LT6271B - Augalinės kilmės fermentuoti pašarai - Google Patents

Augalinės kilmės fermentuoti pašarai Download PDF

Info

Publication number
LT6271B
LT6271B LT2014110A LT2014110A LT6271B LT 6271 B LT6271 B LT 6271B LT 2014110 A LT2014110 A LT 2014110A LT 2014110 A LT2014110 A LT 2014110A LT 6271 B LT6271 B LT 6271B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
fermented
substrate
fermentation
feed
lactic acid
Prior art date
Application number
LT2014110A
Other languages
English (en)
Other versions
LT2014110A (lt
Inventor
Elena Bartkienė
Gražina Juodeikienė
Ramūnas Garbaravičius
Original Assignee
Uab "Baltijos Biotechnologijos"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Uab "Baltijos Biotechnologijos" filed Critical Uab "Baltijos Biotechnologijos"
Priority to LT2014110A priority Critical patent/LT6271B/lt
Priority to PCT/IB2015/057173 priority patent/WO2016046708A1/en
Priority to EP15784972.0A priority patent/EP3197289A1/en
Priority to EA201790686A priority patent/EA201790686A1/ru
Publication of LT2014110A publication Critical patent/LT2014110A/lt
Publication of LT6271B publication Critical patent/LT6271B/lt

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/12Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

Šis išradimas yra susijęs su biotechnologijomis, ir skirtas pašarų gamybos sričiai ir gali būti taikomas didelio antimikrobinio aktyvumo augalinės kilmės fermentuotus pašarų gamybai. @Siūloma sausų fermentuotų pašarų gamybai naudoti iš Lietuvoje užaugintų grūdinių kultūrų raugų išskirtas pieno rūgšties bakterijų padermes Pediococcus acidilactici BaltBio01 MSCL P1480 ir/arba Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481. Siūlomos substratų sudėtys ir gamybos technologijos ypatumai. Pasiūlyta optimali substrato sudėtis skirta atrajojančių gyvulių šėrimui. Pateiktos produktų fermentacijos, džiovinimo, formavimo ir saugojimo sąlygos, nurodytos gatavų produktų bioaktyviosios savybės, tokios kaip pieno rūgšties bakterijų kolonijas sudarančių vienetų skaičius (KVS). Nustatytos KVS reikšmės ir jų pokyčiai gamyboje ir saugojime.

