KR960042056A - 전혈 샘플의 혈액 분석에 사용하기 위한 만능 린스 시약 조성물 - Google Patents

전혈 샘플의 혈액 분석에 사용하기 위한 만능 린스 시약 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 자동화 분석기에서의 다양한 혈액 분석법을 수행하고/하거나 개선하는 만능 린스로서 작용하는 수성 시약 조성물의, 이전에는 공지되지 않았던 용도를 제공한다. 만능 린스 시약은 린스 용액의 pH를 약 7.0 내지 약 7.6으로 유지시키는 인산염 완충액, 비용혈성 비이온성 계면활성제(예 : 플루로닉), 알칼리 금속염(예 : NaCl), 항균 화합물 및 황산화 화합물을 포함하고 삼투 물 농도가 약 285 내지 305mOsmol/kg 이다. 만능린스 시약 조성물을 세정단계에서 또는 반자동화 시스템 및 전자동화 시스템에서 수행하는 모든 형태의 혈구분석방법 공정의 사이클에서 사용하기에 매우 적합하다. 본 발명은 다수의 특정 린스 용액을 본 발명의 만능린스로 대체하여, 수행한 혈구 분석법의 유형에 상관없이 정확하고 허용가능한 결과를 얻는다. 만능 린스는 복잡한 하드웨어와 다수의 상이한 입출력 채널을 갖는 자동화 시스템에 가장 특히 유용하다. 만능 린스 조성물은 이러한 시스템의 설계와 조작을 경제적이고 능률적이고 단순화되도록 한다.

Description

전혈 샘플의 혈액 분석에 사용하기 위한 만능 린스 시약 조성물
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1A 도 내지 제1F도는 수성 린스 시약 조성물을 사용하는 내부 샘플 린스를 포함하는 샘플 사이클을 포함하는, 백혈구 백분율 계수 분석에 대한 과산화효소 방법을 사용하여 백혈구 백분율 계수에 대한 다양한 린스 캐리오버의 효과를 시험한 실험 결과를 도시한 사이토그램이다. 제1A도 및 제1B도는 7.9μL인 린스 캐리오버용적의 결과를 도시한다. 제1C도 및 제1D도는 린스 캐리오버 용적 10.1μL의 결과를 도시한다. 제1E도 및 제1F도는 린스 캐리오버 용적 13.3μL의 결과를 도시한다.

Claims (51)

  1. a) 에틸렌 옥사이드와 1급 하이드록실 그룹으로 말단화된 프로필렌 옥사이드 폴리올과의 블록 공중 합체인 비이온성 비용혈성 계면활성제(i){여기서, 계면활성제 분자 중의 에틸렌 옥사이드의 중량%는 약 30 내지 약 60%이고, 계면활성제의 분자량은 약 2000 내지 4000g/mol이다}와 시약 용액의 pH를 6.9 내지 7.6으로 유지시키기에 효과적인 농도의 완충액 또는 완충액 혼합물(ⅱ)을 포함하는 수성 시약 조성물을 혼합하는 단계(a) 및 혈액 샘플 분석을 실행한 후에 단계(a)의 시약 용액으로 혈액 분석기 시스템 하드웨어와 이의 부품을 세정하여 혈액 샘플과 시약 혼합물 축적을 제거하는 단계(b)를 포함하여, 혈액 샘플 분석에 사용된 반자동화 및 전자동화 혈액 분석기 시스템의 하드웨어와 이의 부품에서의 혈액 샘플과 시약 혼합물 축적을 방지하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 완충액이 린스 시약 용액의 pH를 약 7.0 내지 약 7.3으로 유지시키는 방법.
  3. 제2항에 있어서, 완충액이 Na2HPO4및 NaH2PO4또는 이의 혼합물을 포함하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 계면활성제가, 이의 일반식이 O-(CH2CH2-O)x-(CH2CH(CH3)O)y-(CH2CH2-O)x-H(여기서, x는 7 내지 21이고, y는 14 내지 48이다)인 방법.
