MX2007013494A - Metodo para tratar mieloma multiple utilizando 17-aag o 17-ag o un profarmaco de ya sea 17-aag o 17-ag. - Google Patents

Abstract

Un metodo para tratar mieloma multiple en un sujeto al administrar 17-alilamino-17-demetoxi-geldanamicina o 17-amino geldanamicina, o un profarmaco de ya sea 17-AAG o 17-AG, al sujeto.

Description

MÉTODO PARA TRATAR MIELOMA MÚLTIPLE UTILIZANDO 17-AAG O 17-AG j O UN PROFÁRMACO DE YA SEA 17-AAG O 17-AG I CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN i Esta invención se relaciona a un método para tratar I mielpma múltiple utilizando 17-alilamino-17-demetoxigeldanamicina o 17-aminogeldanamicina, o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG. | ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Mieloma múltiple ("MM", también conocido como I mielloma o mieloma de célula de plasma) es un cáncer incurable pero tratable de la célula de plasma. Las células de plasma son una parte importante del sistema inmune, que producen inmunoglobulinas (anticuerpos) que ayudan a combatir la i infección y enfermedad. MM se caracteriza mediante números excesivos de células de plasma anormales en la médula ósea ("BM") y sobreproducción de inmunoglobulinas monoclonales intactas (IgG, IgA, IgD o IgE; "proteinas M") o proteina Bence-Jones (cadenas ligeras monoclonales libres). Hipercalcemia, anemia, daño renal, susceptibilidad incrementada a la infección bacteriana y producción deteriorada de inmunoglobulina normal son manifestaciones cliifíicas comunes de MM. MM también es frecuentemente caracterizado por osteoporosis difusa, usualmente en la pelvis, espina dorsal, costillas y cráneo. | Las terapias para MM incluyen quimioterapia, transplante de células madre, quimioterapia de dosis alta con transplante de células madre y terapia de salvamento. Las quimioterapias incluyen tratamiento con Thalomid® (talidomida) , bortezomib, Aredia® (pamidronato) , esteroides y Zometa® (ácido zoledrónico) . Sin embargo muchos fármacos de quimioterapia son tóxicos para células no cancerosas activamente divididas, tal como del BM, la linina del estó|mago y los intestinos, y los folículos del cabello. Por lo tanto, la quimioterapia puede resultar en una disminución en onteos de células sanguíneas, náusea, vomito, diarrea y pércida de cabello. La quimioterapia convencional, o quimioterapia de t dosis estándar, es tipicamente el tratamiento primario o iniqial para los pacientes con MM. Los pacientes también pueden recibir quimioterapia en preparación para la quimioterapia de dosis alta y transplante de células madre. Terapia de inducción (quimioterapia convencional antes de un transplante de células madre) se puede utilizar para reducir la carga de tumor antes del transplante. Ciertos fármacos de i quimioterapia son más adecuados para la terapia de inducción que i otros, debido a que ellos son menos tóxicos para las células de BM y da por resultado un mayor rendimiento de células madre de la BM. Ejemplos de fármacos de quimioterapia adecuados para la terapia de inducción incluyen dexametasona, taljldomida/dexametasona, VAD (vincristina, Adriamycin® doxórubicina) y dexametasona en combinación) , DVd (doxorubicina liposomal pegilada (Doxil®, Caelyx®) , vincristina y dexametasona de programa reducido en combinación) . El tratamiento estándar para MM es melfalan en combinación con prednisona (un fármaco corticosteroide) , que logra una proporción de respuesta de 50%. Desafortunadamente, melfalan es un agente alquilante y es menos adecuado para la terapia de inducción. Los corticosteroides (especialmente ! dexametasoma) son algunas veces utilizados solo como terapia de MM, especialmente en pacientes de más edad y aquellos quienes no pueden tolerar la quimioterapia. Dexametasona también se utiliza en la terapia de inducción, sola o en combinación con otros agentes. VAD es el mucho más comúnmente utilizado en la terapia de inducción, pero DVd recientemente se na mostrado que es efectivo en la terapia de inducción. Bortezomib se ha aprobado recientemente para el tratamiento de MM, pero es muy tóxico. Sin embargo, nada de las terapias I existentes ofrecen un potencial significante para una cura. ¡ 17-Alilamino-17-demetoxigeldanamicina ("17-AAG", también algunas veces referidas como 17- I aliJLaminogeldanamicina) es un análogo semi-sintético de la gelaanamicina del compuesto que ocurre naturalmente (Sasaki y i colaboradores , 1981) . Geldanamicina es obtenible al cultivar un | organismo de producción, tal como Streptomyces hygroscopicus var. geldanus NRRL 3602. Otro derivado de geld.anamicina biológicamente activo es 17-aminogeldanamicina ("17-AG"), el cual se produce en el cuerpo humano mediante el metabolismo de 17-AAG. 17-AG también puede ser hecho de geldanamicina (Sasaki y colaboradores , 1979) . Mientras que geldánamicina y sus análogos se han estudiado intensivamente como) agentes anti-cáncer en los años de 1990 (por ejemplo, Sasa,ki y colaboradores, 1981; Schnur, 1995; Schnur y colaboradores, 1999) , ninguno de estos se ha aprobado para el uso anti-cáncer.

Gel ananiicina El 17-AAG y la geldanamicina se creen que actúan al enlazar e inhibir la actividad de proteina-90 de choque térmico ("Hsp90") (Schulte y Neckers, 1998) . Hsp90 actúa como un : acompañante para el procesamiento normal de muchas í proteínas celulares ("proteínas cliente") y se encuentran en tod^s las células mamiferas. El estrés (hipoxia, calor, etc.) induce un incremento de varias veces en su expresión. Existen i otras proteínas inducidas por estrés (co-acompañantes) , tal como proteina-70 de choque térmico ("Hsp70"), la cual también desempeña un papel en la respuesta celular al y recuperación del estrés. | En células de cáncer, la inhibición de Hsp90 permite la disrupción de la interacción entre Hsp90 y sus proteínas cliente, tales como erbB2, receptores de esteroide, raf-1, cdk4 y Akt. Por ejemplo, la exposición para 17-AAG que da por resultado la reducción de erbB2 y desestabilización de Raf-1 ¡ y p53 mutante en células de cáncer de seno SKBr3 i (Schulte y Neckers, 1998), reducción de receptores de esteroide en células de cáncer de seno (Bagatell y colaboradores , 2001) , reducción de Hsp90 y regulación hacia abajo de Raf-1 y erbB2 en células de melanoma MEXF 276L (Burger y colaboradores, 2004), reducción de Raf-1, c-Akt y Erkl/ en células de adenocarcinoma de colon (Hostein y colaboradores, 2001), regulación hacia abajo de proteínas intracelulares Bcr-Abl y c-Raf y reducción de la actividad de quinaba Akt en células de leucemia (Nimmanapalli y i colaboradores, 2001), degradación de cdk4, cdkß y ciclina E I en células de cáncer de pulmón con Rb de tipo silvestre y Shapiro, 2002) y reducción de niveles de erbBl y erbB2 (pl85) en células NSCLC (Nguyen y colaboradores, 2000). < Debido a que la actividad de 17-AAG relativa a Hsp90? y otras proteínas involucradas en la oncogénesis y metástasis de células de cáncer, un número de investigadores clínicos han evaluado su efectividad como un agente anticáncer en experimentos clínicos humanos. De estos diversos experimentos, el Programa de Evaluación de Terapia de Cáncer (CTE?) del National Cáncer Institute recomienda estos regímenes de dosis/programa de Fase 2 para el estudio adicjional: 220 mg/m2 (mg por metro cuadrado de área de I superficie de cuerpo del paciente o sujeto) administrado dos veces semanalmente durante 2 de cada 3 semanas, 450 mg/m2 administrados una veces una semana continuamente o con un reposo o break, y 300 mg/m2 una vez una semana durante 3 semanas de cada 4 semanas. Los resultados de diversos experimentos clínicos — casi exclusivamente con pacientes que tienen tumores sólidos — con 17-AAG generalmente mostró actividad clínica limitada y se resumen enseguida: (a) Un experimento de Fase 1 en pacientes adultos con tumores sólidos se condujo en que los pacientes reciben 17-7?AG diariamente durante 5 dias cada 3 semanas. La dosis de partida fue 10 mg/m2 y se escaló a 56 mg/m2, con una dosis tolerada máxima ("MTD") y la dosis de Fase 2 recomendada definida como 40 mg/m2. El protocolo se enmendó para excluir pacientes con enfermedad de higado pre-existente significante, después de que los pacientes se trataron con dosis de hasta 110 mg/m2 en el mismo programa. Se observaron respuestas de tumor no objectivas. Debido a la hepatotoxicidad reversible limitante de dosis, el protocolo además se enmendó a pacientes de dosis sobre un programa semanalmente dos veces cada otra semana de partida en una dosis de 40 mg/m2 por dia. En dosis diarias de 40 y 56 mg/m2 durante 5 dias, las concentraciones de plasma pico fueron 1,860±660 y 3,170±1,310 nM, respectivamente. Para pacientes tratados en valores AUC promedio 56 mg/m2 para 17-AAG y 17-AG fueron 6,708 y 5,558 nM*h, respectivamente, y promedio t?/2 3.8 y 8.6 horas, respectivamente. Evacuaciones de 17-AAG y 17-AG fueron 19.9 y 30.8 L/h/m2, respectivamente, y valores V2 fueron 93 y 203 L/m2, respectivamente (Grem y colaboradores , 2005) . En un segundo experimento de Fase 1, los pacientes con tumores sólidos avanzados reciben 17-AAG en un programa x 5 diariamente en una dosis de partida de 5 mg/m2. En los 80 mg/m2, toxicidades que limitan la dosis (hepatitis, dolor abdominal, náusea, disnea) se observaron pero a pesar de las escalaciones de dosis se continuaron hasta lograr la dosis 157 mg/m2/dia. Modificaciones de programa de dosis adicionales se implementaron para dejar dos veces semanalmente la dosificación. En el nivel de dosis de 80 mg/m, el t?2 fue 1.5 horas y el plasma Cmax fue 2,700 nM. De manera similar, para 17-AG el t?2 fue 1.75 horas y el Cmax fur 607 nM. Las concentraciones de plasma exceden aquellos necesitados para lograr exterminar células (10-500 nM) en modelos de xenoinjerto ín vi tro e in vivo (Munster y colaboradores, 2001) . (c) Un experimento de Fase 1 de 17-AAG se condujo en que los pacientes con tumores sólidos avanzados se trataran semanalmente durante 3 de cada 4 semanas en una dosis de partida de 10 mg/m2, con una dosis de Fase 2 recomendada de 295 mg/m2. Lograr escalaciones de dosis una dosis de 395 mg/m2, en las cuales la náusea y el vomito secundario para la pancreatitis y fatiga de grado 3 se observaron. El programa de dosificación se enmendó para lograr la dosificación dos veces semanalmente durante 3 de cada 4 semanas y dos veces semanalmente durante 2 de cada 3 semanas. Un análisis de población farmacocinética (PK) se realizó sobre datos obtenidos de este experimento. El Vd (volumen de distribución) para 17-AAG fue 24.2 L para el compartimiento central y 89.6 L para el compartimiento periférico. Valores de evacuación fueron 26.7 L/h y 21.3 L/h para 17-AAG y 17-AG, respectivamente. La evacuación metabólica indicó que 46.4% de 17-AAG se metabolizan para 17-AG. Respuestas de tumor no objetivas se han observado en este experimento para datos. (Chen y colaboradores, 2005). (d) | Otro experimento de Fase 1 en pacientes con tumores ' sólidos y linfomas se conducen utilizando una I ¡ dosificación semanalmente durante 3 semanas de cada J un ciclo de 4 semanas. La dosis de partida fue 15 ' mg/m2. Alargar la escalación de dosis 112 mg/m2 sin ' toxicidad significante y se continuó con un objetivo i de alcanzar un rango de dosis de actividad I I "biológica". El MTD durante semanalmente 17-AAG se i alcanzó a 308 mg/m2. Respuestas de tumor no objetivas ' se han observado para datos en este experimento, y 1 los niveles de proteínas cliente Hsp90 medidas fueron i inalteradas durante la terapia. Nada de correlación i I entre chaperona o niveles de proteina cliente y 17- AAG o 17-AG PK se observó. También no hubo correlación entre el PK de 17-AAG y su toxicidad i clínica (Goetz y colaboradores , 2005) . i (e) i Otro experimento de Fase 1 se condujo utilizando una I vez semanalmente el programa de administración, que | incluye 11 pacientes con melanoma metastático. La dosis de partida fue 10 mg/m , la toxicidad limitativa de dosis se observó en 450 mg/m2/semana i (grado de estimación 3/4 de AST) . En dosis más altas (16-450 mg/m2/semana) la formulación de 17-AAG empleada contiene sulfóxido de dimetilo 10-40 mL I (DMSO) en una infusión individual, la cual I 1 similarmente contribuye a la toxicidad j gastrointestinal que se observó en el experimento.

