MX2007010804A - Uso de lactobacillus rhamnosus gg en combinacion con un acido graso poliinsaturado de cadena larga para el tratamiento, prevencion o reduccion de la inflamacion sistemica en un infante alimentado por formula. - Google Patents

Abstract

La presente invencion esta dirigida al uso novedoso de LGG en combinacion con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para el tratamiento, prevencion o reduccion de la inflamacion sistemica en un infante alimentado por formula.

Description

USO DE LACTOBACILLUS RHAMNOSUS GG EN COMBINACIÓN CON UN ACIDO GRASO POLIINSATURADO DE CADENA LARGA PARA EL TRATAMIENTO, PREVENCIÓN O REDUCCIÓN DE LA INFLAMACIÓN SISTEMICA EN UN INFANTE ALIMENTADO POR FORMULA Campo de la Invención La presente invención se refiere en general al uso de un probiótico en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga en la manufactura de un medicamento para el tratamiento, prevención, o reducción de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula . Antecedentes de la Invención La respuesta inflamatoria es un intento del cuerpo por restablecer y mantener la homeostasia después de la invasión por un agente infeccioso, la estimulación con un antígeno, o un daño físico, químico o traumático. La inflamación localizada está contenida en una región específica y puede exhibir síntomas variables, incluyendo enrojecimiento, hinchazón, calor y dolor. Aunque la respuesta inflamatoria se considera generalmente una respuesta sana a las lesiones, el sistema inmune puede presentar una respuesta fisiológica indeseable si no es regulada apropiadamente. En estas situaciones, el sistema inmune normalmente protector del cuerpo provoca daño a su propio tejido por el tratamiento del tejido sano como si Ref .183579 estuviera infectado o fuera algo anormal. Alternativamente, si existe una lesión, la respuesta inflamatoria puede ser de proporción con el riesgo o amenaza que se este tratando. Esta respuesta inflamatoria puede causar más daño al cuerpo de lo que el propio agente podría haber producido. La respuesta inflamatoria se ha encontrado en parte que consiste de una expresión incrementada de las citocinas tanto proinflamatorias como antiinflamatorias. Las citocinas son proteínas biológicamente activas de peso molecular bajo, involucradas en la coordinación de las respuestas inmunológicas e inflamatorias y la comunicación entre las poblaciones de las células inmunes específicas. Un número de tales tipos de células producen citocinas, incluyendo neutrófilos, monocitos y linfocitos como las fuentes principales durante las reacciones inflamatorias debido a su gran número en el sitio de la lesión. Existen mecanismos múltiples por los cuales las citocinas generadas en los sitios inflamatorios tienen influencia en la respuesta inflamatoria. Si una respuesta proinflamatoria no es contrarrestada exitosamente por las citocinas antiinflamatorias, sin embargo, puede ocurrir una inflamación sistémica no controlada. En contraste con la inflamación localizada, la inflamación sistémica es dispersada en todo el cuerpo. Este tipo de inflamación puede incluir la inflamación localizada en sitios específicos, pero también puede estar localizada con los síntomas "semejantes a la influenza" generales, incluyendo fiebre, escalofríos, fatiga o pérdida de energía, dolores de cabeza, pérdida del apetito, y rigidez muscular. La inflamación sistémica puede conducir a degradación de las proteínas, catabolismo e hipermetabolismo. Como consecuencia, la estructura y función de los órganos esenciales, tales como los músculos, el corazón, el sistema inmune y el hígado puede ser comprometida y puede contribuir a la falla de órganos múltiples y a la mortalidad. Jeschke, et al., Insulin Attenuates the Systemic Inflamatory Response to Thermal Tra uma , Mol. Med. 8(8):443-450 (2002). Aunque se ha logrado un enorme progreso en el entendimiento de los mecanismos de la inflamación sistémica, la velocidad de la mortalidad debido a este trastorno permanece inaceptablemente alta. Frecuentemente, si la respuesta de la citocina es pro o antiinflamatoria depende del resto de los microorganismos individuales que colonizan el lumen intestinal en cualquier tiempo particular. Se sabe bien que la superficie mucosal del tracto intestinal está colonizada por una colección enormemente grande, compleja y dinámica, de microorganismos. La composición de la microflora intestinal varía a lo largo del tracto digestivo así como en diferentes micro-hábitats , tales como la capa de la mucosa epitelial, la capa mucosa profunda de las criptas o folículos, y la superficie de las células epiteliales mucosales. La colonización específica depende de factores internos y externos, incluyendo las moléculas disponibles luminalmente, la calidad del moco, y las interacciones del huésped-microbios y de los microbios-microbios. Murch, S.H., Toll of Allergy Reduced by Probiotics , Lancet, 357:1057-1059 (2001). Estos microorganismos, los cuales componen la microflora del intestino, están involucrados activamente con la respuesta inmune. Los mismos interactúan con el epitelio en las condiciones de las relaciones benéficas mutuas para ambos socios (simbiosis) o en condiciones de beneficio para un socio, sin que sea perjudicial para el otro (comensalismos) . Hooper, et al., How Host-Mi crobial Interactions Shape the Nutrien t Environment of the Mammalian Intestine, Annu Rev. Nutr. 22:283-307 (2002). En efecto, está surgiendo una evidencia considerable que muestra un interjuego o "interferencia" fuerte entre la microflora intestinal y las diversas poblaciones de las células en la mucosa intestinal. Bourlioux, et al., The In testine and i ts Microflora are Partners for the Protection of the Host : Report on the Danone Symposi um " The In tellingen t In testine " , llevado a cabo en París, 14 de junio del 2002, Am, J. Clin. Nutr. 78:675 (2003); Hooper L.V. & Gordon, J.I., Conmensal Host -Bacterial Rela tionships in the Gut , Sci . 292 : 1115 (2001 ) ; Haller, et al . , Non-Pa thogeni c Bacteria Eli ci t a Differen tial Cytokine Response by In testinal Epi thelial Cell/Leucocyte Co-Cul tures , GUT 47 : 79 (2000) ; WalKer, W. A. , Role of Nutrien ts and Bacterial Coloni za tion in the Developmen t of Intestinal Host Defense, J. Pedia tr . Gastroen terol . Nutr. 30 : S2 (2000) . Adicionalmente, la microflora intestinal se ha mostrado que produce respuestas inmune específicas tanto al nivel sistémico como local. Isolauri, E., et al., Probiotics : Effects on Immuni ty, Am . J. Clin . Nutr . 