  5. 제1항 또는 제4항에 있어서, 계면활성제가 플루로닉(Pluronic) P105인 방법.
  6. 제1항에 있어서, 단계(a)의 수성 시약 조성물이 알칼리 금속염을 추가로 포함하는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl, KCl 또는 LiCl인 방법.
  8. 제7항에 있어서, 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl인 방법.
  9. 제1항에 있어서, 단계(a)의 수성 시약 조성물이 항균 화합물을 추가로 포함하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 항균 화합물이 프로클린(Proclin) 150, 프로클린 300, 거말(Germall) 115, 다우아실(Dowacil) 200 및 브로노폴(Bronopol)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  11. 제1항에 있어서, 단계(a)의 수성 시약 조성물이 항산화 화합물을 추가로 포함하는 방법.
  12. 제11항에 있어서, 항산화제가 3,3'-티오디프로피온산, 3,3'-디티오아세트산, 트롤록스또는 수용성 비타민 E, BHT 또는 2,6-디-tert-부틸-4-메틸페놀, BHA 또는 2-tert-부틸-4-메톡시페놀 및 MEHQ 또는 p-메톡시페놀로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  13. 제1항에 있어서, 단계(a)의 수성 시약 조성물이, 이의 삼투 물 농도가 약 285mOsmol/kg내지 약305mOsmol/kg인 방법.
  14. 혈액 분석을 실행한 후에 혈액 분석기 시스템 부품을 수성 린스 시약 조성물(여기서, 린스 조성물은 에틸렌 옥사이드와 1급 하이드록실 그룹으로 말단화된 프로필렌 옥사이드 폴리올과의 블록 공중합체인 비이온성 비용혈성 계면활성제이고, 계면활성제 분자내의 에틸렌 옥사이드의 중량%는 약 30 내지 약 60%이고, 계면활성제의 분자량은 2000 내지 4000g/L이다)로 1회 이상 세정함을 포함하여, 혈액 샘플 분석에 사용된 반자동화 및 전자동화 혈액 분석기 시스템과 이의 부품으로부터 혈액 샘플과 시약 혼합물을 제거하는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 린스 시약 조성물이 pH를 약 7.0 내지 약 7.3으로 유지시키는 완충액을 추가로 포함하는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 완충액이 Na2HPO4및 NaH2PO4또는 이의 혼합물을 포함하는 방법.
  17. 제14항에 있어서, 계면활성제가, 이의 일반식이 O-(CH2CH2-O)x-(CH2CH(CH3)O)y-(CH2CH2-O)x-H(여기서, x는 7 내지 21이고, y는 14 내지 48이다)인 방법.
  18. 제14항 또는 제17항에 있어서, 계면활성제가 플루로닉 P105인 방법.
  19. 제14항에 있어서, 수성 린스 시약 조성물이 알칼리 금속염을 추가로 포함하는 방법.
  20. 제19항에 있어서, 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl, KCl 또는 LiCl인 방법.
  21. 제19항에 있어서, 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl인 방법.
  22. 제14항에 있어서, 수성 린스 시약 조성물이 항균 화합물로 추가로 포함하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 항균 화합물이 프로클린 150, 프로클린 300, 거말 115, 다우아실 200 및 브로노폴로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  24. 제14항에 있어서, 수성 린스 시약 조성물이 항산화 화합물을 추가로 포함하는 방법.
  25. 제24항에 있어서, 항산화제가 3,3'-티오디프로피온산, 3,3'-디티오아세트산, 트롤록스TM또는 수용성 비타민, E, BHT 또는 2,6-디-tert-부틸-4-메틸페놀, BHA 또는 2-tert-부틸-4-메톡시페놀 및 MEHQ 또는 ρ-메톡시페놀로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  26. 제14항에 있어서, 수성 린스 시약 조성물이, 이의 삼투물 농도가 약 285mOsmol/kg 내지 305mOsmol/kg인 방법.