I Aunque los pacientes tratados en 320-450 mg/m2, dos I mostraron enfermedad estable a largo plazo radiológicamente documentada. Respuestas no completas I o parciales se registraron. En el nivel de dosis más i alto (450 mg/m2) las concentraciones de plasma 17-AAG i exceden 10 µM y permanecieron arriba de 120 nM durante periodos en exceso de 24 horas. En el nivel I I de dosis más alto de 450 mg/m2, el volumen promedio I de distribución fue 142.6 L, la evacuación promedio fue 32.2 L/h y el nivel de plasma pico promedio fue i 8,998 µg/L. Fue una correlación lineal entre dosis y 1 área bajo la curva (AUC) para los niveles de dosis I estudiados. Parámetros farmacodinámicos (PD) también se midieron y la inducción de la proteina co- ? chaperona Hsp70 se observó en 8 de 9 pacientes i tratados en 320-450 mg/m2/semana . La disminución de proteínas cliente también se observó en biopsias de tumor: CDK4 en 8 de cada 9 pacientes y la reducción I de Raf-1 en 4 de cada 6 pacientes en 24 horas. Estos | datos indican que Hsp90 en tumores se inhibe durante entre 1 y 5 dias. (Banerji y colaboradores, 2005). í j La actividad de anti-MM in vivo de 17-AAG se ha estudiado utilizando un modelo de lesiones de MM positivo de I GFP difuso en ratones SCID/NOD (Mitsiades y colaboradores, 2006^ . El análisis de supervivencia mostró que el tratamiento significativamente prolongó la supervivencia total media, peroi datos no clínicos son frecuentemente no predictivos de la ajctividad clínica. Como se discutió anteriormente, esto ha sido' particularmente el caso para 17-7?AG en tumores sólidos, donde la promesa de datos pre-clinicos no se ha llevado a cabo! en los experimentos clínicos de la Fase 1. Asi, a pesar de esfuerzos intensivos para desarrollar 17-AAG como un agente anti-cáncer, ninguna agerJcia regulatoria lo ha aprobado para el tratamiento de cualquier cáncer. Aun permanece una necesidad para métodos de i dosificación y administración de 17-AAG y profármacos de 17- AAG l (y su contraparte metabólica 17-AG) de modo que sus beneficios terapéuticos potenciales se puedan realizar. La pre ente invención proporciona tales métodos que son eficaces en el tratamiento de MM utilizando 17-AAG. Una lista de referencias citadas en la presente se proporciona al final de esta especificación. Todos los documentos citados en la presente se incorporan en la presente por referencia como si cada una de tal publicación o documento fuera específicamente e individualmente incorporada en la presente por referencia. BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN i La presente invención proporciona métodos para tratar mieloma múltiple en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, que comprenden la etapa de administrar una formulación terapéutica al sujeto, en donde la formulación farmacéutica comprende una dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o 17-AG o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG y opcionalmente un portador o diluyente terapéuticamente aceptable, y opcionalmente repetir la etapa hasta que no se obtiene beneficio terapéutico adicional. En una modalidad, el método comprende la admi istración de dosis múltiples de 17-AAG o un profármaco del mismo a un sujeto con MM durante un periodo de tiempo de por lo menos 2 semanas, en donde cada una de tal dosis está en el intervalo de aproximadamente 275 mg/m2 aproximadamente 420 mg/m2 de 17-AAG o una cantidad equivalente (una base molar) de un profármaco 17-AAG o 17-AG.

En Iµna modalidad, la dosis es aproximadamente 340 mg/m 7 de i 17-i|VAG o una cantidad equivalente (una base molar) de un profármaco 17-AAG o 17-AG. En una modalidad, esta dosis se administrar dos veces semanalmente durante por lo menos dos semanas. En una modalidad, esta dosis se administra dos veces serrfnalmente durante por lo menos dos semanas en un periodo de ¡tres semanas, que en la proporción de dosificación por tres periodos semanales es llamado un ciclo, y ciclos múltiples de tal tratamiento se administran al sujeto. . En una modalidad, la dosis terapéuticamente ! efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17- AAG es una dosis que da por resultado una AUCota? de 17-7?AG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 ng/mL*h a 25,000 ng/mL*h. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG no excede 15,000 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 1,800 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una i proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 3,0^0 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en I una .proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-7?AG es mayor que 1,800 pero no excede 15,000 ng/mL. En una modalidad, esta dos s se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax 'de 17-AAG es mayor que 3,000 pero no excede 15,000 ng/mL. ' En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AG o un profármaco de 17-AG (lo cual el profármaco incluye 17-7AAG) es una dosis que da por resultado una i AUCtotai de 17-AG por dosis en el intervalo de aproximadamente 5,000 a 18,000 ng/mL*h. En una modalidad, estf dosis se administra en una proporción y frecuencia tal quejla Cmax de 17-AG no excede 2,000 ng/mL. En una modalidad, está dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que! la Cmax de 17-AG es mayor que 500 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal quel la Cmax de 17-AG es mayor que 9000 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y fresuencia tal que la Cmax de 17-AG es mayor que 500 pero no excede 2,000 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-íJG es mayor que 900 pero no excede 2,000 ng/mL. I En una modalidad, la dosis terapéuticamente efecitiva de 17-AAG, un profármaco de 17-AAG, 17-AG, o un proíarmaco de 17-AG es una dosis que da por resultado una AUCtotai combinada de 17-AAG y 17-AG por dosis en el intervalo de aproximadamente 17,500 a 43,000 ng/mL*h. En una modalidad, está dosis se administra en proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-7?AG no excede 15,000 ng/mL y/o la Cmax de 17-AG no excede 2,000 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Craax de 17-^AG es mayor que 1,800 ng/mL y/o la Cmax de 17-AG es mayor quel 500 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una ¡ proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 3,000 ng/mL y/o la Cmax de 17-AG es mayor que 900 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 1,800 pero no ¡excede 15,000 ng/mL y/o la Cmax de 17-AG es mayor que 500 pero no excede 2,000 ng/mL. En una modalidad, esta dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-KAG es mayor que 3,000 pero no excede 15,000 ng/mL y/o la Cmax de 17-AG es mayor que 900 pero no excede 2,000 ng/mL.

En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado una Terminal t?/2 de 17-AAG en un intervalo de 3 a 4.5 h. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efedtiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado una Terminal t?2 de 17-AAG en el intervalo ant rior y una AUCtotai de 17-AAG por dosis en un intervalo de aprqximadamente 12,500 a 25,000 ng/mL*h. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AG o un profármaco de 17-AG es una dosis que da por resultado una Terminal t?2 de 17-AG en el intervalo de 4 a 7 h. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de ÍL7-AG o un profármaco de 17-AG es una dosis que da por resultado una Terminal t?/2 de 17-AG en el intervalo anterior y na AUCtotai de 17-AG por dosis en el intervalo de aproximadamente 5,000 a 18,000 ng/mL*H. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efecfctiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado un Volumen de distribución Vz de 17-AAG en el intervalo de 100 a 270 L. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado un Volumen de distribución Vz de 17-AAG en el intervalo anterior y una AUCtjotai de 17-AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12, ¿00 a 25,000 ng/mL*h.