73 : 444S-50S (2001) . La microflora del intestino en los infantes se sabe bien que va a estar muy lejos de estar desarrollada, comparada con aquella de un adulto. Aunque la microflora del adulto humano consiste de más de 1013 microorganismos y casi 500 especies, algunas son perjudiciales y algunas son benéficas, la microflora de un infante contiene solo una fracción de estos microorganismos, tanto en el número absoluto pero también en la diversidad de las especies. Los infantes están naciendo con un intestino estéril, pero adquieren la flora intestinal desde el canal de nacimiento, su medio ambiente inicial, y lo que ellos ingieren. A causa de que la población de la microflora del intestino es muy inestable en la vida neonatal inicial, frecuentemente es difícil para el intestino del infante mantener el delicado equilibrio entre las bacterias perjudiciales y benéficas, reduciendo así la capacidad del sistema inmune para funcionar normalmente . Es especialmente difícil para los infantes alimentados por fórmula mantener este balance debido a las diferencias entre las especies bacterianas en el intestino de un infante alimentado por fórmula y un infante alimentado por el seno de la madre. Las evacuaciones de los infantes alimentados por el seno de la madre contienen predominantemente Bifidoba cterium , con Streptococcus y Lactobacillus como los contribuyentes menos comunes. En contraste, la microflora de los infantes alimentados por fórmula es más diversa, conteniendo Bifidoba cterium y Ba cterioides así como las especies más patógenas, Staphyilococcus , Escherichia coli , y Clostridia . Las diversas especies de Bifidoba cteri um en las evacuaciones de los infantes alimentados por el seno de la madre y alimentados por fórmula, son diferentes también. Una variedad de factores han sido propuestos como la causa de la diferente flora fecal de los infantes alimentados por el seno de la madre y los infantes alimentados por fórmula, incluyendo el contenido inferior y la diferente composición de las proteínas en la leche humana, un contenido de fósforo inferior en la leche humana, la gran variedad de oligosacáridos en la leche humana, y numerosos mediadores humorales y celulares de la función inmunológica en la leche del seno de la madre. Agostoni, et al., Probiotic Ba cteria in Dietetic Products for Infants : A Commen tary by the ESPGHAN Commi tee on Nutri tion , J. Pediatr. Gastro. Nutr. 38:365-374 (abril 2004). A causa de que la microflora de los infantes alimentados por fórmula es así inestable y la microflora del intestino participa ampliamente en la estimulación de la inmunidad del intestino, los infantes alimentados por fórmula es más probable que desarrollen enfermedades inflamatorias. La mayoría de las enfermedades principales que afectan a los infantes, incluyendo la enfermedad pulmonar crónica, leucomalacia periventricular, meningitis neonatal, hepatitis neonatal, sepsis, o enterocolitis necrotizante son de naturaleza inflamatoria. Dependiendo de la enfermedad particular, la inflamación acompañante puede ocurrir en un órgano específico, tal como el pulmón, el cerebro, el hígado o el intestino, o la inflamación puede ser verdaderamente en naturaleza sistémica. Por ejemplo, la enfermedad pulmonar crónica provoca que los tej idos dentro de los pulmones lleguen a ser inflamados mientras que la meningitis neonatal involucra la inflamación de los revestimientos del cerebro y de la médula espinal . La leucomalacia periventricular es provocada por el daño inflamatorio al área periventricular en el cerebro en desarrollo. La enterocolitis necrotizante provoca la inflamación en el intestino que puede conducir a la destrucción de una parte o la totalidad del intestino y la hepatitis neonatal involucra la inflamación del hígado que ocurre en la infancia temprana. La sepsis, también conocida como el síndrome de la respuesta inflamatoria sistémica, es una enfermedad severa provocada por una infección abrumadora de la corriente sanguínea por las bacterias que producen toxinas, en donde la presencia de patógenos en la corriente sanguínea produce una respuesta inflamatoria de principio a fin en el cuerpo completo. Los infantes prematuros y enfermos críticamente también representan un serio desafío en términos de desarrollo de inmunidad del intestino y de prevención de la inflamación sistémica. Los infantes prematuros o enfermos críticamente son colocados frecuentemente de manera inmediata en incubadoras estériles, en donde ellos permanecen no expuestos a las poblaciones bacterianas a las cuales los infantes normales, sanos, podrían estar expuestos normalmente. Esto puede retardar o dañar el proceso de colonización normal . Estos infantes también son tratados frecuentemente con antibióticos de amplio espectro, los cuales exterminan las bacterias comensales que intentan colonizar el tracto intestinal del infante. Adicionalmente, estos infantes frecuentemente son alimentados por medio de una fórmula para infante, en lugar de la leche de la madre. Cada uno de estos factores puede provocar que la microflora del intestino del infante se desarrolle inapropiadamente, provocando así o precipitando la inflamación sistémica amenazante de la vida. Una manera de estimular la colonización del intestino con microorganismos benéficos en infantes alimentados por fórmula es por medio de la administración de bacterias probióticas. Las bacterias probióticas son microorganismos vivientes que ejercen efectos benéficos en la salud del animal hospedero. Lactobacillus spp. y Bifidobacterium spp . , los cuales son habitantes normales del intestino sano, son especies comunes de probióticos. Desafortunadamente, existen muy pocos estudios publicados sobre los efectos clínicos del suplemento probiótico en infantes. Agostoni, C, et al . , Probiotic Bacteria in Dietetic Products for Infants : A commentary by the ESPGHAN Commi t tee on Nutri tion , J. Pediatr. Gastro. Nutr. 38:365-374 (2004). Se sabe aún menos acerca de la capacidad de los probióticos para regular la inflamación intestinal y alterar la propagación de la respuesta inflamatoria a otros órganos en los infantes . Los resultados de los estudios con respecto a los efectos de los probióticos sobre infantes son controversiales . Por ejemplo, un estudio de 1994 concluyó que la administración de las fórmulas para infantes estándares suplementadas con Bifidoba cteri um la ctis y Streptococcus thermophil us redujo la frecuencia de la diarrea nosocomial comparado con el placebo. Saavedra, J. , et al., Feeding of Bifidobacterium bifidum y Streptococcus thermophilus to infants in Hospital for Prevention of Diarrhea y Shedding of Rotavirus , Lancet 344:1049-79 (1994). En contraste, sin embargo, un estudio de 1999 no reportó efecto protector de la fórmula para infantes suplementada con Bifidoba cterium sola o en combinación con S . thermophil us durante los episodios de diarrea. Phuapradit, P., et al., Reduction of Rotavirus Inf ection in Children Receiving Bifidobacteria-Suplemented Formula , J. Med. Assoc. Thai . 82:S43-48 (1999). La solicitud de patente U.S. No. 20040208863 a favor de Versalovic, et al. está dirigida a un compuesto que tiene actividad antiinflamatoria y es secretada de las bacterias del ácido láctico. La solicitud describe el uso de Lactoba cill us rhamnosus GG (LGG) para inhibir la producción de citocinas proinflamatorias. La referencia, sin embargo, se enfoca sobre los modelos de adultos y no describe o sugiere que la invención podría ser benéfica para infantes. Como se explicó anteriormente, el intestino y el sistema inmune de un infante son muy diferentes de aquellos de un adulto. A causa de que las poblaciones y especies bacterianas varían inmensamente entre el intestino de un infante y un adulto, y la gran diferencia en la madurez del sistema inmune en estas dos poblaciones, no se puede suponer que se podría lograr el mismo resultado en un infante .