  27. 샘플 중의 적혈구를 용혈시켜 헤모글로빈은 방출시키지만 백혈구 개체들은 용혈시키지 않기에 효과적인 농도의 비이온성 폴리에톡실레이트 계면활성제(i), 샘플 중의 적혈구는 용혈시키지만 백혈구는 용혈시키지 않기에 효과적인 농도의 음이온성 또는 쯔비터이온성인 이온성 계면활성제(ⅱ), 샘플 중의 백혈구들은 화학적으로 가교결합시키지만 용혈된 적혈구들은 가교결합시키지 않기에 효과적인 농도의 포름알데히드 또는 파라포름알데히드(ⅲ), 샘플 중의 임파구의 검출능을 향상시키기에 효과적인 농도의 당 또는 당 알콜(ⅳ) 및 반응 혼합물의 pH를 약 6.9 내지 7.6의 거의 중성으로 유지시키는 완충액 또는 완충액 혼합물(v)을 포함하는 시약 조성물과 혈액 샘플을 혼합시켜 시약 혼합물을 형성시키는 단계(a), 단계(a)의 반응 혼합물을 약 60℃ 내지 약 75℃로 가열하여 샘플 중의 적혈구를 용혈시키고 백혈구를 고정시키는 단계(b), 반응 혼합물 중의 백혈구의 적어도 일부를 염색하여 현탁액 중의 염색된 백혈구의 개체수와 염색되지 않은 백혈구의 개체수를 구하는 단계(c)(여기서, 수성 시약 혼합물에 비이온성 계면활성제와 이온성 계면활성제가 존재함으로 인해, 신선한 혈액 샘플과 채혈 후에 하루 이상 실온에서 저장되었던 오래된 혈액 샘플에 대하여 단계(c)에 따르는 정확하고 신뢰할 만한 백혈구 백분율 계수 결과를 제공한다), 단계(c)의 염색된 백혈구와 염색되지 않은 백혈구의 현탁액을 전기 광학 검출 시스템으로 통과시켜 현탁액 중의 백혈구의 백혈구 백분율수를 구하는 단계(d) 및 전혈 샘플을 분석한 후, 에틸렌 옥사이드와 1급 하이드록실 그룹으로 말단화된 프로필렌 옥사이드 폴리올과의 블록 공중합체인 비용혈성 및 비이온성 계면활성제(i){여기서, 계면활성제 중의 에틸렌 옥사이드의 중량%는 약 30 내지 약 60%이고, 계면활성제는 일반식이 HO-(CH2CH2-O)x-(CH2CH(CH3)O)y-(CH2CH2-O)x-H(여기서, x는 7 내지 21 이고, y는 14 내지 48이다)이며, 계면활성제의 분자량은 약 2000 내지 약 4000g/mol이다}와 린스 시약 조성물의 생리적 pH를 유지시키는 완충액 또는 완충액 혼합물(ⅱ)을 혼합하여 포함하는 수성 린스 시약 조성물로 자동화 분석기 시스템을 세척하여 시스템 하드웨어와 이의 부품에 축적된 혈액 샘플과 시약 혼합물을 제거하는 단계(e)를 포함하여, 과산화효소 염색 및 자동화 혈액 분석기 시스템을 사용하여 적혈구와 백혈구를 함유하는 전혈 샘플의 백혈구 백분율수와 하부 개체수를 측정하는 방법.
  28. 제27항에 있어서, 단계(a)의 시약 조성물 중의 비이온성 계면활성제가 폴리에틸렌 글리콜에 대해 에테르화되는 직쇄의 지방족 소수성 계면활성제인 방법.
  29. 제28항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 브리예35인 방법.
  30. 제27항에 있어서, 단계(a)의 시약 조성물 중의 음이온성 계면활성제가 탄소수 10 내지 16의 알킬 설페이트의 알칼리 금속염을 포함하는 방법.
