°C bajo nitrógeno durante 6 horas, se enfría a temperatura ambiente, se vierte en 1500 mi de agua, y se extrae con 4 x 500 mi de etil éter. Las capas eternales se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio, y se concentran. Los productos (5) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (6): una suspensión de 19 mmol de (5) y 2 g de paladio en carbón al 10% en 200 mi de etanol se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica toda la noche. La suspensión se filtra a través de celite, y se concentra. El residuo se re-disuelve en 40 mi de ácido trifluoroacético al 50% en diclorometano. La solución se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y después se concentra. El residuo se redisuelve en 60 mi de tetrahidrofurano/40 mi de agua, y se neutraliza con bicarbonato de sodio sólido, seguido por la adición de 40 mmol de bicarbonato de sodio sólido, y 20 mmol de cloruro de Fmoc. La mezcla después se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, se diluye con 300 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se concentra y se purifica mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de ácido 4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazina-2-carboxílico (7): compuestos (7) se preparan mediante varios métodos. (a) A una solución bifásica de 10 mmol de (6) en 180 mi de acetonitrilo, 180 mi de tetracloruro de carbono, y 240 mi de agua, se enfría a 0°C, se añaden 1 12 mmol de peryodato de sodio sólido, seguido por 340 mg de cloruro de rutenio. La reacción se deja calentar a temperatura ambiente, se agita durante 2 horas, y después se filtra a través de celite. Las capas se separan, y la capa acuosa se re-extrae con 2 x 75 mi de acetato de etilo. Las capas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentra. (b) Una solución de 12 mmol de (6), y 59 mmol de PDC en 60 mi de dimetilformamida seca se agita a 48°C bajo nitrógeno durante ~5 horas, se enfría a temperatura ambiente, y se vierte sobre 600 mi de agua, y se extrae con 3 x 200 mi de diclorometano. Las capas orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio, y se concentran. (c) A una solución de 17 mmol de (6) en 350 mi de acetona mantenida a temperatura ambiente se añaden 25 mi de reactivo Jones (preparado a partir de 8.0 g de ácido crómico, 17.4 mi de agua, y 6.9 mi de ácido sulfúrico concentrado). La mezcla se agita durante 1 hora, 150 mi de isopropanol se añade, y la mezcla se filtra a través de celite. El celite se lava con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinan y se concentran. El residuo se disuelve en 250 mi de acetato de etilo y se lava con 2 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. (d) A una solución de 81 mmol de alcohol (6) en 810 mi de acetonitrilo mantenido a temperatura ambiente, se añade solución reguladora de pH de fosfato (preparada con 7.2 g de fosfato de sodio monobásico, y 14!3 g de fosfato de sodio dibásico en 295 mi de agua), seguido por la adición de 3.3 g (20.7 mmol) de TEMPO, y 18.6 g (164.4 mmol) de clorito de sodio, y la solución bifásica colocada en un baño de aceite mantenido a 43°C, y después una solución de 43.3 mi (25.9 mmol) de solución de hipoclorito de sodio (preparado al mezclar 19.3 mi de solución de hipoclorito de sodio al 10-13%, y 24 mi de agua) se añade lentamente. La reacción se agita a 43°C durante 4 horas. La solución se enfría a temperatura ambiente, y una solución de 200 mi de solución de sulfíto ácido de sodio al 10% se añade, se agita durante 10 minutos, se diluye con 500 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se lava con 1 x 100 mi de salmuera, 1 x 160 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, se seca sobre sulfato de sodio, y se concentra. Los productos (7) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Método B Intermedios di-Boc-2-sustituido-(2-amino-3-benciloxi-propil-amino)-etanoles (4), preparados como se describe en el método A, se oxidan al ácido usando reactivo TEMPO/ácido ¡socianúrico, y después se esterifican con yodometano para proporcionar análogos de dipéptido reducido protegido (8). La desprotección de los grupos Boc, y el bencil éter, proporciona 5-hidroximetil-piperazin-2-onas 3-sustituidas, que se protegen como los derivados de Fmoc para proporcionar (6), los cuales se oxidan al producto final como se describe en el método A.

Método B Síntesis de éster metílico del ácido Di-Boc-(2-amino-3-benciloxi-propilamino)-2-sustituido acético (8): A una suspensión de 76 mmol de (4) en 680 mi de acetona, y 210 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio, mantenido a 0°C, se añaden 21 mmol de bromuro de sodio sólido, y 2.9 mmol de TEMPO, seguido por la adición lenta de 156 mmol de ácido tricloroisocianúrico. La reacción se agita durante 30 minutos a 0°C, y después a temperatura ambiente toda la noche, se acidifica con una solución de ácido clorhídrico 1 N, y se extrae con 2 x 300 mi de acetato de etilo. La capa orgánica se lava con 3 x 50 mi de ácido clorhídrico 1 N, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El residuo se re-disuelve en 40 mi de dimetilformamida seca y 95 mmol de bicarbonato de sodio sólido, y 1 12 mmol de yodometano se añaden, y la mezcla se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno hasta que la HPLC muestra que la reacción se completa; la solución después se diluye con 200 mi de etíléter, y se lava con 2 x 100 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los productos (8) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (6): A una solución de 36 mmol de (8) en 40 mi de ácido trifluoroacético al 50% en diclorometano se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y después se vierte en 200 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio. Las capas se separan, y la capa orgánica se concentra. El residuo se re-disuelve en 100 mi de acetato de etilo, y se lava con 2 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El residuo se disuelve en 100 mi de etanol, y 5 g de paladio en carbono al 10% y 35 mi de una solución de ácido clorhídrico 1 N se añade, y la mezcla se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica hasta que la HPLC muestra que la reacción se completa; la solución después se filtra a través de celite y se concentra. El residuo se re-disuelve en 80 mi de acetato de etilo, 70 mmol de bicarbonato de sodio en 30 mi de agua se añade, y la mezcla se agita a temperatura ambiente toda la noche. El acetato de etilo se remueve y 100 mi de tetrahidrofurano se añade, seguido por 178 mmol de bicarbonato de sodio sólido y 43 mmol de cloruro de Fmoc, y la mezcla se agita hasta que la HPLC muestra que se completa, se diluye con 300 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se lava con 2 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los productos (6) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice. Síntesis de ácido 4-Fmoc-5-sustituído-6-oxo-piperazina-2-carboxilico (7): compuestos (7) se preparan como se describe en el método A.

Esquema sintético común general para la preparación de andamios de cetopiperazina aplicable a compuestos con o sin cadenas laterales R funcionalizadas (Métodos C, E, F) Método C Esteres metílicos de ácido (2-Fmoc-amino-3-R'-O-propilamino)- 2-sustituido acético (10) se preparan mediante aminacíón reductiva de serínal Fmoc O-protegido (9) con a-aminoésteres (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente reductor. La serinal Fmoc O-protegido (9) requerida para la aminación reductiva se prepara de acuedo con el método D, ya sea mediante reducción del éster (12) por hidruro de di-isobutilalumino, mediante la oxidación de serinol Fmoc O-protegído (13) con periodinano Dess-Martin, o mediante la reacción de amina Weinreb de serina Fmoc O-protegida (14) con hidruro de litio aluminio. El método preferido para la preparación de serinales Fmoc- O-protegido (9) es la reducción del análogo amida Weinreb (ésteres metílicos del ácido 2-Fmoc-amino-3-R'-O- propilamino)-2-sustituido acético (10) son después N y O desprotegidos, ciclizados y Fmoc protegidos para proporcionar 6-hidroximetil-piperazin-2- onas 3-sustituidas (6), las cuales entonces se oxidan al producto final como se describe en el método A. El grupo protector (R') en el grupo hidroxilo de serinal Fmoc O- protegido (9) usado en la síntesis depende de la naturaleza de la cadena lateral R del aminoéster. Cuando R no contiene grupos funcionales, la cadena lateral de serina Fmoc se protege como el 'Bu éter. Cuando R contiene grupos funcionales, la cadena lateral de serina Fmoc se protege como el tritiléter.

Método C OMe ( 10) (6) O NH Oxidación Fmoc'' o (7) Método D (11) (12) DIBAL.THF, -78 C (9) (") (14) (9) Método D Síntesis de varios serinales Fmoc O-protegidos (9). Síntesis de éster metílico de serina Fmoc-O-R' (12): una suspensión ligera de 80 mmol de serina Fmoc O-R' (11), 10.0 g (120 mmol) de bicarbonato de sodio sólido, y 10.0 mi (160 mmol) de yodometano en 80 mi de dimetilformamida seco, mantenido bajo nitrógeno, se agita a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla de reacción entonces se vierte sobre 500 mi de agua, y el sólido se filtra. El sólido se re-disuelve en 800 mi de acetato de etilo, y se lava con 1 x 200 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. No se requiere purificación.

Síntesis de serinol Fmoc-O-R' (13): A una solución de 10.0 mmol de serina Fmoc O-R' (1 1 ) en 50 mi de tetrahidrofurano seco, mantenido a -20°C bajo nitrógeno, se añade 1 .77 mi (12.7 mmol) de trietilamina, seguido por la adición lenta de 1.57 mi (12.0 mmol) de isobutilcloroformiato. La mezcla se agita durante 30 minutos, y después se vierte sobre una solución enfriada con hielo de 3.77 (99.6 mmol) de borohidruro de sodio en 10 mi de agua, manteniendo la temperatura debajo de 5°C. La reacción se agita a 0°C durante 15 minutos, y después se templa con solución de ácido clorhídrico N. La mezcla de reacción se diluye con 100 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se lava con 2 x 25 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, 2 x 25 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra. Los compuestos se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de amida Weinreb serina Fmoc-O-R' (14): una suspensión de 20.2 mmol de serina Fmoc O-R' (1 1 ), 6.98 g (21.6 mmol) de tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1 -il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio (TBTU), y 2.5 mi (22.7 mmol) de N-metil-morfolina en 80 mi de diclorometano seco se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 20 minutos, y después 3.02 g (31 mmol) de clorhidrato de ?,?-di-metil-hidroxilamina y 3.3 mi (30 mmol) de N-metil-morfolina se añade, y la suspensión se agita a temperatura ambiente toda la noche. La solución formada después se concentra a sequedad, se re-divide entre 200 mi de acetato de etilo y 100 mi de agua, se lava con 2 x 40 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N y después 2 x 40 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. No se requiere purificación.

R' Datos analíticos para compuestos (14) 'Bu H RMN d (CDCI3): 1 .45 (s, 9H, 'Bu), 3.30 (s, 3H, CH3-N), 3.55-3.7 (m, 2H, CH2-0), 3.76 (s, 3H, CH3-O), 4.19-4.26 (m, 1 H, CH), 4.30-4.38 (m, 2H, CH2-O), 4.82-4.91 •Bu (amplio m, 1 H, CHN), 5.68-5.75 (d, 1 H, NH), 7.2-7.8 (8H, fulveno), rendimiento = cuant., tR = 6.59 min. Trt 1H RMN d (CDCI3): 3.24 (s, 3H, CH3N), 3.34-3.46 (m 2H, CH20), 3.62 (s, 3H, CH30), 4.15-4.37 (dos m, CH2, CH), 4.86-4.98 (m 1 H, CHN), 5.80-5.86 (d, 1 H, NH), 7.18-7.8 (una serie de m, 23H, Trt y fulveno), rendimiento = cuant., tR = 8.0 min.

Síntesis de serinal Fmoc-O-R' (9) a partir de éster (12): A una solución de 3.5 mmol de (12) en 5 mi de tetrahidrofurano, mantenida a -78°C bajo nitrógeno, se añaden lentamente 10 mi de solución de hidruro de diisobutil aluminio 1 N (DIBAL), se agita durante 15 minutos, y se templa mediante la adición lenta de una solución saturada de tartrato de sodio y potasio. La reacción se deja calentar a temperatura ambiente, se diluye con 50 mi de acetato de etilo, y 50 mi de una solución saturada de tartrato de sodio y potasio se añade. Las capas se separan, y la capa acuosa se re- extrae con 1 x 50 mi de acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio, y se concentran. Compuestos (9) se usan sin purificación adicional en la siguiente etapa.

R" Datos analíticos para compuestos (9) 'Bu H RMN d (CDCI3): 1 .16 (s, 9H, 'Bu), 3.59-3.66 (dd, 1 H, CH20), 3.90-3.98 (dd, 1 H, CH20), 4.20-4.27 (t, 1 H, CH), 4.32-4.45 (dos m, 3H, CHN, y CH20), 5.64-5.74 (br. d, 1 H, NH), 7.28-7.35 (m, 2H, fulveno), 7.36-7.44 (m, 2H, fulveno), 7.58-7.65 (d, 2H, fulveno), 7.73-7.78 (d, 2H, fulveno), 9.62 (s, 1 H, CHO). Trt H RMN d (CDCI3): 3.53-3.61 (dd, 1 H, CH20), 3.66-3.75 (dd, 1 H, CH20), 4.33-4.47 (dos m, 4H, CHN, CH, y CH2), 5.66-5.75 (d, 1 H, NH), 7.20-7.81 (una serie de m, 23H, Trt, y fulveno), 9.6 (s, 1 H, CHO).