En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado una Evacuación en el intervalo de 30 a 50 L/h. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resulitado una Evacuación de 17-AAG en el intervalo anterior y una AUCtotai de 17-7AAG por dosis en el intervalo de aprqximadamente 12,500 a 25,000 ng/mL*h. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado un Vss en el intervalo de 100 a 150 L. En una modalidad, la dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG es una dosis que da por resultado un Vss de 17-AAG en el intervalo anterior y una AUCtota? de 17-AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 a 25,000 ng/mL*h. i BREVE DESCRIPCIÓN DEL (LOS) DIBUJO (S) La Figura 1 muestra la concentración de plasma de 17-AAG y 17-AG contra el tiempo actual para un nivel de dosis de 150 mg/m2 de 17-AAG (con la media y desviación estándar (SD)j combinados para los Dias 1 y 11) . La Figura 2 muestra la concentración de plasma de 17-ÁAG y 17-AG contra el tiempo actual para un nivel de dosis de ¿20 mg/m2 de 17-AAG (con la media y SD combinados para los Dias 1 y 11) gura 3 muestra la concentración de plasma de contra el tiempo actual para un nivel de dosis 17-AAG (con la media y SD combinados para los i La Figura 4 muestra la concentración de plasma de 17-A7?G para el Dia 1 y el Dia 11 y 17-AG para el Dia 1 y el Dia 111 contra el tiempo actual para un nivel de dosis de 275 mg/m2 de 17-7?AG (Dia 1 y el Dia 11 (con la media)). La Figura 5 muestra la concentración de plasma de contra el tiempo actual para un nivel de dosis 17-AAG (con la media y SD combinados para los La Figura 6 muestra la AUCtotai para 17 -AAG y 17-AG i para todos los pacientes. La Figura 7 muestra la Cmax de la media observada en el ¡presente estudio para 17-AAG y 17-AG comparado con la med:.a Cmax reportada Barnerji y colaboradores, (2002) para 17-AAG en el Dia 1, 17-AAG en el Dia 8, 17-AG en el Dia 1 y 17- ¡ La Figura 8 muestra la AUCtotai de la media de 17-7?AG observada en el presente estudio en comparación a la AUCtotai de ¡la media de 17-AAG reportada en Banerji y colaboradores , (2002) La Figura 9 muestra el por ciento de células CD138: conl potencial mitocondrial anormal en BM para pacientes durante pre-tratamiento y en el Dia 11 del tratamiento (después de cuatro infusiones de 17-7AAG) . | La Figura 10 muestra el por ciento de células AKT* en células BM total para pacientes durante pre-tratamiento y en el Dia 11 de tratamiento (después de cuatro infusiones de , Las Figuras HA (dosis de 275 mg/m2) y 11B (dosis de 340 mg/m2) muestran el inmunomanchado de Hsp70, AKT total, i ILK, raf-1 y LCK de muestras tomadas en 0 horas y 4 horas después de la administración en el Dia 1 y el Dia 4 (todos los datos del Ciclo 1 de tratamiento; 1: Dia 1, 0 horas; 2: Dia 1, 4 horas; 3: Dia 11, 0 horas; 4; Dia 11, 4 horas) . La Figura 12 muestra el por ciento de cambio de punlpa M de suero y proteina M de orina de un paciente tratado en ).os 150 mg/m2 del nivel de dosis 17-7?AG. ! La Figura 13 muestras el por ciento de cambio de pun a M de suero e IgG total de un paciente tratado en los 275 mg/m2 del nivel de dosis de 17-AAG. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones Para ayudar en el entendimiento y práctica de la prejsente invención, las definiciones para ciertos términos utilizados en la presente se proporcionan enseguida. "Efectos adversos" son como se definen en National Cáncer Institute (2003) Una "toxicidad limitativa de dosis" (DLT) se define como! cualquiera de las siguientes toxicidades clínicas, referiéndose National Cáncer Institute (2003) . Toxicidades hemajtológicas comprenden: (1) neutropenia Grado 4 (conteo de neutrófilos absoluto (ANC) < 0.5 x 109/L) para más de 5 dias consecutivos, o neutropenia febril (ANC < 1.0 x 109/L, fiebre = 3 .5°C), (2) trombocitopenia Grado 4 (plaquetas < 25.0 x 109/L o episodio de flujo de sangre requiriendo plaquetas) y/o ¡anemia Grado 4 (Hemoglobina < 6.5 g/dl). Toxicidades no hemaltológicas comprenden: (1) cualquier toxicidad no hemajtológica >Grado 3 (excepto reacción de sitio de inyección Grado 3, alopecia, anorexia, fatiga) , (2) náusea, diarrea y/o vomijto de Grado > 3 representa el uso de intervención médica máxilma y/o profilaxis, y/o (3) retardo del tratamiento de más de l4 semanas debido a la recuperación prolongada de una aspirado de médula ósea ("BMA") que contiene <5% de células de plasma se pueden utilizar para confirmar una CR. Una biopjsia de trefina se realiza, y los resultados indican <5% de ?élulas de plasma. En mieloma no de glándula secretoria, la biopsia de médula se repite después de un intervalo de 6 semanas para confirmar una CR. Nada de aumento en el tamaño o número de lesiones liticas deben ocurrir (desarrollo de una fractura por compresión no de respuesta excluida) , con desaparición de plasmacitomas de tejido blando. (Bladé y cola boradores, 1998). "Estatus de desempeño de KPS" es como se define en la Tabla 1, el cual también proporciona una comparación 25-49% de reducción en el tamaño de plasmacitomas de tejido suate (mediante radiografía o examinación clínica) ; y nada de ¡ inc ementar el tamaño o número de lesiones liticas (desarrollo de una fractura por compresión no de respuesta excJuida ) . (Bladé y colaboradores, 1998). "Nada de cambio" se define como que no cumple los criterios de ya sea respuesta mínima o enfermedad progresiva. (Bladé y colaboradores, 1998). i "Respuesta parcial (PR)" se define como que ocurre en (pacientes en a quienes algo, pero no todo, del criterio para CR se ha encontrado, que incluyen aquellos en a quienes la electroforesis de rutina es negativa pero sobre a quienes IF no se ha realizado. Ver Bladé y colaboradores, (1998) para ejemplos . "Fase de meseta" se define sobre las bases de los niveles de paraproteina estables durante un minimo de 3 meses. La meseta requerirá observaciones que están dentro de 25 del valor cuando la respuesta se estima, un riesgo anteriormente de 25% que es uno del criterio para la progresión de enfermedad. (Bladé y colaboradores, 1998). "Progresión de enfermedad", para pacientes no en CR, se define como un aumento definido en la actividad de enfermedad en pacientes en remisión parcial o fase de meseta, mientras ,que el término aplicado recae a una recurrencia de enfermedad evidente en pacientes previamente en CR. Ver Bladé y co laboradores, (1998) para ejemplos. "Cáncer refractario" significa un cáncer que no ha respondido a uno o más tratamientos previos. "Recaída" significa el regreso de señales y sintornas de cáncer después de un periodo de mejoramientos de I uno o más tratamientos previos. "Recaída de CR" se define como uno o más de los siguiente: una reapariencia de suero o paraproteina urinaria sobre IF o electroforesis de retina, confirmada mediante por lo menos una investigación adicional y que excluye la reconstitución oligoclonal; un mayor que 5% de células de plasma en un BMA o sobre la biopsia ósea de trefina; desarrollo de nuevas lesiones de hueso Utico o plasmacitomas de tejido suave o aumento definido en el tamaño de lesiones óseas residuales (desarrollo de una fractura por comp|resión no excluye respuesta continua y puede no indicar progresión) ; y desarrollo de hipercalcemia (calcio de suero corregido mayor que 11.5 mg/dL) no atribuible a cualquier otra causa. I "Dosis terapéuticamente efectiva" significa, de otra manera indica, la cantidad de fármaco que se requiere para, ser administrado para lograr el resultado terapéutico deseado. Modalidades La presente invención proporciona nuevos métodos impprtantes para la utilizar 17-AAG o 17-AG y sus profármacos que ¡ejercen su efecto anti-cáncer a través de la formación in vivf de 17-AAG o 17-AG para tratar MM. En una modalidad de los métodos de la presente invención, 17-AAG, o un profármaco de 17-AAG, es el agente terapéutico solo en la composición farmacéutica administrado al paciente para tratar el MM. La pre$ente invención surge en parte del descubrimiento de I nueyos métodos para dosificar y administrar 17-AAG para lograr y mantener niveles de sangre terapéuticamente efeótivos de 17-AAG o 17-AG (o niveles de sangre de 17-AAG ¡ adicionados conjuntamente con 17-AG, como estas porciones son equ:.potentes en ensayos celulares) , expresado como AUCtotaif Terminal t?/2, Evacuación y/o Volumen de distribución, expresado como ya sea Vz o Vss, sin lograr niveles de sangre similares a causa de la toxicidad inmanejable. j En una modalidad, la presente invención comprende administrar múltiples dosis de 17-7?AG, o un profármaco de 17-AAG,| durante un periodo de tres semanas. Colectivamente, estajs dosis durante el periodo de tres semanas son llamadas un dJcl° - Un paciente se puede tratar con múltiples ciclos de terapia. Ciclos diferentes, que incluyen ciclos de duración I más ' grandes o más cortos o que involucran dosis mayores o pocas que son descritas específicamente en la presente, se puede utilizar para practicar la presente invención, mientras que las dosis terapéuticamente efectivas descritas en la preáente se logran. I En una modalidad, la dosis terapéuticamente efecptiva se logra mediante la administración de múltiples I dosis de 17-AAG, o un profármaco de 17-AAG, a un paciente con MM durante un periodo de tiempo de por lo menos 3 semanas, en donde tales múltiples dosis dan por resultado una AUCtota? para 17-^?AG por dosis de por lo menos 12,500 ng/mL*h pero no excede 25,000 ng/mL*h. En una modalidad, cuatro dosis se administran por ciclo, con cada dosis que es por lo menos 150 mg/?!rt2, y un periodo de 3 a 4 dias entre cada dosis. En otra mod.alidad, cuatro dosis se administran por ciclo, con dos dosfLs por semana administradas durante las primeras dos semanas del ciclo de la semana tres. Otros compuestos que 17-AAG o 17-AG se puedan administrar que son convertidos in vivo para 17-AAG o 17-AG (prcjfármacos) . Un tipo de profármaco es aquel en el cual el anillo de benzoquinona se reduce a un anillo de hidroquinona, perc se metaboliza atrás a un anillo de benzoquinona en el sujeto. Un ejemplo especifico de un profármaco 17-AAG es 17-ali][amino-18, 21-dihidro-17-demetoxigeldanamicina . (Adams y colaboradores, 2005). Los métodos de la presente invención por I lo tanto incluyen, en una modalidad, un método para trabar MM en un paciente en necesidad del tratamiento, en donde el método comprende la administración de múltiples dosis de 17-AAG o 17-AG, o un profármaco de 17-7?AG o 17-AG, a i un sujeto con MM, durante un periodo de tiempo de por lo menos 3 semanas, en donde tales múltiples dosis dan por | resultado una AUCtotal para 17-AG por dosis de por lo menos I 5,000 pero no excede 18,000 ng/mL*h. En una modalidad, cuatro dosis se administran por ciclo, con cada dosis que es por lo menos 150 mg/m2, y un periodo de 3 a 4 dias entre cada dosis. En otra modalidad, cuatro dosis se administran por ciclo, con i dosl dosis por semana administradas durante las primeras dos i semanas del ciclo de la semana tres. ¡ Asi, la presente invención incluye dentro de su alc nce el uso de profármacos de 17-AAG y el término "administrar" abarca el tratamiento de MM con una cantidad farmacéuticamente equivalente del compuesto que convierte a 17-ÍAG o 17-AG ín vivo después de la administración al sujeto en rjecesidad del mismo. Procedimientos convencionales para la selección y preparación de derivados de profármacos adecuados son descritos en Wermuth, 2003. El sujeto en necesidad del tratamiento, para propósitos de la presente invención, es tipicamente un pací.ente humano que sufre de MM, aunque los métodos de la inv nción se pueden practicar para propósitos veterinarios, con ajuste adecuado de la dosis unitaria para lograr la AUCtotai equivalente u otros parámetros PK y PD descritos en la presente para el mamífero particular de interés (que incluyen gatos, ganado vacuno, perros, caballos y los similares). Aquellos de habilidad en la técnica de ciencia farmacéutica confcidos o fácilmente pueden determinar los factores de con ersión aplicables a las especies de interés. Tipicamente, sin embargo, los métodos serán practicados para beneficiar sujetos humanos, y aquellos sujetos tipicamente tendrán exhibida alguna evidencia histológica de MM, que incluye uno o Imás de lo siguiente: punta M en suero u orina, plakmacitosis BM de > 30%, anemia, falla renal, hipercalcemia y/ol lesiones de hueso litico. En una modalidad, el sujeto se ha diagnosticado con MM de Etapa III bajo el sistema Durie-Salmon y exhibe uno o mas de estos síntomas: valor de hemoglobina < 8.5 g/dL, valor de (alcio de suero > 12 mg/dL, lesiones de hueso litico avanzadas (escala 3), velocidad de producción de M-componente alto (valor IgG > 7 g/dL; valor IgA > 5 g/dL; proteina Bence Jones > 12 g/24 horas) . Alternativamente, el sujeto se ha diadnosticado con MM de Etapa III basado en el sistema International Staging System (ISS), con niveles de suero de I ß-2 |microglobulina > 5.5 g/dL. ¡ En otra modalidad, el paciente será diagnosticado con MM de Etapa II basado en el sistema Durie-Salmon, en ! donde el sujeto no tiente MM de Etapa III (basado en el sistema Durie-Salmon) y tiene uno o más pero no tiene todos de los siguientes síntomas: valor de hemoglobina > 10 g/dL, valor de calcio de suero < 12 mg/dL, rayos x de hueso, estructura de hueso normal (escala 0) o plasmacitoma de hueso solitario solamente, velocidad de producción de M-componente baja (valor IgG < 5 g/dL; valor IgA < 5 g/dL) . En otra modalidad, el paciente será diagnosticado con MM de Etapa II sobre el sistema ISS, en donde el sujeto no tiene MM de Etapa III (basado sobre el sistema ISS) y no tiene niveles de suero de ß-2 microglobulina < 3.5 g/dL y albúmina > 3.5 g/dL. i En otra modalidad, el paciente tendrá uno o más de los siguientes signos o síntomas de MM: un nivel elevado de proteina M de suero (tal como > 3 g/dL) , y/o más que 10% de las ¡ células en una muestra de BM del sujeto son células de plasma. En otra modalidad, antes del tratamiento el estatus de cesempeño de Karnofsky (KPS) del paciente es por lo menos 70%. En otro aspecto, el KPS del paciente es por lo menos 60%, 50%, 40%, 30%, 20% o 10%. En un aspecto, el ECOG del paciente es por lo menos 0, 1, 2 o 3. Una dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG, 17- AG, ¡o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG es la cantidad de 17-AAG que se administrar en cada administración durante un ciclo de tratamiento al sujeto que trae aproximadamente un resultado terapéutico. El resultado terapéutico puede ser que la velocidad de la progresión o extensión del cáncer es lento o detenido durante algún periodo de tiempo. En algunos pacientes, el resultado terapéutico puede ser de eliminación completa de MM. En algunos pacientes, un resultado terapéutico será logrado con un ciclo de tratamiento. En otros pacientes, un resultado terapéutico será logrado solamente durante múltiples ciclos de tratamientos. Como aquellos de habilidad en la técnica apreciarán, sin embargo, no se puede asegurar que cada paciente de MM logre un resultado terapéutico. , Como es notado anteriormente, en una modalidad, cadp ciclo de tratamiento es tres semanas. En otras modalidades, otros tiempos de ciclo de tratamiento se pueden emplear, tal como dos o cuatro semanas (o un mes), mientras que¡ la AUCtota? equivalente u otros parámetros PK y PD desbritos en la presente se logran. La dosis unitaria empleada en cada ciclo se administra por lo menos una vez y hasta ochos veces por ciclo de tratamiento. Tipicamente, la dosis se administra dos a cuatro veces por ciclo de tratamiento. En una modalidad, la dosis se administra dos veces durante 2 semanas fuera de cada ciclo de tratamiento de tres semanas. Por ejemplo, si se inicia un ciclo en la administración de la primera dosis, entonces en una modalidad, la dosis unitaria se administra una vez o dos veces en las primeras dos semanas del ciclo de tratamiento y nnoo curante la tercera semana. En una modalidad, la dosis se administra en los dias 1, 4, 8 y 11 de cada ciclo de tratamiento, se administra con el dia 1 que es el dia de la prímera dosis. Cada dosis de 17-AAG es una dosis de no más que la dosis máximamente tolerable ("MTD"), la cual se puede definir como la dosis máxima en la cual menos que dos o algunos de seis sujetos se someten al método para el tratamiento de experiencia hematológica o toxicidad no hematológica que es no tratable para el cuidado sustentador. De preferencia, la cantidad de 17-AAG administrada es igual a o menor que la MTD. De preferencia, la cantidad de 17-AAG administrada es una que no da por resultado toxicidad hematológica o no hemaltológica inaceptable y/o inmanejable. De preferencia, el MTD es aproximadamente 340 mg/m2 por dosis. La cantidad terapéuticamente efectiva de una dosis unit aria 17 -AAG o 17-AG o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG es la cantidad que, después de uno o más ciclos de administración de acuerdo con esta invención, da por resultado una respuesta completa (CR) , una respuesta parcial (PR), una respuesta mínima (MR), una condición de enfermedad esta|ble (StD) , una reducción de proteina monoclonal de suero I (prcjteina M de suero) o una reducción de células de plasma en la BM del sujeto (Bladé y colaboradores, 1998), a por lo menos un periodo de tiempo, tal como 3 semanas, 6 semanas, 2 meses, 6 meses, un año o varios años. En una modalidad, la admi.nistración de 17-AAG que da por resultado una disminución en ¡sl suero y/o proteina M de orina, plasmocitosis de BM, alivio de anemia, alivio de falla renal, alivio de i hipércalcemia y/o reducción/alivio de lesiones de hueso Utico en el paciente de MM. En una modalidad, algunos pacientes no recaerán de un CR o experimentarán un retardo significante en la progresión de la enfermedad. . ' La cantidad de 17-/AAG administrada en una dosis unitaria individual puede variar de 275 a 340 mg/m2 por I dosis. Donde el 17-AAG se administra dos veces semanalmente durante dos de cada tres semanas, la cantidad de 17-AAG administrada varia de 275 a 340 mg/m2 por dia. Aquellos de habilidad en la técnica reconocerán que las cantidades de dosis unitaria de profármacos 17-AG o 17-AG o 17-AG mismos se i puejien calcular de las dosis provistas en la presente para 17-AAG y el peso molecular y biodisponibilidad relativa del profármaco o 17-AG. El método de la invención también puede ser descrito en términos de la cantidad de 17-AAG administrada por ciclo de tratamiento. La cantidad por ciclo tipicamente será por lo menos 1,100 mg/m2. Tipicamente la cantidad por ciclo será por lo menos 1,360 mg/m2. En varias modalidades, la cantidad de 17-AAG administrada es por lo menos 1,100 a 1,300 mg/m2/ciclo de tratamiento. ¡ Como es notado anteriormente, la frecuencia de la administración de la dosis unitaria es una vez semanalmente o dos veces semanalmente. En una modalidad del método de la invención, la formulación farmacéutica se administra intravenosamente dos veces semanalmente durante 2 semanas cada 3 o 4 semanas. En una modalidad, el paciente se administra una medicación de pre-tratamiento para prevenir o aminorar las toxicidades relativas del tratamiento. Tales medicaciones de pre-tratamiento ilustrativas son descritas en los ejemplos que siguen. En una modalidad del método de la invención, la administración de 17-AAG o 17-AG o un proiármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG se realiza en el dia 1, 4, B y 11 de cada ciclo, y el tiempo de ciclo es 3 semanas. 17-AAG tipicamente será administrada mediante infusión intravenosa, infusionado en un periodo de por lo menos 30, 60, 90 o 120 minutos. Para pacientes con una área de superficie de cuerpo (BSA) mayor que 2.4 m , la dosificación se puede calcular de acuerdo con los métodos en la presente utilizando un BSA máximo de 2.4 m . En experimentos clínicos humanos del método de la invención, los siguientes regimenes de administración se han empleado sin toxicidad limitativa de dosis lograda ("DLT") en cualquier paciente tratado: 275 mg/m por administración individual de 17-AAG dos veces semanalmente durante dos de (Dias 1, 4, 8 y 11, con un tiempo de ciclo Como es notado anteriormente, después 17-AAG se administra, el mayor metabolito 17-AG, que tiene actividad I anti-cáncer en su propia manera, aparece en el sujeto. 17-AAG y 17-AG son asi cada uno, y conjuntamente, responsable para el peneficio terapéutico del método de la invención. La dosis terapéuticamente efectiva y régimen de dosificación de 17-AAG es uno que logra una Curva Bajo Área (AUCtotai) de 17-AAG y/o 17- G en el sujeto como es descrito en la presente. Varias I dosis terapéuticamente efectivas y régimen de dosis se ilustran en los ejemplos enseguida. Las dosis terapéuticamente efectivas y régimen de dosificación de 17-AAGj y/o 17-AG proporcionadas por la presente invención también pueden ser descritas en términos de Vida Media Terfninal (V2) ; Evacuación (CL) ; y/o Volumen de Distribución en (La fase de eliminación o estado de estudio (Vz y/o Vss) . i El beneficio terapéutico del método de tratamiento de (La presente invención se puede observar en sujetos que responden tan pronto como 3, 6, 12, 18 o 24 semanas del inidio del tratamiento. En una modalidad, un beneficio terapéutico del tratamiento es una reducción en una proteina de fuero y/o BUN o calcio de suero, del paciente. En varias modalidades, la reducción es por lo menos 25%; por lo menos 50% a 80%; por lo menos 90%; y 100%. La reducción en la prot.eina M de suero se puede determinar, por ejemplo, mediante electroforesis de proteina de suero o técnicas de inmuno-fijación. El por ciento de reducción es el nivel de la protteina de suero, BUN, o calcio en el paciente, medida desóués de un periodo de tratamiento y entonces comparado al nivel de la proteina M de suero, BUN o calcio en el paciente med:.do justo antes del tratamiento. Las proteínas de suero son proteínas que, cuando se presenta en niveles elevados en el ¡suero, indica que el sujeto sufre de MM. Tales proteínas de ¡suero incluyen, pero no están limitadas a, proteina M de sueto (también conocida como paraproteina M de suero) , ß-2 i microglobulina, cadena ligera y proteina total. : Otros beneficios terapéuticos que se pueden lograr pori la via de la presente invención incluye uno o más de lo siguiente: disminución en plasmaocitosis BM, alivio de aneifnia, alivio de falla renal, alivio de hipercalcemia y/o reducción/alivio de lesiones de hueso Utico. Otro beneficio terapéutico es una mejora de los KPS del paciente por 10% o más, 20% o más, 30% o más, 40% o más o 50% o más. Otro beneficio terapéutico es una mejora del ECOG del paciente por 1 o ¡más, 2 o más o 3 o más. Idealmente, la práctica de la presente invención no da por resultado toxicidad hematológica o no hematológica inmanejable. Toxicidades hematológicas que son evitadas incluyen: neutropenia, trombocitopenia Grado 4 y/o anemia Grado 4. Toxicidades no hematológicas incluyen: cualquier > toxicidad no hematológica Grado 3 (excepto reacción de sitio de inyección Grado 3, alopecia, anorexia y/o fatiga), náusea, diarrea y/o vomito > Grado 3 (a pesar del uso de la intervención y/o profilaxis médica máxima) y/o retardar el tratamiento de más de 4 semanas debido a la recuperación proJongada de una toxicidad relacionada con el fármaco. Aqufllos de habilidad en la técnica reconocerán que varias toxicidades pueden ocurrir en un paciente con cáncer; el método de la presente invención proporciona el beneficio de reducir o eliminación de la ocurrencia de tales toxicidades. Donde la formulación farmacéutica comprende un compuesto adicional que podria causar una reacción anajfiláctica (similar a Cremophor®) , medicaciones adicionales se ipueden administrar para prevenir o reducir la reacción anafiláctica, tales como (a) loratidina o difenhidramina, (b) famotidina y (c) metilprednisona o dexametasona.

