MD4425C1 - Alcoxipirazoli în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile - Google Patents

Alcoxipirazoli în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile Download PDF

Info

Publication number
MD4425C1
MD4425C1 MDA20150019A MD20150019A MD4425C1 MD 4425 C1 MD4425 C1 MD 4425C1 MD A20150019 A MDA20150019 A MD A20150019A MD 20150019 A MD20150019 A MD 20150019A MD 4425 C1 MD4425 C1 MD 4425C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
compound
electrospray
mmol
alkyl
compound according
Prior art date
Application number
MDA20150019A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD20150019A2 (ro
MD4425B1 (ro
Inventor
Джерод Бернетт БРЕННЕМАН
Джон Дэвид ГИНН
Майкл Д. ЛОУЭ
Кристофер Рональд САРКО
Эдвард С. ТАСБЕР
Чжунхуа Чжан
Original Assignee
Boehringer Ingelheim International Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim International Gmbh filed Critical Boehringer Ingelheim International Gmbh
Publication of MD20150019A2 publication Critical patent/MD20150019A2/ro
Publication of MD4425B1 publication Critical patent/MD4425B1/ro
Publication of MD4425C1 publication Critical patent/MD4425C1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)

Abstract

Prezenta invenţie se referă la compuşi cu formula (I):(I)şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora, unde A este o grupare heterociclil saturată cu 5...7 membri, conţinând un atom de azot şi opţional un atom de oxigen; R1 este un alchil C1-4 substituit opţional cu o grupare metoxi; R2 este selectat dintre H, F, Cl, alchil C1-3, -CN, -OMe şi -CF3; R3 este selectat dintre H şi -CH3; R4 este selectat dintre H, F, -CH3 şi -OMe; R5 este selectat dintre H, Cl, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F şi -OMe; R6 este legat de azotul din gruparea A şi este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)n-cicloalchil C3-6, -C(O)-alchil C1-6, -(CH2)n-heterociclil, -(CH2)n-aril-(CH2)n-heteroaril, -SO2-aril, SO2-alchil C1-6; R7 este selectat dintre H, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F şi -CN.Invenţia se referă, de asemenea, la compoziţii farmaceutice, care cuprind aceşti compuşi, la metode de utilizare a acestora în tratamentul diverselor boli şi tulburări, care pot fi atenuate prin activarea sau potenţarea guanilat-ciclazei solubile.