Síntesis de serinal Fmoc-O-R' (9) a partir de alcohol (13): A una solución de 80 mmol de serinol Fmoc-O-R' (13) en 200 mi de diclorometano seco, mantenida temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añade 88 mmol de periodinano Dess Martin, y la reacción se agita durante 2.5 horas y se templa mediante la adición de 400 mi de solución acuosa de bisulfato de sodio al 10%. Las capas se separan, y la capa orgánica se concentra, se diluye con 300 mi de etiléter, y se lava tres veces con una solución acuosa saturada de bicarbonato que contiene tiosulfato de sodio al 10%, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Síntesis de serinal Fmoc-O-R' (9) a partir de amida Weinreb (14): A una solución de 8.8 g (20.2 mmol) de intermedio amida Weinreb serina Fmoc-O-R' crudo ( 14) en 60 mi de tetrahidrofurano seco, se enfría a -78°C bajo nitrógeno, se añaden 30 mi de solución de hidruro de litio aluminio 1 N en tetrahidrofurano. La solución se agita durante 15 minutos y después se templa mediante la adición lenta de 30 mi de una solución 1 .4N de sulfato ácido de potasio. Después del calentamiento a temperatura ambiente, el sólido se filtra y el filtrado se concentra a sequedad. Después del calentamiento a temperatura ambiente, el sólido se filtra y el filtrado se concentra a sequedad. El residuo se re-divide entre 50 mi de acetato de etilo y 25 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separan, y la capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtran y se concentran. Síntesis de éster metílico del ácido (2-Fmoc-amino-3-R'-O-propilamino)-2-sustituido acético (10): compuestos (10) se preparan mediante aminación reductiva usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. Método de cianoborohidruro de sodio: a una solución de 8.5 mmol de (2) sal clorhidrato en 20 mi de metanol, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añade 2.3 mmol de hidróxido de potasio sólido, y la mezcla se agita durante 25 minutos. Una solución de serinal Fmoc-O-R' (9) en 10 mi de metanol se añade a la suspensión anterior, y la mezcla de reacción se agita durante 1 hora. Una solución de 8.5 mi de cianoborohidruro de sodio 1 N en tetrahidrofurano se añade lentamente, y la reacción se agita por otra hora, se filtra y se concentra. El residuo se divide entre acetato de etilo y agua, y la capa orgánica se lava con 1 x 20 mi de bicarbonato de sodio saturado, se seca sobre sulfato de sodio, y se concentra. Método de triacetoxiborohidruro de sodio: una suspensión de 21 mmol de (2) sal de clorhidrato, y 2.9 mi (21 mmol) de trietilamina en 50 mi de tetrahidrofurano seco, se agita a temperatura ambiente durante 45 minutos y después una solución de -20 mmol de serinal Fmoc-(O-R') (9) en 30 mi de tetrahidrofurano se añade, seguido por 1 .7 g de tamices moleculares en polvo 4A, y la suspensión se agita por 2h adicionales. Se añaden 6.4 g (30 mmol) de triacetoxiborohidruro de sodio sólido, y la suspensión se agita a temperatura ambiente toda la noche. La suspensión se diluye con metanol, los tamices moleculares se filtran, y el filtrad se concentra. El residuo se divide entre 100 mi de acetato de etilo y 50 mi de agua. La capa orgánica se seca sobre sulfato de sodio, se filtra, y se concentra.

Compuestos ( 10) se purifican mediante cromatografía columna en gel de sílice.

Síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (6): para la preparación de compuestos (6) tres etapas se requieren: (a) desprotección de Fmoc con ciclización concomitante, (b) protección Fmoc, y (c) desprotección del grupo hidroxilo. Remoción y ciclización del grupo Fmoc: una solución de 10 mmol de compuesto cíclico en 30 mi de dietilamina al 30% en solución de acetato de etilo se agita a temperatura ambiente toda la noche, y después se concentra a sequedad. (a) Protección Fmoc A una solución bifásica de 10 mmol de compuesto en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, se añade 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido, seguido por 3.36 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas, se diluye con acetato de etilo, las capas se separan, y la capa orgánica se lava con agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. (b) Desprotección del grupo hidroxilo Para compuestos que contienen un grupo protector 'Bu: los compuestos se desprotegen con una solución de ácido trifluoroacético al 90% en diclorometano durante 1 -2 horas, y después se concentran a sequedad. El residuo se disuelve en acetato de etilo y se lava con una solución saturada de bicarbonato de sodio, se seca sobre sulfato de magnesio, y después se concentra. Para compuestos que contienen un grupo protector Trt éter: los compuestos se desprotegen mediante la adición de una solución de ácido trifluoroacético al 1 -10% en diclorometano que contiene tri-isopropil silano al 2-10%. La reacción es instantánea. La solución después se neutraliza al verter en solución saturada de bicarbonato de sodio. Las capas se separan, se secan sobre sulfato de sodio y se concentran. Compuestos (6) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

H RMN d (CDCI3): 1 .43 (s, 6H, CH3), 1 .50-1 .60 (br. M, 4H, CH2), 2.10 (s, 3H, CH3), 2.48 (s, 3H, CH3), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.92 (s, 2H, CH2), 3.08-3.47 (dos m, 3H, CH20, y CH2N), 3.57-3.97 (una serie de m, 3H, CH20 y CHN), 4.15-4.25 (br. m, 1 H, CH), 4.44-4.74 (br. m, HN 2H, CH2), 7.20-7.80 (una serie de br. m, 8H, fulveno), ^ NH rendimiento = 91 %, tR = 6.05 min, (M+ + 1 ) = 704.71 NHPbf 1H RMN d (CDCI3): 2.14-2.56 (dos, m 2H, CH2-lm), 2.90-3.90 (una serie de m, 4H, CH20), 4.0-4.74 (una serie de m, 4H, CHN, CH, CH2), 7.0-7.80 (una serie de múltiples, 25H, fulveno, Im, y Trt), rendimiento = 64%, tR = 5.27 min, (M+ + 1 ) = 675.08. 1H RMN d (CDCI3): 1 .29 (s, 9H, lBu), 2.47-2.74 (una serie de m, 2H, CH2Ph), 2.90-3.04 (m, 1 H, CH2Ph), 3.06-3.45 (tres m, 6H, CH2O, y CH2N), 3.89-4.29 (tres m, 2H, CH y CHN), 4.32-4.42 (m, 1 H, CHN), 4.56-4.66 (m, 2H, CH2), 6.81 -7.80 (una serie de m, 12H, fulveno, y Ph), rendimiento = 71 % (M+ + 1 ) = 515.81 0 'Bu H RMN d (CDCI3): 1 .00 % 1 .10 (dos s, 9H, 'Bu), 3.0- 3.74 (cuatro br. m, 7H, CH20, CH2N y CHN), 3.86-4.26 (una serie de m, 2H, CHN y CH), 4.42-4.68 (br. d, 2H, CH2), 7.26-7.80 (una serie de br. m, 8H, fulveno), rendimiento = 55% (M+ + 1 ) = 439.08 Síntesis de ácido 4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazina-2- carboxílico (7): compuestos (7) se preparan como se describe en el método A.

Compuestos (7) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

R Datos analíticos para compuestos (7) 1H RMN d (CDCI3): 1 .08-1.20 (br. pico, 1 .5H, CH3), 1 .30-1.38 (br. pico, 1 .5H, CH3), 2.86-3.07 (br. m, 1 H, CH2N), 3.83-3.97 (br. m, 1 H, CH2N), 4.18-4.37 (una I serie de br. picos, 2H, CH y CHN), 4.40-4.74 (dos br, CH 3 picos, 3H, CH20, y CHN), 7.28-7.82 (una serie de m, 8H, fulveno), 8.92, 9.10 (br. s, 1 H, CO2H), rendimiento = 51 %, tR = 4.80 min, (M+ + 1 ) = 381 .57. H RMN d (CDCI3): 0.40-1 .60 (una serie de br. picos, 9H, CH, CH2 y CH3), 2.81 -3.09 (br. pico, 1 H, CH2N), 3.68-3.80 (br. pico, 2H, CHN), 3.96-4.32 (br. picos, 2H, CH y CNH), 4.48-4.68 (br. pico, CH20), 7.26-7.84 (una serie de m, 8H, fulveno), rendimiento = 50%, tR = 5.57 min, (M+ + 1 ) = 432.15. 1H RMN d (CDCI3): 3.77-3.99 (m, 1 H, CHN), 3.90-4.35 (una serie de m, 5H, CH2N, CH), 4.44-4.57 (d, 2H, I CH2), 7.3-7.82 (una serie de m, 8H, fulveno), H rendimiento = 48%, tR = 4.58 min, (M+ + 1 ) = 367.30. 1H RMN d (CDCI3): 0.69-1 .90 (una serie de br. picos, CH2 y CH3), 2.85-3.05 (br. pico, 2H, CH2N), 3.65-3.95 (dos br. picos, 1 H, CHN), 4.00-4.40 (dos br. picos, CH2N y CH) 4.41 -4.74 (br. pico, 3H, CH20 y CHN), 7.20-7.80 (una serie de br. m, 8H, fulveno), rendimiento = 70%, tR = 5.93 min, (M+ + 1 ) = 423.42. 1H RMN d (CDCI3): 2.51 -3.06 (una serie de m, 2H, Ch2-CO), 3.85-4.86 (una serie de m, 7H, CH2N, CHN, CH y CH20), 7.0-7.78 (una serie de br. m, 23H, fulveno y Trt), rendimiento = 30%, tR = 7.04 min, (M+ + 1 ) = NHTrt 666.79. 1H RMN d (CDCI3): 1 .74-2.46 (una serie de br. m, 4H, CH2-CO, y CH2), 3.78-4.06 (dos m, 2H, CH2N), 4.16- 4.68 (una serie de br. m, 5H, CHN, CH y CH20), 7.14- 7.82 (una serie de br. m. 23H, fulveno, y Trt), rendimiento = 47%, tR = 7.1 1 min, (M+ + 1 ) = 680.33.

NH /Trt Método E Ester metílico del ácido (2-Fmoc-amino-3-hidroxi-propil-Cbz-amino)-2-sustituido acético (15) se prepara mediante aminación reductiva de serinal Fmoc (OR') (9) con un a-aminoéster (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. La amina secundaria se protege con bencilcloroformiato, y después el grupo hidroxilo desprotegido con solución de ácido trifluoroacético. Compuestos (15) después se desprotege Fmoc. Los intermedios de aminoéster ciclizados inmediatamente para formar 6-hidroximetil-piperazin-2-onas 4-Cbz-3-sustituidas (16). Se prepara 6-hidroximetil-piperazin-2-onas Fmoc 3-sustituidas (6) por intercambio de grupo protector, y después se oxida a los productos deseados (7) como se describe en el método A. Método E (9) (2) ( 16) Fmoc (6) oxidación Síntesis de éster metílico el ácido (2-Fmoc-amino-3-hidroxi-propil-Cbz-amíno)-2-sustituido acético (15): una suspensión de 67 mmol de clorhidrato de aminoéster (2), y 20.9 mmol de hidróxido de potasio sólido en 80 mi de metanol se agita a temperatura ambiente durante 25 minutos, y después se añade una suspensión de (9) en 250 mi de metanol. La mezcla de reacción se agita durante 1 .5 horas, seguido por la adición lenta de 70 mi de cianoborohidruro de sodio 1 N en tetrahidrofurano. La reacción se agita toda la noche, y después se concentra. El residuo se divide entre 300 mi de tetrahidrofurano y 50 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separan, y la capa orgánica se neutraliza con una solución de 239 mmol de bicarbonato de sodio en 50 mi de agua, y después 66 mmol de cloroformiato de bencilo se añaden lentamente, y la reacción se agita durante 3 horas, se diluye con 200 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El residuo se disuelve en una solución de ácido trifluoroacético en diclorometano, y se agita a temperatura ambiente durante 2 horas. La solución se vierte sobre 200 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio. Las capas se separan, y la capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los compuestos (1 5) se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de 4-Cbz-6-h¡droximetil-3-sustituido-piperazin-2-onas (16): una solución de 24 mmol de (15) en 100 mi de dietilamina al 30% en acetato de etilo se añade a temperatura ambiente toda la noche, y después se concentra a sequedad. Los compuestos se purifican mediante cromatografía de columna en gel de sílice.

La síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustitu¡da-piperazin-2-onas (6): Una suspensión de 15 mmol de (16), y 1 .8 g de paladio sobre carbón al 10% en 50 mi de etanol se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica hasta que HPLC muestra que la reacción está completada. La mezcla entonces se filtra a través de celite, se concentra, y el residuo se disuelve en 35 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, y entonces 62 mmol de bicarbonato de sodio sólido se añaden, seguido por 16 mmol de Fmoc-CI, y la mezcla se agita durante 3 horas, se diluye con 100 mi de acetato de etilo y 10 mi de agua. Las capas se separan, y la capa orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los compuestos (6) se purifican mediante cromatografía de columna en gel se sílice.

La síntesis del ácido 4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazina-2-carboxílico (7): compuestos (7) se preparan como se describe en el método A, y se purifican por medio de cromatografía de columna en gen de sílice.

Método F Esteres metílicos de ácido (2-Cbz-amíno-3-benciloxi-propilamino)-2-sustituido acético (20) se preparan por medio de aminación reductiva de Cbz serinal (OBn) (19) con un a-amino éster (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. El Cbz O-bencilo serinal (19) requerido para la aminación reductiva se obtiene por medio de oxidación de Cbz serinol (OBn) (18) con periodinano Dess-Martin. La hidrogenación de (20) seguida de ciclización proporciona 6-hidroximetil-piperazin-2-onas 3-sustituidas las cuales entonces se protegen Fmoc a hidroximetil-piperazin-2-onas 4-Fmoc-3-sustituidas (6). Los productos finales (7) se obtienen como se describe en el método A.

Método F O ( 1 7 ) ( 1 ) ( 1 9 ) 0 ) ( 20) oxidaiion (6) La síntesis de CBz-serinol (OBn) (18): El compuesto (18) se prepara como se describe para el compuesto (13). El compuesto (18) se obtiene con un rendimiento del 79% después de la purificación por cromatografía de columna en gel de sílice. 1 H RMN d (CDCI3): 3.57-3.74 (dos m, 3H, CHN, y CH2O), 3.76-3.96 (dos m, 2H, CH2O), 4.50 (s, 2H, CH2O), 5.10 (s, 2H, CH2O), 5.40-5.50 (br. d, 1 H, NH), 7.22-7.38 (m, 10H, Ph); HPLC tR= 5.33 min, (M+ + 1 ) = 337.64. La síntesis de Cbz serinal (OBn) (19): el compuesto (19) se prepara como se describe para el compuesto (9). A una solución de 80 mmol de Cbz-O-Bn serinol (18) en 200 mi de diclorometano seco, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden 88 mmol de periodinano Dess-Martin, y la reacción se agita durante 2.5 horas, y posteriormente se templa por medio de adición de 400 mi de solución de tiosulfato de sodio acuosa al 10%. Las capas se separan, y la capa orgánica se concentra, se diluye con 300 mi de etil éter, y se lava tres veces con una solución acuosa saturada de bicarbonato que contiene tiosulfato de sodio al 10%, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El compuesto (19) se obtiene con un rendimiento crudo al 99%, y se usa sin purificación adicional. 1H RMN d (CDCI3): 3.69-3.78 (dd, 1 H, CH20), 3.99-4.06 (dd, H, CH20), 4.37-4.46 (m, 1 H, CHN), 4.47-4.52 (d, 2H, CH20), 5.14 (s, 2H, CH20), 5.65-5.75 (br. d, 1 H, NH), 7.14-7.48 (una serie de m, 9H, Ph), 7.98-8.08 (dd, 1 H, Ph), 9.63 (s, 1 H, CHO). La síntesis de ésteres metílicos de ácido (2-Cbz-amino-3-benciloxi-propilamino)-2-sustituido acético (20): Los compuestos (20) se preparan como se describe para el compuesto (10), pero usando Cbz serinal (19) como el aldehido. Los compuestos (20) se purifican por medio de cromatografía de columna de gel de sílice.