  31. 제30항에 있어서, 음이온성 계면활성제가 알칼리 금속 도데실 설페이트를 포함하는 방법.
  32. 제31항에 있어서, 음이온성 계면활성제가 나트륨 도데실 설페이트인 방법.
  33. 제27항에 있어서, 음이온성 계면활성제가 단계(a)의 시약 조성물에 약0.09 내지 약 0.12g/L의 양으로 존재하는 방법.
  34. 제27항에 있어서, 음이온성 또는 쯔비터이온성 계면활성제가 단계(a)의 시약 조성물에 약 0.050 내지 약 0.125g/L의 양으로 존재하는 방법.
  35. 제27항에 있어서, 포름 알데히드가 단계(a)의 시약 조성물에 약 52 내지 약 58g/L의 양으로 존재하는 방법.
  36. 제27항에 있어서, 단계(a)의 시약 조성물이 NaCl, KCl 및 LiCl로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 알칼리 금속 클로라이드염을 추가로 포함하는 방법.
  37. 제36항에 있어서, 염이 NaCl이고 시약에 약 6.8mM 내지 약 10.3mM의 양으로 존재하는 방법.
  38. 제27항에 있어서, 완충액 또는 완충액 혼합물이 단계(a)의 시약 용액의 pH를 약 7.0 내지 약 7.5로 유지시키는 방법.
  39. 제38항에 있어서, 단계(a)의 시약 중의 완충액이 Na2HPO4, Na2H2PO|4또는 이들의 혼합물을 포함하는 방법.
  40. 제27항에 있어서, 단계(a)의 시약 조성물이 EDTA,EGTA 및 이나트륨, 삼나트륨 또는 사나트륨 EDTA 또는 EGTA로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 다가 금속 이온의 킬레이트제를 추가로 포함하는 방법.
  41. 제40항에 있어서, 금속 이온 킬레이트제가 시약 조성물에 약 1mM 내지 약 5mM의 농도로 존재하는 방법.
  42. 제27항에 있어서, 염색단계(d)가 반응 혼합물을 과산화수소 및 크로모겐과 신속하게 혼합하여 과산화효소 활성 백혈구를 염색하는 과산화효소를 포함하는 방법.
  43. 제42항에 있어서, 크로모겐이 4-클로로-1-나프톨인 방법.
  44. 제27항에 있어서, 단계(a)의 시약 조성물이 당 알콜로서 시약 조성물에 약 110.0g/L 내지 약 120.0g/L의 농도로 존재하는 소르비탈을 추가로 포함하는 방법.
  45. 제27항에 있어서, 세정단계(e)에서의 계면활성제가 플루로닉 P105인 방법.
  46. 제27항에 있어서, 단계(e)의 린스 시약 조성물에 알칼리 금속염을 추가로 포함하는 방법.
  47. 제46항에 있어서, 단계(e)의 린스 시약 조성물 중의 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl, KCl 또는 LiCl인 방법.
  48. 제47항에 있어서, 알칼리 금속 클로라이드염이 NaCl인 방법.
  49. 제27항에 있어서, 단계(e)의 린스 시약 조성물이 프로클린 150, 프로클린 300, 거말 115, 다우아실 200 및 브로노폴로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 항균 화합물을 추가로 포함하는 방법.
  50. 제27항에 있어서, 단계(e)의 린스 시약 조성물이 3,3'-티오디프로피온산, 3,3'-디티오아세트산, 트롤록스TM또는 수용성 비타민 E,BHT 또는 2,6-디-tert-부틸-4-메틸페놀, BHA 또는 2-tert-부틸-4-메톡시페놀 및 MEHQ 또는 ρ-메톡시페놀로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 황산화 화합물을 추가로 포함하는 방법.
  51. 제27항에 있어서, 단계(e)의 린스 시약 조성물이, 이의 삼투 물 농도가 약 285mOsmol/kg 내지 305mOsmol/kg이고, 완충액이 pH를 약 7.0 내지 약 7.6으로 유지시키는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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