Description

Prezenta invenţie se referă la compuşi heterociclici, care sunt utili în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile şi sunt astfel utili pentru tratarea diverselor boli, care sunt mediate sau susţinute de scăderea sau diminuarea activităţii guanilat-ciclazei solubile, inclusiv a bolilor cardiovasculare, bolilor renale, diabetului zaharat, tulburărilor fibrotice, tulburărilor urologice, tulburărilor neurologice şi tulburărilor inflamatorii. Prezenta invenţie se referă, de asemenea, la compoziţii farmaceutice, care cuprind aceşti compuşi, la procedee de utilizare a acestor compuşi în tratamentul diverselor boli şi tulburări, la procedee de preparare a compuşilor respectivi şi intermediarilor utili în procedeele date.
Guanilat-ciclaza solubilă (GCs) este un receptor al oxidului nitric (NO), care se găseşte în citoplasma mai multor tipuri de celule. La om, GCs funcţională este un heterodimer compus din subunitatea alfa 1 sau alfa 2 combinată cu subunitatea beta 1, care are o grupare prostetică hem. În condiţii nefiziopatologice, legarea NO de hemul GCs activează enzima pentru catalizarea conversiei guanozin-5'-trifosfat (GTP) în guanozin monofosfat ciclic (GMPc). GMPc este un al doilea mesager care exercită acţiune prin modularea izoformelor proteinei kinază (PKG) dependentă de GMPc, fosfodiesterazelor şi canalelor ionice dependente de GMPc. Astfel, s-a demonstrat că GCs modulează numeroase căi asociate cu boli, inclusiv hipertensiunea arterială, hipertensiunea pulmonară, ateroscleroza, insuficienţa cardiacă, ciroza hepatică, fibroza renală şi disfuncţia erectilă [1], [2].
În condiţii normale, în GCs fierul există în starea bivalentă, fiind capabil să se lege de NO şi monoxidul de carbon (CO). Cu toate acestea, în condiţii de stres oxidativ, care poate apărea în diverse boli, rapoartele publicate indică faptul că fierul hemului devine oxidat în starea trivalentă, fiind incapabil de a fi activat de NO sau CO. S-a emis ipoteza că incapacitatea NO de a semnala prin GCs cu un fier oxidat al hemului contribuie la procesele bolii. Recent, au fost descrise două clase noi de compuşi care intensifică activitatea GCs într-un mod dependent de hem (stimulatori ai GCs) şi într-un mod independent de hem (activatori ai GCs). Activitatea stimulatorilor GCs sinergizează cu NO pentru a spori producţia de GMPc, în timp ce activatorii GCs sunt doar aditivi cu NO pentru a spori nivelurile de GMPc [1]. Atât stimulatorii, cât şi activatorii GCs au demonstrat avantaje în modelele animale de boală. Activatorii GCs oferă avantajul de a fi capabili să vizeze în mod preferenţial forma bolnavă, nefuncţională a enzimei. Activatorii GCs includ BAY 58-2667 (cinaciguat) [3] şi HMR-1766 (ataciguat) [4].
NO are un rol important în menţinerea funcţiei celulare şi tisulare normale. Cu toate acestea, semnalizarea adecvată în calea NO poate fi perturbată în mai multe etape. Semnalizarea NO poate fi afectată de nivelurile reduse ale enzimelor sintetazei oxidului nitric (NOS), ale activităţii NOS, biodisponibilităţii NO, nivelurile GCs şi activitatea GCs. Activatorii GCs au potenţialul de a evita impedimentul funcţional produs de toate aceste deficienţe. Dat fiind că activarea GCs are loc în aval faţă de sinteza NO sau disponibilitatea NO, aceste deficienţe nu vor afecta activitatea activatorilor GCs. Aşa cum s-a descris mai sus, activitatea GCs, în care funcţia este perturbată de oxidarea fierului hemic, va fi corectată de către activatorii GCs. Astfel, activatorii GCs au potenţialul de a oferi avantaje în diverse boli cauzate de semnalizarea defectuoasă în calea NO.
Activarea GCs are potenţialul de a oferi avantaje terapeutice pentru ateroscleroză şi arterioscleroză. S-a demonstrat că tratamentul cu cinaciguat previne hiperplazia neointimală după denudarea endotelială de deteriorarea cu broşă a arterei carotide la şobolani [5]. Ataciguatul a inhibat formarea plăcii aterosclerotice la şoarecii ApoE-/-, care au fost hrăniţi cu o dietă bogată în grăsimi [6]. Producţia scăzută de NO la şoarecii cu deficit de sintetază a oxidului nitric endotelial (eNOS) a dus la sporirea inflamaţiei vasculare şi rezistenţei la insulină ca răspuns la excesul de nutrienţi. În acelaşi studiu, inhibitorul fosfodiesterazei 5 (PDE5) sildenafil a redus inflamaţia vasculară şi rezistenţa la insulină la şoarecii hrăniţi cu o dietă bogată în grăsimi [7]. În cele din urmă, după deteriorarea cu balonul-cateter a arterelor carotide ale şobolanilor in vivo, un stimulator al GCs (YC-1) a inhibat formarea neotimei [8].
Complicaţiile cauzate de diabet pot fi reduse prin activarea GCs. Suprimarea, indusă de glucoză, a eliberării glucagonului se pierde în insulele pancreatice lipsite de PKG, sugerând astfel rolul producţiei de GMPc mediată de GCs în reglarea glucozei [9].
Este bine stabilit clinic că sporirea GMPc prin tratamentul cu inhibitori PDE5 este eficace pentru tratamentul disfuncţiei erectile (DE). Cu toate acestea, 30% dintre pacienţii ce suferă de DE sunt rezistenţi la tratamentul cu inhibitori PDE5 [10]. Stimulatorul de GCs BAY-41-2272 este capabil să relaxeze muşchiul corpilor cavernoşi într-un mod dependent de GCs, sugerând astfel că activitatea sporită a GCs ar putea oferi avantaje în tratarea pacienţilor care suferă de DE [11]. În plus, stimulatorii GCs şi activatorii GCs folosiţi individual sau în combinaţie cu inhibitorul PDE5 au fost capabili să trateze DE în modelele animale [12].
Există dovezi că activarea GCs poate fi utilă în prevenirea fibrozei tisulare, inclusiv a plămânului, ficatului şi rinichiului. Se consideră că procesele tranziţiei epitelial mezenchimale (TEM) şi transformarea fibroblastului în miofibroblast contribuie la fibroza tisulară. În cazul în care cinaciguat sau BAY 41-2272 a fost combinat cu sildenafil, transformarea fibroblastului pulmonar în miofibroblast a fost inhibată [13]. NO este capabil să inhibe TEM a celulelor epiteliale alveolare [14], sugerând că activarea GCs este implicată în procesul dat. De asemenea, s-a dovedit că NO inhibă semnalizarea TGF beta glomerulară [15], ceea ce indică că activarea GCs poate inhiba scleroza glomerulară. Într-un model de ser porcin şi model de tetraclorură de carbon a fibrozei hepatice, un activator al GCs (BAY 60-2260) a fost eficient în inhibarea fibrozei [16].
Studiile clinice au demonstrat eficacitatea folosind cinaciguatul activator al GCs pentru tratamentul insuficienţei cardiace decompensate acute [17]. Acest lucru corespunde rezultatelor obţinute de la un model canin de insuficienţă cardiacă indusă de tachypacing, în care infuzia intravenoasă acută de cinaciguat a fost capabilă să producă descărcare cardiacă [18]. Într-un model de insuficienţă cardiacă cronică indusă de infarctul miocardic la şobolani, HMR 1766 a îmbunătăţit funcţia cardiacă şi a redus fibroza cardiacă, care a fost ulterior amplificată de ramipril [19].
Activatorii GCs pot fi utilizaţi pentru tratarea hipertensiunii. Acest lucru s-a demonstrat în mod clar în studiile clinice în care doza de cinaciguat se titrează în funcţie de mărimea reducerii tensiunii arteriale obţinute [17]. Studiile preclinice, care folosesc cinaciguat, au demonstrat anterior capacitatea activării GCs de a reduce tensiunea arterială [20]. Concluzii similare au fost raportate folosind, de asemenea, activatorul GCs HMR 1766 [4].
Activarea GCs are potenţialul de a reduce inflamaţia prin efectele asupra endoteliului. BAY 41-2272 şi un donator NO au inhibat rularea şi aderenţa leucocitelor la şoarecii cu deficit de eNOS (sintetaza oxidului nitric endotelial). Acest lucru s-a dovedit a fi mediat de suprimarea expresiei moleculei de aderenţă P-selectin [21]. S-a dovedit că inhibitorii NOS şi GCs sporesc expresia ICAM indusă de endotoxină (LPS) pe vasele de microcirculaţie mezenterice. Acest lucru a fost redus de un donator NO într-o manieră dependentă de GMPc. Tratamentul şoarecilor cu inhibitori NOS sau GCs a sporit migrarea, rularea, precum şi aderenţa neutrofilelor indusă de LPS sau carragenină [22].
S-a demonstrat că activarea GCs oferă protecţie faţă de leziunile de ischemie-reperfuzie folosind BAY 58-2667 atât in vivo, cât şi într-un model de inimă izolată [23]. Rezultate similare au fost obţinute folosind acelaşi compus într-un model canin de oprire cardioplegică a inimii şi circulaţie extracorporală [24].
Unele studii au indicat că activarea GCs poate avea efecte antinociceptive. În modelele de diabet indus de streptozotocină supuse nocicepţiei la şoareci (testul de zbatere) şi şobolani (hiperalgezia lăbilor), creşterea nivelurilor de GMPc prin administrarea sildenafilului a blocat răspunsul la durere, care la rândul său a fost anulat de un inhibitor NOS sau GCs [25]. S-a demonstrat că inhibitorul GCs 1H-1,2,4-oxadiazolo-4,2-a-chinoxalin-1-onă (ODQ) blochează efectele antinociceptive ale diverşilor agenţi, inclusiv ale meloxicamului şi difenil diselenidei într-un model de durere indusă de formol [26] [27] şi xilazinei într-un model de presiune asupra labelor [28]. În plus, ataciguatul a fost antinociceptiv în modelul caragenan de hiperalgezie termică declanşată inflamatorie şi modelul protejat de leziuni ale nervilor cauzate de durerea neuropatică la şoareci [29].
S-a demonstrat că inhibarea PDE9, o fosfodiesterază specifică pentru GMPc exprimată în creier, îmbunătăţeşte potenţarea pe termen lung [30]. În sistemul nervos central, GCs este principala enzimă care catalizează formarea GMPc [31]. Astfel, activarea GCs poate fi benefică în tratarea bolii Alzheimer şi Parkinson.
Într-un studiu clinic de faza II, stimulatorul GCs riociguat a fost eficient în tratarea hipertensiunii pulmonare tromboembolice cronice şi hipertensiunii arteriale pulmonare [32]. Aceste constatări extind studiile preclinice în care BAY 41-2272 şi cinaciguatul au redus hipertensiunea pulmonară în modelele de şoareci [33] şi miei [34]. Rezultate similare au fost obţinute folosind HMR 1766 într-un model de şoareci cu hipertensiune pulmonară [35].
Activarea GCs poate trata boala renală cronică. Atât BAY 58-2667, cât şi HMR 1766 au îmbunătăţit funcţia şi structura renală într-un model de nefrectomie subtotală la şobolani ce suferă de boala renală [36], [37]. Funcţia renală îmbunătăţită şi supravieţuirea au fost asigurate de tratamentul cu BAY 58-2667 la şobolanii transgenici cu renină hipertensivă (TG(mRen2)27 şobolani) trataţi cu un inhibitor NOS [20]. Tratamentul cu BAY 41-2272 a păstrat funcţia şi structura renală într-un model cronic de boală renală la şobolani indusă de uninefrectomie şi tratamentul cu anticorpi anti-thy1 [38].
Bolile cauzate de coagularea excesivă a sângelui pot fi tratate cu activatori GCs. Activarea GCs folosind BAY 58-2667 a fost capabilă să inhibe agregarea plachetară indusă de către diverşi stimuli ex vivo. În plus, acest compus a inhibat formarea trombilor in vivo la şoareci şi a prelungit perioada de sângerare [3]. Într-un alt studiu cu folosirea HMR 1766, activarea trombocitelor in vivo a fost inhibată la şobolanii trataţi cu streptozotocin [39]. Activarea GCs poate fi, de asemenea, benefică în tratamentul tulburărilor urologice [40]. Acest fapt este susţinut de studii clinice cu folosirea inhibitorului PDE5 vardenafil [41]. Stimulatorul guanilatciclazei solubile BAY 41-8543 a fost capabil să inhibe proliferarea celulelor musculare netede ale prostatei, uretrei şi vezicii urinare folosind probe de pacienţi [42], oferind astfel o dovadă în plus în susţinerea utilităţii tratării tulburărilor urologice cu activatori ai GCs.
Studiile de mai sus oferă dovezi pentru utilizarea activatorilor GCs în tratarea bolilor cardiovasculare, care includ hipertensiunea, ateroscleroza, boala arterială periferică, restenoza, accidentul vascular cerebral, insuficienţa cardiacă, vasospasmul coronarian, vasospasmul cerebral, ischemia/leziunile de reperfuzie, hipertensiunea pulmonară tromboembolică, hipertensiunea arterială pulmonară, angina stabilă şi instabilă, tulburările tromboembolice. În plus, activatorii GCs pot trata boala renală, diabetul, tulburările fibrotice, inclusiv cele ale ficatului, rinichilor şi plămânilor, tulburările urologice, inclusiv vezica hiperactivă, hiperplazia benignă de prostată, şi disfuncţia erectilă, şi tulburările neurologice, inclusiv boala Alzheimer, boala Parkinson, precum şi durerea neuropatică. Tratamentul cu activatori ai GCs poate oferi, de asemenea, beneficii în tulburările inflamatorii, cum ar fi psoriazisul, scleroza multiplă, artrita, astmul, şi boala pulmonară obstructivă cronică.
Prezenta invenţie se referă la compuşi noi, care activează sau intensifică GCs şi sunt astfel utili în tratarea diverselor boli şi tulburări, ce includ bolile cardiovasculare, inflamatorii şi renale, care pot fi atenuate prin activarea sau intensificarea GCs. Prezenta invenţie se referă, de asemenea, la compoziţii farmaceutice, care cuprind aceşti compuşi, la procedee de utilizare a acestor compuşi în tratamentul diverselor boli şi tulburări, la procedee de preparare a acestor compuşi şi intermediari utili în procedeele date.
Într-un alt aspect, prezenta invenţie se referă la activatori ai guanilat-ciclazei solubile având proprietăţi de solubilitate ce corespund proprietăţilor farmacocinetice acceptabile. După cum se cunoaşte în domeniu, compuşii slab solubili pot suferi de expunere umană slabă. Se preconizează ca compuşii propuşi în prezenta invenţie să aibă proprietăţi de expunere compatibile cu cele ale unui medicament adecvat.
Într-un alt aspect, prezenta invenţie prezintă compuşi cu proprietăţi de stabilitate metabolică compatibile cu proprietăţile farmacocinetice acceptabile. După cum se cunoaşte în domeniu, compuşii cu stabilitate metabolică slabă nu pot atinge uşor nivelurile terapeutice dorite. Se preconizează ca compuşii propuşi în prezenta invenţie să aibă proprietăţi de stabilitate metabolică compatibile cu cele ale unui medicament adecvat.
Într-o variantă de executare se prezintă compuşi cu formula I
I
unde:
A este o grupare heterociclil saturată cu 5...7 membri, conţinând un azot şi opţional un oxigen, unde un carbon din gruparea heterociclil menţionată este substituit opţional cu una sau două grupări selectate dintre alchil C1-3 şi oxo;
R1 este alchil C1-4 substituit opţional cu o grupare metoxi;
R2 este selectat dintre H, F, Cl, alchil C1-3, -CN, -OMe şi -CF3;
R3 este selectat dintre H şi -CH3;
R4 este selectat dintre H, F, -CH3 şi -OMe;
R5 este selectat dintre H, Cl, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F şi -OMe;
R6 este legat de azotul din gruparea A şi este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)nC3-6-cicloalchil, -C(O)C1-6-alchil, -(CH2)n heterociclil, -(CH2)n-aril -(CH2)n-heteroaril, -SO2aril, SO2C1-6alchil, unde C1-6alchil, -(CH2)n heterociclil, -(CH2)n cicloalchil, -(CH2)n aril şi -(CH2)n heteroaril menţionate sunt substituite opţional cu 1-4 grupări selectate independent dintre alchil C1-3, halogen, alcoxi C1-3, -CF3, -OH, oxo, -(CH2)1-3O(CH2)2-3OH, şi -SO2CH3;
R7 este selectat dintre H, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F, şi -CN;
n este 0, 1 sau 2
sau o sare a acestuia.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în varianta de executare de mai sus, unde:
A este o grupare heterociclil saturată cu 5...7 membri, conţinând un azot, unde un carbon din gruparea heterociclil menţionată este substituit opţional cu una sau două grupări alchil C1-3;
R1 este alchil C1-3;
R2 este selectat dintre H, F, Cl, alchil C1-3 , -CN, -OMe şi -CF3;
R3 este selectat dintre H şi -CH3;
R4 este selectat dintre H şi F;
R5 este selectat dintre H, Cl şi -CH3;
R6 este legat de azotul din gruparea A şi este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)nC3-6cicloalchil, -C(O)C1-6alchil, -(CH2)n heterociclil, -(CH2)n aril şi -(CH2)n heteroaril, unde alchil C1-6, -(CH2)n heterociclil, -(CH2)n cicloalchil, -(CH2)n aril şi -(CH2)n heteroaril menţionate sunt substituite opţional cu 1-4 grupări selectate independent dintre alchil C1-3, halogen, alcoxi C1-3, -CF3, -OH şi -SO2CH3;
R7 este H;
şi
n este 0, 1 sau 2;
sau o sare a acestuia.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
R1 este metil, etil sau izopropil; şi gruparea
este selectată dintre:
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
R2 este selectat dintre -CH3, F, Cl, şi -CF3; şi
R6 este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)nC3-6cicloalchil, -C(O)C1-6alchil şi -(CH2)n heterociclil, unde alchil C1-6, -(CH2)n cicloalchil şi -(CH2)n heterociclil menţionate sunt substituite opţional cu 1-4 grupări selectate independent dintre alchil C1-3, halogen, alcoxi C1-3, -CF3, -OH şi -SO2CH3;
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde heterociclilul menţionat în R6 este selectat dintre oxetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, 2-oxabiciclo[3.2.0]heptanil, [1,4]dioxanil, 8-oxabiciclo[3.2.1]octanil, 1-oxaspiro[4.5]decanil şi pirolidin-2-onă;
heteroarilul menţionat în R6 este selectat dintre imidazolil, izoxazolil, pirazinil, pirazolil, piridinil, pirimidinil, tiazolil şi 4,5,6,7-tetrahidrobenzotiazolil;
şi arilul menţionat în R6 este fenil;
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
R6 este -(CH2)n heterociclil, unde heterociclilul menţionat este selectat dintre oxetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, 2-oxabiciclo[3.2.0]heptanil, [1,4]dioxanil, 8-oxabiciclo [3.2.1]octanil şi 1-oxaspiro[4.5]decanil;
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
R2 este -CH3;
R3 este H;
R4 este H sau -CH3;
R5 este H, sau -CH3;
R7 este în poziţia para faţă de R5 şi este H, -CH3 sau -CH2CH3;
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
gruparea
este
;
sau o sare a acestora.
Într-o altă variantă de executare se propun compuşi descrişi în una dintre variantele de executare de mai sus, unde:
R3 este H; şi
R4 este H; sau o sare a acestora.
Tabelul 1 prezintă compuşi tipici ai invenţiei care pot fi preparaţi folosind schemele generale de sinteză, exemplele şi metodele cunoscute în domeniu.
Tabelul 1
Nr. comp. Structura Nr. comp. Structura 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 336 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210
211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258
Într-o variantă de executare, invenţia se referă la oricare dintre compuşii indicaţi în Tabelul 1 de mai sus şi la sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora.
Într-o altă variantă de executare, invenţia se referă la grupul de compuşi indicaţi în Tabelul 1, care constă din compusul cu numărul 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 12, 15, 16, 18, 21, 27, 28, 30, 31, 35, 36, 39, 41, 42, 44, 45, 46, 47, 48, 57, 59, 62, 68, 77, 78, 79, 80, 82, 83, 84, 85, 86, 88, 92, 93 şi 94 şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora.
Într-o altă variantă de executare, invenţia se referă la grupul de compuşi indicaţi în Tabelul 1, care constă din compusul cu numărul 95, 97, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 136, 137, 139, 140, 141, 142, 145, 146, 152, 153, 154, 155, 157, 158, 159,161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 191, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 220, 222, 223, 224, 225, 227, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257 şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora.
Dacă nu se menţionează altfel, în întreaga descriere şi în revendicările anexate, o anumită formulă chimică sau o denumire va cuprinde tautomeri şi toţi izomerii stereo, optici şi geometrici (de ex. enantiomeri, diastereomeri, izomeri E/Z, etc.) şi racemaţii acestora, precum şi amestecurile în diferite proporţii de enantiomeri separaţi, amestecuri de diastereomeri, sau amestecuri de oricare dintre formele de mai sus în care există astfel de izomeri şi enantiomeri, precum şi sărurile, inclusiv sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora şi solvaţii acestora, cum ar fi de exemplu hidraţii, inclusiv solvaţii compuşilor liberi sau solvaţii unei sări a compusului.
Unii dintre compuşii cu formula (I) pot exista în mai mult de o formă tautomeră. Invenţia include procedee pentru utilizarea tuturor acestor tautomeri.
Invenţia include derivaţi acceptabili farmaceutic ai compuşilor cu formula (I). Un "derivat acceptabil farmaceutic" se referă la orice sare sau ester acceptabil farmaceutic, sau orice alt compus care, după administrarea unui pacient, este capabil să furnizeze (direct sau indirect) un compus util pentru invenţie, sau un metabolit farmacologic activ sau un reziduu farmacologic activ al acestuia. Prin metabolit farmacologic activ se va înţelege orice compus al invenţiei care poate fi metabolizat enzimatic sau chimic. Acesta include, de exemplu, compuşi derivaţi hidroxilaţi sau oxidaţi cu formula (I).
Aşa cum este utilizat în prezenta, "săruri acceptabile farmaceutic" se referă la derivaţi ai compuşilor descrişi, unde compusul de bază este modificat prin obţinerea sărurilor acide sau bazice ale acestuia. Exemple de săruri acceptabile farmaceutic includ, dar nu se limitează la sărurile acizilor minerali sau organici ale reziduurilor bazice, cum ar fi aminele; sărurile alcaline sau organice ale reziduurilor acide, cum ar fi acizii carboxilici; şi altele. De exemplu, astfel de săruri includ acetaţi, ascorbaţi, benzensulfonaţi, benzoaţi, bezilaţi, bicarbonaţi, bitartraţi, bromuri/hidrobromuri, edetaţi, camsilaţi, carbonaţi, cloruri/hidrocloruri, citraţi, edisilaţi, disulfonaţi de etan, ezilaţi de estolaţi, fumaraţi, gluceptaţi, gluconaţi, glutamaţi, glicolaţi, glicolilarsnilaţi, hexilresorcinaţi, hidrabamine, hidroximaleaţi, hidroxinaftoaţi, ioduri, izotionaţi, lactaţi, lactobionaţi, malaţi, maleaţi, mandelaţi, metansulfonaţi, metilbromuri, metilnitraţi, metilsulfaţi, mucaţi, napsilaţi, nitraţi, oxalaţi, pamoaţi, pantotenaţi, fenilacetaţi, fosfaţi/difosfaţi, poligalacturonaţi, propionaţi, salicilaţi, stearaţi, subacetaţi, succinaţi, sulfamide, sulfaţi, tanaţi, tartraţi, teoclaţi, toluensulfonaţi, trietiodide, amoniu, benzatine, cloroprocaine, coline, dietanolamine, etilendiamine, meglumine şi procaine. Alte săruri acceptabile farmaceutic pot fi formate cu cationi de metale, cum ar fi aluminiu, calciu, litiu, magneziu, potasiu, sodiu, zinc şi altele. (a se vedea, de asemenea, Pharmaceutical salts, Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19).
Sărurile acceptabile farmaceutic conform prezentei invenţii pot fi sintetizate din compusul de bază care conţine o fracţiune bazică sau acidă prin metode chimice convenţionale. În general, astfel de săruri pot fi preparate prin punerea în reacţie a formelor acide sau bazice libere ale acestor compuşi cu o cantitate suficientă de bază sau acid adecvat în apă sau într-un diluant organic, cum ar fi eter, acetat de etil, etanol, izopropanol, sau acetonitril, sau un amestec al acestora.
Sărurile altor acizi decât cei menţionaţi mai sus, care, de exemplu, sunt utile pentru purificarea sau izolarea compuşilor din prezenta invenţie (de ex., sărurile de acetat trifluoro), de asemenea, cuprind o parte a invenţiei.
În plus, domeniul de aplicare al invenţiei cuprinde utilizarea promedicamentelor compuşilor cu formula (I). Promedicamentele includ acei compuşi care, după transformarea chimică simplă, sunt modificaţi pentru a produce compuşii invenţiei. Transformări chimice simple includ hidroliza, oxidarea şi reducerea. Mai exact, atunci când un promedicament este administrat unui pacient, promedicamentul poate fi transformat într-un compus descris mai sus, conferind astfel efectul farmacologic dorit.
Compuşii din invenţie sunt doar cei care sunt examinaţi ca fiind "stabili chimic" aşa cum se va evalua de către specialiştii în domeniu. De exemplu, un compus care va avea o "valenţă fluctuantă", sau un "carbanion" nu sunt compuşi examinaţi de metodele invenţiei descrise aici.
Pentru toţi compuşii descrişi mai sus în această cerere, în cazul în care nomenclatura este în conflict cu structura, se va înţelege că compusul este definit de structură.
Toţi termenii utilizaţi în această descriere, dacă nu se menţionează altfel, vor fi înţeleşi în sensul lor obişnuit cunoscut în domeniu. De exemplu, "alchil C1-4" este un radical monovalent de hidrocarbură alifatică saturată conţinând 1...4 atomi de carbon cum sunt metilul, etilul, n-propilul, 1-metiletilul (izopropilul), n-butilul sau t-butilul; "alcoxi C1-4" este un alchil C1-4 cu un oxigen terminal, cum ar fi metoxi, etoxi, propoxi, butoxi. Toate grupările alchil, alchenil şi alchinil vor fi înţelese ca fiind ramificate sau neramificate, ciclizate sau neciclizate, dacă este posibil din punct de vedere structural şi dacă nu se specifică altfel. Alte definiţii mai specifice sunt după cum urmează:
Termenul "alchil-C1-n", unde n este un număr întreg de la 2 până la n, fie singur, fie în combinaţie cu un alt radical reprezintă un radical de hidrocarbură aciclică, saturată, ramificată sau liniară cu 1 până la n atomi de carbon. De exemplu, termenul alchil-C1-5 cuprinde radicalii H3C-, H3C-CH2-, H3C-CH2-CH2-, H3C-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH2-CH2-, H3C-CH2-CH(CH3)-, H3C-CH(CH3)-CH2-, H3C-C(CH3)2-, H3C-CH2-CH2-CH2-CH2-, H3C-CH2-CH2-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH(CH3)-CH2-, H3C-CH(CH3)-CH2-CH2-, H3C-CH2-C(CH3)2-, H3C-C(CH3)2-CH2-, H3C-CH(CH3)-CH(CH3)- şi H3C-CH2-CH(CH2CH3)-.
Termenul "alchilen-C1-n-", unde n este un număr întreg de la 1 până la n, fie singur, fie în combinaţie cu un alt radical, reprezintă un radical alchil bivalent cu catenă aciclică, dreaptă sau ramificată conţinând de la 1 până la n atomi de carbon. De exemplu, termenul alchilen-C1-4 include -(CH2)-, -(CH2-CH2)-, -(CH(CH3))-, -(CH2-CH2-CH2)-, -(C(CH3)2)-, -(CH(CH2CH3))-, -(CH(CH3)-CH2)-, -(CH2-CH(CH3))-, -(CH2-CH2-CH2-CH2)-, -(CH2-CH2-CH(CH3))-, -(CH(CH3)-CH2-CH2)-, -(CH2-CH(CH3)-CH2)-, -(CH2-C(CH3)2)-, -(C (CH3)2-CH2)-, -(CH(CH3)-CH(CH3))-, -(CH2-CH(CH2CH3))-, -(CH(CH2CH3)-CH2)-, -(CH(CH2CH2CH3))- , -(CHCH(CH3) 2)- şi -C(CH3)(CH2CH3)-.
Termenul "cicloalchil-C3-n", unde n este un număr întreg 4 până la n, fie singur, fie în combinaţie cu un alt radical, reprezintă un radical de hidrocarbură ciclică, saturată, neramificată cu 3 până la n atomi de carbon. De exemplu, termenul cicloalchil-C3-7 include ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, ciclohexil şi cicloheptil.Prin termenul "heteroatom", aşa cum este utilizat în prezenta, se va înţelege atomi, alţii decât carbon, cum ar fi O, N, S şi P.
În toate grupările alchil sau catenele de atomi de carbon, unul sau mai mulţi atomi de carbon pot fi substituiţi opţional cu heteroatomii: O, S sau N, se va înţelege că, dacă N nu este substituit atunci el este NH, de asemenea, se va fi înţelege că heteroatomii pot înlocui atomii de carbon terminali sau atomii de carbon interni în cadrul unui lanţ de carbon liniar sau ramificat. Astfel de grupări pot fi substituite, aşa cum este descris mai sus, cu grupări, cum ar fi oxo conducând la definiţii, cum ar fi, dar fără a se limita la: alcoxicarbonil, acil, amido şi tioxo.
Termenul "aril" aşa cum este utilizat aici, fie singur, fie în combinaţie cu un alt radical, reprezintă o grupă monociclică aromatică carbociclică conţinând 6 atomi de carbon, care poate fi condensată până la o a doua grupă carbociclică cu 5 sau 6 membri, care poate fi aromatică, saturată sau nesaturată. Aril include, dar nu se limitează la, fenil, indanil, indenil, naftil, antracenil, fenantrenil, tetrahidronaftil şi dihidronaftil.
Termenul "heteroaril" înseamnă un inel heteroaril monociclic aromatic cu 5 - 6 membri sau un inel heteroaril biciclic aromatic cu 7...11 membri, unde, cel puţin, unul dintre inele este aromatic, inelul heteroaril conţinând 1...4 heteroatomi, cum ar fi N, O şi S. Exemple nelimitative de inele heteroaril monociclice cu 5 - 6 membri includ furanil, oxazolil, izoxazolil, oxadiazolil, tiazolil, pirazolil, pirolil, imidazolil, tetrazolil, triazolil, tienil, tiadiazolil, piridinil, pirimidinil, piridazinil, pirazinil, triazinil şi purinil. Exemple nelimitative de inele heteroaril biciclice cu 7...11 membri includ benzimidazolil, chinolinil, dihidro-2H-chinolinil, izochinolinil, chinazolinil, indazolil, tieno[2,3-d]pirimidinil, indolil, izoindolil, benzofuranil, benzopiranil, benzodioxolil , benzoxazolil şi benzotiazolil.
Termenul "heterociclil" înseamnă un radical heterociclic, monociclic, stabil, nearomatic cu 4...8 membri sau un radical heterociclic, biciclic condensat, biciclic unit sau spirociclic cu 6 ...11 membri. Heterociclul cu 5...11 membri constă din atomi de carbon şi unul sau mai mulţi, preferabil unu - patru heteroatomi selectaţi dintre azot, oxigen şi sulf. Heterociclul poate fi saturat sau parţial nesaturat. Exemple nelimitative de radicali heterociclici monociclici nearomatici cu 4...8 membri includ tetrahidrofuranil, azetidinil, pirolidinil, piranil, tetrahidropiranil, dioxanil, tiomorfolinil, 1,1-dioxo-1λ6-tiomorfolinil, morfolinil, piperidinil, piperazinil, şi azepinil. Exemple nelimitative de radicali biciclici condensaţi nearomatici cu 6...11 membri includ octahidroindolil, octahidrobenzofuranil, şi octahidrobenzotiofenil. Exemple nelimitative de radicali biciclici uniţi nearomatici cu 6...11 membri includ 2-azabiciclo[2.2.1]heptanil, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil, şi 3-azabiciclo[3.2.1]octanil. Exemple nelimitative de radicali heterociclici spirociclici nearomatici cu 6...11 membri includ 7-aza-spiro[3,3]heptanil, 7-spiro[3,4]octanil, şi 7-aza-spiro[3,4]octanil. Termenul "heterociclil" are ca scop includerea tuturor formelor izomerice posibile.
Prin termenul "halogen", aşa cum este utilizat în prezenta descriere, se va înţelege brom, clor, fluor sau iod. Definiţiile "halogenat", "parţial sau complet halogenat"; parţial sau complet fluorurat; "substituit cu unul sau mai mulţi atomi de halogen", includ, de exemplu, derivaţi cu inel mono, di sau tri pe unul sau mai mulţi atomi de carbon. Pentru alchil, un exemplu nelimitativ ar fi -CH2CHF2, -CF3 etc.
Se va înţelege că fiecare alchil, cicloalchil, heterociclu, aril sau heteroaril, sau analogii acestora, descrişi în prezenta, sunt opţional parţial sau complet halogenaţi.
Aşa cum este utilizat aici, "azot" sau N şi "sulf" sau S include orice formă oxidată a azotului şi sulfului şi forma cuaternară a oricărui azot bazic. De exemplu, pentru un radical -S-alchil-C1-6, cu excepţia cazului în care se prevede altfel, se va înţelege că acesta include -S(O)-alchil-C1-6 şi, de asemenea, -S(O)2-alchil-C1-6, -S-Ra poate fi reprezentat ca fenil-S(O)m- când Ra este fenil şi dacă m este 0, 1 sau 2.
METODE GENERALE DE SINTEZĂ
Compuşii invenţiei pot fi preparaţi cu ajutorul metodelor generale şi exemplelor prezentate mai jos, precum şi metodelor cunoscute de către specialiştii în domeniu. Condiţiile optime şi timpul de realizare a reacţiilor pot varia în funcţie de reactanţii utilizaţi. Dacă nu se specifică altfel, solvenţii, temperaturile, presiunile şi alte condiţii de reacţie pot fi uşor selectate de către un specialist în domeniu. Proceduri specifice sunt prezentate în secţiunea Exemple de sinteză. Intermediarii folosiţi în sintezele de mai jos sunt disponibili comercial sau pot fi uşor preparaţi prin metode cunoscute de către specialiştii în domeniu. Progresul reacţiei poate fi monitorizat prin metode convenţionale, cum ar fi cromatografia în strat subţire (TLC) sau cromatografia lichidă de înaltă presiune-spec de masă (HPLC-MS). Intermediarii şi produsele pot fi purificate prin metode cunoscute în domeniu, inclusiv cromatografia pe coloană, HPLC, TLC preparativă sau recristalizare.
Metodele descrise mai jos şi în secţiunea Exemple de sinteză pot fi utilizate pentru prepararea compuşilor cu formula I. Compuşii cu formula I pot fi preparaţi în conformitate cu descrierea din Schema 1.
Schema 1
Aşa cum s-a ilustrat mai sus, diester II (R = Me sau Et) şi hidrazină III se încălzesc la reflux într-un solvent adecvat, cum ar fi etanol, cu o bază adecvată, cum ar fi carbonatul de potasiu (K2CO3), obţinând hidroxi pirazol IV. Compusul IV este alchilat, de exemplu prin utilizarea trimetilsilildiazometanului în unele cazuri sau R1I şi unei baze adecvate cum ar fi carbonatul de cesiu (Cs2CO3). Alternativ, se utilizează condiţiile Mitsunobu cu etanol pentru a se obţine clorpiridina de pirazol alcoxi dorită V (R1 = Et). Clorpiridina, V, este cuplată cu specii de bor, VI, în prezenţa unui catalizator de paladiu, cum ar fi tetrakis(trifenil)fosfină (0), şi unei baze adecvate, cum ar fi Na2CO3, în soluţie apoasă de 1,2-DME (1,2-dimetoxietan) sub iradiere cu microunde la temperatura de 120 °C pentru a se obţine VII. Alchilarea fenolului intermediar, VII cu bromură de alchil VIII, în care X = Cl, I sau Br, folosind o bază cum ar fi carbonatul de cesiu (Cs2CO3) într-un solvent cum ar fi acetona, la circa 50°C. Deprotejarea ulterioară a grupării t-Boc cu un acid adecvat, cum ar fi acidul trifluoracetic (TFA) duce la obţinerea compusului IX. Aminarea reductivă a aminei, IX, cu cetona sau aldehida dorită folosind o sursă de hidrură adecvată, cum ar fi NaBH3CN într-un solvent, cum ar fi MeOH, conţinând un acid organic cum ar fi AcOH la aproximativ 50°C, urmată de hidroliza în situ cu o bază cum ar fi o soluţie apoasă de LiOH permite obţinerea compusului dorit cu formula I. Alternativ, alchilările aminei, IX cu halogenuri alchil în prezenţa unei baze adecvate, cum ar fi carbonatul de cesiu (CS2CO3) sau N,N-diizopropiletilamină (DIPEA) într-un solvent cum ar fi MeCN (acetonitril) urmată de hidroliza esterului furnizează compusul dorit cu formula I.