R Datos analíticos para los compuestos (20) 1H RMN d (CDCI3): 1 .30 (s, 9H, 'Bu), 2.50-2.96 (m, 3H, CH2Ph, y CH2N), 3.28-3.54 (m, 3H, CH2N, y CH2O), 3.59 y 3.61 (dos s, 3H, CH30), 3.68-3.86 (m, 1 H, CHN), 4.41 -4.45 (d, 2H, CH20), 5.08 (s, 2H, CH20), 5.25-5.37 (br, t, 1 H, NH), 6.84-6.88 (d, 2H, Ph), 6.98-7.04 (d, 2H, Ph), 7.24-7.37 (m, 10H, Ph), rendimiento = 50%, (M+ + 1 ) = 549.35.

La síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituida-piperazin-2- onas (6): Una suspensión de 38 mmol de (20) en 160 mi de etanol, 38 mi de ácido clorhídrico 1 N, y 20 g de paladio sobre carbono al 10% se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica hasta que HPLC muestre que la reacción se termine. La mezcla entonces se filtra a través de celite, y se concentra a sequedad. El residuo se diluye con 75 mi de tetrahidrofurano y se neutraliza con una solución saturada de bicarbonato de sodio. 106 mmol de bicarbonato de sodio sólido, y 53 mmol de cloruro de Fmoc se añaden, y la reacción se agita a temperatura ambiente hasta que HPLC muestre que la reacción se termine, se diluye con 300 mi de acetato de etilo y 300 mi de salmuera. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava dos veces con salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El producto (6) se purifica por medio de cromatografía de columna de gel de sílice.

La síntesis de ácido 4-Fmoc-5-sustituida-6-oxo-piperazina-2- carboxílico (7): los compuestos (7) se preparan como se describe en el método A.

Síntesis de andamios de cetopiperazina 2,2-disustituidas que imitan aminoácidos sin las cadenas laterales funcionalizadas (Método G) La síntesis de andamios de ácido 4-Fmoc-5-sustítuida-6-oxo-piperazina-2-metil-2-carboxílico que se asemejan a aminoácidos sin cadenas laterales funcionalizadas se realiza usando el método G. Los ésteres terc-butílicos del ácido 2-Boc-amino-3-metoxicarbonil-1 -sustituida-metilamino-2-metil-propiónico (23) se preparan por medio de aminación reductíva de éster metílico del ácido 2-Boc-amino-2-metil-3-oxo-propiónico (22) con un a-amino éster (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. El Compuesto (22) requerido para la aminación reductíva se obtiene por medio de oxidación de a-metil-Boc serina terc-butil éster (21 ) con periodinano Dess-Martin. El grupo Boc de (23) se remueve con cloruro hidrógeno 2N en dioxano, y los amino ésteres ciclizados a ésteres ter-butílicos del ácido 5-sustituido-6-oxo-piperazina-2-metil-2-carboxílico (24), que se protegen con cloruro de Fmoc para dar ésteres terc-butílicos del ácido 4-Fmc-5-sustituido-6-oxo-piperazina-2-metil-2-carboxílico, que se desprotegen con ácido trifluoroacético para dar los productos finales (25).

Método G (21) (2) (23) (25) La síntesis de éster terc-butílico del ácido 2-Boc-amino-2-metil-3-oxo-propiónico (22): la oxidación de éster terc-butílico serina Boc a-metilo (21 ) se realiza usando periodinano Dess-Martin como se describió anteriormente proporciona el producto deseado (22) con un rendimiento crudo de 96%. El compuesto se usa sin purificación adicional en la siguiente etapa. H RMN d (CDCI3): 1 .44 (s, 18H, lBu), 1 .46 (s, 3H, CH3), 5.63-5.70 (br, s, 1 H, NH), 9.5 (s, 1 H, CHO). La síntesis de éster terc-butílico del ácido 2-Boc-amino-3-metoxicarbonil-1 -sustituido-metilamino-2-metil-propiónico (23): Los compuestos (23) se preparan usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (10), pero usando el compuesto (22) como el aldehido. Los compuestos (23) se purifican por medio de cromatografía de columna en gel de sílice.

R Datos analíticos para los compuestos (23) 1H RMN d (CDCI3): 1 .40-1 .46 (dos s, 21 H, CH3 y (Bu), 2.60-2.72 (br, m, 1 H, CH2Ph), 2.82-3.00 (m, 3H, CH2Ph, y CH2N), 3.32-3.43 (t, 1 H, CHN), 3.65 (s, 3H, CH3), 5.62 (br, s, 1 H, NH), 7.13-7.32 (m, 5H, Ph), rendimiento = 69%, (M+ + 1 ) = 436.98.

La síntesis de ácido 2-metil-6-oxo-5-sustitu¡do-p¡peraz¡na-2- carboxílico (25): una solución de 4 mmol de (23) en 8 mi de cloruro de hidrógeno en díoxano se agita a temperatura ambiente durante 5 horas, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se suspende en 20 mi de tetrahidrofurano, se neutraliza con 10 mmol de trietilamina, y se agita a 60°C durante 2 días. Entonces se concentra a sequedad, se resuspende en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, bicarbonato de sodio sólido se añade para ajustar el pH a básico, seguido por 5.6 mmol de cloruro de Fmoc sólido, y la mezcla de reacción se agita durante la noche a temperatura ambiente, el pH se ajusta a 1 con solución de ácido clorhídrico N, se diluye con 100 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se lava con 2 x 100 mi de salmuera, se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra. El residuo se disuelve en 10 mi de ácido trifluoroacético al 50% en diclorometano, y la solución se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. El solvente se concentra, y los productos (25) se purifican por medio de cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de andamios de cetopiperazina 2,2-disustituida que imitan aminoácidos con las cadenas laterales funcionalizadas (Método H) La síntesis de andamios de ácido 4-Fmoc-5-sustituida-6-oxo-piperazina-2-metil-2-carboxílico que se asemejan a aminoácidos con cadenas laterales funcionalizadas se realiza usando el método H. El éster metílico del ácido 2-Alloc-amino-3-metoxicarbonil-1 -sustituido-metilamino-2-metil-propiónico (30) se prepara por medio de aminación reductiva de éster metílico del ácido 2-Alloc-amíno-2-metil-3-oxo-prop¡ónico (28) con un a-amino alil éster (29), usando cíanoborohidruro de sodio o triacetoxíborohidruro de sodio como el agente de reducción, seguido por la protección de la amina secundaria con bencilcloroformiato. El Compuesto (28) requerido para la aminación reductiva se obtiene por medio de oxidación de (27) con periodinano Dess-Martin. El alil éster y los grupos alloc de análogos (30) se remueven con tetrakistrifenil fosfina paladio (0) y los aminoácidos ciclizados por medio de la reacción com un reactivo de acoplamiento de péptido para dar ésteres metílicos del ácido 5-sustituído-6-oxo-piperazina-2-metil-2-carboxílico (31 ). Se obtienen los ácidos 4-Fmc-5-sustituido-6-oxo-píperazina-2-metil-2-carboxíl¡co (25) por medio de saponificación del éster metílico, seguido por la protección de intercambio de grupo.

Método H 126 j (27) Penodinano Dess-Martin F McOll. t.a..1h t Nn NBH-,, M OH OAlilo 3. Cb/.-CU itF-lhí) Í2hl (29) OAlilo 30) La síntesis de éster metílico Alloc a-metilo serina (27): una solución de 8 mmol de Boc a-metil serina (26), 1 .0 g (12 mmol) de bicarbonato de sodio sólido, y 1.0 mi (16 mmol) de yodometano en 8 mi de dimetilformamida seca, mantenida bajo nitrógeno se agita durante la noche. La mezcla de reacción entonces se vierte sobre 50 mi de agua, y se extrae con 50 mi de dietil éter, y se lava con 1 x 20 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El residuo se disuelve en 20 mi de ácido trifluoroacético al 90% en diclorometano, y la solución se agita a temperatura ambiente durante 3 horas, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 35 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, seguido por la adición de 30 mmol de bicarbonato de sodio sólido, y la adición lenta de 12 mmol de cloroformiato de alilo. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, se diluye con 50 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica entonces se lava con 1 x 10 mi de bicarbonato de sodio saturado, y 1 x 10 mi de ácido clorhídrico 1 N, y 1 x 10 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El compuesto (27) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis de éster metílico de ácido 2-alloc-amino-2-metil-3-oxo-propiónico (28): Oxidación de éster metílico de alloc a-metil serina (27) se realiza usando periodínano Dess-Martin como se describió anteriormente para producir el producto deseado (28). La síntesis de éster arílico del ácido 2-alloc-amino-3-metoxicarbonil-1 -sustituido-metil-Cbz-amino-2-metil-propiónico (30): El compuesto (30) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para los compuestos (15), pero usando el compuesto (28) como el aldehido. La síntesis de éster metílico del ácido 4-Cbz-2-metil-6-oxo-5-sustituido-piperazina-2-carboxílico (31 ): A una solución de 10 mmol de compuesto (30) en 30 mi de diclorometano, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden 2 equivalentes de fenilsilano y 0.3 equivalentes de tetrakis-trifenilfosfina paladio (0), y la solución agitada durante 2 horas, y entonces 1 1 mmol de TBTU, y 14 mmol de N-metil-morfolina se añaden, y la solución agitada a temperatura ambiente durante 2 horas, y entonces se concentra a sequedad. La síntesis de ácido 4-Fmoc-2-metil-6-oxo-5-sustituído- piperazina-2-carboxílico (25): A una solución de 10 mmol de compuesto (31 ) en 25 mi de metanol, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añade lentamente, 1 1 mmol de solución de hidróxido de sodio 1 N, y la reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche, se neutraliza con 21 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, 1 g de paladio sobre carbón al 10% se añade, y la suspensión hidrogenada a temperatura ambiente y presión atmosférica durante 3 horas. La suspensión se filtra a través de celite y se concentra. El residuo se re-disuelve en 25 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, seguido por la adición de 30 mmol de bicarbonato de sodio sólido, y 10 mmol de cloruro de Fmoc, y la reacción se agita a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 2 horas. La reacción entonces se diluye con 50 mi de acetato de etilo, y se acidifica con solución de ácido clorhídrico N. Las capas entonces se separan, y la capa orgánica se lava con 1 x 20 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los compuestos (25) se purifican por cromatografía de columna en gel de sílice.

Síntesis de andamios de ácido (5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)-acético (Métodos I, J, K) Las síntesis de andamios de ácido (5-sustituído-6-oxo-piperazín-2-il) se realizan por medio de varios métodos.

Método I (3-protegido-amino-4-(metoxicarbonil-sustituido-metilamino)-butiratos de tere-butilo) (35) se preparan por medio de aminación reductiva de 3-protegido-amino-4-oxo-butirato de tere-butilo (34) con a-amino ésteres (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. El 3-protegido-amino-4-oxo-butirato de tere-butilo (34) requerido para la aminación reductiva se prepara por medio de reducción de hidruro de aluminio litio (LAH) de los derivados amida Weinreb (33). Los análogos de (3-protegido-amino-4-(metoxicarbonil-sustituido-metilamino)-butirato de tere-butilo (35) entonces se desprotege, cicliza, y Fmoc protegido para dar (5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)-acetatos de tere-butilo, que entonces se desprotegen para proporcionar los productos finales (37).

Método I (37) La síntesis de amida Weinreb Asp-(O'Bu) amino-protegido (33): los compuestos (33) se preparan usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (14).

La smiesis ae ¿-proiegiao-amino-4-oxo-Duuraio ae lerc-Dumo (34): los compuestos (34) se preparan usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (9).

La síntesis de 3-protegido-amíno-4-(metoxicarbonil-sustituido-metilamino)-but¡rato de tere-butilo (35): los compuestos (35) se preparan usando un procedimiento similar a uno descrito para compuestos (10), pero usando compuestos (34) como el aldehido.

La síntesis de (4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)-acetato de terc-butilo (36): Para los compuestos que contienen grupo protector amino Fmoc, una solución de 10 mmol de compuesto (35) en 30 mi de dietil amina al 30% en solución de acetato de etilo se agita a temperatura ambiente durante la noche, y entonces se concentra a sequedad. Para los compuestos que contienen grupo protector amino Cbz, una solución de 10 mmol de compuesto (35) en 30 mi de etanol se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica durante 2 horas, se filtra a través de celite, y se concentra a sequedad. Para protección Fmoc, el residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 3.3 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas y se diluye con acetato de etilo. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Los compuestos (36) se purifican por cromatografía de columna en gel de sílice.

La síntesis de (4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)-acetato (37): los compuestos (36) se desprotegen con solución de ácido trifluoroacético al 90% en diclorometano durante 3 horas, y entonces se concentra a sequedad. Los productos finales (37) se purifican por medio de cromatografía de columna en gel de sílice.

R Datos analíticos para compuestos (37) H RMN d (CDCI3): 1 .82-2.13 (br, t, 1 H, CHN), 2.32- 2.53 (br, d, 1 H, CH2CO), 2.63-2.81 (br, d, 1 H, CH2CO), 2.90-3.92 (dos br, m, CH2Ph), 3.38-3.59 (br, m, 1 H, CH2N), 3.66-3.85 (br, m, 1 H, CH2N), 3.95-4.24 (dos br de superposición, picos, 2H, CHN, CH), 4.30- 4.93 (br, d, 2H, CH20), 6.84-7.82 (una serie de m, 13H, fulveno, y Ph), 8.08-8.25 (BR, D, 1 h, CO2H), rendimiento = cuantitativo, tR= 5.57 min, (M+ + 1 ) = 471 .07. 1H RMN d (CDCI3): 0.72-1 .92 (cinco br, m, 9H, CH2) y CH3), 2.14-2.70 (dos br m, 3H, CH2CO, y CHN), 3.26- 3.62 (dos br, m, 1 H, CH2N), 3.70-3.90 (br, m, 1 H, CH2N), 4.03-4.30 (dos m, 2H, CHN y CH), 4.42-4.82 (br, m, 2H, CH20), 7.28-7.82 (una serie de m, 8H, fulveno), 7.97 (s, 1 H, CO2H), rendimiento = 90%, tR= 5.61 min, (M+ + 1 ) = 437.76.

Método J 3-Fmoc-amino-4-(metoxicarbonil-sustituido-metilamino)-butiratos de difenilmetilo (41 ) se preparan por medio de aminación reductiva de 3-Fmoc-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (40) con a-amino ésteres (2), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción. El 3-Fmoc-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (40) requerido para la aminación reductiva se prepara por medio de reducción de hidruro de aluminio litio del derivado amida Weinreb (39), que se ha formado de derivado de éster a-alilo del ácido Fmoc-aspártico disponible comercialmente (39) por medio de protección del ß-éster bajo condiciones Mitsunobu. El alil éster se remueve usando catalizador de paladio (0), seguido por formación de amida Weinreb usando TBTU como el agente de acoplamiento. 3-Fmoc-amino-4-(metoxicarbonil-sustituido-metilamino)-butírato de difenilmetilo (41 ) entonces se desprotege Fmoc, cicliza, se remueve difenilmetil éster por medio de hidrogenación, seguido por protección Fmoc para dar el producto final ácido (4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)- acético (37).