La presente invención también proporciona, en varias modalidades, métodos para tratar MM al administrar 17-AAG o 17-AG, o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG, en combinación con un inhibidor de proteasoma y un tercer compuesto anti-cáncer, el cual puede ser, por ejemplo, Thalomid®, Aredia® y Zometa® o Revlimid® (lenalidomida) . El otrc fármaco anti-cáncer o agente se puede administrar en dosis unitarias y régimen de dosificación actualmente empleado en la técnica. j Importantemente, la presente invención se puede utilizar para tratar pacientes con MM quienes tienen falla I por | lo menos un previo régimen de terapia anti-cáncer, que es, tener MM refractario o recaída refractaria. Esto previo a terapias anti-cáncer incluyen, pero no están limitadas a, monoterapia (terapia de agente individual) o combinación de terapias de los siguientes tratamientos y agentes anticáncer: quimioterapia, transplante de células madre, Thalomid®, Velcade® y Revlimid®. La quimioterapia incluye trabamiento con una combinación de melfalan y prednisona ( P , VAD, o un agente alquilante solo o en combinación con otrp(s) agente (s), tal como ciclofosfamida más etoposido o combinaciones de etoposido, dexametasona, doxorubicina. Diagnóstico y métodos y pruebas de laboratorio que pueden ser de beneficio en la práctica de la presente invpnción son bien conocidos para uno de habilidad ordinaria en la técnica. Ver, por ejemplo, Pagana y Pagana, Mosby' s Manual of Diagnostic and Laboratory Tests, 2- Edición, Mosby- Year Book, 2002 y Jacobs & DeMott Laboratory Test Handbook, 5- Edición, Jacobs y colaboradores, (eds), Lexi-Comp, Inc., 2001 (cada una incorporada en la presente por referencia) .