Metodele UPLC/MS
Timpii de retenţie (TR) raportaţi pentru compuşi în secţiunea Exemple de sinteză sunt obţinuţi prin UPLC/MS utilizând una dintre următoarele metode:
Pentru fiecare metodă, următoarele sunt identice:
Componentele sistemului UPLC/MS - Acquity UPLC cu detectoare PDA, SQ şi ELS.
Condiţiile PDA - Detectare: 210… 400 nm. Viteza de prelevare: 20 pts/sec. Reacţia filtrului: rapidă.
Condiţiile ELSD - Amplificare: 1000. Viteza de prelevare: 20pts/sec. Temp. tubului clistron: 55°C. Modul de pulverizare: răcire. Presiunea gazului: 41 psi.
Condiţiile MS - Instrumentul: Acquity SQD cu sursa ESCi. Modul de ionizare: ESI+/-. Tensiunea capilară: 3,5 kV. Tensiunea pe con: 5 V. Extractor: 1,3 V. Temp. sursei: 150°C. Temp. de desolvatare: 350°C. Gaz de desolvatare: 800 L/oră. Gazul pe con: 50 L/oră.
Condiţiile specifice fiecărei metode sunt următoarele
Metoda A1
Coloană- Waters BEH C18, 2,1x50mm, diametrul particulelor 1,7 µm.
Descrierea şi Gradientul: Metoda gradientului rapid polar mediu. Modul de ionizare ESI+/- 80…1000Da. Gradientul: 90% A - 100% B în 1,19 minute se menţine la 100% B până la 1,70 minute. Viteza de curgere 0,8 mL/min. A=(95% apă 5% acetonitril 0,05% acid formic) B=(Acetonitril 0,05% Acid formic).
Volumul de injectare a probei: 1 µL
Metoda A2
Coloană- Waters BEH C18, 2,1x50mm, diametrul particulelor 1,7 µm.
Descrierea şi Gradientul: Metoda gradientului lung polar mediu. Modul de ionizare ESI+/- 80…1000Da. Gradientul: 90%A - 100% B în 4,45 minute se menţine la 100% B până la 4,58 minute. Viteza de curgere 0,8 mL/min. A=(95% apă 5% acetonitril 0,05% acid formic) B=(acetonitril 0,05% acid formic).
Volumul de injectare a probei: 2 µL
Metoda B1
Coloană- CSH 2,1x50mm C18, diametrul particulelor 1,7 µm.
Descrierea şi Gradientul: Metoda gradientului rapid polar mediu. Modul de ionizare ESI+/- 80…1000Da. Gradientul: 90%A - 100% B în 1,19 minute se menţine la 100%B până la 1,70 minute. Viteza de curgere 0,8mL/min. A=(95% apă 5% acetonitril 0,05% acid formic) B=(acetonitril 0,05% acid formic).
Volumul de injectare a probei: 1 µL
Metoda B2
Coloană- CSH 2,1x50mm C18, diametrul particulelor 1,7 µm.
Descrierea şi Gradientul: Metoda gradientului lung polar mediu. Modul de ionizare ESI+/- 80…1000Da. Gradientul: 90%A - 100% B în 4,45 minute se menţine la 100% B până la 4,58 minute. Viteza de curgere 0,8 mL/min. A=(95% apă 5% acetonitril 0,05% acid formic) B=(acetonitril 0,05% acid formic).
Volumul de injectare a probei: 2 µL
Metoda A1 este utilizată pentru toţi compuşii, cu excepţia compuşilor menţionaţi pentru care este utilizată Metoda A2, Metoda B1, sau Metoda B2.
EXEMPLE DE SINTEZĂ
Compuşii finali sunt desemnaţi cu numerele compuşilor care corespund numerelor compuşilor din Tabelul 1. Intermediarii sunt desemnaţi cu numere scrise prin cratimă care corespund cu cifrele şi numerele indicate în schema pentru fiecare exemplu.
Exemplul 1: Prepararea esterului etilic intermediar al acidului 1-[6-(2-hidroxi-3-metil-fenil)-piridin-2-il] -5-izopropoxi-1H-pirazol-4-carboxilic (1-6)
Într-un balon cu fund rotund, conţinând EtOH (200 mL), K2CO3 (20,05 g, 55,720 mmol), şi 1-1 (10,00 g, 69,65 mmol) se adaugă 1-2 (13,95 mL, 69,65 mmol). Amestecul rezultat se încălzeşte la reflux timp de 3 ore. Masa de reacţie se răceşte şi substanţa solidă se colectează prin filtrare. Această substanţa solidă este înlăturată din pâlnia fritată şi se pune într-un pahar de laborator la care se adaugă 250 mL de HCl 1,0 N (barbotare excesivă). Se confirmă că soluţia este acidă (pH 2) şi apoi se adaugă diclormetan (500 mL). Amestecul se agită până când substanţa solidă se dizolvă complet. Stratul organic se colectează, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează pentru a se obţine 1-3 (17,18 g) sub formă de solid de culoare alburie.
Un amestec de reacţie de 1-3 (0,50 g, 1,87 mmol), 2-iodopropan (372,92 µL, 3,74 mmol), CS2CO3 (0,91 g, 2,80 mmol) în DMA (9,0 mL) este încălzit la 150°C într-un reactor cu microunde timp 10 min. Amestecul se adaugă la apă şi se extrage cu EtOAc (2x). Straturile organice se spală cu apă, saramură, se usucă pe MgSO4 şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc 12-100% în heptan pentru a obţine produsul dorit 1-4 (0,41 g).
Într-un flacon pentru microundă se adaugă 1-4 (1,00 g, 3,29 mmol), 1-5 (0,69 g, 4,52 mmol), Pd(PPh3)4 (0,37 g, 0,32 mmol), DME (15,0 ml), şi Na2CO3 2,0 M (4,36 mL, 8,72 mmol). Amestecul de reacţie se încălzeşte într-un reactor cu microunde la 120°C timp de 20 min. Masa de reacţie se extrage cu diclormetan (2x), se spală cu apă, saramură, se usucă pe Na2SO4, şi se concentrează. Materialul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc 12-100% în heptan pentru a obţine produsul dorit 1-6 (0,41 g).
Exemplul 2: Prepararea esterului etilic intermediar al acidului 1-[6-(2-hidroxi-3-metil-fenil)-piridin-2-il] -5-metoxi-1H-pirazol-4-carboxilic (2-8)
Se dizolvă intermediarul 1-3 (7,00 g, 26,15 mmol) în amestec de EtOAc/MeOH 1:1 (50,0 ml). Ulterior se adaugă lent cu ajutorul unei seringi TMSCHN2 2,0 M în hexani (42,70 ml, 85,40 mmol). Masa de reacţie se agită timp de 3 ore şi se stinge prin adăugarea acidului acetic (4,0 ml). Amestecul se agită timp de 10 minute şi apoi se concentrează. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptan pentru a obţine produsul dorit 2-7 (4,460 g) sub formă de solid alburiu.
Într-un flacon pentru microunde se adaugă 2-7 (1,50 g, 5,33 mmol), 1-5 (0,890 g, 5,86 mmol), Pd(PPh3)4 (0,62 g, 0,532 mmol), DME (12,0 ml), şi Na2CO3 2,0 M (6,922 ml, 13,85 mmol). Amestecul de reacţie se încălzeşte într-un reactor cu microunde la 120°C timp de 20 min, se extrage cu diclormetan (2x), se spală cu apă, saramură, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează. Materialul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptan pentru a obţine produsul dorit 2-8 (1,17 g).
Următorii intermediari sunt sintetizaţi în mod similar din reactivii corespunzători:
2-9 2-10 2-11 2-12 2-13 2-14
Exemplul 3: Prepararea esterului etilic intermediar al acidului 5-etoxi-1-[6-(2-hidroxi-3-metil-fenil)-piridin-2-il] -1H-pirazol-4-carboxilic (3-15)
Se dizolvă acidul 1-(6-clor-piridin-2-il)-5-hidroxi-1H-pirazol-4-carboxilic, 1-3, (3,50 g, 13,08 mmol) în THF (90,0 ml). Se adaugă trifenilfosfină (3,77 g, 14,383 mmol) şi etanol (1,14 ml, 19,614 mmol) şi masa de reacţie se răceşte până la 0 °C. Suspensia rezultată se dizolvă lent la 0 °C, pe măsură ce se adaugă prin picurare azodicarboxilat de diizopropil (3,09 ml, 15,691 mmol) timp de 10 min. Amestecul de reacţie se lasă să se încălzească până la temperatura ambiantă şi se agită timp de 16 ore. Reacţia se concentrează în vid şi reziduul se dizolvă într-o cantitate minimă de diclormetan şi se supune cromatografiei pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 3-50% în heptan pentru a obţine produsul dorit 3-14 (3,33 g).
Într-un flacon pentru microunde se adaugă 3-14 (250,0 mg, 0,85 mmol), 1-5 (134,9 mg, 0,89 mmol), Pd(PPh3)4 (60,05 mg, 0,05 mmol), DME (5,0 ml), şi Na2CO3 2,0 M (1,06 mL, 2,11 mmol). Amestecul de reacţie se încălzeşte într-un reactor cu microunde la 120°C timp de 20 min, se extrage cu diclormetan (2x), se spală cu apă, saramură, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează. Materialul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptan pentru a obţine produsul dorit 3-15 (227,0 mg).
Următorul intermediar este sintetizat în mod similar din reactivii corespunzători:
3-16 3-17 3-18 3-19 3-20 3-21 3-22 3-23 3-24
Exemplul 4: Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (4-19)
Se dizolvă compusul 4-17 (12,50 g, 45,08 mmol) în THF uscat (125,0 ml) sub azot la 25 °C. Se adaugă complexul THF boran (99,17 ml, 99,17 mmol) cu ajutorul unei seringi şi se agită amestecul la 25 °C timp de 16 ore. Se adaugă lent apă (10,0 ml) şi apoi Na2CO3 2,0 M (15,0 ml). Acest amestec se agită timp de 15 minute şi apoi se diluează cu EtOAc şi se colectează straturile organice. Substanţele organice se clătesc cu HCI 1,0 M, se usucă pe MgSO4 şi se concentrează sub vid pentru a obţine un ulei. Uleiul se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 10-80% în heptan pentru a obţine produsul dorit 4-18 (11,78 g) sub formă de solid alb.
La o soluţie de alcool, 4-18, (9,50 g, 36,08 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (9,43 ml, 54,11 mmol) în diclormetan (200,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (23,79 g, 54,11 mmol) la 0 °C . Reacţia se agită timp de 1 oră şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptan pentru a obţine produsul dorit 4-19 (8,74 g) sub formă de solid alb.
Următorii intermediari sunt sintetizaţi în mod similar din reactivii corespunzători:
4-20 4-21 4-22 4-23 4-24
Exemplul 5: Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-5-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (5-34)
Se adaugă o soluţie de acid 5-23 (350,0 g, 2,10 mol) în THF (1,4 l) la o suspensie de LAH (95,9 g, 1,40 mol) în THF (2,5 l) la 0 °C. Amestecul se agită la temperatura camerei timp de 0,5 ore, apoi se încălzeşte la reflux timp de 1 oră. Amestecul se răceşte apoi până la 0 °C, şi se stinge lent prin adăugarea soluţiei de clorură de amoniu apoasă saturată. Se adaugă un volum mare de Na2SO4 şi EtOAc solid, apoi substanţele solide se colectează prin filtrare. Filtratul se concentrează sub vid pentru a obţine compusul brut 5-24 (350,0 g) care este utilizat direct în etapa următoare.
La o soluţie de compus 5-24 (294,0 g, 1,90 mol) în diclormetan (2,2 l) la -10 °C se adaugă clorură de tionil (SOCl2) (460,0 g, 3,90 mol). Ulterior amestecul de reacţie se încălzeşte la reflux timp de 1 oră, apoi se concentrează sub vid pentru a furniza compusul brut 5-25 (298,0 g) care este utilizat direct în etapa următoare.
Un amestec de compus 5-25 (298,0 g, 1,8 mol) şi NaCN (154,5 g, 2,1 mol) în DMF (1,2 l) se agită la temperatura camerei timp de 12 ore, apoi se extrage cu EtOAc şi H2O. Stratul organic se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Reziduul se purifică prin cromatografie pe silicagel (eter de petrol:EtOAc = 50:1) pentru a obţine compusul intermediar 5-26 (230,0 g).
Un amestec de compus 5-26 (180,0 g, 1,10 mol), Ni Raney (40,0 g) şi amoniac apos (250,0 ml) în MeOH (1,0 l) se agită sub H2 (50 psi) la temperatura camerei timp de 5 ore. Amestecul se filtrează apoi şi se concentrează pentru a obţine compusul 5-27 (165,0 g) care este utilizat direct în etapa următoare.
O soluţie de compus 5-27 (165,0 g, 1,0 mol) şi formaldehidă apoasă (HCHO) (37% în greutate, 30 g, 1,0 mol) în acid formic (HCO2H) (1,5 l) se agită la 50 °C peste noapte, apoi solventul se îndepărtează sub vid pentru a obţine compusul 5-28 (150,0 g) care este utilizat direct în etapa următoare.
Compusul 5-28 (150,0 g, 847 mmol) se pune în suspensie în HBr apos (48%, 1,0 l), apoi se încălzeşte până la 100 °C peste noapte. După îndepărtarea solventului sub vid se obţine compusul 5-29 (195,0 g) care este utilizat direct în etapa următoare.
La o soluţie de compus 5-29 (195,0 g, 799 mmol) în THF (1,0 l) şi H2O (1,0 l) se adaugă Et3N (242,0 g, 2,4 mol) şi Boc2O (174,0 g, 799 mmol). Amestecul rezultat se agită la temperatura camerei peste noapte, apoi se extrage cu EtOAc. Fazele organice combinate se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Produsul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (folosind 10:1eter de petrol: EtOAc) pentru a obţine compusul 5-30 (100,0 g).
La o soluţie de compus 5-30 (100,0 g, 380 mmol) şi Et3N (76,8 g, 760 mmol) în diclormetan (1,5 l) răcit până la 0 °C se adaugă anhidridă triflică (Tf2O) (107,0 g, 380 mmol) cu ajutorul unei pâlnii. După adăugarea completă a Tf2O, soluţia se încălzeşte până la temperatura camerei timp de 5 ore. Amestecul de reacţie se tratează apoi cu H2O şi diclormetan, iar faza organică se separă, se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Reziduul se purifică prin cromatografie pe silicagel (folosind eter de petrol: EtOAc 20:1) pentru a obţine compusul 5-31 (105,0 g).
Compusul 5-31 (50,0 g, 127 mmol) se combină cu acetat de paladiu (II) (Pd(OAc)2) (5,0 g), dppp (5,0 g) şi Et3N (25,7 g, 254 mmol) în EtOH (1,0 l), apoi se agită la 80 °C peste noapte sub CO la o presiune de 4 MPa. Amestecul se răceşte până la temperatura camerei, apoi substanţele solide se înlătură prin filtrare. Filtratul se concentrează sub vid, iar reziduul rămas se purifică prin cromatografie pe silicagel (folosind eter de petrol:EtOAc 20:1) pentru a obţine compusul 5-32 (25,0 g).
La o soluţie de LAH (12,5 g, 330 mmol) în THF (400 ml) răcită până la -30°C se adaugă prin picurare o soluţie de compus 5-32 (35,0 g, 110 mmol) în THF (400 ml) timp de 30 min. După adăugare, amestecul de reacţie se agită la 0°C timp de 30 min, apoi se tratează cu H2O şi diclormetan. Faza organică se separă, se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Produsul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (folosind eter de petrol:EtOAc 10:1) pentru a obţine compusul intermediar dorit 5-33 (21,1 g).
La o soluţie de alcool, 5-33, (6,00 g, 21,63 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (5,65 ml, 32,45 mmol) în diclormetan (200,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (14,27 g, 32,45 mmol) la 0 °C. Masa de reacţie se agită timp de 1 oră şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptan pentru a obţine produsul dorit 5-34 (6,60 g) sub formă de solid alb.
Exemplul 6: Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-5-cloro-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (6-39)
La o soluţie de N,N,N'-trimetil-etan-1,2-diamină (45,0 g, 442,0 mmol) în THF (500 ml) se adaugă o soluţie de n-BuLi (177,0 ml, 442 mmol) la - 40°C sub N2. Amestecul se agită la -40 °C timp de 30 min. După ce amestecul se răceşte până la -70 °C, la amestecul de reacţie se adaugă compusul 6-35 (50,0 g, 368 mmol) în THF (250 ml). Amestecul se lasă să se încălzească până la 0 °C şi se agită timp de 30 min. Apoi amestecul de reacţie se răceşte până la -78°C şi se adaugă n-BuLi (177,0 ml, 442 mmol). Amestecul se lasă să se încălzească până la 10 °C şi se răceşte până la -30 °C, după care se adaugă la o soluţie de C2Cl6 (287,0 g, 1,1 mol) în THF (600 ml). Amestecul se agită timp de 2 ore la temperatura camerei. Ulterior acesta se toarnă în 1000 ml de soluţie HCI de 10% şi se extrage cu EtOAc. Straturile organice se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se concentrează, şi se purifică prin cromatografie pe silicagel pentru a obţine compusul 6-36 (36,7 g).
La o soluţie de compus 6-36 (105,0 g, 615 mmol) în HOAc (700 ml) se adaugă NH4OAc
(47,4 g, 615 mmol) la temperatura camerei sub N2. La acest amestec de reacţie se adaugă MeNO2 (188,0 g, 3,08 mol) şi amestecul se încălzeşte până la 40°C timp de 12 ore şi apoi se agită la 85°C timp de 6 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Amestecul se stinge cu H2O şi se extrage cu diclormetan. Straturile organice se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se concentrează, şi se purifică prin cromatografie pe silicagel pentru a obţine compusul 6-37 (97,5 g).
La o soluţie de compus 6-37 (48,0 g, 225 mmol) în THF (900 ml) se adaugă LAH (34,1 g, 899 mol) la -20°C. Amestecul se agită la temperatura camerei timp de 5 ore şi la 50°C timp de 30 min. Amestecul se stinge cu H2O şi se extrage cu diclormetan. Straturile organice se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, şi se concentrează pentru a obţine compusul 6-38 (28,0 g), care este utilizat direct în etapa următoare.
Următorul compus se prepară din compusul intermediar 6-38 conform procedurii descrise în Exemplul 5:
6-39
Exemplul 7: Prepararea acidului 5-izopropoxi-1-(6-{3-metil-2-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (1)
Compusul intermediar 1-6 (373,0 mg, 0,88 mmol), bromura 4-19 (287,1 mg, 0,88 mmol) şi Cs2CO3 (573,5 mg, 1,76 mmol) se combină în acetonă (11,0 ml) şi se încălzeşte până la 50°C timp de 5 ore. Amestecul de reacţie se extrage cu EtOAc, se spală cu saramură, se usucă pe MgSO4 şi se concentrează. Materialul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel (folosind un gradient de 5-100% EtOAc/heptan pentru a obţine compusul intermediar dorit, 7-40 (502,0 mg).
Se dizolvă carbamatul, 7-40, (496,0 mg, 0,79 mmol) în diclormetan (4,0 ml) şi se tratează cu TFA (1,0 ml) la temperatura camerei. După 1 oră amestecul se neutralizează cu soluţie saturată de NaHCO3 şi straturile se separă cu o frită hidrofobă. Filtratul organic se concentrează pentru a obţine 7-41 (375,0 mg).
Amina 7-41 (98,0 mg, 0,19 mmol) se combină cu site moleculare 4Å (30 mg), tetrahidropiran 4-onă (28 µl, 0,28 mmol), AcOH (20 µl), şi Na(CN)BH3 (24 mg, 0,38 mmol) în MeOH (4 ml). Amestecul se agită la temperatura camerei timp de 30 min, şi apoi se încălzeşte până la 50°C timp de 12 ore. Amestecul se diluează cu THF (1,0 ml) şi apă (1 ml). La acesta se adaugă LiOH (42,8 mg, 1,86 mmol) şi reacţia se încălzeşte până la 50°C timp de 2 ore. Apoi acesta se concentrează sub N2, se triturează cu MeOH/DMSO 1:1, se filtrează printr-un filtru de seringă de 0,45 microni, iar filtratul se purifică prin eluare cu gradient (10-100% MeCN/apă+ 0,1% HCO2H) pe Gilson RP-HPLC (cromatografie lichidă de înaltă performanţă în fază inversă). Se concentrează sub vid pentru a obţine compusul din titlu 1 (64,0 mg). SM (spectroscopia de masă), electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,71 min.
Exemplul 7A:
Procedura este echivalentă cu Exemplul 7, cu toate acestea în timpul etapei de aminare reductivă Na(OAc)3BH în diclormetan este substituit cu NaCNBH3/AcOH/MeOH.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind materiile prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 2: SM, electropulverizare, m/z = 617,3 [M+H], RT 0,79 min;
Compusul 37: SM, electropulverizare, m/z = 541,3 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 38: SM, electropulverizare, m/z = 571,4 [M+H], RT 0,76 min;
Compusul 39: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 40: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 41: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 42: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 109: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,77 min;
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 40% i-Propanol(1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 111: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,77 min;
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 40% i-Propanol(1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 113: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,75 min;
Rezoluţie: Lux Cellulose 2 Prep 60% MeOH(1% iPrNH2):CO2 @ 55 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 115: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,75 min;
Rezoluţie: Lux Cellulose 2 Prep 60% MeOH(1% iPrNH2):CO2 @ 55 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 144: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,77 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 1-6, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 43: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 44: SM, electropulverizare, m/z = 585,4 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 45: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 46: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,76 min;
Compusul 47: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,76 min;
Compusul 48: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 104: SM, electropulverizare, m/z = 597,5 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 116: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,77 min;
Rezoluţie: Lux Cellulose 2 Prep 65% MeOH(1% iPrNH2):CO2 @ 60 ml/min., 125 bar, 25°C
Compusul 117: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,77 min;
Rezoluţie: Lux Cellulose 2 Prep 65% MeOH(1% iPrNH2):CO2 @ 60 ml/min., 125 bar, 25°C
Compusul 122: SM, electropulverizare, m/z = 581,5 [M+H], RT 0,72 min;
Rezoluţie: RegisPack Prep 15% IPA(1% dietilamină): CO2 @ 12 ml/min., 120 bar, 40°C
Compusul 123: SM, electropulverizare, m/z = 581,5 [M+H], RT 0,72 min.
Rezoluţie: RegisPack Prep 15% IPA(1% dietilamină): CO2 @ 12 ml/min., 120 bar, 40°C
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 3: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,64 min;
Compusul 5: SM, electropulverizare, m/z = 587,2 [M-H], RT 0,78 min;
Compusul 8: SM, electropulverizare, m/z = 527,2 [M+H], RT 0,69 min;
Compusul 12: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,68 min;
Compusul 13: SM, electropulverizare, m/z = 513,2 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 14: SM, electropulverizare, m/z = 541,3 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 15: SM, electropulverizare, m/z = 541,2 [M+H], RT 0,68 min;
Compusul 23: SM, electropulverizare, m/z = 543,3 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 24: SM, electropulverizare, m/z = 525,2 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 25: SM, electropulverizare, m/z = 539,3 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 61: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 62: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 73: SM, electropulverizare, m/z = 611,4 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 75: SM, electropulverizare, m/z = 593,4 [M-H], RT 0,72 min;
Compusul 81: SM, electropulverizare, m/z = 585,1 [M+H], Metoda A2, RT 1,42 min;
Compusul 86: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,78 min;
Compusul 87: SM, electropulverizare, m/z = 581,4 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 90: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 91: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,83 min;
Compusul 92: SM, electropulverizare, m/z = 571,4 [M+H], RT 0,79 min;
Compusul 102: SM, electropulverizare, m/z = 609,4 [M+H], RT 0,83 min;
Compusul 103: SM, electropulverizare, m/z = 609,4 [M+H], RT 0,89 min;
Compusul 188: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,58 min;
Compusul 192: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,58 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-20, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 10: SM, electropulverizare, m/z = 555,2 [M+H], RT 0,82 min;
Compusul 89: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], Metoda A2, RT 1,80 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-20, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 217: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], 1,45 min (metoda B2);
Compusul 218: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], 1,52 min (metoda B2);
Compusul 219: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], 1,46 min (metoda B2);
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-21, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 59: SM, electropulverizare, m/z = 541,3 [M+H], RT 0,66 min;
Compusul 85: SM, electropulverizare, m/z = 513,2 [M+H], RT 0,71 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-22, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 100: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,77 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 4-23, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 130: SM, electropulverizare, m/z = 571,4 [M+H], RT 0,69 min (Metoda B1);
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 16: SM, electropulverizare, m/z = 541,2 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 27: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 28: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 30: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 31: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,70 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 105: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,72 min
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 20x250mm; MeOH până la 30 mg/ml, 35% EtOH (DEA 1%) în heptan timp de18 min, temp. ambiantă şi colectarea la 290nm;
Compusul 106: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,72 min
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 20x250mm; MeOH până la 30 mg/ml, 35% EtOH (DEA 1%) în heptan timp de18 min, temp. ambiantă şi colectarea la 290nm;
Compusul 127: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,76 min;
Compusul 139: SM, electropulverizare, m/z = 585,4 [M+H], RT 0,74 min
Rezoluţie: Chiracel OD-H, 20x250mm; 10%MeOH în CO2 la 55,5g/min timp de 28 min, 140 Bar, 40°C şi colectarea la 254 nm;
Compusul 140: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,74 min
Rezoluţie: Chiracel OD-H, 20x250mm; 10%MeOH în CO2 la 58g/min timp de 30 min, 120 Bar, 40°C şi colectarea la 254 nm;
Compusul 141: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,74 min
Rezoluţie: Chiracel OD-H, 20x250mm; 10%MeOH în CO2 la 58g/min timp de 30 min, 120 Bar, 40°C şi colectarea la 254 nm;
Compusul 142: SM, electropulverizare, m/z = 585,4 [M+H], RT 0,74 min
Rezoluţie: Chiracel OD-H, 20x250mm; 10%MeOH în CO2 la 55,5g/min timp de 28 min, 140 Bar, 40°C şi colectarea la 254 nm;
Compusul 191: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,61 min;
Compusul 198: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,66 min (metoda B1);
Rezoluţie: LUX Amylose-2, 21x250mm 35% (1:1:1MeOH:EtOH:iPA)+Et2NH:CO2, 80ml/min, 110bar, 40°C
Compusul 199: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,66 min (metoda B1).
Rezoluţie: LUX Amylose-2, 21x250mm 35% (1:1:1MeOH:EtOH:iPA)+Et2NH:CO2, 80ml/min, 110bar, 40°C
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-8, bromură, 6-39, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 17: SM, electropulverizare, m/z = 561,2 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 18: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 19: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 20: SM, electropulverizare, m/z = 559,3 [M+H], RT 0,76 min;
Compusul 21: SM, electropulverizare, m/z = 575,3 [M+H], RT 0,83 min;
Compusul 22: SM, electropulverizare, m/z = 575,3 [M+H], RT 0,73 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-9, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 7: SM, electropulverizare, m/z = 547,2 [M+H], RT 0,71 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-10, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 9: SM, electropulverizare, m/z = 581,2 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 83: SM, electropulverizare, m/z = 609,4 [M+H], RT 0,79 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-10, bromură, 4-21, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 93: SM, electropulverizare, m/z = 595,3 [M+H], RT 0,80 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-10, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 84: SM, electropulverizare, m/z = 623,4 [M+H], RT 0,83 min;
Compusul 88: SM, electropulverizare, m/z = 595,3 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 107: SM, electropulverizare, m/z = 607,4 [M+H], RT 0,77 min;
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 30x250mm; 50%Izopropanol:Hexan cu 1% Izopropilamină @ 88 ml/min, 100 bar CO2, temp. ambiantă
Compusul 108: SM, electropulverizare, m/z = 607,4 [M+H], RT 0,77 min.
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 30x250mm; 50%Izopropanol:Hexan cu 1% Izopropilamină @ 88 ml/min, 100 bar CO2, temp. ambiantă
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-11, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 52: SM, electropulverizare, m/z = 547,3 [M-H], RT 0,70 min;
Compusul 53: SM, electropulverizare, m/z = 575,3 [M-H], RT 0,71 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-12, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 63: SM, electropulverizare, m/z = 559,3 [M+H], RT 0,65 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-13, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 98: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,76 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 2-13, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 99: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,79 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-14, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 124: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,71 min
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 3-15, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 6: SM, electropulverizare, m/z = 541,2 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 32: SM, electropulverizare, m/z = 527,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 34: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 35: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 36: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 110: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,75 min;
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 30% EtOH:CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 112: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,75 min.
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 30% EtOH:CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 3-15, bromură, 4-22, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 245: SM, electropulverizare, m/z = 583,1 [M+H], RT 0,62 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 3-15, bromură, 4-23, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 131: SM, electropulverizare, m/z = 585,4 [M+H], RT 1,21 min (Metoda B1);
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 3-15, bromură, 4-24, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 205: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1);
Compusul 213: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1);
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7, folosind fenol, 3-15, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 114: SM, electropulverizare, m/z = 583,5 [M+H], RT 0,62 min;
Compusul 125: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 1,25 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 2 Prep, 23% MeOH (1% Et2NH) în CO2 la 78ml/min timp de 21 minute, 160 Bar, 40°C.
Compusul 126: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 1,25 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 2 Prep, 23% MeOH (1% Et2NH) în CO2 la 78ml/min timp de 21 minute, 160 Bar, 40°C.
Compusul 128: SM, electropulverizare, m/z = 583,5 [M+H], RT 1,31 min (Metoda B2);
Rezoluţie: Chiralcel OD-H, 20x250mm 5,8% MeOH (~1% Et2NH) în CO2 la 85g/min, 160 Bar, 40C.
Compusul 129: SM, electropulverizare, m/z = 583,5 [M+H], RT 1,31 min (Metoda B2);
Rezoluţie: Chiralcel OD-H, 20x250mm 5,8% MeOH (~1% Et2NH) în CO2 la 85g/min, 160 Bar, 40C.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 4-23, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 216: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,64 min (Metoda B1);
Compusul 247: SM, electropulverizare, m/z = 557,1 [M+H], RT 1,21 min (Metoda B2);
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 146: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,65 min (Metoda B1);
Compusul 152: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,65 min (Metoda B1);
Rezoluţie: Chiralcel OD-H, 20x250mm 5,8% MeOH (~1% Et2NH) în CO2 la 85g/min, 160 Bar, 40°C;
Compusul 153: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,65 min (Metoda B1);
Rezoluţie: Chiralcel OD-H, 20x250mm 5,8% MeOH (~1% Et2NH) în CO2 la 85g/min, 160 Bar, 40°C;
Compusul 155: SM, electropulverizare, m/z = 613,4 [M+H], RT 0,55 min (Metoda B1);
Compusul 156: SM, electropulverizare, m/z = 573,4 [M+H], RT 0,43 min (Metoda B1);
Compusul 163: SM, electropulverizare, m/z = 625,3 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 164: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 172: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,31 min (Metoda B2);
Compusul 179: SM, electropulverizare, m/z = 613,1 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1);
Compusul 189: SM, electropulverizare, m/z = 583,5 [M+H], RT 0,63 min
Compusul 193: SM, electropulverizare, m/z = 583,51 [M+H], RT 0,63 min
Compusul 208: SM, electropulverizare, m/z = 587,3 [M+H], RT 1,48 min (Metoda B2);
Compusul 236: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,54 min (Metoda A2);
Rezoluţie: LUX 5u Celuloză 1 Prep 7% EtOH:Heptan @ 10ml/min
Compusul 238: SM, electropulverizare, m/z = 569,2 [M+H], RT 0,60 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-17, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 135: SM, electropulverizare, m/z = 611,5 [M+H], RT 0,86 min;
Compusul 136: SM, electropulverizare, m/z = 611,5 [M+H], RT 0,83 min;