Método J o 1. Ph,C H-O L Ph3P, DIAD 2. Pd((Ph-P)4, CH,C12, NMM, FTOAc OH 3. G?? ??, NMM. CU , CU. 4. CI-L-N-OCH, F mocHN OAlilo O 38) FmocH FmocHN O ( ¿> i ) Síntesis de amida Weinreb Fmoc-Asp-(OCHPh2) (39) solución de 5.1 g (13.0 mmol) de a-alil éster de ácido Fmoc-aspártico (38) en 30 mi de tetrahidrofurano seco, que contiene 3.4 g (13 mmol) de trifenilfosfina, y 2.41 g (13.1 mmol) de difenilmetanol, mantenida a 0°C bajo nitrógeno, se añade lentamente 2.6 mi (13.4 mmol) de diispropil azodicarboxilato. El baño de hielo se remueve, y la reacción se agita a temperatura ambiente durante la noche, se concentra a sequedad, y entonces se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. 1H RMN d (CDCI3): 2.96-3.06 (dd, 1 H, CH2CO), 3.15-3.26 (dd, 1 H, CH2CO), 4.18-4.76 (una serie de m, 3H, CH, CH2), 5.14-5.32 (m, 1 H, CHN), 5.76-5.86 (m, 1 H, CHO), 7.20-7.80 (una serie de m, 18H, fulveno, y P ); HPLC tR= 7.68 min, (M+ + Na+) = 583.90. El producto (9.8 mmol) entonces se disuelve en 40 mi de una solución de diclorometano:ácido acético:N-metil morfolina a 37:2:1 , que contiene 1 .5 g ( 1 .3 mmol) de tetrakis trifenilfosfina paladio (0), y la solución se agita a temperatura ambiente durante la noche, se concentra a sequedad, y se divide entre 100 mi de acetato de etilo y 30 mi de agua. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con 1 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de sodio, y se concentra. El residuo se suspende en 20 mi de diclorometano seco, y 1.65 mi (15 mmol) de N-metil morfolina, y 4.07 g (12.7 mmol) de TBTU se añaden, y la suspensión se agita a temperatura ambiente durante 20 minutos, seguido por la adición de 1 .65 mi (15 mmol) de N-metil morfolina, y 1 .52 g (1 5.6 mmol) de sal clorhidrato de ?,?-dimetil hidroxil amina. La suspensión se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, se concentra, se divide entre 100 mi de acetato de etilo y 50 mi de agua. La capa orgánica se lava con 1 x 30 mi de agua, 1 x 30 mi de solución saturada de bicarbonato de sodio, y 1 x 30 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, se seca sobre sulfato de sodio, y se concentra. El producto se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. H RMN d (CDCI3): 2.76-2.88 (dd, 1 H, CH2CO), 2.89-3.00 (dd, 1 H, CH2CO), 3.16 (s, 3H, CH3N), 3.70 (s, 3H, CH30), 4.14-4.22 (dd, 1 H, CH), 4.28-4.40 (t, 2H, CH2), 5.07-5.16 (dd, 1 H, CHN), 5.69-5.76 (d, 1 H, CHO), 7.24-7.8 (una serie de m, 18H, fulveno, y Ph); HPLC tR= 7.08 min, (M+ + Na+) = 587.03. La síntesis de 3-Fmoc-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (40): El compuesto (40) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (9). La síntesis de 3-Fmoc-amino-4-(metoxicarbonil-sustitu¡do-metilamino)-butirato de difenilmetilo (41 ): compuestos (41 ) se preparan usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (10), pero usando el compuesto (40) como el aldehido.

La síntesis del ácido (4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il)-acético (37): Una solución de 10 mmol de compuesto (14) en 30 mi de dietilamina al 30% en acetato de etilo se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. La solución entonces se concentra a sequedad, se re-disuelve en 2 x 30 mi de acetato de etilo, y se re-concentra. El residuo se disuelve en 50 mi de etanol, y 20 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, y se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica durante la noche, se filtra a través de celite, y se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 3.3 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas, se diluye con 100 mi de acetato de etilo, las capas se separan, y la capa orgánica se lava con 2 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El producto se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice.

Método K Las síntesis de andamios de ácido (5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-¡l)-acético se lleva acabo de éster a-terc-butílico del ácido Fmoc-aspártico disponible comercialmente (42). El éster a-terc-butílíco del ácido Fmoc-aspártico se reduce de éster a-terc-butílico de Fmoc-Homoserina con borohidruro de sodio vía el anhídrido mezclado, seguido por la protección del alcohol con bromuro de bencilo para dar el éster a-terc-butílico bencil éter de Fmoc-Homoserina (43). El éster terc-butílico entonces se remueve con ácido trifluoroacético, y el ácido se reduce al alcohol con borohidruro de sodio vía el anhídrido mezclado para proporcionar 2-Fmoc-amino-4-benciloxi-1 -butanol (44). El alcohol (44) entonces se convierte a 2-Fmoc-amino-4-benciloxibutanal (45) usando periodinano Dess-Martin como se describió previamente. La aminación reductiva de 2-Fmoc-amino-4-benciloxibutanal (45) y a-amino éster (2) proporciona el éster metílico del ácido (2-Fmoc-amino-4-benciloxi-butilamino)-2-sustituido acético (46). La desprotección Fmoc con dietilamina proporciona la amina primaria libre que cicliza a 6-benciloxietil-3-sustituido-piperazin-2-ona de manera espontánea. El bencil éter se remueve por medio de hidrogenacion, y la amina secundaria se protege como su derivado Fmoc para dar 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-onas (47). Finalmente, el alcohol primario se oxida al ácido para dar los productos finales (48) como se describe en el método A.

Método K o Periodinano Dess-Martin i ?) La síntesis de éster a terc-butílico de Fmoc-homoserina (OBn) (43): A una solución de 10.0 mmol de Fmoc Asp-O'Bu (42) en 50 mi de tetra h id rotura no seco, mantenida a -20°C bajo nitrógeno, se añade 1 .77 mi (12.7 mmol) de trietil amina, seguido por la adición lenta de 1 .57 mi (12.0 mmol) de isobutilcloroformiato. La mezcla se agita durante 30 minutos, y entonces se añade lentamente sobre una solución enfriada con hielo de 3.77 g (99.6 mmol) de borohidruro de sodio en 10 mi de agua, manteniendo la temperatura debajo de 5°C. La reacción se agita a 0°C durante 15 minutos, y entonces se templa con solución de ácido clorhídrico 1 N. La mezcla de reacción se diluye con 100 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica se lava con 2 x 25 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, 2 x 25 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio y se concentra, y purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. El compuesto purificado entonces se disuelve en 30 mi de tetrahidrofurano, y 12 mmol de dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral se añade, seguido por 0.2 mmol de yoduro de tetrabutilamonio y 12 mmol de bromuro de bencilo, y la mezcla se agita durante la noche, se templa con 50 mi de bicarbonato de sodio acuoso saturado, y se extrae con 100 mi de acetato de etilo. El compuesto entones se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis de 2-Fmoc-amino-4-benciloxi-1 -butanol (44): La desprotección del éster terc-butilico usando ácido trifluoroacético al 90% se realiza como se describe para el compuesto (37) en el método I, seguido por la reducción del ácido al alcohol con borohidruro de sodio vía el intermedio anhídrido mezclado como se describe para el compuesto (13). La síntesis de 2-Fmoc-amino-4-benciloxi-1 -butanal (45): El 2-Fmoc-amino-4-benciloxi-1 -butanol (44) se oxida al aldehido usando periodinano Dess-Martin como se describe para la síntesis de (9). La síntesis del éster metílico del ácido (2-Fmoc-amino-4-benciloxi-butilamino)-2-sustítuido acético (46): La aminación reductíva de 2-Fmoc-amino-4-benciloxi-butanal (45) con un a-amino éster (2) usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción se realiza como se describe para la síntesis de (10).

La síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustitu¡do-piperaz¡n-2-onas (47): La desprotección Fmoc de éster metílico del ácido (2-Fmoc-amino-4-benciloxi-butilamino)-2-sustituido acético (46) con ciclización concomitante, seguido por la des-bencilación y re-protección Fmoc se lleva a cabo como se describe para el compuesto (37) en el método J. La síntesis de ácido 4-Fmoc-5-sustituido-6-oxo-piperazin-2-il-acético (37): La oxidación de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-onas (47) al ácido se realiza como se describe en el método A. La elección del agente de oxidación usado se basa en la naturaleza del grupo en la posición 5.

Síntesis de andamios del ácido 3-oxof1 ,41-diazepano-5-carboxílico 2-sustituido (métodos L, M, N) La síntesis de andamios del ácido 3-oxo[1 ,4]-diazepano-5-carboxílico 2-sustituido se realiza usando varios métodos.

Método L 2-Cbz-amino-4-(benciloxícarbonilo-sustituido-metil-Boc amino)-butiratos de tere-butilo (52) se preparan por medio de aminación reductiva de Cbz-2-amino-4-oxo-butirato de tere-butilo (50) con amino éster (51 ), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción, seguido por protección Boc de la amina secundaria. El Cbz-2-amino-4-??? de tere-butilo (50) requerido para la aminación reductiva se prepara por reducción de hidruro de aluminio litio del derivado de amida Weinreb (49). El anillo diazepina se forma por medio de la remoción del grupo de protección, seguido por ciclización con un péptido que forma un reactivo para dar (53). Finalmente, los ácidos 3-oxo[1 ,4]-diazepano-5-carboxílico 4-Fmoc-2-sustituido (54) se forma por medio del intercambio del grupo de protección.

Método L 1 49 Me La síntesis de Cbz-Asp-(Weinreb amida)-0'Bu (49) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (14). La síntesis de 3-Cbz-amino-4-oxo-butirato de tere-butilo (50): el compuesto (50) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (9). La síntesis de 2-Cbz-amino-4-(benciloxicarbonil-sustituido-metilamino)-butirato de tere-butilo) (52): La aminación reductiva de se realiza con un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (10). La amina secundaria se protege por medio de la reacción de la mezcla cruda con 2 equivalentes de bicarbonato Boc en tetrahidrofurano. La síntesis de 1 -Boc-2-sustituido-3-oxo-[ ,4]-diazepano-5-carboxilato de tere-butilo (53): Una solución de 10 mmol de compuesto (52) en 30 mi de etanol se hidrogena a temperatura ambiente y presión atmosférica durante 2 horas, se filtra a través de celite, y se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 100 mi de diclorometano y 1 .2 equivalentes de TBTU, y 2.6 equivalentes de N-metil-morfolina se añaden. La solución se agita a temperatura ambiente durante la noche, y entonces se concentra. El residuo se divide entre 50 mi de acetato de etilo y 25 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, se lava con 1 x 20 mi de una solución de bicarbonato de sodio saturada, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Síntesis de ácido 2-sustituido-3-oxo-[1 ,4]-diazepano-5-carboxílíco 1 -Fmoc (54): Una solución de 10 mmol de compuesto (53) en 10 mi de ácido trifluoroacético al 90% en diclorometano se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y entonces la solución se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 3.36 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas, y entonces se diluye con acetato de etilo. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con 2 x 50 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra.

Método M Los análogos dipeptídicos reducidos (60) se preparan por medio de aminacion reductiva de alloc-2-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (59) con amino éster (29), usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción, seguido por protección Cbz de la amina secundaria. El Alloc-2-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (59) requerido para la aminacion reductiva se prepara por reducción de hidruro de aluminio litio del derivado de amida Weinreb (58), que se prepara por medio del intercambio de grupo de protección de derivado de amida Weinreb (57). El anillo diazepina se forma entonces por medio de la remoción del grupo alloc, seguido por el cierre de anillo en presencia de un péptido que forma un reactivo. Se forman andamios de ácido 2-sustituido-3-oxo-[1 ,4]-diazepano-5-carboxílico (54) se forman por medio del intercambio del grupo de protección.

Método M Fmo (56) l . ?.„ EuN l ien EtOAc ??? 2. ,MI>xr-CI. NaHCO- ??G-?? ) e (58) (59) K OAIilo OAIilo !. ?'??????)., PliSiH. CH,U- 2. TBTU. MM.C.fl C l.

La síntesis de Fmoc-Asp- (Weinreb amida)-OCHPh2 (57): El compuesto (57) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (39). La síntesis de Alloc-Asp-(Weinreb amida)-OCHPh2 (58): Una solución de 10 mmol de compuesto (56) en 20 mi de dietilamina al 30% en acetato de etilo se agita durante 2 horas, y se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 13 mmol de Alloc-CI. La mezcla de agita durante 3 horas, y entonces se diluye con acetato de etilo. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El compuesto (58) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis de 3-alloc-amino-4-oxo-butirato de difenilmetilo (59): El compuesto (59) se prepara usando un procedimiento similar a uno descrito para el compuesto (9). La síntesis de 2-Alloc-amino-4-(aliloxicarbonil-sustituído-metilamino)-butirato de difenilmetilo (60): El compuesto 60 se prepara por medio de aminación reductiva usando un procedimiento similar a uno descrito para los compuestos (15), pero usando el compuesto (59) como el aldehido. El producto se purifica por medio de cromatografía de columna de gel de sílice. La síntesis de 1 -Cbz-2-sustituido-3-oxo-[1 ,4]-diazepano-5-carboxilato (61 ): A una solución de 10 mmol de compuesto (60) en 30 mi de diclorometano, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden 2 equivalentes de fenilsilano y 0.3 equivalentes de tetrakis-trifenilfosfina paladio (0), y la solución agitada durante 2 horas, y entonces 1 .2 equivalentes de TBTU, y 1 .3 equivalentes de N-metil-morfolina se añaden. La solución se agita a temperatura ambiente durante la noche y se concentra. El residuo se divide entre 50 mi de acetato de etilo y 25 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, se lava con 1 x 20 mi de una solución de bicarbonato de sodio saturada, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. Síntesis de ácido 2-sustituído-3-oxo-[1 ,4]-diazepano-5-carboxílico 1 -Fmoc (54): Una solución de 10 mmol de compuesto (61 ) en 30 mi de etanol se hidrogena a temperatura ambiente durante 2 horas, se filtra a través de celite, y entonces la solución se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 3.36 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas, y entonces se diluye con acetato de etilo. Las capas se separan, y la capa orgánica se lava con agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra.