Description

1
LT 6271 B
Technikos sritis Šis išradimas yra susijęs su biotechnologijomis, skirtas pašarų gamybos sričiai ir gali būti taikomas gaminti didelio antimikrobinio aktyvumo augalinės kilmės fermentuotus pašarus.
Technikos lygis Šiuolaikinėje gyvulininkystėje vis plačiau pradedami naudoti sausi fermentuoti pašarai. Sausų kietų pašarų gamyboje naudojama taip vadinama kietos fermentacijos (KF) technologija. KF technologija yra ekonomiškesnė (fermentacijai naudojama paprastesnė, mažesnio tūrio įranga), saugesnė (esant mažam substrato vandens aktyvumui fermentacijos metu sumažėja mikrobiologinė tarša), todėl KF yra inovatyvi technologija, lyginant ją su įprasta fermentacija skystoje fazėje.
Labai svarbu, kad fermentuotuose pašaruose, kuriuose yra mažas drėgmės kiekis, tarp jų KF technologija paruoštuose sausuose pašaruose būtų pakankamas kiekis pienarūgščių bakterijų (PRB). Yra žinoma, kad KF technologija paruošti sausi fermentuoti pašarai lėčiau genda (juose mažesnis patogeninių bakterijų kolonijas sudarančių vienetų skaičius) bei jų maistinė vertė yra geresnė). Įvairūs mikroskopiniai grybai yra pagrindinė fermentuotų pašarų gedimo priežastis. Kai kurios mikroskopinių grybų rūšys gali sukelti gyvūnams rimtus susirgimus, nes jų produkuojami metabolitai yra labai toksiški. Ypač aktuali didelio drėgmės kiekio pašarų (skystų pašarų) mikrobiologinio gedimo problema.
Didelį PRB kiekį turinčių pašarų vartojimas sumažina patogeninius organizmus įvairių naminių gyvulių virškinamajame trakte. Dažniausiai, pašaras su PRB gyvūnams pateikiamas skystoje formoje, tačiau, dėl to, kad daugelis gyvūnų negali vartoti skysto pašaro yra perspektyvu jį gaminti sausoje formoje.
Sausų fermentuotų pašarų gamybai paprastai yra naudojami tradiciniai džiovinimo metodai, kuriais iš pusiau skystų pašarų terminio apdorojimo būdu pašalinama drėgmė, gaunant sausą fermentuotą pašarą. Pastarieji džiovinimo metodai (žiūr. patentą WO2013029682) veikia esant labai aukštai temperatūrai, todėl sumažina PRB ir kitų probiotinių bakterijų gyvybingumą pašaruose. Dėl šių priežasčių, siekiant užtikrinti fermentuotų pašarų veiksmingumą labai svarbu parinkti tinkamas jų gamybos 2
LT 6271 B sąlygas ir užtikrinti pakankamą PRB koncentraciją juose. Svarbus ne tik PRB pakankamas kolonijas sudarančių vienetų skaičius pašaruose, bet ir pašarų saugos užtikrinimas patogeninių bakterijų minimizavimo aspektu. Žinomas sausas probiotinis pašarų priedas, turintis pieno rūgšties bakterijų Streptococcus lactis 3186 K 12 VKPM B-4989, Lactobacilus casei MB VKPM B-4486 ir Lactobacilus acidophilus M86 VKPM B-4992 ir naudojamas atrajojančių gyvūnų žarnyno mikroflorai gerinti (žiūr. patentą RU2063755). Šio probiotinio pašarų priedo trūkumas tas, kad jis nėra pakankamai veiksmingas naikinant gyvūnų patogenines bakterijas, nes jame yra specifinės PRB padermės, nepakankamas PRB kiekis, be to, PRB yra mažesnio biologinio aktyvumo.
Taip pat žinomas biologiškai aktyvaus pašarų priedo iš augalinės kilmės žaliavos gavimo būdas, kuris apima augalinės žaliavos smulkinimą, bakterijų kultūrų atrinkimą, pasėlio gavimą ir fermentaciją kietame substrate (žiūr. patentą RU2202224). Bakterijų kultūros atrenkamos iš žolėdžių gyvūnų (dažniausiai laukinių) įvairių virškinimo trakto skyrių - pradedant gerklų ertme, prieskrandžiu, žarnynu ir baigiant ekskrementais.
Artimiausias analogas siūlomam išradimui yra aprašytas patente US20140037786. Tai sausų fermentuotų pašarų gamybos būdas, kuriame naudojamos PRB padermės Enterococcus faecium MCIMB 30122, Lactobacillus rhamnosus NCIMB 30121, Lactobacillus plantarum LSI (NCIMB 30083), Pediococcus acidililactili NCIMB 30086 ir Pediococcus pentosaceus HTS (LMG P-22549). Kaip augalinės kilmės žaliavą siūloma panaudoti grūdus - kviečius, miežius, rugius, ryžius, kukurūzus, kvietrugius, avižas; daržoves - bulves, sojas, o taip pat pieno produktus -išrūgas, varškę, liesą pieną. Taip pat siūlomas pašarų sausas (kietas) fermentacijos būdas.
Sausiems fermentuotiems pašarams keliami bendri reikalavimai.
Fermentuotų pašarų gamybai (džiovinimui) rekomenduojamos temperatūros (20-75)°C. Kuo žemesnė temperatūra, tuo išlieka didesnis PRB skaičius. Dažniausiai fermentuotų pašarų drėgnis yra 8-9 %, todėl juose PRB skaičius yra didesnis mažesniame pašaro kiekyje, nes pašaras yra labiau koncentruotas, atitinkamai PRB poveikis gyvūnų sveikatingumui yra reikšmingesnis. PRB sausuose fermentuotuose 3
LT 6271 B turi siekti 106- 108 KSV/g.