Compusul 137: SM, electropulverizare, m/z = 597,5 [M+H], RT 0,84 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-18, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 148: SM, electropulverizare, m/z = 609,4 [M+H], RT 0,81 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-19, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 133: SM, electropulverizare, m/z = 597,5 [M+H], RT 0,81 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-20, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 134: SM, electropulverizare, m/z = 611,5 [M+H], RT 0,85 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-21, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 149: SM, electropulverizare, m/z = 613,3 [M+H], RT 0,74 min;
Compusul 150: SM, electropulverizare, m/z = 599,5 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 151: SM, electropulverizare, m/z = 613,3 [M+H], RT 0,74 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 183: SM, electropulverizare, m/z = 573,1 [M+H], RT 0,53 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 182: SM, electropulverizare, m/z = 585,9 [M+H], RT 0,55 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 181: SM, electropulverizare, m/z = 570,7 [M+H], RT 0,61 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 180: SM, electropulverizare, m/z = 583,7 [M+H], RT 0,64 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 209: SM, electropulverizare, m/z = 541,4 [M+H], RT 0,52 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-22, bromură, 5-34, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 224: SM, electropulverizare, m/z = 556,7 [M+H], RT 0,52 min.
Exemplul 8: Prepararea acidului 5-etoxi-1-(6-{2-[2-(2-fluoro-1-metil-etil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-3-metil-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (49)
Se dizolvă amina, 8-42 (2,94 g, 5,74 mmol) în metanol (20 ml), THF (20 ml) şi apă (10 ml). La această soluţie se adaugă LiOH (0,971 g, 40,60 mmol) şi amestecul se încălzeşte la 50 °C timp de 2 ore. Se răceşte reacţia până la temperatura camerei şi se concentrează sub vid. Se purifică produsul brut prin cromatografie pe coloană cu fază inversă pe C18 (folosind un gradient solvent de 5- 95% MeCN/H2O + 0,1% TFA) pentru a obţine 60 (2,94 g). SM, electropulverizare, m/z = 485,1 [M+H], RT 0,68 min.
Se combină aminoacidul 60 (78,0 mg, 0,15 mmol) cu site moleculare 4Å (20 mg), 1-fluoro-propan-2-onă (100 µl), AcOH (25,0 µl), şi Na(CN)BH3 (29,2 mg, 0,44 mmol) în MeOH (4 ml). Se agită amestecul la temperatura camerei timp de 30 min şi apoi se încălzeşte până la 50°C timp de 12 ore. Apoi acesta se concentrează sub N2, se triturează cu MeOH/DMSO 1:1, se filtrează printr-un filtru de seringă de 0,45 microni, iar filtratul se purifică prin eluare cu gradient (10-100% MeCN/apă+ 0,1% HCO2H) pe RP-HPLC Gilson. Se concentrează sub vid pentru a obţine compusul din titlu 49 (70,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 545,3 [M+H], RT 0,72 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 8, folosind materiile prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 64: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 65: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 66: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 67: SM, electropulverizare, m/z = 625,5 [M+H], RT 0,78 min;
Compusul 68: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,68 min;
Compusul 69: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,70 min;
Compusul 70: SM, electropulverizare, m/z = 605,4 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 71: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 76: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,79 min;
Compusul 77: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,69 min;
Compusul 78: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 79: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,75 min;
Compusul 80: SM, electropulverizare, m/z = 611,4 [M+H], RT 0,74 min;
Compusul 94: SM, electropulverizare, m/z = 587,4 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 95: SM, electropulverizare, m/z = 597,4 [M+H], RT 0,82 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 8, folosind fenol, 3-16, bromură, 4-19, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 50: SM, electropulverizare, m/z = 505,2 [M+H], RT 0,66 min;
Compusul 51: SM, electropulverizare, m/z = 561,3 [M+H], RT 0,70min;
Compusul 54: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 55: SM, electropulverizare, m/z = 575,2 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 56: SM, electropulverizare, m/z = 563,3 [M+H], RT 0,74 min;
Compusul 57: SM, electropulverizare, m/z = 623,3 [M+H], RT 0,80 min;
Compusul 58: SM, electropulverizare, m/z = 563,2 [M+H], RT 0,76 min.
Exemplul 9: Prepararea 3,3-difluoro-ciclobutancarbaldehidei intermediare (9-44)
Se adaugă periodinan Dess-Martin (2,6 g, 6,1 mmol) la un amestec de 3,3-difluorociclobutilmetanol, 9-43, (0,5 g, 4,0 mmol) şi NaHCO3 (1,4 g, 16,0 mmol) în diclormetan (10 ml) la temperatura camerei. Se agită suspensia rezultată la întuneric timp de 15 ore şi apoi se toarnă într-o soluţie de NaHCO3 apoasă saturată. Se filtrează amestecul rezultat printr-o frită hidrofobă cu exces de diclormetan. Se spală filtratul organic cu soluţie apoasă saturată de Na2S2O5, şi apoi se separă cu o altă frită hidrofobă. Se usucă filtratul pe MgSO4, şi apoi se filtrează printr-un strat de pământ de diatomee, folosind diclormetan. Se înlătură circa 5 ml de diclormetan prin distilare moleculară la presiune atmosferică (temperatura băii 50 °C). Se răceşte soluţia rămasă până la -78 °C timp de 15 min pentru a precipita substanţele solide de periodinan reziduale. Se înlătură solventul cu seringa şi se trece printr-un filtru Millipore de 0,45 microni. Filtratul care conţine aldehidă brută 9-44 (~0,1M în diclormetan) este folosit aşa cum este fără purificare sau concentrare ulterioară.
Exemplul 10: Prepararea acidului 1-(6-{2-[2-(3,3-difluoro-ciclobutilmetil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-3-metil-fenil}-piridin-2-il)-5-izopropoxi-1H-pirazol-4-carboxilic (4)
Amina 7-41 (56,0 mg, 0,11 mmol) se combină cu site moleculare 4Å (20 mg), 3,3-difluor-ciclobutancarboxaldehidă, 9-44, (100 µl, 0,21 mmol), AcOH (20 µl), şi Na(CN)BH3 (20,01 mg, 0,32 mmol) în MeOH (2,0 ml). Amestecul se agită la temperatura camerei timp de 30 min, şi apoi se încălzeşte până la 50°C timp de 12 ore. Amestecul se diluează cu THF (1,0 ml) şi apă (1,0 ml). La acesta se adaugă LiOH (14,68 mg, 0,64 mmol) şi reacţia se încălzeşte până la 50°C timp de 2 ore. Apoi acesta se concentrează sub N2, se triturează cu MeOH/DMSO 1:1, se filtrează printr-un filtru de seringă de 0,45 microni, iar filtratul se purifică prin eluare cu gradient (10-100% MeCN/apă+ 0,1% HCO2H) pe RP-HPLC Gilson. Se concentrează sub vid pentru a obţine compusul din titlu 4 (40,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 603,4 [M+H], RT 0,78 min.
Se prepară următorii compuşi din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 10, folosind amina corespunzătoare, alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 26: SM, electropulverizare, m/z = 575,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 29: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 0,77 min;
Compusul 82: SM, electropulverizare, m/z = 561,3 [M+H], RT 0,82 min;
Compusul 96: SM, electropulverizare, m/z = 589,4 [M+H], RT 0,96 min.
Exemplul 11: Prepararea 2,2-difluoro-ciclopropancarbaldehidei intermediare (10-46)
Se adaugă EDCI (1,4 g, 7,1 mmol) la un amestec de hidroclorură de N,O-dimetilamină (600 mg, 6,2 mmol) şi acid carboxilic 2,2-difluorciclopropan , 11-45, (580 mg, 4,8 mmol) în diclormetan (15 ml) la temperatura camerei. Se adaugă N,N-diizopropiletilamină (3,3 ml, 19,0 mmol) şi amestecul se agită timp de 3 ore. Se adaugă o soluţie de HCl 1N, şi apoi se agită puternic timp de 10 min. Faza organică se separă folosind o frită hidrofobă şi se aplică direct într-un recipient pentru probe (samplet) de 10 g de SiO2. Materialul brut se purifică pe un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 50 g eluat cu diclormetan/MeOH 9:1. Se înlătură solventul din produsul care conţine fracţiuni prin distilarea moleculară la presiune atmosferică (temp. băii de 70 °C) pentru a obţine 11-46 (605 mg).
O soluţie de 11-46, (605 mg, 3,66 mmol) în diclormetan la -78 °C se tratează prin picurare cu DIBAL-H (4,2 ml, 1,0 M în diclormetan) şi apoi se agită timp de 2,5 ore la -78 °C. Reacţia se stinge prin adăugarea soluţiei apoase saturate de sare Rochelle. Se adaugă un volum egal de apă şi amestecul se încălzeşte la temperatura camerei. Se agită puternic amestecul timp de 3 ore, apoi se separă faza organică cu o frită hidrofobă. Se înlătură diclormetanul prin distilare moleculară la presiunea atmosferică (temp. băii = 62 °C) pentru a obţine 11-47 (389 mg).
Exemplul 12: Prepararea acidului 1-(6-{2-[2-(2,2-difluor-ciclopropilmetil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-3-metil-fenil}-piridin-2-il)-5-metoxi-1H-pirazol-4-carboxilic (72)
Se combină amina 12-48 (90,0 mg, 0,18 mmol) cu site moleculare 4Å (20 mg), 2,2-difluor-ciclopropancarboxaldehidă, 11-47, (60,0 mg, 0,54 mmol), AcOH (20 µl), şi Na(CN)BH3 (34,0 mg, 0,54 mmol) în MeOH (4,0 ml). Se agită amestecul la temperatura camerei timp de 30 min, şi apoi se încălzeşte până la 50°C timp de 12 ore. Amestecul se diluează cu THF (1,0 ml) şi apă (1,0 ml). La acesta se adaugă LiOH (33,00 mg, 1,43 mmol) şi reacţia se încălzeşte până la 50°C timp de 2 ore. Apoi acesta se concentrează sub N2, se triturează cu MeOH/DMSO 1:1, se filtrează printr-un filtru de seringă de 0,45 microni, iar filtratul se purifică prin eluare cu gradient (10-100% MeOH/apă+ 0,1% HCO2H) pe Gilson RP-HPLC. Se concentrează sub vid pentru a obţine compusul din titlu 72 (7,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 561,3 [M+H], Metoda A2, RT 1,59 min.
Exemplul 13:
Prepararea acidului 5-metoxi-1-(6-{3-metil-2-[2-(2,2,2-trifluoro-etil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (11)
Se adaugă 2,2,2-trifluoroetil triflat, 13-49, (36,0 µl, 0,23 mmol) la un amestec de intermediar 12-48 (106,0 mg, 0,21 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (190 µl, 1,10 mmol) în MeCN (5,0 ml). Se încălzeşte amestecul până la 45 °C timp de 4 ore şi apoi se concentrează sub vid. Reziduul rămas se dizolvă din nou în 5 ml de THF/MeOH/apă (2:2:1) şi se tratează cu LiOH (25,0 mg, 1,10 mmol). Se încălzeşte apoi amestecul până la 50 °C timp de 2 ore înainte de îndepărtarea solvenţilor sub vid. Reziduul brut rămas se purifică prin eluare cu gradient pe un cartuş KP-C18 SNAP (Biotage) de 30 g folosind un gradient MeCN de 5-95%/apă + TFA 0,1% pentru a obţine compusul din titlu 11 (103 mg). SM, electropulverizare, m/z = 553,2 [M+H], Metoda A2, RT 1,13 min.
Exemplul 14:
Prepararea 1-metil-5-oxo-pirolidină-3-carbaldehidei intermediare (14-51)
Se combină alcoolul 14-50 (0,20 g, 1,55 mmol) cu reşina IBX legată de polistiren (5,81 g) în diclormetan (20,0 ml) într-un flacon sigilat de 40 ml şi se roteşte pe verticală timp de 20 de ore. Amestecul de reacţie este filtrat din răşină şi răşina se spală de mai multe ori [mai întâi cu diclormetan (10 ml), apoi cu diclormetan/MeOH 1:1 (20 ml), încă o dată cu diclormetan/MeOH 1:1 (20 ml), şi în final cu diclormetan (10 ml)]. Filtratele combinate se concentrează sub un curent de N2 pentru a se obţine un amestec de 14-50 şi produsul dorit 14-51.
Exemplul 15: Prepararea acidului 5-etoxi-1-(6-{3-metil-2-[2-(1-metil-5-oxo-pirolidin-3-ilmetil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (97)
Se combină aminoacidul 60 (40,0 mg, 0,07 mmol) cu site moleculare 4Å (20 mg), 14-51 (51,0 mg, 0,200 mmol), AcOH (15,0 µl), şi Na(CN)BH3 (13,2 mg, 0,20 mmol) în MeOH (2,0 ml). Se agită amestecul la temperatura camerei timp de 30 min şi apoi se încălzeşte până la 50°C timp de 12 ore. Produsul brut se purifică prin cromatografie în coloană cu fază inversă pe C18 (utilizând un gradient solvent de MeCN 5-95%/H2O + TFA 0,1%) pentru a se obţine compusul din titlu 97 (27,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 596,4 [M+H], RT 0,80 min.
Exemplul 16:
Prepararea acidului 5-etoxi-1-(6-{3-metil-2-[2-(tetrahidro-furan-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (101)
La un amestec de amină 8-42 (100,0 mg, 0,20 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (0,10 ml, 0,59 mmol) în DMF (1,00 ml) se adaugă 2-bromometiltetrahidrofuran (8,0 mg, 0,05 mmol) în DMF (0,06 ml). Amestecul se iradiază la 100 °C timp de 10 min şi se răceşte până la temperatura camerei. Se adaugă exces de brom (76,0 mg) şi reacţia se iradiază de mai multe ori şi apoi se agită la temperatura camerei timp de 24 ore. Amestecul de reacţie se filtrează şi filtratul se purifică prin HPLC (utilizând un gradient solvent de MeCN 10-95%/H2O + Acid formic 0,1%) pentru a furniza 16-52 (6,0 mg).
16-52 (6,0 mg) se diluează cu THF (1,0 ml), apă (1,0 ml) şi MeOH (1,0 ml). La acesta se adaugă LiOH (5,0 mg) şi reacţia se încălzeşte la 50 ° C timp de 2 ore. Amestecul de reacţie se răceşte la temperatura camerei, se acidulează cu HCI 4 N în 1,4-dioxan, şi se filtrează. Filtratul se purifică prin HPLC (utilizând un gradient de solvent de 10-95% MeCN/H2O + Acid formic 0,1%) pentru a furniza compusul din titlu 101 (1,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,88 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 16, folosind materiile prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 138: SM, electropulverizare, m/z = 639,4 [M+H], RT 1,16 min;
Compusul 160: SM, electropulverizare, m/z = 563,3 [M+H], RT 0,96 min.
Exemplul 17:
Prepararea acidului 1-(6-{2-[2-(2-hidroxi-2-metil-propil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-3-metil-fenil}-piridin-2-il)-5-metoxi-1H-pirazol-4-carboxilic (33)
Se dizolvă compusul intermediar 12-48 (90,0 mg, 0,18 mmol) în MeCN (5,0 ml) la care se adaugă Cs2CO3 (117,9 mg, 0,36 mmol) şi clorură 17-53 (29,5 mg, 0,27 mmol). Se încălzeşte amestecul până la 50 °C timp de 10 ore. Reacţia a fost răcită, extrasă cu EtOAc, spălată cu saramură, uscată pe MgSO4 şi concentrată. Materialul rezultat se purifică prin eluare cu gradient pe un cartuş KP-C18 SNAP (Biotage) de 30 g folosind un gradient MeCN de 15-65%/apă + TFA 0,1% pentru a se obţine esterul intermediar. Se dizolvă esterul în 5 ml de THF/MeOH/apă (2:2:1) şi se tratează cu LiOH (25,0 mg, 1,10 mmol). Se încălzeşte apoi amestecul până la 50 °C timp de 2 ore înainte de îndepărtarea solvenţilor sub vid. Reziduul brut rămas se purifică prin eluare cu gradient pe un cartuş KP-C18 SNAP (Biotage) de 30 g folosind un gradient de MeCN 15-65%/apă + TFA 0,1% pentru a se obţine compusul din titlu 33 (103,0 mg). SM, electropulverizare, m/z = 543,2 [M+H], RT 0,68 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 17, folosind materiile prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 74: SM, electropulverizare, m/z = 577,3 [M+H], RT 0,67 min;
Compusul 168: SM, electropulverizare, m/z = 587,3 [M+H], RT 0,70 min.
Exemplul 18:
Prepararea esterului terţ-butilic al acidului 6-bromometil-8-trifluorometil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (18-10)
Se dizolvă acidul comercial 18.1 (5,0 g, 22,7 mmol) în THF (30 ml) la temperatura camerei. Se adaugă prin picurare cu ajutorul unei seringi o soluţie de boran 1M în THF (34,0 ml, 34,0 mmol). Se încălzeşte apoi amestecul până la 55 °C peste noapte înainte de a fi răcit până la temperatura camerei şi stins cu apă (5 ml). După agitare timp de 5 min, se adaugă 12 ml de HCl 2N şi amestecul se agită timp de 1 oră. Apoi se adaugă diclormetan (50 ml) şi apă (50 ml), iar fazele rezultate se separă cu o frită hidrofobă. Stratul organic se usucă apoi pe Na2SO4, după care se filtrează din nou. Se concentrează sub vid pentru a se obţine un ulei care se purifică prin eluare cu gradient (5-100% EtOAc/heptan) pe un cartuş KP-Sil SNAP (Biotage) de 100 g. În urma concentrării fracţiunilor produselor se obţine intermediarul 18.2 (3,2 g)
Se adaugă clorura de tionil (SOCl2) (2,3 ml, 31,5 mmol) la o soluţie de alcool 18.2 (3,2 g, 15,5 mmol) în diclormetan (20 ml) sub N2 la -10 °C. După 5 minute, se înlătură baia de răcire şi amestecul se încălzeşte la reflux timp de 6 ore. Se răceşte soluţia rezultată până la temperatura camerei şi se concentrează sub vid. Reziduul rămas este apoi supus distilării azeotrope cu PhMe (2 x 10 ml) şi apoi se dizolvă în DMF (20 ml). Se adaugă NaCN solid (840 mg, 17,1 mmol) şi amestecul se încălzeşte până la 45 °C peste noapte. După răcirea la temperatura camerei, amestecul se diluează cu apă (25 ml), saramură (25 ml), şi EtOAc (50 ml). Se separă straturile, şi substanţele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Se purifică produsul brut prin eluare cu gradient (EtOAc 5-100%/heptan) pe un cartuş KP-Sil SNAP (Biotage) de 100g. Fracţiunile de produs s-au concentrat sub vid pentru a se obţine 18-3 (3,0 g).
Se adaugă prin picurare cu ajutorul unei seringi o soluţie de boran 1M în THF (35 ml, 35 mmol) la o soluţie de 18-3 (3,0 g, 13,9 mmol) în THF (25 ml) la temperatura camerei. Se încălzeşte apoi amestecul până la 55 °C peste noapte înainte de a fi răcit până la temperatura camerei, şi stins cu apă (5 ml). După 5 minute de agitare, se adaugă HCl conc. (8 ml) şi se continuă agitarea timp de 1 oră. Apoi amestecul se diluează cu apă (20 ml), şi se tratează cu NaOH solid până la alcalin. Se adaugă diclormetan (50 ml) şi saramură (25 ml), apoi straturile se separă cu o frită hidrofobă. Se purifică amina brută prin eluare cu gradient (MeCN 5-95%/apă + TFA 0,1%) pe un cartuş KP-C18 SNAP (Biotage) de 120g. După concentrarea fracţiunilor sub vid se obţine o sare TFA intermediară (2,93 g), care se dizolvă în HCO2H (30 ml) şi se tratează cu HCHO apos de 37% (0,66 ml, 8,8 mmol). Se agită amestecul la 50 °C peste noapte, apoi se concentrează sub vid pentru a se obţine un solid brut care se dizolvă imediat în soluţie apoasă de 48% de HBr (25 ml). Se încălzeşte această soluţie până la 100 °C peste noapte, apoi se concentrează sub vid. Materialul brut este supus diluării azeotrope cu PhMe (3 x 15ml), apoi se pune în suspensie în diclormetan (50 ml) şi DMF (10 ml). Se adaugă Et3N (1,9 mL, 0,82 mmol) şi câteva cristale de 4-DMAP. Se adaugă Boc2O (2.0 g, 9.1 mmol) într-o porţie, şi se agită amestecul la temp. camerei peste noapte. Se adaugă soluţie saturată de NH4CI (50 ml) şi straturile se separă cu o frită hidrofobă. Se concentrează sub vid substanţa organică pentru a se obţine un reziduu brut care se purifică prin eluare cu gradient (5-100% EtOAc/heptan) pe un cartuş KP-Sil SNAP (Biotage) de 100 g. În urma concentrării fracţiunilor produselor se obţine 18-5 (540 mg)
Se adaugă cu ajutorul unei seringi Tf2O (0,27 ml, 1,6 mmol) la un amestec de 18-5 (540 mg, 1,46 mmol), Et3N (0,31 ml, 2,2 mmol) şi 4-DMAP (18 mg, 0,15 mmol) în diclormetan (25 ml) răcită până la 0 °C. Se agită amestecul cu încălzire până la temperatura camerei peste noapte, şi apoi se stinge cu NaHCO3 sat. (30 ml). Se separă straturile rezultate cu o frită hidrofobă, iar substanţele organice se concentrează sub N2. Se purifică reziduul brut prin eluare cu gradient (EtOAc 5-30%/heptan) pe un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 50g. În urma concentrării fracţiunilor de produse sub vid se obţine 18-6 (460 mg)
Se combină triflatul 18-6 (460 mg, 1,02 mmol) cu complexul acid-piridină vinilboronic (250 mg, 1,04 mmol) şi Pd(PPh3)4 (60 mg, 0,05 mmol) într-un amestec de DME (9 ml) şi soluţie apoasă 2M de Na2CO3. Amestecul se iradiază în microunde Biotage la 120 °C timp de 40 min. După răcire, amestecul se concentrează sub N2, şi substanţele solide brute se triturează cu diclormetan. Se purifică apoi filtratul de diclormetan prin eluare cu gradient (EtOAc 5-80%/heptan) folosind un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 50g. Fracţiunile de produs s-au concentrat sub vid pentru a se obţine 18-7 (275 mg).
Se combină stiren 18-7 (275 mg, 0,84 mmol) şi NaIO4 (630 mg, 2,95 mmol) într-un amestec de THF (12 ml) şi apă (3 ml) la temperatura camerei. Se adaugă OsO4 (0,13 ml, 0,017 mmol, 4% în greutate în H2O) cu ajutorul unei seringi şi suspensia rezultată se agită puternic peste noapte la temp. camerei. Suspensia este apoi filtrată printr-o frită, şi se concentrează sub vid. Reziduul rămas se dizolvă în diclormetan (20 ml), şi se spală cu soluţie apoasă saturată de tiosulfat (25 ml). Straturile se separă apoi cu o frită hidrofobă, şi substanţa organică se concentrează sub vid. În urma purificării reziduului brut prin eluare cu gradient (EtOAc 5-60%/heptan) pe un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 25g se obţine 18-8 (228 mg).
Se dizolvă aldehida 18-8 (225 mg, 0,683 mmol) în THF (5 ml) şi apoi MeOH (5 ml). Se adaugă NaBH4 solid (40 mg, 1,1 mmol), şi amestecul se agită la temp. camerei timp de 20 min. Se adaugă soluţie apoasă sat. de NH4Cl (ca 50 ml) şi amestecul se agită timp de 15 min. Se adaugă EtOAc (100 ml) şi saramură (100 ml), apoi se separă straturile. Substanţa organică se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub vid. Se purifică produsul brut prin eluare cu gradient (EtOAc 5-100%/heptan) pe un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 50g. În urma concentrării fracţiunilor de produse sub vid se obţine 18-9 (225 mg)
Se adaugă Ph3PBr2 solid (450 mg, 1,02 mmol) la un amestec de 18-9 (225 mg, 0,68 mmol) şi DIPEA (0,21 ml, 1,2 mmol) în diclormetan la 0 °C. Se agită amestecul timp de 1 oră, şi apoi se concentrează sub vid. Se purifică bromura brută prin eluare cu gradient (EtOAc 5-40%/heptani) pe un cartuş HP-SIl SNAP (Biotage) de 25g pentru a obţine 18-10 (248 mg).
În mod similar, următoarele bromuri au fost preparate din materiile prime corespunzătoare conform descrierii în Exemplul 18:
18-11 18-12 18-13
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 18-10, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 158: SM, electropulverizare, m/z = 623,3 [M+H], RT 1,34 min (Metoda B2).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 18-10, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 157: SM, electropulverizare, m/z = 637,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B2).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 18-11, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 201: SM, electropulverizare, m/z = 573,3 [M+H], RT 1,14 min (Metoda B2);
Compusul 202: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 1,14 min (Metoda B2);
Compusul 229: SM, electropulverizare, m/z = 587,3 [M+H], RT 1,46 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Celuloză 3 Prep 14% (1:1:1 MeOH:EtOH:iPA):CO2, 40°C, 110 bar, 80ml/min
Compusul 230: SM, electropulverizare, m/z = 559,3 [M+H], RT 1,46 min (Metoda B2).
Rezoluţie: LUX 5u Celuloză 3 Prep 14% (1:1:1 MeOH:EtOH:iPA):CO2, 40°C, 110 bar, 80ml/min
Compusul 253: SM, electropulverizare, m/z = 559,4 [M+H], RT 1,20 min (Metoda A2) (Med Polar Long).
Compusul 254: SM, electropulverizare, m/z = 559,3 [M+H], RT 1,20 min (Metoda A2) (Med Polar Long).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 18-12, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 177: SM, electropulverizare, m/z = 545,2 [M+H], RT 0,68 min (Metoda B1);
Compusul 187: SM, electropulverizare, m/z = 575,3 [M+H], RT 1,13 min (Metoda B2);
Compusul 231: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 1,26 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep 20% 1:1:1 MeOH:EtOH:iPA (0.1% Et2NH):CO2 @ 75 ml/min., 130 bar, 40°C
Compusul 234: SM, electropulverizare, m/z = 589,3 [M+H], RT 1,26 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep 20% 1:1:1 MeOH:EtOH:iPA (0.1% Et2NH):CO2 @ 75 ml/min., 130 bar, 40°C
Compusul 251: SM, electropulverizare, m/z = 559,4 [M+H], RT 1,18 min (Metoda A2) (Med Polar Long).
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 45% 3:1 hexan:EtOH (1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 252: SM, electropulverizare, m/z = 559,3 [M+H], RT 1,18 min (Metoda A2) (Med Polar Long).
Rezoluţie: ChiralPak AD-H Prep 45% 3:1 hexan:EtOH (1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 18-13, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 166: SM, electropulverizare, m/z = 623,3 [M+H], RT 1,30 min (Metoda B2).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 18-12, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 159: SM, electropulverizare, m/z = 587,3 [M+H], RT 0,61 min (Metoda B1).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 18-13, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 165: SM, electropulverizare, m/z = 637,3 [M+H], RT 1,42 min (Metoda B2).
Exemplul 19:
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 7-Hidroximetil-6-metil-1,2,4,5-tetrahidro-benzo[d]azepină-3-carboxilic (19-14)
Se adaugă o soluţie de compus 19-1 (100g, 0,465 mol) în THF (800,000 ml) la un amestec de LAH (166g, 1,395 mol) în THF anhidru (200 ml) la 0 °C. Se agită amestecul la temperatura camerei timp de 0,5 ore, apoi se încălzeşte la reflux timp de 1 oră. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. La amestec se adaugă lent o soluţie apoasă saturată de NH4Cl (200 ml) . Apoi se adaugă EtOAc şi Na2SO4. Se agită amestecul timp de 1oră, şi apoi se filtrează şi se spală cu PE pentru a obţine compusul 19-2.
La o soluţie de compus 19-2 (360,000 g, 2,365 mol) în diclormetan (3000,000 ml) se adaugă SOCl2 (562.980 g, 4.731 mol) la -10 °C. Apoi amestecul de reacţie se încălzeşte la reflux timp de 4 ore. Se concentrează amestecul pentru a obţine compusul brut 19-3 care este utilizat direct în următoarea etapă.
Un amestec de compus 19-3 (334,000 g , 1,957 mol) şi NaCN (168,096 g , 2,290 mol) în DMF (1000,000 ml) se agită la temperatura camerei peste noapte. Se extrage amestecul cu EtOAc şi H2O. Stratul organic se usucă şi se concentrează, şi apoi se purifică prin cromatografie pe silicagel (PE: EA = 50:1) pentru a obţine compusul 19-4 sub formă de ulei de culoare galbenă.
Un amestec de compus 19-4 (1608,000 g, 9,975 mol), KOH (1117,221 g, 19,950 mol) în EtOH (15000,000 ml) se încălzeşte la reflux timp de 5 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Se înlătură solventul sub presiune redusă. Seajustează reziduul până lapH = 1. Sefiltrează amestecul şi turta de filtrare se usucă pentru a obţine compusul 19-5.
Se adaugă compusul 19-5 (737,000 g, 4,090 mol) la o soluţie agitată de (COCl)2 (8,180 mol) şi DMF (70,000 ml) în diclormetan (7370,000 ml) sub atmosferă de N2, după care se agită timp de 2 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Apoi se evaporă amestecul. Reziduul s-a adăugat la o soluţie agitată de 2,2dimetoxietil-1-amină (429,996 g, 4,090 mol) şi Et3N (454,388 g, 4,499 mol) în diclormetan (1000 ml) la temperatura camerei timp de 2 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Se evaporă amestecul şi reziduul se purifică prin coloană pentru a obţine compusul 19-6.
Se agită o soluţie de compus 19-6 (1053 g, 3,939 mol) în AcOH (2 l) şi HCl (2 l) la temperatura camerei timp de16 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Seevaporă amestecul. Reziduul se cristalizează, se spală cu H2O şi EtOH, şi apoi substanţa solidă se filtrează şi se usucă pentru a obţine compusul 19-7.
Se agită un amestec de Pd/C (4 g) şi compusul 19-7 (40,000 g, 0,197 mol) în AcOH (2 l) la temperatura camerei sub H2 timp de 16 ore. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Amesteculse filtrează, se evaporă, şi reziduul secristalizează cu EtOH. Substanţa solidă se filtrează şi se usucă pentru a se obţine compusul 19-8.
La o soluţie agitată de compus 19-8 (130,000 g, 0,633 mol) în THF (1300,000 ml) se adaugă lentBMS (127,000 ml, 1,267 mol) sub atmosferă N2 , între timp temperatura se menţine sub -5 °C, după care se agită timp de 16 ore. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Reacţia se răceşte cu HCl conc. şi apoi amestecul se încălzeşte la reflux timp de 2 ore. Solventul se evaporă şireziduul se separă cu diclormetan şi H2O. Faza apoasă se ajusteazăpână la pH = 9 şi substanţa solidă se filtrează şi se usucăpentru a obţine compusul 19-9.
Se agită o soluţie de compus 19-9 (220,000 g, 1,150 mol) în soluţie apoasă de HBr 48% (1800,000 ml) la 110 °C timp de 4 ore sub atmosferă de N2 . LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Seevaporă amestecul pentru a obţine compusul brut 19-10.
Un amestec de compus 19-10 (267,000 g, 1,506 mol), Boc2O (492,595 g, 2,260 mol) şi TEA (380,368 g, 3,766 mol) în diclormetan (2670,000 ml) se agită la temperatura camerei timp de 2 ore. Reacţia semonitorizează prin TLC. Dacă compusul 19-10 se consumă, amestecul de reacţie se concentrează sub presiune redusă şi reziduul se purifică prin cromatografie în coloană pentru a obţine compusul 19-11.
Un amestec de compus 19-11 (267,000 g, 0,963 mol) şi Tf2O (271,468 g, 0,963 mol) în (2670,000 ml) se agită la temperatura camerei timp de 2 ore sub atmosferă de N2 . TLC a arătatcă reacţia s-aîncheiat. Amestecul de reacţie se concentrează sub presiune redusă şi reziduul se purifică prin cromatografie în coloană pentru a oferi compusul 19-12.
Un ameste de compus 19-12 (20,000 g, 0,049 mol), dppp (2,000 g), Pd(OAc)2 (2,000 g) şi TEA (9,868 g, 0,098 mol) în EtOH (400,000 ml) se agită la 80 °C timp de 12 ore sub atmosferă de CO. Reacţia se monitorizează prin TLC. Atuncicând reacţia s-a încheiat, amestecul de reacţie se concentrează sub presiune redusă şi reziduul se purifică prin cromatografie în coloană pentru a oferi compusul19-13.
La o soluţie agitată de compus 19-13 (22,000 g, 0,066 mol) în THF (300,000 ml) se adaugă lent LAH (2,507 g, 0,066 mol), între timp temperatura se menţine sub -40 °C. După adăugare, se agită amestecul la temperatura camerei timp de 2 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat şi reacţia se stinge cu H2O. Solventul se înlătură sub presiune redusă şi reziduul se separă cu diclormetan şi H2O, faza organică se usucă pe Na2SO4 anhidru, şi seevaporă. Reziduul a fost purificat prin cromatografie în coloană pentru a oferi compusul 19-14.
Se efectuează bromurarea alcoolului în mod similar ca în Exemplul 4 pentru a se obţine esterul terţ-butilic intermediar al acidului 7-Bromometil-6-metil-1,2,4,5-tetrahidro-benzo[d]azepină-3-carboxilic 19-15.
19-15
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 19-15, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 176: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 1,19 min (Metoda B2);
Compusul 184: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,24 min (Metoda B2);
Compusul 206: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 1,26 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep, 20% MeOH:EtOH:IPA (1:1:1) (0,1% Et2NH) în CO2 la 705ml/min, 130 Bar, 40°C.
Compusul 207: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 1,26 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep, 20% MeOH:EtOH:IPA (1:1:1) (0,1% Et2NH) în CO2 la 705ml/min, 130 Bar, 40°C.
Compusul 222: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,40 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep, 12% MeOH:IPA (1% Et2NH) în CO2 la 70ml/min, 105 Bar, 40°C.
Compusul 223: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 1,42 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep, 12% MeOH:IPA (1% Et2NH) în CO2 la 70ml/min, 105 Bar, 40°C.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 19-15, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 162: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,34 min (Metoda B2);
Compusul 175: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 1,31 min (Metoda B2);
Compusul 190: MS, electropulverizare, m/z = 597,2 [M+H], RT 0,63 min (Metoda B1); Compusul 196: SM, electropulverizare, m/z = 585,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1);
Compusul 203: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1)
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 20x250mm; 20%EtOH:Heptan@ 8 ml/min, temp. ambiantă
Compusul 204: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,67 min (Metoda B1)
Rezoluţie: Chirapak AD-H, 20x250mm; 20%EtOH:Heptan@ 8 ml/min, temp. ambiantă
Compusul 211: SM, electropulverizare, m/z = 613,3 [M+H], RT 1,43 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep 20% iPA+Et2NH:Heptan @ 9ml/min
Compusul 212: SM, electropulverizare, m/z = 613,3 [M+H], RT 1,43 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep 20% iPA+Et2NH:Heptan @ 9ml/min
Compusul 214: SM, electropulverizare, m/z = 611,3 [M+H], RT 1,61 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep 30% iPA:CO2, 110bar, 75ml/min, 40°C
Compusul 215: SM, electropulverizare, m/z = 611,3 [M+H], RT 1,61 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 1 Prep 30% iPA:CO2, 110bar, 75ml/min, 40°C
Compusul 225: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,41 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep 20% 1:1:1 MeOH:EtOH:iPA (0,1% Et2NH): CO2 @ 75 g/min., 110 bar, 40°C
Compusul 226: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,44 min (Metoda B2);
Rezoluţie: ESI Industries CC4 Prep 55% 1:1 hexan:MeOH (3% iPrOH, 0,1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 227: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,41 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep
20% 1:1:1 MeOH:EtOH:iPA (0,1% Et2NH) : CO2 @ 75 g/min., 110 bar, 40°C
Compusul 235: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,41 min (Metoda B2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep
20% 1:1:1 MeOH:EtOH:iPA (0,1% Et2NH) : CO2 @ 75 g/min., 110 bar, 40°C