Método N El éster ß-terc-butílico del ácido Fmoc-aspártico se reduce a éster ß-terc-butílico de Fmoc-Aspartanol (63) con borohidruro de sodio vía el anhídrido mezclado, seguido por la protección del alcohol con bromuro de alilo para dar el éster ß-terc-butílico alil éter de Fmoc-Aspartanol (64). El éster terc-butílico entonces se remueve con ácido trifluoroacético, y el ácido se reduce al alcohol con borohidruro de sodio vía el anhídrido mezclado para proporcionar 2-Fmoc-amino-4-al¡loxi-1 -butanol (65). El alcohol (65) entonces se convierte a 2-Fmoc-am¡no-4-bencilox¡butanal (66) usando periodinano Dess-Martin como se describió previamente. La aminación reductiva de 3-Fmoc-amino-4-aliloxibutanal (66) y a-amino éster (51 ), seguido por protección alloc en la amina secundaria, proporciona el éster bencílico del ácido (3-Fmoc-amino-4-aliloxi-butil-alloc-amino)-2-sustituido acético (67). 7-Aliloximetil-3-sustituido[1 ,4]-diazepan-2-onas Alloc (68) se forman por saponificación del éster bencílico, seguido por desproteccíón Fmoc con dietilamina para proporcionar la amina primaria libre que es ciclizada usando un agente de formación de péptido tal como TBTU. Los productos finales (54) se forman por medio de intercambio de grupo de protección: el aliléter y alloc se remueven por medio de paladio (0), y la amina secundaria se protege como su derivado Fmoc para dar 4-Fmoc-7-benciloximetil-3-sustituido-[1 ,4]-diazepan-2-onas seguido por la oxidación de alcohol primario al ácido para proporcionar los productos finales (54). La selección del agente de oxidación usada se basa en la naturaleza del grupo en la posición 2.

Método N Alil-Br. NalI. lHI FinucH ' Bu AlilC O 2. 'BuOCOCl, ??-?·, -20 sOfBu (64) Periodinano Dess-Martin < 51 AMIO FmocHN (66) ( 54 ) La síntesis del éster ß-terc-butílico de Fmoc-Aspartanol (63): El compuesto (63) se prepara como se describe para la síntesis del compuesto (13), usando el éster ß-terc-butílico del ácido Fmoc-Aspártico (62) como el material de inicio. La síntesis de éster terc-butílico del ácido 3-Fmoc-amino-4-aliloxi-butírico (64): A una solución de 10 mmol de (63) en 30 mi de tetrahidrofurano, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden12 mmol de dispersión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral, 2 mmol de yoduro de tetrabutilamonio y 13 mmol de bromuro de alilo, y la mezcla se agita durante la noche, se templa con 10 mi de bicarbonato de sodio acuoso saturado, y se extrae con 50 mi de acetato de etilo. La síntesis de 3-Fmoc-amino-4-aliloxi-1 -butanol (65): El compuesto (65) se prepara como se describe para la síntesis del compuesto (44). La síntesis de 3-Fmoc-amino-4-aliloxi-butanal (66): 3-Fmoc-amino-4-aliloxi-1 -butanol (65) se oxida al aldehido usando períodinano Dess-Martín como se describe para la síntesis de (9). La síntesis de ácido metílico del ácido (3-Fmoc-amino-4-aliloxi-butil-alloc-amino)-2-sustituido acético (67): La aminación reductiva de 3-Fmoc-amino-4-benciloxi-butanal (66) con un a-amino éster (51 ) usando cianoborohidruro de sodio o triacetoxiborohidruro de sodio como el agente de reducción como se describe para el compuesto (10), seguido por la protección de la amina secundaria como el derivado alloc, se realiza como se describe para el compuesto (15), pero usando con alilcloroformiato en lugar de bencil cloroformíato. La síntesis de 4-alloc-7-aliloximetíl-3-sustituido-[1 ,4]-díazepan-2-onas (68): Una solución de 10 mmol de éster metílico del ácido (3-Fmoc-amino-4-aliloxi-butil-alloc-amino)-2-sustituido acético (67), 20 mmol de carbonato de potasio en 20 mi de metanol, y 10 mi de agua se agita a temperatura ambiente durante 3 horas, se neutraliza con 21 mi de una solución de ácido clorhídrico 1 N, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de dietilamina al 30% en acetato de etilo y se agita durante 3 horas, y después se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 100 mi de diclorometano, y 12 mmol de TBTU y 24 mmol de N-metilmorfolina se añaden, y la solución agitada a temperatura ambiente durante la noche, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se divide entre 30 mi de acetato de etilo y 30 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, y entonces las capas se separan. La capa orgánica se lava con 30 mi de una solución de bicarbonato de sodio saturada, se seca sobre sulfato de magnesio, y se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis del ácido 4-Fmoc-2-sustituido-3-oxo-[1 ,4]-diazepano-5-carboxílico (54): A una solución de 10 mmol de compuesto (68) en 30 mi de diclorometano, mantenida a temperatura ambiente bajo nitrógeno, se añaden 2 equivalentes de fenilsilano y 0.3 equivalentes de tetrakistrifenilfosfina paladio (0), y la solución entonces se agita durante 2 horas, y se concentra a sequedad. La amina secundaria se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua, seguido por la adición de 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido, y 1 .2 equivalentes de Fmoc-CI y la solución bifásica se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, se diluye con 30 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La oxidación de 4-Fmoc-7-hidroximetil-3-sustituido-[1 ,4]-diazepan-2-onas al producto final (54) se realiza como se describe en el método A. La elección del agente de oxidación usado se basa en la naturaleza del grupo en la posición 2, como en el método A para la conversión de (6) a (7).

Síntesis de andamios de ácido 6-sustituido-5-oxo-piperazina-2-carboxílico (Método O) Las síntesis de andamios de ácido 6-sustituido-5-oxo-piperazína- 2- carboxílico que contienen cadenas laterales no funcíonalizadas en la posición 6 se realizan como se describe brevemente en el método O, iniciando de resina 3-Fmoc-am¡no-1 ,2-propan-diol 1 -cloro-tritil disponible comercíalmente (69) que se oxida a la cetona (70) usando periodinano Dess-Martin. La aminación reductíva de cetona (70) con un a amino éster (2) proporciona el éster metílico del ácido (1-aminometil-2-cloro-triloxi-etilamino)-2-sustituido acético unido a la resina (71 ), que se cicliza a 5-clorotritiloximetil- 3- sustítuido-piperazin-2-ona (72) después de desprotección de la amina. La reprotección de la amina secundaria, seguida por la escisión de la resina, proporciona Fmoc-5-hidroximetil-3-sustítuido-piperazin-2-ona (73) que se oxida a ácido 6-sustituido-5-oxo-píperazina-2-carboxílico (74) usando cualquiera de los procedimientos descritos en el método A.

Método O ( · - ) ( 74 ) La síntesis de 1 -amino-3-clortritiloxi-propan-2-ona (70): La oxidación de alcohol unido a resina (69) se realiza mediante oxidación de trióxido de azufre, oxidación de NMO/TPAP (N-metilmorfolina-N- óxido/tetrapropil amonio perrtenato) u oxidación PDC. Para la oxidación de trióxido de azufre, un procedimiento similar a uno descrito en Parkin, J.R. y Doering, W.V. , J. Am. Chem. Soc. 89:5505-5507 (1967) se usa. Para la oxidación de NMO/TPAP, a 0.3 mmol de alcohol unido a resina se añade una solución de 3 mmol de N-óxido de N-metilmorfolina en 10 mi de dimetilformamida seca, y entonces 0.06 mmol de perrutenato de tetrapropilamonio (TPAP) se añade a la suspensión de resina. La reacción se agita durante 80 minutos. El solvente es drenado, la resina se lava con tetrahidrofurano y diclorometano, y entonces se seca bajo vacío. Para la oxidación PDC, una suspensión de alcohol unido a resina en dicromato de piridinio 0.2 M en dimetilformamida se agita a 37°C durante 4 horas, el solvente es drenado, y la resina se lava con dimetilformamida, tetrahidrofurano, y diclorometano. La síntesis de éster metílico de ácido (1 -aminometil-2-cloro-tritiloxi-etilamino)-2-sustituido acético (71 ): La aminación reductiva de la cetona unida a resina (70) con aminoéster se realiza por uno de dos métodos diferentes. En un método, una solución de 2.6 mmol de a amino éster (2) en 20 mi de ácido acético 1 % en dimetilformamida se añade 2.6 mmol de triacetoxiborohidruro de sodio, seguido por la adición inmediata de 0.5 mmol de resina cetona-derivada (70), y la mezcla se agita durante 60 minutos, se enjuaga con metanol, etil amina di-isopropilo al 10%, dimetilformamida, y metanol. En un segundo método, una suspensión de 0.05 mmol de resina cetona-derivada (70) y clorhidrato de a amino-éster 2.0 M (2) en metanol, que contiene cianoborohidruro de sodio 0.05 M se agita a temperatura ambiente durante 5 horas, se drena, y se lava. La síntesis de 5-clorotritiloximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (72) : Una suspensión de 0.05 mmol de resina en 10 mi de pipehdina al 20% en dimetilformamida se agita a temperatura ambiente durante 2 horas. La síntesis de Fmoc-5-hidroximetil-3-sustituido-piperazin-2-ona (73) : Una suspensión de 0.05 mmol de (72) en 10 mi de diclorometano, que contiene 0.25 mmol de Fmoc-Cl y 0.25 mmol de trietil amina se agita a temperatura ambiente durante 6 horas, se drena, y se lava con diclorometano. La resina se re-suspende en 10 mi de ácido trifluoroacético al 95% en diclorometano, y la suspensión agitada durante 2 horas, y se filtra, y el filtrado se concentra. La síntesis del ácido Fmoc-6-sustituido-5-oxo-piperazína-2-carboxílico (74): Oxidación de (73) al producto deseado se realiza por medio de cualquiera de los procedimientos descritos para el método A.

Síntesis de aminoácidos ,a-dísustituidos (Métodos P y Q) En ciertos constructos de la invención, es posible y se contemplan emplear un residuo de aminoácido di-sustituido, tal como un aminoácido a, a-disustituido donde los sustituyentes son iguales o diferentes. En un aspecto, un aminoácido a, a-disustituido se emplea en la posición Aaa o Aaa8, en donde al menos una de las cadenas laterales del aminoácido a,a-disustituido es una cadena lateral de Nle, Ala, Leu, lie, Val, Nva, Met(O) o Met(02). Los siguientes métodos sintéticos P y Q describen la elaboración de a,a-di-n-butilglicina (ácido 2-amino-2-butil-hexanoico), en donde cada una de las cadenas laterales son -(CH2)3-CH3, y de este modo cada uno es el mismo que la cadena lateral de NIe. Sin embargo, se debe entender que métodos similares y esquemas se pueden emplear en la elaboración de otros aminoácidos a, a-disustituidos, donde los sustituyentes son iguales o diferentes. Adicionalmente, cualquier método para la elaboración de un aminoácido a, a-disustituido se puede emplear en la práctica de esta invención, y la práctica de esta invención no se limita a los métodos de los siguientes esquemas sintéticos. De este modo, cualquier método conocido en la técnica para la síntesis de aminoácidos , a-disustituidos se puede emplear en la práctica de esta invención. Lo siguiente muestra métodos alternos para la elaboración de aminoácidos a, a-disustituidos: Clark J.S. y Middleton M.D.: Synthesis of novel alpha-substituted and alpha.alpha-distributed amino acids by rearrangement of ammoniim ylides generated from metal carbenoids. Org. Lett. 4(5):765-8 (2002); Guiño M., Hii K.K.: Wang-aldehyde resin as a recyclable support for the synthesis of alpha, alpha-disubstituted amino acid derivatives. Org Biomol. Chem. 3(17): 3188-93 (2005); y Cota S., Behera M.: Synthesis and Modification of dibenzilglicine derivatives via the Suzuki-Miyaura cross-coupling reaction. J. Pept. Res. 64(2):72-85 (2004). (sO) La síntesis de di-n-butilglicina de benzoilo (80): A una solución de 10 mmol de benzoil glicina (75) en 20 mi de diclorometano, mantenida a 0°C bajo nitrógeno, se añade lentamente 12 mmol de ?,?'- diciclohexilcarbodiimida (DCC) , y la reacción se agita durante 2 horas para producir el compuesto (76). El sólido se filtra, y el filtrado se concentra. El residuo se disuelve en 15 mi de tetrahidrofurano, se enfría a 0°C, y entonces 24 mmol de hidruro de sodio se añade, seguido por 30 mmol de bromuro de n- butilo. La suspensión se agita a 0°C durante 2 horas y entonces se deja calentar a temperatura ambiente, y la solución se concentra a sequedad para dar el compuesto (77). Alternativamente, el compuesto (77) también se puede preparar a partir de norleucina de benzoilo (78) de una manera similar excepto que 12 mmol de hidruro de sodio y 15 mmol de bromuro de n-butilo se usan. El compuesto (77) se disuelve en metanol, 50 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N se añade, y la solución se agita durante 2 horas, y se concentra. El compuesto (80) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis de Fmoc di-n-butilglícina (81 ): 10 mmol de compuesto 80 se disuelve en 30 mi de dioxano, y 10 mi de solución de ácido clorhídrico 6N se añade, y la solución se calienta a reflujo durante la noche. La reacción se enfría a temperatura ambiente, se concentra a sequedad, se re-disuelve en 30 mi de tetrahidrofurano, y 10 mi de agua y 30 mmol de bicarbonato de sodio se añade, seguido por 15 mmol de Fmoc-Cl. La solución bifásica se agita durante 1 hora, y el tetrahidrofurano se remueve bajo vacío. La solución acuosa se extrae con 1 x 50 mi de dietil éter, se acidifica con solución de ácido clorhídrico 1 N, y se extrae con 2 x 50 mi de acetato de etilo. Las capas de acetato de etilo se combinan, se secan sobre sulfato de sodio, y se concentran. El compuesto (81 ) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. Métodos similares se pueden emplear al iniciar con cualquiera de los derivados aminoácidos apropiados (similar al compuesto 78), y al usar un reactivo alquil butilo apropiado, aril butilo o aralquil butilo, el esquema producirá una variedad de sustitutos de aminoácido disustituido (R, R') donde R y R' son diferentes.