La solicitud de patente U.S. No. 20040147010 a favor de Vidal, et al. se refiere a un método de reducción o prevención de los procesos inflamatorios asociados con la enfermedad mediada bacterianamente en el tracto Gl, los huesos, la piel, los ojos, los oídos, los pulmones y la cavidad oral de un ser humano. El método comprende administrar una cantidad efectiva de ácido lipoteicoico (LTA) de las bacterias del ácido láctico y/o la administración de una bacteria de ácido láctico que produce LTA. La solicitud también señala que estas composiciones podrían modificar la colonización bacteriana y la infección durante el período neonatal . Las cepas bacterianas de la solicitud de Vidal fueron Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus johnsonii . Vidal no indicó el uso de LGG. En efecto, Vidal describe que "los LTAs de las bacterias Gram-positivas muestran una diversidad grande desde una cepa bacteriana hasta otra" . Vidal app., p. [0006] . Por lo tanto, no se debe suponer que solamente a causa de que L . acidophil us y L . jonhsonii provocaron un efecto inflamatorio en la línea celular colónica adulta que fue evaluada, todas las especies de Lactobacillus lo podrían hacer. Vidal señala adicionalmente que el LTA de ciertas especies de bacterias tiene un papel mediador en el efecto proinflamatorio en lugar de un efecto antiinflamatorio sobre las células inmunes. Vidal app., p. [0005] . Así, a causa de que LTA puede ser proinflamatorio o antiinflamatorio, dependiendo de las especies bacterianas, la descripción de Vidal está limitada a las especies descritas específicamente. Como Vidal lo ha reconocido en un artículo publicado, "La actividad biológica de LTAs [de diferentes especies bacterianas] no puede ser predicha". Vidal, et al., Lipoteichoic Acids from Lactobacillus johnsonii Strain Lal and Lactobacillus acidophilus Strain Lal O Antagonize the Responsiveness of Human Intestinal Epi thelial HT29 Cells to Lipopolysaccharide and Gram-Nega tive Bacteria , Infect. Imun. 70:2057-2064 (2002) . Basado en las referencias anteriores, el efecto de LGG en el sistema inmune del infante no ha sido descrito hasta ahora. Existen diferencias grandes y fundamentales entre el intestino del infante y el sistema inmune, comparado con aquellos de un adulto. Por lo tanto, los estudios que se enfocan en los adultos o las líneas celulares de adultos, no son útiles en la evaluación del efecto de LGG en los infantes. No se ha mostrado previamente que LGG exhiba un efecto inmune sistémico sobre infantes alimentados por fórmula. Además, tampoco se ha mostrado que el suplemento de LGG en los infantes alimentados por fórmula podría prevenir o reducir la inflamación sistémica a un nivel semejante a aquel de un infante alimentado por el seno de la madre. En consecuencia, podría ser benéfico proporcionar un método de reducción o prevención de la inflamación sistémica en los infantes alimentados por fórmula, que comprende la administración de LGG. Breve Descripción de la Invención Brevemente, por lo tanto, la presente invención está dirigida al uso novedoso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para el tratamiento, prevención, o reducción de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula. La presente invención también está dirigida al uso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula hasta un nivel semejante a aquel de un infante alimentado por el seno de la madre. Adicionalmente, la presente invención está dirigida al uso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la inflamación en uno o más órganos de un infante alimentado por fórmula, seleccionados del grupo que consiste del tracto intestinal, hígado, plasma, pulmones, y cerebro.

En otro aspecto, la presente invención está dirigida a un uso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención del daño físico en la mucosa intestinal de un infante alimentado por fórmula. La presente invención también está dirigida al uso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) , en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la liberación sistémica de una o más citocinas o quimiocinas proinflamatorias en un infante alimentado por fórmula. La presente invención está dirigida adicionalmente al uso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la liberación sistémica de miloperoxidasa (MPO) en un infante alimentado por fórmula. Entre las diversas ventajas que se encontró que van a ser logradas por la presente invención, se encontró que la misma reduce o previene la inflamación sistémica en los infantes alimentados por fórmula. Además, la presente invención reduce o previene la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula a un nivel semejante a aquel de un infante alimentado por el seno de la madre. La invención puede reducir la inflamación en el tracto gastrointestinal, hígado, plasma, pulmones, y cerebro. Todavía otra ventaja de la presente invención es que la misma previene o reduce el daño físico en la mucosa intestinal de un infante alimentado por fórmula. Adicionalmente, la invención reduce o previene la liberación de varias citocinas y quimiocinas proinflamatorias en infantes alimentados por fórmula, incluyendo el factor a de necrosis tumoral (TNFa) , la interleucina-lß (IL-lß) , IL-6, IL-18 y los niveles del oncogén relacionado con el crecimiento (GRO/KC) . Debido a que la presente invención puede ser utilizada para mejorar la condición inflamatoria en un infante, la misma también puede prevenir el inicio de infecciones o enfermedades perjudiciales . Breve Descripción de las Figuras Para un entendimiento más completo de la presente invención, se hace referencia ahora a las siguientes descripciones tomadas en conjunción con las figuras que se anexan . La figura 1 ilustra el efecto de LGG sobre el crecimiento en las crías de la rata, expresado como el peso corporal durante el transcurso del tiempo del estudio. La figura 2A, figura 2B, figura 2C, figura 2D, figura 2E, figura 2F, figura 2G, figura 2H, figura 21, ilustran el efecto de LGG sobre la morfología intestinal de las crías de la rata, como se muestra por micrografías del tejido intestinal bajo las condiciones de inflamación con o sin la LGG. La figura 3A, figura 3B, figura 3C, y la figura 3D, ilustran el efecto de LGG sobre la producción del péptido quimioatrayente del neutrófilo 1 inducido por citocina (CINC-1) del intestino (figura 3A) , hígado (figura 3B) , el plasma (figura 3C) , y el pulmón (figura 3D) , utilizando el ensayo inmunosorbente enlazado a la enzima (ELISA) . La figura 4A, y la figura 4B ilustran el efecto de LGG sobre la producción de TNF-a del plasma (figura 4A) y el pulmón (figura 4B) utilizando ELISA. La figura 5A, y la figura 5B ilustran el efecto de LGG sobre la actividad de MPO intestinal del intestino delgado distal (figura 5A) y el pulmón (figura 5B) . La figura 6A y la figura 6B ilustran el efecto de LGG sobre la abundancia de la citocina. La figura 6A muestra los niveles de citocina en el pulmón y la figura 6B muestra los niveles de citocina en el plasma. Descripción Detallada de la Invención Ahora se hará referencia con detalle a las modalidades de la invención, uno o más ejemplos de la cual se describirán posteriormente. Cada ejemplo está provisto a manera de explicación de la invención, no de limitación de la invención. En efecto, será evidente para aquellos expertos en el arte que se pueden hacer varias modificaciones y variaciones en la presente invención sin apartarse del alcance o espíritu de la presente invención. Por ejemplo, las características ilustradas o descritas como parte de una modalidad, pueden ser utilizadas en otra modalidad para dar una modalidad todavía adicional. Por consiguiente, está propuesto que la presente invención cubre tales modificaciones y variaciones como las que están dentro del alcance de las reivindicaciones anexas y sus equivalentes. Otros objetos, características, y aspectos de la presente invención son descritos en, o son obvios de la siguiente descripción detallada. Se va a entender por una persona con experiencia ordinaria en el arte que la presente exposición es una descripción de las modalidades ejemplares solamente, y no está propuesta como limitativa de los aspectos más amplios de la presente invención. Abreviaturas Cuando se utilicen aquí, las siguientes abreviaturas son utilizadas. LGG, La ctobacillus rhamnosus GG; LCPUFA, ácido graso poliinsaturado de cadena larga; LPS, lipopolisacárido; IL, interleucina; TNF, factor de necrosis tumoral; CINC-1, quimioatrayente del neutrófilo 1 inducido por citocina; GRO/KC, oncogén relacionado con el crecimiento; ELISA, ensayo inmunosorbente enlazado a la enzima,- RT-PCR, reacción en cadena de la polimerasa-transcripción inversa; ANOVA, análisis de la varianza; SD, desviación estándar; PAF, factor de activación de las plaquetas, RMS, substituto de leche de la rata; MPO, miloperoxidasa; TLRs, factores semejantes a Toll; EPA, ácido eicosapentanoico; DHA, ácido docosahexanoico; ARA, ácido araquidónico. Definiciones El término "probiótico" significa un microorganismo que ejerce efectos benéficos sobre la salud del animal hospedero. El término "prebiótico" significa un ingrediente alimenticio no digerible que estimula el crecimiento y/o la actividad de los probióticos. Cuando se utilice aquí, el término "tratamiento" significa la mejora, alivio o remedio de una enfermedad, trastorno o síntoma de una enfermedad o condición. El término "reducción" significa una disminución en la extensión, cantidad o grado. El término "prevención" significa detener o impedir una enfermedad, trastorno, o síntoma de una enfermedad o condición por medio de alguna acción. El término "sistémico", como se utiliza aquí, significa que se refiere a, o que afecta el cuerpo completo. Los términos "cantidad efectiva terapéuticamente" se refieren a una cantidad que conduce a una mejora o remedio de la enfermedad, trastorno, o síntomas de la enfermedad o condición.

El término "prematuro" significa un infante nacido antes del final de la 37/ava. semana de gestación. El término "infante" significa un ser humano que es menor que aproximadamente 1 año de edad. Cuando se utilice aquí, el término "fórmula para infante" significa una composición que satisface los requerimientos nutritivos de un infante porque es un substituto de la leche humana. En los Estados Unidos de América, los contenidos de una fórmula para infante están dictados por las reglas federales descritas en 21 C.F.R. secciones 100, 106 y 107. Estas reglas definen los niveles de macronutrientes, vitaminas, minerales y otros ingredientes en un esfuerzo por estimular las propiedades nutritivas y otras, de la leche del seno humano. De acuerdo con la presente invención, se ha descubierto un uso novedoso de LGG en combinación con al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (LCPUFA) en la manufactura de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula. LGG es una cepa probiótica aislada de la flora intestinal humana sana. La misma se describió en la patente U.S. No. 5,032,399 de Gorbach, et al., que es incorporada aquí en su totalidad, para referencia a la misma. LGG es resistente a la mayoría de los antibióticos, estable en la presencia del ácido y de la bilis, y se fija con avidez a las células mucosales del tracto intestinal humano. El mismo sobrevive sobre 1-3 días en la mayoría de los individuos y hasta 7 días en 30 % de los sujetos. Además de su capacidad de colonización, LGG también afecta benéficamente las respuestas inmune mucosales. LGG es depositado ante la autoridad depositaría del American Type Culture Collection bajo el número de acceso ATCC 53103. En el uso de la invención, una cantidad terapéuticamente efectiva de LGG puede corresponder a entre aproximadamente 1 x 104 y 1 x 1012 cfu/L/Kg/día para un infante. En otra modalidad, la presente invención comprende la administración de entre aproximadamente 1 x 106 y 1 x 109 cfu/L/kg/día de LGG a un infante. En otra modalidad, la presente invención comprende la administración de aproximadamente 1 x 108 cfu/L/kg/día de LGG a un infante. Los LCPUFAs adecuados, útiles en la presente invención pueden incluir, pero no están limitados a, ácido a-linoleico, ácido ?-linoleico, ácido linoleico, ácido linolénico, ácido eicosapentanoico (EPA) , ARA y DHA. En el uso de la presente invención, una cantidad efectiva de LCPUFA puede corresponder a entre aproximadamente 3 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 150 mg por kg de peso corporal por día. En una modalidad de la invención, la cantidad es desde aproximadamente 6 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal por día. En otra modalidad, la cantidad es desde aproximadamente 10 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 60 mg por kg de peso corporal por día. La forma de administración de LGG y LCPUFA en el uso de la invención no es crítica, siempre que una cantidad efectiva terapéuticamente de LGG sea administrada en combinación con al menos un LCPUFA. Más convenientemente, LGG y LCPUFA son suplementados en la fórmula para el infante que es alimentada entonces a un infante. En una modalidad, la fórmula para el infante, para su uso en la presente invención, está completa nutricionalmente y contiene tipos y cantidades adecuadas de lípidos, carbohidratos, proteínas, vitaminas y minerales. La cantidad de lípidos o grasas típicamente puede variar desde aproximadamente 3 hasta aproximadamente 7 g/100 kcal. La cantidad de proteína típicamente puede variar desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 5 g/100 kcal. La cantidad de carbohidratos típicamente puede variar desde aproximadamente 8 hasta aproximadamente 12 g/100 kcal. Las fuentes de proteína pueden ser cualquiera utilizada en el arte, por ejemplo leche descremada, las proteínas del suero, caseína, proteína de soya, proteína hidrolizada, aminoácidos y semejantes. Las fuentes de carbohidratos pueden ser cualesquiera utilizadas en el arte, por ejemplo, lactosa, glucosa, los sólidos del jarabe de maíz, maltodextrinas, sucrosa, almidón los sólidos del jarabe de arroz y semejantes. Las fuentes de lípidos pueden ser cualquiera utilizada en el arte, por ejemplo, aceites vegetales tales como aceite de palma, aceite de soya, palmoleína, aceite de coco, aceite de triglicéridos de cadena media, aceite de girasol de alto contenido oleico, aceite de cártamo de alto contenido oleico y semejantes. Convenientemente, la fórmula para infante disponible comercialmente puede ser utilizada. Por ejemplo, Enfamil®, fórmula para niños prematuros Enfamil®, Enfamil® con hierro, Lactofree®, Nutramigen® Pregestimil® y ProSobee® (disponible de Mead Johnson & Company, Evansville, IN. E.U.A.) pueden ser suplementadas con niveles adecuados de LGG y LCPUFA y utilizadas en la práctica de la invención. En una modalidad de la invención, LGG y LCPUFA pueden ser combinados con uno o más probióticos adicionales para tratar o prevenir la inflamación sistémica en los infantes alimentados por fórmula. Cualquier probiótico conocido en el arte será aceptado en esta modalidad. En una modalidad particular, el probiótico es elegido del grupo que consiste de La ctobacill us y Bifidobacteri um . En otra modalidad de la invención, LGG y LCPUFA pueden ser combinados con uno o más prebióticos para tratar o prevenir la inflamación sistémica en infantes alimentados por fórmula. Cualquier prebiótico conocido en el arte será aceptable en esta modalidad. Los prebióticos de la presente invención pueden incluir lactulosa, galacto-oligosacáridos, fructo-oligosacáridos , isomalto-oligosacáridos , oligosacáridos de la soya, lactosucrosa, xilo-oligosacáridos, y gentio-oligosacáridos . En una modalidad, el LGG es administrado en combinación con DHA. En otra modalidad, LGG es administrado en combinación con ARA. En todavía otra modalidad, LGG es administrado en combinación con, tanto DHA como ARA. La fórmula comercialmente disponible que contiene DHA, ARA, o una combinación de las mismas, puede ser suplementada con LGG y utilizada en la presente invención. Por ejemplo, Enfamil® LIPIL® que contiene niveles efectivos de DHA y ARA, está disponible comercialmente y puede ser suplementada con LGG y utilizada en la presente invención. En una modalidad, tanto DHA como ARA son utilizadas en combinación con LGG para tratar la inflamación sistémica en infantes. En esta modalidad, la proporción en peso de ARA: DHA es típicamente desde aproximadamente 1:3 hasta aproximadamente 9:1. En una modalidad de la presente invención, esta relación es desde aproximadamente 1:2 hasta aproximadamente 4:1. En todavía otra modalidad, la proporción es desde aproximadamente 2:3 hasta aproximadamente 2:1. En una modalidad particular, la proporción es desde aproximadamente 2 : 1 La cantidad efectiva de DHA en una modalidad de la presente invención es típicamente desde aproximadamente 3 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 150 mg por kg de peso corporal por día. En una modalidad de la invención, la cantidad es desde aproximadamente 6 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal por día. En otra modalidad, la cantidad es desde aproximadamente 10 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 60 mg por kg de peso corporal por día. En todavía otra modalidad, la cantidad es desde aproximadamente 15 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 30 mg por kg de peso corporal por día. La cantidad efectiva de ARA en una modalidad de la presente invención es típicamente desde aproximadamente 5 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 150 mg por kg de peso corporal por día. En una modalidad de esta invención, la cantidad varía desde aproximadamente 10 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 120 mg por kg de peso corporal por día. En otra modalidad, la cantidad varía desde aproximadamente 15 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 90 mg por kg de peso corporal por día. En todavía otra modalidad, la cantidad varía desde aproximadamente 20 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 60 mg por kg de peso corporal por día.

La cantidad de DHA en las fórmulas para infante para su uso con la presente invención, típicamente varía desde aproximadamente 5/100 kcal hasta aproximadamente 80 mg/100 kcal. En una modalidad de la presente invención, la misma varía desde aproximadamente 10 mg/100 kcal hasta aproximadamente 50 mg/100 kcal; y en otra modalidad desde aproximadamente 15 mg/100 kcal hasta aproximadamente 20 mg/100 kcal. En una modalidad particular de la presente invención, la cantidad de DHA es de aproximadamente 17 mg/100 kcal. La cantidad de ARA en las fórmulas para infante para su uso con la presente invención varía típicamente desde aproximadamente 10 mg/100 kcal hasta aproximadamente 100 mg/100 kcal. En una modalidad de la presente invención, la cantidad de ARA varía desde aproximadamente 15 mg/100 kcal hasta aproximadamente 70 mg/100 kcal. En otra modalidad, la cantidad de ARA varía desde aproximadamente 20 mg/100 kcal hasta aproximadamente 40 mg/100 kcal. En una modalidad particular de la presente invención, la cantidad de ARA es de aproximadamente 34 mg/100 kcal. La fórmula para infante suplementada con los aceites que contienen DHA y ARA para su uso con la presente invención se puede hacer utilizando las técnicas estándares conocidas en el arte. Por ejemplo, las mismas pueden ser agregadas a la fórmula por el reemplazo de una cantidad equivalente de un aceite, tal como aceite de girasol de alto contenido oleico, normalmente presente en la fórmula. Como otro ejemplo, los aceites que contienen DHA y ARA pueden ser agregados a la fórmula por el reemplazo de una cantidad equivalente del resto de la combinación de grasa total normalmente presente en la fórmula sin DHA y ARA. La fuente de DHA y ARA puede ser cualquier fuente conocida en el arte. En una modalidad de la presente invención, las fuentes de DHA y ARA son aceites de células sencillas como se enseña en las patentes U.S. Nos. 5,374,567; 5,550,156; y 5,397,591, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí en su totalidad para referencia. Sin embargo, la presente invención no está limitada solamente a tales aceites . DHA y ARA pueden ser de una forma natural o refinada. En una modalidad, la fuente está substancialmente libre de EPA. Por ejemplo, en una modalidad de la presente invención, la fórmula para infante contiene menos de aproximadamente 16 mg de EPA/100 kcal; en otra modalidad menos de aproximadamente 10 mg de EPA/100 kcal; y en todavía otra modalidad menos de 5 mg de EPA/100 kcal. Una modalidad particular substancialmente no contiene EPA. Otra modalidad está libre de EPA porque aún las cantidades de traza de EPA están ausentes de la fórmula. Se cree que la provisión de la combinación de LGG con DHA y/o ARA proporciona efectos complementarios o sinergísticos con respecto a las propiedades antiinflamatorias de las formulaciones que contienen estos agentes. Aunque no se desea que esté limitado por esta o cualquier otra teoría, los probióticos tales como LGG se piensa que imparten efectos antiinflamatorios en parte a través de la interacción con los receptores específicos, conocidos como los receptores semejantes a Toll (TLRs) sobre la superficie de las células inmunes específicas. La interacción directa o indirecta entre LGG y estos receptores inicia una cascada de transducción de la señal intracelular que conduce a la alteración de la expresión del gen en estas células objetivo. Es esta interacción específica y la alteración resultante en la expresión del gen y otros efectos celulares los que se piensa que van a estar involucrados en la modulación de la inflamación. En contraste, los ácidos grasos ?-3 tales como DHA se piensa que imparten una acción antiinflamatoria por medio de la alteración de la producción de los mediadores proinflamatorios, derivados de ácidos grasos, conocidos ampliamente, eicosanoides, los ácidos grasos ?-6, tales como ARA, los cuales están localizados en el grupo de los fosfolípidos de las membranas celulares, son liberados durante la respuesta inflamatoria y liberan un grupo de ARA libres. El grupo de ARA es activado entonces por dos clases de enzimas, conocidas como lipoxigenasas y ciclooxigenasas, que producen un espectro específico de eicosanoides incluyendo los prostanoides de la serie 2, ' tales como prostaglandinas, tromboxanos, y leucotrienos. Estos eicosanoides se sabe que tienen una gran cantidad de acciones proinflamatorias en muchos tipos celulares y órganos. Ya se sabe que las dietas ricas en ácidos grasos ?-3, tales como las EPA y DHA, son competidores de los ácidos grasos ?-6 en varias etapas de este proceso y, por lo tanto, moderan los efectos proinflamatorios de ARA. Por ejemplo, los ácidos grasos ?-3 modulan el alargamiento de los ácidos grasos ?-6 en ARA, la incorporación de ARA en el grupo de fosfolípidos de la membrana celular, y la producción de los eicosanoides proinflamatorios de ARA. La combinación de DHA y ARA, por lo tanto, proporcionan acciones distintas, pero complementarias, para moderar la respuesta inflamatoria en los tejidos múltiples . Como una alternativa a una fórmula para infante, el LGG y LCPUFA pueden ser administrados como un suplemento no integral a la alimentación de la fórmula. Por ejemplo, LGG puede ser ingerido en la forma de una pildora, tableta, cápsula, tableta ovalada, polvo, líquido o gel. En esta modalidad de la invención, un suplemento de LGG puede ser ingerido en combinación con otros suplementos de nutrientes, tales como vitaminas, o en combinación con un suplemento de LCPUFA, tales como DHA o ARA. En otra modalidad, el LGG y/o LCPUFA son encapsulados en una matriz de azúcar, grasa o polisacáridos, para incrementar adicionalmente la probabilidad de supervivencia bacteriana. Las composiciones de la presente invención también pueden ser provistas en una forma adecuada para los infantes, seleccionada del grupo que consiste de una fórmula de seguimiento, bebidas, leche, yogur, jugo de fruta, bebida a base de fruta, tableta masticable, galletita, pastelito o una combinación de los mismos. En la presente invención, el infante es un infante alimentado por fórmula. En una modalidad, el infante es alimentado por fórmula desde el nacimiento. En otra modalidad, el infante es alimentado por el seno de la madre desde el nacimiento hasta una edad que es menor que un año, y es alimentado por fórmula después de esto, en tal instante empieza el suplemento de LGG y LCPUFA. En una modalidad particular de la presente invención, el uso comprende tratar o prevenir la inflamación sistémica en un infante prematuro alimentado por fórmula. En este uso, el LGG y LCPUFA pueden ser administrados al infante prematuro en la forma de una fórmula para infante o cualquier otra fórmula adecuada. En otra modalidad, el LGG puede ser administrado al infante prematuro en combinación con DHA y/o ARA para crear un efecto antiinflamatorio potencialmente sinergístico. En un uso particular de la presente invención, la administración de LGG y LCPUFA reduce o previene la liberación sistémica de una o más citocinas o quimiocinas proinflamatorias en un infante alimentado por fórmula. Cuando se utilice aquí, las citocinas o quimiocinas "proinflamatorias" incluyen aquellas que se sabe en el arte que van a estar involucradas en la regulación ascendente de las reacciones inflamatorias. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados a TNF-a IL-lß, IL-6, IL-18 y GRO/KC. Las quimiocinas son un grupo de citocinas que son capaces de la migración de los leucocitos desde la sangre hasta los tejidos en el sitio de la inflamación. Cuando se producen cantidades en exceso, las quimiocinas pueden conducir al daño del tejido sano. El oncogén relacionado con el crecimiento (GRO/KC) es una quimiocina que recluta las células inmunes hasta el sitio de la inflamación. El mismo es la contraparte humana al quimioatrayente del neutrófilo 1 inducido por la citocina de la rata (CINC-1) , y está relacionado funcionalmente con la familia de la interleucina-8. En otra modalidad de la presente invención, el LGG y LCPUFA reducen o previenen la liberación sistémica de MPO en un infante alimentado por fórmula. La MPO es una proteína que contiene hierro localizada en los granulos azurofílicos de los neutrófilos y en los lisosomas de los monocitos. La misma utiliza la peroxidasa acida para convertir el cloruro al ácido hipocloroso. El ácido hipocloroso producido reacciona entonces con, y destruye las bacterias. Durante la inflamación, los niveles de MPO tienen su valor máximo cuando se intenta destruir los patógenos. Por consiguiente, la enzima es extremadamente útil como un marcador de la inflamación. Frode, T. & Medeiros, Y. Myloperoxidase and Adenosine-Deaminase Levéis in the Pleural Fluid Leakage Induced by Carrageenan in the Mouse Model of Pleurisy, MI 10:4,223-227 (2001) . Como será observado en los ejemplos, LGG se ha mostrado que reduce la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula a un nivel semejante a aquel de los infantes alimentados por el seno de la madre. El daño físico a la mucosa intestinal de los infantes de las ratas alimentadas por fórmula fue reducido a un nivel semejante a aquellos de los infantes de las ratas alimentadas con la leche de la madre cuando sus dietas fueron suplementadas con LGG. Adicionalmente, el CINC-1, MPO, y varios niveles de citocinas en los infantes de las ratas alimentadas por fórmula, fueron reducidos a niveles semejantes a aquellos de los infantes de las ratas alimentados con la leche de la madre, cuando se suplementan con LGG. Los siguientes ejemplos describen varias modalidades de la presente invención. Otras modalidades dentro del alcance de las reivindicaciones de aquí serán evidentes para aquellos expertos en el arte a partir de la consideración de la especificación o la práctica de la invención como se describe aquí. Está propuesto que la especificación, junto con los ejemplos, se considere que va a ser solamente ejemplar, con el alcance y espíritu de la invención que está indicado por las reivindicaciones que siguen a los ejemplos. En los ejemplos, todos los porcentajes están dados en una base en peso a menos que se indique de otra manera. Ejemplo 1 Este ejemplo describe los materiales y métodos necesarios para mostrar el efecto de LGG en las crías de ratas neonatales alimentadas por fórmula. En dos experimentos separados, diez ratas infantes Sprague-Dawley (Taconic, Germantown, NY) , fueron asignadas al azar a dos grupos de alimentación de gastrostomía con cinco ratas por grupo. La alimentación por gastrostomía, utilizando el modelo de "cría en la casa" del infante de la rata, empezaron el día 7 de vida de las crías de la rata. Los tubos de alimentación de gastrostomía fueron construidos de secciones de 14 cm de tubería de polietileno que fueron insertados en el estómago de las crías. Este es un modelo utilizado normalmente en estudios de nutrición en fase de desarrollo cuando es importante manipular la composición nutritiva en la ausencia de las alimentaciones maternales. La colocación para la gastrostomía se hizo bajo anestesia con isoflurano. Las bombas de jeringa controladas por temporizador fueron conectadas a los tubos de alimentación y fueron ajustadas para la alimentación a las ratas durante los primeros 20 minutos de cada hora a una velocidad de flujo dependiente del peso. Cinco ratas criadas por la madre de la misma edad fueron utilizadas como controles de referencia. Durante un período de aclimatación de 2 días, las crías de rata alimentadas por gastrostomía fueron alimentadas con un substituto de leche de la rata (RMS) . El componente de la proteína del RMS fue de entre 30 y 40 g/kg/día, el cual es semejante a aquella de la leche de la madre y la cual es requerida para el crecimiento normal . Uno de los grupos alimentados por RMS también fue provisto con un suplemento de 1 x 108 cfu/L/Kg/día de LGG. El otro grupo fue alimentado con RMS solamente, sin suplemento de LGG. La totalidad de los grupos alimentados por gastrostomía recibieron la misma cantidad de grasas y carbohidratos . Los lipopolisacáridos (LPS) de Escherichia coli 0127:B8 (LPS; Sigma, St . Louis, MO) , fueron disueltos en agua por agitación en forma de remolino hasta una concentración de 2 mg/ml. Las ratas alimentadas por gastrostomía fueron provistas con entre 0.25 y 0.5 mg/kg/día de LPS por medio de un tubo para gastrostomía empezando 2 días después del inicio de la alimentación artificial. Las crías fueron provistas con el suplemento de LPS durante 6 días. Esta dosis fue determinada en estudios piloto que conduce a escalofríos ocasionales, piloerección, y ganancia pobre de peso pero no fue asociado con un incremento significativo en la mortalidad durante un período de 6 días . Al final del período de tratamiento de 6 días, las crías de la rata fueron eutanizadas con una sobredosis de pentobarbital sódico. El intestino delgado fue removido y separado en tres partes: el íleon, yeyuno, y duodeno, almacenados a -80 °C para los ensayos de la enzima y ELISA, o fijados en 10% de formalina amortiguada neutral para la morfología intestinal. Los pulmones, el hígado y el plasma fueron almacenados a -80 °C para los ensayos de la enzima y ELISA. El software estadístico de Sigmastat (SPSS, Chicago, IL) fue utilizado para analizar el peso corporal, las mediciones de las vellosidades, y las actividades de la enzima, MPO, ELISA para CINC-1, y TNF-a y los resultados de densitometría para RT-PCR. Todos los datos fueron reportados como promedios + desviación estándar (SD) . Un análisis de una vía de la varianza entre los grupos (ANOVA) fue utilizado para determinar si una diferencia significativa estuvo presente entre todos los grupos de tratamiento.

Ejemplo 2 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG sobre el crecimiento de las crías después de la alimentación por gastrostomía. Las crías de la rata fueron pesadas diariamente después de la alimentación por gastrostomía y se compararon con los animales de referencia alimentados por la madre. La figura 1 muestra que los animales alimentados por la madre crecieron más rápidamente que las crías alimentadas por gastrostomía, tratadas con LPS. Las gráficas lineales representan la velocidad incrementada del peso corporal de las crías con el incremento expresado en el tiempo desde el inicio del estudio. La provisión de LGG a las crías tratadas con LPS, alimentadas por gastrostomía, no mejoró la ganancia de peso. Ejemplo 3 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG sobre la morfología intestinal de las crías de la rata. Los estudios de microscopía fueron enfocados sobre el íleon a causa de que esta es una región más altamente susceptible a ciertas patologías en infantes (por ejemplo, las perforaciones relacionadas con la enterocolitis necrotizante y relacionadas con la enteritis no necrotizante) . Las muestras del íleon fijadas con formalina fueron intercaladas en parafina; se cortaron secciones de 6 µm utilizando un micrótomo de parafina 2030 de Reichert-Jung. Las secciones fueron teñidas entonces con un teñido con hematoxilina y eosina (H&E) de rutina. La figura 2 muestra los resultados de este teñido. Las selecciones de íleon de las crías de rata tratadas con LPS (figuras 2G-2I) mostraron una metaplasia impresionante en el epitelio velloso, con una depilación incrementada del citoplasma, comparado con los controles criados por la madre (figura 2A-2C) . Las figuras 2G-2F muestran que estas acciones también caracterizaron la expansión de la lámina propia por el infiltrado linfoplasmacítico, el adelgazamiento de la muscularis mucosae, y cambios regenerativos en las criptas o folículos incluyendo un número incrementando y ramificación de los folículos y una actividad mitótica incrementada. Estas características estuvieron ausentes en los animales de control criados por la madre, y se atenuaron en el grupo tratado con LPS más LGG (figuras 2D-2F) . El daño físico en la mucosa intestinal del grupo de LPS/LGG fue reducida a un nivel semejante a aquel de las crías de rata alimentadas con la leche de la madre. En los intestinos de estas últimas, el cambio metaplásico en los vellos fue intermedio entre aquel observado en los tejidos de los grupos de control y de LPS. Notablemente, esto parece que ocurre como un espectro, como se ilustra por la metaplasia observada en los vellos, que se aproxima a aquel del grupo tratado con LSP.