Compusul 228: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,44 min (Metoda B2);
Rezoluţie: ESI Industries CC4 Prep 55% 1:1 hexan:MeOH (3% iPrOH, 0,1% iPrNH2):CO2 @ 80 ml/min., 100 bar, 25°C
Compusul 232: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,54 min (Metoda A2);
Rezoluţie: LUX 5u Celuloză 1 Prep 7% EtOH:Heptan @ 10ml/min
Compusul 233: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,50 min (Metoda A2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep 20% EtOH:CO2, 80ml/min, 110bar, 40°C
Compusul 235: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 1,50 min (Metoda A2);
Rezoluţie: LUX 5u Cellulose 4 Prep 20% EtOH:CO2, 80ml/min, 110bar, 40°C
Exemplul 20.
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 5-bromometil-4,7-dimetil-1,3-dihidro-izoindol-2-carboxilic (20-4)
Într-un flacon cu fund rotund de 100 ml se adaugă amină 20-1 (0,500 g, 4,13 mmol) care se dizolvă în diclormetan (15,0 ml). Amestecul de reacţie se răceşte până la 0 °C şi se adaugă trietilamină (1,15 ml, 8,25 mmol) şi BOC2O (1,35 g, 6,19 mmol). Se încălzeşte reacţia până la temperatura camerei şi se agită peste noapte. Se extrage reacţia cu diclormetan, se spală cu apă şi saramură, se usucă pe MgSO4 şi se concentrează. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani. Fracţiunile dorite se colectează şi se concentrează, ceea ce duce la obţinerea unui ulei (0,556 g).
Se adaugă prin picurare la 0 °C alcool propargilic (0,579 ml, 9,94 mmol) la o soluţie de diacetilen 20-2 (0,550 g, 2,49 mmol) în etanol anhidru (15,0 ml). Se adaugă catalizatorul Wilkinson (0,229 g, 0,249 mmol) şi amestecul se agită timp de 16 ore la temperatura camerei. Amestecul de reacţie brut se concentrează şi se supune cromatografiei pe silicagel utilizând un gradient EtOAc de 10-80% în heptani. Fracţiunile dorite se colectează şi se concentrează rezultând o substanţă solidă de culoare albuie (0,125 g).
La o soluţie de alcool 20-3 (125 mg, 0,451 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (0,118 ml, 0,676 mmol) în diclormetan (5,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (297 mg, 0,676 mmol) la 0 °C. Masa de reacţie se agită timp de 2 ore şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptani pentru a obţine produsul dorit 20-4 (35,0 mg) sub formă de solid alb.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 20-4, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 145: MS, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,75 min; Compusul 246: SM, electropulverizare, m/z = 585,0 [M+H], RT 1,40 min (Metoda B2);
Exemplul 21.
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-5,8-dimetil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (21-8).
Se dizolvă cetona 21-1 (14,00 g, 70,27 mmol) şi pirolidina (8,71 ml, 106,0 mmol) în toluen (60 ml) şi amestecul se încălzeşte la reflux în condiţii Dean Stark timp de 24 ore. Apoi amestecul de reacţie se concentrează sub vid. Se dizolvă reziduul rezultat în toluen (60 ml) şi se tratează cu 4-hexen-3-onă (8,32 ml, 70,27 mmol) şi hidrochinonă (0,080 g, 0,727 mmol). Soluţia se încălzeşte la reflux timp de 24 ore şi apoi se diluează cu EtOAc şi se spală cu HCl 1N. Straturile organice combinate se usucă şi se concentrează sub vid pentru a se obţine un ulei vâscos. Materialul se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 20-100% în heptani pentru a se obţine un solid de culoare galbenă (11,74 g).
Se adaugă prin picurare o soluţie LiHMDS 1,0 M (42,95 ml) la o soluţie de 21-2 intermediar (10,00 g, 35,79 mmol) în THF (50,0 ml) la -78 °C. Acest amestec se agită la -78 °C timp de încă 30 min. Se adaugă prin picurare TMS-Cl (5,45 ml, 42,95 mmol) şi se agită la -78 °C timp de 2 ore. Se încălzeşte amestecul de reacţie până la temperatura camerei şi se diluează cu eter dietilic (200 ml). Se adaugă acest amestec la o soluţie saturată de Na2CO3 şi fazele se separă. Straturile organice combinate se usucă şi se concentrează sub vid. Se dizolvă reziduul în ACN (50,0 ml) şi se adaugă Pd(OAc)2 (8,04 g, 35,79 mmol). Amestecul rezultat se răceşte într-o baie de apă pentru a menţine temperatura reacţiei sub 35 °C şi se agită peste noapte. Se filtrează masa de reacţie prin celită, şi filtratul se concentrează sub vid. Se prelevă reziduul în 200 ml de EtOAc, şi apoi se tratează cu soluţie TBAF 1,0 M (50,0 ml). Se agită acest amestec timp de 30 min şi apoi se spală cu HCI 1N şi soluţie de tiosulfat de sodiu de 10%. Se usucă şi se concentrează substanţele organice. Se purifică materialul prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 20-80% în heptani pentru a se obţine un solid de culoare albuie (6,11 g).
La o soluţie de material iniţial 21-3 (1,50 g, 5,41 mmol) în diclormetan (25,0 ml) la temperatura camerei se adaugă piridină (0,871 ml, 10,82 mmol). Se răceşte soluţia până la -30 °C şi se adaugă prin picurare Tf2O (1,00 ml, 5,95 mmol). Se agită amestecul de reacţie la -30 °C timp de 1 oră şi apoi se încălzeşte până la temperatura camerei. Se concentrează sub vid şi reziduul se diluează cu EtOAc, se spală cu HCl 1N, NaHCO3saturat, saramură, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează. Se purifică materialul rezultat prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani pentru a se obţine un solid de culoare albă (1,61 g).
Se combină triflatul 21-4 (1,00 g, 2,44 mmol) cu boronat (0,647 g, 2,69 mmol) şi Pd(PPh3)4 (0,144 g, 0,124 mmol) într-un amestec de DME (15,0 ml) şi Na2CO3 2,0 M (1,27 ml). Amestecul de reacţie se iradiază în MW la 120 °C timp de 40 min. Se concentrează sub N2 şi se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani. Se concentrează fracţiunile dorite pentru a se obţine un solid alb (0,662 g).
Substratul 21-5 (1,029 g, 3,58 mmol), NaIO4 (2,34 g, 10,94 mmol), 2,5% în greutate OsO4 în t-BuOH (1,0 ml), THF (12,4 ml) şi H2O (2,4 ml) se combină la temperatura camerei, apoi se agită peste noapte la întuneric. Se diluează amestecul de reacţie cu apă şi diclormetan. Se separă straturile cu o frită hidrofobă. Substanţele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează, şi se concentrează. Se purifică reziduul prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani pentru a se obţine un ulei de culoare aurie (0,786 g).
Se dizolvă aldehida 21-6 (0,785 g, 2,71 mmol) în THF (5,0 ml) şi MeOH (5,0 ml). Se răceşte amestecul până la 0 °C şi se adaugă NaBH4 (0,156 g, 4,07 mmol). Se agită amestecul de reacţie la temperatura camerei timp de 30 min. Se stinge masa de reacţie cu soluţie apoasă de NH4Cl şi se agită timp de 10 min. Se extrage cu EtOAc, se spală cu NH4Cl, saramură, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează. Materialul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani. Se colectează fracţiunile dorite pentru a se obţine produsul dorit 21-7 (0,626 g) sub formă de un solid alb.
La o soluţie de alcool 21-7 (0,300 g, 1,030 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (0,269 ml, 1,54 mmol) în diclormetan (10,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (0,679 g, 1,54 mmol) la 0 °C. Masa de reacţie se agită timp de 2 ore şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptani pentru a obţine produsul dorit 21-8 (0,338 g) sub formă de solid alb.
În mod similar, următoarele bromuri au fost preparate din materiile prime corespunzătoare conform descrierii din Exemplul 21:
21-9
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 21-8, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 120: MS, electropulverizare, m/z = 583,5 [M+H], RT 0,74 min; Compusul 178: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,64 min (Metoda B1).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 21-8, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 132: SM, electropulverizare, m/z = 597,5 [M+H], RT 0,83 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 21-9, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 154: SM, electropulverizare, m/z = 597,7 [M+H], RT 0,81 min.
Exemplul 22.
Prepararea intermediarilor esterul terţ-butilic al acidului 5-Bromometil-4-metil-1,3-dihidroizoindol-2-carboxilic (22-5) şi esterul terţ-butilic al acidului 6-Bromometil-4-metil-1,3-dihidro-izoindol-2-carboxilic (22-6)
La o soluţie agitată de Boc-amină 22-1 (2,00 g, 12,89 mmol) în THF (30,0 ml) şi iodură de tetrabutilamoniu (0,476 g, 1,29 mmol) se adaugă soluţie KHMDS 0,5 M (25,8 ml) şi amestecul se agită timp de 30 min la temperatura camerei. Se adaugă prin picurare bromura (1,69 ml, 19,33 mmol) şi se agită amestecul timp de 30 min la temperatura camerei şi apoi se încălzeşte la reflux timp de 2 ore. Amestecul de reacţie se stinge cu NH4Cl saturat şi se extrage cu EtOAc. Substanţele organice combinate se usucă cu MgSO4 şi se concentrează sub vid. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 5-40% în heptani pentru a se obţine produsul dorit (2,13 g) sub formă de ulei incolor.
Se adaugă prin picurare alcool propargilic (2,39 ml, 41,11 mmol) la 0 °C la o soluţie de diacetilen 22-2 (2,13 g, 10,28 mmol) în etanol anhidru (50,0 ml). La amestec se adaugă catalizatorul Wilkinson (0,95 g, 1,028 mmol) şi acesta se agită peste noapte la temperatura camerei. Masa de reacţie brută se concentrează sub vid şi se supune cromatografiei pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 10-80% în heptani. Se colectează fracţiunile dorite şi se concentrează pentru a se obţine ambii regioizomeri 22-3 şi 22-4 (1,93 g). Amestecul se transmite în etapa următoare.
La o soluţie de amestec de alcooli 22-3 şi 22-4 (1,93 g, 7,33 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (1,91 ml, 10,98 mmol) în diclormetan (50,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (4,73 g, 10,98 mmol) la 0 °C. Masa de reacţie se agită timp de 2 ore şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptani pentru a se obţine amestecul de regioizomeri 22-5 şi 22-6 (2,12g) sub formă de solid alb.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 22-5, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 256: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 1,13 min (Metoda A2); Compusul 257: SM, electropulverizare, m/z = 527,3 [M+H], RT 1,12 min (Metoda A2);
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 22-6, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 255: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 1,15 min (Metoda A2); Compusul 258: SM, electropulverizare, m/z = 527,3 [M+H], RT 1,16 min (Metoda A2);
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 22-5, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 119: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 1,13 min (Metoda A2); Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 22-6, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 118: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 1,11 min (Metoda A2);
Exemplul 23.
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 5-Bromometil-6-metil-1,3-dihidroizoindol-2-carboxilic (23-3).
Se adaugă prin picurare alcool (0,968 ml, 12,94 mmol) la 0 °C la o soluţie de diacetilen 23-1 (500 mg, 2,59 mmol) în etanol anhidru (12,0 ml). La amestec se adaugă catalizatorul Wilkinson (239,4 mg, 0,259 mmol) şi acesta se agită peste noapte la temperatura camerei. Masa de reacţie brută se concentrează sub vid şi se supune cromatografiei pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 10-80% în heptani. Fracţiunile dorite se colectează şi se concentrează rezultând o substanţă solidă (105 mg).
La o soluţie de alcool 23-2 (105 mg, 0,399 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (0,104 ml, 0,598 mmol) în diclormetan (7,0 ml) se adaugă dibromură de trifenilfosfină (263 mg, 0,59 mmol) la 0 °C. Masa de reacţie se agită timp de 2 ore şi se concentrează sub vid. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 7-60% în heptani pentru a obţine 23-3.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 23-3, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 143: SM, electropulverizare, m/z = 555,4 [M+H], RT 0,74 min.
Exemplul 24:
Prepararea acidului 5-etoxi-1-(6-{3-metil-2-[5-metil-2-(tetrahidro-piran-4-carbonil)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic (Compusul 147)
Se combină amina 12-48 (122 mg, 0,232 mmol) cu DMAP (2 mg, 0,02 mmol) şi DIPEA (60 µl, 0,34 mmol) în diclormetan (5 ml) la temperatura camerei. Se adaugă clorură de tetrahidro-2H-piran-4-carbonil (40 µl, 0,23 mmol), şi se agită amestecul peste noapte la temperatura camerei. Amestecul se aplică direct într-un recipient pentru probe (samplet), şi apoi se purifică prin eluţie cu diclormetan de 100% pe un cartuş HP-Sil SNAP (Biotage) de 50g. În urma concentrării sub vid se obţine esterul intermediar (31 mg), care este utilizat imediat în următoarea etapă.
Se dizolvă esterul (30 mg) în EtOH/H2O/THF (1, 0,5, 0,5 ml) şi se tratează cu LiOH (26 mg, 1,2 mmol). Se agită amestecul la 45 °C peste noapte, şi apoi se concentrează sub N2. Se purifică apoi reziduul prin eluare cu gradient (MeCN 5-95%/apă + TFA 0,1%) pe un cartuş KP-C18 SNAP (Biotage) de 12g. Produsul se concentrează sub vid pentru a se obţine Compusul 150 (26 mg).
Compusul 147: SM, electropulverizare, m/z = 611,3 [M+H], RT 1,04 min (Metoda B1)
Exemplul 25:
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-8-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (25-14)
La un amestec de 25-01 (185 g; 0,940 mol), K2CO3 (437 g, 3,17 mol) în acetonă (2 l) se adaugă MeI (424 g, 2,99 mol). Se agită amestecul la 40 °C timp de 16 ore. După filtrare, amestecul se purifică prin coloană cu silicagel (PE: EtOAc = 500: 1) pentru a oferi 1-brom-3-metoxi-5-metil-benzen, 25-02 (189 g) sub formă de ulei galben deschis.
La un amestec de 25-02 (200 g, 0,995 mol) în THF uscat (1,70 l) se adaugă prin picurare n-BuLi (438 ml; 1,09 mol) la -70 °C. După agitare timp de 1 oră la -70 °C, se adaugă prin picurare DMF uscat (76,3 g, 1,04 mol) la -70 °C şi se agită timp de 1 oră la -70 °C. Amestecul se toarnă în NH4Cl (1,00 l) şi se extrage cu EtOAc (500 ml x 3), se spală cu saramură (500 ml x 2), se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează pentru a oferi 3-metoxi-5-metil-benzaldehida, 25-03 (147 g) sub formă de ulei de culoare galbenă.
Amestecul de 25-03 (150 g, 0,999 mol) şi NH4OAc (30,8 g, 0,40 mol) în MeNO2 (1,5 l) se încălzeşte la reflux timp de 16 ore. Amestecul se concentrează, apoi se diluează cu EtOAc (1000 ml), se spală cu apă (1 l), saramură (100 ml), straturile organice se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Amestecul se triturează cu PE: EtOAc = 10: 1 timp de 10 minute, se filtrează pentru a se obţine1-Metoxi-3-metil-5-((E)-2-nitro-vinil)-benzen, 25-04 (80 g) sub formă de solid de culoare galbenă.
La un amestec de LiAlH4 (78,6 g, 2,00 mol) în THF uscat (1 l) se adaugă 25-04 (78 g, 0,404 mol) în porţii la 0 °C în THF (200 ml) şi se agită timp de 16 ore la 70 °C. Amestecul se răceşte până la 0 °C, se stinge lent cu apă (78 ml), NaOH 15% (78 ml) şi apă (235 ml). După filtrare, amestecul se concentrează pentru a se obţine 2-(3-Metoxi-5-metil-fenil)-etilamină, 25-05 (40 g) sub formă de ulei de culoare galben deschis.
Amestecul de compus 25-05 (66 g, 0,40 mol) şi acid formic (73,5 g, 1,60 mol) în dioxan (600 ml) se agită timp de 16 ore la 90 °C. Amestecul a fost concentrat pentru a se obţine N-[2-(3-metoxi-5-metil-fenil)-etil]-formamidă, 25-06 (77 g) sub formă de solid galben.
La o soluţie de 25-06 (76,0 g, 0,354 mol) în diclormetan (2,5 l) se adaugă POCl3 (155 g, 1,01 mol) la 15 °C şi se încălzeşte la reflux timp de 3 ore. Soluţia se concentrează, la reziduu se adaugă apă (1,5 l), toluen (1,5 l) şi NaOH 20% (500 ml), apoi se încălzeşte la reflux timp de 1 oră şi se răceşte. Amestecul se diluează cu EtOAc (500 ml x 3), se spală cu apă (1 l x 2), saramură (100 ml x 2), straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Acesta se purifică prin coloană cu silicagel (PE: EtOAc = 10: 1) pentru a se obţine 6-metoxi-8-metil-3,4-dihidro-izochinolină, 25-07 (58,5 g) sub formă de ulei de culoare brună.
La o soluţie de 25-07 (58,5 g, 0,334 mol) în MeOH (500 ml) se adaugă NaBH4 (63,3 g, 1,67 mol) la 0 °C şi amestecul se menţine la 0 °C timp de 4 ore. Soluţia se stinge cu HCl 1N (100 ml), pH-ul se ajustează la 8 prin adăugarea a NaHCO3, se extrage cu diclormetan (300 ml x 2), straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează pentru a se obţine 6-metoxi-8-metil-3,4-dihidro-izochinolin, 25-08 (83 g, brut) sub formă de ulei de culoare brună.
O soluţie de 25-08 brut (83 g, 0,47 mol) în HBr (40% în apă, 500 ml) se încălzeşte până la 90 °C timp de 12 ore. Soluţia se evaporă sub presiune redusă pentru a se obţine hidrobromura 8-metil-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ol, 25-09. La acest reziduu brut se adaugă Boc2O (72 g, 0,33 mol) şi trietilamină (63 g, 0,62 mol) şi amestecul rezultat se agită timp de 12 ore la 15 °C, apoi se diluează cu diclormetan (1500 ml) şi apă (100 ml ). Stratul organic se spală cu HCl 0,5 N (100 ml) şi saramură (100 ml), se usucă, se concentrează, şi se purifică prin coloană cu silicagel (PE: EtOAc = 30: 1) pentru a se obţine esterul terţ-butilic al acidului 6-hidroxi-8-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic, 25-10 (33,4 g) sub formă de solid de culoare albă.
La o soluţie de 25-10 (33 g; 0,113 mol) şi piridină (20,1 g, 0,254 mol) în diclormetan uscat (300 ml) se adaugă Tf2O (39,4 g, 0,139 mol) prin picurare la -30 °C şi se agită timp de 1 oră la -30 °C. Apoi soluţia se încălzeşte până la 15 °C şi se agită timp de 8 ore. Amestecul se diluează cu diclormetan (500 ml) şi apă (100 ml), şi straturile organice combinate se concentrează şi apoi se purifică prin coloană cu silicagel (PE: EtOAc =50: 1) pentru a se obţine esterul terţ-butilic al acidului 8-metil-6-trifluorometansulfoniloxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic, 25-11 (43 g) sub formă de solid de culoare albă.
O soluţie de 25-11 (43 g, 0,109 mol), Et3N (33,0 g, 0,327 mol), DPPP (4,53 g) şi Pd(OAc)2 (5 g) în MeOH (500 ml) se agită sub presiune de 3 MPa de CO la 90 °C timp de 2 zile. După filtrare şi concentrare reziduul se purifică prin cromatografie pe silicagel (PE: EtOAc =50: 1) pentru a se obţine esterul 2-terţ-butil ester 6-metil al acidului 8-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,6-dicarboxilic, 25-12 (21 g) sub formă de ulei incolor.
La o soluţie de 25-12 (21 g, 0,693 mol) în THF uscat (500 ml) se adaugă LiAlH4 (7,4 g, 208 mmol) la -50 °C. Se agită amestecul la -50 °C timp de 1 oră, şi apoi la 0°C timp de 30 min. Masa de reacţie se stinge lent cu H2O (7,4 ml), NaOH 15% (7,4 ml), şi H2O (22,2 ml) şi apoi se filtrează. Filtratul se concentrează şi se purifică prin prep-HPLC şi se concentrează. Se extrage reziduul cu diclormetan (1 l x 2), straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează pentru a se obţine esterul terţ-butilic al acidului 6-hidroximetil-8-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic, 25-13 (14,8 g) sub formă de ulei incolor.
La o soluţie de 25-13 (13,4 g, 0,485 mol) şi DIEA (11,8 ml, 0,679 mol) în diclormetan (200 ml) la -30 °C se adaugă dibromură de trifenilfosfină (26,6 g, 0,606 mol). Amestecul rezultat se agită timp de 1 oră, în timp ce baia rece se lasă să se încălzească până la -10 °C. Substanţele volatile sunt îndepărtate din amestecul de -10 °C, reziduul se pune în suspensie în diclormetan (50 ml), iar filtratul se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 5-40% în heptan) pentru a se obţine intermediarul dorit 25-14 (16,2 g) sub formă de solid alb.
În mod similar, următoarele bromuri au fost preparate din materiile prime corespunzătoare conform descrierii din Exemplul 25:
25-15
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 1-6, bromură, 25-14, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 161: SM, electropulverizare, m/z = 597,3 [M+H], RT 0,75 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 25-14, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 171: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,68 min;
Compusul 186: SM, electropulverizare, m/z = 541,3 [M+H], RT 0,60 min;
Compusul 237: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,60 min;
Compusul 239: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,60 min;
Compusul 240: SM, electropulverizare, m/z = 585,2 [M+H], RT 0,60 min;
Compusul 242: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,59 min;
Compusul 244: SM, electropulverizare, m/z = 557,3 [M+H], RT 0,62 min.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 25-14, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 169: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,73 min;
Compusul 173: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,74 min;
Compusul 174: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 0,72 min;
Compusul 195: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,71 min;
Rezoluţie: Coloană CI 15% 1:1:1MeOH:EtOH:iPA + dietilamină:CO2, 3 ml/min, 40°C, 200bar
Compusul 197: SM, electropulverizare, m/z = 583,4 [M+H], RT 0,71 min;
Rezoluţie: Coloană CI 15% 1:1:1MeOH:EtOH:iPA + dietilamină:CO2, 3 ml/min, 40°C, 200bar
Compusul 200: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 0,63 min (Metoda B1);
Compusul 210: SM, electropulverizare, m/z = 571,1 [M+H], RT 0,70 min (Metoda B1);
Compusul 241: SM, electropulverizare, m/z = 569,3 [M+H], RT 0,62 min;
Compusul 243: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,63 min;
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 25-15, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 121: SM, electropulverizare, m/z = 569,4 [M+H], RT 0,72 min.
Exemplul 26:
Prepararea esterului terţ-butilic intermediar al acidului 6-bromometil-8-metil-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic (26-12).
Într-un balon cu fund rotund se încarcă ester metilic al acidului 2-hidroxi-4-iodo-benzoic, 26-01 (12,0 g, 43,2 mmol), complexul 2,4,6-trivinil-ciclotriboroxan-piridină (11,4 g, 47,5 mmol), paladiu tetrakis(trifenilfosfină) (2,49 g, 2,16 mmol), soluţie apoasă 2,0 M de carbonat de sodiu (25,9 ml, 51,7 mmol), şi 1,2-dimetoxietan (50 ml), deoxigenat prin alternarea între vid şi argon (3x), şi se încălzeşte la reflux sub presiune de argon timp de 3 ore, şi apoi se agită 18 ore la temperatura ambiantă. Substanţele volatile se îndepărtează sub vid, reziduul se pune în suspensie în HCl 1N (800 ml) şi se extrage cu EtOAc (600 ml, 300 ml, şi apoi 300 ml). Extractele organice combinate se spală cu saramură, se usucă pe NaSO4, şi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 5-30% în heptan) pentru a se obţine acidul 2-hidroxi-4-vinil-benzoic, 26-02 (3,70 g) şi esterul metilic al acidului 2-hidroxi-4-vinil-benzoic (0,300 g).
La o soluţie de 26-02 (3,70 g, 22,0 mmol) şi ester metilic al acidului 2-hidroxi-4-vinil-benzoic (0,300 g, 1,69 mmol) în MeOH (50 ml) se adaugă H2SO4 (4,0 ml, 75 mmol). Amestecul rezultat se încălzeşte la reflux timp de 16 ore, şi apoi se lasă să se răcească până la temperatura camerei. Se adaugă gheaţă (100 g) şi amestecul se agită. După ce gheaţa se topeşte complet, se înlătură MeOH sub presiune redusă şi reziduul apos se extrage cu DCM (2x 100 ml). Extractele organice combinate se combină, se concentrează sub vid şi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 0-5% în heptan) pentru a se obţine ester metilic al acidului 2-hidroxi-4-vinil-benzoic, 26-03 (3,75 g) sub formă de ulei limpede.
La un amestec sub agitare de 26-03 (3,75 g, 21 mmol) şi metaperiodat de sodiu (13,8 g, 64,3 mmol) în THF (80 ml) şi apă (20 ml) se adaugă o soluţie de 4% în greutate de tetraoxid de osmiu în apă (3,69 ml, 0,47 mmol). Balonul cu masa de reacţie (care se încălzeşte după adăugarea reactivului osmiu) se înveleşte în folie de aluminiu pentru a proteja conţinutul de lumină, iar suspensia se agită 16 ore. Substanţele volatile se îndepărtează sub presiune redusă, reziduul se diluează cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 (700 ml) şi se extrage cu EtOAc (700 ml, 200 ml, şi apoi 200 ml). Extractele organice combinate se concentrează sub vid şi apoi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 0-50% în heptan) pentru a se obţine esterul metilic al acidului 4-formil-2-hidroxi-benzoic, 26-04 (2,25 g) sub formă de solid galben.
Într-un balon cu fund rotund cu ajutaj Dean Stark ataşat, 26-04 (2,25g, 12 mmol) şi dimetilacetal de aminoacetaldehidă (1,31 g, 12 mmol) se încălzeşte la reflux în toluen timp de 3 ore. Amestecul de reacţie se concentrează sub vid, obţinându-se esterul metilic brut al acidului 4-{[2,2-dimetoxi-etilimino]-metil}-2-hidroxi-benzoic, 26-05 (3,33 g, 12,4 mmol) sub formă de ulei de culoare brună. La acest ulei brut se adaugă o bară mare de agitare, acid polifosforic (25,0 g), şi pentoxid de fosfor (33,0 g, 232 mmol). Gudronul vâscos rezultat se agită la 80 °C timp de 5 ore. Amestecul de reacţie se diluează cu H2O (600 ml), se transferă într-un balon Erlenmeyer de 5 l, şi amestecul agitat puternic se tratează atent cu porţiuni mici de NaHCO3 solid până când substanţele adăugate sus-menţionate nu provoacă formarea spumei în amestecul receptor. Amestecul bazic apos se extrage apoi cu DCM (5 x 200 ml). Extractele organice combinate se spală cu H2O (2 x 50 ml), se usucă cu Na2SO4, se concentrează sub vid şi apoi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 0-100% în heptan) pentru a se obţine esterul metilic al acidului 5-hidroxi-izochinolin-6-carboxilic, 26-06 (0,520 g).
26-06 (0,520 g, 2,46 mmol) se dizolvă în MeOH (15 ml) şi apoi se adaugă HCl 4N în dioxan (6,15 ml, 24 mmol). Se hidrogenează cu un aparat H-Cube prin ciclizarea continuă a soluţiei printr-un cartuş PtO2 la o viteză de 1 ml/minut sub presiune H2 de 10 mbar timp de 5 ore, apoi sub presiune H2 de 50 mbar timp de 15 ore. Amestecul de reacţie se concentrează sub presiune redusă pentru a se obţine esterul metilic brut al acidului 5-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-carboxilic; hidroclorura, 26-07 (0,90 g) sub formă de solid de culoare roşie. Acest solid brut se dizolvă în DCM (30 ml) şi se răceşte până la 0 °C înainte de adăugarea trietilaminei (1,65 ml, 11 mmol) şi apoi di-terţ-butil dicarbonatului (1,70 ml, 7,39 mmol). Amestecul de reacţie se îndepărtează din baie rece, se agită 16 ore, se concentrează sub presiune redusă şi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 0-50% în heptan). Intermediarul dorit esterul 2-terţ-butil ester 6-metil al acidului 5-hidroxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,6-dicarboxilic 26-08 (0,492 g) co-eluează cu di-terţ-butil dicarbonatul (1,61 g). Se dizolvă amestecul (2,1 g) în MeOH (50 ml), se adaugă K2CO3 (2,21 g, 16 mmol) şi amestecul rezultat se agită 16 ore. Se înlătură supernatantul din balonul cu masa de reacţie şi sedimentul se triturează cu MeOH (2 x 10 ml). Supernatanţii metanolici combinaţi se concentrează sub presiune redusă, se dizolvă în EtOAc (50 ml), se spală cu HCl 1N (3 x 30 ml), saramură (10 ml), se usucă cu Na2SO4, şi se concentrează sub vid pentru a obţine 26-08 (0,422 g). Acest reziduu se combină cu iodometan (1,0 ml, 16 mmol), K2CO3 (0,20 g, 1,5 mmol), Cs2CO3 (0,40 g, 1,5 mmol), şi acetonă (4,0 ml) şi se iradiază în microunde la temperatura de 70 °C timp de 7 ore. Amestecul se concentrează sub presiune redusă şi se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 0-100%) pentru a produce esterul 2-terţ-butilic ester 6-metil al acidului 5-metoxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,6-dicarboxilic impur, 26-09 (0,245 g), care a fost transmis mai departe aşa cum este.
26-09 impur (0,240 g, 0,51 mmol) se combină cu hidroxid de litiu (1,22 g, 5,1 mmol) în THF (4,0 ml), MeOH (4,0 ml) şi apă (2,0 ml). Amestecul se încălzeşte 45 de minute la 55 °C şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul se dizolvă în EtOAc (20 ml), se spală cu HCl 1N (3 x 50 ml), saramură (10 ml), se usucă cu Na2SO4, şi se concentrează sub vid pentru a obţine esterul 2-terţ-butilic al acidului 5-metoxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2,6-dicarboxilic, 26-10 (0,177 g) sub formă de solid alb.
La o soluţie de 26-10 brut (0,177 g, 0,58 mmol) în THF (3 ml) se adaugă boran 1M în soluţie de THF (1,27 ml, 1,27 mmol) şi amestecul rezultat se agită timp de 18 ore. Amestecul de reacţie se concentrează sub vid şi se purifică prin cromatografie în fază inversă (silicagel C18, MeCN 5-95%, în H2O cu TFA 0,1%) pentru a obţine esterul terţ-butilic al acidului 6-hidroximetil-5-metoxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin -2-carboxilic, 26-11 (0,125 g) sub formă de reziduu limpede, incolor.
26-11 (0,125 g, 0,43 mmol) şi N,N-diizopropiletilamină (0,111 ml, 0,64 mmol) se dizolvă în DCM (4,0 ml), amestecul rezultat se dezoxigenează prin alternarea între argon şi vid (3x), şi apoi se răceşte până la -30 °C. Se adaugă dibromură de trifenilfosfină (0,262 g, 0,60 mmol) şi amestecul rezultat se agită timp de 3 ore, pe măsură ce baia rece se încălzeşte până la -15 °C. Amestecul de reacţie se concentrează sub presiune redusă şi reziduul se purifică prin cromatografie (silicagel, EtOAc 5-50% în heptan) pentru a produce esterul terţ-butilic intermediar dorit al acidului 6-bromometil-5-metoxi-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carboxilic, 26-12 (0,103 g).
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 3-15, bromură, 26-12, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 220: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,71 min;
Compusul 221: SM, electropulverizare, m/z = 571,3 [M+H], RT 0,71 min;
Exemplul 27:
Acidul 5-metoxi-1-(6-{3-metil-2-[5-metil-1-oxo-2-(tetrahidro-piran-4-il)-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi]-fenil}-piridin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxilic
La o suspensie de compus 27 (0,065 g, 0,11 mmol) într-un amestec 4:1 de 1,1,2,2,-tetracloretan:apă (1,2 ml) se adaugă clorit de sodiu (0,035 g, 0,39 mmol). Amestecul se încălzeşte la 55 °C timp de 2 ore, apoi se răceşte până la temperatura camerei şi se purifică prin cromatografie flash cu fază inversă C18 pentru a obţine compusul din titlu (0,009 g).
Compusul 167: SM, electropulverizare, m/z = 584,8 [M+H], RT 1,01 min.
Se prepară următorul compus conform procedurii de mai sus folosind Compusul 114 în calitate de materii prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 194: SM, electropulverizare, m/z = 597,22 [M+H], RT 1,02 min.
Exemplul 28:
Prepararea acidului 1-{6-[2-(2-(S)-1-[1,4]Dioxan-2-ilmetil-5-metil-1,2,3,4-tetrahidro-izochinolin-6-ilmetoxi)-3-metil-fenil]-piridin-2-il}-5-etoxi-1H-pirazol-4-carboxilic
Se dizolvă amina 8-42 (80,0 mg, 0,152 mmol) în acetonitril (3,0 ml) şi se adaugă clorură (16,87 mg, 0,182 mmol) şi Cs2CO3 (51,5 mg, 0,243 mmol). Se încălzeşte masa de reacţie până la 60 °C şi se agită peste noapte. LC-MS a indicat masa dorită. Se extrage masa de reacţie cu acetat de etil, se spală cu saramură, se usucă pe MgSO4, şi se concentrează. Reziduul rezultat se supune cromatografiei pe silicagel folosind un gradient EtOAc de 12-100% în heptani. Fracţiunile dorite se colectează şi se concentrează pentru a obţine produsul (43,0 mg).
La o soluţie de epoxid 28-1 (43,0 mg, 0,074 mmol) şi DCE (2,0 ml) se adaugă 2-cloroetanol (0,005 ml, 0,081 mmol), apoi o soluţie de BF3Et2O (0,01 ml) în DCE. Se agită masa de reacţie la 45 °C peste noapte. Se răceşte amestecul de reacţie până la temperatura camerei şi se concentrează. Materialul rezultat se transmite în stare brută în etapa următoare.
La materialul iniţial se adaugă 28-2 (40,0 mg) se adaugă o soluţie de NaOH 2,0 M (2,0 ml). Această soluţie se încălzeşte până la 90 °C şi devine omogenă. Se agită timp de 2 ore şi masa de reacţie se răceşte până la temperatura camerei. Se supune unei coloane C18 (ACN 20-80% în apă cu TFA 0,1%). Fracţiunile dorite se colectează şi se concentrează pentru a obţine compusul dorit 18 (19,1 mg).
Compusul 185: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,75 min Metoda B1.
Se prepară următorul compus conform procedurii descrise în Exemplul 28, folosind materiile prime şi condiţiile de purificare corespunzătoare:
Compusul 170: SM, electropulverizare, m/z = 599,3 [M+H], RT 0,63 min Metoda B1.
Exemplul 29:
Terţ-butil 8-etil-6(hidroximetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-carboxilat (29-13)
La amestecul de compus 29-1 (300 g, 1,6 mol) şi K2CO3 (665 g, 4,8 mol) în DMF (2000 ml) s-a adăugat MeI(250 g, 1,8 mol) prin picurare la temperatura camerei. Amestecul a fost agitat peste noapte. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat, evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-2 (165 g, randament 52%).
Soluţia de compus 29-2 (100 g, 497,4 mmol), NBS (88,5 g, 497,4 mmol) şi AIBN (10 g, 10%) în CCl4 (700 ml) s-a încălzit la reflux timp de 12 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. După ce s-a răcit până la temperatura camerei, reacţia s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-3 (48 g, randament 42%).
Soluţia de compus 29-3 (80 g, 285,7 mmol) şi TMSCN (28,2 g, 285,7 mmol) în ACN (600 ml) a fost agitată la temperatura camerei timp de 0,5 ore. TBAF (74,6 g, 285,7 mmol) s-a adăugat în amestecul de reacţie pe bază de gheaţă şi amestecul s-a agitat timp de 12 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-4 (39 g, randament 60%).