Concentraciones de cadena ligera de kappa libre y lambda libre en el suero se pueden medir utilizando Freelite™ (The Bincling Site Inc., Birmingham, United Kingdom). I Un ingrediente farmacéutico activo ("API", 17-AAG, 17-AG, profármaco, inhibidor de proteasoma, otro compuesto ant?j.-cáncer, etc.) útil en el método de la presente invención se j puede formular para la administración oralmente o intravenosamente, en una forma sólida o liquida adecuada. Ver Genijiaro, ed., Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20- Edición. (Lippincott Williams & Wilkins 2003), incorporada en la presente por referencia. El API se puede combinar, por ejemplo, con un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, no tóxico para soluciones, emulsiones, suspensiones o cualquier otra forma adecuada para la administración enteral o parenteral. Portadores farmacéuticamente aceptables incluyen agua y otros portadores adecuados para el uso en preparaciones de manufactura en forijna licuada. Además, se puede utilizar estabilización auxiliar, espesamiento y agentes colorantes. ¡ Un API útil en el método de la invención se puede I formular como microcápsulas, nanoparticulas o nanqsuspensiones . Protocolos generales para tales formulaciones son descritas, por ejemplo, en Microcápsulas y Nandparticulas en Medicina y Farmacia por Max Donbrow, ed., CRC i Press (1992) y en Bosch y colaboradores, (1996), De Castro (1996) y Bagchi y colaboradores, (1997) . Al incrementar la relación de área de superficie a volumen, estás formulaciones son especialmente adecuadas para el suministro de 17-AAG u otro API relativamente insoluble. 17-AAG se puede formular en una emulsión con vitamina E o un derivado PEGilado del mismo. Procedimientos genfricos para formulaciones con tales excipientes son descritos en Quay y colaboradores, (1998) y Lambert y colaboradores , (2000) . El 17-AAG se puede disolver en una solución acuosa que contiene etanol (de preferencia menos que 1% «ie p/v). Se adiciona vitamina E o una vitamina E PEGilada. El etanol entonces se remueve para formar una pre-emulsión que se puede formular para rutas intravenosa u oral de administración . j Otro método para preparar una formulación farmacéutica útil en el presente método involucra encapsulamiento 17-AAG u otro API en liposomas. Métodos para fortnar liposomas como vehículos de suministro de fármaco son bieh conocidos en la técnica. Protocolos adecuados adaptables para la presente invención incluyen aquellos descritos por Boni y colaboradores, (1997), Straubinder y colaboradores, (1995) y Rahman y colaboradores, (1995) para paclitaxel y por Sonntag y colaboradores, (2001) para epotilona, muta tis mutandis . De los diversos lipidos que se pueden utilizar en tales formulaciones, fosfatidilcolina y polietilenglicol-deri(vatizada diestearil fosfatidil-etanolamina son notables. La cantidad de 17-AAG u otro API que se puede combinar con el material portador para producir una forma de dosificación individual o unitaria variará dependiendo del suje Ito tratado y el modo particular de administración. Por ejemplo, una formulación para el uso intravenosa comprende una cantidad de 17-AAG que varia de aproximadamente 1 mg/mL a apro )ximadamente 25 mg/mL, de preferencia de aproximadamente 5 glic¡erol y combinaciones de los mismos, como es divulgado en Zhong y colaboradores, (2005) . Otra formulación de 17-AAG que se puede utilizar es una basada sobre sulfóxido de dimetilo ("DMSO") y lecitina de huevp (fosfolipidos de huevo) , como se enseña en Tabibi y colaboradores, (2004). Sin embargo, debido a que ciertas caracteristicas de DMSO (olor, reacciones adversas del paciente) , tales formulaciones son menos preferidas que el unas libres de DMSO enseñadas en la presente. Otras formulaciones para 17-AAG que se pueden emplear en el método de la invención son descritas en Ulm y cola boradores, (2003), Ulm y colaboradores, (2004), Mansfield y colaboradores, (2006) , Desai y colaboradores , (2006) y i Isaács y colaboradores , (2006) . En otra modalidad, la formulación farmacéutica se puede diluir 1:7 antes de la administración con WFI, USP estéril (una parte de producto de fármaco no diluida a 6 partes de WFI estéril) . La dilución se realiza bajo condiciones asépticas, controladas. La concentración de producto de fármaco diluida final es, utilizando 17-AAG como un ejemplo, por lo menos 1.00 mg/mL, tal como aproximadamente 1.43, aproximadamente 2.00 o aproximadamente 10.00 mg/mL. Dependiendo de la BSA y la dosis asignada, la dosis I de | 17-AAG u otro API requerirá volúmenes diferentes de producto de fármaco a ser adicionado a la bolsa de mezcla. Un sobr llenado se puede calcular y emplear para contar la pérdida en el conjunto de administración. De preferencia, la formulación farmacéutica, con el producto de fármaco diluido, es pH neutro y la solución es hipertónica en aproximadamente 600 mOsm. La formulación farmacéutica se puede almacenar a -20°C, con protección de luz. El producto de fármaco se deja para llegar a temperatura ambiente antes de la mezcla y luego se mezcla mediante inversión suave. Después de la dilución, el producto de fármaco debe ser estable por hasta a I aprojximadamente 10 horas a temperatura ambiente (en una dilu ión de 1:7). La presente invención, habiéndose descrito en aspecto breve y en detalle anteriormente, se ilustra en los sigutientes Ejemplos Ejemplo 1 — Farmacocinética de 17-AAG en la Formulación Basada en Cremophor® en Perros ¡ Los reportes clínicos previos de 17-AAG en cáncer invoLucraron experimentos en los cuales el 17-AAG se administró en una formulación comprendida de DMSO con fosfblipidos de huevo (Tabibi y colaboradores, 2004 y 2005) . Para' comparar el PK de esta formulación de 17-AAG con la formulación basada en Cremophor® para ser utilizada en el experimento clínico reportado en el Ejemplo 2, cada formulación de 17-AAG se administró en dos dosis (1 y 2 mg/ks; 20 y 40 mg/m2) a perros pachones. Seis perros recibieron la dosis de 1 mg/kg, y 5 perros recibieron la dosis de 2 mg/kg, en un diseño de cruzamiento, de modo que cada perro recibió ambas formulaciones. Los resultados, I resumidos en la tabla enseguida, muestran que la formulación basada en Cremophor® es comparable a la formulación de DMSO /fosfolipido de huevo. AUC promedio está dentro de 20%; '—max i max y los valores de vida media de eliminación también fueron similares para las dos formulaciones realizaron después de cada dos ciclos de tratamiento (aproximadamente cada 6 semanas). La determinación de eficacia anti-tumor en pacientes estables o que responden se base en estimaciones de tumor objetivo hechas de acuerdo con un sistema de estimación de respuesta de mieloma estandarizado. Todas las estimaciones de tumor basadas en imagen de linea de base se realizaron dentro de 28 dias antes del i comienzo del tratamiento y se reevaluaron cada 6 semanas (aproximadamente cada dos ciclos) después. Todos los pac:.entes con tumores que responden (CR o PR) fueron examinados para confirmar la respuesta 6 semanas después de la primera documentación de respuesta. Los criterios de respuesta utilizados estuvieron de acuerdo con Bladé y i colaboradores, (1998) . I El muestreo farmacocinético (PK) y farmacodinámico (PDl se obtuvo durante solamente el primer ciclo de trabamiento . En el caso de eventos adversos serios relacionados con el fármaco (SAEs) y/o toxicidades Grado 4, muestras PK adicionales fueron recolectadas. , Pacientes de MM enrolados en este estudio fueron aquéllos quienes tuvieron falla en por lo menos dos previos regímenes de terapia anti-cáncer. Los criterios del enrolamiento fueron: (1) los pacientes fueron de por lo menos 18 ¡años de edad; (2) tuvieron un estatus de desempeño de KPS de > 70%; (3) tuvieron evidencia histológica de MM pero no tuvieron necesariamente enfermedad mesurable, aunque la enfejrmedad tiene que haber sido estimada dentro de 28 dias anteis de la iniciación del tratamiento; (4) fueron, con respecto a todos los eventos adversos de cualquier quimioterapia, cirugía o radioterapia, previa resueltos a NCI CTCAE (v. 3.0) Grado < 2; y (5) tuvieron los siguientes resultados de laboratorio dentro de 10 dias de administración de 17-AAG: hemoglobina >8 g/dL, conteo de neutrófilos ¡ absoluto > 1.5 x 109/L, conteo de plaqueta > 75 x 109/L, I bilirrubina de suero < 2 x limite superior de normal (ULN) , AST j< 2.5 ULN y creatinina de suero < 2 x ULN. Los pacientes fueron graduados de acuerdo con la i escala de Estatus de Desempeño de KPS y criterios como es desfrito en la Tabla 1. Los pacientes se excluyeron del estfdio si ellos tuvieron una condición tal como neuropatía pre|existente, embarazo, alimentación de seno, quimioterapia reciente, y etcétera. Para ser elegible para el enrolamiento, los pacientes también han tenido que cumplir ciertas condiciones hematológicas. I 17-AAG es proteina altamente enlazada en plasma (aproximadamente 95% en ensayos in vi tro utilizando sangre humana) ; sin embargo, la proteina de plasma para la cual el fármaco que enlaza y la afinidad de enlace no son conocidos. Pacientes quienes están recibiendo agentes que se conocen que es roroteina altamente de enlace se sometieron al cierre de monitoreo clínico mientras se enrolan en el experimento.

Estudios in vi tro implican el involucramiento de enzimas de citocromo P450 en el metabolismo de 17-AAG. Nada de estudios de interacción de fármaco-fármaco formales se han realizado con 17-AAG y fármacos que son substratos, inhibidores o inductores de citocromo P450-3A4. Mientras no hay contraindicación al uso de concomitante de cualquier medicación con 17-AAG, 17-AAG se utilizó con cuidado en combinación con fármacos que son también de enlace altamente de proteina (por ejemplo arfarin) y fármacos que son un substrato, inhibidor o inductor de citocromo P450-3A4. Contraceptivos hormonales no se utilizaron en mujeres de maternidad potencial enroladas en el experimento. Nada de otros agentes de investigación se permitieron durante la dur=.ción completa del estudio. Estimaciones de PK incluyeron las siguientes prueibas. Muestras de sangre para la determinación de concentraciones de plasma del compuesto parental y su meta.bolito primario se recolectaron después de la primera y I cuanta administración de 17-AAG solamente (Dia 1 y 11). El numero total de muestras de PK recolectadas fue aproximadamente 110 mL de sangre completa (7-8 cucharadas) .

Si un paciente experimentó un SAE potencialmente relacionado con el fármaco, muestras de PK adicionales se recolectaron.

La sangre fue retirada del brazo contralateral al sitio de infusión utilizando un catéter residente para evitar múltiples piquetes de aguja. Para las muestras de 17-AAG, 5 mL de sangre se retiraron en un tubo al vacio que contiene heparina como anti-coagulante. El tubo de sangre se invirtió varias veces y el tubo se colocó en hielo húmedo inmediatamente de la separación pendiente del plasma. Si un catéter se utilizó para la recolección de sangre, el fluido en ¡el catéter fue completamente retirado antes de cada recolección de muestra y descartado. Muestras de plasma se i conservaron sobre hielo húmedo durante recolección y centrifugación. Muestras de plasma se dividieron en dos cric.frasquitos antes de congelamiento a -70°C.

Concentraciones de plasma de 17-AAG su(s) metabolito (s) pripjiario (s) se midieron mediante un método de cromatografía liquida-espectrometría de masa validado. (Egorin y colaboradores, 1998). La estimación de PD incluyó las siguientes pruebas: La ocurrencia de toxicidades especificas (por ejemplo, i severidad, duración y reversibilidad) se comparó a los i parámetros PK (por ejemplo, evacuación, exposición, la vida media de eliminación, concentración de plasma máximo y tiempo arriba» una concentración de plasma objetivo) . Estas toxicidades incluyen toxicidades de hepatotoxicidad y gastrointestinal. Las correlaciones de laboratorio incluyeron a) expresión de superficie de receptor 1 de factor de crecimiento similar a insulina (IGF-1R), expresión total de Akt, Hsp90 y Hsp70. Células de MM se purificaron de BMAs rea] izadas en linea de base, dentro de 24 horas de la primera dosis de 17-AAG, y después del final del tratamiento. Células de MM se purificaron de la BM basada en la expresión CD138 utilizando tecnología de cuenta magnética y se confirmaron mediante el análisis citométrico de flujo que son células de MM de CD138+ >95%. El análisis citométrico de flujo se uti izó para estimar la expresión de superficie de IGF-1R utilizando anticuerpo monoclonal de IGR-1R anti-humano i conjugado con isotiocianato de fluoresceina (FITC) (Mitsiades y ^colaboradores, 2002). Análisis de inmunomanchado se utilizaron para evaluar los niveles totales de Akt, Hsp90 y Hsp70. Las aspiraciones de BM se realizan rutinariamente para i estimar el estado clínico en MM. Estos estudios correlativos permitieron a) la estimación del grado en la cual 17-AAg inhibió la función de Hsp90 en células de tumor de pacientes de MM tratados en protocolo; y b) correlación de respuestas cliiicas para 17-AAG con el grado de modulación de los biomarcadores. Además, el perfil de expresión de gen (Davies y colaboradores, 2003) se utilizó para identificar otros bio-marbadores potenciales para la sensibilidad del fármaco conjtra resistencia, que se puede validar en experimentos I clínicos futuros. Finalmente, células mononucleares de sangre periférica se aislaron en dos ocasiones (la primera y la última infusión en el Ciclo 1, en los Dias 1 y 11) antes de y 4 h<bras después de la infusión. Las células se examinaron para el cambio en la expresión de proteina cliente mediante Manchado de Western. Las proteínas cliente de interés inclluyen Hsp70, RAF1, LCK y CDK4 y otras como es indicado. La estimación final del tratamiento se condujo como sigue. El periodo de tratamiento diseñado fue 24 semanas (8 ciclos) . Los pacientes se trataron en la ausencia de enfermedad progresiva o toxicidades asociadas de tratamiento inaceptables. Todos los pacientes quienes recibieron por lo menos una dosis del fármaco de estudio y tratamiento discontinuo por cualquier razón (excepto la muerte) tuvieron la estimación final de tratamiento realizado. La estimación ocutrió hasta 28 dias después de la última administración de 17-AAG e incluyó un examen fisico, con peso del cuerpo y mediciones de signos vitales, documentación de Estatus de Desempeño de KPS, hematología, coagulación y determinaciones quimica/electrolitica, urinálisis, estimación de las medicaciones actuales del paciente y eventos adversos i clínicos en curso (si los hay) . Las estimaciones de tumor (pruebas de laboratorio de mieloma, estimación de enfermedad extramedular, BMA y otra representación radiográfica, si es apropiado) se hicieron en este tiempo solamente si la estimación previa ocurrió más que 4 semanas antes del retiro.

La dosis y programa de administración de 17-AAG en el experimento fueron como sigue. 17-AAG se administró intravenosamente dos veces semanalmente durante 2 semanas (en el Día 1, 4, 8 y 11) cada 3 semanas en dosis escaladas (calculado mg/m2) infusionadas durante 60 minutos después de la pre-medicación. Para pacientes con una área de superficie del cuerpo mayor que 2.4 m2, la dosificación se calculó utilizando un BSA máximo de 2.4 m2. ¡ La preparación y administración de 17-AAG fue como sigue. 17-AAG se disolvió en propilenglicol al 30%, Crerrophor® EL al 20% y etanol al 50% a una concentración de 10 mg/mL en el frasquito. El producto de fármaco fue disponible en frasquitos de vidrio claros de tipo 1 de 20 mL con | un terminado de 20 mm (que contiene 200 mg/frasquito) . Los frasquitos se cerraron con tapones de suero recubiertos de Teflón gris 20 mm y tapas recubiertas de laca blanca 20 mm. Esto se diluyó 1:7 antes de la administración con WFI I esté'ril, USP (una parte de producto de fármaco no diluido a 6 partes de WFI estéril) . La dilución se realizó bajo condiciones asépticas, controladas. El producto de fármaco diluido final tuvo una concentración de aproximadamente 1.43 mg/mL. 17-AAG se preparó ya sea utilizando contenedores al vacilo de vidrio o bolsas de mezcla no de PVC compatibles, no de DEHP (di (2-etil-hexil) ftalato) IV. Ambos sistemas requjieren equipos de administración que contienen nada de PVC,| nada de DEHP y ya sea un filtro en línea 0.22 µm o uso de ?n equipo de extensión que contiene tal un filtro. Debido a la sensibilidad a la luz del 17-AAG, se aconseja la protección de la luz. Dependiendo del área de superficie del cuerpo y la dosijs asignada para pacientes individuales, la dosis de 17-AAG | requiere diferentes volúmenes de producto de fármaco que sean adicionados a la bolsa de la mezcla. Un sobrellenado se calculó para tener en cuenta cualquier pérdida en el equipo de c.dministración. Como es notado anteriormente, 17-AAG se administró intravenosamente durante 60 minutos dos veces semanalmente durante 2 semanas cada 3 semanas. La dosis total suministrada se redondeó al miligramo más cercano. Todos los pacientes se pre-medicaron antes de cada inf?sión de 17-AAG. Un régimen de pre-medicación apropiado se medicar con loratidina 10 mg p.o., famotidina 20 mg p.o. y ya sea metilprednisolona 40-80 mg IV o dexametasona 10-20 mg IV 30 minutos antes de la infusión de 17-AAG. La selección de la antihistamina y corticosteroide, la ruta de administración, dosis antes de la infusión de 17-AAG estuvo a juicio del investigador, pero fue similar a la profilaxis para otros procuctos que contienen Cremophor® (tal como Taxol®, paclitaxel) . Dosis de corticosteroides fueron más bajas si el paci|ente estuvo recibiendo prednisona concomitante. El régijmen de premedicación de dosis alta fue para pre-medicar con ¡ difenhidramina 50 mg IV, famotidina 20 mg IV y ya sea metilprednisolona 80 mg IV o dexametasona 20 mg IV, por lo menos 30 minutos antes de la infusión de 17-AAG. I Las dosis y el programa del fármaco de estudio fueron como sigue. El grupo de pacientes inicial recibió la infusión intravenosa de 17-AAG en una dosis unitaria de 150 mg/rh2. Grupos de pacientes subsecuentes se enrolaron por el esquema de escalación resumido en la tabla que sigue, como es soportado por toxicidades observadas. Los grupos subsecuentes recibieron las siguientes dosificaciones: 220 mg/m2, 275 mg/m2 y 3|40 mg/m2. con escalación de dosis para ocurrir si <1 de cada 6 pacientes evaluables tienen DLT en el nivel de dosis 340 mg/m2. Tres pacientes se asignaron a cada grupo. Si nada de DLT se observó en un grupo de tres pacientes evaluables parp la decisión de escalación de dosis ("evaluable" se define aquí como que tiene recibido cuatro tratamientos en un período de la semana 3 y no haber sido retirado debido a la j toxicidad relacionada con el fármaco) , entonces el siguiente nivel de dosis fue evaluado. Si uno de tres pacientes evaluables experimentan un DLT, entonces el grupo se incrementó a seis pacientes evaluables. Si dos o más de seis pacientes evaluables en un grupo experimentaron un DLT, entonces el MTD se consideró que se ha excedido; todas las acumulaciones adicionales estuvieron en el nivel de dosis previo. Si no más que uno de los seis pacientes experimentaron un DLT, entonces el siguiente nivel de dosis se evaluó. Una vez que el MTD se definió, un número adicional de pacientes se alistaron para llegar a un total acumulativo de 12 pacientes en el nivel de dosis de MTD. Veintidós pacientes se trataron de acuerdo con este protocolo. Los pacientes tuvieron un KPS medio de 90. El 17-AAG se administró durante aproximadamente 1.0 hora. De estos 22 pacientes, actualmente 19 son evaluables. Cuatro pacientes se administraron con la dosis 150 mg/mi (una hora de infusión intravenosa) dos veces semanalmente durante cada 2 de cada 3 semanas. De estos cuatro pacientes, todos los cuatro son evaluables. Uno mostró un MR (por lo menos 25% de reducción de proteína M de suero) . DLT no se observó en cualquiera de estos cuatro pacientes. Nueve pacientes se administraron con la dosis 220 mg /m2l luna hora de infusión intravenosa) dos veces sema '1?almente durante cada 2 de cada 3 semanas. De estos nueve pacientes, siete son actualmente evaluables. De estos siete pacientes evaluables, cuatro son de enfermedad estable y tres son de enfermedad progresiva. DLT se observó en un paciente; el EpLT fue infiltración de higado de células de plasma con un ALT elevado Grado 3. Nada de DLT se observó en los otros seis pacientes. El análisis de BMAs de los pacientes mostraron apo^tosis incrementada (como es determinada por el potencial mitfcondrial de medición) y la disminución Akt comparando los datos para que sea obtenida una clasificación en el Día 11 (p=0.06). Leucocitos de sangre periférica (PBL) mostraron indicción reactiva de Hsp70 después del tratamiento con 17-AAG i i Tres pacientes se administraron con la dosis 275 mg/ijn2 (una hora de infusión intravenosa) dos veces semánalmente durante cada 2 de cada 3 semanas. De estos tres pacientes, todos los tres son evaluables. Nada de DLT se observó en cualquiera de estos tres pacientes. j Seis pacientes se administraron con la dosis 340 mg/m2 (una hora de infusión intravenosa) dos veces semanalmente durante cada 2 de cada 3 semanas. De estos seis pacientes, cinco son evaluables. Diferente al paciente individual con una ALT elejvada Grado 3, solamente las toxicidades relacionadas con el ¡fármaco observados en los pacientes fueron transaminasas elevadas Grado 1-2, nausea, fatiga, diarrea, anemia, mialgias y salpullido. Nada se observó de contraindicación a fármacos que contienen Cremophor®. j De los pacientes anteriores, 19 pacientes evaluables se han evaluado para la actividad anti-mieloma . De estos 19 pacientes, hay un paciente con una MR, once pacientes con enfermedad estable después de tres o más ciclos de tratamiento. Un paciente fue considerado un PR (90% de reducción de proteina M de orina) pero fue retirado del estudio para el salpullido de la piel y alteración. El por ciento de pacientes con respuesta (MR) es 5%, y el por ciento de pacientes con enfermedad estable es 58%. De los cuatro pac:.entes dosificados a 150 mg/m , un paciente tuvo una MR, dos tuvieron enfermedad estable y uno tuvo enfermedad progresiva. De los siete pacientes dosificados a 220 mg/m2, cuat.ro pacientes tuvieron enfermedad estable y tres tuvieron enfermedad progresiva. De los tres pacientes dosificados a 275 mg/m2, todos los tres tuvieron enfermedad estable. De los cinto pacientes dosificados a 340 mg/m2, dos pacientes tuvieron enfermedad estable y tres tuvieron enfermedad progresiva . El análisis de PK se realizó como sigue. La sangre se ¡recolectó como sigue para el análisis de concentración de fárjnaco de plasma: pre-dosis, 30 mins intra-infusión, justo ant s de la infusión final (EOI) y 5, 15, 30 minutos y 1, 2, 4, ¡8 y 24 horas de pos infusión. Figuras 1-3 y 5 grafican la concentración de plasma de 17-AAG y un mayor metabolito, 17-amino geldanamicina (17-AG), contra el tiempo actual por grupo de dosis. La Figura 4 muestra el Día 1 y el Día 11 curv.as de la media para el fármaco parental y metabolito para el grupo de dosis 275 mg/m2. Las curvas de concentración de plasma vs. tiempo para el fármaco parental 17-AAG y el mayor metabolito (17-AG) demostraron decaimiento muy similar para el Día 1, después de la plrimera infusión y el Día 11, y después de la cuarta infusión de 17-AAG (Figura 4) . Las desviaciones estándar de i inteijpaciente fueron pequeñas. ! Las curvas de concentración de plasma vs . tiempo excedje el fármaco parental de aproximadamente 3 horas pos infusión para los grupos 150 y 275 mg/m2 y aproximadamente 7 horas pos infusión para el grupo 220 mg/m2. El Cmax de 17-AAG incrementado en una dosis aproximadamente de manera propo cional. Sin embargo, la Cmax del metabolito 17-AG no incrementado de una manera proporcional de dosis. El Cmax de 17-AAG aparentemente va hacia arriba con dosis incrementadas de 17?-AAG pero no es necesariamente verdadero para la Cmax de 17-AGJ Esto es verdades para las dosis 275 y 340 mg/m2. (Ver i Figura 7 ) . 1 El patrón de eliminación no cambió desde el Día 1 al Dí^ 11 como es demostrado por todos los tres pacientes en el nivel de dosis 275 mg/m2 (Figura 4). Ninguno de estos mostlró niveles de plasma de pre-dosis no cero en el Día 11. i En (embargo, para el nivel de dosis 220 mg/m2, huvo i concentración de metabolito en los niveles uniformes en el Día l para 2 de cada de los 10 pacientes. Ambos de estos pacientes tuvieron cavidad más lenta para 17-AAG que promedia (CL = 16.8 y CL = 17.3 L/h/m2 comparado al promedio para el i grupo CL = 25.3 ± 9.6 L/h/m2). ' Parámetros de PK se calcularon sobre los datos de tiempo de concentración de plasma mediante el análisis no compartamental utilizando el software Kinetica versión 4.3 i (Innaphase, Champs sur Marne, Francia). AUC se calculó medialnte la regla log-lineal de mezclado: la regla lineal se i apliqó al intervalo donde la concentración estuvo ascendiente y lal regla log-lineal se aplicó al intervalo donde la I concentración estuvo descendiente. La AUCúitia es el área de t=0 a túitimaí el último tiempo de muestreo. AUCextra es el área extrapolada de AUCúitima al infinito y AUCtotai = AUCúitima + AUCextta Y es también llamada área AUC0-oo bajo la curva de I tiempo de concentración de tiempo cero al infinito. La constante de velocidad terminal ?z se calculó en por lo menos tres puntos sobre la curva de eliminación con valores mayores que ejL limite inferior de cuantificación. La Tabla 4 lista los parámetros de PK para 17-AAG (promedio + una desviación i estándar) . La Tabla 5 lista las áreas, Cmax, y vida media para el metabolito 17-AG (promedio ± una desviación estándar) . A través de todos los pacientes, la vida media para 17-AAG varió de 2.19 ± 0.58 horas a 3.68 ± 0.27 horas. A través de todcs los pacientes, la vida media para 17-AG varió de 4.6 ± 0.5Q horas a 5.40 ± 1.39 horas. No hubo dependencia de dosis para la vida media, evacuación o volúmenes distributivos de estas dosis de administraciones. La cavidad sistémica total para 17-AAG varió de 38.18 ± 11.10 L/h a 54.92 ± 6.76 L/h. El volumen distributivo (V2) para 17-AAG varió de 159.6 ± 54.4 L a 2Ó4.2 ± 65.6 L. El volumen distributivo (Vss) para 17-AAG varió de 123.4 ± 23.4 L a 170.9 ± 41.7 L.