Ejemplo 4 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG sobre CINC-1. Los niveles de CINC-1 en el intestino delegado y el plasma fueron determinados por los kits de ensayo inmunométrico de la enzima TiterZyme para el oncogén relacionado con el crecimiento de la rata/CINC-1 (Assay Designs, Ann Arbor, MI) . La absorbancia fue determinada a 450 nm, y la concentración fue calculada utilizando la ecuación derivada de una curva estándar lineal. Para investigar adicionalmente los efectos de las dietas en el péptido del CINC-1, la producción de CINC-1 fue evaluada por ELISA en el intestino delgado, el hígado, el pulmón y el plasma. En un experimento inicial, la administración de LPS a las crías de la rata provocó una elevación aproximada de 4 veces en CINC-1 sobre las crías tratadas sin LPS alimentadas por gastrostomía (datos no mostrados) . Como se muestra en la figura 3A, cuando se comparan las crías tratadas con LPS alimentadas por gastrostomía con las ratas tratadas con LPS/LGG y las alimentadas por la madre, los niveles de CINC-1 intestinal en las crías no difiere significativamente entre los 3 grupos, pero sugirió una tendencia ligera hacia que es más elevada en el grupo tratado con LPS y no en el grupo tratado con LGG. Las concentraciones de CINC-1 en el hígado (figura 3B) y en el plasma (figura 3C) , sin embargo, fueron casi 2 veces tan elevadas en el grupo tratado con LPS que no recibieron LGG, pero esta fue atenuada significativamente con LGG. El pulmón (figura 3D) , utilizado aquí para determinar si el efecto probiótico podría extenderse a un órgano distal, también mostró una elevación significativa (de aproximadamente 4 veces) de CINC-1 con el tratamiento de LPS cuando se compara con los controles alimentados por la madre, pero esto fue atenuado significativamente con LGG. En el hígado y el plasma, el suplemento de LGG redujo los niveles de CINC-1 a un nivel que fue muy semejante a aquel de las crías de la rata alimentadas con la leche de la madre. Estos resultados muestran que LGG tiene la capacidad de reducir la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula a un nivel que es semejante a aquel del infante alimentado por el seno de la madre . Ejemplo 5 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG sobre los niveles de TNF-a en las ratas infantes. Los niveles de TNF-a en el intestino delgado y en el plasma fueron determinados por los kits de ensayo inmunométrico de la enzima TiterZyme para TNF-a (Assay Designs, Ann Arbor, MI) . La absorbancia fue determinada a 450 nm, y la concentración fue calculada utilizando la ecuación derivada de una curva estándar lineal. Para investigar adicionalmente los efectos de las dietas sobre la producción de TNF-a, la producción de TNF-a fue evaluada por ELISA en el plasma y el pulmón. La figura 4 ilustra el efecto de LGG sobre la producción de TNF-a del plasma (figura 4A) y el pulmón (figura 4B) utilizando ELISA. Las figuras 4A y 4B indican que los niveles de TNF-a fueron significativamente más elevados en las crías tratadas con LPS, alimentadas por gastrostomía, que en las crías criadas por la madre y LGG redujo significativamente la elevación inducida por LPS de TNF-a tanto en el plasma como en el pulmón. Ejemplo 6 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG sobre los niveles de MPO. La actividad de MPO, una medida de la acumulación de neutrófilos y un marcador de la lesión del tejido, fue determinada por un procedimiento enzimático estándar. Las muestras del intestino fueron homogeneizadas en hielo en el amortiguador de KH2P04 0.01 M. Después de la centrifugación a 10,000 g durante 20 minutos a 4 °C, las pelotillas fueron resuspendidas por sonicación en un amortiguador de bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB 13.7 mM, KH2P04 50 mM, y ácido acético 50 mM, pH 6.0). El sobrenadante fue mantenido para el análisis de ELISA. La suspensión fue centrifugada nuevamente a 10,000 g durante 15 minutos. El sobrenadante fue incubado entonces en un baño de agua a 60 °C durante 2 horas . La concentración de MPO del sobrenadante fue medida por la oxidación dependiente de H202 de la tetrametilbencidina. La absorbancia fue determinada a 650 nm y se comparó con una curva estándar lineal. La proteína fue medida utilizando el ensayo de la proteína de BioRad De (BioRad) . Las figuras 5A y 5B ilustran el efecto de LGG sobre la actividad de MPO en el intestino delgado distal (figura 5A) y el pulmón (figura 5B) . Los niveles de MPO fueron significativamente más elevados en las crías tratadas con LPS, alimentadas por gastrostomía, que en las crías criadas por la madre y LGG redujo significativamente la elevación inducida por LPS de MPO tanto en el intestino delgado distal como en el pulmón. Los niveles de MPO reducidos en las ratas tratadas con LPS/LGG son muy semejantes a aquellos de las ratas alimentadas por la madre, que muestran que LGG redujo la inflamación sistémica en los infantes alimentados por fórmula a un nivel que es semejante al nivel de los infantes alimentados por el seno de la madre. Ejemplo 7 Este ejemplo ilustra el efecto de LGG en varios niveles de citocina. Los kits de perlas Multiplex fueron comprados de LINCO Research, Inc. (St. Charles, MO, EUA). Las citocinas/quimiocinas fueron analizadas por un kit que incluyó: el factor de estimulación de la colonia de granulocitos-macrófagos (GMCSF) , interferón-? (IFN-?) , interleucina- la (IL-la) , IL-la, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL- , IL-12p70, IL-18, la proteína 1 del quimioatrayente del monocito (MCP-1) , GRO/KC (CINC-1 de la rata) , y el factor a de necrosis tumoral (TNF-a) . El ensayo multiplex fue efectuado de acuerdo con las especificaciones del fabricante. Las curvas estándares para cada citocina/quimiocina fueron generadas utilizando las concentraciones de referencia suministradas por los fabricantes. Los datos de entrada (intensidad fluorescente promedio) fueron analizados por el software de cuantificación MasterPlex (MiraiBio, Inc., Alameda, CA, EUA) , para obtener los valores de la concentración . Para investigar adicionalmente los efectos de LPS y LGG sobre las citocinas, 14 citocinas/quimiocinas del pulmón, hígado, plasma e intestino delgado distal fueron analizadas. Estas incluyeron: el factor de estimulación de la colonia de granulocitos-macrófagos (GMCSF) , interferón-? (IFN-?) , interleucina-la (IL-la) , IL-lß, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-18, la proteína 1 del quimioatrayente del monocito (MCP-1), GRO/KC (CINC-1 de la rata), y el factor a de necrosis tumoral (TNF-a) . La figura 6A muestra que en el pulmón, IL-lß, IL-6, IL-18, GRO/KC (CINC-1 de la rata), y TNF-a fueron significativamente más elevados en las crías tratadas con LPS, alimentadas por gastrostomía, que en las crías criadas por la madre y el LGG redujo significativamente la elevación inducida por LPS de IL-lß, IL-6, IL-10, IL-18, GRO/KC (CINC-1 de la rata) y TNF-a. La figura 6B muestra que en el plasma, los niveles de IL-lß, IL-6, IL-10, IL-18, y GRO/KC (CINC-1 de la rata) y TNF-a fueron significativamente más elevados en las crías tratadas con LPS, alimentadas por gastrostomía, que en las crías criadas por la madre y LGG redujo significativamente la elevación inducida por LPS de estas citocinas/quimiocinas. También existió un incremento significativo de los niveles de citocina/quimiocina en el hígado de los animales que recibieron LPS. Este efecto fue reducido en los animales que recibieron el LGG. Estos resultados muestran que el suplemento de LGG en los infantes alimentados por fórmula reduce la inflamación sistémica. Además, los resultados muestran que LGG reduce la inflamación sistémica en los infantes alimentados por fórmula a un nivel que es semejante a aquel de los infantes que son alimentados por el seno de la madre. Esto es ilustrado en los resultados descritos aquí por medio de la comparación del grupo tratado con LGG y el grupo exclusivamente alimentado por la leche de la madre. En varios casos, la administración de LGG condujo a una respuesta inflamatoria particular que no es significativamente diferente entre el grupo tratado LGG y el grupo alimentado con la leche de la madre, indicando una respuesta inflamatoria semejante. La invención reduce la inflamación en el tracto gastrointestinal, hígado, plasma, pulmones y cerebro y previene o reduce el daño físico en la mucosa intestinal de un infante alimentado por fórmula. Como la presente invención puede ser utilizada para mejorar la condición inflamatoria en un infante, la misma también puede prevenir el inicio de infecciones o enfermedades perjudiciales. Todas las referencias citadas en esta especificación, incluyendo sin limitación, todos los artículos, publicaciones, patentes, solicitudes de patente, presentaciones, textos, reportes, manuscritos, folletos, libros, informaciones de Internet, artículos de anuarios, publicaciones periódicas y semejantes, son incorporadas aquí para referencia en esta especificación en su totalidad. La descripción de las referencias de aquí está propuesta solamente para resumir las aserciones hechas por sus autores y no se admite que cualquier referencia constituya al arte previo. Los solicitantes se reservan el derecho a desafiar la exactitud y pertinencia de las referencias citadas. Estas y otras modificaciones y variaciones a la presente invención pueden ser practicadas por aquellos con experiencia ordinaria en el arte sin apartarse del espíritu y alcance de la presente invención, que es descrita más particularmente en las reivindicaciones anexas. Además, se debe entender que los aspectos de las diversas modalidades pueden ser intercambiados tanto parcial como totalmente.

Además, aquellos con experiencia ordinaria en el arte apreciarán que la descripción precedente es solamente a manera de ejemplo, y no está propuesta para limitar la invención como se describirá adicionalmente en tales reivindicaciones anexas. Por lo tanto, el espíritu y alcance de las reivindicaciones anexas no deben estar limitados a la descripción de las versiones preferidas contenidas allí. Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro- de la presente descripción de la invención.

Claims (26)

1. Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. El uso de LGG en combinación con al menos un
2. LCPUFA en la manufactura de un medicamento para el tratamiento, prevención o reducción de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula. 2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el LCPUFA comprende DHA o ARA.
3. 3. El uso de conformidad con la reivindicación 2, en donde el LCPUFA comprende DHA en una cantidad entre aproximadamente 3 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 150 mg por kg de peso corporal por día.
4. 4. El uso de conformidad con la reivindicación 2, en donde el LCPUFA comprende ARA en una cantidad entre aproximadamente 5 mg por kg de peso corporal por día hasta aproximadamente 150 mg por kg de peso corporal por día.
5. 5. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el LCPUFA comprende DHA y ARA.
6. 6. El uso de conformidad con la reivindicación 5, en donde la proporción de ARA:DHA es desde aproximadamente 1:3 hasta aproximadamente 9:1.
7. 7. El uso de conformidad con la reivindicación 5, en donde la proporción de ARA:DHA es desde aproximadamente 1:2 hasta aproximadamente 4:1.
8. 8. El uso de conformidad con la reivindicación 5, en donde la proporción de ARA: DHA es desde aproximadamente 2:3 hasta aproximadamente 2:1.
9. 9. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la inflamación sistémica es tratada o prevenida en el tracto intestinal, hígado, plasma, pulmones y cerebro del infante .
10. 10. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el medicamento es incorporado en una fórmula para infante y consumido por el infante.
11. 11. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la cantidad de LGG en el medicamento está entre aproximadamente 1 x 104 y 1 x 1010 cfu/L/kg/día.
12. 12. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la cantidad de LGG en el medicamento está entre aproximadamente 1 x 106 y 1 x 109 cfu/L/kg/día.
13. 13. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la cantidad de LGG en el medicamento es de aproximadamente 1 x 108 cfu/L/kg/día.
14. 14. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el medicamento comprende adicionalmente al menos otro probiótico.
15. 15. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el medicamento comprende adicionalmente al menos un prebiótico.
16. 16. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el infante es un infante prematuro.
17. 17. El uso de LGG en combinación con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la inflamación sistémica en un infante alimentado por fórmula a un nivel semejante a aquel de un infante alimentado por el seno de la madre.
18. 18. El uso de LGG en combinación con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la inflamación en uno o más órganos de un infante alimentado por fórmula seleccionado del grupo que consiste del tracto intestinal, hígado, plasma, pulmones, y cerebro .
19. 19. El uso de LGG en combinación con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención del daño físico en la mucosa intestinal de un infante alimentado por fórmula.
20. 20. El uso de conformidad con la reivindicación 19, en donde el daño físico comprende una depuración del citoplasma, la expansión de la lámina propia por un infiltrado linfoplasmacítico, el adelgazamiento de la muscularis mucosae, un número incrementado y ramificación de los folículos o criptas, y/o una actividad mitótica incrementada .
21. 21. El uso de LGG en combinación con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la liberación sistémica de una o más citocinas o quimiocinas proinflamatorias en un infante alimentado por fórmula.
22. 22. El uso de conformidad con la reivindicación 21, en donde la citocina o quimiocina proinflamatoria comprende uno o más seleccionados del grupo que consiste de TNF-a, IL-lß, IL-6, IL-18, y GRO/KC.
23. 23. El uso de conformidad con la reivindicación 22, en donde la liberación sistémica de TNF-a, IL-lß, IL-6, o IL-18 es reducida o prevenida en el pulmón, hígado o plasma del infante .
24. 24. El uso de conformidad con la reivindicación 22, en donde la liberación sistémica de GRO/KC es reducida o prevenida en el intestino, hígado, plasma o pulmón del infante .
25. 25. El uso de LGG en combinación con al menos un LCPUFA en la manufactura de un medicamento para la reducción o prevención de la liberación sistémica de MPO en un infante alimentado por fórmula.
26. 26. El uso de conformidad con la reivindicación 25, en donde la liberación sistémica de MPO es reducida o prevenida en el intestino o el pulmón del infante.