Soluţia de compus 29-4 (12 g, 53,1 mmol) şi Ni (10 g) în MeOH (80 ml) şi NH3.H2O (80 ml) s-a agitat sub H2 cu presiune de 50 psi la temperatura camerei timp de 5 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Amestecul s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat cu o pompă de vid pentru a se obţine produsul brut (8 g), care s-a utilizat direct în următoarea etapă.
Soluţia de compus 29-5 (75 g, 326,08 mmol) şi HCHO (8.8 g, 293,47 mmol) în HCO2H (500 ml) s-a agitat la 50 °C sub N2 peste noapte. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Solventul a fost înlăturat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-6 (54 g, randament 64% în 2 etape).
Soluţia de compus 29-6 (45 g, 186 mmol) în soluţie apoasă de HBr (400 ml) s-a agitat la 90 °C timp de 12 ore. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Solventul a fost înlăturat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-7 (20,75 g, randament 53%).
Soluţia de compus 29-7 (20 g, 87,7 mmol), Boc2O (19,1 g, 87,7 mmol) şi TEA (17,7 g, 175,4 mmol) în THF/H2O (1:1) (200 ml) s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-8 (20 g, randament 70%).
Soluţia de compus 29-8 (14 g, 42,7 mmol), K2CO3 (17,66 g, 128 mmol), Pd(dppf)Cl2 (2,5 g), Pd (PPh3)4 (2,5 g), şi compus 29-8B (7,22 g, 46,9 mmol) în DMF (150 ml) s-a agitat la reflux peste noapte. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. După filtrare, filtratul a fost concentrat sub presiune redusă şi reziduula fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-9 (7,2 g, randament 61%).
Soluţia de compus 29-9 (7,2 g, 26,2 mmol) şi Pd-C (2 g) în MeOH (100 ml) s-a agitat sub H2 cu o presiune de 50 psi la temperatura camerei timp de12 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Amestecul a fost filtrat şi filtratul a fost concentrat pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a oferi compusul 29-10 (5,8g, randament 80%).
Soluţia de compus 29-10 (5,8 g, 20,9 mmol), Tf2O (5,9 g, 20,9 mmol) şi TEA (6,3 g, 62,7 mmol) în DCM (70 ml) s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-11(7 g, randament 82%).
Un amestec de compus 29-11 (7 g, 17,1 mmol), Pd(OAc)2 (1,4 g), dppp (1,4 g) şi Et3N (5,2 g, 51,3 mmol) în MeOH (80 ml) s-a agitat la 80 °C sub CO cu o presiune de 3 MPa timp de 2 zile. Substanţa solidă s-a filtat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-12 (4,8 g, randament 88%).
La o soluţie de LiAlH4 (1,1 g, 30,1 mmol) în THF (10 ml) s-a adăugat prin picurare soluţia de compus 29-12 (4,8 g, 15,0 mmol) în THF (50 ml) la -50 °C timp de 30 min. După adăugare, amestecul de reacţie s-a agitat la 0 °C timp de 2,5 ore. Apoi amestecul de reacţie a fost tratat cu H2O şi DCM. Stratul organic s-a separat, spălat cu saramură, uscat pe Na2SO4, filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 29-13 (4,1 g, randament 92%).
În mod similar, bromura a fost preparată din 29-13 conform descrierii din Exemplul 25 producând compusul 29-14.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 29-14, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 248: SM, electropulverizare, m/z = 583,3 [M+H], RT 1,29 min (Metoda A2);
Compusul 249: SM, electropulverizare, m/z = 555,3 [M+H], RT 1,37 min (Metoda A2);
Exemplul 30:
Terţ-butil 8-ciano-6-(hidroximetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-carboxilat (30-12)
La amestecul de compus 30-1 (300 g, 1,6 mol) şi K2CO3 (665 g, 4,8 mol) în DMF (2000 ml) s-a adăugat MeI (250 g, 1,8 mol) prin picurare la temperatura camerei. Amestecul a fost agitat peste noapte. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat, evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-2 (165 g, randament 52%).
Soluţia de compus 30-2 (100 g, 497,4 mmol), NBS (88,5 g, 497,4 mmol) şi AIBN (10 g, 10%) în CCl4 (700 ml) s-a încălzit la reflux timp de 12 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. După ce s-a răcit până la temperatura camerei, reacţia s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-3 (48 g, randament 42%).
Soluţia de compus 30-3 (80 g, 285,7 mmol) şi TMSCN (28,2 g, 285,7 mmol) în ACN (600 ml) s-a agitat la temperatura camerei timp de 0,5 ore. TBAF (74,6 g, 285,7 mmol) s-a adăugat la amestecul de reacţie pe bază de gheaţă şi amestecul s-a agitat timp de 12 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-4 (39 g, randament 60%).
Soluţia de compus 30-4 (12 g, 53,1 mmol) şi Ni (10 g) în MeOH (80 ml) şi NH3.H2O (80 ml) s-a agitat sub H2 cu o presiune de 50 psi la temperatura camerei timp de 5 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Amestecul s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat cu o pompă de vid pentru a se obţine produsul brut (8 g), care s-a utilizat direct în următoarea etapă.
Soluţia de compus 30-5 (75 g, 326,08 mmol) şi HCHO (8.8 g, 293,47 mmol) în HCO2H (500 ml) s-a agitat la 50 °C sub N2 peste noapte. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Solventul a fost înlăturat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-6 (54 g, randament 64% în 2 etape).
Soluţia de compus 30-6 (45 g, 186 mmol) în soluţie apoasă de HBr (400 ml) s-a agitat la 90 °C timp de 12 ore. LCMS a arătat că reacţia s-a încheiat. Solventul a fost înlăturat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-7 (20,75 g, randament 53%).
Soluţia de compus 30-7 (20 g, 87,7 mmol), Boc2O (19,1 g, 87,7 mmol) şi TEA (17,7 g, 175,4 mmol) în THF/H2O (1:1) (200 ml) s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-8 (20 g, randament 70%).
O soluţie de compus 30-8 (11 g, 34,8 mmol), Pd(dppf)Cl2 (2,5 g), Pd (PPh3)4 (2,5 g), ZnCN (2.8 g, 31,3 mmol), Zn (1,1 g, 17,4 mmol) în DMF (110 ml) s-a agitat la reflux peste noapte. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. După filtrare, filtratul a fost concentrat sub presiune redusă şi reziduula fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-9 (6,5 g, randament 71%).
Soluţia de compus 30-9(12 g, 43,7 mmol), Tf2O (12,3 g, 43,7 mmol) şi TEA (13,3 g, 131,23 mmol) în DCM (120 ml) s-a agitat la temperatura camerei timp de 3 ore. TLC a arătat că reacţia s-a încheiat. Masa de reacţie s-a stins cu H2O şi s-a extras cu EtOAc. Stratul organic a fost uscat, filtrat şi evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine produsul brut, care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-10 (9 g, randament 51%).
Un amestec de compus 30-10 (9,5 g, 23,4 mmol), Pd(OAc)2 (1,9 g), dppp (1,9 g) şi Et3N (7,1 g, 70,1 mmol) în MeOH (90 ml) s-a agitat la 80 °C sub CO cuo presiune de 3 MPa timp de 2 zile. Substanţa solidă s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-11 (6 g, randament 80%).
La o soluţie de LiAlH4 (1,4 g, 37,9 mmol) în THF (10 ml) s-a adăugat prin picurare soluţia de compus 30-11 (6 g, 19,0 mmol) în THF (50 ml) la -50 °C timp de 30 min. După adăugare, amestecul de reacţie s-a agitat la -20 °C timp de 4,5 ore. Apoi amestecul de reacţie a fost tratat cu H2O şi DCM. Stratul organic s-a separat, spălat cu saramură, uscat pe Na2SO4, filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie pe silicagel pentru a se obţine compusul 30-12 (4,1 g, randament 74%).
În mod similar, bromura a fost preparată din 30-12 conform descrierii din Exemplul 25 producând compusul 30-13.
Se prepară următorul compus din Tabelul 1 conform procedurii descrise în Exemplul 7a, folosind fenol, 2-8, bromură, 30-13, şi alte materii prime şi condiţii de purificare corespunzătoare:
Compusul 250: SM, electropulverizare, m/z = 580,2 [M+H], RT 0,61 min.
EVALUAREA ACTIVITĂŢII BIOLOGICE
Analiza celulară
Analiza celulară a activatorului GCs se efectuează în prezenţa şi absenţa serului uman (SU) de 50% folosind celule ovariene de hamster chinezesc, care au fost transfectate stabil pentru a exprima subunităţile alfa 1 şi beta 1 de guanilat ciclază solubile umane (sGC). Celulele se incubează preliminar cu 40 microM 1H-1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]chinoxalin-1-onă (ODQ), un inhibitor al sGC, timp de o oră în soluţie tampon conţinând albumină din ser bovin 0,1% şi 3-izobutil-1-metilxantină (IBMX). Se prepară curbele concentraţie-răspuns pentru compuşii de testare în DMSO. Se efectuează o diluare intermediară a compuşilor în soluţie tampon conţinând IBMX sau ser uman de tip AB conţinând IBMX. Se adaugă compuşii diluaţi la celule şi se incubează la temperatura camerei timp de treizeci de minute. Se măsoară GMPc cu ajutorul unui kit de fluorescenţă omogenă descompusă în timp CisBio şi se calculează CE50 pentru fiecare compus.
În analiza menţionată a fost testată activitatea compuşilor tipici propuşi în prezenta invenţie. Compuşii preferaţi au o valoare CE50 <1000 nM în analiza menţionată şi compuşii mai preferaţi au o valoare EC50 < 200 nM. Ca exemple, în Tabelul 2 sunt prezentate date pentru compuşii tipici din Tabelul 1.
Tabelul 2
Numărul compusului CE50 (nM) Numărul compusului CE50 (nM) 1 39 130 21 2 11 131 410 3 29 132 11 4 11 133 27 5 9. 134 46 6 87 135 54 7 32 136 81 8 42 137 89 9 59 138 54 10 16 139 8,4 11 17 140 15 12 26 141 17 13 180 142 62 14 18 143 160 15 28 144 460 16 23 145 13 17 18 146 23 18 8 147 450 19 17 148 43 20 24 149 44 21 17 150 91 22 14 151 130 23 52 152 14 24 54 153 26 25 16 154 28 26 5 155 86 27 14 156 720 28 13 157 25 29 3,5 158 30 30 10 159 53 31 19 160 110 32 170 161 14 33 97 162 23 34 65 163 55 35 29 164 32 36 27 165 11 37 120 166 6,6 38 66 167 30 39 17 168 580 40 62 169 13 41 27 170 28 42 24 171 16 43 130 172 50 44 44 173 13 45 26 174 14 46 38 175 40 47 22 176 9,7 48 10 177 35 49 54 178 14 50 990 179 59 51 72 180 28 52 170 181 62 53 110 182 370 54 110 183 980 55 110 184 12 56 820 185 30 57 24 186 16 58 82 187 14 59 31 188 8,6 60 -- 189 12 61 59 190 23 62 24 191 3,3 63 82 192 10 64 71 193 12 65 56 194 87 66 110 195 4,7 67 320 196 13 68 38 197 19 69 61 198 5,3 70 180 199 9 71 67 200 20 72 17 201 12 73 250 202 12 74 73 203 4,4 75 23 204 4,5 76 160 205 13 77 31 206 7,4 78 48 207 9,2 79 33 208 20 80 45 209 200 81 410 210 19 82 8 211 30 83 29 212 36 84 9 213 39 85 22 214 30 86 41 215 37 87 55 216 110 88 28 217 35 89 150 218 62 90 69 219 140 91 75 220 150 92 20 221 210 93 37 222 5,4 94 45 223 8,5 95 54 224 79 96 24 225 10 97 67 226 12 98 270 227 13 99 160 228 14 100 170 229 3,9 101 110 230 13 102 110 231 4,6 103 110 232 9,5 104 31 233 11 105 17 234 13 106 27 235 20 107 23 236 28 108 24 237 4,9 109 34 238 5,1 110 45 239 6,5 111 99 240 7,9 112 110 241 8 113 24 242 11 114 40 243 16 115 68 244 23 116 28 245 280 117 29 246 6,5 118 39 247 8,6 119 57 248 4,2 120 12 249 4,6 121 40 250 44 122 23 251 7 123 55 252 10 124 47 253 13 125 27 254 25 126 58 255 9,5 127 7,5 256 14 128 15 257 14 129 17 258 15
EVALUAREA SOLUBILITĂŢII
Solubilitatea se măsoară prin următoarea metodă.
1. Prepararea probei:
Se prepară o soluţie mamă de 100 ul, DMSO 10 mM de fiecare compus pe o placă cu 96 de godeuri. Experimentul se realizează la 3 valori ale pH-ului (2,2, 4,5 şi 6,8) cu determinare separată. Pentru fiecare pH şi o referinţă, este necesar 40 ul de fiecare compus.
Prepararea soluţiei tampon:
McIlvaine pH 2,2: La 2,076 g de monohidrat de acid citric şi 0,043 g Na2HPO4 x 2H2O se adaugă 100 ml de apă deionizată.
McIlvaine pH 4,5: La 1,166 g de monohidrat de acid citric şi 1,585 g Na2HPO4 x 2H2O se adaugă 100 ml de apă deionizată.
McIlvaine pH 6,8: La 0,476 g de monohidrat de acid citric şi 2,753 g Na2HPO4 x 2H2O se adaugă 100 ml de apă deionizată.
Cu ajutorul unui dispozitiv adecvat de manipulare a lichidelor (Multipette® sau un manipulator de lichide) se adaugă 390 ul de fiecare soluţie tampon şi 10 ul de compus în fiecare godeu al unei plăci cu 96 de godeuri adânci. Plăcile sunt acoperite ferm şi agitate timp de 24 de ore într-un agitator (la 54 RPM) la temperatura camerei. Conţinutul de DMSO în soluţia tampon finală este de 2,5% v/v.
După 24 ore plăcile se centrifughează pentru a înlătura picăturile de pe capac înainte de deschidere (timp de ~5 min la 2500 RPM).
Filtrarea se face sub vid cu placă de filtrare cu 96 de godeuri Millipore. Filtratul se colectează pe o placă cu godeuri adânci şi se transferă pe o placă adecvată pentru efectuarea analizei UPLC.
Placa de referinţă se prepară prin adăugarea a 10 ul de compus la 390 ul de acetonitril/apă 50:50 pe o placă cu 96 de godeuri adânci şi se transferă pe o placă adecvată pentru efectuarea analizei UPLC. Se verifică vizual godeurile privind existenţa precipitării, se notează comentariile privind orice prezenţă în rezultatele raportate.
2. Măsurarea probelor
Probele se măsoară cu UPLC-UV folosind metoda cromatografică descrisă mai jos.
faza staţionară Waters ACQUITY UPLC® BEH C18 1,7 µm 2,5x50 mm faza mobilă solventul A acid formic 0,1 % (pH 3) solventul B acetonitril cu acid formic 0,1 % Gradient 0 min 5 % B 1,0 min 95 % B 1,3 min 95 % B 1,4 min 5 % B 1,7 min 5 % B temperatura coloanei 40°C Debitul 0,8 ml/min durata/perioada ciclului 1,7 min/2,7 min volumul de injectare 2 µl temperatura probelor 20 °C Detectarea cu matrice de fotodiode (PDA) Activarea datelor 3D lungimea de undă 254 nm rata de prelevare 40 puncte/sec rezoluţia 4,8 nm
Software-ul Waters Empower®2 este utilizat pentru generarea seturilor de probe (conform schemei plăcii), metodelor seturilor de probe şi metodelor pentru instrumente.
Un Set de probe cuprinde metodele pentru trei plăci cu 96 godeuri (o placă de referinţă şi două plăci cu probe, şi include o metodă a setului de probe şi o metodă pentru instrumente).
3. Procesarea şi analiza datelor
Cromatogramele UV colectate la 254 nm se integrează şi prelucrează.
Se presupune că compusul este dizolvat complet în soluţia de referinţă (acetonitril/apă 50:50)
Datele privind solubilitatea (µg/ml) pentru compuşii din Tabelul 1 sunt prezentate în Tabelul 3 de mai jos.
Tabelul 3
Numărul compusului (pH 2,2) (pH 4,5) (pH 6,8) 1 95 80 87 2 110 83 88 3 96 79 81 4 100 81 83 5 98 76 72 6 90 64 81 7 110 77 91 8 110 82 98 9 94 70 82 10 94 50 73 11 23 <0,1 80 12 110 90 92 13 100 84 87 14 110 82 76 15 110 88 90 16 95 71 81 17 97 62 85 18 110 86 90 19 96 70 75 20 95 72 68 21 96 62 60 22 97 68 73 23 99 79 82 24 95 76 76 25 91 38 39 26 100 80 80 27 110 88 90 28 110 83 90 29 110 79 78 30 100 81 75 31 110 89 94 32 91 73 78 33 93 73 75 34 82 65 68 35 93 73 78 36 91 72 74 37 92 74 78 38 110 94 88 39 93 44 81 40 99 81 85 41 96 75 80 42 93 75 78 43 95 79 82 44 100 85 88 45 82 61 73 46 100 82 86 47 87 69 79 48 100 82 86 49 92 69 58 50 120 79 75 51 110 83 93 52 83 58 73 53 84 65 70 54 100 78 75 55 98 48 49 56 87 66 77 57 95 47 51 58 111 85 89 59 -- -- -- 60 117 96 100 61 130 110 99 62 110 88 91 63 110 90 92 64 100 66 66 65 110 84 74 66 63 54 55 67 90 76 78 68 85 71 74 69 91 77 80 70 86 57 64 71 94 75 78 72 44 46 67 73 86 67 71 74 110 83 95 75 120 93 90 76 100 86 89 77 96 83 87 78 100 86 89 79 100 87 89 80 110 94 95 81 100 84 79 82 120 100 97 83 110 88 95 84 110 86 89 85 120 96 110 86 110 90 91 87 110 87 90 88 90 63 75 89 130 92 81 90 100 81 81 91 100 81 81 92 110 93 96 93 98 77 81 94 91 68 73 95 100 80 84 96 93 67 75 97 91 72 77 98 150 110 99 99 150 120 110 100 110 88 97 101 90 73 74 102 99 81 82 103 96 78 81 104 110 93 97 105 93 72 75 106 88 69 73 107 73 54 58 108 81 61 65 109 88 33 36 110 130 96 120 111 87 69 75 112 110 78 94 113 94 80 84 114 120 99 100 115 89 71 43 116 -- -- -- 117 102 82 85 118 110 84 92 119 110 89 97 120 110 94 97 121 110 90 93 122 100 86 82 123 100 76 73 124 100 8,6 44 125 110 76 78 126 96 74 78 127 130 100 110 128 93 77 78 129 95 79 79 130 130 100 110 131 130 97 110 132 130 110 110 133 120 99 100 134 110 94 100 135 110 97 100 136 120 100 110 137 110 98 110 138 -- -- -- 139 130 110 120 140 140 120 120 141 130 110 110 142 120 87 93 143 160 150 160 144 110 89 93 145 110 92 94 146 100 88 79 147 1,2 3,1 75 148 110 100 94 149 110 78 81 150 100 67 78 151 110 98 85 152 97 74 74 153 87 67 65 154 85 36 57 155 60 66 73 156 -- -- -- 157 94 70 62 158 64 43 41 159 86 55 51 160 <0,1 0,93 73 161 110 91 97 162 100 83 82 163 110 75 73 164 100 72 93 165 120 58 39 166 110 51 64 167 2,1 5,9 83 168 110 90 88 169 120 100 97 170 120 96 95 171 120 99 98 172 110 87 85 173 130 98 97 174 99 71 91 175 110 80 85 176 100 77 43 177 110 58 86 178 100 72 86 179 43 92 93 180 100 79 76 181 110 87 88 182 110 81 81 183 110 82 87 184 89 76 76 185 100 83 82 186 110 83 99 187 100 82 83 188 89 77 73 189 89 73 75 190 100 83 87 191 100 85 80 192 -- -- -- 193 100 80 73 194 0,68 2,5 78 195 110 83 80 196 89 77 85 197 110 83 79 198 120 100 93 199 120 96 92 200 100 73 73 201 87 68 66 202 92 73 70 203 81 70 72 204 82 72 73 205 99 73 81 206 90 71 76 207 82 68 73 208 82 47 57 209 110 81 84 210 110 87 87 211 95 82 78 212 92 79 75 213 85 66 72 214 81 64 69 215 86 70 76 216 -- -- -- 217 97 73 69 218 120 85 75 219 110 76 74 220 100 77 86 221 100 72 94 222 85 71 73 223 81 68 69 224 110 78 13 225 95 78 81 226 98 83 86 227 90 73 77 228 96 78 81 229 100 81 73 230 100 84 72 231 120 92 87 232 93 74 63 233 98 73 86 234 120 97 91 235 100 83 88 236 110 96 83 237 94 55 52 238 77 55 52 239 91 71 72 240 92 69 67 241 100 81 84 242 110 79 78 243 100 82 81 244 120 99 98 245 100 79 92 246 -- -- -- 247 90 75 71 248 94 75 74 249 94 67 93 250 110 81 86 251 100 72 77 252 94 73 62 253 100 75 81 254 100 64 80 255 -- -- -- 256 -- -- -- 257 -- -- -- 258 -- -- --
EVALUAREA STABILITĂŢII METABOLICE
Obiectivul
Analiza stabilităţii metabolice la intervalul de timp 5, cu capacitate de trecere înaltă a microzomilor hepatici umani (MHU) are ca scop determinarea metabolismului compuşilor in vitro. Compuşii se incubează cu MHU la o concentraţie de 1 uM, la 37 °C, timp de 60 de min în total. Procentul de compus rămas la 5, 15, 30, şi 60 de min se utilizează pentru a calcula t1/2 (min), CLint (ml/min/kg), CLh (ml/min/kg), şi % Qh. Analiza se bazează pe un format de 96 de godeuri şi poate cuprinde până la 92 de compuşi pe placă (n=1).
Incubarea
Folosind un cap multicanal cu 96 de godeuri, dispozitivul Biomek FX, echipat cu un bloc/agitator de încălzire Peltier, este programat pentru realizarea următoarelor etape:
1. Se picură cu pipeta 175 ul de 1,15 mg/ml microzomi în fiecare din cele 96 de inserţii conice (Vânzări analitice şi produse, numărul catalogului 96PL05), care se încadrează pe placa blocului/agitatorului de încălzire Peltier (placa de incubare)
2. Se adaugă 5 ul de compuşi de pe placa de analiză la microzomi şi se agită amestecul la 600 rpm la 42,1 °C timp de 10 min (o setare de 42,1 °C pe Peltier este necesară pentru probe pentru incubarea la 37 °C)
3. După 10 minute, se îndeamnă utilizatorul să pună placa NADPH pe masă şi se adaugă 20 ul de pe placa NADPH la placa de incubare pentru a începe reacţia
4. Se adaugă 215 ul de acetonitril rece de 100% conţinând un standard(e) intern pe o placă "de răcire" la 0 minute, 5 minute, 15 minute, 30 minute, şi 60 minute
5. La 0 min, 5 min, 15 min, 30 min şi 60 min în incubare, se aspiră 12 ul din amestecul de incubare şi se adaugă la soluţia de răcire pentru a opri reacţia
6. Se adaugă 185 ul de apă de calitate HPLC în fiecare godeu al plăcilor de răcire la 0, 5, 15, 30 şi 60 de minute pentru a dilua compuşii până la concentraţia adecvată pentru spectrometrul de masă
După colectarea tuturor intervalelor de timp, plăcile de răcire se sigilează cu suporturi de plăci perforabile cu 96 de godeuri sau folie de etanşare termică şi se centrifughează la 3000 rpm timp de 15 min pentru a granula microzomii.
Analiza
Plăcile se analizează cu ajutorul LC/MS/MS cu ionizare prin pulverizare de electroni (IPE) şi tranziţiile MRM determinate în prealabil. Metoda LC include următorii parametri:
Volumul de injectare: 5 ul
fazele mobile: Acid formic 0,1% în apă (A) şi acid formic 0,1% în acetonitril (B) (calitate HPLC)
Temperatura în partea stângă şi dreaptă: 35 °C
Timpul de execuţie: 4,0 min
Coloana: Thermo Scientific, Aquasil C18, 50 x 2,1 mm, 5 µ, numărul de reper 77505-052130, sau echivalentul
Gradientul pompei LC:
Timpul Total (min) Viteza de curgere (ul/min) %A %B 0 500 90,0 10,0 0,5 500 90,0 10,0 1,5 500 1,0 99,0 2,5 500 1,0 99,0 3,3 500 90,0 10,0 4,0 500 90,0 10,0
Dacă forma vârfului este slabă şi nu poate fi introdusă în mod corespunzător, următoarea metodă LC poate fi utilizată:
Volumul de injectare: 5 ul
Fazele mobile: Bicarbonat de amoniu 2,5 mM (A) şi Acetonitril (B) 100% (calitate HPLC)
Clătire apoasă: Apă 90%, Acetonitril 10% (calitate HPLC)
Clătire organică: Acetonitril 90%, Apă 10% (calitate HPLC)
Temperatura în partea stângă şi dreaptă: 35°C
Timpul de execuţie: 4,5 min
Coloana: Phenomex Luna 3u C18(2) 100A, 50 x 2,00 mm
Gradientul pompei LC:
Timpul Total (min) Viteza de curgere (ul/min) %A %B 0 500 90,0 10,0 0,5 500 90,0 10,0 1,5 500 1,0 99,0 2,5 500 1,0 99,0 3,30 500 90,0 10,0 4,50 500 90,0 10,0
Folosind un şablon Excel în Activitybase, suprafeţele vârfurilor ce corespund intervalelor de 5, 15, 30 şi 60 min, sunt comparate cu suprafaţa vârfului la 0 minute pentru a calcula procentul de compus rămas folosind următoarea ecuaţie:
Procentul de compus rămas = (ASC la Timpul t min/ASC la Timpul 0 min) x 100 unde t = 0, 5, 15, 30 sau 60 min.
Timpul (min) este reprezentat în funcţie de logaritmul natural (Ln) al procentului compusului rămas pentru a determina panta. Panta se utilizează pentru a calcula t1/2 (min) cu ajutorul ecuaţiei, t1/2 = 0,693/pantă.
Clint, clearance intrinsec
- 0,693/t1/2*Masa medie a ficatului în g/masa corporală medie în kg * f(u)/concentraţia proteică la incubare în mg/ml* mg proteine microzomice/g ficat
- 0,693/t1/2 * 26 g/kg * 1/1,0 mg/ml * 45 mg/g
Clh, clearance hepatic
- Flux hepatic * f(u) * Clint/(flux hepatic + f(u) * Clint)
Qh, % Flux sanguin hepatic
- (Clh/Flux hepatic) * 100
Datele privind stabilitatea metabolică (%Qh) pentru compuşii din Tabelul 1 sunt prezentate în Tabelul 4 de mai jos. Compuşii preferaţi au valorile %Qh mai mici de 24.
Tabelul 4
Numărul compusului HLM (%Qh) Numărul compusului HLM (%Qh) 1 <24 130 25 2 <24 131 28 3 <24 132 <24 4 <24 133 <24 5 <24 134 32 6 <24 135 29 7 <24 136 <24 8 <24 137 <24 9 <24 138 68 10 30 139 <24 11 47 140 <24 12 <24 141 <24 13 <24 142 <24 14 31 143 <24 15 <24 144 <24 16 <24 145 <24 17 31 146 <24 18 <24 147 <24 19 29 148 <24 20 38 149 <24 21 <24 150 <24 22 33 151 <24 23 <24 152 <24 24 <24 153 <24 25 29 154 <24 26 29 155 <24 27 <24 156 <24 28 <24 157 31 29 28 158 <24 30 <24 159 <24 31 <24 160 44 32 <24 161 <24 33 <24 162 26 34 <24 163 <24 35 <24 164 <24 36 <24 165 <24 37 <24 166 27 38 <24 167 <24 39 <24 168 <24 40 <24 169 <24 41 <24 170 <24 42 <24 171 <24 43 26 172 <24 44 <24 173 <24 45 <24 174 <24 46 <24 175 31 47 <24 176 28 48 <24 177 <24 49 48 178 <24 50 40 179 <24 51 <24 180 <24 52 <24 181 <24 53 <24 182 <24 54 <24 183 <24 55 <24 184 <24 56 <24 185 <24 57 <24 186 <24 58 <24 187 <24 59 <24 188 <24 60 <24 189 26 61 <24 190 43 62 <24 191 <24 63 <24 192 <24 64 <24 193 <24 65 <24 194 <24 66 <24 195 <24 67 <24 196 <24 68 <24 197 <24 69 <24 198 <24 70 <24 199 <24 71 <24 200 40 72 47 201 <24 73 36 202 <24 74 <24 203 <24 75 31 204 <24 76 <24 205 <24 77 <24 206 <24 78 <24 207 <24 79 <24 208 <24 80 <24 209 <24 81 <24 210 <24 82 <24 211 <24 83 <24 212 <24 84 <24 213 <24 85 <24 214 <24 86 <24 215 <24 87 <24 216 <24 88 <24 217 89 89 76 218 89 90 <24 219 89 91 <24 220 <24 92 <24 221 <24 93 <24 222 <24 94 <24 223 <24 95 <24 224 <24 96 30 225 <24 97 <24 226 52 98 31 227 25 99 <24 228 44 100 31 229 34 101 <24 230 <24 102 <24 231 <24 103 25 232 <24 104 26 233 26 105 <24 234 <24 106 <24 235 29 107 <24 236 <24 108 <24 237 <24 109 <24 238 <24 110 <24 239 25 111 <24 240 <24 112 <24 241 <24 113 <24 242 <24 114 <24 243 <24 115 25 244 <24 116 <24 245 <24 117 25 246 <24 118 <24 247 <24 119 <24 248 <24 120 <24 249 <24 121 <24 250 <24 122 <24 251 <24 123 <24 252 <24 124 <24 253 <24 125 <24 254 <24 126 <24 255 <24 127 <24 256 <24 128 <24 257 <24 129 <24 258 <24
METODE DE UTILIZARE TERAPEUTICĂ
Compuşii descrişi în prezenta invenţie activează eficient guanilat-ciclaza solubilă. Activarea sau potenţarea guanilat-ciclazei solubile este un mijloc atractiv pentru prevenirea şi tratarea diverselor boli sau stări asociate cu activarea deficitară a GCs. Astfel, într-o variantă de executare a invenţiei, sunt prevăzute metode de tratare a bolilor care pot fi atenuate prin activarea sau potenţarea GCs. Acestea includ:
Bolile cardiovasculare şi cele asociate, care includ hipertensiunea, ateroscleroza, boala arterială periferică, restenoza, accidentul vascular cerebral, insuficienţa cardiacă, vasospasmul coronarian, vasospasmul cerebral, ischemia/leziunile de reperfuzie, hipertensiunea pulmonară tromboembolică, hipertensiunea arterială pulmonară, angina stabilă şi instabilă, şi tulburările tromboembolice;
Bolile inflamatorii, care includ psoriazul, scleroza multiplă, artrita, astmul, şi boala pulmonară obstructivă cronică;
Tulburările fibrotice hepatice, care includ, dar nu se limitează la ciroză de orice etiologie sau fibroză a anumitor zone ale ficatului, cum ar fi fibroza periportală care poate fi cauzată de leziuni imunologice, efecte hemodinamice şi/sau alte cauze;
Tulburări fibrotice renale care includ, dar nu se limitează la glomeruloscleroză, glomeruloscleroza focală, fibroza mezangială, fibroza interstiţială cauzată de leziuni imunologice, efecte hemodinamice, diabet (tip I şi 2), nefropatia diabetică, nefropatia IgA, lupus nefropatia, nefropatia membranoasă, hipertensiunea, sindromul uremic hemolitic, glomerulonefritidele multiple, nefrita interstiţială, nefrita tubulointerstiţială cauzată de leziuni imunologice şi neimunologice;
Tulburări fibrotice pulmonare, atât difuze, cât şi localizate, din cauze imunologice şi neimunologice, inclusiv, dar fără a se limita la fibroza pulmonară idiopatică, fibroza pulmonară cauzată de expunere la toxine, produse chimice, medicamente, şi fibroza chistică;
Tulburări fibrotice cardiace din cauze imunologice şi neimunologice, care includ boala cardiacă ischemică (boala arterială coronariană) şi fluxul sanguin scăzut tranzitoriu şi/sau susţinut în una sau mai multe vase coronariene, inclusiv, eventual asociate cu intervenţiile pe arterele sau venele coronariene, asociate cu chirurgia cardiacă şi/sau utilizarea procedurilor cardiopulmonare de evitare şi miocardită din cauze virale şi nevirale, precum şi leziunile miocardice imunologice cauzate potenţial de reactivitatea încrucişată cu alţi antigeni la care este expus corpul uman;
Alte boli mediate, cel puţin, parţial prin diminuarea sau scăderea activităţii guanilat-ciclazei solubile, cum ar fi boala renală, diabetul, tulburările urologice, inclusiv vezica hiperactivă, hiperplazia benignă de prostată, şi disfuncţia erectilă, şi tulburările neurologice, care includ boala Alzheimer, boala Parkinson şi durerea neuropatică.
Aceste tulburări au fost bine caracterizate la om, dar există, de asemenea, cu o etiologie similară la alte mamifere, şi pot fi tratate cu ajutorul compoziţiilor farmaceutice propuse în prezenta invenţie.
Pentru uz terapeutic, compuşii din invenţie pot fi administraţi printr-o compoziţie farmaceutică în orice formă de dozare farmaceutică convenţională, în orice mod convenţional. Forme de dozare convenţionale includ, în mod specific, un purtător acceptabil farmaceutic adecvat pentru forma de dozare selectată. Căile de administrare includ, dar nu se limitează la intravenoasă, intramusculară, subcutanată, intrasinovială, prin infuzie, sublinguală, transdermică, orală, locală sau prin inhalare. Modurile preferate de administrare sunt oral şi intravenos.
Compuşii propuşi în prezenta invenţie pot fi administraţi de sine stătător sau în combinaţie cu adjuvanţi care sporesc stabilitatea inhibitorilor, facilitează administrarea compoziţiilor farmaceutice care îi conţin în anumite variante de executare, asigură o dizolvare sau dispersie sporită, sporesc activitatea inhibitorie, asigură terapie adjuvantă, şi altele, inclusiv alţi ingredienţi activi. Într-o variantă de executare, de exemplu, pot fi administraţi compuşii multipli din prezenta invenţie. În mod avantajos, în astfel de terapii combinate se utilizează doze mai mici de substanţe terapeutice convenţionale, evitând astfel posibila toxicitate şi efectele secundare adverse produse atunci când aceşti agenţi sunt utilizaţi ca monoterapii. Compuşii invenţiei pot fi combinaţi fizic cu substanţe terapeutice convenţionale sau alţi adjuvanţi într-o singură compoziţie farmaceutică. În mod avantajos, compuşii pot fi administraţi apoi împreună într-o singură formă de dozare. În unele variante de executare, compoziţiile farmaceutice care cuprind astfel de combinaţii de compuşi conţin, cel puţin, circa 5%, dar mai preferabil, cel puţin, circa 20% de un compus cu formula (I) (g/g) sau o combinaţie a acestora. Procentajul optim (g/g) al unui compus al invenţiei poate varia şi ţine de competenţa specialiştilor în domeniu. Alternativ, compuşii prezentei invenţii şi substanţele terapeutice convenţionale sau alţi adjuvanţi pot fi administraţi separat (fie în serie, fie în paralel). Dozarea separată permite o flexibilitate mai mare în regimul de dozare.
Aşa cum s-a menţionat mai sus, formele de dozare ale compuşilor din prezenta invenţie pot include purtători acceptabili farmaceutic şi adjuvanţi cunoscuţi specialiştilor în domeniu şi adecvaţi formei de dozare. Aceşti purtători şi adjuvanţi includ, de exemplu, schimbători de ioni, alumină, stearat de aluminiu, lecitină, proteine serice, substanţe tampon, apă, săruri sau electroliţi şi substanţe pe bază de celuloză. Forme de dozare preferate includ tablete, capsule, comprimate, lichide, soluţii, suspensii, emulsii, pastile, siropuri, pulberi reconstituibile, granule, supozitoare şi plasturi transdermici. Metode de preparare a unor astfel de forme de dozare sunt cunoscute (a se vedea, de exemplu, H.C. Ansel and N.G. Popovish, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 5th ed., Lea and Febiger (1990)). Nivelurile de dozare şi cerinţele faţă de compuşii din prezenta invenţie pot fi selectate de către specialiştii în domeniu din metodele şi tehnicile disponibile adecvate pentru un anumit pacient. În unele variante de executare, nivelurile de dozare variază de la circa 1-1000 mg/doză pentru un pacient de 70 kg. Deşi o doză pe zi poate fi suficientă, pot fi administrate până la 5 doze pe zi. Pentru dozele orale, până la 2000 mg/zi pot fi necesare. După cum va aprecia un specialist în domeniu, doze mai mici sau mai mari pot fi necesare în funcţie de anumiţi factori. De exemplu, o anumită dozare şi regim de tratament va depinde de factori, cum sunt: profilul general de sănătate al pacientului, severitatea şi decurgerea tulburării pacientului sau dispoziţia acestuia, şi opinia medicului curant.
Descrierea se publică în redacţia solicitantului.
1. O. Evghenov et al., Nature reviews, 2006, 5, 755-768
2. Y. Wang-Rosenke et al., Curr. Med. Chem., 2008, 15, 1396-1406
3. J.-P. Stasch et al., Brit. J. Pharmacol., 2002, 136, 773-783
4. U. Schindler et al., 2006, Mol. Pharmacol., 69, 1260-1268
5. K. Hirschberg et al., Cardiovasc. Res., 2010, 87, Suppl. 1, S100, Abstract 343
6. M. van Eickels, BMC Pharmacology, 2007, 7, Suppl. 1, S4
7. N. Rizzo et al., Arterioscler. Throm. Vasc. Biol., 2010, 30, 758-765
8. C. Wu, J. Pharmacol. Sci., 2004, 94, 252-260
9. V. Leiss et al.,BMC Pharmacology, 2009, 9, Suppl. 1, P40
10. S. Gur et al., Curr. Pharm. Des. 2010, 16, 1619-1633
11. C. Teixera et al., J. Pharmacol. & Exp. Ther., 2007, 322, 1093-1102
12. WO 2010/081647 A2 2010.07.22
13. T. Dunkern et al., Eur. J. Pharm., 2007, 572, 12-22
14. S. Vyas-Read et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2007, 293, 1212-1221
15. E. Dreiecher et al., J. Am. Soc. Nephrol., 2009, 20, 1963-1974
16. A. Knorr et al., Arzneimittel-Forschung, 2008, 58, 71-80
17. H. Lapp et al., Circulation, 2009, 119, 2781-2788
18. G. Boerrigter et al., Hypertension, 2007, 49, 1128-1133
19. F. Daniela, Circulation, 2009, 120, Suppl. 2, S852-S853
20. J.-P. Stasch et al., 2006, J. Clin. Invest., 116, 2552-2561
21. A. Ahluwalla et al., Proc.Natl. Acad. Sci. USA, 2004, 101, 1386-1391
22. D. Dal Secco, Nitric Oxide, 2006, 15, 77-86
23. T. Krieg et al., Eur. Heart J., 2009, 30, 1607-1613
24. T. Radovits et al., Eur. J. Cardiothorac. Surg., 2010
25. C. Patil et al., Pharm., 2004, 72, 190-195
26. P. Aguirre-Banuelos et al., Eur. J. Pharmacol., 2000, 395, 9-13
27. L. Savegnago et al., J. Pharmacy Pharmacol., 2008, 60, 1679-1686
28. T. Romero et al., Eur. J. Pharmacol., 2009, 613, 64-67
29. WO 2009/043495 A1 2009.04.09
30. F. van der Staay et al., Neuropharmacol. 2008, 55, 908-918
31. K. Domek-Lopacinska et al., Mol. Neurobiol., 2010, 41, p.129-137
32. H. Ghofrani et al., Eur. Respir. J., 2010, 36, 792-799
33. R. Dumitrascu et al., Circulation, 2006, 113, 286-295
34. O. Evgenov et al., 2007, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 176, 1138-1145
35. N. Weissmann et al., 2009, Am. J. Physiol. Lung cell. Mol. Physiol., 297, L658-665
36. P. Kalk et al., 2006, Brit. J. Pharmacol., 148, 853-859
37. K. Benz et al., 2007, Kidney Blood Press. Res., 30, 224-233
38. Y. Wang et al., 2005, Kidney Intl., 68, p.47-61
39. A. Schafer et al., 2006, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2006, 26, 2813-2818
40. WO 2008/138483 A1 2008.11.20
41. C. Stief et al., 2008, Eur. Urol., 53, 1236-1244
42. B. Fibbi et al., 2010, J. Sex. Med., 7, 59-69