Tabla 4 — Parámetros de PK para 17-AAG Dosis (mgm ) Parámetro de PK 150 220 275 340 (ng/mL) 2,403 ± 605 4,671 ± 1,449 6,820 ±1,715 9,355 ± 2,678 AUCaiü,*, (ng/ml*h) 5,304 ±757 9,162 ±2,778 13,411 ±1,482 18,653 ±4,020 AUCtotai (ng/mL*h) 5,592 ± 757 9,460 ± 3,788 13,803 ± 1,540 18,997 ±4,195 Terrninal T?/2 (h) 2.19 ±0.58 2.68 ± 0.99 2.96 ±1.34 3.30 ±0.83 Cavidad (L/h) 54.92 ± 6.76 46.77 ±14.66 39.63 ± 8.92 35.71 ±9.08 V«(L) 169.9 ±30.3 171.0 ±67.1 159.6 ±54.4 174.0 ±71.2 V3S(L) 170.9±41.7 139.1 ±45.7 123.4 ± 23.4 101.3 ±27.7 Tabla 5 — Parámetro de PK para 17-AG Dosis (mg/m ) Parámetro PK 150 220 275 340 Cmx. (ng/mL) 725 ±191 689 ±265 1,493 ±426 1,644 ±440 AuCnipmo (ng/ml*h) 5,232 ±3,489 5,351+2,485 9,335 ±2,400 12,613 ±5,369 AUCtotai (ng/mL*h) 5,787 ±3,785 4,645 ±2,585 9,636 ±2,400 13,121 ± 5,658 Terminal T1/2 (h) 5.40 ±1.39 5.25 ±1.01 4.76 ±0.34 4.70 ±0.50 ! AUCtotai se incrementó con la dosis para 17-AAG, para el raetabolito tanto los niveles promedio de AUCtota? como el promedio de Cmax fueron inferiores que los que serian esperados para una respuesta de dosis lineal para el grupo 220 i mg/m2. En estos 17 pacientes, no hubo incremento en la AUCtbtai entre el Día 1 y el Día 11 para 17-AAG. Para el metabolito (17-AG), los resultados fueron similares sin patifón de incremento o disminución (Figura 6). Sin embargo, i para dos pacientes sobre 150 mg/m2, la AUCtotai para el metcbolito excedió la AUCtotai del fármaco parental. Entre los pacientes, la relación del metabolito al fármaco parental varió ampliamente, de 31% a 173%. Desde el Dia ¡ 1 al Dia 11 la relación fue similar para cualquier paciente específico algunas veces ligeramente más superior y para1 otros pacientes ligeramente inferior. Consecuentemente, aunc[ue la relación de interpaciente grandemente difiere, cada paciente metaboliza el fármaco de una manera única la cual no cambia con dosis subsecuentes. Este experimento empleó una formulación de 17-AAG en ¡ una base de Cremophor® ( cf. La formulación de DMSO/fosfolípido de huevo utilizada en un experimento previo (Bar.erji y colaboradores, 2002)). La Figura 7 superimpone el promedio de Cmax de 17-AAG y 17-AG para los resultados de este experimento sobre los resultados de aquel experimento previo. La Figura 8 hace lo mismo para la AUCtotai de 17-AAG.

Los resultados para 17-AAG indican que no hay diferencia en la Cmax o la AUCotai para las dos formulaciones. La variación muy amplia en AUCotai para el nivel de dosis 320 mg/m2 en Banerji y colaboradores, (2002) no fue visto en ya sea los niveles de dosis 275 mg/m2 o 340 mg/m2 para el presente estudio. El volumen de infusionados para el producto de Cremophor® para los 340 mg/m2 fue aproximadamente 428 cc suministrado en durante 1 hora. El volumen de infusionado par^ el producto de fosfolípido de huevo/DMSO para los 320 mg/?j?2 fue aproximadamente 576 cc suministrado en durante 1 hor^. Aunque los resultados para los primeros pacientes casi pueden aparecer para dar una Cmax inferior para el metabolito que i se encontró en el previo estudio utilizando la formulación de DMSO/fosfolípido de huevo, hay también pocos pacientes para asegurar el significado estadístico. La vida media (T?2) para 17-AAG y para 17-AG fue similar a otros estudios y los resultados CL = 47.52 ± 12.81 L/h¡ y Vss = 144.45 ± 43.51 L fueron muy cercanos a los valores reportados en un previo estudio para tratar varios tumores sólidos para el programa de dosificación semanalmente i (Baherji y colaboradores, 2002; 17-AAG CL = 33-71 L/h, Vss = 130 ¡ ± 50 L y ti 2 = 2.98 ± 1.0 horas). Análisis de PD se realizó e indicó lo siguiente. El dató PD para las dosis 150 mg/m2 y 220 mg/m2 indica que BMAs obtenido antes de la administración de 17-AAG y en el Día 11 tiér.e un incremento en apoptosis y una disminución en pAKT. BMAs se obtuvieron de pacientes pre-estudiados (antes de la administración de 17-AAG) y en el Dia 11. Células MM se purificaron mediante un Distribuidor de Célula Activado de Fluorescencia (FACS) del BMA basado en la expresión CD138. Estas células CD138+ recolectadas luego fueron probadas para el ¡potencial mitocondrial anormal mediante la medición de potencial mitocondrial en células de plasma utilizando Annéxin V (BD Biosciences, San José, CA) . La Figura 9 muestra el por ciento de apoptosis de células de mieloma CD138+ de muestras de pacientes antes de administrar 17-AAG y en el Día 11. El potencial mitocondrial anormal se observa antes de la apoptosis de aquella célula (muerte de célula programada) . El significado estadístico de la apoptosis incrementada tiene valor p de 0.06. El por ciento de células CD128+ con potencial mitocondrial anormal en BM incrementó de menos que 5% (antes del tratamiento) a más que 40% (en el Dia 11 del trabamiento) . El por ciento de cambio incrementó por más que 35%? El por ciento de cambio se incrementó por más de ocho veces . ¡ Las BMAs recolectadas también mostraron AKT y pAKT fosforilado incrementado cuando se comparan muestras de pacientes antes de administrar 17-AAG y en el Dia 11 (ver Fig,. 10) . La Figura 10 muestra el por ciento de células que tiehen AKT detectado durante el número total de células BM.

AKT es una proteina de señalización que es subregulada en célalas de mieloma sobre la ruta intracelular Ras/Raf/MAPK crítica para el crecimiento y progresión de célula de mieloma. El significado estadístico de la disminución en células AKT+ tiene un valor p de 0.057. El por ciento de células AKT+ sobre células BM total disminuyó de más que 20% (antes del tratamiento) o menos que 10% (en el Día 11 del tratamiento) . El por ciento de cambio disminuyó por más que 10%. El por ciento de cambio disminuyó por más que una mitad. I El PBL obtenido de pacientes antes de y cuatro hor^s después de las infusiones de 17- AAG en el Día 1 y el Día 11 fueron corridas sobre un gel de proteína e inmúnomanchado para Hsp70 total, AKT, ILK, raf-1 y LCK. La Figura 10 muestra los resultados para dos pacientes (una dosis a 275 mg/m2, y la otra a 340 mg/m2) . Los resultados para ambos de estos pacientes mostraron un incremento de Hsp70 (ve): la Fig. 11), la respuesta de estrés de calor tipico vis :o con inhibidores HSP90. La medición de punta M de suero y proteína M de oriha en un paciente tratado en el nivel de dosis 150 mg/m2 mostró una reducción de 41% de proteína M de orina después de dos ciclos de tratamiento (Figura 12) . El paciente se conjsidera por tener un MR. El paciente tuvo los siguientes regímenes antes del alistamiento en este estudio (y los resultados respectivos de estos tratamientos previos) : VAD respuesta no conocida) , bortezomib (enfermedad progresiva) , bortezomib/dexametasona (enfermedad estable) , lenalidomida enfermedad progresiva) y transplante autólogo. La medición de punta M de suero e IgG en un paciente tratado en el nivel de dosis 275 mg/m2 mostró una reducción de 11% de punta M de suero después de ocho ciclos de tratamiento (ver la Figura 13) . El paciente se considera por tener una enfermedad estable tres meses, sin cualquier trat.amiento, después de completar los ocho ciclos de tratamiento. El paciente tuvo los siguientes regímenes antes de alistarse en este estudio (y los resultados respectivos de estos antes del tratamiento) : talidomida/dexametasona (PR) , talídomida/dexametasona/ciclofosfamida (PR), bortezomib (PR) y dexametasona (enfermedad progresiva) . Aunque la presente invención se ha descrito en detalle con referencia a modalidades específicas, aquellos de hab?lidad en la técnica reconocerán que modificaciones y mejoramientos están dentro del alcance y espíritu de la invención. La citación de publicaciones y documentos de patente no se propone como una admisión que cualquiera de tal documento es pertinente de la técnica previa, esto no constituye cualquier admisión como a los contenidos o datos de la misma. La invención habiéndose ahora descrito por medio de i la descripción escrita, aquellos de habilidad en la técnica reconocerán que la invención se puede practicar en una variedad de modalidades y que la descripción anterior son para, propósitos de ilustración y no de limitación de las siguientes reivindicaciones. Referencias Adams y colaboradores, (2005), WO 2005/063714. Clin . Cáncer. Res .

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Claims (1)

1. REIVINDICACIONES i 1. Un método para tratar mieloma múltiple (MM) en un isujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende la etapa de administrar al sujeto una for :mnj?ulación farmacéutica que comprende una dosis I terapéuticamente efectiva de 17-alilamino-17-dem^toxigeldanamicina (17-AAG) o 17-aminogeldanamicina (17-AG) o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG, y opcionalmente un ¡portador o diluyente farmacéuticamente aceptable, y opcionalmente repetir la etapa de administración hasta que no se obtiene beneficio terapéutico adicional. 2. Un método para tratar MM en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende la etapa de administrar al sujeto dosis múltiples de 17-AAG o 17-AG o un profármaco de ya sea 17-AAG o 17-AG al paciente durante un período de tiempo de por lo menos 2 semanas, en donde cada una de tal dosis está en el intervalo de aprcximadamente 275 a aproximadamente 420 mg/m2 de 17-AAG, o una cantidad equivalente de 17-AG o un profármaco de 17-AAG o prof|ármaco de 17-AG. | 3. El método de conformidad con la reivindicación 2, ' caracterizado porque cada dosis de 17-AAG es aproximadamente 340 mg/m2 o una cantidad equivalente de 17-AG o uní profármaco de 17-AAG o profármaco de 17-AG. 4. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la dosis se administra dos veces semanalmente durante por lo menos dos semanas. ' 5. El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la dosis se administra dos veces semánalmente durante por lo menos dos semanas en un período de tres semanas. I 6. El método de conformidad con la reivindicación i 5, caracterizado porque los múltiples ciclos de tratamiento I se administran al sujeto, en donde cada ciclo de tratamiento comprende de la dosis administrada dos veces semanalmente durante por lo menos dos semanas en un período de tres semanas . 7. Un método para tratar MM en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende la taPa de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG que da por resultado una AUCtotai de 17-AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 a aproximadamente 25,000 ng/mL*h. í 8. El método de conformidad con la reivindicación 7, ¡caracterizado porque la dosis se administra a una 1,8 0 ng/mL. 10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la dosis se administra en una propOrción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 3, OCO ng/mL. 11. El método de conformidad con la reivindicación I 7, ¡caracterizado porque la dosis se administra en una Cmax de 17-AAG es mayor que ¡ 12. El método de conformidad con la reivindicación 11, l caracterizado porque la dosis se administra en una propprción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que I 3,O?|? pero no excede 15,000 ng/mL. 13. Un método para tratar MM en un sujeto en el método caracterizado porque inistrar al sujeto una dosis 17-AG o un profármaco de 17-AG Cotai de 17-AG por dosis en el 5,000 ng/mL*h a aproximadamente i 14. El método de conformidad con la reivindicación 13, icaracterizado porque la dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AG no excede . El método de conformidad con la reivindicación la dosis se administra en una que la Cmax de 17-AG es mayor que i ¡ 16. El método de conformidad con la reivindicación 15, I caracterizado porque la dosis se administra en una propprción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AG es mayor que I 900 hg/mL. 17. El método de conformidad con la reivindicación 13, | caracterizado porque la dosis se administra en una i proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AG es mayor que 500 pero no excede 2,000 ng/mL. i 18. El método de conformidad con la reivindicación i 17, ^caracterizado porque la dosis se administra en una propqrción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AG es mayor que 900 ?g/mL pero no excede 2,000 ng/mL. 19. Un método para tratar MM en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende I la etlapa de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG, un profármaco de 17-AAG, 17-AG, o un profármaco de 17-AG que da por resultado una AUCtotai combinada de Í7-AAG y 17-AG por dosis en el intervalo de i aproximadamente 17,500 ng/mL*h a aproximadamente 43,000 ng/mL*h. , 20. El método de conformidad con la reivindicación I 19, caracterizado porque la dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG no excede 15, COO ng/mL o la Cmax de 17-AG no excede 2,000 ng/mL. ¡ 21. El método de conformidad con la reivindicación 19, I caracterizado porque la dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 1,800 ng/mL o la Cmax de 17-AG es mayor que 500 ng/mL. 22. El método de conformidad con la reivindicación 21, I caracterizado porque la dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 3,000 ng/mL o la Cmax de 17-AG es mayor que 900 ng/mL. 23. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque la dosis se administra en una i proporción y frecuencia tal que la Craax de 17-AAG es mayor que i 1 , 800 pero no excede 15 , 000 ng/mL o la Cmax de 17-AG es mayor I que 5|00 pero no excede 2 , 000 ng/mL . i > 24. El método de conformidad con la reivindicación i 23, caracterizado porque la dosis se administra en una proporción y frecuencia tal que la Cmax de 17-AAG es mayor que 3,000 pero no excede 15,000 ng/mL o la Cmax de 17-AG es mayor que 900 pero no excede 2,000 ng/mL. 25. Un método para tratar MM en un sujeto en I necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende I la et pa de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente i efectjva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG que da por I resultado una Terminal T1 2 de 17-AAG en el intervalo de 3 a la e|tapa e a m n strar a su eto una os s terap ut camente efectiva de 17-AG o un profármaco de 17-AG que da por resuitado una Terminal T?2 de 17-AG en el intervalo de 4 a 7 h. 28. El método de conformidad con la reivindicación 27, saracterizado porque la dosis da por resultado una AUCotai i de 17-AG por dosis en el intervalo de aproximadamente 5,000 a i aproximadamente 18,000 ng/mL*h. 29. Un método para tratar MM en un sujeto en i necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende la etjapa de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente i efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG que da por resultado un Volumen de distribución V2 de 17-AAG en el intervalo de 100 a 270 L. 30. El método de conformidad con la reivindicación i 29, caracterizado porque la dosis da por resultado una AUCotai i de 174AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 a aproximadamente 25,000 ng/mL*h. i 31. Un método para tratar MM en un sujeto en de tal tratamiento, caracterizado porque comprende de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG que da por una Evacuación de 17-AAG en el intervalo de 30 a 50 i L/h. 32. El método de conformidad con la reivindicación I 31, Caracterizado porque la dosis da por resultado una AUCtotai I I de lj-AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 a aproximadamente 25,000 ng/mL*h. 33. Un método para tratar MM en un sujeto en i necesidad de tal tratamiento, caracterizado porque comprende la etapa de administrar al sujeto una dosis terapéuticamente efectiva de 17-AAG o un profármaco de 17-AAG que da por resultado un Volumen de distribución VS3 de 17-AAG en el I intercalo de 100 a 150 L. 34. El método de conformidad con la reivindicación i 33, caracterizado porque la dosis da por resultado una AUCtotai de 17j-AAG por dosis en el intervalo de aproximadamente 12,500 I a aproximadamente 25,000 ng/mL*h. I 1 35. El método de conformidad con la reivindicación l 1, caracterizado porque la etapa de administración da por result.ado una inducción de HSP70 en las células mononucleares de sangre periférica del sujeto. ¡ 36. El método de conformidad con la reivindicación i 35, caracterizado porque la inducción de HSP70 es observable un día después de la etapa de administración. i 37. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la etapa de administración da por resultad un incremento de apoptosis de células CD138+ entre I las células aspiradas de médula ósea del sujeto. i 38. El método de conformidad con la reivindicación I 37, caracterizado porque el incremento de apoptosis de células CD138+ es observable cuatro horas después de la etapa de administración. | 39. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la etapa de administración da por i resultado una disminución de AKT total en células aspiradas de médula ósea del sujeto. I 40. El método de conformidad con la reivindicación 39, Caracterizado porque la disminución de AKT total es observable cuatro horas después de la etapa de i i administración .