Método Q La síntesis de Fmoc- a,a di-n-butil glicina (87): A una suspensión de 20 mmol de clorhidrato de éster glicina metilo (82), y 2 g de tamices moleculares en polvo en 40 mi de tetrahidrofurano seco, mantenida a temperatura ambiente, se añaden 24 mmol de hidroxido de potasio, seguido por 22 mmol de benzaldehído. La suspensión se agita durante 2 horas, se filtra, y el filtrado se concentra. El residuo se re-disuelve en 40 mi de tolueno seco, y entonces se añade a una suspensión de 60 mmol de hidruro de sodio en tolueno, seguido por la adición de 60 mmol de bromuro de n-butilo. La suspensión se agita durante 12 horas, seguido por la adición de 30 mi de una solución de ácido clorhídrico 6 N, se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y entonces las capas se separan. La sal clorhidrato de (84) obtenida de este modo se usa in situ para la preparación de (87). Para aislar (84) como la sal clorhidrato, la capa acuosa se concentra a sequedad y el producto se cristaliza a partir de metanol-éter seco. Alternativamente, el compuesto (84) se puede preparar a partir de clorhidrato de éster metílico de norleucina usando un procedimiento sintético similar excepto que 30 mmol de hidruro de sodio y 30 mmol de bromuro de n-butilo se usan para la conversión de (86) a (84). La mezcla acuosa de la forma clorhidrato del compuesto (84) como se obtiene anteriormente se calienta a reflujo durante 1 hora y entonces se enfria a temperatura ambiente. Se neutraliza con hidróxido de sodio sólido y entonces se diluye con 30 mi de tetrahidrofurano. Bicarbonato de sodio (30 mmol) se añade seguido por 15 mmol de Fmoc-CI. La solución bifásica se agita durante 1 hora, y el tetrahidrofurano se remueve bajo vacío. La solución acuosa se extrae con 1 x 50 mi de dietil éter, se acidifica con solución de ácido clorhídrico 1 N, y se extrae con 2 x 50 mi de acetato de etilo. Las capas de acetato de etilo se combinan, se secan sobre el sulfato de sodio, y se concentran. El compuesto (87) se purifica por medio de cromatografía de columna de gel de sílice. Mélodos similares se pueden emplear al iniciar con cualquier derivado de aminoácido apropiado (similar al compuesto 85), y al usar un reactivo alquil butil apropiado, aril butilo, o aralquil butilo el esquema producirá una variedad de sustitutos de aminoácido (R, R') disustituido donde R y R' son diferentes.

Síntesis de andamios (R, R') disustituidos (Método R) La invención provee además constructos en donde los sustitutos de aminoácido se emplean con dos grupos R, R y R'. El siguiente método describe la síntesis del ácido (R)-5,5-dibutil-6-oxo-piperazina-2-carboxílico Fmoc-protegido, donde R y R' son cada grupo correspondiente a un radical de cadena lateral norleucina. Puede parecer que el método posterior se puede modificar, en base en parte de los métodos anteriores, para producir sustitutos de aminoácido (R, R') disustituidos. Métodos similares se pueden emplear de tal manera que al iniciar con cualquier derivado de aminoácido apropiado (un compuesto similar al compuesto (84)) el esquema puede producir una variedad de sustitutos de aminoácido (R, R') disustituidos donde R y R' son diferentes.

Método R (8<>1 La síntesis de éster metílico del ácido (2-Fmoc-amino-3-terc-butoxi-propilamino)-2,2,di-n-butil acético (88): Una suspensión de 21 mmol de (84, esquema Q), y 2.9 mi (21 mmol) de trietil amina en 50 mi de tetrahidrofurano, se agita a temperatura ambiente durante 45 minutos, y entonces una solución de ~ 20 mmol de Fmoc(0-t-butil)-serinal crudo (9, esquema D) en 30 mi de tetrahidrofurano se añade, seguido por 1 .7 g de tamices moleculares en polvo 4Á, y la suspensión se agita durante 2 horas adicionales. 6.4 g (30 mmol) de triacetoxiborohidruro de sodio sólido se añade, y la suspensión se agita a temperatura ambiente durante la noche. La suspensión se diluye con metanol, los tamices moleculares se filtran, y el filtrado se concentra. El residuo se divide entre 100 mi de acetato de etilo y 50 mi de agua. La capa orgánica se seca sobre sulfato de sodio, se filtra, y se concentra. El compuesto (88) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. Síntesis de 4-Fmoc-6-hidroximetil-3,3-di-n-butíl-piperaz¡n-2-ona (89): Una solución de 10 mmol de compuesto (88) en 30 mi de dietilamína al 30% en acetato de etilo se agita a temperatura ambiente durante la noche, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en 20 mi de tetrahidrofurano y 10 mi de agua, y 2.52 g (30 mmol) de bicarbonato de sodio sólido se añade, seguido por la adición de 3.36 g (13 mmol) de Fmoc-CI. La mezcla se agita durante 3 horas, y se diluye con 50 mi de acetato de etilo, las capas se separan, y la capa orgánica se lava con 30 mi de agua, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. La mezcla cruda se disuelve en una solución de 10 mi de ácido trifluoroacético al 90% en diclorometano, y se agita 2 horas, y entonces se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en en acetato de etilo y se lava con 50 mi de una solución saturada de bicarbonato de sodio, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El compuesto (89) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice. La síntesis de ácido 4-Fmoc-5,5-di-n-butil-6-oxo-piperazina-2-carboxilico (90): A una solución de 8 mmol de alcohol (89) en 81 mi de acetonitrilo mantenida a temperatura ambiente, se añade solución reguladora de pH de fosfato (preparada con 0.72 g de fosfato de sodio monobásico y 1 .43 g de fosfato de sodio dibásico en 29.5 mi de agua), seguido por la adición de 0.33 g (2.1 mmol) de TEMPO, y 1 .86 g (16.5 mmol) de clorito de sodio, y la solución bifásica se coloca en un baño de aceite mantenido a 43°C. Una solución de 4.3 mi (2.6 mmol) de solución de hipoclorito de sodio (preparado por el mezclado de 1 .9 mi de solución de hipoclorito de sodio al 10-13%, y 2.4 mi de agua) se añade lentamente. La reacción se agita a 43°C durante 4 horas, se enfría a temperatura ambiente, 20 mi de sulfito ácido de sodio al 10% se añade, se agita durante 10 minutos, se diluye con 50 mi de acetato de etilo, y las capas se separan. La capa orgánica entonces se lava con 1 x 10 mi de salmuera, 1 x 10 mi de solución de ácido clorhídrico 1 N, se seca sobre sulfato de magnesio, y se concentra. El compuesto (90) se purifica por medio de cromatografía de columna en gel de sílice.

Métodos sintéticos para los compuestos que incluyen sustitutos de fórmula I Los compuestos que incluyen uno o más sustitutos de fórmula I como se describe en las varias modalidades de esta invención se pueden sintetizar fácilmente por medio de cualquier procedimiento convencional para la formación de un enlace de péptido entre los aminoácidos. Dichos procedimientos convencionales incluyen, por ejemplo, cualquier procedimiento de fase en solución permitiendo una condensación entre el grupo amino alfa libre de un residuo de aminoácido que tiene su grupo carboxilo u otro grupo reactivo protegido y el grupo carboxilo primario libre de otro residuo de aminoácido que tiene su grupo amino u otros grupos reactivos protegidos. En un procedimiento convencional preferido, los compuestos de esta invención se pueden sintetizar por medio de síntesis de fase sólida y se purifican de acuerdo a métodos conocidos en la técnica. El sustituto de aminoácido de la presente invención se puede incorporar en compuestos de esta invención por medio de métodos sustancialmente similares o idénticos a aquellos empleados con residuos. Cualquiera de un número de procedimientos bien conocidos que utilizan una variedad de resinas y reactivos se pueden usar para preparar los compuestos de esta invención. El procedimiento para la síntesis de los compuestos se puede realizar por medio de un procedimiento con el cual cada aminoácido o sustituto de aminoácido en la secuencia deseada se añade una vez en sucesión a otro residuo de aminoácido o sustituto de aminoácido o por medio de un procedimiento con el cual los fragmentos de péptido con la secuencia de aminoácido deseada, que puede incluir uno o más sustitutos de aminoácido, primero se sintetizan de manera convencional y entonces se condensan para proveer el compuesto deseado. El compuesto resultante se cicliza para dar un compuesto cíclico de la invención. Los métodos de síntesis de péptido de fase sólida son bien conocidos y se practican en la técnica. En dichos métodos la síntesis de compuestos de la invención se puede realizar por incorporación secuencial de los residuos de aminoácido deseados o sustitutos de aminoácido una vez en la cadena de péptido que crece de acuerdo a los principios generales de los métodos de fase sólida. Estos métodos se describen en numerosas referencias, incluyendo Merrifield R. B., Solid phase synthesis (Nobel lecture). Angew. Chem. 24:799-810 (1985) and Barany et al., The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol. 2, Gross E. and Meienhofer J., Eds. Academic Press, 1 -284 (1980). En las síntesis química de compuestos, los grupos de cadena lateral reactiva de los varios residuos de aminoácido o sustitutos de aminoácido se protegen con grupos de protección adecuados, que previenen una reacción química de que ocurra en el sitio hasta que el grupo de protección se remueva. También común es la protección del grupo amino alfa de un residuo de aminoácido o sustituto de aminoácido mientras que la entidad reaccione en el grupo carboxilo, seguido por la remoción selectiva del grupo de protección amino alfa para permitir que una reacción posterior tome lugar en ese sitio. Los grupos de protección específicos se han descrito y se conocen en los métodos de síntesis de fase sólida y métodos de síntesis de fase de solución. Los grupos alfa amino se pueden proteger por medio de un grupo de protección adecuado, incluyendo un grupo de protección tipo uretano, tal como benciloxicarbonilo (Z) y benciloxicarbonílo sustituido, tal como p-clorobenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxícarbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, p-bifenil-isopropoxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) y p-metoxibenciloxicarbonilo (Moz); grupos de protección del tipo uretano alífático, tal como t-butíloxicarbonilo (Boc), diísopropilmetoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, y aliloxicarbonilo, Fmoc es preferido para la protección de amino alfa. Los grupos guanidino se pueden proteger por medio de un grupo de protección adecuado, tal como nitro, p-toluenosulfonilo (Tos), Z, pentametilcromanosulfonilo (Pmc), adamantiloxicarbonilo, pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo (Pbf), Fmoc, y Boc. Pbf es un grupo de protección preferido para Arg. Otros grupos de protección preferidos incluyen Z, Fmoc, y Boc. Se debe entender que los grupos de protección guanidino particularmente se pueden escindir y remover durante el procedimiento sintético, o no puede ser escindido o removido alternativamente, caso en el cual la cadena lateral con el grupo de protección forma un derivado de un radical de cadena lateral aminoácido como se define aquí. Particularmente cuando el grupo de protección es lábil, y se puede remover por medio de algún mecanismo in vivo durante la administración a un paciente, el compuesto se convierte en "fármaco", el cual es por decir un compuesto que es un precursor de fármaco que, después de la administración a un paciente, se convierte a la forma de fármaco deseada in vivo vía algún procedimiento químico o fisiológico (por ejemplo, un profármaco al llevarlo a un pH fisiológico o a través de la acción enzimática se convierte a la forma farmacológica deseada). Los compuestos de la invención descritos aquí se pueden preparar usando la síntesis de fase sólida, ya sea manualmente o por medio de un sintetízador peptídico automatizado, usando módulos de programación según se provee por el fabricante y siguiendo los protocolos expuestos por el fabricante, o por medio de las modificaciones de los protocolos del fabricante para mejorar el rendimiento de los acoplamientos difíciles. La síntesis de fase sólida se comienza del extremo C-terminal del compuesto mediante acoplamiento de un a-aminoácido, sustituto de a-aminoácido o mímético de alcohol a-amino a una resina adecuada. Dichos materiales de inicio se preparan mediante la unión a una resina alcohol p-benciloxibencilo (Wang) o una resina de cloruro de 2-clorotritilo, mediante un enlace amida entre un enlazador Fmoc, tal como ácido p-[(R, S)-a-[1 -(9H-fluor-en-9-il)-metoxiformamido]-2,4-dimetiloxibencil]-fenoxiacético (enlazador Rink) a una resina benzihidrilamina (BHA), o por otros medios conocidos bien en la técnica, tales como mediante la unión de de un mimético de alcohol a-amino-protegido a enlazador 3,4-dihidro-2H-piran-2il-metanol unido a una resina poliestireno clorometilo. Los soportes de resina Fmoc-enlazador-BHA están disponibles comercialmente y generalmente se usan cuando son factibles. Las resinas se realizan a través de ciclos repetitivos como sea necesario para agregar aminoácidos consecutivamente. Los grupos de protección Fmoc amino alfa se remueven bajo condiciones básicas. Piperidina, piperazina, dietilamina, o morfolina (20-40% v/v) en N,N-dimetilformamida (DMF) se pueden usar para este propósito. Después de la remoción del grupo de protección amino alfa, los aminoácidos protegidos posteriores o sustitutos de aminoácidos se acoplan en forma escalonada en el orden deseado para obtener un intermedio, péptido-resina protegida. Los reactivos de activación usados para el acoplamiento de los aminoácidos en la síntesis de fase sólida de los péptidos se conocen bien en la técnica. Después de que el compuesto se sintetiza, si se desea, los grupos de protección de cadena lateral protegida ortogonalmente se puede remover usando métodos bien conocidos en la técnica para la derivación adicional del compuesto.

Los grupos reactivos en un compuesto se pueden modificar selectivamente, ya sea durante la síntesis de fase sólida o después de la remoción de la resina. Por ejemplo, los compuestos se pueden modificar para obtener modificaciones N-terminal, tales como la acetilación, mientras sea en la resina, o se pueden remover de la resina mediante el uso de un reactivo de escisión y entonces se modifica. Los métodos para la modificación N-terminal, tal como acetilación, o modificación C-terminal, tal como amidación o introducción de un grupo N-acetilo, se conocen en la técnica. Similarmente, los métodos para la modificación de cadenas laterales de aminoácidos se conocen bien por aquellos con experiencia en la técnica de síntesis peptídico. La elección de modificaciones hechas para grupos reactivos presentes en el compuesto se determinará, en parte, por las características que se desean en el compuesto. Los compuestos es, en una modalidad, ciclízado antes de la escisión de la resina. Para la ciclización a través de los radicales de cadena lateral reactiva, las cadenas laterales deseadas se desprotegen, y el compuesto suspendido en un solvente adecuado y un agente de acoplamiento cíclico agregado. Solventes adecuados incluyen, por ejemplo DMF, díclorometano (DCM) o 1 -metil-2-pirrolidona (NMP). Los reactivos de acoplamiento cíclicos adecuados incluiyen, por ejemplo, 2-(1 H-benzotríazol-1 -il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TBTU), 2-(1 H-benzotriazol-1 -il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato (HBTU), benzotriazol- -íl-oxi-tris(dimetilamino)fosfoniohexafluorofosfato (BOP), benzotriazol-1 -il-oxi- tris(pirrolidino)fosfoniohexafluorofosfato (PyBOP), 2-(7-aza-1 H-benzotriazol-1 -il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluronio tetrafluoroborato (TATU), 2-(2-oxo-1 (2H)-piridil)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluron'io tetrafluoroborato (TPTU) o ?,?'-diciclohexilcarbodiimida/1 -hidroxibenzotriazol (DCCI/HOBt). El acoplamiento se inicia convencionalmente mediante el uso de una base adecuada, tal como ?,?-diispropiletilamina (DIPEA), sim-colidina o N-metilmorfolina (NMM). Después de la escisión de los compuestos de la fase sólida después de la síntesis, el compuesto se puede purificar por medio de cualquier número de métodos, tales como cromatografía líquida de alta resolución de fase inversa (RP-HPLC), usando una columna adecuada, tal como una columna C-?ß. Otros métodos de separación de separación o purificación, tal como aquellos métodos basados en el tamaño o carga del compuesto, también se pueden emplear. Una vez purificado el compuesto se puede caracterizar por medio de cualquier número de métodos, tal como cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), análisis de aminoácido, espectrometría de masas, y lo similar. Los compuestos de la presente invención con un derivado amida sustituida C-terminal, típicamente un grupo N-alilo, se preparan por medio de una síntesis de fase sólida iniciada del extremo C-terminal del compuesto mediante acoplamiento de un aminoácido alfa protegido o sustituto de aminoácido a una resina adecuada. Dichos métodos para la preparación de derivados de amida sustituida en fase sólida se han descrito en la técnica. Ver, por ejemplo, Barn D. R., Morphy J. R., Rees D. C. Synthesis of an array of amides by aluminum chloride assisted cleavage of resin-bound esters. Tetrahedron Lett. 37, 3213-3216 ( 1996); DeGrado W. F. Kaiser E. T. Solid-phase synthesis of protected peptides on a polymer bound oxime: Preparation of segments comprising the sequences of a cytotoxic 26-peptide analogue. J. Org. Chem. 47:3258-3261 ( 1982). Dicho material de inicio se puede preparar mediante la unión de un aminoácido amino-protegido alfa o sustituto de aminoácido mediante un enlace éster a una resina alcohol p-benciloxibencilo (Wang) a través de medios bien conocidos. La cadena peptídica se desarrolla con la secuencia deseada de aminoácidos o sustitutos de aminoácidos, el producto ciclizado y la resina tratada con una solución de amina apropiada y cloruro de aluminio (tal como metil amina, dimetil amina, etilamina, y así sucesivamente) en diclorometano. El compuesto derivado amida resultante se libera en solución de la resina. La resina se filtra y el compuesto derivado de amida recuperado por medio de la concentración de solvente seguido por la precipitación con éter. El compuesto crudo se seca y los grupos protectores de cadena lateral de aminoácido restantes escindidos usando ácido trifluoroacético (TFA) en presencia de agua y triisopropilsilano (TIS). El producto final se precipita mediante la adición de éter frío y se colecta mediante filtración. La purificación final es mediante RP-HPLC usando una columna Ci8. En un método preferido, los compuestos se sintetizan por medio de los siguientes métodos. Cada uno de los compuestos tiene uno o dos sustitutos de aminoácidos basados en una estructura ceto-piperazina. Los sustitutos de aminoácido se sintetizan como se describe anteriormente. Los compuestos se sintetizan usando química Fmoc. Un método sintético manual se usa para acoplamientos inmediatamente antes y después de la incorporación del sustituto del aminoácido ceto-piperazina. El siguiente protocolo se emplea para unir un sustituto de aminoácido a resina, de tal manera que el sustituto de aminoácido se encuentre en una posición terminal. La resina amida Rink (carga en 0.3 mmol/g, Advanced ChemTech) se deja hinchar en DMF durante 30 minutos. La desprotección Fmoc de la resina se realiza usando piperidina al 20%/DMF durante 20 minutos. El acoplamiento de la resina con el sustituto aminoácido Fmoc-ceto protegido-piperazina seleccionado (2 equivalentes) se realiza por medio de incubación durante la noche en DMF con PyBop (2 equivalentes) y DIEA (4 equivalentes). Si después de la prueba Kaiser se obtiene un resultado positivo, la reacción de acoplamiento se conduce una segunda vez. La acetilación se realiza usando Ac2O (10 equivalentes) y piridina (20 equivalentes) en DMF. El siguiente protocolo se emplea para unir un sustituto aminoácido ceto-piperazina a péptido-resina. El acoplamiento se lleva a cabo al mezclar el sustituto aminoácido piperazina ceto Fmoc-protegido (2 equivalentes), TBTU (2 equivalentes) y DIEA (4 equivalentes) en DMF y dejando incubar durante la noche, nuevamente con una repetición de la reacción de acoplamiento si una prueba Kaiser positiva se obtiene. La acetilación se realiza usando Ac20 (10 equivalentes) y piridina (20 equivalentes) en DMF. El siguiente protocolo se emplea para acoplar un aminoácido Fmoc-protegido a un sustituto de aminoácido ceto-piperazina en fase sólida. En la mayoría de los casos al menos dos ciclos de acoplamiento se necesitan, y frecuentemente tres ciclos se emplean. En un aminoácido Fmoc-protegido de ciclo típico (4 equivalentes) se mezcla con HOAt (4 equivalentes) y DIC (4 equivalentes) en DMF durante 30 minutos. La mezcla resultante entonces se mezcla durante la noche en un tubo SPE con un sustituto de aminoácido ceto-piperazina unido directamente o a través de intermedios a resina. Los acoplamientos entre los aminoácidos que no son adyacentes directamente a un sustituto de aminoácido ceto-piperazina en la secuencia se conducen usando protocolos estándar para síntesis de péptidos de fase sólida. Los siguientes grupos protectores se emplean: Boc para Lys y Orn, t-Butil para Tyr y Ser, Tritil para Cys y His, O-t-Butil para Asp y Pbf para Arg. Los compuestos se escinden de la resina que emplea una mezcla de TFA/tioanisol/fenol/H20/DTT/TIS (87.5/2.5/2.5/5/2.5/1 1 ) (1 5 mi) para 3 horas. El material resultante se filtra y precipita de éter frío bajo condiciones de congelamiento durante una hora. El péptido cisteinilo precipitado se lava con éter frío al menos tres veces antes de usarse en una etapa de oxidación. Para la ciclización para formar enlaces disulfuro vía oxidación de aire, el compuesto cisteinilo crudo se disuelve en una mezcla de acetonítrilo y agua. El pH de la mezcla de reacción se ajusta a 7-8 usando NH4OH al 5%.

La solución resultante se agita lentamente con 150 mg de carbón activado granular 150 mg durante 2 días. La terminación de la ciclización se confirma por medio de análisis LC-EM antes de proceder a la siguiente etapa del procedimiento. Después de la ciclización, el carbón sólido se filtra de la solución. El filtrado se liofiliza o se seca en centrífuga speed vac para obtener un compuesto cíclico crudo. Ciertos compuestos de la invención, donde el sustituto en la fórmula I se une a una resina u otro soporte sólido peptidico se encuentra en la posición C-terminal, se pueden sintetizar por medio del siguiente esquema.

El sustituto (7) se prepara por el esquema del método A anterior, o cualquier método alterno. Resina amida Sieber protegida Fmoc se trata por hinchamiento de la resina en una mezcla 1 : 1 de dimetilformamida y diclorometano durante 45 minutos, seguido por filtración y lavado con dimetilformamida. La resina lavada entonces se desprotege con piperidina al 20% en dimetilformamida durante 15 minutos, se filtra, y se lava con dimetilformamida. Una solución de sustituto Fmoc-protegido (7) en dimetilformamida se añade a la resina amida Sieber desprotegida como se preparó anteriormente, seguido por PyBop sólido, y düsopropiletilamina, seguido por dimetilformamida adicional. La mezcla se agita durante la noche con burbujeo de nitrógeno. La resina se filtra, y se lava con dimetilformamida, se termina con solución de finalización que consiste de una solución de 3:2:1 de dimetilformamida: anhídrido acético: piridina durante 30 minutos, se filtra, y se lava con dimetilformamida para proveer sustituto (7) que forma complejo con la resina. El sustituto Fmoc-protegido resultante (7) formando complejo con resina se desprotege con piperidina al 20% en dimetilformamida durante 15 minutos, se filtra, y se lava con dimetilformamida para producir sustituto (7) formando complejo con resina. Una solución de Fmoc-AA-OH deseado (4 equivalentes, donde AA es cualquier aminoácido deseado) en dimetilformamida se añade al sustituto (7) que forma complejo con la resina, seguido por una solución de HCTU (60 mmol, 4 equivalentes), y diisopropiletilamina (120 mmol, 8 equivalentes) en DMF y se acopla durante la noche con burbujeo de nitrógeno. La resina Fmoc-AA-sustituto (7) resultante se aisla mediante filtración y se lava con dimetilformamida. Con el fin de asegurar un acoplamiento completo, el producto se trata nuevamente con una solución de Fmoc-AA-OH como se mencionó anteriormente con burbujeo de nitrógeno. La resina resultante se filtra y se lava con dimetilformamida. La resina Fmoc-AA-sustituto resultante (7) entonces se finaliza con solución de finalización como anteriormente se mencionó durante 30 minutos. La resina entonces se filtra, se lava con dimetilformamida, diclorometano, y dietil éter, y entonces se seca bajo vacío. Después cada aminoácido subsiguiente se acopla usando métodos de acoplamiento de péptido convencional. La PEGilación opcional de los compuestos elaborados que emplean un sustituto de fórmula I de la invención se puede realizar, incluyendo los métodos descritos posteriormente. La PEGilación de grupos amina reactiva, tales como lisina o cadenas laterales ornitina, un alifático amino omega en la posición N-terminal, o un grupo amina de un sustituto de fórmula I en la posición C-terminal, se realiza al disolver 0.005 mmol de compuesto purificado en 2 mi de dimetilsulfóxido, seguido por la adición de 55.5 mg (0.01 1 mmol, 2 equivalentes) de PEG-5K-OSu (5000 Da PM metoxi-PEG con un grupo reactivo propionato succinimidilo), con 17.7 µ? (0.13 mmol, 20 equivalentes) de trietil amina entonces se añade, y la solución ligeramente turbia se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. El PEG-5K-OSu en exceso se templa por la adición de 7 µ? (0.1 1 1 mmol, 10 equivalentes) de etanol amina, y la reacción se agita durante la noche. La PEGilación de grupos carboxilo reactivos, tales como cadenas laterales Asp o Glu o un carboxilo terminal en un compuesto en un residuo de aminoácido terminal o un sustituto terminal de fórmula I, se realiza mediante acoplamiento de PEG-NH2 (PEG-amina), al constructo que contiene un grupo carboxilato en la cadena lateral de Asp o Glu o en el C-terminal. El constructo peptídico (0.005 mmol) se disuelve en DMSO (2 mi), seguido por la adición de 55.5 mg (0.01 1 mmol, 2 equivalente) de PEG-NH2 y HOBt (0.01 mmol). El acoplamiento se inicia por la adición de 0.0055 mmoles de reactivo de acoplamiento N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida (EDAC). La solución ligeramente turbia se agita a temperatura ambiente durante la noche. El constructo PEGilado peptídico entonces se purifica por medio de HPLC. La PEGilación de grupos tiol reactivos, tales como cadenas laterales Cys o Hcys o un grupo tiol en R del sustituto de fórmula I, se realiza mediante el tratamiento del compuesto en DMSO con reactivo PEG-metil-maleimida (SunBio, Orinda, California) durante la noche. El compuesto PEGilado entonces se purifica por medio de HPLC. Después de la PEGilación, la mezcla de compuesto crudo resultante se purifica por HPLC, produciendo un compuesto PEG-derivado incluyendo uno o más sustitutos de aminoácido. 7. Ensayos para la determinación de la eficacia de compuestos que incluyen sustitutos de fórmula I En general, cualquier sistema de ensayo apropiado para un polipéptido de origen se puede emplear. Lo siguiente ejemplifica sistemas de esnayo empleados donde el polipéptido de origen es un péptido ANP, tal como mini-ANP. Compuestos seleccionados incluyendo al menos un sustituto de fórmula I se analizan en ensayos para determinar la unión y estatus funcional. Los siguientes ensayos se emplean. Cultivo celular. Un clon de ADNc que codifica para el receptor A peptídico natriurético humano (NPRA) se adquiere de Bio S&T Inc. (Montreal, Quebec). El clon de ADNc se inserta en el vector de expresión mamífero pcADN3.1 (Invitrogen) y se transfecta en células HEK-293. Clones adecuados se seleccionan por cultivo de células en presencia de G418 sulfato. Expresión de NPRA se examina por medio de la unión de péptido natriurético [125l]-atrial ([125I]-ANP) a homogenados de membrana preparados de líneas de células clónales. Células HEK-hNPRA se mantienen en cultivo a 37°C en CO2 al 5% en Medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) complementado con FBS al 10%, G418 sulfato (300 µ?/?t??) de glutamato de sodio (0.29 mg/ml), penicilina (100 unidades/ml) y estreptomicina (100 ug/ml). Ensayo de unión competitiva. Un ensayo de inhibición competitiva se realiza usando homogenados de membrana crudos preparados de células HEK-hNPRA. Para preparar los homogenados de membrana, células se enjuagan con solución salina con pH regulado de fosfato y se incuban durante 15 minutos a 4°C en regulador de pH de lisis hipotónico (10 mM Tris, pH 7.4 + 5 mM EDTA). Las células se transfieren de placas a tubos de polipropileno y se homogenizan. Los homogenados se centrifugan a 25000 x g durante 20 minutos. Las pellas se re-suspenden en regulador de pH que consiste de 50 mM Tris (pH 7.4) y 1 mM EDTA, se homogeniza y centrifuga a 25000 x g durante 20 minutos. Las pellas se re-suspenden en regulador de pH que consta de 100 mM Tris (pH 7.4) y 10 mM MgCI2 y se almacenan a -80°C hasta que se necesite. En el día de un ensayo, los homogenados se descongelan y homogenizan. La unión de [125I]-ANP se realiza en regulador de pH que contiene 25 mM de Hepes (pH 7.4), 100 mM NaCI, 2 mM CaCI2, 5mM MgCI2, 0.1 % BSA y 1 mM 1 , 0-fenantrolina. Homogenados (1 -10 µg proteína/pozo) se incuban con [125I]-ANP (25-30 pM) y se incrementan las concentraciones de ligandos de competición en placas de filtro Millipore durante 120 minutos a 4°C. Los ensayos se interrumpen por la adición de regulador de pH de lavado frío (solución salina con pH regulado de fosfato) seguido por filtración usando una tubería de vacío. La radioactividad unida se determina usando un contador gamma. La unión no específica se define por medio de la unión de [125l]-hANP a membranas HEK293 no transfectadas. Los datos se analizan usando un software de ajuste de curva GraphPad Prism®. Método general para la determinación de EC50. La evaluación funcional de compuestos se realiza al medir la acumulación de cGMP ¡ntracelular en células HEK-293 que expresan hNPR-A recombinante. Las células HEK-NPRA se recolectan por medio de lavado y centrifugación en Regulador de pH de Disociación Celular (Gibco, Life Technologies). Las células peletizadas se re-suspenden en solución salina balanceada de Hank (HBSS) que contiene 10 mM Hepes (pH 7.4), 5 mM MgCI2, 200 mM L-glutamina, 1 mM 1 ,10-fenantrolina y BSA (0.5 mg/ml). Después de la centrifugación, las células se re-suspenden en el regulador de pH anterior complementado con 0.5 mM 3-¡sobutil-1 -metilxantano (IBMX). Células (~2 x 10 /pozo) se añaden a cada pozo de una placa de 96 pozos y se incuban durante 15 minutos a 37°C. Después del periodo de pre-incubacíón, las células se incuban por 15 minutos adicionales en presencia de concentraciones incrementadas de compuestos. La reacción se termina por medio de lisis de las células con un choque de temperatura. La placa de reacción se incuba en un baño de hielo seco/etanol durante 15 minutos seguido por la incubación a 90°C durante 10 minutos. La acumulación de cGMP se mide usando el cGMP Flashplate RIA (Perkin-Elmer). El análisis de datos y valores EC50 se determinan al usar análisis de regresión no lineal con el software GraphPad Prism®. Determinación de análisis de resonancia magnética de masa y nuclear. Los valores de masa se determinan usando un Waters MicroMass ZQ utilizando un modo positivo. Las determinaciones de masa se comparan con valores calculados y se expresan en la forma de peso de masa más dos dividido por dos ((M+2)/2), a menos que se especifique otra cosa. Los datos de RMN de protones se obtienen usando un espectrómetro de 300 MHz Bruker. Los espectros se obtienen después de disolver los compuestos en un solvente deuterado tal como cloroformo, DMSO, o metanol como sea apropiado. Las mediciones de HPLC se hacen usando un Waters Alliance HT con una columna YMC Pack Pro C18 (4.6 x 50 mm, 3µ) y eluyendo a 1 ml/minuto en un procedimiento escalonado. El solvente A (agua que contiene ácido trifluoroacético al 0.1 % v/v) y el solvente B (acetonithlo que contiene ácido trifluoroacético al 0.1 % v/v) se usan como fases móviles. Para el análisis de intermedios ceto piperazina, la columna se equilibra con B al 10% y entonces B se incrementa a 90% durante un periodo de 8 minutos. Para el análisis de péptidos, la columna se equilibra con B al 2% y entonces se incrementa a 90% durante un periodo de 8 minutos. 8. Compuestos que incluyen sustitutos de fórmula I La invención se ¡lustra adicionalmente por medio de los siguientes ejemplos no limitantes.

EJEMPL0 1 Los siguientes compuestos se basan en el polipéptido de origen H-Met-cyclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO:1 ) se sintetizan, cada uno emplea un sustituto de aminoácido sencillo de fórmula I de uno o más de los métodos anteriores. Por razones sintéticas, Met en la posición 1 se sustituye con Nle. Los compuestos resultantes se purifican y los pesos en masa se determinan, con los resultados como los mostrados a continuación.

CUADRO 1 Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Nle-Asp-Arg-lle-Ser-Cys-Tyr-Arg-NH, En los compuestos del cuadro 1 , los compuestos 1 -1 , 1 -5, 1 -7, 1 - 8, 1 -12, 1 -1 5, 1 -18, 1 -20 y 1 -22 son inactivos en sistemas de ensayo relevantes. Los compuestos restantes se activan. El compuesto 1 -2, con la siguiente estructura, se prueba como se describe anteriormente. o Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Nle-Asp-Arg-lle-Ser-Cys-Tyr-Arg-NH En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 0.3 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 1 -2 tiene un EC50 de 2 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC50de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

El compuesto 1 -14, con la siguiente estructura, se prueba como se describe anteriormente. o s-Tyr-Arg-Nr-L En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 0.9 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 1 -14 tiene un EC50 de 3.5 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC50de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

El compuesto 1 -13, con la siguiente estructura, se prueba como se describe anteriormente.

En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 0.2 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 1 -13 tiene un EC50 de 2 nM en un sistema de ensayo en el cual en constructo tiene un EC50 de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

EJEMPLO 2 Los siguientes compuestos basados en el polipéptido de origen H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO:1 ) se sintetizan, cada uno empleando dos sustitutos de aminoácido de formula I de uno o más de los métodos anteriores. Para razones sintéticas, Met en la posición 1 se sustituye con NIe. Los compuestos resultantes se purifican y los pesos en masa se determinan, con los resultados como se muestra posteriormente: CUADRO 2 En los compuestos del cuadro 2, los compuestos 2-2 y 2-4 son inactivos en sistemas de ensayo relevantes. Los compuestos restantes son activos. El compuesto 2-6, con la siguiente estructura, se prueba como se describe anteriormente.

En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 0.027 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 2-6 tiene un EC50 de 0.2 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC5o de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

EJEMPLO 3 El siguiente compuesto basado en el polipéptido de origen H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO: 1 ) se sintetiza, empleando tres sustitutos de aminoácido de formula I de uno o más de los métodos anteriores. Para razones sintéticas, Met en la posición 1 se sustituye con NIe. Los compuestos resultantes se purifican y los pesos en masa se determinan.

CUADRO 3 EJEMPLO 4 Los siguientes compuestos basados en el polipéptido de origen H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO: 1 ) se sintetizan, empleando dos sustitutos de aminoácido de formula I de uno o más de los métodos anteriores y un grupo protésico PEG. Para razones sintéticas, Met en la posición 1 se sustituye con NIe. Los compuestos resultantes se purifican y los pesos en masa se determinan.

CUADRO 4 En los compuestos del cuadro 4, el compuesto 4-6 es inactivo en sistemas de ensayo relevantes. Los compuestos restantes son activos.

EJEMPLO 5 Los siguientes compuestos basados en el polipéptido de origen H-Met-ciclo(Cys-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-lle-Ser-Cys)-Tyr-Arg-NH2 (SEQ ID NO: 1 ) se sintetizan, empleando uno o dos sustitutos de aminoácido de formula I de uno o más de los métodos anteriores. Aunque el polipéptido de origen es cíclico, estos compuestos son lineares, con cada residuo Cys sustituido con un residuo Ala. Para razones sintéticas, Met en la posición 1 se sustituye con Nle. El compuesto 5-1 , con la siguiente estructura se prueba como se describe anteriormente. NH o o En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 88.5 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 5-1 tiene un EC50 de 340 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC50 de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

El compuesto 5-2, con la siguiente estructura, se prueba como describe anteriormente o Ala-His-Phe-Gly-Gly-Arg-Nle-Asp-Arg-lle-Ser-Ala-Tyr-Arg-NH2 o En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 14.5 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 5-2 tiene un EC50 de 550 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC50 de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC50 de 3.3 nM.

El compuesto 5-3, con la siguiente estructura, se prueba como se describe anteriormente.

En estudios de unión del receptor este compuesto tiene un Ki promedio de 8.7 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un Ki de 0.05 nM y mini-ANP tiene un Ki de 0.6 nM. El compuesto 5-3 tiene un EC50 de 80.5 nM en un sistema de ensayo en el cual hANP tiene un EC50 de 0.6 nM y mini-ANP tiene un EC5o de 3.3 nM.

EJEMPLO 6 Los siguientes compuestos basados en el polipéptido de origen oxitocina H-ciclo(Cys-Tyr-lle-Gln-Asn-Cys)- Pro-Leu Gly-NH2 (SEQ ID NO:3) se sintetizan, empleando sustitutos de aminoácido sencillos de fórmula I de uno o más de los métodos anteriores.

CUADRO 6 EJEMPLO 7 Los siguientes compuestos basados en el polipéptido de origen oxitocina H-ciclo(Cys-Tyr-lle-Gln-Asn-Cys)-Pro-Leu Gly-NH2 (SEQ ID NO:3) se sintetizan, empleando sustitutos de aminoácido sencillos de fórmula I de uno o más de los métodos anteriores. Aunque el polipéptido de origen es cíclico, estos compuestos son lineares, con cada residuo Cys sustituido con un residuo Ala.

CUADRO 7 7-6 0 ?? „ ? ProLeu-Gly-NhL Ala-Tyr-lle-Gln-Asn y 2 0 7-7 ?? Ala-Tyr-lle-Gln-Asn-Ala-Pro 0 7-8 0 A ?? Ala-Tyr-lle-Gln-Asn-Ala-Pro-Leu ? 2 0 Los ejemplos precedentes se pueden repetir con sucesos similares mediante la sustitución de reactivos descritos genéricamente o específicamente y/o condiciones de operación de esta invención por aquellos usados en los ejemplos precedentes. Aunque la invención se ha descrito en detalle con referencia particular a aquellas modalidades preferidas. Otras modalidades pueden alcanzar los mismos resultados. Variaciones y modificaciones de la presente invención serán obvias para aquellos de experiencia en la técnica y se destinan para cubrir todas las modificaciones y equivalentes. Las descripciones completas de todas las referencias, solicitudes, patentes publicaciones citadas anteriormente y/o en los anexos, y de las solicitude correspondientes, se incorporan aquí para referencia.

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1 .- Un compuesto que tiene una fórmula de estructura I: o su enantiomero, estereoisomero o diastereoisomero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R1 y R2 no sean ambos H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR1 1 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2 o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6b es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no sean (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , l o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=O)(CH2)m(NR8)2, alquilo, aralquilo o arilo; cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo o alquilo; R11 es un soporte sólido de péptido; R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1 . 2. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque y es 1 . 3. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque y es 0. 4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11 y R6a es H o alquilo. 5. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R6a es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)N(R8)2 o (CH2)mC(=O)NR11 , (CH2)mC(=0)OR1 1 y R4 es H o alquilo. 6. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R3 es un grupo de una fórmula: 7.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alqu¡l-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R 2 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 8.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R7 es H. 9.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R6a es H o alquilo; y R9 es tere-butilo, alilo o un grupo de una fórmula: 10.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado además porque R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R12 es H o trifenilmetileno, terc-butoxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 1 1 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado además porque R7 es H. 12. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado además porque R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR11. 13. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6a en H o alquilo; y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 14.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R 2 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 15.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque R7 es H. 16.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR1 1. 17.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisomero o diastereoisomero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es alquil-N(R8)2l (CH2)nOR8, (CH2)nC(=O)0R8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: R4 es H o alquilo; R6a es H o alquilo; y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 18 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque R3 es un grupo de una fórmula: y R es tere-butilo, alilo o un grupo de una fórmula: 19.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 7, caracterizado además porque R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R12 es H o, trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 20. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque R7 es H. 21 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisomero o diastereoisomero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=O)0R8, C(=O)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=O)N(R8)2, o un grupo de una fórmula: R4 es H o alquilo; R6a es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)m-C(=0)N(R8)2, o R8)2 y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 22.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado además porque R3 es un grupo de una fórmula: y R9 es tere-butilo, alilo, o un grupo de una fórmula: 23.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado además porque R es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R12 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 24. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado además porque R6a es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR1 1. 25. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado además porque R7 es H. 26. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R4 es H o alquilo; y R9 es tere-butilo, alilo, o un grupo de una fórmula: 27.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R1 es alquil-N(R8)2, alquil-OR8, (CH2)n-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8 alquil-C(=0)N(R8)2, o el grupo de la fórmula: y R12 es H o trifenilmetileno, terc-butiloxicarbonilo, toluenosulfonilo, formilo, nitro o benciloxicarbonilo y n es un número entero que tiene un valor entre 2 y 6. 28.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R7 es H. 29.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR11. 30 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque tiene una fórmula: o su enantiomero, estereoisomero o diastereoisomero, o su sal sintéticamente aceptable, en donde: R y R3 son grupos alquilo independientes. 31 .- El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R3 es un grupo de una fórmula: 32.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R4 es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11, (CH2)mC(=O)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2 y R6a es H o alquilo. 33. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R6a es (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR1 1 , (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)pOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2 y R4 es H o alquilo. 34. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque R7 es H. 35. - Un método para sintetizar un péptido que comprende un grupo de la fórmula: dicho método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto que tiene una fórmula de estructura I : i o su enantiomero, estereoisómero o diastereoisómero, o su sal sintéticamente aceptable, con un aminoácido N-protegido, en donde: R1 es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=0)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil- S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una formula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R1 y R2 ambos no son H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=0)NR1 1 , (CH2)mC(=0)OR1 1 , (CH2)pOH, (CH2)pOBn( (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=0)NR11, (CH2)mC(=O)OR11, (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6a es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no son (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=O)OR1 1, (CH2)qOH, (CH2)pOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo, C(=0)(CH2)m(NR8)2, cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo, o alquilo; R1 es un soporte sólido de péptido; R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1 . 36.- Un compuesto que comprende una pluralidad de residuos de aminoácido y al menos un grupo de la fórmula: o su enantiómero, estereoisómero o diastereoisómero, en donde: R es H, alquilo, arilo, alquilarilo, alquil-N(R8)2, alquil-OR8, alquil-C(=O)OR8, C(=0)OR8, alquil-NH2, alquil-S-R8, alquil-C(=0)N(R8)2, o un grupo de una formula: R2 es H o alquilo, con la condición de que R1 y R2 no son ambos H; R3 es H o un primer grupo protector de nitrógeno; R4 es H, alquilo, (CH2)mC(=O)OH, (CH2)mC(=0)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11, (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R5 es H o alquilo; R6a es H, alquilo, (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11 , (CH2)mC(=O)OR11, (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=O)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R6b es H o alquilo; con la condición de que ambos de R4 y R6a no son (CH2)mC(=0)OH, (CH2)mC(=O)NR11 , (CH2)mC(=0)OR11 , (CH2)qOH, (CH2)qOBn, (CH2)qOalilo, (CH2)mC(=0)N(R8)2, o (CH2)mC(=0)N(R8)(CH2)pN(R8)2; R7 es H, C(=0)alquilo o C(=0)(CH2)m(NR8)2, cada ocurrencia de R8 es independientemente H, arilo o alquilo; R1 1 es un soporte sólido de péptido; R12 es H o un segundo grupo protector de nitrógeno; cada ocurrencia de m es un número entero independiente que tiene un valor entre 0 y 6; cada ocurrencia de q es un número entero independiente que tiene un valor entre 1 y 6; p es un número entero que tiene un valor entre 1 y 10; y y es 0 o 1 .