Claims (27)

1. Compus cu formula I
I unde: A este o grupare heterociclil saturată cu 5...7 membri, conţinând un azot şi opţional un oxigen, unde un carbon din gruparea heterociclil menţionată este substituit opţional cu una sau două grupări selectate dintre alchil-C1-3 şi oxo; R1 este alchil C1-4 substituit opţional cu o grupare metoxi; R2 este selectat dintre H, F, Cl, alchil-C1-3, -CN, -OMe şi -CF3; R3 este selectat dintre H şi - CH3; R4 este selectat dintre H, F, -CH3 şi -OMe; R5 este selectat dintre H, Cl, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F şi -OMe; R6 este legat de azotul din gruparea A şi este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)n-cicloalchil C3-6, -C(O)-alchil C1-6, -(CH2)n-heterociclil, -(CH2)n-aril-(CH2)n-heteroaril, -SO2-aril, SO2-alchil C1-6, unde alchil C1-6, -(CH2)n-heterociclil, -(CH2)n-cicloalchil, -(CH2)n-aril şi -(CH2)n-heteroaril menţionaţi sunt substituiţi opţional cu 1…4 grupări selectate independent dintre alchil C1-3, halogen, alcoxi-C1-3, -CF3, -OH, oxo, -(CH2)1-3O(CH2)2-3OH şi -SO2CH3; R7 este selectat dintre H, -CH3, -CH2CH3, -CF3, F şi -CN; n este 0, 1 sau 2; sau o sare a acestuia.
2. Compus conform revendicării 1, unde: A este o grupare heterociclil saturată cu 5...7 membri, conţinând un azot, unde un carbon din gruparea heterociclil menţionată este substituit opţional cu una sau două grupări alchil C1-3; R1 este alchil C1-3; R2 este selectat dintre H, F, Cl, alchil C1-3, -CN, -OMe şi -CF3; R3 este selectat dintre H şi -CH3; R4 este selectat dintre H şi F; R5 este selectat dintre H, Cl şi -CH3; R6 este legat de azotul din gruparea A şi este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)n-cicloalchil C3-6, -C(O)-alchil C1-6, -(CH2)n-heterociclil, -(CH2)n-aril şi -(CH2)n-heteroaril, unde alchil C1-6, -(CH2)n-heterociclil, -(CH2)n-cicloalchil, -(CH2)n-aril şi -(CH2)n-heteroaril menţionaţi sunt substituiţi opţional cu 1…4 grupări selectate independent dintre alchil-C1-3, halogen, alcoxi-C1-3, -CF3, -OH şi -SO2CH3; R7 este H; şi n este 0, 1 sau 2; sau o sare a acestuia.
3. Compus conform revendicării 1 sau 2, unde: R1 este metil, etil sau izopropil; şi gruparea
este selectată dintre:
sau o sare a acestuia.
4. Compus conform uneia din revendicările 1 - 3, unde: R2 este selectat dintre -CH3, F, Cl şi -CF3; şi R6 este selectat dintre H, alchil C1-6, -(CH2)n-cicloalchil C3-6, -C(O)-alchil C1-6 şi -(CH2)n-heterociclil, unde alchil C1-6, -(CH2)n-cicloalchil şi -(CH2)n-heterociclil menţionaţi sunt substituiţi opţional cu 1-4 grupări selectate independent dintre alchil-C1-3, halogen, alcoxi-C1-3, -CF3, -OH şi -SO2CH3; sau o sare a acestuia.
5. Compus conform uneia din revendicările 1 - 4, unde fiecare heterociclil menţionat în R6 este selectat dintre oxetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, 2-oxabiciclo[3.2.0]heptanil, [1,4]dioxanil, 8-oxabiciclo[3.2.1]octanil, 1-oxaspiro[4.5]decanil şi pirolidin-2-onă; fiecare heteroaril menţionat în R6 este selectat dintre imidazolil, izoxazolil, pirazinil, pirazolil, piridinil, pirimidinil, tiazolil şi 4,5,6,7-tetrahidrobenzotiazolil; şi fiecare aril menţionat în R6 este fenil; sau o sare a acestuia.
6. Compus conform uneia din revendicările 1 - 5, unde: R6 este -(CH2)n heterociclil, unde heterociclilul menţionat este selectat dintre oxetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, 2-oxabiciclo[3.2.0]heptanil, [1,4]dioxanil, 8-oxabiciclo [3.2.1]octanil şi 1-oxaspiro[4.5]decanil; sau o sare a acestuia.
7. Compus conform uneia din revendicările 1 - 6, unde: R2 este -CH3; R3 este H; R4 este H sau -CH3; R5 este H sau -CH3; R7 este în poziţia para faţă de R5 şi este H, -CH3 sau -CH2CH3; sau o sare a acestuia.
8. Compus conform uneia din revendicările 1 - 7, unde: gruparea
este ; sau o sare a acestuia.
9. Compus conform uneia din revendicările 1 - 8, unde: R3 este H; şi R4 este H; sau o sare a acestuia.
10. Compus conform revendicării 1, selectat din grupul ce constă din
Nr. comp. Structura Nr. comp. Structura 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 336 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210
211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 ; şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestuia.
11. Compus conform revendicării 10, selectat din grupul ce constă din compuşii cu numărul 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 12, 15, 16, 18, 21, 27, 28, 30, 31, 35, 36, 39, 41, 42, 44, 45, 46, 47, 48, 57, 59, 62, 68, 77, 78, 79, 80, 82, 83, 84, 85, 86, 88, 92, 93 şi 94 şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestuia.
12. Compus conform revendicării 10, selectat din grupul ce constă din compuşii cu numărul 95, 97, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 136, 137, 139, 140, 141, 142, 145, 146, 152, 153, 154, 155, 157, 158, 159, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 191, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 220, 222, 223, 224, 225, 227, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257 şi sărurile acceptabile farmaceutic ale acestuia.
13. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
14. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
15. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
16. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
17. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
18. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
19. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
20. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
21. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
22. Compus conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că compusul este
sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia.
23. Compoziţie farmaceutică cuprinzând un compus conform uneia din revendicările 1-22 şi un excipient sau purtător acceptabil farmaceutic.
24. Metodă de tratare a unei boli sau tulburări, care poate fi atenuată prin activarea sau potenţarea guanilatciclazelor solubile, cuprinzând administrarea unei cantităţi eficiente terapeutic de un compus conform uneia din revendicările 1-22 unui pacient care are nevoie de aceasta.
25. Metodă conform revendicării 24, unde boala sau tulburarea poate fi o boală cardiovasculară, boală inflamatorie, tulburare fibrotică hepatică, tulburare fibrotică renală, tulburare fibrotică pulmonară şi tulburare fibrotică cardiacă.
26. Metodă conform revendicării 24, unde boala poate fi o boală renală, vezică hiperactivă, hiperplazie benignă de prostată, disfuncţie erectilă, boală Alzheimer, boală Parkinson şi durere neuropatică.
27. Procedeu conform revendicării 24, unde boala este nefropatie diabetică.
MDA20150019A 2012-09-07 2013-09-03 Alcoxipirazoli în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile MD4425C1 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261697899P 2012-09-07 2012-09-07
PCT/US2013/057826 WO2014039434A1 (en) 2012-09-07 2013-09-03 Alkoxy pyrazoles as soluble guanylate cyclase activators