Dažniausiai pašarų fermentacijai naudojamos homofermentinės PRB, kurių pagrindinis metabolitas yra pieno rūgštis, o kitų metabolitų (acto rūgšties ir etanolio) produkuojamos koncentracijos nereikšmingos. Jei fermentacijoje dalyvauja heterofermentinės bakterijos, tai pagrindinis metabolizmo produktas gali būti acto rūgštis, o pieno rūgšties išskiriamas kiekis nežymus. PRB, naudojamos pašarų fermentacijai, gali būti homofermentinės ir heterofermentinės. Homofermentinės PRB yra tos, kurių pagrindinis metabolitas pieno rūgštis, o heterofermentinių PRB produkuojamas laktatas toliau metabolizuojamas į acetatą, anglies dvideginį ar kitus metabolitus.
Siekiant užtikrinti fermentuotų pašarų saugą nuo patogeninių mikroorganizmų, taip pat, labai svarbu užtikrinti pakankamai žemą fermentuotų pašarų pH. Rekomenduojamas fermentuotų pašarų pH yra nuo 3,5 iki 5,0.
Taip pat svarbu užtikrinti fermentuotų produktų juslines savybes ir tekstūrą. PRB fermentacijos metu produkuoja pieno rūgštį naudodamos anglies turinčius substratus. Pieno rūgšties koncentracija fermentuotuose produktuose gali skirtis priklausomai nuo terpėje esančių fermentuojamųjų cukrų, PRB rūšies ir kitų faktorių.
Homofermentinėmis PRB bakterijomis fermentuojant substratus pieno rūgšties koncentracija juose dažniausiai kinta nuo 50 iki 300 mM. Heterofermentinėmis PRB fermentuojant gali būti gaunamas, atitinkamai, nuo 50 iki 300 mM acto rūgšties kiekis. Išradimo esmė Išradimo tikslas - didelio biologinio aktyvumo augalinės kilmės fermentuotų pašarų gavimas panaudojant naujai atrinktas pieno rūgšties bakterijų padermes išskirtas iš fermentuotos grūdinės žaliavos. Šis tikslas pasiekiamas panaudojant fermentuotų pašarų gamyboje augalinės kilmės substratą ir PRB raugą, kuriame dominuoja Pediococcus acidilactici BaltBioOI MSCL P1480 ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481 padermės. Toliau bus naudojamas sutrumpintas PRB žymėjimas nenurodant registracijos įstaigos ir registracijos numerių. 4
LT 6271 B
Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 padermės išgautos (izoliuotos) iš Lietuvoje užaugintų varpinių grūdinių kultūrų raugų. Padermių izoliavimo techninius darbus pagal sutartis atliko UAB „Bioseka“. Padermes identifikavo UAB „Biosta“.
Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 padermių identifikavimas.
Raugai gaminti laboratorinėmis sąlygomis, keičiant terpės drėgnį ir fermentacijos temperatūrą. Raugai buvo ruošti iš 1370 tipo ruginių miltų bei avižų miltų ir vandens santykiu 1:1 arba 1:2, temperatūra buvo cikliškai keičiama ribose (25-35) °C.
BaltBio pieno rūgšties bakterijų išskyrimas iš spontaninių raugų. 10 g raugo maišyta su 90 ml 0,9 % fiziologinio tirpalo (9 g natrio chlorido 1 I distiliuoto vandens, sterilizuota 15 min prie 121°C) homogenizatoriuje Stomacher400 (Seward medical, London, UK). Iš gautos suspensijos ruošti nuo10'2 iki 10*5 skiediniai. Atitinkamai 10-4 ir 10'5 skiediniai pasėti j Petri lėkšteles su mMRS agaru. Lėkštelės laikytos 25 °C, 30 °C arba 35 °C anaerobinėmis sąlygomis. Po trijų parų nustatytas PRB skaičius 1 g raugo. Atsitiktinai pasirinktos bakterijų kolonijos (iš kiekvieno raugo mėginio išskirta po 30 PRB (iš viso 270)) išgrynintos persėjant j naujas lėkšteles. Bakterijų kultūros laikytos -40 °C ir -80 °C temperatūroje. Modifikuota MRS terpė (mMRS) ruošta, ištirpinant po 10,0 g triptono peptono ir mėsos ekstrakto, po 5,0 g mielių ekstrakto ir natrio acetato, po 7,0 g gliukozės, fruktozės ir maltozės, po 2,0 g natrio gliukonatas, K2HPO4 ir trisamoniocitrato, 1,0 ml tvino 80, 0,2 g MgS04-7 H2O, O, 05 g MnSC>4-4 H2O, 0,5 g cisteino chlorido, 15,0 g agaro 1 I distiliuoto vandens Gautas tirpalas (pH 6,3) sterilizuotas 15 min prie 121°C . MRS agaro terpė (MRS) ruošta, ištirpinant 66,2 g MRS agaro 1 I distiliuoto vandens. Gautas tirpalas virtas, kol agaras visiškai ištirps ir sterilizuotas 15 min prie 118 °C . PRB charakterizuotos nustačius jų morfologiją. Atmetimo būdu atlikus Gram reakcijos ir katalazės testus ir mikroskopinius tyrimus nustatyta, kad 36 PRB padermės buvo gramteigiamos ir buvo rutuliškos formos (kokai). Toliau buvo atlikti angliavandenių fermentacijos ir augimo skirtingose temperatūrose testai. Žinoma, kad P. pentosaceus ir P. acidilactici skirtingai fermentuoja maltozę ir trehalozę bei skiriasi galimybe augti 50°C temperatūroje, P. pentosaceus fermentuoja abu angliavandenius 5
LT 6271 B ir negali augti šioje temperatūroje, P. acidilactici fermentuoja tik trehalozę ir auga 50 °C temperatūroje. Atsižvelgiant į tai, kad 5 bakterijų padermės fermentavo maltozę ir trehalozę bei neaugo esant 50 °C temperatūrai, jos pripažintos kaip P. pentosaceus, o 4 bakterijų padermės identifikuotos kaip P. acidilactici, nes jos nefermentavo maltozės, bet augo 50 °C temperatūroje.
Amplifikacijos PGR metodu buvo identifikuotos šių 9 padermių 16S rDNR geno sekos. Jų sekų palyginimas su tarptautinio biotechnologijos informacijos centro (NCBI) bakterijų banko sekomis parodė ir patvirtino kad su ne mažiau kaip 95 % tikimybe šios PRB padermės priklauso P. acidilactici ir P. pentosaceus. įvertinus išskirtų P. acidilactici ir P. pentosaceus padermių bakteriocinų aktyvumą j patogeninius mikroorganizmus (Bacillus thuringiensis, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Bacillus macerans, Salmonella enteritidis, Micrococcus sp, Yersinia enterocolitica, Listeria sp., Pseudomonas aeroginosa), kaip perspektyviausi mikroorganizmai gyvūnų sveikatingumui užtikrinti, panaudojant juos pašarų priedams ir kitiems pašariniams produktams, pasirinkti Pediococcus acidilactici BaltBio 01 ir Pediococcus pentosaceus BaltBio 02.
Toliau aprašyme naudojami terminai, reiškia: PRB raugas - tai terpėje pagamintoje iš bulvių sulčių, jas autoklavuojant, atvėsinant ir į 30 °C produktą įvedant grynas PRB Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir/arba Pediococcus pentosaceus BaltBio02 kultūras (į 0,5 litro sulčių/1 ml grynų bakterijų kultūrų, pagausintų MRS buljone).
Substratas - tai bet kokia augalinė žaliava, augalinės kilmės produktai, kuriuose yra angliavandenių, tai gali būti grūdiniai javai ir jų dalys, aliejingos sėklos, ankštiniai augalai, šienas, žolė. Substrato mikrobinei taršai sumažinti ir reikiamo dydžio frakcijai gauti prieš fermentaciją žaliava gali būti smulkinama, apdorojama aukšta temperatūra, garais, ekstruzija bei kitais žinomais būdais.
Fermentacija - paruoštos augalinės kilmės žaliavos fermentacija atliekama 20-40 °C temperatūroje, skystame substrate, kai drėgnis daugiau kaip 50 %, arba kietame substrate, kai drėgnis mažesnis kaip 50 %. Fermentuojama anaerobiniu arba aerobiniu būdu priklausomai nuo substrato savybių - drėgnio, sudėties ir kt. Pradinis PRB raugo kiekis substrate gali būti nuo 0,5% iki 10%. Fermentacijos trukmė nuo 8 h iki 72 h. 6
LT 6271 B
Fermentuoto substrato apdorojimas - po fermentacijos fermentuota masė apdorojama įvairiais būdais: smulkinama, sijojama, granuliuojama.
Fermentuoto substrato stabilizavimas - drėgmei sumažinti substratas džiovinamas, sublimuojamas, presuojamas-džiovinamas, gali būti šaldomas, kapsuliuojamas, chemiškai konservuojamas.
Fermentuotas produktas - atsižvelgiant į fermentuoto substrato stabilizavimo būdą gaunamas biologiškai aktyvus pastos, miltelių, granulių pavidalo kietas pašarinės paskirties produktas. Fermentuoto produkto pH nuo 3,0 iki 6,0, jame PRB yra nuo 104 iki 109 KSV/g. Šiame išradime siūloma toliau aprašyta fermentuotų pašarų gamybos technologija. 1. Substratas - miežinės ir kvietinės sėlenos bei vanduo sumaišomi lėtaeigėje maišyklėje iki homogeninės masės. Maišoma 10 minučių, mišinio temperatūra 29 ± 5 °C, palaikomas drėgnis 50 ± 5 %.
2. J homogenizuotą substratą įterpiamas iki 109 KSV/g pagausintas PRB raugas. 3. Mišinys sumaišomas, ir dedamas į fermentacijos kamerą. Fermentacija vykdoma 24h, prie temperatūros +30 ± 2 °C ir oro drėgnio 85 ± 2 %. 4. Fermentuotas substratas vėl sudedamas į maišyklę ir pagal receptūrą pridedama (0,5 %) pašarinių (gyvulių šėrimo tikslams naudojamų) mielių Saccharomyces cerevisiae. Maišoma 10 min. 5. Fermentuotas produktas fasuojamas ir laikomas įprastose sąlygose -temperatūra (15 - 20) °C, oro drėgnis (55-75) %.
Kaip fermentuotų produktų substrato komponentai pasirinkti kviečiai ir miežiai. Atlikus tyrimą su įvairios sudėties substratais buvo pasirinktas optimalios sudėties substratas susidedantis iš 5-20 % kviečių ir 80-95 % miežių sėlenų. Pagaminti iš šios sudėties substrato pašarai be kita ko pasižymi labai geru fermentuotų produktų formavimu presavimo būdu. Toliau pateikiami fermentuoto produkto su šiuo substratu bandymų rezultatai. 7
LT 6271 B
Fermentuoto produkto savybės priklauso nuo fermentacijos temperatūros. Fermentuotų kviečių-miežių sėlenų PRB koncentracija (KSV/g) fermentuojant temperatūrose 37 °C ir 20 °C buvo atitinkamai 60x108 KSV/g ir 40x108 KSV/g. Džiovinto fermentuoto produkto PRB KSV priklausomybė nuo džiovinimo temperatūros ir laiko (1 lentelė) 1 lentelė
Džiovini mo tempe ratūra PRB KSV/g Laikas, h 2 4 6 8 18 20 28 20 °C 450x1O7 -74x108 360x 107-68x108 350x107 -66x108 320x 107-59x10® 30 °C >500x107 -88x108 >500x107 -150x1O8 >500x107 -200x1O8 >500x1O7 -110x1O8 210x107 -20x1O8 180x1O7 -20x1O8 to Γ'- O O O CO ® T
Nustatyta, kad džiovinant išlieka pakankamai didelis kiekis PRB (nepriklausomai nuo džiovinimo trukmės), tačiau 18 ir ilgiau valandų džiovinant 30 °C temperatūroje pradeda augti pelėsiai ir mielės (mielių (5-6)x107KSV/g) Todėl džiovinimo procesas turi būti kuo trumpesnis. Džiovinto fermentuoto produkto pH ir drėgnio priklausomybė nuo džiovinimo laiko (2 lentelė) 2 lentelė
PH Drėgnis, % Laikas, h Laikas, h 0 72 0 72 5,50 4,06 45,2-46,6 8,2-9,8 Džiovinimo temperai tūra 30 °C
Fermentuoto produkto priklausomybė nuo išlaikymo laiko. Išdžiovintas iki rekomenduojamo drėgnio (8,82 %) fermentuotas produktas buvo laikomas kambario temperatūroje polietileninėje pakuotėje. Buvo tiriama taip δ
LT 6271 B laikomo produkto PRB koncentracija (KSV/g) kas 30 parų, t.y., po 0, 30, 60 ir 90 parų (3 lentelė). 3 lentelė
Fermentuotas produktas Laikymo sąlygos normalios: temperatūra - (15 -30)°C, drėgnis 65 % Paros 0 30 60 90 PRB, KSV/g (16-18)x107 (24-20)x106 (23,8-20)x106 50x105 L-(+) ir D-(-) pieno rūgšties izomerų kiekis fermentuotame produkte.
Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 produkuoja: D-(-) pieno rūgšties izomerų kiekį 0,111552 mg/100g ir 0,892419 pg/100g atitinkamai; L (+) pieno rūgšties izomerų kiekį 0,98g/100g ir 0,67 g/100g atitinkamai.
Kviečių-miežių substratas yra tinkamas fermentuotų pašarų gamybai (apie 40 % drėgnio Fermentuotame produkte gaunama PRB koncentracija yra 10® KSV/g). Kviečių-miežių substratas gerai homogenizuojasi, o jį fermentuojant su Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 mišiniu sumažėja mikrobinis žaliavos užterštumas patogeniniais mikroorganizmais - išdžiovintame iki 8,82 % drėgnio produkte (30 °C temperatūroje 28 vai.) nenustatyta mielinių ir pelėsinių grybų. PRB koncentracija fermentuotame produkte yra 18*107 KSV/g, kuri po 90 parų laikymo kambario temperatūroje polietileninėje pakuotėje sumažėja iki 50x105 KSV/g. Fermentuotas produktas yra saugus L-(+) ir D-(-) pieno rūgšties izomerų atžvilgiu.
Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 pieno rūgšties bakterijų padermės yra saugios naudoti pašaruose, o su jomis fermentuoti sausi pašarų produktai pasižymi dideliu biologiniu aktyvumu, nepraranda biologinio aktyvumo saugojant. 9
LT 6271 B
Pavyzdžiai:
Pavyzdys 1. Pieno rūgšties bakterijų Pediococcus acidilactici BaltBioOI ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 mišiniu fermentuoto produkto įtakos veršelių sveikatingumui įvertinimas. Šiuo metu plačiai taikomas intensyvus veršelių auginimas sukelia žarnyno mikrofloros disbalansą, nes virškinamajame trakte nesivysto tinkama mikroflora, kuri natūraliomis sąlygomis auginamų gyvulių virškinamajame trakte susiformuoja iš aplinkos ir gaunama su motinos pienu. Dėl įvairių priežasčių, pasikeitus plonųjų žarnų mikroorganizmų sudėčiai, pradeda daugintis žarnyno lazdelės, kurios užima PRB vietą.
Patogeninių bakterijų sukelta infekcija pažeidžia gleivinę, sumažėja jos apsauginės funkcijos. PRB medžiagos gali normalizuoti žarnyno mikroflora, gerinti apsaugines gleivinės savybes, skatinti maisto medžiagų pasisavinimą ir natūralų rezistentiškumą, sumažinti patirtų stresų padarinius.
Teigiama, kad PRB dėka galvijų jaunikliai greičiau pradeda savarankiškai virškinti augalinės kilmės pašarus, geriau pasisavintų augalinius baltymus ir kitas maistingąsias medžiagas.
Lyginant intensyviai ir normaliai auginamus gyvulius, nustatyta kad fiziologinės virškinamojo trakto savybės pasikeičia tuomet, kai žūva normali mikroflora. Dėl silpniau besivystančio žarnyno sumažėja jo masė, susikaupia per daug skysčių aklojoje ir storosiose žarnose ir veršeliai gali susirgti enteritu ir diarėja.
Bandymui buvo atrinkta 14 veršelių: bandomoji grupė (n=6) ir kontrolinė (n=8). Veršeliai buvo atrinkti analogų principu pagal amžių, laikomi vienodomis sąlygomis, girdomi karvių pienu tris kartus per parą, šeriami specialiu kombinuotu pašaru. Bandomoji grupė 14 dienų, rytinio girdymo metu (apie 07:00 vai.), gavo probiotikų mišinį, įpilant po 50 ml į pieną. Bandymo pradžioje (0 d.) ir pabaigoje (14 d.) kraujo dujų analizatoriumi „Epoc“ (EPOC, Kanada) buvo tiriami šie parametrai: pH; PC02; P02; Na; K; iCa; Glu; Laktatai; Hct; HC03, TC02, cS02, Hb. Kraujo biocheminiu analizatoriumi „Hitachi 705“ (Hitachi, Japonija), naudojant „DiaSys“ (Diagnostic 10
LT 6271 B
Systems GmbH, Vokietija) reagentus, ištirtas kraujo fermentas aspartataminotransferazė (AST). Bandymo pradžioje ir pabaigoje buvo fiksuojama veršelių svoris. Nustatyta, kad tyrimo metu statistiškai patikimai (p<0,05) kito šie kraujo parametrai: pH; PC02, laktatai, AST, leukocitai, limfocitai bei veršelių priesvoris. Bandymų rezultatai parodyti 4 lentelėje. 4 lentelė
Parametras Kontrolinė gru pė Bandomoji grupė Bandymų pradžia Bandymų pabaiga Bandymų pradžia Bandymų pabaiga Kraujo pH 7,36 7,361 7,33 7,28 PC02 63,95 70,93 63,08 60,71 Laktatai 3,95 4,29 3,2 2,64 AST, TV/I 50,18 58,9 49,82 33,1 Leukocitai, *106 10,69 10,32 9,37 11,43 Limfocitai, *109/l 4,57 5,55 4,57 6,39 Priesvoris, kg 35,75 49 34,37 45,25 Šeriant PRB P. acidilactici BaltBioOI ir P. pentosaceus BaltBio02 mišiniu 14 dienų po 50 ml: sumažėjo rizika susirgti acidoze (stabilizuojasi kraujo pH, sumažėja laktatu, PC02 koncentracija); sumažėjo kepenų pažeidimų rizika (sumažėjo AST koncentracija); sustiprėjo organizmo imunitetas (padidėja limfocitų ir leukocitų skaičius kraujyje), kiti parametrai nepasikeitė.
Pavyzdys 2. Pieno primilžiai ir cheminė sudėtis, karves šeriant Pediococcus pentosaceus priedu.
Pagausintos ir paruoštos fermentacijai PRB Pediococcus pentosaceus
BaltBio02 Lietuvos juodmargių karvių šėrimo eksperimento metodika. 11
LT 6271 B
Tyrimai atlikti su holšteinizuotomis Lietuvos juodmargėmis karvėmis tvartiniu laikotarpiu. Atsižvelgiant į amžių, laktacijos tarpsnį, primilžius, karvės suskirstytos į dvi grupes: kontrolinę (n=10) ir bandomąją (n=10). Visos karvės buvo šeriamos pagal proteinų ir energijos poreikius subalansuotu racionu, atitinkančiu karvių mitybos fiziologines normas.
Bandomosios karvės buvo šeriamos tuo pačiu racionu. Tačiau kartu su pašaru šios karvės kiekvieną dieną 56 d. gavo 100 g tiriamojo priedo, kurį sudarė Pediococcus pentosaceus BaltBio02 ir ekstruduoti kviečių miltai, kuriame PRB kiekis 5,0x108 KSV/g.
Pieno primilžiai tiriamuoju laikotarpiu buvo nustatomi tris kartus, t.y. tyrimo pradžioje, tyrimo viduryje (praėjus pusei tiriamojo laiko) bei tyrimo pabaigoje, atliekant kontrolinius karvių melžimus. Natūralaus riebumo pieno kiekis perskaičiuotas į 4 proc. riebumo (koreguoto) pieno kiekį, vadovaujantis koeficientais. Pieno mėginiai buvo paimti iš kiekvienos karvės individualiai pagal pieno mėginių ėmimo taisykles (LST EN ISO 707:1999+P:2003 Pienas ir pieno produktai. Mėginių ėmimo taisyklės) tyrimo pradžioje, viduryje ir pabaigoje. Mėginiuose buvo nustatyti pieno riebalai, baltymai, laktozė ir urėja prietaisu „LactoScope FTIR“ (FT1.0. 2001; Delta Instruments, Olandija) bei somatinių ląstelių skaičius (SLS) prietaisu „SomaScope“ (CA-3A4, 2004; Delta Instruments, Olandija).
Tyrimų duomenys apdoroti statistinės analizės metodu (Venables and Smith, 2005). Apskaičiuoti požymių aritmetiniai vidurkiai ir jų paklaidos, patikimumo laipsnis p<0,05.
Pieno primilžiai ir cheminė sudėtis, karves šeriant Pediococcus pentosaceus BaltBio02 priedu parodyti 5 lentelėje. 5 lentelė
Rodiklis Kontrolinė grupė Bandomoji grupė 1 2 3 1 2 3 Pienas, kg/d 15,86 15,08 16,60 18,04 18,87 22,38 4% koreguotas pieno kiekis, 17,22 16,94 17,83 19.17 19.88 23,43 12
LT 6271 B kg/d Riebalų kiekis, % 4,5 4,69 4,56 4,41 4,42 4,40 Riebalų kiekis, kg/d 0,73 0,73 0,75 0,80 0,82 0,97 Laktozės kiekis, % 4,44 4,46 4,38 4,46 4,54 4,46 Laktozės kiekis, kg/d 0,71 0,70 0,74 ,0,80 0,85 1,0
Naudojant Pediococcus pentosaceus BaltBio02 priedą, piene statistikai reikšmingai padidėjo riebalų ir laktozės kiekiai. Riebalų kiekis bandomosios grupės karvių piene bandymo pabaigoje buvo 0,22 kg/d didesnis (p<0,05) nei kontrolinės grupės piene ir 0,17 kg/d didesnis (p<0,05) nei tos pačios grupės bandymo pradžioje. Laktozės kiekis bandomosios grupės karvių piene bandymo pabaigoje buvo 0,26 kg/d didesnis (p<0,05) nei kontrolinės grupės piene ir 0,2 kg/d didesnis (p<0,05) nei tos pačios grupės bandymo pradžioje. Baltymų, šlapalo kiekiai ir SLS bandymo pradžioje ir pabaigoje skyrėsi nežymiai (p>0,05).
Remiantis gautais rezultatais, konstatuota, kad šeriant melžiamas karves fermentuotu pašaru (60 % drėgnio 90 g/per parą), kuriame Pediococcus pentosaceus BaltBio02 kiekis ne mažesnis nei 5,0x108 KSV/g esant šėrimo trukmei ne trumpesnei nei 56 dienos, padidėjo melžiamų karvių produktyvumas.

Claims (6)

13 LT 6271 B Išradimo apibrėžtis 1. Augalinės kilmės fermentuoti pašarai susidedantys pieno rūgšties bakterijų raugo ir substrato, besiskiriantys tuo, kad raugo sudėtyje dominuoja padermės Pediococcus acidilactici BaltBioOI MSCL P1480 ar/ir Pediococcus pentosaceus BaltBio02 MSCL P1481, ir naudojamas substratas - augalinės kilmės produktai turintys angliavandenių - grūdiniai javai ir jų dalys, aliejingos sėklos, ankštiniai augalai, šienas, žolė.
2. Fermentuoti pašarai, pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad substratas yra mišinys susidedantis iš 5-20 % kviečių sėlenų ir 80-95 % miežių sėlenų.
3. Fermentuoti pašarai, pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad pieno rūgšties bakterijų raugo ir substrato santykis fermentacijos pradžioje turi būti 0,5-10 dalių su 90-99,5 dalių atitinkamai, geriausia 2:98.
4. Fermentuoti pašarai, pagal 1-3 punktus, besiskiriantys tuo, kad substratas su pieno rūgšties bakterijų raugu fermentuojamas temperatūrų intervale 30-34 °C iki pasiekiama pieno rūgšties bakterijų koncentracija 101 2-109KSV/g.
5. Fermentuoti pašarai, pagal 1-4 punktus, besiskiriantys tuo, kad substratas prieš fermentaciją ekstruduotas ir esant mažiau nei 50 % drėgmei fermentuotas 30 °C arba mažesnėje temperatūroje.
6. Fermentuoti pašarai, pagal 1-5 punktus, besiskiriantys tuo, kad po fermentacijos gautas fermentuotas produktas presavimo būdu granuliuotas ir išdžiovintas iki 8-10 % drėgnio. 1 Fermentuoti pašarai, pagal 1-6 punktus, besiskiriantys tuo, kad jie 2 skirti atrajojančių gyvulių šėrimui.
LT2014110A 2014-09-24 2014-09-24 Augalinės kilmės fermentuoti pašarai LT6271B (lt)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LT2014110A LT6271B (lt) 2014-09-24 2014-09-24 Augalinės kilmės fermentuoti pašarai
PCT/IB2015/057173 WO2016046708A1 (en) 2014-09-24 2015-09-17 Fermented feed of plant origin
EP15784972.0A EP3197289A1 (en) 2014-09-24 2015-09-17 Fermented feed of plant origin
EA201790686A EA201790686A1 (ru) 2014-09-24 2015-09-17 Ферментированный корм растительного происхождения

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
LT2014110A LT6271B (lt) 2014-09-24 2014-09-24 Augalinės kilmės fermentuoti pašarai

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT2014110A LT2014110A (lt) 2016-04-11
LT6271B true LT6271B (lt) 2016-05-10

Family

ID=54352482

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT2014110A LT6271B (lt) 2014-09-24 2014-09-24 Augalinės kilmės fermentuoti pašarai

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP3197289A1 (lt)
EA (1) EA201790686A1 (lt)
LT (1) LT6271B (lt)
WO (1) WO2016046708A1 (lt)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LT6480B (lt) 2017-04-10 2017-12-11 Aleksandro Stulginskio Universitetas Dehidratuotos pievų žolės miltai

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL237575B1 (pl) * 2017-09-14 2021-05-04 Centrum Badan Dna Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia Sposób uszlachetniania makuchów rzepakowych
CN110140810B (zh) * 2019-05-23 2022-03-15 浙江大学 饲用发酵黄酒糟的制备方法及其发酵黄酒糟
CN110964673B (zh) * 2019-12-30 2022-03-04 上海应用技术大学 一种具有高抗氧化性及美白效果的戊糖片球菌及其应用
CN112899200A (zh) * 2021-03-04 2021-06-04 江西格力特农牧发展有限公司 一种恒温发酵的液态乳酸菌及制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2202224C2 (ru) 2001-02-22 2003-04-20 Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН Способ получения биологически активной кормовой добавки из растительного сырья
US20140037786A1 (en) 2011-03-22 2014-02-06 Fermentationexperts A/S Fermentation of protein-rich feed

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2063755C1 (ru) 1993-07-14 1996-07-20 Товарищество с ограниченной ответственностью "Алэф" Сухой пробиотик для жвачных животных руменолакт
US5534271A (en) * 1994-11-16 1996-07-09 Nutrition Physiology Process for improving the utilization of feedstuffs by ruminants
CN1927027A (zh) * 2006-09-28 2007-03-14 天津生机集团有限公司 提高奶牛产奶量的益生菌组合物
WO2013029682A1 (de) 2011-09-01 2013-03-07 Schaeffler Technologies AG & Co. KG Antriebsvorrichtung
LT6270B (lt) 2014-09-24 2016-05-10 Uab "Baltijos Biotechnologijos" Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2202224C2 (ru) 2001-02-22 2003-04-20 Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН Способ получения биологически активной кормовой добавки из растительного сырья
US20140037786A1 (en) 2011-03-22 2014-02-06 Fermentationexperts A/S Fermentation of protein-rich feed

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LT6480B (lt) 2017-04-10 2017-12-11 Aleksandro Stulginskio Universitetas Dehidratuotos pievų žolės miltai

Also Published As

Publication number Publication date
WO2016046708A1 (en) 2016-03-31
EA201790686A1 (ru) 2017-11-30
LT2014110A (lt) 2016-04-11
EP3197289A1 (en) 2017-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sornplang et al. Probiotic isolates from unconventional sources: a review
US10123558B2 (en) Leuconostoc citreum and fermented foods using the same as a starter, and compositions thereof
LT6270B (lt) Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai
US20200199691A1 (en) Novel bacillus amyloliquefaciens strain and method for preparing fermented soy product using the same
CN116083273A (zh) 一株植物乳杆菌NHE-LpE15及应用
EP3027734B1 (en) Isolated microorganism strain lactobacillus plantarum tak 59 ncimb42150 and its use
LT6271B (lt) Augalinės kilmės fermentuoti pašarai
US20070009503A1 (en) Antibiotic, Compositions Containing the Antibiotic, and Methods for Administering the Antibiotic and/or Said Compositions to Livestock
WO2007058027A1 (ja) バチルス・チューリンゲンシスを含む有害菌の防除剤
JP4199685B2 (ja) 新規な乳酸菌
JP2006169197A5 (lt)
KR101427187B1 (ko) 미생물 생균제를 유효성분으로 함유하는 친환경 미생물 제제 및 이의 제조방법
JP2010029117A (ja) ラクトバチルス・プランタラムを含有する動物用飼料組成物、該組成物を含有する動物用配合飼料及び前記ラクトバチルス・プランタラムを動物腸管内で維持又は増殖させる方法
KR102831152B1 (ko) 신규한 웨이셀라 시바리아 sc51-2 균주 및 이의 배양방법
EP1862080A1 (en) Protease-resistant bacteriocins produced by lactic acid bacteria and their use in livestock
CN116963607A (zh) 乳酸菌抑制产甲烷菌生长或减少甲烷排放的用途
JP4997500B2 (ja) 動物用生菌剤、飼料組成物、及びこれらの使用方法
CN115992066B (zh) 一株用于液体发酵饲料的副干酪乳杆菌NHB-LpD2及应用
KR20030064462A (ko) 유해세균의 성장을 억제하는 신규 미생물 및 이를유효성분으로 하는 미생물 첨가제
US20150352161A1 (en) Use of hafnia alvei for reducing the carriage of escherichia coli producing shiga toxins (stec) in ruminants
KR101003740B1 (ko) 신규한 젖산초유 유래의 스트렙토코쿠스 서머필루스 cnb-11 균주 및 이를 함유하는 발효초유 첨가 생균제
RU2493723C1 (ru) Биопрепарат с пробиотической активностью для оптимизации усвоения кормов, предназначенных для сельскохозяйственных животных и птицы
RU2849616C1 (ru) Штамм Lactiplantibacillus plantarum S10 ВКПМ В-14328 для силосования корма и производства кормовых добавок
CN101081295A (zh) 抗生素、含有抗生素的组合物和将抗生素和/或所述组合物给药牲畜的方法
KR102831153B1 (ko) 신규한 라틸락토바실러스 사케이 아종 사케이 sc83-3 균주 및 이의 배양방법

Legal Events

Date Code Title Description
BB1A Patent application published

Effective date: 20160411

FG9A Patent granted

Effective date: 20160510

MM9A Lapsed patents

Effective date: 20190924