Publications (3)

Publication Number Publication Date
MD20150019A2 MD20150019A2 (ro) 2015-07-31
MD4425B1 MD4425B1 (ro) 2016-06-30
MD4425C1 true MD4425C1 (ro) 2017-01-31

Family

ID=49170904

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20150019A MD4425C1 (ro) 2012-09-07 2013-09-03 Alcoxipirazoli în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile

Country Status (37)

Country Link
US (2) US8906904B2 (ro)
EP (1) EP2892891B1 (ro)
JP (1) JP5970134B2 (ro)
KR (1) KR101692707B1 (ro)
CN (1) CN104619695B (ro)
AP (1) AP2015008231A0 (ro)
AR (1) AR092869A1 (ro)
AU (1) AU2013312931B2 (ro)
BR (1) BR112015004529B1 (ro)
CA (1) CA2880494C (ro)
CL (2) CL2015000255A1 (ro)
CY (1) CY1122610T1 (ro)
DK (1) DK2892891T3 (ro)
EA (1) EA027244B1 (ro)
EC (1) ECSP15012804A (ro)
ES (1) ES2748798T3 (ro)
GE (1) GEP20176631B (ro)
HR (1) HRP20191755T1 (ro)
HU (1) HUE046996T2 (ro)
IL (1) IL236987A (ro)
LT (1) LT2892891T (ro)
MA (1) MA37891B1 (ro)
MD (1) MD4425C1 (ro)
MX (1) MX338887B (ro)
NZ (1) NZ703989A (ro)
PE (1) PE20151001A1 (ro)
PH (1) PH12015500457B1 (ro)
PL (1) PL2892891T3 (ro)
PT (1) PT2892891T (ro)
RS (1) RS59394B1 (ro)
SG (2) SG10201510668UA (ro)
SI (1) SI2892891T1 (ro)
TN (1) TN2015000054A1 (ro)
TW (1) TWI586661B (ro)
UA (1) UA115881C2 (ro)
UY (1) UY35012A (ro)
WO (1) WO2014039434A1 (ro)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
UA115881C2 (uk) * 2012-09-07 2018-01-10 Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх Алкоксипіразоли як активатори розчинної гуанілатциклази
TW201625584A (zh) 2014-07-02 2016-07-16 諾華公司 茚滿及吲哚啉衍生物及其作為可溶性鳥苷酸環化酶活化劑之用途
DK3172202T3 (da) 2014-07-22 2020-04-27 Boehringer Ingelheim Int Heterocykliske carboxylsyrer som aktivatorer af opløselig guanylatcyclase
HK1254636A1 (zh) 2015-12-18 2019-07-26 Novartis Ag 作为可溶性鸟苷酸环化酶激活剂的茚满衍生物及其用途
EP3525778A1 (de) 2016-10-11 2019-08-21 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Kombination enthaltend sgc aktivatoren und mineralocorticoid-rezeptor-antagonisten
WO2019081456A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Bayer Aktiengesellschaft USE OF SGC ACTIVATORS AND STIMULATORS COMPRISING A BETA2 SUBUNIT
EP3498298A1 (en) 2017-12-15 2019-06-19 Bayer AG The use of sgc stimulators and sgc activators alone or in combination with pde5 inhibitors for the treatment of bone disorders including osteogenesis imperfecta (oi)
JP7314173B2 (ja) 2018-04-30 2023-07-25 バイエル アクチェンゲゼルシャフト 認知障害の治療のためのｓＧＣ活性化薬及びｓＧＣ刺激薬の使用
MX2020012230A (es) 2018-05-15 2021-01-29 Bayer Ag Uso de benzamidas sustituidas con 1,3-tiazol-2-ilo para el tratamiento de enfermedades asociadas con la sensibilizacion de las fibras nerviosas.
EP3574905A1 (en) 2018-05-30 2019-12-04 Adverio Pharma GmbH Method of identifying a subgroup of patients suffering from dcssc which benefits from a treatment with sgc stimulators and sgc activators in a higher degree than a control group
EP3820470B1 (en) * 2018-07-12 2024-09-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Alkoxy pyrazoles as soluble guanylate cyclase activators for use in treating portal hypertension
EP3911675A1 (en) 2019-01-17 2021-11-24 Bayer Aktiengesellschaft Methods to determine whether a subject is suitable of being treated with an agonist of soluble guanylyl cyclase (sgc)
PL4043451T3 (pl) * 2019-10-18 2024-06-10 Fmc Corporation Sposoby wytwarzania związku pośredniego w syntezie kwasu 5-bromo-2-(3-chloropirydyn-2-ylo)-2h-pirazolo-3-karboksylowego
CN112079712B (zh) * 2020-09-18 2022-12-13 江苏美迪克化学品有限公司 一种对乙烯基水杨酸的制备方法
EP4259617B1 (en) * 2020-12-10 2024-10-23 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrazolo piperidine carboxylic acids
EP4011873A1 (en) 2020-12-10 2022-06-15 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrazolo piperidine carboxylic acids
GB202102895D0 (en) 2021-03-01 2021-04-14 Cambridge Entpr Ltd Novel compounds, compositions and therapeutic uses thereof
TW202402274A (zh) 2022-03-21 2024-01-16 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 用於治療門脈高壓之可溶性鳥苷酸環化酶活化劑
JP2025518350A (ja) 2022-06-09 2025-06-12 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 女性における駆出率が維持された心不全の治療に使用するための可溶性グアニル酸シクラーゼアクチベーター
WO2024097316A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble guanylate cyclase activators for treating systemic sclerosis
EP4630113A1 (en) 2022-12-09 2025-10-15 Boehringer Ingelheim International GmbH Solid forms of a sgc activator
WO2025036839A1 (en) 2023-08-16 2025-02-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble guanylate cyclase activators for treating clinically significant portal hypertension and decompensated cirrhosis

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000027394A1 (en) * 1998-11-05 2000-05-18 University College London Activators of soluble guanylate cyclase
WO2008138483A1 (en) * 2007-05-12 2008-11-20 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft sGC STIMULATORS, sGC ACTIVATORS AND COMBINATIONS FOR THE TREATMENT OF UROLOGICAL DISORDERS
WO2009043495A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Use of sulfonyl-substituted 2-sulfonylaminobenzoic acid n-phenylamides in the treatment of pain
WO2010081647A2 (en) * 2009-01-17 2010-07-22 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Sgc stimulators of sgc activators in combination with pde5 inhbitors for the treatment of erectile dysfunction
US20110028493A1 (en) * 2008-04-04 2011-02-03 Nobuyuki Matsunaga Heterocyclic derivative and use thereof
WO2011147810A1 (en) * 2010-05-26 2011-12-01 Bayer Pharma Aktiengesellschaft THE USE OF sGC STIMULATORS, sGC ACTIVATORS, ALONE AND COMBINATIONS WITH PDE5 INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF SYSTEMIC SCLEROSIS (SSc).

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002026712A2 (en) 2000-09-29 2002-04-04 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Quaternary amines and related inhibitors of factor xa
AR031176A1 (es) 2000-11-22 2003-09-10 Bayer Ag Nuevos derivados de pirazolpiridina sustituidos con piridina
CN1568564A (zh) 2000-11-22 2005-01-19 维思克斯公司 用于非线性光学元件的温度启动的定位设备
GB0212785D0 (en) 2002-05-31 2002-07-10 Glaxo Group Ltd Compounds
ZA200504898B (en) * 2002-12-20 2006-11-29 Pharmacia Corp Acyclic pyrazole compounds
MX2008000779A (es) 2005-07-18 2008-02-21 Bayer Healthcare Ag Uso de activadores y estimuladores de guanilatociclasa solubles para la prevencion o tratamiento de trastornos renales.
US20080045560A1 (en) 2006-08-15 2008-02-21 Wyeth Pyrrolidine and related derivatives useful as PR modulators
BRPI0816382A2 (pt) 2007-09-06 2015-02-24 Merck Sharp & Dohme Composto, composição, e, métodos para ativar a guanilato ciclase solúvel e para tratar ou previnir doenças
WO2009068652A1 (en) 2007-11-30 2009-06-04 Smithkline Beecham Corporation 2, 6-disubstituted pyridines and 2, 4-disubstituted pyrimidines as soluble guanylate cyclase activators
TW200938529A (en) * 2007-12-03 2009-09-16 Smithkline Beecham Corp Compounds
WO2010015653A1 (en) * 2008-08-07 2010-02-11 Smithkline Beecham Corporation Pyrimidine derivatives as activators of soluble guanylate cyclase
WO2010015652A2 (en) 2008-08-07 2010-02-11 Smithkline Beecham Corporation Thiazole compounds as activators of soluble guanylate cyclase
AU2009322836B2 (en) 2008-11-25 2013-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Soluble guanylate cyclase activators
AU2010218224B2 (en) 2009-02-26 2013-06-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Soluble guanylate cyclase activators
WO2011095553A1 (en) 2010-02-05 2011-08-11 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Sgc stimulators or sgc activators in combination with pde5 inhbitors for the treatment of erectile dysfunction
EP2531187B1 (en) * 2010-02-05 2015-08-12 Adverio Pharma GmbH sGC STIMULATORS OR sGC ACTIVATORS ALONE AND IN COMBINATION WITH PDE5 INHBITORS FOR THE TREATMENT OF CYSTIC FIBROSIS
EP2585055A1 (de) 2010-06-25 2013-05-01 Bayer Intellectual Property GmbH Verwendung von stimulatoren und aktivatoren der löslichen guanylatzyklase zur behandlung von sichelzellanämie und konservierung von blutersatzstoffen
EP2632551B1 (en) 2010-10-28 2016-07-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Soluble guanylate cyclase activators
EP2683710B1 (en) 2011-03-10 2017-07-19 Boehringer Ingelheim International GmbH Soluble guanylate cyclase activators
WO2013025425A1 (en) 2011-08-12 2013-02-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Soluble guanylate cyclase activators
EP2594270A3 (en) 2011-11-18 2013-07-31 BIP Patents The use of sGC stimulators, sGC activators, alone and combinations with PDE5 inhibitors for the treatment of systemic sclerosis (SSc)
UA115881C2 (uk) * 2012-09-07 2018-01-10 Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх Алкоксипіразоли як активатори розчинної гуанілатциклази

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000027394A1 (en) * 1998-11-05 2000-05-18 University College London Activators of soluble guanylate cyclase
WO2008138483A1 (en) * 2007-05-12 2008-11-20 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft sGC STIMULATORS, sGC ACTIVATORS AND COMBINATIONS FOR THE TREATMENT OF UROLOGICAL DISORDERS
WO2009043495A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Use of sulfonyl-substituted 2-sulfonylaminobenzoic acid n-phenylamides in the treatment of pain
US20110028493A1 (en) * 2008-04-04 2011-02-03 Nobuyuki Matsunaga Heterocyclic derivative and use thereof
WO2010081647A2 (en) * 2009-01-17 2010-07-22 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Sgc stimulators of sgc activators in combination with pde5 inhbitors for the treatment of erectile dysfunction
WO2011147810A1 (en) * 2010-05-26 2011-12-01 Bayer Pharma Aktiengesellschaft THE USE OF sGC STIMULATORS, sGC ACTIVATORS, ALONE AND COMBINATIONS WITH PDE5 INHIBITORS FOR THE TREATMENT OF SYSTEMIC SCLEROSIS (SSc).

Non-Patent Citations (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. Ahluwalla et al., Proc.Natl. Acad. Sci. USA, 2004, 101, 1386-1391 *
A. Knorr et al., Arzneimittel-Forschung, 2008, 58, 71-80 *
A. Schafer et al., 2006, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2006, 26, 2813-2818 *
B. Fibbi et al., 2010, J. Sex. Med., 7, 59-69 *
C. Patil et al., Pharm., 2004, 72, 190-195 *
C. Stief et al., 2008, Eur. Urol., 53, 1236-1244 *
C. Teixera et al., J. Pharmacol. & Exp. Ther., 2007, 322, 1093-1102 *
C. Wu, J. Pharmacol. Sci., 2004, 94, 252-260 *
D. Dal Secco, Nitric Oxide, 2006, 15, 77-86 *
E. Dreiecher et al., J. Am. Soc. Nephrol., 2009, 20, 1963-1974 *
F. Daniela, Circulation, 2009, 120, Suppl. 2, S852-S853 *
F. van der Staay et al., Neuropharmacol. 2008, 55, 908-918 *
G. Boerrigter et al., Hypertension, 2007, 49, 1128-1133 *
H. Ghofrani et al., Eur. Respir. J., 2010, 36, 792-799 *
H. Lapp et al., Circulation, 2009, 119, 2781-2788 *
J.-P. Stasch et al., 2006, J. Clin. Invest., 116, 2552-2561 *
J.-P. Stasch et al., Brit. J. Pharmacol., 2002, 136, 773-783 *
K. Benz et al., 2007, Kidney Blood Press. Res., 30, 224-233 *
K. Domek-Lopacinska et al., Mol. Neurobiol., 2010, 41, p.129-137 *
K. Hirschberg et al., Cardiovasc. Res., 2010, 87, Suppl. 1, S100, Abstract 343 *
L. Savegnago et al., J. Pharmacy Pharmacol., 2008, 60, 1679-1686 *
M. Follman et al., The Chemistry and Biology of Soluble Guanylate Cyclase Stimulators and Activators. Angew. Chem. Int. Eng. 2013, 52, 9442-9462. DOI: 10.1002/anie.201302588, regăsit în Internet la 2016.04.26, url: https://www.researchgate.net/profile/Markus_Follmann2/publication/256074490_The_Chemistry_and_Biology_of_Soluble_Guanylate_Cyclase_Stimulators_and_Activators/links/0deec536cf46265e97000000.pdf *
M. van Eickels, BMC Pharmacology, 2007, 7, Suppl. 1, S4 *
N. Rizzo et al., Arterioscler. Throm. Vasc. Biol., 2010, 30, 758-765 *
N. Weissmann et al., 2009, Am. J. Physiol. Lung cell. Mol. Physiol., 297, L658-665 *
O. Evgenov et al., 2007, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 176, 1138-1145 *
O. Evghenov et al., Nature reviews, 2006, 5, 755-768 *
P. Aguirre-Banuelos et al., Eur. J. Pharmacol., 2000, 395, 9-13 *
P. Kalk et al., 2006, Brit. J. Pharmacol., 148, 853-859 *
R. Dumitrascu et al., Circulation, 2006, 113, 286-295 *
S. Gur et al., Curr. Pharm. Des. 2010, 16, 1619-1633 *
S. Vyas-Read et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2007, 293, 1212-1221 *
T. Dunkern et al., Eur. J. Pharm., 2007, 572, 12-22 *
T. Krieg et al., Eur. Heart J., 2009, 30, 1607-1613 *
T. Radovits et al., Eur. J. Cardiothorac. Surg., 2010 *
T. Romero et al., Eur. J. Pharmacol., 2009, 613, 64-67 *
U. Schindler et al., 2006, Mol. Pharmacol., 69, 1260-1268 *
V. Leiss et al.,BMC Pharmacology, 2009, 9, Suppl. 1, P40 *
Y. Wang et al., 2005, Kidney Intl., 68, p.47-61 *
Y. Wang-Rosenke et al., Curr. Med. Chem., 2008, 15, 1396-1406 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201500298A1 (ru) 2015-08-31
JP5970134B2 (ja) 2016-08-17
ES2748798T3 (es) 2020-03-18
PT2892891T (pt) 2019-11-05
LT2892891T (lt) 2020-01-27
EP2892891A1 (en) 2015-07-15
AU2013312931A1 (en) 2015-02-05
SI2892891T1 (sl) 2019-11-29
MD20150019A2 (ro) 2015-07-31
MA37891A1 (fr) 2018-01-31
AU2013312931B2 (en) 2017-06-22
CA2880494A1 (en) 2014-03-13
HK1210164A1 (en) 2016-04-15
UY35012A (es) 2014-03-31
USRE46886E1 (en) 2018-06-05
IL236987A (en) 2017-02-28
HRP20191755T1 (hr) 2019-12-27
SG11201500861QA (en) 2015-04-29
CN104619695A (zh) 2015-05-13
PE20151001A1 (es) 2015-07-15
EP2892891B1 (en) 2019-07-31
TW201422607A (zh) 2014-06-16
ECSP15012804A (es) 2015-12-31
JP2015527394A (ja) 2015-09-17
AP2015008231A0 (en) 2015-01-31
PH12015500457A1 (en) 2015-04-20
BR112015004529A2 (pt) 2017-07-04
MA37891B1 (fr) 2018-05-31
PH12015500457B1 (en) 2015-04-20
CL2015000562A1 (es) 2015-06-12
SG10201510668UA (en) 2016-01-28
CL2015000255A1 (es) 2015-05-29
MD4425B1 (ro) 2016-06-30
WO2014039434A1 (en) 2014-03-13
TN2015000054A1 (en) 2016-06-29
UA115881C2 (uk) 2018-01-10
NZ703989A (en) 2017-04-28
KR20150048765A (ko) 2015-05-07
BR112015004529B1 (pt) 2022-06-21
MX2015002807A (es) 2015-05-15
AR092869A1 (es) 2015-05-06
US8906904B2 (en) 2014-12-09
PL2892891T3 (pl) 2020-01-31
EA027244B1 (ru) 2017-07-31
US20140073629A1 (en) 2014-03-13
HUE046996T2 (hu) 2020-04-28
MX338887B (es) 2016-05-04
RS59394B1 (sr) 2019-11-29
CA2880494C (en) 2021-09-21
CN104619695B (zh) 2018-04-10
CY1122610T1 (el) 2021-03-12
DK2892891T3 (da) 2019-10-14
BR112015004529A8 (pt) 2019-08-27
KR101692707B1 (ko) 2017-01-04
TWI586661B (zh) 2017-06-11
GEP20176631B (en) 2017-02-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
MD4425C1 (ro) Alcoxipirazoli în calitate de activatori ai guanilat-ciclazei solubile
EP2683710B1 (en) Soluble guanylate cyclase activators
ES2784477T3 (es) Acidos carboxílicos heterocíclicos como activadores de guanilato ciclasa soluble
JP5752232B2 (ja) プロテインキナーゼ阻害剤としての置換ピロロトリアジン化合物
CN108440515B (zh) 取代的苯并呋喃基和苯并噁唑基化合物及其用途
CN105073751A (zh) 作为酪蛋白激酶1δ/ε抑制剂的新的取代的咪唑
US20150306070A1 (en) Use of maleimide derivatives for preventing and treating leukemia
JPWO2019189555A1 (ja) 複素環化合物
US20250011288A1 (en) Rxfp1 agonists
TWI827869B (zh) 作為蛋白激酶抑制劑的取代的吡咯並[2,3-b]吡啶及吡唑並[3,4-b]吡啶衍生物
HK1210164B (en) Alkoxy pyrazoles as soluble guanylate cyclase activators
TW202028199A (zh) 作為蛋白激酶抑制劑的萘啶酮和吡啶基嘧啶酮類化合物

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued